JPH08154666A - New yeast, bread dough containing the same and production of the dough - Google Patents

New yeast, bread dough containing the same and production of the dough

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JPH08154666A
JPH08154666A JP30793694A JP30793694A JPH08154666A JP H08154666 A JPH08154666 A JP H08154666A JP 30793694 A JP30793694 A JP 30793694A JP 30793694 A JP30793694 A JP 30793694A JP H08154666 A JPH08154666 A JP H08154666A
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dough
yeast
bread
high sugar
fermentation
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Hiroaki Yamauchi
宏昭 山内
Isato Takada
勇人 高田
Koji Morita
浩治 森田
Ikuko Tomofuji
幾子 友藤
Kozo Oya
甲三 大宅
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Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
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Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
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Abstract

PURPOSE: To provide bread dough containing a specific yeast, capable of well fermenting even in a highly saccharlc state and of obtaining excellent bread through the straight method as well as the batch method or the CHUDANE method(medium-leaven method). CONSTITUTION: This dough contains yeast such as Saccharomyces-cerevlsiae R-9152 (FERM-P-14675) or Saccharomyces-cerevlslae R-9155 (FERM-P-14676), which is highly suppressed in fermentation at low temperatures but can conduct enough fermentation in a highly saccharic medium. This yeast has a specific invertase activity of 10-150 unit, a fermenting ability in a highly saccharic medium at 30 deg.C for 115min. of >=350ml, resistance to refrigeration and/or freezing and also resistance to storage under refrigeration in a highly saccharic medium.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【0001】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は新規酵母、該酵母を含有
するパン生地および該生地の製造方法に関する。更に詳
しくは、製パン上、とりわけリタード工程を含むデニッ
シュやクロワッサンなどのペーストリー、糖濃度の高い
菓子パン、さらに全ての種類のパンにおける冷蔵生地あ
るいは冷凍生地に有用な新規酵母及びこの酵母を含有す
るパン生地および該パン生地の製造方法に関する。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a novel yeast, bread dough containing the yeast and a method for producing the dough. More specifically, on bread making, in particular, pastries such as Danish and croissant including a retardation process, confectionery bread with high sugar concentration, and novel yeast useful for refrigerated dough or frozen dough in all types of bread and this yeast are contained. The present invention relates to bread dough and a method for producing the dough.

【0002】[0002]

【従来の技術】従来から、糖濃度が25%以上の菓子パ
ン生地においても、高い発酵力を示し良好な菓子パンを
製造できるパン酵母が望まれており、浸透圧耐性の高い
酵母のスクリーニングあるいは酵母のインベルターゼ比
活性等について検討が行われている。しかしながら、後
者のインベルターゼ比活性と菓子パン生地での発酵力と
の関係について、十分な検討はなされておらず、特に菓
子パン生地のような高糖生地での冷蔵、冷凍後の発酵力
に対するインベルターゼ比活性の関与に関してはほとん
ど研究されていないのが現状である。そのため、インベ
ルターゼ比活性に注目した発明は、特開昭61−231
993、特開平3−80073に開示されているインベ
ルターゼ比活性の全くないかあるいはほとんどないパン
酵母に関するもののみである。しかしながら、これらの
発明はフラクトオリゴ糖入りパンに使用することを目的
に育種されたフラクトオリゴ糖非資化性酵母に関するも
のである。そのため、これらの酵母は砂糖を多量に添加
する菓子パンのような高糖生地での発酵力が十分でな
く、良好な菓子パンを製造するための酵母としては、実
用性が十分ではないという欠点をもっている。
2. Description of the Related Art Conventionally, there has been a demand for baker's yeast capable of producing good confectionery breads having high fermentation ability even in a confectionery bread dough having a sugar concentration of 25% or more. The invertase specific activity has been studied. However, the relationship between the latter invertase specific activity and the fermenting power in confectionery bread dough has not been sufficiently examined, and in particular, the invertase specific activity for the fermenting power after refrigeration and freezing in a high sugar dough such as confectionery bread dough. Currently, little research has been done on the involvement of. Therefore, the invention focusing on the invertase specific activity is disclosed in JP-A-61-231.
993, Japanese Patent Application Laid-Open No. 3-80073, discloses only baker's yeast having no or little invertase specific activity. However, these inventions relate to a fructooligosaccharide non-assimilating yeast that has been bred for use in bread containing fructooligosaccharide. Therefore, these yeasts do not have sufficient fermenting power in a high sugar dough such as sweet bread to which a large amount of sugar is added, and as yeasts for producing good sweet bread, they have a drawback that they are not sufficiently practical. .

【0003】このような状況から、現在までインベルタ
ーゼ比活性が生地中の砂糖を分解するのに十分な量以上
あるが、その比活性がかなり低く高糖生地の発酵力が高
い酵母は開発されていないのが現状である。
Under these circumstances, yeasts have been developed up to now, which have an invertase specific activity more than a sufficient amount to decompose sugar in the dough, but the specific activity is considerably low and the fermentative power of high sugar dough is high. The current situation is that there are none.

【0004】また、最近の製パン業界では、省力化によ
る工程の合理化と、その反面、多様な消費者ニーズにこ
たえるための品種のバラエティー化との両方のニーズに
応えるため、冷凍生地法が盛んに行われるようになって
きた。さらには、生地を冷凍させないで冷蔵状態で保管
すると同時に生地の熟成を図る所謂冷蔵生地法も盛んに
検討されるようになってきた。しかしながら、従来のパ
ン酵母の場合は生地を低温に冷却しても発酵速度は常温
の場合よりも遅くはなるものの発酵が進むため、冷蔵生
地での保管はせいぜい1日程度であり、このため一部実
用化はされてはいるものの広く応用されるまでには至っ
ていないのが実状である。
In the recent bakery industry, the frozen dough method is popular in order to meet the needs of both the rationalization of the process by labor saving and the variety of varieties to meet various consumer needs. Has started to take place. Furthermore, a so-called refrigerated dough method has been actively studied, in which the dough is stored in a refrigerated state without being frozen, and at the same time, the dough is matured. However, in the case of conventional baker's yeast, even if the dough is cooled to a low temperature, the fermentation rate will be slower than that at room temperature, but since the fermentation proceeds, storage in refrigerated dough is at most about one day, and therefore Although it has been put to practical use, it has not yet been widely applied.

【0005】デニッシュやクロワッサンなどのペースト
リーの製造では、ロールインマーガリンをきれいに層状
に折り込むため生地を低温処理するいわゆる「リタード
法」がとりいれられている。しかしながら、このリター
ド工程における若干の生地発酵のために、ロールインマ
ーガリンがきれいに折り込まれず、できたパンの層がき
れいにならなかったり、生地の冷蔵保管が事実上できな
いため、成形残の生地の活用ができず、製パン工程の歩
留りの低下を招いている。
In the production of pastries such as Danish and croissant, a so-called "retard method" is adopted in which the dough is treated at a low temperature in order to fold the roll-in margarine into a neat layer. However, due to some fermentation of the dough in this retardation process, the roll-in margarine was not folded neatly, the bread layer formed was not clean, and the dough could not be stored refrigerated, so the utilization of the dough after molding was not possible. However, the yield of the bread making process is reduced.

【0006】このような課題を解決すべく、特開平5-76
348、特開平5-284896、および特開平5-336872には、冷
蔵中には発酵せず、一定温度以上では発酵する酵母(低
温感受性酵母)が開示されているが、冷蔵保存後の発酵
力(本明細書の復温発酵力に相当する)が、冷蔵前に比
べて60%程度である。従って、冷蔵生地を用いてパンを
作製した場合、発酵力が不足するためボリュームのある
良質なパンが製造できないという欠点がある。
In order to solve such a problem, Japanese Patent Laid-Open No. 5-76
348, JP-A-5-284896, and JP-A-5-336872 disclose yeasts that do not ferment during refrigeration but that ferment above a certain temperature (cold-sensitive yeasts). (Corresponding to the rewarming fermentation power in the present specification) is about 60% as compared with that before refrigeration. Therefore, when bread is made using refrigerated dough, there is a disadvantage that fermenting power is insufficient and bread with high quality cannot be produced.

【0007】さらに、低温感受性酵母の復温発酵力の低
下は、生地中の糖濃度が高くなると一般により顕著にな
り、対粉当りの糖の添加量が25%以上の菓子パン生地
のような高糖生地で冷蔵後の発酵力が、冷蔵前と同等の
発酵力を有する低温感受性酵母は、未だ開発されていな
いのが現状である。
[0007] Furthermore, the decrease in the reheat fermentation ability of the cold-sensitive yeast becomes more remarkable as the sugar concentration in the dough becomes higher, and it is as high as that of confectionary bread dough in which the added amount of sugar per flour is 25% or more. At present, a low-temperature-sensitive yeast having a fermenting power after refrigeration with sugar dough that is equivalent to that before refrigeration has not yet been developed.

【0008】冷凍生地法においても、生地ミキシング
後、冷凍過程において若干の発酵(所謂冷凍前発酵)が
起こり、エチルアルコールが生地に生成することによっ
て酵母の冷凍耐性が低下したり、流通過程における冷凍
庫の開閉など保管条件の不良による温度上昇のため、せ
っかく冷凍した生地でも昇温による一部解凍が起こり品
質が低下する、などの問題があった。そして冷凍前発酵
を抑えるため、冷凍生地の製造ではミキシング温度を極
端に低く押さえるべく冷蔵庫のような低温下でミキシン
グを行い、かつ急速冷凍をするためスパイラル急速冷凍
機を使用するなど膨大なエネルギーを必要としているの
が実状である。
Also in the frozen dough method, after dough mixing, some fermentation (so-called pre-freeze fermentation) occurs in the freezing process, and ethyl alcohol is produced in the dough to reduce the freezing resistance of the yeast, or the freezer in the distribution process. Since the temperature rises due to poor storage conditions such as opening and closing, the quality of the dough, which has been frozen for a long time, is partially thawed due to the temperature rise and the quality is deteriorated. And in order to suppress pre-freezing fermentation, in the production of frozen dough, mixing is performed at a low temperature like a refrigerator in order to keep the mixing temperature extremely low, and a huge amount of energy is used such as using a spiral quick freezer for quick freezing. The reality is what is needed.

【0009】このような課題を解決すべく、特開平4−
234939では、低温感受性かつ冷凍耐性の性質を有
するパン酵母が提供されているが、そのパン酵母はもと
もと一般のパン酵母に較べると発酵力がかなり弱いもの
であり、実用性という面で問題がある。
In order to solve such a problem, Japanese Unexamined Patent Publication No.
Although 234939 provides baker's yeast having low temperature sensitivity and freeze-tolerance, the baker's yeast originally has a considerably weaker fermenting power than general baker's yeast, which is problematic in practicality. .

【0010】[0010]

【発明が解決しようとする課題】従って、通常の中種
法、ストレート法菓子パン生地で十分に発酵するパン酵
母が望まれていた。
Therefore, there has been a demand for a baker's yeast that can be sufficiently fermented with a conventional dough of the middle seed type and the straight type confectionary bread dough.

【0011】また、生地を冷凍させないで冷蔵状態でも
流通が可能な冷蔵生地法や、リタード工程における生地
膨張が従来のパン酵母に比べて少なく、商品価値が高
く、かつ残生地も活用でき製品歩留りの高いペーストリ
ー商品の製造を可能とする新規酵母、該酵母を含有する
パン生地、および該生地の製造方法を提供することが望
まれていた。
In addition, the refrigerating dough method allows the dough to be distributed in a refrigerated state without freezing, and the dough expansion in the retarding process is less than that of conventional baker's yeast, and the product value is high, and the remaining dough can be utilized. It has been desired to provide a novel yeast that enables production of high pastry products, a bread dough containing the yeast, and a method for producing the dough.

【0012】さらに、冷蔵保存後でも発酵力が低下せ
ず、また高糖生地を冷蔵保存した場合でも復温発酵力が
高い酵母を提供することが望まれていた。
Further, it has been desired to provide a yeast having a high fermenting power which is not deteriorated even after being refrigerated and which has a high reheat fermenting power even when the high sugar dough is refrigerated and stored.

【0013】また、冷凍生地法においては、生地の冷凍
過程で速やかに発酵が抑制されることにより冷凍耐性が
向上し、冷凍流通過程での保管条件による昇温に対して
も耐性のある冷凍生地の製造を可能とする新規酵母及び
これを含有する冷凍生地が望まれていた。
Further, in the frozen dough method, fermentation is rapidly suppressed during the freezing process of the dough so that the freezing resistance is improved, and the frozen dough is resistant to temperature rise due to storage conditions in the frozen distribution process. A novel yeast and a frozen dough containing the same have been desired.

【0014】[0014]

【課題を解決するための手段】本発明は、上記問題点を
解決すべくなされたものであり、その目的とするところ
は、高糖生地発酵力が非常に高く、通常の中種法、スト
レート法で良好な菓子パンが得られ、さらに、冷蔵耐性
および/または冷凍耐性を有し、冷蔵、冷凍保存後の発
酵力の減少が少なく、高糖生地での冷蔵保存にも耐性な
酵母を提供することにある。
SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made to solve the above-mentioned problems, and its object is to have a very high fermenting ability for high sugar dough, and to use the ordinary middle seed method, straight A good confectionery bread can be obtained by the method, and further, it has a resistance to refrigeration and / or freezing, a decrease in fermentation power after refrigeration and frozen storage is small, and a yeast that is resistant to refrigerated storage in high sugar dough is provided. Especially.

【0015】本発明者らは、自然界から、あるいは保存
菌株からのスクリーニング又は変異処理や交雑や細胞融
合などによる育種操作によって得られた菌株を用いて幅
広く酵母のスクリーニングを行った結果、低温下で発酵
が非常に抑制される酵母であり、インベルターゼ比活性
が生地中の砂糖を分解するには十分であるが、その比活
性がかなり低く、高糖生地発酵の高い酵母を分離した。
そして、さらにこれらの酵母から、スクリーニング、お
よび育種を重ねた結果、目的とする菌株を得ることに成
功し、本発明を完成させた。
The present inventors extensively screened yeast using the strains obtained by screening from the natural world or from preserved strains or breeding operations such as mutation treatment, crossing and cell fusion. It was a yeast whose fermentation was extremely suppressed, and although the specific activity of invertase was sufficient to decompose sugar in the dough, its specific activity was rather low, and yeast with high sugar dough fermentation was isolated.
As a result of repeated screening and breeding from these yeasts, the target strain was successfully obtained, and the present invention was completed.

【0016】本発明は、サッカロミセス属に属し、以下
の性質: (1)インベルターゼ比活性が10ユニット以上、15
0ユニット以下、および、 (2)高糖生地での30℃、115分の発酵力が350
ml以上である、を有する酵母に関する。
The present invention belongs to the genus Saccharomyces and has the following properties: (1) Invertase specific activity of 10 units or more, 15
0 units or less, and (2) High sugar dough has a fermenting power of 350 at 115 ° C for 115 minutes.
is more than ml.

【0017】好適な実施態様においては、本発明の酵母
は、さらに以下の性質: (3)高糖生地での5℃、24時間の発酵力が10ml
以下、および、 (4)30℃の復温高糖生地発酵力が、30℃、115
分の高糖生地発酵力の90%以上である、を有する。
In a preferred embodiment, the yeast of the present invention further has the following properties: (3) Fermentative power of 10 ml in a high sugar dough at 5 ° C. for 24 hours.
The following, and (4) reheat high sugar dough fermenting power of 30 ℃, 30 ℃, 115
90% or more of the high sugar dough fermenting power of minutes.

【0018】好適な実施態様においては、本発明の酵母
は、さらに以下の性質: (5)−20℃、1週間冷凍保存後の30℃での復温高
糖生地発酵力が、30℃、115分の高糖生地発酵力の
90%以上である、という性質を有する。
In a preferred embodiment, the yeast of the present invention further has the following properties: (5) -20 ° C, reheated high sugar dough fermenting power at 30 ° C after frozen storage for 1 week is 30 ° C, It has the property of being 90% or more of the high sugar dough fermenting power of 115 minutes.

【0019】上記性質を有する酵母として、以下の酵
母:サッカロミセス・セレビシエR−9152(FER
M P−14675)、サッカロミセス・セレビシエR
−9155(FERM P−14676)、サッカロミ
セス・セレビシエR−9156(FERM P−146
77)、サッカロミセス・セレビシエR−9160(F
ERM P−14678)、または、サッカロミセス・
セレビシエR−9194(FERM P−14679)
が挙げられる。
As yeasts having the above-mentioned properties, the following yeasts: Saccharomyces cerevisiae R-9152 (FER
MP-14675), Saccharomyces cerevisiae R
-9155 (FERM P-14676), Saccharomyces cerevisiae R-9156 (FERM P-146)
77), Saccharomyces cerevisiae R-9160 (F
ERM P-14678) or Saccharomyces
Cerevisiae R-9194 (FERM P-14679)
Is mentioned.

【0020】上記酵母は、通常の菓子パン生地、冷蔵お
よび/または冷凍パン生地に好適に用いられ得る。
The above yeast can be suitably used for ordinary pastry dough, refrigerated and / or frozen dough.

【0021】本発明は、さらに、上記に記載の酵母を少
なくとも1種を含有するパン生地に関し、好適な実施態
様においては、パン生地は、通常の菓子パン生地、冷蔵
パン生地あるいは冷凍パン生地である。
The present invention further relates to a bread dough containing at least one yeast described above, and in a preferred embodiment, the bread dough is an ordinary confectionery bread dough, refrigerated bread dough, or frozen dough.

【0022】また、本発明は、上記に記載の酵母を少な
くとも1種を含有するパン生地の製造方法に関し、好適
な実施態様においては、通常の菓子パン生地、冷蔵パン
生地あるいは冷凍パン生地の製造方法である。
The present invention also relates to a method for producing a bread dough containing at least one yeast described above, and in a preferred embodiment, a method for producing an ordinary confectionery bread dough, refrigerated bread dough or frozen bread dough.

【0023】高糖生地発酵力が高く、冷蔵、冷凍後にも
発酵力が高い本願発明の酵母を用いることにより、本願
発明の目的である良好な菓子パンの製造及び長時間保存
のできる冷蔵生地や、品質がよく歩留りの高いリタード
法でのペーストリー、さらには冷凍耐性の高い冷凍生地
の製造が可能になる。また、冷蔵生地法による高糖生地
を用いる菓子パンの製造が可能になる。従って、本発明
の目的が達成される。以下に、本発明を具体的に説明す
る。
By using the yeast of the present invention, which has a high fermenting power of high sugar dough and a high fermenting power even after refrigeration and freezing, a refrigerated dough which is an object of the present invention can be produced and can be stored for a long time, It enables the production of high quality, high yield pastry by the retard method and frozen dough with high freezing resistance. Further, it becomes possible to manufacture a sweet bun using a high sugar dough by the refrigerating dough method. Therefore, the object of the present invention is achieved. The present invention will be specifically described below.

【0024】本発明の酵母は、少なくとも以下の性質: (1)インベルターゼ比活性が10ユニット以上、15
0ユニット以下、および、 (2)高糖生地での30℃、115分の発酵力が350
ml以上である、を有する。
The yeast of the present invention has at least the following properties: (1) Invertase specific activity of 10 units or more, 15
0 units or less, and (2) High sugar dough has a fermenting power of 350 at 115 ° C for 115 minutes.
It is more than ml.

【0025】インベルターゼ比活性が、10ユニットよ
り低いと、生地中の砂糖を十分に分解できないために十
分な発酵力が得られず、150ユニットより高いと、高
糖生地での砂糖の分解速度が速くなり生地の浸透圧が高
くなる。その結果、発酵が阻害され、十分な高糖生地発
酵力が得られない。また150ユニットより高いと、高
糖生地の冷蔵中に砂糖がより速く分解されるため浸透圧
が上昇し、復温発酵力が低下するという欠点も生じる。
このような点から、インベルターゼ比活性は150ユニ
ット以下であることが好ましい。
If the invertase specific activity is lower than 10 units, sufficient fermentability cannot be obtained because the sugar in the dough cannot be sufficiently decomposed, and if it is higher than 150 units, the decomposition rate of sugar in the high sugar dough is high. It becomes faster and the osmotic pressure of the dough becomes higher. As a result, fermentation is inhibited, and sufficient high sugar dough fermenting power cannot be obtained. On the other hand, if it is higher than 150 units, the sugar is decomposed more quickly during refrigeration of the high-sugar dough, so that the osmotic pressure increases and the reheat fermentation power decreases.
From this point of view, the invertase specific activity is preferably 150 units or less.

【0026】本発明の酵母は、さらに、高糖生地での3
0℃、115分の発酵力が350ml以上であるという
性質を有する。このような性質を有する酵母は、低温下
での耐性が付与され、かつ、パン製造時に発酵力が十分
に保持されているため、本発明の目的を達成し得る。
[0026] The yeast of the present invention is further used in high sugar dough.
It has the property that the fermentation power at 0 ° C. for 115 minutes is 350 ml or more. The yeast having such properties is endowed with resistance to low temperatures and has a sufficient fermenting power during bread making, so that the object of the present invention can be achieved.

【0027】本発明の酵母は、さらに以下の性質: (3)高糖生地での5℃、24時間の発酵力が10ml
以下、および、 (4)30℃の復温高糖生地発酵力が、30℃、115
分の高糖生地発酵力の90%以上である、を有し得る。
The yeast of the present invention further has the following properties: (3) Fermentation power of 10 ml in a high sugar dough at 5 ° C. for 24 hours
The following, and (4) reheat high sugar dough fermenting power of 30 ℃, 30 ℃, 115
90% or more of the high sugar dough fermenting power of minutes.

【0028】高糖生地での5℃、24時間の発酵力が1
0ml以下であることにより、冷蔵中の生地の膨張もほ
とんどなく、リタード法等での生地の成型がしやすく、
残生地の再利用が可能になる。また、30℃の復温高糖
生地発酵力が、30℃、115分の高糖生地発酵力の9
0%以上であることにより、冷蔵後も十分な発酵力が維
持され、冷蔵生地法によってボリュームのある良好なパ
ンを得ることができる。
Fermentation power of high sugar dough for 24 hours at 5 ° C is 1
Since it is 0 ml or less, the dough hardly expands during refrigeration, and the dough can be easily formed by the retard method,
The remaining fabric can be reused. In addition, the re-warm high sugar dough fermenting power of 30 ° C is 30 ° C and the high sugar dough fermenting power of 115 minutes is 9
When it is 0% or more, a sufficient fermenting power is maintained even after refrigeration, and a voluminous good bread can be obtained by the refrigeration dough method.

【0029】本発明の酵母は、さらに以下の性質: (5)−20℃、1週間冷凍保存後の30℃での復温高
糖生地発酵力が、30℃、115分の高糖生地発酵力の
90%以上である、という性質を有し得る。
The yeast of the present invention further has the following properties: (5) High-sugar dough fermenting ability for 15 minutes at 30 ° C for 15 minutes at re-warming high-sugar dough fermenting ability at -20 ° C and 30 ° C after frozen storage. It may have the property of being 90% or more of the force.

【0030】前記(3)の性質にさらに(5)の性質が
付与されることにより、特に冷凍耐性が高められ、冷凍
生地法においてもボリュームのある良好なパンを得るこ
とができる。
By imparting the property (5) to the property (3), the freezing resistance is particularly enhanced, and a good bread having a large volume can be obtained even in the frozen dough method.

【0031】上記性質を有する酵母の具体例として、以
下の酵母:サッカロミセス・セレビシエR−9152
(FERM P−14675)、サッカロミセス・セレ
ビシエR−9155(FERM P−14676)、サ
ッカロミセス・セレビシエR−9156(FERM P
−14677)、サッカロミセス・セレビシエR−91
60(FERM P−14678)、または、サッカロ
ミセス・セレビシエR−9194(FERM P−14
679)が挙げられる。
Specific examples of the yeast having the above properties include the following yeast: Saccharomyces cerevisiae R-9152.
(FERM P-14675), Saccharomyces cerevisiae R-9155 (FERM P-14676), Saccharomyces cerevisiae R-9156 (FERM P
-14677), Saccharomyces cerevisiae R-91.
60 (FERM P-14678) or Saccharomyces cerevisiae R-9194 (FERM P-14
679).

【0032】本発明の酵母の性質の測定は、以下のよう
にして行い得る。
The properties of the yeast of the present invention can be measured as follows.

【0033】インベルターゼ比活性は、乾燥重量として
1gの菌体が1分間にスクロースより生成するグルコー
スの2倍量(mg)と定義する。
The invertase specific activity is defined as the double amount (mg) of glucose produced from sucrose in 1 minute by dry weight of 1 g of cells.

【0034】具体的には、乾物重量として約50mgの
酵母菌体を5mlの0.1M酢酸バッファー(pH5.
0)に懸濁し、その0.2mlを0.1M酢酸バッファ
ーpH5.0 0.8mlに加え、さらに1mlの15
(W/V)%スクロースバッファー溶液を加えて30
℃、10分間反応させる。1mlの1N NaOHを加えて反
応を停止し、1N HClを1ml加えて中和し、遠心分離
(3000rpm、5分)して菌体を除き、上澄のグルコース
濃度をグルコスタット法(商品名:グルコースB−テス
トワコー:和光純薬製)で測定する。測定する酵母の濃
度はインベルターゼ比活性の高低により適宜希釈し、グ
ルコスタット法による測定において吸光度に直線性のあ
る範囲で測定を行う。
Specifically, about 50 mg of yeast cells as a dry matter weight was added to 5 ml of 0.1 M acetate buffer (pH 5.
0), 0.2 ml thereof was added to 0.8 ml of 0.1 M acetate buffer pH 5.0, and another 1 ml of 15 ml was added.
30% by adding (W / V)% sucrose buffer solution
React at 10 ° C for 10 minutes. The reaction was stopped by adding 1 ml of 1N NaOH, neutralized by adding 1 ml of 1N HCl, centrifuged (3000 rpm, 5 minutes) to remove the cells, and the glucose concentration in the supernatant was determined by the glucostat method (trade name: Glucose B-Test Wako: manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). The concentration of the yeast to be measured is appropriately diluted depending on the level of invertase specific activity, and the measurement is performed within a range in which the absorbance is linear in the measurement by the glucostat method.

【0035】なお、酵母の乾燥重量は酵母菌体を105
℃、5時間乾燥した後の重量と定義する。
The dry weight of yeast is 105 yeast cells.
It is defined as the weight after drying at 5 ° C. for 5 hours.

【0036】各種高糖生地での発酵力は、イースト工業
会で定められた高糖生地発酵力に準じて以下のようにし
て測定した。
The fermentative power of various high-sugar doughs was measured as follows in accordance with the high-sugar dough fermentative power set by the Yeast Industry Association.

【0037】(5℃高糖生地発酵力) 以下の原料配合: 小麦粉 100 g 酵母 3 g 庶糖 30 g 食塩 0.5 g 水 52 ml を有する生地を捏上温度が20±1℃になるようにミキ
シングを行い、生地をシリンダーにいれてあらかじめス
タート時の生地量を測定し、5℃、24時間発酵させた
後の生地量とスタート時の生地量との差を、5℃高糖生
地発酵力とした。 (30℃高糖生地発酵力)上記原料配合により、生地を
捏上温度が30±1℃になるようにミキシングを行い、
生地をシリンダーにいれてあらかじめスタート時の生地
量を測定し、30℃、115分発酵させた後の生地量と
スタート時の生地量との差を30℃高糖生地発酵力とす
る。
(5 ° C. high sugar dough fermenting power) Blending of the following raw materials: flour 100 g yeast 3 g sucrose 30 g salt 0.5 g water 52 ml so that the dough has a kneading temperature of 20 ± 1 ° C. After mixing, put the dough in a cylinder and measure the amount of dough at the start in advance. The difference between the amount of dough after fermentation at 5 ° C for 24 hours and the amount of dough at the start is 5 ° C high sugar dough fermentation ability. And (30 ° C. high sugar dough fermenting power) By mixing the above raw materials, the dough is mixed so that the kneading temperature is 30 ± 1 ° C.,
The dough is put in a cylinder, the amount of dough at the start is measured in advance, and the difference between the amount of dough after fermentation at 30 ° C. for 115 minutes and the amount of dough at the start is defined as 30 ° C. high sugar dough fermenting power.

【0038】(30℃復温高糖生地発酵力)復温発酵力
は、5℃高糖生地発酵力測定と同様に調製した高糖生地
を5℃、24時間発酵させた後、30℃に復温させて測
定する。復温後、30℃、115分の発酵力をもって、
30℃復温高糖生地発酵力とする。
(30 ° C reheat high sugar dough fermenting power) The reheat fermenting power was 30 ° C after fermenting the high sugar dough prepared in the same manner as 5 ° C high sugar dough fermenting power measurement at 5 ° C for 24 hours. Reheat and measure. After rewarming, with fermenting power of 15 minutes at 30 ℃,
30 ℃ reheat and high sugar dough fermenting power.

【0039】(冷凍1週間後の復温高糖生地発酵力)冷
凍後復温発酵力は、30℃高糖生地発酵力測定と同様に
調製した高糖生地を30℃で1時間発酵しガス抜きし、
−20℃で1週間冷凍後30℃に復温させて測定する。
復温後、30℃、115分の発酵力をもって冷凍1週間
後の復温高糖生地発酵力とする。
(Re-warmed high-sugar dough fermenting power after 1 week of freezing) The re-warmed high-sugar dough fermenting power after freezing was obtained by fermenting a high-sugar dough prepared in the same manner as the 30 ° C. high-sugar dough fermenting power measurement at 30 ° C. for 1 hour. Pull out,
After freezing at -20 ° C for 1 week, the temperature is returned to 30 ° C and measurement is performed.
After rewarming, the fermenting power at 115 ° C for 30 minutes is used as the rewarming high sugar dough fermenting power after 1 week of freezing.

【0040】本発明のパン生地は、上記性質を有する酵
母を1種または2種以上含有する。パン生地は、好適に
は、菓子パン生地のような高糖生地、冷蔵生地、冷凍生
地である。本発明のパン生地は、ペストリーあるいは菓
子パン用の生地、例えば、デニッシュ、クロワッサンを
はじめ、食パン、バターロール、中華まんじゅう、イー
ストドーナツ等、膨張剤としてパン酵母を使用するもの
すべてを含む。
The bread dough of the present invention contains one or more yeasts having the above properties. The dough is preferably a high-sugar dough such as a confectionary dough, a refrigerated dough, or a frozen dough. The bread dough of the present invention includes pastry or confectionery bread dough, for example, Danish, croissant, bread, butter rolls, Chinese steamed buns, yeast donuts, and all using bread yeast as a swelling agent.

【0041】本発明は、さらに、上記のパン生地の製造
方法に関するものである。パン生地の成分の配合は、当
業者に公知の各パン生地に応じた配合が適用され得る。
The present invention further relates to a method for producing the above dough. The ingredients of the bread dough may be blended according to the bread dough known to those skilled in the art.

【0042】本発明の酵母を用いることにより、高糖生
地発酵力が上昇し、冷蔵、冷凍後の高糖生地発酵力が高
くなる理由は、インベルターゼ比活性が生地中の砂糖を
分解するには十分であるが、かなり低い酵母をスクリー
ニング、育種した効果が大であると考えられる。また、
低温下で発酵力が抑制される理由については明らかでは
ないが、酵母の発酵は細胞外の糖類(グルコースやフル
クトース、シュクロースなど)を細胞膜に存在する糖の
透過酵素(パーミアーゼ)により酵母の細胞内に輸送
し、輸送された糖類を解糖系の酵素によりエチルアルコ
ールと炭酸ガスとに分類することにより進行するといわ
れており、この細胞膜に存在する糖の透過酵素が該酵母
の場合特に低温下で活性が低下する、細胞質内に存在す
る解糖系の酵素の一部又は全部が該酵母の場合低温下で
活性が低下する、温度により特異的に誘導されるタンパ
ク(ヒートショックプロテイン)によって該酵母の場合
発酵が阻害される、その他、呼吸能が特に低温下で抑制
されることによって発酵が遅れる、などが考えられる。
By using the yeast of the present invention, the high sugar dough fermenting power is increased, and the high sugar dough fermenting power after refrigeration and freezing is increased because the invertase specific activity decomposes sugar in the dough. It is sufficient, but it is considered that the effect of screening and breeding yeast which is considerably low is large. Also,
Although the reason why fermentative power is suppressed at low temperature is not clear, yeast fermentation involves the use of extracellular sugars (glucose, fructose, sucrose, etc.) in the yeast cells by permease of sugars present in the cell membrane. It is said to proceed by classifying the transported saccharides into ethyl alcohol and carbon dioxide gas by a glycolytic enzyme, and in the case where the sugar permease present in this cell membrane is the yeast, especially at low temperature. In the case of the yeast, a part or all of the glycolytic enzymes existing in the cytoplasm decrease in activity at low temperature, and a protein specifically induced by temperature (heat shock protein) In the case of yeast, it is considered that fermentation is inhibited, and that fermentation is delayed by suppressing respiratory ability especially at low temperatures.

【0043】なお、一般的には低温感受性(LOW TEMPERA
TURE SENSITIVE:LTS)という遺伝子がサッカロミセス属
に存在することは公知ではあるが、これは低温下や高温
下での「増殖」が抑制されたり死滅する現象に関するも
のであり、低温下での「発酵」が抑制される現象とは異
なっている。
Generally, low temperature sensitivity (LOW TEMPERATURE
It is known that the gene (TURE SENSITIVE: LTS) exists in the genus Saccharomyces, but this is related to the phenomenon that "growth" at low temperature or high temperature is suppressed or killed, and "fermentation at low temperature""Is different from the phenomenon of being suppressed.

【0044】以下、本願発明の酵母を取得する方法につ
いて述べる。
The method for obtaining the yeast of the present invention will be described below.

【0045】まず、低温感受性酵母の取得法について述
べる。
First, a method for obtaining a cold-sensitive yeast will be described.

【0046】上記酵母は、自然界からのスクリーニン
グ、ニトロソグアニジン、エチルメタンスルホネート、
紫外線照射等の変異処理、交雑や細胞融合などによる育
種操作によって得ることができる。ここでは、変異処理
して、目的とする酵母を取得する方法を開示するが、本
発明の酵母の取得方法がこの方法に限られないことはい
うまでもない。
The above-mentioned yeasts are screened from the natural world, nitrosoguanidine, ethyl methanesulfonate,
It can be obtained by mutation treatment such as ultraviolet irradiation, or breeding operation such as hybridization or cell fusion. Here, a method for obtaining the target yeast by mutation treatment is disclosed, but it goes without saying that the method for obtaining the yeast of the present invention is not limited to this method.

【0047】また、1段階の変異処理だけでは、不十分
な場合は、変異処理を繰り返す方法、胞子を取得して戻
し交雑する方法、細胞融合させる方法などを併用するこ
とも可能である。詳細については、後記する。
When the one-step mutation treatment is insufficient, it is also possible to use a combination of a method of repeating the mutation treatment, a method of obtaining spores and backcrossing, a method of cell fusion, and the like. Details will be described later.

【0048】(A)酵母の変異方法 ここでは、エチルメタンスルフォネート(以下、EMS
と記す)による変異法を説明する。使用する培地は以下
の通りである。
(A) Method for Mutating Yeast Here, ethyl methane sulfonate (hereinafter referred to as EMS) is used.
Will be described). The medium used is as follows.

【0049】 YPD培地 YPD寒天プレート グルコース 20 g グルコース 20 g ポリペプトン 20 g ポリペプトン 20 g 酵母エキス 10 g 酵母エキス 10 g 水 1000 ml 寒天 20 g 水 1000 ml まず、親株のスラントから、1白金耳、YPD培地 5
mlに植菌し、30℃、16時間振盪培養する。培養終
了後、3000rpm、10分で遠心分離して集菌し、0.1M、pH7.
0のリン酸バッファーで1回洗浄する。菌体を同じリン
酸バッファー5mlに懸濁し、EMSを0.15ml添
加し、30℃、2時間、時々攪拌しながら処理し、30
00rpm、10分の遠心分離で集菌し、リン酸バッフ
ァーで洗浄後、20%Na2S2O3を5ml加えて30℃、10分
静置してEMSを分解する。20%Na2S2O3処理を2回行
い、生理食塩水5mlで3回洗浄し、生理食塩水5ml
に懸濁し、上記組成のYPD寒天プレートに適宜希釈し
て菌を塗布する。
YPD Medium YPD Agar Plate Glucose 20 g Glucose 20 g Polypeptone 20 g Polypeptone 20 g Yeast Extract 10 g Yeast Extract 10 g Water 1000 ml Agar 20 g Water 1000 ml First, from the parent slant, 1 platinum loop, YPD medium 5
The cells are inoculated in ml and cultured with shaking at 30 ° C. for 16 hours. After completion of the culture, the cells were collected by centrifugation at 3000 rpm for 10 minutes, 0.1 M, pH 7.
Wash once with 0 phosphate buffer. The cells were suspended in 5 ml of the same phosphate buffer, 0.15 ml of EMS was added, and the mixture was treated at 30 ° C. for 2 hours with occasional stirring.
The cells are collected by centrifugation at 00 rpm for 10 minutes, washed with a phosphate buffer, 5 ml of 20% Na 2 S 2 O 3 is added, and the mixture is allowed to stand at 30 ° C. for 10 minutes to decompose EMS. 20% Na 2 S 2 O 3 treatment was performed twice, washed with 5 ml of physiological saline 3 times, and 5 ml of physiological saline was added.
Then, the cells are suspended in, and appropriately diluted on a YPD agar plate having the above composition, and the bacteria are applied.

【0050】(B)低温感受性酵母のスクリーニング B-1.1次スクリーニング:マイクロプレート法 ブロムクレゾールパープル(BCP)を用い、高pHでは
青紫色、低pHでは黄色になるBCPの性質を利用して発
酵力をスクリーニングする方法である。
(B) Screening for cold-sensitive yeast B-1. Primary screening: Microplate method By using bromcresol purple (BCP), the properties of BCP that becomes bluish purple at high pH and yellow at low pH are used. This is a method of screening the fermentative power.

【0051】YPD寒天プレートで生育した株を、1白
金耳、YPD培地200μlが入ったマイクロプレートに植
菌し、30℃、16時間静置培養する。マイクロプレー
トの各ウエルにBCP含有YPD培地(上記YPD培地
にブロムクレゾールパープル(BCP)30mg加えたもの)200
μlを注入し、このマイクロプレート各2枚に、この培養
ブロスを20μlずつそれぞれ移植し、それぞれ10℃、
および30℃で5時間静置培養する。30℃培養区で生
育が良く菌量が多く、よく発酵するためブロスのpHが
下がり色が黄変し、かつ10℃培養区で生育は良いが発
酵が抑制されるためブロスのpHが下がらず色が黄変し
ていない株を選択する。
The strain grown on the YPD agar plate is inoculated into a microplate containing 1 platinum loop and 200 μl of YPD medium and statically cultured at 30 ° C. for 16 hours. YCP medium containing BCP in each well of the microplate (bromcresol purple (BCP) 30 mg added to the above YPD medium) 200
20 μl of this culture broth was transplanted to each of 2 microplates, 10 ° C,
And incubate at 30 ° C. for 5 hours. In the 30 ° C culture group, the growth is good and the amount of bacteria is large, and the pH of the broth is yellow because the pH of the broth is low because the fermentation is good. Select a strain whose color has not turned yellow.

【0052】B-2.2次スクリーニング:マイセル法:2
次スクリーニングはマイセル発酵の前後の重量差が大き
い株を選択する方法である。使用する培地は以下の通り
である。
B-2. Secondary screening: Meissel method: 2
The subsequent screening is a method of selecting a strain having a large weight difference before and after Mycel fermentation. The medium used is as follows.

【0053】 糖蜜培地 マイセル液 糖蜜(糖として) 30g グルコース 80g 硫安 5g (NH42 HPO4 5g 燐安 3g KH2 PO4 5g 尿素 2g 水 1000ml 水 1000ml 1次スクリーニングで得られた株を糖蜜培地5mlに1
白金耳植菌して、30℃、24時間振盪培養する。この
培養液5mlを糖蜜培地50mlに移植し、さらに30
℃、24時間振盪培養する。培養後、2本のフラスコか
ら、培養液を併せて80mlとり、3000rpm、1
0分遠心分離して集菌し、滅菌水で1回洗浄する。100m
lのマイセル液に懸濁し、それぞれ50mlを、10℃
で15時間、および30℃で5時間培養した。マイセル
発酵の前後の重量差をもってマイセル発酵力とし、30
℃で良く発酵しており、かつ10℃で発酵力が低い株を
選択する。
Molasses medium Meissel liquid Molasses (as sugar) 30 g Glucose 80 g Ammonium sulfate 5 g (NH 4 ) 2 HPO 4 5 g Phosphorus ammonium 3 g KH 2 PO 4 5 g Urea 2 g Water 1000 ml Water 1000 ml The molasses medium was used as a molasses medium. 1 to 5 ml
Platinum loops are inoculated and cultured with shaking at 30 ° C. for 24 hours. Transfer 5 ml of this culture to 50 ml of molasses medium and
Culture with shaking at 24 ° C for 24 hours. After culturing, 80 ml of the culture solution was collected from the two flasks together, 3000 rpm, 1
The cells are collected by centrifugation for 0 minute and washed once with sterile water. 100m
Suspend in 50 ml each of Mycel solution,
C. for 15 hours and at 30.degree. C. for 5 hours. The weight difference before and after Mycel fermentation is defined as the Mycel fermenting power, 30
A strain that is well fermented at 0 ° C and has low fermentative power at 10 ° C is selected.

【0054】なお、本願発明の目的である、低温下で発
酵力が抑制される酵母を取得する観点からは、変異処理
した酵母を、増殖する酵母を死滅させる薬剤を含有する
YPD培地に接種し、低温下で嫌気状態で培養する工程
を加えることが、より効果的である。低温で増殖する菌
体が死滅するので、スクリーニングの効率はさらに向上
するからである。増殖する酵母を死滅させる薬剤として
は、例えば、ナイスタチン、アンホテリシンB、シクロ
ヘキシミドなどが挙げられるが、比較的低濃度で増殖細
胞死滅効果のある薬剤であればいずれでもよい。薬剤の
培地中の濃度は、ナイスタチンの場合10μg/ml〜
50μg/ml、アンホテリシンBの場合、100μg
/ml〜500μg/ml、シクロヘキシミドの場合、
1000μg/ml〜5000μg/mlが適当であ
る。
From the viewpoint of obtaining the yeast of which fermentative power is suppressed at low temperature, which is the object of the present invention, the mutagenized yeast is inoculated into a YPD medium containing a drug that kills the growing yeast. It is more effective to add a step of culturing in an anaerobic state at low temperature. This is because the bacterial cells that proliferate at low temperature are killed and the screening efficiency is further improved. Examples of agents that kill proliferating yeast include nystatin, amphotericin B, cycloheximide, and the like, but any agent can be used as long as it has an effect of killing proliferating cells at a relatively low concentration. The concentration of the drug in the medium is 10 μg / ml for nystatin.
50 μg / ml, 100 μg for amphotericin B
/ Ml to 500 μg / ml, in the case of cycloheximide,
1000 μg / ml to 5000 μg / ml is suitable.

【0055】次に、インベルターゼ比活性の低い株のス
クリーニング、育種について述べる。
Next, screening and breeding of strains having a low invertase specific activity will be described.

【0056】インベルターゼ比活性の低い株の取得方法
としては、一つは低温感受性株取得のための親株を選定
する前により多くの菌株についてインベルターゼ活性を
測定し、所望の範囲の比活性を持つ株を用いて低温感受
性株の変異スクリーニング等を行うことが挙げられる。
また、インベルターゼ比活性の低い胞子株を単離し、上
記方法で得られた低温感受性株の胞子株と交雑株を形成
させ、その胞子株を単離し、所望のインベルターゼ比活
性の範囲内にある酵母を選択する等の方法を挙げること
ができるが、その方法については、スクリーニング、変
異、交雑、細胞融合等いずれの方法を用いてもよく特に
制限はない。
As a method for obtaining a strain having a low invertase specific activity, one is to measure the invertase activity of more strains before selecting a parent strain for obtaining a cold-sensitive strain, and to select a strain having a specific activity within a desired range. Examples of the method include mutation screening of cold-sensitive strains using.
Further, a spore strain having a low invertase specific activity is isolated, a spore strain of a cold-sensitive strain obtained by the above method and a hybrid strain are formed, the spore strain is isolated, and the yeast is in the range of the desired invertase specific activity. There may be mentioned any method such as screening, mutation, crossing, cell fusion and the like without particular limitation.

【0057】以上の方法で得られた酵母について、各種
発酵力、冷蔵耐性、冷凍耐性、製パン性等の評価を行
う。評価に使用する菌体は、以下の方法で調製し得る。
The yeasts obtained by the above method are evaluated for various fermentative powers, cold storage resistance, freezing resistance, bread-making properties and the like. The bacterial cells used for evaluation can be prepared by the following method.

【0058】 培地100mlを500ml容坂口フラスコに分注、殺
菌し、新鮮なスラントから1白金耳移植し、30℃、2
4時間振盪培養する。
[0058] Dispense 100 ml of medium into a 500 ml Sakaguchi flask, sterilize, and transplant 1 platinum loop from fresh slant at 30 ° C, 2
Incubate with shaking for 4 hours.

【0059】第2種母:第1種母と同じ培地1Lを5L
容三角フラスコに分注、殺菌後、第1種母を全量植菌
し、30℃、24時間振盪培養する。
Second seed mother: 5 L of the same medium 1 L as the first seed mother
After dispensing into a conical Erlenmeyer flask and sterilizing, the first seed mother is inoculated in the total amount and shake-cultured at 30 ° C. for 24 hours.

【0060】 種培養: 培地組成:糖蜜(糖として) 300 g 流加方式で添加する 硫安 4 g 燐安 0.7 g 尿素 2.5 g 10L容ミニジャーファーメンターに培地1Lを加えて
殺菌し、第2種母全量を加えて2Lとする。30〜35
℃、pH4〜5(安水でコントロール)、300rpm
で攪拌しつつ、2NL/分通気して、12時間培養す
る。
Seed culture: Medium composition: Molasses (as sugar) 300 g Ammonium sulfate 4 g Phosphorus 0.7 g Urea 2.5 g 10 L volume added as a fed-batch method 1 L of medium was added to a mini jar fermenter to sterilize , And the total amount of the second seed mother to make 2L. 30-35
℃, pH 4-5 (control with ammonium hydroxide), 300 rpm
Aeration is carried out at 2 NL / min while stirring for 12 hours, and the cells are cultured for 12 hours.

【0061】 本培養: 培地組成:糖蜜(糖として) 350 g 流加方式で添加する。Main culture: Medium composition: molasses (as sugar) 350 g Added by fed-batch system.

【0062】 硫安 4 g 燐安 1 g 尿素 2.5 g 10L容ミニジャーファーメンターに培地1.3Lを加
えて殺菌し、種培養液700mlを加えて2Lとする。
30〜35℃、pH4〜5(安水でコントロール)、3
00rpmで攪拌しつつ、2NL/分通気して、10時
間培養する。
Ammonium sulphate 4 g Phosphorus ammonium 1 g Urea 2.5 g 10 L Miniger fermenter was sterilized by adding 1.3 L of medium to 700 L of seed culture to make 2 L.
30-35 ° C., pH 4-5 (control with ammonium hydroxide), 3
Aeration is carried out at 2 NL / min while stirring at 00 rpm, and the cells are cultured for 10 hours.

【0063】上記培養ブロスを分離・水洗・濾過して、
生菌体を得る。
The above culture broth is separated, washed with water, filtered,
Obtain live cells.

【0064】上記に本発明の酵母のスクリーニング、育
種法等について述べたが、低温感受性株の取得過程では
1段階の変異処理だけでは、低温下での発酵力は抑制さ
れても30℃の発酵力も低下傾向にある。また、低イン
ベルターゼ比活性株の取得では、低インベルターゼ比活
性株との交雑株からの胞子株の単離という一回の操作で
は十分に所望の活性の株の取得ができない場合がある。
このような場合には、次に挙げるような方法も実施し得
る。
Although the yeast screening, breeding method and the like of the present invention have been described above, in the process of obtaining a cold-sensitive strain, fermentation at 30 ° C. is possible even if the fermenting ability at low temperature is suppressed by only one-step mutation treatment. Power is also declining. Further, in obtaining a low invertase specific activity strain, it may not be possible to obtain a strain having a desired activity sufficiently by a single operation of isolating a spore strain from a hybrid with the low invertase specific activity strain.
In such a case, the following method can also be implemented.

【0065】即ち、低温感受性株取得の場合には、変異
処理を1回以上繰り返す方法、少なくとも1回の変異処
理で得られた低温下で発酵が抑制される低温感受性変異
株の胞子株と野生の2倍体である酵母の胞子株とを少な
くとも1回戻し交雑させる方法、この低温感受性変異株
と野生の2倍体である酵母とを少なくとも1回戻し細胞
融合させる方法などである。
That is, in the case of obtaining a cold-sensitive strain, a method in which the mutation treatment is repeated one or more times, a spore strain of a cold-sensitive mutant strain and a wild-type obtained by at least one mutation treatment which suppress fermentation under low temperature And a method in which this cold-sensitive mutant strain and a wild diploid yeast are fused back at least once.

【0066】低インベルターゼ比活性株を取得する場合
には、一回の交雑で得られた交雑株の胞子株と低インベ
ルターゼ比活性株との交雑と、その胞子単離を1回以上
行うなどの方法である。
When a low invertase specific activity strain is to be obtained, a cross between a spore strain of the hybrid strain obtained by one cross and a low invertase specific activity strain and isolation of the spores are performed once or more. Is the way.

【0067】なお、戻し交雑とは、変異株と野生株の胞
子株を分離し、互いに異なる性をもった胞子株同志を交
雑させて交雑株をとり、さらに交雑株から胞子株をと
り、野生株の胞子株と交雑を行う操作を1回以上行うこ
とである。これを行うことによって低温感受性(発酵に
関する)の遺伝子と、野生株の優秀な発酵力の遺伝子を
合わせ持つ菌株を取得することができる。
Backcrossing means that spore strains of a mutant strain and a wild strain are separated, spore strains having different sexes are crossed to obtain a crossbred strain, and a spore strain is taken from the crossbred strain to obtain a wild strain. The operation of crossing with the spore strain of the strain is performed once or more. By carrying out this, it is possible to obtain a strain having a gene of low temperature sensitivity (related to fermentation) and a gene of excellent fermentability of a wild strain.

【0068】このように胞子株を取得できれば上述のよ
うな戻し交雑法が可能であるが、もし取得した変異株や
野生株が胞子形成能が極端に低かったり、胞子出芽率が
極端に低いため胞子株の取得が困難な場合は細胞融合法
を用いればよい。常法に従ってマーカーをつけてもよい
し、融合の頻度が高ければマーカーをつけなくとも融合
は可能である。なお、マーカーについては例えば特開昭
63−294778に記載されているリジン要求株と呼
吸欠損株との組み合わせが挙げられる。
If a spore strain can be obtained in this way, the above-mentioned backcrossing method is possible. However, if the obtained mutant strain or wild strain has an extremely low sporulation ability or an extremely low spore germination rate. If it is difficult to obtain a spore strain, the cell fusion method may be used. A marker may be attached according to a conventional method, or fusion can be performed without a marker if the fusion frequency is high. Examples of the marker include a combination of a lysine-requiring strain and a respiratory-deficient strain described in JP-A-63-294778.

【0069】[0069]

【実施例】次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明
するが、本発明は何等実施例により制限されるものでは
ない。
The present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited to the examples.

【0070】(実施例1)商品名カネカレッドイースト
(鐘淵化学工業株式会社製)の菌株をFowellプレート
(酢酸ナトリウム 0.4%、寒天2%、pH6.7)に塗布し、28℃、2
日間培養して胞子を形成させ、得られた胞子株R−6R
を親株として、前記(A)のEMS法による変異を行
い、前記(B)のスクリーニングを行った結果、低温感
受性のサッカロミセス・セレビシエR−6180−1を
得た。
(Example 1) A strain of Kaneka Red Yeast (produced by Kaneka Kagaku Kogyo Co., Ltd.) was applied to a Fowell plate (sodium acetate 0.4%, agar 2%, pH 6.7) at 28 ° C and 2 ° C.
Spore strain R-6R obtained by culturing for a day to form spores
As a parent strain, mutation was carried out by the EMS method of the above (A), and the screening of the above (B) was carried out. As a result, Saccharomyces cerevisiae R-6180-1 having low temperature sensitivity was obtained.

【0071】次に、この株に、商品名カネカレッドイー
ストから分離した多数の胞子株からスクリーニングされ
たインベルターゼ比活性の非常に低い株サッカロミセス
・セレビシエR−13Rを交雑させ、胞子を形成させ、
生命工学工業技術研究所に寄託されている、インベルタ
ーゼ比活性が低く、低温感受性の胞子株サッカロミセス
・セレビシエR−9152(FERM P−1467
5)、サッカロミセス・セレビシエR−9155(FE
RM P−14676)、およびサッカロミセス・セレ
ビシエR−9156(FERM P−14677)を取
得した。
Next, this strain was crossed with a strain of Saccharomyces cerevisiae R-13R having a very low invertase specific activity screened from a large number of spore strains isolated from Kaneka Red Yeast to form spores,
Spore strain Saccharomyces cerevisiae R-9152 (FERM P-1467), which has a low invertase specific activity and is cold-sensitive, has been deposited at the Institute of Biotechnology.
5), Saccharomyces cerevisiae R-9155 (FE
RM P-14676) and Saccharomyces cerevisiae R-9156 (FERM P-14677).

【0072】これらの株のジャー培養を行い、インベル
ターゼ比活性、5℃高糖生地発酵力、30℃高糖生地発
酵力、30℃復温高糖生地発酵力を測定すると共に、下
記に示す方法で通常の加糖中種法菓子パンとストレート
法菓子パンを通常の方法と冷蔵工程を経る方法の2つの
方法で作製し、なたね置換法による比容積、パンの外
観、内相の評価を行い、上記株の評価を行った。
Jar culture of these strains was carried out to measure invertase specific activity, 5 ° C. high sugar dough fermenting power, 30 ° C. high sugar dough fermenting power, 30 ° C. reheat high sugar dough fermenting power, and the method shown below was used. In the above, a conventional sweetened medium seed method sweet bread and a straight method sweet bread were prepared by two methods, an ordinary method and a method of undergoing a refrigeration step, and the specific volume by the rapeseed substitution method, the appearance of the bread, and the internal phase were evaluated. The stock was evaluated.

【0073】なお、冷蔵貯蔵なしの通常のストレート法
の製パンは、下記工程のうち冷蔵貯蔵工程なしとし、そ
れ以外は同様の条件で製パンを行った。
In the usual straight bread making without refrigerating storage, the bread making was performed under the same conditions except that the refrigerating storage step was not included in the following steps.

【0074】加糖中種法菓子パンの配合及び工程:配合
の数字は重量部を表す。
Formulation and Steps of Sweetened Medium Method Sweet Bread: The numbers in the formulation represent parts by weight.

【0075】 中種 本捏 配合: 強力粉 63 27 薄力粉 7 3 砂糖 5 25 食塩 − 1 油脂 − 8 酵母 4 − 脱粉 − 2 卵 − 10 イーストフード 0.1 − 水 40 10 工程条件: 中種ミキシング:低速2分、中速2分 捏上温度 :27℃ 中種発酵 :30℃、2.5時間 本捏ミキシング:低速2分、中速4分、高速2分 フロアタイム :30℃、30分 分割重量 :400g ベンチタイム :30℃、15分 成型 :モルダーで成型 ホイロ :38℃、湿度80%(型上1.5cm
まで膨張した時点で焼成開始) 焼成 :200℃、15分 ストレート法による菓子パンの配合および工程:配合の
数字は重量部を表す。 配合: 強力粉 90 薄力粉 10 砂糖 30 食塩 1 油脂 8 イースト 4 脱粉 2 全卵 10 イーストフード 0.1 水 50 工程条件: ミキシング:低速3分、中速6分、高速2分 捏上温度 :27℃ 発酵時間 :30℃、1.5時間 分割重量 :400g ベンチタイム:30℃、15分 冷蔵貯蔵 :5℃、1,4,7日間 成型 :モルダーで成型 ホイロ :38℃、湿度80%(型上1.5cmまで
膨張した時点で焼成開始) 焼成 :200℃、15分 結果を表1、2、3及び4に示す。
Medium seeds Main kneading blend: Strong flour 63 27 Thin flour 7 3 Sugar 525 Salt -1 Oil / fat 8 Yeast 4-Degrinization-2 Egg-10 Yeast food 0.1-Water 4010 Process conditions: Medium seed mixing: Low speed 2 minutes, medium speed 2 minutes Kneading temperature: 27 ° C Medium seed fermentation: 30 ° C, 2.5 hours Main kneading mixing: Low speed 2 minutes, medium speed 4 minutes, high speed 2 minutes Floor time: 30 ° C, 30 minutes division Weight: 400 g Bench time: 30 ° C, 15 minutes Molding: Molding with moulding Proof: 38 ° C, 80% humidity (1.5 cm on mold)
Baking is started at the time when it is expanded.) Baking: 200 ° C., 15 minutes Blending of sweet bread by the straight method and process: Numbers in blending represent parts by weight. Formulation: Strong flour 90 Light flour 10 Sugar 30 Salt 1 Oil and fat 8 Yeast 4 Desalting 2 Whole egg 10 Yeast food 0.1 Water 50 Process conditions: Mixing: Low speed 3 minutes, Medium speed 6 minutes, High speed 2 minutes Forging temperature: 27 ° C Fermentation time: 30 ° C, 1.5 hours Divided weight: 400g Bench time: 30 ° C, 15 minutes Refrigerated storage: 5 ° C for 1,4,7 days Molding: Molding with molder Roh: 38 ° C, 80% humidity (on mold) Firing starts at the time of expansion to 1.5 cm) Firing: 200 ° C., 15 minutes The results are shown in Tables 1, 2, 3 and 4.

【0076】[0076]

【表1】 [Table 1]

【0077】[0077]

【表2】 [Table 2]

【0078】[0078]

【表3】 [Table 3]

【0079】[0079]

【表4】 [Table 4]

【0080】表に示したように、本発明の酵母は、通常
のイーストに比較して通常の中種法、ストレート法菓子
パンでも良好なパンが得られ、また、冷蔵中の生地の膨
張もなく冷蔵保存にともなう比容積の低下、外観、内相
の劣化が少なく、菓子パン生地においても、冷蔵生地法
において長期に良好なパンが得られることがわかる。
As shown in the table, the yeast of the present invention can obtain good bread even in the ordinary middle seed method and straight method confectionery bread as compared with the ordinary yeast, and the dough does not expand during refrigeration. It can be seen that there is little deterioration in the specific volume, appearance, and internal phase due to refrigerated storage, and even in confectionary bread dough, good bread can be obtained for a long time by the refrigerated dough method.

【0081】(実施例2)実施例1と同様の方法で、イ
ンベルターゼ比活性が低く、低温感受性であり、かつ冷
凍耐性であるサッカロミセス・セレビシエR−9156
(FERM P−14677)、サッカロミセス・セレ
ビシエR−9160(FERM P−14678)、お
よびサッカロミセス・セレビシエR−9194(FER
M P−14679)を取得した。
Example 2 In the same manner as in Example 1, Saccharomyces cerevisiae R-9156 which has a low invertase specific activity, is cold-sensitive, and is freeze-tolerant.
(FERM P-14677), Saccharomyces cerevisiae R-9160 (FERM P-14678), and Saccharomyces cerevisiae R-9194 (FER
MP-14679).

【0082】これらの株を実施例1と同様にジャー培養
を行い、インベルターゼ比活性、5℃高糖生地発酵力、
30℃高糖生地発酵力、30℃復温高糖生地発酵力、−
20℃、1週間冷凍後の復温高糖生地発酵力を測定し、
さらに、以下に示す方法で冷凍生地菓子パンを作製し、
上記株の冷凍耐性を評価した。
Jar culture was performed on these strains in the same manner as in Example 1, and the invertase specific activity, high sugar dough fermenting power at 5 ° C.,
30 ℃ high sugar dough fermenting power, 30 ℃ reheat high sugar dough fermenting power,-
Measure the reheated high sugar dough fermenting power after freezing at 20 ℃ for 1 week,
Furthermore, a frozen dough confectionery bread is prepared by the following method,
The above strains were evaluated for freeze resistance.

【0083】配合:配合の数字は重量部を表す。Formulation: Formulation numbers represent parts by weight.

【0084】 強力粉 90 薄力粉 10 砂糖 30 食塩 1 油脂 8 イースト 4 脱粉 2 全卵 10 イーストフード 0.1 水 50 工程条件: ミキシング:低速3分、中速6分、高速2分 捏上温度 :27℃ 発酵時間 :30℃、1時間 分割重量 :400g ベンチタイム:30℃、15分 成型 :モルダーで成型 冷凍条件 :−20℃、1、2、4週間 解凍 :30℃、1時間 ホイロ :38℃、湿度80%、(型上1.5cmま
で膨張した時点で焼成開始) 焼成 :200℃、15分 なお、冷凍しない場合は、上記工程のうち、冷凍、解凍
工程なしとし、それ以外は同様の条件で製パンを行っ
た。
Strong flour 90 Thin flour 10 Sugar 30 Salt 1 Oil and fat 8 Yeast 4 Desalting 2 Whole egg 10 Yeast food 0.1 Water 50 Process conditions: Mixing: low speed 3 minutes, medium speed 6 minutes, high speed 2 minutes Forging temperature: 27 C. Fermentation time: 30.degree. C., 1 hour Divided weight: 400 g Bench time: 30.degree. C., 15 minutes Molding: Molding with moulder Freezing conditions: -20.degree. C., 1, 2 and 4 weeks Thawing: 30.degree. C., 1 hour Proofer: 38.degree. , Humidity 80%, (Baking starts when it expands to 1.5 cm on the mold) Baking: 200 ° C., 15 minutes When not frozen, the above steps are the same without the freezing and thawing steps. Bread was made under the conditions.

【0085】結果を表5、6および7に示す。The results are shown in Tables 5, 6 and 7.

【0086】[0086]

【表5】 [Table 5]

【0087】[0087]

【表6】 [Table 6]

【0088】[0088]

【表7】 [Table 7]

【0089】表に示したように、本発明の酵母は、通常
のイーストに比較して、冷凍保存にともなう比容積の低
下、外観、内相の劣化が少なく、菓子パン生地において
も、冷凍生地法において長期に良好なパンが得られるこ
とがわかる。
As shown in the table, the yeast of the present invention shows less decrease in specific volume, appearance and internal phase deterioration due to frozen storage than ordinary yeast. It can be seen that good bread can be obtained in the long term.

【0090】[0090]

【発明の効果】本発明の酵母を用いることにより、糖濃
度の高い菓子パン等のリッチなパンにおいて、中種法、
ストレート法、どちらにおいても従来の酵母に比べて良
好なパンが得られる。さらに、この良好な性質を低温感
受性株に導入することにより、冷蔵生地法、リタード法
および冷凍生地法において、発酵が抑制され、生地膨張
が少なく、冷蔵、冷凍後でも発酵力が低下せずに、良好
なパンを得ることができる。特に、糖濃度が高いリッチ
なパン製法においても、従来不可能であった長期安定的
に冷蔵、冷凍生地法において良好なパンが提供される。
INDUSTRIAL APPLICABILITY By using the yeast of the present invention, in a rich bread such as sweet bread having a high sugar concentration, the intermediate seed method,
In both straight methods, better bread can be obtained as compared with conventional yeast. Furthermore, by introducing this good property into the low temperature sensitive strain, in the refrigerated dough method, the retard method and the frozen dough method, fermentation is suppressed, the dough expansion is small, and the fermenting power does not decrease even after refrigeration and freezing. , You can get good bread. In particular, even in a rich bread production method having a high sugar concentration, excellent bread can be provided in the long-term stable refrigeration and frozen dough method, which has been impossible in the past.

Claims (10)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 サッカロミセス属に属し、以下の性質: (1)インベルターゼ比活性が10ユニット以上、15
0ユニット以下、および、 (2)高糖生地での30℃、115分の発酵力が350
ml以上である、を有する酵母。
1. The following properties belonging to the genus Saccharomyces: (1) Invertase specific activity of 10 units or more, 15
0 units or less, and (2) High sugar dough has a fermenting power of 350 at 115 ° C for 115 minutes.
Yeast having a volume of at least ml.
【請求項2】 さらに以下の性質: (3)高糖生地での5℃、24時間の発酵力が10ml
以下、および、 (4)30℃の復温高糖生地発酵力が、30℃、115
分の高糖生地発酵力の90%以上である、を有する請求
項1に記載の酵母。
2. The following properties are further provided: (3) Fermentation power of high sugar dough at 5 ° C. for 24 hours is 10 ml.
The following, and (4) reheat high sugar dough fermenting power of 30 ℃, 30 ℃, 115
The yeast according to claim 1, which has a high sugar dough fermenting power of 90% or more.
【請求項3】 さらに以下の性質: (3)高糖生地での5℃、24時間の発酵力が10ml
以下、 (4)30℃の復温高糖生地発酵力が、30℃、115
分の高糖生地発酵力の90%以上、および、 (5)−20℃、1週間冷凍保存後の30℃での復温高
糖生地発酵力が、30℃、115分の高糖生地発酵力の
90%以上である、を有する請求項1に記載の酵母。
3. The following properties are further provided: (3) Fermentation power of high sugar dough for 10 hours at 5 ° C. for 24 hours
Below, (4) reheat high sugar dough fermenting power of 30 ℃, 30 ℃, 115
90% or more of the high sugar dough fermenting power of 5 minutes, and (5) -20 ℃, re-warmed high sugar dough fermenting power at 30 ℃ after frozen storage for 1 week, 30 ℃, 115 minutes high sugar dough fermentation The yeast according to claim 1, having 90% or more of the force.
【請求項4】 前記酵母が、サッカロミセス・セレビシ
エR−9152(FERM P−14675)、サッカ
ロミセス・セレビシエR−9155(FERM P−1
4676)、サッカロミセス・セレビシエR−9156
(FERM P−14677)、サッカロミセス・セレ
ビシエR−9160(FERM P−14678)、ま
たは、サッカロミセス・セレビシエR−9194(FE
RM P−14679)である、請求項1、2または3
に記載の酵母。
4. The yeast is Saccharomyces cerevisiae R-9152 (FERM P-14675), Saccharomyces cerevisiae R-9155 (FERM P-1).
4676), Saccharomyces cerevisiae R-9156.
(FERM P-14677), Saccharomyces cerevisiae R-9160 (FERM P-14678), or Saccharomyces cerevisiae R-9194 (FE
RM P-14679).
The yeast according to.
【請求項5】 請求項1ないし4いずれかの項に記載の
酵母を少なくとも1種を含有するパン生地。
5. A dough containing at least one yeast according to any one of claims 1 to 4.
【請求項6】 前記パン生地が冷蔵生地である、請求項
5に記載のパン生地。
6. The dough according to claim 5, wherein the dough is a refrigerated dough.
【請求項7】 前記パン生地が冷凍生地である、請求項
5に記載のパン生地。
7. The dough according to claim 5, wherein the dough is a frozen dough.
【請求項8】 請求項1ないし4いずれかの項に記載の
酵母を少なくとも1種含有するパン生地の製造方法。
8. A method for producing a dough containing at least one yeast according to any one of claims 1 to 4.
【請求項9】 前記パン生地が冷蔵生地である、請求項
8に記載のパン生地の製造方法。
9. The method for producing bread dough according to claim 8, wherein the bread dough is a refrigerated dough.
【請求項10】 前記パン生地が冷凍生地である、請求
項8に記載のパン生地の製造方法。
10. The method for producing a dough according to claim 8, wherein the dough is a frozen dough.
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WO2023226507A1 (en) * 2022-05-27 2023-11-30 安琪酵母股份有限公司 High-sugar-permeation-resistant saccharomyces cerevisiae strain and use

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