JPH06107560A - 組み替えサイトカインの投与による、退縮乳腺を持つ動物の乳腺炎の治療又は予防の方法 - Google Patents
組み替えサイトカインの投与による、退縮乳腺を持つ動物の乳腺炎の治療又は予防の方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 サイトカインは、退縮乳腺の自然の防衛系を
増進する能力の故に有用である。免疫強化活性の他にサ
イトカインは、乳腺の退縮の正常な生理を促進し、それ
により、哺乳類の新規感染に対する保護をさらに与え
る。退縮乳腺は、退縮の初期に非常に感染し易く、従っ
て最も感染し易い期間を短くし、一方で自然の防衛機構
を強化することが、ほとんどの治療にとって非常に有利
である。単独で、種々のサイトカインの組み合わせで、
又は他の治療薬との組み合わせで使用することによりサ
イトカインは、乳腺を保護し、既存の感染症を治癒さ
せ、又授乳の休止期間及び授乳の再開の初期に特に有用
である。 【効果】 牛乳の生産量に影響することなく、乳腺炎の
予防及び治療を行うことができる。
増進する能力の故に有用である。免疫強化活性の他にサ
イトカインは、乳腺の退縮の正常な生理を促進し、それ
により、哺乳類の新規感染に対する保護をさらに与え
る。退縮乳腺は、退縮の初期に非常に感染し易く、従っ
て最も感染し易い期間を短くし、一方で自然の防衛機構
を強化することが、ほとんどの治療にとって非常に有利
である。単独で、種々のサイトカインの組み合わせで、
又は他の治療薬との組み合わせで使用することによりサ
イトカインは、乳腺を保護し、既存の感染症を治癒さ
せ、又授乳の休止期間及び授乳の再開の初期に特に有用
である。 【効果】 牛乳の生産量に影響することなく、乳腺炎の
予防及び治療を行うことができる。
Description
【０００１】
【発明の背景】本発明は、授乳初期及び／又は退縮乳腺
を持つ温血動物の乳腺炎の治療又は予防に関する。治療
には、組み替えサイトカインを用いる。
を持つ温血動物の乳腺炎の治療又は予防に関する。治療
には、組み替えサイトカインを用いる。
【０００２】サイトカインは、有用な治療を与え、乳腺
の退縮の初期、ならびに授乳の開始期における新規感染
又は既感染から乳腺を非常に保護し、治療する。この治
療により、その後の授乳サイクル中の牛乳生産も増加す
る。免疫感作及びワクチン法と反対に本発明は、宿主の
特異的及び非特異的防衛機構を最適化して新規感染を防
ぎ、乳腺退縮の正常な生理学的過程を促進する。本発明
は、そのままですべての哺乳類の病的感染の有効な予防
及び治療に有用であるが、特に牛、羊、山羊又は水牛な
どの牛乳生産温血動物に特に有用である。さらに、病気
に対する従来の抗生物質治療と共に補助的治療としての
サイトカインの利用は、新規感染の減少、有効性の増
進、及び／又は治療に必要な抗生物質の量の減少に有用
であり、治療の残存薬剤が減少する。
の退縮の初期、ならびに授乳の開始期における新規感染
又は既感染から乳腺を非常に保護し、治療する。この治
療により、その後の授乳サイクル中の牛乳生産も増加す
る。免疫感作及びワクチン法と反対に本発明は、宿主の
特異的及び非特異的防衛機構を最適化して新規感染を防
ぎ、乳腺退縮の正常な生理学的過程を促進する。本発明
は、そのままですべての哺乳類の病的感染の有効な予防
及び治療に有用であるが、特に牛、羊、山羊又は水牛な
どの牛乳生産温血動物に特に有用である。さらに、病気
に対する従来の抗生物質治療と共に補助的治療としての
サイトカインの利用は、新規感染の減少、有効性の増
進、及び／又は治療に必要な抗生物質の量の減少に有用
であり、治療の残存薬剤が減少する。
【０００３】商業的に重要なそのような病気のひとつ
は、乳組織の炎症である乳腺炎である。この病気の原因
は、種々の細菌であり、年間の牛乳生産の大きな損失の
原因となる。乳腺感染は、温血動物の組織系の多様な感
染症の研究の有用なモデルであり、そのひとつが乳腺炎
である。授乳中の乳腺に乳内抗生物質治療を使用する
が、最も有効な乳腺炎治療のひとつは、授乳の終了時
（ドライングオフ）における抗生物質の乳内注入であ
る。この治療は、ドライングオフの時点で既存の感染を
治癒させるのに非常に有効である。
は、乳組織の炎症である乳腺炎である。この病気の原因
は、種々の細菌であり、年間の牛乳生産の大きな損失の
原因となる。乳腺感染は、温血動物の組織系の多様な感
染症の研究の有用なモデルであり、そのひとつが乳腺炎
である。授乳中の乳腺に乳内抗生物質治療を使用する
が、最も有効な乳腺炎治療のひとつは、授乳の終了時
（ドライングオフ）における抗生物質の乳内注入であ
る。この治療は、ドライングオフの時点で既存の感染を
治癒させるのに非常に有効である。
【０００４】サイトカインは、宿主の免疫系に対する正
の免疫モジュレート効果、ならびに退縮乳腺の正常な生
物学的過程に対する影響を持つ。本発明は、哺乳類の退
縮乳腺における細菌の新規感染の定着を予防し、頻度を
減らす。さらに非授乳牛における現在の抗微生物治療に
対する補助として、本発明の方法は、有効性の増進、治
療投薬量の減少、及び残留薬剤の最少化に有用である。
さらに本発明の方法は、古典的抗微生物治療に対して耐
性を持つ感染に対して有効である。
の免疫モジュレート効果、ならびに退縮乳腺の正常な生
物学的過程に対する影響を持つ。本発明は、哺乳類の退
縮乳腺における細菌の新規感染の定着を予防し、頻度を
減らす。さらに非授乳牛における現在の抗微生物治療に
対する補助として、本発明の方法は、有効性の増進、治
療投薬量の減少、及び残留薬剤の最少化に有用である。
さらに本発明の方法は、古典的抗微生物治療に対して耐
性を持つ感染に対して有効である。
【０００５】
【発明の概略】本発明は、初期授乳の間の、又は退縮乳
腺を持つ（非授乳牛治療）動物の乳腺炎を、非授乳牛期
としても知られる該期間の牛にサイトカインを投与する
ことにより予防又は治療することに関する。Ｓ．ａｕｒ
ｅｕｓなどの感染源を原因とする乳腺炎に感染したすべ
ての動物が、本発明の方法により利益を得るが、牛、羊
及び山羊は牛乳生産に最も多く用いられ、この治療によ
り利益を得ることが認められている。
腺を持つ（非授乳牛治療）動物の乳腺炎を、非授乳牛期
としても知られる該期間の牛にサイトカインを投与する
ことにより予防又は治療することに関する。Ｓ．ａｕｒ
ｅｕｓなどの感染源を原因とする乳腺炎に感染したすべ
ての動物が、本発明の方法により利益を得るが、牛、羊
及び山羊は牛乳生産に最も多く用いられ、この治療によ
り利益を得ることが認められている。
【０００６】本発明の好ましい方法は、標的組織に直接
（乳内）又は非経口的に（粘膜内、又は皮下）注射した
場合に温血動物などの動物の生物応答を引き出すのに十
分な量の種々のサイトカイン又はサイトカイン誘導物質
と組み合わせた製薬上許容できるキャリヤーの投与を含
む。さらに本発明で有用な代表的サイトカインには、イ
ンターロイキン（インターロイキン１から１２）、イン
ターフェロン、コロニー賦活因子、例えば顆粒球コロニ
ー賦活因子、マクロファージコロニー賦活因子又は顆粒
球マクロファージコロニー賦活因子、繊維芽細胞成長因
子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小板誘導
成長因子又は腫瘍壊死因子が含まれる。さらに、上記化
合物の変異体、ペプチド同等物、ならびにその誘導物質
も本発明の範囲内に含まれるものとする。上記化合物の
組み合わせも、本文に記載の感染症の治療に有効である
ことがわかっている。牛、山羊又は羊の場合、化合物
は、乳腺の乳頭管を通して直接注射することもできる。
治療は、繰り返すことができ、特に授乳の開始直前に行
うことができる。
（乳内）又は非経口的に（粘膜内、又は皮下）注射した
場合に温血動物などの動物の生物応答を引き出すのに十
分な量の種々のサイトカイン又はサイトカイン誘導物質
と組み合わせた製薬上許容できるキャリヤーの投与を含
む。さらに本発明で有用な代表的サイトカインには、イ
ンターロイキン（インターロイキン１から１２）、イン
ターフェロン、コロニー賦活因子、例えば顆粒球コロニ
ー賦活因子、マクロファージコロニー賦活因子又は顆粒
球マクロファージコロニー賦活因子、繊維芽細胞成長因
子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小板誘導
成長因子又は腫瘍壊死因子が含まれる。さらに、上記化
合物の変異体、ペプチド同等物、ならびにその誘導物質
も本発明の範囲内に含まれるものとする。上記化合物の
組み合わせも、本文に記載の感染症の治療に有効である
ことがわかっている。牛、山羊又は羊の場合、化合物
は、乳腺の乳頭管を通して直接注射することもできる。
治療は、繰り返すことができ、特に授乳の開始直前に行
うことができる。
【０００７】従って、非授乳牛期間、授乳初期及び／又
は退縮乳腺の間の温血動物の乳腺炎感染の治療又は予防
法の提供が本発明の目的である。該病気の治療又は予防
のための組成物の提供も、本発明の別の目的である。イ
ンターロイキン−２及び／又は顆粒球マクロファージコ
ロニー賦活因子が、本発明の組成物中に含んで供給す
る、有用なサイトカインである。
は退縮乳腺の間の温血動物の乳腺炎感染の治療又は予防
法の提供が本発明の目的である。該病気の治療又は予防
のための組成物の提供も、本発明の別の目的である。イ
ンターロイキン−２及び／又は顆粒球マクロファージコ
ロニー賦活因子が、本発明の組成物中に含んで供給す
る、有用なサイトカインである。
【０００８】これらの、及び本発明の他の目的を、以下
の本発明の記載におけるより詳細な実施例にて開示す
る。これらの実施例は、説明のためであり、本発明の制
限のためではない。
の本発明の記載におけるより詳細な実施例にて開示す
る。これらの実施例は、説明のためであり、本発明の制
限のためではない。
【０００９】
【実施例】実施例１ 乳内注射に対するサイトカインの投薬量応答及び生物応
答 ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２は両方共、投薬
量と相関的に体細胞の乳汁中への浸潤を引き起こすが、
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦは、有意な化学誘因活性を示さな
い、図１。ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２の最
低有効投薬量及び最高許容投薬量は、それぞれ０．５ｍ
ｇから１０００ｍｇ、及び０．５ｍｇから３０ｍｇであ
るが、最高５ｍｇのｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦの乳内注射で
も、乳腺への細胞の有意な流入は引き出せない。これら
の投薬量は、体細胞の量的誘導の指針であるが、重要な
利益となる質的変化は、より低い投薬量で誘導すること
ができる。化学誘因物質としてのｒ−ＢｏＩＬ−１に関
する特異的生物活性は、ｒ−ＢｏＩＬ−２より約１０，
０００倍大きいが、試験管内特異的生物活性は、同等で
ある。乳汁中の活性ＩＬ−２阻害剤又は生物学的安定性
の減少により、この矛盾は説明される。最大許容投薬量
を用いたｒ−ＢｏＩＬ−１注射後の細胞の極大数は、ｒ
−ＢｏＩＬ−２より４−５倍大きい。乳腺へのＰＭＮ移
動の速度論に関して、移動は、ｒ−ＢｏＩＬ−２注射の
場合よりｒ−ＢｏＩＬ−１注射の場合の方が投薬量に依
存して８−２４時間早く起こる。ｒ−ＢｏＩＬ−１又は
ｒ−ＢｏＩＬ−２注射後の主な細胞型は、ＰＭＮであ
る。
答 ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２は両方共、投薬
量と相関的に体細胞の乳汁中への浸潤を引き起こすが、
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦは、有意な化学誘因活性を示さな
い、図１。ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２の最
低有効投薬量及び最高許容投薬量は、それぞれ０．５ｍ
ｇから１０００ｍｇ、及び０．５ｍｇから３０ｍｇであ
るが、最高５ｍｇのｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦの乳内注射で
も、乳腺への細胞の有意な流入は引き出せない。これら
の投薬量は、体細胞の量的誘導の指針であるが、重要な
利益となる質的変化は、より低い投薬量で誘導すること
ができる。化学誘因物質としてのｒ−ＢｏＩＬ−１に関
する特異的生物活性は、ｒ−ＢｏＩＬ−２より約１０，
０００倍大きいが、試験管内特異的生物活性は、同等で
ある。乳汁中の活性ＩＬ−２阻害剤又は生物学的安定性
の減少により、この矛盾は説明される。最大許容投薬量
を用いたｒ−ＢｏＩＬ−１注射後の細胞の極大数は、ｒ
−ＢｏＩＬ−２より４−５倍大きい。乳腺へのＰＭＮ移
動の速度論に関して、移動は、ｒ−ＢｏＩＬ−２注射の
場合よりｒ−ＢｏＩＬ−１注射の場合の方が投薬量に依
存して８−２４時間早く起こる。ｒ−ＢｏＩＬ−１又は
ｒ−ＢｏＩＬ−２注射後の主な細胞型は、ＰＭＮであ
る。
【００１０】サイトカイン注射後の乳汁ＰＭＮの量的変
化の他に、質的変化（活性化）も観察される。ｒ−Ｂｏ
ＩＬ−１は、最初の１６時間で処理前のＰＭＮの数の１
５０倍の増加を示し、４０時間で２０倍に減少し、１１
２時間までに正常な量に戻る、図２Ａ。ホルボールエス
テル刺激による誘導超酸化物は、常在性ＰＭＮよりかな
り増加する、図２Ｃ。乳汁の常在性ＰＭＮからの誘導超
酸化物は、かなり阻害され、同一の動物からの抹消血Ｐ
ＭＮからの誘導超酸化物のわずか５％である。食作用
は、乳内ｒ−ＢｏＩＬ−１投与により影響されず、図２
Ｂ、おそらく補充ＰＭＮが部分的にのみ活性化又は感作
されると思われる。
化の他に、質的変化（活性化）も観察される。ｒ−Ｂｏ
ＩＬ−１は、最初の１６時間で処理前のＰＭＮの数の１
５０倍の増加を示し、４０時間で２０倍に減少し、１１
２時間までに正常な量に戻る、図２Ａ。ホルボールエス
テル刺激による誘導超酸化物は、常在性ＰＭＮよりかな
り増加する、図２Ｃ。乳汁の常在性ＰＭＮからの誘導超
酸化物は、かなり阻害され、同一の動物からの抹消血Ｐ
ＭＮからの誘導超酸化物のわずか５％である。食作用
は、乳内ｒ−ＢｏＩＬ−１投与により影響されず、図２
Ｂ、おそらく補充ＰＭＮが部分的にのみ活性化又は感作
されると思われる。
【００１１】ｒ−ＢｏＩＬ−２も乳汁ＰＭＮの量的増加
を引き出し、図２Ｄ、２ｍｇの投薬量の場合７２時間後
に標準レベルに減少する。ｒ−ＢｏＩＬ−１投与の場合
と同様に、誘導超酸化物は、常在性ＰＭＮよりかなり増
加し、図２Ｆ、試料採取後９６時間を通じて残る。食作
用は、４０−６４時間以内に常在性ＰＭＮより２−３倍
に増加し、１１２時間までにパーセント食作用は次第に
減少するが、まだ処理前より上である、図２Ｅ。食細胞
当たりのビーズの摂取の平均数も、活性化により増加す
る。体細胞のカウント数と比較した極大食細胞活動の遅
延は、活性化及び化学誘因が明確に調節されていること
を示唆している。
を引き出し、図２Ｄ、２ｍｇの投薬量の場合７２時間後
に標準レベルに減少する。ｒ−ＢｏＩＬ−１投与の場合
と同様に、誘導超酸化物は、常在性ＰＭＮよりかなり増
加し、図２Ｆ、試料採取後９６時間を通じて残る。食作
用は、４０−６４時間以内に常在性ＰＭＮより２−３倍
に増加し、１１２時間までにパーセント食作用は次第に
減少するが、まだ処理前より上である、図２Ｅ。食細胞
当たりのビーズの摂取の平均数も、活性化により増加す
る。体細胞のカウント数と比較した極大食細胞活動の遅
延は、活性化及び化学誘因が明確に調節されていること
を示唆している。
【００１２】ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦは、５ｍｇの乳内投
薬量の場合でさえ乳汁ＰＭＮの有意な量的増加を引き出
さない、図２Ｇ。しかし誘導超酸化物生産により測定す
る生物活性は、常在性ＰＭＮより増加する、図２Ｉ。さ
らに、食作用を行う細胞のパーセントは、増加する、図
２Ｈ。食作用の増加は、最高１１２時間、注射前以上の
レベルに維持される。
薬量の場合でさえ乳汁ＰＭＮの有意な量的増加を引き出
さない、図２Ｇ。しかし誘導超酸化物生産により測定す
る生物活性は、常在性ＰＭＮより増加する、図２Ｉ。さ
らに、食作用を行う細胞のパーセントは、増加する、図
２Ｈ。食作用の増加は、最高１１２時間、注射前以上の
レベルに維持される。
【００１３】実施例２ 乳内注射及び筋肉内注射の両方により酪農牛乳生産の生
体内測定も行う。牛から朝夕、搾乳し、牛乳を秤量し、
１日当たりのキログラムを記録する。牛１頭当たりのＩ
Ｌ−２の合計投薬量は、２−９６ｍｇの範囲である。Ｉ
Ｌ−２を１回で注射するか、又は多数回で注射するかが
個々の動物の牛乳生産に与える影響は、１日当たりに投
与するｒ−ＢｏＩＬ−２の合計投薬量に基づいて異な
る、図３Ａ（乳内）。高投薬量の動物（１３．５ｍｇ）
では、３回目の注射までに生産が３０−４０％減少する
が、４．５ｍｇ投薬量の場合はわずか１２％の減少しか
観察されない（０時間又は標準牛と統計的に差がな
い）。合計投薬量が４．５ｍｇ以下の場合、牛乳生産に
対する統計的に有意な影響は観察されない。これは、乳
腺の分泌上皮をサイトカインにより生理学的に非−分泌
の状態に誘導することができることを示唆している。こ
の誘導は、初期授乳の間に必要な形態学的変化を助ける
ために非常に重要で、防衛機構を促進する。２．５μｇ
／ｋｇ体重／日でｒ−ＢｏＩＬ−２を５日間筋肉内注射
した場合も、牛乳生産に対する同様の影響が観察され
る、図３Ｂ（筋肉内）。
体内測定も行う。牛から朝夕、搾乳し、牛乳を秤量し、
１日当たりのキログラムを記録する。牛１頭当たりのＩ
Ｌ−２の合計投薬量は、２−９６ｍｇの範囲である。Ｉ
Ｌ−２を１回で注射するか、又は多数回で注射するかが
個々の動物の牛乳生産に与える影響は、１日当たりに投
与するｒ−ＢｏＩＬ−２の合計投薬量に基づいて異な
る、図３Ａ（乳内）。高投薬量の動物（１３．５ｍｇ）
では、３回目の注射までに生産が３０−４０％減少する
が、４．５ｍｇ投薬量の場合はわずか１２％の減少しか
観察されない（０時間又は標準牛と統計的に差がな
い）。合計投薬量が４．５ｍｇ以下の場合、牛乳生産に
対する統計的に有意な影響は観察されない。これは、乳
腺の分泌上皮をサイトカインにより生理学的に非−分泌
の状態に誘導することができることを示唆している。こ
の誘導は、初期授乳の間に必要な形態学的変化を助ける
ために非常に重要で、防衛機構を促進する。２．５μｇ
／ｋｇ体重／日でｒ−ＢｏＩＬ−２を５日間筋肉内注射
した場合も、牛乳生産に対する同様の影響が観察され
る、図３Ｂ（筋肉内）。
【００１４】実施例３ 非授乳牛へのサイトカイン投与の薬物動態学 非授乳牛への１回の乳内注射後の、サイトカインの存在
を特別に調べるため、４頭の異なる牛からの５クォータ
ーに、ドライオフにて１ｍｇのｒ−ＢｏＩＬ−２を注射
する。非授乳乳腺は、１２時間毎にその内容物を搾乳し
ないので、非授乳乳腺に注射したｒ−ＢｏＩＬ−２の生
物活性の保持につき、７２時間かそれ以上後に調べるこ
とができる。１ｍｇのｒ−ＢｏＩＬ−２で処理した非授
乳牛クォーターからの分泌物を、非授乳牛処理から７
２，１４４及び２４０時間後に集める。牛乳の場合と同
様に、非授乳分泌試料の１：５０希釈液を作り、これら
の溶液をＢＴ−２を用いたバイオアッセイにより分析
し、媒体中で希釈したｒ−ＢｏＩＬ−２と比較する。図
４に示す通り、注射後７２時間で早くも、処理乳化腺で
ｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性（０．０２４ηｇ／ｍｌ）
は、検出されない。従ってサイトカインは、乳腺の防衛
機構に有益な長期間の変化を起こさせ、それが乳腺中の
生物活性の検出の制限時間を大きく越えている。
を特別に調べるため、４頭の異なる牛からの５クォータ
ーに、ドライオフにて１ｍｇのｒ−ＢｏＩＬ−２を注射
する。非授乳乳腺は、１２時間毎にその内容物を搾乳し
ないので、非授乳乳腺に注射したｒ−ＢｏＩＬ−２の生
物活性の保持につき、７２時間かそれ以上後に調べるこ
とができる。１ｍｇのｒ−ＢｏＩＬ−２で処理した非授
乳牛クォーターからの分泌物を、非授乳牛処理から７
２，１４４及び２４０時間後に集める。牛乳の場合と同
様に、非授乳分泌試料の１：５０希釈液を作り、これら
の溶液をＢＴ−２を用いたバイオアッセイにより分析
し、媒体中で希釈したｒ−ＢｏＩＬ−２と比較する。図
４に示す通り、注射後７２時間で早くも、処理乳化腺で
ｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性（０．０２４ηｇ／ｍｌ）
は、検出されない。従ってサイトカインは、乳腺の防衛
機構に有益な長期間の変化を起こさせ、それが乳腺中の
生物活性の検出の制限時間を大きく越えている。
【００１５】実施例４ 授乳動物の乳腺炎の予防 乳汁ＰＭＮの量的及び質的変化の異なる誘導と関連し
て、宿主へのサイトカインの外からの投与が持つ有力な
利益を、予防及び治療に関する応用実験によりさらに明
らかにする。ｒ−ＢｏＩＬ−１、ｒ−ＢｏＩＬ−２及び
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦはすべて、その後のＳ．ａｕｒｅ
ｕｓの攻撃から宿主を保護することができる、表１。
Ｓ．ａｕｒｅｕｓの攻撃の２４時間前に投与すると、ｒ
−ＢｏＩＬ−１の保護効果が最も有効である。この最大
保護は、このサイトカインに対する量的最大生物応答と
関連する。Ｓ．ａｕｒｅｕｓの攻撃の４８時間前に投与
すると、ｒ−ＢｏＩＬ−２の保護効果が最も有効であ
る。これも、このサイトカインに対する量的最大生物応
答と関連しており、食作用及び誘導超酸化物の質的向上
も示している、図２Ｄ及び２Ｅ。ｒ−ＢｏＩＬ−１及び
ｒ−ＢｏＩＬ−２と異なり、ｒ−ＢｏＧＮ−ＣＳＦは、
乳汁ＰＭＮに小さな量的変化しか引き出さない。しかし
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦをＳ．ａｕｒｅｕｓの攻撃の２４
時間及び４８時間前に投与した両方の場合に、Ｓ．ａｕ
ｒｅｕｓからの優れた保護が観察される。両方の時間
共、処理乳腺の乳汁中の細胞の食作用能力が増加してい
ることが示されている、図２Ｈ。
て、宿主へのサイトカインの外からの投与が持つ有力な
利益を、予防及び治療に関する応用実験によりさらに明
らかにする。ｒ−ＢｏＩＬ−１、ｒ−ＢｏＩＬ−２及び
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦはすべて、その後のＳ．ａｕｒｅ
ｕｓの攻撃から宿主を保護することができる、表１。
Ｓ．ａｕｒｅｕｓの攻撃の２４時間前に投与すると、ｒ
−ＢｏＩＬ−１の保護効果が最も有効である。この最大
保護は、このサイトカインに対する量的最大生物応答と
関連する。Ｓ．ａｕｒｅｕｓの攻撃の４８時間前に投与
すると、ｒ−ＢｏＩＬ−２の保護効果が最も有効であ
る。これも、このサイトカインに対する量的最大生物応
答と関連しており、食作用及び誘導超酸化物の質的向上
も示している、図２Ｄ及び２Ｅ。ｒ−ＢｏＩＬ−１及び
ｒ−ＢｏＩＬ−２と異なり、ｒ−ＢｏＧＮ−ＣＳＦは、
乳汁ＰＭＮに小さな量的変化しか引き出さない。しかし
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦをＳ．ａｕｒｅｕｓの攻撃の２４
時間及び４８時間前に投与した両方の場合に、Ｓ．ａｕ
ｒｅｕｓからの優れた保護が観察される。両方の時間
共、処理乳腺の乳汁中の細胞の食作用能力が増加してい
ることが示されている、図２Ｈ。
【００１６】
【表１】 表１ 組み替え牛サイトカインによるＳ．ａｕｒｅｕｓ乳腺炎の予防 処理1 乳腺2 投薬量 3 投与4 ％感染 5 ％抑制 6 標準＊ １０ − − １００ ０ ＩＬ−１ １０ １μｇ ０時間 １３ ８７ １０ 〃 −２４時間 ０ １００ １０ 〃 −４８時間 ２２ ７８ ＩＬ−２ １０ １ｍｇ ０時間 ７７ ２３ 〃 −２４時間 １１ ８９ １０ 〃 −４８時間 ３７ ６３ ────────────────── 標準＊ １０ − − ８２ ０ ＧＭ−ＣＳＦ １０ １ｍｇ −２４時間 ２０ ７６ １０ 〃 −４８時間 ２０ ７６ ───────────────────────────── １ 午後の搾乳後１回の乳内注射による投与。２２頭の
異なる授乳ホルスタイン酪農牛からの合計１００の乳腺
を処理。
異なる授乳ホルスタイン酪農牛からの合計１００の乳腺
を処理。
【００１７】２ すべての乳腺は、最初の注射前の午前
の搾乳後、５回連続して試料が細菌を含まない。
の搾乳後、５回連続して試料が細菌を含まない。
【００１８】３ 蛋白質の質量として合計投薬量を示
す。ｒ−ＢｏＩＬ−１、ｒ−ＢｏＩＬ−２及びｒ−Ｂｏ
ＧＭ−ＣＳＦの生物活性は、それぞれ３２，０００Ｕｎ
ｉｔｓ／μｇ、２２，０００Ｕｎｉｔｓ／μｇ及び３
８，０００Ｕｎｉｔｓ／μｇである。
す。ｒ−ＢｏＩＬ−１、ｒ−ＢｏＩＬ−２及びｒ−Ｂｏ
ＧＭ−ＣＳＦの生物活性は、それぞれ３２，０００Ｕｎ
ｉｔｓ／μｇ、２２，０００Ｕｎｉｔｓ／μｇ及び３
８，０００Ｕｎｉｔｓ／μｇである。
【００１９】４ サイトカインは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓと
同時に、０、３０−２００ＣＦＵのＳ．ａｕｒｅｕｓの
攻撃の２４又は４８時間前に投与した。
同時に、０、３０−２００ＣＦＵのＳ．ａｕｒｅｕｓの
攻撃の２４又は４８時間前に投与した。
【００２０】５ Ｓ．ａｕｒｅｕｓの乳内攻撃後１４日
間、乳汁試料がＳ．ａｕｒｅｕｓを含まないままの場合
に、個々のクォーターが治癒したと考える。
間、乳汁試料がＳ．ａｕｒｅｕｓを含まないままの場合
に、個々のクォーターが治癒したと考える。
【００２１】６ ％抑制＝（１−｛治療後の感染％／標
準クォーターの感染％）｝ｘ１００ ＊ 標準１のクォーターは、２５０ＣＦＵのＳ．ａｕｒ
ｅｕｓで攻撃。標準２のクオーターは、３０ＣＦＵの
Ｓ．ａｕｒｅｕｓで攻撃。
準クォーターの感染％）｝ｘ１００ ＊ 標準１のクォーターは、２５０ＣＦＵのＳ．ａｕｒ
ｅｕｓで攻撃。標準２のクオーターは、３０ＣＦＵの
Ｓ．ａｕｒｅｕｓで攻撃。
【００２２】実施例５ 定着した感染の、サイトカインを用いた治療 感染した乳腺も、ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−
２の乳内注射により有効に治療することができる、表２
を参照。両方のサイトカインは、投薬量応答性治療効果
を有する。ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２は、
投薬量を１回で投与するより連続３回の搾乳の間に投与
すると、最も有効である。実際に感染症が治癒したクォ
ーター（ＣＵＲＥ）のパーセントと比較した、１回以上
の搾乳の間、感染を清浄化していたクォーター（ＲＥＳ
ＰＯＮＤＩＮＧ）のパーセントは、宿主細胞が細菌の絶
滅に失敗した尺度となる。再発率は、ｒ−ＢｏＩＬ−２
が最も高い（１０ｍｇ投薬量ｘ３の結合再発率は、４０
％）。ｒ−ＢｏＩＬ−１の場合の高い再発率は、多くの
宿主細胞がＳ．ａｕｒｅｕｓを実際に摂取することがで
きるが、これらの細胞は、細菌の絶滅に有効でないこと
を示唆している。ｒ−ＢｏＩＬ−１の場合の再発率（５
４％）は、Ｎａ（ナトリウム）セファピリン処理（５７
％）の場合と同等であるが、ｒ−ＢｏＩＬ−１の場合の
再発率（５４％）は、最終的治癒率がＣｅｆａ−Ｌａｋ
R程有効でないとは言え、Ｃｅｆａ−ＬａｋR処理の場合
（１６％）により近い。これは、乳汁中の食細胞の活性
化が感染源の有効な治療のために重要な要素であること
を示唆している。さらに、ｒ−ＢｏＩＬ−２及びｒ−Ｂ
ｏＧＭ−ＣＳＦが示す通り宿主細胞の活性化が有効な
ら、ｒ−ＢｏＩＬ−１又は抗生物質との結合治療が有用
である。
２の乳内注射により有効に治療することができる、表２
を参照。両方のサイトカインは、投薬量応答性治療効果
を有する。ｒ−ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２は、
投薬量を１回で投与するより連続３回の搾乳の間に投与
すると、最も有効である。実際に感染症が治癒したクォ
ーター（ＣＵＲＥ）のパーセントと比較した、１回以上
の搾乳の間、感染を清浄化していたクォーター（ＲＥＳ
ＰＯＮＤＩＮＧ）のパーセントは、宿主細胞が細菌の絶
滅に失敗した尺度となる。再発率は、ｒ−ＢｏＩＬ−２
が最も高い（１０ｍｇ投薬量ｘ３の結合再発率は、４０
％）。ｒ−ＢｏＩＬ−１の場合の高い再発率は、多くの
宿主細胞がＳ．ａｕｒｅｕｓを実際に摂取することがで
きるが、これらの細胞は、細菌の絶滅に有効でないこと
を示唆している。ｒ−ＢｏＩＬ−１の場合の再発率（５
４％）は、Ｎａ（ナトリウム）セファピリン処理（５７
％）の場合と同等であるが、ｒ−ＢｏＩＬ−１の場合の
再発率（５４％）は、最終的治癒率がＣｅｆａ−Ｌａｋ
R程有効でないとは言え、Ｃｅｆａ−ＬａｋR処理の場合
（１６％）により近い。これは、乳汁中の食細胞の活性
化が感染源の有効な治療のために重要な要素であること
を示唆している。さらに、ｒ−ＢｏＩＬ−２及びｒ−Ｂ
ｏＧＭ−ＣＳＦが示す通り宿主細胞の活性化が有効な
ら、ｒ−ＢｏＩＬ−１又は抗生物質との結合治療が有用
である。
【００２３】乳腺炎に感染している間の、ＰＭＮの生物
活性及びＰＭＮの数は、動物内で、及びそれぞれ個別の
感染乳腺において異なる。明らかに食作用の活性化は、
細菌の有効な除去に必要であるが、食細胞の殺細菌性成
分の適した活性化がないと不十分である。そのような、
殺細菌活性化を伴わない食作用の活性化の分離が、実際
に前記の再感染の原因となる。この生物活性は、組み替
え同族サイトカインの、標的組織への局所的生体内投与
により、正確に調節することができる。
活性及びＰＭＮの数は、動物内で、及びそれぞれ個別の
感染乳腺において異なる。明らかに食作用の活性化は、
細菌の有効な除去に必要であるが、食細胞の殺細菌性成
分の適した活性化がないと不十分である。そのような、
殺細菌活性化を伴わない食作用の活性化の分離が、実際
に前記の再感染の原因となる。この生物活性は、組み替
え同族サイトカインの、標的組織への局所的生体内投与
により、正確に調節することができる。
【００２４】
【表２】 表２ 乳腺炎治療薬としての組み替え牛サイトカインの効力処理1 投薬量 2 間隔 ％応答 3 ％治癒 4 ％再発 5 ＩＬ−１（１回） １０μｇ − １１ １１ ０ ２００μｇ − ２０ ０ １００ ６００μｇ − １０ ０ １００ ＩＬ−１（多数回） １０μｇ ２４時間 ７７ ８ ９０ 〃 ４８時間 ３９ ０ １００ ２００μｇ ２４時間 ７９ ７ ９１ 〃 ４８時間 ９４ ２９ ５４ ─────────────────────── ＩＬ−２（１回） ２μｇ − ０ ０ − １０μｇ − ２０ ０ １００ ３０μｇ − １０ １０ ０ ＩＬ−２（多数回） ２ｍｇ ２４時間 ５５ ９ ８４ １０ｍｇ ４８時間 ３３ ８ ７６ １０ｍｇ ２４時間 ５８ ２５ ５７ 〃 ４８時間 ３３ ２５ ２３ ─────────────────────── Ｎａセファピリン ２００ｍｇ １２時間 ８６ ４２ ５１ Ｃｅｆａ−ＬａｋR ２００ｍｇ １２時間 ９２ ７７ １６ ─────────────────────── １ 処理の２−３週間前にＳ．ａｕｒｅｕｓに感染させ
る。１−３回の連続乳内注射により、午前又は午後の搾
乳後に治療薬を投与する。２８頭の異なる授乳ホルスタ
イン酪農牛からの合計１２０の乳腺を用いる。組み替え
牛インターロイキン−１（ＩＬ−１）及びインターロイ
キン−２（ＩＬ−２）は、ＩＭＭＵＮＥＸＣｏｒｐ．，
Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡから入手する。Ｎａセファピリン
は、ＰＢＳ中で調製し；Ｃｅｆａ−ＬａｋR（Ｂｒｉｓ
ｔｏｌ Ｍｅｙｅｒｓ）は、包装に挿入された指示に従
って使用する。
る。１−３回の連続乳内注射により、午前又は午後の搾
乳後に治療薬を投与する。２８頭の異なる授乳ホルスタ
イン酪農牛からの合計１２０の乳腺を用いる。組み替え
牛インターロイキン−１（ＩＬ−１）及びインターロイ
キン−２（ＩＬ−２）は、ＩＭＭＵＮＥＸＣｏｒｐ．，
Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡから入手する。Ｎａセファピリン
は、ＰＢＳ中で調製し；Ｃｅｆａ−ＬａｋR（Ｂｒｉｓ
ｔｏｌ Ｍｅｙｅｒｓ）は、包装に挿入された指示に従
って使用する。
【００２５】２ 示した間隔で午後の搾乳後に乳頭管を
通してサイトカインを乳内注射する。合計投薬量を、合
計体積１０ｍｌの無菌ＰＢＳ中の形態で投与する。ｒ−
ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性は、それ
ぞれ３２，０００Ｕｎｉｔｓ／μｇ及び２２，０００Ｕ
ｎｉｔｓ／μｇである。１回の注射当たり２００ｍｇの
Ｎａセファピリン及びＣｅｆａ−ＬａｋRの全投薬量
は、連続した午後及び午前の搾乳後に記載の方法に従っ
て投与する。
通してサイトカインを乳内注射する。合計投薬量を、合
計体積１０ｍｌの無菌ＰＢＳ中の形態で投与する。ｒ−
ＢｏＩＬ−１及びｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性は、それ
ぞれ３２，０００Ｕｎｉｔｓ／μｇ及び２２，０００Ｕ
ｎｉｔｓ／μｇである。１回の注射当たり２００ｍｇの
Ｎａセファピリン及びＣｅｆａ−ＬａｋRの全投薬量
は、連続した午後及び午前の搾乳後に記載の方法に従っ
て投与する。
【００２６】３ ％応答＝一時的（＞１搾乳）にＳ．ａ
ｕｒｅｕｓを含まないクォーター／処理したクォーター
の合計数 ４ ％治癒クォーター＝感染を清浄化し、Ｓ．ａｕｒｅ
ｕｓを含まない状態を保っているクォーターの数／処理
したクォーターの合計数。治療後１４日間の監視期間中
で、連続した３回の午前の搾乳から＞１ＣＦＵ、又は連
続した２回で＞２０ＣＦＵが存在した場合に感染が再発
したと考える。
ｕｒｅｕｓを含まないクォーター／処理したクォーター
の合計数 ４ ％治癒クォーター＝感染を清浄化し、Ｓ．ａｕｒｅ
ｕｓを含まない状態を保っているクォーターの数／処理
したクォーターの合計数。治療後１４日間の監視期間中
で、連続した３回の午前の搾乳から＞１ＣＦＵ、又は連
続した２回で＞２０ＣＦＵが存在した場合に感染が再発
したと考える。
【００２７】 ５ ％再発＝［１−｛％応答／％治癒｝］Ｘ１００実施例６ サイトカイン処理後の非授乳牛分泌物からの細胞の食細
胞活動 Ｃｅｆａ−ＤｒｉRとＩＬ−２又はＣｅｆａ−ＤｒｉRの
みで処理した後３日目及び６日目に、乳腺洗浄液から体
細胞を単離する。細胞を蛍光ラテックス微小球と共にイ
ンキュベートし、ビーズに対する食作用能力に関して流
動細胞計測器で分析する。図５は、両治療グループで感
染クォーター中の食細胞活動が３日目に比べて６日目に
増加していることを示しており、３日後には、まだ生物
活性ＩＬ−２が検出されない、図４。対照的に非感染ク
ォーターでは、両治療グループで３日目に比べて６日目
に食細胞活動が減少している。このデータは、ドライオ
フの時点で感染が定着した乳腺からの細胞は、ドライオ
フの時点で感染が清浄化された乳腺からの細胞より、高
度の食細胞活動を維持していることを示唆している。
又、ＩＬ−２を用いた治療は、非授乳乳腺の細胞の食細
胞活動を増進するようである。
胞活動 Ｃｅｆａ−ＤｒｉRとＩＬ−２又はＣｅｆａ−ＤｒｉRの
みで処理した後３日目及び６日目に、乳腺洗浄液から体
細胞を単離する。細胞を蛍光ラテックス微小球と共にイ
ンキュベートし、ビーズに対する食作用能力に関して流
動細胞計測器で分析する。図５は、両治療グループで感
染クォーター中の食細胞活動が３日目に比べて６日目に
増加していることを示しており、３日後には、まだ生物
活性ＩＬ−２が検出されない、図４。対照的に非感染ク
ォーターでは、両治療グループで３日目に比べて６日目
に食細胞活動が減少している。このデータは、ドライオ
フの時点で感染が定着した乳腺からの細胞は、ドライオ
フの時点で感染が清浄化された乳腺からの細胞より、高
度の食細胞活動を維持していることを示唆している。
又、ＩＬ−２を用いた治療は、非授乳乳腺の細胞の食細
胞活動を増進するようである。
【００２８】実施例７ サイトカインを用いた治療によるノカルジア症の予防 １０頭の異なるホルスタイン酪農牛からの１７の乳クォ
ーターの２つのグループを選び、日常的非授乳治療Ｃｅ
ｆａ−ＤｒｉR、又は非授乳牛治療と１ｍｇの組み替え
牛インターロイキン−２（ＩＬ−２）処理を行う。ノカ
ルジア症の抗生物質治療は、有効でないことが示されて
いる。Ｃｅｆａ−ＤｒｉR処理クォーターは、ブイヨン
浸漬による攻撃後、７２％の乳腺がノルカジアに感染す
る、表３。しかし、非授乳牛治療が組み替えＩＬ−２を
含む場合、５３％の乳腺しか感染しない。
ーターの２つのグループを選び、日常的非授乳治療Ｃｅ
ｆａ−ＤｒｉR、又は非授乳牛治療と１ｍｇの組み替え
牛インターロイキン−２（ＩＬ−２）処理を行う。ノカ
ルジア症の抗生物質治療は、有効でないことが示されて
いる。Ｃｅｆａ−ＤｒｉR処理クォーターは、ブイヨン
浸漬による攻撃後、７２％の乳腺がノルカジアに感染す
る、表３。しかし、非授乳牛治療が組み替えＩＬ−２を
含む場合、５３％の乳腺しか感染しない。
【００２９】
【表３】 表３ ｒ−ＢｏＩＬ−２による非授乳牛におけるノルカジア症の予防 感染クォーターのパーセント1 ＩＬ−２ Ｄ／Ｏ＋ Ｄ／Ｏ＋処理2 乳腺数 投薬量 3 ドライオフ １０日 4 ２８日 Ｃｅｆａ−ＤｒｉR １７ − ０ ２４ ７２ Ｃｅｆａ−ＤｒｉR ＋ｒ−ＢｏＩＬ−２ １７ １ｍｇ ０ ６ ５１ ─────────────────────────── １ 各クォーターを、ドライオフにて１０8ｃｆｕのノ
ルカジアのブイヨン中に浸漬する。その後すべての乳頭
をヨージジン溶液に浸漬し、それぞれの非授乳牛治療に
より処理する。
ルカジアのブイヨン中に浸漬する。その後すべての乳頭
をヨージジン溶液に浸漬し、それぞれの非授乳牛治療に
より処理する。
【００３０】２ 最後の午後の搾乳後に１回の乳内注射
を行う。非授乳期に入る１０頭の異なるホルスタイン酪
農牛からの合計３４の乳腺を処理する。
を行う。非授乳期に入る１０頭の異なるホルスタイン酪
農牛からの合計３４の乳腺を処理する。
【００３１】３ 蛋白質の質量として合計投薬量を示
す。ｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性は、２２，０００Ｕｎ
ｉｔｓ／μｇである。ｒ−ＢｏＩＬ−２の注射は、Ｃｅ
ｆａ−ＤｒｉRと同時に行う。
す。ｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性は、２２，０００Ｕｎ
ｉｔｓ／μｇである。ｒ−ＢｏＩＬ−２の注射は、Ｃｅ
ｆａ−ＤｒｉRと同時に行う。
【００３２】４ すべてのクォーターを示した時点では
ぎ取り、その非授乳分泌物をノルカジアの存在に関して
プレート化する。
ぎ取り、その非授乳分泌物をノルカジアの存在に関して
プレート化する。
【００３３】実施例８ 乳腺退縮の初期における黄色ブドウ球菌の新規感染の予
防 ６頭の異なるホルスタイン酪農牛からの１２のＳ．ａｕ
ｒｅｕｓ感染乳クォーターの２つのグループを選び、日
常的非授乳治療Ｃｅｆａ−ＤｒｉR、又は非授乳牛治療
と１ｍｇの組み替え牛インターロイキン−２（ＩＬ−
２）処理を行う。トライングオフにおける処理後８−１
０日で、非授乳分泌試料を採取し、残留抗生物質又は細
菌の存在に関して調べる。その後すべてのクォーターを
５０−２５０ＣＦＵのＳ．ａｕｒｅｕｓで再攻撃し、動
物に子を生ませる。授乳の開始時に、連続した３回の搾
乳において試料を採取し、Ｓ．ａｕｒｅｕｓの存在に関
して調べる。Ｃｅｆａ−ＤｒｉRのみで処理したクォー
ターはすべて感染していることが見いだされる。しかし
Ｃｅｆａ−ＤｒｉRとＩＬ−２で処理したクォーターの
４０％が授乳の開始時に感染していない、表４。
防 ６頭の異なるホルスタイン酪農牛からの１２のＳ．ａｕ
ｒｅｕｓ感染乳クォーターの２つのグループを選び、日
常的非授乳治療Ｃｅｆａ−ＤｒｉR、又は非授乳牛治療
と１ｍｇの組み替え牛インターロイキン−２（ＩＬ−
２）処理を行う。トライングオフにおける処理後８−１
０日で、非授乳分泌試料を採取し、残留抗生物質又は細
菌の存在に関して調べる。その後すべてのクォーターを
５０−２５０ＣＦＵのＳ．ａｕｒｅｕｓで再攻撃し、動
物に子を生ませる。授乳の開始時に、連続した３回の搾
乳において試料を採取し、Ｓ．ａｕｒｅｕｓの存在に関
して調べる。Ｃｅｆａ−ＤｒｉRのみで処理したクォー
ターはすべて感染していることが見いだされる。しかし
Ｃｅｆａ−ＤｒｉRとＩＬ−２で処理したクォーターの
４０％が授乳の開始時に感染していない、表４。
【００３４】
【表４】 表４ 非授乳期の攻撃後のＳ．ａｕｒｅｕｓ感染の、ｒ−ＢｏＩＬ−２による予防 感染クォーターのパーセント1 ＩＬ−２ Ｄ／Ｏ＋ カービン処理2 乳腺数 投薬量 3 ドライオフ １０日 4 グ後５日 Ｃｅｆａ−ＤｒｉR １０ − １００ ０ １００ Ｃｅｆａ−ＤｒｉR ＋ｒ−ＢｏＩＬ−２ １０ １ｍｇ １００ ０ ６０ ─────────────────────────── １ ドライングオフの前、最低２週間、すべてのクォー
ターを黄色ブドウ球菌（ニューボールド株３０５）に感
染させる。
ターを黄色ブドウ球菌（ニューボールド株３０５）に感
染させる。
【００３５】２ Ｃｅｆａ−ＤｒｉRの場合、最後の午
後の搾乳後、１回の乳内注射により投与する。ｒ−Ｂｏ
ＩＬ−２処理動物の場合、ｒ−ＢｏＩＬ−２を注射し、
その後Ｃｅｆａ−ＤｒｉRを投与する。非授乳期に入る
７頭の異なるホルスタイン酪農牛からの合計２０の乳腺
を処理する。
後の搾乳後、１回の乳内注射により投与する。ｒ−Ｂｏ
ＩＬ−２処理動物の場合、ｒ−ＢｏＩＬ−２を注射し、
その後Ｃｅｆａ−ＤｒｉRを投与する。非授乳期に入る
７頭の異なるホルスタイン酪農牛からの合計２０の乳腺
を処理する。
【００３６】３ 蛋白質の質量として合計投薬量を示
す。ｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性は、２２，０００Ｕｎ
ｉｔｓ／μｇである。
す。ｒ−ＢｏＩＬ−２の生物活性は、２２，０００Ｕｎ
ｉｔｓ／μｇである。
【００３７】４ １０日目にすべてのクォーターをはぎ
取り、その非授乳分泌物を、Ｓ．ａｕｒｅｕｓの存在に
関してプレート化する。
取り、その非授乳分泌物を、Ｓ．ａｕｒｅｕｓの存在に
関してプレート化する。
【００３８】５ すべてのクォーターを、カービング後
４０５日に２回試料採取し、乳汁をプレート化してＳ．
ａｕｒｅｕｓの存在を検出する。
４０５日に２回試料採取し、乳汁をプレート化してＳ．
ａｕｒｅｕｓの存在を検出する。
【００３９】実施例９ サイトカインを用いた非授乳牛治療の直後の授乳におけ
る牛乳生産の増加 非授乳牛治療後の可能な牛乳生産量へのｒ−ＢｏＩＬ−
２の効果も評価する。３頭の酪農牛につき、ｒ−ＢｏＩ
Ｌ−２処理前の授乳サイクル（第２又は第３授乳）の最
初の５日間の牛乳生産を、ｒ−ＢｏＩＬ−２処理直後の
授乳サイクル（第３又は第４授乳）の最初の５日間の牛
乳生産と比較する、図６。牛乳生産の阻害は見られず、
実際はｒ−ＢｏＩＬ−２処理後の授乳において８０％の
生産増加が観察される。
る牛乳生産の増加 非授乳牛治療後の可能な牛乳生産量へのｒ−ＢｏＩＬ−
２の効果も評価する。３頭の酪農牛につき、ｒ−ＢｏＩ
Ｌ−２処理前の授乳サイクル（第２又は第３授乳）の最
初の５日間の牛乳生産を、ｒ−ＢｏＩＬ−２処理直後の
授乳サイクル（第３又は第４授乳）の最初の５日間の牛
乳生産と比較する、図６。牛乳生産の阻害は見られず、
実際はｒ−ＢｏＩＬ−２処理後の授乳において８０％の
生産増加が観察される。
【００４０】本発明の主たる特徴及び態様は、以下の通
りである。
りである。
【００４１】１．温血動物の乳腺炎の治療又は予防法に
おいて、該方法が：授乳初期における該温血動物へのサ
イトカインの投与を含むことを特徴とする方法。
おいて、該方法が：授乳初期における該温血動物へのサ
イトカインの投与を含むことを特徴とする方法。
【００４２】２．温血動物の乳腺炎の治療又は予防法に
おいて、該方法が：該温血動物へのサイトカインの投与
を含み、該動物が退縮乳腺を持つことを特徴とする方
法。
おいて、該方法が：該温血動物へのサイトカインの投与
を含み、該動物が退縮乳腺を持つことを特徴とする方
法。
【００４３】３．第１項に記載の方法において、該動物
が牛、羊又は山羊であることを特徴とする方法。
が牛、羊又は山羊であることを特徴とする方法。
【００４４】４．第２項に記載の方法において、該動物
が牛、羊又は山羊であることを特徴とする方法。
が牛、羊又は山羊であることを特徴とする方法。
【００４５】５．第３項に記載の方法において、該サイ
トカインが食細胞機能又は免疫系を活性化することを特
徴とする方法。
トカインが食細胞機能又は免疫系を活性化することを特
徴とする方法。
【００４６】６．第４項に記載の方法において、該サイ
トカインが食細胞機能又は免疫系を活性化することを特
徴とする方法。
トカインが食細胞機能又は免疫系を活性化することを特
徴とする方法。
【００４７】７．第１項に記載の方法において、該サイ
トカインがインターロイキン−１から１２、インターフ
ェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細胞
成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小
板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又は
誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを特
徴とする方法。
トカインがインターロイキン−１から１２、インターフ
ェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細胞
成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小
板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又は
誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを特
徴とする方法。
【００４８】８．第２項に記載の方法において、該サイ
トカインがインターロイキン−１から１２、インターフ
ェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細胞
成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小
板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又は
誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを特
徴とする方法。
トカインがインターロイキン−１から１２、インターフ
ェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細胞
成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小
板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又は
誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを特
徴とする方法。
【００４９】９．第３項に記載の方法において、該サイ
トカインがインターロイキン−１から１２、インターフ
ェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細胞
成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小
板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又は
誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを特
徴とする方法。
トカインがインターロイキン−１から１２、インターフ
ェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細胞
成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血小
板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又は
誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを特
徴とする方法。
【００５０】１０．第４項に記載の方法において、該サ
イトカインがインターロイキン−１から１２、インター
フェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細
胞成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血
小板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又
は誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを
特徴とする方法。
イトカインがインターロイキン−１から１２、インター
フェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽細
胞成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、血
小板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物又
は誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであることを
特徴とする方法。
【００５１】１１．第７項に記載の方法において、該化
合物が、処理乳腺当たり０．０１ｍｇ−４０ｍｇの量の
インターロイキン−２であることを特徴とする方法。
合物が、処理乳腺当たり０．０１ｍｇ−４０ｍｇの量の
インターロイキン−２であることを特徴とする方法。
【００５２】１２．第８項に記載の方法において、該化
合物が、処理乳腺当たり０．０１ｍｇ−４０ｍｇの量の
インターロイキン−２又は処理乳腺当たり約０．５ｍｇ
から約５ｍｇの顆粒球マクロファージコロニー賦活因子
であることを特徴とする方法。
合物が、処理乳腺当たり０．０１ｍｇ−４０ｍｇの量の
インターロイキン−２又は処理乳腺当たり約０．５ｍｇ
から約５ｍｇの顆粒球マクロファージコロニー賦活因子
であることを特徴とする方法。
【００５３】１３．第１項に記載の方法において、さら
に：抗生物質と共にサイトカインを投与することを含む
ことを特徴とする方法。
に：抗生物質と共にサイトカインを投与することを含む
ことを特徴とする方法。
【００５４】１４．第２項に記載の方法において、さら
に：抗生物質と共にサイトカインを投与することを含む
ことを特徴とする方法。
に：抗生物質と共にサイトカインを投与することを含む
ことを特徴とする方法。
【００５５】１５．温血動物の非授乳期間に続く授乳時
に乳汁分泌量を増加させる方法において、該方法が：授
乳初期又は該動物が退縮乳腺を持っている期間に該温血
動物にサイトカインを投与することを含むことを特徴と
する方法。
に乳汁分泌量を増加させる方法において、該方法が：授
乳初期又は該動物が退縮乳腺を持っている期間に該温血
動物にサイトカインを投与することを含むことを特徴と
する方法。
【００５６】１６．第１５項に記載の方法において、該
温血動物が牛、羊又は山羊であることを特徴とする方
法。
温血動物が牛、羊又は山羊であることを特徴とする方
法。
【００５７】１７．第１６項に記載の方法において、該
サイトカインが該動物の食細胞機能又は免疫系を活性化
することを特徴とする方法。
サイトカインが該動物の食細胞機能又は免疫系を活性化
することを特徴とする方法。
【００５８】１８．第１７項に記載の方法において、該
サイトカインがインターロイキン−１から１２、インタ
ーフェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽
細胞成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、
血小板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物
又は誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであること
を特徴とする方法。
サイトカインがインターロイキン−１から１２、インタ
ーフェロン、腫瘍壊死因子、コロニー賦活因子、繊維芽
細胞成長因子、形質転換成長因子、血小板活性化因子、
血小板誘導成長因子、それらの変異体、ペプチド同等物
又は誘因物質、あるいはそれらの組み合わせであること
を特徴とする方法。
【００５９】１９．第１８項に記載の方法において、該
化合物が、処理乳腺当たり０．０１ｍｇ−４０ｍｇの量
のインターロイキン−２であることを特徴とする方法。
化合物が、処理乳腺当たり０．０１ｍｇ−４０ｍｇの量
のインターロイキン−２であることを特徴とする方法。
【００６０】２０．第１８項に記載の方法において、該
化合物が処理乳腺当たり約０．５ｍｇから約５５ｍｇの
量の顆粒球マクロファージコロニー賦活因子であること
を特徴とする方法。
化合物が処理乳腺当たり約０．５ｍｇから約５５ｍｇの
量の顆粒球マクロファージコロニー賦活因子であること
を特徴とする方法。
【図１】組み替えサイトカインの乳内注射に対する牛の
乳腺の投薬量応答を示すものである。ｒ−ＢｏＩＬ−１
（組み替え牛インターロイキン−１）の３１２．５μｇ
から０．５ｍｇまで（○─○）；４０ｍｇから０．１ｍ
ｇまでのｒ−ＢｏＩＬ−２（組み替え牛インターロイキ
ン−２）（□─□）；及び０．２ｍｇから５．０ｍｇま
でのｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（組み替え牛顆粒球マクロフ
ァージコロニー賦活因子）（●─●）の５種類の順次倍
希釈液の全投薬量を、正常に授乳中のホルスタイン酪農
牛からの３−４乳腺中に、時間０にて投与する。１グル
ープ当たり３−４、合計５４の乳腺クォーターに、朝の
搾乳後、乳頭管を通して種々の濃度の組み替え牛サイト
カインを注射する。ミルク試料を集め、生存体細胞の数
をＣｏｕｌｔｅｒRＺＭ上でＣ２５６Ｃｈａｎｎｅｌｙ
ｚｅｒを用いてカウントする。データを、ミルク１ｍｌ
当たりの体細胞数として表す。
乳腺の投薬量応答を示すものである。ｒ−ＢｏＩＬ−１
（組み替え牛インターロイキン−１）の３１２．５μｇ
から０．５ｍｇまで（○─○）；４０ｍｇから０．１ｍ
ｇまでのｒ−ＢｏＩＬ−２（組み替え牛インターロイキ
ン−２）（□─□）；及び０．２ｍｇから５．０ｍｇま
でのｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（組み替え牛顆粒球マクロフ
ァージコロニー賦活因子）（●─●）の５種類の順次倍
希釈液の全投薬量を、正常に授乳中のホルスタイン酪農
牛からの３−４乳腺中に、時間０にて投与する。１グル
ープ当たり３−４、合計５４の乳腺クォーターに、朝の
搾乳後、乳頭管を通して種々の濃度の組み替え牛サイト
カインを注射する。ミルク試料を集め、生存体細胞の数
をＣｏｕｌｔｅｒRＺＭ上でＣ２５６Ｃｈａｎｎｅｌｙ
ｚｅｒを用いてカウントする。データを、ミルク１ｍｌ
当たりの体細胞数として表す。
【図２】ｒ−ＢｏＩＬ−１又はｒ−ＢｏＩＬ−２を注射
した乳腺からの乳汁ＰＭＮの量及び質を示すものであ
る。正常な授乳ホルスタイン酪農牛からの、合計１２の
乳腺に、乳頭管を通して２００μｇのｒ−ＢｏＩＬ−
１；２ｍｇのｒ−ＢｏＩＬ−２；あるいは１ｍｇのｒ−
ＢｏＧＭ−ＣＳＦを注射する。ミルク試料を集め、生存
体細胞の数をＣｏｕｌｔｅｒRＺＭ上でＣ２５６Ｃｈａ
ｎｎｅｌｙｚｅｒを用いてカウントする。データを、ｒ
−ＢｏＩＬ−１（Ａ）；ｒ−ＢｏＩＬ−２（Ｄ）；又は
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（Ｇ）の注射後１６，４０，６４
及び８８時間のミルク１ｍｌ当たりの体細胞数として表
す。ｒ−ＢｏＩＬ−１（Ｂ）；ｒ−ＢｏＩＬ−２
（Ｅ）；又はｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（Ｈ）に関して、２
μの蛍光ビーズを摂取する細胞のパーセントを測定する
ことによる流動細胞計測法により、乳汁ＰＭＮ（多核細
胞）による食細胞活動の合計パーセントを定量的に測定
する。最初に全集団を前方光散乱によりゲートし、ＦＡ
ＬＳ及び９０o光散乱のみが多核細胞であると考える。
ｒ−ＢｏＩＬ−１（Ｃ）；ｒ−ＢｏＩＬ−２（Ｆ）；又
はｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（Ｉ）に関して、ＰＭＡ（５２
０ｎｇ）刺激の後の超酸化物の誘導も、全細胞シトクロ
ム−ｃ還元分析を用いて監視する。未処理乳汁からのＰ
ＭＮは、超酸化物の生産を誘導されないが、抹消血ＰＭ
Ｎは、５−１５ηＭ Ｏ2／分／１０7ＰＭＮの範囲で誘
導可能である。
した乳腺からの乳汁ＰＭＮの量及び質を示すものであ
る。正常な授乳ホルスタイン酪農牛からの、合計１２の
乳腺に、乳頭管を通して２００μｇのｒ−ＢｏＩＬ−
１；２ｍｇのｒ−ＢｏＩＬ−２；あるいは１ｍｇのｒ−
ＢｏＧＭ−ＣＳＦを注射する。ミルク試料を集め、生存
体細胞の数をＣｏｕｌｔｅｒRＺＭ上でＣ２５６Ｃｈａ
ｎｎｅｌｙｚｅｒを用いてカウントする。データを、ｒ
−ＢｏＩＬ−１（Ａ）；ｒ−ＢｏＩＬ−２（Ｄ）；又は
ｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（Ｇ）の注射後１６，４０，６４
及び８８時間のミルク１ｍｌ当たりの体細胞数として表
す。ｒ−ＢｏＩＬ−１（Ｂ）；ｒ−ＢｏＩＬ−２
（Ｅ）；又はｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（Ｈ）に関して、２
μの蛍光ビーズを摂取する細胞のパーセントを測定する
ことによる流動細胞計測法により、乳汁ＰＭＮ（多核細
胞）による食細胞活動の合計パーセントを定量的に測定
する。最初に全集団を前方光散乱によりゲートし、ＦＡ
ＬＳ及び９０o光散乱のみが多核細胞であると考える。
ｒ−ＢｏＩＬ−１（Ｃ）；ｒ−ＢｏＩＬ−２（Ｆ）；又
はｒ−ＢｏＧＭ−ＣＳＦ（Ｉ）に関して、ＰＭＡ（５２
０ｎｇ）刺激の後の超酸化物の誘導も、全細胞シトクロ
ム−ｃ還元分析を用いて監視する。未処理乳汁からのＰ
ＭＮは、超酸化物の生産を誘導されないが、抹消血ＰＭ
Ｎは、５−１５ηＭ Ｏ2／分／１０7ＰＭＮの範囲で誘
導可能である。
【図３】授乳酪農牛へのｒ−ＢｏＩＬ−２の乳内注射又
は筋肉注射後の牛乳生産を示すものである。ｒ−ＢｏＩ
Ｌ−２の乳内注射後、又は未処理の８頭の授乳酪農牛に
関して平均牛乳生産を、キログラム＋／−標準誤差で記
録する。データを、処理前の最初の５日間（平均を１０
０％生産量）と比較した平均牛乳生産（標準偏差）のパ
ーセントで示す。ｓ．ａｕｒｅａｕｓに感染したクォー
ターに合計投薬量が４．５ｍｇ（○─○）又は１３．５
ｍｇ（●─●）のｒ−ＢｏＩＬ−２を乳内注射した後の
生産を、感染未処理牛（△─△）と６日間比較する、パ
ネルＡ。同様に、７頭の授乳牛において、ｒ−ＢｏＩＬ
−２を２．５μｇ／ｋｇ／日で注射した場合の生産も５
日間追跡し（○─○）、３頭の正常なＰＢＳ注射標準
（△─△）と比較する、パネルＢ。すべての牛は、ｒ−
ＢｏＩＬ−２治療の時点で、その第２又は第３授乳期の
中あるいは後期である。牛乳生産への影響はすべて一時
的であり、治療の休止後９６時間以内に治療前のレベル
に戻る。
は筋肉注射後の牛乳生産を示すものである。ｒ−ＢｏＩ
Ｌ−２の乳内注射後、又は未処理の８頭の授乳酪農牛に
関して平均牛乳生産を、キログラム＋／−標準誤差で記
録する。データを、処理前の最初の５日間（平均を１０
０％生産量）と比較した平均牛乳生産（標準偏差）のパ
ーセントで示す。ｓ．ａｕｒｅａｕｓに感染したクォー
ターに合計投薬量が４．５ｍｇ（○─○）又は１３．５
ｍｇ（●─●）のｒ−ＢｏＩＬ−２を乳内注射した後の
生産を、感染未処理牛（△─△）と６日間比較する、パ
ネルＡ。同様に、７頭の授乳牛において、ｒ−ＢｏＩＬ
−２を２．５μｇ／ｋｇ／日で注射した場合の生産も５
日間追跡し（○─○）、３頭の正常なＰＢＳ注射標準
（△─△）と比較する、パネルＢ。すべての牛は、ｒ−
ＢｏＩＬ−２治療の時点で、その第２又は第３授乳期の
中あるいは後期である。牛乳生産への影響はすべて一時
的であり、治療の休止後９６時間以内に治療前のレベル
に戻る。
【図４】ｒ−ＢｏＩＬ−２を注射した非授乳牛からの分
泌物中の残留ｒ−ＢｏＩＬ−２生物活性の測定を示すも
のである。４クォーターからの分泌物（４頭の異なる
牛）の２クォーターにドライングオフにて１ｍｇのｒ−
ＢｏＩＬ−２を注射（２部分）し、２クォーターはｒ−
ＢｏＩＬ−２による治療を行わない。注射後０，７２，
１４４及び２４０時間で非授乳乳腺分泌物を集める。示
したすべての試料は、７２時間の時点のものであり、
１：５０及び１：２００に希釈し、ＩＬ−２依存性ＢＴ
−２ Ｔ細胞系を用いて生物活性ｒ−ＢｏＩＬ−２の量
につき分析する、パネルＢ。ＢＴ−２細胞系は、成長に
ＩＬ−２を必要とする牛Ｔ細胞系である。この細胞系の
増殖度の測定により、試験媒体中の生物活性ＩＬ−２の
量を直接測定することができる。データを、個別番号の
動物それぞれにつき３重のＢＴ−２細胞の試料の平均3
Ｈ−チミジン挿入＋／−Ｓ．Ｄ．として表す。標準試料
（牛番号５５６及び８０２）からのクォーター、又はｒ
−ＢｏＩＬ−２処理動物（牛番号８０５及び８０９）の
クォーターにおいて、いずれの時点でもｒ−ＢｏＩＬ−
２活性は、検出されなかった。２％非授乳分泌物中の種
々の濃度のｒ−ＢｏＩＬ−２の標準分析も、正の標準と
してパネルＡに示す。
泌物中の残留ｒ−ＢｏＩＬ−２生物活性の測定を示すも
のである。４クォーターからの分泌物（４頭の異なる
牛）の２クォーターにドライングオフにて１ｍｇのｒ−
ＢｏＩＬ−２を注射（２部分）し、２クォーターはｒ−
ＢｏＩＬ−２による治療を行わない。注射後０，７２，
１４４及び２４０時間で非授乳乳腺分泌物を集める。示
したすべての試料は、７２時間の時点のものであり、
１：５０及び１：２００に希釈し、ＩＬ−２依存性ＢＴ
−２ Ｔ細胞系を用いて生物活性ｒ−ＢｏＩＬ−２の量
につき分析する、パネルＢ。ＢＴ−２細胞系は、成長に
ＩＬ−２を必要とする牛Ｔ細胞系である。この細胞系の
増殖度の測定により、試験媒体中の生物活性ＩＬ−２の
量を直接測定することができる。データを、個別番号の
動物それぞれにつき３重のＢＴ−２細胞の試料の平均3
Ｈ−チミジン挿入＋／−Ｓ．Ｄ．として表す。標準試料
（牛番号５５６及び８０２）からのクォーター、又はｒ
−ＢｏＩＬ−２処理動物（牛番号８０５及び８０９）の
クォーターにおいて、いずれの時点でもｒ−ＢｏＩＬ−
２活性は、検出されなかった。２％非授乳分泌物中の種
々の濃度のｒ−ＢｏＩＬ−２の標準分析も、正の標準と
してパネルＡに示す。
【図５】退縮初期の乳腺からの、サイトカイン投与後の
ＰＭＮの食細胞能力を示すものである。非授乳期に入っ
たばかりの２頭のホルスタイン酪農牛からの合計４乳腺
を使用する。すべてのクォーターを、処理前４−６週
間、Ｓ．ａｕｒｅａｕｓに感染させる。ドライングオフ
前、最後の搾乳直後に、乳内注射により、クォーターの
２つをＣｅｆａ−ＤｒｉRで処理し、クォーターの２つ
をＣｅｆａ−ＤｒｉR＋１ｍｇの牛ＩＬ−２で処理す
る。その後非授乳分泌物を、ドライオフ期の第３日及び
第６日に集め、ＣｏｕｌｔｅｒR上でＣ２５６Ｃｈａｎ
ｎｅｌｙｚｅｒを用いて生存体細胞の数をカウントす
る。ＰＭＮによる食細胞の合計パーセントを、２μの蛍
光ビーズを摂取する細胞のパーセントを測定することに
よる流動細胞計測法により定量的に測定する。
ＰＭＮの食細胞能力を示すものである。非授乳期に入っ
たばかりの２頭のホルスタイン酪農牛からの合計４乳腺
を使用する。すべてのクォーターを、処理前４−６週
間、Ｓ．ａｕｒｅａｕｓに感染させる。ドライングオフ
前、最後の搾乳直後に、乳内注射により、クォーターの
２つをＣｅｆａ−ＤｒｉRで処理し、クォーターの２つ
をＣｅｆａ−ＤｒｉR＋１ｍｇの牛ＩＬ−２で処理す
る。その後非授乳分泌物を、ドライオフ期の第３日及び
第６日に集め、ＣｏｕｌｔｅｒR上でＣ２５６Ｃｈａｎ
ｎｅｌｙｚｅｒを用いて生存体細胞の数をカウントす
る。ＰＭＮによる食細胞の合計パーセントを、２μの蛍
光ビーズを摂取する細胞のパーセントを測定することに
よる流動細胞計測法により定量的に測定する。
【図６】非授乳牛治療としてのｒ−ＢｏＩＬ−２の乳内
注射前及び後の授乳初期牛乳生産を示すものである。授
乳の開始後最初の６日間、４頭の牛につき、処理の直前
及び処理の直後の授乳に関する牛乳生産をキログラム；
（Ｓ．Ｄ．）で示す。ｒ−ＢｏＩＬ−２処理後（○─
○）、又は処理前の同授乳時間の生産（○─○）を監視
する。各処理牛が受けたｒ−ＢｏＩＬ−２の合計投薬量
は、２ｍｇである。ｒ−ＢｏＩＬ−２処理の時点で３頭
の牛は第２授乳を終え、１頭は、第３授乳を終えるとこ
ろである。それぞれ同一の動物に関して、第３及び第４
授乳の開始時の処理後生産を、第２又は第３授乳の開始
後最初の６日間（処理前）の生産と比較する。
注射前及び後の授乳初期牛乳生産を示すものである。授
乳の開始後最初の６日間、４頭の牛につき、処理の直前
及び処理の直後の授乳に関する牛乳生産をキログラム；
（Ｓ．Ｄ．）で示す。ｒ−ＢｏＩＬ−２処理後（○─
○）、又は処理前の同授乳時間の生産（○─○）を監視
する。各処理牛が受けたｒ−ＢｏＩＬ−２の合計投薬量
は、２ｍｇである。ｒ−ＢｏＩＬ−２処理の時点で３頭
の牛は第２授乳を終え、１頭は、第３授乳を終えるとこ
ろである。それぞれ同一の動物に関して、第３及び第４
授乳の開始時の処理後生産を、第２又は第３授乳の開始
後最初の６日間（処理前）の生産と比較する。
フロントページの続き (72)発明者 ゲイリー・ジヨン・フアーダ アメリカ合衆国ニユージヤージイ州07111 アービントン・メイプルアベニユー131 (72)発明者 フイリツプ・ウエイン・ヘイズ アメリカ合衆国ニユーヨーク州10990ウオ ーウイツク・カウンテイルート１ 364
Claims (3)
- 【請求項１】 温血動物の乳腺炎の治療又は予防法にお
いて、該方法が：授乳初期における該温血動物へのサイ
トカインの投与を含むことを特徴とする方法。 - 【請求項２】 温血動物の乳腺炎の治療又は予防法にお
いて、該方法が：該温血動物へのサイトカインの投与を
含み、該動物が退縮乳腺を持つことを特徴とする方法。 - 【請求項３】 温血動物の非授乳期間に続く授乳時に乳
汁分泌量を増加させる方法において、該方法が：授乳初
期又は該動物が退縮乳腺を持っている期間に該温血動物
にサイトカインを投与することを含むことを特徴とする
方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US74127891A | 1991-08-07 | 1991-08-07 | |
| US741278 | 2000-12-19 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06107560A true JPH06107560A (ja) | 1994-04-19 |
Family
ID=24980081
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4227788A Pending JPH06107560A (ja) | 1991-08-07 | 1992-08-05 | 組み替えサイトカインの投与による、退縮乳腺を持つ動物の乳腺炎の治療又は予防の方法 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5336488A (ja) |
| EP (1) | EP0537437A3 (ja) |
| JP (1) | JPH06107560A (ja) |
| AU (1) | AU659179B2 (ja) |
| CA (1) | CA2075328A1 (ja) |
| HU (1) | HUT67071A (ja) |
| IL (1) | IL102753A0 (ja) |
| NZ (1) | NZ243850A (ja) |
| RU (1) | RU2078580C1 (ja) |
| ZA (1) | ZA925909B (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015512886A (ja) * | 2012-03-06 | 2015-04-30 | ビグノッティ，アンドレア | 治療調製物及びその調製方法 |
Families Citing this family (8)
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|---|---|---|---|---|
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| US6929791B2 (en) | 1998-07-16 | 2005-08-16 | Institut Pasteur | Peptides of IL-2 and derivatives thereof |
| US6168785B1 (en) * | 1998-07-16 | 2001-01-02 | Institut Pasteur | Biological applications of new peptides of IL-2 and derivatives and use as therapeutic agents |
| EP1944037B1 (en) * | 2005-09-27 | 2011-06-29 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Remedy for mastitis |
| RU2508072C1 (ru) * | 2012-10-12 | 2014-02-27 | Эдуард Васильевич Овчаренко | Способ коррекции продуктивности получения молозива у коров |
| RU2536976C1 (ru) * | 2013-12-26 | 2014-12-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) | Способ лечения мастита у лактирующих овец |
| RU2683289C1 (ru) * | 2018-04-16 | 2019-03-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) | Способ профилактики мастита у лактирующих коров |
| RU2731476C1 (ru) * | 2019-06-13 | 2020-09-03 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармокологии и терапии" (ФГБНУ "ВНИВИПФиТ") | Способ профилактики мастита у лактирующих коров |
Family Cites Families (8)
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|---|---|---|---|---|
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| CA1299103C (en) * | 1986-03-07 | 1992-04-21 | Robert Joseph Collier | Method and compositions for increasing mammary parenchyma |
| US5162111A (en) * | 1986-07-30 | 1992-11-10 | Grabstein Kenneth H | Treatment of bacterial diseases with granulocyte-macrophage colony stimulating factor |
| DE3777721D1 (de) * | 1986-08-11 | 1992-04-30 | American Cyanamid Co | Zusammensetzungen zur parenteralen verabreichung und deren verwendung. |
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| DK0405315T3 (da) * | 1989-06-30 | 1995-09-25 | American Cyanamid Co | Anvendelse af et fagocyt-aktiverende stof: LPS eller IL-2 til fremstilling af et lægemiddel til behandling af Staphylococcus aureus-infektioner hos køer |
| US5124145A (en) * | 1989-10-24 | 1992-06-23 | Ciba-Geigy Canada Ltd. | Method for the prevention and treatment of bovine mastitis |
| ES2113354T3 (es) * | 1990-05-04 | 1998-05-01 | American Cyanamid Co | Estabilizacion de somatotropinas y otras proteinas por modificacion de residuos de cisteina. |
-
1992
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Cited By (1)
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