JPS58103656A - 電気泳動用装置 - Google Patents
電気泳動用装置Info
- Publication number
- JPS58103656A JPS58103656A JP56201613A JP20161381A JPS58103656A JP S58103656 A JPS58103656 A JP S58103656A JP 56201613 A JP56201613 A JP 56201613A JP 20161381 A JP20161381 A JP 20161381A JP S58103656 A JPS58103656 A JP S58103656A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gel
- electrophoresis
- substrate
- sides
- spacers
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、主とじ下蛋白質のような電荷を有すす°１）
°粒′Ｆｏｓｍｓ析１６６も０１シ・％に臨床用体液分
析に関するものである。
°粒′Ｆｏｓｍｓ析１６６も０１シ・％に臨床用体液分
析に関するものである。
シランカプリング処理のような活性化処理を施こし九基
板（ガラス、ポリエステルなど）にボリアクリルアξ′
ドゲルを結合させて得られる薄膜支持体、あるいは、ア
ガロースゲルを用いる水平型電気泳動については既に報
告されているが、特に等電点電気泳動像には分離バンド
の乱れが見られ問題がある。等電点電気泳動とは支持体
にわらかじ−め両性電解質（たとえばＬＫＢ社製アンフ
オライン）を混合しておき、これに電場をかけるとアン
フオラインに含まれる多種類の両性電解質が個有の等電
点く基づいて移動し、陽、陰画極間に１）Ｈ勾配を形成
し、装填し九試料成分もまたこの１）Ｈ勾配上の個有の
等電点位置に分離濃縮される。
板（ガラス、ポリエステルなど）にボリアクリルアξ′
ドゲルを結合させて得られる薄膜支持体、あるいは、ア
ガロースゲルを用いる水平型電気泳動については既に報
告されているが、特に等電点電気泳動像には分離バンド
の乱れが見られ問題がある。等電点電気泳動とは支持体
にわらかじ−め両性電解質（たとえばＬＫＢ社製アンフ
オライン）を混合しておき、これに電場をかけるとアン
フオラインに含まれる多種類の両性電解質が個有の等電
点く基づいて移動し、陽、陰画極間に１）Ｈ勾配を形成
し、装填し九試料成分もまたこの１）Ｈ勾配上の個有の
等電点位置に分離濃縮される。
等電点電気泳動は原理的に電気的中性に近い状態におけ
る電気泳動であるため、泳動が進むにしたがって支持体
であるゲル全体の抵抗値が大きくなる。このため抵抗の
不均一な個所があると電流分布に乱れを生じゃすくなシ
、結果的にｐＨ分布も不均一になる。事実１０Ｘ２５Ｘ
０．０５（（７））のゲル薄膜を用いた電気泳動像は、
各試料の分離バンドが波状になっておシ、これはｐＨ分
布に乱れが生じていることを示して−る。従来のように
目視で解析する場合には余９問題にならないにしても計
器による定量、あるいは２次元泳動像に展開する場合に
は分−能低下につながる。
る電気泳動であるため、泳動が進むにしたがって支持体
であるゲル全体の抵抗値が大きくなる。このため抵抗の
不均一な個所があると電流分布に乱れを生じゃすくなシ
、結果的にｐＨ分布も不均一になる。事実１０Ｘ２５Ｘ
０．０５（（７））のゲル薄膜を用いた電気泳動像は、
各試料の分離バンドが波状になっておシ、これはｐＨ分
布に乱れが生じていることを示して−る。従来のように
目視で解析する場合には余９問題にならないにしても計
器による定量、あるいは２次元泳動像に展開する場合に
は分−能低下につながる。
采発明は薄膜ゲルを用いた水平製電気泳動像の分離能向
上に関わるもので、ゲルの泳動力向く平行な側面をゲル
と親和性のよい材料で絶縁（シールド）することによシ
１通電時に生ずる電流の工ツヂ効果を減少させ均一な電
流分布を形成し％特に等電点電気泳動において乱れのな
いかつ分離のよい分離像を与えることを目的とする。
上に関わるもので、ゲルの泳動力向く平行な側面をゲル
と親和性のよい材料で絶縁（シールド）することによシ
１通電時に生ずる電流の工ツヂ効果を減少させ均一な電
流分布を形成し％特に等電点電気泳動において乱れのな
いかつ分離のよい分離像を与えることを目的とする。
薄職ゲルを用いた等電点電気泳動は泳動終了時ゲル面は
形成されるＰＨ位置によって収縮、膨潤がおこシ泳動直
角方向に波状を形成する。さらにこの波形はゲル側面附
近で一方向に著しくわん曲している。全面のＰＨ分布を
表面ｐＨ計を用いて測定するとはソこの波に沿ってｐＨ
の等高融が描かれていることがわかつ九６周辺部の乱れ
は１時としてゲルの中央部にまで及び、電気泳動像（分
離バンド）も直線にならず波形にゆらぐことになる。
形成されるＰＨ位置によって収縮、膨潤がおこシ泳動直
角方向に波状を形成する。さらにこの波形はゲル側面附
近で一方向に著しくわん曲している。全面のＰＨ分布を
表面ｐＨ計を用いて測定するとはソこの波に沿ってｐＨ
の等高融が描かれていることがわかつ九６周辺部の乱れ
は１時としてゲルの中央部にまで及び、電気泳動像（分
離バンド）も直線にならず波形にゆらぐことになる。
これを改善する丸めには（１）支持体のミクロな構造が
均一であること、（２）電流分布が支持体全面において
均一であること、（３）試料を装填するためのスポット
の面積を小さくすること等が考えられるが、本発明はこ
のうち（２）の項目に咳当する。
均一であること、（２）電流分布が支持体全面において
均一であること、（３）試料を装填するためのスポット
の面積を小さくすること等が考えられるが、本発明はこ
のうち（２）の項目に咳当する。
本発明は、ゲルの側面をゲルと親和性のある材料（たと
えばガラス、シランカプリング処理したガラス、同じく
シランカプリング処理したポリエステルなど）でシール
し、を流のエッヂ効果を妨ぐことを目的としたものであ
る。形状はたとえばガラス基板と一体化して両側に一定
巾のヘシを設けたもの（第１図）、基板の両側にスペー
サをは９つけたもの（＠２図）、ｊ！にゲル側面と接す
る部分ＫＲ（曲率）をつけたもの（第３図）等考えられ
る。
えばガラス、シランカプリング処理したガラス、同じく
シランカプリング処理したポリエステルなど）でシール
し、を流のエッヂ効果を妨ぐことを目的としたものであ
る。形状はたとえばガラス基板と一体化して両側に一定
巾のヘシを設けたもの（第１図）、基板の両側にスペー
サをは９つけたもの（＠２図）、ｊ！にゲル側面と接す
る部分ＫＲ（曲率）をつけたもの（第３図）等考えられ
る。
本発明の効果は実施例に示すが、側面をシールすること
によシミ流がゲル側面に集中するのを紡ぎ、その結果乱
れのない泳動像か得られ、このゲルを２次元泳動にも支
障なく利用する事が可能になる。
によシミ流がゲル側面に集中するのを紡ぎ、その結果乱
れのない泳動像か得られ、このゲルを２次元泳動にも支
障なく利用する事が可能になる。
以下１本発明を実施例を参照して詳細に説明する。
１）シランカプリング処理を施こしたカラス板（ＩＩＯ
ＸＩＩＯＸＩ （■））の両端に同じくシランカプリン
グ処理をしたガラススペーサ（１１０Ｘ４Ｘ１ （■）
）をはシつけ（＃！２図）て、これに両性担体（たとえ
ばＬＫＢ社製アンフオライン）を混合したアクリルアミ
ドゲル作成用溶液５（アクリルアミドモノマー、ＮＮ’
メチレン−ビスアクリルアミド、テトラメチルエチレン
ジアミン、過硫酸アンモニクム混合溶液）を注入して重
合させる。倚られた等電点電気用薄型ゲルは泳動装置の
冷却板にのせ（第４１ＳｉＱ）十極儒に、０．０１モ〜
のリンｆｌｔ溶液、−極側に０．０４モルのカセイソー
ダ溶液のもとて予備線Ｊｍ（２００ＶＸ３０分）する。
ＸＩＩＯＸＩ （■））の両端に同じくシランカプリン
グ処理をしたガラススペーサ（１１０Ｘ４Ｘ１ （■）
）をはシつけ（＃！２図）て、これに両性担体（たとえ
ばＬＫＢ社製アンフオライン）を混合したアクリルアミ
ドゲル作成用溶液５（アクリルアミドモノマー、ＮＮ’
メチレン−ビスアクリルアミド、テトラメチルエチレン
ジアミン、過硫酸アンモニクム混合溶液）を注入して重
合させる。倚られた等電点電気用薄型ゲルは泳動装置の
冷却板にのせ（第４１ＳｉＱ）十極儒に、０．０１モ〜
のリンｆｌｔ溶液、−極側に０．０４モルのカセイソー
ダ溶液のもとて予備線Ｊｍ（２００ＶＸ３０分）する。
次にゲル上にあらかじめ穿孔しておいた個所に血清３μ
ｔ′ｔ−装填し泳動（５００ＶＸ２時間）する。
ｔ′ｔ−装填し泳動（５００ＶＸ２時間）する。
泳動終了時直ちにゲル表面のｐＨを衣面ｐＨ計を用いて
測定した結果（第５図）を従来法（ゲル側面をシールし
ないゲルを用ｉる方法）の結果（第６図）と比較してみ
るとｐＨ等高融の乱れが少なく、乱れの及ぶ範囲もせま
くなっていることがわかる。また同一条件で泳動した試
料をクーマジープ〜−染色ｔて血清の蛋白分離像をみる
と分離した各バンドがわん曲せず、泳動方向に直角に直
線になっており効果が顕著である。第５．６図において
ｙは泳動分離方向、χはゲルの横巾方向を示す。
測定した結果（第５図）を従来法（ゲル側面をシールし
ないゲルを用ｉる方法）の結果（第６図）と比較してみ
るとｐＨ等高融の乱れが少なく、乱れの及ぶ範囲もせま
くなっていることがわかる。また同一条件で泳動した試
料をクーマジープ〜−染色ｔて血清の蛋白分離像をみる
と分離した各バンドがわん曲せず、泳動方向に直角に直
線になっており効果が顕著である。第５．６図において
ｙは泳動分離方向、χはゲルの横巾方向を示す。
ガラス基板と一体化しｆｃ構造でゲルと接する部分にＲ
（曲率）をつけた構造のもの（第３図）を使用した場合
も、より良い結果が得られｆｃ。
（曲率）をつけた構造のもの（第３図）を使用した場合
も、より良い結果が得られｆｃ。
第１図（→、（ｂ）は１本発明の一実施例の装置を示す
図、第２図（→、（呻及び第３図は、本発明の他の動装
置を示す断面図、第５図は本発明による等電点電気泳動
結果を示すｐＨ等高線図、第６図は従来法による９Ｈ等
高線図である。 １・・・基板、２・・・ゲル、３・・・接着テープ、４
・・・基板。 ５・・・スペーサー、６・・・基板、７・・・試料装填
用の孔。 ８・・・基板、９・・・カバー板、１０・・・液絡用１
紙。 １１・・・液絡用スポンジ、１２・・・電解液、１３・
・・冷′ｖ１１ 日 第 ２ 図 市 ３ 図 猶 Ｓ 口 第 ６ 図
図、第２図（→、（呻及び第３図は、本発明の他の動装
置を示す断面図、第５図は本発明による等電点電気泳動
結果を示すｐＨ等高線図、第６図は従来法による９Ｈ等
高線図である。 １・・・基板、２・・・ゲル、３・・・接着テープ、４
・・・基板。 ５・・・スペーサー、６・・・基板、７・・・試料装填
用の孔。 ８・・・基板、９・・・カバー板、１０・・・液絡用１
紙。 １１・・・液絡用スポンジ、１２・・・電解液、１３・
・・冷′ｖ１１ 日 第 ２ 図 市 ３ 図 猶 Ｓ 口 第 ６ 図
Claims (1)
- １、ポリアクリルアミドあるいはアガロースゲルから成
る電気泳動用支持体の泳動一方向に平行ｉ＠面を、これ
らゲルと親和性のある材料で絶縁することを特徴とする
電気泳動用装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56201613A JPS58103656A (ja) | 1981-12-16 | 1981-12-16 | 電気泳動用装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56201613A JPS58103656A (ja) | 1981-12-16 | 1981-12-16 | 電気泳動用装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58103656A true JPS58103656A (ja) | 1983-06-20 |
Family
ID=16443957
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56201613A Pending JPS58103656A (ja) | 1981-12-16 | 1981-12-16 | 電気泳動用装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58103656A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60190849A (ja) * | 1984-03-12 | 1985-09-28 | Fuji Photo Film Co Ltd | 電気泳動方法及びそれに用いる支持媒体 |
| JPS61501726A (ja) * | 1984-03-22 | 1986-08-14 | プリバ・アグロ・ホールディング・ベスローテン・フェンノートシャップ | Ｉｓｆｅｔを製造する方法およびそのｉｓｆｅｔ |
| WO1995035496A1 (en) * | 1994-06-21 | 1995-12-28 | Pharmacia Biotech Ab | Spacer |
| JP2010060350A (ja) * | 2008-09-02 | 2010-03-18 | Yokogawa Electric Corp | ガス分析計 |
-
1981
- 1981-12-16 JP JP56201613A patent/JPS58103656A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60190849A (ja) * | 1984-03-12 | 1985-09-28 | Fuji Photo Film Co Ltd | 電気泳動方法及びそれに用いる支持媒体 |
| JPS61501726A (ja) * | 1984-03-22 | 1986-08-14 | プリバ・アグロ・ホールディング・ベスローテン・フェンノートシャップ | Ｉｓｆｅｔを製造する方法およびそのｉｓｆｅｔ |
| WO1995035496A1 (en) * | 1994-06-21 | 1995-12-28 | Pharmacia Biotech Ab | Spacer |
| US5736022A (en) * | 1994-06-21 | 1998-04-07 | Pharmacia Biotech Ab | Spacer |
| JP2010060350A (ja) * | 2008-09-02 | 2010-03-18 | Yokogawa Electric Corp | ガス分析計 |
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