JPS59204171A - Ｓｈ基を有する化合物の定量用試薬 - Google Patents
Ｓｈ基を有する化合物の定量用試薬Info
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- JPS59204171A JPS59204171A JP7694583A JP7694583A JPS59204171A JP S59204171 A JPS59204171 A JP S59204171A JP 7694583 A JP7694583 A JP 7694583A JP 7694583 A JP7694583 A JP 7694583A JP S59204171 A JPS59204171 A JP S59204171A
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- Japan
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
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- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
り
〔式中 Ｒ１は水素、ニトロ、ジ低級アルキルア／ 又
１’Ｊ：Ｒ３−ＣＯＮＨ−（ここにおいてＲ３は低級ア
ルキル又はフェニルである。）であυ、Ｒ２ハ水素又は
ニトロであシ、マレイミド置換基はベンゾイル置換基の
オルト又はパラ位にある。〕で表わされるマレイミド誘
導体に関する。
１’Ｊ：Ｒ３−ＣＯＮＨ−（ここにおいてＲ３は低級ア
ルキル又はフェニルである。）であυ、Ｒ２ハ水素又は
ニトロであシ、マレイミド置換基はベンゾイル置換基の
オルト又はパラ位にある。〕で表わされるマレイミド誘
導体に関する。
本発明において低級アルキルとは炭素数１〜６個のもの
を意味し、例えばメチル、エチル、プロピル等が掲げら
れる。
を意味し、例えばメチル、エチル、プロピル等が掲げら
れる。
本発明のマレイミド誘導体は新規化合物であって、一般
式（ＩＩ） （Ｒ１、Ｒ２は前掲に同じ。アミン置換基はベンゾイル
置換基のオルト又はパラ位にある。）で表わされるアミ
ノベンゾフェノン類に無水マレイン酸を反応させて、ベ
ンゾフェノニルマレイミド酸類とし、これを常法により
脱水閉環することにより合成できる。
式（ＩＩ） （Ｒ１、Ｒ２は前掲に同じ。アミン置換基はベンゾイル
置換基のオルト又はパラ位にある。）で表わされるアミ
ノベンゾフェノン類に無水マレイン酸を反応させて、ベ
ンゾフェノニルマレイミド酸類とし、これを常法により
脱水閉環することにより合成できる。
この反応は次のように表わされる。
（ＩＩ）
＾
ｒｌｌ） 式化合物と無水マレイン酸との反応は、〔
■〕式化合物をジオキサン等の溶媒に溶かしたものに室
温で無水マレイン酸を加え、１〜７２時間攪拌すればよ
い。
■〕式化合物をジオキサン等の溶媒に溶かしたものに室
温で無水マレイン酸を加え、１〜７２時間攪拌すればよ
い。
脱水閉還は、過剰の無水酢酸中、触媒量の無水酢酸すト
リウム又は無水酢酸カリウムを加え４０〜８０ ”Ｃで
加熱することにょシ行われるが、その他に次の手段によ
っても行うことができる。
リウム又は無水酢酸カリウムを加え４０〜８０ ”Ｃで
加熱することにょシ行われるが、その他に次の手段によ
っても行うことができる。
１）脱水剤として五酸化リンを用い、ベンゼン。
トルエン、キシレン等の溶媒中、室温〜２００”Ｃ（好
ましくは５０〜１２ｏ°ｃ）で反応させる。
ましくは５０〜１２ｏ°ｃ）で反応させる。
２）過剰のポＩＪ ＩＪン酸中、室温〜１５ｏ′ｃ（好
ましくは＋８０〜１２０℃）で反応させる。
ましくは＋８０〜１２０℃）で反応させる。
又は、
３）過剰のポリリン酸エステルをそのまま又はクロロホ
ルムに溶解して室温〜６０′Ｃで反応させる。
ルムに溶解して室温〜６０′Ｃで反応させる。
このように本発明のマレイミド誘導体は入手しやすい安
価な原料から簡単な反応で得ることができる。
価な原料から簡単な反応で得ることができる。
本発明のマレイミド誘導体はＳＨ基を有する化合物（以
下「ＳＨ化合物」と略す。）の定量試薬、更に詳しくは
高速液体クロマトグラフィー ＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍ
ａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ
ｙ （以下［ＨＰＬＣＪと略す。）によって微量のＳＨ
化合物を定量するための試薬として有用である。
下「ＳＨ化合物」と略す。）の定量試薬、更に詳しくは
高速液体クロマトグラフィー ＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍ
ａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ
ｙ （以下［ＨＰＬＣＪと略す。）によって微量のＳＨ
化合物を定量するための試薬として有用である。
従来、微量化合物を定量するには、ＨＰＬＣ、ガスクロ
マトグラフィー、ガスクロマトグラフィー−質量分析等
の方法があり、中でも操作が簡便で定量が迅速にできる
のはＨＰＬＣである。
マトグラフィー、ガスクロマトグラフィー−質量分析等
の方法があり、中でも操作が簡便で定量が迅速にできる
のはＨＰＬＣである。
ＨＰＬＣは高圧ポンプで加速した移動相によって試別溶
液を固定相へ送りこみ、移動相−固定相聞の親和力の差
により試料を分離し、定量、定性、精製等に用いるもの
であり、その検出法としては、紫外線吸光光度（以下［
ｖＪと略す。）測定、螢光光度（以下「ＦＰ」と略す。
液を固定相へ送りこみ、移動相−固定相聞の親和力の差
により試料を分離し、定量、定性、精製等に用いるもの
であり、その検出法としては、紫外線吸光光度（以下［
ｖＪと略す。）測定、螢光光度（以下「ＦＰ」と略す。
）測定等がよく使用される。Ｆ Ｐ測定は、検出法中最
も感度が高く微量分析に適しているが、高価なＦＰ測定
計を用いねばならずしかもそれは他の一般螢光分析に使
えない、螢光が安定と在るような分析条件の設定がむず
かしい等の欠点を有しているので、普通の場合はＵＶ測
定が行われる。
も感度が高く微量分析に適しているが、高価なＦＰ測定
計を用いねばならずしかもそれは他の一般螢光分析に使
えない、螢光が安定と在るような分析条件の設定がむず
かしい等の欠点を有しているので、普通の場合はＵＶ測
定が行われる。
１１ＰＬＣ−ＵＶ測定で微量化合物を定量する場合、そ
の構造中にＵＶ吸収の大きい基を有することが必要であ
るが、ＳＨ基はこの条件を満たしていない。
の構造中にＵＶ吸収の大きい基を有することが必要であ
るが、ＳＨ基はこの条件を満たしていない。
従ってｔＪＶ吸収の大きい基を有していないＳＨ化合物
においては、微量定量が困難であり、誘導化が必要とな
る。又、生体液を体外にとり出すとすぐ、該液中に含１
れるＳＨ化合物は三量化、交換反応及び／又は他のＳ
Ｈ化合物と反応する性質があるのでＳＨ基を保護してお
くことも必要である。
においては、微量定量が困難であり、誘導化が必要とな
る。又、生体液を体外にとり出すとすぐ、該液中に含１
れるＳＨ化合物は三量化、交換反応及び／又は他のＳ
Ｈ化合物と反応する性質があるのでＳＨ基を保護してお
くことも必要である。
マレイミド基はＳＨ基と常温でたやすく反応するため、
マレイミド基にＵＶ吸収の大きい基を結合したＮ−（４
−ジメチルアミノ−３，、！５−ジニトロフェニル）マ
レイミド（以下「Ｄ Ｄ Ｐ Ｍｊと略す。）が上記目
的のために使用されている。
マレイミド基にＵＶ吸収の大きい基を結合したＮ−（４
−ジメチルアミノ−３，、！５−ジニトロフェニル）マ
レイミド（以下「Ｄ Ｄ Ｐ Ｍｊと略す。）が上記目
的のために使用されている。
本発明者等はＤＤＰＭ、ｌ：５優れたＳＨ化合物定量試
薬を求めて研究を重ね、本発明を完成した。
薬を求めて研究を重ね、本発明を完成した。
本発明のマレイミド誘導体はいずれもＳ ＦＩ化働定量
試薬として有用であるが、特に 〔１３式でＲ１がＣＨ
３Ｃ０ＮＨ−Ｒ２が水素であり、マレイミド置換基とベ
ンゾイル置換基がパラ位（以下「置換基同志がパラ位」
と略す。）のもの及びＲ１がジメチルアミノ Ｒ２が水
素、置換基同志がパラ位のものは２５４の；４３す′ 置チ１０又は３５０面 においてもＵＶ測定が可能であ
シ、一方の波長においてＳＨ化合物−マレイミド誘導体
付加体のピークに他の物質のピークが重なることがあっ
ても、ＳＨ化合物を定量しやすいという利点を有してい
る。更に後者のマレイミド誘導体は螢光を発するのでＦ
Ｐ測測定使用することも可能である。
試薬として有用であるが、特に 〔１３式でＲ１がＣＨ
３Ｃ０ＮＨ−Ｒ２が水素であり、マレイミド置換基とベ
ンゾイル置換基がパラ位（以下「置換基同志がパラ位」
と略す。）のもの及びＲ１がジメチルアミノ Ｒ２が水
素、置換基同志がパラ位のものは２５４の；４３す′ 置チ１０又は３５０面 においてもＵＶ測定が可能であ
シ、一方の波長においてＳＨ化合物−マレイミド誘導体
付加体のピークに他の物質のピークが重なることがあっ
ても、ＳＨ化合物を定量しやすいという利点を有してい
る。更に後者のマレイミド誘導体は螢光を発するのでＦ
Ｐ測測定使用することも可能である。
本発明を更に詳細に説明するだめ、以下に実施例を示す
が、本発明はこれらに限定されるものではない。
が、本発明はこれらに限定されるものではない。
’Ｊ 雄側］、 Ｎ−（２−ベンゾイルフェニル）
マレイミドの合成２−アミノベンゾフェノン９．６２を
ジオキサン２００ ｍ、ｅに溶解し、これに無水マレイ
ン酸５．３９を加え室温で１５時間攪拌する。析出晶を
戸数し、乾燥したものに無水酢酸ナトリウム１．４２及
び無水酢酸８０ｍｅを加え、８０°市時間攪拌する。反
応溶液を減圧濃縮し残渣をシリカゲルクロマトグラフィ
ーにて精製し、更にトルエンから再結晶して目的化合物
（以下「２−ＢｐＭＪ と略す。） ６．８Ｐを得る
（１１１．１）、 １７３〜１７５°Ｃ）。
マレイミドの合成２−アミノベンゾフェノン９．６２を
ジオキサン２００ ｍ、ｅに溶解し、これに無水マレイ
ン酸５．３９を加え室温で１５時間攪拌する。析出晶を
戸数し、乾燥したものに無水酢酸ナトリウム１．４２及
び無水酢酸８０ｍｅを加え、８０°市時間攪拌する。反
応溶液を減圧濃縮し残渣をシリカゲルクロマトグラフィ
ーにて精製し、更にトルエンから再結晶して目的化合物
（以下「２−ＢｐＭＪ と略す。） ６．８Ｐを得る
（１１１．１）、 １７３〜１７５°Ｃ）。
実１ｆｆ１例２ Ｎ （４−ベンゾイルフェニル
）マレイミドの合成４−アミノベンゾフェノン９．６１
をジオキサン２００＋＋＋ｅに溶解し、これに無水マレ
イン酸５．３５７を加え室温で１４５時間攪拌する。析
出晶をＰ取し、乾ｉｔ、−’ｒＮ−（’４−ベンゾイル
フェニル）マレアミ孕 ド酸１０．０Ｐ （ｍ、ｐ、 １７２〜１７５°Ｃ）
。
）マレイミドの合成４−アミノベンゾフェノン９．６１
をジオキサン２００＋＋＋ｅに溶解し、これに無水マレ
イン酸５．３５７を加え室温で１４５時間攪拌する。析
出晶をＰ取し、乾ｉｔ、−’ｒＮ−（’４−ベンゾイル
フェニル）マレアミ孕 ド酸１０．０Ｐ （ｍ、ｐ、 １７２〜１７５°Ｃ）
。
これに無水酢酸ナトリウム１４ｙ及び無水酢酸８０ｍｅ
を加え、８０°Ｃ２時間攪拌する。反応溶液を減圧濃縮
し残漬をシリカゲルクロマトグラフィーにて精製し、更
にエタノールから再結晶して目的化合物（以下［−ＢＰ
ＭＪと略す。）７０ｙを得る（ ｍ、ｐ。
を加え、８０°Ｃ２時間攪拌する。反応溶液を減圧濃縮
し残漬をシリカゲルクロマトグラフィーにて精製し、更
にエタノールから再結晶して目的化合物（以下［−ＢＰ
ＭＪと略す。）７０ｙを得る（ ｍ、ｐ。
１５９〜１６１°Ｃ）。
実施例３ Ｎ−［：４−（４−ニトロベンゾイル）
フェニルシマレイミドの合成 ４−アミノ−４−ニトロベンゾフェノン］、、２８！？
をジオキサン２０ｍｅに溶解し、これに無水マレイン酸
０．５６９９を加え室温で４時間攪拌する。減圧濃縮後
、炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで洗
浄後塩酸酸性にし析出物をＰ取する。これヲＮ 、 Ｎ
−ジメチルホルムアミド−Ｈ２Ｏで再結晶Ｌ テＮ −
（４−（４−ニトロベンゾイル）フェニルコマレアミド
酸１１５２を得る（ｍ、ｐ、２１０〜２１３°Ｃ）。
フェニルシマレイミドの合成 ４−アミノ−４−ニトロベンゾフェノン］、、２８！？
をジオキサン２０ｍｅに溶解し、これに無水マレイン酸
０．５６９９を加え室温で４時間攪拌する。減圧濃縮後
、炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで洗
浄後塩酸酸性にし析出物をＰ取する。これヲＮ 、 Ｎ
−ジメチルホルムアミド−Ｈ２Ｏで再結晶Ｌ テＮ −
（４−（４−ニトロベンゾイル）フェニルコマレアミド
酸１１５２を得る（ｍ、ｐ、２１０〜２１３°Ｃ）。
これに無水酢酸ナトリウム０．１５ｇｔ及び無水酢酸１
０ｙｄ を加え、８０°Ｃ２時間攪拌する。反応混合物
を減圧濃縮し残渣をクロロホルムに溶解し炭酸水素すト
リウム（以下「ＮａＨＣＯ３」と書く。）水溶液で洗浄
し、硫酸すトリウムで乾燥する。溶媒を減圧留去し残漬
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、更
にＣＨＣｌ３−ｎ−ヘキサンから再結晶し目的化合物（
以下［ＮＢＰＭＪと略す。）０２５ｙを得る（ ｍ、ｐ
、 ２３５〜２３７°Ｃ）。
０ｙｄ を加え、８０°Ｃ２時間攪拌する。反応混合物
を減圧濃縮し残渣をクロロホルムに溶解し炭酸水素すト
リウム（以下「ＮａＨＣＯ３」と書く。）水溶液で洗浄
し、硫酸すトリウムで乾燥する。溶媒を減圧留去し残漬
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、更
にＣＨＣｌ３−ｎ−ヘキサンから再結晶し目的化合物（
以下［ＮＢＰＭＪと略す。）０２５ｙを得る（ ｍ、ｐ
、 ２３５〜２３７°Ｃ）。
４−アセチル−４−ニトロベンゾフェノン２゜Ｏｙをメ
タノール２００ｔｎｅに溶解しパラジウム−炭素０．２
９存在下で水素の発生が止まる迄接触還元する。触媒を
澱去後減圧濃縮し残渣をインプロパツールから再結晶し
て、４−アセチルアミノ−４−アミノベンゾフェノン１
．２０１１７を得る（ ｍ、ｐ、 ２２２”２２４°Ｃ
）。
タノール２００ｔｎｅに溶解しパラジウム−炭素０．２
９存在下で水素の発生が止まる迄接触還元する。触媒を
澱去後減圧濃縮し残渣をインプロパツールから再結晶し
て、４−アセチルアミノ−４−アミノベンゾフェノン１
．２０１１７を得る（ ｍ、ｐ、 ２２２”２２４°Ｃ
）。
これをジオキサン５０ｍｅに溶解し、無水マレイン酸０
．５５６ ｙを加え室温で７２時間攪拌する。減圧留去
後残渣をＮａＨＣＯ３水溶液に溶解し、クロロホルムで
洗浄後塩酸酸性にし析出物をＰ取する。水洗し、メタノ
ールで洗浄し乾燥してＮ−Ｃ４−（４−７セチルアミノ
ベンゾイル）フェニルコマレアミド酸１．３５７を得る
（ ｍ、ｐ、 ２０２〜２０９°Ｃ）。
．５５６ ｙを加え室温で７２時間攪拌する。減圧留去
後残渣をＮａＨＣＯ３水溶液に溶解し、クロロホルムで
洗浄後塩酸酸性にし析出物をＰ取する。水洗し、メタノ
ールで洗浄し乾燥してＮ−Ｃ４−（４−７セチルアミノ
ベンゾイル）フェニルコマレアミド酸１．３５７を得る
（ ｍ、ｐ、 ２０２〜２０９°Ｃ）。
これに無水酢酸ナトリウム０２１ｙ及び無水酢酸３０ｍ
ｅを加え、５０°Ｃで５０分間攪拌する。冷後、不溶物
をｐ取し、ジオキサン−ｎ−へキサンから再結晶して目
的化合物（以下［ＡＡＢＰＭＪと略す。）０．４２ｐを
得る（ ｍ、ｐ、 ２５２〜２５５℃〈分解〉）。
ｅを加え、５０°Ｃで５０分間攪拌する。冷後、不溶物
をｐ取し、ジオキサン−ｎ−へキサンから再結晶して目
的化合物（以下［ＡＡＢＰＭＪと略す。）０．４２ｐを
得る（ ｍ、ｐ、 ２５２〜２５５℃〈分解〉）。
ＡＡＢＰＭ （実施例４ ） ２．ｓｃ＋ｓｙ、ホルマ
リン１４ｍｆ！及び水素化ホウ素ナトリウム２．８９５
ｐをアセトニトリル２３０ｍｅに加え、これに室温攪拌
下、１時間おきに３回に分けて酢酸３．４ｍｅをゆっく
り加える。−夜攪拌後、反応液を減圧濃縮し残渣に１０
％ ＮａＯＨを加えクロロホルム抽出する。クロロホル
ム層を水洗後硫酸ナトリウムで乾燥し、クロロホルムを
減圧留去し残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し
、２％メタノール−クロロホルムで溶出し４−アセチル
アミノ−４−ジメチルアミノベンゾフェノン２６７ｙを
得る（ｍ、ｐ、１９９〜２０１°Ｃ）。
リン１４ｍｆ！及び水素化ホウ素ナトリウム２．８９５
ｐをアセトニトリル２３０ｍｅに加え、これに室温攪拌
下、１時間おきに３回に分けて酢酸３．４ｍｅをゆっく
り加える。−夜攪拌後、反応液を減圧濃縮し残渣に１０
％ ＮａＯＨを加えクロロホルム抽出する。クロロホル
ム層を水洗後硫酸ナトリウムで乾燥し、クロロホルムを
減圧留去し残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し
、２％メタノール−クロロホルムで溶出し４−アセチル
アミノ−４−ジメチルアミノベンゾフェノン２６７ｙを
得る（ｍ、ｐ、１９９〜２０１°Ｃ）。
これを／オキザ：／１０ｒｎｅ−１０％塩酸４０ｍｅ中
２．５時間還流する。反応液をジクロルメタンで洗浄後
アルカリ性にしジクロルメタンで抽出し、これを硫酸ナ
トリウムで乾燥し減圧留去して残渣をジクロルメタンー
ヘキザンから再結晶して４−アミノ−４′−ジメチルア
ミノベンゾイル２．００ ？ ヲ？ｌる（ｍ、ｐ。
２．５時間還流する。反応液をジクロルメタンで洗浄後
アルカリ性にしジクロルメタンで抽出し、これを硫酸ナ
トリウムで乾燥し減圧留去して残渣をジクロルメタンー
ヘキザンから再結晶して４−アミノ−４′−ジメチルア
ミノベンゾイル２．００ ？ ヲ？ｌる（ｍ、ｐ。
１５５〜１５７°Ｃ）。
これに無水マレイン酸０．９７９ｙ及びジオキサン２０
ｍｅを加え、室温で一夜攪拌する。反応液を冷却し析出
晶を１取し、クロロホルム−エタノール−アセトンの混
液から再結晶しＮ −〔４−（４−ジノチルアミノベン
ゾイル）フェニルコマレイミド酸２．２８９を得る（ｍ
、ｐ、１８２〜１８５℃）。
ｍｅを加え、室温で一夜攪拌する。反応液を冷却し析出
晶を１取し、クロロホルム−エタノール−アセトンの混
液から再結晶しＮ −〔４−（４−ジノチルアミノベン
ゾイル）フェニルコマレイミド酸２．２８９を得る（ｍ
、ｐ、１８２〜１８５℃）。
これに無水酢酸ナトリウム０．１５５５’及び無水酢酸
２０ ｍｅを加え５０８Ｃで５０分間攪拌する。今後、
析出品をシー取し目的化合物（以下１’−ＤＡＢＰＭＪ
と略す。）０７７７ｙを得る（ｍ、ｐ、２３０〜２３２
°Ｃ〈分解〉）。
２０ ｍｅを加え５０８Ｃで５０分間攪拌する。今後、
析出品をシー取し目的化合物（以下１’−ＤＡＢＰＭＪ
と略す。）０７７７ｙを得る（ｍ、ｐ、２３０〜２３２
°Ｃ〈分解〉）。
実施例６ Ｎ−（４−（３，５−ジニトロベンゾイ
イヒ）フェニル〕アセトアニリドＬｏｙ、３，５−ジニ
トロベンゾイルクロライド１３ｐ及び塩化アルミニウム
３０ｙを１００°Ｃで２時間反応させる。反応混合物を
氷を入れた希塩酸水溶液中にあけ、析出物をｐ取する。
イヒ）フェニル〕アセトアニリドＬｏｙ、３，５−ジニ
トロベンゾイルクロライド１３ｐ及び塩化アルミニウム
３０ｙを１００°Ｃで２時間反応させる。反応混合物を
氷を入れた希塩酸水溶液中にあけ、析出物をｐ取する。
これを１０％ ＮａＯＨで洗浄後メタノール洗浄し、４
−アセチルアミノ−３，５−ジニトロベンゾフェノン１
１．Ｏｙ−を得る（ ｍ、ｐ、 ２５０〜２５１°Ｃ）
。
−アセチルアミノ−３，５−ジニトロベンゾフェノン１
１．Ｏｙ−を得る（ ｍ、ｐ、 ２５０〜２５１°Ｃ）
。
これにジオキサン５０ｍｅ及び１０％塩酸１６０ｍｅを
加え、４時間還流後、反応液を冷却し析出晶を戸取する
。これをメタノール中に懸濁し、結晶の色調が淡黄色か
ら濃橙色に変化したとき戸数して４−アミノ−３−１５
−ジニトロベンゾフェノン７．４２５Ｐを得る（ ｍ、
ｐ、 ２２３〜２２５°Ｃ）。
加え、４時間還流後、反応液を冷却し析出晶を戸取する
。これをメタノール中に懸濁し、結晶の色調が淡黄色か
ら濃橙色に変化したとき戸数して４−アミノ−３−１５
−ジニトロベンゾフェノン７．４２５Ｐを得る（ ｍ、
ｐ、 ２２３〜２２５°Ｃ）。
これに無水マレイン酸２．７７ｐ及びジオキサン１５０
ｍｅを加え、室温で一夜攪拌する。ＮａＨＣＯ３水溶液
を加えた後、クロロホルムで洗浄し塩酸酸性マレアミド
酸（ｍ、ｐ、 １８７〜１９２°Ｃ〈分解〉）８１６７
ｙを得る。
ｍｅを加え、室温で一夜攪拌する。ＮａＨＣＯ３水溶液
を加えた後、クロロホルムで洗浄し塩酸酸性マレアミド
酸（ｍ、ｐ、 １８７〜１９２°Ｃ〈分解〉）８１６７
ｙを得る。
これに無水酢酸ナトリウム０．８１７ｙ及び無水酢酸５
５ｙ＋＋ｊ’を加え８０°Ｃで２時間攪拌′する。反応
液を減圧濃縮後残渣をンリカゲルカラムクロマトグラフ
イーにて鞘製し、更にジオキサン−クロロホルム−〇−
ヘキサンから再結晶して目的化合物（以下「ＤＮＢＰＮ
＋」と略す。 ）５．４４５４７を得る（ ｍ、ｐ、
１９９〜２００°Ｃ）。
５ｙ＋＋ｊ’を加え８０°Ｃで２時間攪拌′する。反応
液を減圧濃縮後残渣をンリカゲルカラムクロマトグラフ
イーにて鞘製し、更にジオキサン−クロロホルム−〇−
ヘキサンから再結晶して目的化合物（以下「ＤＮＢＰＮ
＋」と略す。 ）５．４４５４７を得る（ ｍ、ｐ、
１９９〜２００°Ｃ）。
実施例７ ２５４ｎｍにおけるＳＨ化合物の定量４−Ｂ
ＰＭ、ＮＢＰＭ、ＡＡＢＰＭ、ＤＡＢＰＭ、ＤＮＢＰＭ
又はＤＩ）ＰＭ １０＋ｎｇをアセトン１ ｍｅに溶解
したものの０、２７１１ｅと、］−（］Ｄ−３−、１．
ルカプトー２−メチルプロパノイル−Ｌ−プロリン（一
般名「カプトグリル」。以下一般名で呼ぶ。）Ｉｆｆη
を０．１ＭＰｈｏｓｇｔｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ６，
０） １００ ｍｅに溶解したものの１ ｍｅをよく
混合し、その一定量をＳｈｉｍａｄｚｕＬＣ−４Ａ Ｌ
ｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ （高滓製作
所製）に注入する。アセトニトリル−メタノール−１％
酢酸（容量比５：２ニア、流速１．０＋ｍ？／ｍｉｎ
）を移動相、内径４ ｍｍ 、長さ３Ｑｃｍのステンレ
六ラムに充填剤として粒径１０μｍの％ −Ｂｏｎｄａ
ｐａｋ Ｃ−１８（日本ウォーターズ社製）をつめたも
のを固定相として分離した。検出感度０．０２、ＵＶ波
長２５４ ｎｍで測定したクロマトグラムを第１〜６図
に示す。
ＰＭ、ＮＢＰＭ、ＡＡＢＰＭ、ＤＡＢＰＭ、ＤＮＢＰＭ
又はＤＩ）ＰＭ １０＋ｎｇをアセトン１ ｍｅに溶解
したものの０、２７１１ｅと、］−（］Ｄ−３−、１．
ルカプトー２−メチルプロパノイル−Ｌ−プロリン（一
般名「カプトグリル」。以下一般名で呼ぶ。）Ｉｆｆη
を０．１ＭＰｈｏｓｇｔｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ６，
０） １００ ｍｅに溶解したものの１ ｍｅをよく
混合し、その一定量をＳｈｉｍａｄｚｕＬＣ−４Ａ Ｌ
ｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ （高滓製作
所製）に注入する。アセトニトリル−メタノール−１％
酢酸（容量比５：２ニア、流速１．０＋ｍ？／ｍｉｎ
）を移動相、内径４ ｍｍ 、長さ３Ｑｃｍのステンレ
六ラムに充填剤として粒径１０μｍの％ −Ｂｏｎｄａ
ｐａｋ Ｃ−１８（日本ウォーターズ社製）をつめたも
のを固定相として分離した。検出感度０．０２、ＵＶ波
長２５４ ｎｍで測定したクロマトグラムを第１〜６図
に示す。
第１〜６図かられかるように、本発明のマレイミド誘導
体（第１〜５図）は従来品であるＤ Ｄ Ｐ Ｍ（第６
図）と同程度かそれ以上のピークの鋭さを有し、しかも
それぞれ保持時間が異なるので、ＵＶ測定に使用するＳ
Ｈ基定量用試薬として有用である。
体（第１〜５図）は従来品であるＤ Ｄ Ｐ Ｍ（第６
図）と同程度かそれ以上のピークの鋭さを有し、しかも
それぞれ保持時間が異なるので、ＵＶ測定に使用するＳ
Ｈ基定量用試薬として有用である。
実施例８ ３１０又は３５０ｎｍにおけるＳＨ化合物の
定量マレイミド誘導体としてＡＡＢＰＭ、 ＤＡＢＰ
Ｍ。
定量マレイミド誘導体としてＡＡＢＰＭ、 ＤＡＢＰ
Ｍ。
ＤＤＰＭを用い、それぞれ波長を３１０． ３５０．
３５０ｎｍとする以外は実施例６と同様にしてカプトグ
リルの定量を行った。クロマトグラムを第７〜９図に示
す。
３５０ｎｍとする以外は実施例６と同様にしてカプトグ
リルの定量を行った。クロマトグラムを第７〜９図に示
す。
Ａ、ＡＢＰＭ及びＤＡＢＰＭは３１０又は３５０ ｎｍ
テも使用可能なことがわかる。これらの波長におい
ては、生体成分のピークが現われにくくこの点からも有
用である。
テも使用可能なことがわかる。これらの波長におい
ては、生体成分のピークが現われにくくこの点からも有
用である。
一方、第９図かられかるように従来品であるＤＤＰＭは
３５０ｎｍ ではピークが鈍くこの波長では定量に用い
得ないことがわかる。
３５０ｎｍ ではピークが鈍くこの波長では定量に用い
得ないことがわかる。
実施例９ 生体液中のＳＨ化合物の定量１−（Ｄ−３−
アセチルメルカプト−２−メチルプロパノイル）−Ｌ−
プロ）ツルーＬ−フェニルアラニンの脱アセチル化され
た代謝物（以後「脱アセチル化代謝物」と呼ぶ。）を含
むヒト血漿１ｍｅ Ｋ Ｏ，１八１ Ｐｈｏｓｐｂａｔ
ｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ６，７５） ２ｍｅを加えた
後、２−ＢＰＭ ｆ７）７−１＝ ） ン溶液（０，１
ＮＭｍｆ） ０．５ｍｅを加え、３０秒間よく攪拌した
後室温で３０分間放置する。内部標準物質として既知量
の４−Ｂ ＰＭｗ−＋ Ｇア＋チル化代謝物付加体を加
え、６Ｎ’−ＨＣｌ ０．５ｍｅを加えて塩酸酸性と
しクロロポルム抽出を行う。有機層を窒素気流下４０’
Ｃ以下で蒸発乾固させたものを０．５Ｍ Ｐｈｏｓｐｈ
ａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ７，０） ２．５ｍｅに
溶解しエーテルで２回洗浄後、６Ｎ”ＨＣ１添加以降の
操作をくり返し、得られた乾固物をアセトニトリル１０
０ｐｉに溶解したものの一定量をＳｈｉｍａｄｚｕ Ｌ
Ｃ−４ＡＬｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈに
注入する。移動相をアセトニトリル−ギ酸アンモニウム
（ｐＨ３，７５） （容量比２１ ： ２９ 、流速
１．０ｙｉ（’／ｍｉｎ ）、検出感度を００１とする
以外は実施°例７と同様の測定条件によシ、第１０図の
クロマトグラムを得た。
アセチルメルカプト−２−メチルプロパノイル）−Ｌ−
プロ）ツルーＬ−フェニルアラニンの脱アセチル化され
た代謝物（以後「脱アセチル化代謝物」と呼ぶ。）を含
むヒト血漿１ｍｅ Ｋ Ｏ，１八１ Ｐｈｏｓｐｂａｔ
ｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ６，７５） ２ｍｅを加えた
後、２−ＢＰＭ ｆ７）７−１＝ ） ン溶液（０，１
ＮＭｍｆ） ０．５ｍｅを加え、３０秒間よく攪拌した
後室温で３０分間放置する。内部標準物質として既知量
の４−Ｂ ＰＭｗ−＋ Ｇア＋チル化代謝物付加体を加
え、６Ｎ’−ＨＣｌ ０．５ｍｅを加えて塩酸酸性と
しクロロポルム抽出を行う。有機層を窒素気流下４０’
Ｃ以下で蒸発乾固させたものを０．５Ｍ Ｐｈｏｓｐｈ
ａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ７，０） ２．５ｍｅに
溶解しエーテルで２回洗浄後、６Ｎ”ＨＣ１添加以降の
操作をくり返し、得られた乾固物をアセトニトリル１０
０ｐｉに溶解したものの一定量をＳｈｉｍａｄｚｕ Ｌ
Ｃ−４ＡＬｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈに
注入する。移動相をアセトニトリル−ギ酸アンモニウム
（ｐＨ３，７５） （容量比２１ ： ２９ 、流速
１．０ｙｉ（’／ｍｉｎ ）、検出感度を００１とする
以外は実施°例７と同様の測定条件によシ、第１０図の
クロマトグラムを得た。
２−ＢＰＭ−説アセチル化代謝物付加体のピークは生体
成分、試薬自身のピークと重ならず、生体液中のＳＨ化
合物か定量できることがわかる。
成分、試薬自身のピークと重ならず、生体液中のＳＨ化
合物か定量できることがわかる。
第１〜１０図は本発明のマレイミド誘導体を用いて高速
液体クロマトグラフィーで測定したＳＨ化合物を含んだ
液体のクロマトグラムである。図中の数字は保持時間（
分）である。 特許出願人 大日本製薬株式会社 代理人 小 島 −晃 第１図 第２図 第３図 第４図 第５図 第６図 第７図 第８図 第９図 第１０図
液体クロマトグラフィーで測定したＳＨ化合物を含んだ
液体のクロマトグラムである。図中の数字は保持時間（
分）である。 特許出願人 大日本製薬株式会社 代理人 小 島 −晃 第１図 第２図 第３図 第４図 第５図 第６図 第７図 第８図 第９図 第１０図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 〔式中 Ｒ１は水素、ニトロ、ジ低級アルキルアミノ又
はＲ３−Ｃ０ＮＨ−（ここにおいてＲ３は低級アルキル
又はフェニルである。）であり Ｒ２は水素又はニトロ
であり、マレイミド置換基はベンゾイル置換基のオルし
又はパラ位にある。〕で表わされるマレイミド誘導体。 −
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7694583A JPS59204171A (ja) | 1983-04-28 | 1983-04-28 | Ｓｈ基を有する化合物の定量用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7694583A JPS59204171A (ja) | 1983-04-28 | 1983-04-28 | Ｓｈ基を有する化合物の定量用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59204171A true JPS59204171A (ja) | 1984-11-19 |
| JPH058379B2 JPH058379B2 (ja) | 1993-02-02 |
Family
ID=13619884
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7694583A Granted JPS59204171A (ja) | 1983-04-28 | 1983-04-28 | Ｓｈ基を有する化合物の定量用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59204171A (ja) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5083368A (ja) * | 1973-11-22 | 1975-07-05 | ||
| JPS54141765A (en) * | 1978-04-25 | 1979-11-05 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Maleimidoacyloxyphenyl derivative |
| JPS55149253A (en) * | 1979-05-09 | 1980-11-20 | Mitsui Toatsu Chem Inc | Maleimido and its preparation |
-
1983
- 1983-04-28 JP JP7694583A patent/JPS59204171A/ja active Granted
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5083368A (ja) * | 1973-11-22 | 1975-07-05 | ||
| JPS54141765A (en) * | 1978-04-25 | 1979-11-05 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Maleimidoacyloxyphenyl derivative |
| JPS55149253A (en) * | 1979-05-09 | 1980-11-20 | Mitsui Toatsu Chem Inc | Maleimido and its preparation |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH058379B2 (ja) | 1993-02-02 |
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