JPH04303757A - キャピラリ電気泳動装置 - Google Patents
キャピラリ電気泳動装置Info
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- JPH04303757A JPH04303757A JP3093563A JP9356391A JPH04303757A JP H04303757 A JPH04303757 A JP H04303757A JP 3093563 A JP3093563 A JP 3093563A JP 9356391 A JP9356391 A JP 9356391A JP H04303757 A JPH04303757 A JP H04303757A
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- JP
- Japan
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- elution time
- peak
- flow velocity
- electroosmotic flow
- capillary
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- Granted
Links
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はアミノ酸、蛋白質、核酸
など電荷をもつ物質を分離分析するキャピラリ電気泳動
装置に関するものである。
など電荷をもつ物質を分離分析するキャピラリ電気泳動
装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】キャピラリ電気泳動装置ではキャピラリ
の両端に印加された電圧によってキャピラリ中を電気泳
動する物質を検出器で検出し、その検出信号からデータ
処理装置で各ピークの溶出時間を検出し、その溶出時間
から各ピークの成分を同定する。各ピーク成分の移動度
は成分の種類と置かれている状況によって決まることか
ら、保持時間はクロマトグラフィの場合と同様に同定の
ための指標となる。溶出時間は変動するので、クロマト
グラフィの場合と同様に標準物質を用いて溶出時間の比
をとって補正を行ない、溶出時間の変動をキャンセルす
る方法が採られている。
の両端に印加された電圧によってキャピラリ中を電気泳
動する物質を検出器で検出し、その検出信号からデータ
処理装置で各ピークの溶出時間を検出し、その溶出時間
から各ピークの成分を同定する。各ピーク成分の移動度
は成分の種類と置かれている状況によって決まることか
ら、保持時間はクロマトグラフィの場合と同様に同定の
ための指標となる。溶出時間は変動するので、クロマト
グラフィの場合と同様に標準物質を用いて溶出時間の比
をとって補正を行ない、溶出時間の変動をキャンセルす
る方法が採られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】キャピラリ電気泳動の
溶出時間の変動の要因としては種々のものが考えられる
。変動要因には電気浸透と電気泳動の両方の影響を受け
るものの他に、電気浸透のみが大きく作用するものがあ
る。溶出時間は電気浸透と電気泳動の両者の和で表わさ
れるので、単に標準物質の溶出時間との比をとるだけで
は変動分を除去することができない。例えば、溶液の温
度が変化した場合は電気浸透と電気泳動がともに各物質
について同様の割合で変動するので、変動分を除去する
ことが可能である。しかし、汚れなどによりキャピラリ
の内面状態が変化した場合には、電気浸透流の要因が独
立に変動するため、標準物質を用いる従来の方法ではそ
の変動を除去することはできない。本発明は電気浸透に
よる溶出時間の変動を除去して正しく同定を行なうこと
のできるキャピラリ電気泳動装置を提供することを目的
とするものである。
溶出時間の変動の要因としては種々のものが考えられる
。変動要因には電気浸透と電気泳動の両方の影響を受け
るものの他に、電気浸透のみが大きく作用するものがあ
る。溶出時間は電気浸透と電気泳動の両者の和で表わさ
れるので、単に標準物質の溶出時間との比をとるだけで
は変動分を除去することができない。例えば、溶液の温
度が変化した場合は電気浸透と電気泳動がともに各物質
について同様の割合で変動するので、変動分を除去する
ことが可能である。しかし、汚れなどによりキャピラリ
の内面状態が変化した場合には、電気浸透流の要因が独
立に変動するため、標準物質を用いる従来の方法ではそ
の変動を除去することはできない。本発明は電気浸透に
よる溶出時間の変動を除去して正しく同定を行なうこと
のできるキャピラリ電気泳動装置を提供することを目的
とするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明では中性物質の溶
出時間を測定して電気浸透流速を求める。それを用いて
各イオン成分の溶出時間から電気浸透の寄与している部
分を取り除き、電気浸透流速が０と仮定した場合の溶出
時間を求める。
出時間を測定して電気浸透流速を求める。それを用いて
各イオン成分の溶出時間から電気浸透の寄与している部
分を取り除き、電気浸透流速が０と仮定した場合の溶出
時間を求める。
【０００５】図１により本発明を説明する。溶出時間検
出手段２はキャピラリの両端に印加された電圧によって
キャピラリ中を電気泳動する物質の検出信号から各ピー
クの溶出時間を検出する。電気浸透流速算出手段４は中
性物質のピークの溶出時間から電気浸透流速を求める。 電気泳動速度算出手段６は各ピークに対して溶出時間検
出手段２で検出された溶出時間と電気浸透流速算出手段
４で求められた電気浸透流速とから電気泳動速度を求め
る。溶出時間補正手段８は電気浸透流速を０として補正
した各ピークの溶出時間を求める。
出手段２はキャピラリの両端に印加された電圧によって
キャピラリ中を電気泳動する物質の検出信号から各ピー
クの溶出時間を検出する。電気浸透流速算出手段４は中
性物質のピークの溶出時間から電気浸透流速を求める。 電気泳動速度算出手段６は各ピークに対して溶出時間検
出手段２で検出された溶出時間と電気浸透流速算出手段
４で求められた電気浸透流速とから電気泳動速度を求め
る。溶出時間補正手段８は電気浸透流速を０として補正
した各ピークの溶出時間を求める。
【０００６】
【作用】キャピラリ電気泳動装置において、キャピラリ
中のイオン種ａの速度Ｖａは、 Ｖａ＝Ｖｏ＋Ｖｅａ で表わされる。ここで、Ｖｏは電気浸透流（エレクトロ
オズモシス）の速度、Ｖｅａはイオン種ａの電気泳動速
度であり、Ｖｏ，Ｖｅａはそれぞれ Ｖｏ＝μｏ・Ｅ Ｖｅａ＝μｅａ・Ｅ と表わされる。μｏは電気浸透の移動度、μｅａはイオ
ン種ａの移動度、Ｅは電場の強さである。
中のイオン種ａの速度Ｖａは、 Ｖａ＝Ｖｏ＋Ｖｅａ で表わされる。ここで、Ｖｏは電気浸透流（エレクトロ
オズモシス）の速度、Ｖｅａはイオン種ａの電気泳動速
度であり、Ｖｏ，Ｖｅａはそれぞれ Ｖｏ＝μｏ・Ｅ Ｖｅａ＝μｅａ・Ｅ と表わされる。μｏは電気浸透の移動度、μｅａはイオ
ン種ａの移動度、Ｅは電場の強さである。
【０００７】試料注入部から検出器までの距離をＬとす
ると、試料中のイオン種ａが検出されるまでの時間（溶
出時間）ｔａは次のように表わされる。 ｔａ＝Ｌ／Ｖａ ＝Ｌ／｛（μｏ＋μｅａ）・Ｅ｝ 試料中の中性物質又は添加された中性物質の溶出時間を
ｔｓとすると、予め設定したＬ又は架空のＬにより、Ｖ
ｏ＝Ｌ／ｔｓ となる。イオン種ａの溶出時間ｔａに対しては（Ｖｏ＋
Ｖｅａ）・ｔａ＝Ｌ であるので、これから Ｖｅａ＝Ｌ／ｔａ−Ｖｏ が求められる。電気浸透流速を０と仮定したときの相対
溶出時間ｔａ’は ｔａ’＝Ｌ／Ｖｅａ により求めることができる。各イオン種について相対溶
出時間を求め、これを溶出時間として標準物質を用いた
通常の補正を行なう。
ると、試料中のイオン種ａが検出されるまでの時間（溶
出時間）ｔａは次のように表わされる。 ｔａ＝Ｌ／Ｖａ ＝Ｌ／｛（μｏ＋μｅａ）・Ｅ｝ 試料中の中性物質又は添加された中性物質の溶出時間を
ｔｓとすると、予め設定したＬ又は架空のＬにより、Ｖ
ｏ＝Ｌ／ｔｓ となる。イオン種ａの溶出時間ｔａに対しては（Ｖｏ＋
Ｖｅａ）・ｔａ＝Ｌ であるので、これから Ｖｅａ＝Ｌ／ｔａ−Ｖｏ が求められる。電気浸透流速を０と仮定したときの相対
溶出時間ｔａ’は ｔａ’＝Ｌ／Ｖｅａ により求めることができる。各イオン種について相対溶
出時間を求め、これを溶出時間として標準物質を用いた
通常の補正を行なう。
【０００８】図２により各ピークの溶出時間の検出から
相対溶出時間を算出するまでの手順をフローチャートと
して示す。各ピークの溶出時間が検出されると、その中
から中性成分の溶出時間を選んで電気浸透流速Ｖｏを求
め、このＶｏを用いて各ピーク成分の電気泳動速度Ｖａ
，Ｖｂ，……を求める。次に、各ピーク成分の電気泳動
速度Ｖａ，Ｖｂ，……を用い、各ピーク成分に対して相
対溶出時間ｔａ’，ｔｂ’，……を求めると、これは電
気浸透の変動に依存しない溶出時間となる。その後、標
準物質を用いて相対溶出時間で同定を行なう。
相対溶出時間を算出するまでの手順をフローチャートと
して示す。各ピークの溶出時間が検出されると、その中
から中性成分の溶出時間を選んで電気浸透流速Ｖｏを求
め、このＶｏを用いて各ピーク成分の電気泳動速度Ｖａ
，Ｖｂ，……を求める。次に、各ピーク成分の電気泳動
速度Ｖａ，Ｖｂ，……を用い、各ピーク成分に対して相
対溶出時間ｔａ’，ｔｂ’，……を求めると、これは電
気浸透の変動に依存しない溶出時間となる。その後、標
準物質を用いて相対溶出時間で同定を行なう。
【０００９】
【実施例】図３に一実施例を表わす。キャピラリ１２の
両端がそれぞれリザーバ１４と１６のバッファ液に浸さ
れ、両バッファ液には高圧電源１８から泳動電圧が印加
される。キャピラリ１２のリザーバ１４側の端部に試料
が注入され、その試料がリザーバ１６方向に電気泳動す
るものとする。リザーバ１６側にはキャピラリ１２中を
泳動してきた成分を検出する検出器２０が設けられてお
り、検出器２０で検出された信号から各成分の溶出時間
がデータ処理装置２２で検出され、中性物質の溶出時間
を基に各ピーク成分の相対溶出時間がデータ処理装置２
２で求められる。
両端がそれぞれリザーバ１４と１６のバッファ液に浸さ
れ、両バッファ液には高圧電源１８から泳動電圧が印加
される。キャピラリ１２のリザーバ１４側の端部に試料
が注入され、その試料がリザーバ１６方向に電気泳動す
るものとする。リザーバ１６側にはキャピラリ１２中を
泳動してきた成分を検出する検出器２０が設けられてお
り、検出器２０で検出された信号から各成分の溶出時間
がデータ処理装置２２で検出され、中性物質の溶出時間
を基に各ピーク成分の相対溶出時間がデータ処理装置２
２で求められる。
【００１０】図１における溶出時間検出手段２、電気浸
透流速算出手段４、電気泳動速度算出手段６及び溶出時
間補正手段８はデータ処理装置２２により実現される。 データ処理装置２２は例えばパーソナルコンピュータや
マイクロコンピュータにより実現される。
透流速算出手段４、電気泳動速度算出手段６及び溶出時
間補正手段８はデータ処理装置２２により実現される。 データ処理装置２２は例えばパーソナルコンピュータや
マイクロコンピュータにより実現される。
【００１１】
【発明の効果】本発明では中性物質の溶出時間から電気
浸透流の流速を求め、各ピーク成分の検出された溶出時
間から電気浸透流の影響を取り除いた相対溶出時間を求
めるようにしたので、例えばキャピラリ内面の変化など
に起因する溶出時間の変動要因を除去し、温度変化など
に伴う溶出時間変動の補正をより正確に行なって正確な
同定を行なうことができるようになる。
浸透流の流速を求め、各ピーク成分の検出された溶出時
間から電気浸透流の影響を取り除いた相対溶出時間を求
めるようにしたので、例えばキャピラリ内面の変化など
に起因する溶出時間の変動要因を除去し、温度変化など
に伴う溶出時間変動の補正をより正確に行なって正確な
同定を行なうことができるようになる。
【図１】本発明を示すブロック図である。
【図２】本発明の動作を示すフローチャート図である。
【図３】一実施例を示す略線図である。
２ 溶出時間検出手段
４ 電気浸透流速算出手段
６ 電気泳動速度算出手段
８ 溶出時間補正手段
１２ キャピラリ
２０ 検出器
２２ データ処理装置
Claims (1)
- 【請求項１】 キャピラリの両端に印加された電圧に
よってキャピラリ中を電気泳動する物質を検出器で検出
し、その検出信号からデータ処理装置で各ピークの溶出
時間を測定するキャピラリ電気泳動装置において、前記
データ処理装置は溶出時間を検出する溶出時間検出手段
の他に、中性物質のピークの溶出時間から電気浸透流速
を求める電気浸透流速算出手段と、各ピークに対して前
記溶出時間検出手段で検出された溶出時間と前記電気浸
透流速算出手段で求められた電気浸透流速とから電気泳
動速度を求める電気泳動速度算出手段と、電気浸透流速
を０として補正した各ピークの溶出時間を求める溶出時
間補正手段とを備えたキャピラリ電気泳動装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3093563A JP2940211B2 (ja) | 1991-03-29 | 1991-03-29 | キャピラリ電気泳動装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3093563A JP2940211B2 (ja) | 1991-03-29 | 1991-03-29 | キャピラリ電気泳動装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04303757A true JPH04303757A (ja) | 1992-10-27 |
| JP2940211B2 JP2940211B2 (ja) | 1999-08-25 |
Family
ID=14085720
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3093563A Expired - Fee Related JP2940211B2 (ja) | 1991-03-29 | 1991-03-29 | キャピラリ電気泳動装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2940211B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001098768A1 (fr) * | 2000-06-20 | 2001-12-27 | Japan Science And Technology Corporation | Procede d'analyse electrophoretique |
| KR102198936B1 (ko) * | 2019-08-06 | 2021-01-05 | 경희대학교 산학협력단 | 승압 컨버터 장치를 이용한 마이크로-모세관 전기영동 시스템 |
-
1991
- 1991-03-29 JP JP3093563A patent/JP2940211B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001098768A1 (fr) * | 2000-06-20 | 2001-12-27 | Japan Science And Technology Corporation | Procede d'analyse electrophoretique |
| KR102198936B1 (ko) * | 2019-08-06 | 2021-01-05 | 경희대학교 산학협력단 | 승압 컨버터 장치를 이용한 마이크로-모세관 전기영동 시스템 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2940211B2 (ja) | 1999-08-25 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
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