JPH09191874A - 正常ヒトメラニン細胞培養用無血清培地 - Google Patents
正常ヒトメラニン細胞培養用無血清培地Info
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- JPH09191874A JPH09191874A JP8008324A JP832496A JPH09191874A JP H09191874 A JPH09191874 A JP H09191874A JP 8008324 A JP8008324 A JP 8008324A JP 832496 A JP832496 A JP 832496A JP H09191874 A JPH09191874 A JP H09191874A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ヒト表皮メラニン細胞を無血清条件下におい
て培養するのに適した無血清培地を提供する。 【解決手段】動物細胞培養用基礎培地において、Ｃａ2+
を０.１５ｍＭ／Ｌ〜１.２ｍＭ／Ｌ、プロテアーゼイン
ヒビターを０.０１ｍｇ／Ｌ〜０.５ｍｇ／Ｌ含有する、
ヒト表皮メラニン細胞培養用無血清培地。
て培養するのに適した無血清培地を提供する。 【解決手段】動物細胞培養用基礎培地において、Ｃａ2+
を０.１５ｍＭ／Ｌ〜１.２ｍＭ／Ｌ、プロテアーゼイン
ヒビターを０.０１ｍｇ／Ｌ〜０.５ｍｇ／Ｌ含有する、
ヒト表皮メラニン細胞培養用無血清培地。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本願発明は正常ヒト皮膚メラ
ニン細胞の無血清培養に用いる培地に関する。
ニン細胞の無血清培養に用いる培地に関する。
【０００２】
【従来の技術】ヒト由来の正常細胞をインビトロで培養
することは、医学の分野および医薬品や化粧品の開発等
に不可欠の技術である。ヒト表皮メラニン細胞のインビ
トロにおける培養は、ヒトにおけるメラニン合成の研究
や、皮膚の白化作用物質の研究に不可欠である。ヒト表
皮メラニン細胞の培養には、従来から知られている培地
であるＭＣＤＢ１５３、Ｍ１９９等を基礎培地として、
上皮成長因子や、繊維芽細胞成長因子等の各種成長因
子、インスリン、トリヨードサイロニン等のホルモン、
コレラトキシン、トランスフェリン等の担体、牛脳下垂
体抽出物、牛脳視床下部抽出物等、および牛胎児血清
（ＦＢＳ）等の血清成分などの生物材料を添加した培地
を用いて培養が行われている。しかしながら、従来の培
地を用いて培養した場合、満足な増殖性が得られない。
また、血清は様々な物質の混合物であり、メラニン細胞
の増殖や、メラニン合成に関する研究において、実験結
果の解釈の妨げとなるため、血清を含まない培地での培
養が望まれている。
することは、医学の分野および医薬品や化粧品の開発等
に不可欠の技術である。ヒト表皮メラニン細胞のインビ
トロにおける培養は、ヒトにおけるメラニン合成の研究
や、皮膚の白化作用物質の研究に不可欠である。ヒト表
皮メラニン細胞の培養には、従来から知られている培地
であるＭＣＤＢ１５３、Ｍ１９９等を基礎培地として、
上皮成長因子や、繊維芽細胞成長因子等の各種成長因
子、インスリン、トリヨードサイロニン等のホルモン、
コレラトキシン、トランスフェリン等の担体、牛脳下垂
体抽出物、牛脳視床下部抽出物等、および牛胎児血清
（ＦＢＳ）等の血清成分などの生物材料を添加した培地
を用いて培養が行われている。しかしながら、従来の培
地を用いて培養した場合、満足な増殖性が得られない。
また、血清は様々な物質の混合物であり、メラニン細胞
の増殖や、メラニン合成に関する研究において、実験結
果の解釈の妨げとなるため、血清を含まない培地での培
養が望まれている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ヒト表皮メ
ラニン細胞を無血清条件下で培養するのに好適に用いら
れるメラニン細胞培養用無血清培地を提供することを目
的とする。
ラニン細胞を無血清条件下で培養するのに好適に用いら
れるメラニン細胞培養用無血清培地を提供することを目
的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは動物細胞培
養用基礎培地において、カルシウムイオンの濃度を規定
された範囲に制御し、タンパク質分解酵素阻害剤である
アプロチニンを添加することによって、ヒト表皮メラニ
ン細胞が無血清条件下で培養できることを見いだした。
本発明の培地を用いれば、無血清条件下で培養した場合
でも良好な増殖性が得られる。すなわち本発明は、動物
細胞培養用基礎培地において、カルシウムイオンを０.
１５〜１.２ｍＭ／Ｌとし、アプロチニンを０.０１ｍｇ
／Ｌ〜０.５ｍｇ／Ｌを含有する、ヒト表皮メラニン細
胞培養用無血清培地を提供する。本発明に用いる動物細
胞培養用基礎培地としては、ヒト表皮メラニン細胞の培
養に適する培地であれば、従来から知られている培地が
いずれも好適に用いられる。好ましい培地としては、Ｍ
ＣＤＢ１５３、Ｍ１９９、イーグルＭＥＭ、ダルベッコ
改変イーグルＭＥＭ、ハムＦ１２、ＲＰＭＩ１６４０等
が挙げられ、特にＭＣＤＢ１５３培地あるいはその一部
アミノ酸を強化した、改変ＭＣＤＢ１５３培地が好適に
用いられる。本明細書において「ＭＣＤＢ１５３培地」
という語には、本来のＭＣＤＢ１５３培地および特開平
６−３２７４０に記載のごときＭＣＤＢ１５３培地の一
部アミノ酸の濃度を変えた培地を含む。
養用基礎培地において、カルシウムイオンの濃度を規定
された範囲に制御し、タンパク質分解酵素阻害剤である
アプロチニンを添加することによって、ヒト表皮メラニ
ン細胞が無血清条件下で培養できることを見いだした。
本発明の培地を用いれば、無血清条件下で培養した場合
でも良好な増殖性が得られる。すなわち本発明は、動物
細胞培養用基礎培地において、カルシウムイオンを０.
１５〜１.２ｍＭ／Ｌとし、アプロチニンを０.０１ｍｇ
／Ｌ〜０.５ｍｇ／Ｌを含有する、ヒト表皮メラニン細
胞培養用無血清培地を提供する。本発明に用いる動物細
胞培養用基礎培地としては、ヒト表皮メラニン細胞の培
養に適する培地であれば、従来から知られている培地が
いずれも好適に用いられる。好ましい培地としては、Ｍ
ＣＤＢ１５３、Ｍ１９９、イーグルＭＥＭ、ダルベッコ
改変イーグルＭＥＭ、ハムＦ１２、ＲＰＭＩ１６４０等
が挙げられ、特にＭＣＤＢ１５３培地あるいはその一部
アミノ酸を強化した、改変ＭＣＤＢ１５３培地が好適に
用いられる。本明細書において「ＭＣＤＢ１５３培地」
という語には、本来のＭＣＤＢ１５３培地および特開平
６−３２７４０に記載のごときＭＣＤＢ１５３培地の一
部アミノ酸の濃度を変えた培地を含む。
【０００５】本発明の培地は、カルシウムイオンの濃度
を０.１５〜１.２ｍＭ／Ｌ、より好ましくは０.６〜０.
９ｍＭ／Ｌとする。カルシウムイオンの濃度が０.１５
ｍＭ未満の場合には本発明の効果が得られず、また１.
２ｍＭを越えて添加しても細胞の増殖性は変わらなくな
る。本発明の培地には、カルシウムに加えて、プロテア
ーゼインヒビターを添加する。本発明に好適に用いられ
るプロテアーゼインヒビターの例としては、アプロチニ
ン、アンチパイン、リューペプチン、キモスタチン、ベ
スタチン、エピベスタチン、アマスタチン、エピアマス
タチン等が挙げられる。本発明において特に好適に用い
られるプロテアーゼインヒビターは、アプロチニンであ
る。アプロチニンは、クニッツ型のプロテアーゼインヒ
ビターとして知られている酵素である。本発明の培地
中、プロテアーゼインヒビターを０.０１〜０.５ｍｇ／
Ｌ、より好ましくは０.０５〜０.１ｍｇ／Ｌ添加する。
プロテアーゼインヒビターの濃度が０.０１ｍｇ／Ｌ未
満の場合には本発明の効果が得られない。一方、プロテ
アーゼインヒビターを１ｍｇ／Ｌ以上添加した場合に
は、細胞の増殖性が却って悪化する。
を０.１５〜１.２ｍＭ／Ｌ、より好ましくは０.６〜０.
９ｍＭ／Ｌとする。カルシウムイオンの濃度が０.１５
ｍＭ未満の場合には本発明の効果が得られず、また１.
２ｍＭを越えて添加しても細胞の増殖性は変わらなくな
る。本発明の培地には、カルシウムに加えて、プロテア
ーゼインヒビターを添加する。本発明に好適に用いられ
るプロテアーゼインヒビターの例としては、アプロチニ
ン、アンチパイン、リューペプチン、キモスタチン、ベ
スタチン、エピベスタチン、アマスタチン、エピアマス
タチン等が挙げられる。本発明において特に好適に用い
られるプロテアーゼインヒビターは、アプロチニンであ
る。アプロチニンは、クニッツ型のプロテアーゼインヒ
ビターとして知られている酵素である。本発明の培地
中、プロテアーゼインヒビターを０.０１〜０.５ｍｇ／
Ｌ、より好ましくは０.０５〜０.１ｍｇ／Ｌ添加する。
プロテアーゼインヒビターの濃度が０.０１ｍｇ／Ｌ未
満の場合には本発明の効果が得られない。一方、プロテ
アーゼインヒビターを１ｍｇ／Ｌ以上添加した場合に
は、細胞の増殖性が却って悪化する。
【０００６】本発明の培地には、さらに通常細胞をイン
ビトロにて培養する際に用いられる種々の添加剤を添加
してもよい。特に本発明の培地には、ヒト表皮メラニン
細胞の増殖に有効な１以上の成長因子を添加するのが好
ましい。本発明の培地に有用な成長因子としては、上皮
細胞成長因子、塩基性繊維芽細胞成長因子、インターロ
イキン−１、トランスフォーミンググロースファクター
α等が挙げられるがこれに限定されない。本発明の培地
には、さらに牛脳下垂体抽出物（ＢＰＥ）、牛脳視床下
部抽出物、牛大脳抽出物、アルブミン等の生物材料や、
インスリン、ＰＭＡ（Phorbol 12-myristrate 13-aceta
te）、ヘパリン、ハイドロコーチゾン、トランスフェリ
ン、コレラトキシン、トリヨードサイロニン等を添加し
てもよい。また、ゲンタマイシン硫酸塩、アンフォテリ
シンＢ、ペニシリン、ミノマイシン、硫酸カナマイシ
ン、ストレプトマイシンのごとき抗生物質を添加しても
よい。以下本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明
する。
ビトロにて培養する際に用いられる種々の添加剤を添加
してもよい。特に本発明の培地には、ヒト表皮メラニン
細胞の増殖に有効な１以上の成長因子を添加するのが好
ましい。本発明の培地に有用な成長因子としては、上皮
細胞成長因子、塩基性繊維芽細胞成長因子、インターロ
イキン−１、トランスフォーミンググロースファクター
α等が挙げられるがこれに限定されない。本発明の培地
には、さらに牛脳下垂体抽出物（ＢＰＥ）、牛脳視床下
部抽出物、牛大脳抽出物、アルブミン等の生物材料や、
インスリン、ＰＭＡ（Phorbol 12-myristrate 13-aceta
te）、ヘパリン、ハイドロコーチゾン、トランスフェリ
ン、コレラトキシン、トリヨードサイロニン等を添加し
てもよい。また、ゲンタマイシン硫酸塩、アンフォテリ
シンＢ、ペニシリン、ミノマイシン、硫酸カナマイシ
ン、ストレプトマイシンのごとき抗生物質を添加しても
よい。以下本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明
する。
【０００７】
【実施例１】改変ＭＣＤＢ１５３培地を用い、正常ヒト
表皮メラニン細胞を培養した。 細胞：２次凍結正常ヒトメラニン細胞（Cascade Biolog
ics Inc.) 培地：表１に示す組成の改変ＭＣＤＢ１５３培地を用い
た。この改変ＭＣＤＢ１５３培地は通常のＭＣＤＢ１５
３培地と比べてヒスチジン、イソロイシン、メチオニ
ン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシンを強
化した培地である。
表皮メラニン細胞を培養した。 細胞：２次凍結正常ヒトメラニン細胞（Cascade Biolog
ics Inc.) 培地：表１に示す組成の改変ＭＣＤＢ１５３培地を用い
た。この改変ＭＣＤＢ１５３培地は通常のＭＣＤＢ１５
３培地と比べてヒスチジン、イソロイシン、メチオニ
ン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシンを強
化した培地である。
【０００８】
【表１】
【０００９】
【表２】
【００１０】なお、表１に示す組成に対し、基礎となる
ＭＣＤＢ１５３培地はL-ヒスチジンＨＣl・２Ｈ2Ｏを8.
0×10-5M/L(16,77mg/L)、L-イソロイシンを1.5×10-5M/
L(1.968mg/L)、L-メチオニンHClを3.0×10-5M/L(4.476m
g/L)、L-フェニルアラニンを3.0×10-5M/L(4.956mg/
L)、L-トリプトファンを1.5×10-5M/L(3.06mg/L)、およ
びL-チロシンを1.5×10-5M/L(2.718mg/L)含有し、エタ
ノールアミンおよびホスホエタノールアミンは含有しな
いという点においてのみ異なっている。この改変ＭＣＤ
Ｂ１５３培地へ表３の各種添加剤および牛胎児血清を
０.５％（ｖ／ｖ）を添加した培地を基本とし、Ｃａ2+
の濃度が０.１５〜１.２ｍＭ／Ｌとなるように設定し
た。カルシウムイオンの濃度は表１に示す組成の培地へ
ＣaＣl2・２Ｈ2Ｏを添加して調節した。
ＭＣＤＢ１５３培地はL-ヒスチジンＨＣl・２Ｈ2Ｏを8.
0×10-5M/L(16,77mg/L)、L-イソロイシンを1.5×10-5M/
L(1.968mg/L)、L-メチオニンHClを3.0×10-5M/L(4.476m
g/L)、L-フェニルアラニンを3.0×10-5M/L(4.956mg/
L)、L-トリプトファンを1.5×10-5M/L(3.06mg/L)、およ
びL-チロシンを1.5×10-5M/L(2.718mg/L)含有し、エタ
ノールアミンおよびホスホエタノールアミンは含有しな
いという点においてのみ異なっている。この改変ＭＣＤ
Ｂ１５３培地へ表３の各種添加剤および牛胎児血清を
０.５％（ｖ／ｖ）を添加した培地を基本とし、Ｃａ2+
の濃度が０.１５〜１.２ｍＭ／Ｌとなるように設定し
た。カルシウムイオンの濃度は表１に示す組成の培地へ
ＣaＣl2・２Ｈ2Ｏを添加して調節した。
【００１１】
【表３】
【００１２】２次凍結正常ヒト表皮メラニン細胞を融解
した後、上記培地を入れた１２穴プレート（コーニング
社）内へ約５０００個／ｃｍ2となるよう播種した。播
種後３７℃、５％ＣＯ2インキュベーター内で培養を行
った。１〜２日毎に細胞を顕微鏡にて観察し、新鮮な培
地と交換した。細胞播種後７日目に細胞を回収して細胞
数を数えた。細胞数は０.０２５％トリプシン／０.０１
％ＥＤＴＡを用いて器壁より細胞を剥し、血球計算板を
用いて顕微鏡下で計数した。結果を図１に示す。カルシ
ウム濃度０.６〜０.９ｍＭ／Ｌにおいて、細胞の増殖性
の上昇が認められた。
した後、上記培地を入れた１２穴プレート（コーニング
社）内へ約５０００個／ｃｍ2となるよう播種した。播
種後３７℃、５％ＣＯ2インキュベーター内で培養を行
った。１〜２日毎に細胞を顕微鏡にて観察し、新鮮な培
地と交換した。細胞播種後７日目に細胞を回収して細胞
数を数えた。細胞数は０.０２５％トリプシン／０.０１
％ＥＤＴＡを用いて器壁より細胞を剥し、血球計算板を
用いて顕微鏡下で計数した。結果を図１に示す。カルシ
ウム濃度０.６〜０.９ｍＭ／Ｌにおいて、細胞の増殖性
の上昇が認められた。
【００１３】
【実施例２】プロテアーゼインヒビターであるアプロチ
ニンを添加して培養を行った。培養は表３の各種添加剤
と牛胎児血清を０.５％（ｖ／ｖ）、並びにアプロチニ
ン０．０１〜２.５μｇ／ｍｌを実施例１と同じ改変Ｍ
ＣＤＢ１５３培地へ添加した培地を用いた。実施例１と
同様に細胞培養を行い、細胞の播種後７日目の細胞数を
測定した。結果を図２に示す。アプロチニンの添加によ
り、細胞の増殖能が強化されたことがわかる。
ニンを添加して培養を行った。培養は表３の各種添加剤
と牛胎児血清を０.５％（ｖ／ｖ）、並びにアプロチニ
ン０．０１〜２.５μｇ／ｍｌを実施例１と同じ改変Ｍ
ＣＤＢ１５３培地へ添加した培地を用いた。実施例１と
同様に細胞培養を行い、細胞の播種後７日目の細胞数を
測定した。結果を図２に示す。アプロチニンの添加によ
り、細胞の増殖能が強化されたことがわかる。
【００１４】
【実施例３】実施例１と同じ改変ＭＣＤＢ１５３培地へ
表３の各種添加剤を添加するが、血清は添加せず、さら
にＣaＣl2・２Ｈ2Ｏを添加してカルシウムイオンの濃度
が０.９ｍＭ／Ｌである高カルシウム無血清培地を調製
した。この高カルシウム無血清培地へ種々の濃度のアプ
ロチニンを添加して、実施例１の方法に従って正常ヒト
表皮メラニン細胞培養を行った。対照として、カルシウ
ムイオンを０.１５ｍＭ／Ｌ、牛胎児血清を０.５％（ｖ
／ｖ）を含有する培地を用い、同様に培養を行った。結
果を図３に示す。高カルシウム濃度の培地を用いた場
合、アプロチニンの添加によって、無血清条件下におい
て対照の培地と比して２倍程度の細胞数が得られた。
表３の各種添加剤を添加するが、血清は添加せず、さら
にＣaＣl2・２Ｈ2Ｏを添加してカルシウムイオンの濃度
が０.９ｍＭ／Ｌである高カルシウム無血清培地を調製
した。この高カルシウム無血清培地へ種々の濃度のアプ
ロチニンを添加して、実施例１の方法に従って正常ヒト
表皮メラニン細胞培養を行った。対照として、カルシウ
ムイオンを０.１５ｍＭ／Ｌ、牛胎児血清を０.５％（ｖ
／ｖ）を含有する培地を用い、同様に培養を行った。結
果を図３に示す。高カルシウム濃度の培地を用いた場
合、アプロチニンの添加によって、無血清条件下におい
て対照の培地と比して２倍程度の細胞数が得られた。
【００１５】
【発明の効果】本発明の培地を用いれば無血清条件下に
おいて正常ヒト表皮メラニン細胞の培養が可能となる。
本発明の培地を用いれば、従来技術の２倍程度の細胞増
殖性が得られる。
おいて正常ヒト表皮メラニン細胞の培養が可能となる。
本発明の培地を用いれば、従来技術の２倍程度の細胞増
殖性が得られる。
【図１】 本発明の実施例１の結果を示す図である。
【図２】 本発明の実施例２の結果を示す図である。
【図３】 本発明の実施例３の結果を示す図である。
Claims (7)
- 【請求項１】 動物細胞培養用基礎培地において、Ｃａ
2+を０.１５ｍＭ／Ｌ〜１.２ｍＭ／Ｌ、プロテアーゼイ
ンヒビターを０.０１ｍｇ／Ｌ〜０.５ｍｇ／Ｌ含有す
る、ヒト表皮メラニン細胞培養用無血清培地。 - 【請求項２】 Ｃａ2+を０.６ｍＭ／Ｌ〜０.９ｍＭ／
Ｌ、プロテアーゼインヒビターを０.０５ｍｇ／Ｌ〜０.
１ｍｇ／Ｌ含有する、請求項１記載の無血清培地。 - 【請求項３】 さらにヒト表皮メラニン細胞の増殖に有
用な１以上の増殖因子を含む、請求項１または２記載の
培地。 - 【請求項４】 さらにウシ脳下垂体抽出物を含有する、
請求項１〜３いずれかに記載の培地。 - 【請求項５】 プロテアーゼインヒビターがアプロチニ
ンである、請求項１〜４いずれかに記載の培地。 - 【請求項６】 動物細胞培養用基礎培地がＭＣＤＢ１５
３培地である、請求項１〜５いずれかに記載の培地。 - 【請求項７】 請求項１〜６いずれかに記載の培地を用
いて正常ヒトメラニン細胞の培養を無血清条件下で行
う、正常ヒト皮膚メラニン細胞の無血清培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8008324A JPH09191874A (ja) | 1996-01-22 | 1996-01-22 | 正常ヒトメラニン細胞培養用無血清培地 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8008324A JPH09191874A (ja) | 1996-01-22 | 1996-01-22 | 正常ヒトメラニン細胞培養用無血清培地 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09191874A true JPH09191874A (ja) | 1997-07-29 |
Family
ID=11690007
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8008324A Pending JPH09191874A (ja) | 1996-01-22 | 1996-01-22 | 正常ヒトメラニン細胞培養用無血清培地 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09191874A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007080919A1 (ja) | 2006-01-13 | 2007-07-19 | Japan Science And Technology Agency | 動物細胞を無血清培養するための培地用添加剤、キット及びこれらの利用 |
| US9394521B2 (en) | 2010-03-10 | 2016-07-19 | Two Cells Co., Ltd. | Cell preparation containing mesenchymal stem cells, and method for producing same |
| CN107142237A (zh) * | 2011-05-17 | 2017-09-08 | 李晖 | 培养基、细胞培养用试剂盒及细胞培养方法 |
| US10131877B2 (en) | 2008-11-11 | 2018-11-20 | Two Cells Co., Ltd. | Differentiation-inducing culture medium additive and use thereof |
| CN115181719A (zh) * | 2022-07-13 | 2022-10-14 | 福建省海西细胞生物工程有限公司 | 一种用于培养组织工程表皮的无血清培养基 |
-
1996
- 1996-01-22 JP JP8008324A patent/JPH09191874A/ja active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007080919A1 (ja) | 2006-01-13 | 2007-07-19 | Japan Science And Technology Agency | 動物細胞を無血清培養するための培地用添加剤、キット及びこれらの利用 |
| US9074176B2 (en) | 2006-01-13 | 2015-07-07 | Two Cells Co., Ltd. | Culture medium additive for use in serum-free culturing of animal cell, kit and use thereof |
| US10184112B2 (en) | 2006-01-13 | 2019-01-22 | Two Cells Co., Ltd. | Culture medium additive for use in serum-free culturing of animal cell, kit and use thereof |
| US10131877B2 (en) | 2008-11-11 | 2018-11-20 | Two Cells Co., Ltd. | Differentiation-inducing culture medium additive and use thereof |
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| CN107142237A (zh) * | 2011-05-17 | 2017-09-08 | 李晖 | 培养基、细胞培养用试剂盒及细胞培养方法 |
| CN107142237B (zh) * | 2011-05-17 | 2021-03-02 | 深圳涌泰生物科技有限公司 | 培养基、细胞培养用试剂盒及细胞培养方法 |
| CN115181719A (zh) * | 2022-07-13 | 2022-10-14 | 福建省海西细胞生物工程有限公司 | 一种用于培养组织工程表皮的无血清培养基 |
| CN115181719B (zh) * | 2022-07-13 | 2023-09-15 | 福建省海西细胞生物工程有限公司 | 一种用于培养组织工程表皮的无血清培养基 |
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