JPH06289018A - Device for determining base arrangement of nucleic acid - Google Patents
Device for determining base arrangement of nucleic acidInfo
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Abstract
Description
【0001】[0001]
【産業上の利用分野】本発明はDNAシーケンサと称さ
れ、DNAの塩基配列を解析するための装置に関するも
のである。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a device called a DNA sequencer, for analyzing a base sequence of DNA.
【0002】[0002]
【従来の技術】従来のDNAシーケンサでは、螢光プラ
イマー(マーカとして螢光物質を化学結合させたプライ
マー)又はラジオアイソトープラベルされたプライマー
を用いて、サンガー反応により末端塩基がA(アデニ
ン)、G(グアニン)、C(シトシン)及びT(チミ
ン)のそれぞれになっているDNAフラグメント群を調
整する。それを試料として、ポリアクリルアミドゲル電
気泳動装置のスラブ状ゲルのサンプル投入部に末端塩基
別に投入して同時に電気泳動させ、オンライン式又はオ
フライン式にDNAフラグメントを検出してDNAの塩
基配列を決定している。2. Description of the Related Art In a conventional DNA sequencer, a fluorescent primer (a primer chemically bound to a fluorescent substance as a marker) or a primer labeled with a radioisotope is used, and the end bases are A (adenine) and G by a Sanger reaction. (Guanine), C (cytosine), and T (thymine), respectively, are prepared. Using it as a sample, put it into the sample input part of the slab-like gel of the polyacrylamide gel electrophoretic apparatus for each end base, and simultaneously perform electrophoresis, and detect the DNA fragment by online or offline method to determine the DNA base sequence. ing.
【0003】[0003]
【発明が解決しようとする課題】ゲル電気泳動装置では
泳動に長時間を要する。例えば約400塩基を読もうと
すれば泳動に4〜8時間を必要とする。またゲル電気泳
動に起因する精度の悪さや、ゲルの場所により泳動速度
が異なって末端塩基の異なるレーン間で検出の順序が逆
転する、いわゆるスマイリングが発生し、塩基数が多く
なると正確な配列決定が困難になる問題もある。The gel electrophoresis apparatus requires a long time for electrophoresis. For example, reading about 400 bases requires 4 to 8 hours for migration. In addition, the accuracy of sequence determination increases when the number of bases increases, which causes poor accuracy due to gel electrophoresis and reverses the order of detection between lanes with different terminal bases due to different migration speeds depending on the gel location. There is also a problem that becomes difficult.
【0004】また、DNAフラグメントを検出できるよ
うにするための螢光体、ラジオアイソトープ、化学発光
物質などのマーカと検出器との兼ね合いで、サンプル量
が多く必要となったり、長い配列を読むのが困難である
という問題が生じている。そこで、本発明は測定に要す
る時間を短縮するとともに、塩基配列読取り精度を向上
させ、またマーカも必要としない核酸塩基配列決定装置
を提供することを目的とするものである。In addition, a marker such as a fluorophore, a radioisotope, a chemiluminescent substance, etc. for detecting a DNA fragment and a detector are combined with each other, so that a large amount of sample is required or a long sequence is read. The problem is that it is difficult. Therefore, it is an object of the present invention to provide a nucleic acid base sequence determination device that shortens the time required for measurement, improves the base sequence reading accuracy, and does not require a marker.
【0005】[0005]
【課題を解決するための手段】本発明では、DNAフラ
グメント群を電気泳動より分離させるのではなく、末端
塩基別に調整されたDNAフラグメント群試料を末端塩
基別に質量分析計により分析し、4種類の末端塩基別の
質量スペクトルデータを得、それらを一まとめにして質
量数の順にピークを読み取ることによってDNAの塩基
配列を決定しようとするものである。In the present invention, instead of separating DNA fragment groups by electrophoresis, a sample of DNA fragment groups prepared for each terminal base is analyzed by a mass spectrometer for each terminal base, and four types of DNA fragments are analyzed. It is intended to determine the base sequence of DNA by obtaining mass spectrum data for each end base, collecting the data, and reading the peaks in order of mass number.
【0006】そのため、本発明は、末端塩基ごとのDN
Aフラグメント群試料が塗布されたサンプルプレートを
配置し、測定位置の試料に対してレーザビームを照射し
て試料をイオン化するイオン源、そのイオン源で発生し
たイオンを質量数により分離する分析部、及び分離され
たイオンを検出する検出器を備えた質量分析計と、その
質量分析計からの4種類の末端塩基別の質量スペクトル
データを取り込み、末端塩基別に記憶する記憶部と、そ
の記憶部の末端塩基別の4種類の質量スペクトルデータ
から質量数の順にピークを読み取って試料DNAの塩基
配列を決定する塩基配列決定部と、を備えている。Therefore, the present invention provides DN for each terminal base.
An ion source for arranging a sample plate coated with the A fragment group sample and irradiating the sample at the measurement position with a laser beam to ionize the sample, an analysis unit for separating ions generated by the ion source by mass number, And a mass spectrometer equipped with a detector for detecting the separated ions, and a storage unit for loading the mass spectrum data for each of the four types of terminal bases from the mass spectrometer and storing the data for each terminal base, and the storage unit And a base sequence determination unit that determines the base sequence of the sample DNA by reading peaks in order of mass number from four types of mass spectrum data for each end base.
【0007】本発明の好ましい態様では、塩基配列決定
部には4種類の末端塩基を含む質量スペクトルに1塩基
単位に相当する質量数より小さい質量数間隔部があった
ときに、その試料がヘテロ接合を有するDNAであると
して処理するヘテロ接合判定処理部をさらに含んでい
る。In a preferred embodiment of the present invention, when the base sequence determination part has a mass number interval part smaller than the mass number corresponding to one base unit in the mass spectrum containing four kinds of terminal bases, the sample is heterogeneous. It further includes a heterozygous determination processing unit that processes as DNA having a junction.
【0008】[0008]
【作用】サンガー反応を用いて鋳型DNAから作成され
た末端塩基別のDNAフラグメント群試料の溶液を、末
端塩基別に場所を異ならせてサンプルプレートに塗布す
る。そのサンプルプレートを質量分析計のイオン源に設
置し、レーザビームを照射してDNAフラグメントイオ
ンを発生させる。レーザビームによるイオン化では試料
に含まれているDNAフラグメントが分解せずにそのま
までイオン化される。このようにして、末端塩基別のD
NAフラグメント群の質量スペクトルを得る。各DNA
フラグメントにはプライマーがついているが、プライマ
ーの質量数は既知であり、また各塩基の質量数も既知で
あるので、質量スペクトルのピークの位置も決まってい
る。4種類の末端塩基別の質量スペクトルを一まとめに
してプライマーの次の質量数のピークから順次読んでい
けば、塩基配列が決定できる。The solution of the DNA fragment group sample for each end base prepared from the template DNA using the Sanger reaction is applied to the sample plate at different positions for each end base. The sample plate is placed on the ion source of the mass spectrometer and irradiated with a laser beam to generate DNA fragment ions. In the ionization by the laser beam, the DNA fragment contained in the sample is ionized as it is without being decomposed. In this way, D
Obtain mass spectra of NA fragments. Each DNA
Although a primer is attached to the fragment, the mass number of the primer is known and the mass number of each base is also known, so the peak position of the mass spectrum is also determined. The base sequence can be determined by collecting the mass spectra of the four types of terminal bases and reading them sequentially from the peak of the next mass number of the primer.
【0009】鋳型DNAからサンガー反応により末端塩
基がA,G,C,Tのいずれかである各DNAフラグメ
ント群試料を作成する。例えば、鋳型DNAが [プライマー対応部]+AAGCTAAGTTCAGG であったとする。サンガー反応では次の式の上段のDN
Aが作成される。 A sample of each DNA fragment group whose terminal base is A, G, C or T is prepared from the template DNA by Sanger reaction. For example, it is assumed that the template DNA is [primer corresponding part] + AAGCTAAGTTCAGG. In the Sanger reaction, the DN in the upper part of the following equation
A is created.
【0010】その結果、サンガー反応により得られるA
端をもつフラグメントは次の3つとなる。 (プライマー)+TTCGA (プライマー)+TTCGATTCA (プライマー)+TTCGATTCAA 同様に、T端をもつフラグメントは次の5つとなる。 (プライマー)+T (プライマー)+TT (プライマー)+TTCGAT (プライマー)+TTCGATT (プライマー)+TTCGATTCAAGT G端をもつフラグメントは次の2つとなる。 (プライマー)+TTCG (プライマー)+TTCGATTCAAG C端をもつフラグメントは次の4つとなる。 (プライマー)+TTC (プライマー)+TTCGATTC (プライマー)+TTCGATTCAAGTC (プライマー)+TTCGATTCAAGTCCAs a result, A obtained by the Sanger reaction
There are the following three fragments with ends. (Primer) + TTCGA (Primer) + TTCGATTCA (Primer) + TTCGATTCAA Similarly, the following five fragments have a T-terminus. (Primer) + T (Primer) + TT (Primer) + TTCGAT (Primer) + TTCGATT (Primer) + TTCGATTCAAGT The following two fragments have a G-terminal. (Primer) + TTCG (Primer) + TTCGATTCAAG The following four fragments have C-terminals. (Primer) + TTC (Primer) + TTCGATTC (Primer) + TTCGATTCAAGTC (Primer) + TTCGATTCAAGTCC
【0011】これらの末端塩基別のDNAフラグメント
群をそれぞれ試料とする質量スペクトルは、図1に示さ
れるようになる。この4つの質量スペクトルデータで、
プライマーの次のピークから質量数(分子量)の順に読
み取られ、塩基配列TTCGATTCAAGTCCが決
定される。これら鋳型DNAの相補的な塩基配列を表わ
している。The mass spectrum of each of the DNA fragment groups for each end base as a sample is as shown in FIG. With these four mass spectrum data,
From the next peak of the primer, the mass number (molecular weight) is read in that order, and the base sequence TTCGAATTCAAGTCC is determined. It shows the complementary nucleotide sequences of these template DNAs.
【0012】[0012]
【実施例】図2(A)は一実施例における質量分析計を
表わしたものである。図2(A)において、2はイオン
源であり、サンガー法により調整されたDNAフラグメ
ント群試料溶液が末端塩基別に塗布されたサンプルプレ
ート4が配置される。サンプルプレート4は図2(B)
に示されるような長尺の金属板であり、その長手方向に
沿って末端塩基別のDNAフラグメント群試料溶液6が
塗布される。サンプルプレート4上で試料溶液6は例え
ば末端塩基の種類A,G,C,T別に配置され、4つの
塗布試料で一組をなしている。EXAMPLE FIG. 2A shows a mass spectrometer in one example. In FIG. 2 (A), 2 is an ion source, and a sample plate 4 to which a DNA fragment group sample solution prepared by the Sanger method is applied for each end base is arranged. The sample plate 4 is shown in FIG.
Is a long metal plate, and the DNA fragment group sample solution 6 for each end base is applied along the longitudinal direction of the metal plate. The sample solution 6 is arranged on the sample plate 4 for each of the types A, G, C, and T of the terminal bases, and a set of four coated samples constitutes one set.
【0013】サンプルプレート4は(A)のイオン源2
に紙面垂直方向に差し込まれ、(B)の矢印方向に送ら
れて末端塩基別に1つずつ順次イオン化されて測定され
る。イオン源2でサンプルプレート4に塗布され、イオ
ン化位置に配置された試料をイオン化するために、イオ
ン源2の外部に窒素レーザ8が配置され、窒素レーザ8
からのレーザビーム10はレーザビーム導入端子12を
経てイオン源2のイオン化位置に配置された試料に照射
される。イオン化位置で発生した試料イオンを検出器方
向に引き出すためにイオン源内で検出器側には引出し電
極12が配置されており、引出し電極12には試料プレ
ート4に対して例えば−30KeVの高電圧が印加され
ている。16は検出器であり、検出器16とイオン源2
の間には引き出されたイオンが検出器16に向って飛行
するドリフト領域18が配置されている。この質量分析
計は飛行時間(TOF;Time-of-Flight)型質量分析計
であり、イオン化されてから検出器16へ到達するまで
の時間が質量数に対応し、質量数の小さいイオンほど短
時間で到達することによってDNAフラグメント群が質
量数に応じて分離される。26はこの質量分析計を排気
するための排気手段であり、主排気手段としてターボ分
子ポンプを備えている。The sample plate 4 is the ion source 2 of (A).
Is inserted in the direction perpendicular to the paper surface, is sent in the direction of the arrow in (B), and is sequentially ionized one by one for each terminal base for measurement. A nitrogen laser 8 is arranged outside the ion source 2 in order to ionize the sample applied to the sample plate 4 by the ion source 2 and arranged at the ionization position.
The laser beam 10 from is emitted to the sample placed at the ionization position of the ion source 2 through the laser beam introduction terminal 12. In order to extract the sample ions generated at the ionization position toward the detector, the extraction electrode 12 is arranged on the detector side in the ion source, and the extraction electrode 12 has a high voltage of, for example, −30 KeV with respect to the sample plate 4. Is being applied. 16 is a detector, and the detector 16 and the ion source 2
A drift region 18 in which the extracted ions fly toward the detector 16 is arranged between them. This mass spectrometer is a time-of-flight (TOF) mass spectrometer, and the time from ionization to reaching the detector 16 corresponds to the mass number, and the smaller the mass number, the shorter the ion. By reaching in time, the DNA fragment groups are separated according to their mass numbers. Reference numeral 26 denotes an exhaust means for exhausting the mass spectrometer, which is equipped with a turbo molecular pump as a main exhaust means.
【0014】レーザビーム10が試料に照射されたタイ
ミングを検出してイオンの飛行開始のトリガー信号とす
るためにフォトダイオード20が配置されている。質量
スペクトルを表示するためにデジタルオシロスコープ2
2が設けられており、デジタルオシロスコープ22はフ
ォトダイオード20の検出信号をトリガー信号として検
出器16の出力信号を取り込み、表示する。検出器16
の検出信号はまた、コンピュータ24へ取り込まれて記
憶され、塩基配列決定に利用される。A photodiode 20 is arranged to detect the timing of irradiation of the sample with the laser beam 10 and use it as a trigger signal for starting the flight of ions. Digital oscilloscope 2 to display the mass spectrum
2 is provided, and the digital oscilloscope 22 takes in the output signal of the detector 16 using the detection signal of the photodiode 20 as a trigger signal and displays it. Detector 16
The detection signal of is also taken into the computer 24 and stored therein, and is used for base sequence determination.
【0015】サンプルプレート4は順次図2(A)の紙
面垂直方向に送られて末端塩基別の塗布試料が順次分析
されていく。本発明で用いる質量分析計は図2に例示の
ものに限定されるものではないが、図2に示した質量分
析計自体の詳細は Analytical Chemistry, Vol.64, No.
21,pp.1027-1039(1992) に記載されている。The sample plate 4 is sequentially fed in the direction perpendicular to the paper surface of FIG. 2A, and the coated samples for each end base are sequentially analyzed. The mass spectrometer used in the present invention is not limited to the one illustrated in FIG. 2, but the details of the mass spectrometer itself shown in FIG. 2 are described in Analytical Chemistry, Vol.
21, pp.1027-1039 (1992).
【0016】コンピュータ24では取り込んだ質量スペ
クトルデータからDNAの塩基配列を決定するために、
図3に示される手段を備えている。質量分析計30から
の末端塩基別の質量スペクトルデータを記憶する4つの
データ記憶部32A,32G,32C,32Tが設けら
れている。塩基配列決定部34は4つの記憶部の質量ス
ペクトルデータを一まとめにして質量数の小さいピーク
から順に配列することによってDNAの塩基配列を決定
する。決定された塩基配列は表示部36に表示される。In order to determine the DNA base sequence from the mass spectrum data that has been taken in by the computer 24,
It comprises the means shown in FIG. Four data storage units 32A, 32G, 32C, and 32T that store the mass spectrum data for each end base from the mass spectrometer 30 are provided. The base sequence determination unit 34 determines the base sequence of the DNA by grouping the mass spectrum data of the four storage units and arranging them in order from the peak with the smallest mass number. The determined base sequence is displayed on the display unit 36.
【0017】DNAフラグメント群試料がPCR法によ
り調整されたものである場合に、鋳型DNAがヘテロ接
合を含んでいるときには、DNAフラグメント群試料に
は2種類の配列が含まれることになる。このとき、1種
類の配列であれば末端塩基別の4つの質量スペクトルデ
ータを一まとめにして得られる質量スペクトルのピーク
は1塩基単位に相当する質量数間隔で配列されるが、ヘ
テロ接合を含んでいる場合には、接近した位置に2つの
ピークが共存することになる。そこで、ヘテロ接合判定
処理部38をさらに設け、4つの質量スペクトルデータ
を一まとめにして得られる質量スペクトルのピーク間隔
に1塩基単位に相当する質量数間隔よりも狭い間隔の部
分が存在するときに、ヘテロ接合が含まれていると判定
し、2種類の配列を決定する。When the DNA fragment group sample is prepared by the PCR method and the template DNA contains a heterozygote, the DNA fragment group sample contains two kinds of sequences. At this time, in the case of one kind of sequence, the peaks of the mass spectrum obtained by collecting four mass spectrum data for each end base are arranged at the mass number intervals corresponding to one base unit, but the heterojunction is included. In the case of, two peaks coexist at close positions. Therefore, when the heterojunction determination processing unit 38 is further provided, when the peak interval of the mass spectrum obtained by gathering the four mass spectrum data includes a part having a narrower interval than the mass number interval corresponding to one base unit, , And determine that two types of sequences are included.
【0018】図3のコンピュータ24で囲まれたブロッ
クのうち、記憶部32A,32G,32C,32TはR
AMやハードディスク装置などの記憶装置にそれぞれの
領域が設定されることにより実現され、塩基配列決定部
34とヘテロ接合判定処理部38はCPUとメモリ装置
を使ってソフトウエアにより実現される。Of the blocks surrounded by the computer 24 in FIG. 3, the storage units 32A, 32G, 32C and 32T are R.
This is realized by setting respective areas in a storage device such as an AM or a hard disk device, and the base sequence determination unit 34 and the heterojunction determination processing unit 38 are realized by software using a CPU and a memory device.
【0019】図4により一実施例の動作を説明する。イ
オン源に末端塩基別DNAフラグメント群試料溶液を塗
布したサンプルプレートを設置し、真空排気した後、レ
ーザビーム10をイオン化位置の試料に照射することに
よってその試料の質量スペクトルを得る。例えば、最初
にA端フラグメント群の質量分析を行ない、そのデータ
をコンピュータに取り込む。同様に、順次、G端フラグ
メント群試料、C端フラグメント群試料、T端フラグメ
ント群試料と繰り返した後、4種類の質量スペクトルデ
ータを一まとめにしてピークを質量数順に並べることに
よってDNA塩基配列を得、それを表示する。The operation of one embodiment will be described with reference to FIG. A sample plate coated with a DNA fragment group sample solution for each end base is installed as an ion source, and after evacuation, the sample at the ionization position is irradiated with the laser beam 10 to obtain a mass spectrum of the sample. For example, first, mass analysis of the A-terminal fragment group is performed, and the data is loaded into a computer. Similarly, after repeating the G-terminal fragment group sample, the C-terminal fragment group sample, and the T-terminal fragment group sample in sequence, the four types of mass spectrum data are collected together and the peaks are arranged in order of the mass numbers to determine the DNA base sequence. Get and display it.
【0020】この操作を4種類の試料を組として、試料
の数だけ繰り返し行なう。実施例では質量分析計として
飛行時間型質量分析計を用いているが、必ずしもこれに
限定されるものではなく、イオンを磁場で分離する質量
分析計を用いてもよい。This operation is repeated as many times as there are samples of four kinds of samples. Although a time-of-flight mass spectrometer is used as a mass spectrometer in the embodiments, the mass spectrometer is not necessarily limited to this, and a mass spectrometer that separates ions by a magnetic field may be used.
【0021】[0021]
【発明の効果】本発明では末端塩基別に調整したDNA
フラグメント群試料を質量分析計により分離し、4種類
の末端塩基別試料についての質量スペクトルデータをま
とめることにより塩基配列を決定するようにしたので、
数秒程度というようなごく短時間に結果を得ることがで
きる。またゲル電気泳動法に比べて螢光体やラジオアイ
ソトープなどのマーカをつける必要もなく、またゲル電
気泳動の場合のスマイリングもなく、ゲル電気泳動法よ
りも高精度に塩基配列を決定することができる。INDUSTRIAL APPLICABILITY In the present invention, DNA prepared by adjusting the terminal bases
The fragment group samples were separated by a mass spectrometer, and the base sequence was determined by collecting the mass spectrum data for the four types of end base-specific samples.
The result can be obtained in a very short time such as several seconds. Moreover, compared to gel electrophoresis, there is no need to attach markers such as fluorophores and radioisotopes, and there is no smileing in the case of gel electrophoresis, and it is possible to determine the base sequence with higher accuracy than gel electrophoresis. it can.
【図1】末端塩基別DNAフラグメント群試料の質量ス
ペクトルを示す図である。FIG. 1 is a diagram showing a mass spectrum of a DNA fragment group sample according to end bases.
【図2】一実施例を示す図であり、(A)は質量分析計
を示す概略構成図、(B)は同実施例で用いるサンプル
プレートを示す拡大平面図である。FIG. 2 is a diagram showing an example, (A) is a schematic configuration diagram showing a mass spectrometer, and (B) is an enlarged plan view showing a sample plate used in the example.
【図3】同実施例におけるコンピュータの機能を示すブ
ロック図である。FIG. 3 is a block diagram showing functions of a computer in the embodiment.
【図4】一実施例の動作を示すフローチャート図であ
る。FIG. 4 is a flowchart showing the operation of the embodiment.
2 イオン源 4 サンプルプレート 6 塗布された末端塩基別DNAフラグメント群試
料 8 窒素レーザ 10 レーザビーム 16 検出器 20 フォトダイオード 24 コンピュータ 32A,32G,32C,32T 末端塩基別の質量ス
ペクトルデータ記憶部 34 塩基配列決定部 36 表示部 38 ヘテロ接合判定処理部2 Ion source 4 Sample plate 6 Coated DNA fragment group sample by end base 8 Nitrogen laser 10 Laser beam 16 Detector 20 Photodiode 24 Computer 32A, 32G, 32C, 32T Mass spectrum data storage section for each end base 34 Base sequence Determining unit 36 Display unit 38 Heterojunction determination processing unit
Claims (2)
とのDNAフラグメント試料が塗布されたサンプルプレ
ートを配置し、測定位置の試料に対してレーザビームを
照射して試料をイオン化するイオン源、そのイオン源で
発生したイオンを質量数により分離する分析部、及び分
離されたイオンを検出する検出器を備えた質量分析計
と、 前記質量分析計からの4種類の末端塩基別の質量スペク
トルデータを取り込み、末端塩基別に記憶する記憶部
と、 前記記憶部の末端塩基別の4種類の質量スペクトルデー
タから質量数の順にピークを読み取って試料DNAの塩
基配列を決定する塩基配列決定部と、を備えたことを特
徴とする核酸の塩基配列決定装置。1. An ion source for arranging a sample plate coated with a DNA fragment sample for each of four types of terminal bases that has undergone the Sanger reaction, and irradiating the sample at the measurement position with a laser beam to ionize the sample. A mass spectrometer equipped with an analysis unit for separating ions generated by an ion source by mass number, and a detector for detecting the separated ions, and mass spectrum data for each of four types of end bases from the mass spectrometer. A storage unit that captures and stores each end base, and a base sequence determination unit that determines a base sequence of sample DNA by reading peaks in order of mass number from four types of mass spectrum data for each end base of the storage unit An apparatus for determining a base sequence of a nucleic acid, characterized in that
ペクトルデータを質量数の順に並べた結果の質量スペク
トルに1塩基単位に相当する質量数より小さい質量数間
隔部があったときに、その試料がヘテロ接合を有するD
NAであるとして処理するヘテロ接合判定処理部をさら
に含んでいる請求項1に記載の核酸の塩基配列決定装
置。2. The base sequence determination unit, when a mass spectrum obtained as a result of arranging four kinds of mass spectrum data in order of mass number has a mass number interval smaller than the mass number corresponding to one base unit, D whose sample has a heterojunction
The nucleic acid base sequence determination device according to claim 1, further comprising a heterozygous determination processing unit that processes as NA.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9866593A JPH06289018A (en) | 1993-03-31 | 1993-03-31 | Device for determining base arrangement of nucleic acid |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9866593A JPH06289018A (en) | 1993-03-31 | 1993-03-31 | Device for determining base arrangement of nucleic acid |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH06289018A true JPH06289018A (en) | 1994-10-18 |
Family
ID=14225813
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP9866593A Pending JPH06289018A (en) | 1993-03-31 | 1993-03-31 | Device for determining base arrangement of nucleic acid |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH06289018A (en) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6027890A (en) * | 1996-01-23 | 2000-02-22 | Rapigene, Inc. | Methods and compositions for enhancing sensitivity in the analysis of biological-based assays |
US6312893B1 (en) | 1996-01-23 | 2001-11-06 | Qiagen Genomics, Inc. | Methods and compositions for determining the sequence of nucleic acid molecules |
US6613508B1 (en) | 1996-01-23 | 2003-09-02 | Qiagen Genomics, Inc. | Methods and compositions for analyzing nucleic acid molecules utilizing sizing techniques |
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- 1993-03-31 JP JP9866593A patent/JPH06289018A/en active Pending
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