JPH0678782A - Production of lysosphingolipid and new genus rhodococcus microorganism used therefor - Google Patents
Production of lysosphingolipid and new genus rhodococcus microorganism used thereforInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、中性スフィンゴ糖脂質
のリゾ体を生物学的に製造する方法に関するものであ
る。更に詳細には、本発明は、ロドコッカス属に属する
放線菌を用いて、酵素的に、中性スフィンゴ糖脂質から
脱アシル化し、リゾスフィンゴ糖脂質を製造する方法、
及び該方法に用いる新規ロドコッカス属微生物に関する
ものである。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for biologically producing a lyso form of a neutral glycosphingolipid. More specifically, the present invention uses an actinomycete belonging to the genus Rhodococcus to enzymatically deacylate a neutral glycosphingolipid to produce a lysosphingolipid.
And a novel Rhodococcus microorganism used in the method.
【０００２】[0002]
【従来の技術】一般に、リゾスフィンゴ糖脂質の製造法
は、ヒドラジン分解法やアルコール系溶媒中でのアルカ
リ加水分解法が適応される。これらの方法では、アミノ
糖を有するスフィンゴ糖脂質、例えばグロボシドからリ
ゾ体のグロボシドの製造を行うとき、脂質部分とアミノ
糖の両方に作用を受け、デ−Ｎ−アセチルリゾグロボシ
ドが第一に製造されるので、次いで脂質部分を保護した
後、再アセチル化、脱保護を行う必要があり、多くの手
間と熟練を要する。2. Description of the Related Art Generally, as a method for producing a lysosphingolipid, a hydrazine decomposition method or an alkaline hydrolysis method in an alcohol solvent is applied. In these methods, when a glycosphingolipid having an amino sugar, for example, a lyso-form globoside is produced from globoside, both lipid moiety and amino sugar are affected, and de-N-acetyllysogloboside is first Since it is produced, it is necessary to re-acetylate and deprotect after protecting the lipid portion, which requires a lot of labor and skill.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】本発明は、リゾスフィ
ンゴ糖脂質を生物学的な方法により製造する方法を提供
することを目的とする。本発明者らは、リゾスフィンゴ
糖脂質を生物学的な方法で製造する方法を開発するため
に、リゾスフィンゴ糖脂質生成酵素を産生する細菌を鋭
意探索したところ、全く新規で、新種と認められる放線
菌を単離することに成功し、該放線菌を利用することに
よって、本発明を完成するに至った。The object of the present invention is to provide a method for producing a lysosphingolipid by a biological method. In order to develop a method for producing lysosphingolipid glycolipids by a biological method, the present inventors diligently searched for a bacterium that produces a lysosphingolipid glycolipase, and found to be a completely new and novel species. The present invention was completed by succeeding in isolating actinomycetes and utilizing the actinomycetes.
【０００４】[0004]
【課題を解決するための手段】本発明のリゾスフィンゴ
糖脂質の製造法は、ロドコッカス属に属し、中性スフィ
ンゴ糖脂質をリゾ化する酵素を生産する能力を有する微
生物の菌体又は菌体処理物で、中性スフィンゴ糖脂質を
処理することを特徴とするものである。従来、リゾスフ
ィンゴ糖脂質を生成できる微生物は、ノカルディア属放
線菌に属する一菌株 (Nocardia sp. 285株) のみである
が、この菌は酸性スフィンゴ糖脂質に作用し、中性スフ
ィンゴ糖脂質には作用しない。Means for Solving the Problems The method for producing a lysosphingolipid according to the present invention is a bacterial or bacterial cell treatment of a microorganism belonging to the genus Rhodococcus and capable of producing an enzyme for lysing a neutral glycosphingolipid. It is characterized by treating a neutral glycosphingolipid with a product. Conventionally, the only microorganism that can produce lysosphingolipids is a single strain belonging to the genus Actinomyces Nocardia (Nocardia sp. 285 strain), but this bacterium acts on acidic glycosphingolipids and becomes a neutral glycosphingolipid. Does not work.
【０００５】本発明に用いる微生物としては、ロドコッ
カス属に属し、中性スフィンゴ糖脂質をリゾ化する酵素
を生産する能力を有する微生物であれば、特に制限はな
く、例えば、ロドコッカス(Rhodococcus) sp. stain GL
-26が挙げられる。本菌株は、本発明者らにより、北海
道の道北地方の土壌中から分離されたものであり、工業
技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第１３１２１
号として寄託されている。The microorganism used in the present invention is not particularly limited as long as it is a microorganism belonging to the genus Rhodococcus and capable of producing an enzyme for lysing a neutral glycosphingolipid, for example, Rhodococcus sp. stain GL
-26 is mentioned. The present strain was isolated by the present inventors from the soil in Hokkaido's Hokkaido prefecture, and was submitted to the Institute of Microbial Science and Technology, Institute of Industrial Science and Technology.
Has been deposited as an issue.
【０００６】ロドコッカス(Rhodococcus) sp. stain GL
-26の菌学的性質は次の通りである。 ａ. 桿菌であり、生育時間によって菌体の大きさを変化
させる。その大きさは、0.5×３〜７μm から 0.5×１
μm である。 ｂ. グラム陽性であり、胞子を作成しない。 ｃ. 運動性なし。鞭毛なし。 ｄ. 抗酸性を示す。 ｅ. 偏性好気性である。 ｆ. Ｏ−Ｆテストは陰性である。 ｇ. ペプチドグリカン層にメソ−ジアミノピメリン酸を
有する。[0006] Rhodococcus sp. Stain GL
The mycological properties of -26 are as follows. a. It is a bacillus, and the size of the bacterium changes depending on the growth time. The size is 0.5 × 3 ～ 7μm to 0.5 × 1
μm. b. Gram positive, no spore formation. c. No mobility. No flagella. d. Shows anti-acidity. e. It is obligately aerobic. f. OF test is negative. g. having meso-diaminopimelic acid in the peptidoglycan layer.
【０００７】本菌株の属する分類学的位置をバージェイ
ズ・マニュアル・オブ・システマチック・バクテリオロ
ジー(Bergey's Manual of Systematic Bacteriology)に
より求めると、ロドコッカス属に属することは明らかで
ある。ロドコッカス属に属する放線菌ではリゾスフィン
ゴ糖脂質を生成する能力は知られていない。ロドコッカ
スsp. stain GL-26は、リゾスフィンゴ糖脂質を生成で
きる点で全く相違し、ロドコッカス属に属する新株であ
ると認められるものである。[0007] When the taxonomic position to which this strain belongs is determined by Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, it is clear that it belongs to the genus Rhodococcus. Actinomycetes belonging to the genus Rhodococcus have not been known to have the ability to produce lysosphingolipids. Rhodococcus sp. Stain GL-26 is totally different in that it can produce lysosphingolipids, and is recognized as a new strain belonging to the genus Rhodococcus.
【０００８】本発明の対象となる中性スフィンゴ糖脂質
としては、例えばグロボシド、フォルスマン抗原が挙げ
られる。本発明の製造法は、中性スフィンゴ糖脂質を水
又は緩衝液等の水性媒体に分散又は懸濁させ、前述した
ロドコッカス属に属し、中性スフィンゴ糖脂質をリゾ化
する酵素を生産する能力を有する微生物の菌体又は菌体
処理物で処理することにより行うことができる。Examples of the neutral glycosphingolipid to which the present invention is applied include globoside and Forssmann antigen. The production method of the present invention disperses or suspends a neutral glycosphingolipid in an aqueous medium such as water or a buffer, belongs to the genus Rhodococcus described above, and has the ability to produce an enzyme that lysates a neutral glycosphingolipid. It can be carried out by treating with a microbial cell of the microorganism or a treated product of the microbial cell.
【０００９】本発明に用いる菌体処理物としては、例え
ば、菌体の破砕物、粗・精製酵素、固定化菌体・酵素が
挙げられる。中性スフィンゴ糖脂質を水又は緩衝液等の
水性媒体に分散又は懸濁させるためには、タウロデオキ
シコール酸等の界面活性剤を用いることが好ましい。反
応液中の中性スフィンゴ糖脂質の濃度は、通常0.05〜1m
g/mL、好ましくは0.1〜0.5mg/mLであり、菌体又は菌体
処理物の使用量は、0.001〜0.1g/mL、好ましくは0.005
〜0.05g/mLであり、反応温度は、通常25〜40℃、好まし
くは30〜37℃、反応ｐＨは、通常５〜７、好ましくは5.
5〜6.5、反応時間は、通常16〜72時間、好ましくは24〜
48時間である。The treated cells used in the present invention include, for example, crushed cells, crude / purified enzyme, immobilized cells / enzyme. In order to disperse or suspend the neutral glycosphingolipid in water or an aqueous medium such as a buffer, it is preferable to use a surfactant such as taurodeoxycholic acid. The concentration of neutral glycosphingolipid in the reaction solution is usually 0.05 to 1 m.
g / mL, preferably 0.1 to 0.5 mg / mL, the amount of the bacterial cells or the treated product of bacterial cells is 0.001 to 0.1 g / mL, preferably 0.005
The reaction temperature is usually 25 to 40 ° C, preferably 30 to 37 ° C, and the reaction pH is usually 5 to 7, preferably 5.
5 to 6.5, the reaction time is usually 16 to 72 hours, preferably 24 to
48 hours.
【００１０】ロドコッカスsp. stain GL-26の菌体又は
菌体処理物に含まれる、中性スフィンゴ糖脂質をリゾ化
する酵素は、以下に示す理化学的性質を有する新規な酵
素である。 (1) 作用及び基質特異性：下記の式に示すように、グロ
ボシドのセラミド部分を構成するスフィンゴシン塩基と
脂肪酸の間の酸アミド結合を切断し、リゾグロボシドを
生成する。The enzyme for lysating the neutral glycosphingolipid, which is contained in the microbial cells or the treated product of Rhodococcus sp. Stain GL-26, is a novel enzyme having the following physicochemical properties. (1) Action and substrate specificity: As shown in the formula below, cleaves the acid amide bond between the sphingosine base and the fatty acid that compose the ceramide portion of globoside to produce lysogloboside.
【００１１】[0011]
【化１】 [Chemical 1]
【００１２】(2) 至適ｐＨ：５〜７、好ましくは 5.5〜
6.5 長い糖鎖を有する糖脂質に作用しリゾ体の糖脂質を生成
する酵素は、放射性同位元素を用いたレベルで A431 細
胞にわずかにその存在が示唆された［J. Biol.Chem., 2
63, 10915-10921(1988)］ほか、ノカルディア属に属す
る微生物に見いだされている［J. Biochem.(Tokyo), 10
3, 1-4(1988)］。しかし、これらの酵素はいずれも酸性
糖脂質であるガングリオシドに作用する酵素でグロボシ
ドには作用しない。(2) Optimum pH: 5 to 7, preferably 5.5 to
6.5 It was suggested that the enzyme that acts on glycolipids having long sugar chains to produce lysoform glycolipids was slightly present in A431 cells at the level using radioisotopes [J. Biol. Chem., 2
63 , 10915-10921 (1988)] and other microorganisms belonging to the genus Nocardia [J. Biochem. (Tokyo), 10
3 , 1-4 (1988)]. However, all of these enzymes act on ganglioside, which is an acidic glycolipid, and do not act on globoside.
【００１３】本発明の製造法により得られたリゾスフィ
ンゴ糖脂質は、例えば、以下のようにして分離・精製す
ることができる。反応液、又は反応液にクロロホルム−
メタノール（２：１）混液４容を添加し、二相に分配し
た上層をセップ−パック(Sep-Pak) Ｃ18カートリッジ
(ウォータース社製) に添加し脂質画分を吸着させた
後、蒸留水で脱塩する。脂質画分は、メタノール（100
％）、続いてクロロホルム−メタノール−水 (60：30：
4.5)の混合溶媒で溶出させる。更に、逆相高速液体クロ
マトグラフィー（ＨＰＬＣ）等を用いてリゾグロボシド
を精製する。The lysosphingolipid obtained by the production method of the present invention can be separated and purified as follows, for example. The reaction solution, or chloroform in the reaction solution
4 volumes of a mixture of methanol (2: 1) was added, and the upper layer was divided into two phases and the upper layer was Sep-Pak C 18 cartridge.
(Manufactured by Waters) to adsorb the lipid fraction, and then desalted with distilled water. The lipid fraction is methanol (100
%), Followed by chloroform-methanol-water (60:30:
Elute with the mixed solvent of 4.5). Further, lysogloboside is purified by using reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) or the like.
【００１４】以上のようにして得られたリゾスフィンゴ
糖脂質は、アミノ基に再びカルボキシル基を有する化合
物を導入することにより有効に利用することができる。
利用例を下記の式に示す。The lysosphingolipid thus obtained can be effectively used by introducing a compound having a carboxyl group into the amino group again.
A usage example is shown in the following formula.
【００１５】[0015]
【化２】 [Chemical 2]
【００１６】上記式中、（Ａ）はリゾグロボシド、
（Ｂ）は放射性同位元素で標識された脂肪酸、（Ｃ）は
蛍光を有する脂肪酸、（Ｄ）はビオチン、（Ｅ）は樹脂
(Resin)に結合している脂肪酸を表す。例えば、脂肪酸
を導入することにより、天然では混合物であるものを単
一にそろえたり、長さを変えたりもできる。また、蛍光
を有する脂肪酸やビオチン等の標識化合物を導入するこ
とにより、細胞表面の糖鎖認識蛋白質の存在を調べた
り、糖転移酵素等の糖受容体として利用した簡便な活性
測定法の開発も期待される。更に、リゾスフィンゴ糖脂
質を用い、糖脂質を樹脂等に固定することもできる。こ
れにより、１）糖脂質と細胞表層の相互作用、２）抗糖
脂質抗体の精製、３）糖脂質に特異的なグルコシダー
ゼ、糖転移酵素の精製の可能性、４）抗原としての利用
研究が著しく進展されることが期待できる［Methods En
zymol., 50, 137-140(1978)］。In the above formula, (A) is lysogloboside,
(B) is a fatty acid labeled with a radioisotope, (C) is a fluorescent fatty acid, (D) is biotin, and (E) is a resin.
Represents a fatty acid bound to (Resin). For example, by introducing a fatty acid, it is possible to prepare a single mixture which is a mixture in nature or to change the length. In addition, by introducing a labeling compound such as fatty acid or biotin that has fluorescence, the presence of a sugar chain recognizing protein on the cell surface can be examined, and a simple method for measuring the activity using a sugar receptor such as a glycosyltransferase can be developed. Be expected. Furthermore, glycolipids can be immobilized on a resin or the like using lysosphingolipids. As a result, 1) interaction between glycolipid and cell surface, 2) purification of anti-glycolipid antibody, 3) possibility of purification of glucosidase and glycosyltransferase specific to glycolipid, and 4) use research as antigen Expected to make significant progress [Methods En
zymol., 50 , 137-140 (1978)].
【００１７】[0017]
【実施例】以下、調製例及び実施例により本発明を更に
具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定され
るものではないことはいうまでもない。 （調製例１） グロボシドの調製 ブタ血液を0.85％塩化ナトリウム水溶液で３回洗浄し
た。得られたブタ赤血球を0.1％酢酸水溶液中で破裂さ
せた後、0.1％酢酸水溶液で洗浄し、凍結乾燥した。得
られたブタ赤血球膜を熱エタノールで抽出し、溶媒を留
去して粗抽出物を得た。粗抽出物をクロロホルム−メタ
ノール−水（８：４：３）の混合溶媒で二相に分配して
得られた下層（Folch Lower Layer ）を蒸発させ、イア
トロビーズ(Iatrobeads)（6RS 8060、ヤトロン製、カラ
ムサイズ１cm×100cm)にかけ、ヘキサン−イソプロパノ
ール−水（Ａ＝40：55：５、Ｂ＝10：60：30）でＡ 100
％からＡ 50 ％、Ｂ 50 ％まで60分で直線濃度勾配的に
変化させ、その後、同じ比率で60分溶出させた。薄層ク
ロマトグラフィー（メルク社製）で溶出パターンをモニ
ターし、グロボシド画分を集めた。グロボシドが精製さ
れるまで同様のクロマトグラフィーを繰り返し、精製グ
ロボシドを得た。EXAMPLES The present invention will be described in more detail with reference to Preparation Examples and Examples, but it goes without saying that the scope of the present invention is not limited thereto. (Preparation Example 1) Preparation of globoside Pig blood was washed with 0.85% sodium chloride aqueous solution three times. The obtained porcine red blood cells were ruptured in a 0.1% acetic acid aqueous solution, washed with a 0.1% acetic acid aqueous solution, and lyophilized. The obtained porcine red blood cell membrane was extracted with hot ethanol and the solvent was distilled off to obtain a crude extract. The crude extract was partitioned into two phases with a mixed solvent of chloroform-methanol-water (8: 4: 3) and the lower layer (Folch Lower Layer) obtained was evaporated, and Iatrobeads (6RS 8060, manufactured by Jatron, Column size 1 cm x 100 cm) and hexane-isopropanol-water (A = 40: 55: 5, B = 10: 60: 30) A 100
From 50% to A 50% and B 50%, a linear concentration gradient was applied in 60 minutes, and then the same ratio was used for 60 minutes for elution. The elution pattern was monitored by thin-layer chromatography (manufactured by Merck), and the globoside fraction was collected. The same chromatography was repeated until globoside was purified to obtain purified globoside.
【００１８】（調製例２） 菌の集積及び単離 菌の集積及び単離は、以下に示すウシ脳抽出物をタウロ
デオキシコール酸で懸濁させた培地を用いて行った。 菌の単離培地の組成 ウシ脳抽出物(TypeVIII)（シグマ社製） 0.2 ％ タウロデオキシコール酸（シグマ社製） 0.01％ リン酸二水素カリウム 0.68 g/L 硝酸アンモニウム 0.40 g/L 塩化ナトリウム 0.29 g/L （寒 天 1.5 ％） ｐＨ 7.0-7.4 （実施例１） リゾグロボシドの製造 精製グロボシド５mgをタウロデオキシコール酸10mgを含
む50mM MES（２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン
酸）緩衝液(pH6.5) 20mL中に懸濁させた。これに、ロド
コッカス sp. stain GL-26の菌体懸濁液（10％懸濁液）
又は膜画分懸濁液（10mg蛋白／mL）２mLを添加し、30℃
で48時間攪拌した。途中、薄層クロマトグラフィー（メ
ルク社製）で基質の消費を確認した。反応液、又は反応
液にクロロホルム−メタノール（２：１）混液88mLを添
加し、二相に分配した上層をセップ−パック(Sep-Pak)
Ｃ18カートリッジ (ウォータース社製) に添加し脂質画
分を吸着させた後、蒸留水で脱塩し、少量のメタノール
と充分量のクロロホルム−メタノール−水 (60：30：4.
5)混合溶媒で生成物を溶出させた。Preparation Example 2 Accumulation and Isolation of Bacteria Accumulation and isolation of bacteria were carried out using a medium prepared by suspending the following bovine brain extract with taurodeoxycholic acid. Composition of bacterial isolation medium Bovine brain extract (Type VIII) (manufactured by Sigma) 0.2% Taurodeoxycholic acid (manufactured by Sigma) 0.01% Potassium dihydrogen phosphate 0.68 g / L Ammonium nitrate 0.40 g / L Sodium chloride 0.29 g / L (agar 1.5%) pH 7.0-7.4 (Example 1) Production of lysogloboside 50 mM MES (2- (N-morpholino) ethanesulfonic acid) buffer solution (pH 6. containing 5 mg of purified globoside and 10 mg of taurodeoxycholic acid). 5) Suspended in 20 mL. In addition to this, a bacterial cell suspension of Rhodococcus sp. Stain GL-26 (10% suspension)
Alternatively, add 2 mL of the membrane fraction suspension (10 mg protein / mL), and 30 ℃
It was stirred for 48 hours. On the way, the consumption of the substrate was confirmed by thin layer chromatography (Merck). 88 mL of chloroform-methanol (2: 1) mixed solution was added to the reaction solution or the reaction solution, and the upper layer distributed in two phases was separated by Sep-Pak.
The mixture was added to a C 18 cartridge (manufactured by Waters) to adsorb the lipid fraction, desalted with distilled water, and a small amount of methanol and a sufficient amount of chloroform-methanol-water (60: 30: 4.
5) The product was eluted with the mixed solvent.
【００１９】反応生成物を同定するため、反応液をセッ
プ−パック(Sep-Pak) Ｃ18カートリッジ (ウォータース
社製) に添加し脂質画分を吸着させた後、蒸留水で脱塩
した。脂質画分は、クロロホルム−メタノール−水 (6
0：30：4.5)の混合溶媒で溶出させた。得られた脂質画
分を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（メルク社製）
にて分析したところ、ニンヒドリン陽性の糖脂質が生成
していた。In order to identify the reaction product, the reaction solution was added to a Sep-Pak C 18 cartridge (manufactured by Waters) to adsorb the lipid fraction and then desalted with distilled water. The lipid fraction was chloroform-methanol-water (6
It was eluted with a mixed solvent of 0: 30: 4.5). The obtained lipid fraction was subjected to thin layer chromatography (TLC) (Merck).
As a result, it was found that ninhydrin-positive glycolipid was produced.
【００２０】更に、得られた糖脂質をSTR ODSHカラム
（島津製作所製、4.6×250mm)を用いて高速液体クロマ
トグラフィーにかけ、メタノール−水（60：40）の混合
溶媒で非吸着画分を溶出後、メタノール(100％) からク
ロロホルム−メタノール−水 (60：30：4.5)の直線的濃
度勾配で溶出させた。溶出パターンを薄層クロマトグラ
フィー（メルク社製）でモニターし、リゾグロボシド画
分を得た。Further, the obtained glycolipid was subjected to high performance liquid chromatography using a STR ODS H column (Shimadzu Corporation, 4.6 × 250 mm), and a non-adsorbed fraction was obtained with a mixed solvent of methanol-water (60:40). After elution, it was eluted with a linear concentration gradient of methanol (100%) to chloroform-methanol-water (60: 30: 4.5). The elution pattern was monitored by thin layer chromatography (Merck) to obtain a lysogloboside fraction.
【００２１】このリゾグロボシド画分について、グリコ
シダーゼによる逐次分解法、500MHz 1Ｈ−ＮＭＲ、高速
原子衝撃質量分析法（ＦＡＢ−ＭＳ）による機器分析法
によって構造解析を行った。これらの結果、反応生成物
はリゾグロボシドと同定された。リゾグロボシドの 1Ｈ
−ＮＭＲスペクトル及びＦＡＢ−ＭＳスペクトルを、そ
れぞれ、図１及び図２に示す。About this lysogloboside fraction, glyco
Sequase decomposition method, 500MHz 1H-NMR, high speed
Instrumental analysis by atomic bombardment mass spectrometry (FAB-MS)
Structural analysis was performed by. As a result of these, reaction products
Was identified as lysogloboside. Lysogloboside1H
-NMR spectrum and FAB-MS spectrum
They are shown in FIGS. 1 and 2, respectively.
【００２２】[0022]
【発明の効果】本発明によれば、リゾスフィンゴ糖脂質
を生物学的な方法により製造することができる。INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, lysosphingolipids can be produced by a biological method.
【図１】本発明の製造法により得られたリゾグロボシド
の 1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。FIG. 1 is a diagram showing a 1 H-NMR spectrum of lysogloboside obtained by the production method of the present invention.
【図２】本発明の製造法により得られたリゾグロボシド
のＦＡＢ−ＭＳスペクトルを示す図である。FIG. 2 is a diagram showing a FAB-MS spectrum of lysogloboside obtained by the production method of the present invention.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:01） ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 5 Identification code Office reference number FI technical display location C12R 1:01)
Claims (3)
糖脂質をリゾ化する酵素を生産する能力を有する微生物
の菌体又は菌体処理物で、中性スフィンゴ糖脂質を処理
することを特徴とするリゾスフィンゴ糖脂質の製造法。1. A method for treating a neutral glycosphingolipid with a microbial cell or a treated product of a microorganism belonging to the genus Rhodococcus and having the ability to produce an enzyme for lysing a neutral glycosphingolipid. Method for producing lysosphingolipids.
糖脂質をリゾ化する酵素を生産する能力を有する微生物
がロドコッカス(Rhodococcus) sp. stain GL-26である
請求項１記載の製造法。2. The method according to claim 1, wherein the microorganism belonging to the genus Rhodococcus and having an ability to produce an enzyme for lysating a neutral glycosphingolipid is Rhodococcus sp. Stain GL-26.
を生産する能力を有するロドコッカス(Rhodococcus) s
p. stain GL-26。3. Rhodococcus s capable of producing an enzyme for lysating neutral glycosphingolipids.
p. stain GL-26.
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|---|---|---|---|
| JP23731292A JP3035602B2 (en) | 1992-09-04 | 1992-09-04 | Process for producing lysosphingolipids and novel Rhodococcus microorganisms used in the process |
Applications Claiming Priority (1)
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| JP (1) | JP3035602B2 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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1992
- 1992-09-04 JP JP23731292A patent/JP3035602B2/en not_active Expired - Lifetime
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| CN1090236C (en) * | 1994-07-21 | 2002-09-04 | 宝酒造株式会社 | Glyocolipid ceramide deacylase |
| US6821761B2 (en) | 1994-07-21 | 2004-11-23 | Takara Bio, Inc. | Sphingolipid ceramide N-deacylase, methods for producing sphingolipids and sphingolipid derivatives, and sphingolipid ceramide N-deacylase gene |
| US7364787B2 (en) | 1994-07-21 | 2008-04-29 | Takara Bio, Inc. | Sphingolipid ceramide N-deacylase, methods for producing sphingolipids and sphingolipid derivatives, and sphingolipid ceramide N-deacylase gene |
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| US7101699B2 (en) | 2000-09-26 | 2006-09-05 | Takara Bio Inc. | Sphingolipid ceramide deacylase gene |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3035602B2 (en) | 2000-04-24 |
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