JPS59199049A - Test tube for solid-liquid phase reaction - Google Patents
Test tube for solid-liquid phase reactionInfo
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- JPS59199049A JPS59199049A JP7306683A JP7306683A JPS59199049A JP S59199049 A JPS59199049 A JP S59199049A JP 7306683 A JP7306683 A JP 7306683A JP 7306683 A JP7306683 A JP 7306683A JP S59199049 A JPS59199049 A JP S59199049A
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Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は固定化反応物(以下「固相担体」とい捕え、液
体サンプル中の被検物質を定量する方法に有用な、固相
担体と液相(反応試液および液体サンプルあるいは固相
担体洗滌用液)との分離を簡易ならしめるための固−液
相反応用試験管に関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to an immobilized reactant (hereinafter referred to as a "solid phase carrier"), which is useful in a method for quantifying a test substance in a liquid sample, and a liquid phase (reaction reagent and liquid sample). The present invention relates to a solid-liquid phase application test tube for simplifying separation from a sample (or a solid phase carrier washing liquid).
近年、臨床検査の手段として抗原抗体反応を利用した免
疫学的な方法や、酵素反応を利用した生化学的な方法が
繁用されている。これらの方法において、反応後の反応
物と未反応物を分離したり、あるいは回収したりする場
合、その操作は極めて繁雑で時間を要する。In recent years, immunological methods that utilize antigen-antibody reactions and biochemical methods that utilize enzymatic reactions have been frequently used as clinical testing tools. In these methods, when separating or recovering reactants and unreacted products after the reaction, the operation is extremely complicated and time consuming.
1959年、 BersonとYal lowにより開
発された放射免疫測定法(RIA)は、ホルモンや癌抗
原等の極微量物質の測定に用いられている。この方法は
被検物質と該被検物質と同じ物質に放射性物質を標識し
たもの(以下rRI標識物質」という)および該被検物
質に対する抗体の3者を反応させ、その後、抗体−RI
標識物質結合物CB〕の放射活性、もしくは抗体と結合
しなかったRI[[物質CFIの放射活性を測定するこ
とにより被検物質を定量するものである。この際CB)
と(F)を分離(以下r [B) / CF、)分離」
という)する必要があるが、これは通常遠心操作によっ
て行なわれている。Radioimmunoassay (RIA), developed by Berson and Yallow in 1959, is used to measure trace amounts of substances such as hormones and cancer antigens. In this method, a test substance, the same substance as the test substance labeled with a radioactive substance (hereinafter referred to as rRI-labeled substance), and an antibody against the test substance are reacted, and then the antibody-RI
The test substance is quantified by measuring the radioactivity of the labeled substance conjugate CB] or the radioactivity of the RI [[substance CFI] that is not bound to the antibody. At this time CB)
Separate and (F) (hereinafter r [B) / CF,) Separation”
), which is usually done by centrifugation.
しかし近年ではこの分離操作を簡便にするために、抗体
を固相担体に固定化(不溶化)し、反応後のCB) /
CF’)分離を容易にした方法が繁用されるようにな
った。However, in recent years, in order to simplify this separation procedure, antibodies are immobilized (insolubilized) on solid phase carriers, and CB) /
CF') methods that facilitate separation have come into frequent use.
またRIAの原理を応用し、放射性物質の代・わりに酵
素を標麩として用いた酵素免疫測定法(EIA)が19
69年EngvallとPerlmannによって開発
された。一般にEIAもRIAと同様CB)/CF)分
離を必要としており、球状1円柱状あるいは歯車状の固
相担体に抗体を固定したものを用いて〔B〕(J
/〔F〕分離を容易にしている。E I MBルてF〕
分離後酵素活性を測定するが、当該酵素活性は極めて鋭
敏なことからCB)/1m F m1分離を完全に行な
わしめないと被検物質の定量値に誤差を生ずる結果とな
る。従ってこの様な定量値誤差を防ぐため固相担体上に
結合した酵素標識物質の酵素活性を測定する方法におい
ては抗原抗体及応援、固相担体と反応液とを分離した後
、該固相担体を3〜5回位繰り返し洗滌することによっ
て未反応の標識物質CF)を完全に取り除いてから酵素
反応を開始させる必要がある。この際、固相担体と反応
液の分離、固相担体と洗滌液との分離はアスピレータ−
による吸引による方法が繁用されているが、この方法は
多くの時間と手間を要する。そこで当該吸引方法に代る
方法として、内壁を固相担体とした反応用試験管を用い
ることにより反応後、試験管を静かに倒すことで反応液
を排出させ、洗滌液を加えて洗滌後、同様にして洗滌液
を排出させるといつた方法が実用化されている。この方
法では洗滌操作は簡易化できたものの、当該試験管を製
造する段階において、一本一本に抗体を固定化する工程
が必要となることから、非能率的非生産的方法であり、
コスト面および精度面でも問題が残された。In addition, enzyme immunoassay (EIA), which applies the principles of RIA and uses enzymes as a marker instead of radioactive substances, is 19
It was developed by Engvall and Perlmann in 1969. Generally, like RIA, EIA requires CB)/CF) separation, and the separation of [B] (J/[F] is facilitated by using a spherical, cylindrical, or gear-shaped solid phase carrier with antibodies immobilized on it. E IMB Le F]
After separation, the enzyme activity is measured, but since the enzyme activity is extremely sensitive, if the CB)/1 m F m1 separation is not completed completely, an error will occur in the quantitative value of the test substance. Therefore, in order to prevent such errors in quantitative values, in the method of measuring the enzyme activity of an enzyme labeling substance bound to a solid phase carrier, after separating the antigen-antibody and support, the solid phase carrier, and the reaction solution, the solid phase carrier is It is necessary to completely remove unreacted labeling substance CF by repeatedly washing the sample 3 to 5 times before starting the enzymatic reaction. At this time, the separation of the solid phase carrier and the reaction solution, and the separation of the solid phase carrier and the washing solution are performed using an aspirator.
A method using suction is often used, but this method requires a lot of time and effort. Therefore, as an alternative to the suction method, by using a reaction test tube whose inner wall is a solid phase carrier, after the reaction, the test tube is gently tilted to drain the reaction liquid, and after washing by adding a washing liquid, A method of discharging the cleaning solution in a similar manner has been put into practical use. Although this method simplified the washing operation, it was an inefficient and unproductive method because it required a step to immobilize antibodies on each tube at the stage of manufacturing the test tubes.
Problems also remained in terms of cost and accuracy.
本発明は上述の如き既存の方法における問題点を解決す
べく検討した結果成されたものである。The present invention was achieved as a result of studies aimed at solving the problems in the existing methods as described above.
即ち本発明は
(1)試験管本体1を傾斜又は転倒させた際、試験管内
部に入れである固相担体7が排出されないように、試験
管18口部3側にストッパー2を設けたことを特徴とす
る固−液相反応用試験管であり、
(2)ストッパー2の一端は試験管本体1の開口部3の
エツジ4の一部に位置するように一体に成型されるか、
または該位置に固着あるいは回転自在なように装着され
、該位置とは反対側のエツジ部分に該ストッパーの他の
一端が着脱可能なように嵌合あるいは装着するようにな
した上記(1)記載の試験管である。また、更に、(3
)ストッパー2が試験管本体1の開口部3側に着脱可能
なように嵌合あるいは装着されてなる上記(1)記載の
試験管である。That is, the present invention provides (1) a stopper 2 is provided on the mouth 3 side of the test tube 18 so that the solid phase carrier 7 contained inside the test tube is not discharged when the test tube main body 1 is tilted or overturned; (2) One end of the stopper 2 is integrally molded so as to be located at a part of the edge 4 of the opening 3 of the test tube body 1;
or the above-mentioned (1), wherein the stopper is fixed or rotatably attached to the position, and the other end of the stopper is removably fitted or attached to the edge portion on the opposite side from the position; This is a test tube. Furthermore, (3
) The test tube according to (1) above, wherein the stopper 2 is removably fitted or attached to the opening 3 side of the test tube body 1.
本発明の固−液相反応用試験管は、試験管内部に入れた
固相担体が排出されないようストッパーを試験管開口部
側に設けであるので、試験管を傾けるか転倒させるかす
ることによって、試験管内の液相のみを排出することが
できる。従って本発明の固−液相反応用試験管は従来の
アスピレータ−によって液相を吸引する方法に比べ、極
めて操作性の優れた固相と液相の分離方法を提供する。The solid-liquid phase application test tube of the present invention is equipped with a stopper on the test tube opening side to prevent the solid phase carrier placed inside the test tube from being discharged. , only the liquid phase inside the test tube can be discharged. Therefore, the solid-liquid phase application test tube of the present invention provides a method for separating solid and liquid phases with extremely superior operability compared to the conventional method of suctioning the liquid phase using an aspirator.
例えばアスピレータ−を用いる場合には試験管1本毎に
吸水管を挿入しなければならないが、本発明の固−液相
反応用試験管を用いた場合にはその必要がなく、また当
該試験管を複数本同時に簡易固定する試験管立でのよう
なものを用いれば、同時に多数の試験管について、同相
担体と液相との分離ができるので、アスピレータ−を用
いる方法に比べ、当該分離操作に要する時間及び手間が
大巾に短縮、削減でき、更にはアスピレータ−といった
附属装置も必要としない等、多くのメリットを有する。For example, when using an aspirator, it is necessary to insert a water absorption tube into each test tube, but when using the solid-liquid phase application test tube of the present invention, this is not necessary, and the test tube If you use something like a test tube stand that simply fixes multiple tubes at the same time, you can separate the same-phase carrier and liquid phase for many test tubes at the same time, so the separation operation is easier than using an aspirator. It has many advantages, such as the time and effort required can be greatly shortened and reduced, and additional equipment such as an aspirator is not required.
又、本発明の固−液相反応用試験管には、現在繁用され
ている球状2円柱状、歯車状等の固相担体が用いられる
ので、試験管内壁を固相担体とするような非能率的、非
生産的方法は必要としない。In addition, the solid-liquid phase application test tube of the present invention uses solid phase supports such as spheres, cylinders, gears, etc., which are commonly used at present. There is no need for inefficient or unproductive methods.
次に図面によって本発明を説明する。Next, the present invention will be explained with reference to the drawings.
第1図は本発明の固−液相反応用試験管の一例を示す全
体図である。第1図中、lは試験管本体、2はストッパ
ーであり、該試験管本体とストッパーバ一体ニ成型する
か、該試験管本体にストッパーを固着するがあるいはス
トッパーが回転自在なように装着するがして形成される
。第1図中、3は本発明の試験管本体の開口部を示し、
4は該開口部のエツジを示す。FIG. 1 is an overall view showing an example of a solid-liquid phase application test tube of the present invention. In Fig. 1, l is the test tube body, and 2 is a stopper.The test tube body and stopper bar are integrally molded, or the stopper is fixed to the test tube body, or the stopper is attached so that it can rotate freely. It is formed by In FIG. 1, 3 indicates the opening of the test tube body of the present invention,
4 indicates the edge of the opening.
第2図は本発明の固−液相反応用試験管に固相せること
によりて固相担体と液相とを分離し、固相担体のみが残
った状態を第3図に示す。本発明の固−液相反応用試験
管は傾斜させるかまたは転倒させるといった極めて簡単
な操作で固相と液相を分離できるものである。また第4
図に示す如く本発明の固−液相反応用試験管を複数本が
同時に簡易固定できるような試験管室て1oにかん合さ
せておけば、複数本について同時に同相と液相の分離を
実施することができる。FIG. 2 shows a state in which the solid phase carrier and the liquid phase are separated by placing the solid phase in the solid-liquid phase application test tube of the present invention, and only the solid phase carrier remains. The solid-liquid phase application test tube of the present invention can separate a solid phase and a liquid phase by extremely simple operations such as tilting or overturning. Also the fourth
As shown in the figure, if multiple solid-liquid phase application test tubes of the present invention are connected to 1o in a test tube chamber where multiple tubes can be easily fixed at the same time, the same phase and liquid phase can be separated simultaneously for multiple tubes. can do.
第5図は本発明の試験管におけるストッパー2のセント
方法の一例を示す説明図である。この様に構成すれば、
該試験管内に固相担体を入れた後、ストッパーを指先等
で軽く押さえるだけで極めて簡単にセットできる。また
第6図及び第7図に示す如くストッパーを既製の試験管
13に嵌合させることによって本発明の固−液相反応用
試験管を構成することもできる。第8図、第9図はスト
ッパーのセット方法を示す他の態様であり、図中5なら
びに6はストッパーの一端を嵌合あるいは装着させるた
めの突起部および四部をそれぞれ示す。FIG. 5 is an explanatory diagram showing an example of the method of inserting the stopper 2 in the test tube of the present invention. If configured like this,
After placing the solid support in the test tube, it can be set very easily by simply pressing the stopper lightly with a fingertip or the like. Furthermore, the solid-liquid phase application test tube of the present invention can be constructed by fitting a stopper into a ready-made test tube 13 as shown in FIGS. 6 and 7. FIGS. 8 and 9 show other methods of setting the stopper, and numerals 5 and 6 in the figures respectively indicate a protrusion and four parts for fitting or mounting one end of the stopper.
また、第10図に示す如く試験管本体1とストッパー2
を別々に構成し、試験管本体にはストッパーが装着可能
なように突起部あるいは凹部を設けておいて、必要に応
じストッパーを装着するようにしてもよい。尚、突起部
あるいは四部の形状は、該ストッパーがセットできるよ
うに構成されていればいかなるものでもよく、当該図面
によって制限されるものではない。In addition, as shown in FIG. 10, the test tube body 1 and the stopper 2 are
The test tube body may be configured separately, and the test tube body may be provided with a protrusion or a recess so that a stopper can be attached, and the stopper may be attached as necessary. Note that the shape of the protrusion or the four parts may be any shape as long as it is configured to allow the stopper to be set, and is not limited by the drawings.
第11図はストッパー2の一端を試験管本体1の開口部
3側のエツジ4の一部に回転自在なように装着する一例
を示す説明図である。FIG. 11 is an explanatory view showing an example in which one end of the stopper 2 is rotatably attached to a part of the edge 4 on the opening 3 side of the test tube body 1.
第12図、第13図は本発明の試験管におけるストッパ
ーの形状の一例を示す平面図である。ストッパーの形状
もこの図によって制限されるものではなく、要は試験管
内の液相の排出に支障を来さず、固相担体のみが残るよ
うに構成されていればよく、例えば網状のものであって
もよい。FIGS. 12 and 13 are plan views showing an example of the shape of the stopper in the test tube of the present invention. The shape of the stopper is not limited by this figure; in short, it may be configured so that it does not interfere with the discharge of the liquid phase in the test tube and leaves only the solid phase carrier; for example, it may be mesh-shaped. There may be.
尚、第14図に示す如く試験管本体1とストッパー2の
間に切り込み9を設けておけばストッパーをセットする
とき折り曲げやすくなり好都合である。It is advantageous to provide a notch 9 between the test tube body 1 and the stopper 2 as shown in FIG. 14, as this makes it easier to bend the stopper when setting it.
本発明の試験管は、固相担体の出し入れに好都合なよう
にストッパーを着脱可能な構成として示したが、固相担
体を試験管内から取り出す必要のないような場合には、
予め固相担体を試験管内部ニ入t”L、ストッパーをセ
ットした状態で固定した構成であってもよい。Although the test tube of the present invention is shown as having a removable stopper for convenient loading and unloading of the solid phase carrier, in cases where it is not necessary to take out the solid phase carrier from inside the test tube,
The structure may be such that the solid phase carrier is fixed in advance inside the test tube with a stopper set therein.
本発明の試験管の素材としては、熱可塑性樹脂。The material for the test tube of the present invention is thermoplastic resin.
熱硬化性樹脂等が用いられる。熱可塑性樹脂としては、
例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン。A thermosetting resin or the like is used. As a thermoplastic resin,
For example, polyethylene, polypropylene.
ポリメチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリエチ
レンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート、ス
チレン−アクリロニトリル共x< 合体lスチレン−無
水マレイン酸共重合体、スチレン−アクリル酸共重合体
、スチレン−メチルメタクリレート共重合体、スチレン
−ブタジェン共fi 合体。Polymethyl methacrylate, polyvinyl chloride, polyethylene terephthalate, polybutylene terephthalate, styrene-acrylonitrile copolymer styrene-maleic anhydride copolymer, styrene-acrylic acid copolymer, styrene-methyl methacrylate copolymer, styrene- Butadiene co-fi combined.
スチレン−イソプレン共重合体、エチレン−プロピレン
共重合体、エチレン−アクリル酸共重合体。Styrene-isoprene copolymer, ethylene-propylene copolymer, ethylene-acrylic acid copolymer.
エチレン−アクリル酸エステル共重合体、ポリビニルア
ルコールアセタール化物、ポリビニルアルコールブチラ
ール化物等、また熱硬化性樹脂としては、例えば、不飽
和ポリエステル樹脂、エポキシ樹脂、エポキシアクリレ
ート樹脂等が用いられる。Ethylene-acrylic acid ester copolymer, polyvinyl alcohol acetal, polyvinyl alcohol butyral, etc., and as the thermosetting resin, for example, unsaturated polyester resin, epoxy resin, epoxy acrylate resin, etc. are used.
第1図は本発明の固−液相反応用試験管の一例を示す全
体図である。第2図は本発明の固−液相反応用試験管に
固相担体と液相とを入れ、ストッパーをセットした状態
を示す。第3図は第2図の状態の当該試験管を傾斜また
は転倒させることによって液相部分を分離した後、固相
担体のみが残った状態を示す。第4図は本発明の固−液
相反応用試験管の複数本を簡易固定できる試験管室てに
固定した状態を示す。第5図乃至第10図は、本発明の
固−液相反応用試験管におけるストッパーのセット方法
を示す説明図。第11図はストッパーの一端を回転自在
なように装着させる方法の一例を示す説明図。第12図
、第13図は本発明の固−液相反応用試験管におけるス
トッパーの形状の一例を示す平面図である。第14図は
第1図のA−A’断面図。第15図及び第16図は本発
明の固−液相反応用試験管の他の態様を示す全体図であ
る。
1、試験管本体 2. ストッパー 3.開口部4
、エツジ 5.突起部 6.凹部7、固相担体
8.液相 9.切り込み10、 試験管室て
11.穴 12.注ぎ口■3.跳領W詠9′簀
出願人 中外製薬株式会社
!“6図 才′フ(ζ
乏・9ワ
づ(・g1ス
オ□t(1ニー”:hFIG. 1 is an overall view showing an example of a solid-liquid phase application test tube of the present invention. FIG. 2 shows a state in which a solid phase support and a liquid phase are placed in the solid-liquid phase application test tube of the present invention, and a stopper is set. FIG. 3 shows a state in which only the solid phase carrier remains after the liquid phase portion is separated by tilting or overturning the test tube in the state shown in FIG. FIG. 4 shows a state in which a plurality of solid-liquid phase application test tubes of the present invention are fixed in a test tube chamber where they can be easily fixed. 5 to 10 are explanatory diagrams showing a method of setting a stopper in the solid-liquid phase application test tube of the present invention. FIG. 11 is an explanatory diagram showing an example of a method for rotatably mounting one end of the stopper. 12 and 13 are plan views showing an example of the shape of the stopper in the solid-liquid phase application test tube of the present invention. FIG. 14 is a sectional view taken along the line AA' in FIG. FIGS. 15 and 16 are general views showing other embodiments of the solid-liquid phase application test tube of the present invention. 1. Test tube body 2. Stopper 3. Opening 4
, Edge 5. Projection 6. Recess 7, solid support
8. Liquid phase 9. Notch 10, test tube room
11. Hole 12. Spout■3. Applicant Chugai Pharmaceutical Co., Ltd. “6 figure sai’fu(ζ 小・9wazu(・g1suo□t(1knee)”:h
Claims (4)
、試験管開口部3側にストッパー2を設けたことを特徴
とする固−液相反応用試験管。(1) A stopper 2 is provided on the test tube opening 3 side to prevent the solid phase carrier 7 placed inside the test tube from being ejected when the test tube body 1 is tilted or overturned. Characteristic solid-liquid phase application test tube.
のエツジ4の一部に位置するように、一体に成型される
か、または該位置に固着あるいは回転自在なように装着
され、該位置とは反対側のエツジ部分に該ストッパーの
他の一端が着脱可能なように嵌合あるいは装着するよう
になした特許請求の範囲第一項記載の試験管。(2) One end of the stopper 2 is connected to the opening 3 of the test tube body 1.
The stopper is integrally molded or fixed or rotatably mounted at a part of the edge 4 of the stopper, and the other end of the stopper is located at a part of the edge 4 on the opposite side from the position. The test tube according to claim 1, which is adapted to be removably fitted or attached.
可能なように嵌合あるいは装着されてなる特許請求の範
囲第一項記載の試験管。(3) The test tube according to claim 1, wherein the stopper 2 is removably fitted or attached to the opening 3 side of the test tube body 1.
可能なように突起部5または四部6を設けてなる特許請
求の範囲第二項または第三項記載の試験管。(4) The test tube according to claim 2 or 3, wherein the stopper 2 is provided with a protrusion 5 or a fourth part 6 so that the stopper 2 can be fitted or attached to the edge 4 portion.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP7306683A JPS59199049A (en) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | Test tube for solid-liquid phase reaction |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP7306683A JPS59199049A (en) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | Test tube for solid-liquid phase reaction |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS59199049A true JPS59199049A (en) | 1984-11-12 |
Family
ID=13507591
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP7306683A Pending JPS59199049A (en) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | Test tube for solid-liquid phase reaction |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS59199049A (en) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0341342A2 (en) * | 1988-05-09 | 1989-11-15 | Multi-Technology, Inc. | Fail safe releasable locks for capped disposable centrifuge containers |
EP0341372A2 (en) * | 1988-05-09 | 1989-11-15 | Multi-Technology, Inc. | Disposable laboratory testing devices |
CN108180151A (en) * | 2018-01-22 | 2018-06-19 | 浙江理工大学 | A kind of Visualization platform for being used to study solid-liquid two-phase impeller channel |
-
1983
- 1983-04-27 JP JP7306683A patent/JPS59199049A/en active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0341342A2 (en) * | 1988-05-09 | 1989-11-15 | Multi-Technology, Inc. | Fail safe releasable locks for capped disposable centrifuge containers |
EP0341372A2 (en) * | 1988-05-09 | 1989-11-15 | Multi-Technology, Inc. | Disposable laboratory testing devices |
CN108180151A (en) * | 2018-01-22 | 2018-06-19 | 浙江理工大学 | A kind of Visualization platform for being used to study solid-liquid two-phase impeller channel |
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