JPH0378652A - Liquid chromatography/mass spectrometry and apparatus - Google Patents
Liquid chromatography/mass spectrometry and apparatusInfo
- Publication number
- JPH0378652A JPH0378652A JP21672789A JP21672789A JPH0378652A JP H0378652 A JPH0378652 A JP H0378652A JP 21672789 A JP21672789 A JP 21672789A JP 21672789 A JP21672789 A JP 21672789A JP H0378652 A JPH0378652 A JP H0378652A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- temperature
- ion source
- liquid chromatograph
- optimum
- mobile phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 title claims description 9
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 title description 6
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims abstract description 26
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims abstract description 26
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 20
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 12
- 230000008016 vaporization Effects 0.000 claims description 9
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 claims description 7
- 238000009834 vaporization Methods 0.000 claims description 7
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 15
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 65
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 239000006200 vaporizer Substances 0.000 description 10
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 8
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FYZYXYLPBWLLGI-AUOPOVQUSA-N Genipin 1-beta-gentiobioside Chemical compound C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]1O)O)O[C@@H]1OC=C([C@@H]2[C@H]1C(=CC2)CO)C(=O)OC)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O FYZYXYLPBWLLGI-AUOPOVQUSA-N 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- WSKNCDIGADDYAP-FLVHOVDBSA-N genipin 1-O-beta-D-isomaltoside Natural products COC(=O)C1=CO[C@@H](O[C@H]2O[C@H](CO[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@@H]4C(=CC[C@]14C)CO WSKNCDIGADDYAP-FLVHOVDBSA-N 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 3
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 3
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 150000004043 trisaccharides Chemical group 0.000 description 3
- KYWSCMDFVARMPN-LCSVLAELSA-N Saikosaponin D Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@]([C@H]3[C@]([C@@H]4[C@@]([C@@]5(C[C@@H](O)[C@]67CO[C@]5([C@@H]6CC(C)(C)CC7)C=C4)C)(C)CC3)(C)CC2)(C)CO)O[C@@H]([C@@H]1O)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O KYWSCMDFVARMPN-LCSVLAELSA-N 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000003891 environmental analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 229930192014 saikosaponin Natural products 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 2
- ZQPVHVKWCGZNDW-NVYKSAHZSA-N (2r,3s,4s,5r,6r)-2-(hydroxymethyl)-6-[[(2r,3s,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-methoxyoxan-2-yl]methoxy]oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC)O[C@@H]1CO[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZQPVHVKWCGZNDW-NVYKSAHZSA-N 0.000 description 1
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IBFYXTRXDNAPMM-BVTMAQQCSA-N Geniposide Chemical compound O([C@@H]1OC=C([C@@H]2[C@H]1C(=CC2)CO)C(=O)OC)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O IBFYXTRXDNAPMM-BVTMAQQCSA-N 0.000 description 1
- IBFYXTRXDNAPMM-FZEIBHLUSA-N Geniposide Natural products COC(=O)C1=CO[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@H]2[C@@H]1CC=C2CO IBFYXTRXDNAPMM-FZEIBHLUSA-N 0.000 description 1
- VJEMOEYSQDKAQF-MJKDWHOWSA-N Saikosaponin C Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2C([C@H]3[C@](C4[C@@]([C@@]5(C[C@H](O)[C@]67CO[C@]5([C@@H]6CC(C)(C)CC7)C=C4)C)(C)CC3)(C)CC2)(C)C)O[C@@H]1CO[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 VJEMOEYSQDKAQF-MJKDWHOWSA-N 0.000 description 1
- VSVPCEFIECVNTB-UHFFFAOYSA-N Saikosaponin c Natural products CC1OC(OC2C(O)C(O)C(OC3CCC4(C)C(C3)C(C)(C)CC5(C)C4C=CC67OCC8(CCC(C)(C)CC68)C(O)CC57C)OC2COC9OC(CO)C(O)C(O)C9O)C(O)C(O)C1O VSVPCEFIECVNTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000270666 Testudines Species 0.000 description 1
- VGLLGNISLBPZNL-RBUKDIBWSA-N arborescoside Natural products O=C(OC)C=1[C@@H]2C([C@H](O[C@H]3[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)OC=1)=C(CO)CC2 VGLLGNISLBPZNL-RBUKDIBWSA-N 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- ZDKCXSMMRXSSDE-UHFFFAOYSA-N chikusakoside II Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C3C(C4C(C5(CC(O)C67COC5(C6CC(C)(C)CC7)C=C4)C)(C)CC3)(C)CC2)(C)CO)OC1COC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 ZDKCXSMMRXSSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- NBGJGWFIDMDCAW-UHFFFAOYSA-N egonol-beta-gentiobioside Natural products C=1C=2C=C(C=3C=C4OCOC4=CC=3)OC=2C(OC)=CC=1CCCOC(C(C(O)C1O)O)OC1COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O NBGJGWFIDMDCAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229930182489 iridoid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008145 iridoid glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- -1 pentasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- LVTJOONKWUXEFR-UEZXSUPNSA-N protodioscin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1)O)O[C@@H]1CC2=CC[C@H]3[C@@H]4C[C@@H]5O[C@]([C@H]([C@@H]5[C@@]4(C)CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)(O)CC[C@@H](C)CO[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O LVTJOONKWUXEFR-UEZXSUPNSA-N 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- VJEMOEYSQDKAQF-UHFFFAOYSA-N saikogenin E 3-O-beta-D-glucopyranosyl-(1?6)-[alpha-L-rhamnopyranosyl-(1?4)]-beta-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C3C(C4C(C5(CC(O)C67COC5(C6CC(C)(C)CC7)C=C4)C)(C)CC3)(C)CC2)(C)C)OC1COC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 VJEMOEYSQDKAQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- QDQWGYLCDZBAMD-UHFFFAOYSA-N saponin C Natural products CC1C2C3CCC4C5(C)CCC(O)C(C)(COC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C5CCC4(C)C3(C)CCC27C8OC8C1(C)OC7=O QDQWGYLCDZBAMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
（イ）産業上の利用分野
この発明は液体クロマトグラフ／質虫分析法及びその装
置に関する。さらに詳しくは、天然物化学、生化学、医
学、薬学、バイオテクノロジ、環境分析、工業化学等の
各分野での分析に好適な液体クロマトグラフ／質量分析
法及びその装置に関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION (a) Field of Industrial Application This invention relates to a liquid chromatography/pasper analysis method and apparatus thereof. More specifically, the present invention relates to a liquid chromatography/mass spectrometry method and an apparatus thereof suitable for analysis in various fields such as natural product chemistry, biochemistry, medicine, pharmacy, biotechnology, environmental analysis, and industrial chemistry.
（ロ）従来の技術及び課題
液体クロマトグラフ（以下ＬＣと略す）と質量分析計（
ＭＳ ）とをリンクした液体クロマトグラフ／質量分叶
計（ＬＣ／ＭＳ）は、天然物化学、生化学、医学、薬学
、バイオテクノロジ、環境分析、工業化学等の各分野で
のオンライン分析に汎用されている。(b) Conventional technologies and problems Liquid chromatograph (hereinafter abbreviated as LC) and mass spectrometer (
The liquid chromatograph/mass spectrometer (LC/MS) linked with MS) is versatile for online analysis in various fields such as natural product chemistry, biochemistry, medicine, pharmacy, biotechnology, environmental analysis, and industrial chemistry. has been done.
上Ｓ己ＬＣ／ＭＳｉこおいて、ＬＣとＭＳとのリンクは
ＬＣでの溶出成分をイオン化するインターフェースを介
して行われている。このインターフェースとしては、例
えば、ＬＣの移動相流路に接続され該流路で分離・溶出
されるピーク成分を含有する移動相を気化しかつ噴霧す
るベーパライザプロブと、該プローブから噴霧される気
化物を加熱下でイオン化しかつ得られるピーク成分イオ
ンを選択的に排出するイオン源とから構成されるものが
あり、サーモスプレィイオン源（ＴＳＰ）が汎用されて
いる。In the case of LC/MSi, the LC and MS are linked via an interface that ionizes the eluted components in the LC. This interface includes, for example, a vaporizer probe that is connected to the mobile phase channel of the LC and vaporizes and sprays the mobile phase containing peak components to be separated and eluted in the channel, and a vaporizer probe that is connected to the mobile phase channel of the LC and that vaporizes and sprays the mobile phase containing peak components to be separated and eluted in the channel. There is an ion source that ionizes a compound under heating and selectively discharges the resulting peak component ions, and a thermospray ion source (TSP) is widely used.
上記インターフェースを用いるＬ Ｃ／ Ｍ Ｓにおけ
る分析条件は、移動相、ベーパライザコントロール温度
、イオンＲ温度等がパラメータとなる。The analysis conditions in LC/MS using the above interface include the mobile phase, vaporizer control temperature, ion R temperature, etc. as parameters.
これらのパラメータのうち、従来から化合物の感度はベ
ーパライザコントロール温度に依存することか知られて
おり、庄ぎが払われてきている。しかしながら、化合物
の感度とイオン源温度との相関についてはあまり検討さ
れていない。このためイオン源はカートリッジヒータを
用いて設定した温度で一定に加熱する構成とされている
。その具体的な構成を第１６図に示すと、イオン源（１
０）のプローブ（１１）接続側にチップヒータ（１２）
を、その後段の本体部にイオン源ブロック（１３）を有
し、これらそれぞれにカートリッジヒータ（１４）が埋
設されている。上記チップヒータ温度（以下ＴＨ湯温度
いう）はイオン源ブロック温度（以下Ｂ温度という）よ
りも若干、例えば２０℃程度、高く設定される。このよ
うにカートリッジヒータを用いた構成ではイオン源の温
度は測定前に一旦設定されたしのかそのまま一定に保ｆ
これ、測定中に温度を可変制御できる構成の乙のではな
かった。Among these parameters, it has been known that the sensitivity of a compound depends on the vaporizer control temperature, and this has been largely ignored. However, the correlation between compound sensitivity and ion source temperature has not been studied much. For this reason, the ion source is configured to be constantly heated at a set temperature using a cartridge heater. The specific configuration of the ion source (1
Chip heater (12) on the probe (11) connection side of 0)
has an ion source block (13) in its rear main body, and a cartridge heater (14) is embedded in each of these blocks. The chip heater temperature (hereinafter referred to as TH water temperature) is set slightly higher than the ion source block temperature (hereinafter referred to as B temperature), for example, by about 20°C. In this configuration using a cartridge heater, the temperature of the ion source is set once before measurement and then kept constant.
This was not the case with the configuration in which the temperature could be variably controlled during measurement.
ところで、天然物化学の分野では配糖体をオンライン分
析することが望まれているか、今までのところ上記汎用
のＴＳＰ ＬＣ／ＭＳを応用した報告例はなく、現在
のところＬＣ／ＭＳの利用としては、インターフェース
としてスプリッタ、コネクションバイブ及びフリット（
ＦＲＩＴ）プローブから構成され、高速の原子の衝撃に
よりイオン化するＰＲＩＴ−Ｆ Ａ Ｂを用いかつ磁場
型の質量分析計を用いる報告例が１例あるのみである。By the way, in the field of natural product chemistry, online analysis of glycosides is desired, but so far there have been no reports on the application of the above-mentioned general-purpose TSP LC/MS. supports splitter, connection vibe and flit (
There is only one report using PRIT-FAB, which is composed of a FRIT probe and is ionized by high-speed atomic bombardment, and a magnetic field type mass spectrometer.
しかしながらこの分析法ではスプリット（スプリット比
１００ ： ｌ程度）を行うので感度におけろロスが大
きくピークが非常にブロードとなり、また汎用性に欠け
るものである。However, since this analysis method performs splitting (split ratio of about 100:1), there is a large loss in sensitivity, the peak becomes very broad, and it lacks versatility.
（ハ）課題を解決するための手段
この発明の発明者らは、汎用性のあるＬＣ／ＭＳでのオ
ンライン分析を高感度に行うべく鋭意研究した結果、ベ
ーパライザコントロール温度、移動相等の分析条件は従
来と同じに設定した下で、化合物の感度がイオン源の温
度によって大きく変化する、換言すれば化合物に応じて
最適イオン化温変が存在することを見いだしｒこ。(c) Means for Solving the Problems The inventors of this invention have conducted extensive research to perform online analysis with a versatile LC/MS with high sensitivity, and have found that analysis conditions such as vaporizer control temperature and mobile phase We found that, with the same settings as before, the sensitivity of a compound changes greatly depending on the temperature of the ion source, in other words, there is an optimal ionization temperature variation depending on the compound.
またさらにこれに関連して分析対象化合物が配糖体であ
るとき、この配糖体のアグリコンと称される非糖部分よ
りも糖部分が最適イオン化温度を支配的に決める事実を
見いだした。Furthermore, in connection with this, we have discovered the fact that when the target compound to be analyzed is a glycoside, the sugar moiety of the glycoside determines the optimal ionization temperature more than the non-sugar moiety called an aglycone.
かくしてこの発明によれば、試料を液体クロマトグラフ
ィの手法により分離し、分離されたピク成分を含有する
移動相を順次気化した後、得られる各気化ピーク成分を
それぞれ最適イオン化温度でイオン化し、得られる各イ
オンのマススペクトルを測定することを特徴とする液体
クロマトグラフィ／質量分析法が提供される。Thus, according to the present invention, a sample is separated by a liquid chromatography method, the mobile phase containing the separated PIC components is sequentially vaporized, and each of the resulting vaporized peak components is ionized at an optimum ionization temperature, thereby obtaining A liquid chromatography/mass spectrometry method is provided that is characterized by measuring the mass spectrum of each ion.
この発明の方法において、最適イオン化温度とは、分析
対象成分である化合物かイオン化された際得られる全イ
オン強度又は擬分子イオンの相対強度が最大になるイオ
ン化温度を意味する。上記分析対象成分の最適イオン化
温度は、予め種々の温度の下での全イオン化強度又は凝
分子イオンの相対強度を測定して決められる。これにつ
いては後述する実施ρ１の記載が参照される。またこの
発明において、分析対象成分か配糖体であるときは、上
記最適イオン化温度は、該配糖体の非糖部（アグリコン
）の構造によらず糖部の構造に基づいて設定することが
できる。例えばアグリコンがそれぞれ、テルペンである
イリドイド配糖体、フラボノイドであるフラボノイド配
糖体、ステロイドであるサポニンにおいて、糖部が単糖
類であれば最適イオン化温度は約２２０℃程度、三糖類
であれば約３００℃程度、三糖類であれば約３３０〜３
４０℃程度に設定すればよいことになる。これらはこの
発明の発明者らによって見いだされた知見である。In the method of this invention, the optimum ionization temperature means the ionization temperature at which the total ion intensity or the relative intensity of pseudomolecular ions obtained when a compound to be analyzed is ionized is maximized. The optimal ionization temperature of the above-mentioned component to be analyzed is determined in advance by measuring the total ionization intensity or the relative intensity of condensed ions at various temperatures. Regarding this, refer to the description of implementation ρ1 described later. Furthermore, in the present invention, when the target component to be analyzed is a glycoside, the optimum ionization temperature can be set based on the structure of the sugar moiety, not on the structure of the non-sugar moiety (aglycone) of the glycoside. can. For example, in iridoid glycosides where the aglycone is a terpene, flavonoid glycoside which is a flavonoid, and saponin which is a steroid, the optimal ionization temperature is about 220°C if the sugar moiety is a monosaccharide, and about 220°C if it is a trisaccharide. About 300℃, about 330-3 for trisaccharides
It is sufficient to set the temperature to about 40°C. These are the findings discovered by the inventors of this invention.
これについても後述する実施例の記載が参照される。Regarding this also, reference is made to the description of the embodiments described later.
この発明の方法において、得られる各気化ビ〜り成分を
それぞれ最適イオン化温度でイオン化するとは、例えば
液体クロマトグラフィの手法で分離されかつ溶出される
各ピーク成分を、例えばそれぞれの保持時間、溶出位置
等を識別の手段としてこれに基づいて、イオン源でのイ
オン化温度を可変制御することをいう。従ってこの発明
の方法に実施においては、イオン源は上記識別手段に基
づいて加熱温度を追従性良く変更できる構成とされる。In the method of this invention, ionizing each obtained vaporized beer component at an optimal ionization temperature means, for example, that each peak component separated and eluted by a liquid chromatography method is This means that the ionization temperature in the ion source is variably controlled based on this as a means of identification. Therefore, in implementing the method of the present invention, the ion source is configured to be able to change the heating temperature with good followability based on the identification means.
この構成例としては以下の記載及び実施例の記載が参照
される。For this configuration example, refer to the following description and the description of the embodiments.
この発明の方法において、液体クロマトグラフィの手法
及びマススペクトルの測定には、当該分野における通常
の方法がそのまま用いられる。In the method of this invention, conventional methods in the field are used as they are for liquid chromatography and mass spectrum measurement.
この発明はまた上記方法を実施する装置として、液体ク
ロマトグラフと質量分析計との間に、液体クロマトグラ
フの移動相流路で分離され溶出されるピーク成分含有移
動相を気化する気化部、該気化部で得られた気化ピーク
成分を加熱下でイオン化するイオン源をこの順に接続し
てなる液体クロマトグラフ／質量分析計であって、上記
イオン源が、（ａ）予め各測定対象ピーク成分の最適イ
オン化温度を記憶する記憶部、（ｂ）移動相流路で溶出
される各試料の保持時間に基づいて、各最適イオン化温
度を記憶部から読み出しかつこれらを溶出順に設定する
温度プログラム部、及び（ｃ）上記プログラム部で設定
された順序でイオン源を加熱する加熱作動部からなるイ
オン源温度制御部を具備してなる液体クロマトグラフ／
質亀分析計をも提供するものである。The present invention also provides an apparatus for carrying out the above method, which includes a vaporizing section that vaporizes a mobile phase containing peak components that is separated and eluted in a mobile phase flow path of the liquid chromatograph, which is provided between a liquid chromatograph and a mass spectrometer. A liquid chromatograph/mass spectrometer comprising an ion source that ionizes vaporized peak components obtained in a vaporization section under heating, which are connected in this order, wherein the ion source (a) (b) a temperature program section that reads each optimal ionization temperature from the storage section and sets these in the order of elution based on the retention time of each sample eluted in the mobile phase flow path; (c) A liquid chromatograph comprising an ion source temperature control section consisting of a heating operation section that heats the ion source in the order set by the program section.
It also provides a quality turtle analyzer.
この発明の装置（以下分析計という）は、イオン源にイ
オン源温度制御部を具備する以外は当該分野で公知の構
成とすることができる。The apparatus of the present invention (hereinafter referred to as an analyzer) can have a configuration known in the art except that the ion source is equipped with an ion source temperature control section.
この発明の分析計において、液体クロマトグラフ（以下
ＬＣという）と質量分析計（以下ＭＳという）とを接続
する気化部及びイオン源には、ベパライザブローブと該
プローブから噴霧される気化物を加熱下でイオン化しか
つ得られるピーク成分イオ、ンを選択的に排出する構成
のイオン源とからなる公知のインターフェースをその基
本構成として用いることかできろ。該インターフェース
には例えばサーモスプレィイオン源（ＴＳＰ）か挙げら
れる。In the analyzer of the present invention, a vaporizer probe and a vaporized substance sprayed from the probe are connected to a vaporizer probe and an ion source that connect a liquid chromatograph (hereinafter referred to as LC) and a mass spectrometer (hereinafter referred to as MS). A known interface consisting of an ion source configured to ionize under heating and selectively eject the resulting peak component ions may be used as its basic configuration. The interface may include, for example, a thermospray ion source (TSP).
この発明の分析計のイオン源に具備されるイオン源温度
制御部は、記憶部、温度プログラム部及び加熱作動部か
ら構成される。上記記憶部には、予め測定対象のピーク
成分の最適イオン化温度か記憶される。該最適イオン化
温度は、前述したごとき方法で予め測定されて決定され
ろ。また上記温度プログラム部は、ＬＣから分離・溶出
される各ピーク成分について各最適イオン化温度を上記
記憶部から読みだし、かつこれらを溶出順に従って設定
できるように構成される。上記溶出順に設定するには、
ピーク成分の保持時間（又は溶出位Ｗ）に基づいて行わ
れる。この場合ら予め目的成分の保持時間（又は溶出位
置）が同条件のＬＣで測定されて決定される。また前記
加熱作動部は、上記温度プログラムで設定されたプログ
ラムに従ってイオン源の温度を所定温度に可変制御する
構成とされる。この−例としては、イオン源を熱容量の
小さい抵抗体で構成して温度追従性を良好にし、これに
直流電流を流して加熱制御する構成が挙げられろ。上記
材質としてはステンレスが挙げられる。The ion source temperature control section included in the ion source of the analyzer of this invention is composed of a storage section, a temperature program section, and a heating operation section. The storage section stores in advance the optimum ionization temperature of the peak component to be measured. The optimum ionization temperature should be measured and determined in advance by the method described above. Further, the temperature program section is configured to read each optimum ionization temperature for each peak component separated and eluted from the LC from the storage section, and to set these in accordance with the order of elution. To set the elution order above,
This is performed based on the retention time (or elution position W) of the peak component. In this case, the retention time (or elution position) of the target component is determined in advance by measuring it by LC under the same conditions. Further, the heating operation unit is configured to variably control the temperature of the ion source to a predetermined temperature according to a program set in the temperature program. An example of this is a configuration in which the ion source is configured with a resistor having a small heat capacity to improve temperature followability, and heating is controlled by passing a direct current through the ion source. The above-mentioned material may include stainless steel.
この発明の分析計において、イオン源はその気化部接続
側端部及びその後段の本体部がそれぞれ独立して加熱制
御される構成のものが好ましい。In the analyzer of the present invention, it is preferable that the ion source has a structure in which the heating of the end portion connected to the vaporization section and the main body portion of the subsequent stage are independently controlled.
この構成は例えばそれぞれの加熱対象部分を互いに絶縁
して熱容量の小さい抵抗体で構成し、各部位に独立して
直流電流を流して加熱制御する等が挙げられる。この場
合において、前記最適イオン化温度のプログラムは本体
部に設定され、端部側はこれに対して一定の高温（例え
ば２ Ｑ ’Ｃ程度）で加熱制御されることが好ましい
。This configuration includes, for example, insulating the respective heating target parts from each other and configuring them with resistors with small heat capacities, and controlling the heating by passing direct current through each part independently. In this case, it is preferable that the optimum ionization temperature program is set in the main body part, and that the end part side is heated at a constant high temperature (for example, about 2 Q'C).
（以下余白）
（ニ）作用
この発明によれば、液体クロマトグラフで分離された各
ピーク成分は、その溶出順に従って移動相流路を移送さ
れ気化部に導入される。該気化部で順次導ピーク成分は
移動相と共に気化され続いてイオン源に順次導入される
。このイオン源において、各ピーク成分はそれぞれ最適
のイオン化温度の下でイオン化され、質量分析に付され
順次マススペクトルが測定されることとなる。(Left below) (d) Function According to the present invention, each peak component separated by a liquid chromatograph is transferred through the mobile phase channel according to the order of elution and introduced into the vaporization section. In the vaporization section, the peak-leading components are sequentially vaporized together with the mobile phase and then sequentially introduced into the ion source. In this ion source, each peak component is ionized under an optimal ionization temperature, subjected to mass spectrometry, and mass spectra are sequentially measured.
以下実施例によりこの発明の詳細な説明するが、これに
よりこの発明は限定されるらのではない。The present invention will be described in detail below with reference to Examples, but the present invention is not limited thereby.
（ホ）実施例
実施例１
第１図は、この発明の液体クロマトグラフ／質量分析計
（Ｌ Ｃ／ Ｍ Ｓ ）の−例におけるインターフェー
ス部の一実施例の構成説明図である。(e) Examples Example 1 FIG. 1 is an explanatory diagram of the configuration of an example of an interface section in an example of a liquid chromatograph/mass spectrometer (LC/MS) of the present invention.
該図において、インターフェース（１）はベーパライザ
プローブ（２）とイオン源（３）とから主として構成さ
れている。ベーパライザプローブ（２）は図示しない液
体クロマトグラフ（ＬＣ）の移動相流路に接続されてお
り、通常のサーモスプレィイオン源（ＴＳＰ）に用いら
れろものかそのまま使用されており、図示しない加熱手
段により１５０〜４００°Ｃの範囲て加熱調節されてい
る。In the figure, the interface (1) mainly consists of a vaporizer probe (2) and an ion source (3). The vaporizer probe (2) is connected to the mobile phase flow path of a liquid chromatograph (LC) (not shown), and is used as it is in a normal thermospray ion source (TSP). The heating is controlled within the range of 150 to 400°C.
イオン源（３）はその一端か上記プローブ（２）に接続
され、他端が図示しないロー タリボンブ（ＲＰ）に連
通されるステンレス製の管路体（３１）で構成されてい
る。（３２）はフィラメント、（３３）は放電電極、（
３４）はりベラ、（３５）は質量分析計（ＭＳ）に連通
ずるイオン排出孔である。上記ステンレス製管路体（３
１）はプローブ（２）接続側端部と本体部とが絶縁ガイ
シ（３６）で、また本体部とＲＰへの連通部は絶縁スペ
ーサ（３７）でそれぞれ絶縁されている。そして端部及
び本体部にはそれぞれ直流電源が接続されて、チップヒ
ータ（Ｔ）（）部及びブロックヒータ部（Ｂ）が構成さ
れている。The ion source (3) is composed of a stainless steel conduit body (31) connected at one end to the probe (2) and communicated at the other end to a rotary bomb (RP) not shown. (32) is a filament, (33) is a discharge electrode, (
34) A beam spatula, (35) is an ion ejection hole that communicates with a mass spectrometer (MS). The above stainless steel pipe body (3
In 1), the connecting end of the probe (2) and the main body are insulated by an insulating insulator (36), and the main body and the communicating part to the RP are insulated by an insulating spacer (37). A DC power supply is connected to the end portion and the main body portion, respectively, thereby forming a chip heater (T) portion and a block heater portion (B).
上記イオン源（３）にはさらにイオン源温度制御部（４
）が具備されている。該イオン源温度制御部（４）は、
記憶部（４１）、温度プログラム部（４２）、加熱制御
部（４３）及びＣＰＵから構成されている。記憶部（４
１）には最適イオン化温度が記憶される。温度プログラ
ム部（４２）は、２つのプログラムか設定でき、そのう
ち一方はブロックヒータ温度（以下Ｂ温度という）のプ
ログラムであり、分析対象成分の各最適イオン化温度を
上記記憶部（４１）からＣＰＵを介して読みだしかつこ
れらを保持時間に基づいて溶出順に所定時間間隔で設定
できるものである。また他方はチップヒータ温度（以下
ＴＨ温度という）のプログラムであり、これは上記Ｂ温
度プログラムに対して常に一定の高温側（例えば約２０
℃）となるように設定されるものである。上記加熱制御
部（４３）はＣＰＵを介して温度プログラム部（４２）
から出力される温度プログラムに従って、上記各直ａ、
電源の供給電気量を調節するよう構成されている。The ion source (3) further includes an ion source temperature control section (4).
) is provided. The ion source temperature control section (4) includes:
It is composed of a storage section (41), a temperature program section (42), a heating control section (43), and a CPU. Storage part (4
1) stores the optimum ionization temperature. The temperature program section (42) can set two programs, one of which is a program for the block heater temperature (hereinafter referred to as B temperature), in which each optimum ionization temperature of the component to be analyzed is stored in the CPU from the storage section (41). These can be read out through the elution time and set at predetermined time intervals in the order of elution based on the retention time. The other is a chip heater temperature (hereinafter referred to as TH temperature) program, which is always on the high temperature side (for example, about 20
℃). The heating control section (43) is controlled by a temperature program section (42) via the CPU.
According to the temperature program output from
The power source is configured to adjust the amount of electricity supplied by the power source.
（試験例１）
ジエニボサイド（ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ） （以下イ成
分という）及びジェニピンゲンチオビオサイド（ｇｅｎ
ｉｐｉｎ ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｉｄｅ） （以下口成
分という）それぞれについて、Ｂ温度依存性を調べた。(Test Example 1) Dieniboside (hereinafter referred to as component A) and genipin gentiobioside (geniposide)
The temperature dependence of B (ipin, gentiobioside) (hereinafter referred to as oral components) was investigated.
結果を第２図及び第３図に示す。第２図からイ成分の場
合は２２０℃で感度か最大であり、第３図から口成分の
場合は３００℃で感度か最大であることがわかる。The results are shown in FIGS. 2 and 3. From Figure 2, it can be seen that the sensitivity is maximum at 220°C for the A component, and from Figure 3, the sensitivity is maximum at 300°C for the mouth component.
（試験例２）
上記試験例１の結果に基づき、イ成分及び口成分か両方
含有されている植物の実のメタノール抽出液を試料とし
て、上ＭＥ Ｌ Ｃ／ Ｍ Ｓによる分析を試みた。(Test Example 2) Based on the results of Test Example 1 above, an analysis using upper MELC/MS was attempted using a sample of a methanol extract of a plant fruit containing both a component and a component.
この抽出液については、保持時間（ＴＲ）１０分までは
ＢＬ！Ａ度２２０℃がほぼ最適イオン化温度である化合
物群が溶出し、ＴＲ１５分にＢ温度３００°Ｃが最適イ
オン化温度である口成分が溶出し、ＴＲ２１，５分にＢ
温度２２０℃が最適イオン化温度であるイ成分が溶出す
ることがわかっている。For this extract, the retention time (TR) is BL! up to 10 minutes! A group of compounds whose optimum ionization temperature is approximately 220°C elutes, a compound group whose optimum ionization temperature is approximately 300°C elutes at TR15, and a group of compounds whose optimum ionization temperature is approximately 300°C elutes at TR21,5 minutes.
It is known that component A, whose optimum ionization temperature is eluted at a temperature of 220°C.
この抽出液について、
）まずイオン源の温度をＢ温度２２０℃、ＴＨ温度２４
０℃に固定して全イオン強度クロマトグラムを測定した
ところ、第４図に示す結果を得た。Regarding this extract solution, first, set the temperature of the ion source to 220°C for B temperature and 24°C for TH temperature.
When the total ion strength chromatogram was measured with the temperature fixed at 0° C., the results shown in FIG. 4 were obtained.
ｉｉ） 次にイオン源のＢ温度及びＴＨ温度を、第６
図に示す温度プログラムに従ってステブブワイズに変化
させて全イオン強度クロマトグラムを測定したところ、
第５図に示す結果を得た。ii) Next, set the B temperature and TH temperature of the ion source to the sixth
The total ion intensity chromatogram was measured by changing the temperature stepwise according to the temperature program shown in the figure.
The results shown in FIG. 5 were obtained.
上記第４図では、イ成分には良い感度が得られているが
、口成分は検出されていない。これに反し、第５図では
、イ成分及び口成分のいずれにも最高感度が得られてい
る。In FIG. 4 above, good sensitivity is obtained for the A component, but the mouth component is not detected. On the contrary, in FIG. 5, the highest sensitivity is obtained for both the A component and the mouth component.
上記のことから、成分イ及び口にそれぞれに応じた最適
イオン化温度で切換えて測定することにより、それぞれ
が高感度で分析できることがわかった。From the above, it was found that each component can be analyzed with high sensitivity by switching and measuring the optimal ionization temperature according to each component.
実施例２
分析対象試料がすべて配糖体である場合に、上記実施例
１のＬＣ／ＭＳで分析可能かどうかを検討した。Example 2 In the case where all the samples to be analyzed were glycosides, it was examined whether the LC/MS of Example 1 above could be used for analysis.
まず各種配糖体において、感度に対する最適イオン化温
度の有無を検討した。First, we investigated whether there is an optimal ionization temperature for sensitivity for various glycosides.
下記に、検討した５種（イ〜ホ）の配糖体の分類と具体
名を示す。The classification and specific names of the five types (I to H) of glycosides studied are shown below.
イ：ジェニボサイド
ロ：ジエニビンゲンチオビオサイド
バルチン（ｒｕｔｉｎ）
二：サイコサポニン（ｓａｉｋｏｓａｐｏｎｉｎ） Ａ
ホ：サイコサポニンＣ
上記５種の配糖体のＢ温度依存性の有無について調べた
ところ、第７〜１１図に示す結果を得た。A: Genibosidero: Dienibingenthiobiosidevartin (rutin) II: Saikosaponin (saikosaponin) A
E: Saikosaponin C The presence or absence of B temperature dependence of the five types of glycosides mentioned above was investigated, and the results shown in Figs. 7 to 11 were obtained.
これらの結果から、まず配糖体にはＢＩＭＬ度依存性の
あることがわかる。従って上記各配糖体には前記インタ
フェースを用いるＬＣ／ＭＳで分析する場合最適イオン
化温度が存在し、これは具体的にはイは２２０℃程度、
ロ、ハ、二はいずれら３００８Ｃ程度、ホは３３０〜３
４０℃を選択すればよいことがわかる。These results first show that glycosides have BIML degree dependence. Therefore, each of the above glycosides has an optimum ionization temperature when analyzed by LC/MS using the above interface.
B, C, and 2 are all about 3008C, and E is 330-3
It can be seen that 40°C should be selected.
またさ、らに、上記口、ハ及び二について得られた結果
を考察すると、アグリコンが異なる配糖体であっても糖
部の構造が同様であると、その最適イオン化温度ら同様
になるこ−とがわかった。すなわち配糖体の糖部の構造
とその最適イオン化温度との間には規則性があることが
見いだされた。これは新しい知見である。Furthermore, considering the results obtained for 1, 3 and 2 above, even if the aglycones are different, if the structure of the sugar moiety is the same, the optimum ionization temperature will be the same. -I understood that. In other words, it was found that there is a regularity between the structure of the sugar moiety of a glycoside and its optimal ionization temperature. This is a new finding.
上記のことから、糖部か単糖類である配糖体の最適イオ
ン化温度は２２０℃程度、糖部が五糖類である配糖体の
最適イオン化温度は３００℃程度、糖部か三糖類である
配糖体の最適イオン化温度は３３０〜３４０℃程度と類
別できる。さらには、四糖類、五糖類と糖の数が増える
と、最適イオン化温度は上昇すると考えられる。From the above, the optimal ionization temperature for glycosides whose sugar moiety is a monosaccharide is around 220°C, and the optimal ionization temperature for glycosides whose sugar moiety is a pentasaccharide is around 300°C, which is a sugar moiety or a trisaccharide. The optimum ionization temperature of glycosides can be classified as approximately 330 to 340°C. Furthermore, it is thought that the optimal ionization temperature increases as the number of tetrasaccharides, pentasaccharides, and sugars increases.
従って、配糖体を加熱下でイオン化して質量分析するイ
オン源を有する上記のごときＬ Ｃ／ Ｍ Ｓの場合、
配糖体の糖部の構造に基づいて最適イオン化温度を設定
することにより、高感度で分析することができる。この
例の１つとして、上記口についてイオン化温度を２２０
℃及び３００℃にそれぞれ設定して測定したときの全イ
オン強度クロマドダラムを調べたところ、第１２図及び
第１３図に示す結果を得た。Therefore, in the case of the above-mentioned LC/MS having an ion source that ionizes glycosides under heating and performs mass spectrometry,
By setting the optimal ionization temperature based on the structure of the sugar moiety of the glycoside, analysis can be performed with high sensitivity. One example of this is to set the ionization temperature for the mouth to 220
When the total ionic strength chromadalum was measured at 300° C. and 300° C., the results shown in FIGS. 12 and 13 were obtained.
この結果からイオン化温度を選択することにより、配糖
体を感度良好に分析することができろ。By selecting the ionization temperature based on these results, glycosides can be analyzed with good sensitivity.
このことは、従来配糖体がＴ Ｓ Ｐ −Ｌ Ｃ／ Ｍ
Ｓで分析できなかったことに対して、適切なイオン化
温度を設定することによりこの従来の装置を用いても感
度良好に分析できることを示している。This means that conventional glycosides are TSP-LC/M
Although analysis could not be performed using S, this shows that by setting an appropriate ionization temperature, it is possible to perform analysis with good sensitivity using this conventional device.
次に、上記口成分（構造式を第１４図に示す）について
その最適イオン化温度（＝３００℃）でイオン化して得
られたマススペクトルを第１５図に示す。Next, FIG. 15 shows a mass spectrum obtained by ionizing the above-mentioned mouth component (the structural formula is shown in FIG. 14) at its optimum ionization temperature (=300° C.).
該スペクトルと上記構造式とを対比することにより、上
記スペクトルには分子量を与える成分子イオンだけでな
く、アグリコンや塘についての構造情報を与えるフラグ
メントが観察される。By comparing the spectrum with the above structural formula, it is observed that in the above spectrum, not only the component ions that give the molecular weight, but also fragments that give structural information about the aglycone and the tang.
以上のことから、試料が配糖体である場合でも、この発
明の装置や従来のＴＳＰ−ＬＣ／ＭＳを、そのイオン源
に最適イオン温度を設定することにより感度良好に分析
でき、分子量の決定や構造解析に利用することができる
。From the above, even when the sample is a glycoside, it can be analyzed with good sensitivity by setting the optimal ion temperature for the ion source using the device of this invention or conventional TSP-LC/MS, and the molecular weight can be determined. It can be used for structural analysis.
（へ）発明の効果
この発明によれば、加熱下でイオン化してマススペクト
ルを測定する際、感度の点から最適イオン化温度が存在
することが分かる。従って、この最適イオン化温度がそ
れぞれ異なる複数の化合物を含む試料を、各化合物につ
いての最適イオン化温度となるようにイオン源の温度を
可変制御することにより、１つの分析でこれらの化合物
を高感度で分析することかできる。(F) Effects of the Invention According to the present invention, it can be seen that there is an optimum ionization temperature from the viewpoint of sensitivity when ionizing under heating and measuring a mass spectrum. Therefore, by variably controlling the temperature of the ion source so that the optimum ionization temperature for each compound is obtained for a sample containing multiple compounds each having a different optimum ionization temperature, these compounds can be analyzed with high sensitivity in one analysis. It can be analyzed.
またこの発明によれば、液体クロマトグラフで分離・溶
出される複数の化合物を、その溶出順に従ってそれぞれ
の最適イオン化温度でイオン化させて質量分析すること
ができる。Further, according to the present invention, a plurality of compounds separated and eluted by a liquid chromatograph can be ionized at their respective optimum ionization temperatures according to their elution order, and subjected to mass spectrometry.
イオン源温度をプログラムで変えられるので、オートサ
ンプラと組み合わせろことにより、多様な試料の高感度
Ｌ Ｃ／ Ｍ Ｓ分析の自動化を図ることができろ。Since the ion source temperature can be changed programmatically, by combining it with an autosampler, it is possible to automate high-sensitivity LC/MS analysis of a variety of samples.
またさらにこの発明によれば、試料が配糖体である場合
にら、その最適イオン化温度を設定することで、この発
明の分析計のみならず従来のＴＳＰ−ＬＣ／ＭＳでも高
感度に分析することができる。またこの発明の分析法や
ＬＣ／ＭＳに上り配糖体の構造情報を得ることができる
ので、構造解析に多大の寄与をすることができる。Furthermore, according to the present invention, when the sample is a glycoside, by setting the optimum ionization temperature, analysis can be performed with high sensitivity not only with the analyzer of the present invention but also with conventional TSP-LC/MS. be able to. Furthermore, since structural information on glycosides can be obtained using the analytical method of the present invention and LC/MS, it can greatly contribute to structural analysis.
第り図はこの発明のＬ Ｃ／ Ｍ Ｓの一例におけるイ
ンターフェース部の一実施例の構成説明図、第２図はジ
エニボサイドのイオン源温変依存性を示すグラフ図、第
３図はジェニピンゲンチオビオサイドの第２図相当図、
第４図は植物の実のメタノール抽出液についてイオン源
温度を固定したときに得られる全イオン強度クロマトグ
ラム図、第５図は植物の実のメタノール抽出液について
イオン源温度を変化させたときに得られる全イオン強度
クロマトグラム図、第６図は第５図の温度変化の一例の
温度プログラム図、第７〜１１図はそれぞれ、ジエニボ
サイド、ジェニピンゲンチオビオサイド、ルチン、サイ
コサポニンＡ及びサイコサポニンＣの第２図相当図、第
１２図はジェニピンゲンチオビオサイドのイオン化温度
が２２０℃のときの全イオン強度クロマトグラム図、第
１３図はイオン化温度か３００℃のときの第１２図相当
図、第１４図はジェニピンゲンチオビオサイドの構造式
を表す図、第１５図はジェニピンゲンチオビオサイドの
イオン化温度３００℃のときのマススペクトル図、第１
６図は従来例の第１図相当図である。
■・・・・・インターフェース、
２・・・・・・ベーパライザプローブ、３・・・・・イ
オン源、
４・・・・・・イオン源温度制御部、
３Ｉ・・・・・・管路体、 ３２・・・・・・フ
ィラメント、３３・・・・・・放電電極、 ３４・
・・・・・リベラ、３５・・・・・・イオン排出孔、
３６・・・・・・絶縁ガイシ、３７・・・・・絶縁スペ
ーサ、
４１・・・・・・記憶部、
４２・・・・・・温度プログラム部、
４３・・・・・・加熱制御部。
３７
第
第
】
ィ才〉逓ｌ友（°Ｃ）
第
８
図
イオンＡ！（”Ｃ）
第
イオ；源１斐（°Ｃ）
第
１０ｒｙ：Ｉ
イオン源！（’Ｃ）
笛１１
閏
２７０ ２８０ ２９０
３００ ３１０ ３２０ ３３０ ３４０３５０ ３６
０イＩＡ逼渡−（°Ｃ）
７０
第１２
膚
垣
１４図
第
１５図Fig. 2 is an explanatory diagram of the configuration of an embodiment of the interface section in an example of the LC/MS of the present invention, Fig. 2 is a graph showing the dependence of dieniboside on temperature changes in the ion source, and Fig. 3 is a graph showing the dependence of dieniboside on temperature changes in the ion source. Diagram equivalent to Figure 2 of thiobioside,
Figure 4 is a total ion intensity chromatogram obtained when the ion source temperature is fixed for a methanol extract of plant fruits, and Figure 5 is a total ion intensity chromatogram obtained when the ion source temperature is varied for a methanol extract of plant fruits. The total ion intensity chromatogram obtained, FIG. 6 is a temperature program diagram of an example of the temperature change in FIG. 5, and FIGS. Figure 12 is a total ion intensity chromatogram of saponin C when the ionization temperature is 220°C, Figure 13 is a diagram equivalent to Figure 12 when the ionization temperature is 300°C. Corresponding diagram, Figure 14 is a diagram showing the structural formula of genipin gentiobioside, Figure 15 is a mass spectrum diagram of genipin gentiobioside at an ionization temperature of 300°C, Figure 1
FIG. 6 is a diagram corresponding to FIG. 1 of the conventional example. ■...Interface, 2...Vaporizer probe, 3...Ion source, 4...Ion source temperature control section, 3I...Pipeline body, 32... filament, 33... discharge electrode, 34.
...Ribera, 35...Ion discharge hole,
36...Insulating insulator, 37...Insulating spacer, 41...Storage section, 42...Temperature program section, 43...Heating control section . 37th] Aeon A! (''C) 1st Ion; Source 1 (°C) 10th ry:I Ion source! ('C) Whistle 11 Leap 270 280 290 300 310 320 330 340 350 36
0i IA passing - (°C) 70 12th wall fence 14 figure 15
Claims (1)
分離されたピーク成分を含有する移動相を順次気化した
後、得られる各気化ピーク成分をそれぞれ最適イオン化
温度でイオン化し、得られる各イオンのマススペクトル
を測定することを特徴とする液体クロマトグラフィ／質
量分析法。 ２、試料が配糖体含有試料であり、最適イオン化温度が
配糖体糖部の構造に基づいて設定されるものである請求
項１の分析法。 ３、液体クロマトグラフと質量分析計との間に、液体ク
ロマトグラフの移動相流路で分離され溶出されるピーク
成分含有移動相を気化する気化部、該気化部で得られた
気化ピーク成分を加熱下でイオン化するイオン源をこの
順に接続してなる液体クロマトグラフ／質量分析計であ
って、 上記イオン源が、 （ａ）予め各測定対象ピーク成分の最適イオン化温度を
記憶する記憶部、 （ｂ）移動相流路で溶出される各試料の保持時間に基づ
いて、各最適イオン化温度を記憶部から読み出しかつこ
れらを溶出順に設定する温度プログラム部、及び （ｃ）上記プログラム部で設定された順序でイオン源を
加熱する加熱作動部 からなるイオン源温度制御部を具備してなる液体クロマ
トグラフ／質量分析計。 ４、イオン源が、熱容量が小さい抵抗体で構成され、こ
の抵抗体への直流電流の供給量によりイオン源温度が制
御される請求項３の液体クロマトグラフ／質量分析計。 ５、イオン源が、その気化部接続側端部及びその後段の
本体部とで独立して温度制御されるよう構成され、上記
本体部を最適イオン化温度でかつ上記端部を最適イオン
化温度より一定の高温でそれぞれ加熱制御する請求項３
の液体クロマトグラフ／質量分析計。[Claims] 1. Separating a sample by liquid chromatography,
Liquid chromatography/mass that is characterized by sequentially vaporizing a mobile phase containing separated peak components, ionizing each obtained vaporized peak component at an optimal ionization temperature, and measuring the mass spectrum of each obtained ion. Analysis method. 2. The analytical method according to claim 1, wherein the sample is a glycoside-containing sample, and the optimum ionization temperature is set based on the structure of the glycoside sugar moiety. 3. Between the liquid chromatograph and the mass spectrometer, there is a vaporization section that vaporizes the mobile phase containing peak components separated and eluted in the mobile phase flow path of the liquid chromatograph, and a vaporization section that vaporizes the peak component-containing mobile phase that is separated and eluted in the mobile phase flow path of the liquid chromatograph. A liquid chromatograph/mass spectrometer in which an ion source that ionizes under heating is connected in this order, the ion source comprising: (a) a storage section that stores in advance the optimum ionization temperature of each peak component to be measured; b) a temperature program unit that reads each optimum ionization temperature from the storage unit based on the retention time of each sample eluted in the mobile phase flow path and sets these in the order of elution, and (c) a temperature program unit that A liquid chromatograph/mass spectrometer comprising an ion source temperature control section consisting of a heating operation section that sequentially heats the ion source. 4. The liquid chromatograph/mass spectrometer according to claim 3, wherein the ion source is composed of a resistor having a small heat capacity, and the ion source temperature is controlled by the amount of direct current supplied to the resistor. 5. The ion source is configured such that the temperature of the end on the connection side of the vaporization section and the main body at the subsequent stage is independently controlled, and the main body is kept at an optimum ionization temperature and the end is kept at a constant temperature lower than the optimum ionization temperature. Claim 3: The heating is controlled at a high temperature of
liquid chromatograph/mass spectrometer.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21672789A JP2926773B2 (en) | 1989-08-22 | 1989-08-22 | Liquid chromatograph / mass spectrometry and apparatus therefor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21672789A JP2926773B2 (en) | 1989-08-22 | 1989-08-22 | Liquid chromatograph / mass spectrometry and apparatus therefor |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0378652A true JPH0378652A (en) | 1991-04-03 |
| JP2926773B2 JP2926773B2 (en) | 1999-07-28 |
Family
ID=16692979
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21672789A Expired - Lifetime JP2926773B2 (en) | 1989-08-22 | 1989-08-22 | Liquid chromatograph / mass spectrometry and apparatus therefor |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2926773B2 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0599911A (en) * | 1991-10-03 | 1993-04-23 | Hitachi Ltd | Mass spectrometer for liquid chromatography |
| JP2000123781A (en) * | 1998-10-14 | 2000-04-28 | Hitachi Ltd | Atmospheric pressure ionization mass spectrometer |
| JP2014179200A (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Jeol Ltd | Mass spectroscope |
| CN113711025A (en) * | 2019-05-08 | 2021-11-26 | 株式会社岛津制作所 | Mass spectrometer and mass spectrometry method |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2876434A4 (en) * | 2012-07-17 | 2016-05-04 | Snu R&Db Foundation | Method for improving mass spectrum reproducibility and quantitative analysis method using same |
-
1989
- 1989-08-22 JP JP21672789A patent/JP2926773B2/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0599911A (en) * | 1991-10-03 | 1993-04-23 | Hitachi Ltd | Mass spectrometer for liquid chromatography |
| JP2000123781A (en) * | 1998-10-14 | 2000-04-28 | Hitachi Ltd | Atmospheric pressure ionization mass spectrometer |
| JP2014179200A (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Jeol Ltd | Mass spectroscope |
| CN113711025A (en) * | 2019-05-08 | 2021-11-26 | 株式会社岛津制作所 | Mass spectrometer and mass spectrometry method |
| CN113711025B (en) * | 2019-05-08 | 2024-05-24 | 株式会社岛津制作所 | Mass spectrometer and mass spectrometry method |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2926773B2 (en) | 1999-07-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tolstikov et al. | Analysis of highly polar compounds of plant origin: combination of hydrophilic interaction chromatography and electrospray ion trap mass spectrometry | |
| JP2834136B2 (en) | Mass spectrometer | |
| Liu et al. | Structural analysis of saponins from medicinal herbs using electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
| Kite et al. | Liquid chromatography/mass spectrometry of malonyl‐ginsenosides in the authentication of ginseng | |
| Køppen et al. | Determination of acidic herbicides using liquid chromatography with pneumatically assisted electrospray ionization mass spectrometric and tandem mass spectrometric detection | |
| Liu et al. | Determination and quantification of active phenolic compounds in pigeon pea leaves and its medicinal product using liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| Sun et al. | A UHPLC–MS/MS method for simultaneous determination of six flavonoids, gallic acid and 5, 8-dihydroxy-1, 4-naphthoquinone in rat plasma and its application to a pharmacokinetic study of Cortex Juglandis Mandshuricae extract | |
| Van der Peyl et al. | Gas phase ion/molecule reactions in laser desorption mass spectrometry | |
| JP2000057989A (en) | Mass spectrometer and mass spectrometry | |
| Pouwels et al. | Evidence for oligomers in pyrolysates of microcrystalline cellulose | |
| Xu et al. | Chemical profiling and quantification of ShenKang injection, a systematic quality control strategy using ultra high performance liquid chromatography with Q Exactive hybrid quadrupole orbitrap high‐resolution accurate mass spectrometry | |
| Bianco et al. | Identification of glucosinolates in capers by LC‐ESI‐hybrid linear ion trap with Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry (LC‐ESI‐LTQ‐FTICR MS) and infrared multiphoton dissociation | |
| Hostettmann et al. | Desorption/chemical ionization mass spectrometry of naturally occurring glycosides | |
| Jin et al. | Simultaneous determination of 12 active components in the roots of Pulsatilla chinensis using tissue‐smashing extraction with liquid chromatography and mass spectrometry | |
| Liao et al. | UPLC–PDA–ESI–MS/MS analysis of compounds extracted by cardiac h9c2 cell from Polygonum orientale | |
| Zhang et al. | Ultra‐performance liquid chromatography hyphenated with quadrupole‐Orbitrap mass spectrometry for simultaneous determination of necine‐core‐structure pyrrolizidine alkaloids in Crotalaria sessiliflora L. without all corresponding standards | |
| Mowthorpe et al. | Matrix‐assisted laser desorption/ionisation time‐of‐flight/thin layer chromatography/mass spectrometry—a rapid method for impurity testing | |
| Schulten et al. | Identification of ginsenosides from Panax ginseng in fractions obtained by high-performance liquid chromatography by field desorption mass spectrometry, multiple internal reflection infrared spectroscopy and thin-layer chromatography | |
| Liu et al. | Identification of new trace triterpenoid saponins from the roots of Panax notoginseng by high‐performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
| JPH0378652A (en) | Liquid chromatography/mass spectrometry and apparatus | |
| Dong et al. | Structural analysis of monoterpene glycosides extracted from Paeonia lactiflora Pall. using electrospray ionization Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry and high‐performance liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
| Zu et al. | Determination and quantification of astragalosides in Radix Astragali and its medicinal products using LC–MS | |
| Guo et al. | Simultaneous quantification of 25 active constituents in the total flavonoids extract from Herba Desmodii Styracifolii by high‐performance liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
| Jorge et al. | Quantification and structural characterization of raffinose family oligosaccharides in Casuarina glauca plant tissues by porous graphitic carbon electrospray quadrupole ion trap mass spectrometry | |
| Jiang et al. | Simultaneous determination of multiple components in cigarettes by mechanochemical extraction and direct analysis in real time mass spectrometry in minutes |