JPH0631306B2 - Process for producing crystals of cytidine-5'-choline diphosphate monohydrate - Google Patents
Process for producing crystals of cytidine-5'-choline diphosphate monohydrateInfo
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- JPH0631306B2 JPH0631306B2 JP60154930A JP15493085A JPH0631306B2 JP H0631306 B2 JPH0631306 B2 JP H0631306B2 JP 60154930 A JP60154930 A JP 60154930A JP 15493085 A JP15493085 A JP 15493085A JP H0631306 B2 JPH0631306 B2 JP H0631306B2
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Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明はシチジン−５′−ジリン酸コリン（以下、ＣＤ
Ｐ−コリンと称する。）１は水和物結晶の製造法に関す
る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to cytidine-5′-choline diphosphate (hereinafter, referred to as CD
It is called P-choline. 1) relates to a method for producing hydrate crystals.
従来の技術 ＣＤＰ−コリンは脳代謝賦活剤として用いられている物
質であって、その製造法としては微生物を用いる方法と
化学的に合成する方法とが知られている。2. Description of the Related Art CDP-choline is a substance used as a cerebral metabolism activating agent, and as its production method, a method using a microorganism and a method of chemically synthesizing it are known.
化学的合成法によるＣＤＰ−コリンの製造法としては、
たとえばシチジン−５′−モノリン酸(以下、５′−Ｃ
ＭＰと略称する。)とホスホリルコリンとを原料とし、
これらをジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下に反
応させる方法[ジャーナル オブ バイオロジカル ケ
ミストリー(J．Biol. Chem.）第222巻185頁(１９５６
年)]、５′−ＣＭＰのアミド類とホスホリルコリンとを
反応させる方法[特公昭４２−１３８４号公報]、５′−
ＣＭＰとホスホリルコリンのアミド類とを反応させる方
法[特公昭４５−４７４７号公報]などが提案されてい
る。しかし、これらいずれの方法においても反応は定量
的には進行しないで、反応生成物中には目的物であるＣ
ＤＰ−コリンのほかに、未反応の原料や副反応により生
成した副生成物が不純物として存在している。このよう
な不純物はその種類が多いうえに、ＣＤＰ−コリン自体
の物理化学的性質に類似する物質も含まれており、この
ような不純物を含む粗製のＣＤＰ−コリンから不純物を
除去するには、未だ数多くの課題が残されている。As a method for producing CDP-choline by a chemical synthesis method,
For example, cytidine-5'-monophosphate (hereinafter 5'-C
Abbreviated as MP. ) And phosphorylcholine as raw materials,
Method for reacting these in the presence of dicyclohexylcarbodiimide [Journal of Biological Chemistry (J. Biol. Chem.) Vol. 222, p. 185 (1956)
)], A method of reacting amides of 5'-CMP with phosphorylcholine [JP-B-42-1384], 5'-
A method of reacting CMP with amides of phosphorylcholine [JP-B-45-4747] has been proposed. However, the reaction does not proceed quantitatively in any of these methods, and the reaction product C
In addition to DP-choline, unreacted raw materials and by-products produced by side reactions exist as impurities. In addition to many types of such impurities, substances that are similar to the physicochemical properties of CDP-choline itself are also included. To remove impurities from crude CDP-choline containing such impurities, Many challenges still remain.
従来、化学的合成法により製造された粗製のＣＤＰ−コ
リンを精製する方法として、活性炭を用いる方法、強塩
基性イオン交換樹脂を用いる方法、あるいはこれらを併
用する方法が提案されている。Conventionally, as a method for purifying crude CDP-choline produced by a chemical synthesis method, a method using activated carbon, a method using a strongly basic ion exchange resin, or a method using these in combination has been proposed.
しかしながら、これら精製法は、いずれもＣＤＰ−コリ
ン、さらには数種の不純物を、まず活性炭やイオン交換
樹脂に吸着させ、続いて吸着されたＣＤＰ−コリンと不
純物とを各種溶離剤を用いて分別溶出させる方法であ
り、このような方法では(i)大量の活性炭あるいはイオ
ン交換樹脂を必要とする、(ii)溶離剤として水のほかに
蟻酸，アンモニア，アルコールなどの各種酸、アルカ
リ、溶剤を必要とする、(iii)溶出液中のＣＤＰ−コリ
ン濃度が低く、濃縮などによるＣＤＰ−コリンの採取に
多量のエネルギーを必要とする、(iv)溶出に用いた酸，
アルカリ，溶剤などの回収に煩雑な操作を必要とするな
どの欠点があるため工業的精製法としては必ずしも有利
な方法とはいえない。However, in all of these purification methods, CDP-choline and several impurities are first adsorbed on activated carbon or an ion exchange resin, and then the adsorbed CDP-choline and impurities are separated using various eluents. It is a method of elution, and in such a method (i) a large amount of activated carbon or ion exchange resin is required, (ii) various acids such as formic acid, ammonia, alcohol, etc., alkalis and solvents as eluents Required, (iii) the concentration of CDP-choline in the eluate is low, and a large amount of energy is required to collect CDP-choline by concentration etc., (iv) the acid used for elution,
It is not always an advantageous method as an industrial refining method because it has drawbacks such as complicated operations required for recovering alkalis and solvents.
問題点を解決するための手段 本発明者らは、従来技術が有するこのような欠点を克服
すべく鋭意検討の結果、特定の２種のイオン交換樹脂を
使用することにより粗製のＣＤＰ−コリン水溶液から不
純物のみを特異的に吸着除去できることを見い出し、こ
の方法により得られた水溶液から、容易に効率よくＣＤ
Ｐ−コリン１水和物が結晶として製造できることを見い
出した。Means for Solving the Problems The inventors of the present invention have conducted extensive studies to overcome such drawbacks of the prior art, and as a result, by using two specific types of ion exchange resins, a crude CDP-choline aqueous solution is obtained. It has been found that only impurities can be specifically adsorbed and removed from the CD, and CD can be easily and efficiently extracted from the aqueous solution obtained by this method.
It has been found that P-choline monohydrate can be produced as crystals.
すなわち、本発明は化学的合成法により製造された粗製
のシチジン−５′−ジリン酸コリンの水溶液を調製し、
該水溶液を強酸性イオン交換樹脂と次いで弱塩基性イオ
ン交換樹脂と接触させ、得られた水溶液を濃縮した後、
アルコールを加えて晶出させることを特徴とするシチジ
ン−５′−ジリン酸コリン１水和物の製造法である。That is, the present invention prepares an aqueous solution of crude cytidine-5'-choline diphosphate produced by a chemical synthesis method,
After contacting the aqueous solution with a strongly acidic ion exchange resin and then with a weakly basic ion exchange resin and concentrating the resulting aqueous solution,
A method for producing cytidine-5'-choline diphosphate monohydrate, which comprises crystallization by adding alcohol.
本発明における、化学的合成法によって製造された粗製
のシチジン−５′−ジリン酸コリン(以下、単に粗製の
ＣＤＰ−コリンと略称する。)としては、たとえば５′
−ＣＭＰまたはその反応性誘導体とホスホリルコリンま
たはこれらの塩、あるいは５′−ＣＭＰとホスホリルコ
リンの反応性誘導体またはこれらの塩を反応させること
により製造されたものを挙げることができる。このよう
な原料化合物を用いるＣＤＰ−コリンの製造法は、すで
に公知であり、５′−ＣＭＰの反応性誘導体としては、
たとえば５′−ＣＭＰのアミド類(たとえば遊離のアミ
ド，モノメチルアミド，ジエチルアミド，モルホリドな
ど)、またホスホリルコリンの反応性誘導体としては、
たとえばホスホリルコリンのアミド類(たとえば遊離の
アミド，モノメチルアミド，ジエチルアミド，モルホリ
ドなど)などがある。本反応は、通常非水系の有機溶媒
(たとえばｏ−クロロフエノール，トリクレゾール，ア
セトニトリル，ピリジンなど)中で行なわれる。このよ
うな反応により得られた粗製のＣＤＰ−コリンには未反
応原料あるいはこれに起因する不純物のほかに、副反応
により生成した不純物(たとえばジシチジンピロリン酸
エステル，シチジン−５′−ジリン酸など)が含まれて
いる。Examples of crude cytidine-5'-choline diphosphate (hereinafter simply referred to as crude CDP-choline) produced by a chemical synthesis method in the present invention include 5 '.
Examples thereof include those produced by reacting -CMP or a reactive derivative thereof with phosphorylcholine or a salt thereof, or 5'-CMP and a reactive derivative of phosphorylcholine or a salt thereof. A method for producing CDP-choline using such a raw material compound is already known, and as a reactive derivative of 5'-CMP,
For example, 5'-CMP amides (eg, free amide, monomethylamide, diethylamide, morpholide, etc.), and reactive derivatives of phosphorylcholine include
Examples include phosphorylcholine amides (eg, free amides, monomethylamides, diethylamides, morpholides, etc.). This reaction is usually a non-aqueous organic solvent.
(For example, o-chlorophenol, tricresole, acetonitrile, pyridine, etc.). The crude CDP-choline obtained by such a reaction contains unreacted raw materials or impurities resulting from this, as well as impurities produced by a side reaction (for example, dicytidine pyrophosphate ester, cytidine-5'-diphosphoric acid, etc.). )It is included.
このような粗製のＣＤＰ−コリンから、その水溶液を調
製するには反応生成物に水を加えればよい。通常ＣＤＰ
−コリンの濃度がほぼ１〜３０重量％(好ましくは、ほ
ぼ３〜１０重量％)になるように水を加える。反応は通
常有機溶媒中で行なわれるが、このような場合には反応
液から有機溶媒を留去して濃縮したのち水を加えて水溶
液とするか、あるいは反応液にエーテルなどを加えたの
ち、水で抽出することにより粗製のＣＤＰ−コリンの水
溶液を得ることができる。Water can be added to the reaction product to prepare an aqueous solution thereof from such crude CDP-choline. Normal CDP
Water is added so that the concentration of choline is approximately 1 to 30% by weight (preferably approximately 3 to 10% by weight). The reaction is usually carried out in an organic solvent.In such a case, the organic solvent is distilled off from the reaction solution and concentrated, and then water is added to form an aqueous solution, or ether is added to the reaction solution, A crude CDP-choline aqueous solution can be obtained by extraction with water.
本発明では、このようにして得られた水溶液を強酸性イ
オン交換樹脂と弱塩基性イオン交換樹脂との両樹脂に接
触させる。In the present invention, the aqueous solution thus obtained is brought into contact with both the strongly acidic ion exchange resin and the weakly basic ion exchange resin.
本発明で用いることのできる強酸性イオン交換樹脂とし
ては、−ＳＯ3Ｈを活性基とする強酸型のイオン交換樹
脂を挙げることができ、通常架橋ポリスチレンをスルホ
ン化した樹脂が用いられる。このような強酸性イオン交
換樹脂として、たとえばアンバーライト ＩＲ−１２
４,２００,２５２(オルガノ（株）製)、ダイヤイオン
ＰＫ−２０８,２１６,２２８,ダイヤイオン ＳＫ−
１１０，ダイヤイオン ＨＰＫ−２５,３０,５５(三菱
化成工業（株）製)、ダウエックス ５０ＷＸ８,ＭＳ
Ｃ−１(ダウケミカル社（株）製）などを挙げることが
できる。このような強酸性イオン交換樹脂は、Ｈ型を用
いる。この樹脂の使用量は、不純物の種類あるいはその
量によっても左右されるが、通常処理されるべき粗製の
ＣＤＰ−コリン１００ｇ当たりほぼ５００〜３０００ml
である。As a strongly acidic ion exchange resin that can be used in the present invention
For -SO3Strong acid type ion exchange tree with H as an active group
Fat can be mentioned, and usually crosslinked polystyrene is
Resin is used. Such strong acidic ion exchange
As the replacement resin, for example, amber light IR-12
4,200,252 (Organo Corporation), Diaion
PK-208,216,228, Diaion SK-
110, Diaion HPK-25, 30, 55 (Mitsubishi
Chemical Industry Co., Ltd.), Dowex 50WX8, MS
Examples include C-1 (manufactured by Dow Chemical Co., Ltd.)
it can. H-type is used for such strongly acidic ion exchange resin.
There is. The amount of this resin used depends on the type of impurities or
It depends on the quantity, but usually the crude
Approximately 500 to 3000 ml per 100 g of CDP-choline
Is.
また、本発明で用いることのできる弱塩基性イオン交換
樹脂としては、第３級アミン，ポリアミンなどを活性基
とする有効pH範囲０〜９のイオン交換樹脂を挙げること
ができる。このような弱塩基性イオン交換樹脂として
は、たとえばアンバーライト ＩＲＡ−６８,９３,９
４，ＩＲ−４５(オルガノ（株）製)、ダイアイオン Ｗ
Ａ−１０,２０,３０)三菱化成工業（株）製)、ダウエッ
クス ＭＷＡ−１,ＷＧＲ(ダウケミカル社（株）製)な
どである。このような弱塩基性イオン交換樹脂はＯＨ型
を用いる。この樹脂の使用量は、不純物の種類あるいは
その量によっても左右されるが、通常処理されるべき粗
製のＣＤＰ−コリンの１００ｇ当たりほぼ２００〜５０
０mlである。これら両樹脂に粗製のＣＤＰ−コリンの水
溶液を接媒させる方式としては、バッチ式と塔式とを挙
げることができる。一般に効率の面からみて塔を用いる
のが好ましい。水溶液との接触は両樹脂のうちのいずれ
を先に行ってもよい。一般には強酸性イオン交換樹脂を
先に接触させる。これら両樹脂は混床式で用いてもよ
い。不純物として無機塩が含まれている場合には、ま
ず、強酸性イオン交換樹脂で処理し、次いで弱塩基性イ
オン交換樹脂で処理するのがよい。塔方式の場合にはＳ
Ｖがほぼ０．１〜５の速度で通液する。接触温度は強酸
性イオン交換樹脂の場合にはＣＤＰ−コリンの加水分解
を防止するため約１０℃以下が好ましく、弱塩基性イオ
ン交換樹脂の場合には室温で行なわれる。In addition, weak basic ion exchange that can be used in the present invention
As the resin, tertiary amine, polyamine, etc. are used as active groups.
And an ion exchange resin with an effective pH range of 0-9
You can As such a weakly basic ion exchange resin
Is, for example, Amber Light IRA-68,93,9
4, IR-45 (manufactured by Organo Corporation), Diaion W
A-10, 20, 30) Mitsubishi Kasei Co., Ltd.), Dowe
Cous MWA-1, WGR (manufactured by Dow Chemical Co.)
How is it? Such weakly basic ion exchange resin is OH type
To use. The amount of this resin used depends on the type of impurities or
It depends on the amount, but it is usually rough to be processed.
200 to 50 per 100 g of manufactured CDP-choline
It is 0 ml. Crude CDP-choline water was added to both of these resins.
A batch method and a tower method are mentioned as a method of bringing the solution into contact with the medium.
You can get it. Generally, towers are used in terms of efficiency
Is preferred. Any of the two resins should come into contact with the aqueous solution.
You may go first. Generally, strong acid ion exchange resin
Contact first. Both resins may be used in a mixed bed type.
Yes. If inorganic salts are included as impurities,
First, treat it with a strongly acidic ion exchange resin, and then
It is better to treat with on-exchange resin. S in case of tower system
V is passed at a rate of approximately 0.1 to 5. Contact temperature is strong acid
Hydrolysis of CDP-choline in case of cationic ion exchange resin
To prevent this, it is preferable to keep the temperature below about 10 ℃.
In the case of resin-exchange resins, it is carried out at room temperature.
接触処理後の樹脂は、常法により再生することができ
る。すなわち強酸性イオン交換樹脂については、たとえ
ば塩酸などの鉱酸の水溶液を用いてＨ型に再生すること
ができる。また弱塩基性イオン交換樹脂については、た
とえば水酸化ナトリウムなどのアルカリの水溶液を用い
てＯＨ型に再生することができる。The resin after the contact treatment can be regenerated by a conventional method. That is, the strongly acidic ion exchange resin can be regenerated into the H type by using an aqueous solution of a mineral acid such as hydrochloric acid. The weakly basic ion exchange resin can be regenerated into an OH type by using an aqueous solution of alkali such as sodium hydroxide.
粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液を両樹脂に接触処理させ
たあとの水溶液は、そのまま濃縮し、濃縮液を常法によ
りアルコールで晶出することにより純品のＣＤＰ−コリ
ン１水和物の結晶を得ることができる。After the crude aqueous CDP-choline solution is contacted with both resins, the aqueous solution is concentrated as it is, and the concentrated solution is crystallized with alcohol by a conventional method to obtain pure CDP-choline monohydrate crystals. Obtainable.
なお、粗製の、あるいは精製されたＣＤＰ−コリンの水
溶液中に含まれる不純物は高速液体クロマトグラフィー
(ＵＶ検出またはＲＩ検出)を用いて分析することができ
る。Impurities contained in the crude or purified CDP-choline aqueous solution were analyzed by high performance liquid chromatography.
(UV detection or RI detection) can be used for analysis.
本発明の作用効果 本発明の製造法によれば、粗製のＣＤＰ−コリンに含ま
れる不純物成分のみが選択的に吸着除去されるため、従
来の吸着炭，吸着樹脂による精製法と比べて樹脂の使用
量が大幅に減少し、また水以外の特殊な溶離剤を必要と
しない。このため、極めて高濃度のＣＤＰ−コリンを含
有する精製液を得ることができる。また本精製法では精
製収率が約９７％以上であり、ほぼ定量的である。また
本発明の製造法によれば、各種溶離剤などの回収操作が
不要となるなどの利点を有している。Advantageous Effects of the Invention According to the production method of the present invention, since only the impurity components contained in the crude CDP-choline are selectively adsorbed and removed, compared to the conventional adsorption carbon and adsorption resin purification methods, The amount used is greatly reduced, and no special eluent other than water is required. Therefore, a purified solution containing an extremely high concentration of CDP-choline can be obtained. Further, in this purification method, the purification yield is about 97% or more, which is almost quantitative. Further, according to the production method of the present invention, there is an advantage that a recovery operation of various eluents is unnecessary.
このように本発明は工業上極めて有用なシチジン−５′
−ジリン酸コリン１水和物の製造法である。Thus, the present invention is an industrially extremely useful cytidine-5 '.
-A method for producing choline diphosphate monohydrate.
以下実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明する。Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples.
実施例 １ ３０ｇのＣＤＰ−コリン，７ｇのホスホリルコリンおよ
び１．５ｇの５′−ＣＭＰを含有する粗製のＣＤＰ−コ
リンの水溶液５００mlを強酸性イオン交換樹脂充填塔
[塔内径１．５cmの二重管式クロマト塔にダイヤイオン
ＨＰＫ−２５,４２〜６０メッシュ,Ｈ型４００mlを充
填(樹脂層の高さ２２５cm)したもの、外筒には５℃の冷
水を通じておく]にＳＶが０．５の速度で通液し、通液
後７００mlの水を用いて水洗(ＳＶ＝０．５)した。この
間ＣＤＰ−コリンを含有する合計９５０mlの溶出液を採
液した。高速液体クロマトグラフィー(ＲＩ検出)による
分析の結果、この溶出液中のホスホリルコリンの量は
０．１ｇ(除去率９８．５％)、５′−ＣＭＰの量は１．
５ｇであることを確認した。Example 1 30 g of CDP-choline, 7 g of phosphorylcholine and
And crude CDP-co-containing 1.5 g of 5'-CMP
500 ml of phosphoric acid aqueous solution packed with a strongly acidic ion exchange resin
[Diaion in a double-tube chromatography column with an inner diameter of 1.5 cm
HPK-25, 42-60 mesh, H type 400 ml
Filled (resin layer height 225 cm), the outer cylinder is cooled at 5 ° C
Through water], SV is passed at a rate of 0.5,
After that, it was washed with 700 ml of water (SV = 0.5). this
Collect a total of 950 ml of eluate containing inter-CDP-choline.
Liquor By high performance liquid chromatography (RI detection)
As a result of analysis, the amount of phosphorylcholine in this eluate was
0.1 g (removal rate 98.5%), and the amount of 5'-CMP was 1.
It was confirmed to be 5 g.
次いでこの溶出液を弱塩基性イオン交換樹脂充填塔[塔
内径１．０cmのクロマト塔にダイヤイオン ＷＡ−３
０,ＯＨ型１００mlを充填したもの(樹脂層の高さ１２７
cm)にＳＶが２．０の速度で通液し、通液後４００mlの
水を用いて水洗(ＳＶ＝２．０)した。この間ＣＤＰ−コ
リンを含有する合計１３００mlの溶出液を採液した。こ
の溶出液を高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)によ
って分析したところ、ＣＤＰ−コリン量は２９．４ｇで
あり、５′−ＣＭＰ、その他不純物ピークは検出されな
かった(ＣＤＰ−コリンの回収率９８．０％)。Then, this eluate is applied to a weak basic ion exchange resin packed tower
Diaion in a 1.0 cm inner diameter chromatography column WA-3
Filled with 0, OH type 100ml (resin layer height 127
cm) and SV at a rate of 2.0.
It was washed with water (SV = 2.0). During this time, CDP-ko
A total of 1300 ml of eluate containing phosphorus was collected. This
The eluate of was analyzed by high performance liquid chromatography (UV detection).
Analysis showed that the amount of CDP-choline was 29.4 g.
Yes, 5'-CMP and other impurity peaks are not detected
Yes (CDP-choline recovery 98.0%).
実施例 ２ ６．５Ｗ／Ｖ％のＣＤＰ−コリン,１．４Ｗ／Ｖ％のホ
スホリルコリン,０．２Ｗ／Ｖ％の５′−ＣＭＰ,１．０
Ｗ／Ｖ％の５′−ＣＭＰモルホリデート,モルホリン,ジ
シチジンピロリン酸エステル,４−モルホリン−Ｎ,Ｎ′
−ジシクロヘキシルカルボジイミド,遊離リン酸,その他
の不純物を含有する粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液400m
lを強酸性イオン交換樹脂充填塔[塔内径１．５cmの二重
管式クロマト塔へダイヤイオン ＨＰＫ−３０,４２
〜６０メッシュ,Ｈ型４００mlを充填(樹脂層の高さ２２
５cm)したもの、外筒には５℃の冷水を通じておく]にＳ
Ｖが０．５の速度で通液し、通液後６００mlの水を用い
て水洗(ＳＶ＝０．５)した。この間ＣＤＰ−コリンを含
有する合計７２０mlの溶出液を採液した。Example 2 6.5 W / V% CDP-choline, 1.4 W / V% pho
Suphorylcholine, 0.2 W / V% 5'-CMP, 1.0
W / V% 5'-CMP morpholidate, morpholine, di
Cytidine pyrophosphate ester, 4-morpholine-N, N '
-Dicyclohexylcarbodiimide, free phosphoric acid, other
Aqueous solution of crude CDP-choline containing impurities of 400 m
l is a strongly acidic ion-exchange resin packed tower [tower with an inner diameter of 1.5 cm
To tube chromatographic tower Diaion HPK-30,42
~ 60 mesh, H type 400ml filled (resin layer height 22
5 cm), put cold water at 5 ° C in the outer cylinder]
V is passed at a rate of 0.5, and 600 ml of water is used after passing
It was washed with water (SV = 0.5). During this period, CDP-choline was included.
A total of 720 ml of eluate was collected.
次いでこの溶出液を弱塩基性イオン交換樹脂充填塔[塔
内径１．０cmのクロマト塔にアンバーライトＩＲＡ−９
４Ｓ,ＯＨ型６０mlを充填(樹脂層の高さ７５cm)したも
の]にＳＶが２．０の速度で通液し、通液後４２０mlの
水を用いて水洗(SV＝2.0)した。この間ＣＤＰ−コリン
を含有する合計１１００mlの溶出液を採液した。This eluate was then added to a weakly basic ion-exchange resin packed column [amberlite IRA-9 in a chromatographic column with an inner diameter of 1.0 cm.
It was filled with 60 ml of 4S, OH type (resin layer height 75 cm)] and passed through at a rate of SV of 2.0, and after passing through, it was washed with 420 ml of water (SV = 2.0). During this period, a total of 1100 ml of eluate containing CDP-choline was collected.
この溶出液を高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)に
よって分析したところ２５．５ｇのＣＤＰ−コリンが確
認され、不純物ピークは認められなかった。When this eluate was analyzed by high performance liquid chromatography (UV detection), 25.5 g of CDP-choline was confirmed and no impurity peak was observed.
このＣＤＰ−コリン含有の水溶液を濃縮し、濃縮液をア
ルコールで晶出することにより純品のＣＤＰ−コリン１
水和物の結晶が得られた。この結晶の元素分析値は次の
通りであった。This CDP-choline-containing aqueous solution is concentrated, and the concentrated solution is crystallized with alcohol to obtain pure CDP-choline 1
Hydrate crystals were obtained. The elemental analysis values of this crystal were as follows.
実施例 ３ 遊離のホスホリルコリン１２ｇとシチジン−５′−リン
酸アミドのジシクロヘキシルグアニジウム塩２８ｇとを
オルトクロロフェノール５００mlに溶解させ１００℃で
１６時間反応させた。反応終了後オルトクロロフェノー
ルを減圧で殆んど濃縮留去した。この濃縮液にエーテル
５００mlを加えこれを水２５０mlで２回抽出した。両抽
出液を合しエーテル１００mlで洗い水層に含まれるエー
テルを減圧留去し液量を４００mlとした。このようにし
て得られた粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液を実施例２で
用いたのと同じ２種のイオン交換樹脂充填塔を用いて同
じ条件下で処理し、得られたＣＤＰ−コリン水溶液を高
速液体クロマトグラフィーによって分析したところ不純
物のピークは全く認められなかった。 Example 3 12 g of free phosphorylcholine and 28 g of dicyclohexylguanidinium salt of cytidine-5'-phosphoric acid amide were dissolved in 500 ml of orthochlorophenol and reacted at 100 ° C for 16 hours. After the reaction was completed, ortho-chlorophenol was concentrated and distilled off under reduced pressure. To this concentrated solution was added 500 ml of ether, and this was extracted twice with 250 ml of water. The two extracts were combined, washed with 100 ml of ether, and the ether contained in the aqueous layer was distilled off under reduced pressure to a liquid volume of 400 ml. The thus obtained crude aqueous solution of CDP-choline was treated under the same conditions using the same two kinds of ion-exchange resin packed columns as used in Example 2 to obtain the obtained aqueous CDP-choline solution. When analyzed by high performance liquid chromatography, no impurity peak was observed.
この水溶液を濃縮し、濃縮液をアルコールで晶出するこ
とにより純品のＣＤＰ−コリン１水和物の結晶１３．９
ｇを得た。This aqueous solution was concentrated, and the concentrated solution was crystallized with alcohol to give pure CDP-choline monohydrate crystals 13.9.
g was obtained.
第１図は実施例２で用いた粗製のＣＤＰ−コリンの水溶
液の高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析
チャートを示す。第２図は、強酸性イオン交換樹脂と接
触させて得られたＣＤＰ−コリンを含有する溶出液の高
速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析チャー
トを示す。 第３図は、さらに弱塩基性イオン交換樹脂と接触させる
ことにより得られたＣＤＰ−コリンを含有する精製液の
高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析チャ
ートを示す。Ｐ0はＣＤＰ−コリンのピークを示し、Ｐ1
〜Ｐ9はいずれも不純物のピークを示す。FIG. 1 shows an analysis chart of the crude CDP-choline aqueous solution used in Example 2 by high performance liquid chromatography (UV detection). FIG. 2 shows an analysis chart by high performance liquid chromatography (UV detection) of an eluate containing CDP-choline obtained by contacting with a strongly acidic ion exchange resin. FIG. 3 shows an analysis chart by high performance liquid chromatography (UV detection) of a purified liquid containing CDP-choline obtained by further contacting it with a weakly basic ion exchange resin. P 0 indicates the peak of CDP-choline, P 1
.About.P 9 all indicate peaks of impurities.
Claims (1)
ジン−５′−ジリン酸コリンの水溶液を調製し、該水溶
液を強酸性イオン交換樹脂と次いで弱塩基性イオン交換
樹脂と接触させ、得られた水溶液を濃縮した後、アルコ
ールを加えて晶出させることを特徴とするシチジン−
５′−ジリン酸コリン１水和物の製造法。1. A method of preparing a crude aqueous solution of crude cytidine-5'-choline diphosphate prepared by a chemical synthesis method, contacting the aqueous solution with a strongly acidic ion exchange resin and then a weakly basic ion exchange resin, The concentrated aqueous solution is concentrated, and then alcohol is added to crystallize the solution.
Process for producing 5'-choline diphosphate monohydrate.
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| JP60154930A JPH0631306B2 (en) | 1985-07-12 | 1985-07-12 | Process for producing crystals of cytidine-5'-choline diphosphate monohydrate |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| JP60154930A JPH0631306B2 (en) | 1985-07-12 | 1985-07-12 | Process for producing crystals of cytidine-5'-choline diphosphate monohydrate |
Publications (2)
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ID=15595050
Family Applications (1)
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1985
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