JPH09262096A - 食品中の成分測定方法及び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置並びに食品試料のサンプリング方法及び装置 - Google Patents
食品中の成分測定方法及び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置並びに食品試料のサンプリング方法及び装置Info
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- JPH09262096A JPH09262096A JP8099417A JP9941796A JPH09262096A JP H09262096 A JPH09262096 A JP H09262096A JP 8099417 A JP8099417 A JP 8099417A JP 9941796 A JP9941796 A JP 9941796A JP H09262096 A JPH09262096 A JP H09262096A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 魚肉類等の食品試料にサンプリング管の先端
を当てるだけで、食品試料から直接成分を採取してＦＩ
Ａ法によって測定を行うことができるようにする。 【解決手段】 管本体８の先端開口部を多孔質膜１０で
閉塞し、さらに管本体８にキャリヤ液流入管１４及びキ
ャリヤ液流出管１６を連結したサンプリング管２を用い
る。そして、多孔質膜１０を食品試料２４に接触させた
状態において、キャリヤ液流入管１４からサンプリング
管２内に試料液調製用キャリヤ液２６を連続的に導入す
ることにより、多孔質膜１０を通過した食品試料中２４
の成分をサンプリング管２内を流れるキャリヤ液２６中
に採取するとともに、このキャリヤ液２６をキャリヤ液
流出管１６から試料液として連続的に流出させた後、こ
の試料液をＦＩＡ法による成分測定部６に導入する。
を当てるだけで、食品試料から直接成分を採取してＦＩ
Ａ法によって測定を行うことができるようにする。 【解決手段】 管本体８の先端開口部を多孔質膜１０で
閉塞し、さらに管本体８にキャリヤ液流入管１４及びキ
ャリヤ液流出管１６を連結したサンプリング管２を用い
る。そして、多孔質膜１０を食品試料２４に接触させた
状態において、キャリヤ液流入管１４からサンプリング
管２内に試料液調製用キャリヤ液２６を連続的に導入す
ることにより、多孔質膜１０を通過した食品試料中２４
の成分をサンプリング管２内を流れるキャリヤ液２６中
に採取するとともに、このキャリヤ液２６をキャリヤ液
流出管１６から試料液として連続的に流出させた後、こ
の試料液をＦＩＡ法による成分測定部６に導入する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＦＩＡ法（流れ分
析法）による食品中の成分測定方法及び装置に関し、さ
らに詳述すると、食品試料にサンプリング管を接触させ
て該試料から直接成分を採取して測定を行うことができ
る方法及び装置に関する。また、本発明は、魚肉類に含
まれるＡＴＰ関連化合物の濃度比から魚介類の鮮度を測
定する方法及び装置に関し、さらに詳述すると、魚肉類
にサンプリング管を接触させて魚肉類から直接成分を採
取して測定を行うことができるとともに、採取した成分
からＦＩＡ法によりＫI値を迅速に算出して魚介類の鮮
度判定を短時間で行うことができる方法及び装置に関す
る。
析法）による食品中の成分測定方法及び装置に関し、さ
らに詳述すると、食品試料にサンプリング管を接触させ
て該試料から直接成分を採取して測定を行うことができ
る方法及び装置に関する。また、本発明は、魚肉類に含
まれるＡＴＰ関連化合物の濃度比から魚介類の鮮度を測
定する方法及び装置に関し、さらに詳述すると、魚肉類
にサンプリング管を接触させて魚肉類から直接成分を採
取して測定を行うことができるとともに、採取した成分
からＦＩＡ法によりＫI値を迅速に算出して魚介類の鮮
度判定を短時間で行うことができる方法及び装置に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】食品の品質に対する人々の関心は年々高
くなっており、よりおいしく、新鮮で、安全な食品が求
められている。食品産業においては、これらの要望に応
えるために、原料、製造工程での中間製品及び最終製品
について、様々な面から品質の検査、管理を行う必要に
迫られている。この場合、食品の品質を官能検査によっ
て客観的に判断するにはかなりの工数と熟練したパネル
（検査員）が必要であるため、センサー等を用いた科学
的な食品品質の判定方法が要望されている。
くなっており、よりおいしく、新鮮で、安全な食品が求
められている。食品産業においては、これらの要望に応
えるために、原料、製造工程での中間製品及び最終製品
について、様々な面から品質の検査、管理を行う必要に
迫られている。この場合、食品の品質を官能検査によっ
て客観的に判断するにはかなりの工数と熟練したパネル
（検査員）が必要であるため、センサー等を用いた科学
的な食品品質の判定方法が要望されている。
【０００３】食品産業で取り扱う材料の内、水産物の鮮
度については、(イ)きわめて短時間の内に変化するこ
と、(ロ)魚種により鮮度の変化が様々な経過をたどるこ
と、(ハ)客観的な判断が難しいことから、これまで多く
の方法が検討されてきた。それらの中で、現在では、魚
肉中に含まれるＡＴＰ関連化合物の量の比率（Ｋ値）を
鮮度の指標として用いる方法が確立されている。
度については、(イ)きわめて短時間の内に変化するこ
と、(ロ)魚種により鮮度の変化が様々な経過をたどるこ
と、(ハ)客観的な判断が難しいことから、これまで多く
の方法が検討されてきた。それらの中で、現在では、魚
肉中に含まれるＡＴＰ関連化合物の量の比率（Ｋ値）を
鮮度の指標として用いる方法が確立されている。
【０００４】すなわち、魚の死後、筋肉中のＡＴＰは、
細胞内の代謝メカニズムにより、ＡＴＰ（アデノシン
５’−三リン酸）→ＡＤＰ（アデノシン５’−二リン
酸）→ＡＭＰ（アデノシン５’−リン酸）→ＩＭＰ（イ
ノシン５’−リン酸）→ＨXＲ（イノシン）→ＨX（ヒポ
キサンチン）と代謝され、さらに尿酸と過酸化水素にま
で分解されるが、その際ＨXＲとＨXが蓄積する。そこ
で、ＨXＲとＨXの濃度の合計値と全ての成分の濃度の合
計値との比をとった値がＫ値であり、下記式で表される
（単位％）。なお、[ATP]等は各成分の濃度である。 Ｋ値＝{([HXR]+[HX])／([ATP]+[ADP]+[AMP]+[IMP]+[H
XR]+[HX])}×100
細胞内の代謝メカニズムにより、ＡＴＰ（アデノシン
５’−三リン酸）→ＡＤＰ（アデノシン５’−二リン
酸）→ＡＭＰ（アデノシン５’−リン酸）→ＩＭＰ（イ
ノシン５’−リン酸）→ＨXＲ（イノシン）→ＨX（ヒポ
キサンチン）と代謝され、さらに尿酸と過酸化水素にま
で分解されるが、その際ＨXＲとＨXが蓄積する。そこ
で、ＨXＲとＨXの濃度の合計値と全ての成分の濃度の合
計値との比をとった値がＫ値であり、下記式で表される
（単位％）。なお、[ATP]等は各成分の濃度である。 Ｋ値＝{([HXR]+[HX])／([ATP]+[ADP]+[AMP]+[IMP]+[H
XR]+[HX])}×100
【０００５】また、魚の死後１０〜２０時間で、ＡＴ
Ｐ、ＡＤＰ、ＡＭＰまでの成分はほとんど無視できる程
度まで減少する。そこで、通常流通している水産物に対
しては、Ｋ値を簡易化した下記ＫI値（単位％）で鮮度
を表せることが知られている。 ＫI値＝{([HXR]+[HX])／([IMP]+[HXR]+[HX])}×100
Ｐ、ＡＤＰ、ＡＭＰまでの成分はほとんど無視できる程
度まで減少する。そこで、通常流通している水産物に対
しては、Ｋ値を簡易化した下記ＫI値（単位％）で鮮度
を表せることが知られている。 ＫI値＝{([HXR]+[HX])／([IMP]+[HXR]+[HX])}×100
【０００６】従来、前述したＫI値を指標とし、ＦＩＡ
法によって魚介類の鮮度を判定するシステムとして、図
１２に示す構成のものが提案されている。図１２のＦＩ
Ａシステムにおいて、Ａは第１のキャリヤ液、Ｂはポン
プ、Ｃはインジェクタ、Ｄはウリカーゼ固定化リアク
タ、Ｅはアルカリフォスフォターゼ（ＡＰ）固定化リア
クタ、Ｆは遅延コイル、Ｇはブランクリアクタ、Ｈは第
２のキャリヤ液、Ｉはポンプ、Ｊはミキシングコイル、
Ｋはプリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ（ＰＮＰ）
／キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）同時固定化リアク
タ、Ｌは尿酸測定用グラッシーカーボン電極、Ｍはポテ
ンシオスタット、Ｎは記録計を示す。
法によって魚介類の鮮度を判定するシステムとして、図
１２に示す構成のものが提案されている。図１２のＦＩ
Ａシステムにおいて、Ａは第１のキャリヤ液、Ｂはポン
プ、Ｃはインジェクタ、Ｄはウリカーゼ固定化リアク
タ、Ｅはアルカリフォスフォターゼ（ＡＰ）固定化リア
クタ、Ｆは遅延コイル、Ｇはブランクリアクタ、Ｈは第
２のキャリヤ液、Ｉはポンプ、Ｊはミキシングコイル、
Ｋはプリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ（ＰＮＰ）
／キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）同時固定化リアク
タ、Ｌは尿酸測定用グラッシーカーボン電極、Ｍはポテ
ンシオスタット、Ｎは記録計を示す。
【０００７】図１２のシステムでは、第１のキャリヤ液
ＡにインジェクタＣから試料が注入され、流路Ｐを通っ
たキャリヤ液Ａ中ではリアクタＫでＨXＲがＨXに、ＨX
が過酸化水素と尿酸に変換され、この尿酸が電極Ｌで検
出される。また、流路Ｑを通ったキャリヤ液Ａ中ではリ
アクタＥでＩＭＰがＨXＲに変換された後、リアクタＫ
でＨXＲがＨXに、ＨXが過酸化水素と尿酸に変換され、
この尿酸が電極Ｌで検出される。このとき、本システム
では遅延コイルＦを設けてあるので、ＨXＲ及びＨXの総
濃度に対応する第１のピークと、ＩＭＰ、ＨXＲ及びＨX
の総濃度に対応する第２のピークとが得られるから、こ
れらのピーク高さに基づいて前記式によりＫI値を求め
ることができる。
ＡにインジェクタＣから試料が注入され、流路Ｐを通っ
たキャリヤ液Ａ中ではリアクタＫでＨXＲがＨXに、ＨX
が過酸化水素と尿酸に変換され、この尿酸が電極Ｌで検
出される。また、流路Ｑを通ったキャリヤ液Ａ中ではリ
アクタＥでＩＭＰがＨXＲに変換された後、リアクタＫ
でＨXＲがＨXに、ＨXが過酸化水素と尿酸に変換され、
この尿酸が電極Ｌで検出される。このとき、本システム
では遅延コイルＦを設けてあるので、ＨXＲ及びＨXの総
濃度に対応する第１のピークと、ＩＭＰ、ＨXＲ及びＨX
の総濃度に対応する第２のピークとが得られるから、こ
れらのピーク高さに基づいて前記式によりＫI値を求め
ることができる。
【０００８】この場合、リアクタＥにおけるＡＰによる
酵素反応はリン酸イオンによって阻害され、リアクタＫ
におけるＰＮＰによる酵素反応は加リン酸分解であるた
めリン酸イオンを必要とする。したがって、本システム
では、試料をリアクタＥに導入する第１のキャリヤ液Ａ
としてはリン酸イオンを含まないものを用い、一方第２
のキャリヤ液Ｈとしてはリン酸イオンを含むものを使用
して、リアクタＫの手前で第１のキャリヤ液Ａにリン酸
イオンを含む第２のキャリヤ液Ｈを混合している。
酵素反応はリン酸イオンによって阻害され、リアクタＫ
におけるＰＮＰによる酵素反応は加リン酸分解であるた
めリン酸イオンを必要とする。したがって、本システム
では、試料をリアクタＥに導入する第１のキャリヤ液Ａ
としてはリン酸イオンを含まないものを用い、一方第２
のキャリヤ液Ｈとしてはリン酸イオンを含むものを使用
して、リアクタＫの手前で第１のキャリヤ液Ａにリン酸
イオンを含む第２のキャリヤ液Ｈを混合している。
【０００９】なお、図１２の装置においてウリカーゼ固
定化リアクタＤを配置しているのは、試料中にもともと
共存している尿酸は正の誤差を与えるため、この尿酸を
分解除去するためである。また、同様のＦＩＡシステム
において、グラッシーカーボン電極Ｌによる尿酸の測定
に代えて、反応後のキャリヤ液に過酸化水素と反応して
発光する試薬を加えてこのときの発光量を光応答性の素
子で計測することにより、前記と同様の２つのピークを
得てＫI値を求めることも提案されている。
定化リアクタＤを配置しているのは、試料中にもともと
共存している尿酸は正の誤差を与えるため、この尿酸を
分解除去するためである。また、同様のＦＩＡシステム
において、グラッシーカーボン電極Ｌによる尿酸の測定
に代えて、反応後のキャリヤ液に過酸化水素と反応して
発光する試薬を加えてこのときの発光量を光応答性の素
子で計測することにより、前記と同様の２つのピークを
得てＫI値を求めることも提案されている。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】図１２に示した従来の
ＦＩＡシステムによって測定を行う場合、インジェクタ
Ｃから第１のキャリヤ液Ａ中に注入する試料液は、切り
取った魚肉類からの成分の抽出操作を行って調製してお
り、試料液の調製が面倒である。このような試料液の調
製操作を省き、魚肉類から鮮度測定に必要な成分を直接
採取できるようにすれば、魚介類の鮮度測定を簡便かつ
迅速に行うことが可能となる。
ＦＩＡシステムによって測定を行う場合、インジェクタ
Ｃから第１のキャリヤ液Ａ中に注入する試料液は、切り
取った魚肉類からの成分の抽出操作を行って調製してお
り、試料液の調製が面倒である。このような試料液の調
製操作を省き、魚肉類から鮮度測定に必要な成分を直接
採取できるようにすれば、魚介類の鮮度測定を簡便かつ
迅速に行うことが可能となる。
【００１１】また、ＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXを過酸化水素
と尿酸に変換するのに必要な３種の酵素であるＡＰ、Ｐ
ＮＰ及びＸＯＤを２のリアクタに分割して固定化してい
る従来のＦＩＡシステムは、１試料のＫI値の測定に５
分程度を要し、測定の迅速性に劣るという欠点を有して
いた。すなわち、ＩＭＰをＨXＲに変換し、ＨXＲをＨX
に変換し、ＨXを過酸化水素と尿酸に変換するというよ
うな連続的な酵素反応は、１つのリアクタに連続反応に
必要な全ての酵素を固定化して行うことが反応効率の点
で望ましく、これにより反応速度を高めることができる
が、従来のＦＩＡシステムでは連続反応に必要な酵素を
２つのリアクタに分割しているため、反応効率、反応速
度が低く、したがって測定に時間がかかるものであっ
た。
と尿酸に変換するのに必要な３種の酵素であるＡＰ、Ｐ
ＮＰ及びＸＯＤを２のリアクタに分割して固定化してい
る従来のＦＩＡシステムは、１試料のＫI値の測定に５
分程度を要し、測定の迅速性に劣るという欠点を有して
いた。すなわち、ＩＭＰをＨXＲに変換し、ＨXＲをＨX
に変換し、ＨXを過酸化水素と尿酸に変換するというよ
うな連続的な酵素反応は、１つのリアクタに連続反応に
必要な全ての酵素を固定化して行うことが反応効率の点
で望ましく、これにより反応速度を高めることができる
が、従来のＦＩＡシステムでは連続反応に必要な酵素を
２つのリアクタに分割しているため、反応効率、反応速
度が低く、したがって測定に時間がかかるものであっ
た。
【００１２】本発明は、上記事情に鑑みてなされたもの
で、その第１の目的は、魚肉類等の食品試料から直接成
分を採取してＦＩＡ法によって測定を行うことが可能な
食品中の成分測定方法及び装置を提供することにある。
第２の目的は、ＡＰ、ＰＮＰ及びＸＯＤの酵素反応を利
用してＦＩＡ法によって魚介類のＫI値を求める場合に
おいて、魚肉類から直接成分を採取して測定を行うこと
ができるとともに、１試料のＫI値を１分程度の短時間
で算出することができ、したがって魚介類の鮮度判定を
きわめて簡便かつ迅速に行うことが可能な魚介類の鮮度
測定方法及び装置を提供することにある。第３の目的
は、魚肉類等の食品試料から直接成分を採取することが
できる食品試料のサンプリング方法及び装置を提供する
ことにある。
で、その第１の目的は、魚肉類等の食品試料から直接成
分を採取してＦＩＡ法によって測定を行うことが可能な
食品中の成分測定方法及び装置を提供することにある。
第２の目的は、ＡＰ、ＰＮＰ及びＸＯＤの酵素反応を利
用してＦＩＡ法によって魚介類のＫI値を求める場合に
おいて、魚肉類から直接成分を採取して測定を行うこと
ができるとともに、１試料のＫI値を１分程度の短時間
で算出することができ、したがって魚介類の鮮度判定を
きわめて簡便かつ迅速に行うことが可能な魚介類の鮮度
測定方法及び装置を提供することにある。第３の目的
は、魚肉類等の食品試料から直接成分を採取することが
できる食品試料のサンプリング方法及び装置を提供する
ことにある。
【００１３】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記目的
を達成するために鋭意検討を行った結果、下記知見を得
た。 （１）魚肉類等の食品試料から直接成分を採取し、ＦＩ
Ａ法によって測定を行うには、次のようなサンプリング
手段が適当であることを見い出した。すなわち、管本体
の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、管本体に
キャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結してサン
プリング管を作製する。そして、サンプリング管の多孔
質膜を魚肉類等の食品試料に接触させた状態において、
キャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用
キャリヤ液を連続的に導入し、多孔質膜を通過した食品
試料中の成分をサンプリング管内を流れるキャリヤ液中
に採取して、このキャリヤ液をキャリヤ液流出管から試
料液として連続的に流出させることにより、魚肉類等の
食品試料から直接成分を採取できることを知見した。
を達成するために鋭意検討を行った結果、下記知見を得
た。 （１）魚肉類等の食品試料から直接成分を採取し、ＦＩ
Ａ法によって測定を行うには、次のようなサンプリング
手段が適当であることを見い出した。すなわち、管本体
の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、管本体に
キャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結してサン
プリング管を作製する。そして、サンプリング管の多孔
質膜を魚肉類等の食品試料に接触させた状態において、
キャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用
キャリヤ液を連続的に導入し、多孔質膜を通過した食品
試料中の成分をサンプリング管内を流れるキャリヤ液中
に採取して、このキャリヤ液をキャリヤ液流出管から試
料液として連続的に流出させることにより、魚肉類等の
食品試料から直接成分を採取できることを知見した。
【００１４】（２）前記のサンプリング手段では、主に
多孔質膜内外の圧力差によって多孔質膜中を物質が移動
するものであり、食品試料が液体状である場合には、多
孔質膜内外の圧力差は経時的にほぼ一定であるため、多
孔質膜を通過してキャリヤ液中に入る成分の量は経時的
にほぼ一定している。しかし、食品試料が魚肉類のよう
な固形物で液体量が少ない場合には、多孔質膜と接して
いる部分の液体がまずサンプリング管内に吸引される結
果、多孔質膜内外の圧力差が変動するので、多孔質膜を
通過してキャリヤ液中に入る成分の量が経時的に変動す
る。そのため、キャリヤ液をそのまま成分測定部に送っ
て測定を行うと、後述する第１チャンネルと第２チャン
ネルに導入される試料中の成分濃度が同じでなくなるお
それがあり、正しくＫI値の測定を行うことができない
おそれがある。したがって、食品試料が固形物である場
合には、キャリヤ液流出管から流出させた試料液を一時
貯留して攪拌した後、成分測定部に送ることにより、キ
ャリヤ液中に入る成分量の経時的変動を解消してキャリ
ヤ液中の成分濃度を均一化し、ＦＩＡの第１、第２チャ
ンネルに導入される試料中の成分濃度を同じにすること
ができ、ＫI値を正しく測定することが可能となること
を知見した。
多孔質膜内外の圧力差によって多孔質膜中を物質が移動
するものであり、食品試料が液体状である場合には、多
孔質膜内外の圧力差は経時的にほぼ一定であるため、多
孔質膜を通過してキャリヤ液中に入る成分の量は経時的
にほぼ一定している。しかし、食品試料が魚肉類のよう
な固形物で液体量が少ない場合には、多孔質膜と接して
いる部分の液体がまずサンプリング管内に吸引される結
果、多孔質膜内外の圧力差が変動するので、多孔質膜を
通過してキャリヤ液中に入る成分の量が経時的に変動す
る。そのため、キャリヤ液をそのまま成分測定部に送っ
て測定を行うと、後述する第１チャンネルと第２チャン
ネルに導入される試料中の成分濃度が同じでなくなるお
それがあり、正しくＫI値の測定を行うことができない
おそれがある。したがって、食品試料が固形物である場
合には、キャリヤ液流出管から流出させた試料液を一時
貯留して攪拌した後、成分測定部に送ることにより、キ
ャリヤ液中に入る成分量の経時的変動を解消してキャリ
ヤ液中の成分濃度を均一化し、ＦＩＡの第１、第２チャ
ンネルに導入される試料中の成分濃度を同じにすること
ができ、ＫI値を正しく測定することが可能となること
を知見した。
【００１５】（３）ＡＰによる酵素反応は、これまでリ
ン酸イオンによって阻害されると考えられており、実
際、リン酸イオンが高濃度である場合には該反応は著し
く阻害される。しかし、本発明者らは、キャリヤ液中の
リン酸イオン濃度を試料中のＩＭＰ及びＨXＲの合計濃
度の２倍以上で５ｍＭ以下（本明細書において単位Ｍは
ｍｏｌ／ｌを示す）の範囲の低濃度にした場合には、Ａ
Ｐによる酵素反応がリン酸イオンによってほとんど阻害
されることなく進行し、ＩＭＰがＨXＲに良好に変換さ
れ、またＰＮＰによる酵素反応はキャリヤ液中のリン酸
イオン濃度がＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍以上で
５ｍＭ以下の範囲でも良好に進行し、ＨXＲがＨXに変換
されることを知見した。したがって、キャリヤ液として
リン酸イオン濃度がＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍
以上で５ｍＭ以下のものを使用すれば、ＡＰ、ＰＮＰ及
びＸＯＤを１本のリアクタに固定化したＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタによってＩＭＰ→ＨXＲ→ＨX
→尿酸／過酸化水素という連続酵素反応を高い反応効
率、反応速度で行うことでき、試料中のＩＭＰ、ＨXＲ
及びＨXの合計濃度を迅速に検出できることが判明し
た。
ン酸イオンによって阻害されると考えられており、実
際、リン酸イオンが高濃度である場合には該反応は著し
く阻害される。しかし、本発明者らは、キャリヤ液中の
リン酸イオン濃度を試料中のＩＭＰ及びＨXＲの合計濃
度の２倍以上で５ｍＭ以下（本明細書において単位Ｍは
ｍｏｌ／ｌを示す）の範囲の低濃度にした場合には、Ａ
Ｐによる酵素反応がリン酸イオンによってほとんど阻害
されることなく進行し、ＩＭＰがＨXＲに良好に変換さ
れ、またＰＮＰによる酵素反応はキャリヤ液中のリン酸
イオン濃度がＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍以上で
５ｍＭ以下の範囲でも良好に進行し、ＨXＲがＨXに変換
されることを知見した。したがって、キャリヤ液として
リン酸イオン濃度がＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍
以上で５ｍＭ以下のものを使用すれば、ＡＰ、ＰＮＰ及
びＸＯＤを１本のリアクタに固定化したＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタによってＩＭＰ→ＨXＲ→ＨX
→尿酸／過酸化水素という連続酵素反応を高い反応効
率、反応速度で行うことでき、試料中のＩＭＰ、ＨXＲ
及びＨXの合計濃度を迅速に検出できることが判明し
た。
【００１６】（４）本発明者らは、前記のようにリン酸
イオン濃度がＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍以上で
５ｍＭ以下の範囲のキャリヤ液を用いてＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタによって測定を行った場合、
検出されるＨX等の成分の濃度が合計で０．０６〜３０
０μＭという低濃度のときに各成分に対する検量線が直
線になることを見い出した。したがって、ＡＰ／ＰＮＰ
／ＸＯＤ同時固定化リアクタに試料を導入するキャリヤ
液中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が０．０６〜３
００μＭとなるように該キャリヤ液に試料を導入するこ
とにより、ＫI値を正しく求めることができることが判
明した。ただし、かかる低濃度の成分を検出する場合に
は、検出器として高感度のものが必要となる。
イオン濃度がＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍以上で
５ｍＭ以下の範囲のキャリヤ液を用いてＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタによって測定を行った場合、
検出されるＨX等の成分の濃度が合計で０．０６〜３０
０μＭという低濃度のときに各成分に対する検量線が直
線になることを見い出した。したがって、ＡＰ／ＰＮＰ
／ＸＯＤ同時固定化リアクタに試料を導入するキャリヤ
液中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が０．０６〜３
００μＭとなるように該キャリヤ液に試料を導入するこ
とにより、ＫI値を正しく求めることができることが判
明した。ただし、かかる低濃度の成分を検出する場合に
は、検出器として高感度のものが必要となる。
【００１７】（５）図１２に示した従来のＦＩＡシステ
ムでは、濃度の高い試料液を測定に使用しているため、
試料液中の成分を十分に分解するために必要な固定化酵
素量が多くなり、その結果リアクタが大型化し、この点
でも反応に時間を要していると考えられる。すなわち、
従来はＨX等の成分の濃度が合計で５ｍＭ程度になるよ
うな調製条件の魚肉類抽出試料を使用しており、その結
果リアクタのカラムとしては内径３ｍｍ、長さ５０ｍｍ
程度のものが必要となっている。これに対し、（２）で
述べたようにＨX等の成分の濃度が合計で０．０６〜３
００μＭという低濃度になるような調製条件の魚肉類抽
出試料を使用して測定を行う場合は、試料中の成分を十
分に分解するために必要な固定化酵素量が少なくてす
み、リアクタを小型化して反応時間を短くすることがで
きるため、測定の迅速化を図ることができる。
ムでは、濃度の高い試料液を測定に使用しているため、
試料液中の成分を十分に分解するために必要な固定化酵
素量が多くなり、その結果リアクタが大型化し、この点
でも反応に時間を要していると考えられる。すなわち、
従来はＨX等の成分の濃度が合計で５ｍＭ程度になるよ
うな調製条件の魚肉類抽出試料を使用しており、その結
果リアクタのカラムとしては内径３ｍｍ、長さ５０ｍｍ
程度のものが必要となっている。これに対し、（２）で
述べたようにＨX等の成分の濃度が合計で０．０６〜３
００μＭという低濃度になるような調製条件の魚肉類抽
出試料を使用して測定を行う場合は、試料中の成分を十
分に分解するために必要な固定化酵素量が少なくてす
み、リアクタを小型化して反応時間を短くすることがで
きるため、測定の迅速化を図ることができる。
【００１８】（６）ＫI値を求めるためには、ＡＰ／Ｐ
ＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタを用いて（１）で述べ
たようにして試料中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度
を検出するとともに、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアク
タを用いて同じ試料中のＨXＲ及びＨXの合計濃度を検出
すればよい。この場合、ＫI値を正しく求めるために
は、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタを配置した流路
でＩＭＰの分解が生じないことが必要である。この点に
関し、本発明者らは、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアク
タに試料を導入するキャリヤ液としてリン酸イオン濃度
が５ｍＭ以上のものを用いることにより、（２）で述べ
たような低濃度のＩＭＰの分解を抑制できることを見い
出した。
ＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタを用いて（１）で述べ
たようにして試料中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度
を検出するとともに、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアク
タを用いて同じ試料中のＨXＲ及びＨXの合計濃度を検出
すればよい。この場合、ＫI値を正しく求めるために
は、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタを配置した流路
でＩＭＰの分解が生じないことが必要である。この点に
関し、本発明者らは、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアク
タに試料を導入するキャリヤ液としてリン酸イオン濃度
が５ｍＭ以上のものを用いることにより、（２）で述べ
たような低濃度のＩＭＰの分解を抑制できることを見い
出した。
【００１９】（７）ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リ
アクタとＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタの２本のリ
アクタを用いてＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度に対応
するピークとＨXＲ及びＨXの合計濃度に対応するピーク
を同時に得るようにすれば、図１２のシステムのように
遅延コイルを用いて２つのピークを時間をずらして検出
する場合に比べ、測定時間を短縮化することができる。
アクタとＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタの２本のリ
アクタを用いてＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度に対応
するピークとＨXＲ及びＨXの合計濃度に対応するピーク
を同時に得るようにすれば、図１２のシステムのように
遅延コイルを用いて２つのピークを時間をずらして検出
する場合に比べ、測定時間を短縮化することができる。
【００２０】本発明は、上記（１）〜（７）の知見に基
づいてなされたもので、下記の食品中の成分測定方法及
び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置、食品試料のサ
ンプリング方法及び装置を提供する。
づいてなされたもので、下記の食品中の成分測定方法及
び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置、食品試料のサ
ンプリング方法及び装置を提供する。
【００２１】食品中の成分測定方法 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、該
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せた後、該試料液をＦＩＡ法による成分測定部に導入す
ることを特徴とする食品中の成分測定方法。
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せた後、該試料液をＦＩＡ法による成分測定部に導入す
ることを特徴とする食品中の成分測定方法。
【００２２】食品中の成分測定装置 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、該
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せるサンプリング装置と、前記サンプリング装置のキャ
リヤ液流出管から流出した試料液が導入され、該試料液
中の成分をＦＩＡ法により測定する成分測定部とを具備
することを特徴とする食品中の成分測定装置。
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せるサンプリング装置と、前記サンプリング装置のキャ
リヤ液流出管から流出した試料液が導入され、該試料液
中の成分をＦＩＡ法により測定する成分測定部とを具備
することを特徴とする食品中の成分測定装置。
【００２３】魚介類の鮮度測定方法 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、該
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を魚肉類に接触させた状態において、前記キャ
リヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キャ
リヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜を
通過した魚肉類中の成分をサンプリング管内を流れるキ
ャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を前記
キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出させた
後、キャリヤ液流出管から流出した試料液を一時貯留し
て攪拌し、次いでリン酸イオン濃度が試料中のイノシン
５’−リン酸及びイノシンの合計濃度の２倍以上で５ｍ
Ｍ以下である第１キャリヤ液に前記貯留、攪拌後の試料
液を導入し、この第１キャリヤ液をアルカリフォスフォ
ターゼ／プリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ／キサ
ンチンオキシダーゼ同時固定化リアクタに通して試料液
中のイノシン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチ
ンを過酸化水素及び尿酸に変換した後、第１キャリヤ液
中の過酸化水素又は尿酸の濃度を検出することにより試
料液中のイノシン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサ
ンチンの合計濃度に対応する第１物理量を得るととも
に、リン酸イオンを含む第２キャリヤ液に前記貯留、攪
拌後の試料液を導入し、この第２キャリヤ液をプリンヌ
クレオシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキシダー
ゼ同時固定化リアクタに通して試料液中のイノシン及び
ヒポキサンチンを過酸化水素及び尿酸に変換した後、第
２キャリヤ液中の過酸化水素又は尿酸の濃度を検出する
ことにより試料液中のイノシン及びヒポキサンチンの合
計濃度に対応する第２物理量を得、前記第１物理量及び
第２物理量から下記式で示されるＫI値を算出すること
を特徴とする魚介類の鮮度測定方法。 ＫI値＝{([HXR]+[HX])／([IMP]+[HXR]+[HX])}×100 [IMP]：イノシン５’−リン酸濃度 [HXR]：イノシン濃度 [HX] ：ヒポキサンチン濃度
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を魚肉類に接触させた状態において、前記キャ
リヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キャ
リヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜を
通過した魚肉類中の成分をサンプリング管内を流れるキ
ャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を前記
キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出させた
後、キャリヤ液流出管から流出した試料液を一時貯留し
て攪拌し、次いでリン酸イオン濃度が試料中のイノシン
５’−リン酸及びイノシンの合計濃度の２倍以上で５ｍ
Ｍ以下である第１キャリヤ液に前記貯留、攪拌後の試料
液を導入し、この第１キャリヤ液をアルカリフォスフォ
ターゼ／プリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ／キサ
ンチンオキシダーゼ同時固定化リアクタに通して試料液
中のイノシン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチ
ンを過酸化水素及び尿酸に変換した後、第１キャリヤ液
中の過酸化水素又は尿酸の濃度を検出することにより試
料液中のイノシン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサ
ンチンの合計濃度に対応する第１物理量を得るととも
に、リン酸イオンを含む第２キャリヤ液に前記貯留、攪
拌後の試料液を導入し、この第２キャリヤ液をプリンヌ
クレオシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキシダー
ゼ同時固定化リアクタに通して試料液中のイノシン及び
ヒポキサンチンを過酸化水素及び尿酸に変換した後、第
２キャリヤ液中の過酸化水素又は尿酸の濃度を検出する
ことにより試料液中のイノシン及びヒポキサンチンの合
計濃度に対応する第２物理量を得、前記第１物理量及び
第２物理量から下記式で示されるＫI値を算出すること
を特徴とする魚介類の鮮度測定方法。 ＫI値＝{([HXR]+[HX])／([IMP]+[HXR]+[HX])}×100 [IMP]：イノシン５’−リン酸濃度 [HXR]：イノシン濃度 [HX] ：ヒポキサンチン濃度
【００２４】魚介類の鮮度測定装置 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、該
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を魚肉類に接触させた状態において、前記キャ
リヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キャ
リヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜を
通過した魚肉類中の成分をサンプリング管内を流れるキ
ャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を前記
キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出させる
サンプリング装置と、サンプリング装置のキャリヤ液流
出管から流出した試料液を一時貯留して攪拌する貯留・
攪拌機構と、アルカリフォスフォターゼ／プリンヌクレ
オシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキシダーゼ同
時固定化リアクタを備え、リン酸イオン濃度が試料中の
イノシン５’−リン酸及びイノシンの合計濃度の２倍以
上で５ｍＭ以下である第１キャリヤ液に前記貯留・攪拌
機構を流出した試料液を導入するとともに、この第１キ
ャリヤ液を前記リアクタに通して試料液中のイノシン
５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチンを過酸化水
素及び尿酸に変換した後、第１キャリヤ液中の過酸化水
素又は尿酸の濃度を検出することにより試料液中のイノ
シン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチンの合計
濃度に対応する第１物理量を得る第１チャンネルと、プ
リンヌクレオシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキ
シダーゼ同時固定化リアクタを備え、リン酸イオンを含
む第２キャリヤ液に前記貯留・攪拌機構を流出した試料
液を導入するとともに、この第２キャリヤ液を前記リア
クタに通して試料液中のイノシン及びヒポキサンチンを
過酸化水素及び尿酸に変換した後、第２キャリヤ液中の
過酸化水素又は尿酸の濃度を検出することにより試料液
中のイノシン及びヒポキサンチンの合計濃度に対応する
第２物理量を得る第２チャンネルと、前記第１物理量及
び第２物理量から前記式で示されるＫI値を算出する演
算部とを具備することを特徴とする魚介類の鮮度測定装
置。
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を魚肉類に接触させた状態において、前記キャ
リヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キャ
リヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜を
通過した魚肉類中の成分をサンプリング管内を流れるキ
ャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を前記
キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出させる
サンプリング装置と、サンプリング装置のキャリヤ液流
出管から流出した試料液を一時貯留して攪拌する貯留・
攪拌機構と、アルカリフォスフォターゼ／プリンヌクレ
オシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキシダーゼ同
時固定化リアクタを備え、リン酸イオン濃度が試料中の
イノシン５’−リン酸及びイノシンの合計濃度の２倍以
上で５ｍＭ以下である第１キャリヤ液に前記貯留・攪拌
機構を流出した試料液を導入するとともに、この第１キ
ャリヤ液を前記リアクタに通して試料液中のイノシン
５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチンを過酸化水
素及び尿酸に変換した後、第１キャリヤ液中の過酸化水
素又は尿酸の濃度を検出することにより試料液中のイノ
シン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチンの合計
濃度に対応する第１物理量を得る第１チャンネルと、プ
リンヌクレオシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキ
シダーゼ同時固定化リアクタを備え、リン酸イオンを含
む第２キャリヤ液に前記貯留・攪拌機構を流出した試料
液を導入するとともに、この第２キャリヤ液を前記リア
クタに通して試料液中のイノシン及びヒポキサンチンを
過酸化水素及び尿酸に変換した後、第２キャリヤ液中の
過酸化水素又は尿酸の濃度を検出することにより試料液
中のイノシン及びヒポキサンチンの合計濃度に対応する
第２物理量を得る第２チャンネルと、前記第１物理量及
び第２物理量から前記式で示されるＫI値を算出する演
算部とを具備することを特徴とする魚介類の鮮度測定装
置。
【００２５】食品試料のサンプリング方法 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、該
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せることを特徴とする食品試料のサンプリング方法。
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せることを特徴とする食品試料のサンプリング方法。
【００２６】食品試料のサンプリング装置 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞するとともに、該
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せることを特徴とする食品試料のサンプリング装置。
管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ液流出管を連結
してなるサンプリング管を用い、前記サンプリング管の
多孔質膜を食品試料に接触させた状態において、前記キ
ャリヤ液流入管からサンプリング管内に試料液調製用キ
ャリヤ液を連続的に導入することにより、前記多孔質膜
を通過した食品試料中の成分をサンプリング管内を流れ
るキャリヤ液中に採取するとともに、このキャリヤ液を
前記キャリヤ液流出管から試料液として連続的に流出さ
せることを特徴とする食品試料のサンプリング装置。
【００２７】以下、本発明についてさらに詳しく説明す
る。サンプリング管 サンプリング管の構造に限定はなく、多孔質膜を食品試
料に接触させた状態において、キャリヤ液流入管からサ
ンプリング管内に試料液調製用キャリヤ液を連続的に導
入したときに、多孔質膜を通過した食品試料中の成分が
内部を流れるキャリヤ液中に添加されるものであればど
のような構造であってもよい。また、多孔質膜として
は、ポリアミド樹脂等からなる孔径０．２〜１．２μｍ
程度の微細孔を有するものを好適に用いることができる
が、これに限定されるものではない。
る。サンプリング管 サンプリング管の構造に限定はなく、多孔質膜を食品試
料に接触させた状態において、キャリヤ液流入管からサ
ンプリング管内に試料液調製用キャリヤ液を連続的に導
入したときに、多孔質膜を通過した食品試料中の成分が
内部を流れるキャリヤ液中に添加されるものであればど
のような構造であってもよい。また、多孔質膜として
は、ポリアミド樹脂等からなる孔径０．２〜１．２μｍ
程度の微細孔を有するものを好適に用いることができる
が、これに限定されるものではない。
【００２８】試料液調製用キャリヤ液 試料液調製用キャリヤ液は、食品試料の種類、測定目的
等に応じて適宜決定することができる。例えば、食品試
料が魚肉類である場合、１ｍＭのリン酸イオン含有を含
有するｐＨ６．５の０．０２Ｍビス−トリス塩酸緩衝溶
液を好適に使用することができる。すなわち、該緩衝溶
液中ではＩＭＰが安定であるため、この緩衝溶液を試料
液調製用キャリヤ液として用いれば、後述するＫI値測
定の第２チャンネルにおいて、ＨXＲ及びＨXの合計濃度
を正しく検出することができる。
等に応じて適宜決定することができる。例えば、食品試
料が魚肉類である場合、１ｍＭのリン酸イオン含有を含
有するｐＨ６．５の０．０２Ｍビス−トリス塩酸緩衝溶
液を好適に使用することができる。すなわち、該緩衝溶
液中ではＩＭＰが安定であるため、この緩衝溶液を試料
液調製用キャリヤ液として用いれば、後述するＫI値測
定の第２チャンネルにおいて、ＨXＲ及びＨXの合計濃度
を正しく検出することができる。
【００２９】酵素 アルカリフォスフォターゼ（ＡＰ）としては牛小腸粘膜
由来のもの、プリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ
（ＰＮＰ）としては小牛脾臓由来のもの、好熱性微生物
由来のもの、キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）として
は牛乳由来のもの、好熱性微生物由来のもの等の公知の
ものを使用することができるが、ＰＮＰ及びＸＯＤとし
てはいずれも好熱性微生物由来のものが安定性及び比活
性が高い点で好ましい。
由来のもの、プリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ
（ＰＮＰ）としては小牛脾臓由来のもの、好熱性微生物
由来のもの、キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）として
は牛乳由来のもの、好熱性微生物由来のもの等の公知の
ものを使用することができるが、ＰＮＰ及びＸＯＤとし
てはいずれも好熱性微生物由来のものが安定性及び比活
性が高い点で好ましい。
【００３０】リアクタ ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタは１本のリア
クタにＡＰ、ＰＮＰ及びＸＯＤを固定化したものであ
り、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタは１本のリアク
タにＰＮＰ及びＸＯＤを固定化したものである。この場
合、各リアクタは酵素を固定化した担体をカラムに充填
することにより作製できるが、単一の酵素を固定化した
担体をカラム内にＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤの順あるいはＰ
ＮＰ／ＸＯＤの順に配置する方式よりは、１つの担体に
ＡＰ、ＰＮＰ及びＸＯＤあるいはＰＮＰ及びＸＯＤを固
定化したものをカラムに充填する方式の方が反応効率が
高い点で好ましい。なお、担体としてはアミノプロピル
基を修飾した多孔質ガラス等の任意のものを用いること
ができる。
クタにＡＰ、ＰＮＰ及びＸＯＤを固定化したものであ
り、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタは１本のリアク
タにＰＮＰ及びＸＯＤを固定化したものである。この場
合、各リアクタは酵素を固定化した担体をカラムに充填
することにより作製できるが、単一の酵素を固定化した
担体をカラム内にＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤの順あるいはＰ
ＮＰ／ＸＯＤの順に配置する方式よりは、１つの担体に
ＡＰ、ＰＮＰ及びＸＯＤあるいはＰＮＰ及びＸＯＤを固
定化したものをカラムに充填する方式の方が反応効率が
高い点で好ましい。なお、担体としてはアミノプロピル
基を修飾した多孔質ガラス等の任意のものを用いること
ができる。
【００３１】第１及び第２キャリヤ液 第１キャリヤ液としては、リン酸イオン濃度が試料中の
ＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍以上で５ｍＭ以下、
好ましくは１〜２ｍＭのものを用いる。リン酸イオン濃
度が試料中のＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍より少
ないと試料中のＨXＲの分解が十分に起こらず、ＩＭ
Ｐ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が正しく得られない。ま
た、５ｍＭより多いと試料中のＩＭＰの分解が十分に起
こらず、同様にＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が正し
く得られない。第１キャリヤ液のｐＨは７．０〜９．
０、特に７．５〜８．５であることが望ましい。第１キ
ャリヤ液として、より具体的には、ｐＨ８程度の０．１
Ｍトリス塩酸緩衝溶液に１〜２ｍＭのリン酸イオンを添
加したもの等を用いることができる。第１キャリヤ液に
は、必要に応じ、ＡＰによる酵素反応の活性化を目的と
してマグネシウムイオンを添加することができる。
ＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍以上で５ｍＭ以下、
好ましくは１〜２ｍＭのものを用いる。リン酸イオン濃
度が試料中のＩＭＰ及びＨXＲの合計濃度の２倍より少
ないと試料中のＨXＲの分解が十分に起こらず、ＩＭ
Ｐ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が正しく得られない。ま
た、５ｍＭより多いと試料中のＩＭＰの分解が十分に起
こらず、同様にＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が正し
く得られない。第１キャリヤ液のｐＨは７．０〜９．
０、特に７．５〜８．５であることが望ましい。第１キ
ャリヤ液として、より具体的には、ｐＨ８程度の０．１
Ｍトリス塩酸緩衝溶液に１〜２ｍＭのリン酸イオンを添
加したもの等を用いることができる。第１キャリヤ液に
は、必要に応じ、ＡＰによる酵素反応の活性化を目的と
してマグネシウムイオンを添加することができる。
【００３２】第２キャリヤ液としては、リン酸イオン濃
度を含有するもの、好ましくはリン酸イオン濃度が５ｍ
Ｍ以上、特に５ｍＭ〜１Ｍ、さらに好適には５０〜２０
０ｍＭのものを用いる。リン酸イオン濃度が５ｍＭより
少ないと、低濃度のＩＭＰの場合、数％が分解してＨX
Ｒを生成し、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が正しく求められ
ないことがある。２００ｍＭより多いと、化学発光法で
検出を行う場合に化学発光に適したｐＨに調整できなく
なることがある。また、第２キャリヤ液のｐＨは７．０
〜９．０、特に７．５〜７．８であることが望ましい。
第２キャリヤ液として、より具体的には、ｐＨ７．８程
度の０．１Ｍリン酸緩衝溶液を用いることができる。
度を含有するもの、好ましくはリン酸イオン濃度が５ｍ
Ｍ以上、特に５ｍＭ〜１Ｍ、さらに好適には５０〜２０
０ｍＭのものを用いる。リン酸イオン濃度が５ｍＭより
少ないと、低濃度のＩＭＰの場合、数％が分解してＨX
Ｒを生成し、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が正しく求められ
ないことがある。２００ｍＭより多いと、化学発光法で
検出を行う場合に化学発光に適したｐＨに調整できなく
なることがある。また、第２キャリヤ液のｐＨは７．０
〜９．０、特に７．５〜７．８であることが望ましい。
第２キャリヤ液として、より具体的には、ｐＨ７．８程
度の０．１Ｍリン酸緩衝溶液を用いることができる。
【００３３】第１、第２キャリヤ液への試料の導入 第１キャリヤ液に試料を導入する場合、第１キャリヤ液
中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が０．０６〜３０
０μＭ、好ましくは１〜１００μＭとなるように導入す
ることが適当である。このようにした場合、各成分に対
する検量線が直線状となってＫI値を正しく算出するこ
とが可能となる。また、ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定
化リアクタを小型化して反応時間の短縮を図ることがで
きる。
中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度が０．０６〜３０
０μＭ、好ましくは１〜１００μＭとなるように導入す
ることが適当である。このようにした場合、各成分に対
する検量線が直線状となってＫI値を正しく算出するこ
とが可能となる。また、ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定
化リアクタを小型化して反応時間の短縮を図ることがで
きる。
【００３４】第２キャリヤ液に試料を導入する場合、第
２キャリヤ液中のＨXＲ及びＨXの合計濃度が０．０６〜
３００μＭ、好ましくは１〜１００μＭとなるように導
入することが適当である。このようにした場合、ＰＮＰ
／ＸＯＤ同時固定化リアクタを小型化して反応時間の短
縮を図ることが可能となる。
２キャリヤ液中のＨXＲ及びＨXの合計濃度が０．０６〜
３００μＭ、好ましくは１〜１００μＭとなるように導
入することが適当である。このようにした場合、ＰＮＰ
／ＸＯＤ同時固定化リアクタを小型化して反応時間の短
縮を図ることが可能となる。
【００３５】検出手段 反応後のキャリヤ液中の過酸化水素又は尿酸の濃度を検
出して第１物理量及び第２物理量を得る検出手段として
は、例えば下記手段を挙げることができるが、これらに
限定されるものではない。
出して第１物理量及び第２物理量を得る検出手段として
は、例えば下記手段を挙げることができるが、これらに
限定されるものではない。
【００３６】反応後のキャリヤ液に過酸化水素と反応
して発光する試薬を導入し、このときの発光量を光応答
性素子で計測する。発光試薬としては例えばルミノール
類、過シュウ酸エステル類等を用いることができ、光応
答性素子としては例えばフォトダイオード、フォトトラ
ンジスタ、ＰＩＮフォトダイオード、アバランシェフォ
トダイオード、光導電性セル、光電子増倍管等を用いる
ことができる。 反応後のキャリヤ液中の過酸化水素濃度を過酸化水素
電極等の電極を用いて計測する。 反応後のキャリヤ液中の尿酸濃度をグラッシーカーボ
ン電極等の電極を用いて計測する。
して発光する試薬を導入し、このときの発光量を光応答
性素子で計測する。発光試薬としては例えばルミノール
類、過シュウ酸エステル類等を用いることができ、光応
答性素子としては例えばフォトダイオード、フォトトラ
ンジスタ、ＰＩＮフォトダイオード、アバランシェフォ
トダイオード、光導電性セル、光電子増倍管等を用いる
ことができる。 反応後のキャリヤ液中の過酸化水素濃度を過酸化水素
電極等の電極を用いて計測する。 反応後のキャリヤ液中の尿酸濃度をグラッシーカーボ
ン電極等の電極を用いて計測する。
【００３７】なお、、のように発光法、電極法で過
酸化水素濃度を検出する場合は、試料中に共存している
過酸化物が妨害物質となる可能性があるため、リアクタ
の手前にペルオキシダーゼ固定化カラムやカタラーゼ固
定化カラムを配置して試料中から過酸化物を除去するこ
とが好ましい。また、のように尿酸濃度を検出する場
合は、試料中に共存している尿酸が妨害物質となるた
め、リアクタの手前にウリカーゼ固定化カラムを配置し
て試料中から尿酸を除去することが好ましい。これらの
場合、妨害物質の除去のために使用するカラムは小型の
カラムでよいため、測定の迅速性には影響しない。
酸化水素濃度を検出する場合は、試料中に共存している
過酸化物が妨害物質となる可能性があるため、リアクタ
の手前にペルオキシダーゼ固定化カラムやカタラーゼ固
定化カラムを配置して試料中から過酸化物を除去するこ
とが好ましい。また、のように尿酸濃度を検出する場
合は、試料中に共存している尿酸が妨害物質となるた
め、リアクタの手前にウリカーゼ固定化カラムを配置し
て試料中から尿酸を除去することが好ましい。これらの
場合、妨害物質の除去のために使用するカラムは小型の
カラムでよいため、測定の迅速性には影響しない。
【００３８】
【発明の実施の形態】図１は本発明に係る食品中の成分
測定装置の一例を示すフロー図であり、本装置はサンプ
リング管２を備えた本発明に係る食品試料のサンプリン
グ装置４と、ＦＩＡ法による成分測定部６とからなる。
サンプリング管２において、８はステンレススチール製
の管本体（内径５ｍｍ）、１０は管本体８の先端開口部
を閉塞するポリアミド樹脂製の多孔質膜、１２は多孔質
膜固定用テープ、１４は管本体８に連結されたステンレ
ススチール製のキャリヤ液流入管（内径０．５ｍｍ）、
１６は管本体８に連結されたステンレススチール製のキ
ャリヤ液流出管（内径０．５ｍｍ）、１８はキャリヤ液
流出管１６の先端部に固定されたアクリル樹脂からなる
キャリヤ液の流れ制御用ロッド、２０は管本体８の基端
開口部を閉塞するキャップ、２２はベントバルブを示
す。
測定装置の一例を示すフロー図であり、本装置はサンプ
リング管２を備えた本発明に係る食品試料のサンプリン
グ装置４と、ＦＩＡ法による成分測定部６とからなる。
サンプリング管２において、８はステンレススチール製
の管本体（内径５ｍｍ）、１０は管本体８の先端開口部
を閉塞するポリアミド樹脂製の多孔質膜、１２は多孔質
膜固定用テープ、１４は管本体８に連結されたステンレ
ススチール製のキャリヤ液流入管（内径０．５ｍｍ）、
１６は管本体８に連結されたステンレススチール製のキ
ャリヤ液流出管（内径０．５ｍｍ）、１８はキャリヤ液
流出管１６の先端部に固定されたアクリル樹脂からなる
キャリヤ液の流れ制御用ロッド、２０は管本体８の基端
開口部を閉塞するキャップ、２２はベントバルブを示
す。
【００３９】本サンプリング装置４は、多孔質膜１０を
食品試料２４に接触させた状態において、キャリヤ液流
入管１４からサンプリング管２内に試料液調製用キャリ
ヤ液２６を連続的に導入することにより、多孔質膜１０
を通過した食品試料２４中の成分をサンプリング管２内
を流れるキャリヤ液２６中に採取するとともに、このキ
ャリヤ液２６をキャリヤ液流出管１６から試料液として
連続的に流出させた後、該試料液を成分測定部６に導入
するものである。
食品試料２４に接触させた状態において、キャリヤ液流
入管１４からサンプリング管２内に試料液調製用キャリ
ヤ液２６を連続的に導入することにより、多孔質膜１０
を通過した食品試料２４中の成分をサンプリング管２内
を流れるキャリヤ液２６中に採取するとともに、このキ
ャリヤ液２６をキャリヤ液流出管１６から試料液として
連続的に流出させた後、該試料液を成分測定部６に導入
するものである。
【００４０】本サンプリング装置４は、固形の食品試料
のみならず、液状の食品試料、例えばスープ類等からの
サンプリングも可能である。特に、粒子、微生物、油等
を含む液状試料のサンプリングに本サンプリング装置４
を用いれば、上記粒子、微生物、油等が成分測定部６に
入らないようにすることができ、測定上有利である。ま
た、食品試料が液体状である場合には、前述したように
多孔質膜を通過してキャリヤ液中に入る成分の量は経時
的にほぼ一定しているので、試料中の成分の絶対濃度を
測定することが可能となる。これに対し、食品試料が魚
肉類のような固形物である場合には、前述したように多
孔質膜を通過してキャリヤ液中に入る成分の量が経時的
に変動するので、本サンプリング装置４は成分の比を測
定するのに好適に使用される。
のみならず、液状の食品試料、例えばスープ類等からの
サンプリングも可能である。特に、粒子、微生物、油等
を含む液状試料のサンプリングに本サンプリング装置４
を用いれば、上記粒子、微生物、油等が成分測定部６に
入らないようにすることができ、測定上有利である。ま
た、食品試料が液体状である場合には、前述したように
多孔質膜を通過してキャリヤ液中に入る成分の量は経時
的にほぼ一定しているので、試料中の成分の絶対濃度を
測定することが可能となる。これに対し、食品試料が魚
肉類のような固形物である場合には、前述したように多
孔質膜を通過してキャリヤ液中に入る成分の量が経時的
に変動するので、本サンプリング装置４は成分の比を測
定するのに好適に使用される。
【００４１】図２は本発明に係る魚介類の鮮度測定装置
の一例を示すフロー図である。図２において、３２はリ
ン酸イオン濃度が１〜２ｍＭの第１キャリヤ液、３４は
リン酸イオン濃度が５〜２００ｍＭの第２キャリヤ液、
３６、３８は過酸化水素と反応して発光する発光試薬を
含む発光試薬液、４は図１に示した構成のサンプリング
装置、４０はサンプリング装置４からの試料液を一時貯
留して攪拌するマグネットスターラを用いた貯留・攪拌
機構（攪拌槽容量１．５ｍｌ程度）、４２はペリスタポ
ンプ、４４は第１キャリヤ液流路、４６は第２キャリヤ
液流路、４８、５０は発光試薬液流路、５２は試料液流
路、５４は第１キャリヤ液にサンプリング装置４からの
試料液を導入するインジェクタ、５６は第１キャリヤ液
流路４４に介装されたＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化
リアクタ（内径２ｍｍ、長さ３０ｍｍ）、５８はリアク
タ５６を出た第１キャリヤ液に発光試薬液３６を導入
し、このときの発光量を光応答性素子で計測する検出
部、６０は第２キャリヤ液にサンプリング装置４からの
試料液を導入するインジェクタ、６２は第２キャリヤ液
流路４６に介装されたＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアク
タ（内径２ｍｍ、長さ３０ｍｍ）、６４はリアクタ６２
を出た第２キャリヤ液に発光試薬液３８を導入し、この
ときの発光量を光応答性素子で計測する検出部、６６は
検出部５８、６４で計測した発光量（第１物理量及び第
２物理量）からＫI値を算出する演算部（パーソナルコ
ンピュータ）を示す。
の一例を示すフロー図である。図２において、３２はリ
ン酸イオン濃度が１〜２ｍＭの第１キャリヤ液、３４は
リン酸イオン濃度が５〜２００ｍＭの第２キャリヤ液、
３６、３８は過酸化水素と反応して発光する発光試薬を
含む発光試薬液、４は図１に示した構成のサンプリング
装置、４０はサンプリング装置４からの試料液を一時貯
留して攪拌するマグネットスターラを用いた貯留・攪拌
機構（攪拌槽容量１．５ｍｌ程度）、４２はペリスタポ
ンプ、４４は第１キャリヤ液流路、４６は第２キャリヤ
液流路、４８、５０は発光試薬液流路、５２は試料液流
路、５４は第１キャリヤ液にサンプリング装置４からの
試料液を導入するインジェクタ、５６は第１キャリヤ液
流路４４に介装されたＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化
リアクタ（内径２ｍｍ、長さ３０ｍｍ）、５８はリアク
タ５６を出た第１キャリヤ液に発光試薬液３６を導入
し、このときの発光量を光応答性素子で計測する検出
部、６０は第２キャリヤ液にサンプリング装置４からの
試料液を導入するインジェクタ、６２は第２キャリヤ液
流路４６に介装されたＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアク
タ（内径２ｍｍ、長さ３０ｍｍ）、６４はリアクタ６２
を出た第２キャリヤ液に発光試薬液３８を導入し、この
ときの発光量を光応答性素子で計測する検出部、６６は
検出部５８、６４で計測した発光量（第１物理量及び第
２物理量）からＫI値を算出する演算部（パーソナルコ
ンピュータ）を示す。
【００４２】本装置では、第１キャリヤ液流路４４、発
光試薬液流路４８、インジェクタ５４、ＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６、検出部５８によって第
１チャンネル６８が構成され、第２キャリヤ液流路４
６、発光試薬液流路５０、インジェクタ６０、ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタ６２、検出部６４によって第
２チャンネル７０が構成されている。
光試薬液流路４８、インジェクタ５４、ＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６、検出部５８によって第
１チャンネル６８が構成され、第２キャリヤ液流路４
６、発光試薬液流路５０、インジェクタ６０、ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタ６２、検出部６４によって第
２チャンネル７０が構成されている。
【００４３】本装置においては、第１キャリヤ液流路４
４を流れる第１キャリヤ液にインジェクタ５４からサン
プリング装置４からの試料液を導入し、この第１キャリ
ヤ液をＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６に
通して試料中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXをそれぞれ過酸化
水素及び尿酸に変換した後、検出部５８で第１キャリヤ
液中の過酸化水素濃度を検出することにより試料中のＩ
ＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度に対応する第１物理量
（発光量）を得る。また、第２キャリヤ液流路４６を流
れる第２キャリヤ液にインジェクタ５０からサンプリン
グ装置４からの試料液を導入し、この第２キャリヤ液を
ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ６２に通して試料中
のＨXＲ及びＨXをそれぞれ過酸化水素及び尿酸に変換し
た後、検出部６４で第２キャリヤ液中の過酸化水素濃度
を検出することにより試料中のＨXＲ及びＨXの合計濃度
に対応する第２物理量（発光量）を得る。そして、演算
部６６において、第１物理量（[IMP]+[HXR]+[HX]に対
応）及び第２物理量（[HXR]+[HX]に対応）から下記式に
よりＫI値を算出するものである。 ＫI値＝（第２物理量／第１物理量）×100
４を流れる第１キャリヤ液にインジェクタ５４からサン
プリング装置４からの試料液を導入し、この第１キャリ
ヤ液をＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６に
通して試料中のＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXをそれぞれ過酸化
水素及び尿酸に変換した後、検出部５８で第１キャリヤ
液中の過酸化水素濃度を検出することにより試料中のＩ
ＭＰ、ＨXＲ及びＨXの合計濃度に対応する第１物理量
（発光量）を得る。また、第２キャリヤ液流路４６を流
れる第２キャリヤ液にインジェクタ５０からサンプリン
グ装置４からの試料液を導入し、この第２キャリヤ液を
ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ６２に通して試料中
のＨXＲ及びＨXをそれぞれ過酸化水素及び尿酸に変換し
た後、検出部６４で第２キャリヤ液中の過酸化水素濃度
を検出することにより試料中のＨXＲ及びＨXの合計濃度
に対応する第２物理量（発光量）を得る。そして、演算
部６６において、第１物理量（[IMP]+[HXR]+[HX]に対
応）及び第２物理量（[HXR]+[HX]に対応）から下記式に
よりＫI値を算出するものである。 ＫI値＝（第２物理量／第１物理量）×100
【００４４】
【実施例】図２に示した装置を用いて下記実験１〜７を
行い、図２の成分測定部６の効果を確認した。ただし、
実験例１〜７では、成分測定部６にサンプリング装置４
及び貯留・攪拌機構４０を接続せず、別途調製した試料
液を用いて実験を行った。また、検出部５８、６４の光
応答性素子としてはシリコンフォトダイオードを使用
し、シリコンフォトダイオードで検出した光に対応する
電圧信号を検出部５８、６４から演算部６６に転送し
た。また、演算部６６で上記電圧値を記録し、ピーク高
さの算出に用いた。
行い、図２の成分測定部６の効果を確認した。ただし、
実験例１〜７では、成分測定部６にサンプリング装置４
及び貯留・攪拌機構４０を接続せず、別途調製した試料
液を用いて実験を行った。また、検出部５８、６４の光
応答性素子としてはシリコンフォトダイオードを使用
し、シリコンフォトダイオードで検出した光に対応する
電圧信号を検出部５８、６４から演算部６６に転送し
た。また、演算部６６で上記電圧値を記録し、ピーク高
さの算出に用いた。
【００４５】実験例１：第１キャリヤ液中のリン酸イオ
ンの影響 第１キャリヤ液を０．１Ｍトリス塩酸緩衝溶液（ｐＨ
８．０、１０ｍＭマグネシウムイオン含有）とし、これ
にリン酸ナトリウムを添加して、リン酸イオン濃度を１
ｍＭ〜１００ｍＭの範囲で変化させた。ＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６としては、酵素固定化担
体を内径２ｍｍ、長さ５ｍｍのカラムに充填したものを
用いた。これらの条件で１００μＭのＩＭＰ、ＨXＲ及
びＨXをそれぞれ０．０２ｍＭビス−トリス塩酸緩衝溶
液（２０μｌ、ｐＨ６．５、１ｍＭリン酸イオン含有）
としたものを測定し、ＩＭＰ／ＨXＲ、ＨXＲ／ＨXのピ
ーク高さの比を比較した。結果を図３に示す。図３よ
り、ＡＰの活性に対応するＩＭＰ／ＨXＲの比は、この
範囲で直線的に減少するが、リン酸イオン濃度１〜２ｍ
Ｍでは０．８〜０．９程度であることがわかった。ま
た、ＰＮＰの活性に対応するＨXＲ／ＨXの比は、リン酸
イオン濃度１〜２ｍＭにおいて０．８付近であることが
わかった。したがって、第１キャリヤ液中のリン酸イオ
ン濃度を１〜２ｍＭとした場合には、ＡＰによる酵素反
応がリン酸イオンによってほとんど阻害されることなく
進行し、かつＰＮＰによる酵素反応も良好に進行するこ
とが確認された。なお、第１キャリヤ液にＩＭＰが添加
された時点で、ＨXＲやＨXへの分解が起こる可能性があ
るが（後述）、最終的に[IMP]+[HXR]+[HX]として測定す
るので、測定結果に影響はないと考えられる。
ンの影響 第１キャリヤ液を０．１Ｍトリス塩酸緩衝溶液（ｐＨ
８．０、１０ｍＭマグネシウムイオン含有）とし、これ
にリン酸ナトリウムを添加して、リン酸イオン濃度を１
ｍＭ〜１００ｍＭの範囲で変化させた。ＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６としては、酵素固定化担
体を内径２ｍｍ、長さ５ｍｍのカラムに充填したものを
用いた。これらの条件で１００μＭのＩＭＰ、ＨXＲ及
びＨXをそれぞれ０．０２ｍＭビス−トリス塩酸緩衝溶
液（２０μｌ、ｐＨ６．５、１ｍＭリン酸イオン含有）
としたものを測定し、ＩＭＰ／ＨXＲ、ＨXＲ／ＨXのピ
ーク高さの比を比較した。結果を図３に示す。図３よ
り、ＡＰの活性に対応するＩＭＰ／ＨXＲの比は、この
範囲で直線的に減少するが、リン酸イオン濃度１〜２ｍ
Ｍでは０．８〜０．９程度であることがわかった。ま
た、ＰＮＰの活性に対応するＨXＲ／ＨXの比は、リン酸
イオン濃度１〜２ｍＭにおいて０．８付近であることが
わかった。したがって、第１キャリヤ液中のリン酸イオ
ン濃度を１〜２ｍＭとした場合には、ＡＰによる酵素反
応がリン酸イオンによってほとんど阻害されることなく
進行し、かつＰＮＰによる酵素反応も良好に進行するこ
とが確認された。なお、第１キャリヤ液にＩＭＰが添加
された時点で、ＨXＲやＨXへの分解が起こる可能性があ
るが（後述）、最終的に[IMP]+[HXR]+[HX]として測定す
るので、測定結果に影響はないと考えられる。
【００４６】実験例２：第２キャリヤ液中での低濃度Ｉ
ＭＰの安定性 図２に示した成分測定部６では、第２チャンネル７０に
おいてＩＭＰが分解しないことが必要であるが、ＩＭＰ
はアルカリ性及び酸性で不安定で、一部がＨXＲ又はＨX
に分解するとされている。そこで、１μＭの低濃度ＩＭ
Ｐ溶液を各種緩衝溶液を用いて調製し、高速液体クロマ
トグラフによってＨXＲ及びＨXへの分解量を測定した。
その結果、０．１Ｍトリス塩酸緩衝溶液（ｐＨ７．８及
びｐＨ８．０、０、１ｍＭリン酸イオン含有）中ではＨ
XＲへの分解が８％程度認められたが、０．１Ｍトリス
塩酸緩衝溶液（ｐＨ７．８、リン酸イオンを５、１０、
３０ｍＭ含有）及び０．１Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．
８）中ではＨXＲやＨXへの分解はほとんど認められなか
った（１％以下）。したがって、第２キャリヤ液３４と
してリン酸イオン濃度が１０〜１００ｍＭのもの、例え
ばｐＨ７．８程度の０．１Ｍリン酸緩衝溶液を用いれ
ば、１μＭ程度の低濃度のＩＭＰでも、ＨXＲやＨXへの
分解をほとんど生じさせることなく測定を行うことがで
きることがわかった。
ＭＰの安定性 図２に示した成分測定部６では、第２チャンネル７０に
おいてＩＭＰが分解しないことが必要であるが、ＩＭＰ
はアルカリ性及び酸性で不安定で、一部がＨXＲ又はＨX
に分解するとされている。そこで、１μＭの低濃度ＩＭ
Ｐ溶液を各種緩衝溶液を用いて調製し、高速液体クロマ
トグラフによってＨXＲ及びＨXへの分解量を測定した。
その結果、０．１Ｍトリス塩酸緩衝溶液（ｐＨ７．８及
びｐＨ８．０、０、１ｍＭリン酸イオン含有）中ではＨ
XＲへの分解が８％程度認められたが、０．１Ｍトリス
塩酸緩衝溶液（ｐＨ７．８、リン酸イオンを５、１０、
３０ｍＭ含有）及び０．１Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．
８）中ではＨXＲやＨXへの分解はほとんど認められなか
った（１％以下）。したがって、第２キャリヤ液３４と
してリン酸イオン濃度が１０〜１００ｍＭのもの、例え
ばｐＨ７．８程度の０．１Ｍリン酸緩衝溶液を用いれ
ば、１μＭ程度の低濃度のＩＭＰでも、ＨXＲやＨXへの
分解をほとんど生じさせることなく測定を行うことがで
きることがわかった。
【００４７】実験例３：ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定
化リアクタにおけるｐＨの影響 第１キャリヤ液３２のｐＨについて、実験例１と同様の
方法で検討を行った。第１キャリヤ液には０．１Ｍトリ
ス塩酸緩衝溶液（１ｍＭリン酸イオン、１０ｍＭマグネ
シウムイオン含有）を用い、ｐＨを７．０〜８．７の間
で変化させて、実験例１と同様の検討を行った。結果を
図４に示す。その結果、第１キャリヤ液としてはｐＨ
７．５〜８．７程度の範囲のものが使用可能であり、特
にｐＨ８付近が適当であることがわかった。
化リアクタにおけるｐＨの影響 第１キャリヤ液３２のｐＨについて、実験例１と同様の
方法で検討を行った。第１キャリヤ液には０．１Ｍトリ
ス塩酸緩衝溶液（１ｍＭリン酸イオン、１０ｍＭマグネ
シウムイオン含有）を用い、ｐＨを７．０〜８．７の間
で変化させて、実験例１と同様の検討を行った。結果を
図４に示す。その結果、第１キャリヤ液としてはｐＨ
７．５〜８．７程度の範囲のものが使用可能であり、特
にｐＨ８付近が適当であることがわかった。
【００４８】実験例４：ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リア
クタにおけるｐＨの影響 第２キャリヤ液３２のｐＨについて、実験例３と同様の
方法で検討を行った。第２キャリヤ液には０．１Ｍリン
酸緩衝溶液を用い、ｐＨを７．５〜８．７間で変化させ
て、実験例３と同様の検討を行った。結果を図５に示
す。その結果、第２キャリヤ液としてはｐＨ７．５〜
８．７程度の範囲のものが使用可能であり、特にｐＨ
７．８付近が適当であることがわかった。
クタにおけるｐＨの影響 第２キャリヤ液３２のｐＨについて、実験例３と同様の
方法で検討を行った。第２キャリヤ液には０．１Ｍリン
酸緩衝溶液を用い、ｐＨを７．５〜８．７間で変化させ
て、実験例３と同様の検討を行った。結果を図５に示
す。その結果、第２キャリヤ液としてはｐＨ７．５〜
８．７程度の範囲のものが使用可能であり、特にｐＨ
７．８付近が適当であることがわかった。
【００４９】実験例５：リアクタ長さの影響 ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６の長さの
影響を調べた。第１キャリヤ液は０．１Ｍトリス塩酸緩
衝溶液（ｐＨ８．０、１又は２ｍＭリン酸イオン、１０
ｍＭマグネシウムイオン含有）とした。結果を図６に示
す。その結果、リアクタ長さ３０ｍｍではピーク高さは
３成分ともほぼ同じで、比は約０．９９であった。した
がって、ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタは３
０ｍｍの長さで十分にＩＭＰ→ＨXＲ→ＨXの変換が行え
ることが認められた。また、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化
リアクタ６２についても同様の検討を行った結果、ＡＰ
／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタと同様に３０ｍｍ
の長さで十分にＨXＲ→ＨXの変換が行えることがわかっ
た。
影響を調べた。第１キャリヤ液は０．１Ｍトリス塩酸緩
衝溶液（ｐＨ８．０、１又は２ｍＭリン酸イオン、１０
ｍＭマグネシウムイオン含有）とした。結果を図６に示
す。その結果、リアクタ長さ３０ｍｍではピーク高さは
３成分ともほぼ同じで、比は約０．９９であった。した
がって、ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタは３
０ｍｍの長さで十分にＩＭＰ→ＨXＲ→ＨXの変換が行え
ることが認められた。また、ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化
リアクタ６２についても同様の検討を行った結果、ＡＰ
／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタと同様に３０ｍｍ
の長さで十分にＨXＲ→ＨXの変換が行えることがわかっ
た。
【００５０】実験例６：ＩＭＰ、ＨXＲ、ＨXに対する検
量線 下記測定条件でＩＭＰ、ＨXＲ、ＨXに対する検量線の作
成を行った。 (1)発光試薬（第１、第２チャンネルともに同じ）：ル
ミノール３５μＭ、ペルオキシダーゼ２５μｇｍｌ-1を
含有する０．８Ｍ炭酸ナトリウム緩衝溶液（ｐＨ１０．
０） (2)第１キャリヤ液：０．１Ｍトリス塩酸緩衝溶液（ｐ
Ｈ８．０、１ｍＭリン酸イオン、１０ｍＭマグネシウム
イオン含有） (3)第２キャリヤ液：０．１Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ
７．８） (4)流速：流路１４、１６、１８、２０とも、０．６ｍ
ｌ／分 (5)リアクタ：リアクタ２６、３２とも、内径２ｍｍ、
長さ３０ｍｍ (6)温度：２５±０．５℃ (7)サンプル量：２０μｌ
量線 下記測定条件でＩＭＰ、ＨXＲ、ＨXに対する検量線の作
成を行った。 (1)発光試薬（第１、第２チャンネルともに同じ）：ル
ミノール３５μＭ、ペルオキシダーゼ２５μｇｍｌ-1を
含有する０．８Ｍ炭酸ナトリウム緩衝溶液（ｐＨ１０．
０） (2)第１キャリヤ液：０．１Ｍトリス塩酸緩衝溶液（ｐ
Ｈ８．０、１ｍＭリン酸イオン、１０ｍＭマグネシウム
イオン含有） (3)第２キャリヤ液：０．１Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ
７．８） (4)流速：流路１４、１６、１８、２０とも、０．６ｍ
ｌ／分 (5)リアクタ：リアクタ２６、３２とも、内径２ｍｍ、
長さ３０ｍｍ (6)温度：２５±０．５℃ (7)サンプル量：２０μｌ
【００５１】得られた検量線を図７、８に示す。図７は
ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６による検
量線、図８はＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ６２に
よる検量線である。その結果、０．０６〜３００μＭの
範囲において直線の検量線が得られ、図２に示した成分
測定部６によればこの範囲の濃度の成分を測定可能であ
ることが認められた。
ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ５６による検
量線、図８はＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ６２に
よる検量線である。その結果、０．０６〜３００μＭの
範囲において直線の検量線が得られ、図２に示した成分
測定部６によればこの範囲の濃度の成分を測定可能であ
ることが認められた。
【００５２】実験例７：ＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXを含む試
料の測定 ＩＭＰ２０μＭ、ＨXＲ２μＭ及びＨX２μＭを含む模擬
試料を調製し、この試料の測定を実験例６と同様にして
を行った。検出部の応答を図９に示す。この場合、第１
チャンネルの出力Ｘのピーク高さと第２チャンネルの出
力Ｙのピーク高さとの比からＫI値を算出するものであ
るが、図９より、図２に示した成分測定部６によれば１
分程度の短時間でＫI値を算出できることが確認され
た。
料の測定 ＩＭＰ２０μＭ、ＨXＲ２μＭ及びＨX２μＭを含む模擬
試料を調製し、この試料の測定を実験例６と同様にして
を行った。検出部の応答を図９に示す。この場合、第１
チャンネルの出力Ｘのピーク高さと第２チャンネルの出
力Ｙのピーク高さとの比からＫI値を算出するものであ
るが、図９より、図２に示した成分測定部６によれば１
分程度の短時間でＫI値を算出できることが確認され
た。
【００５３】成分測定部６とサンプリング装置４、貯留
・攪拌機構４０とを接続した図２の装置を用いて下記実
験８〜９を行い、図２の装置の効果を確認した。この場
合、試料液調製用キャリヤ液としては０．０２Ｍビス−
トリス塩酸緩衝溶液（ｐＨ６．５、１ｍＭリン酸イオン
含有）を用いた。その他の条件は実験例６と同様とし
た。
・攪拌機構４０とを接続した図２の装置を用いて下記実
験８〜９を行い、図２の装置の効果を確認した。この場
合、試料液調製用キャリヤ液としては０．０２Ｍビス−
トリス塩酸緩衝溶液（ｐＨ６．５、１ｍＭリン酸イオン
含有）を用いた。その他の条件は実験例６と同様とし
た。
【００５４】実験例８：ＩＭＰ溶液に対する検量線 ０℃又は２５℃に保ったＩＭＰ溶液にサンプリング装置
４のサンプリング管の先端部を浸漬して測定を行った。
検量線を図１０に示す。その結果、１００μＭ〜１ｍＭ
までの範囲では検量線は直線であり、傾きも０．９５と
良好であった。
４のサンプリング管の先端部を浸漬して測定を行った。
検量線を図１０に示す。その結果、１００μＭ〜１ｍＭ
までの範囲では検量線は直線であり、傾きも０．９５と
良好であった。
【００５５】実験例９：魚肉試料の直接測定 魚肉試料として凍結（−２０℃）しておいた鯖を使用
し、これにサンプリング管の先端部を当てた場合の応答
を調べた。この場合、鯖の体表から５ｍｍ程度までナイ
フで切れ目をいれ、そこにサンプリング管の先端を差し
入れた。成分測定部への試料液の導入は、インジェクタ
をシーケンサで制御し、３回ずつ連続で測定できるよう
にした。結果を図１１に示す。図１１（Ａ）からわかる
ように、サンプリング管を魚肉に当てた後８０秒程度か
ら応答が見られた（●は第１チャンネルのピーク高さ、
○は第２チャンネルのピーク高さ）。また、ピーク高さ
は変動したが、同一時刻の第１チャンネルの応答と第２
チャンネルの応答との比を計算すると、図１１（Ｂ）に
示したようにほぼ一定であった（●は第２チャンネル／
第１チャンネルのピーク高さの比）。したがって図２の
装置によれば、魚肉から直接サンプリングを行ってＫI
値を算出できることが確認された。
し、これにサンプリング管の先端部を当てた場合の応答
を調べた。この場合、鯖の体表から５ｍｍ程度までナイ
フで切れ目をいれ、そこにサンプリング管の先端を差し
入れた。成分測定部への試料液の導入は、インジェクタ
をシーケンサで制御し、３回ずつ連続で測定できるよう
にした。結果を図１１に示す。図１１（Ａ）からわかる
ように、サンプリング管を魚肉に当てた後８０秒程度か
ら応答が見られた（●は第１チャンネルのピーク高さ、
○は第２チャンネルのピーク高さ）。また、ピーク高さ
は変動したが、同一時刻の第１チャンネルの応答と第２
チャンネルの応答との比を計算すると、図１１（Ｂ）に
示したようにほぼ一定であった（●は第２チャンネル／
第１チャンネルのピーク高さの比）。したがって図２の
装置によれば、魚肉から直接サンプリングを行ってＫI
値を算出できることが確認された。
【００５６】また、多孔質膜の場合は、前述したよう
に、魚肉の表面のように液体量の少ないところでは、キ
ャリヤ液に取り込まれるＩＭＰ等の量の変動が大きいこ
とが考えられる。そこで、図２の装置ではインジェクタ
の手前に貯留・攪拌機構を設置して、試料液中のＩＭＰ
等の濃度の変化が急激に起きないようにしているもので
ある。この点について検討を行ったところ、魚肉直接測
定時でも継続して測定した場合の応答値の変動は比較的
緩やかであり、したがって食品試料が固形物である場合
には、キャリヤ液流出管から流出させた試料液を成分測
定部に導入する前に一時貯留して攪拌することが有効で
あることがわかった。
に、魚肉の表面のように液体量の少ないところでは、キ
ャリヤ液に取り込まれるＩＭＰ等の量の変動が大きいこ
とが考えられる。そこで、図２の装置ではインジェクタ
の手前に貯留・攪拌機構を設置して、試料液中のＩＭＰ
等の濃度の変化が急激に起きないようにしているもので
ある。この点について検討を行ったところ、魚肉直接測
定時でも継続して測定した場合の応答値の変動は比較的
緩やかであり、したがって食品試料が固形物である場合
には、キャリヤ液流出管から流出させた試料液を成分測
定部に導入する前に一時貯留して攪拌することが有効で
あることがわかった。
【００５７】
【発明の効果】本発明に係る食品中の成分測定方法及び
装置によれば、魚肉類等の固形状の食品試料やスープ類
等の液状の食品試料にサンプリング管の先端を当てるだ
けで、食品試料から直接成分を採取してＦＩＡ法によっ
て測定を行うことができ、したがって食品試料の測定を
きわめて簡単に行うことが可能である。
装置によれば、魚肉類等の固形状の食品試料やスープ類
等の液状の食品試料にサンプリング管の先端を当てるだ
けで、食品試料から直接成分を採取してＦＩＡ法によっ
て測定を行うことができ、したがって食品試料の測定を
きわめて簡単に行うことが可能である。
【００５８】本発明に係る魚介類の鮮度測定方法及び装
置によれば、魚肉類にサンプリング管の先端を当てるだ
けで、魚肉類から直接成分を採取してＦＩＡ法によって
ＫI値を測定することができ、したがってＫI値の測定を
きわめて簡単に行うことが可能である。また、本発明に
係る魚介類の鮮度測定方法及び装置は、ＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタを用いたことにより、ＩＭ
Ｐ、ＨXＲ及びＨXを過酸化水素及び尿酸に変換する酵素
反応を高い反応効率で高速に行うことができるため、１
試料のＫI値を１分程度の短時間で算出することがで
き、魚介類の鮮度判定をきわめて迅速に行うことが可能
である。さらに、本発明に係る魚介類の鮮度測定方法及
び装置では低濃度の試料を用いればよいため、試料中の
成分を十分に分解するために必要な固定化酵素量が少な
くてすみ、リアクタを小型化して反応時間を短くするこ
とができるため、この点でも測定の迅速化を図ることが
できる。
置によれば、魚肉類にサンプリング管の先端を当てるだ
けで、魚肉類から直接成分を採取してＦＩＡ法によって
ＫI値を測定することができ、したがってＫI値の測定を
きわめて簡単に行うことが可能である。また、本発明に
係る魚介類の鮮度測定方法及び装置は、ＡＰ／ＰＮＰ／
ＸＯＤ同時固定化リアクタを用いたことにより、ＩＭ
Ｐ、ＨXＲ及びＨXを過酸化水素及び尿酸に変換する酵素
反応を高い反応効率で高速に行うことができるため、１
試料のＫI値を１分程度の短時間で算出することがで
き、魚介類の鮮度判定をきわめて迅速に行うことが可能
である。さらに、本発明に係る魚介類の鮮度測定方法及
び装置では低濃度の試料を用いればよいため、試料中の
成分を十分に分解するために必要な固定化酵素量が少な
くてすみ、リアクタを小型化して反応時間を短くするこ
とができるため、この点でも測定の迅速化を図ることが
できる。
【００５９】本発明に係る食品試料のサンプリング方法
及び装置によれば、魚肉類等の固形状の食品試料やスー
プ類等の液状の食品試料にサンプリング管の先端を当て
るだけで、食品試料から直接成分を採取することがで
き、したがって食品試料のサンプリングをきわめて簡単
に行うことが可能である。
及び装置によれば、魚肉類等の固形状の食品試料やスー
プ類等の液状の食品試料にサンプリング管の先端を当て
るだけで、食品試料から直接成分を採取することがで
き、したがって食品試料のサンプリングをきわめて簡単
に行うことが可能である。
【図１】本発明に係る食品中の成分測定装置の一例を示
す概略図である。
す概略図である。
【図２】本発明に係る魚介類の鮮度測定装置の一例を示
すフロー図である。
すフロー図である。
【図３】第１キャリヤ液中のリン酸イオン濃度とＩＭＰ
／ＨXＲ、ＨXＲ／ＨXのピーク高さの比との関係を示す
グラフである。
／ＨXＲ、ＨXＲ／ＨXのピーク高さの比との関係を示す
グラフである。
【図４】第１キャリヤ液のｐＨとＩＭＰ／ＨXＲ、ＨXＲ
／ＨXのピーク高さの比との関係を示すグラフである。
／ＨXのピーク高さの比との関係を示すグラフである。
【図５】第２キャリヤ液のｐＨとＨXＲ／ＨXのピーク高
さの比との関係を示すグラフである。
さの比との関係を示すグラフである。
【図６】ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタの長
さとＩＭＰ／ＨXＲ、ＨXＲ／ＨXのピーク高さの比との
関係を示すグラフである。
さとＩＭＰ／ＨXＲ、ＨXＲ／ＨXのピーク高さの比との
関係を示すグラフである。
【図７】ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタによ
って反応を行った場合におけるＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの
濃度とピーク高さとの関係を示すグラフである。
って反応を行った場合におけるＩＭＰ、ＨXＲ及びＨXの
濃度とピーク高さとの関係を示すグラフである。
【図８】ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタによって反
応を行った場合におけるＨXＲ及びＨXの濃度とピーク高
さとの関係を示すグラフである。
応を行った場合におけるＨXＲ及びＨXの濃度とピーク高
さとの関係を示すグラフである。
【図９】図２の装置の成分測定部を用いてＩＭＰ、ＨX
Ｒ及びＨXを含む試料の測定を行った場合の応答の一例
を示す波形図である。
Ｒ及びＨXを含む試料の測定を行った場合の応答の一例
を示す波形図である。
【図１０】図２の装置のサンプリング管をＩＭＰ溶液に
浸漬したときのＩＭＰ濃度とピーク高さとの関係を示す
グラフである。
浸漬したときのＩＭＰ濃度とピーク高さとの関係を示す
グラフである。
【図１１】（Ａ）は図２の装置のサンプリング管を魚肉
に接触させたときの第１チャンネル及び第２チャンネル
のピーク高さを示すグラフ、（Ｂ）は両ピーク高さの比
を示すグラフである。
に接触させたときの第１チャンネル及び第２チャンネル
のピーク高さを示すグラフ、（Ｂ）は両ピーク高さの比
を示すグラフである。
【図１２】従来の魚介類の鮮度測定装置の一例を示すフ
ロー図である。
ロー図である。
２ サンプリング管 ４ サンプリング装置 ６ 成分測定部 ８ 管本体 １０ 多孔質膜 １４ キャリヤ液流入管 １６ キャリヤ液流出管 ３２ 第１キャリヤ液 ３４ 第２キャリヤ液 ３６ 発光試薬液 ３８ 発光試薬液 ４０ 試料液 ４２ ペリスタポンプ ４４ 第１キャリヤ液流路 ４６ 第２キャリヤ液流路 ４８ 発光試薬液流路 ５０ 発光試薬液流路 ５２ 試料液流路 ５４ インジェクタ ５６ ＡＰ／ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ ５８ 検出部 ６０ インジェクタ ６２ ＰＮＰ／ＸＯＤ同時固定化リアクタ ６４ 検出部 ６６ 演算部 ６８ 第１チャンネル ７０ 第２チャンネル
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 輕部 征夫 神奈川県川崎市宮前区東有馬１丁目３番16 号
Claims (12)
- 【請求項１】 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞す
るとともに、該管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ
液流出管を連結してなるサンプリング管を用い、前記サ
ンプリング管の多孔質膜を食品試料に接触させた状態に
おいて、前記キャリヤ液流入管からサンプリング管内に
試料液調製用キャリヤ液を連続的に導入することによ
り、前記多孔質膜を通過した食品試料中の成分をサンプ
リング管内を流れるキャリヤ液中に採取するとともに、
このキャリヤ液を前記キャリヤ液流出管から試料液とし
て連続的に流出させた後、該試料液をＦＩＡ法による成
分測定部に導入することを特徴とする食品中の成分測定
方法。 - 【請求項２】 食品試料が固形物である場合に、キャリ
ヤ液流出管から流出させた試料液を成分測定部に導入す
る前に一時貯留して攪拌するようにした請求項１記載の
方法。 - 【請求項３】 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞す
るとともに、該管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ
液流出管を連結してなるサンプリング管を用い、前記サ
ンプリング管の多孔質膜を魚肉類に接触させた状態にお
いて、前記キャリヤ液流入管からサンプリング管内に試
料液調製用キャリヤ液を連続的に導入することにより、
前記多孔質膜を通過した魚肉類中の成分をサンプリング
管内を流れるキャリヤ液中に採取するとともに、このキ
ャリヤ液を前記キャリヤ液流出管から試料液として連続
的に流出させた後、 キャリヤ液流出管から流出した試料液を一時貯留して攪
拌し、 次いでリン酸イオン濃度が試料中のイノシン５’−リン
酸及びイノシンの合計濃度の２倍以上で５ｍＭ以下であ
る第１キャリヤ液に前記貯留、攪拌後の試料液を導入
し、この第１キャリヤ液をアルカリフォスフォターゼ／
プリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオ
キシダーゼ同時固定化リアクタに通して試料液中のイノ
シン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチンを過酸
化水素及び尿酸に変換した後、第１キャリヤ液中の過酸
化水素又は尿酸の濃度を検出することにより試料液中の
イノシン５’−リン酸、イノシン及びヒポキサンチンの
合計濃度に対応する第１物理量を得るとともに、 リン酸イオンを含む第２キャリヤ液に前記貯留、攪拌後
の試料液を導入し、この第２キャリヤ液をプリンヌクレ
オシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオキシダーゼ同
時固定化リアクタに通して試料液中のイノシン及びヒポ
キサンチンを過酸化水素及び尿酸に変換した後、第２キ
ャリヤ液中の過酸化水素又は尿酸の濃度を検出すること
により試料液中のイノシン及びヒポキサンチンの合計濃
度に対応する第２物理量を得、 前記第１物理量及び第２物理量から下記式で示されるＫ
I値を算出することを特徴とする魚介類の鮮度測定方
法。 ＫI値＝{([HXR]+[HX])／([IMP]+[HXR]+[HX])}×100 [IMP]：イノシン５’−リン酸濃度 [HXR]：イノシン濃度 [HX] ：ヒポキサンチン濃度 - 【請求項４】 第１キャリヤ液中のイノシン５’−リン
酸、イノシン及びヒポキサンチンの合計濃度が０．０６
〜３００μＭとなるように第１キャリヤ液に試料液を導
入する請求項３記載の方法。 - 【請求項５】 第２キャリヤ液として、リン酸イオン濃
度が５ｍＭ以上のものを用いる請求項３又は４記載の方
法。 - 【請求項６】 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞す
るとともに、該管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ
液流出管を連結してなるサンプリング管を用い、前記サ
ンプリング管の多孔質膜を食品試料に接触させた状態に
おいて、前記キャリヤ液流入管からサンプリング管内に
試料液調製用キャリヤ液を連続的に導入することによ
り、前記多孔質膜を通過した食品試料中の成分をサンプ
リング管内を流れるキャリヤ液中に採取するとともに、
このキャリヤ液を前記キャリヤ液流出管から試料液とし
て連続的に流出させることを特徴とする食品試料のサン
プリング方法。 - 【請求項７】 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞す
るとともに、該管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ
液流出管を連結してなるサンプリング管を用い、前記サ
ンプリング管の多孔質膜を食品試料に接触させた状態に
おいて、前記キャリヤ液流入管からサンプリング管内に
試料液調製用キャリヤ液を連続的に導入することによ
り、前記多孔質膜を通過した食品試料中の成分をサンプ
リング管内を流れるキャリヤ液中に採取するとともに、
このキャリヤ液を前記キャリヤ液流出管から試料液とし
て連続的に流出させるサンプリング装置と、 前記サンプリング装置のキャリヤ液流出管から流出した
試料液が導入され、該試料液中の成分をＦＩＡ法により
測定する成分測定部とを具備することを特徴とする食品
中の成分測定装置。 - 【請求項８】 サンプリング装置のキャリヤ液流出管か
ら流出した試料液を成分測定部の手前で一時貯留して攪
拌する貯留・攪拌機構を設けた請求項７記載の装置。 - 【請求項９】 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞す
るとともに、該管本体にキャリヤ液流入管及びキャリヤ
液流出管を連結してなるサンプリング管を用い、前記サ
ンプリング管の多孔質膜を魚肉類に接触させた状態にお
いて、前記キャリヤ液流入管からサンプリング管内に試
料液調製用キャリヤ液を連続的に導入することにより、
前記多孔質膜を通過した魚肉類中の成分をサンプリング
管内を流れるキャリヤ液中に採取するとともに、このキ
ャリヤ液を前記キャリヤ液流出管から試料液として連続
的に流出させるサンプリング装置と、 サンプリング装置のキャリヤ液流出管から流出した試料
液を一時貯留して攪拌する貯留・攪拌機構と、 アルカリフォスフォターゼ／プリンヌクレオシドフォス
フォリラーゼ／キサンチンオキシダーゼ同時固定化リア
クタを備え、リン酸イオン濃度が試料中のイノシン５’
−リン酸及びイノシンの合計濃度の２倍以上で５ｍＭ以
下である第１キャリヤ液に前記貯留・攪拌機構を流出し
た試料液を導入するとともに、この第１キャリヤ液を前
記リアクタに通して試料液中のイノシン５’−リン酸、
イノシン及びヒポキサンチンを過酸化水素及び尿酸に変
換した後、第１キャリヤ液中の過酸化水素又は尿酸の濃
度を検出することにより試料液中のイノシン５’−リン
酸、イノシン及びヒポキサンチンの合計濃度に対応する
第１物理量を得る第１チャンネルと、 プリンヌクレオシドフォスフォリラーゼ／キサンチンオ
キシダーゼ同時固定化リアクタを備え、リン酸イオンを
含む第２キャリヤ液に前記貯留・攪拌機構を流出した試
料液を導入するとともに、この第２キャリヤ液を前記リ
アクタに通して試料液中のイノシン及びヒポキサンチン
を過酸化水素及び尿酸に変換した後、第２キャリヤ液中
の過酸化水素又は尿酸の濃度を検出することにより試料
液中のイノシン及びヒポキサンチンの合計濃度に対応す
る第２物理量を得る第２チャンネルと、 前記第１物理量及び第２物理量から下記式で示されるＫ
I値を算出する演算部とを具備することを特徴とする魚
介類の鮮度測定装置。 ＫI値＝{([HXR]+[HX])／([IMP]+[HXR]+[HX])}×100 [IMP]：イノシン５’−リン酸濃度 [HXR]：イノシン濃度 [HX] ：ヒポキサンチン濃度 - 【請求項１０】 第１キャリヤ液中のイノシン５’−リ
ン酸、イノシン及びヒポキサンチンの合計濃度が０．０
６〜３００μＭとなるように第１キャリヤ液に試料液を
導入する請求項９記載の装置。 - 【請求項１１】 第２キャリヤ液として、リン酸イオン
濃度が５ｍＭ以上のものを用いる請求項９又は１０記載
の装置。 - 【請求項１２】 管本体の先端開口部を多孔質膜で閉塞
するとともに、該管本体にキャリヤ液流入管及びキャリ
ヤ液流出管を連結してなるサンプリング管を用い、前記
サンプリング管の多孔質膜を食品試料に接触させた状態
において、前記キャリヤ液流入管からサンプリング管内
に試料液調製用キャリヤ液を連続的に導入することによ
り、前記多孔質膜を通過した食品試料中の成分をサンプ
リング管内を流れるキャリヤ液中に採取するとともに、
このキャリヤ液を前記キャリヤ液流出管から試料液とし
て連続的に流出させることを特徴とする食品試料のサン
プリング装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP09941796A JP3679855B2 (ja) | 1996-03-28 | 1996-03-28 | 食品中の成分測定方法及び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置並びに食品試料のサンプリング方法及び装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP09941796A JP3679855B2 (ja) | 1996-03-28 | 1996-03-28 | 食品中の成分測定方法及び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置並びに食品試料のサンプリング方法及び装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09262096A true JPH09262096A (ja) | 1997-10-07 |
| JP3679855B2 JP3679855B2 (ja) | 2005-08-03 |
Family
ID=14246903
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP09941796A Expired - Fee Related JP3679855B2 (ja) | 1996-03-28 | 1996-03-28 | 食品中の成分測定方法及び装置、魚介類の鮮度測定方法及び装置並びに食品試料のサンプリング方法及び装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3679855B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004046693A1 (ja) * | 2002-11-21 | 2004-06-03 | Sapporo Immuno Diagnostic Laboratory | 唾液の採取および回収器具 |
-
1996
- 1996-03-28 JP JP09941796A patent/JP3679855B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004046693A1 (ja) * | 2002-11-21 | 2004-06-03 | Sapporo Immuno Diagnostic Laboratory | 唾液の採取および回収器具 |
| JPWO2004046693A1 (ja) * | 2002-11-21 | 2006-03-16 | 株式会社札幌イムノ・ダイアグノスティック・ラボラトリー | 唾液の採取および回収器具 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3679855B2 (ja) | 2005-08-03 |
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