JPH08240584A - Method for quantification of orthophosphoric acid ion - Google Patents
Method for quantification of orthophosphoric acid ionInfo
- Publication number
- JPH08240584A JPH08240584A JP4682895A JP4682895A JPH08240584A JP H08240584 A JPH08240584 A JP H08240584A JP 4682895 A JP4682895 A JP 4682895A JP 4682895 A JP4682895 A JP 4682895A JP H08240584 A JPH08240584 A JP H08240584A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- aqueous solution
- reagent
- polyvinyl alcohol
- fluorescence intensity
- fluorescence
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、水溶液中のオルトリン
酸イオンを高感度に、精度良く定量する方法に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for quantifying orthophosphate ion in an aqueous solution with high sensitivity and accuracy.
【０００２】[0002]
【従来の技術】従来、水溶液中のオルトリン酸イオンを
定量する方法としては、該オルトリン酸イオンと６価の
モリブデン酸等の無機オキソ酸との反応により生じたヘ
テロポリ酸、或いはその還元反応物であるヘテロポリ青
錯体の吸光を測定する方法が一般的に用いられている。
しかし、この方法は低感度であり、ｎｇ／ｍｌレベル以
下の定量には使用しにくい。2. Description of the Related Art Hitherto, as a method for quantifying orthophosphate ions in an aqueous solution, a heteropolyacid produced by a reaction of the orthophosphate ion with an inorganic oxoacid such as hexavalent molybdic acid, or a reduction product thereof has been used. A method of measuring the absorption of a heteropoly blue complex is generally used.
However, this method has low sensitivity and is difficult to use for quantification below the ng / ml level.
【０００３】そのため、高感度でオルトリン酸イオンを
定量する方法として、上記オルトリン酸イオンと無機オ
キソ酸との反応により生じたヘテロポリ酸と、蛍光性の
陽イオン染料とを会合させ、それにより消失する該陽イ
オン染料の蛍光を測定する方法が提案されている。ここ
で、この方法は、通常、操作性の良さから連続流れ分
析、即ち、無機オキソ酸と蛍光性の陽イオン染料を含有
する試薬水溶液を細管中に一定流量で流し、これに流路
の途中でオルトリン酸イオンを含有する検体水溶液を注
入し、該細管中で前記蛍光の消失反応を行った後、この
混合液を蛍光測定セルに導いて蛍光強度を測定する方法
により実施するのが一般的である。この方法によれば、
水溶液中のオルトリン酸イオンは、ｎｇ／ｍｌ以下のレ
ベルで定量が可能であり好適である。Therefore, as a method for quantifying orthophosphate ion with high sensitivity, a heteropolyacid produced by the reaction of the above-mentioned orthophosphate ion and an inorganic oxoacid is allowed to associate with a fluorescent cationic dye, and disappears. A method for measuring the fluorescence of the cationic dye has been proposed. Here, this method is usually a continuous flow analysis from the viewpoint of good operability, that is, a reagent aqueous solution containing an inorganic oxo acid and a fluorescent cationic dye is flown at a constant flow rate into a thin tube, and the flow path is in the middle of this. It is generally carried out by injecting an aqueous solution of a sample containing an orthophosphate ion in the above step, carrying out the fluorescence quenching reaction in the narrow tube, and then introducing this mixed solution into a fluorescence measuring cell to measure the fluorescence intensity. Is. According to this method
The orthophosphate ion in the aqueous solution is suitable because it can be quantified at a level of ng / ml or less.
【０００４】また、この方法においては、上記ヘテロポ
リ酸と蛍光性の陽イオン染料との会合体が蛍光測定セル
中で沈澱することを防止するため、試薬水溶液に検体水
溶液を注入した後の蛍光測定直前の混合液にポリビニル
アルコールを添加することも知られている。Further, in this method, in order to prevent the association of the above-mentioned heteropolyacid and the fluorescent cationic dye from precipitating in the fluorescence measuring cell, the fluorescence measurement after injecting the sample aqueous solution into the reagent aqueous solution is carried out. It is also known to add polyvinyl alcohol to the liquid mixture immediately before.
【０００５】[0005]
【発明が解決しようとする課題】ところで、蛍光性の陽
イオン染料は、無機オキソ酸と共存下において安定性が
十分ではない。そのため、これらの両者が共存される試
薬水溶液を用いる上記定量方法では、該試薬水溶液の保
存中やオルトリン酸イオンの定量操作中において、陽イ
オン染料に分解が生じ、測定される蛍光強度の精度が低
下する問題があった。例えば、前記した連続流れ分析に
よりこの方法を実施する場合においては、複数の検体を
連続して測定すると、測定時間が長くなるにつれ、試薬
水溶液中の該陽イオン染料の分解が激しくなり、蛍光強
度のベースラインが下降してくる問題があった。By the way, a fluorescent cationic dye is not sufficiently stable in the coexistence with an inorganic oxo acid. Therefore, in the above-mentioned quantification method using a reagent aqueous solution in which both of these coexist, the cationic dye is decomposed during storage of the reagent aqueous solution or during the operation of quantifying the orthophosphate ion, and the accuracy of the measured fluorescence intensity is high. There was a problem of decline. For example, in the case where this method is carried out by the continuous flow analysis described above, when a plurality of analytes are continuously measured, as the measurement time becomes longer, the decomposition of the cationic dye in the reagent aqueous solution becomes more intense and the fluorescence intensity increases. There was a problem that the baseline of the was falling.
【０００６】以上の背景から、オルトリン酸イオンを高
感度且つ高精度で測定する方法を開発することが望まれ
ていた。From the above background, it has been desired to develop a method for measuring orthophosphate ion with high sensitivity and high accuracy.
【０００７】[0007]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
に鑑み鋭意研究を続けてきた。その結果、無機オキソ酸
と蛍光性の陽イオン染料が含有される試薬水溶液中にさ
らにポリビニルアルコールを共存させることにより、上
記課題が解決できることを見いだし本発明を完成するに
至った。Means for Solving the Problems The inventors of the present invention have conducted extensive research in view of the above problems. As a result, they have found that the above problems can be solved by further coexisting polyvinyl alcohol in an aqueous reagent solution containing an inorganic oxo acid and a fluorescent cationic dye, and completed the present invention.
【０００８】即ち、本発明は、ａ）オルトリン酸イオン
と反応してヘテロポリ酸を生成しうる無機オキソ酸また
はその塩 ｂ）蛍光性の陽イオン染料 ｃ）ポリビニルアルコール を含有する試薬水溶液と、オルトリン酸イオンを含有す
る検体水溶液とを混合し、得られた混合液の蛍光強度か
ら上記検体水溶液中のオルトリン酸イオン濃度を定量す
ることを特徴とするオルトリン酸イオンの定量方法であ
る。That is, the present invention comprises: a) an inorganic oxo acid or a salt thereof capable of reacting with an orthophosphate ion to form a heteropoly acid; b) a fluorescent cationic dye; c) a reagent aqueous solution containing polyvinyl alcohol; A method for quantifying orthophosphate ions, which comprises mixing an analyte aqueous solution containing an acid ion and quantifying the orthophosphate ion concentration in the above-mentioned aqueous analyte solution from the fluorescence intensity of the obtained mixed solution.
【０００９】本発明において、試薬水溶液の構成成分で
ある、オルトリン酸イオンと反応してヘテロポリ酸を生
成しうる無機オキソ酸またはその塩（以下、無機オキソ
酸類とも略する）は、かかる性状を有する公知のものが
何等制限なく使用できる。具体的には、モリブデン酸、
タングステン酸、バナジン酸、ニオブ酸等及び、これら
の無機オキソ酸のアンモニウム塩、ナトリウム塩、リチ
ウム塩、カリウム塩、ルビジウム塩、カルシウム塩、マ
グネシウム塩等が挙げられ、このうちモリブデン酸及び
そのアンモニウム塩、ナトリウム塩を用いるのが好まし
い。ここで、該無機オキソ酸類の試薬水溶液中での濃度
は、特に制限されるものではないが、測定操作上適切な
ヘテロポリ酸の生成速度を勘案すれば０．０００１〜
２．０ｍｏｌ／ｌ、好ましくは０．００３〜０．５ｍｏ
ｌ／ｌであることが好適である。In the present invention, the inorganic oxo acid or a salt thereof (hereinafter also abbreviated as inorganic oxo acids) capable of reacting with orthophosphate ions to form a heteropolyacid, which is a constituent of the aqueous reagent solution, has such properties. Known materials can be used without any restrictions. Specifically, molybdic acid,
Examples thereof include tungstic acid, vanadic acid, niobic acid and the like, and ammonium salts, sodium salts, lithium salts, potassium salts, rubidium salts, calcium salts, magnesium salts and the like of these inorganic oxo acids, of which molybdic acid and its ammonium salts. It is preferable to use the sodium salt. Here, the concentration of the inorganic oxoacids in the reagent aqueous solution is not particularly limited, but 0.0001-in consideration of the production rate of the heteropolyacid appropriate for the measurement operation.
2.0 mol / l, preferably 0.003 to 0.5 mo
It is preferably 1 / l.
【００１０】また、本発明において、蛍光性の陽イオン
染料は、公知のものが何等制限なく使用できる。具体的
には、ローダミンＢ、ローダミン６Ｇなどの１価のトリ
フェニルメタン系化合物、２，３−ジアミノナフタレン
などのアリルアミノ系化合物、ローダミンＳ、アクリジ
ンレッド、チオブロミン、フラビオシン等が挙げられ、
このうち蛍光強度やイオン会合性の強さからローダミン
Ｂ、ローダミン６Ｇなどの１価のトリフェニルメタン系
のものを用いるのが好ましい。ここで、該蛍光性の陽イ
オン染料の試薬水溶液中での濃度は、特に制限されるも
のではないが、オルトリン酸イオンの定量範囲や感度を
勘案すると、１０-8〜１０-4ｍｏｌ／ｌ、好ましくは１
０-7〜１０-5ｍｏｌ／ｌであることが好適である。In the present invention, known fluorescent cationic dyes can be used without any limitation. Specific examples include monovalent triphenylmethane compounds such as rhodamine B and rhodamine 6G, allylamino compounds such as 2,3-diaminonaphthalene, rhodamine S, acridine red, thiobromine, flaviosine and the like,
Of these, monovalent triphenylmethane compounds such as rhodamine B and rhodamine 6G are preferably used because of their fluorescence intensity and ion-association property. Here, the concentration of the fluorescent cationic dye in the reagent aqueous solution is not particularly limited, but in consideration of the quantitative range and sensitivity of orthophosphate ion, 10 -8 to 10 -4 mol / l , Preferably 1
It is preferably 0 -7 to 10 -5 mol / l.
【００１１】本発明の定量方法では、上記無機オキソ酸
類と蛍光性の陽イオン染料を含有する試薬水溶液に、さ
らにポリビニルアルコールを含有させる。それにより、
蛍光性の陽イオン染料の安定性が向上し、試薬水溶液の
保存中或いは定量操作中に該陽イオン染料の分解により
蛍光が消失することが抑制される。その結果、本発明の
定量方法では、検体水溶液中のオルトリン酸イオンを精
度良く測定することが可能になる。In the quantification method of the present invention, polyvinyl alcohol is further added to the reagent aqueous solution containing the inorganic oxoacids and the fluorescent cationic dye. Thereby,
The stability of the fluorescent cationic dye is improved, and the disappearance of fluorescence due to decomposition of the cationic dye during storage of the reagent aqueous solution or during quantitative operation is suppressed. As a result, according to the quantification method of the present invention, it becomes possible to accurately measure orthophosphate ions in the sample aqueous solution.
【００１２】ここで、ポリビニルアルコールとしては、
重合度が５０〜１００００のものを用いるのが好まし
い。水への溶解性を勘案すると重合度は、５０〜２００
０であるのが好適である。ポリビニルアルコールのケン
化率は７０％以上であるのが好ましい。また、該ポリビ
ニルアルコールの試薬水溶液中での濃度は、特に制限さ
れるものではないが、蛍光性の陽イオン染料の安定性向
上効果や試薬水溶液の泡立ち易さを勘案すると、水溶液
中において０．００１〜４重量％、好ましくは０．０１
〜０．５重量％であることが好適である。Here, as polyvinyl alcohol,
It is preferable to use one having a degree of polymerization of 50 to 10,000. Considering the solubility in water, the degree of polymerization is 50 to 200.
It is preferably 0. The saponification ratio of polyvinyl alcohol is preferably 70% or more. The concentration of the polyvinyl alcohol in the reagent aqueous solution is not particularly limited, but in consideration of the stability improving effect of the fluorescent cationic dye and the ease of foaming of the reagent aqueous solution, the concentration of the polyvinyl alcohol in the aqueous solution is 0. 001 to 4% by weight, preferably 0.01
It is preferably about 0.5% by weight.
【００１３】なお、試薬水溶液には、ヘテロポリ酸の生
成速度を速めるため、上記各成分の他にリン酸以外のｐ
ｋａ２以上の酸を含有させるのが好ましい。かかる酸と
しては、具体的には硫酸、塩酸、硝酸、フッ化水素酸等
が挙げられ、このうち酸性度が高く、不純物の少ない試
薬が得やすい硫酸、塩酸を使用することが好ましい。こ
こで、該酸の試薬水溶液中での濃度は、０．１〜２０ｍ
ｏｌ／ｌ、好ましくは０．３〜５ｍｏｌ／ｌであること
が好適である。また、この試薬水溶液には、エチレンジ
アミン四酢酸塩のようなキレート剤を含有させても良
い。In order to accelerate the production rate of the heteropolyacid, the reagent aqueous solution contains p other than phosphoric acid in addition to the above components.
It is preferable to contain an acid of ka2 or more. Specific examples of such an acid include sulfuric acid, hydrochloric acid, nitric acid, hydrofluoric acid, and the like, and among these, it is preferable to use sulfuric acid or hydrochloric acid which has a high acidity and is easy to obtain a reagent containing few impurities. Here, the concentration of the acid in the reagent aqueous solution is 0.1 to 20 m.
It is suitable that it is ol / l, preferably 0.3 to 5 mol / l. Further, this reagent aqueous solution may contain a chelating agent such as ethylenediaminetetraacetic acid salt.
【００１４】以上の試薬水溶液に、オルトリン酸イオン
を含有する検体水溶液を混合すると、生成するヘテロポ
リ酸と蛍光性の陽イオン染料が会合し蛍光の消失が生じ
る。従って、本発明では、上記試薬水溶液と検体水溶液
の混合液の蛍光強度を測定し、その蛍光の消失量を求め
ることにより、検体水溶液中のオルトリン酸イオン濃度
を定量することができる。ここで、定量中の各液の温度
は、特に制限されるものではないが、通常、０〜１００
℃であるのが一般的である。また、試薬水溶液と検体水
溶液とを混合してから、得られた混合液の蛍光強度を測
定するまでには、蛍光の消失反応を十分に進行させるた
め、一般には０．０１〜６０分の間隔を設けるのが好適
である。When the sample aqueous solution containing orthophosphate ions is mixed with the above reagent aqueous solution, the generated heteropolyacid and the fluorescent cationic dye associate with each other to cause the disappearance of fluorescence. Therefore, in the present invention, the concentration of orthophosphate ion in the sample aqueous solution can be quantified by measuring the fluorescence intensity of the mixed solution of the reagent aqueous solution and the sample aqueous solution and determining the amount of disappearance of the fluorescence. Here, the temperature of each liquid during the quantification is not particularly limited, but is usually 0 to 100.
It is generally in ° C. In addition, in order to allow the fluorescence quenching reaction to proceed sufficiently after mixing the reagent aqueous solution and the sample aqueous solution until measuring the fluorescence intensity of the obtained mixed solution, generally, an interval of 0.01 to 60 minutes is used. Is preferably provided.
【００１５】本発明において、こうしたオルトリン酸イ
オンの定量操作は、精度の良さや操作の迅速性を勘案す
ると、連続流れ分析により実施するのが好ましい。図１
に、本発明のオルトリン酸イオンの定量方法を連続流れ
分析により実施する場合の、代表的態様を示す。即ち、
図１において、２のラインには、無機オキソ酸類、蛍光
性の陽イオン染料及びポリビニルアルコールが含有され
る試薬水溶液が供給され、ポンプ３により送液される。
一方、１のラインには蒸留水が供給され、同様にポンプ
３により送液される。そうして、ライン１を流れる蒸留
水は、検体水溶液導入バルブ４より検体水溶液が注入さ
れた後、前記ライン２を流れる試薬水溶液と混合され
る。そして、得られた混合液は、反応コイル５を流れる
過程で、蛍光性の陽イオン染料の蛍光消失反応が十分に
施された後、分光蛍光光度計の蛍光測定セル６に導か
れ、その蛍光強度が測定される。In the present invention, the quantitative operation of such orthophosphate ion is preferably carried out by continuous flow analysis in consideration of accuracy and quickness of operation. FIG.
Fig. 2 shows a typical embodiment when the method for quantifying orthophosphate ion of the present invention is carried out by continuous flow analysis. That is,
In FIG. 1, a reagent aqueous solution containing inorganic oxo acids, a fluorescent cationic dye and polyvinyl alcohol is supplied to a line 2 and is sent by a pump 3.
On the other hand, distilled water is supplied to the line 1 and is similarly sent by the pump 3. Then, the distilled water flowing in the line 1 is mixed with the reagent aqueous solution flowing in the line 2 after the sample aqueous solution is injected from the sample aqueous solution introducing valve 4. Then, the obtained mixed solution is introduced into the fluorescence measuring cell 6 of the spectrofluorometer after the fluorescence quenching reaction of the fluorescent cation dye is sufficiently performed in the process of flowing through the reaction coil 5, and the fluorescence thereof is introduced. The intensity is measured.
【００１６】以上により、検体水溶液中のオルトリン酸
イオンは、迅速に定量でき、また、前記の如く試薬水溶
液中にポリビニルアルコールが含有されているため、こ
のオルトリン酸イオンは極めて良好な精度で測定でき
る。例えば、かかる連続流れ分析により、複数の検体水
溶液を測定する場合においても、測定時間の経過と供に
蛍光強度のベースラインが下降してくることが抑制され
る。As described above, the orthophosphate ion in the sample aqueous solution can be rapidly quantified, and since the reagent aqueous solution contains polyvinyl alcohol as described above, the orthophosphate ion can be measured with extremely good accuracy. . For example, by such continuous flow analysis, even when a plurality of sample aqueous solutions are measured, the baseline of the fluorescence intensity is suppressed from decreasing with the passage of measurement time.
【００１７】[0017]
【効果】本発明によれば、試薬水溶液中にポリビニルア
ルコールの作用により、蛍光性の陽イオン染料の安定性
が向上し、試薬水溶液の保存中或いは定量操作中に該陽
イオン染料の分解により蛍光が消失することが抑制され
る。また、蛍光強度測定時においては、ヘテロポリ酸と
蛍光性の陽イオン染料との会合体が蛍光測定セル中に沈
澱することも防止される。[Effect] According to the present invention, the stability of the fluorescent cationic dye is improved by the action of polyvinyl alcohol in the reagent aqueous solution, and the fluorescence is generated by the decomposition of the cationic dye during storage or quantitative operation of the reagent aqueous solution. Are suppressed from disappearing. Further, during the measurement of the fluorescence intensity, the association of the heteropolyacid and the fluorescent cationic dye is prevented from precipitating in the fluorescence measurement cell.
【００１８】本発明により、水溶液中のオルトリン酸イ
オンは、ｎｇ／ｍｌ以下のレベルで、良好な精度で定量
することができる。According to the present invention, orthophosphate ions in an aqueous solution can be quantified with good accuracy at a level of ng / ml or less.
【００１９】[0019]
【実施例】以下に実施例及び比較例を掲げて本発明を説
明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。EXAMPLES The present invention will be described below with reference to examples and comparative examples, but the present invention is not limited to these examples.
【００２０】実施例１ 図１に示した連続流れ分析のシステムで測定を行った。
試薬水溶液は、陽イオン染料としてローダミンＢ６．２
×１０-6ｍｏｌ／ｌ、モリブデン酸アンモニウム０．０
０５ｍｏｌ／ｌ、硫酸０．８ｍｏｌ／ｌ、重合度１００
でケン価度が１００％のポリビニルアルコール０．０５
重量％の濃度となるよう調整した水溶液である。ライン
２に供給する試薬水溶液、ライン１に供給する蒸留水と
も流量１．４ｍｌ／分で送液した。検体水溶液導入バル
ブ４（６方バルブ）からは、０、２×１０-7、４×１０
-7、６×１０-7、８×１０-7、１０×１０-7ｍｏｌ／ｌ
の各オルトリン酸イオンを含む標準水溶液を１７０μｌ
づつ、それぞれの濃度につき２回注入した。この検体水
溶液の注入間隔は、５分とした。また、得られた混合液
の蛍光強度は、定量５８０ｎｍ（励起波長５６０ｎｍ）
で測定した。Example 1 Measurements were carried out with the continuous flow analysis system shown in FIG.
The reagent aqueous solution contains rhodamine B6.2 as a cationic dye.
× 10 -6 mol / l, ammonium molybdate 0.0
05 mol / l, sulfuric acid 0.8 mol / l, polymerization degree 100
And polyvinyl alcohol with a ken number of 100% is 0.05
It is an aqueous solution adjusted to have a concentration of wt%. Both the reagent aqueous solution supplied to the line 2 and the distilled water supplied to the line 1 were sent at a flow rate of 1.4 ml / min. 0, 2 × 10 −7 , 4 × 10 from the sample aqueous solution introduction valve 4 (6-way valve)
-7 , 6 x 10 -7 , 8 x 10 -7 , 10 x 10 -7 mol / l
170 μl of standard aqueous solution containing each orthophosphate ion of
Two injections were made for each concentration. The injection interval of this sample aqueous solution was 5 minutes. In addition, the fluorescence intensity of the obtained mixed solution has a fixed amount of 580 nm (excitation wavelength of 560 nm).
It was measured at.
【００２１】以上の測定により得られた蛍光強度の変化
のチャートを図２に示した。各蛍光ピークの強度は、注
入した検体水溶液中のオルトリン酸イオン濃度に良く対
応していた。また、かかる測定中において、蛍光強度の
ベースラインは０．２×１０-7ｍｏｌ・ｌ-1相当蛍光強
度・(時間)-1以下でしか下降しなかった。A chart of changes in fluorescence intensity obtained by the above measurement is shown in FIG. The intensity of each fluorescence peak corresponded well to the orthophosphate ion concentration in the injected sample aqueous solution. In addition, during such measurement, the baseline of the fluorescence intensity dropped only at 0.2 × 10 −7 mol·l −1 equivalent fluorescence intensity · (time) −1 or less.
【００２２】比較例１ 実施例１において、試薬水溶液中にポリビニルアルコー
ルを含有させなかった以外は実施例１と同様に実施し
た。かかる測定中において、蛍光強度のベースライン
は、図３に示す如く１．２×１０-7ｍｏｌ・ｌ-1相当蛍
光強度・(時間)-1で下降した。Comparative Example 1 The procedure of Example 1 was repeated, except that the aqueous solution of reagent did not contain polyvinyl alcohol. During the measurement, the baseline of the fluorescence intensity decreased at the fluorescence intensity corresponding to 1.2 × 10 −7 mol·l −1 (time) −1 as shown in FIG. 3.
【００２３】比較例２ 実施例１において、試薬水溶液中にポリビニルアルコー
ルを含有させず、該実施例１と等量に相当するポリビニ
ルアルコールを、混合液が蛍光強度セル６に導入される
直前の箇所で該混合液に注入するようにした以外は、実
施例１と同様に実施した。かかる測定中において、蛍光
強度のベースラインは０．６×１０-7ｍｏｌ・ｌ-1相当
蛍光強度・(時間)-1で下降した。Comparative Example 2 In Example 1, a portion immediately before the mixed solution was introduced into the fluorescence intensity cell 6 without adding polyvinyl alcohol to the reagent aqueous solution and equivalent to the polyvinyl alcohol in Example 1 was introduced. The same procedure as in Example 1 was carried out except that the mixture was injected into the mixture. During the measurement, the baseline of the fluorescence intensity decreased at the fluorescence intensity corresponding to 0.6 × 10 −7 mol·l −1 (time) −1 .
【００２４】実施例２ 実施例１において、試薬水溶液中の酸を塩酸を１．６ｍ
ｏｌ／ｌとした以外は、実施例１と同様に実施した。各
蛍光ピークの強度は、注入した検体水溶液中のオルトリ
ン酸イオン濃度に良く対応していた。また、かかる測定
中において、蛍光強度のベースラインは、０．３×１０
-7ｍｏｌ・ｌ-1相当蛍光強度・(時間)-1でしか下降しな
かった。Example 2 In Example 1, the acid in the aqueous reagent solution was added with hydrochloric acid at 1.6 m.
It carried out like Example 1 except having set it as ol / l. The intensity of each fluorescence peak corresponded well to the orthophosphate ion concentration in the injected sample aqueous solution. Further, during such measurement, the baseline of fluorescence intensity was 0.3 × 10
The fluorescence intensity decreased only at -7 mol·l −1 equivalent fluorescence intensity · (time) −1 .
【００２５】実施例３ 実施例１において、試薬水溶液中含有させるポリビニル
アルコールとして、重合度１０００でケン価度が１００
％のものを用いた以外は、実施例１と同様に実施した。
各蛍光ピークの強度は、注入した検体水溶液中のオルト
リン酸イオン濃度に良く対応していた。また、かかる測
定中において、蛍光強度のベースラインは、０．３×１
０-7ｍｏｌ・ｌ-1相当蛍光強度・(時間)-1でしか下降し
なかった。Example 3 In Example 1, the polyvinyl alcohol contained in the aqueous reagent solution had a polymerization degree of 1000 and a saponification number of 100.
The same procedure as in Example 1 was carried out except that the content of 1% was used.
The intensity of each fluorescence peak corresponded well to the orthophosphate ion concentration in the injected sample aqueous solution. Also, during such measurement, the baseline of fluorescence intensity was 0.3 × 1.
It decreased only at 0 −7 mol·l −1 equivalent fluorescence intensity · (time) −1 .
【００２６】実施例４ 実施例１において、試薬水溶液中含有させるポリビニル
アルコールの濃度を０．２重量％と変えた以外は、実施
例１と同様に実施した。各蛍光ピークの強度は、注入し
た検体水溶液中のオルトリン酸イオン濃度に良く対応し
ていた。また、かかる測定中において、蛍光強度のベー
スラインは、０．３×１０-7ｍｏｌ・ｌ -1相当蛍光強度
・(時間)-1でしか下降しなかった。Example 4 Polyvinyl contained in the reagent aqueous solution in Example 1
Except that the concentration of alcohol was changed to 0.2% by weight
It carried out like Example 1. The intensity of each fluorescence peak is
Well corresponds to the concentration of orthophosphate ion in the sample aqueous solution.
I was Also, during such measurement, the fluorescence intensity
Sline is 0.3 × 10-7mol·l -1Equivalent fluorescence intensity
·(time)-1It only descended.
【００２７】実施例５ 実施例１において、試薬水溶液中含有させる無機オキソ
酸類として、モリブデン酸を用いた以外は、実施例１と
同様に実施した。各蛍光ピークの強度は、注入した検体
水溶液中のオルトリン酸イオン濃度に良く対応してい
た。また、かかる測定中において、蛍光強度のベースラ
インは、０．３×１０-7ｍｏｌ・ｌ-1相当蛍光強度・
(時間)-1でしか下降しなかった。Example 5 The procedure of Example 1 was repeated, except that molybdic acid was used as the inorganic oxoacids contained in the aqueous reagent solution. The intensity of each fluorescence peak corresponded well to the orthophosphate ion concentration in the injected sample aqueous solution. Further, during such measurement, the baseline of the fluorescence intensity was 0.3 × 10 −7 mol·l −1 equivalent fluorescence intensity.
(Time) It fell only at -1 .
【００２８】実施例６ 実施例１において、試薬水溶液中含有させる蛍光性の陽
イオン染料として、ローダミン６Ｇを用いた以外はは実
施例１と同様に実施した。各蛍光ピークの強度は、注入
した検体水溶液中のオルトリン酸イオン濃度に良く対応
していた。また、かかる測定中において、蛍光強度のベ
ースラインは、０．３×１０-7ｍｏｌ・ｌ-1相当蛍光強
度・(時間)-1でしか下降しなかった。Example 6 The procedure of Example 1 was repeated, except that Rhodamine 6G was used as the fluorescent cationic dye contained in the reagent aqueous solution. The intensity of each fluorescence peak corresponded well to the orthophosphate ion concentration in the injected sample aqueous solution. Further, during such measurement, the baseline of the fluorescence intensity dropped only at the fluorescence intensity corresponding to 0.3 × 10 −7 mol·l −1 (time) −1 .
【図１】図１は、本発明のオルトリン酸イオンの定量方
法を連続流れ分析により実施する場合の代表的態様の概
略図である。FIG. 1 is a schematic view of a typical embodiment when the method for quantifying orthophosphate ion of the present invention is carried out by continuous flow analysis.
【図２】図２は、実施例１において測定された蛍光強度
の変化のチャートである。FIG. 2 is a chart of changes in fluorescence intensity measured in Example 1.
【図３】図２は、比較例１において測定された蛍光強度
の変化のチャートである。FIG. 2 is a chart of changes in fluorescence intensity measured in Comparative Example 1.
１：蒸留水供給ライン ２：試薬水溶液供給ライン ３：ポンプ ４：検体水溶液導入バルブ ５：反応コイル ６：蛍光測定セル 1: Distilled water supply line 2: Reagent aqueous solution supply line 3: Pump 4: Sample aqueous solution introduction valve 5: Reaction coil 6: Fluorescence measurement cell
Claims (1)
ポリ酸を生成しうる無機オキソ酸またはその塩 ｂ）蛍光性の陽イオン染料 ｃ）ポリビニルアルコール を含有する試薬水溶液と、オルトリン酸イオンを含有す
る検体水溶液とを混合し、得られた混合液の蛍光強度か
ら上記検体水溶液中のオルトリン酸イオン濃度を定量す
ることを特徴とするオルトリン酸イオンの定量方法。1. An inorganic oxo acid or a salt thereof capable of reacting with an orthophosphate ion to form a heteropolyacid, b) a fluorescent cationic dye, c) an aqueous reagent solution containing polyvinyl alcohol, and an orthophosphate ion. A method for quantifying orthophosphate ion, which comprises mixing the sample aqueous solution described above and quantifying the orthophosphate ion concentration in the sample aqueous solution from the fluorescence intensity of the obtained mixed solution.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4682895A JPH08240584A (en) | 1995-03-07 | 1995-03-07 | Method for quantification of orthophosphoric acid ion |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4682895A JPH08240584A (en) | 1995-03-07 | 1995-03-07 | Method for quantification of orthophosphoric acid ion |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08240584A true JPH08240584A (en) | 1996-09-17 |
Family
ID=12758200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4682895A Pending JPH08240584A (en) | 1995-03-07 | 1995-03-07 | Method for quantification of orthophosphoric acid ion |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08240584A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004011928A1 (en) * | 2002-07-29 | 2004-02-05 | Tohoku Techno Arch Co., Ltd. | Method and device for measuring water trace constituent |
| US7416899B2 (en) | 2002-07-29 | 2008-08-26 | Tohoku Techno Arch Co., Ltd. | Method and apparatus for measuring trace ingredients in water |
-
1995
- 1995-03-07 JP JP4682895A patent/JPH08240584A/en active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004011928A1 (en) * | 2002-07-29 | 2004-02-05 | Tohoku Techno Arch Co., Ltd. | Method and device for measuring water trace constituent |
| CN100368807C (en) * | 2002-07-29 | 2008-02-13 | 株式会社东北宏桥技术 | Method and apparatus for measuring trace ingredients in water |
| US7416899B2 (en) | 2002-07-29 | 2008-08-26 | Tohoku Techno Arch Co., Ltd. | Method and apparatus for measuring trace ingredients in water |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Itaya et al. | A new micromethod for the colorimetric determination of inorganic phosphate | |
| CN102879345B (en) | Method for determining phosphorus content of silicon ferrovanadium | |
| CN109187395A (en) | The measuring method of total phosphorus content in a kind of detergent | |
| JPS6342736B2 (en) | ||
| JPH08240584A (en) | Method for quantification of orthophosphoric acid ion | |
| CN103245756A (en) | Method for determining content of vincamine acid by non-aqueous titration method | |
| Chromý et al. | Spectrophotometric determination of magnesium in biological fluids with xylidyl blue II | |
| Rios et al. | Simultaneous flow-injection flourimetric determination of ammonia and hydrazine with a novel mode of forming pH gradients | |
| CN108137635B (en) | Acetate complex and method for acetate quantification | |
| CN105842437A (en) | Kit for detecting D-3-hydroxybutyric acid and preparation method of kit | |
| Ioannou | A simple and rapid fluorimetric method for the microdetermination of isonicotinic acid hydrazide | |
| CN105548107B (en) | A kind of preparation method of luminous precursor and its application in iron ion detection and method | |
| Speck et al. | Determination of hydroxymethyl groups in 1, 2-glycols and related substances | |
| Chen et al. | Flow injection spectrofluorimetric determination of reserpine in tablets by on-line acetone sensitized photochemical reaction | |
| Donhowe et al. | Factitious hypophosphatemia related to mannitol therapy. | |
| CN111239126A (en) | Detection reagent combination for phosphate molybdenum antimony resistance method determination and preparation method thereof | |
| Panadero et al. | Fast determination of naproxen in serum by stopped-flow/room temperature liquid phosphorimetry | |
| CA1335251C (en) | Quantitative determination of phosphorus | |
| JPS62198737A (en) | Analysis of vanadium | |
| US3615228A (en) | Glucose determination method employing orthotoluidine | |
| Adam et al. | Development of Spectrophotometric Method for the Assay of Aminocaproic Acid in Dosage Forms Using Ascorbic Acid | |
| JPS6171355A (en) | Analyzing method of phosphoric acid | |
| KR100295183B1 (en) | Method for measuring the effective amount of phosphoric acid of solution leached by lancaster method | |
| JP2003240766A (en) | Method and apparatus for measuring borate ion | |
| US3732077A (en) | Method and composition for determining bun |