JPH04234977A - Apparatus for electrical treatment of cell and syringe - Google Patents

Apparatus for electrical treatment of cell and syringe

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JPH04234977A
JPH04234977A JP2415978A JP41597890A JPH04234977A JP H04234977 A JPH04234977 A JP H04234977A JP 2415978 A JP2415978 A JP 2415978A JP 41597890 A JP41597890 A JP 41597890A JP H04234977 A JPH04234977 A JP H04234977A
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JP
Japan
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cylinder
cell
piston
cell suspension
suction
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Pending
Application number
JP2415978A
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Japanese (ja)
Inventor
Mamoru Koga
守 古賀
Kunimichi Oohashi
大橋 邦通
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Shimadzu Corp
Original Assignee
Shimadzu Corp
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Publication date
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Publication of JPH04234977A publication Critical patent/JPH04234977A/en
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/02Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion

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  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
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  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
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  • Sustainable Development (AREA)
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  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Electromagnetism (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

PURPOSE:To provide a readily handleable apparatus for electrical treatment of cells usable under conditions of micro-gravity. CONSTITUTION:One end of a cylinder 2 having a pair of opposite electrode plates 5 and 5 is provided with a suction and discharge hole 6 and a piston 3 is then inserted into the cylinder 2. When the suction and discharge hole 6 is placed in a cell suspension and the piston 3 is pulled, the cell suspension is sucked into the cylinder 3. The sucked cell suspension is kept in contact with the electrode plates 5 and 5 without hardening into spherical shapes even under micro-gravity.

Description

【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]

【0001】0001

【産業上の利用分野】本発明は細胞電気処理装置及びシ
リンジ、特に、対向電極を有する細胞電気処理装置、及
びシリンダとピストンとを備えたシリンジに関する。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a cell electroprocessing device and a syringe, and more particularly to a cell electroprocessing device having opposed electrodes and a syringe including a cylinder and a piston.

【0002】0002

【従来の技術】細胞融合や細胞に対する遺伝子導入処理
等は、例えば細胞懸濁液を電気処理することにより行わ
れている。このような細胞の電気処理を行うための装置
として、チャンバを有する本体と、チャンバ内に配置さ
れた対向電極とを備えた細胞電気処理装置が知られてい
る。この種の細胞電気処理装置では、チャンバ内に細胞
懸濁液をピペッティングにより注入し、対向電極間に電
圧を印加すると細胞の電気処理が行える。
BACKGROUND OF THE INVENTION Cell fusion and gene introduction into cells are carried out, for example, by electrically treating a cell suspension. As a device for electrically processing cells, there is known a cell electrical processing device that includes a main body having a chamber and a counter electrode disposed within the chamber. In this type of cell electroprocessing device, cells can be electrically processed by injecting a cell suspension into a chamber by pipetting and applying a voltage between opposing electrodes.

【0003】0003

【発明が解決しようとする課題】最近、細胞工学の分野
において、落下塔のような無重力又は微小重力下におけ
る細胞の電気処理が試みられている。
Recently, in the field of cell engineering, attempts have been made to electrically process cells under zero gravity or microgravity, such as in a drop tower.

【0004】ところが、前記従来の細胞電気処理装置を
用いて微小重力条件下で細胞の電気処理を試みると、対
向電極間で細胞懸濁液が表面張力により球状になってし
まい、細胞懸濁液が対向電極の一方又は両方と接触しな
い場合がある。細胞懸濁液が対向電極と良好に接触しな
いと、細胞懸濁液が電気処理されず、細胞融合等が行え
ない。
However, when attempting to electrically process cells under microgravity conditions using the conventional cell electroprocessing device, the cell suspension becomes spherical due to surface tension between the opposing electrodes. may not be in contact with one or both of the opposing electrodes. If the cell suspension does not come into good contact with the counter electrode, the cell suspension will not be electrically processed and cell fusion etc. will not be possible.

【0005】また、前記従来の細胞電気処理装置は、ピ
ペッティングにより細胞懸濁液を注入する必要があるた
め、取扱いが容易ではない。
Furthermore, the conventional cell electroprocessing apparatus described above is not easy to handle because it is necessary to inject the cell suspension by pipetting.

【0006】本発明の目的は、取扱いが容易でありかつ
微小重力条件下でも使用可能な細胞電気処理装置、及び
この細胞電気処理装置に採用され得るシリンジを提供す
ることにある。
An object of the present invention is to provide a cell electroprocessing device that is easy to handle and can be used even under microgravity conditions, and a syringe that can be used in this cell electroprocessing device.

【0007】[0007]

【課題を解決するための手段】第1の発明に係る細胞電
気処理装置は、吸排孔を有するシリンダと、シリンダ内
に配置された対向電極と、シリンダに摺動可能に挿入さ
れたピストンとを備えている。
[Means for Solving the Problems] A cell electroprocessing device according to a first aspect of the invention includes a cylinder having an intake and exhaust hole, a counter electrode disposed within the cylinder, and a piston slidably inserted into the cylinder. We are prepared.

【0008】第2の発明に係るシリンジは、吸排孔を有
するシリンダと、吸排孔内に嵌入可能な突起を有しかつ
シリンダに摺動可能に挿入されたピストンとを備えてい
る。
The syringe according to the second aspect of the invention includes a cylinder having a suction/discharge hole, and a piston having a protrusion that can be fitted into the suction/discharge hole and slidably inserted into the cylinder.

【0009】[0009]

【作用】第1の発明の細胞電気処理装置では、ピストン
を動かすと、吸排孔からシリンダ内に細胞懸濁液が吸入
され、あるいは吸排孔からシリンダ内の細胞懸濁液が排
出される。細胞懸濁液を吸入する場合は、ピストンをシ
リンダの最奥部まで挿入しておく。そして、吸排孔を細
胞懸濁液内に配置してピストンを引くと、シリンダ内に
細胞懸濁液が吸入される。この際、シリンダ内には、ピ
ストンの移動量だけ細胞懸濁液が吸入されるため、空気
が殆ど混入しない。このため、上述の操作を微小重力下
で行った場合でも、シリンダ内に吸入された細胞懸濁液
は、表面張力により球状に固まってしまうことがなく、
シリンダ内に配置された対向電極との接触が保たれる。 したがって、本発明の細胞電気処理装置では、微小重力
条件下でも対向電極間に電圧を印加するとシリンダ内で
細胞懸濁液を電気処理できる。また、本発明の細胞電気
処理装置は、シリンダ内に吸入した細胞懸濁液に対して
直接電気処理が行えるため、従来例のようなピペッティ
ングによる操作が必要でなく、取扱いが容易である。
[Operation] In the cell electroprocessing device of the first invention, when the piston is moved, the cell suspension in the cylinder is sucked into the cylinder through the suction and discharge hole, or the cell suspension in the cylinder is discharged from the suction and discharge hole. When inhaling the cell suspension, insert the piston all the way into the cylinder. Then, when the suction/discharge hole is placed in the cell suspension and the piston is pulled, the cell suspension is sucked into the cylinder. At this time, since the cell suspension is sucked into the cylinder by the amount of movement of the piston, almost no air is mixed into the cylinder. Therefore, even when the above operation is performed under microgravity, the cell suspension sucked into the cylinder will not solidify into a spherical shape due to surface tension.
Contact is maintained with a counter electrode located within the cylinder. Therefore, in the cell electroprocessing device of the present invention, even under microgravity conditions, the cell suspension can be electrically processed within the cylinder by applying a voltage between the opposing electrodes. Further, since the cell electroprocessing device of the present invention can directly electrically process the cell suspension sucked into the cylinder, it does not require pipetting operations as in the conventional example, and is easy to handle.

【0010】第2の発明のシリンジでは、吸排孔を液体
物質中に配置してピストンを摺動すると、シリンダに対
して液体物質を出入りさせることができる。ピストンを
押して液体物質を吸排孔から排出する場合において、ピ
ストンをシリンダの最奥部まで押し込むと、ピストンの
突起が吸排孔内に嵌入する。これにより、吸排孔内に溜
まっている液体物質もシリンダ外に排出される。したが
って、本発明のシリンジでは、シリンダ内に吸入された
液体物質をほぼ完全に排出できる。
[0010] In the syringe of the second aspect of the invention, by arranging the suction/discharge hole in the liquid substance and sliding the piston, the liquid substance can be moved in and out of the cylinder. When pushing the piston to discharge the liquid substance from the suction/discharge hole, when the piston is pushed to the innermost part of the cylinder, the protrusion of the piston fits into the suction/discharge hole. As a result, the liquid substance accumulated in the suction/discharge hole is also discharged to the outside of the cylinder. Therefore, with the syringe of the present invention, the liquid substance sucked into the cylinder can be almost completely discharged.

【0011】[0011]

【実施例】図1から図3に本発明の一実施例に係る細胞
電気処理装置を示す。図において、細胞電気処理装置1
は、シリンダ2とピストン3とから主に構成されている
Embodiment FIGS. 1 to 3 show a cell electroprocessing device according to an embodiment of the present invention. In the figure, cell electroprocessing device 1
is mainly composed of a cylinder 2 and a piston 3.

【0012】シリンダ2は、対向する1対の絶縁体板4
,4と、対向する1対の電極板5,5とから構成された
角筒状の部材であり、内部にチャンバ2aが形成されて
いる。なお、絶縁体板4は、例えばガラス製であり、シ
リンダ2内が目視可能である。シリンダ2の一端には、
凸部6が形成されている。凸部6内には、チャンバ2a
と外界とを連絡するための吸排孔6aが設けられている
。吸排孔6aは、凸部6の先端側が徐々に縮径されてい
る。シリンダ2の他端には、チャンバ2aの開口7が設
けられている。開口7の周囲には、フランジ部7aが形
成されている。フランジ部7aから開口7内にストッパ
8が突出している(図2)。
The cylinder 2 has a pair of opposing insulator plates 4.
, 4 and a pair of electrode plates 5, 5 facing each other. Note that the insulator plate 4 is made of glass, for example, and the inside of the cylinder 2 can be visually observed. At one end of cylinder 2,
A convex portion 6 is formed. Inside the convex portion 6 is a chamber 2a.
A suction/exhaust hole 6a is provided for communicating between the inside and the outside world. The diameter of the suction/discharge hole 6a is gradually reduced on the tip side of the convex portion 6. The other end of the cylinder 2 is provided with an opening 7 of the chamber 2a. A flange portion 7a is formed around the opening 7. A stopper 8 projects into the opening 7 from the flange portion 7a (FIG. 2).

【0013】ピストン3は、角柱状の部材であり、シリ
ンダ2のチャンバ2a内に挿入されている。ピストン3
は、長手方向に延びる溝部9を有している。溝部9には
、ストッパ8が嵌入している。ピストン3は、シリンダ
2の凸部6側先端に、円錐状の突起10を有している。 この突起10は、凸部6内の吸排孔6aに嵌入し得る。 また、ピストン3の他端には、平坦な押圧部11が形成
されている。
The piston 3 is a prismatic member inserted into the chamber 2a of the cylinder 2. piston 3
has a groove 9 extending in the longitudinal direction. A stopper 8 is fitted into the groove 9. The piston 3 has a conical projection 10 at the tip of the cylinder 2 on the convex portion 6 side. This protrusion 10 can fit into the suction/exhaust hole 6a in the convex portion 6. Further, a flat pressing portion 11 is formed at the other end of the piston 3.

【0014】次に、前記細胞電気処理装置1の使用方法
の一例について説明する。細胞の電気融合を行う場合は
、細胞電気処理装置1のチャンバ2a内に細胞懸濁液が
吸入される。ここでは、まずピストン3をシリンダ2の
最奥部まで押し込み、ピストン3の突起10を吸排孔6
a内に嵌入させる。そして、シリンダ2の凸部6を細胞
懸濁液内に浸してピストン3を徐々に引き上げると、細
胞懸濁液が吸排孔6aからチャンバ2a内に吸入される
。この際、ピストン3がシリンダ2の最奥部まで挿入さ
れているため、チャンバ2a内には空気の混入がなく細
胞懸濁液が充満する。したがって、吸入された細胞懸濁
液は、チャンバ2a内において対向する両電極板5,5
と密接する。
Next, an example of how to use the cell electroprocessing device 1 will be explained. When electrofusion of cells is performed, a cell suspension is sucked into the chamber 2a of the cell electroprocessing device 1. Here, first push the piston 3 to the innermost part of the cylinder 2, and insert the protrusion 10 of the piston 3 into the intake/discharge hole 6.
Insert it into a. Then, when the convex portion 6 of the cylinder 2 is immersed in the cell suspension and the piston 3 is gradually pulled up, the cell suspension is sucked into the chamber 2a through the suction/discharge hole 6a. At this time, since the piston 3 is inserted to the innermost part of the cylinder 2, the chamber 2a is filled with the cell suspension without any air being mixed in. Therefore, the inhaled cell suspension is transferred to both electrode plates 5, 5 facing each other in the chamber 2a.
be in close contact with

【0015】なお、上述の細胞懸濁の吸入操作を落下塔
のような微小重力条件下で行った場合、チャンバ2a内
に吸入された細胞懸濁液は表面張力により球状になろう
とするが、チャンバ2a内には空気が混入していないた
め、細胞懸濁液と電極板5,5との接触は保たれる。ま
た、微小重力条件下において細胞懸濁液の吸入操作を行
っている場合に誤ってピストン3から手を離すと、ピス
トン3は慣性によりシリンダ2から抜け出ようとするが
、ピストン3は溝部9の端部にストッパ8が当接するこ
とにより、シリンダ2からの脱落が防止される。
[0015] When the above-described cell suspension suction operation is performed under microgravity conditions such as in a drop tower, the cell suspension sucked into the chamber 2a tends to become spherical due to surface tension. Since no air is mixed into the chamber 2a, contact between the cell suspension and the electrode plates 5, 5 is maintained. Furthermore, if you accidentally release your hand from the piston 3 while inhaling a cell suspension under microgravity conditions, the piston 3 will try to come out of the cylinder 2 due to inertia, but the piston 3 will not fit into the groove 9. By abutting the end with the stopper 8, falling off from the cylinder 2 is prevented.

【0016】細胞懸濁液の吸入操作が終わると、チャン
バ2a内に吸入された細胞懸濁液を電気処理する。細胞
懸濁液の電気処理は、細胞電気処理装置1を図4に示す
ような電気処理用ホルダ12に装着して行う。図4にお
いて、電気処理用ホルダ12は、絶縁性材料により構成
された角柱状の容器状部材であり、一端に開口12aを
有している。電気処理用ホルダ12内の底面には、弾性
部材からなるキャップ13が配置されている。このキャ
ップ13は、細胞電気処理装置1のシリンダ2の凸部6
が嵌入し得る凹部13aを有している。また、電気処理
用ホルダ12の対向する内周面には、1対の電極14,
14が配置されている。各電極14は、U字状に折り曲
げられている。電気処理用ホルダ12には、その外周面
から突出するレセプタクル15が一体に設けられている
。レセプタクル15には、各電極14からの導線14a
が延びており、端面に各導線14aの端子電極(図示せ
ず)が配置されている。
When the cell suspension suction operation is completed, the cell suspension sucked into the chamber 2a is subjected to electrical treatment. The cell suspension is electrically processed by attaching the cell electrical processing device 1 to an electrical processing holder 12 as shown in FIG. In FIG. 4, the electrical processing holder 12 is a prismatic container-shaped member made of an insulating material, and has an opening 12a at one end. A cap 13 made of an elastic member is placed on the bottom surface of the electrical processing holder 12 . This cap 13 is connected to the convex portion 6 of the cylinder 2 of the cell electroprocessing device 1.
It has a recessed portion 13a into which the material can be fitted. Further, a pair of electrodes 14,
14 are arranged. Each electrode 14 is bent into a U-shape. The electrical processing holder 12 is integrally provided with a receptacle 15 protruding from its outer peripheral surface. The receptacle 15 has conductive wires 14a from each electrode 14.
extends, and terminal electrodes (not shown) of each conductive wire 14a are arranged on the end surface.

【0017】細胞融合を行う場合は、電気処理用ホルダ
12内に細胞電気処理装置1を挿入する。電気処理用ホ
ルダ12内において、細胞電気処理装置1のシリンダ2
の先端は、凸部6がキャップ13の凹部13aに嵌入す
ることにより弾性的に支持される。また、シリンダ2の
他端は、電気処理用ホルダ12の開口12aにフランジ
部7aが当接することにより安定に支持される。なお、
電極14,14は、シリンダ2を構成する電極板5,5
に弾性的に圧接する。
When performing cell fusion, the cell electrical processing device 1 is inserted into the electrical processing holder 12. Inside the electrical processing holder 12, the cylinder 2 of the cell electrical processing device 1
The tip of the cap 13 is elastically supported by the projection 6 fitting into the recess 13a of the cap 13. Further, the other end of the cylinder 2 is stably supported by the flange portion 7a coming into contact with the opening 12a of the electrical processing holder 12. In addition,
The electrodes 14, 14 are electrode plates 5, 5 that constitute the cylinder 2.
Elastic pressure contact.

【0018】細胞電気処理装置1が電気処理用ホルダ1
2に装着されると、図示しない電圧印加装置のプラグ1
6をレセプタクル15に装着する。そして、電圧印加装
置を作動すると、シリンダ2の電極板5,5間に電圧が
印加される。これにより、チャンバ2a内に吸入された
細胞懸濁液の電気処理が行われ、細胞懸濁液中の細胞が
融合する。
The cell electroprocessing device 1 is an electroprocessing holder 1
2, the plug 1 of the voltage application device (not shown)
6 is attached to the receptacle 15. Then, when the voltage application device is activated, a voltage is applied between the electrode plates 5, 5 of the cylinder 2. As a result, the cell suspension sucked into the chamber 2a is subjected to electrical processing, and the cells in the cell suspension are fused.

【0019】電気処理が終了すると、電気処理用ホルダ
12から細胞電気処理装置1を取り出し、細胞懸濁液を
回収する。この場合、ピストン3をシリンダ2内に押し
込むと、チャンバ2a内の細胞懸濁液がピストン3によ
り押されて吸排孔6aから排出される。ここで、ピスト
ン3をシリンダ2の最奥部まで押し込むと、ピストン3
の突起10が吸排孔6a内に嵌入するため、吸排孔6a
内に溜まった細胞懸濁液まで外部に排出できる。したが
って、本実施例の細胞電気処理装置1によれば、電気処
理した細胞懸濁液が効率良く回収できる。
When the electrical processing is completed, the cell electrical processing device 1 is taken out from the electrical processing holder 12, and the cell suspension is collected. In this case, when the piston 3 is pushed into the cylinder 2, the cell suspension in the chamber 2a is pushed by the piston 3 and discharged from the suction/discharge hole 6a. Here, when the piston 3 is pushed to the innermost part of the cylinder 2, the piston 3
Because the protrusion 10 fits into the suction/discharge hole 6a, the suction/discharge hole 6a
Even the cell suspension accumulated inside can be discharged to the outside. Therefore, according to the cell electroprocessing device 1 of this embodiment, the electrotreated cell suspension can be efficiently recovered.

【0020】[0020]

【発明の効果】第1の発明に係る細胞電気処理装置では
、ピストンを備えたシリンダ内に対向電極が配置されて
いる。このため、本発明に係る細胞電気融合装置は、取
扱いが容易でありかつ微小重力条件下でも使用できる。
Effects of the Invention In the cell electroprocessing device according to the first aspect of the invention, a counter electrode is disposed within a cylinder provided with a piston. Therefore, the cell electrofusion device according to the present invention is easy to handle and can be used even under microgravity conditions.

【0021】第2の発明に係るシリンジは、ピストンが
シリンダの吸排孔に嵌入可能な突起を有している。この
ため、本発明に係るシリンジでは、吸排孔内に溜まって
いる液体物質までほぼ完全に排出できる。
[0021] In the syringe according to the second aspect of the invention, the piston has a protrusion that can be fitted into the suction/discharge hole of the cylinder. Therefore, in the syringe according to the present invention, even the liquid substance accumulated in the suction/discharge hole can be almost completely discharged.

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]

【図1】本発明の一実施例の一部切欠き正面図。FIG. 1 is a partially cutaway front view of an embodiment of the present invention.

【図2】図1のII−II断面図。FIG. 2 is a sectional view taken along line II-II in FIG. 1;

【図3】図1図のIII −III 断面図。FIG. 3 is a cross-sectional view taken along line III-III in FIG. 1;

【図4】前記実施例の使用状態を示す縦断面図。FIG. 4 is a longitudinal sectional view showing the usage state of the embodiment.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

1  細胞電気処理装置 2  シリンダ 3  ピストン 5  対向電極 6a  吸排孔 10  突起。 1 Cell electroprocessing device 2 Cylinder 3 Piston 5 Counter electrode 6a Suction and exhaust hole 10.Protrusion.

Claims (2)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】吸排孔を有するシリンダと、前記シリンダ
内に配置された対向電極と、前記シリンダに摺動可能に
挿入されたピストンと、を備えた細胞電気処理装置。
1. A cell electroprocessing device comprising: a cylinder having an intake/exhaust hole; a counter electrode disposed within the cylinder; and a piston slidably inserted into the cylinder.
【請求項2】吸排孔を有するシリンダと、前記吸排孔内
に嵌入可能な突起を有する、前記シリンダに摺動可能に
挿入されたピストンと、を備えたシリンジ。
2. A syringe comprising: a cylinder having a suction/discharge hole; and a piston slidably inserted into the cylinder and having a protrusion that can be fitted into the suction/discharge hole.
JP2415978A 1990-12-28 1990-12-28 Apparatus for electrical treatment of cell and syringe Pending JPH04234977A (en)

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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003057819A1 (en) * 2002-01-07 2003-07-17 Uab Research Foundation Electroporation cuvette-pipette tips, multi-well cuvette arrays, and electrode template apparatus adapted for automation and uses thereof

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WO2003057819A1 (en) * 2002-01-07 2003-07-17 Uab Research Foundation Electroporation cuvette-pipette tips, multi-well cuvette arrays, and electrode template apparatus adapted for automation and uses thereof

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