JPH0717677B2 - Novel cyclosporin derivatives with improved "8-amino acids" - Google Patents
Novel cyclosporin derivatives with improved "8-amino acids"Info
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- JPH0717677B2 JPH0717677B2 JP63315185A JP31518588A JPH0717677B2 JP H0717677 B2 JPH0717677 B2 JP H0717677B2 JP 63315185 A JP63315185 A JP 63315185A JP 31518588 A JP31518588 A JP 31518588A JP H0717677 B2 JPH0717677 B2 JP H0717677B2
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Description
【発明の詳細な説明】 免疫調整異常は“自己免疫”の広範囲な変化及び慢性炎
症疾患の中にみられ、全身性エリテマトーデス、慢性リ
ウマチ関節炎、タイプI糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性
肝硬変、ブドウ膜炎、多発硬化症及びその他限局性回腸
炎、潰瘍性大腸炎、水疱性類天疱瘡、類肉腫症、乾癬、
魚鱗癬、及び重症な眼障害などの様な疾患を含んでい
る。これらの状態のそれぞれについての潜在的な病因論
は、かなり異なってはいるが、一般的にそれらは自己抗
体の変化及び自己反応リンパ球の出現をもたらす。この
自己反応性は、1つには正常免疫系を調整している生体
恒常性制御の欠損にある。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Immune dysregulation is found in a wide range of changes in "autoimmunity" and in chronic inflammatory diseases such as systemic lupus erythematosus, chronic rheumatoid arthritis, type I diabetes, inflammatory bowel disease, biliary cirrhosis, Uveitis, multiple sclerosis and other localized ileitis, ulcerative colitis, bullous pemphigoid, sarcoidosis, psoriasis,
It includes diseases such as ichthyosis and severe eye disorders. The potential etiology for each of these conditions varies considerably, but generally they lead to alterations in autoantibodies and appearance of autoreactive lymphocytes. This autoreactivity lies in part in the lack of homeostatic control that regulates the normal immune system.
同様に、骨髄あるいは臓器移植後、宿主リンパ球は外来
性組織抗原を認識し拒絶現象を引き起こす抗体の産生を
始める。Similarly, after bone marrow or organ transplantation, host lymphocytes recognize foreign tissue antigens and start producing antibodies that cause rejection.
自己免疫あるいは拒絶反応の結果として、炎症細胞及び
それらの遊出する媒介物質による組織の破壊を引きおこ
す。NSAID及びコルチコステロイドなどの様な抗炎症因
子は、これら媒介物質による影響や分泌を阻止する事を
主として行ない、疾患の免疫学的基礎的緩和に対しては
なんの作用をも示さない。As a result of autoimmunity or rejection, it causes tissue destruction by inflammatory cells and their transmigrating mediators. Anti-inflammatory factors such as NSAIDs and corticosteroids primarily block the effects and secretions of these mediators and have no effect on the immunological basal alleviation of the disease.
一方、シクロホスフォアミドの様な細胞障害因子は、正
常及び自己免疫応答の両者をシャットオフさせる非特異
的様式で作用する。さらに、この様な非特異的免疫抑制
剤で治療を受けた患者は、彼らの自己免疫疾患によって
引き起こされた感染症に負けてしまうであろう。On the other hand, cytotoxic factors such as cyclophosphamide act in a non-specific manner, shutting off both normal and autoimmune responses. Moreover, patients treated with such non-specific immunosuppressive drugs will lose the infection caused by their autoimmune disease.
シクロスポリンは、トリポクラジウム インフラタム
(Tolypocladium inflatum)及びシリンドロカルポン
ルチダム(Cylindrocarpon lucidum)を含む色々な真菌
種の発酵培地中より単離された免疫抑制化合物の一員で
ある。Cyclosporine consists of Tolypocladium inflatum and cylindrocarpon.
It is a member of immunosuppressive compounds isolated from the fermentation medium of various fungal species, including rutidam (Cylindrocarpon lucidum).
シクロスポリン類の一般的構造は、11個のアミノ酸を含
んでいる環状ペプチドとして確立されている。The general structure of cyclosporins has been established as a cyclic peptide containing 11 amino acids.
例えば、シクロスポリンAの確立された構造は環状ペプ
チドであり、幾つかのメチル化されたアミノ酸を含み、
8位でこのアミノ酸はシクロスポリンの生物学活性に重
要であると考えられているD−アラニンより成ってい
る。For example, the established structure of cyclosporin A is a cyclic peptide, containing some methylated amino acids,
At position 8 this amino acid consists of D-alanine, which is believed to be important for the biological activity of cyclosporine.
Bmt=(4R)−4−[(E)−2−ブテニル]−4−メ
チル−L−スレオニン Me=メチル Abu=α−アミノブチル酸 Val=バリン Ala=アラニン MeLeu=N−メチル ロイシン MeVal=メチル バリン Sar=ザルコシン 慨してシクロスポリンAの様なシクロスポリンには、細
胞毒性あるいは骨髄毒性はない。また、これは単核球の
遊走を阻止するものでもなければ、果粒球及びマクロフ
ァージの機能も阻害しない。この作用は特異的なもので
あり、主な確立された免疫応答には、なんの悪影響も及
ぼさない。しかしながら、これは腎細胞毒性を持ち、以
下の好ましくない副作用を誘起することが知られてい
る。 Bmt = (4R) -4-[(E) -2-butenyl] -4-methyl-L-threonine Me = methyl Abu = α-aminobutyric acid Val = valine Ala = alanine MeLeu = N-methyl leucine MeVal = methyl Valine Sar = sarcosine Cyclosporine, like cyclosporin A, is not cytotoxic or myelotoxic. It also neither inhibits the migration of mononuclear cells nor does it inhibit the function of granulocytes and macrophages. This effect is specific and has no adverse effect on the main established immune response. However, it has renal cytotoxicity and is known to induce the following unwanted side effects.
(1) 肝機能異常 (2) 多毛症 (3) 歯肉肥大 (4) 振せん (5) 神経毒 (6) 知覚過敏性及び (7) 消化器系不快感。(1) Liver dysfunction (2) Hirsutism (3) Gingival hypertrophy (4) Tremor (5) Neurotoxin (6) Hyperesthesia and (7) Digestive discomfort.
従がって、本発明の目的は(1)抗炎症因子よりも早期
に作用することによって免疫系のヘルプ及びサプレッシ
ョン メカニズムのバランスを修復し、かつまた、
(2)からだの感染症に対する罹病性を増大させる事な
く、サプレッサー細胞サーキットによる特異的長期間に
及ぶ移植トレランスを誘発する、より腎細胞毒性の低
い、新規シクロスポリン誘導体を提供することにある。Therefore, the object of the present invention is to (1) restore the balance between help and suppression mechanisms of the immune system by acting earlier than anti-inflammatory factors, and
(2) It is intended to provide a novel cyclosporin derivative having lower renal cytotoxicity, which induces a specific long-term transplantation tolerance by a suppressor cell circuit without increasing susceptibility to body infection.
本発明の他の目的は、治療を必要としている患者に本発
明の活性免疫抑制剤を投与する為の薬剤的構成物を提供
することにある。Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for administering the active immunosuppressive agent of the present invention to a patient in need of treatment.
本発明の更に他の目的は、新規免疫抑制剤をその様な治
療を必要としている哺乳動物種に対して十分量投与する
事によって、拒絶現象、自己免疫及び慢性炎症疾患を制
御する方法を提供することにある。Still another object of the present invention is to provide a method for controlling rejection phenomenon, autoimmunity and chronic inflammatory disease by administering a sufficient amount of a novel immunosuppressive agent to a mammalian species in need of such treatment. To do.
最後に、本発明の目的は、この活性化合物の生合成及び
単離に関する方法を提供することでもある。Finally, the object of the present invention is also to provide a method for the biosynthesis and isolation of this active compound.
A. 発明の範囲 本発明は8位が3−フルオロ−アラニンであるシクロス
ポリン誘導体に関するものであり 式中Rは3−フルオロ−D−アラニンあるいは2−ジュ
ーテロ−3−フルオロ−D−アラニンである。3−フル
オロ−アラニン誘導体はシクロスポリンAと同様の免疫
抑制特性を示しかつまたその腎細胞毒性はシクロスポリ
ンAより低い。A. Scope of the invention The present invention relates to a cyclosporine derivative in which the 8-position is 3-fluoro-alanine. In the formula, R is 3-fluoro-D-alanine or 2-deutero-3-fluoro-D-alanine. The 3-fluoro-alanine derivative exhibits immunosuppressive properties similar to cyclosporin A and also its renal cytotoxicity is lower than that of cyclosporin A.
B. 生合成方法論 本発明における改良シクロスポリンは以下の発酵方法に
従って調製される。B. Biosynthetic Methodology The improved cyclosporin in the present invention is prepared according to the following fermentation method.
実施例 1. 8−(2−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニン)
−シクロスポリンAの調製 培養:トリポクラジウム インフラタムMF5080,NRRL−8
044 培地:斜面培地A g/ モルトエキス 20.0 イーストエキス 4.0 寒天 20.0 シード培地B モルトエキス 70.0 グルコース 50.0 培養培地C グルコール 40.0 カゼインペプトン 10.0 MgSO4・7H2O 0.5 KH2PO4 2.0 NaNO3 3.0 KCl 0.5 FeSO4・7H2O 0.01 凍結乾燥菌の入ったチューブを無菌的に開け、シード培
地B(3ケ所にバッフルの付いた250ml用のエーレンマ
イヤーフラスコ中に20ml)を用いて4日間、27℃、回転
振とう(220rpm)で発育させる。Example 1. 8- (2-deutero-3-fluoro-D-alanine)
-Preparation of cyclosporin A Culture: Tolypocladium infratum MF5080, NRRL-8
044 Medium: slant medium A g / malt extract 20.0 Yeast extract 4.0 Agar 20.0 Seed Medium B Malt extract 70.0 Glucose 50.0 culture medium C glucose 40.0 Casein peptone 10.0 MgSO 4 · 7H 2 O 0.5 KH 2 PO 4 2.0 NaNO 3 3.0 KCl 0.5 FeSO 4・ 7H 2 O 0.01 Aseptically open the tube containing the freeze-dried bacteria and spin at 27 ° C for 4 days using seed medium B (20 ml in an Erlenmeyer flask for 250 ml with baffles at 3 places). Grow with shaking (220 rpm).
このシード菌を、より詳しい解析の為に斜面寒天(培地
A)に植菌する。斜面培地で14日間、27℃で培養し、そ
の後、使用時まで4℃に保存しておく。This seed bacterium is inoculated on slope agar (medium A) for more detailed analysis. Incubate in slant medium at 27 ° C for 14 days, then store at 4 ° C until use.
胞子を5mlの培地Cで全斜面寒天培地より洗い流して取
り出し、プレ培養フラスコ(50mlの培地Cの入った250m
l用のエーレンマイヤーフラスコ)中で培養する。この
プレ培養は5日間、27℃で行なう。The spores were washed out from the whole slant agar medium with 5 ml of the medium C and taken out to prepare a pre-culture flask (250 ml containing 50 ml of the medium C.
Incubate in an Erlenmeyer flask for l). This preculture is carried out for 5 days at 27 ° C.
プレ培養菌の5mlをプロダクション培地(250ml用のエー
レンマイヤーフラスコに50mlの培地C及び5mg/mlの2−
ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニンを含む)中に
植菌する。過滅菌2−ジューテロ−3−フルオロ−D
−アラニンを、その培養に先立って滅菌した後に加える
(最終濃度、5mg/ml)。全量2.2リッターのプロダクシ
ョン培地からなる44本のフラスコ中で14から21日間、27
℃、攪拌(220rpm)しながら培養する。培養後、発酵培
地より、以下の項目C記載の方法で抽出する。5 ml of the pre-culture was added to the production medium (50 ml medium C in an Erlenmeyer flask for 250 ml and 5 mg / ml of 2-
(Including deutero-3-fluoro-D-alanine). Over-sterilized 2-deutero-3-fluoro-D
-Alanine is added after sterilization prior to its culture (final concentration, 5 mg / ml). 27 flasks in total of 2.2 liters of production medium for 14 to 21 days in 44 flasks, 27
Incubate at ℃, stirring (220 rpm). After culturing, it is extracted from the fermentation medium by the method described in item C below.
実施例 2 8−(3−フルオロ−アラニン)シクロスポリンの調製 プレ培養を、2−ジューテロ−3−フルオロ−アラニン
の代わりに5mg/mlの3−フルオロ−アラニンを含む全量
400mlのプロダクション培地で行なう以外は、実質的に
は実施例1記載と同様の方法で行なった後、以下の項目
C記載の方法で抽出が行なわれる発酵培地が得られる。Example 2 Preparation of 8- (3-Fluoro-alanine) Cyclosporine The pre-culture was supplemented with 5 mg / ml 3-fluoro-alanine instead of 2-deutero-3-fluoro-alanine in a total volume.
A fermentation medium is obtained which is substantially the same as that described in Example 1 except that 400 ml of the production medium is used, and then extraction is performed by the method described in Item C below.
C. 抽出方法論 a.培地から、遠心により細胞を除去する。C. Extraction methodology a. Remove cells from medium by centrifugation.
b.各25mlのメチレンクロライドで3回、清浄化された培
地を抽出する。b. Extract the clarified medium 3 times with 25 ml of methylene chloride each.
c.各25mlのアセトンで3回、細胞を抽出する。c. Extract cells 3 times with 25 ml each of acetone.
d.メチレンクロライド及びアセトン抽出物を集め、減圧
下で乾燥させる。d. Collect methylene chloride and acetone extract and dry under reduced pressure.
e.残留物をメタノールに溶解し、無水Na2SO4で乾燥さ
せ、過後、減圧下で乾燥する。e. Dissolve the residue in methanol, dry over anhydrous Na 2 SO 4 , then dry under reduced pressure.
f.試料をHPLC分析にかけ、シクロスポリンの誘導体を決
定し単離する。f. Subject the sample to HPLC analysis to determine and isolate derivatives of cyclosporine.
D. HPLC分析 実施例1の8−(2−ジューテロ−3−フルオローアラ
ニン)シクロスポリンA 粗抽出物を、次のクロマトグラフ系を用いてHPLC分析を
行なう。D. HPLC analysis The 8- (2-deutero-3-fluoro-alanine) cyclosporin A crude extract of Example 1 is subjected to HPLC analysis using the following chromatographic system.
溶媒 80/20 v:v アセトニトリル:水 流速 0.6ml/分 カラム デュポン ゾルバックス(DuPont Zorbax)ODS
4.6mm×25cm,60℃に維持 検出器 LDSスペクトロメーターIII,210nm,0.05AUFS インテグレーター スペクトラーフィジックス SP4100
コンピューティング インテグレーター シクロスポリンAの保持時間と92%の等価を示す保持時
間を持っている期待されたシクロスポリンAの2−ジュ
ーテロ−3−フルオロ−D−アラニン類似体の濃度は、
濃度既知のシクロスポリンAの外来的標準物より得られ
るシクロスポリンAの領域カウント/mcgで測定領域カウ
ントを割り算する事によって、計算される。Solvent 80/20 v: v Acetonitrile: Water Flow rate 0.6 ml / min Column DuPont Zorbax ODS
4.6mm × 25cm, maintained at 60 ℃ Detector LDS Spectrometer III, 210nm, 0.05AUFS Integrator Spectra Physics SP4100
Computing Integrators The expected concentration of 2-deutero-3-fluoro-D-alanine analog of cyclosporin A with a retention time that is 92% equivalent to that of cyclosporin A is:
It is calculated by dividing the measured area count by the area count of cyclosporin A / mcg obtained from an exogenous standard of cyclosporin A of known concentration.
2.2培地の内から、4本の発酵産生物から得た抽出残
留物を75mlのメタノール中に集め、HPLCクロマトグラフ
ィーによりアッセイする。43.1mgの粗8−(2−デュー
テロ−3−フルオロ−D−アラニン)−シクロスポリン
Aを含むこの試料をAとして標示する。試料Aをわずか
に油状を示す残留物として濃縮する。この残留物を6ml
の1:1 v:vなるメチレンクロライド:メタノール中に溶
解する。あらかじめメタノールで平衡しておいたファル
マシア(Pharmacia)LH−20からなる200mlカラムに、こ
の溶液をのせ、クロマトグラフィーを行なう。クロマト
グラフィーを、流速5ml/分のメタノールによって行ない
1本8mlの分画後、40本、各5mlの分画をする。フラクシ
ョン22から26までを集めBとして標示する。容量は25ml
である。2.2 From the medium, the extraction residue obtained from 4 fermentation products is collected in 75 ml of methanol and assayed by HPLC chromatography. This sample containing 43.1 mg of crude 8- (2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A is labeled as A. Sample A is concentrated as a slightly oily residue. 6 ml of this residue
1: 1 v: v methylene chloride: soluble in methanol. The solution is loaded onto a 200 ml column consisting of Pharmacia LH-20 which has been equilibrated with methanol in advance, and chromatography is carried out. Chromatography is carried out with methanol at a flow rate of 5 ml / min, and after fractionation of 8 ml each, 40 fractions, 5 ml each are fractionated. Collect fractions 22 to 26 and label as B. The capacity is 25 ml
Is.
試料BはHPLC分析により33.7mgの8−(2−ジューテロ
−3−フルオロ−D−アラニン)−シクロスポリン−A
を含むものであった。Sample B was 33.7 mg 8- (2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin-A by HPLC analysis.
Was included.
試料Bを濃縮し乾燥後、この残留物を1mlのメタノール
中で溶解する。この溶液を、80/20 v:vのアセトニトリ
ル:水の溶媒系、流速10ml/分、60℃からなるデュポン
ゾルバックスODSカラム2.1×25cmを用いた調製用HPLC
クロマトグラフィーにかける。溶出の動向を、0.05mm光
路長セル、0.32AUFS設定した、ギルソン(Gilson)モデ
ル116U.V.検出装置を用いた、波長210nmにおいて追跡す
る。U.V.シグナルはスペクトラーフィジクスSP4100コン
ピューティング インテグレーターでモニターされ、こ
の紫外線トレースに基づいて15の分画を得た。フラクシ
ョン9をCとして標示し、フラクション10は濃縮し乾燥
した。残留物をDとして標示した。After concentrating and drying sample B, the residue is dissolved in 1 ml of methanol. This solution was applied to a preparative HPLC using a DuPont Zorbax ODS column 2.1 x 25 cm consisting of 80/20 v: v acetonitrile: water solvent system, flow rate 10 ml / min, 60 ° C.
Chromatograph. The elution trend is followed at a wavelength of 210 nm using a Gilson model 116 U.V. detector set up with a 0.05 mm pathlength cell, 0.32 AUFS. The UV signal was monitored with a Spectra Physics SP4100 Computing Integrator and 15 fractions were obtained based on this UV trace. Fraction 9 was designated as C and fraction 10 was concentrated and dried. The residue was labeled as D.
試料Dを0.5mlのメタノール中で溶解する。この溶液
を、80/20 v:vのアセトニトリル:水の溶媒系、流速10m
l/分、60℃からなるデュポン ゾルバックスODSカラム
2.1×25cmを用いた調製用HPLCクロマトグラフィーにか
ける。溶出の動向を1mm光路長セル、0.32AUFS設定し
た、LDCスペクトロモニターII装置を用いた波長226nmに
おいて追跡する。U.V.シグナルはスペクトラー フィジ
クスSP4100コンピューティング インテグレーターでモ
ニターされ、この紫外線トレースに基づいて10の分画を
得た。フラクション4及び5を取り出し、試料Cと混ぜ
て、容量35mlとした。これをEとして標示した。この試
料はHPLC分析により、226nmにおける紫外線純度で99%
以上を示す。20.1mgの8−(2−ジューテロ−3−フル
オロ−D−アラニン)−シクロスポリンAを含むもので
あった。試料Eを高減圧下で濃縮乾燥を行ない、20.2mg
の8−(2−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニ
ン)−シクロスポリンAを獲得した。Dissolve sample D in 0.5 ml of methanol. This solution is mixed with a solvent system of 80/20 v: v acetonitrile: water at a flow rate of 10 m.
DuPont Zorbax ODS column consisting of l / min, 60 ℃
Subject to preparative HPLC chromatography using 2.1 x 25 cm. The elution trend is followed at a wavelength of 226 nm using an LDC Spectromonitor II instrument with a 1 mm pathlength cell, 0.32 AUFS. The UV signal was monitored with a Spectra Physics SP4100 Computing Integrator and 10 fractions were obtained based on this UV trace. Fractions 4 and 5 were removed and mixed with sample C to a volume of 35 ml. This was labeled as E. This sample was 99% UV pure at 226 nm by HPLC analysis.
The above is shown. It contained 20.1 mg of 8- (2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A. Sample E was concentrated and dried under high vacuum to give 20.2mg
8- (2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A was obtained.
実施例2の8−(3−フルオロ−D−アラニン)−シク
ロスポリンA 1本400mlの発酵産生物より抽出された残留物を1mlのメ
チレン クロライド中に溶解し、この溶液を、あらかじ
めメタノールで平衡しておいたファルマシアLH−20から
なる40mlカラムにのせ、クロマトグラフィーを行なう。
クロマトグラフィーを、流速2ml/分のメタノールによっ
て行ない、1本10mlの分画後、30本、各1mlの分画をす
る。フラクション16から27をHPLC分析の結果に基づいて
取り出し、一つにまとめ合わせる。この混合分画物を濃
縮乾燥した。この残留物をFとして標示した。One 8- (3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A of Example 2 The residue extracted from 400 ml of fermentation product was dissolved in 1 ml of methylene chloride and this solution was pre-equilibrated with methanol. Place on a 40 ml column made of Pharmacia LH-20 and chromatograph.
Chromatography is carried out with a flow rate of 2 ml / min of methanol, and after fractionation of 10 ml each, 30 fractions of 1 ml each are fractionated. Fractions 16 to 27 are removed based on the results of the HPLC analysis and combined. The mixed fraction was concentrated and dried. This residue was labeled as F.
試料Fを、250mlのメタノール中に溶解し、デュポン
ゾルバックスODSカラム0.94×25cm、60℃で維持される
調製用HPLCクロマトグラフィーにかける。クロマトグラ
フィーは、流速2ml/分、80:20v:vのアセトニトリル:水
の溶媒系を用いて行なう。溶出の動向を1mm光路長セ
ル、1.28AUFS設定した、LDSスペクトルモニターII装置
を用いた波長220nmにおいて追跡する。紫外線シグナル
はスペクトラーフィジクスSP4100コピューティング イ
ンテグレーターでモニターされ、この紫外線トレースに
基づいて11の分画を得た。フラクション7はHPLC分析に
より、210nmにおける紫外線純度で99%以上を示す、3.2
5mgの8−(3−フルオロ−D−アラニン)−シクロス
ポリンAを含むものであった。フラクション7を高域圧
下で濃縮乾燥を行ない、3.3mgの8−(3−フルオロ−
D−アラニン)−シクロスポリンAを獲得した。Sample F was dissolved in 250 ml of methanol and added to DuPont.
Zorbax ODS column 0.94 x 25 cm, preparative HPLC chromatography maintained at 60 ° C. Chromatography is performed using a 80:20 v: v acetonitrile: water solvent system at a flow rate of 2 ml / min. The elution trend is followed at a wavelength of 220 nm using an LDS spectrum monitor II device with a 1 mm path length cell and 1.28 AUFS setting. The UV signal was monitored by a Spectra Physics SP4100 Coupling Integrator and 11 fractions were obtained based on this UV trace. Fraction 7 by HPLC analysis shows a UV purity at 210 nm of> 99%, 3.2
It contained 5 mg of 8- (3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A. Fraction 7 was concentrated and dried under high pressure to give 3.3 mg of 8- (3-fluoro-
D-alanine) -cyclosporin A was acquired.
E.8−(2−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニ
ン)−シクロスポリンAの物理的特性 質量スペクトル:数値(1202)より19マスユニット多い
(M+M)+、m/2 1221がシクロスポリンAに対して検
出され、これは、シクロスポリンAのアラニン残基が2
−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニンにより置換
されている事と一致するものである。1 H NMRスペクトル:1H NMRデーターは8位における2−
ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニンの取り込みを
確定するものである。13 C NMRスペクトル:スペクトルは恒室温中で、CDCl3使
用100MHzのバリアン(Varian)XL−400スペクトルメー
ターにより記録される。対照として77.0ppmの溶媒ピー
クを用いて、0ppmにおけるTMSに対する相関として化学
シフトを示した。10.0,16.1,17.0,18.1,18.5,18.8,20.
0,20.5,21.2,21.8,22.0,23.6(2×),23.9(2×),2
4.0,24.2,24.5,24.9,25.0,25.6,29.3,29.88,29.94,29.9
6,31.2,31.4,35.8,36.0,36.2,37.5,39.2,39.6,40.6,48.
75(2×),48.83,50.4,55.3,55.45,55.49,57.6,57.9,5
9.0,74.8,81.9d,(J=177.2Hz)*,126.2,129.5,169.
8,169.9(2×),170.9d*,170.1,171.1,171.53,171.5
6,173.4,173.59,173.61ppm。* 3−フルオロ−2−ジューテロ−D−アラニン残基の
これら共鳴は、19F核種とカップリングするために重複
して測定される。61個の炭素に対する13C NMRデーター
は、重水素原子を保有している3−フルオロ−2−ジュ
ーテロ−D−アラニン残基のα−炭素は観察されないと
いう仮定のもとに、分子構造式C62H109DN11O12Fと一致
するものである。Physical properties of E.8- (2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A Mass spectrum: 19 mass units more than the numerical value (1202) (M + M) + , m / 2 1221 is for cyclosporin A It was found that the alanine residue of cyclosporin A is 2
-Deutero-3-fluoro-D-alanine. 1 H NMR spectrum: 1 H NMR data is 2-
Determining uptake of deutero-3-fluoro-D-alanine. 13 C NMR Spectra: Spectra are recorded on a Varian XL-400 spectrometer at 100 MHz using CDCl 3 at constant room temperature. The solvent peak at 77.0 ppm was used as a control and the chemical shift was shown as a correlation to TMS at 0 ppm. 10.0,16.1,17.0,18.1,18.5,18.8,20.
0,20.5,21.2,21.8,22.0,23.6 (2x), 23.9 (2x), 2
4.0,24.2,24.5,24.9,25.0,25.6,29.3,29.88,29.94,29.9
6,31.2,31.4,35.8,36.0,36.2,37.5,39.2,39.6,40.6,48.
75 (2 x), 48.83,50.4,55.3,55.45,55.49,57.6,57.9,5
9.0,74.8,81.9d, (J = 177.2Hz) * , 126.2,129.5,169.
8,169.9 (2x), 170.9d * , 170.1,171.1,171.53,171.5
6,173.4,173.59,173.61ppm. * These resonances of the 3-Fluoro-2-deutero-D-alanine residue are measured in duplicate due to coupling with the 19 F nuclide. The 13 C NMR data for 61 carbons show that the molecular structure C was based on the assumption that the α-carbon of the 3-fluoro-2-deutero-D-alanine residue carrying the deuterium atom was not observed. It is the same as 62 H 109 DN 11 O 12 F.
F.発明の範囲に基づく本化合物の有用性 本発明は移植後の拒絶現象、自己免疫あるいは慢性炎症
疾患にかかっている患者に対して、活性成分として構造
式(I)なる化合物の投与を含む治療についての方法に
も同様に関するものである。F. Utility of the present compounds based on the scope of the present invention The present invention includes administration of a compound represented by the structural formula (I) as an active ingredient to patients suffering from rejection phenomenon after transplantation, autoimmune disease or chronic inflammatory disease. The same applies to methods of treatment.
これらの状態及び疾患の治療に対して、構造式(I)な
る化合物は、一般的な非毒性薬学的に許容されるキャリ
アー、アジュバンド及び賦形剤を含む適用量ユニットな
る調剤を、経口、局所、非経口、吸入噴霧、あるいは経
直腸的に投与するものである。本明細書中で使用されて
いる非経口なる用語は、皮下注射、静脈、筋内、腹板内
(itrasternal)注射あるいは点滴による方法を含む。
温血動物、例えば馬、畜牛、羊、犬、猫などに対する治
療に加えて、本発明の化合物は人体に対する治療におい
ても効果的である。For the treatment of these conditions and diseases, the compound of structural formula (I) is orally administered in a dosage unit formulation which comprises a conventional non-toxic pharmaceutically acceptable carrier, adjuvant and excipient. It is administered topically, parenterally, by inhalation spray, or rectally. The term parenteral as used herein includes subcutaneous injections, intravenous, intramuscular, intrasternal injections or infusion methods.
In addition to treatment of warm-blooded animals such as horses, cattle, sheep, dogs, cats, etc., the compounds of the present invention are effective in treating the human body.
活性成分を含む薬剤組成物は、経口投与に際して適切な
形態をとる。例えば錠剤、トローチ、飴、水性あるいは
油性懸濁液、分散しやすい粉末あるいは顆粒、乳剤、ハ
ードあるいはソフトカプセル、あるいはシロップまたは
エリキシルなどである。経口使用の為の組成物は、薬剤
組成物製造に対する公知の技術に従い、かつ薬剤的洗練
され、口にあった調剤にする為に、これら組成物は甘味
剤、香味剤、着色剤及び防腐剤などのグループより幾つ
か選んで、それを含む組成物として調整されるものであ
る。非毒性薬学的に許容される賦形剤との混合剤中に活
性成分を含む錠剤も同様に公知の方法で製造されるもの
である。使用しうる賦形剤とは、例えば(1)炭酸カル
シウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウ
ムあるいはリン酸ナトリウムなどの様な不活性希釈剤、
(2)コーンスターチ、あるいはアルギン酸などの様な
顆粒形成剤及び崩壊剤、(3)スターチ、ゲラチンある
いはアラビアゴムなどの様な結合剤、及び(4)ステア
リン酸マグネシウム、ステアリン酸あるいは滑石などの
様な潤滑形成剤である。錠剤にはコート操作は不要であ
るが、消化器系での錠剤の崩壊、及び吸収作用を遅ら
せ、それによって、長期に及ぶ作用の持続をもたらすコ
ート操作を公知の技術によって行なってもよい。例え
ば、モノステアリン酸グリセリルあるいはジステアリン
酸グリセリルなどが時間遅延物質として使用される。ま
たこれら錠剤を、この解離を制御する為に浸透性治療用
錠剤として形成する、U.S.特許4,256,108;4,106,452;及
び4,265,874に記載の技術によってコートしてもよい。Pharmaceutical compositions containing the active ingredient are in suitable form for oral administration. For example, tablets, troches, candy, aqueous or oily suspensions, easily dispersible powders or granules, emulsions, hard or soft capsules, syrups or elixirs, etc. Compositions for oral use are in accordance with known techniques for the manufacture of pharmaceutical compositions and in order to provide pharmaceutically refined and palatable preparations, these compositions have sweetening, flavoring, coloring and preservative agents. The composition is prepared by selecting some from the group such as. Tablets containing the active ingredient in admixture with non-toxic pharmaceutically acceptable excipients are likewise prepared by known methods. Excipients that can be used include, for example, (1) an inert diluent such as calcium carbonate, sodium carbonate, lactose, calcium phosphate or sodium phosphate;
(2) Granule-forming and disintegrating agents such as corn starch or alginic acid, (3) Binders such as starch, gelatin and gum arabic, and (4) magnesium stearate, stearic acid or talc. It is a lubricant forming agent. Although tablets do not require a coating operation, the coating operation may be carried out by known techniques to delay the disintegration of the tablet in the digestive system and the absorption effect, thereby providing a long-lasting effect. For example, glyceryl monostearate or glyceryl distearate is used as the time delay substance. The tablets may also be coated by the techniques described in US Pat. Nos. 4,256,108; 4,106,452; and 4,265,874 which are formed as osmotic therapeutic tablets to control this dissociation.
場合によっては、経口使用の為の調剤は、活性成分が不
活性固形希釈剤と伴に混合されている、ハードゲラチン
カプセルとしての形態をとることもある。例えば、炭酸
カルシウム、リン酸カルシウムあるいはカオリンなどの
不活性固形希釈剤である。また、同様に、活性成分が水
または油状メディウム、例えばピーナッツ油、液状パラ
フィン、あるいはオリーブ油などと伴に混合されている
ソフトゲラチンカプセルとしての形態をとることもあ
る。In some cases, formulations for oral use may take the form of hard gelatin capsules, in which the active ingredient is mixed with an inert solid diluent. For example, an inert solid diluent such as calcium carbonate, calcium phosphate or kaolin. It may also take the form of a soft gelatin capsule in which the active ingredient is likewise mixed with water or an oily medium such as peanut oil, liquid paraffin, or olive oil.
水性懸濁液は普通、水性懸濁液の製造に適切な賦形剤と
の混合において活性物質を含むものである。その様な賦
形剤を以下に示す。Aqueous suspensions generally contain the active material in admixture with excipients suitable for the manufacture of aqueous suspensions. Such excipients are shown below.
(1)懸濁形成性、例えばナトリウムカルボキシメチル
セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメ
チルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピ
ロリドン、トラガカントガム、及びアラビアゴム。(1) Suspension-forming properties such as sodium carboxymethylcellulose, methylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, sodium alginate, polyvinylpyrrolidone, tragacanth gum, and gum arabic.
(2)分散あるいは湿潤剤、 (a)自然に存在している燐脂質、例えばレシチン、 (b)脂肪酸とのアルキレンオキサイド縮合反応産物、
例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、 (c)長鎖脂肪族アルコールとのエチレンオキサイド縮
合反応産物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノ
ール、 (d)脂肪酸及びヘキシトール油来の部分的エステルと
のエチレンオキサイド縮合反応産物、例えばポリオキシ
エチレンソルビトールモノオリエート、あるいは (e)脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分的エス
テルとのエチレンオキサイド縮合反応産物、例えばポリ
オキシエチレンソルビタンモノオリエート。(2) Dispersing or wetting agent, (a) naturally occurring phospholipid such as lecithin, (b) alkylene oxide condensation reaction product with fatty acid,
For example, polyoxyethylene stearate, (c) an ethylene oxide condensation reaction product with a long-chain aliphatic alcohol, for example, heptadecaethyleneoxycetanol, (d) an ethylene oxide condensation reaction product with a partial ester derived from fatty acid and hexitol oil. , E.g. polyoxyethylene sorbitol monooleate, or (e) ethylene oxide condensation reaction products with partial esters derived from fatty acids and hexitol anhydrides, e.g. polyoxyethylene sorbitan monooleate.
水性懸濁液は同様に幾つかの防腐剤をも含み得る。例え
ば、エチルあるいはn−プロピルp−ヒドロキシベンゾ
エート、幾つかの着色剤、幾つかの香味剤、及び幾つか
の甘味剤、例えばシュクロースあるいはサッカリンなど
である。The aqueous suspension may also contain some preservatives. For example, ethyl or n-propyl p-hydroxybenzoate, some colorants, some flavors, and some sweeteners such as sucrose or saccharin.
油性懸濁液は活性成分を植物油の中に懸濁することによ
って形成させるものである。例えば、アラキス油、オリ
ーブ油、ゴマ油、あるいはココナッツ油、あるいは液状
パラフィンなどの鉱油である。また油性懸濁液は、例え
ばビーズワックス、ハードパラフィンあるいはセチルア
ルコールの様な濃化剤をも含む。甘味剤及び香味剤など
も含まれ、口にあった経口調剤となる。これら組成物は
アスコルビン酸の様な酸化防止剤の添加により保存され
る。Oily suspensions are formed by suspending the active ingredient in a vegetable oil. For example, arachis oil, olive oil, sesame oil, coconut oil, or mineral oil such as liquid paraffin. The oily suspensions also contain a thickening agent, for example beeswax, hard paraffin or cetyl alcohol. A sweetener and a flavoring agent are also included, and it becomes an oral preparation suitable for the mouth. These compositions are preserved by the addition of an antioxidant such as ascorbic acid.
分散しやすい粉末あるいは顆粒は、水性懸濁液の調製に
適している。それらは、活性成分を分散あるいは湿潤
剤、懸濁形成剤及び幾つかの防腐剤との混合剤として提
供するものである。適切な分散あるいは湿潤剤、及び懸
濁形成剤はすでに上記において例示されている。添加剤
としての賦形剤、例えば、甘味剤、香味剤及び着色剤な
ども、上記に示されている。Powders or granules which are easy to disperse are suitable for the preparation of aqueous suspensions. They provide the active ingredient as a mixture with dispersing or wetting agents, suspension-forming agents and some preservatives. Suitable dispersing or wetting agents and suspending agents are exemplified by those already mentioned above. Excipients as additives, such as sweetening agents, flavoring agents and coloring agents, are also indicated above.
本発明の薬剤組成物は水中油型乳剤としての形態もとり
うる。油相は、オリーブ油あるいはアラキス油などの植
物油、あるいは液状パラフィンの様な鉱油、または、そ
れらの混合により形成されている。適切な乳化形成剤と
は(1)アラビアゴム及びトラガカントゴムの様に自然
に存在しているゴム、(2)大豆及びレシチンなどの様
に自然に存在している燐脂質、(3)ソルビタンモノオ
レエートの様な脂肪酸及びヘキシトール無水物由来のエ
ステルあるいは部分的エステル、(4)ポリオキシエチ
レンソルビタンモノオレエートの様なエチレンオキサイ
ドとの当該部分エステルの縮合反応産物、などである。
また、乳剤にも同様に甘味剤及び香味剤が含まれてい
る。The pharmaceutical composition of the present invention may also be in the form of an oil-in-water emulsion. The oily phase is formed by a vegetable oil such as olive oil or arachis oil, a mineral oil such as liquid paraffin, or a mixture thereof. Suitable emulsifying agents include (1) naturally occurring gums such as gum arabic and tragacanth, (2) naturally occurring phospholipids such as soybean and lecithin, and (3) sorbitan monoole. An ester or a partial ester derived from a fatty acid and hexitol anhydride such as an ate, (4) a condensation reaction product of the partial ester with ethylene oxide such as polyoxyethylene sorbitan monooleate, and the like.
The emulsion also contains a sweetening agent and a flavoring agent.
シロップ及びエリキシルも、グリセロール、プロピレン
グリコール、ソルビトールあるいはシュクロースなどの
甘味剤と、伴に形成される。その様な調剤にも同様に粘
滑剤、防腐剤及び香味及び着色剤などが含まれる。Syrups and elixirs are also formed with sweetening agents such as glycerol, propylene glycol, sorbitol or sucrose. Such formulations also include demulcents, preservatives and flavoring and coloring agents and the like.
薬剤組成物は無菌的注射可能な水性あるいは油性懸濁液
としての形態をとることもある。この懸濁液は上記記載
の適切な分散あるいは湿潤剤及び懸濁形成剤を用いて、
公知の技術によって形成されるものである。無菌的注射
可能な調剤とは、1,3−ブタンジオール溶液の様な毒性
のない非経口使用に許容されている希釈液あるいは溶媒
中に存在している無菌的注射可能な溶液あるいは懸濁液
のことである。使用されうる適切なる賦形剤及び溶媒と
して水、リンゲル溶液及び等張塩化ナトリウム溶液など
がある。更に、無菌的固定油も、溶媒あるいは懸濁形成
メディウムとして、一般に使用されている。この目的の
為に、刺激の少ない固定油例えば合成モノ−あるいはジ
グリセライド、などが用いられている。また、更にオレ
イン膜の様な脂肪酸の使用も、注射可能調剤中にみられ
る。The pharmaceutical composition may take the form of a sterile injectable aqueous or oleaginous suspension. This suspension may be formulated with the appropriate dispersing or wetting agents and suspending agents described above,
It is formed by a known technique. Aseptic injectable preparation means a sterile injectable solution or suspension in a diluent or solvent that is allowed for non-toxic parenteral use such as 1,3-butanediol solution. That is. Suitable excipients and solvents that can be used include water, Ringer's solution and isotonic sodium chloride solution. In addition, sterile fixed oils are also commonly used as solvents or suspension forming media. For this purpose, mild fixed oils such as synthetic mono- or diglycerides have been used. Also, the use of fatty acids, such as olein films, is also found in injectable formulations.
(I)の化合物は、薬の経直腸使用に際して坐薬として
の形態で投与される時もある。これらの組成物は、適切
な非刺激性の賦形剤と、本薬剤を混合することによって
調製され、この賦形剤は通常の温度においては固形であ
るが、直腸内温度に際しては液状となるもので、それに
より直腸内で融解して薬を遊離するものである。その様
な材料としては、ココアバター及びポリエチレングリコ
ールがある。The compounds of (I) are sometimes administered in the form of suppositories for rectal use of the drug. These compositions are prepared by mixing the agent with a suitable non-irritating excipient which is solid at normal temperatures but liquid at rectal temperatures. It causes melting in the rectum and release of the drug. Such materials include cocoa butter and polyethylene glycol.
局所的使用に際しては、本免疫調整剤を含んだ、クリー
ム、軟膏、ゼリー、溶液あるいは懸濁液、等が用いられ
る。一回投与量として調製される、担体材料との混合に
おける活性成分の容量は、治療を受ける側と、及び個々
の投与形態に非常に左右されるものである。例えば、人
体経口投与用の調剤は、総組成物量に対して約5から約
95%の間で変動しうる適切かつ一般的な量の担体材料と
の混合における、治療上十分である活性成分の容量を含
むものである。For topical use, cream, ointment, jelly, solution or suspension containing the immunomodulator is used. The volume of active ingredient in admixture with a carrier material, prepared as a single dose, is very dependent on the side to be treated and on the particular mode of administration. For example, a preparation for oral administration to humans may have a dosage of about 5 to about
It contains a therapeutically sufficient volume of the active ingredient in admixture with suitable and conventional amounts of carrier material which may be varied between 95%.
特定患者に対する特異的投与量レベルは、使用しうる特
異的化合物の活性、患者の年齢、体重、健康状態、性、
食事内容、投与時間、投与経路、体外排出速度、他の薬
との併用、治療中の特定疾患の度合い、などの種々の因
子に依存している。Specific dose levels for a particular patient will include the activity of the specific compounds available, the patient's age, weight, physical condition, sex,
It depends on various factors such as the content of the meal, the administration time, the administration route, the rate of excretion from the body, the combination with other drugs, and the degree of a specific disease during treatment.
G.本発明の範囲における、本化合物の有用性を支持する
生物学的証拠 構造式(I)なる化合物は免疫抑制活性を持ち、それに
より種々の“自己免疫”及び慢性炎疾患者の治療におい
て有効である事が知られている。また、それら化合物
は、移植手術を受けた時の移植片拒絶あるいは、“ドナ
ー”臓器に対する拒絶反応の阻止という面においても有
効である。以下の表は、本発明の化合物の有用性を説明
し、かつ支持するものである。G. Biological evidence supporting the utility of the present compounds within the scope of the present invention The compound of structural formula (I) has immunosuppressive activity and is thus useful in the treatment of various "autoimmune" and chronic inflammation patients. It is known to be effective. The compounds are also effective in terms of graft rejection when undergoing transplant surgery or in blocking rejection of "donor" organs. The following table illustrates and supports the utility of the compounds of this invention.
インビトロでのこの腎細胞毒性アッセイにおいて、8−
(2−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニン)−シ
クロスポリンAは、実験結果を解析しうる比較的限定さ
れた投与量範囲にわたって、シクロスポリンAよりも、
その毒性が少なかった。In this renal cytotoxicity assay in vitro, 8-
(2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A is more potent than cyclosporin A over a relatively limited dose range in which experimental results can be analyzed.
Its toxicity was low.
インビトロ腎細胞毒性アッセイ 標的組織としてラビット由来の新鮮調達した近位曲細管
を利用し、毒性のパラメータとする3H−ロイシンの取り
込み量の変化を測定するインビトロ腎細胞毒性アッセイ
を用いて、試料2−ジューテロ−3−フルオロ−D−ア
ラニンを評価した。このアッセイの目的はシクロスポリ
ンAに対する試験試料の毒性を測定することにある。セ
ファロスポリン抗生物質を用いて、以前に行なったアッ
セイの確認により、このアッセイが細胞レベルにおけ
る、相関、本来の毒性潜在能力に対して正確な予測が出
来る事を示している。加えるべき唯一の仮定条件は、薬
物速度/薬剤の分布パラメーターは実質上、異なっては
いないという事である。本方法論の有用性は、更にツニ
カマイシン類似体のインビボ及びインビトロにおけるデ
ーターの比較により立証されており、対照化合物に対す
る。インビボの腎細胞毒性の予測を少なくとも90%の正
確さで示すのが、このインビトロアッセイである。In Vitro Renal Cytotoxicity Assay Sample 2 was prepared using an in vitro renal cytotoxicity assay that utilizes changes in uptake of 3 H-leucine as a toxicity parameter, using freshly procured proximal convoluted tubules from rabbits as target tissues. -Deutero-3-fluoro-D-alanine was evaluated. The purpose of this assay is to determine the toxicity of test samples to cyclosporin A. Confirmation of previous assays using cephalosporin antibiotics indicates that this assay can accurately predict correlation, intrinsic toxicity potential at the cellular level. The only assumption to be added is that the pharmacokinetic / drug distribution parameters are not substantially different. The utility of this methodology has been further demonstrated by comparison of in vivo and in vitro data for tunicamycin analogs versus control compounds. It is this in vitro assay that provides a prediction of in vivo renal cytotoxicity with at least 90% accuracy.
細管懸濁液と適切な濃度を持った試験化合物を混合し合
計で23時間反応させ、最後の3時間において、パスルを
与える3H−ロイシンを加える。ロイシンの取り込み量を
1μgタンパクに対する数値として測定し、各試験ポイ
ントにおける比活性を、コントロール比活性に対するパ
ーセントとしてグラフ化する。本実験において、溶液中
に遊離されてくる最高可能容量(23時間の反応中に溶解
し、平衡化されうる化合物を与える)の薬剤レベルの量
を決定した。以下の表に見られる様に、化合物8−(2
−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニン)シクロス
ポリンAは、投与量30μg/mlにおいて、シクロスポリン
Aよりも低い毒性を示した。Capillary suspension and test compound of appropriate concentration are mixed and allowed to react for a total of 23 hours, and in the last 3 hours, 3 H-leucine, which gives a pulse, is added. Leucine uptake was measured as a numerical value for 1 μg protein and the specific activity at each test point is graphed as a percentage of the control specific activity. In this experiment, the amount of drug level of the highest possible volume released in solution (which gives a compound that can be dissolved and equilibrated during the 23 hour reaction) was determined. As shown in the table below, compound 8- (2
-Deutero-3-fluoro-D-alanine) cyclosporin A showed lower toxicity than cyclosporin A at a dose of 30 μg / ml.
限定された、試験範囲でのデーター及び薬物速度因子は
等価であるという仮定により、動物中において、8−
(2−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニン)−シ
クロスポリンAは、シクロスポリンAよりも腎細胞毒性
が低いと期待されるものである。 Due to the limited data in the study range and the assumption that the pharmacokinetic factors are equivalent, 8-
(2-deutero-3-fluoro-D-alanine) -cyclosporin A is expected to have lower renal cytotoxicity than cyclosporin A.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI 技術表示箇所 A61K 38/00 ABL ACJ ACS ADA ADP C12P 21/04 9282−4B //(C12P 21/04 C12R 1:645) C07K 99:00 A61K 37/02 ADP ACJ ACS ADA ABL (72)発明者 ロバート テー.ジヨージルマン アメリカ合衆国,07036 ニユージヤーシ イ,リンデン,アカデミー テラス 437─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 6 Identification code Internal reference number FI Technical display location A61K 38/00 ABL ACJ ACS ADA ADP C12P 21/04 9282-4B // (C12P 21/04 C12R 1 : 645) C07K 99:00 A61K 37/02 ADP ACJ ACS ADA ABL (72) Inventor Robert Ta. The Yogilman USA, 07036 New Jersey, Linden, Academy Terrace 437
Claims (5)
ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニン)1. A compound having the following structural formula: (In the formula, R is 3-fluoro-D-alanine or 2-
Deutero-3-fluoro-D-alanine)
アラニンである請求項1記載の化合物。2. R is 2-deutero-3-fluoro-D-
The compound according to claim 1, which is alanine.
なる化合物を治療上効果的な量で含んでいる、免疫調整
異常あるいは疾患を予防、制御あるいは治療するための
医薬組成物。 (式中Rは3−フルオロ−D−アラニン、あるいは2−
ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニン)3. A pharmaceutical carrier and the following structural formula (I):
A pharmaceutical composition for preventing, controlling or treating an immune dysregulation or disease, which comprises a therapeutically effective amount of the compound. (In the formula, R is 3-fluoro-D-alanine or 2-
Deutero-3-fluoro-D-alanine)
アラニンである請求項3記載の組成物。4. R is 2-deutero-3-fluoro-D-
The composition of claim 3 which is alanine.
フラタムMF5080を3−フルオロ−D−アラニン、あるい
は2−ジューテロ−3−フルオロ−D−アラニンと伴に
インキュベーションし、 (b)ステップ(a)で得られる発酵培地中より生産物
を抽出及び単離する事より成る請求項1記載の構造式
(I)の化合物の調製方法。5. (a) Incubating trypocladium infratum MF5080 with 3-fluoro-D-alanine or 2-deutero-3-fluoro-D-alanine in a culture medium, and (b) step ( The method for preparing the compound of structural formula (I) according to claim 1, which comprises extracting and isolating the product from the fermentation medium obtained in a).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63315185A JPH0717677B2 (en) | 1988-12-15 | 1988-12-15 | Novel cyclosporin derivatives with improved "8-amino acids" |
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63315185A JPH0717677B2 (en) | 1988-12-15 | 1988-12-15 | Novel cyclosporin derivatives with improved "8-amino acids" |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
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JPH02184699A JPH02184699A (en) | 1990-07-19 |
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---|---|---|---|---|
JPH037237A (en) * | 1989-03-14 | 1991-01-14 | Sandoz Ag | Novel use and therpeutic means for administering cyclospoline |
-
1988
- 1988-12-15 JP JP63315185A patent/JPH0717677B2/en not_active Expired - Lifetime
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JPH02184699A (en) | 1990-07-19 |
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