JPH03215496A - Novel peptide - Google Patents
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Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は生理活性ペプチド、更に詳しくはマクロファー
ジ走化活性を有する新規ペプチトに関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Industrial Application Field] The present invention relates to a physiologically active peptide, and more particularly to a novel peptide having macrophage chemotactic activity.
一般的に、マクロファージ走化性囚７−（以下ＭＣＦと
略す）は，リンパ球及びリンパ球系株化細胞から特異的
または非特異的に分泌されるマクロファージ走化活性を
有するリンフオカインの一種として知られている。たと
えば、末梢血リンパ球（以下ＰＢＬと略す）をレクチン
たとえばフイトヘムアグルチニン（以下円ＩＡと略す）
で刺激した後、その刺激リンパ球を培養した上清には高
いマクロファージ走化活性が認められることは既に知ら
れている。In general, macrophage chemotactic prisoner 7- (hereinafter abbreviated as MCF) is known as a type of lymphokine that has macrophage chemotactic activity and is secreted specifically or nonspecifically from lymphocytes and lymphoid cell lines. It is being For example, peripheral blood lymphocytes (hereinafter abbreviated as PBL) are treated with lectins such as phytohemagglutinin (hereinafter abbreviated as circle IA).
It is already known that high macrophage chemotactic activity is observed in the supernatant obtained by culturing the stimulated lymphocytes after stimulation with .
さらに永続生存性を持たせるために白血病細胞株と」二
記刺激リンパ球を融合させて得られたハイブリｌ＜−マ
の培養１二清にもマクロファージ走化活性が認められる
（特開昭６０−１８１０１８号公報）。In addition, macrophage chemotactic activity was also observed in the cultured serum of hybrid cells obtained by fusing leukemia cell lines with ``2-stimulated lymphocytes'' to ensure permanent survival (Japanese Patent Application Laid-Open No. 1983-1960). -181018).
一方、遅延型過敏症において、感作動物に惹起反応を生
じさせ、皮膚反応が最大となる約４８時間後において、
その組織中にリンパ球の他マクロファージの浸潤が著明
であることから，遅延型過敏症発症においてＭＣＩ”の
関与が考えられている。On the other hand, in delayed-type hypersensitivity, an induced reaction is caused in the sensitized animal, and about 48 hours after the skin reaction reaches its maximum,
Since the infiltration of macrophages in addition to lymphocytes is remarkable in the tissue, it is thought that MCI is involved in the onset of delayed-type hypersensitivity.
このようにＭＣＦは反応局所にマクロファージを集合さ
せる活性を有することで定義されるので、抗腫瘍剤とし
て医薬への応用が期待されている。Since MCF is thus defined by having the activity of assembling macrophages at the reaction site, it is expected to be applied to medicine as an antitumor agent.
しかし，１一記リンパ球の培養」二清中にも，惹起反応
を生じさせた皮膚中にも、いずれにもＭＣＦの濃度は低
く、未だその構造は明らかとなっていなレ）。However, the concentration of MCF is low both in the culture of lymphocytes described in Section 1-1 and in the skin where the induced reaction occurred, and its structure has not yet been clarified.
本発明者らは． ＭＣＦ活性を有する化合物について解
析を進めてきた結果、特定のアミノ酸配列を有するペプ
チド及びその誘導体ペプチドが高いＭＣＩ”活性を有す
ることを見出し、本発明に至った。The inventors. As a result of analyzing compounds having MCF activity, it was discovered that peptides having a specific amino acid sequence and derivative peptides thereof have high MCI'' activity, leading to the present invention.
すなオ〕ち，本発明は下記の式で示される新規ペプチト
及びその薬理学的に許容されうる塩に関するものである
。Specifically, the present invention relates to a novel peptide represented by the following formula and a pharmacologically acceptable salt thereof.
式ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−［）−Ｅ−Ｆ
〔式中，『ｒ１は
（８）水素 または、
（ｂ）アセチル基であり、
Ａは、
（ａ）無し
（ｂ） Ｌ−Ｔｒｐ
（ｃ） Ｌ−Ｌｅｕ
（ｄ） Ｌ−Ｇｌｎ
（ｅ） Ｌ−Ｓｅｒ
（ｆ） Ｌ−Ｔｙｒ
（ｇ） Ｌ−Ｔｈｒ
（ｈ） ＧＬｙ
Ｂは、
Ｇ−Ｉｆ−Ｉ−ｎ
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または，
であり、
（ａ） Ｌ−Ａｒｇ
（ｂ） Ｌ−Ｌｃｕ
（Ｃ） Ｌ−Ｇｌ．ｕ
Ｃは、
（ａ） Ｇｌｙ
（ｂ） Ｌ−Ａｒｇ
Ｄは、
（ａ）ｌ、−Ｇｌｎ
（ｂ） Ｌ−Ａｒｇ
（ｃ） Ｌ−Ｌｙｓ
（ｄ）Ｄ−＾ｒｇ
（ｅ）Ｌ−Ｔｒｐ
（ｒ） Ｌ−Ａｓｐ
（ｇ） Ｌ−Ｃｙｓ
（ｈ）Ｇｕｙ
（ｉ） Ｌ−Ｇｌｕ
Ｅは、
（ａ） Ｌ−Ｓｅｒ
（ｂ）Ｌ−Ｇｌｕ
（ｃ）Ｌ−Ｇｌｎ
または、
または，
であり、
または、
であり、
または，
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または，
であり、
または，
または、
または、
（ｄ） Ｌ−Ｐｒｏ
（ｅ） Ｌ−Ｌｅｕ
（ｆ） Ｌ−Ｖａｌ
（ｇ） Ｌ−＾１ａ
（ｈ） Ｌ−Ｍｅｔ
（ｉ） Ｌ−Ａｓｎ
（ｊ） Ｌ−Ｐｈｅ
（ｋ） Ｇｌｙ
（１） Ｌ−Ａｒｇ
Ｆは、
（ａ） Ｇｌｙ
（ｂ） Ｌ−Ａｓｐ
（ｃ） Ｌ−Ｇｌｕ
（ｄ） Ｌ−Ｓｅｒ
（ｅ） Ｌ−Ａｒｇ
（ｆ） Ｌ−Ｃｙｓ
Ｇは、
（ａ）無し
（ｂ） Ｇｌｙ
Ｈは，
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
であり、
または、
または、
または、
または，
または，
であり、
または、
であり、
（．）無し または、
（ｂ） Ｌ−Ｓｅｒ であり、
■は、
（ａ）無し または、
（ｂ） Ｌ−Ｇｌｕ であり、
ｒ１は、
（ａ）水酸基 または、
（ｂ）アミド基 である。〕
本発明の新規ペブチドは高いＭＣＦ活性を有しており、
遅延型過敏症の研究用試薬，更には抗腫瘍剤としての医
薬用途に有効に用いられる。Formula m-A-B-C-[)-E-F [wherein, r1 is (8) hydrogen or (b) acetyl group, A is (a) None (b) L-Trp ( c) L-Leu (d) L-Gln (e) L-Ser (f) L-Tyr (g) L-Thr (h) GLy B is G-If-I-n or or or or or or , or, or, or, (a) L-Arg (b) L-Lcu (C) L-Gl. u C is (a) Gly (b) L-Arg D is (a) l, -Gln (b) L-Arg (c) L-Lys (d) D-^rg (e) L-Trp ( r) L-Asp (g) L-Cys (h) Guy (i) L-Glu E is (a) L-Ser (b) L-Glu (c) L-Gln or, or, or , is, or, or, or, or, or, or, or, or, or, or, (d) L-Pro (e) L-Leu (f) L-Val (g) L-^1a (h) L-Met (i) L-Asn (j) L-Phe (k) Gly (1) L-Arg F is (a) Gly (b) L-Asp (c) L- Glu (d) L-Ser (e) L-Arg (f) L-Cys G is (a) None (b) Gly H is, or, or, or, or, or, or, or, or. Yes, or, or, or, or, or, (.) None, or (b) L-Ser, ■ is (a) None, or (b) L-Glu and r1 is (a) a hydroxyl group or (b) an amide group. ] The novel peptide of the present invention has high MCF activity,
It is effectively used as a research reagent for delayed-type hypersensitivity, and also for medical purposes as an antitumor agent.
本発明のペプチドは、化学的にアミノ酸を順次結合させ
る化学合成法によって製造される。The peptide of the present invention is produced by a chemical synthesis method in which amino acids are chemically linked in sequence.
ペプチ！・の化学合成法としては，同相合成法が広く用
いられている。本発明のペプチド類を合成する際にも、
この方法を用いることができる。Pepchi! The in-phase synthesis method is widely used as a chemical synthesis method for . When synthesizing the peptides of the present invention,
This method can be used.
同相合成法においては、種々のアミノ酸部分の反応性側
鎖を適当な保護基で保護することにより、保護基が最後
に除去されるまで反応性側鎖で起こる可能性のある化学
反応を防止することができる。In the in-phase synthesis method, the reactive side chains of various amino acid moieties are protected with appropriate protecting groups to prevent possible chemical reactions at the reactive side chains until the protecting groups are finally removed. be able to.
例えば、Ａｓｐ．Ｇｌｕにおける側鎖保護基としては，
０ロｚｌ、ＯＬＢｕを用いることができ、Ｓｅｒ． Ｔ
ｈｒ． Ｔｙｒにおける側鎖保護基としてＩｌｚｌ．
Ｂｒ−Ｚ． ｔａｕを用いることができる。また． Ｌ
ｙｓにおいてはＣＩ−Ｚ． Ｔｏｓが、＾ｒｇにおいて
Ｔｏｓ、阿ＴＳ． Ｍｔｒが、ＨｉｓにおいてＴｏｓ．
ＤＮＰ． Ｔｒｔ・Ｏ｝ｌが、ＴｒｐにおいてＣＩ−１
０が， Ｃｙｓにおいては４−ＭｅＢｚｌ、４−ＭｅＯ
Ｂｚｌが側鎖保護基として用いられる。Ｎｅｔはスルホ
キシトの形で保護することができる。For example, Asp. As a side chain protecting group in Glu,
0Lozl, OLBu can be used, and Ser. T
hr. Ilzl. as a side chain protecting group on Tyr.
Br-Z. tau can be used. Also. L
In ys, CI-Z. Tos in ^rg, AtS. Mtr in His.Tos.
DNP. Trt・O}l is CI-1 in Trp
0 is 4-MeBzl, 4-MeO in Cys
Bzl is used as a side chain protecting group. Net can be protected in the form of sulfoxide.
固相合成法としては、Ｂｏｃ法、Ｆｍｏｃ法が代表的で
あり、どちらの方法も本発明のペプチド類合成の際に利
用できる。固和合或は、例えば，α−アミノ保護アミノ
酸を用いてペプチドのＣ一末端から開始することができ
る。適当な出発材料は、例えば必要なα−アミノ保護ア
ミノ酸をクロ口メチル樹脂、オキシメチル樹脂、ベンズ
ヒドリルアミン樹脂に付加することにより調製できる。Typical solid-phase synthesis methods include the Boc method and the Fmoc method, and either method can be used in the synthesis of the peptides of the present invention. Solid incorporation can begin from the C-terminus of the peptide, for example using α-amino protected amino acids. Suitable starting materials can be prepared, for example, by adding the required α-amino protected amino acid to a chloromethyl resin, an oxymethyl resin, a benzhydrylamine resin.
また、αーアミノ基及び側鎖基が葆護されたアミノ酸の
付加した４（オキシメチル）フェニルアセタミドメチル
樹脂が市販されており、本発明のペプチド類合成の際に
も使用することができる。また、本発明のペプチド類は
、自動固相合成機を利用しても合成することができる。In addition, 4(oxymethyl)phenylacetamidomethyl resin to which amino acids with α-amino groups and side chain groups are added is commercially available, and can be used in the synthesis of the peptides of the present invention. . Furthermore, the peptides of the present invention can also be synthesized using an automatic solid phase synthesizer.
典型的なＢｏｃ法ペブチド合成の工程を示す。例えば，
出発材料として、α−アミノ基をＢｏｃ基で保護したア
ミノ酸樹脂を使用する。The steps of a typical Boc method peptide synthesis are shown. for example,
As a starting material, an amino acid resin in which the α-amino group is protected with a Boc group is used.
１． ０ＣＭで洗浄（３回）
２． ＴＦＡ／ＤＣＭで脱Ｂｏｃ化
３． ０ＣＭで洗浄（３回）
４． ＤＩＥＡ／ＤＭＦで中和
５． ０ＭＦで洗浄（５回）
６．Ｂｏｃアミノ酸無水物と反応
７．１）ＣＭで洗浄（５回）
８． 工程２〜７の繰り返し
９， ＤＣＭで洗浄（２回）
１０． Ａｒガスで乾燥
Ｈ．アニソール／メチルエチルスルフイド添加１２．−
７０℃で旺を添加、−２０℃／３０分、０℃／３０分反
応
１３． ８Ｆを留去
１４．クロロホルム・エーテルで洗浄（３回）１５．
５Ｎ−酢酸水溶液で合成ペプチドを抽出１６．合成ペプ
チドを叶ＬＣにて精製
典型的なＦｍｏｃ法ペプチド合成の工程を示す。例えば
、出発材料として，α−アミノ基をＢｏｃ基で保護した
アミノ酸樹脂を使用する。1. Wash with 0CM (3 times) 2. De-Boc conversion with TFA/DCM3. Wash with 0CM (3 times) 4. Neutralize with DIEA/DMF5. Wash with 0MF (5 times) 6. Reaction with Boc amino acid anhydride 7.1) Washing with CM (5 times) 8. Repeat steps 2-7 9. Wash with DCM (2 times) 10. Dry with Ar gas H. Anisole/methyl ethyl sulfide addition 12. −
Add hydroxide at 70°C, -20°C/30 minutes, 0°C/30 minutes reaction 13. Distill 8F14. Wash with chloroform ether (3 times)15.
Extract the synthetic peptide with 5N acetic acid aqueous solution 16. Purification of synthetic peptides using Kano LC The steps of typical Fmoc method peptide synthesis are shown. For example, an amino acid resin in which the α-amino group is protected with a Boc group is used as the starting material.
１， Ｉ）ＣＭで洗浄（３回）
２． ＴＦＡ／ＤＣＭで脱Ｂｏｃ化
３． ０ＣＭで洗浄（３回）
４． ０肝で洗浄（３回）
５．ＦＩｌｏｅアミノ酸無水物と反応
６． ０ＭＦで洗浄（５回）
７． ピペリジン／ＤＭＦで脱Ｆ＋＋＋ｏｃ化８． 工
程４〜７の繰り返し
９． ０ＭＦで洗浄（５回）
１０． ０ＣＭで洗浄（２回）
Ｈ． Ａｒガスで乾燥
１２．アニソール／メチルエチルスルフィド／１，２エ
タンジチオール添加
１３．−７０℃で｝ＩＦを添加，−２０℃７３０分、０
℃／３０分反応
１４． ｌ−ＩＦを留去
１５．クロロホルム・エーテルで洗浄（３回）１６．
５Ｎ−酢酸水溶液で合成ベプチドを抽出１７．合成ペプ
チドをＩ１｝’ＬＣにて精製以下、実施例により，本発
明を更に詳細に説明する。尚、アミノ酸，ペプチド、保
護基、活性基等が本明細書において記号で示される場合
、ＩＵＰＡＣ及びＩＵＰにより規定された或るいは、ペ
プチド化学の分野で使用される通常の記号を用いる。記
号の例は次の通りである。1. I) Washing with CM (3 times) 2. De-Boc conversion with TFA/DCM3. Wash with 0CM (3 times) 4. Wash with 0 liver (3 times) 5. Reaction with FIloe amino acid anhydride6. Wash with 0MF (5 times) 7. De-F+++oc removal with piperidine/DMF8. Repeat steps 4-79. Wash with 0MF (5 times) 10. Wash with 0CM (2 times) H. Dry with Ar gas12. Anisole/methyl ethyl sulfide/1,2 ethanedithiol addition 13. Add IF at -70°C, -20°C for 730 minutes, 0
℃/30 min reaction 14. Distill off l-IF15. Wash with chloroform ether (3 times)16.
Extract the synthetic peptide with 5N acetic acid aqueous solution 17. Purification of Synthetic Peptide by I1}'LC The present invention will be explained in more detail with reference to Examples below. When amino acids, peptides, protecting groups, active groups, etc. are indicated by symbols in this specification, the usual symbols defined by IUPAC and IUP or used in the field of peptide chemistry are used. Examples of symbols are:
Ｉ、−Ａｌａ・・・Ｌ−アラニン
し−Ａｒｇ・・Ｌ−アルギニン
しーＡｓｎ・・Ｌ−アスパラギン
しーＡｓρ・・・し−アスパラギン酸
Ｌ−Ｃｙｓ・・・し−システイン
Ｌ−Ｇｌｎ・・・Ｌ−グルタミン
Ｌ−Ｇｌｕ・・・Ｌ−グルタミン酸
Ｇｌｙ・・・・・・グリシン
Ｌ−Ｈｉｓ・・・Ｌ−ヒスチジン
Ｌ−ＩＬｅ・・・Ｌ−イソロイシン
Ｌ−Ｌｅｕ・・・Ｌ一ロイシン
Ｌ−Ｌｙｓ・・・し−リジン
Ｌ−Ｎｅｔ・・・Ｌ−メチオニン
Ｌ−Ｐｈｅ・・・し−フェニルアラニンＬ−Ｐｒｏ・・
化一プロリン
Ｌ−Ｓｅｒ・・・し−セリン
Ｌ−Ｔｈｒ・・・し−スレオニン
Ｌ−Ｔｒｐ・・・し−トリプトファン
Ｌ−Ｔｙｒ・・・Ｌ一タイロシン
Ｌ−Ｖａｌ・・化−バリン
Ｄ−Ａｌａ・・・Ｄ−アラニン
Ｄ−Ａｒｇ・・・Ｄ−アルギニン
Ｄ−Ａｓｎ・・・Ｄ−アスパラギン
Ｄ−Ａｓｐ・・・Ｄ−アスパラギン酸
Ｄ−Ｃｙｓ・・・Ｄ−システイン
Ｄ−Ｇｌｎ・・・Ｄ−グルタミン
Ｄ−Ｇｌｕ・・・Ｄ−グルタミン酸
Ｄ−１ｌｉｓ・・・Ｄ−ヒスチジン
Ｄ−Ｉ１ｅ・・・Ｄ−イソロイシン
Ｄ−Ｌｅｕ・・・Ｄ一ロイシン
Ｄ−Ｌｙｓ・・・叶リジン
Ｄ−Ｎｅｔ・・・Ｄ−メチオニン
Ｄ−Ｎｌｅ・・・Ｄ−ノルロイシン
Ｄ − Ｐ ｈ ｅ・・・１）一フェニルアラニンＤ−
Ｐｒｏ・・Ｄ−プロリン
Ｄ−Ｓｅｒ・・・Ｄ−セリン
Ｄ−Ｔｈｒ・・・Ｄ−スレオニン
Ｄ一丁ｒｐ・・・Ｄ−１−リブトファンＤ−’ｒｙｒ・
・・１）一タイロシン
Ｄ−Ｖａｌ・Ｄ−バリン
＋１ＰＬＣ・・高速液体クロマ１〜グラフィーＯＤＳ力
ラム・ＣＩ８カラム
ＨＭＰレジン・・ヒドロキシメチルフェノキシ酢酸レジ
ン（樹脂）
ＰＡＭレジン・・・フェニルアセタミドレジン（樹脂）
１３ＨＡレジン・・・ペンズヒドリルアミンレジン（樹
脂）
ＤＣＭ・・・ジクロ口メタン
ＤＭＦ・・・ジメチルホルムアミド
ＴＦＡ・・叫〜リフルオ口酢酸
Ａｒガス・・・アルゴンガス
Ｂｚｌ・・・ベンジル基
しＢｕ・・・乞一ブチル基
２・・・・・・ペンジノレオキシカノレボニノレ基Ｂｏ
ａ・・・プチルオキシ力ルボニル基Ｔｏｓ−トシル基
ＭＴＳ・・・メシチレンーニースルホニル基Ｔｒｔ・・
・トリチル基
ＤＮＩ）・・・２，４〜ジニトロフェニル基Ｍｔｒ・・
・４−メトキシー２，３．６− トリメチルベンゼンス
ルホニル基
Ｆｍｏｃ・・・９−フルオレニルメトキシカルボニル基
以下に実施例を示して本発明をより詳細に説明する。I, -Ala...L-Alanine -Arg...L-Arginine -Asn...L-Asparagine-Asρ...S-Aspartic acid L-Cys...Cysteine L-Gln...・L-glutamine L-Glu...L-glutamic acid Gly...glycine L-His...L-histidine L-ILe...L-isoleucine L-Leu...L-leucine L- Lys...Lysine L-Net...L-Methionine L-Phe...Shi-Phenylalanine L-Pro...
Proline L-Ser...Serine L-Thr...Threonine L-Trp...Tryptophan L-Tyr...L-Tyrosin L-Val...Valine D-Ala ...D-Alanine D-Arg...D-Arginine D-Asn...D-Asparagine D-Asp...D-Aspartic acid D-Cys...D-Cysteine D-Gln...D -Glutamine D-Glu...D-Glutamic acid D-1lis...D-Histidine D-I1e...D-Isoleucine D-Leu...D-Leucine D-Lys...Kanolysine D-Net. ...D-methionine D-Nle...D-norleucine D-Phe...1) Monophenylalanine D-
Pro...D-proline D-Ser...D-serine D-Thr...D-threonine D1chorp...D-1-ributophane D-'ryr...
... 1) Tylosin D-Val, D-valine + 1 PLC, High performance liquid chroma 1 - Graphy ODS power ram, CI8 column, HMP resin, Hydroxymethylphenoxyacetic acid resin (resin), PAM resin, Phenylacetamide resin (resin)
13HA resin...penzhydrylamine resin (resin) DCM...dichloromethane DMF...dimethylformamide TFA...scream ~ refluoroacetic acid Ar gas...argon gas Bzl...benzyl group Bu...・Kiichibutyl group 2...Pendinoleoxycanoleboninole group Bo
a...butyloxycarbonyl group Tos-tosyl group MTS...mesitylene-neesulfonyl group Trt...
・Trityl group DNI)...2,4-dinitrophenyl group Mtr...
-4-methoxy 2,3.6-trimethylbenzenesulfonyl group Fmoc...9-fluorenylmethoxycarbonyl group The present invention will be explained in more detail with reference to Examples below.
尚、実施例におけるマクロファージ走化活性の測定は次
の如く行なった。In addition, macrophage chemotactic activity in Examples was measured as follows.
あらかじめ３〜４日前に、腹腔内に流動パラフィンを注
入したモルモットから採取した腹腔浸出細胞（通常９５
％以上マクロファージ）をマクロファージとして２ＸＩ
Ｏ’／＋ｎＱの細胞濃度で用いた。Peritoneal exudate cells (usually 95%
% macrophages) as macrophages 2XI
A cell concentration of O'/+nQ was used.
４８六ケモタキシスチャンバーの王室に活性を測定する
試料を入れ、ボアサイズ５μ朧のポリカーボネート膜を
その上に載せ、上室にマクロファージ懸濁液を入れＣＯ
２インキュベーター内で３７℃，９０ｌ！ｌｉｎ、イン
キユベートした。インキュベート後、非遊走面の付着細
胞を除き、固定，ギムザ染色、封入処理を行い、遁走面
の細胞数を顕微鏡下（×４００）で計測し． ＭＣＦ活
性とした。A sample to be measured for activity is placed in the royal chamber of the 486 chemotaxis chamber, a polycarbonate membrane with a bore size of 5μ is placed on top of it, and a macrophage suspension is placed in the upper chamber and CO
2 Incubator at 37℃, 90l! lin, incubated. After incubation, adherent cells on the non-migrating surface were removed, fixed, Giemsa stained, and mounted, and the number of cells on the fugue surface was counted under a microscope (×400). It was defined as MCF activity.
実施例１〜２３は，ペプチド自動合成機（八８１社製４
３０Ａ型）を用いた同相合成法による本発明ペプチド類
の合成、物性値（ＩＩＰＬｃの保持時間）、プロトン−
ＮＭＲのスペクトルを示す。Examples 1 to 23 were performed using an automatic peptide synthesizer (manufactured by Hachi81 Co., Ltd. 4).
Synthesis of the peptides of the present invention by the in-phase synthesis method using 30A type), physical properties (retention time of IIPLc), proton-
An NMR spectrum is shown.
本発明のべブチド類は、精製後或いは脱保護の後精製後
、プロテインシークエンサー（ＡＥｌＩ社製４７７Ａ型
）にて配列を確認した。After the bebutides of the present invention were purified or deprotected and purified, the sequence was confirmed using a protein sequencer (Model 477A manufactured by AEI).
実施例１．
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｌ
−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ一Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇｌ
ｕ−ＯＨ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−
Ｇｌｕ−ＯＨを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い， Ｆａ
＋ｏｃ法ペプチド合成の］二程に従って、順次Ｆｍｏｃ
−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 1. H-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Asp-L
-Glu-L-Arg-Gly-L-Ser-L-Gl
u-OH Boc-L-Glu(OBzl)-PAM resin
Using 0.5 mmol based on Glu-OH, Fa
According to the second step of the +oc method peptide synthesis, Fmoc
-L-amino acids were condensed.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆ＋ｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−０Ｈ
Ｆ＋ｕｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏｆ｛
Ｆｎ＋ｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢＵ）−０１ｌＦｍｏｃ
−Ｌ−Ｇｌｕ （ＯｔＢＵ）−０ＨＦａ＋ｏｃ−Ｌ−＾
ｒｇ （Ｍｔｒ）−０ｌＩＦｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔａ
ｕ）−０Ｈ
本ペプチドは、ＩＩＰＬＣにより精製した。条件は、以
下の通りである。F+moc-L-Trp-0H F+uoc-L-Leu-Off Fmoc-Gly-Of{ Fn+oc-L-Asp(OtBU)-01lFmoc
-L-Glu (OtBU)-0HFa+oc-L-^
rg (Mtr)-0lIFmoc-L-Ser(ta
u)-0H This peptide was purified by IIPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；＾：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５＝９５のりニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍＱｌ分
本ペプチドの保持時間は、２５．４分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; ^: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95
: 5 to 5=95 gradient (60 minutes) Flow rate: 6 mQl The retention time of the peptide was 25.4 minutes.
収量１６１Ｂ、収率３０．７％であった。The yield was 161B, 30.7%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第１図に
示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２．
Ｈ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
−Ｇｌｎ−Ｌ−Ａｓｐ−０ＨＢｏａ−Ｌ−Ａｓｐ（Ｏ［
ｌｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−０Ｈを基準にし
て０．５ｍＩＩｏｌ用い． Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の
工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させ
た。Example 2. H-L-Thr-L-Leu-Gly-L-Arg-L
-Gln-L-Asp-0HBoa-L-Asp(O[
lzl)-PAM resin at 0.5 mIIol based on L-Asp-0H. Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（ｔｌｌｕ）−０ｌｌＦｍｏｃ−
Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ｌｌＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｎ−ＯＨ
本ペプチドは、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は、以
下の通りである。Fmoc-L-Thr(tllu)-0llFmoc-
L-Leu-OH Fmoc-Gly-0H Fmoc-L-Arg(Mtr)-0llFmoc-L
-Gln-OH This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（＋９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセ１一二トリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍｌ１／分
本ペプチドの保持時間は、１８．５分であった。ODS power ram (+9 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetyl trinitrile (0.1% TFA) A: B = 95
:5 to 5=95 linear gradient (60 minutes) Flow rate: 6 ml 1/min The retention time of the peptide was 18.5 minutes.
収ｊｌ８６Ｂ、収率２５．０％であった。The yield was 25.0%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第２図に
示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３．
Ｉ１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＧＬｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｇｌｎ−Ｌ−Ａｓｐ−０ＨＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）一ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−０｝１を基準に
して０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆ＋＋＋ｏｃ法ペプチド合成
の工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合さ
せた。Example 3. I1-L-Trp-L-Leu-GLy-L-Arg-
L-Gln-L-Asp-0HBoc-L-Asp(O
Using 0.5 mmol of Bzl)-PAM resin based on L-Asp-0}1, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of F+++oc method peptide synthesis.
用いたＦｎ＋ｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fn+oc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−０Ｈ
Ｆ＋＋＋ｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＲ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−ＯｆｆＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｎ−０｝１
本ペプチドは、ｌ＋ＰＬｃにより精製した。条件は、以
下の通りである。Fmoc-L-Trp-0H F+++oc-L-Leu-OR Fmoc-Gly-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-OffFmoc-L
-Gln-0}1 This peptide was purified by l+PLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；＾：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセ１一二トリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５：９５のリニア−グラジエント（６０分）
流 速；６ｄ／分
本ペプチトの保持時間は、２５．０分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; ^: water (0.1% TFA) B: ace-1-nitrile (0.1% TFA) A: B = 95
:5 to 5:95 linear gradient (60 min) Flow rate: 6 d/min The retention time of the peptide was 25.0 min.
収量１８９ｍｇ．収率４８．８％であった。Yield 189mg. The yield was 48.8%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第３図に
示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例４．
Ｉ１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｇｌｙ−Ｌ−＾ｓｐ−０ＨＩ１ｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯＩ
３ｚｌ）−ＰＡＭレジンをし−＾８ｐ−０Ｈを基準にし
て０．５０Ｈ１０１用い． Ｆｉ＋ｏｃ法ペプチド合成
の工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合さ
せた。Example 4. I1-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arg-
Gly-L-^sp-0HI1oc-L-Asp(OI
3zl)-PAM resin using 0.50H101 based on ^8p-0H. Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fi+oc method peptide synthesis.
用いたＦ ｍ ｏ ｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏｆｆ
Ｆｗｏｃ−Ｌ−＾ｒｇ（？ｌｔｒ）一０ｔ１本ペプチド
は、ＨＰＬＣにより精製した。条件は，以下の通りであ
る。This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
ロ：アセトニトリル（０． ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ａ＋Ｍ／分
本ペプチドの保持時間は、２５．２分であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95
Linear gradient (60 minutes) from :5 to 5:95 Flow rate: 6a+M/min The retention time of the peptide was 25.2 minutes.
収ｆｆｉ２８ａ＋ｇ、収率８．０％であった。The yield was 28a+g and the yield was 8.0%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第４図に
示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例５．
Ｈ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｓｐ−０Ｈ１’３ｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−ＰＡＮレジンをＬ−Ａｓｐ−０Ｈを基準
にして０．５１ＩＩｕ＋ｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド
合成の工程に従って，順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮
合させた。Example 5. H-L-Thr-L-Leu-Gly-L-Arg-L
-Gly-L-Asp-0H1'3oc-L-Asp
Using 0.51 IIu+ol of (OBzl)-PAN resin based on L-Asp-0H, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）一叶
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆ’ｍｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆ＋ｓｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０Ｈ本ペプチトは
、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は、以下の通りであ
る。Fmoc-L-Thr(tBu) Ichiha Fmoc-L-Leu-OH F'moc-Gly-0H F+soc-L-Arg(Mtr)-0H This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ ）
８：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速ＨＧｍＱｌ分
本ペプチドの保持時間は、１８．０分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TFA) 8: acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95
:5 to 5=95 linear gradient (60 min) flow rate HGmQl fraction The retention time of the peptide was 18.0 min.
収斌７Ｑｍｇ、収率２２．７％であった。The concentration was 7Qmg, and the yield was 22.7%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第５図に
示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例６．
Ｉ１−Ｌ−Ｌｃｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇｌｎ−
Ｌ−Ａｓｐ−０ＨＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐ
ＡＭレジンを１、−Ａｓｐ−ＯＨを基準にして０．５ｍ
ｍｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチ１〜合成の１−程に従っ
て，順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 6. I1-L-Lcu-Gly-L-Arg-L-Gln-
L-Asp-0HBoc-L-Asp(OBzl)-P
1 AM resin, 0.5 m based on -Asp-OH
Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed using Fmoc method pepti 1 to step 1 of synthesis using mol.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆｎ＋ｏｃ−Ｇ ｌ ｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０８Ｆｎｏｃ−Ｌ−
Ｇｌｎ−ＯＨ
本ペプチトは、｝ＩＰＬＣにより精製した。条件は、以
下の通りである。Fmoc-L-Leu-0H Fn+oc-Gly-0H Fmoc-L-Arg(Mtr)-08Fnoc-L-
Gln-OH This peptide was purified by IPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍｌｌｌ／分
本ペプチドの保持時間は、１７．５分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TFA) B: acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate: 6 ml/min The retention time of the peptide was 17.5 minutes.
収ｊｉｔ９１ｍｇ．収率３ｌ．０％であった。Contains 91mg. Yield 3l. It was 0%.
本ペブチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第６図に
示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例７．
｝１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｇｌｎ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ０Ｈ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＭレジンをＬ−Ｇｕｙ−０Ｈ
を基準にして０ ． ５ｍｍｏ ｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペ
プチド合成の工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ
酸を縮合させた。用いたＦ＋＋＋ｏｃ試薬は、以下の通
りである。Example 7. }1-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-Gln-L-Asp-Gly0H Boc-L-Gly-PAM resin L-Guy-0H
0. Using 5 mmol, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis. The F+++oc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯｌＩ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０１Ｆｎ＋ｏｃ−Ｇ
ｌｎ−ＯｌＩ
ＦＩｏｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−０Ｈ本ペブチド
は、ＩＩＰＬＣにより精製した。条件は、以下の通りで
ある。Fmoc-L-Trp-OH Fmoc-L-Leu-OlI Fmoc-Gly-Off Fmoc-L-Arg(Mtr)-01Fn+oc-G
The ln-OlI FIooc-L-Asp(OtBu)-0H peptide was purified by IIPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＥＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦ＾）Ａ ： １３＝
９５ ： ５から５：９５のリニアーグラジエント（６
０分）
流 速；６ｍＱ／分
本ペプチドの保持時間は． ２４．３分であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TEA) B: Acetonitrile (0.1% TF^) A: 13=
Linear gradient from 95:5 to 5:95 (6
0 min) Flow rate: 6 mQ/min The retention time of this peptide is. It was 24.3 minutes.
収斌２３２ｎ＋ｇ、収率５５．８％であった。The condensation was 232n+g, and the yield was 55.8%.
本ペブチトのプロトンーＮＭＲのスペク１〜ルは第７図
に示される。The proton-NMR spectra of this peptide are shown in FIG.
実施例８．
｝１−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｌ−
Ａｓｐ−ＯＨＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＰＡＮ
レジンをし−＾ｓｐ−０Ｈを基準にして０ ． ５ｎ＋
ｍｏ ｌ用い， Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工程に従っ
て、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 8. }1-L-Leu-Gly-L-Arg-Gly-L-
Asp-OHBoc-L-Asp(OBzl)-PAN
Apply resin to -^sp-0H based on 0. 5n+
Using mol, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｏ＋ｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆａ＋ｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０｝１本ペプチドは
、ＨＰＬＣにより精製した。条件は、以下の通りである
。Fo+oc-L-Leu-OH Fa+oc-Gly-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-0}1 This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝＝９５
：５から５＝９５のりニアーグラジエント（６０分）
流 速；６１７分
本ペプチドの保持時間は、１７．１分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = = 95
: 5 to 5=95 glue near gradient (60 minutes) Flow rate: 617 minutes The retention time of this peptide was 17.1 minutes.
収量７８Ｂ、収率３０．２％であった。The yield was 78B, 30.2%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第８図に
示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例９．
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ
−Ｇｌｕ−Ｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇｌ
ｕ−ＯＲ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−
Ｇｌｕ−ＯＨを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆｍｏ
ｃ法ペプチド合成の工程に従って、順次Ｆ石ｏｃ−Ｌ−
アミノ酸を縮合させた。Example 9. H-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Lys-L
-Glu-L-Glu-Gly-L-Ser-L-Gl
u-OR Boc-L-Glu(OBzl)-PAM resin
Using 0.5 mmol based on Glu-OH, Fmo
According to the steps of c-method peptide synthesis, F-oc-L-
Amino acids were condensed.
用いたＦｗｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fwoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯｌＩ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０１｛
Ｆｍｏｃ−ＧＬｙ−（ｌＩＩ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−０１ｌＦｎ＋ｏｃ−
Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（
ｔＢｕ）−０ｌ１本ペプチトは，ＨＰＬＣにより精製し
た。条件は、以下の通りである。Fmoc-L-Trp-OlI Fmoc-L-Leu-01{ Fmoc-GLy-(lII Fmoc-L-Lys(Boc)-01lFn+oc-
L-Glu(OtBu)-0HFmoc-L-Ser(
tBu)-0l monopeptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９Ｘ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製移動
相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（ｏ． ｉ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍΩ／分
本ペブチドの保持時間は、２３，８分であった２収景３
７２Ｂ．収率７２．０％であった。OOS column (19X300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (o.i% TFA) A: B = 95
: Linear gradient (60 minutes) from 5 to 5:95 Flow rate: 6 mΩ/min The retention time of this peptide was 23.8 minutes.
72B. The yield was 72.0%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第９図に
示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例１０，
ＩＩ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｃｙｓ−
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇ
ｌｕ−０Ｈ
１３ｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ
−Ｇｌｕ−ＯＨを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆｍ
ｏｃ法ペプチド合成の工程に従って、順次Ｆｍｏｅ−Ｌ
−アミノ酸を縮合させた。Example 10, II-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Cys-
L-Glu-L-Cys-Gly-L-Ser-LG
lu-0H 13oc-L-Glu(OBzl)-PAM resin
Using 0.5 mmol based on -Glu-OH, Fm
According to the steps of oc method peptide synthesis, Fmoe-L
- Amino acids were condensed.
用いたＦｔａｏｃ試薬は、以下の通りである。The Ftaoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ一丁ｒｐ−ＯＨ
Ｆ＋１ｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯｌＩ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｃｙｓ（ｔＢｕ）−０ＨＦ＋＋＋ｏｃ−
Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−０８Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（
ｔＢｕ）−０８本ペプチドは、ＨＰＬＣにより精製した
。条件は、以下の通りである。Fmoc-L-Cys(tBu)-0HF+++oc-
L-Glu(OtBu)-08Fmoc-L-Ser(
tBu)-08 This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｉｉｌａｔｅｒｓ
社製移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦ＾）Ａ：ロ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍＱ／分
本ペプチドの保持時間は、２８．１分であった。ODS force ram (19 x 300) IIlaters
Company mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TF^) A: Ro=95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate: 6 mQ/min The retention time of the peptide was 28.1 minutes.
収量１５０．８＋ｏｇ、収率３０．７％であった。The yield was 150.8+og, and the yield was 30.7%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＩ＋のスペクトルは第ｌＯ
図に示される。The proton-NMI+ spectrum of this peptide is
As shown in the figure.
実施例＋１．
ｌ１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｃｙｓ−
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｉ、−Ｓｅｒ−Ｌ、
−Ｃｙｓ−０Ｈ
Ｈｏｃ−Ｌ−Ｃｙｓ（４Ｍｅｌ３ｚｌ）一ｌノＡＭレジ
ンを１、−Ｃｙｓ−０Ｈを基準にして０．５制ｎｏｌ用
い、Ｆｉｏｃ法ペプチト合成の工程に従って、順次Ｆｎ
＋ｏｃ−１、一アミノ酸を縮合させた。Example +1. l1-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Cys-
L-Glu-L-Asp-Gly-I, -Ser-L,
Using -Cys-0H Hoc-L-Cys (4Mel3zl) and 0.5 no AM resin based on -Cys-0H, Fn was sequentially added according to the process of Fioc method peptide synthesis.
+oc-1, one amino acid was condensed.
用いたＦｎ＋ｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fn+oc reagent used is as follows.
１’＋＋＋ｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−（ＩＨ
１７Ｂｏｃ−１−Ｌｅｕ−Ｏｌｌ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｃｙｓ（ＬＢｕ）−０ｔｌＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｕ（Ｏｔ［３ｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（
ＯｔＢｕ）−０ｌＩＦｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−
０Ｈ
本ペプチトは、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は、以
下の通りである。1'+++oc-L-Trp-(IH 17Boc-1-Leu-Oll Fmoc-Gly-OH Fmoc-L-Cys(LBu)-0tlFmoc-L
-Glu(Ot[3u)-0HFmoc-L-Asp(
OtBu)-0lIFmoc-L-Ser(tBu)-
0H This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
ロ：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のりニアーグラジエント（６０分）
流 速；６＋＋＋Ｑ／分
本ペプチドの保持時間は、２８．３分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Near gradient from 5 to 5=95 (60 minutes) Flow rate: 6+++Q/min The retention time of the peptide was 28.3 minutes.
収量６２１ｇ、収率ｌ２．８％であった。The yield was 621 g, yield 12.8%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第Ｈ図に
示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in Figure H.
実施例１２．
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｇｌｎ−Ｌ
−Ａｒｇ−Ｌ−Ｓｅｒ−ＯＨＢｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚ
ｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ｓｅｒ−ＯＨを基準にして０
．５ｉｎ＋ｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工程に
従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。用
いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。Example 12. H-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Gln-L
-Arg-L-Ser-OHBoc-L-Ser(Bz
l)-PAM resin based on L-Ser-OH
．． Using 5in+ol, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis. The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
ト’ｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０８本ペプチドは、
ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は、以下の通りである
。Fmoc-L-Trp-OH Fmoc-L-Leu-0H Fmoc-Gly-OH To'moc-L-Gln-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-08 This peptide is
Purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ ）
８：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）＾：Ｄ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６１／分
本ペプチドの保持時間は． ２２．５分であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) 8: Acetonitrile (0.1% TFA) ^: D = 95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 min) Flow rate: 61/min Retention time of the peptide was . It was 22.5 minutes.
収Ｊｉ１４Ｈ，収率３７．８％であった。The yield was 37.8%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＲのスペクトルは第１２図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例１３．
Ｈ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−＾ｒｇ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ
−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−０ＨＢｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＮレ
ジンをＬ−Ｇｌｙ−ＯＨを基準にして０．５ｇ＋ｎｏｌ
用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工程に従って、順次Ｆ
ｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた．用いたＦｍｏｃ試
薬は、以下の通りである。Example 13. H-L-Leu-L-^rg-Gly-L-Trp-L
-Ser-Gly-0HBoc-L-Gly-PAN resin based on L-Gly-OH 0.5g+nol
Fmoc method peptide synthesis using Fmoc method.
moc-L-amino acid was condensed. The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｓ＋ｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｇｌ
ｙ−ＯＨ
Ｆａ＋ｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−０８本ペプチドは，
ＨＰＬＣにより精製した。条件は，以下の通りである。Fs+oc-L-Leu-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-0HFmoc-Gl
y-OH Fa+oc-L-Trp-0H Fmoc-L-Ser(tBu)-08 This peptide is
Purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；＾：水（０．１％ＴＦ＾）
ロ：アセトニトリル（０．１％ＴＦ＾）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｓｆｌ／分
本ペプチドの保持時間は、２４．３分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; ^: Water (0.1% TF^) B: Acetonitrile (0.1% TF^) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5=95 (60 minutes) Flow rate: 6 sfl/min The retention time of the peptide was 24.3 minutes.
収量１７２ｍｇ、収率５１．０％であった。The yield was 172 mg, 51.0%.
本ペブチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第１３図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例１４．
Ｈ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇｌ
ｕ−０Ｈ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ （０ロｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ
−Ｇｌｕ−ＯＨを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆｍ
ｏｃ法ペプチド合成の工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ
−アミノ酸を縮合させた。Example 14. H-L-Ser-L-Leu-Gly-L-Arg-L
-Glu-L-Asp-Gly-L-Ser-L-Gl
u-0H Boc-L-Glu (0rozl)-PAM resin
Using 0.5 mmol based on -Glu-OH, Fm
According to the steps of oc method peptide synthesis, Fmoc-L
- Amino acids were condensed.
用いたＦｖｎｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fvnoc reagent used is as follows.
Ｆｆｌｌｏｅ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−０ＨＦｎｏｃ−
Ｌ−Ｌｅｕ−０｝１
ｌ’ ｍ ｏ ｃ − Ｇ ｌ ｙ − Ｏ ＨＦｍｏ
ｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ
（ＯＬＢｕ）−０ｆｔＦｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ （Ｏｔ［
ｌｕ）−０Ｈ本ペプチドは、ＩＩＰＬｃにより精製した
。条件は、以下の通りである。Ffloe-L-Ser(tBu)-0HFnoc-
L-Leu-0}1 l'moc-Gly-OHFmo
c-L-Arg(Mtr)-0HFmoc-L-Glu
(OLBu)-0ftFmoc-L-Asp (Ot[
lu)-0H This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０． ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）＾：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍｌ２７分
本ペプチドの保持時間は，３０．６分であった．収量２
３２Ｂ、収率４８．９％であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA)^: B=95:
Linear gradient from 5 to 5 = 95 (60 minutes) Flow rate: 6 ml 27 minutes The retention time of this peptide was 30.6 minutes. Yield 2
32B, yield was 48.9%.
本ペプチドのプロトンーＭＨのスペクトルは第１４図に
示される。The proton-MH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例ｔＳ．
Ｉｔ−Ｌ−Ｇｌｎ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌ ｙ−Ｌ−Ａｒｇ
−Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−
Ｇｌｕ−ＯＨ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−
Ｇｌｕ−０１ｌを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆｍ
ｏｃ法ペプチド合成の工程に従って、順次Ｆ■ｏｃ−Ｌ
−アミノ酸を縮合させた。Example tS. It-L-Gln-L-Leu-Gly-L-Arg
-L-Glu-L-Asp-Gly-L-Ser-L-
Glu-OH Boc-L-Glu(OBzl)-PAM resin
Using 0.5 mmol based on Glu-01l, Fm
According to the steps of oc method peptide synthesis, F oc-L
- Amino acids were condensed.
用いたＦ閤ｏｃ試薬は，以下の通りである．Ｆｍｏｃ−
Ｌ−Ｇｌｎ−０１−１
Ｆ＋ｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆ＋ｗｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｓ＋ｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｕ（ＯＬＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−＾ｓｐ （
ＯｔＢｕ）−０８Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ （Ｌｌ３ｕ）
−ＤＨ本ペプチトは、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件
は、以下の通りである。The F.O.C. reagent used is as follows. Fmoc-
L-Gln-01-1 F+moc-L-Leu-OH F+woc-Gly-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-0HFs+oc-L
-Glu(OLBu)-0HFmoc-L-^sp (
OtBu)-08Fmoc-L-Ser (Ll3u)
-DH This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニ１−リノレ（０．１％丁ＦＡ）Ａ：ロ＝９
５：５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速７６ｍＱｌ分
本ペブチトの保持時間は、３０．１分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetoni-1-linole (0.1% TFA) A: Lo=9
Linear gradient from 5:5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate 76 mQl The retention time of the peptide was 30.1 minutes.
収量２１５１ＩＩｇ、収率４３．４％であった。The yield was 2151 IIg, 43.4%.
本ペブチドのプロトン−ＮＭＲのスペク１−ルは第ｌ５
図に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is 15th.
As shown in the figure.
実施例１６．
Ｉｔ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｓｐ−ＧＬｙＬ．−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇ
ｌｕ−０｝１
１３ｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ （ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンを
Ｌ−Ｇｌｕ−０Ｈをノ＾準にして０．５ｍｓｏｌ用い、
Ｆ＋ｓｏｃ法ペプチド合成の工程に従って、順次Ｆ＋＋
＋ｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 16. It-L-Thr-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-Glu-L-Asp-GLyL. -Ser-L-G
Using 0.5 msol of lu-0}1 13oc-L-Glu (OBzl)-PAM resin with L-Glu-0H as standard,
According to the steps of F+soc method peptide synthesis, F++
+oc-L-amino acids were condensed.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−０ＨＦＩｌｏｃ−Ｌ
−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆ＋ｍｏｃ−Ｇｌｙ−０１ｌ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｍｏｃ−１−
Ｇｌｕ （ＯｔＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−＾ｓｐ（Ｏ
ｔＢｕ）−０ＨＦｓ＋ｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−０
１ｌ本ペブチドは、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は
、以下の通りである。Fmoc-L-Thr(tBu)-0HFIloc-L
-Leu-0H F+moc-Gly-01l Fmoc-L-Arg(Mtr)-0HFmoc-1-
Glu (OtBu)-0HFmoc-L-^sp(O
tBu)-0HFs+oc-L-Ser(tBu)-0
The 1 liter peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍＱ／分
本ペブチドの保持時間は． ３０．３分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient (60 min) from 5 to 5:95 Flow rate: 6 mQ/min Retention time of the peptide. It was 30.3 minutes.
収量１７０ｍｇ．収率３５．３％であった。Yield 170mg. The yield was 35.3%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＲのスペクトルは第１６図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例１７．
Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇ
ｌｕ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇｌｕ−
ＯＨ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ （ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ
−Ｇｌｕ．−Ｏｆｆを基準にして０．５ｍ■ｏｆ用い、
Ｆｎ＋ｏｃ法ペブチド合成の工程に従って、順次Ｆｍｏ
ｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 17. H-Gly-L-Leu-Gly-L-Arg-L-G
lu-L-Asp-Gly-L-Ser-L-Glu-
OH Boc-L-Glu (OBzl)-PAM resin
-Glu. -Using 0.5m off based on Off,
According to the steps of Fn+oc method peptide synthesis, Fmo
The c-L-amino acid was condensed.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
ＦＩＩＩｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆｔ
ト’ｗｏｅ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｕ （ＯｔＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（
ＯｔＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−０
Ｈ
本ペプチドは、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は、以
下の通りである。FIIIoc-L-Gly-Off Fmoc-L-Leu-Oft'woe-L-Arg(Mtr)-0HFmoc-L
-Glu(OtBu)-0HFmoc-L-Asp(
OtBu)-0HFmoc-L-Ser(tBu)-0
H This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ｌ’ Ｆ Ａ ）Ａ：Ｂ
＝９５：５から５：９５のリニアーグラジエント（６０
分）
流 速；６ａ＋Ｑ／分
本ペブチドの保持時間は、３０．３分であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% l' F A ) A: B
= linear gradient from 95:5 to 5:95 (60
(min) Flow rate: 6a+Q/min The retention time of the peptide was 30.3 minutes.
収ｊｉ２０７ｍｇ、収率４５．１％であった。The total amount was 207 mg, and the yield was 45.1%.
本ペブチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第１７図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例１８．
Ｉｔ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−（ｉｌｎ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ１．−Ｓｅｒ−Ｌ−
Ｇｌｕ−ＯｌＩ
Ｕｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−
Ｇｌｕ−ＯｆｆをＪ！準にして０．５＋＋＋ｍｏｌ用い
， Ｆｍｏｃ法ペブチド合成の工程に従って、順次Ｆｍ
ｏｃ−ｌ．−アミノ酸を縮合させた。Example 18. It-L-Ser-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-(iln-L-Asp-Gly1.-Ser-L-
Glu-OlI Uoc-L-Glu(OBzl)-PAM resin
Glu-Off to J! Using 0.5+++ mol as standard, Fm
oc-l. - Amino acids were condensed.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔロｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−
Ｌｅｕ−０１ｌ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆ＋＊ｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０８Ｆａ＋ｏｃ−
Ｌ−Ｇｌｎ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ （ＯｔＢｕ）−０８本ペプチト
は． ＩＩＰＬＣにより精製した。条件は、以下の通り
である。Fmoc-L-Ser(trou)-0HFmoc-L-
Leu-01l Fmoc-Gly-OH F+*oc-L-Arg(Mtr)-08Fa+oc-
L-Gln-OH Fmoc-L-Asp (OtBu)-08 peptide. Purified by IIPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（＋９Ｘ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製移動
相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニ１−リル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ ： ｆ３
＝９５ ： ５から５：９５のリニアーグラジエント（
６０分）
流 速；６ＨＨ／分
本ペプチ１への保持時間は、３０．３分であった。ODS power ram (+9X300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonilyl (0.1% TFA) A: f3
=95: Linear gradient from 5 to 5:95 (
60 minutes) Flow rate: 6HH/min The retention time for Pepti 1 was 30.3 minutes.
収Ｍ！９０ｍｇ．収率４２．０％であった。Collection M! 90mg. The yield was 42.0%.
本ペブチトのプロｉ〜ンーＮＭＲのスペクトルは第１８
図に示される。The pro-i-nmr spectrum of this pebutite is the 18th
As shown in the figure.
実施例＋９．
ｔｉ− Ｌ−Ｇ ｌｎ−１．−Ｌｃｕ−Ｇ ｌ ｙ−Ｌ
− Ａ ｒｇ− Ｌ−Ｇ ｌ ｎ− Ｌ− Ａｓｐ−Ｇ
１ ｙＬ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇｌｕ−０｝１
１３ｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ （ＯＬｌｚｌ）−ＰＡＭレジン
をＬ−Ｇｌｕ−Ｏｌ１を基準にして０ ． ５ｎ＋ｍｏ
１用い、Ｆｍｏｃ法ペブチド合成の］一程に従って、
順次Ｆ ｍ ｏ ｃ − Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example +9. ti- L-G ln-1. -Lcu-Gly-L
-A rg- L-G l n- L- Asp-G
1 yL-Ser-L-Glu-0}1 13oc-L-Glu (OLlzl)-PAM resin was adjusted to 0.0% based on L-Glu-Ol1. 5n+mo
1, according to the Fmoc method peptide synthesis]
Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed.
用いたＦ’ ｍ ｏ ｃ試薬は、以下の通りである。The F'moc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−１−Ｇｌｎ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｌ１
Ｆｍｏｃ−（ｉｌｙ−ＯＮ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０１｛Ｆｍｏｃ−Ｌ
−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−０８Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ
Ｂｕ）−０Ｈ本ペプチトは、ＩＩＰＬｃにより精製した
。条件は、以下の通りである。Fmoc-1-Gln-Off Fmoc-L-Leu-Ol1 Fmoc-(ily-ON Fmoc-L-Arg(Mtr)-01{Fmoc-L
-Asp(OtBu)-08Fmoc-L-Ser(t
Bu)-0H peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速ＨＧｍＱｌ分
本ペブチトの保持時間は、３０．４分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TFA) B: acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate HGmQl Retention time of the aliquot peptide was 30.4 minutes.
収量２０８ｗ＋ｇ、収率４２．１％であった。The yield was 208 w+g, and the yield was 42.1%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第１９図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２０．
ｔｌ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｇｌｎ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇ
ｌｕ−０Ｈ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ （Ｏ［３ｚｌ）−ＰＡＭレジンを
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｏｆｆを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い、
Ｆｒｓｏｃ法ペプチド合成の工程に従って，順次Ｆｍｏ
ｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 20. tl-L-Thr-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-Gln-L-Asp-Gly-L-Ser-LG
Using 0.5 mmol of lu-0H Boc-L-Glu (O[3zl)-PAM resin based on L-Glu-Off,
According to the steps of Frsoc method peptide synthesis, Fmo
The c-L-amino acid was condensed.
用いたＦ ｍ ｏ ｃ試薬は，以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−０ｌＩＦ’ｍｏｃ−
Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏｌｌ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−＾ｒｇ（ＭＬｒ）−０ｌｌＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｎ−Ｏｌｌ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−０１ｌＦｍｏｃ−
Ｌ−Ｓｃｒ （ｔＢｕ）−０ｌ１本ペプチトは、ＩＩＰ
Ｌｃにより精製した。条件は、以下の通りである。Fmoc-L-Thr(tBu)-0lIF'moc-
L-Leu-0H Fmoc-Gly-Oll Fmoc-L-^rg(MLr)-0llFmoc-L
-Gln-Oll Fmoc-L-Asp(OtBu)-01lFmoc-
L-Scr (tBu)-0l single peptide is IIP
Purified by Lc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
ｌｉ：アセトニ１〜リル（０．１％Ｔ Ｉ−’ Ａ ）
Ａ：ロ＝ ９５ ： ５から５：９５のリニアーグラジ
エント（６０分）
流 速；６ＩｎＱ／分
本ペブチトの保持時間は、２９．６分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TFA) li: acetonitrile (0.1% T I-'A)
Linear gradient (60 minutes) from A: 95:5 to 5:95. Flow rate: 6 InQ/min. The retention time of this peptide was 29.6 minutes.
収量２６６Ｉｌｌｇ．収率５５．３％であった。Yield 266 Illg. The yield was 55.3%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第２０図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２１．
Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇ
ｌｎ−Ｌ−＾ｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ｇｌｕ−
０Ｈ
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（０口ｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−
Ｇｌｕ−ＯＨを基準にして０．５ｍｍｏｌ用い、ＦＩｌ
ｏｃ法ペプチド合成の工程に従って，順次Ｆｍｏｃ−Ｌ
−アミノ酸を縮合させた。Example 21. H-Gly-L-Leu-Gly-L-Arg-L-G
ln-L-^sp-Gly-L-Ser-L-Glu-
0H Boc-L-Glu (0 mouth zl)-PAM resin
Using 0.5 mmol based on Glu-OH, FIl
According to the steps of oc method peptide synthesis, Fmoc-L
- Amino acids were condensed.
用いたＦｓｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fsoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｅ−Ｌ−Ｇｌｙ−Ｏｌｌ
Ｆｎ＋ｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯｌＩ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−
Ｇｌｎ−０｝Ｉ
Ｆ＋ｗｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−
Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ［３ｕ）−０８本ペプチドは、ＩＩＰＬ
Ｃにより精製した。条件は、以下の通りである。Fmoe-L-Gly-Oll Fn+oc-L-Leu-Oll Fmoc-L-Arg(Mtr)-0HFmoc-L-
Gln-0}IF+woc-L-Asp(OtBu)-0HFmoc-
L-Ser(t[3u)-08 This peptide is IIPL
Purified by C. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍｌ２／分
本ペプチドの保持時間は． ３０．５分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TFA) B: acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5 = 95 (60 minutes) Flow rate: 6 ml2/min The retention time of the peptide is . It was 30.5 minutes.
収量５６ｍｇ、収率１２．２％であった。The yield was 56 mg, 12.2%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＨのスペクトルは第２１図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２２．
Ｉｆ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇｌｕ−
Ｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ＯｆｆＢｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−ＰＡ
ＮレジンをＬ − Ｇ ｌ ｙ − ０ Ｈを基準にし
て０．５ｍＩｌ１ｏ１用い，Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の
工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させ
た。用いたＦ ｍ ｏ ｃ試薬は、以下の通りである。Example 22. If-L-Leu-Gly-L-Arg-L-Glu-
L-Asp-Gly-OffBoc-L-Gly-PA
Using 0.5 ml of N resin based on L-Gly-0H, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis. The F m oc reagent used is as follows.
Ｆｗｏｃ−Ｌ−１．ｅｕ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ （Ｍｔｒ）−０ＨＦ＋ａｏｃ−
Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（
ＯｔＢｕ）−０Ｈ本ペプチドは、ＨＰＬＣにより精製し
た。条件は、以下の通りである。Fwoc-L-1. eu-0H Fmoc-L-Gly-0H Fmoc-L-Arg (Mtr)-0HF+aoc-
L-Glu(OtBu)-0HFmoc-L-Asp(
OtBu)-0H This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相：Ａ：水（０．１％ＴＦ＾）
Ｂ：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｖＲ／分
本ペプチドの保持時間は、２９．８分であった。OOS column (19 x 300) Waters mobile phase: A: Water (0.1% TF^) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5=95 (60 minutes) Flow rate: 6 vR/min The retention time of the peptide was 29.8 minutes.
収旦１０４ｓ＋ｇ、収率３２．２％であった。The weight was 104s+g, and the yield was 32.2%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第２２図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２３．
｝１−Ｌ−Ｌａｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇｌｎ−
Ｌ−＾ｓｐ−Ｇｌｙ−ＯｌｌＢｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−ＰＡ
ＭレジンをＬ−Ｇｕｙ−０Ｈを基準にして０．５＋＋ｕ
＋＋ｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工程に従って
、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。用いたＦ
ｍｏｃ試薬は，以下の通りである。Example 23. }1-L-Lau-Gly-L-Arg-L-Gln-
L-^sp-Gly-OllBoc-L-Gly-PA
M resin is 0.5++u based on L-Guy-0H
Using ++ol, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis. F used
The moc reagent is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆ＋＋＋ｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−ＯｆｆＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｎ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−０Ｈ本ペプチドは
、ＨＰＬＣにより精製した。条件は、以下の通りである
。Fmoc-L-Leu-0H F+++oc-Gly-0H Fmoc-L-Arg(Mtr)-OffFmoc-L
-Gln-OH Fmoc-L-Asp(OtBu)-0H This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（＋９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）＾：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍＱ／分
本ペプチドの保持時間は． ２８．８分であった。ODS power ram (+9 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA)^: B=95:
Linear gradient (60 minutes) from 5 to 5:95. Flow rate: 6 mQ/min. Retention time of the peptide. It was 28.8 minutes.
収量２０ １ｍｇ、収率６２．４％であった。The yield was 201 mg, 62.4%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第２３図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２４．
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｓｐ−Ｌ
−Ｇｌｕ−Ｌ−＾ｒｇ−ＯｉｌＢｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ）−ＰＡＮレジンをＬ−Ａｒｇ−０Ｈを基準にして
０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆ＋ｏｃ法ペプチド合成の工程に
従って、順次ＦＯＩＯＣ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。Example 24. H-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Asp-L
-Glu-L-^rg-OilBoc-L-Arg(T
Using 0.5 mmol of os)-PAN resin based on L-Arg-0H, FOIOC-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of F+oc method peptide synthesis.
用いたＦ＋ｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The F+moc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏｌ！
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＲ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−ＧＬｕ（Ｏｔｔ３ｕ）−ＯｆｆＦ−ｏｃ
−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−０ｌｌ本ペブチドは、ＩＩ
ＰＬｃにより精製した。条件は、以下の通りである。Fmoc-L-Trp-Ol! Fmoc-L-Leu-OH Fmoc-Gly-OR Fmoc-L-GLu(Ott3u)-OffF-oc
-L-Asp(OtBu)-0ll This peptide is II
Purified by PLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） ＷａＬｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．Ｉ％ＴＦＡ ）
Ｂ：アセ１一二トリル（０．１％ＴＦ’Ａ）＾： Ｂ＝
９５ ： ５から５：９５のリニアーグラジエント（６
０分）
流 速７６ｗａＱｌ分
本ペプチドの保持時間は、２５．１分であった。OOS column (19 x 300) Mobile phase manufactured by WaLers; A: Water (0.I% TFA) B: Ace-1-nitrile (0.1% TF'A)^: B=
Linear gradient from 95:5 to 5:95 (6
The retention time of the present peptide was 25.1 minutes at a flow rate of 76 waQl.
収Ｈ５８■ｇ．収率３０．６％であった。Yield H58g. The yield was 30.6%.
本ペプチドのプロトンーＮＮＨのスペクトルは第２４図
に示される。The proton-NNH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２５．
Ｉｔ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−＾ｒｇ−
Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ａｓｐ−０ＨＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−ＰＡＮレジンをＬ−Ａｓｐ−０Ｈを基準にし
て０．５ｍｍｏｌ用い， Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工
程に従って，順次Ｆ園ｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた
。Example 25. It-L-Trp-L-Leu-Gly-L-^rg-
L-Pro-L-Asp-0HBoc-L-Asp(O
Using 0.5 mmol of Bzl)-PAN resin based on L-Asp-0H, Foc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis.
用いたＦ■ｏｃ試薬は、以下の通りである．Ｆｍｏｃ−
Ｌ−Ｔｒｐ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−ＯｆｆＦｎ＋ｏｃ−
Ｌ−Ｐｒｏ−０Ｈ
本ペブチドは， ＩＩＰＬｃによりＩＪ製した。条件は
、以下の通りである。The Foc reagent used is as follows. Fmoc-
L-Trp-0H Fmoc-L-Leu-0H Fmoc-Gly-0H Fmoc-L-Arg(Mtr)-OffFn+oc-
L-Pro-0H This peptide was manufactured by IJ using IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％Ｔ Ｉ・’ Ａ ）ロ：アセ
トニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）Ａ ： Ｂ＝９５ ：
５から５；９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６社／分
本ペプチドの保持時間は、２５．６分であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TI・'A) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B=95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate: 6 companies/min The retention time of the present peptide was 25.6 minutes.
収斌２３０ｍｇ、収率６１．９％であった。The total amount was 230 mg, and the yield was 61.9%.
本ペブチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第２５図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２６．
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
−Ｌｅｕ−Ｌ−＾ｓｐ−ＯＨＢｏｃ−Ｌ−＾ｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−０｝１を基準にし
て０．５ａ＋＠ｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ベプチド合成の工
程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた
．用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである．Ｆｍｏｃ
−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯｌＩ
Ｆｓ＋ｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ （Ｍｔｒ）−ＯＨ本ペプチドは
、ＨＰＬＣにより精製した．条件は，以下の通りである
。Example 26. H-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arg-L
-Leu-L-^sp-OHBoc-L-^sp(OB
Using 0.5a+@ol of zl)-PAM resin based on L-Asp-0}1, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis. The Fmoc reagent used is as follows. Fmoc
-L-Trp-OlI Fs+oc-L-Leu-OH Fmoc-L-Gly-OH Fmoc-L-Arg (Mtr)-OH This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｉｌａｔｅｒｓ社
製移動相：＾：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
８：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦ＾）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速：６■Ｑ／分
本ペプチドの保持時間は、２８．６分であった．収量７
４−ｇ、収率ｌ９．５％であった．本ペプチドのプロト
ンーＮＭＨのスペクトルは第２６図に示される．
実施例２７．
Ｉ１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−＾ｒｇ−
Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｓｐ−ＯＨＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基準にし
て０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工程
に従って５順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた。ODS power ram (19 x 300) Ilaters mobile phase: ^: Water (0.1% TFA) 8: Acetonitrile (0.1% TF^) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 min) Flow rate: 6 Q/min The retention time of the peptide was 28.6 min. Yield 7
4-g, yield 19.5%. The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in Figure 26. Example 27. I1-L-Trp-L-Leu-Gly-L-^rg-
L-Val-L-Asp-OHBoc-L-Asp(O
Using 0.5 mmol of Bzl)-PAM resin based on L-Asp-OH, five Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０１ｌＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｖａ ｌ−ＯＨ
本ペブチドは． ｌＩｆ’Ｌｃにより精製した。条件は
，以下の通りである，
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦ＾）
Ｂ：アセトニトリル（０６ｌ％ＴＦＡ ）Ａ：Ｂ＝９５
：５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６−／分
本ペプチドの保持時間は、２７．０分であった。Fmoc-L-Trp-Off Fmoc-L-Leu-Off Fmoc-Gly-0H Fmoc-L-Arg(Mtr)-01lFmoc-L
-Val-OH This peptide is. Purified by lIf'Lc. The conditions are as follows: OOS column (19 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TF^) B: acetonitrile (06l% TFA) A: B = 95
Linear gradient (60 min) from :5 to 5:95 Flow rate: 6-/min The retention time of the peptide was 27.0 min.
収盆１００ｓ＋ｇ．収率２６．９％であった。Storage tray 100s+g. The yield was 26.9%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第２７図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２８．
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｌ＜−
Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ａｓｐ−０ＨＢｏｃ−Ｌ−＾ｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基準にし
て０．５ｍｓ＋ｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド合成の工
程に従って，順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた
．用いたＦｓｏｃ試薬は、以下の通りである．Ｆｍｏｃ
−Ｌ−τｒｐ−ＯｌＩ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆ−１
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−ＤＨＦｍｏｃ−Ｌ−
Ａｌａ−０Ｈ
本ペプチドは、ＨＰＬＣにより精製した。条件は、以下
の通りである。Example 28. H-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arl<-
L-Ala-L-Asp-0HBoc-L-^sp(O
Bzl)-PAM resin was used for 0.5 ms+ol based on L-Asp-OH, and Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc method peptide synthesis. The Fsoc reagent used is as follows. Fmoc
-L-τrp-OlI Fmoc-L-Leu-Of-1 Fmoc-Gly-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-DHFmoc-L-
Ala-0H This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００）ｖａｔｅｒｓ社製移
動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６ｍＱｌ分
本ペプチドの保持時間は、２５．４分であった。OOS column (19 x 300) Vaters mobile phase; A: water (0.1% TFA) B: acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) flow rate; 6 mQl fraction The retention time of the peptide was 25.4 minutes.
収量８３ｍｇ、収率２３．２％であった。The yield was 83 mg, 23.2%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第２８図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例２９．
Ｉｔ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ａｓｐ−０１ｌＢｏａ−Ｌ−Ａｓｐ（
ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基準に
して０．５ｍ＋ｓｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペブチド合成の
工程に従って、順次Ｆ＋＋＋ｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合
させた。Example 29. It-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-Phe-L-Asp-01lBoa-L-Asp (
Using 0.5 m+sol of OBzl)-PAM resin based on L-Asp-OH, F+++oc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Fmoc peptide synthesis.
用いたＦｒａｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fraoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆ＋＋＋ｏｃ−Ｇｌｙ−０１ｌ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ｆｔＦｍｏｃ−Ｌ
−Ｐｈｅ−ＯＨ
本ペプチドは、ＩＩＰＬｃにより精製した。条件は，以
下の通りである。Fmoc-L-Trp-0H Fmoc-L-Leu-0H F+++oc-Gly-01l Fmoc-L-Arg(Mtr)-0ftFmoc-L
-Phe-OH This peptide was purified by IIPLc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９Ｘ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製移動
相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ ： Ｂ＝９
５ ： ５から５：９５のリニアーグラジエント（６０
分）
流 速；６社／分
本ペプチドの保持時間は、２９．５分であった。OOS column (19X300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B=9
Linear gradient from 5:5 to 5:95 (60
(min) Flow rate: 6 companies/min The retention time of the present peptide was 29.5 minutes.
収量Ｈ８ａ＋ｇ、収率２９．８％であった。The yield was H8a+g, 29.8%.
本ペブチドのプロトンーＮＭＲのスペクトルは第２９図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３０．
Ｉｔ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｍｅｔ−Ｌ−Ａｓｐ−ＯｆｔＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基準
にして０．５ｍｍｏｌ用い、Ｆｔｍｏｃ法ペプチド合成
の工程に従って，順次Ｆ＋＊ｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合
させた。Example 30. It-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-Met-L-Asp-OftBoc-L-Asp
Using 0.5 mmol of (OBzl)-PAM resin based on L-Asp-OH, F++*oc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of Ftmoc peptide synthesis.
用いたＦｎｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fnoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ
Ｆ＋＊ｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏｔｌ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０８Ｆｍｏｃ−Ｌ−
Ｎｅｔ−ＯＨ
本ペプチドは． ＨＰＬＣにより精製した。条件は，以
下の通りである。Fmoc-L-Trp-Off Fmoc-L-Leu-OH F+*oc-Gly-Otl Fmoc-L-Arg(Mtr)-08Fmoc-L-
Net-OH This peptide is. Purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ礼製
移動相；Ａ：水（０．ｌ％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５二９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速：ＧｔｒｒＱｌ分
本ペプチドの保持時間は、２７．３分であった。OOS column (19 x 300) Mobile phase manufactured by Waters; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5295 (60 minutes) Flow rate: GtrrQl fraction The retention time of the peptide was 27.3 minutes.
収ｉｉ１４８．８ｍｇ、収４４３８．１％であった。The yield was 148.8 mg, and the yield was 4438.1%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＲのスペクトルは第３０図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３１．
Ｉｔ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｓｐ−ＯＨＢｏａ−１、−Ａｓｐ（
ＯロＺｌ）−ＰＡＭレジンをしーＡｓｐ−Ｏｆ（を基準
にして０．５＋＋＋＋ｓｏｌ用い、Ｆｍｏｃ法ペプチド
合成の工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮
合させた。Example 31. It-L-Trp-L-Glu-Gly-L-Arg-
L-Glu-L-Asp-OHBoa-1, -Asp(
Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed using Fmoc-L-PAM resin at a concentration of 0.5+++sol based on Asp-Of() according to the steps of Fmoc method peptide synthesis.
用いたＦＩＩＩｏｃ試薬は、以下の通りである。The FIIIoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｙｐ−Ｏｆｌ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−０ＨＦａｏｃ−Ｇ
ｌｙ−０Ｈ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−＾ｒｇ（Ｍｔｒ）−Ｏｉ１本ペプチトは
、ＩＩＰＬＣにより精製した。条件は、以下の通りであ
る。Fmoc-L-Typ-Ofl Fmoc-L-Glu(OtBu)-0HFaoc-G
ly-0H Fmoc-L-^rg(Mtr)-Oi single peptide was purified by IIPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０６ｌ％ＴＦＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速：６ｍ（１／分
本ペプチドの保持時間は、２０．５分であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (06l% TFA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate: 6 m (1/min) The retention time of the peptide was 20.5 minutes.
収ｊｔ７５＋ｇ．収率１９．θ％であった。Collection jt75+g. Yield: 19. It was θ%.
本ペプチドのプロトンーＮＭＨのスペクトルは第３１図
に示される。The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３２．
Ｈ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
−Ｇｌｎ−Ｌ−Ａｓｐ−０ＨＢｏｃ−Ｌ−＾ｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）−ＰＡＮレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基準にして
０．５ｍｍｏｌ用い， Ｆ＋ｓｏｃ法ペプチト合成の工
程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた
。Example 32. H-L-Tyr-L-Leu-Gly-L-Arg-L
-Gln-L-Asp-0HBoc-L-^sp(OB
Using 0.5 mmol of zl)-PAN resin based on L-Asp-OH, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of the F+soc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は、以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆ＋ｉｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ（ｔａｕ）−０｝１Ｆｍｏｃ−
Ｌ−Ｌｅｕ−０Ｈ
Ｆ＋ｏｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ＨＦｍｏｃ−Ｌ−
Ｇｌｎ−０Ｈ
本ペブチ１−は、ｌＩＩ’Ｌｃにより精製した。条件は
、以下の通りである。F+ioc-L-Tyr(tau)-0}1Fmoc-
L-Leu-0H F+ooc-Gly-OH Fmoc-L-Arg(Mtr)-0HFmoc-L-
Gln-0H This pebuti 1- was purified by lII'Lc. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９Ｘ３００） ｌｉｌａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）Ａ ： １３＝
９５ ： ５から５＝９５のりニアーグラジエント（６
０分）
流 速；６ｍｌ２／分
本ペプチトの保持時間は、２０．７分であった。OOS column (19X300) Lilaters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) B: Acetonitrile (0.1% TFA) A: 13=
95: 5 to 5 = 95 glue near gradient (6
Flow rate: 6 ml/min The retention time of this peptide was 20.7 minutes.
収！４７ｍｇ、収率ｌ２．５％であった。Revenue! 47 mg, yield 12.5%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＲのスペクトルは第３２図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３３．
Ｉｆ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＧＩｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ａｓｎ−Ｌ−Ａｓｐ−ＯｆｆＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＲを基準
にして０．５ｍｓ＋ｏｌ用い、Ｆ＋＋＋ｏｅ法ペプチド
合成の工程に従って，順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮
合させた．用いたＦｗｒｏｃ試薬は、以下の通りである
。Example 33. If-L-Trp-L-Leu-GIy-L-Arg-
L-Asn-L-Asp-OffBoc-L-Asp
Using (OBzl)-PAM resin for 0.5 ms+ol based on L-Asp-OR, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of the F+++oe method peptide synthesis. The Fwroc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−０｝Ｉ
Ｆｓｏｃ−Ｇｌｙ−０１−１
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０８Ｆａｏｃ−Ｌ−
Ａｓｎ−０１ｌ
本ペプチドは、ＨＰＬＣにより精製した。条件は、以下
の通りである。Fmoc-L-Trp-OH Fmoc-L-Leu-0}I Fsoc-Gly-01-1 Fmoc-L-Arg(Mtr)-08Faoc-L-
Asn-01l This peptide was purified by HPLC. The conditions are as follows.
ＯＤＳ力ラム（１９ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０．１％ＴＥＡ）
８：アセトニトリル（０．ｌ％ＴＦＡ）＾： Ｂ＝９５
： ５から５：９５のリニアーグラジエント（６０分
）
流 速：６ｎ＋Ｑ／分
本ペプチドの保持時間は． ２４．９分であった．収量
６４ｍｇ、収率ｌ６．８％であった。ODS power ram (19 x 300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TEA) 8: Acetonitrile (0.1% TFA)^: B = 95
: Linear gradient from 5 to 5:95 (60 minutes) Flow rate: 6n+Q/min The retention time of this peptide is. It was 24.9 minutes. The yield was 64 mg, yield 16.8%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＲのスペクトルは第３３図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３４．
Ｉ１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−＾ｓｐ−ＯＨＢｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−ＰＡＭレジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基準にし
て０．５組ｎｏｌ用い、Ｆ＋ｎｏｃ法ペプチド合成の工
程に従って、順次Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸を縮合させた
。Example 34. I1-L-Trp-L-Leu-Gly-D-Arg-
L-Glu-L-^sp-OHBoc-L-Asp(O
Using 0.5 sets of Bzl)-PAM resin based on L-Asp-OH, Fmoc-L-amino acids were sequentially condensed according to the steps of the F+noc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は，以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ−０Ｈ
Ｆ＋ｎｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆ
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
Ｆ’ Ｉｌｌｏｃ−Ｄ−Ａｒ ｇ（Ｔｏｓ）−ＩＩＩＦ
ｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＬｌ３ｕ）−０Ｈ本ペブチドは
、ＩＩＰＬＣにより精製した。条件は，以下の通りであ
る。Fmoc-L-Tyr-0H F+noc-L-Leu-Of Fmoc-Gly-0H F' Illoc-D-Ar g(Tos)-IIIF
The moc-L-Glu(OLl3u)-0H peptide was purified by IIPLC. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１０ Ｘ ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製
移動相；Ａ：水（０，１％ＴＦＡ）
Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＥＡ）Ａ：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６社／分
本ペプチドの保持時間は、２５．５分であった。OOS column (10 x 300) Waters mobile phase; A: water (0.1% TFA) B: acetonitrile (0.1% TEA) A: B = 95:
Linear gradient from 5 to 5=95 (60 minutes) Flow rate: 6 companies/min The retention time of the present peptide was 25.5 minutes.
収斌１６２Ｂ，収率４ｌ．８％であった．本ペブチドの
プロトンーＮＭＨのスペクトルは第３４図に示される。Consolidation: 162B, yield: 4l. It was 8%. The proton-NMH spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３５．
Ｉ１−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−
Ｌ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ａｓｐ−０１ｌ［１ｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−ＰＡＮレ、ジンをＬ−Ａｓｐ−ＯＨを基
準にして０．５ｍｍｏｌ用い、ｆ” ＋ｉ ｏ ｃ法ペ
プチド合成の工程に従って、順次Ｆｍｏｃ−１．−アミ
ノ酸を縮合させた。Example 35. I1-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Arg-
L-Ser-L-Asp-01l[1oc-L-Asp
Using 0.5 mmol of (OBzl)-PAN resin and gin based on L-Asp-OH, Fmoc-1.-amino acids were sequentially condensed according to the steps of the f''+ioc method peptide synthesis.
用いたＦｍｏｃ試薬は，以下の通りである。The Fmoc reagent used is as follows.
ｌ’ｉ＋ｏｃ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｏｆｆ
Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｏｆｆ
Ｆ＋＋＋ｏｃ−Ｇｌｙ−０Ｈ
訃’ｎｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０ｌＩＦａ＋ｏｃ
−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−０Ｈ本ペプチドは、ＩＩＰＬ
ｃにより精製した。条件は、以下の通りである。l'i+oc-L-Trp-Off Fmoc-L-Leu-Off F+++oc-Gly-0H Noc-L-Arg(Mtr)-0lIFa+oc
-L-Ser(tBu)-0H This peptide is IIPL
Purified by c. The conditions are as follows.
ＯＯＳカラム（１９Ｘ３００） Ｗａｔｅｒｓ社製移動
相；Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）
８：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ＞Ａ：Ｂ＝９５：
５から５＝９５のリニアーグラジエント（６０分）
流 速；６鵬Ｑ／分
本ペプチドの保持時間は． ２４．９分であった．収量
Ｈ８ｍｇ．収率３２．２％であった。OOS column (19X300) Waters mobile phase; A: Water (0.1% TFA) 8: Acetonitrile (0.1% TFA>A:B=95:
Linear gradient from 5 to 5 = 95 (60 min) Flow rate: 6 Q/min The retention time of the peptide is. It was 24.9 minutes. Yield H8mg. The yield was 32.2%.
本ペプチドのプロトン−ＮＭＲのスペクトルは第３５図
に示される。The proton-NMR spectrum of this peptide is shown in FIG.
実施例３６．
実施例１〜３５の各ペプチドについて，前記したマクロ
ファージ走化活性の測定法に従って、マクロファージの
走化活性を測定したところ第１表の結果を得た。Example 36. The chemotactic activity of macrophages was measured for each of the peptides of Examples 1 to 35 according to the method for measuring macrophage chemotactic activity described above, and the results shown in Table 1 were obtained.
なお，活性は，フィトヘムアグルチニン刺激ひと末梢血
リンパ球培養上清の走化活性を１００とした時の各ペプ
チドの走化活性を相対的に示した。The activity is the relative chemotactic activity of each peptide when the chemotactic activity of the phytohemagglutinin-stimulated human peripheral blood lymphocyte culture supernatant is set as 100.
第１表
実施例 マクロファージ走化性良好化合物
活性４ Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−ｔＢ１−
Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｌ−ＡｓｒＯＨ＜１０
５
ｔｌ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−＾ｒｇ−
Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｓｐ−ＯＨ１２
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｇｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｇｌｎ−Ｌ
−Ａｒｇ−Ｌ−Ｓｅｒ−ＯＨ２４
Ｉｆ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｓｐ−
Ｌ−Ｇｌｕ−Ｌ−Ａｒｇ−ＯＨ＜１０
１０
〈２０
２５
Ｈ−Ｌ−Ｔｒｐ−Ｌ−Ｌｅａ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ
−Ｐｒｏ−Ｌ−Ａｓｐ−０Ｈ〈２０Table 1 Examples Compounds with good macrophage chemotaxis
Activity 4 H-L-Trp-L-tB1-
Gly-L-Arg-Gly-L-AsrOH<10 5 tl-L-Thr-L-Leu-Gly-L-^rg-
Gly-L-Asp-OH12 H-L-Trp-L-Lgu-Gly-L-Gln-L
-Arg-L-Ser-OH24 If-L-Trp-L-Leu-Gly-L-Asp-
L-Glu-L-Arg-OH<10 10 <20 25 H-L-Trp-L-Lea-Gly-L-Arg-L
-Pro-L-Asp-0H〈20
第１〜３５図は実施例１〜３５の各ペプチドのプロトン
ーＮＭＨのスペクトルを示す図である。1 to 35 are diagrams showing proton-NMH spectra of each peptide of Examples 1 to 35.
Claims (1)
示される新規ペプチド及びその薬理学的に許容されうる
塩。 〔式中、ｍは （ａ）水素または、 （ｂ）アセチル基であり、 Ａは、 （ａ）無しまたは、 （ｂ）Ｌ−Ｔｒｐまたは、 （ｃ）Ｌ−Ｌｅｕまたは、 （ｄ）Ｌ−Ｇｌｎまたは、 （ｅ）Ｌ−Ｓｅｒまたは、 （ｆ）Ｌ−Ｔｙｒまたは、 （ｇ）Ｌ−Ｔｈｒまたは、 （ｈ）Ｇｌｙであり、 Ｂは、 （ａ）Ｌ−Ａｒｇまたは、 （ｂ）Ｌ−Ｌｅｕまたは、 （ｃ）Ｌ−Ｇｌｕであり、 Ｃは、 （ａ）Ｇｌｙまたは、 （ｂ）Ｌ−Ａｒｇであり、 Ｄは、 （ａ）Ｌ−Ｇｌｎまたは、 （ｂ）Ｌ−Ａｒｇまたは、 （ｃ）Ｌ−Ｌｙｓまたは、 （ｄ）Ｄ−Ａｒｇまたは、 （ｅ）Ｌ−Ｔｒｐまたは、 （ｆ）Ｌ−Ａｓｐまたは、 （ｇ）Ｌ−Ｃｙｓまたは、 （ｈ）Ｇｌｙまたは、 （ｉ）Ｌ−Ｇｌｕであり、 Ｅは、 （ａ）Ｌ−Ｓｅｒまたは、 （ｂ）Ｌ−Ｇｌｕまたは、 （ｃ）Ｌ−Ｇｌｎまたは、 （ｄ）Ｌ−Ｐｒｏまたは、 （ｅ）Ｌ−Ｌｅｕまたは、 （ｆ）Ｌ−Ｖａｌまたは、 （ｇ）Ｌ−Ａｌａまたは、 （ｈ）Ｌ−Ｍｅｔまたは、 （ｉ）Ｌ−Ａｓｎまたは、 （ｊ）Ｌ−Ｐｈｅまたは、 （ｋ）Ｇｌｙまたは、 （ｌ）Ｌ−Ａｒｇであり、 Ｆは、 （ａ）Ｇｌｙまたは、 （ｂ）Ｌ−Ａｓｐまたは、 （ｃ）Ｌ−Ｇｌｕまたは、 （ｄ）Ｌ−Ｓｅｒまたは、 （ｅ）Ｌ−Ａｒｇまたは、 （ｆ）Ｌ−Ｃｙｓであり、 Ｇは、 （ａ）無しまたは、 （ｂ）Ｇｌｙであり、 Ｈは、 （ａ）無しまたは、 （ｂ）Ｌ−Ｓｅｒであり、 Ｉは、 （ａ）無しまたは、 （ｂ）Ｌ−Ｇｌｕであり、 ｎは、 （ａ）水酸基または、 （ｂ）アミド基である。〕[Claims] 1. A novel peptide represented by the formula m-A-B-C-D-E-F-G-H-I-n and a pharmacologically acceptable salt thereof. [In the formula, m is (a) hydrogen or (b) acetyl group, and A is (a) None or (b) L-Trp or (c) L-Leu or (d) L- Gln or (e) L-Ser or (f) L-Tyr or (g) L-Thr or (h) Gly, and B is (a) L-Arg or (b) L- Leu or (c) L-Glu, C is (a) Gly or (b) L-Arg, and D is (a) L-Gln or (b) L-Arg or ( c) L-Lys or (d) D-Arg or (e) L-Trp or (f) L-Asp or (g) L-Cys or (h) Gly or (i) L- Glu, E is (a) L-Ser or (b) L-Glu or (c) L-Gln or (d) L-Pro or (e) L-Leu or (f) L-Val or (g) L-Ala or (h) L-Met or (i) L-Asn or (j) L-Phe or (k) Gly or (l) L-Arg Yes, F is (a) Gly or (b) L-Asp or (c) L-Glu or (d) L-Ser or (e) L-Arg or (f) L-Cys. Yes, G is (a) None or (b) Gly, H is (a) None or (b) L-Ser, I is (a) None or (b) L- Glu, and n is (a) a hydroxyl group or (b) an amide group. ]
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008380A JPH03215496A (en) | 1990-01-19 | 1990-01-19 | Novel peptide |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008380A JPH03215496A (en) | 1990-01-19 | 1990-01-19 | Novel peptide |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03215496A true JPH03215496A (en) | 1991-09-20 |
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ID=11691619
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|---|---|---|---|
| JP2008380A Pending JPH03215496A (en) | 1990-01-19 | 1990-01-19 | Novel peptide |
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| JP (1) | JPH03215496A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994026295A1 (en) * | 1993-05-14 | 1994-11-24 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Metal chelates as spacer compounds in biologically active peptides |
-
1990
- 1990-01-19 JP JP2008380A patent/JPH03215496A/en active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994026295A1 (en) * | 1993-05-14 | 1994-11-24 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Metal chelates as spacer compounds in biologically active peptides |
| US5464934A (en) * | 1993-05-14 | 1995-11-07 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Metal chelates as spacer compounds in biologically active peptides |
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