JPH0552836A - Displaying method for completion of test and detection tester fitted with test completion display - Google Patents

Displaying method for completion of test and detection tester fitted with test completion display

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JPH0552836A
JPH0552836A JP24021791A JP24021791A JPH0552836A JP H0552836 A JPH0552836 A JP H0552836A JP 24021791 A JP24021791 A JP 24021791A JP 24021791 A JP24021791 A JP 24021791A JP H0552836 A JPH0552836 A JP H0552836A
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JP
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test
color
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capillary
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Application number
JP24021791A
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Japanese (ja)
Inventor
Ikuo Miyamoto
Hiromitsu Okabe
Chie Sugimoto
郁夫 宮本
博光 岡部
智恵 杉本
Original Assignee
Terumo Corp
テルモ株式会社
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Publication date
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Abstract

PURPOSE:To clearly display the completion of a test, in a method for detecting the specific substance in a fluid to be examined using a capillary migration medium, by capturing the chromoplast migrated accompanied by capillary migration by a capture material to develop a color. CONSTITUTION:When a specimen containing an antigen to be measured is applied to a specimen sampling part 3, the specimen is moved downstream by capillary migration and the antigen-antibody reaction with a labelled antibody is generated at a position 4 to generate a labelled reaction product. This labelled reaction product is further subjected to capillary migration downstream on a chromatograph medium 1 to further generate the antigen-antibody reaction with an immobilized antibody in a detection part 5 and captured by the detection part 5 to perform the developement due to a label to detect the antigen to be measured. The specimen is continuously subjected to capillary migration thereafter to reach a colored magnetic particle 6 and moves while carries said particle 6 to reach the position of a magnet 7 and is captured by said magnet 7 to develop a color based on the colored magnetic particle. By this method, the completion of the specimen, that is, the reaching of the specimen to the downstream terminal of the medium is clearly displayed.

Description

【発明の詳細な説明】 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】 [0001]

【産業上の利用分野】本発明は、クロマトグラフ媒体等の毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法および装置であって、特に試験の終了を呈色表示するようにした方法および装置に関する。 BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention provides a method and apparatus for detecting the test a specific substance to be inspected in the fluid using a capillary transfer media, such as a chromatographic medium, especially color displays the end of the test to a method and apparatus that.

【0002】 [0002]

【従来の技術】クロマトグラフ法等により被検査流体中の特定物質を検出試験する際に、試験終了の表示が必要な場合がある。 When detecting test a specific substance to be inspected in the fluid by the Related Art chromatography or the like, it may require the display of the end of the test. 従来は、クロマトグラフ媒体の下流終端付近にpH指示薬や水分試験紙を施して、試験の終了を色の変化により表示または検知している。 Conventionally, subjected to pH indicator and moisture test paper near the downstream end of the chromatographic medium, it is displayed or detected by a color change of the end of the test. pH指示薬による方法は、被検査流体がpH指示薬を施した下流終端位置まで毛管移動した時のpH変化に伴う呈色状態の変化を利用したものである。 The method according to the pH indicator is one which utilizes a change in color development state due to pH changes when the capillary moves to the downstream end position which the test fluid is subjected to a pH indicator. また、水分試験紙による方法は、被検査液体が毛管移動によって水分試験紙を配置した下流終端位置に到達した際の、試験紙の液体吸収に伴う色の変化を利用したものである。 Moreover, the method according to the moisture test paper is to be inspected liquid when it reaches the downstream end position of arranging the moisture test paper by capillary movement, utilizing a change in color due to the liquid absorption of the test strip.

【0003】しかしながら、pH指示薬は通常最初から一定の色を有しており、無色から有色に変化するものは極めて少ない。 However, pH indicator is usually initially has a certain color, which changes from colorless to color very little. しかも、pHの変化前の色と変化後の色とが近似している場合が多く、試験の終了を明確に表示しにくいという欠点がある。 Moreover, if a lot, there is a disadvantage that clearly displayed hardly the end of the test and the color after the change and before change of the pH color is approximated. 更に、pH指示薬のある呈色表示部の前位置等に、pHを安定させるための緩衝液域を設けておく必要がある。 Furthermore, the prior position of the color display unit with a pH indicator, it is necessary to provide a buffer zone for stabilizing the pH.

【0004】また、水分試験紙の場合は、紙を着色しておかないと、乾燥状態と吸水状態とで色の違いを生じないため、やはり最初から一定の色に着色されており、しかも乾燥時の色と吸水時の色は同系色であるために、色の区別がしにくく、試験の終了を明確に表示できない。 [0004] In the case of water the test paper, unless you have colored paper, since in the dry state and water conditions no differences in color, are also colored with the first constant color, yet dry the color at the time of color and water absorption when for a similar color, difficult to color distinction, can not be clearly displays the end of the test.
その上、水分試験紙位置まで到達した被検査液体がその後の時間経過に伴って蒸発してしまうと水分試験紙が再度乾燥して、元の色に戻ってしまい、試験の終了を表示できなくなるという欠点がある。 Moreover, until the moisture test paper located under test liquid that has reached the dried subsequent When would evaporate over time moisture test paper again, reverts to the original color, it can no longer be viewed the end of the test there is a drawback.

【0005】 [0005]

【発明の内容】本発明者らは上記した従来技術におけるような欠点のない、毛管移動媒体による検出試験の終了を明確に表示できる方法を求めて研究を行ってきた。 The present inventors have found the contents of the Invention have been developing seeking how clearly display without disadvantages as in the prior art described above, the end of the detection test by capillary transfer medium. その結果、クロマトグラフ媒体等の毛管移動媒体の所定位置に有色体を施す共に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に有色体用の捕捉材を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端部へと移動してきた有色体を該捕捉材で捕捉させると、その部分に鮮明な呈色が発現して試験の終了を明確に表示できることを見出した。 As a result, both subjected to chromoplasts in position of the capillary transfer medium, such as a chromatographic medium, the downstream end or near the capillary transfer medium is positioned to capture material for chromoplasts, with the capillary movement of the test fluid When a colored body has moved to the downstream end portion is caught by the capturing material, it was found to be clearly displays the end of the test expressed a clear color on that portion.

【0006】更に、本発明者らは、上記の有色体およびその捕捉材の組み合わせの代わりに、反応型発色剤を使用して、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の1つまたは2つ以上の成分を施すと共に、下流終端またはその付近に反応型発色剤の残りの成分を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端へと移動してきた反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分を該残りの成分と反応させ発色させた場合にも、同様に鮮明な発色または色変化を生じて試験の終了を明確に表示できることを見出した。 Furthermore, the present inventors have found that instead of the combination of the above chromoplasts and its capturing material, using a reactive color former, one of the reactive color former in a predetermined position of the capillary transfer medium or 2 one or more of the ingredients is performed with, is positioned downstream end or the remaining components of the reactive color former in the vicinity thereof, one the one of the reactive color former having moved to the downstream end with the capillary movement of the test fluid or when two or more components were developed by reacting with said residue Ri components were also found to be able to clearly view the end of the test produced similar crisp color development or color change.

【0007】したがって、本発明は、毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法において、毛管移動媒体の所定位置に有色体を施すと共に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に有色体用の捕捉材を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動してきた有色体を捕捉材で捕捉して試験の終了を呈色表示することを特徴とする方法である。 Accordingly, the present invention provides a method for detecting test a specific substance to be inspected in the fluid using a capillary transfer media, to a predetermined position of the capillary transfer medium is performed with a colored material, or downstream end of the capillary transfer medium its near positions the capturing material for chromoplasts in a feature that color displays the end of the catch and tested in capturing material chromoplasts which has moved to the downstream terminal end with the capillary movement of the test fluid it is a method of.

【0008】更に、本発明は、毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法において、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の1つまたは2つ以上の成分を施すと共に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に反応型発色剤の残りの成分を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動してきた反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分を該残りの成分と反応・発色させて試験の終了を呈色表示することを特徴とする方法である。 Furthermore, the present invention is one or more components of the method of detecting the test a specific substance to be inspected in the fluid using a capillary transfer media, reactive color former in a predetermined position of the capillary transfer medium together with applied, is positioned downstream end or the remaining components of the reactive color former in the vicinity of the capillary transfer media, one the one of the reactive color former which has moved to the downstream terminal end with the capillary movement of the test fluid or two or more ends of the test is reacted, color and said residue Ri ingredients components is a method and displaying color. また、上記の方法との方法は併用してもよく、したがって本発明は、上記の方法との方法を組み合わせた方法をも包含する。 Further, the method of the above methods may be used in combination, thus the present invention also encompasses a method combining the methods of the above methods.

【0009】更に、本発明は上記した方法を実施するのに使用する、毛管移動媒体、その所定位置に施した有色体および/或いは反応型発色剤の1つまたは2つ以上の成分、並びに毛管移動媒体の下流終端またはその付近に配置した有色体用の捕捉材および/または反応型発色剤の残りの成分を備えていることを特徴とする試験終了表示体付きの検出試験装置を包含する。 Furthermore, the present invention is used to implement the method described above, one or more components of the capillary transfer media, chromoplasts subjected to the predetermined position and / or the reactive color former, and the capillary including capturing material and / or reactive color former detection test apparatus with the end of the test display body, characterized in that it comprises the remaining components of a downstream end or chromoplasts disposed near the moving medium.

【0010】上記において「毛管移動媒体を使用した検出試験」とは、毛管媒体中を被検査流体を毛管移動させてその中に含まれる各成分の分配係数や吸着程度の差を利用して特定の物質を検出したり、分離する検出試験をいい、その代表例は毛管移動媒体として紙、布帛、粒状物等のクロマトグラフ媒体を用いたクロマトグラフ法を挙げることができる。 [0010] A "detection test using capillary transfer media" in the above, identify the capillary medium by utilizing the difference in distribution coefficients and adsorption about the components contained therein by capillary moves the inspection fluid or detecting a substance refers to a detection test to separate, representative examples thereof include paper as capillary transfer media, fabric, a chromatographic method using a chromatographic medium granules and the like. しかしながら、クロマトグラフ法に限定されず、毛管移動媒体を利用する同種の検出試験法は、いずれも本発明に包含される。 However, not limited to chromatography, the detection test method of the same type that utilizes capillary transfer medium, both of which are encompassed in the present invention. また、上記において「毛管移動媒体の下流終端」とは、毛管移動媒体の試料採取部を設ける一方の側を上流側とし、被検査流体が該上流側から毛管移動媒体の他方の端部に向かって毛管移動していく該他方の側を下流側とし、下流終端とは毛管移動媒体の該下流側の端部をいう。 Further, the "downstream end of the capillary transfer medium" in the above, one side of which is provided a sampling of the capillary transfer medium to the upstream side, the test fluid is toward the other end of the capillary transfer media from the upstream side Te side of said other continue to capillary movement and downstream refer to the end of the downstream side of the capillary transfer medium downstream end. 更に「下流終端の付近」とは、毛管移動媒体の下流終端の近傍であって、 Furthermore the "vicinity of the downstream end" is a vicinity of the downstream end of the capillary transfer medium,
下流終端に到達する前の位置をいう。 It refers to the position before reaching the downstream end.

【0011】上記の方法で使用する有色体とは、それ自体が毛管移動媒体や被検査流体とは異なる色を有し、 [0011] The colored member used in the above methods, have different colors itself capillary transfer medium and the test fluid,
捕捉材を配置した位置で捕捉材により捕捉されて有色体自体の色を発現し、試験の終了を表示し得る着色体をいう。 Captured by the capturing material in placing the capturing material position expressing the color of the colored member itself, it refers to a colored material capable of displaying the end of the study. 有色体と捕捉材との組み合わせとしては、有色体と捕捉材との間の物理的な付加作用や吸着作用を利用するもの、化学反応や生物学的反応を伴って有色体を捕捉材位置に捕捉すもの等のいずれをも採用できる。 The combination of the chromoplasts and capturing material, those utilizing physical accretion and adsorption action between chromoplasts and capturing material, the capture material located chromoplasts accompanied by chemical reactions and biological reactions any such as those be captured it can be employed. そのうちでも、有色体として有色磁性粒子等の有色磁性体を使用し、捕捉材として磁石等の磁場発生部材を使用して、該有色磁性体を磁力によって毛管移動媒体の下流終端またはその付近に捕捉して有色体の色に基づく呈色を生じさせるのが、簡単で便利である。 Among them, use the colored magnetic colored magnetic particles and the like as chromoplasts, captured using a magnetic field generating member of the magnet such as a capturing material, the organic color magnetic downstream end or near the capillary transfer medium by the magnetic force and that produce a color based on the color of the chromoplasts is, is simple and convenient.

【0012】また、上記の方法で使用する反応型発色剤とは、2または3以上の反応性成分からなっていて、 [0012] The reactive color former used in the above methods, consist two or more reactive components,
それらが反応することによって無色から特定の色に発色するか、または最初の色とは異なった色に色変化する発色剤をいう。 They colored to a specific color from colorless by reacting or refers to a color former that changes color to a different color than the first color. 反応型発色剤としては、化学反応を伴う発色剤、生物反応を伴う発色剤、またはその両方を伴う発色剤のいずれをも使用することができる。 The reactive color former, the color former with the chemical reaction, can be used any coloring agents, or coloring agents with both involving biological response. 例えば、検出試験装置が、イムノアッセイ等に利用されるものの場合は、反応型発色剤の1つまたは2つ以上の成分を酵素発色性基質または酵素として、それを毛管移動媒体の所定位置に施し、残りの成分をそれに対応した酵素または酵素発色性基質として、それを毛管移動媒体の下流終端またはその付近に位置させて、両者の反応による発色または色変化により試験の終了を表示するようにするとよい。 For example, detection test apparatus, in the case of those used in immunoassays and the like, one or more components of the reactive color former as an enzyme chromogenic substrate or enzyme, subjecting it to a predetermined position of the capillary transfer medium, the remaining components as an enzyme or enzyme chromogenic substrate corresponding thereto, it was allowed to downstream end or near the capillary transfer medium, the coloring or color change due to both the reaction may be to display the end of the test .

【0013】そして、上記で使用する有色体およびその捕捉材並びに反応型発色剤としては、各々の検出試験の種類や内容に応じて、実施しようとしている検出試験の妨害にならないものを選択して使用するのがよい。 [0013] Then, as the color thereof and capturing material and reactive color former used in the above, according to the type and content of each of the detection test, select the one that does not become interference detection test trying to practice good to use. また、有色体および反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分は、途中で毛管移動媒体に吸着されたり付着することがなく、被検査流体の毛管移動に伴って毛管移動媒体の下流終端まで円滑に移動できるものを選択して使用するのがよい。 Further, the one or more components of chromoplasts and reactive color former, without adhering or adsorbed on the capillary transfer medium in the middle, downstream of the capillary transfer medium with the capillary movement of the test fluid it is preferable to select and use those which can be smoothly moved to the end. また、有色体およびその捕捉材並びに反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分と該残りの成分は、毛管移動媒体上の検出試験の妨げにならず、しかも試験の終了を明確に表示し得る位置にそれぞれ設ける必要がある。 Further, the one or two or more components and said residue Ri components of chromoplasts and its trapping agent and the reactive color former, not interfere with the detection test on capillary transfer medium, yet clearly the end of the test it is necessary to provide at positions capable of displaying.

【0014】通常、捕捉材および/または反応型発色剤の該残りの成分は、毛管移動媒体上の下流終端またはその付近に適当な手段により固定して設けるのがよい。 [0014] Usually, it said residue Ri components of the capture material and / or reactive coloring agent, preferably provided with fixed by the downstream end or suitable means near its on capillary transfer medium. また、有色体および/或いは反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分は、捕捉材および/または反応型発色剤の該残りの成分を設けた位置から所定の間隔をあけて、 Further, the one or more components of chromoplasts and / or reactive coloring agent at a predetermined interval from the capture material and / or position provided The residue Ri components of reactive color former,
それよりも上流側に、被検査流体の毛管移動に伴って下流側に移動し得るようにして施すのがよい。 On the upstream side thereof, it is preferable performed as may move downstream along with the capillary movement of the test fluid. その間隔は、検出試験装置の未使用時に両者間で捕捉や反応が生じないような距離としておく。 The interval, the capture and the reaction between them is kept and no such distances occur during unused detector test device. 有色体および反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分が検出試験を何ら妨害しない場合には、それらを毛管移動媒体の上流端側に施してもよいが、通常は、検出しようとする特定物質の検出域から外れた下流側に設けるのが安全であり好ましい。 If the one or more components of chromoplasts and reactive color former does not in any way interfere with the detection test, they may be applied to the upstream end of the capillary transfer medium, but typically, attempts to detect that provided on the downstream side deviated from the detection zone of a specific substance is safe preferably.

【0015】また、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に捕捉材および/または反応型発色剤の該残りの成分を配置するに当たって、その配置形状は毛管移動媒体を横切る直線状としたり、花型、星型、その他の任意の形状にすることができ、その場合にはその配置形状に応じた直線状、花型、星型等の呈色状態を発現させることができ、試験の終了を一層明確に表示することができる。 Further, when arranging the downstream end or said residue Ri components of the capture material and / or reactive color former in the vicinity of the capillary transfer media, or its arrangement shape straight across the capillary transfer media, flower-type , star, can be any other shape, in which case a straight line corresponding to the arrangement shape, flower-type, it is possible to express the color development state of the star-like, more the end of the study it can be clearly displayed.

【0016】本発明の内容の理解のために、近年開発されたイムノクロマトグラフ法(URCharaborty et al., [0016] for the understanding of the content of the present invention, it has been developed in recent years immunochromatography (URCharaborty et al.,
Ann. Biol. clin.,1990,48, 403-408 ; RF Zuk et a ... Ann Biol clin, 1990,48, 403-408; RF Zuk et a
l.,CLINICAL CHEMISTRY, Vol.31, No.7, 1985)を例にとって、本発明を図1〜2により具体的に説明する。 l., CLINICAL CHEMISTRY, Vol.31, No.7, for example 1985), the present invention will be described in detail by Figures 1-2.

【0017】図1および図2において、1はクロマトグラフ媒体、2は裏打ちフイルム、3は試料(検体)採取部、4は検体中の測定対象抗原と特異的に反応する標識した抗体(以後「標識抗体」という)の乾燥物を施した位置、5は検体中の測定対象抗原と別の位置で特異的に反応する抗体(以後「固定化抗体」という)をクロマトグラフ媒体に固定化してある位置(検出部)、6は有色磁性粒子、7は磁石(ゴム磁石等)、8は酵素発色性基質(酵素)、そして9は固定化された酵素(酵素発色性基質)を示す。 [0017] In Figures 1 and 2, 1 is the chromatographic medium, the 2 backing film, 3 is a sample (specimen) collection unit, 4 labeled antibody reacts measured antigen specifically in a specimen (hereinafter " dried product subjected position of that labeled antibody "), 5 is immobilized antibody (hereinafter referred to as" immobilized antibody ") that react specifically with the measurement target antigen and another position in the sample to the chromatographic medium position (detecting section), the colored magnetic particles 6, 7 magnets (rubber magnet or the like), 8 enzyme chromogenic substrate (enzyme), and 9 denotes an immobilized enzyme (enzyme chromogenic substrate).

【0018】図1において、測定対象抗原を含有する検体を試料採取部3に施すと、毛管移動によって該抗原を含む検体が下流側へと移動してゆき、位置4で標識抗体と抗原・抗体反応を生じて標識された反応物を生ずる。 [0018] In FIG 1, when subjected to specimen containing a measured antigen sampling unit 3, Yuki move specimen containing the antigen to the downstream side by capillary movement, labeled antibody and the antigen-antibody Position 4 It caused the reaction produces a reaction product which is labeled.
この標識された反応物はクロマトグラフ媒体上を更に下流側へと毛管移動してゆき、検出部5で固定化抗体と更に抗原・抗体反応を生じて検出部5に捕捉されて標識による発現を行って、測定対象抗原の有無等の検出が行われる。 The labeled reactant so on are capillary moves to a further downstream side on the chromatographic medium, the trapped in the detection unit 5 caused a further antigen-antibody reaction with the immobilized antibody in the detection unit 5 expression by labeling go and detection of the presence or absence of the measurement target antigen takes place. 検体の残部はその後も下流側へと毛管移動を続け、有色磁性粒子位置6に達し、該有色磁性粒子を随伴しながら更に下流側に移動して磁石7位置に到達し、そこで磁石7によって捕捉されて有色磁性粒子に色に基づく呈色を発現して、試験の終了、すなわち検体がクロマトグラフ媒体の下流終端またはその付近に到達したことを明確に表示する。 Then the remainder of the sample continued to capillary movement to the downstream side, it reaches the colored magnetic particles position 6, further moves to the downstream side while accompanying the organic color magnetic particles reach the magnet 7 position, where captured by the magnet 7 has been expressing a color based on the color colored magnetic particles, the end of the test, i.e., the sample is clearly display that it has reached the downstream end or near the chromatographic medium.

【0019】図1において、磁石7は、検出試験装置と一体に設けておいても、または着脱自在に設けておいても、或いは個別に準備しておき各々の試験内容等に応じて試験時に適当な位置に取り付けるようにしてもよい。 [0019] In FIG. 1, the magnet 7, be previously formed integrally with the detection test device, or be previously detachably provided, or when the test in accordance with the individually prepared for each advance test contents, etc., it may be attached to a suitable position.
また、その場合に使用する有色磁性体の例としては、磁性を有する着色したポリマー粒子;鉄、コバルト、ニッケルまたはそれらの化合物等からなる着色した磁性物質自体;体内にマグネタイトを持っている着色標識した細菌(例えば走磁性細菌)等を挙げることができる。 In addition, examples of the colored magnetic material used in this case, colored polymer particles having magnetic; colored label that have magnetite in the body; iron, cobalt, colored magnetic substance itself made of nickel or a compound thereof such as bacteria (e.g. running magnetic bacterium), and the like.

【0020】また、図2においては、図1の場合と同様に、試料採取部3に供給された測定対象抗原を含有する検体が毛管移動によって下流側へと移動してゆき、位置4で標識抗体と抗原・抗体反応を生じて標識された反応物を生じ、この標識された反応物が検出部5で固定化抗体と更に抗原・抗体反応を生じて検出部5に捕捉されて標識により発現して、測定対象抗原の有無等の検出が行われる。 Further, in FIG. 2, as in the case of FIG. 1, the sample containing the measurement target antigen supplied to the sampling section 3 so on are moved to the downstream side by capillary movement, labeled with the position 4 resulting reaction labeled occurring antibodies and antigen-antibody reaction, the labeled reactant is trapped in the detection unit 5 caused a further antigen-antibody reaction with the immobilized antibody in the detection unit 5 expression by labeling and, the detection of the presence or absence of the measurement target antigen takes place. 検体の残部はその後も下流側へと毛管移動を続けて、8の位置の酵素発色性基質(酵素)に達し、その後該酵素発色性基質(酵素)を随伴しながら更に下流側に毛管移動して、固定化された酵素(酵素発色性基質) It specimens remainder continues thereafter to the downstream side capillary movement, reaching enzyme chromogenic substrate position 8 (enzymes), further capillary moves downstream while then associated the enzyme chromogenic substrate (enzyme) Te, immobilized enzyme (enzyme chromogenic substrate)
9に到達し、そこで反応を生じて発色または色変化を起こし、試験の終了を明確に表示する。 It reached 9, where the reaction causes a color development or color change occurs to clearly display the end of the test.

【0021】図2のものでは、酵素発色性基質および酵素の組合せの外に、酵素/酵素基質/発色性成分の組み合わせを使用してもよい。 The intended Figure 2, in addition to the combination of enzyme chromogenic substrate and enzyme may be used a combination of enzyme / enzyme substrate / color component. その場合には、酵素、酵素基質および発色性成分の1つまたは2つを所定の同じ位置または別々の位置に施し、残りの2つまたは1つの成分を毛管移動媒体の下終端またはその付近に固定して設けるのがよい。 In that case, an enzyme, subjected to one or two predetermined same position or different positions of the enzyme substrate and the color-developing components, the remaining two or one component under end or near the capillary transfer medium It may be disposed fixed. その際の固定化は、この種の物質に対して通常使用されている固定化方法を採用するのがよい。 Immobilization in that case, it is preferable to adopt a fixing method that is generally used for this type of material.

【0022】反応性発色剤である酵素発色性基質/酵素の組合わせの例としては、アルカリホスファターゼ/5 [0022] Examples of a combination of enzyme chromogenic substrate / enzyme that is reactive color former, alkaline phosphatase / 5
−クロロー4−ブロモ−3−インドホスフェートからなる組合せ、β−D−ガラクトシダーゼ/2−ニトロフェニル・β−D−ガラクトシドからなる組合わせ等を挙げることができる。 - chloro 4-bromo-3 combinations of India phosphate, can be mentioned combinations such as that consisting of beta-D-galactosidase / 2-nitrophenyl · beta-D-galactoside. また、反応性発色剤である酵素/酵素基質/発色性成分の組合せの例としては、ペルオキシダーゼ/ヒドロペルオキシド/2,2'−アジノビス(3 In addition, examples of a combination of enzyme / enzyme substrate / color component is a reactive coloring agent, a peroxidase / hydroperoxides / 2,2'-azinobis (3
−エチルベンゾチアゾリン−6−スルホン酸)ジアンモニウム塩(ABTS)からなる組合せ、グルコースオキシダーゼ/グルコース/ABTSからなる組合せ等を挙げることができる。 - can be exemplified combinations of ethyl benzo thiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS), the combinations consisting of glucose oxidase / glucose / ABTS.

【0023】また、上記した酵素発色性基質/酵素の組合せ、および酵素/酵素基質/発色性成分の組合せの代わりに、通常の化学反応によって発色し得る複数の化合物の組合せを使用してもよく、そのような例としては、 [0023] It is also possible to use combinations of the above enzyme chromogenic substrate / enzyme combinations, and in place of the combination of enzyme / enzyme substrate / color component, a plurality of compounds capable of coloring by conventional chemical reactions , as such an example,
カリウム塩/コバルト亜硝酸ナトリウム、臭化物/硝酸銀、硝酸銀/ジフェニルアミン、第1鉄塩/フェリシアン化カリウム、ヨウ素/デンプン等を挙げることができる。 Potassium salt / cobalt sodium nitrite, bromide / silver nitrate, silver nitrate / diphenylamine, ferrous salt / potassium ferricyanide, it can be mentioned iodine / starch.

【0024】更に、図1に示すものと図2に示すものを組み合わせてもよく、その場合には、有色磁性粒子6の位置と酵素発色性基質(酵素)8の位置は互いに離しておいても、または互いに悪影響を及ぼさない時は同じ位置にしてもよい。 Furthermore, may be combined as shown in FIGS. 2 to that shown in FIG. 1, in which case the positions of the enzyme chromogenic substrate (enzyme) 8 colored magnetic particles 6 is oven away from each other also, or it may be in the same position when not adversely affect each other. 更に、磁石7の位置と酵素(酵素発色性基質)9の位置は多少ずれしておいても、または同じ位置にしておいてもよい。 Moreover, positions of the enzyme (enzyme chromogenic substrate) 9 of the magnet 7 may be allowed to slightly shift, or may be set to the same position.

【0025】図1および図2に示したものは、ほんの一例であり、本発明はそれに限定されるものではない。 [0025] those shown in FIGS. 1 and 2 are by way of example only, the present invention is not limited thereto. そこで用いる毛管移動媒体等は、この種の検査試験において従来から知られているいずれのものを使用してもよく、またそれらの形状もストリップ状だけでなくカラム状等種々の形状とすることができる。 Capillary transfer media and the like used therefore may be used any of those conventionally known in the inspection test of this kind, also be a column shape such as various shapes as well as their shape strip it can.

【0026】そして、本発明においては、毛管移動媒体の下流終端またはその付近における有色体用の捕捉材または反応型発色剤の該残りの成分の配置位置、毛管移動媒体の材質や厚さ、毛管移動媒体の形状等を変えたり、 [0026] Then, the present in the invention, the arrangement position of the downstream end or said residue Ri components of trapping agent and the reactive color former for chromoplasts in the vicinity thereof of capillary transfer media, capillary transfer medium of material and thickness, capillary or changing the shape of the transfer medium,
或いは毛管移動媒体は下流終端部に別の吸水体を設ける等の方法を採用することによって、被検査流体が捕捉材または反応型発色剤の該残りの成分の配置位置に到達するまでの時間、すなわち試験終了表示を発するまでの時間を変化調節することができる。 Or time to capillary transfer medium by employing a method such as providing a separate water absorber downstream end portion, the test fluid reaches the arrangement position of said residue Ri components of trapping agent and the reactive color former, that can be adjusted varying the time until issuing a test end indication.

【0027】そして、本発明は、毛管移動媒体を使用する検出試験法のいずれに対しても適用可能であり、例えば上記したイムノクロマトグラフ法のような免疫学的試験法、毛管移動媒体を利用する化学分析等に有効に使用できる。 [0027] Then, the present invention is, for any of the detection test methods using capillary transfer medium can be applied, using for example immunological test methods, such as immunochromatography described above, the capillary transfer medium It can be effectively used for chemical analysis. また、被検査流体は液体および気体のいずれの形態であってもよい。 Also, the test fluid may be in any form of liquid and gas. 以下に本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はそれにより限定されない。 The following specifically describes the invention based on examples in, but the present invention is not limited thereby.

【0028】 [0028]

【実施例】 【Example】

《実施例 1》試料採取部(親水性多孔性プラスチック;縦×横×厚さ=50mm×8mm×4mm)を上流端(始端側)に有し、ポリエステルフイルムで裏打ちしたナイロン・テトロン混紡織物(厚さ250μm)からなる毛管移動媒体(幅8mm、長さ100mm)を備えたクロマトグラフを準備した。 "Example 1" sampling portion (hydrophilic porous plastic; length × width × thickness = 50 mm × 8 mm × 4 mm) and has an upstream end (starting end side), nylon Tetron blend fabric lined with polyester film ( thickness 250 [mu] m) capillary transfer medium consisting of (width 8 mm, were prepared chromatograph equipped with a length 100 mm). 毛管移動媒体の始端から10mmの位置に金コロイド粒子で標識された抗ヒト絨毛性ゴナドトロピン(HCG)ポリクロナール抗体の凍結乾燥物10μgを施した。 It was subjected to freeze-dried product 10μg of labeled anti-human chorionic gonadotropin (HCG) polyclonal antibody colloidal gold particles from the starting to the position of 10mm capillary transfer medium. また、該標識抗体の位置から10mm離れた下流位置に抗HCGポリクロナール抗体を固定化した。 Moreover, it was immobilized anti HCG polyclonal antibody in a downstream position away 10mm from the location of the labeled antibody. 更に、該固定化抗体から10mm下流の位置に、青色磁性ポリスチレンラテックス粒子(固形分1%;ポリサイエンスInc.社製)30μlを施し、 Moreover, the 10mm downstream position from the immobilized antibody, the blue magnetic polystyrene latex particles (1% solids; Polysciences Inc.) subjected to 30 [mu] l,
また該青色磁性ポリスチレン粒子を施した位置から30 The 30 from a position subjected to the blue magnetic polystyrene particles
mm下流(毛管移動媒体の始端から70mmの位置) mm downstream (position of 70mm from the beginning of the capillary transfer medium)
に、ゴム磁石(パイロット社製;マグシート;幅×長さ×厚さ=8mm×1mm×1mm)をポリエステル裏打ちフイルム側に貼って、図1に示した検出試験具を作成した。 The rubber magnet stuck (pilot Co.; Magushito width × length × thickness = 8 mm × 1 mm × 1 mm) to the polyester backing film side to prepare a detection test device shown in FIG.

【0029】上記で作成した検出試験具の試料採取部に尿(検体)1mlを浸み込ませて、イムノクロマトグラフ法による試験を行ったところ、抗HCGポリクロナール抗体が固定化された箇所に検体中のHCGが検出された。 [0029] The impregnated urine (specimen) 1 ml to sampling portion of the detection test device created above, was tested by the immunochromatographic method, in a specimen at a location anti HCG polyclonal antibody is immobilized HCG has been detected. また、試験開始から3分後にゴム磁石位置に青色磁性ポリスチレン粒子に基づく青色が観察されて、試験の終了が呈色表示された。 Moreover, blue based blue magnetic polystyrene particles in a rubber magnet position observed 3 minutes after the start of the test, the end of the test are displayed color. また、ゴム磁石の位置を毛管移動媒体の始端から80mmに変えたところ、4分後に青色呈色による試験終了表示がなされた。 Furthermore, was changed to 80mm the position of the rubber magnet from the starting end of the capillary transfer medium, the test result is displayed by the blue coloration is made after 4 minutes.

【0030】《実施例 2》実施例1で使用した検出試験具の毛管移動媒体のゴム磁石を張り付けた下流終端部分に濾紙(Bio-rad gel dryer;Bio-rad社製;縦50m [0030] "Example 2" filter paper on the downstream end portion affixed rubber magnet capillary transfer medium detection test device used in Example 1 (Bio-rad gel dryer; Bio-rad Co., Ltd., vertical 50m
m、横8mm、厚さ0.85mm)を1枚または2枚重ねて厚くし、且つゴム磁石の位置を毛管移動媒体の始端から55〜65mmの位置にした他は実施例1と同様にして検出試験を行ったところ、試験終了を表示するまでに要した時間は下記の表1に示すとおりであった。 m, horizontal 8 mm, thicker overlapping one or two thickness 0.85 mm), and except that the position of the rubber magnet from the starting end of the capillary transfer medium to the position of 55~65mm in the same manner as in Example 1 was subjected to detection test, time required to view the end of the test were as shown in Table 1 below.

【0031】 [0031]

【表1】 Bio-rad gel dryer枚数 ゴム磁石の位置 試験終了表示までの時間(始端からの距離)) 1 枚 60mm 3分65mm 4分 2 枚 55mm 3分60mm 4分 TABLE 1 Bio-rad gel dryer (Distance from beginning) time to position the test result is displayed in the number rubber magnet) one 60 mm 3 min 65 mm 4 min two 55 mm 3 min 60 mm 4 min

【0032】上記表1の結果から、磁石の位置および/ [0032] From the results shown in Table 1, the position of the magnets and /
または毛管移動媒体の状態(材質)等を変えることによって、試験終了を表示するのに要する時間を変化調節できることがわかる。 Or by varying the capillary transfer medium state (material) or the like, it can be seen that changes adjust the time required to view the end of the test.

【0033】《実施例 3》実施例1に使用した検出試験具において、青色磁性ポリスチレン粒子を施す代わりに、毛管移動媒体の始端から45mmの位置に2mM [0033] In "Example 3" detection test device used in Example 1, instead of applying the blue magnetic polystyrene particles, to start from the 45mm position of the capillary transfer medium 2mM
MgCl 2 −10mM5−クロロー4−ブロモ−3−インドホスフェートの10μlをスポイトで施し、また磁石を設ける代わりに毛管移動媒体の始端から60mmの位置にウシ腸由来のアルカリホスファターゼの3μgを物理吸着により固定化した検出試験具を使用した他は、実施例1と同様にして検体の検出試験を行った。 Applying 10μl of MgCl 2 -10mM5- chloro 4-bromo-3 India phosphate a dropper, also fixed by physical adsorption of 3μg of alkaline phosphatase from calf intestine 60mm position from the beginning of the capillary transfer medium instead of providing the magnet other using phased detection test device was detected test specimens in the same manner as in example 1. その結果、抗HCGポリクロナール抗体が固定化された箇所に検体中のHCGが検出された。 As a result, HCG in the sample at a location anti HCG polyclonal antibody was immobilized was detected. また、ウシ腸由来のアルカリホスファターゼを固定化した位置に液が到達してから30〜60秒後に青色の発色が明瞭に発現して試験の終了を確認することができた。 Moreover, it was possible to blue color to confirm the end of the clearly expressed by tested after reaching the liquid in a fixed position the alkaline phosphatase from calf intestine after 30-60 seconds.

【0032】《実施例 4》実施例1に使用した検出試験具において、青色磁性ポリスチレン粒子を施す代わりに、毛管移動媒体の始端から40mmの位置にウレアハイドロジェンパーオキサイド(Sigma社製)12.5μg [0032] In "Example 4" detection test device used in Example 1, instead of applying the blue magnetic polystyrene particles, urea hydrogen peroxide in the position of 40mm from the beginning of the capillary transfer medium (Sigma Co.) 12. 5μg
を施し、毛管移動媒体の始端から50mmの位置に西洋ワサビ由来ペルオキシダーゼ2μgを施し、また磁石を設ける代わりに毛管移動媒体の始端から60mmの位置にABTS4.5μgを固定化した検出試験具を使用した他は実施例1と同様にして検体の検出試験を行った。 Alms, subjected to horseradish peroxidase 2μg from the beginning of the capillary transfer medium to the position of 50 mm, also using detection test device was immobilized ABTS4.5μg the position of 60mm from the beginning of the capillary transfer medium instead of providing the magnet others were subjected to detection test specimens in the same manner as in example 1.
その結果、ABTSを固定化した位置に液が到達してから30〜60秒後に緑色の発色が明瞭に発現して試験の終了を確認することができた。 As a result, it was possible to green color confirms the completion of the clearly expressed by tested after reaching the liquid in a fixed position of the ABTS after 30-60 seconds.

【0033】 [0033]

【発明の効果】試験の終了時に鮮明な呈色状態または色変化を発現させることが可能なため、試験の終了を明確に表示することができる。 Because according to the present invention capable of expressing a vivid color development state or the color change at the end of the test, it is possible to clearly display the end of the test. 毛管移動媒体および被検査流体の色、種類、性状等に応じて有色体や反応型発色剤の色や種類等を適宜選択することことができ、それによって試験終了時の呈色状態を毛管移動媒体や被検査流体自体の色と明確に区別できるようにすることが可能である。 The color of capillary transfer media and the test fluid, the type, can be appropriately selected chromoplasts and reactive color former in the color and the type or the like according to the properties or the like, the capillary moves the color development state at the end of the study whereby It can be clearly distinguished from the medium or of the test fluid itself colors. 有色体や反応型発色剤を選択することによって、試験終了表示部分を試験終了前の無色の状態から有色に発色させることが可能であり、その場合には試験の終了が極めて明確に表示できる。 By selecting the chromoplasts and reactive color former, it is possible to color the colored test end indication portion from the colorless state before the end of the test, it quite clearly appears the end of the test in that case.

【図面の簡単な説明】 BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

【図1】本発明の検出試験装置の一例を示す図である。 Is a diagram illustrating an example of a detection test device of the present invention; FIG.

【図2】本発明の検出試験装置の別の例を示す図である。 Is a diagram showing another example of a detection test device of the present invention; FIG.

【符号の説明】 DESCRIPTION OF SYMBOLS

1 クロマトグラフ媒体 2 裏打ちフイルム 3 試料採取部 4 標識抗体 5 固定化抗体 6 有色磁性粒子 7 磁石 8 酵素発色性基質(酵素) 9 固定化された酵素(酵素発色性基質) 1 chromatographic medium 2 backing film 3 sampling portion 4 labeled antibody 5 immobilized antibody 6 colored magnetic particles 7 magnet 8 enzyme chromogenic substrate (enzyme) 9 immobilized enzyme (enzyme chromogenic substrate)

Claims (9)

    【特許請求の範囲】 [The claims]
  1. 【請求項1】 毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法において、毛管移動媒体の所定位置に有色体を施すと共に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に有色体用の捕捉材を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動してきた有色体を捕捉材で捕捉して試験の終了を呈色表示することを特徴とする方法。 1. A using capillary transfer media in methods of detecting test a specific substance to be inspected in the fluid, at a predetermined position of the capillary transfer medium is performed with a colored material colored downstream end or near the capillary transfer medium positions the capturing material for the body, a method which is characterized in that color displays the end of the catch and tested in capturing material chromoplasts which has moved to the downstream terminal end with the capillary movement of the test fluid.
  2. 【請求項2】 有色体が有色磁性粒子であり、そして有色体用の捕捉材が磁場発生部材である請求項1の方法。 Wherein chromoplasts is colored magnetic particles, and the method of claim 1 capturing material for chromoplasts are magnetic field generating member.
  3. 【請求項3】 毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法において、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の1つまたは2つ以上の成分を施すと共に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に反応型発色剤の残りの成分を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動してきた反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分を該残りの成分と反応・ 3. A method for detecting test a specific substance to be inspected in the fluid using a capillary transfer media, is performed with one or more components of the reactive color former in a predetermined position of the capillary transfer medium, is positioned downstream end or the remaining components of the reactive color former in the vicinity of the capillary transfer media, said one or more reactive color former which has moved to the downstream terminal end with the capillary movement of the test fluid the reaction of the component and said residue Ri components,
    発色させて試験の終了を呈色表示することを特徴とする方法。 Wherein that color displays the end of the test by color development.
  4. 【請求項4】 反応型発色剤の該1つまたは2つ以上の成分が酵素発色性基質または酵素であり、残りの成分がそれに対応した酵素または酵素発色性基質である請求項3の方法。 Wherein said one or more components of the reactive color former is an enzyme chromogenic substrates or enzyme method of claim 3, the remaining components is an enzyme or enzyme chromogenic substrate corresponding thereto.
  5. 【請求項5】 反応型発色剤が化学反応型の発色剤である請求項3の方法。 5. The method of claim 3 reactive coloring agent is a chemical reaction type color former.
  6. 【請求項6】 反応型発色剤が化学反応および酵素反応を伴う発色剤である請求項3の方法。 6. The method of claim 3 reactive coloring agent is a coloring agent with the chemical reactions and enzymatic reactions.
  7. 【請求項7】 反応型発色剤が、酵素、酵素基質および反応型発色成分の組み合わせからなる請求項6の方法。 7. A reactive coloring agent, enzyme, method of claim 6 comprising a combination of an enzyme substrate and the reaction type color developing component.
  8. 【請求項8】 請求項1および請求項3の方法を組み合わせた方法。 8. A method combining the method of claim 1 and claim 3.
  9. 【請求項9】 毛管移動媒体、その所定位置に施した有色体および/或いは反応型発色剤の1つまたは2つ以上の成分、並びに毛管移動媒体の下流終端またはその付近に配置した有色体用の捕捉材および/または反応型発色剤の残りの成分を備えていることを特徴とする試験終了表示体付きの検出試験装置。 9. Capillary transfer medium, one or more components of the applied to predetermined positions chromoplasts and / or reactive coloring agent, and a downstream end or chromoplasts disposed near the capillary transfer medium the capturing material and / or reactive coloring agent remaining detection test apparatus of the test end indication member with characterized in that it comprises components.
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