JPH11269076A - Anti-fibrillating agent - Google Patents
Anti-fibrillating agentInfo
- Publication number
- JPH11269076A JPH11269076A JP37019498A JP37019498A JPH11269076A JP H11269076 A JPH11269076 A JP H11269076A JP 37019498 A JP37019498 A JP 37019498A JP 37019498 A JP37019498 A JP 37019498A JP H11269076 A JPH11269076 A JP H11269076A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- agent
- fibrosis
- administration
- keratan sulfate
- antifibrotic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
【0001】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、ケラタン硫酸オリ
ゴ糖の医薬用途に関し、さらに詳細には、ケラタン硫酸
オリゴ糖を有効成分とする抗線維化剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a pharmaceutical use of keratan sulfate oligosaccharide, and more particularly, to an antifibrotic agent containing keratan sulfate oligosaccharide as an active ingredient.
【0002】[0002]
【従来の技術】間質性肺炎や肝硬変などの慢性炎症で
は、何らかの刺激により炎症性細胞からの活性酸素およ
び増殖性サイトカインの産生、分泌が亢進することによ
り、線維芽細胞の増殖と細胞外基質蛋白質の産生過剰が
起こり、不可逆的な線維化に至る。慢性炎症に対しては
ステロイド剤などの抗炎症剤による治療が行われている
が、線維化の進行を抑制する医薬品は現在なく、有効な
治療法が求められている。2. Description of the Related Art In chronic inflammation such as interstitial pneumonia and cirrhosis, the production and secretion of active oxygen and proliferative cytokines from inflammatory cells are enhanced by some kind of stimulus, thereby increasing the proliferation of fibroblasts and extracellular matrix. Overproduction of protein occurs, leading to irreversible fibrosis. Chronic inflammation is treated with anti-inflammatory agents such as steroids, but there is no drug that suppresses the progression of fibrosis, and an effective treatment method is required.
【0003】また抗腫瘍剤等の薬剤投与により、副作用
として肺線維症等が引き起こされる場合もあり、このよ
うな副作用(線維化)を有効に予防・抑制する薬剤が望
まれている。[0003] In addition, pulmonary fibrosis may be caused as a side effect by administration of a drug such as an antitumor agent, and a drug that effectively prevents or suppresses such side effect (fibrosis) is desired.
【0004】[0004]
【発明が解決しようとする課題】このように、線維化を
予防・抑制する医薬品が期待されている。従って、本発
明の目的は、線維化を予防し、線維化の進行を抑制する
医薬品、すなわち抗線維化剤を提供することにある。As described above, a drug which prevents or suppresses fibrosis is expected. Therefore, an object of the present invention is to provide a pharmaceutical product that prevents fibrosis and suppresses the progress of fibrosis, that is, an anti-fibrotic agent.
【0005】[0005]
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題を
解決すべく鋭意検討を重ねた結果、抗炎症剤、抗アレル
ギー剤、免疫調節剤、分化誘導剤、アポトーシス誘導剤
の有効成分として有用であることが知られている(国際
公開第WO96/16973号)ケラタン硫酸オリゴ糖に抗線維化
作用があることを見い出し、本発明を完成するに至っ
た。The present inventors have conducted intensive studies to solve the above-mentioned problems, and as a result, have found that they have been used as active ingredients of anti-inflammatory agents, anti-allergic agents, immunomodulators, differentiation inducers, and apoptosis inducers. The inventors have found that keratan sulfate oligosaccharides, which are known to be useful (WO 96/16973), have an antifibrotic effect, and have completed the present invention.
【0006】すなわち、本発明は、ケラタン硫酸オリゴ
糖またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗
線維化剤(以下、本発明抗線維化剤ともいう)を提供す
る。本発明抗線維化剤は、好ましくは、肺線維症、肝硬
変、動脈硬化症、強皮症、経皮経管冠動脈血管拡張術
(percutaneous transluminal coronary angioplasty;
PTCA)後の冠動脈再狭窄、間質性心筋炎、間質性膀
胱炎、糸球体腎炎、血管炎、糖尿病性腎症、高血圧性腎
硬化症、HIV腎症、IgA腎症、ループス腎症、間質
性腎炎、尿管閉塞による閉塞腎、熱傷後の皮膚はんこん
化及び中毒からなる群から選ばれる1又は2以上の疾患
に伴う線維化の予防薬または進行抑制薬として使用され
る。[0006] That is, the present invention provides an antifibrotic agent (hereinafter, also referred to as the antifibrotic agent of the present invention) containing a keratan sulfate oligosaccharide or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. The anti-fibrotic agent of the present invention is preferably pulmonary fibrosis, cirrhosis, arteriosclerosis, scleroderma, percutaneous transluminal coronary angioplasty;
PTCA) after coronary restenosis, interstitial myocarditis, interstitial cystitis, glomerulonephritis, vasculitis, diabetic nephropathy, hypertensive renal sclerosis, HIV nephropathy, IgA nephropathy, lupus nephropathy, It is used as an agent for preventing or inhibiting the progression of fibrosis associated with one or more diseases selected from the group consisting of interstitial nephritis, obstructed kidney due to ureteral obstruction, skin burn after burn and intoxication.
【0007】また本発明抗線維化剤は、より好ましく
は、薬剤投与により引き起こされる線維化に対して用い
られる。薬剤は、好ましくは、抗腫瘍剤、抗生剤、抗菌
剤、抗不整脈剤、消炎剤、抗リウマチ剤、インターフェ
ロン又は小柴胡湯である。[0007] The antifibrotic agent of the present invention is more preferably used for fibrosis caused by drug administration. The drug is preferably an antitumor agent, an antibiotic, an antibacterial, an antiarrhythmic, an anti-inflammatory, an antirheumatic, interferon or Shosaikoto.
【0008】本発明抗線維化剤は、さらにより好ましく
は、抗腫瘍剤投与に伴う肺線維症の予防薬または進行抑
制薬である。抗腫瘍剤は、好ましくは抗腫瘍性抗生物質
である。[0008] The antifibrotic agent of the present invention is even more preferably a prophylactic or progress inhibitor of pulmonary fibrosis associated with administration of an antitumor agent. The antitumor agent is preferably an antitumor antibiotic.
【0009】[0009]
【発明の実施の形態】以下に、本発明の実施の形態につ
いて説明する。本発明抗線維化剤は、ケラタン硫酸オリ
ゴ糖またはその薬学的に許容される塩を有効成分とす
る。Embodiments of the present invention will be described below. The antifibrotic agent of the present invention contains keratan sulfate oligosaccharide or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
【0010】本発明抗線維化剤に用いるケラタン硫酸オ
リゴ糖は、ケラタン硫酸由来のオリゴ糖である限りにお
いて特に限定されないが、ケラタン硫酸をエンド−β−
N−アセチルグルコサミニダーゼ型ケラタン硫酸分解酵
素で分解して得られうるケラタン硫酸の分解生成物であ
ることが好ましい。[0010] The keratan sulfate oligosaccharide used in the antifibrotic agent of the present invention is not particularly limited as long as it is an oligosaccharide derived from keratan sulfate.
It is preferably a decomposition product of keratan sulfate that can be obtained by decomposition with an N-acetylglucosaminidase-type keratan sulfate degrading enzyme.
【0011】なおこのケラタン硫酸オリゴ糖は、シアル
酸残基及び/又はフコース残基を含んでいてもよい。通
常には、シアル酸残基は、α2,3又はα2,6グリコ
シド結合でガラクトース残基に結合し、フコース残基
は、α1,3グリコシド結合でガラクトース残基に結合
する。The keratan sulfate oligosaccharide may contain a sialic acid residue and / or a fucose residue. Usually, sialic acid residues bind to galactose residues at α2,3 or α2,6 glycosidic bonds, and fucose residues bind to galactose residues at α1,3 glycosidic bonds.
【0012】好ましくは、ケラタン硫酸オリゴ糖は、硫
酸化されたN−アセチルグルコサミン残基を還元末端に
有する二〜五糖のオリゴ糖であって、1分子中の少なく
とも2個所の水酸基が硫酸化されたケラタンオリゴ糖、
特に、少なくともGal(6S)-GlcNAc(6S)(ただし、Galは
ガラクトース残基を、GlcNAcはN-アセチルグルコサミン
残基を、6Sは6-O-硫酸エステル基をそれぞれ表す。)で
表される二糖を構成単位として含む上記ケラタン硫酸オ
リゴ糖である。[0012] Preferably, the keratan sulfate oligosaccharide is a di- to pentasaccharide oligosaccharide having a sulfated N-acetylglucosamine residue at a reducing end, wherein at least two hydroxyl groups in one molecule are sulfated. Keratan oligosaccharides,
In particular, at least Gal (6S) -GlcNAc (6S) (Gal represents a galactose residue, GlcNAc represents an N-acetylglucosamine residue, and 6S represents a 6-O-sulfate group). The above keratan sulfate oligosaccharide containing a disaccharide as a constitutional unit.
【0013】さらに好ましくは、前記ケラタン硫酸オリ
ゴ糖は、式(I)で表される四硫酸化N−アセチルラク
トサミン四糖及び式(II)で表される二硫酸化N−アセ
チルラクトサミン二糖から選ばれる。 Gal(6S)β1-4GlcNAc(6S)β1-3Gal(6S)β1-4GlcNAc(6S)・・・・・・ (I) Gal(6S)β1-4GlcNAc(6S)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・(II) (式中、Galはガラクトース残基を、GlcNAcはN-アセチ
ルグルコサミン残基を、6Sは6-O-硫酸エステル基をそれ
ぞれ表す)More preferably, the keratan sulfate oligosaccharide comprises a tetrasulfated N-acetyllactosamine tetrasaccharide represented by the formula (I) and a disulfated N-acetyllactosaminedisaccharide represented by the formula (II): Chosen from sugar. Gal (6S) β1-4GlcNAc (6S) β1-3Gal (6S) β1-4GlcNAc (6S) ・ ・ ・ ・ ・ ・ (I) Gal (6S) β1-4GlcNAc (6S) ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ (II) (In the formula, Gal represents a galactose residue, GlcNAc represents an N-acetylglucosamine residue, and 6S represents a 6-O-sulfate group.)
【0014】ケラタン硫酸オリゴ糖は、単一の種からな
っていても、混合物であってもよい。本発明に使用され
るケラタン硫酸オリゴ糖は、ケラタン硫酸、好ましくは
高硫酸化ケラタン硫酸の緩衝溶液にエンド-β-N-アセチ
ルグルコサミニダーゼ型ケラタン硫酸分解酵素、例えば
バチルス属細菌由来のケラタナーゼ(II)(特開平2−
57182号公報)、またはバチルス・サーキュランス
KsT202株由来のケラタン硫酸分解酵素(国際公開
第WO96/16166号)を作用させて分解した後、得られた分
解物を分画することにより得ることができる。得られた
オリゴ糖は通常の分離精製方法、例えば、エタノール沈
殿による濃縮、ゲル濾過および陰イオン交換クロマトグ
ラフィーによる分離精製法により、目的のオリゴ糖を分
離精製することができる。The keratan sulfate oligosaccharide may consist of a single species or may be a mixture. The keratan sulfate oligosaccharide used in the present invention may be prepared by adding an endo-β-N-acetylglucosaminidase-type keratan sulfate-degrading enzyme, for example, keratanase (II) derived from a bacterium belonging to the buffer solution of keratan sulfate, preferably highly sulfated keratan sulfate. (Japanese Unexamined Patent Application Publication No.
No. 57182) or a keratan sulfate-degrading enzyme derived from Bacillus circulans KsT202 (WO 96/16166), followed by degradation, followed by fractionation of the resulting degradation product. . The oligosaccharide obtained can be separated and purified by a usual separation and purification method, for example, concentration by ethanol precipitation, gel filtration and separation and purification by anion exchange chromatography.
【0015】本発明に用いるケラタン硫酸オリゴ糖の原
料となるケラタン硫酸は、主としてガラクトースまたは
ガラクトース−6−硫酸とN−アセチルグルコサミン−
6−硫酸と二糖の繰り返し構造で構成され、動物種およ
び器官などによって硫酸含量が異なっているが、通常は
サメなどの軟骨魚類、クジラ、ウシなどの哺乳動物の軟
骨、骨や角膜などの生原料から製造される。The keratan sulfate used as the raw material of the keratan sulfate oligosaccharide used in the present invention is mainly galactose or galactose-6-sulfate and N-acetylglucosamine-
It is composed of 6-sulfuric acid and disaccharide repeating structures, and the sulfuric acid content varies depending on animal species and organs. Usually, cartilage fish such as sharks, whales, cartilage of mammals such as cattle, bone and cornea, etc. Manufactured from raw materials.
【0016】原料として使用されるケラタン硫酸は、通
常入手できるものであればよく、特に限定されていない
が、構成糖であるガラクトース残基が硫酸化された高硫
酸化ケラタン硫酸(構成二糖あたり1.5〜2分子の硫
酸基を含む高硫酸化ケラタン硫酸をケラタンポリ硫酸と
いうこともある)を用いることが好ましい。また、ガラ
クトース残基の硫酸基の位置として、6位が好ましい。
このような高硫酸化ケラタン硫酸は、たとえば、サメな
どの軟骨魚類のプロテオグリカンから取得できる。ま
た、市販されているものを使用することもできる。The keratan sulfate used as a raw material is not particularly limited as long as it is generally available, but is not particularly limited. Highly sulfated keratan sulfate in which a galactose residue as a constituent sugar is sulfated (per constituent disaccharide) It is preferable to use a highly sulfated keratan sulfate containing 1.5 to 2 molecules of a sulfate group as keratan polysulfate). The position of the sulfate group of the galactose residue is preferably at position 6.
Such highly sulfated keratan sulfate can be obtained, for example, from proteoglycans of cartilaginous fish such as sharks. Also, commercially available products can be used.
【0017】本発明に用いられるケラタン硫酸オリゴ糖
は、電離した状態のもの、プロトンが付加した構造のも
のを包含する。また、薬学的に許容される塩とは、例え
ば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等のアルカ
リ金属塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アン
モニウム塩等の無機塩基との塩、又はジエタノールアミ
ン塩、シクロヘキシルアミン塩、アミノ酸塩等の有機塩
基との塩のうち、薬学的に許容される塩を用いることが
できるが、これらに限定されるものではない。The keratan sulfate oligosaccharide used in the present invention includes those having an ionized state and those having a structure to which a proton is added. Also, pharmaceutically acceptable salts include, for example, sodium salts, potassium salts, alkali metal salts such as lithium salts, alkaline earth metal salts such as calcium salts, salts with inorganic bases such as ammonium salts, or diethanolamine Among salts with organic bases such as salts, cyclohexylamine salts and amino acid salts, pharmaceutically acceptable salts can be used, but are not limited thereto.
【0018】上記のようにして得ることのできるケラタ
ン硫酸オリゴ糖を、後述する剤形において有効成分とし
て配合して所望の抗線維化剤とすることができる。The keratan sulfate oligosaccharide obtained as described above can be blended as an active ingredient in a dosage form described later to obtain a desired antifibrotic agent.
【0019】本発明の適用対象となる疾患は、ヒトを含
む哺乳動物の線維化を伴う疾患であり、本発明の抗線維
化剤は、これらの疾患に伴う線維化の予防薬又は進行抑
制薬として治療対象に投与することができる。この予防
薬又は進行抑制薬は、前記疾患に伴う線維化の予防、進
行防止(維持)等を目的として投与することができる。The diseases to which the present invention is applied are diseases accompanied by fibrosis in mammals including humans, and the antifibrotic agents of the present invention are used for preventing or inhibiting the progression of fibrosis associated with these diseases. Can be administered to a subject to be treated. This prophylactic or progress inhibitor can be administered for the purpose of preventing fibrosis associated with the disease, preventing (maintaining) progress, and the like.
【0020】上記疾患として、具体的には、肺線維症、
肝硬変、動脈硬化症、強皮症、経皮経管冠動脈血管拡張
術(PTCA)後の冠動脈再狭窄、間質性心筋炎、間質
性膀胱炎、糸球体腎炎、血管炎、糖尿病性腎症、高血圧
性腎硬化症、HIV腎症、IgA腎症、ループス腎症、
間質性腎炎、尿管閉塞による閉塞腎、熱傷後の皮膚はん
こん化及び中毒(パラコート中毒等)などに伴う線維症
からなる群から選ばれる1又は2以上の疾患を挙げるこ
とができる。これらの疾患の中でも肺線維症、糸球体腎
炎および血管炎に伴う線維化が、本発明抗線維化剤の適
用に特に適している。The above-mentioned diseases include, specifically, pulmonary fibrosis,
Cirrhosis, arteriosclerosis, scleroderma, coronary restenosis after percutaneous transluminal coronary vasodilation (PTCA), interstitial myocarditis, interstitial cystitis, glomerulonephritis, vasculitis, diabetic nephropathy , Hypertensive renal sclerosis, HIV nephropathy, IgA nephropathy, lupus nephropathy,
One or more diseases selected from the group consisting of interstitial nephritis, obstructed kidney due to ureteral obstruction, fibrosis associated with burned skin and poisoning (eg, paraquat poisoning) can be mentioned. Among these diseases, pulmonary fibrosis, fibrosis associated with glomerulonephritis and vasculitis are particularly suitable for application of the antifibrotic agent of the present invention.
【0021】さらに本発明抗線維化剤は、薬剤投与によ
り引き起こされる線維化に対しても有効である。線維化
を引き起こす可能性がある薬剤としては、抗腫瘍剤、抗
生剤、抗菌剤、抗不整脈剤、消炎剤、抗リウマチ剤、イ
ンターフェロン、小柴胡湯等が例示され、本発明抗線維
化剤はこれら薬剤の投与により引き起こされる線維化に
対して、より好ましく適用することができる。Furthermore, the antifibrotic agent of the present invention is also effective against fibrosis caused by drug administration. Examples of drugs that may cause fibrosis include antitumor agents, antibiotics, antibacterial agents, antiarrhythmic agents, anti-inflammatory agents, antirheumatic agents, interferons, Sho-saiko-to, and the like. It can be more preferably applied to fibrosis caused by administration of these drugs.
【0022】特に本発明抗線維化剤は、抗腫瘍剤投与に
伴う線維化の予防薬または進行抑制薬であることが好ま
しく、抗腫瘍剤投与に伴う肺線維症の予防薬または進行
抑制薬であることがより好ましい。抗腫瘍剤としてはブ
レオマイシン、メトトレキサート、プロカルバジン、メ
ルファラン、ブスルファン、マイトマイシンC、フルオ
ロウラシル、ビンカアルカロイド、アザチオプリン、サ
イトシンアラビノシド、シクロホスファミド、クロラム
ブシル、ニトロソウレア化合物、エトポシド、ジノスタ
チン等が例示される。抗腫瘍剤の中でも、抗腫瘍性抗生
物質、特にブレオマイシン投与により引き起こされる肺
線維症、特に間質性肺疾患(なかでも間質性肺炎)が、
本発明抗線維化剤の特に好ましい適用疾患である。In particular, the antifibrotic agent of the present invention is preferably a prophylactic or progress inhibitor of fibrosis associated with administration of an antitumor agent, and a prophylactic or inhibitor of progression of pulmonary fibrosis associated with administration of an antitumor agent. More preferably, there is. Examples of the antitumor agent include bleomycin, methotrexate, procarbazine, melphalan, busulfan, mitomycin C, fluorouracil, vinca alkaloid, azathioprine, cytosine arabinoside, cyclophosphamide, chlorambucil, nitrosourea compound, etoposide, dinostatin and the like. . Among antitumor agents, antitumor antibiotics, especially pulmonary fibrosis caused by administration of bleomycin, especially interstitial lung disease (among others, interstitial pneumonia)
This is a particularly preferable disease to which the antifibrotic agent of the present invention is applied.
【0023】ただし、ここに挙げた疾患名は例示であ
り、かかる例示疾患に本発明ケラタン硫酸オリゴ糖製剤
の適用範囲が限定されるべきものではない。However, the disease names listed here are examples, and the application range of the keratan sulfate oligosaccharide preparation of the present invention should not be limited to these exemplified diseases.
【0024】本発明抗線維化剤には、ケラタン硫酸オリ
ゴ糖と共に、このケラタン硫酸オリゴ糖以外の抗線維化
作用を有する物質を有効成分として配合することができ
る。The antifibrotic agent of the present invention may contain, as an active ingredient, a substance having an antifibrotic action other than the keratan sulfate oligosaccharide, together with the keratan sulfate oligosaccharide.
【0025】なお、ここにいう「ケラタン硫酸オリゴ糖
以外の抗線維化作用を有する物質」は、ケラタン硫酸オ
リゴ糖との組合せ配合又は組合せ投与により、重篤な副
作用が惹起されたり、一方の物質が他方の物質の本来有
する抗線維化作用を阻害したりしない限りにおいて特に
限定されない。The “substance having an anti-fibrotic action other than keratan sulfate oligosaccharide” as used herein means that serious side effects are caused by combination or administration of the substance with keratan sulfate oligosaccharide, Is not particularly limited as long as it does not inhibit the intrinsic antifibrotic action of the other substance.
【0026】また、本発明抗線維化剤に、抗炎症剤を組
み合わせて配合したり、本発明抗線維化剤に抗炎症剤を
組合わせて投与したりすることも可能である。適用可能
な抗炎症剤としては例えばプレドニゾロン等のステロイ
ド剤、あるいはスーパーオキサイド・ディスムターゼ等
の抗炎症性酵素等が挙げられるが、これらに限定される
べきものではない。It is also possible to combine the anti-fibrotic agent of the present invention with an anti-inflammatory agent, or to administer the anti-fibrotic agent of the present invention in combination with an anti-inflammatory agent. Applicable anti-inflammatory agents include, for example, steroids such as prednisolone, and anti-inflammatory enzymes such as superoxide dismutase, but are not limited thereto.
【0027】また、本発明抗線維化剤は、薬剤投与によ
り引き起こされる線維化に対して有効であることから、
本発明抗線維化剤に、線維化を引き起こす可能性のある
薬剤(例えば前述の薬剤)を組み合わせて配合したり、
本発明抗線維化剤に、線維化を引き起こす可能性のある
薬剤(例えば前述の薬剤)を組み合わせて投与したりす
ることも可能である。もちろん、線維化を引き起こす可
能性のある薬剤(例えば前述の薬剤)を投与する前に、
予め本発明抗線維化剤を投与しておくこともできる。The antifibrotic agent of the present invention is effective against fibrosis caused by drug administration,
The anti-fibrotic agent of the present invention may be combined with a drug that may cause fibrosis (for example, the aforementioned drugs),
It is also possible to administer the anti-fibrotic agent of the present invention in combination with an agent that may cause fibrosis (for example, the aforementioned agents). Of course, before administering drugs that can cause fibrosis (for example, the drugs mentioned above),
The antifibrotic agent of the present invention can be administered in advance.
【0028】本発明においては、対象となる疾患の性質
や進行状況、投与方法などに応じて、任意の剤形を本発
明抗線維化剤の剤形として適宜選択することができる。In the present invention, any dosage form can be appropriately selected as the dosage form of the antifibrotic agent of the present invention, depending on the nature, progress, administration method, etc. of the target disease.
【0029】すなわち、本発明抗線維化剤は注射(静脈
内、筋肉内、皮下、皮内、腹腔内等)、経口、経皮、吸
入などにより投与することができ、これらの投与方法に
応じて適宜製剤化することができる。That is, the antifibrotic agent of the present invention can be administered by injection (intravenous, intramuscular, subcutaneous, intradermal, intraperitoneal, etc.), oral, transdermal, inhalation, etc., depending on the administration method. Can be formulated as appropriate.
【0030】選択し得る剤形も特に限定されず、例えば
注射剤(溶液、懸濁液、乳濁液、用時溶解用固形剤
等)、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、リポ化
剤、軟膏剤、ゲル剤、外用散剤、スプレー剤、吸入散剤
等から広く選択することができる。また、これらの製剤
調製にあたり、慣用の賦形剤、安定化剤、結合剤、滑沢
剤、乳化剤、浸透圧調整剤、pH調整剤、その他着色剤、
崩壊剤等、通常医薬に用いられる成分を使用することが
できる。The dosage form that can be selected is not particularly limited. For example, injection preparations (solutions, suspensions, emulsions, solid preparations for dissolution, etc.), tablets, capsules, granules, powders, liquids, liposomes It can be widely selected from agents, ointments, gels, external powders, sprays, inhalation powders and the like. In addition, in preparing these formulations, conventional excipients, stabilizers, binders, lubricants, emulsifiers, osmotic pressure regulators, pH regulators, other colorants,
Components usually used in medicines such as disintegrants can be used.
【0031】本発明抗線維化剤中の有効成分であるケラ
タン硫酸オリゴ糖の配合量並びに本発明抗線維化剤の投
与量は、その製剤の投与方法、投与形態、使用目的、患
者の具体的症状、患者の体重等に応じて個別的に決定さ
れるべき事項であり、特に限定はされないが、ケラタン
硫酸オリゴ糖の臨床投与量として1日当り概ね300〜
1500mg/ヒト/日、程度である。また、上記製剤
の投与間隔は1日1回程度でも可能であり、1日2〜3
回に分けて投与することもできる。The amount of the keratan sulfate oligosaccharide which is an active ingredient in the antifibrotic agent of the present invention and the dosage of the antifibrotic agent of the present invention are determined by the method of administration of the preparation, the dosage form, the purpose of use and the specific patient It is a matter to be determined individually according to symptoms, patient weight, and the like, and is not particularly limited. However, the clinical dose of keratan sulfate oligosaccharide is generally about 300 to 300 per day.
1500 mg / human / day. In addition, the administration interval of the above preparation can be about once a day,
It can also be administered in divided doses.
【0032】[0032]
【実施例】以下に、本発明を試験例及び製剤例によって
具体的に説明する。しかしながら、これらにより本発明
の技術的範囲が限定されるべきものではない。The present invention will be described below in more detail with reference to Test Examples and Formulation Examples. However, these should not limit the technical scope of the present invention.
【0033】[0033]
【試験例1】ブレオマイシン惹起マウス肺線維症(間質
性肺炎)モデルに対する効果の検討 本薬効薬理試験例1においてはケラタン硫酸オリゴ糖と
して式(I)で表されるケラタン硫酸四糖(以下、L4
L4という)あるいは式(II)で表されるケラタン硫酸
二糖(以下、L4という)のナトリウム塩の溶液を使用
した。このL4L4の溶液の性状は、無色の透明な水溶
液であり、pHは約6〜7、蒸留水に対する浸透圧比は
約1であった。また、このL4の溶液の性状は無色の透
明な水溶液であり、pHは約6〜7、生理食塩水に対す
る浸透圧比は約1であった。[Test Example 1] Examination of effect on bleomycin-induced mouse pulmonary fibrosis (interstitial pneumonia) model In pharmacological test example 1 of the present drug, keratan sulfate tetrasaccharide (hereinafter, referred to as formula (I)) as a keratan sulfate oligosaccharide is used. L4
A solution of a sodium salt of keratan sulfate disaccharide (hereinafter, referred to as L4) represented by the formula (II) was used. The properties of this L4L4 solution were a colorless and transparent aqueous solution, the pH was about 6 to 7, and the osmotic pressure ratio to distilled water was about 1. The L4 solution was a colorless and transparent aqueous solution, the pH was about 6 to 7, and the osmotic pressure ratio to physiological saline was about 1.
【0034】<実験方法>6週齢のICR系雄性マウス
にブレオマイシンを150mg/kg、単回静脈内に投
与することによりモデルを作製した。L4L4あるいは
L4の溶液をブレオマイシン投与翌日から13日間連
日、筋肉内に1、5および25mg/kgの用量で投与
した(各群12〜15匹ずつ)。ブレオマイシン投与後
2週に解剖し、右肺に対して生理食塩液で3回、気管支
肺胞洗浄を行い、気管支肺胞洗浄液(BALF)を得
た。評価項目は気管支肺胞洗浄液中の総細胞数および総
蛋白質量(蛋白量)、右肺のヒドロキシプロリン量(コ
ラーゲン量に相当)、左肺の湿重量および肺線維化スコ
ア(病理組織所見)とした。尚、蛋白量は BCA Protein
Assayキット(PIERCE製)により、ヒドロキシプロリン
量は Woessnerらの方法(Woessner, L.F., 1961, Arch.
Biochem. Biophys., 93: 440-447)により測定した。
また、肺線維化スコアは浴本らの方法(浴本久雄、高橋
克俊、松田明、梅沢浜夫, 1983, 癌と化学療法, 10:255
0-2557)により測定した。<Experimental Method> A model was prepared by injecting bleomycin at a dose of 150 mg / kg intravenously once into 6-week-old male ICR mice. L4 L4 or a solution of L4 was intramuscularly administered at doses of 1, 5, and 25 mg / kg for 13 consecutive days from the day after bleomycin administration (12 to 15 mice per group). Two weeks after the administration of bleomycin, the right lung was subjected to bronchoalveolar lavage three times with physiological saline to obtain a bronchoalveolar lavage fluid (BALF). The evaluation items were the total number of cells and total protein (protein amount) in the bronchoalveolar lavage fluid, the amount of hydroxyproline in the right lung (corresponding to the amount of collagen), the wet weight of the left lung and the lung fibrosis score (pathological findings). did. The amount of protein is BCA Protein
Using an Assay kit (manufactured by PIERCE), the amount of hydroxyproline was determined by the method of Woessner et al. (Woessner, LF, 1961, Arch.
Biochem. Biophys., 93: 440-447).
The lung fibrosis score was determined by the method of Yumoto et al. (Hisao Yumoto, Katsutoshi Takahashi, Akira Matsuda, Hamao Umezawa, 1983, Cancer and Chemotherapy, 10: 255
0-2557).
【0035】<結果> (1)L4L4の効果 肺湿重量は25mg/kg投与で有意な抑制効果が認め
られた(図1)。気管支肺胞洗浄液中の総細胞数は5お
よび25mg/kg投与で有意な抑制効果が認められた
(図2)。気管支肺胞洗浄液中の蛋白量は25mg/k
g投与で低値を示した(図3)。ヒドロキシプロリン量
および肺線維化スコアは25mg/kg投与で有意な抑
制効果が認められた(図4,5)。このことからL4L
4には抗線維化作用があることが示された。<Results> (1) Effect of L4L4 A significant suppression effect on lung wet weight was observed at 25 mg / kg administration (FIG. 1). The total number of cells in the bronchoalveolar lavage fluid was significantly suppressed by administration of 5 and 25 mg / kg (FIG. 2). Protein content in bronchoalveolar lavage fluid is 25 mg / k
g showed a low value (Fig. 3). The hydroxyproline amount and the pulmonary fibrosis score were significantly inhibited by the administration of 25 mg / kg (FIGS. 4 and 5). From this, L4L
No. 4 was shown to have an antifibrotic effect.
【0036】(2)L4の効果 肺湿重量は25mg/kg投与で低値を示した(図
6)。気管支肺胞洗浄液中の総細胞数は1、5および2
5mg/kg投与で有意な抑制効果が認められた(図
7)。気管支肺胞洗浄液中の蛋白量は25mg/kg投
与で低値を示した(図8)。ヒドロキシプロリン量およ
び肺線維化スコアは25mg/kg投与で低値を示した
(図9,10)。このことからL4には抗線維化作用が
あることが示された。(2) Effect of L4 Lung wet weight showed a low value at 25 mg / kg administration (FIG. 6). The total number of cells in bronchoalveolar lavage fluid was 1, 5 and 2
A significant inhibitory effect was observed at 5 mg / kg administration (FIG. 7). The amount of protein in the bronchoalveolar lavage fluid showed a low value at 25 mg / kg administration (FIG. 8). The hydroxyproline amount and pulmonary fibrosis score showed low values at 25 mg / kg administration (FIGS. 9 and 10). This indicated that L4 has an antifibrotic effect.
【0037】尚、図1〜9中、*はDunnettの多重比較検
定において対照に対してp<0.05の水準で有意であること
を示し、**はp<0.01の水準で有意であることを示す。In FIGS. 1 to 9, * indicates that the value was significant at the level of p <0.05 relative to the control in Dunnett's multiple comparison test, and ** indicates that the level was significant at the level of p <0.01. Show.
【0038】[0038]
【試験例2】MRLマウスにおける糸球体腎炎及び血管
炎に対する効果の検討 本薬効薬理試験例2においてはケラタン硫酸オリゴ糖と
して式(II)で表されるケラタン硫酸二糖(以下、L4
という)のナトリウム塩の溶液を使用した。このL4の
溶液の性状は無色の透明な水溶液であり、pHは約6〜
7、生理食塩水に対する浸透圧比は約1であった。[Test Example 2] Examination of effects on glomerulonephritis and vasculitis in MRL mice In pharmacological test example 2 of the present drug, keratan sulfate disaccharide (hereinafter referred to as L4) represented by formula (II) as keratan sulfate oligosaccharide
) Was used. This L4 solution is a colorless and transparent aqueous solution and has a pH of about 6 to
7. The osmotic pressure ratio to physiological saline was about 1.
【0039】<実験方法>10週齢の雄性MRL(lpr/l
pr)マウス(Izui S.,et al., Mechanism of genetic con
trol of murine systemic lupus erythematosus., In S
ystemic Lupus Erythematosus, pp.3-12, Ed. Peter A.
Miescher, Springer-Verlag Berlin, 1995)を用い、ま
た対照としては雄性C57BL/6系マウスを使用し
た。マウスの群構成を以下に示す。なお、群分けは原則
として試験物質の投与開始前日に行った。予備飼育期間
中に眼窩静脈叢より採血を行い、血中クレアチニン(CR
E)及び血中尿素窒素(BUN)を指標として、各群の平均値
及び標準偏差が群間で差がないように割り付けた。また
標準偏差についてもなるべく小さくなるように設定し
た。<Experimental method> A 10-week-old male MRL (lpr / l
pr) mouse (Izui S., et al., Mechanism of genetic con
trol of murine systemic lupus erythematosus., In S
ystemic Lupus Erythematosus, pp.3-12, Ed.Peter A.
Miescher, Springer-Verlag Berlin, 1995), and male C57BL / 6 mice were used as a control. The group composition of the mice is shown below. The grouping was performed on the day before the administration of the test substance in principle. Blood was collected from the orbital venous plexus during the pre-breeding period, and blood creatinine (CR
Using E) and blood urea nitrogen (BUN) as indexes, the average value and standard deviation of each group were assigned so that there was no difference between the groups. The standard deviation was set to be as small as possible.
【0040】[0040]
【表1】 ──────────────────────────────────── 群番号 試験物質 マウス L4投与量 L4投与濃度 L4投与液量 マウス数 (mg/kg) (mg/ml) (ml/kg) 雄 ──────────────────────────────────── 1 PBS MRL − − 2.5 7 2 L4 MRL 2.5 1 2.5 7 3 L4 MRL 5 2 2.5 7 4 L4 MRL 10 4 2.5 7 5 無処理 C57BL/6 − − − 5 ──────────────────────────────────── PBSはリン酸緩衝生理食塩液を示す。[Table 1] 群 Group No. Test substance Mouse L4 dose L4 dose Concentration L4 dose Number of mice (mg / kg) (mg / ml) (ml / kg) Male ─────────────────────────── 1 1 PBS MRL--2.5 7 2 L4 MRL 2.5 1 2.5 73 3 L4 MRL 5 2 2.5 74 4 L4 MRL 10 4 2.5 75 5 No treatment C57BL / 6----5- ───────────────────────────────── PBS indicates phosphate buffered saline.
【0041】試験物質のPBS溶液を、11〜16週齢
の間の35日間連日、筋肉内に投与した。投与期間終了
後に後大動脈から採血した。採取した血液を臨床化学自
動分析装置(COBAS MIRA S;日本ロシュ販売)に付し、CR
Eを測定した。A PBS solution of the test substance was administered intramuscularly for 35 consecutive days between 11 and 16 weeks of age. After the end of the administration period, blood was collected from the posterior aorta. The collected blood was applied to an automatic clinical chemistry analyzer (COBAS MIRA S; sold by Roche Japan), and CR
E was measured.
【0042】また、上記と同様の群構成(各群12匹の
マウス)で上記と同様に投与を行い、投与期間終了後に
腎臓を摘出し、糸球体及び腎動脈について病理組織学的
検査を行った。In the same group composition as above (12 mice in each group), administration was carried out in the same manner as described above. After the administration period, the kidney was excised, and histopathological examination was performed on glomeruli and renal arteries. Was.
【0043】糸球体は、(1)ごく軽度の係蹄の肥厚や細
胞増殖がみられるのみで、WHOの分類で微小変化群(Mini
mal change;MC)というタイプに分類されると判断さ
れる糸球体像と、(2)ボウマン嚢腔や血管腔がほぼ完全
に消失し、糸球体が細胞成分や沈着物にうめつくされ、
その機能が廃絶されていると推定される糸球体像〔WHO
の分類で、び慢性糸球体腎炎(Diffuse Glomerulonephri
tis)の増殖性糸球体腎炎(Proliferative Glomeruloneph
ritis)に相当する糸球体像;DP〕とに分けられた。M
CとDPを示す糸球体の数をそれぞれカウントし、それ
ぞれのカウント数を全糸球体数で割ることにより、これ
らの出現率(%)を算出した。The glomeruli were: (1) Only a slight increase in snare thickening and cell proliferation was observed, and the microscopic change group (Mini
mal change (MC) and the glomerular image determined to be classified as type (MC), and (2) the Bowman's capsule and vascular cavity almost completely disappear, and the glomerulus is buried in cellular components and deposits,
Glomerular image whose function is presumed to be abolished (WHO
Classification of diffuse glomerulonephritis (Diffuse Glomerulonephri
tis) Proliferative Glomeruloneph
ritis); DP]. M
The number of glomeruli showing C and DP was counted, and the appearance rate (%) was calculated by dividing each count by the total number of glomeruli.
【0044】図11に、正常な糸球体像(左上)、MCの
糸球体像(右上)及びDPの糸球体像(左下)を示す
(生物の形態を示す写真。写真倍率:×500。各写真
の右下の横棒(Bar)は10μmを示す)。FIG. 11 shows a normal glomerular image (upper left), a glomerular image of MC (upper right), and a glomerular image of DP (lower left) (a photograph showing the form of an organism. Photo magnification: × 500. The bar at the bottom right of the photograph indicates 10 μm).
【0045】図11より、糸球体の病変は、MCから徐
々にボウマン嚢腔や血管腔が単球やメサンギウム細胞の
増殖、フィブリンおよび免疫複合体の沈着等により消失
した状態、すなわちDPに移行していくものと考えられ
る。すなわちDPよりもMCの方が正常に近く、またM
CよりもDPの方が糸球体腎炎に伴う線維化が進んでい
ることがわかる。As shown in FIG. 11, glomerular lesions gradually shift from MC to DP in which the Bowman's capsule and vascular lumen disappeared due to the proliferation of monocytes and mesangial cells, the deposition of fibrin and immune complexes, and the like. It is thought that it goes. That is, MC is closer to normal than DP, and M
It turns out that fibrosis accompanying glomerulonephritis is more advanced in DP than in C.
【0046】腎動脈は、組織像を下記のグレード1〜4
に段階づけ、それぞれの出現数をカウントした。グレー
ド1〜4のそれぞれの組織像を図12に示す(生物の形
態を示す写真。写真倍率:×204。各写真の右下の横
棒(Bar)は50μmを示す)。The renal arteries are classified into the following grades 1 to 4
And the number of occurrences of each was counted. The histological image of each of Grades 1 to 4 is shown in FIG. 12 (photograph showing the morphology of the organism. Photo magnification: × 204. The bar at the lower right of each photograph indicates 50 μm).
【0047】グレード1:ほぼ正常な腎動脈像(左上) グレード2:血管周囲における炎症性細胞浸潤が見られ
る(右上) グレード3:血管周囲における炎症性細胞浸潤および外
膜〜中膜の破綻(空胞変性およびフィブリン沈着)が見
られる(左下) グレード4:血管周囲における炎症性細胞浸潤、外膜〜
中膜の破綻(空胞変性、フィブリン沈着および平滑筋細
胞の増生)および内膜〜中膜における炎症性細胞浸潤が
見られる(右下)Grade 1: almost normal renal artery image (upper left) Grade 2: inflammatory cell infiltration around blood vessels (upper right) Grade 3: inflammatory cell infiltration around blood vessels and disruption of adventitia-media ( Vacuolar degeneration and fibrin deposition) (lower left) Grade 4: Inflammatory cell infiltration around blood vessels, adventitia
Medial rupture (vacuolar degeneration, fibrin deposition and smooth muscle cell proliferation) and inflammatory cell infiltration in the intima-media (lower right)
【0048】グレード1が最も正常に近く、グレード4
が最も血管炎に伴う線維化が進んでいることを示してい
る。Grade 1 is most normal and grade 4
Indicates that fibrosis associated with vasculitis is most advanced.
【0049】<結果>血中クレアチニン(CRE)濃度は、
いずれのL4投与群(群番号2〜4)においても有意な低
下が認められた(図13)。このことから、L4投与に
よって腎機能が回復傾向にあることが示され、線維化が
抑制されていることが示唆された。<Results> The blood creatinine (CRE) concentration was
A significant decrease was observed in all L4 administration groups (group numbers 2 to 4) (FIG. 13). This indicates that L4 administration tends to restore renal function, suggesting that fibrosis is suppressed.
【0050】糸球体におけるMCの出現率は、いずれのL
4投与群(群番号2〜4)においてもPBS投与群(群番
号1)に比べて増加していた(図14)。また糸球体に
おけるDPの出現率は、いずれのL4投与群(群番号2〜
4)においてもPBS投与群(群番号1)に比べて低下し
ており、特にL4の10mg/kg投与群(群番号4)では有意
な低下が認められた(図15)。これらのことから、L
4には抗線維化作用があることが示された。The appearance rate of MC in the glomerulus
In the four administration groups (Group Nos. 2 to 4), the number was increased as compared with the PBS administration group (Group No. 1) (FIG. 14). In addition, the appearance rate of DP in glomeruli was determined for all L4 administration groups (group numbers 2 to
4) also decreased as compared with the PBS administration group (Group No. 1), and a significant decrease was observed particularly in the L4 10 mg / kg administration group (Group No. 4) (FIG. 15). From these, L
No. 4 was shown to have an antifibrotic effect.
【0051】また、腎動脈における組織像について、特
にL4の5mg/ml投与群(群番号3)及び10mg/ml投与群
(群番号4)においてグレード4が顕著に減少しており、
より正常に近い組織像が観察された(図16)。このこ
とからも、L4には抗線維化作用があることが示され
た。The histological images in the renal artery were observed, particularly in the L4 5 mg / ml administration group (Group No. 3) and the 10 mg / ml administration group.
(Group No. 4) markedly reduced grade 4;
A more normal tissue image was observed (FIG. 16). This also indicates that L4 has an antifibrotic effect.
【0052】尚、図13中、*はWilliamsの多重比較検
定においてp<0.05の水準で有意であることを示し、**は
p<0.01の水準で有意であることを示す。また、図15
中、*はBonferroniの多重比較検定においてp<0.05の水
準で有意であることを示す。In FIG. 13, * indicates that the significance was at the level of p <0.05 in the Williams multiple comparison test, and ** indicates
Significance is shown at the level of p <0.01. FIG.
In the figure, * indicates that the significance was at the level of p <0.05 in Bonferroni's multiple comparison test.
【0053】[0053]
【試験例3】自然発症糖尿病マウス(db/db)における
糖尿病性腎症に対する効果の検討 本薬効薬理試験例3においては、ケラタン硫酸オリゴ糖
としてL4のナトリウム塩を用いた。L4のナトリウム
塩を6%となるように注射用蒸留水で溶解後、生理食塩
液で所定の濃度に溶解して用いた。また陽性対照として
は、カプトプリル(ACE阻害薬;三共株式会社)を用い
た。カプトプリルを所定の濃度となるように注射用蒸留
水に溶解して用いた。[Test Example 3] Investigation of effect on diabetic nephropathy in spontaneously diabetic mice (db / db) In pharmacological test example 3 of the present invention, the sodium salt of L4 was used as a keratan sulfate oligosaccharide. The sodium salt of L4 was dissolved in distilled water for injection to a concentration of 6%, and then dissolved in physiological saline to a predetermined concentration before use. Captopril (ACE inhibitor; Sankyo Co., Ltd.) was used as a positive control. Captopril was dissolved in distilled water for injection to a predetermined concentration and used.
【0054】<実験方法>糖尿病を発症し、かつ24時
間中に排泄される尿中アルフ゛ミン量が2700〜6000μg以上で
あるC57BL(db/db)マウス(34週齢の雌性マウ
ス)を実験に用いた。また、正常群として健康なC57
BLマウス(10週齢の雌性マウス)を用いた。マウス
の群構成を以下に示す。<Experimental Method> C57BL (db / db) mice (34-week-old female mice) which develop diabetes and whose urinary albumin excreted in 24 hours is 2700-6000 μg or more are used for the experiments. Was. In addition, C57 which is healthy as a normal group
BL mice (10 week old female mice) were used. The group composition of the mice is shown below.
【0055】[0055]
【表2】 ──────────────────────────────────── 群名 試験物質 投与量 投与方法 マウス数 (物質量/液量/体重) 雌 ──────────────────────────────────── 対照群 生理食塩液 2ml/kg 背部皮下 10 L4投与群 L4 5mg/2ml/kg 背部皮下 10 L4投与群 L4 10mg/2ml/kg 背部皮下 10 L4投与群 L4 20mg/2ml/kg 背部皮下 10 陽性対照群 カプトプリル 3mg/10ml/kg 経口 10 正常群 − − − 10 ────────────────────────────────────[Table 2] Group name Test substance Dosage Administration method Number of mice (Substance / fluid / body weight) Female ──────────────────────────────────── Control group Physiological saline Liquid 2ml / kg back subcutaneous 10 L4 administration group L4 5mg / 2ml / kg back subcutaneous 10 L4 administration group L4 10mg / 2ml / kg back subcutaneous 10 L4 administration group L4 20mg / 2ml / kg back subcutaneous 10 positive control group captopril 3mg / 10ml / kg Oral 10 Normal group---10 ────────────────────────────────────
【0056】各試験物質をブラインドにて週6回、8週
間、背部皮下に投与した。なお陽性対照群には、カプト
プリルを同様に週6回、8週間、経口投与した。Each test substance was administered subcutaneously in the back six times a week for 8 weeks in a blind. To the positive control group, captopril was similarly orally administered 6 times a week for 8 weeks.
【0057】群分け時および薬物投与開始後2週間毎
に、代謝ケ−ジにて尿を24時間蓄尿し、尿量を測定
後、尿中アルブミン濃度をマイクロアルブミンHAテス
トワコー(和光純薬)にて測定し、尿中アルブミン濃度
と尿量より24時間中に排泄された尿中アルブミン量を
算出した。結果を図17に示す。At the time of grouping and every two weeks after the start of drug administration, urine is stored in a metabolic cage for 24 hours, and after measuring the urine volume, the albumin concentration in urine is measured by microalbumin HA Test Wako (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). The amount of urinary albumin excreted during 24 hours was calculated from the urinary albumin concentration and urine volume. The results are shown in FIG.
【0058】また、薬物投与8週間後には尿中クレアチ
ニン量を臨床化学自動分析装置(COBAS MIRA S;日本ロ
シュ販売)により測定し、尿中アルブミン量と尿中クレ
アチニン量との比を算出した。結果を図18に示す。Eight weeks after the administration of the drug, the urinary creatinine level was measured by an automatic clinical chemistry analyzer (COBAS MIRAS; sold by Nippon Roche), and the ratio between the urinary albumin level and the urine creatinine level was calculated. The results are shown in FIG.
【0059】尚、図17および18中、*はDunnettの多
重比較検定において対照に対してp<0.05の水準で有意で
あることを示し、**はp<0.01の水準で有意であることを
示す。In FIGS. 17 and 18, * indicates that the value was significant at the level of p <0.05 with respect to the control in Dunnett's multiple comparison test, and ** indicates that the value was significant at the level of p <0.01. Show.
【0060】<結果>対照群では尿中アルブミンの明ら
かな増加が認められ、また、対照群では経時的に排泄さ
れるアルブミン量が増加していることが明らかとなった
(図17)。<Results> A clear increase in urinary albumin was observed in the control group, and the amount of albumin excreted with time was increased in the control group (FIG. 17).
【0061】L4投与群では投与後2週より値は減少し
始め、それ以降は全群で対照群より低値を示した。L4
20mg/kg群の4週および8週後において有意な抑制効果
が認められた。In the L4 administration group, the value began to decrease from 2 weeks after administration, and thereafter, in all groups, the value was lower than that in the control group. L4
A significant inhibitory effect was observed after 4 weeks and 8 weeks in the 20 mg / kg group.
【0062】陽性対照群では投与後4週より値は減少し
始め、それ以降は有意ではないが低値を示した(図1
7)。In the positive control group, the value began to decrease from 4 weeks after administration, and thereafter showed a low value, although not significant (FIG. 1).
7).
【0063】投与後8週における尿中アルブミン量/尿
中クレアチニン量の比では、対照群に比べてL4投与群
では全群で低値を示し、L4 20mg/kg群で有意な抑制が
認められた。陽性対照群においても対照群と比較して有
意な抑制効果が認められた(図18)。The ratio of urinary albumin / urine creatinine at 8 weeks after administration was lower in all groups in the L4 administration group than in the control group, and significant inhibition was observed in the L4 20 mg / kg group. Was. A significant inhibitory effect was also observed in the positive control group as compared to the control group (FIG. 18).
【0064】糖尿病性腎症の場合、一般に尿中アルブミ
ンはその病態に従い、徐々に増加していくことが明らか
となっている。今回のモデルにおいても同様に、尿中ア
ルブミンの経時的な増加が認められ、病態の進行が徐々
に進んでいることが分かる。L4は、アルブミンの尿中
排泄を速やかに抑制し、改善した。L4の抑制効果が、
陽性対照投与群より早期に発現したことより、ACE阻
害薬と比較してL4の方が有用である可能性が示唆され
た。In the case of diabetic nephropathy, it has been found that urinary albumin generally gradually increases in accordance with the disease state. Similarly, in the present model, a time-dependent increase in urinary albumin was observed, indicating that the progress of the disease state was gradually progressing. L4 rapidly suppressed and improved urinary excretion of albumin. The suppression effect of L4
The expression earlier than in the positive control administration group suggested that L4 might be more useful than the ACE inhibitor.
【0065】[0065]
【製剤例】(1)注射剤 常法により、リン酸塩でpH6.8〜7.6に調整した
生理食塩液に、L4を10mg/mlの終濃度で溶解し、こ
れを無菌濾過した後、1mlずつバイアルに分注し密封し
て注射剤を製造した。[Formulation Examples] (1) Injection L4 was dissolved at a final concentration of 10 mg / ml in a physiological saline solution adjusted to pH 6.8 to 7.6 with phosphate according to a conventional method, and the solution was subjected to aseptic filtration. Each 1 ml was dispensed into a vial and sealed to produce an injection.
【0066】(2)軟膏剤 日本薬局方親水軟膏にL4L4を10mg/mlの終濃度で
溶解し、軟膏剤を製造した。(2) Ointment L4L4 was dissolved at a final concentration of 10 mg / ml in a hydrophilic ointment of the Japanese Pharmacopoeia to prepare an ointment.
【0067】(3)スプレー剤 常法により、リン酸塩でpH6.8〜7.6に調整した
生理食塩液に、L4を10mg/mlの終濃度で溶解し、こ
れを無菌濾過した後、1mlずつバイアルに分注し密封し
てスプレー剤を製造した。(3) Spraying agent L4 was dissolved at a final concentration of 10 mg / ml in a physiological saline solution adjusted to pH 6.8 to 7.6 with a phosphate according to a conventional method. 1 ml was dispensed into vials and sealed to produce a spray.
【0068】[0068]
【発明の効果】本発明により、線維化の予防、または進
行を抑制する医薬品、すなわち抗線維化剤が提供され
る。本発明抗線維化剤は、特に薬剤投与により引き起こ
される線維化に対して有効であることから、薬剤投与に
よる副作用の防止・抑制剤としても用いることができ
る。Industrial Applicability According to the present invention, there is provided a pharmaceutical agent for preventing or suppressing the progress of fibrosis, that is, an anti-fibrotic agent. Since the antifibrotic agent of the present invention is particularly effective for fibrosis caused by drug administration, it can also be used as an agent for preventing / suppressing side effects due to drug administration.
【図1】種々の用量でケラタン硫酸四糖(L4L4)を
投与したマウスの肺湿重量を示す。FIG. 1 shows the wet lung weight of mice that received keratan sulfate tetrasaccharide (L4L4) at various doses.
【図2】種々の用量でケラタン硫酸四糖を投与したマウ
スの気管支肺胞洗浄液(BALF)中の総細胞数を示
す。FIG. 2 shows the total number of cells in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of mice that received keratan sulfate tetrasaccharide at various doses.
【図3】種々の用量でケラタン硫酸四糖を投与したマウ
スの気管支肺胞洗浄液中の蛋白量を示す。FIG. 3 shows the amount of protein in bronchoalveolar lavage fluid of mice to which keratan sulfate tetrasaccharide was administered at various doses.
【図4】種々の用量でケラタン硫酸四糖を投与したマウ
スの肺のヒドロキシプロリン量を示す。FIG. 4 shows the amount of hydroxyproline in the lungs of mice to which keratan sulfate tetrasaccharide was administered at various doses.
【図5】種々の用量でケラタン硫酸四糖を投与したマウ
スの肺の肺線維化スコアを示す。FIG. 5 shows pulmonary fibrosis scores of the lungs of mice administered with keratan sulfate tetrasaccharide at various doses.
【図6】種々の用量でケラタン硫酸二糖(L4)を投与
したマウスの肺の肺湿重量を示す。FIG. 6 shows the lung wet weight of the lungs of mice administered keratan sulfate disaccharide (L4) at various doses.
【図7】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマウ
スの気管支肺胞洗浄液中の総細胞数を示す。FIG. 7 shows the total number of cells in bronchoalveolar lavage fluid of mice that received keratan sulfate disaccharide at various doses.
【図8】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマウ
スの気管支肺胞洗浄液中の蛋白量を示す。FIG. 8 shows the amount of protein in bronchoalveolar lavage fluid of mice to which keratan sulfate disaccharide was administered at various doses.
【図9】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマウ
スの気管支肺胞洗浄液中の蛋白量を示す。FIG. 9 shows the amount of protein in bronchoalveolar lavage fluid of mice to which keratan sulfate disaccharide was administered at various doses.
【図10】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの肺の肺線維化スコアを示す。FIG. 10 shows pulmonary fibrosis scores of the lungs of mice administered with keratan sulfate disaccharide at various doses.
【図11】糸球体における正常組織像(N)、微小変化(M
inimal change)組織像(MC)及びび慢増殖(Diffuse pro
liferative)組織像(DP)を示す(生物の形態を示す
写真)。FIG. 11 shows normal tissue images (N) and minute changes (M
inimal change) Histology (MC) and Diffuse proliferation (Diffuse pro
liferative) shows a histological image (DP) (photograph showing the form of an organism).
【図12】腎動脈におけるグレード1〜4の組織像を示
す(生物の形態を示す写真)。FIG. 12 shows histological images of grades 1 to 4 in the renal artery (photographs showing morphology of an organism).
【図13】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの血清クレアチニン濃度を示す。FIG. 13 shows serum creatinine concentrations in mice administered keratan sulfate disaccharide at various doses.
【図14】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの糸球体における、MCの出現率を示す。FIG. 14 shows the incidence of MC in glomeruli of mice to which keratan sulfate disaccharide was administered at various doses.
【図15】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの糸球体における、DPの出現率を示す。FIG. 15 shows the appearance rate of DP in glomeruli of mice to which keratan sulfate disaccharide was administered at various doses.
【図16】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの腎動脈における、組織像のグレードの変化を示
す。FIG. 16 shows changes in histological grade in renal arteries of mice to which keratan sulfate disaccharide was administered at various doses.
【図17】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの尿中アルブミン量を示す。FIG. 17 shows urinary albumin levels of mice to which keratan sulfate disaccharide was administered at various doses.
【図18】種々の用量でケラタン硫酸二糖を投与したマ
ウスの尿中クレアチニン量に対する尿中アルブミン量の
比を示す。FIG. 18 shows the ratio of urinary albumin to urinary creatinine in mice administered with keratan sulfate disaccharide at various doses.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 FI A61K 31/00 613 A61K 31/00 613 617 617 617G // C07H 11/00 C07H 11/00 ────────────────────────────────────────────────── ─── Continued on the front page (51) Int.Cl. 6 Identification code FI A61K 31/00 613 A61K 31/00 613 617 617 617G // C07H 11/00 C07H 11/00
Claims (7)
に許容される塩を有効成分とする抗線維化剤。1. An antifibrotic agent comprising keratan sulfate oligosaccharide or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
る、請求項1記載の抗線維化剤。2. The anti-fibrotic agent according to claim 1, which is a prophylactic or progress inhibitor of fibrosis.
症、経皮経管冠動脈血管拡張術後の冠動脈再狭窄、間質
性心筋炎、間質性膀胱炎、糸球体腎炎、血管炎、糖尿病
性腎症、高血圧性腎硬化症、HIV腎症、IgA腎症、
ループス腎症、間質性腎炎、尿管閉塞による閉塞腎、熱
傷後の皮膚はんこん化及び中毒からなる群から選ばれる
1又は2以上の疾患に伴う線維化の予防薬または進行抑
制薬である、請求項2記載の抗線維化剤。3. Pulmonary fibrosis, cirrhosis, arteriosclerosis, scleroderma, coronary restenosis after percutaneous transluminal coronary vasodilation, interstitial myocarditis, interstitial cystitis, glomerulonephritis, vascular Inflammation, diabetic nephropathy, hypertensive renal sclerosis, HIV nephropathy, IgA nephropathy,
Lupus nephropathy, interstitial nephritis, obstructed kidney due to ureteral obstruction, a preventive or progress inhibitor of fibrosis associated with one or more diseases selected from the group consisting of skin erosion and poisoning after burn, The anti-fibrotic agent according to claim 2.
る線維化である、請求項1〜3のいずれか1項記載の抗
線維化剤。4. The antifibrotic agent according to claim 1, wherein the fibrosis is fibrosis caused by administration of a drug.
不整脈剤、消炎剤、抗リウマチ剤、インターフェロン又
は小柴胡湯である、請求項4記載の抗線維化剤。5. The antifibrotic agent according to claim 4, wherein the drug is an antitumor agent, an antibiotic, an antibacterial agent, an antiarrhythmic agent, an anti-inflammatory agent, an antirheumatic agent, interferon or Shosaikoto.
たは進行抑制薬である、請求項4記載の抗線維化剤。6. The anti-fibrotic agent according to claim 4, which is a prophylactic agent or a progress-inhibiting agent for pulmonary fibrosis accompanying administration of the anti-tumor agent.
求項6記載の抗線維化剤。7. The antifibrotic agent according to claim 6, wherein the antitumor agent is an antitumor antibiotic.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP37019498A JPH11269076A (en) | 1998-01-22 | 1998-12-25 | Anti-fibrillating agent |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1064298 | 1998-01-22 | ||
JP10-10642 | 1998-01-22 | ||
JP37019498A JPH11269076A (en) | 1998-01-22 | 1998-12-25 | Anti-fibrillating agent |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH11269076A true JPH11269076A (en) | 1999-10-05 |
Family
ID=26345948
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP37019498A Pending JPH11269076A (en) | 1998-01-22 | 1998-12-25 | Anti-fibrillating agent |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH11269076A (en) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011013791A1 (en) | 2009-07-30 | 2011-02-03 | 富士フイルム株式会社 | Kidney-targeting drug delivery agent comprising genetically modified gelatin |
US8173170B2 (en) | 2004-12-22 | 2012-05-08 | Nitto Denko Corporation | Drug carrier and drug carrier kit for inhibiting fibrosis |
CN104623435A (en) * | 2015-01-19 | 2015-05-20 | 王春东 | Soup capable of tonifying kidneys, tonifying qi and treating stranguria to treat ureteral obstruction |
US9408864B2 (en) | 2010-08-05 | 2016-08-09 | Nitto Denko Corporation | Composition for regenerating normal tissue from fibrotic tissue |
US9572886B2 (en) | 2005-12-22 | 2017-02-21 | Nitto Denko Corporation | Agent for treating myelofibrosis |
US9914983B2 (en) | 2012-12-20 | 2018-03-13 | Nitto Denko Corporation | Apoptosis-inducing agent |
US9976142B2 (en) | 2014-04-02 | 2018-05-22 | Nitto Denko Corporation | Targeting molecule and a use thereof |
US10080737B2 (en) | 2014-04-07 | 2018-09-25 | Nitto Denko Corporation | Polymer-based hydrotropes for hydrophobic drug delivery |
US10098953B2 (en) | 2008-03-17 | 2018-10-16 | Nitto Denko Corporation | Therapeutic agent for fibroid lung |
-
1998
- 1998-12-25 JP JP37019498A patent/JPH11269076A/en active Pending
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4005601A1 (en) | 2004-12-22 | 2022-06-01 | Nitto Denko Corporation | Drug carrier and drug carrier kit for inhibiting fibrosis |
US8173170B2 (en) | 2004-12-22 | 2012-05-08 | Nitto Denko Corporation | Drug carrier and drug carrier kit for inhibiting fibrosis |
US8178124B2 (en) | 2004-12-22 | 2012-05-15 | Nitto Denko Corporation | Drug carrier and drug carrier kit for inhibiting fibrosis |
EP2730277A2 (en) | 2004-12-22 | 2014-05-14 | Nitto Denko Corporation | Drug carrier and drug carrier kit for inhibiting fibrosis |
US9572886B2 (en) | 2005-12-22 | 2017-02-21 | Nitto Denko Corporation | Agent for treating myelofibrosis |
US10098953B2 (en) | 2008-03-17 | 2018-10-16 | Nitto Denko Corporation | Therapeutic agent for fibroid lung |
WO2011013791A1 (en) | 2009-07-30 | 2011-02-03 | 富士フイルム株式会社 | Kidney-targeting drug delivery agent comprising genetically modified gelatin |
US9408864B2 (en) | 2010-08-05 | 2016-08-09 | Nitto Denko Corporation | Composition for regenerating normal tissue from fibrotic tissue |
US9926561B2 (en) | 2010-08-05 | 2018-03-27 | Nitto Denko Corporation | Composition for regenerating normal tissue from fibrotic tissue |
US9914983B2 (en) | 2012-12-20 | 2018-03-13 | Nitto Denko Corporation | Apoptosis-inducing agent |
US9976142B2 (en) | 2014-04-02 | 2018-05-22 | Nitto Denko Corporation | Targeting molecule and a use thereof |
US10080737B2 (en) | 2014-04-07 | 2018-09-25 | Nitto Denko Corporation | Polymer-based hydrotropes for hydrophobic drug delivery |
CN104623435A (en) * | 2015-01-19 | 2015-05-20 | 王春东 | Soup capable of tonifying kidneys, tonifying qi and treating stranguria to treat ureteral obstruction |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9107913B2 (en) | Viral hepatitis treatment | |
EP2969002B1 (en) | Use of levocetirizine and montelukast in the treatment of traumatic injury | |
KR100363031B1 (en) | Use of magnesium-based products for the treatment or prevention of renal tissue formation and autoimmune diseases | |
US10806735B2 (en) | Use of neutrophil elastase inhibitors in liver disease | |
JPH06329541A (en) | Medicine containing sulodexide for treating diabetic nephropathy | |
JPH11269076A (en) | Anti-fibrillating agent | |
EP2338495A1 (en) | Iron bis-glycinate chelate for use in the oral treatment of anemia in patients with celiac disease | |
Umeki et al. | Supplemental fosfomycin and/or steroids that reduce cisplatin-induced nephrotoxicity | |
EP2561876B1 (en) | Formulations of Deoxycholic Acid and Salts Thereof | |
US20040198652A1 (en) | Methods and compositions for preventing and treating septic shock and endotoxemia | |
AU662883B2 (en) | Use of trinitrobenzenes or carminic acid in the treatment of cancer or viral diseases | |
EP1699468B1 (en) | Pharmaceutical composition comprising a zinc-hyaluronate complex for the treatment of multiple sclerosis | |
EP0931548A2 (en) | Antifibrotic agent | |
EP0717995A2 (en) | Cell degeneration suppressing and organ toxicity reducing agent | |
JP2005510453A (en) | Highly sulfated disaccharides and their use for the treatment of inflammation | |
JPH1017478A (en) | Preventing or therapeutic agent for ulcerative colitis | |
JP5265580B2 (en) | Chronic obstructive pulmonary disease treatment | |
JP4925406B2 (en) | Preventive and / or therapeutic agent for diabetic nephropathy | |
JPH08165243A (en) | Anti-inflammatory agent | |
JP2001151680A (en) | Antipruritic | |
WO2024074515A1 (en) | Nitazoxanide for the treatment of hepatic impairment | |
WO2021219691A1 (en) | Dapagliflozin and ambrisentan for the prevention and treatment of covid-19 | |
CN113143921A (en) | Application of 3- (phenylseleno) -1H pyrrole [2,3-b ] pyridine in preparation of anti-inflammatory drugs | |
JPH02503918A (en) | Orally activated heparin mucopolysaccharide based composition | |
JPH01104010A (en) | Drug for remedy and prevention of renal and hepatic disease |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Effective date: 20050915 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090519 |
|
A02 | Decision of refusal |
Effective date: 20091027 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 |