JPH11507050A - Treatment and prevention of prostate disease - Google Patents

Treatment and prevention of prostate disease

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JPH11507050A
JPH11507050A JP9501341A JP50134197A JPH11507050A JP H11507050 A JPH11507050 A JP H11507050A JP 9501341 A JP9501341 A JP 9501341A JP 50134197 A JP50134197 A JP 50134197A JP H11507050 A JPH11507050 A JP H11507050A
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steroid
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JP9501341A
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Japanese (ja)
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スミス，ロイ・ジイ
ローズナー，ウイリアム
ナカーラ，エイテイフ・エム
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メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド
セント・ルークズ／ルーズベルト・ホスピタル・センター
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、ＳＨＢＧに結合する化合物であってしかもエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げることによりエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの両方のＳＨＢＧ媒介効果に拮抗する該化合物の治療上有効な量を投与することにより、良性前立腺過形成（ＢＰＨ）および前立腺癌を処置および予防する方法に関する。本発明は更に、ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物、並びにＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールの結合を妨げる化合物を見出す方法に関する。   (57) [Summary] The present invention relates to a compound that binds to SHBG and also inhibits the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol, thereby reducing the SHBG-mediated effects of both estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol. A method for treating and preventing benign prostatic hyperplasia (BPH) and prostate cancer by administering a therapeutically effective amount of the antagonistic compound. The invention further relates to compounds that bind to SHBG and prevent the binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol, and to methods of finding compounds that bind to SHBG and prevent binding of estradiol.

Description

【発明の詳細な説明】 前立腺病の処置および予防 本発明の背景 良性前立腺過形成（ＢＰＨ）および前立腺癌は、年老いてきた男性の最も共通 的な悩みの種の中に入っている。 良性前立腺過形成は、しばしば、前立腺の経尿道的切除（ＴＵＲＰ）として知 られた手法により外科的に処置される。尿の閉鎖を開放するために遂行される他 の外科的手法は、切開またはステントを含む。去勢もまた、前立腺肥大の後退を もたらした。ＢＰＨの薬物治療は、閉鎖症状を軽減することによりこの病気の症 状を処置するがしかしこの病気の基礎となる原因即ち肥大化前立腺に影響を及ぼ さないアルファ−１遮断剤が含まれている。ＢＰＨの処置において用いられる代 表的アルファ−１遮断剤は、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、タムスロ シンおよびアルフゾシンを含む。これらの薬物は、前立腺の平滑筋の緊張を弛緩 して、膀胱圧に影響を及ぼすことなく尿道内の圧力を下げる。これらの薬剤の共 通的な副作用は、めまい感、頭痛および疲労である。 メルク・アンド・カンパニー・インク社により商品名プロス カー（ＰＲＯＳＣＡＲ）（登録商標）下で上市されているフィナステリド（１７ β−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル）−４−アザ−５α−アンドロスト− １−エン−３−オン）は、良性前立腺過形成の処置用に最近上市されたテストス テロン−５α−レダクターゼの阻害剤である。前立腺におけるアンドロゲン活性 の主媒介物質は、テストステロン−５α−レダクターゼの作用により前立腺にお いて局部的に形成される５α−ジヒドロテストステロン（“ＤＨＴ”）である。 テストステロン−５α−レダクターゼの阻害剤は、前立腺においてにＤＨＴへの テストステロン（Ｔ）の転化を阻害しそして過度アンドロゲン刺激の症状を予防 するかまたは減じるよう働く。特に、１９８３年３月２２日に発行されたメルク ・アンド・カンパニー・インク社に譲渡された米国特許第４，３７７，５８４号 参照。前立腺癌の処置におけるフィナステリドの効用もまた、次の文書即ち１９ ８８年１０月５日に公開されたＥＰ０，２８５，３８２、１９８８年１０月５日 に公開されたＥＰ０，２８５，３８３、カナダ国特許第１，３０２，２７７号お よびカナダ国特許第１，３０２，２７６号に開示されている。 前立腺癌およびＢＰＨの両方共、抗アンドロゲンで処置され てきた。フルタミドおよびカソデックスのような非ステロイド系抗アンドロゲン は、前立腺細胞においてサイトゾルのアンドロゲンレセプター部位についてＤＨ Ｔと競合する。これらの非ステロイド系抗アンドロゲンは、ゴナドトロフィン放 出性ホルモンアゴニストおよびプロゲストゲン程には、性交能および性欲を実質 的に変化させない。しかしながら、これらの非ステロイド系抗アンドロゲンは、 しばしば、男性宿主を女性化する(女性化乳房)かまたは精巣の過度刺激を引き起 こすフィードバック効果を発動させる不所望な傾向を示す。 ナファレリン、ブセレリン、ゴセレリンおよびリュープロレリンのようなゴナ ドトロフィン放出性ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニストはすべて、下垂体前葉にお いてＧｎＲＨレセプターを脱感作することにより黄体形成ホルモン（ＬＨ）の放 出を低減する。ＧｎＲＨアゴニストは、テストステロンの生成を低減し、前立腺 体積の収縮を誘発させおよびＢＰＨの尿症状の重症度を低減する能力がある。残 念なことに、これらの薬物はインポテンツおよび潮紅のような悪作用を有し、そ れにより大多数の患者は該薬物を継続するのを思いとどまらせられる。これらの アンドロゲン抑制剤はかくしてＢＰＨ処置において筋の通らない 有意性があるが、しかし進行前立腺癌の患者の処置においては大いなる重要性が ある。 メゲストロールアセテート、ヒドロキシプロゲステロンおよびメドロゲストン のようなプロゲストゲンは、ＬＨ放出を阻止しおよびアンドロゲンレセプターを 遮断することによりテストステロンを抑制して、前立腺体積の減少を引き起こす 。低減された性欲およびインポテンツのような悪影響が、プロゲストゲンのＢＰ Ｈ処置における常用を妨げてきた。 かくして、ＢＰＨおよび前立腺癌の追加的療法が、副作用を許容し得ないおよ び／または現在利用され得る療法から適切な軽減を経験しない個人にとって依然 必要である。 性ホルモン結合性グロブリン（ＳＨＢＧ）は、ヒトおよびイヌの血清中に見ら れるがしかしラットにおいては見られない結合性蛋白質であって、高親和性（３ ７℃におけるＫｄ：ＤＨＴ１＝ｎＭ、Ｔ＝３ｎＭ）でもってテストステロン、ジ ヒドロテストステロンおよびエストラジオールと結合する。性ステロイドの各々 の結合は、競合的であると思える。本発明まで、ＳＨＢＧの機能は明確に定めら れておらず、標的細胞中に拡散してステロイドレセプターと相互作用する“遊離 ”ステロイドの量 を調節する際に役割を演じると考えられていた。この機能は単に結合の事実によ り達成されると考えられており、ＳＨＢＧと細胞との特異的相互作用に依存する とは信じられていなかった。ステロイドと結合すること加えて、ＳＨＢＧはそれ 自体、原形質膜上のレセプター部位に結合する。 ＳＨＢＧは細胞調節剤であると思われ、しかして細胞とのその相互作用および 細胞に対するその究極的効果は２つの工程にて制御される。工程１：未リガンド 結合（ｕｎｌｉｇａｎｄｅｄ）ＳＨＢＧのみが、レセプターに結合する。結合の 阻止はそのステロイド結合性部位の占有にのみ関連し、結合されるステロイドの 特質に関連しない。かくして、重要な生物学的実体としての遊離ＳＨＢＧの概念 が考えられねばならない。正常な男性においてＳＨＢＧの約４０％は未リガンド 結合にあり、しかして結合されているＳＨＢＧについて、テストステロンが占有 部の７５％を占める（「ドゥン等，ジェイ・クリン・エンドクリノル・メタブ（ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．），５３：６９〜７５（１ ９８１）」）。女性においては、ＳＨＢＧの８０％以上が未リガンド結合にある 。男性においてと同じくらい多い占有部の部分を占める単一ステロイド はないが、占有部の半分以上はテストステロン、デヒドロエピアンドロステロン およびΔ５−アンドロステンジオールにより占められる。物理化学のみが考慮さ れるならば、循環するステロイドの特質（例えば、それらの濃度およびＳＨＢＧ についての親和性）はいくらかの特異性を比較的非特異性の系であるものに与え る、ことが明らかである。工程２：未リガンド結合ＳＨＢＧがそのレセプターに 結合した後、ステロイドはＳＨＢＧ−レセプター複合体に結合し得、そしてそれ が生物学的活性を有するなら、細胞内ｃＡＭＰの蓄積及び／または結合ステロイ ドの転流のような他の結合後事象に通じ得る。 エストラジオールは、肝臓により作られるＳＨＢＧの量を増加する。男性にお いて、血清中のＳＨＢＧおよびエストラジオール対テストステロンの比率は両方 共、年齢の関数として増加する。 ウィリアム・ロスナー等（「ナクラ等，ジェイ・クリン・エンドクリン・アン ド・メタブ（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．＆ Ｍｅｔａｂ．），７１（２ ）：４９８〜４０４（１９９０）」）は、未リガンド結合ＳＨＢＧがヒト前立腺 細胞に結合すること並びにエストラジオールの引き続く結合がｃＡＭＰ の用量依存性増加を引き起こすことを示した。ＳＨＢＧがそのレセプターに結合 されると、それは次いでステロイドと結合してＳＨＢＧのそのレセプターからの 解離をもたらすことになり得る（この解離の半減期は約３０時間である。）。こ の活性はヒト前立腺癌細胞（ＬＮＣａＰ細胞）において最初に記録されたけれど も、その効果はＢＰＨ組織の一次培養においてはるかに一層顕著であった。「ナ クラ等，“エストラジオールはヒトの前立腺においてｃＡＭＰの急速な蓄積を引 き起こす”，プロク・ナトル・アカド・サイ（Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ）（ＵＳＡ）９１：５４０２〜５４０５，１９９４」参照。ＢＰＨからの 培養された腺維芽細胞および上皮細胞の比較により、活性が腺維芽細胞に限られ ることが示された。このｃＡＭＰ効果は、エストラジオールについて特異的であ った。ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）はＳＨＢＧに結合するけれども、ＤＨ ＴはＢＰＨ組織においてｃＡＭＰに影響を及ぼさなかった。前立腺癌細胞系ＬＮ ＣａＰにおいては、ＤＨＴおよびエストラジオールは両方共その系を活性化して ｃＡＭＰの増加を引き起こした。 更に、抗エストロゲンタモキシフェンは、ｃＡＭＰを増加す ることにおけるエストラジオールの効果を遮断しなかった。これは、多分タモキ シフェンがＳＨＢＧへのエストラジオールの結合ついて競合しない故であろう。 更に、効力のあるエストロゲンジエチルスチルベストロールは、ＳＨＢＧに結 合せずかつ前立腺細胞においてｃＡＭＰを増加しなかった。 ステロイド代謝産物である２−メトキシエストラジオールは、知られた生物学 的活性を有さない。しかしながら、２−メトキシエストラジオールは、エストラ ジオールよりもしっかりとＳＨＢＧに結合する。この結合は、エストラジオール 結合でもって観察されるｃＡＭＰの増加をもたらさない。 アンドロゲンは、良性前立腺過形成および前立腺癌の病原論にとって中心的で あることが広く認められている。しかしながら、前立腺のこれらの病気は、男性 が年をとるにつれ即ち血漿アンドロゲンが低下しつつある時期に有病率において 増加する。総血漿アンドロゲンの減少は年齢に関連した血漿ＳＨＢＧの増加によ り増幅され、しかして該増加は総アンドロゲンの低下よりも比較的大きい遊離ア ンドロゲンの低下をもたらす。加えて、エストロゲンはＢＰＨにおいて重要であ ると長く思われてきた が、しかしヒトの前立腺に対する直接的影響は決して示されていない。アンドロ ゲンレベルを下げそしてＳＨＢＧを上げるエストラジオールが、前立腺の病気の 病原論において役割を演じると示唆されてきた。エストラジオールはＳＨＢＧと 協力して活動して、ヒトのＢＰＨおよび前立腺癌組織において細胞内ｃＡＭＰの 大きな増加をもたらす。この増加は抗エストロゲンにより妨げられずかつＳＨＢ Ｇに結合しないエストロゲンにより誘発されないので、古典的細胞内エストロゲ ンレセプターにより媒介されない。 本発明は、ＳＨＢＧに結合しかもエストラジオールおよび５α−アンドロスタ ン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げることによりエストラジオールおよび ５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの両方のＳＨＢＧ媒介効果に拮 抗する化合物の治療上有効な量を投与することにより、良性前立腺過形成（ＢＰ Ｈ）および前立腺癌を処置および予防する方法に関する。本発明は更に、ＳＨＢ Ｇに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β− ジオールの結合を妨げる化合物を見出す方法に関する。本発明の詳細な記載 構造式Ｉ の５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール（３α−ジオール）は、ジヒ ドロテストステロンの３α還元および／またはアンドロステロンの１７β還元に より形成される。それは、固有のホルモン活性を有するとは考えられない。それ は皮膚においてＤＨＴの豊富な代謝産物である故、そのグルクロニドの血漿濃度 は、多毛女性における皮膚アンドロゲン活性のマーカーとして提案されてきたけ れども、これに関してその有用性は確かでない。同様に、前立腺３α−ジオール は単にＤＨＴの性向を反映すると考えられ、しかしてＤＨＴは結局血漿３α−ジ オールグルクロニドになる。３α−ジオールは、イヌにおいてその投与がＢＰＨ に通じる故前立腺病に関連づけられてきた。３α−ジオールが与えられたイヌに おける前立腺ＤＨＴは自然 的ＢＰＨに見られるものに近い故並びにＤＨＴの投与もまたイヌにおいてＢＰＨ をもたらす故、３α−ジオールがＢＰＨの発生に参与する機序はそのＤＨＴへの 酸化を伴うと予想されるが、しかし立証されていない。 本発明の背景において論じられたように、最近の数年中に、ステロイドホルモ ンは、それらに加えてそれらの古典的細胞内レセプターを伴う機序を通じて効果 を奏する、という仮説を支持する証拠が蓄積されてきた。一つのかかる機序は、 多数の細胞がそれらの原形質膜上に血漿蛋白質即ちＳＨＢＧについてのレセプタ ーを有するという観察に基づいている。また、ＳＨＢＧ−［性ホルモン結合性グ ロブリンレセプター］(ＲＳＨＢＧ)複合体がステロイド活性化シグナル形質導入 経路に関与して、該経路は結局細胞内ｃＡＭＰの急速な発生になる、という証拠 も上記に論じられている。ＢＰＨの患者の前立腺において、エストラジオールは ＳＨＢＧ−ＲＳＨＢＧ複合体を活性化しそしてＤＨＴはこの活性化に競合的に拮 抗する。エストラジオールに加えて、１種の他のステロイド即ち３α−ジオール のみが、この系においてアゴニストとして働く。更に、この系は、イヌの前立腺 において存在しそして同じ２種のステロイドにより活 性化される。 本実験は、ＤＨＴの不活性代謝産物であるとこれまで考えられていた３α−ジ オールがホルモンであることを実証する。それは、ＳＨＢＧ−ＲＳＨＢＧ系にお いてアゴニストである。１／２の最大応答を引き起こす濃度は、男性の血漿中の その濃度にほぼ等しい。更に、３α−ジオールおよびエストラジオールのみがこ の系においてアゴニストであり、そして両方のステロイド共イヌにおいてＢＰＨ を誘発する。高親和性でもってＳＨＢＧに結合するすべての他の内因性ステロイ ドは、かかる２種のアゴニストの効果に拮抗する。逆に、ＳＨＢＧに結合しない 構造的に関連したステロイド例えば３α−および３β，５β−アンドロスタンジ オールは、アゴニストでもアンタゴニストでもない。 エストラジオールで引き起こされるｃＡＭＰの上昇は、エストロゲンレセプタ ーにより媒介されない。ＢＰＨ組織において、ＤＨＴはアゴニストでなく、エス トラジオールの効果に拮抗する。ＤＨＴはまた、３α−ジオールの効果に拮抗す る。同じことが、テストステロンに当てはまる。かくして、細胞内アンドロゲン レセプターを経て効果を奏するかかる２種の古典的内因 性アンドロゲンは、ＳＨＢＧ−ＲＳＨＢＧ複合体におけるアンタゴニストとして 働く。ＳＨＢＧに結合するすべての内因性ステロイドは、アゴニストまたはアン タゴニストのいずれかとして活性である。 ヒトの前立腺はエストロゲンレセプターを含有するけれども、ヒトのＢＰＨに おけるエストロゲンの役割は不明である。しかしながら、エストラジオールがイ ヌのＢＰＨの発生において３α−ジオールと相乗作用を示すことは確かである。 これらがＲＳＨＢＧを活性化するただ２種のステロイドであることも、同様に確 かである。３α−ジオールがイヌのＢＰＨを引き起こす機序はＤＨＴへのその前 立腺内転化によるものであった、ということが以前に主張されていた。しかしな がら、我々は、３α−ジオールは前立腺の成長の直接的エフェクターとして機能 し得ることを示す。 本発明は、ＢＰＨおよび前立腺癌を処置および／または予防する方法であって 、かかる処置の必要な患者に、ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５ α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物の治療上有 効な量を投与することからなる上記方法を包含する。この方法の一つの具 体的態様において、ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンド ロスタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物は、０．００１〜２０ ０．０ｍｇ／日の間の投薬量にて投与される。この具体的態様の一つのクラスに おいてＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３ α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物は０．０１〜５０．０ｍｇ／日の投 薬量にて投与され、そしてこの具体的態様のサブクラスにおいてＳＨＢＧに結合 しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール の結合を妨げる化合物は約０．１〜５．０ｍｇ／日の投薬量にて投与される。Ｓ ＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７ β−ジオールの結合を妨げる化合物は、例７に記載されている検定を用いて決定 され得る。 本発明の第２の具体的態様において、良性前立腺過形成および前立腺癌を処置 および予防する方法は、かかる処置の必要な患者に、ＳＨＢＧに結合しかつエス トラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨 げる化合物であってしかもテストステロン、５β−アンドロスタン−３α，１７ β−ジオール、５α−アンドロスタン−３β，１７β −ジオール、５β−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール、２−メトキシ− エストラジオールおよびΔ5−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール（アン ドロスト−５−エン−３α，１７β−ジオールとも呼ばれる。）から選択された 該化合物を投与することからなる。 本発明において用いられ得る好ましい化合物は、次のもの即ち５α−アンドロ スタン−３β，１７β−ジオール、２−メトキシ−エストラジオールおよびΔ5 −アンドロスタン−３α，１７β−ジオール（アンドロスト−５−エン−３α， １７β−ジオールとも呼ばれる。）を含む。 本発明は、０．００１〜２００．０ｍｇ／日の間、一層特に約０．０１〜５０ ．０ｍｇ／日、最も特に０．１〜５．０ｍｇ／日の投薬量にて、ＳＨＢＧに結合 しかつエストラジオールおよび３α−ジオールの結合を妨げる化合物の全身的、 経口的、非経口的または局所的投与により、ＢＰＨおよび前立腺癌を含めて前立 腺の病気を処置および予防する方法を提供するという目的を有する。用語“ＢＰ Ｈを処置する”は、ＢＰＨの閉塞的症状を軽減すること並びに前立腺の成長を緩 慢にするおよび／または逆転することを含むよう意図されている。用語“ＢＰＨ を予防する”は、閉塞的症状の発現を防止することおよび前立腺の肥大を防止す ることを含むよう意図されている。用語“前立腺癌を処置するは、前立腺癌の成 長を緩慢にするおよび／または停止させることを含むよう意図されている。用語 “前立腺癌を予防する”は、前立腺癌を発現しそうな患者において前立腺癌の発 現を防止することを含むよう意図されている。また、ＳＨＢＧに結合しかつエス トラジオールおよび３α−ジオールの結合を妨げる化合物は、フィナステリドま たはエプリステリドのような５α−レダクターゼ２阻害剤、ＷＯ９３／２３４２ ０およびＷＯ９５／１１２５４に開示されているような４，７β−ジメチル−４ −アザ−５α−コレスタン−３−オン、３−オキソ−４−アザ−４，７β−ジメ チル−１６β−（４−クロロフェノキシ）−５α−アンドロスタンおよび３−オ キソ−４−アザ−４，７β−ジメチル−１６β−（フェノキシ）−５α−アンド ロスタンのような５α−レダクターゼ１阻害剤、ＷＯ９５／０７９２７に開示さ れているような３−オキソ−４−アザ−１７β−（２，５−トリフルオロメチル フェニル−カルバモイル）−５α−アンドロスタンのような５α−レダクターゼ １および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤(dual inhibitor)、 フルタミドおよびカソデックスのような非ステロイド系抗アンドロゲン並びにプ ラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、タムスロシンおよびアルフゾシンのよう なアルファ−１遮断剤と共に共投与され得る。 本発明はまた、本発明の新規な処置方法において用いるための適当な全身用、 経口用、非経口用および局所用製薬処方物を提供するという目的を有する。ＳＨ ＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β −ジオールの結合を妨げる化合物を活性成分として含有する組成物は、全身投与 用の慣用の賦形剤中の種々様々な治療的投薬量形態にて投与され得る。例えば、 該化合物は、タブレット、カプセル（各々、時限放出性処方物および持続放出性 処方物を含む。）、丸剤、粉末、顆粒、エリキシル剤、チンキ剤、溶液、懸濁液 、シロップおよび乳濁液のような経口投薬形態にて投与され得る。同様に、それ らはまた、静脈内用（ボーラスおよび注入の両方）、腹腔内用、皮下用、吸蔵で もってのもしくは吸蔵なしでの局所用または筋肉内用の形態にて投与され得、し かしてこれらはすべて、製薬技術の当業者に周知の形態が用いられる。例えば経 口投与について、該組成物は、処置されるべき患者への投薬の 調節のために０．０１、０．０５、０．１、０．２、１．０、２．０、５．０、 １０．０、５０．０および１００．０ミリグラムの活性成分を含有する刻み目付 きのまたは刻み目なしのタブレットの形態にて提供され得る。 ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび３α−ジオールの結合を妨げる 化合物は、局所投与用に適合された製薬上許容され得る担体と共にかかる活性化 合物を含んでなる製薬組成物にて投与され得る。局所用製薬組成物は、例えば、 皮膚への施用用に適合された溶液、クリーム、軟膏、ゲル、ローション、シャン プーまたはエアゾールの処方物の形態にあり得る。本発明の処置方法において有 用な局所用製薬組成物は、約０．００１％ないし０．１％の活性化合物を製薬土 許容され得る担体と混合して含み得る。 有利には、本発明の化合物は単一日用量にて投与され得、あるいは総日用投薬 が１日２回、３回または４回の分割投与量にて投与され得る。本発明についての 化合物は、適当な鼻内用賦形剤の局所使用によりまたは当業者に周知の経皮用皮 膚パッチの鼻内用形態を用いる経皮的経路により、鼻内用形態にて投与され得る 。経皮的送出系の形態にて投与されるために、その投 薬の投与は、無論、投薬計画全体を通じて間欠的よりむしろ連続的であろう。 本発明の化合物を利用する投薬計画は、患者のタイプ、種、年齢、体重、性別 および医学的状態，処置されるべき症状の重症度，投与の経路，患者の腎臓およ び肝臓の機能，並びに用いられるその特定の化合物を含めて種々の因子に従って 選択される。通常の技能を有する医師は、症状の進行を防止し、対抗し、停止し または逆転するために必要とされる薬物の有効量を容易に決定および処方し得る 。毒性を伴わないで効力を奏する範囲内の薬物の濃度を達成する際の最適な精度 は、標的部位への薬物の利用能の動力学に基づく投薬計画を必要とする。これは 、薬物の分配、平衡および排泄の考慮を含む。 本発明の方法において、ここにおいて詳細に記載されたＳＨＢＧに結合しかつ エストラジオールおよび３α−ジオールの結合を妨げる化合物は活性成分を形成 し得、そして典型的には、投与の意図形態即ち経口用のタブレット、カプセル、 エリキシル剤、シロップ等に関して適当に選択された適当な製薬用の希釈剤、賦 形剤または担体（ここにおいて一まとめにして“担体”物質と称される。）と混 合してかつ慣用の製薬的粒子と一致し て投与される。 例えば、タブレットまたはカプセルの形態での経口投与について、活性薬物成 分は、エタノール、グリセロール、水等のような経口用の無毒の製薬上許容され 得る不活性担体と一緒にされ得る。本発明の製品を含有するカプセルは、本発明 の活性化合物をラクトースおよびステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カル シウム、デンプン、タルクまたは他の担体と混合しそしてこの混合物をゼラチン カプセル中に入れることにより製造され得る。タブレットは、活性成分をリン酸 カルシウム、ラクトース、トウモロコシデンプンまたはステアリン酸マグネシウ ムのような慣用のタブレット化成分と混合することにより製造され得る。更に、 所望または必要であるとき、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤もまた 、該混合物中に混入され得る。適当な結合剤は、デンプン、ゼラチン、グルコー スまたはベータ−ラクトースのような天然糖、トウモロコシ甘味料、アラビア、 トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムのような天然および合成ガム、カルボ キシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ロウ等を含む。これらの投薬 形態にて用いられる滑沢剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム 、 ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリ ウム等を含む。崩壊剤は、制限なしでデンプン、メチルセルロース、寒天、ベン トナイト、キサンタンガム等を含む。 液体形態は、合成および天然ガム例えばトラガカント、アラビア、メチルセル ロース等のような、適当に香味づけられた懸濁または分散剤中にて投与され得る 。用いられ得る他の分散剤は、グリセリン等を含む。非経口投与について、無菌 の懸濁液および溶液が所望される。適当な保存剤を一般的に含有する等張性製剤 は、静脈内投与が所望されるとき用いられる。 活性薬物成分を含有する局所用製剤は、例えばクリームまたはゲル処方物にお いてアルコール溶液、局所用クレンザー、クレンジングクリーム、スキンゲル、 スキンローションおよびシャンプーを形成させるために、例えばアルコール、ア ロエ・ベラゲル、アラントイン、グリセリン、ビタミンＡおよびＥの油、鉱油、 ＰＰＧ２、ミリスチルプロピオネート等のような当該技術において周知の種々の 担体物質と混合され得る。例えばＥＰ０，２８５，３８２参照。 本発明の化合物はまた、小単層ラメラ小胞、大単層ラメラ小 胞および複層ラメラ小胞のようなリポソーム送出系の形態にて投与され得る。リ ポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンの ような種々のリン脂質から形成され得る。 本発明の化合物はまた、該化合物の分子がカップリングされる個々の担体とし てのモノクロナール抗体の使用により送出され得る。本発明の化合物はまた、標 的設定可能な薬物用担体としての可溶性ポリマーとカップリングされ得る。かか るポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロ ピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェ ノールまたはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリシンを 含み得る。更に、本発明の化合物は、薬物の制御的放出を達成する際に有用な生 分解性ポリマーのクラス例えばポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリ ヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、 ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポ リマーにカップリングされ得る。 本発明はまた、ＳＨＢＧに結合する化合物であってしかもエ ストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールの結合を 妨げることによりエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β −ジオールの両方のＳＨＢＧ媒介効果に拮抗する該化合物の、前立腺の病気の処 置において有用な薬の製造における使用を提供する。 本発明はまた、ＢＰＨおよび前立腺癌の処置および予防のために有用な化合物 を同定する方法であって、 （ａ）試験されるべき化合物の試料を標識ジヒドロテストステロン、標識エスト ラジオールおよび標識テストステロンから選択された標識ステロイドを含有する 希釈された妊婦血清、イヌＳＨＢＧまたはヒトＳＨＢＧ中の選定濃度にてインキ ュベートし、 （ｂ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量の定量化を可能にするためにＳＨＢ Ｇに結合されたステロイドを結合されていないステロイドから分離し、 （ｃ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量を決定し、そして （ｄ）該化合物のＩＣ５０を決定する ことからなる上記方法に関する。標識ステロイドは、放射性に標識、蛍光的に標 識、化学発光的に標識または別のやり方で標 識され得る。好ましくは標識ステロイドは、放射性に標識される。最も好ましく は標識ステロイドはトリチウム化ジヒドロテストステロンであり、そして標識の 量は上澄み液中に存在する放射能の量を測定することにより測定される。工程( ａ)〜(ｃ)を各回化合物の異なる濃度にて少なくとも５回繰り返すことが好まし い。好ましくは、妊婦血清、イヌＳＨＢＧまたはヒトＳＨＢＧは、ＮａＣｌ中０ ．１５ＭにされたｐＨ７．０のリン酸ナトリウム緩衝剤中に１：２０にて希釈さ れ、そしてこの希釈溶液の０．５ｍＬが試験管中に分取されそして０．１ｎＭト リチウム化ＤＨＴと共にインキュベートされる。イヌまたはヒトＳＨＢＧを用い るとき、精製されたイヌまたはヒトＳＨＢＧで開始することが望ましい。試験さ れるべき化合物の濃度は０．００１〜１００ｎＭの範囲内にあること、並びにイ ンキュベーションが室温にて約１５分間そして次いで氷浴中で更に１５分間行わ れることが好ましい。好ましくは、蛋白質は、０．５ｍＬの飽和硫酸アンモニウ ム溶液の添加により沈殿される。最も好ましくは、硫酸アンモニウムの添加後、 希釈されたインキュベートされた混合物は、塩の局部的に高い濃度を回避するた めに好ましくは渦式混合機にて、振とうされる。好ましくは、蛋 白質を更に沈殿させるために、該管は最も好ましくは８０００ｒｐｍにて１０分 間遠心分離される。次いで、上澄み液の測定される試料が好ましくは０．５ｍＬ 取り出され、そして標識の量が測定される。 好ましくは、化合物のＩＣ５０は、放射性ＤＨＴの量を該化合物の濃度の対数 の関数としてプロットすることにより決定される。管に添加された総放射能から 上澄み液の放射能を引くことにより放射性ＤＨＴの量を決定することが好ましい 。 好ましくは、ＩＣ５０＜１０ｎＭを有する化合物は、該化合物がエストラジオ ールおよび３α−ジオールのアゴニストまたはアンタゴニストであるかどうかを 決定するために、ヒトＢＰＨ組織ｃＡＭＰ検定にて再検定される。一般に、この 検定は、次の工程即ち （ａ）十分な量の未リガンド結合ＳＨＢＧを培養における前立腺組織のミンチ（ 細かく刻んだもの）に添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させ、 （ｂ）過剰のＳＨＢＧを好ましくは洗浄により除去し、 （ｃ）既知濃度の試験されるべき化合物を添加し、そして （ｄ）細胞内ｃＡＭＰを決定する ことからなる。 化合物がアゴニストでない（細胞内ｃＡＭＰの増加を引き起こさない）場合、 次の工程が、該化合物のアンタゴニスト活性を確認するために遂行され得る。即 ち、 （ｅ）十分な量の未リガンド結合ＳＨＢＧを培養における前立腺組織のミンチに 添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させ、 （ｆ）過剰のＳＨＢＧを好ましくは洗浄により除去し、 （ｇ）エストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール から選択された化合物を添加し、 （ｈ）既知濃度の試験されるべき化合物を添加し、そして （ｉ）細胞内ｃＡＭＰを決定する。 ＩＣ５０＜１０ｎＭを有しかつヒトＢＰＨ組織ｃＡＭＰ検定においてアンタゴ ニストであると分かった興味ある化合物は、ＢＰＨの症状の処置についてＢＰＨ のイヌモデルにおいておよび引き続いてヒトにおいて試験され得る。ＢＰＨのイ ヌモデルにおいて、去勢されたイヌが、試験化合物の存在および不存在下でエス トラジオールおよび５α−アンドロスタンジオールで処置される。前立腺の成長 が、好ましくはＭＲＩによりモニタ ーされる。ＢＰＨを有する老いたイヌもまた、それらの肥大化前立腺が試験化合 物に応答して収縮するかどうかを決定するために試験化合物で処置され得る。や はり、前立腺の大きさが、好ましくはＭＲＩによりモニターされる。 ここにおいて記載されたＢＰＨおよび前立腺癌を含めて前立腺の病気を処置お よび予防する方法は、次の例により更に例示され得る。 一般的方法 一般的方法１ ＳＨＢＧ 「ロスナー等，“ヒト血漿からのテストステロン−エストラジオール結合性グ ロブリンの単離および特性付け：新規なアフィニティーカラムの使用”，バイオ ケミストリー（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），１４：４８１３〜２０（１９８５ ）」に記載されているような我々のオリジナル方法の改変（「カン等，“テスト ステロン−エストラジオール結合性グロブリンのサイズ異性体が個々の男性およ び女性の血漿中に存在する”，ステロイズ(Ｓｔｅｒｏｉｄｓ)，４５：４６３〜 ７２(１９８５)」）により、１モルＤＨＴ／モルＳＨＢＧを含有するＳＨＢＧを 、 妊婦血漿から単離した。その純度は、ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧ Ｅ）、ナトリウムドデシルサルフェートＰＡＧＥ（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）および抗 全ヒト抗血清に対する免疫電気泳動により確認された。これらの方法のすべてに よる調査により、汚染物の不存在が明らかにされた。それは５０ｍＭのトリス− ＨＣｌ、５０ｍＭのＣａＣｌ2（ｐＨ７．４）および１０％グリセロール（トリ ス−Ｃａ緩衝剤）中で−２０Ｃにて貯蔵され、そして単離の６月内に用いられた 。Ｉ ステロイドを、デキストラ被覆木炭（２．５％，ｗｔ／ｖｏｌ）と共にＳＨＢ Ｇからストリッピングさせた。予備実験において、このストリッピングの処理操 作の完全性は、１０6ｃｐｍ［3Ｈ］ＤＨＴで平衡化されていた８μＭのＳＨＢＧ −ＤＨＴの溶液をストリッピングすることにより保証された。ＳＨＢＧの回収は ８５％であった。 次の処理操作を、ＤＨＴをＳＨＢＧ−ＤＨＴの溶液中で別のステロイドで置き 換えるために用いた。トリス−Ｃａ緩衝剤中のＳＨＢＧ−ＤＨＴ（１．１μＭ） ５ミリリットルを、ＹＭ−１０膜を備えたアミコン（ＡＭＩＣＯＮ）限外濾過セ ル（型式５２）中に入れ、そして５倍モル過剰の交換されるべきステロ イドと共に室温にて穏やかに撹拌した。３０分後温度を４℃に下げ、そしてイン キュベーションを更に３０分間続行した。その時点にて４０ｍＬの氷冷トリス− Ｃａ緩衝剤を添加し、そして５分後この溶液を当初の容量（５ｍＬ）まで濃縮し た。４０ｍＬの氷冷緩衝剤の添加および濃縮を３回繰り返し、そしてその後溶液 を室温に温めそして新鮮な５倍モル過剰の置き換え用ステロイドを再び添加した 。全体の処理操作を、数回繰り返した。この交換を、適宜［3Ｈ］テストステロ ンまたは［3Ｈ］エストラジオールについてモニターした。ＳＨＢＧに結合され た放射能に基づいて、交換は、テストステロンについて３回の交換後にそしてエ ストラジオールについて４回の交換後に９０％より大の完全度であった。２−［3 Ｈ］メトキシエストラジオールは、商業的に入手できない。それはエストラジ オールまたはテストステロンのいずれかよりもしっかりとＳＨＢＧに結合するの で、４回の交換は適切であると仮定した。実験結果に影響を及ぼし得るＳＨＢＧ への損傷についての対照として、ＤＨＴそれ自体を４回の交換に通した。 イヌＳＨＢＧ（ｃＳＨＢＧ）を「スズキ等，“イヌ血清のテストステロン結合 性グロブリンの精製および特性付け”，ジェ イ・バイオケム（Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．），８５：１１９５〜１２２０３（１９ ７９）」に記載されているようにして単離し、そしてその純度をヒトＳＨＢＧ（ ｈＳＨＢＧ）についてのように確認した。それもまた、使用前にステロイドがス トリッピングされた。 一般的方法２ 前立腺組織外植片 ヒト前立腺組織を、ＢＰＨについての手術時に得た。イヌ前立腺組織を、２〜 ３年齢の純血種のビーグル犬の犠牲（非経口的フェノバルビタール）時に開手術 により得た。かかる組織をおおよそ５ｍｍ3の立方体に分け、そして６０ｍｍプ リマリア（Ｐｒｉｍａｒｉａ）培養皿（ベクトン・ディキンソン・ラブウエア社 ）中において、１００単位／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプト マイシン硫酸塩および０．２５μｇ／ｍＬのアンホテリシンを含有する５％胎児 ウシ血清を有するＲＰＭＩ−１６４０（ニューヨーク州グランドアイランドのギ ブコ・ラボラトリーズ社）中に２〜３日置いた。それを細かく刻んで１ｍｍ3部 分にし、そして実験を始める前に約１８時間血清不含培地（０．５ｍＬのＲＰＭ Ｉ−１６４０）中の１６ｍ ｍウェルに移した。添加例えばＳＨＢＧ、ステロイド、対照の添加は、血清不含 ＲＰＭＩ−１６４０中でなされた。 一般的方法３ 膜に結合されたアデニル酸シクラーゼ活性および細胞内ｃＡＭＰの蓄積を、「 ナクラ等，“ヒトコルチコステロイド結合性グロブリンによる乳癌細胞系におけ るアデニル酸シクラーゼの導入”，バイオケム・バイオフィス・レス・コミュー ン（Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ．），１５３：１ ０１２〜８（１９８８）」において先に記載されているようにして決定する。 蛋白質を、「ブラッドフォード，“蛋白質−染料結合の原理を利用する蛋白質 のマイクログラム量の定量化のための迅速かつ鋭敏な方法”，アナル・バイオケ ム（Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．），７２：２４８〜５３（１９７６）」の方法 により測定した。 一般的方法４ ＬＮＣａＰ細胞 ＬＮＣａＰ細胞（ヒト前立腺癌細胞系，継代数９）を、アメリカン・タイプ・ カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａ ｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（メリーランド州ロッ クビル）から得た。コーニング(Ｃｏｒｎｉｎｇ)培養フラスコ(ニューヨーク州 コーニングのコーニング・ラボラトリー・サイエンス・カンパニー社)中におい て、Ｌ−グルタミン（３００ｍｇ／Ｌ）、１０％胎児ウシ血清（ニューヨーク州 グランドアイランドのギブコ社）および抗体（１００Ｕ／ｍＬのペニシリンＧ・ ＮＡａ、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン硫酸塩および０．２５μｇ／ｍ ＬのアンホテリシンＢ）が補足されたＲＰＭＩ−１６４０培地中で細胞を単層に て成長させた。 例１ ｃＡＭＰの蓄積に対する種々のＳＨＢＧ− ステロイド組合わせの効果 ＬＮＣａＰ細胞を、ダルベッコ改良イーグル血清不含培地中に置いた。細胞（ １ｍｇ蛋白質／ｍＬ）を、１μＭのＳＨＢＧ−ステロイドまたは緩衝剤（対照） およびホスホジエステラーゼ阻害剤イソブチルメチルキサニチン（０．１ｍＭ） と共に３７℃にて１４分間インキュベートした。それらを次いで、先に記載され ているようなｃＡＭＰの測定のために、遠心分離しそ してトリクロロ酢酸で抽出した。結果 ４種の異なるＳＨＢＧ−ステロイド複合体を、単一ＳＨＢＧ−ステロイド濃度 （１μＭ）にて評価した。ＳＨＢＧ−ステロイド複合体への細胞の暴露は、１５ 分間行われた。遊離ステロイドおよび未リガンド結合ＳＨＢＧの両方共が、１μ ＭのＳＨＢＧ−ステロイドの平衡混合物中に存在する。ＳＨＢＧ−ＤＨＴ、ＳＨ ＢＧ−テストステロンおよびＳＨＢＧ−エストラジオールについての遊離ＳＨＢ Ｇおよび遊離ステロイドの算出濃度は、それぞれ３１、５２および６５ｎＭであ った（この算出において用いられた会合定数は、１．０×１０9Ｍ−１（ＤＨＴ ）、３．５×１０8Ｍ-1（テストステロン）および２．２×１０8Ｍ-1（エストラ ジオール）であった。）。ＳＨＢＧからのＤＨＴの解離についてのｔ1/2は１． ７分で、そしてテストステロンおよびエストラジオールについてのそれらは実質 的にそれより小さかった。かくして、各種ステロイドがＳＨＢＧの２つのプール （遊離のものおよびレセプターに結合されたもの）の間で平衡化するのに並びに ステロイドがレセプター結合ＳＨＢＧを活性化しそしてアデニル酸シクラーゼ系 を始動させるのに十 分な時間があった。 最初に単離されたＳＨＢＧ−ＤＨＴ複合体においてＤＨＴに対して他のステロ イドを置換する間のＳＨＢＧへの損傷についての対照として、ＳＨＢＧ−ＤＨＴ 複合体が、交換用ステロイドとしてＤＨＴを用いて交換処理操作に４回付された 。この処理操作は、交換なしで用いられたＳＨＢＧ−ＤＨＴの活性と比較して１ ４％の活性の減少をもたらした。しかしながら、交換されたＳＨＢＧは、他のＳ ＨＢＧ−ステロイド複合体のいずれよりもｃＡＭＰの増加を引き起こす際に依然 有意的に一層活性であった。 しかしながら、この実験の最も顕著な部分は、ＳＨＢＧ−２−メトキシエスト ラジオールと緩衝剤対照の間の統計的に有意的な差の欠如であった。このステロ イド代謝産物はテストステロンまたはエストラジオールのいずれかよりもＳＨＢ Ｇにしっかりと結合するが、しかしステロイドホルモンとしての活性を有さない ものである。ＤＨＴは、ＳＨＢＧの不存在下で緩衝剤対照とは異ならなかった。 例２ 未リガンド結合ＳＨＢＧが既に結合している細胞に ステロイドを添加することのｃＡＭＰに対する効果 アデニル酸シクラーゼ活性の刺激およびｃＡＭＰが順次に未リガンド結合ＳＨ ＢＧのそのレセプターへの結合、ステロイドのＳＨＢＧ−レセプター複合体への 結合、アデニル酸シクラーゼの活性化および最後にｃＡＭＰの形成にて進行する という仮説を試験するために、未リガンド結合ＳＨＢＧが既に結合されているＬ ＮＣａＰ細胞にステロイドを添加することのｃＡＭＰに対する効果を試験した。 細胞（０．６〜１．６ｍｇ蛋白質／ｍＬ）を血清不含培地（例１参照）中に置き 、そして次いで５０ｎＭの未リガンド結合ＳＨＢＧと共に３７℃にて１時間イン キュベートした。これらの細胞を血清不含培地で１回洗浄し、そして次いで種々 の濃度のステロイドおよびイソブチルメチルキサンチンを含有する血清不含培地 中で１５分間インキュベートした。５０ｎＭの未リガンド結合ＳＨＢＧを添加し た後のｃＡＭＰの増加パーセントは、緩衝剤の添加と比較して７．８％±３．８ ％であった。レセプターが未リガンド結合ＳＨＢＧにより占有されたＬＮＣａＰ 細胞は、ＤＨＴまたはエストラジオ ールの添加に続いてそれらのｃＡＭＰ含有率の用量依存性増大を示したが、未占 有レセプターを有するものはそうではなかった。５０ｎＭより大のＤＨＴの濃度 において、かかる応答は減退した。例１におけるＳＨＢＧ−２−メトキシエスト ラジオール複合体の添加の場合と同様に、レセプターが未リガンド結合ＳＨＢＧ により占有されている細胞への２−メトキシエストラジオールの添加は、ｃＡＭ Ｐの蓄積に対する効果を有していなかった。比較により、エストラジオールへの 応答は究極的にＤＨＴへの応答と同じくらい大きい程度を達成するが、しかしこ れを達成するのに約２０倍大きい最終濃度（１μＭ）を必要とする。 例３ 全体的な実験計画は、培養における前立腺組織のミンチに十分な未リガンド結 合ＳＨＢＧを添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させることであった。 過剰のＳＨＢＧを除去するために洗浄した後、適切な濃度のＤＨＴまたはエスト ラジオールを添加し、そして１５分後実験を終了しそして細胞内ｃＡＭＰを決定 した。ＳＨＢＧの不存在下では、ＤＨＴもエストラジオールのいずれもｃＡＭＰ の変化に影響を及ぼさなかった。ス テロイドを有さないＳＨＢＧは、緩衝剤と比較してｃＡＭＰのわずかな増加を引 き起こした（４８％，ｐ，０．０３，ｎ＝２０）。対照的に、レセプターに結合 されたＳＨＢＧの存在下では、エストラジオールは、ｃＡＭＰの活発な用量依存 性の増加を引き起こした。驚くべきことに、エストラジオールの４．５倍大きい 親和性でもってＳＨＢＧに結合するＤＨＴは、前立腺組織においてＳＨＢＧ−レ セプターアデニル酸シクラーゼ系を活性化しなかった。 例４ 正常なイヌおよびＢＰＨを有する患者からの前立腺外植片を、血清含有培地中 で３日間、１日２回培地を変えて培養した。実験を開始する前に、それらを血清 不含培地中に２４時間置いた。かかる適切な外植片に高度に精製されたイヌまた はヒトＳＨＢＧを３時間添加し、そしてレセプターに結合されていないＳＨＢＧ を２回の洗浄でもって除去した。種々の濃度の適切なステロイドを添加し、そし て細胞内ｃＡＭＰを１５分後検定した。 いかなる場合にも、ＳＨＢＧの不存在下でのいずれのステロイドもまたはステ ロイドの不存在下でのＳＨＢＧもｃＡＭＰに影響を及ぼさなかった。イヌにおい て、エストラジオールおよ び５α−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール（３α−ジオール）は両方共 、ｃＡＭＰの増加を引き起こした。１００ｎＭにおいて、両者は、ブランクと比 較して約６５倍の増加をもたらした。各々について、半最大応答は幾分活発性が 劣ったが、しかし一層感受性であった。ヒトにおいて、３α−ジオールへの応答 は、１０ｎＭにて最大（１１倍）でありそして０．４ｎＭにて半最大であった。 １００ｎＭのエストラジオールへの応答は、１０ｎＭの３α−ジオールにおおよ そ等しかった。テストステロン、ＤＨＴ、５α−アンドロスタン−３β，１７β −ジオール、５β−アンドロスタン−３α，１７β−ジオールおよび５β−アン ドロスタン−３β，１７β−ジオール並びにΔ５−アンドロスタン−３β，１７ β−ジオールは、効果なしであった。 テストステロンがプロホルモンとして機能する器官において、アンドロゲンレ セプターを活性化するステロイドは、テストステロンの５αが還元された代謝産 物であるＤＨＴである。ＤＨＴは、可逆的様式にて３α−および３β，５α−ア ンドロスタンジオールに更に代謝される。３α−ジオールは、イヌにおいてＢＰ Ｈを生じさせることおよびこの効果においてエストラジ オールと相乗作用を示すことが知られている。この例におけるデータはイヌおよ びヒトの前立腺において３α−ジオールの直接的効果を示しており、また生体内 における３α−ジオールの先に観察された効果がＤＨＴへの転化なして媒介され 得る可能性を上げている。 例５ 実験計画： 全体的な実験計画は、培養における前立腺組織のミンチに十分な 未リガンド結合ＳＨＢＧ（５０ｎＭ）を添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを 飽和させることであった。過剰のＳＨＢＧを除去するために洗浄した後、適切な 濃度の指摘されたステロイドを特記された順序にて添加しそして最後の添加後２ ０分して実験を終了し、そして以前のように（「ナクラ等，“エストラジオール はヒトの前立腺においてｃＡＭＰの急速な蓄積を引き起こす”,プロク・ナトル ・アカド・サイ（Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ）（ＵＳＡ）９１：５ ４０２〜５４０５，１９９４」）商業的ＥＬＩＳＡ（ミシガン州オックスフォー ドのオックスフォード・バイオメド・リサーチ・インク社）によりｃＡＭＰを決定 した。すべての培養物は、イソブチル−メチルキサンチン（０．１ｍＭ）を含有 していた。 結果： レセプターがＳＨＢＧで飽和されていたヒトの前立腺のミンチに添加 されたエストラジオールおよび３α−ジオールは両方共、ｃＡＭＰの用量依存性 の活発な増加を引き起こした。ＳＨＢＧの不存在下で添加された同じステロイド は、効果なしであった。下記の表は、前立腺のミンチにおいてｃＡＭＰに対する ＳＨＢＧを有するエストラジオールまたは３α−ジオールの効果を示す。ヒトに ついて、それらのデータは、各々三重反復にて３人の患者から得られた組織につ いて行われた実験の平均±ＳＥＭである。イヌについて、それらのデータは、２ 頭のイヌの一方から得られた組織からの三重反復実験の平均±ＳＥＭである。 ヒトにおいて、半最大応答は、１．２ｎＭの３α−ジオールおよび５．０ｎＭ のエストラジオールにおいて起こった。同様 な結果が、イヌの前立腺およびｃＳＨＢＧを用いて得られた。しかしながら、イ ヌにおいて最大応答は一層大きく、即ちヒトの前立腺において見られた１１倍ど ころか約６０倍であった。更に、イヌの前立腺において、エストラジオールおよ び３α−ジオールは等効力であった。 例６ ＲＳＨＢＧについてのステロイドのアゴニスト およびアンタゴニスト活性 我々は、ＲＳＨＢＧを刺激するかまたは３α−ジオールにより引き起こされる 刺激を阻害するかのいずれかの能力について、エストラジオールおよび３α−ジ オールに加えて種々のステロイドを調査した。該ステロイドは、それらがＳＨＢ Ｇにしっかりと結合することが知られている（テストステロン、ＤＨＴ、２−メ トキシエストラジオール、Δ５−アンドロステン−３β，１７β−ジオール、５ α−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール）故またはそれらが３α−ジオー ルに構造的に関連しているがしかしＳＨＢＧに結合しない（５β−アンドロスタ ンジオールの２種の異性体）故選ばれた。これらのステロイドのいずれも、この 系においてアゴニストでなかった。実験は三重反 復にて２回なされ、そして第２表に示されているように商即ち実験／対照±ＳＥ Ｍとして与えられる。アゴニスト活性について、ステロイド（１０ｎＭ）または 賦形剤（対照）が、レセプターがＳＨＢＧで飽和されていた前立腺のミンチにお いてｃＡＭＰを発生させるそれらの能力について調査された。アゴニスト活性実 験における対照は未リガンド結合ＳＨＢＧ＋賦形剤であったことが留意される。 アンタゴニスト活性について、前立腺のミンチ中のＲＳＨＢＧはｈＳＨＢＧで飽 和され、賦形剤またはステロイド（５０ｎＭ）と共に１５分間インキュベートさ れ、そして次いで１０ｎＭの３α−ジオールに２０分間暴露された。この実験に おける対照はＳＨＢＧ＋賦形剤＋３α−ジオールであることが留意される。試験 されたステロイドは、２−メトキシ−エストラジオール（２ＭｅＯＥ2）、Δ5− アンドロスタン−３β，１７β−ジオール（Δ5）、５β−アンドロスタン−３ α，１７β−ジオール（３α，５β）、５β−アンドロスタン−３β，１７β− ジオール（３β，５β）、５α−アンドロスタン−３β，７β−ジオール（３β ，５α）である。 データが、第２表に要約されている。 ステロイドのいずれも、この系においてアゴニストでなかった。一方、ＳＨＢ Ｇに結合するステロイドのすべてが３α−ジオールの効果に拮抗したのに対し、 ２種の５β−アンドロスタンジオールは拮抗しなかった。 例７ ＢＰＨおよび前立腺癌の処置および予防のために有用なエストラジオールおよび アンドロスタンジオールのアンタゴニストの同定 ＳＨＢＧに結合する化合物は、アゴニストまたはアンタゴニストのいずれかで ある。適切に高い親和性でもって結合する化合物を選択するために、ＮａＣｌ中 ０．１５ＭにされたｐＨ７．０のリン酸ナトリウム緩衝剤中におおよそ１：２０ にて妊婦血 清を最初に希釈する。次いで、この希釈血清の０．５ｍＬが試験管中に分取され 、種々の濃度の結合性競合物質（０．００１〜１００ｎＭ）の不存在下でおよび 存在下で０．１ｎＭトリチウム化ジヒドロテストステロン（おおよそ４５〜１０ ０Ｃｉ／ミリモル）と共に室温にて１５分間インキュベートする。該管を次いで 氷浴に移し、そして更に１５分間インキュベートする。次いで０．５ｍＬの飽和 硫酸アンモニウム溶液を添加する一方、塩の局部的に高い濃度を回避するために 希釈血清を渦式混合機にて振とうする。該管を８０００ｒｐｍにて１０分間遠心 分離し、そして次いで上澄み液の０．５ｍＬを計数する。沈殿物中の放射性ＤＨ Ｔの量（引き算により決定される。）を競合物質分子の濃度の対数の関数として プロットし、そしてＩＣ５０を決定する。ＩＣ５０が低ければ低いほど、ＳＨＢ Ｇへのトリチウム化ＤＴＨ結合について競合物質は一層効力がある。ＩＣ５０＜ １０ｎＭでもって競合する化合物は、ヒトＢＰＨ組織ｃＡＭＰ検定（「ナクラ等 ，ジェイ・クリン・エンドクリン・アンド・メタブ（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃ ｒｉｎ．＆ Ｍｅｔａｂ．），７１（２）：４９８〜４０４（１９９０）」）に おいて該化合物がエストラジオールおよびアンドロスタンジオール のアゴニストまたはアンタゴニストであるかどうかを決定するために、純粋なヒ トＳＨＢＧを含有する培養におけるヒトＢＰＨ組織を用いて再検定される。アン タゴニストであると分かった化合物は、更に、ＢＰＨの症状の処置についてＢＰ Ｈのイヌモデルにおいてそして引き続いてヒトにおいて試験され得る。 以上の詳記は本発明の原理を例示の目的のために与えられた例と共に教示する が、本発明の実施は、次の請求の範囲およびその等価物内に入るような、ここに おいて記載された処理操作およびプロトコルの時宜的な変型、適合、改変、削除 または付加のすべてを包含する、ということが理解されよう。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION                         Treatment and prevention of prostate disease Background of the invention   Benign prostatic hyperplasia (BPH) and prostate cancer are the most common in older men Is in the midst of anxiety.   Benign prostatic hyperplasia is often known as transurethral resection of the prostate (TURP). It is surgically treated according to the procedure given. Others carried out to open urine closure Surgical procedures include incisions or stents. Castration also leads to regression of prostatic hypertrophy Brought. Drug treatment of BPH reduces the symptoms of closure by reducing the symptoms of the disease. Treat the condition, but affect the underlying cause of the disease, the enlarged prostate No alpha-1 blockers are included. Alternatives used in the treatment of BPH Representative alpha-1 blockers include prazosin, terazosin, doxazosin, tamsulo Includes syn and alfuzosin. These drugs relax prostate smooth muscle tone It lowers the pressure in the urethra without affecting the bladder pressure. These drugs are shared Common side effects are dizziness, headache and fatigue.   Pross trade name by Merck & Company, Inc. Finasteride marketed under PROSCAR® (17 β- (N-tert-butylcarbamoyl) -4-aza-5α-androst- 1-en-3-one) is a test product recently marketed for the treatment of benign prostatic hyperplasia. It is an inhibitor of heron-5α-reductase. Androgen activity in the prostate Is the main mediator of the prostate by the action of testosterone-5α-reductase. And locally formed 5α-dihydrotestosterone (“DHT”). Inhibitors of testosterone-5α-reductase have an effect on DHT in the prostate Inhibits testosterone (T) conversion and prevents symptoms of hyperandrogen stimulation Work to do or reduce. In particular, Merck published March 22, 1983 U.S. Pat. No. 4,377,584, assigned to Company & Company Inc. reference. The utility of finasteride in the treatment of prostate cancer is also described in the following document: EP 0,285,382, published October 5, 1988, October 5, 1988 EP 0,285,383, and Canadian Patent No. 1,302,277, And Canadian Patent 1,302,276.   Both prostate cancer and BPH are treated with antiandrogens Have been. Non-steroidal antiandrogens such as flutamide and Casodex Shows DH for the cytosolic androgen receptor site in prostate cells Compete with T. These non-steroidal antiandrogens release gonadotrophin. Sexual intercourse and libido are as substantial as the sex hormone agonists and progestogens. Not change. However, these non-steroidal antiandrogens are Often feminizes the male host (gynecomastia) or causes excessive testicular irritation It shows an undesirable tendency to activate the rubbing feedback effect.   Gona such as nafarelin, buserelin, goserelin and leuprorelin All dotrophin-releasing hormone (GnRH) agonists are located in the anterior pituitary gland. Release of luteinizing hormone (LH) by desensitizing GnRH receptor Reduce outflow. GnRH agonists reduce testosterone production and It is capable of inducing volume contraction and reducing the severity of urinary symptoms of BPH. Remaining Remember, these drugs have adverse effects, such as impotence and flushing, This deters most patients from continuing with the drug. these Androgen inhibitors are thus muscular in BPH treatment Significant, but of great importance in the treatment of patients with advanced prostate cancer is there.   Megestrol acetate, hydroxyprogesterone and medrgestone Progestogens such as block LH release and block the androgen receptor Blockade suppresses testosterone, causing a decrease in prostate volume . Adverse effects such as reduced libido and impotence are associated with progestogen BP It has prevented regular use in H treatment.   Thus, additional therapies for BPH and prostate cancer may not tolerate side effects. And / or individuals who do not experience adequate relief from currently available therapies is necessary.   Sex hormone binding globulin (SHBG) is found in human and dog serum. However, it is a binding protein that is not found in rats and has high affinity (3 (Kd at 7 ° C .: DHT1 = nM, T = 3 nM). Binds with hydrotestosterone and estradiol. Each of the sex steroids Seems to be competitive. Until the present invention, the functions of SHBG have been clearly defined. Not released and diffuse into target cells to interact with steroid receptors "The amount of steroids It was thought to play a role in regulating This function simply depends on the fact of And is dependent on the specific interaction of SHBG with cells It was not believed. In addition to binding steroids, SHBG As such, it binds to receptor sites on the plasma membrane.   SHBG appears to be a cell modulator, and thus its interaction with cells and Its ultimate effect on cells is controlled in two steps. Step 1: Unligand Only unligated SHBG binds to the receptor. Binding Blocking is only related to the occupancy of the steroid binding site, Not related to nature. Thus, the concept of free SHBG as an important biological entity Must be considered. About 40% of SHBG is unliganded in normal men Testosterone occupied for SHBG in binding and thus bound Account for 75% of the total ("Dun et al., Jay Clin Endocrinol Metab ( J. Clin. Endocrinol. Metab. ), 53: 69-75 (1 981))). In women, more than 80% of SHBG is unliganded . Single steroids occupy as much occupancy as in men No testosterone, dehydroepiandrosterone And Δ5-androstenediol. Only physical chemistry is considered If available, the characteristics of circulating steroids (eg, their concentration and SHBG Gives some specificity to what is a relatively non-specific system It is clear that Step 2: Unliganded SHBG becomes its receptor After binding, the steroid can bind to the SHBG-receptor complex and Has biological activity, accumulates intracellular cAMP and / or binds Can lead to other post-coupling events such as commutation.   Estradiol increases the amount of SHBG made by the liver. For men And the ratio of SHBG and estradiol to testosterone in serum are both Both increase as a function of age.   William Rossner et al. ("Nakura et al., Jay Klin Endklin An De Metab (J. Clin. Endocrin. & Metab.), 71 (2 ): 498-404 (1990) ") indicates that unliganded SHBG is in human prostate. Binding to cells as well as subsequent binding of estradiol is cAMP Causes a dose-dependent increase in SHBG binds to its receptor When it is done, it then binds to steroids and binds SHBG from its receptor. It can result in dissociation (the half-life of this dissociation is about 30 hours). This Activity was first recorded in human prostate cancer cells (LNCaP cells) However, the effect was much more pronounced in primary cultures of BPH tissue. "N Kura et al., “Estradiol induces rapid accumulation of cAMP in the human prostate. Proc Natl Acad Sci) (USA) 91: 5402-5405, 1994 ". From BPH Comparison of cultured fibroblasts and epithelial cells shows that activity is limited to fibroblasts Rukoto has been shown. This cAMP effect is specific for estradiol. Was. Dihydrotestosterone (DHT) binds to SHBG, but DH T did not affect cAMP in BPH tissues. Prostate cancer cell line LN In CaP, DHT and estradiol both activate the system Caused an increase in cAMP.   In addition, antiestrogens tamoxifen increase cAMP Did not block the effects of estradiol on This is maybe tamaki This may be because cyphene does not compete for binding of estradiol to SHBG.   In addition, the potent estrogen diethylstilbestrol has been linked to SHBG. And did not increase cAMP in prostate cells.   2-Methoxyestradiol, a steroid metabolite, is known from biology No active activity. However, 2-methoxyestradiol does not Binds to SHBG more tightly than diols. This bond is estradiol It does not result in the increase in cAMP observed with binding.   Androgens are central to the pathogenesis of benign prostate hyperplasia and prostate cancer It is widely accepted that there is. However, these diseases of the prostate are male As they age, that is, when plasma androgens are falling To increase. Decrease in total plasma androgen is due to age-related increase in plasma SHBG The increase is more significant than the decrease in total androgen. Causes a decrease in androgen. In addition, estrogens are important in BPH Has long been thought However, no direct effects on the human prostate have been shown. Andro Estradiol, which lowers gen levels and raises SHBG, It has been suggested to play a role in pathogenesis. Estradiol and SHBG Working in concert, the intracellular cAMP of human BPH and prostate cancer tissue Brings a big increase. This increase is not impeded by antiestrogen and SHB It is not induced by estrogen that does not bind to G; Not mediated by the receptor.   The present invention relates to the binding of SHBG to estradiol and 5α-androsta. Estradiol and hindering the binding of -3α, 17β-diol Antagonizes the SHBG-mediated effects of both 5α-androstane-3α, 17β-diol. By administering a therapeutically effective amount of an antagonistic compound, benign prostatic hyperplasia (BP H) and methods for treating and preventing prostate cancer. The present invention further provides SHB G and estradiol and 5α-androstan-3α, 17β- The present invention relates to a method for finding a compound that prevents the binding of a diol.Detailed description of the invention   Structural formula I 5α-androstane-3α, 17β-diol (3α-diol) For 3α reduction of dolotestosterone and / or 17β reduction of androsterone Formed. It is not considered to have intrinsic hormonal activity. It Is a rich metabolite of DHT in the skin, so its glucuronide plasma concentration Has only been proposed as a marker of cutaneous androgen activity in hairy women However, its usefulness is not certain in this regard. Similarly, prostate 3α-diol May merely reflect the propensity of DHT, and DHT may eventually end up in plasma 3α-di. Become an all-glucuronide. 3α-diol is administered in dogs with BPH Has been linked to late prostate disease. To dogs given 3α-diol Prostate DHT is natural And the administration of DHT is also similar to that seen in The mechanism by which 3α-diol participates in the development of BPH is that Expected to be accompanied by oxidation, but not proven.   As discussed in the background of the present invention, the steroid form Are effective through a mechanism involving their classical intracellular receptors in addition to them Evidence has been accumulated that supports the hypothesis that the One such mechanism is: A large number of cells have receptors on their plasma membrane for plasma proteins or SHBG Based on the observation that In addition, SHBG- [sex hormone binding group Robrin receptor] (RSHBG) complex transduces steroid activation signal Involvement in the pathway, evidence that it results in the rapid development of intracellular cAMP Are also discussed above. In the prostate of patients with BPH, estradiol is Activates the SHBG-RSHBG complex and DHT competitively antagonizes this activation. Oppose. In addition to estradiol, one other steroid, namely 3α-diol Only act as agonists in this system. In addition, this system can And are activated by the same two steroids It is made.   This experiment demonstrates that 3α-dithiophene was previously considered to be an inactive metabolite of DHT. Demonstrate that oars are hormones. It is in SHBG-RSHBG system And are agonists. The concentration that causes a half-maximal response is It is almost equal to its concentration. Furthermore, only 3α-diol and estradiol are Are agonists in the system and both steroids have BPH in dogs. Trigger. All other endogenous steroids that bind to SHBG with high affinity Antagonizes the effects of these two agonists. Conversely, does not bind to SHBG Structurally related steroids such as 3α- and 3β, 5β-androstane All is neither an agonist nor an antagonist.   Estradiol-induced elevation of cAMP is associated with estrogen receptor Not mediated by In BPH tissues, DHT is not an agonist, Antagonizes the effects of tradiol. DHT also antagonizes the effects of 3α-diol You. The same applies to testosterone. Thus, intracellular androgens Two such classical endogenous effects via receptors Sex androgens are antagonists in the SHBG-RSHBG complex work. All endogenous steroids that bind to SHBG are agonists or Active as any of the agonists.   Although the human prostate contains estrogen receptors, it does not The role of estrogen in this is unknown. However, estradiol does not It is certain that it shows a synergistic effect with 3α-diol in the development of BPH in dogs. It is equally assured that these are the only two steroids that activate RSHBG. Is. The mechanism by which 3α-diol causes BPH in dogs is before DHT It was previously claimed that this was due to intra-gonadal inversion. But However, we note that 3α-diol functions as a direct effector of prostate growth That you can do it.   The present invention is a method for treating and / or preventing BPH and prostate cancer, In a patient in need of such treatment, SHBG is bound and estradiol and 5 Therapeutic use of compounds that interfere with the binding of α-androstane-3α, 17β-diol And the like comprising administering an effective amount. One component of this method In a somatic embodiment, it binds to SHBG and estradiol and 5α-and Compounds that prevent the binding of rostan-3α, 17β-diol are from 0.001 to 20 It is administered at a dosage between 0.0 mg / day. One class of this specific embodiment And estradiol and 5α-androstan-3 in Compounds that interfere with the binding of α, 17β-diol are administered at 0.01 to 50.0 mg / day. Administered in a dosage and binds to SHBG in a subclass of this embodiment And estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol The compound that interferes with binding is administered at a dosage of about 0.1-5.0 mg / day. S Binds HBG and binds estradiol and 5α-androstan-3α, 17 Compounds that interfere with β-diol binding are determined using the assay described in Example 7. Can be done.   In a second embodiment of the invention, treating benign prostate hyperplasia and prostate cancer And methods of prevention are provided for patients in need of such treatment to bind and Prevents binding of tradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol Testosterone, 5β-androstane-3α, 17 β-diol, 5α-androstane-3β, 17β -Diol, 5β-androstane-3β, 17β-diol, 2-methoxy- Estradiol and ΔFive-Androstane-3α, 17β-diol (anne Also referred to as drost-5-ene-3α, 17β-diol. ) Selected from Administering the compound.   Preferred compounds that can be used in the present invention are the following: 5α-andro Stan-3β, 17β-diol, 2-methoxy-estradiol and ΔFive -Androstan-3α, 17β-diol (androst-5-ene-3α, Also called 17β-diol. )including.   The invention relates to a preparation of the invention, comprising between 0.001 and 200.0 mg / day, more particularly about . Binds to SHBG at a dosage of 0 mg / day, most particularly 0.1-5.0 mg / day Systemic compounds that interfere with the binding of estradiol and 3α-diol, Prostate, including BPH and prostate cancer, by oral, parenteral or topical administration It has the purpose of providing a method for treating and preventing glandular diseases. The term "BP Treating H "can reduce the obstructive symptoms of BPH as well as slow prostate growth. It is intended to include toning and / or reversing. The term "BPH Prevents "prevents obstructive symptoms and prevents prostate enlargement" It is intended to include The term "treating prostate cancer" refers to the development of prostate cancer. It is intended to include slowing and / or stopping the length. the term “Prevent prostate cancer” refers to the development of prostate cancer in patients likely to develop prostate cancer. It is intended to include preventing actuality. In addition, it binds to SHBG and Compounds that prevent the binding of tradiol and 3α-diol are finasteride or Or a 5α-reductase 2 inhibitor such as epristeride, WO 93/2342 0 and 4,7β-dimethyl-4 as disclosed in WO 95/11254. -Aza-5α-cholestan-3-one, 3-oxo-4-aza-4,7β-dim Chill-16β- (4-chlorophenoxy) -5α-androstane and 3- Oxo-4-aza-4,7β-dimethyl-16β- (phenoxy) -5α-and 5α-reductase 1 inhibitors, such as rostane, disclosed in WO95 / 07927 3-oxo-4-aza-17β- (2,5-trifluoromethyl 5α-reductase such as phenyl-carbamoyl) -5α-androstane A dual inhibitor of 1 and 5α-reductase 2, Nonsteroidal antiandrogens such as flutamide and catodex and Like lazocin, terazosin, doxazosin, tamsulosin and alfuzosin Can be co-administered with a suitable alpha-1 blocker.   The present invention also provides suitable systemic for use in the novel methods of treatment of the present invention; It has the purpose of providing oral, parenteral and topical pharmaceutical formulations. SH BG and estradiol and 5α-androstan-3α, 17β A composition containing as an active ingredient a compound that interferes with diol binding, Can be administered in a wide variety of therapeutic dosage forms in conventional excipients. For example, The compounds can be used in tablets, capsules (timed release formulations and sustained release formulations, respectively). Including formulation. ), Pill, powder, granule, elixir, tincture, solution, suspension , Syrups and emulsions. Similarly, it Are also intravenous (both bolus and infusion), intraperitoneal, subcutaneous, and occluded. May be administered in topical or intramuscular form, with or without occlusion; Thus, all of these employ forms well known to those skilled in the pharmaceutical arts. For example For buccal administration, the compositions may be administered to a patient to be treated. 0.01, 0.05, 0.1, 0.2, 1.0, 2.0, 5.0, for adjustment Notched containing 10.0, 50.0 and 100.0 milligrams of active ingredient It may be provided in the form of a mushroom or unscored tablet.   Binds to SHBG and prevents binding of estradiol and 3α-diol The compound may be activated with such a pharmaceutically acceptable carrier adapted for topical administration. The compounds can be administered in a pharmaceutical composition comprising the compound. Topical pharmaceutical compositions include, for example, Solutions, creams, ointments, gels, lotions, shanks adapted for application to the skin It may be in the form of a pooh or aerosol formulation. In the treatment method of the present invention, Topical pharmaceutical compositions may contain from about 0.001% to 0.1% of the active compound. It may be included in admixture with an acceptable carrier.   Advantageously, the compounds of the present invention may be administered in a single daily dose, or may be administered in a total daily dose. Can be administered in divided doses twice, three or four times daily. About the present invention The compounds may be prepared by topical use of suitable intranasal excipients or by transdermal coatings well known to those skilled in the art. Can be administered in intranasal form by a transdermal route using the intranasal form of a skin patch . To be administered in the form of a transdermal delivery system, the Administration of the drug will, of course, be continuous rather than intermittent throughout the dosage regimen.   Dosage regimens utilizing the compounds of the present invention may include patient type, species, age, weight, gender. And medical condition, the severity of the condition to be treated, the route of administration, the patient's kidneys and According to various factors, including the function of the liver and liver, and the particular compound used. Selected. A physician of ordinary skill can prevent, counter, stop Or easily determine and prescribe the effective amount of drug needed to reverse . Optimal accuracy in achieving drug concentrations in a range that works without toxicity Requires a regimen based on the kinetics of drug availability to the target site. this is , Including consideration of drug distribution, equilibrium and excretion.   In the method of the present invention, binds to SHBG as described in detail herein; and Compounds that block the binding of estradiol and 3α-diol form the active ingredient And is typically intended for administration, i.e., oral tablets, capsules, Suitable pharmaceutical diluents, excipients, appropriately selected for elixirs, syrups, etc. Admixed with a vehicle or carrier (collectively referred to herein as "carrier" materials). And consistent with conventional pharmaceutical particles Administered.   For example, for oral administration in the form of a tablet or capsule, the active drug component Minutes are oral non-toxic pharmaceutically acceptable such as ethanol, glycerol, water, etc. It can be combined with the resulting inert carrier. Capsules containing the product of the present invention Active compounds of lactose and magnesium stearate, calcium stearate Mix with calcium, starch, talc or other carriers and mix this mixture with gelatin It can be manufactured by placing in a capsule. Tablets phosphoric acid active ingredient Calcium, lactose, corn starch or magnesium stearate It can be prepared by mixing with conventional tableting ingredients such as Furthermore, When desired or necessary, suitable binders, lubricants, disintegrating agents and coloring agents can also be added. , Can be incorporated into the mixture. Suitable binders are starch, gelatin, glucose Natural sugars such as sugar or beta-lactose, corn sweeteners, Arabic, Natural and synthetic gums such as tragacanth or sodium alginate, Including xymethylcellulose, polyethylene glycol, wax and the like. These medications Lubricants used in the form include sodium oleate, sodium stearate , Magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride Um etc. Disintegrants include, without limitation, starch, methyl cellulose, agar, ben Includes tonite, xanthan gum and the like.   Liquid forms include synthetic and natural gums such as tragacanth, arabic, methylcell It can be administered in a suitably flavored suspending or dispersing agent such as loin and the like. . Other dispersants that can be used include glycerin and the like. For parenteral administration, sterile Suspensions and solutions are desired. Isotonic preparations generally containing suitable preservatives Is used when intravenous administration is desired.   Topical formulations containing the active drug ingredient can be used, for example, in cream or gel formulations. Alcohol solution, topical cleanser, cleansing cream, skin gel, To form skin lotions and shampoos, for example, alcohol, alcohol Loe Veragel, Allantoin, Glycerin, Vitamin A and E Oils, Mineral Oils, Various well-known in the art such as PPG2, myristyl propionate, etc. It can be mixed with a carrier material. See, for example, EP 0,285,382.   The compounds of the present invention may also comprise small unilamellar vesicles, large unilamellar lamellae. It can be administered in the form of liposomal delivery systems such as vesicles and multilamellar vesicles. Re Posomes contain cholesterol, stearylamine or phosphatidylcholine. And various phospholipids.   The compounds of the present invention can also be used as individual carriers to which the molecules of the compounds are coupled. Can be delivered by use of any monoclonal antibody. The compounds of the present invention also It can be coupled with soluble polymers as targetable drug carriers. Heel Polymers are polyvinylpyrrolidone, pyran copolymer, polyhydroxypro Pill methacrylamide phenol, polyhydroxyethyl aspartamide Poly (ethylene oxide) polylysine substituted with phenol or palmitoyl residue May be included. In addition, the compounds of the present invention are useful in achieving controlled release of drugs. Degradable polymer classes such as polylactic acid, polyepsilon caprolactone, poly Hydroxybutyric acid, polyorthoester, polyacetal, polydihydropyran, Crosslinked or amphiphilic block copolymer of polycyanoacrylate and hydrogel It can be coupled to a limer.   The present invention also relates to a compound that binds to SHBG, Binding of stradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol By preventing estradiol and 5α-androstan-3α, 17β -The compound, which antagonizes both SHBG-mediated effects of diols, in treating prostate disease Use in the manufacture of a medicament useful in a medical device.   The present invention also provides compounds useful for the treatment and prevention of BPH and prostate cancer A method of identifying (A) A sample of the compound to be tested is labeled with dihydrotestosterone, labeled est Contains labeled steroids selected from Ladiol and labeled testosterone Ink at selected concentrations in diluted pregnant serum, dog SHBG or human SHBG And then (B) SHB to enable quantification of the amount of steroid bound to SHBG Separating the steroid bound to G from the unbound steroid; (C) determining the amount of steroid bound to SHBG, and (D) determining the IC50 of the compound The method comprises: Labeled steroids are radioactively labeled and fluorescently labeled. Sense, chemiluminescently or otherwise labeled Can be recognized. Preferably, the labeled steroid is radioactively labeled. Most preferred Indicates that the labeled steroid is tritiated dihydrotestosterone, and The amount is determined by measuring the amount of radioactivity present in the supernatant. Process ( Preferably a) to (c) are repeated at least 5 times, each time at a different concentration of the compound. No. Preferably, the serum of pregnant woman, dog SHBG or human SHBG is 0% in NaCl. . 1:20 dilution in 15M sodium phosphate buffer pH 7.0 And 0.5 mL of this diluted solution is dispensed into test tubes and 0.1 nM Incubate with lithiated DHT. Using dog or human SHBG When starting, it is desirable to start with purified dog or human SHBG. Tested The concentration of the compound to be used is in the range of 0.001 to 100 nM; Incubation at room temperature for about 15 minutes and then in ice bath for another 15 minutes Preferably. Preferably, the protein is 0.5 mL of saturated ammonium sulfate. Precipitated by the addition of the solution. Most preferably, after the addition of ammonium sulfate, The diluted incubated mixture avoids locally high concentrations of salt. For this purpose, it is preferably shaken with a vortex mixer. Preferably, The tube is most preferably at 8000 rpm for 10 minutes to further precipitate white matter. Centrifuged during Then, the sample to be measured in the supernatant is preferably 0.5 mL. Removed and the amount of label is measured.   Preferably, the IC50 of a compound is determined by measuring the amount of radioactive DHT as a log of the concentration of the compound. Is determined by plotting as a function of From the total radioactivity added to the tube It is preferred to determine the amount of radioactive DHT by subtracting the radioactivity of the supernatant .   Preferably, compounds having an IC50 <10 nM are those compounds in which the compound is estradiol Whether they are agonists or antagonists of To determine, it is retested in the human BPH tissue cAMP assay. Generally, this The test involves the following steps: (A) mincing of prostate tissue in culture with sufficient amount of unliganded SHBG ( Chopped) to saturate their SHBG receptors, (B) removing excess SHBG, preferably by washing; (C) adding a known concentration of the compound to be tested, and (D) Determine intracellular cAMP Consisting of   If the compound is not an agonist (does not cause an increase in intracellular cAMP), The following steps can be performed to confirm the antagonist activity of the compound. Immediately Chi (E) A sufficient amount of unliganded SHBG is added to the minced prostate tissue in culture. Addition to saturate their SHBG receptors, (F) removing excess SHBG, preferably by washing; (G) estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol Adding a compound selected from (H) adding a known concentration of the compound to be tested, and (I) Determine intracellular cAMP.   Antago with IC50 <10 nM and in human BPH tissue cAMP assay Compounds of interest that have proven to be ninists are BPH for the treatment of BPH symptoms. In dog models and subsequently in humans. BPH In a human model, castrated dogs are escaping in the presence and absence of the test compound. Treated with tradiol and 5α-androstanediol. Prostate growth But preferably monitored by MRI Is performed. Older dogs with BPH may also be tested for their enlarged prostate. Can be treated with a test compound to determine if it contracts in response to an object. And Beams and prostate size are monitored, preferably by MRI.   Treat prostate disease, including the BPH and prostate cancer described herein. And methods of preventing can be further illustrated by the following examples.                                General method                               General method 1 SHBG   "Rosner et al.," Testosterone-Estradiol Binding Groups from Human Plasma. Isolation and Characterization of Roblin: Use of a Novel Affinity Column ", Bio Chemistry, 14: 4813-20 (1985). )) As described in our original method (“Kang et al.,“ Test The size isomer of sterone-estradiol binding globulin is And in the plasma of women ", Steroids, 45: 463- 72 (1985) "), to obtain SHBG containing 1 mol DHT / mol SHBG. , Isolated from pregnant plasma. Its purity was determined by polyacrylamide gel electrophoresis (PAG). E), sodium dodecyl sulfate PAGE (SDS-PAGE) and anti- Confirmed by immunoelectrophoresis against whole human antiserum. For all of these methods The investigation revealed the absence of contaminants. It is 50 mM Tris- HCl, 50 mM CaClTwo(PH 7.4) and 10% glycerol (bird (Ca-buffer buffer) at -20C and used within 6 months of isolation . I   The steroids were added to SHB with dextra-coated charcoal (2.5%, wt / vol) Stripped from G. In a preliminary experiment, this stripping operation The completeness of the work is 106cpm [ThreeH] 8 μM SHBG equilibrated with DHT -Guaranteed by stripping the solution of DHT. SHBG collection 85%.   The following procedure was followed by placing DHT with another steroid in a solution of SHBG-DHT. Used to change. SHBG-DHT in Tris-Ca buffer (1.1 μM) Five milliliters were transferred to an AMICON ultrafiltration cell equipped with a YM-10 membrane. (Model 52) and a 5 fold molar excess of the sterol to be exchanged. The mixture was gently stirred at room temperature with the id. After 30 minutes reduce the temperature to 4 ° C and The incubation continued for another 30 minutes. At that time 40 mL of ice-cold Tris Ca buffer was added and after 5 minutes the solution was concentrated to the original volume (5 mL). Was. The addition and concentration of 40 mL of ice-cold buffer was repeated three times and then the solution Was warmed to room temperature and fresh 5-fold molar excess of replacement steroid was added again. . The entire processing operation was repeated several times. This exchange, as appropriate [ThreeH] Testostero Or [Three[H] estradiol was monitored. Combined with SHBG Based on the radioactivity that was exchanged, testosterone was exchanged after three changes and More than 90% completeness after 4 changes for stradiol. 2- [Three [H] methoxyestradiol is not commercially available. It's estraj Binds to SHBG more tightly than either all or testosterone It was assumed that four exchanges were appropriate. SHBG can affect experimental results As a control for damage to DHT, DHT itself was passed through four changes.   Canine SHBG (cSHBG) is referred to as “Suzuki et al.,“ Testosterone binding of dog serum. Purification and Characterization of Sex Globulin ”, J J. Biochem., 85: 1195-12203 (19 79)) and its purity is determined using human SHBG ( hSHBG). Again, steroids should be used before use. Tripped.                               General method 2 Prostate tissue explant   Human prostate tissue was obtained at the time of surgery for BPH. Canine prostate tissue Open surgery at the time of sacrifice (parenteral phenobarbital) of a 3 year old purebred Beagle dog Obtained by About 5mmThreeDivided into cubes, and Primaria culture dish (Becton Dickinson Labware) )), 100 units / mL penicillin, 100 μg / mL strept 5% fetus containing mycin sulfate and 0.25 μg / mL amphotericin RPMI-1640 with bovine serum (Gui, Grand Island, NY) (Buko Laboratories) for 2-3 days. Finely chop it and 1mmThreeDepartment And serum-free medium (0.5 mL RPM) for about 18 hours before starting the experiment. 16m in I-1640) Transferred to m-well. Additions such as addition of SHBG, steroids and controls are serum free Made in RPMI-1640.                               General method 3   Membrane-bound adenylate cyclase activity and intracellular cAMP accumulation were determined by " Nakura et al., “Human corticosteroid binding globulin in breast cancer cell lines Introduction of Adenylate Cyclase ”, BioChem by Officeless Commu (Biochem Biophys Res Commun.), 153: 1. 012-8 (1988) ".   Proteins are referred to as "Bradford," Proteins that utilize the principle of protein-dye binding. A Rapid and Sensitive Method for Quantifying Microgram Content of Analytes ", Anal Bioke (Anal. Biochem.), 72: 248-53 (1976) ". Was measured by                               General method 4 LNCaP cells   LNCaP cells (human prostate cancer cell line, passage 9) were purchased from American Type Culture Collection (America) n Type Culture Collection (Rock, MD) Kubil). Corning culture flask (New York State) Corning Laboratory Science Company of Corning) L-glutamine (300 mg / L), 10% fetal bovine serum (New York Gibco of Grand Island) and antibodies (100 U / mL penicillin G NAa, 100 μg / mL streptomycin sulfate and 0.25 μg / m Cells in monolayer in RPMI-1640 medium supplemented with L amphotericin B) Grown.                                   Example 1                  Various SHBG- for cAMP accumulation                         Effects of steroid combinations   LNCaP cells were placed in Dulbecco's modified Eagle serum-free medium. cell( 1 mg protein / mL) with 1 μM SHBG-steroid or buffer (control) And phosphodiesterase inhibitor isobutylmethylxanthine (0.1 mM) For 14 minutes at 37 ° C. Then they are described earlier Centrifuge to measure cAMP as described And extracted with trichloroacetic acid.result   The four different SHBG-steroid conjugates were combined with a single SHBG-steroid concentration (1 μM). Exposure of cells to the SHBG-steroid complex was Made for a minute. Both free steroid and unliganded SHBG contained 1 μm M present in an equilibrium mixture of SHBG-steroids. SHBG-DHT, SH Free SHB for BG-testosterone and SHBG-estradiol The calculated concentrations of G and free steroid were 31, 52 and 65 nM, respectively. (The association constant used in this calculation was 1.0 × 109M-1 (DHT ) 3.5 × 108M-1(Testosterone) and 2.2 × 108M-1(Estra Diol). ). T for dissociation of DHT from SHBG1/2Is 1. In 7 minutes, and those for testosterone and estradiol Was smaller than that. Thus, various steroids are in two pools of SHBG (Free and bound to the receptor) and Steroids activate receptor-bound SHBG and adenylate cyclase system Ten to start There was a minute time.   Other sterols against DHT in the initially isolated SHBG-DHT complex SHBG-DHT as a control for damage to SHBG during The conjugate was subjected to four exchange operations using DHT as the replacement steroid . This treatment procedure was compared to the activity of SHBG-DHT used without exchange by 1 This resulted in a 4% decrease in activity. However, the exchanged SHBG is Still in causing an increase in cAMP over any of the HBG-steroid complexes It was significantly more active.   However, the most prominent part of this experiment was the SHBG-2-methoxy est There was a lack of statistically significant difference between ladiol and the buffer control. This Stero Metabolites are SHBs more than either testosterone or estradiol Binds tightly to G but has no steroid hormone activity Things. DHT did not differ from the buffer control in the absence of SHBG.                                   Example 2              For cells with unliganded SHBG already bound              Effect of adding steroid on cAMP   Stimulation of adenylate cyclase activity and cAMP in turn lead to unliganded SH Binding of BG to its receptor, steroid to SHBG-receptor complex Proceeds in binding, activation of adenylate cyclase and finally cAMP formation To test the hypothesis that unliganded SHBG is already bound to L The effect of adding steroids to NCaP cells on cAMP was tested. Place cells (0.6-1.6 mg protein / mL) in serum-free medium (see Example 1) And then 1 hour at 37 ° C. with 50 nM unliganded SHBG Cubbed. The cells are washed once with serum-free medium and then -Free medium containing steroid and isobutylmethylxanthine at different concentrations For 15 minutes. Add 50 nM unliganded SHBG The percentage increase in cAMP after the addition was 7.8% ± 3.8 compared to the addition of buffer. %Met. LNCaP whose receptor is occupied by unliganded SHBG Cells can be DHT or Estradio Showed a dose-dependent increase in their cAMP content following the addition of Those with the receptor were not. DHT concentrations greater than 50 nM In, such responses diminished. SHBG-2-methoxy est in Example 1 As with the addition of the ladiol conjugate, the receptor was unliganded SHBG Of 2-methoxyestradiol to cells occupied by cAM It had no effect on P accumulation. By comparison, estradiol The response ultimately achieves a magnitude as large as the response to DHT, but Approximately 20 times greater final concentration (1 μM) is required to achieve this.                                   Example 3   The overall experimental design should be sufficient for unliganded mincing of prostate tissue in culture. Synthetic SHBG was added to saturate their SHBG receptors. After washing to remove excess SHBG, the appropriate concentration of DHT or est Ladiol was added and after 15 minutes the experiment was terminated and intracellular cAMP was determined did. In the absence of SHBG, neither DHT nor estradiol was cAMP. Did not affect the change. S SHBG without teroids causes a slight increase in cAMP as compared to buffer. (48%, p, 0.03, n = 20). In contrast, binds to the receptor In the presence of modified SHBG, estradiol is an active dose-dependent agent of cAMP Caused an increase in sex. Surprisingly, it is 4.5 times larger than estradiol DHT, which binds to SHBG with affinity, can be expressed in SHBG-reactive in prostate tissue. It did not activate the scepter adenylate cyclase system.                                   Example 4   Prostate explants from normal dogs and patients with BPH were placed in serum-containing medium For 3 days twice a day. Serum them before starting the experiment Placed in free medium for 24 hours. Highly purified dogs or such suitable explants Adds human SHBG for 3 hours and adds SHBG not bound to the receptor. Was removed with two washes. Add various concentrations of the appropriate steroid and add After 15 minutes, intracellular cAMP was assayed.   In any case, any steroid or step in the absence of SHBG SHBG in the absence of Lloyd also had no effect on cAMP. Dog smell Estradiol and And 5α-androstane-3α, 17β-diol (3α-diol) are both , Caused an increase in cAMP. At 100 nM, both compared to blank About a 65-fold increase. For each, the half-maximal response is somewhat active Inferior, but more sensitive. Response to 3α-diol in humans Was maximal (11-fold) at 10 nM and half maximal at 0.4 nM. The response to 100 nM estradiol is comparable to 10 nM 3α-diol. It was equal. Testosterone, DHT, 5α-androstane-3β, 17β -Diol, 5β-androstane-3α, 17β-diol and 5β-anne Drostan-3β, 17β-diol and Δ5-androstan-3β, 17 β-diol had no effect.   In the organ where testosterone functions as a prohormone, The steroids that activate the sceptors are metabolic products in which testosterone 5α is reduced. DHT. DHT can be used in a reversible manner with 3α- and 3β, 5α- It is further metabolized to nandrostandiol. 3α-diol is BP in dogs H in this effect and It is known to exhibit synergy with oars. The data in this example is for dogs and Has shown a direct effect of 3α-diol in humans and human prostate. The previously observed effect of 3α-diol in E. coli is mediated without conversion to DHT It is raising the possibility.                                   Example 5   Experiment planThe overall experimental design is sufficient to mince prostate tissue in culture. Unliganded SHBG (50 nM) was added to increase their SHBG receptors. Was to saturate. After washing to remove excess SHBG, the appropriate The concentrations of the indicated steroids are added in the order specified and 2 after the last addition Terminate the experiment at 0 minutes and proceed as before ("Nakura et al.," Estradiol Causes rapid accumulation of cAMP in the human prostate. " ・ Proc Natl Acad Sci (USA) 91: 5 402-5405, 1994 ") Commercial ELISA (Oxford, MI) CAMP determined by Oxford Biomed Research, Inc. did. All cultures contain isobutyl-methylxanthine (0.1 mM) Was.   result: Added to minc in human prostate where the receptor was saturated with SHBG Estradiol and 3α-diol were both dose dependent of cAMP Caused a lively increase. Same steroid added in the absence of SHBG Had no effect. The table below shows cAMP levels in prostate mince. 4 shows the effect of estradiol or 3α-diol having SHBG. Human In addition, those data are obtained for tissue from three patients, each in triplicate. ± SEM of experiments performed with For dogs, those data are 2 Mean ± SEM of triplicate experiments from tissues obtained from one of the head dogs.   In humans, the half-maximal response is 1.2 nM 3α-diol and 5.0 nM Happened in estradiol. As well Excellent results were obtained with canine prostate and cSHBG. However, The maximal response is greater in dogs, 11 times that seen in the human prostate. It was about 60 times earlier. In addition, estradiol and And 3α-diol were equipotent.                                   Example 6                Steroid agonists for RSHBG                         And antagonist activity   We stimulate RSHBG or are triggered by 3α-diol Estradiol and 3α-diamine for any ability to inhibit stimulation Various steroids were investigated in addition to oars. The steroids are G is known to bind tightly (testosterone, DHT, 2-me Toxiestradiol, Δ5-androstene-3β, 17β-diol, 5 α-androstane-3β, 17β-diol) Is structurally related to but does not bind to SHBG (5β-androsta Two isomers of diol). None of these steroids Was not an agonist in the system. The experiment is Mie anti In duplicate, and as shown in Table 2, the quotient or experiment / control ± SE Given as M. For agonist activity, steroids (10 nM) or An excipient (control) was added to the prostate mince whose receptor was saturated with SHBG. And their ability to generate cAMP was investigated. Agonist activity It is noted that the control in the experiment was unliganded SHBG + vehicle. For antagonist activity, RSHBG in prostate mince was saturated with hSHBG. And incubated for 15 minutes with excipients or steroids (50 nM) And then exposed to 10 nM 3α-diol for 20 minutes. In this experiment It is noted that the control in this is SHBG + excipient + 3α-diol. test The steroid used was 2-methoxy-estradiol (2MeOETwo), ΔFive− Androstane-3β, 17β-diol (ΔFive), 5β-androstan-3 α, 17β-diol (3α, 5β), 5β-androstane-3β, 17β- Diol (3β, 5β), 5α-androstane-3β, 7β-diol (3β , 5α).   The data is summarized in Table 2.   None of the steroids were agonists in this system. On the other hand, SHB All of the steroids that bind to G antagonized the effects of 3α-diol, The two 5β-androstanediols did not antagonize.                                   Example 7 Estradiol useful for the treatment and prevention of BPH and prostate cancer Identification of antagonists of androstanediol   Compounds that bind to SHBG can be either agonists or antagonists. is there. To select compounds that bind with appropriately high affinity, Approximately 1:20 in sodium phosphate buffer at pH 7.0 made to 0.15M. Maternal blood at Dilute Qing first. Then, 0.5 mL of the diluted serum is dispensed into test tubes. In the absence of various concentrations of binding competitor (0.001-100 nM) and 0.1 nM tritiated dihydrotestosterone in the presence (approximately 45-10 (0 Ci / mmol) at room temperature for 15 minutes. Then put the tube Transfer to ice bath and incubate for another 15 minutes. Then 0.5 mL of saturation In order to avoid locally high concentrations of salts while adding ammonium sulphate solution Shake the diluted serum with a vortex mixer. Centrifuge the tube at 8000 rpm for 10 minutes Separate and then count 0.5 mL of the supernatant. Radioactive DH in sediment The amount of T (determined by subtraction) as a function of the logarithm of the concentration of the competitor molecule Plot and determine the IC50. The lower the IC50, the more SHB Competitors are more potent for tritiated DTH binding to G. IC50 < Compounds that compete at 10 nM are identified in the human BPH tissue cAMP assay ("Nakura et al. , J. Clin. Endocrine and Methabu (J. Clin. Endoc) rin. & Metab. ), 71 (2): 498-404 (1990) "). Wherein the compound is estradiol and androstanediol Pure agonists to determine if they are agonists or antagonists. Retested using human BPH tissue in cultures containing SHBG. Ann Compounds that have been found to be agonists also have BP for the treatment of the symptoms of BPH. H can be tested in a dog model and subsequently in humans.   The foregoing detailed description teaches the principles of the invention, together with examples given for illustrative purposes. However, implementations of the present invention are hereby deemed to be within the following claims and their equivalents. Modification, adaptation, modification, or deletion of the processing operations and protocols described in Or it will be understood that it encompasses all of the additions.

【手続補正書】 【提出日】１９９７年１２月９日 【補正内容】 請求の範囲 １． 前立腺の病気を処置または予防するのに有用な医薬の製造における、ＳＨ ＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３α，１７β −ジオールの結合を妨げる化合物の使用。 ２． 化合物の投与量が０．００１〜２００ｍｇ／日である、請求の範囲第１項 の使用。 ３． 化合物の投与量が０．０１〜５０ｍｇ／日である、請求の範囲第１項の使 用。 ４． 化合物の投与量が０．１〜５ｍｇ／日である、請求の範囲第１項の使用。 ５． 前立腺の病気が良性前立腺過形成である、請求の範囲第１項の使用。 ６． 前立腺の病気が前立腺癌である、請求の範囲第１項の使用。 ７． 医薬が全身投与用に製造される、請求の範囲第１項の使用。 ８． 医薬が経口投与用に製造される、請求の範囲第１項の使用。 ９． ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン−３ α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物が テストステロン、 ５α−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール、 ２−メトキシ−エストラジオールおよび Δ5−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール から選択される、請求の範囲第１項の使用。 １０． ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン− ３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物が ５α−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール、 ２−メトキシ−エストラジオールおよび Δ5−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール から選択される、請求の範囲第１項の使用。 １１． 医薬が （ａ）５α−レタクターゼ２阻害剤、 （ｂ）５α−レダクターゼ１阻害剤、 （ｃ）５α−レダクターゼ１および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤、 （ｄ）非ステロイド系抗アンドロゲン、 （ｅ）アルファ−１遮断剤 から選択された化合物を更に含む、請求の範囲第１項の使用。 １２． （ａ）５α−レダクターゼ２阻害剤がフィナステリドおよびエプリステ リドから選択され、 （ｂ）５α−レダクターゼ１阻害剤が４，７β−ジメチル−４−アザ−５α−コ レスタン−３−オン、３−オキソ−４−アザ−４,７β−ジメチル−１６β−(４ −クロロフェノキシ)−５α−アンドロスタンおよび３−オキソ−４−アザ−４ ，７β−ジメチル−１６β−(フェノキシ)−５α−アンドロスタンから選択され 、 （ｃ）５α−レダクターゼ１および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤が３−オ キソ−４−アザ−１７β−（２，５−トリフルオロメチルフェニル−カルバモイ ル）−５α−アンドロスタンであり、 （ｄ）非ステロイド系抗アンドロゲンがフルタミドおよびカソデックスから選択 され、そして （ｅ）アルファ−１遮断剤がプラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、タムスロ シンおよびアルフゾシンから選択される、 請求の範囲第１１項の使用。 １３． 化合物がＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロ スタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げるかどうかを決定する方法であっ て、 （ａ）試験されるべき化合物の試料をジヒドロテストステロン、エストラジオー ルおよびテストステロンから選択された標識ステロイドを含有する希釈された妊 娠血清、純粋なイヌＳＨＢＧまたは純粋なヒトＳＨＢＧ中で選定濃度にてインキ ュベートし、 （ｂ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量の定量化を可能にするためにＳＨＢ Ｇに結合されたステロイドを結合されていないステロイドから分離し、 （ｃ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量を決定し、そして （ｄ）該化合物のＩＣ５０を決定する ことからなる上記方法。 １４． 工程（ａ）〜（ｃ）を化合物の異なる濃度にて少なくとも５回繰り返す 、請求の範囲第１３項の方法。 １５． 化合物が０．００１ｎＭと１００ｎＭの間の濃度にて試験される、請求 の範囲第１３項の方法。 １６． 標識ステロイドがトリチウム化ジヒドロテストステロンであり、ＳＨＢ Ｇに結合されたステロイドが沈殿により結合されていないステロイドから分離さ れ、かつＳＨＢＧに結合されたステロイドの量が、沈殿された混合物から上澄み 液の測定される量を取り出しそして上澄み液の測定される量における放射能を測 定することにより測定される、請求の範囲第１３項の方法。 １７． 前立腺の病気を処置および予防するために有用な化合物を見出す方法で あって、 （ａ）試験されるべき化合物の試料を標識ジヒドロテストステロン、標識エスト ラジオールおよび標識テストステロンから選択された標識ステロイドを含有する 希釈された妊娠血清、イヌＳＨＢＧまたはヒトＳＨＢＧ中で選定濃度にてインキ ュベートし、 （ｂ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量の定量化を可能にするためにＳＨＢ Ｇに結合されたステロイドを結合されていないステロイドから分離し、 （ｃ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量を決定し、 （ｄ）該化合物のＩＣ５０を決定し、そして （ｅ）該化合物がアゴニストまたはアンタゴニストであるかどうかを決定する ことからなる上記方法。 １８． 化合物がアンタゴニストまたはアゴニストであるかどうかの決定が： （ｆ）十分な量の未リガンド結合ＳＨＢＧを培養における前立腺組織のミンチに 添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させ、 （ｇ）前立腺組織の飽和されたこのミンチから過剰のＳＨＢＧを除去し、 （ｈ）洗浄されたこのミンチに既知濃度の試験されるべき化合物を添加し、そし て （ｉ）細胞内ｃＡＭＰを決定する という追加工程を含む、請求の範囲第１７項の方法。 １９． 化合物がアンタゴニストまたはアゴニストであるかどうかの決定が： （ｊ）十分な量の未リガンド結合ＳＨＢＧを培養における前立腺組織のミンチに 添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させ、 （ｋ）前立腺組織の飽和されたこのミンチから過剰のＳＨＢＧを除去し、 （ｌ）洗浄されたこのミンチに既知濃度の試験されるべき化合物を添加し、そし て （ｍ）細胞内ｃＡＭＰを決定する という追加工程を含む、請求の範囲第１８項の方法。 ２０． （ａ）ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロス タン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物、および （ｂ）製薬上許容され得る担体 からなる医薬組成物。 ２１． （ａ）５α−レダクターゼ２阻害剤、 （ｂ）５α−レダクターゼ１阻害剤、 （ｃ）５α−レダクターゼ１および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤、 （ｄ）非ステロイド系抗アンドロゲン、および （ｅ）アルファ−１遮断剤 から選択された化合物を更に含む、請求の範囲第２０項の組成物。[Procedural amendment] [Date of submission] December 9, 1997 [Content of amendment] Claims 1. Use of a compound that binds to SHBG and prevents the binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol in the manufacture of a medicament useful for treating or preventing prostate disease. 2. Use according to claim 1, wherein the dose of the compound is between 0.001 and 200 mg / day. 3. Use according to claim 1, wherein the dose of the compound is between 0.01 and 50 mg / day. 4. Use according to claim 1, wherein the dose of the compound is between 0.1 and 5 mg / day. 5. Use according to claim 1, wherein the prostate disease is benign prostatic hyperplasia. 6. Use according to claim 1, wherein the prostate disease is prostate cancer. 7. Use according to claim 1, wherein the medicament is manufactured for systemic administration. 8. Use according to claim 1, wherein the medicament is manufactured for oral administration. 9. Compounds that bind to SHBG and prevent the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol are testosterone, 5α-androstane-3β, 17β-diol, 2-methoxy-estradiol and Δ 5 -androstane-3α. , 17β-diol. 10. Compounds which bind to SHBG and prevent the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol are 5α-androstane-3β, 17β-diol, 2-methoxy-estradiol and Δ 5 -androstane-3α, 17β-diol. The use according to claim 1, which is selected from diols. 11. (A) a 5α-reductase 2 inhibitor, (b) a 5α-reductase 1 inhibitor, (c) a dual inhibitor of 5α-reductase 1 and 5α-reductase 2, (d) a nonsteroidal anti-androgen, Use according to claim 1, further comprising e) a compound selected from alpha-1 blockers. 12. (A) the 5α-reductase 2 inhibitor is selected from finasteride and epristeride; and (b) the 5α-reductase 1 inhibitor is 4,7β-dimethyl-4-aza-5α-cholestan-3-one, 3-oxo-4. -Aza-4,7β-dimethyl-16β- (4-chlorophenoxy) -5α-androstane and 3-oxo-4-aza-4,7β-dimethyl-16β- (phenoxy) -5α-androstane (C) the dual inhibitor of 5α-reductase 1 and 5α-reductase 2 is 3-oxo-4-aza-17β- (2,5-trifluoromethylphenyl-carbamoyl) -5α-androstan; d) the non-steroidal antiandrogen is selected from flutamide and Casodex, and (e) the alpha-1 blocker is prazosin, Zosyn, doxazosin, is selected from tamsulosin, and alfuzosin, the use of claim 11, wherein. 13. A method for determining whether a compound binds to SHBG and interferes with the binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol, comprising: (a) preparing a sample of the compound to be tested with dihydrotestosterone, estradiol and testosterone; Incubated at a selected concentration in diluted pregnancy serum, pure dog SHBG or pure human SHBG containing a labeled steroid selected from: (b) allowing quantification of the amount of steroid bound to SHBG Separating the steroid bound to the SHBG from the unbound steroid to determine the amount of the steroid bound to the SHBG, and (d) determining the IC50 of the compound. Method. 14． 14. The method of claim 13, wherein steps (a)-(c) are repeated at least five times with different concentrations of the compound. 15. 14. The method of claim 13, wherein the compound is tested at a concentration between 0.001 nM and 100 nM. 16. The labeled steroid is tritiated dihydrotestosterone, the steroid bound to SHBG is separated from the unbound steroid by precipitation, and the amount of steroid bound to SHBG is determined in the supernatant from the precipitated mixture. 14. The method of claim 13 wherein said amount is determined by removing an amount and measuring the radioactivity in the measured amount of the supernatant. 17． A method of finding a compound useful for treating and preventing a disease of the prostate, comprising: (a) diluting a sample of a compound to be tested with a labeled steroid selected from labeled dihydrotestosterone, labeled estradiol and labeled testosterone. (B) incubating the conjugate bound to SHBG to allow quantification of the amount of steroid bound to SHBG, in a pregnancy serum, canine SHBG or human SHBG isolated at a selected concentration. (C) determining the amount of steroid bound to SHBG; (d) determining the IC50 of the compound; and (e) determining whether the compound is an agonist or antagonist. The above method comprising: 18. The determination of whether the compounds are antagonists or agonists includes: (f) adding sufficient amounts of unliganded SHBG to the minced prostate tissue in culture to saturate their SHBG receptors; and (g) saturation of the prostate tissue. Removing the excess SHBG from the minced minced, adding (h) adding a known concentration of the compound to be tested to the washed minced, and (i) determining intracellular cAMP. 18. The method of claim 17, wherein 19. The determination of whether the compounds are antagonists or agonists includes: (j) adding sufficient amounts of unliganded SHBG to the minced prostate tissue in culture to saturate their SHBG receptors; and (k) saturation of the prostate tissue. Removing the excess SHBG from the minced minced, adding (l) a known concentration of the compound to be tested to the washed minced, and (m) determining intracellular cAMP. Item 18. The method according to Item 18. 20. A pharmaceutical composition comprising (a) a compound that binds to SHBG and prevents the binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol, and (b) a pharmaceutically acceptable carrier. 21. (A) a 5α-reductase 2 inhibitor; (b) a 5α-reductase 1 inhibitor; (c) a dual inhibitor of 5α-reductase 1 and 5α-reductase 2; (d) a non-steroidal anti-androgen; 21. The composition of claim 20, further comprising: a) a compound selected from alpha-1 blockers.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ， ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，Ｌ Ｒ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ， ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 スミス，ロイ・ジイ アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカー ン・アベニユー・126 (72)発明者 ローズナー，ウイリアム アメリカ合衆国、ニユー・ヨーク・10019、 ニユー・ヨーク、テンス・アベニユー・ 1000 (72)発明者 ナカーラ，エイテイフ・エム アメリカ合衆国、ニユー・ヨーク・10019、 ニユー・ヨーク、テンス・アベニユー・ 1000────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page    (81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, L U, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF) , CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (KE, LS, MW, SD, S Z, UG), UA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD , RU, TJ, TM), AL, AM, AU, AZ, BB , BG, BR, BY, CA, CN, CZ, EE, GE, HU, IL, IS, JP, KG, KR, KZ, LK, L R, LT, LV, MD, MG, MK, MN, MX, NO , NZ, PL, RO, RU, SG, SI, SK, TJ, TM, TR, TT, UA, US, UZ, VN (72) Inventor Smith, Roy Ji             New Jersey, United States             07065, Lowway, East Linker             N Avenue 126 (72) Rosener, William             United States, New York 10019,             New York, Tence Avenue             1000 (72) Inventors Nakara, AT-M             United States, New York 10019,             New York, Tence Avenue             1000

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １． 前立腺の病気を処置または予防する方法であって、かかる処置の必要な ヒトに、ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン− ３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物を含んでなる医薬組成物の治療上 有効な投与量を投与することからなる上記方法。 ２． 化合物の投与量が０．００１〜２００ｍｇ／日である、請求の範囲第１ 項の方法。 ３． 化合物の投与量が０．０１〜５０ｍｇ／日である、請求の範囲第１項の 方法。 ４． 化合物の投与量が０．１〜５ｍｇ／日である、請求の範囲第１項の方法 。 ５． 前立腺の病気が良性前立腺過形成である、請求の範囲第１項の方法。 ６． 前立腺の病気が前立腺癌である、請求の範囲第１項の方法。 ７． 医薬組成物が全身的に投与される、請求の範囲第１項の方法。 ８． 医薬組成物が経口的に投与される、請求の範囲第１項の方法。 ９． 医薬組成物が局所的に投与される、請求の範囲第１項の方法。 １０． ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン −３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物が テストステロン、 ５α−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール、 ２−メトキシ−エストラジオールおよび Δ5−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール から選択される、請求の範囲第１項の方法。 １１． ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン −３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物が ５α−アンドロスタン−３β，１７β−ジオール、 ２−メトキシ−エストラジオールおよび Δ5−アンドロスタン−３α，１７β−ジオール から選択される、請求の範囲第１項の方法。 １２． （ａ）５α−レダクターゼ２阻害剤、 （ｂ）５α−レダクターゼ１阻害剤、 （ｃ）５α−レダクターゼ１および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤、 （ｄ）非ステロイド系抗アンドロゲン、 （ｅ）アルファ−１遮断剤 から選択された化合物の投与を追加的に含む、請求の範囲第１項の方法。 １３． （ａ）５α−レダクターゼ２阻害剤がフィナステリドおよびエプリス テリドから選択され、 （ｂ）５α−レダクターゼ１阻害剤が４，７β−ジメチル−４−アザ−５α−コ レスタン−３−オン、３−オキソ−４−アザ−４，７β−ジメチル−１６β−（ ４−クロロフェノキシ）−５α−アンドロスタンおよび３−オキソ−４−アザ− ４，７β−ジメチル−１６β−（フェノキシ）−５α−アンドロスタンから選択 され、 （ｃ）５α−レダクターゼ１および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤が３−オ キソ−４−アザ−１７β−（２，５−トリフルオロメチルフェニル−カルバモイ ル）−５α−アンドロスタ ンであり、 （ｄ）非ステロイド系抗アンドロゲンがフルタミドおよびカソデックスから選択 され、そして （ｅ）アルファ−１遮断剤がプラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、タムスロ シンおよびアルフゾシンから選択される、 請求の範囲第１２項の方法。 １４．化合物がＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロ スタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げるかどうかを決定する方法であっ て、 （ａ）試験されるべき化合物の試料をジヒドロテストステロン、エストラジオー ルおよびテストステロンから選択された標識ステロイドを含有する希釈された妊 娠血清、純粋なイヌＳＨＢＧまたは純粋なヒトＳＨＢＧ中で選定濃度にてインキ ュベートし、 （ｂ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量の定量化を可能にするためにＳＨＢ Ｇに結合されたステロイドを結合されていないステロイドから分離し、 （ｃ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量を決定し、そして （ｄ）該化合物のＩＣ５０を決定する ことからなる上記方法。 １５． 工程（ａ）〜（ｃ）を化合物の異なる濃度にて少なくとも５回繰り返 す、請求の範囲第１４項の方法。 １６． 化合物が０．００１ｎＭと１００ｎＭの間の濃度にて試験される、請 求の範囲第１４項の方法。 １７． 標識ステロイドがトリチウム化ジヒドロテストステロンであり、ＳＨ ＢＧに結合されたステロイドが沈殿により結合されていないステロイドから分離 され、かつＳＨＢＧに結合されたステロイドの量が、沈殿された混合物からの上 澄み液の測定される量を取り出しそして上澄み液の測定される量における放射能 を測定することにより測定される、請求の範囲第１４項の方法。 １８． 前立腺の病気を処置および予防するために有用な化合物を見出す方法 であって、 （ａ）試験されるべき化合物の試料を標識ジヒドロテストステロン、標識エスト ラジオールおよび標識テストステロンから選択された標識ステロイドを含有する 希釈された妊娠血清、イヌＳＨＢＧまたはヒトＳＨＢＧ中で選定濃度にてインキ ュベートし、 （ｂ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量の定量化を可能に するためにＳＨＢＧに結合されたステロイドを結合されていないステロイドから 分離し、 （ｃ）ＳＨＢＧに結合されたステロイドの量を決定し、 （ｄ）該化合物のＩＣ５０を決定し、そして （ｅ）該化合物がアゴニストまたはアンタゴニストであるかどうかを決定する ことからなる上記方法。 １９． 化合物がアンタゴニストまたはアゴニストであるかどうかの決定が： （ｆ）十分な量の未リガンド結合ＳＨＢＧを培養における前立腺組織のミンチに 添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させ、 （ｇ）前立腺組織の飽和されたこのミンチから過剰のＳＨＢＧを除去し、 （ｈ）洗浄されたこのミンチに既知濃度の試験されるべき化合物を添加し、そし て （ｉ）細胞内ｃＡＭＰを決定する という追加工程を含む、請求の範囲第１８項の方法。 ２０． 化合物がアンタゴニストまたはアゴニストであるか どうかの決定が： （ｊ）十分な量の未リガンド結合ＳＨＢＧを培養における前立腺組織のミンチに 添加してそれらのＳＨＢＧレセプターを飽和させ、 （ｋ）前立腺組織の飽和されたこのミンチから過剰のＳＨＢＧを除去し、 （ｌ）洗浄されたこのミンチに既知濃度の試験されるべき化合物を添加し、そし て （ｍ）細胞内ｃＡＭＰを決定する という追加工程を含む、請求の範囲第１９項の方法。 ２１． （ａ）ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロ スタン−３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物、および （ｂ）製薬上許容され得る担体 からなる医薬組成物。 ２２． （ａ）５α−レダクターゼ２阻害剤、 （ｂ）５α−レダクターゼ１阻害剤、 （ｃ）５α−レダクターゼ１および５α−レダクターゼ２の二重阻害剤、 （ｄ）非ステロイド系抗アンドロゲン、および （ｅ）アルファ−１遮断剤 から選択された化合物を更に含む、請求の範囲第２１項の組成物。 ２３． ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン −３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物の、前立腺の病気を防止するた めに有用な薬の製造のための使用。 ２４． ＳＨＢＧに結合しかつエストラジオールおよび５α−アンドロスタン −３α，１７β−ジオールの結合を妨げる化合物の、前立腺の病気を処置するた めに有用な薬の製造のための使用。[Claims] 1. A method of treating or preventing a disease of the prostate, comprising in a human in need of such treatment a compound which binds to SHBG and prevents binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol. The above method comprising administering a therapeutically effective dose of 2. 3. The method of claim 1, wherein the dose of the compound is 0.001-200 mg / day. 3. 2. The method of claim 1, wherein the dose of the compound is between 0.01 and 50 mg / day. 4. 2. The method of claim 1, wherein the dose of the compound is 0.1-5 mg / day. 5. 2. The method of claim 1, wherein the prostate disease is benign prostatic hyperplasia. 6. 2. The method of claim 1, wherein the prostate disease is prostate cancer. 7. 2. The method of claim 1, wherein the pharmaceutical composition is administered systemically. 8. 2. The method of claim 1, wherein the pharmaceutical composition is administered orally. 9. 2. The method of claim 1, wherein the pharmaceutical composition is administered topically. 10. Compounds that bind to SHBG and prevent the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol are testosterone, 5α-androstane-3β, 17β-diol, 2-methoxy-estradiol and Δ 5 -androstane-3α, The method according to claim 1, wherein the method is selected from 17β-diol. 11. Compounds which bind to SHBG and prevent the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol are 5α-androstane-3β, 17β-diol, 2-methoxy-estradiol and Δ 5 -androstane-3α, 17β-diol. The method of claim 1 wherein the method is selected from diols. 12. (A) 5α-reductase 2 inhibitor, (b) 5α-reductase 1 inhibitor, (c) dual inhibitor of 5α-reductase 1 and 5α-reductase 2, (d) non-steroidal anti-androgen, (e) 2. The method of claim 1, further comprising administering a compound selected from an alpha-1 blocker. 13. (A) the 5α-reductase 2 inhibitor is selected from finasteride and epristeride; and (b) the 5α-reductase 1 inhibitor is 4,7β-dimethyl-4-aza-5α-cholestan-3-one, 3-oxo-4. -Aza-4,7β-dimethyl-16β- (4-chlorophenoxy) -5α-androstane and 3-oxo-4-aza-4,7β-dimethyl-16β- (phenoxy) -5α-androstane (C) the dual inhibitor of 5α-reductase 1 and 5α-reductase 2 is 3-oxo-4-aza-17β- (2,5-trifluoromethylphenyl-carbamoyl) -5α-androstan; d) the non-steroidal antiandrogen is selected from flutamide and Casodex, and (e) the alpha-1 blocker is prazocis , Terazosin, doxazosin, tamsulosin and is selected from alfuzosin, method of Claim 12. 14． A method for determining whether a compound binds to SHBG and interferes with the binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol, comprising: (a) preparing a sample of the compound to be tested with dihydrotestosterone, estradiol and testosterone; Incubated at a selected concentration in diluted pregnancy serum, pure dog SHBG or pure human SHBG containing a labeled steroid selected from: (b) allowing quantification of the amount of steroid bound to SHBG Separating the steroid bound to the SHBG from the unbound steroid to determine the amount of the steroid bound to the SHBG, and (d) determining the IC50 of the compound. Method. 15. 15. The method of claim 14, wherein steps (a)-(c) are repeated at least five times at different concentrations of the compound. 16. 15. The method of claim 14, wherein the compound is tested at a concentration between 0.001 nM and 100 nM. 17． The labeled steroid is tritiated dihydrotestosterone, the SHBG-bound steroid is separated from the unbound steroid by precipitation, and the amount of SHBG-bound steroid is determined by measuring the supernatant from the precipitated mixture. 15. The method of claim 14, wherein the amount is measured by removing the amount and measuring the radioactivity in the measured amount of the supernatant. 18. A method of finding a compound useful for treating and preventing a disease of the prostate, comprising: (a) diluting a sample of a compound to be tested with a labeled steroid selected from labeled dihydrotestosterone, labeled estradiol and labeled testosterone. Incubated at a selected concentration in isolated pregnant serum, canine SHBG or human SHBG, and (b) unconjugated SHBG-bound steroid to allow quantification of the amount of SHBG-bound steroid Separating from the steroid; (c) determining the amount of steroid bound to the SHBG; (d) determining the IC50 of the compound; and (e) determining whether the compound is an agonist or antagonist. Become the above method. 19. The determination of whether the compounds are antagonists or agonists includes: (f) adding sufficient amounts of unliganded SHBG to the minced prostate tissue in culture to saturate their SHBG receptors; and (g) saturation of the prostate tissue. Removing the excess SHBG from the minced minced, adding (h) adding a known concentration of the compound to be tested to the washed minced, and (i) determining intracellular cAMP. Item 18. The method according to Item 18. 20. The determination of whether the compounds are antagonists or agonists includes: (j) adding sufficient amounts of unliganded SHBG to the minced prostate tissue in culture to saturate their SHBG receptors; and (k) saturation of the prostate tissue. Removing the excess SHBG from the minced minced, adding (l) a known concentration of the compound to be tested to the washed minced, and (m) determining intracellular cAMP. 20. The method according to claim 19, wherein 21. A pharmaceutical composition comprising (a) a compound that binds to SHBG and prevents the binding of estradiol and 5α-androstan-3α, 17β-diol, and (b) a pharmaceutically acceptable carrier. 22. (A) a 5α-reductase 2 inhibitor; (b) a 5α-reductase 1 inhibitor; (c) a dual inhibitor of 5α-reductase 1 and 5α-reductase 2; (d) a non-steroidal anti-androgen; 22. The composition of claim 21 further comprising a compound selected from: alpha-1 blockers. 23. Use of a compound that binds to SHBG and prevents the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol for the manufacture of a medicament useful for preventing prostate disease. 24. Use of a compound that binds to SHBG and prevents the binding of estradiol and 5α-androstane-3α, 17β-diol for the manufacture of a medicament useful for treating prostate disease.
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