JPH02164825A - セレノー又はテルロピリリウム塩を含む光力学療法用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ）　、神経膠１１１（
ｇｌｉｏｍａ）または黒色腫（ｍｅｌａｎｏｍａ）細胞
の治療用の新規な組成物に関する。

〔従来の技術〕

テルロ−及びセレノピリリウムは、本明細書中に記載し
たのと構造が極めて類似したものに至るまで、光伝導性
、光抵抗性及びリソグラフ組成物または光学記録ディス
ク中の色素として使用するために知られている（たとえ
ば、米国特許第４．３６５，０１７号及び第４，５８４
，２５８号をそれぞれ参照）。

しかしながら、このような記載は、光力学療法において
特に有効なものはもちろんのこと、セレノまたはテルロ
ピリリウム色素が医薬としての用途を有することは認め
ていなかった。それを目的として、これらの公知テルロ
ピリリウムと共に使用するために教示された種類の溶媒
及び「担体」はジクロロメタン及びビスフェノールポリ
カーボネートのような生物学的に危険なまたは致命的な
物質であった。

〔発明が解決しようとする課題〕

一方、宿主の分化した癌及び黒色腫のような局在化し、
分化した癌を選択された光エネルギーに暴露する前に、
この癌中にある種の色素を選択的に保持させることによ
って光力学療法（ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｔｈｅｒａ
ｐｙ）　（ｐｄ　ｔ）が発展した。このような治療に特
に有効な色素は、Ｊ、Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏ
ｇｙ＋　　６巻、３８０頁（１９８８）及びその他に報
告されるように一量体（ｓｉｎｇｌｅｔ）酸素またはス
ーパーオキシドアニオンを発生することが判明している
。色素は癌細胞によって選択的に保持され、健康な細胞
によっては保持されないのでｐｔａ効果も選択的である
。

この目的で特に好ましい色素としてはアクリジン、メチ
レンブルー、ローダミン１２３、エオシン、テトラサイ
クリン、クロロフィル及びヘマトポルフィリン誘導体（
以下、１１　Ｐ　Ｄ　）のようなポルフィリンが挙げら
れる。光力学療法（以下、ｐｄ　ｔ）に用いられるこれ
らの従来の色素組成勅令てに関するむずかしさは、７０
０ｎｍよりもかなり短い波長の光をこれらが主に吸収す
ることであった。すなわち、それらは７００ｎｍより大
きい波長に暴露されるときには比較的有効でない。しか
し、約７００〜１２００ｎｒｔｌの波長の光は、これよ
り短い光とは異なり、はとんどの生物組織を容易に通過
することが知られている。その結果、宿主の表面から容
易には近づくことのできない癌にｐｄｔを使用すること
は困難であった（６５０ｎｍにおいて作用するものはま
だ表面治療に有用である）。

従って、本発明の目的は、ｐａｔに使用するだめの、７
００ｒ＋ｍより大きい波長を主に吸収する細胞毒性があ
り且つ光活性化可能な色素を見い出すことである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明の手がかりは、先行技術の光伝導性及び光学ディ
スク組成物に使用されるものを含むいくつかのセレノ−
及びテルロピリリウムが確かに７００ｎｍより大きい波
長の光を吸収し、次いで光治療効果を生ずるのに有効な
一量体酸素を生成するという発見である。

さらに詳しくは、本発明の一局面によれば、本発明の目
的は、光治療効果を生ずるのに十分なエネルギーを有す
る約６５０〜１１０００ｎの波長の光に空気飽和溶液中
で暴露された時に少なくとも０．００５の一量体酸素量
子効率を有する、治療上有効な量のセレノ−又はテルロ
ピリリウム色素と医薬として許容され得る担体を含んで
なる、宿主哺乳類の体に含まれる分化した癌又は黒色腫
細胞を治療するのに有効な組成物によって達成される。

本発明者らは、本発明の新規な医薬組成物が癌細胞、特
に生体内の癌、神経膠原及び黒色腫細胞の光速法におい
て特に有効であることを発見した。

本明細書中で使用される「癌」としては、前立腺癌（６
５才以上の米国男性人口の約５０％に起こる）の約９０
％を含む腺癌；はとんど扁平上皮癌；及び全ての移行上
皮癌が挙げられる。この用語は肺中の燕麦細胞癌もしく
は大細胞癌または不完全に分化した癌を含まない。この
ような癌は本発明によって影響されるとは考えられない
。

本明細書中に記載した分化した癌の有効な治療により、
腫瘍の成長の退行及び／または抑制ならびにＩＩ！１瘍
の緩解がもたらされる。本発明によって治療できる特定
の器官の癌としては肺（前述のものを除く）、結腸、乳
房、膀胱、前立腺、肺臓、胃、膣、食道、舌、鼻咽頭、
肝臓、卵巣及び精巣が挙げられる。また、本発明によっ
て治療できるのは神経膠原、すなわち、神経組織の癌で
ある。

本発明はテルロ−またはセレノビリリウム色素を含む組
成物を特徴とする。好ましいのは下記構造式を有する色
素である： 〔式中、Ｒ’　　、Ｒ’　　、Ｒ５及びＲ８は、それぞ
れ独立に、水素、炭素数６〜１２のアリール、たとえば
、フェニル、ナフチルなど；炭素数６〜１２のへテロア
リール、たとえば、ピリジル、ヂエニル、フリルなどま
たは炭素数１〜１２のアルギル、たとえば、メチル、エ
チル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、
ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ドデシルなどから選ば
れ、　Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立に、
水素、アミノ；ヒドロキシ；ハロ、たとえば、クロロ、
フルオロ、ヨード及びブロモ；またはアルキル、了り−
ルまたはアルキルもしくはアリール誘導体、たとえば、
アルキルチオ、アリールチオ、アルコキシ、アルキルセ
レノ、アリールセレノ、アルキルテルロまたはアリール
テルロ（炭素数はすべて１〜１２である）、たとえば、
メチル、エチル、プロピル、ヘキシル、ドデシル、フェ
ニル、ナフチル、メチルチオ、ヘキシルチオ、ドデシル
チオ、フェニルチオ、ならびにこれらの対応するセレノ
等価物及びこれらの対応するテルロ等価物などから選ば
れ；Ｒ″、Ｒ１０及びＲｌ　＋はそれぞれ独立に水素、
ハロ、たとえば、クロロ、フルオロ、ブロモ及びヨード
；シアノ；ならびに炭素数１〜１２のアルギル及びアル
コキシ、たとえば、メチル、エチル、プロピル、イソプ
ロピル、ブチル、ｔ−ブチル、ヘキシル、ヘプチル、オ
クチル、ドデシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、
ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ヘプトキシ、ドデシルオキシ
などから選ばれ：ｎは０．１または２であり、ＸＩ及び
ｘ２は、それぞれ独立に、０．Ｓｅ、ＳまたはＴｅであ
るが、少なくとも１方はＴｅまたはＳｅであり；そして
Ｚはカチオンに関して不活性な水溶性アニオンである〕
。本明細書中で使用する「アルキル」は置換アルキル、
たとえば、ヒドロキシ基で置換されたものを含む。

「カチオンに関して不活性な」とは、アニオンが色素か
らＳｅまたはＴｅを移動させるために色素の炭素骨格を
増加させないことを意味する。このような不活性アニオ
ンとしては、塩化物、臭化物などのようなハロゲン化物
；テトラフルオロボレート、過塩素酸塩、メシレート、
ヘキサフルオロホスフェ−１・などが挙げられる。次亜
塩素酸塩、ペルオキシ酸、過ヨウ素酸塩、三ヨウ化物、
三臭化物及び任意の強酸化体のアニオンのようなアニオ
ンは除外される。

従って、有用なテルロビリリウムとしては前記の有用な
アニオンのいずれかと表Ｉに列挙したビリリウムとによ
って形成される塩が挙げられる。

有用なビリリウムの最も好ましい例としては次のものが
挙げられる： ム案 に イし一−ｉ戸−□□−□−ンとｉ 比較例 麦」二」目交桝 任意の有用な合成を用いて本発明の組成物に使用する色
素を生成できる。いくつかの方法が前記米国特許第４，
３６５．０１７号に示されている。Ｚがルイス塩基であ
り（以下の例を参照）且つＸＩ及びＸ２が異なるもので
ある以外は、以下の一般的な手法が有用である： これとは異なり、作用しない色素は、ＸＩ及びＸ２はと
もに０もしくはＳであるかまたはそれらが一緒になって
Ｏ及びＳである以外は構造が同一である。いくつかの比
較例を表■に示す。

または は所望のカルコゲニドであり、そしてＲ’、Ｒ’Ｒ′及
びＲ８は環」二の所望の置換基である〕。

しかしながら、Ｚがルイス塩基、たとえば、ハロゲン化
物もしくはメシレートでありｘｌとｘ２とが異なるもの
である場合には、医薬として純粋な色素を得るために以
下の手法を用いることが必要であるニルイス塩基アニオ
ンでないアニオンと組み合わせて所望の色素を選択し、
このような塩をルイス塩基を含むイオン交換樹脂と混合
してイオン交換させる。

翌造韮− 好ましい色素を、以下の一般的反応のいずれかによって
製造した： 〔式中、Ｒ’　〜Ｒ”　、Ｘ’　　、Ｘ２　、ｎ及びＺ
（Ｚ＝Ｃ１、ＢｒまたはＣＩｈＳＯ３−以外）は前述と
同様にして選ばれる〕。Ｚ　＝ＣＩ　、　ＢｒまたはＣ
ＩＬ、５ｏ３−を含む色素の製造には、色素のテトラフ
ルオロボレート、ヘキザフルオロボスフェ−１・、また
は過塩素酸塩と共にイオン交換樹脂を用いる。

１１′告　リ１−色７．１の坩１し惣Ｕ仄色素１の過塩
素酸塩（０，１９ｇ　：　０．２７ｍｍｏｌ　）及びア
ンバーライト（八ｍｂｅｒｌｉｔｅ）　ＩＲＡ−４００
（Ｃ１）イオン交換樹脂１．５ｇをメタノール７５　ｍ
　Ｌ中で４時間攪拌した。イオン交換樹脂を濾過によっ
て除去し、濾過ケークをメタノール１０ｍＬで洗浄した
。合した濾液をイオン交換樹脂１．５ｇと共にさらに２
時間攪拌した。イオン交換樹脂を濾過によって除去し、
濾過ケークをメタノール１０ｍＬで洗浄した。合した濾
液を減圧濃縮した。残渣をアセトニトリル５ｍＬ中に溶
解し、次いでエーテルで５０ｍＬに希釈した。冷却によ
って黄緑色の結晶として色素が析出し、これを濾過によ
って回収し、エーテルで洗浄し、乾燥して色素０．１４
ｇ　（８２％）を得た。

ｍｐ　２１３．Ｒ５−２１５”Ｃ０ λ、、、−Ｘ（ＣＨｚＣ］ｚ）７８６ｎｍ（ｅ　３０４
，０００）　。

’Ｉｔ　ＮＭＲ（ＣＤ＋ＯＤ）　　δ８．８７（ｔ、Ｉ
ＩＩ、Ｊ＝１３．３１１ｚ）、　７．７８（ｂｒ　ｓ、
４Ｈ）、　６．７６（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝１３．３）１ｚ）
、　６．７１（ｄ、ＬＨ。

Ｊ＝１３．３ｆｌｚ）、　１．４７（ｓ、２７Ｈ）、　
１．４５（ｓ、９１１）。

分析二計算値（Ｃｚｑｌ１４：＋５ｅＴｅ−ＣＩ）：　
Ｃ，５５，旧ＩＩ、　６．８　；　Ｃ１，５，６；実測
値：　Ｃ，５５，２；　１１．６．８　；ＣＩ＋　５．
５゜ ２ａのＣゴ 色素２のへキサホスフェート塩（０，１１ｇ　、　０．
２０ｍｍｏｌ）をメタノールＩＯｍＬ中に？容解した。

アンバーライトＩＲＡ−４００（ＣＩ）イオン交換樹脂
２．０ｇを加え、得られた混合物を周囲温度において１
時間攪拌した。樹脂を濾過によって除去し、濾過ケーク
をメタノール５ｍＬで洗浄した。合した濾液を濃縮した
。

残渣をアセトニトリル１ｍＬ及びエーテル２０ｍＬから
再結晶して色素２ａを０．０５３ｇ　（５０％）得た。

ｍｐ　２０９〜２０９．５°Ｃ０ λｗａｘ　（水）　７３０ｎｍ（ε３００，０００）。

ＩＩ　ＮＭＲ（ＣＤ３０Ｄ）　６８．７８（ｔ、１１Ｌ
Ｊ＝１３１＋ｚ）、　７．７５（ｂｒ　５４１１Ｌ　６
．６７（ｄ、２１１．Ｊ＝１．３Ｈｚ）、　１．４６（
ｓ、３６１１）。

分析：計算値ＣＣ２ｑ１１４ｓＳｅｚ）：　Ｃ，５９，
５；　ＩＬ　７．４　；Ｃ１，６，１ｉ実測値：　Ｃ，
５９，６；　Ｈ，７，５ｉ　Ｃ１，７，１゜３ａの ２Ｈ）、　　７．７（ｂｒ　ｓ、２Ｈ）、　　６．６９
（ｄ、２８．Ｊ＝１３Ｈｚ）、　　１．４８（ｓ、１８
Ｈ）、１．４２（ｓ、１８８）。

分析：計算値（Ｃ２９Ｈ４ｎＳＴｅＣ１）：　Ｃ１５９
，４；　Ｈｌ　７．４　ｉＣｌ、６．０；実測値：　Ｃ
，５９，３；　Ｈ，７，４；　Ｃ１，５，８゜色素３の
へキサフルオロボスフェート塩（０，０７０ｇ　、　０
．１０ｍｍｏ＋）をメタノール２０ｍＬ中に溶解した。

アンバーライトＩＲＡ−４００（ＣＩ　）イオン交換樹
脂１ｇを加えた。得られた混合物を周囲温度において４
時間攪拌した。イオン交換樹脂を濾過によって除去し、
濾過ケークをメタノール１０ｍＬで洗浄した。

合した濾液を濃縮した。残渣をアセトニトリル１ｍＬ及
びエーテル２０１ＩＩＬから再結晶した。冷却によって
色素の青銅色の針状結晶が析出し、それを濾過によって
回収し、エーテルで洗浄し、そして乾燥して色素３　ａ
　０．０４８ｇ　（８１％）を得た。

ｍｐ　２００．５〜２０３．５°ｃ６ λｗａｘ’　（水）　７４５ｎｍ（ε１１０，０００）
。

’　ＨＮＭＲ（ＣＤｓＯＤ）　　δ８．７７（ｔ、Ｉｌ
ｌ、Ｊ＝１３１１ｚ）、　７．９３（ｂｒ　ｓ。

無水酢酸２ＯｍＬ中２．６−ジーｔｅｒｔ−ブチル−４
メチルセレノピリリウムクロリド（６，ＯＯｇ　、　１
８．８ｍｍｏｌ）及び（２，６−シーｔｅｒｔ−ブチル
テルロピラン−４−イリデン）アセトアルデヒド（６，
７２ｇ１９．４ｍｍｏｌ）を蒸気浴上で１１分間加熱し
た。反応混合物を周囲温度に冷却し、アセトニトリル１
５１ＩＩＬを加えた。得られた溶液をグラスウールのパ
ッドで濾過した。濾液をエーテル２５０ｍＬで希釈し、
得られた溶液を冷却した。色素が青銅色の結晶として析
出し、それを濾過によって回収し、エーテルで洗浄し、
そして乾燥して色素１０．５１ｇ　（８８％）を得た。

’ＩＩ　ＮＭＲ及び吸収分光分析法によって生成物は色
素２〜色素１〜色素４のうち１つ〜２つまたは１つの混
合物であることが示された。この混合物は、ペテロ原子
のランダムスクランプリングが反応中に起こった場合の
へテロ原子の統計的分布から期待される。それはそれで
もｐｄｔにおける有用性があるが、このような混合物は
各成分各々に及び−緒にＦＤＡの承認を必要とし、医薬
として純粋な色素に比べてほとんど満足とはいえないで
あろう結果のために望ましくない出費を必要とする。（
「医薬として純粋な」とは色素が含む不純物が２重量％
以下（ＦＤＡによって設定された基準）であることを意
味する。） 狭朋拠 哺乳類の分化した癌または黒色腫を治療するｐｄｔ法に
置いて、色素は医薬として許容され得る担体に加える場
合に特に有用である。医薬として許容され得る担体はピ
リリウム色素を充分に溶解する溶媒のような種々の担体
から選ばれる。適当な担体溶媒の好ましい例において、
最少量（９５％エタノール１ｍＬ中色素１００■）をリ
ン酸塩緩衝食塩水で希釈して１ｍＭの色素塩濃度を生じ
る。その他の有用な例としては水中５％デキストロース
溶液またはエタノールとポリエトキシル化キャスターオ
イル（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔｉｔ
ｕｔｅから“Ｄｉｌｕｅｎｔ　Ｎｏ、１２″として入手
可能）のようなポリオールとの混合物が挙げられる。

さらに他の許容され得る担体溶媒としては、嚢内治療の
ためのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）ならびにＩＶ
及びＩＰ注射のための等張食塩水が挙げられる。

有用なさらに他の担体としては次のものが挙げられる： ゼラチンのような物質、天然の糖、たとえば、スクロー
スまたはラクトース、レシチン、ペクチン、澱粉（たと
えば、コンスターヂ）、アルギン酸、チロース（ｔｙｌ
ｏｓｅ）、タルク、リコポジウム、シリカ（たとえば、
コロイド状シリカ）、グルコースセルロース、セルロー
ス誘導体、たとえば、セルロースヒドロキシル基が低級
脂肪族アルコール及び／または低級飽和オキシアルコー
ルで部分エーテル化されたセルロースエーテル（たとえ
ば、メチルヒドロキシプロピルセルロース、メチルセル
ロース、ヒドロキシエチルセルロース）、ステアリン酸
エステル、たとえば、ステアリン酸メチル及びステアリ
ン酸グリセリル、炭素数１２〜２２の脂肪酸、特に飽和
酸のマグネシウム及びカルシウム塩（ステアリン酸カル
シウム、ラウリル酸カルシウム、オレイン酸マグネシウ
ム、パルミチン酸カルシウム、ヘヘン酸カルシウム及び
ステアリン酸マグネシウム）、乳化剤、油脂、特に植物
起源の油脂（たとえば、ビーナツツオイル、ギヤスター
オイル、オリーブオイル、ゴマ油、綿実油、コーン油、
小麦胚芽油、ヒマワリ種油、タラ肝油）、飽和脂肪酸の
千ノー、ジー及びＩ・リグリセリド（ＣＩ２Ｈ２４０□
〜ＣＩ＋１１１３６０□及びそれらの混合物）、たとえ
ば、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリ
セリル、トリステアリン酸グリセリル、トリラウリン酸
グリセリル）、医薬として混和され得るモノ−または多
価アルコール及びポリオール、たとえば、グリセリン、
マンニトール、ソルビトール、ペンタエリトリトール、
エチルアルコール、ジエチレングリコール、トリエチレ
ングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコ
ール、ジプロピレングリコール、ポリ（エチレングリコ
ール）及び他のポリ（アルキレングリコール）、ならび
にこのようなアルコール及びポリグリコールの誘導体、
飽和及び不飽和脂肪酸（炭素数２〜２２、特に１０〜１
８）と−価脂肋族アルコール（炭素数１〜２０のアルカ
ノール）または多価アルコール、たとえば、グリコール
、グリセリン、ジエチレングリコール、ペンタエリトリ
トール、ソルビトール、マンニトール、エチルアルコー
ル、ブチルアルコール、オクタデシルアルコールなどと
のエステル、たとえば、ステアリン酸グリセリル、パル
ミチン酸グリセリル、エチレンジステアレート、エヂレ
ンジラウレート、エチレンジアセテート、モノアセチン
、トリアセチン、オレイン酸グリセリル、エーテル化さ
れる多価アルコールのエステル、安息香酸ベンジル、ジ
オキソラン、グリセリンホルマール、テトラヒドロフル
フリルアルコール、炭素数１〜１２のポリグリコールエ
ーテル、ラフ１−アミド、乳酸エステル、たとえば、乳
酸エチル、炭酸エチル、シリコーン（特に、中粘度ジメ
チルポリシロキサン）、炭酸マグネシウムなど。

さらに他の添加剤及び組成物の製造方法は現存する文献
中に見られる。

色素及び担体の有用な投与方法としては静脈内（■■）
、腹腔内（Ｉ　Ｐ）　、嚢内及び動脈内注射が挙げられ
る。

用量はピリリウム色素がどの癌に用いられているかによ
って変化する。このような用量は当業者ならば、Ｇｏｏ
ｄｍａｎ　ａｎｄ　Ｇｉ１ｍａｎ’ｓ　”Ｔｈｅ　Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ　ｏｆ　Ｔｈ
ｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”　（第６版）、１６７５−１７
３７頁、５ｕｂｔｉｔｌｅ″Ｄｅｓｉｇｎ　ａｎｄ　Ｏ
ｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆ　Ｄｏｓａｇｅ　Ｒｅｇｉ
ｍｅｎｓ″（Ｍａｃｍｉｌｌａｎ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎ
ｇ　Ｃｏ。

ニューヨーク、１９８０）に記載された方法を用いて決
定できる。ｐｄｔ薬剤に関して通常経験される用量なら
びに臨床試験と動物実験のプロトコールにみられるＬＤ
５゜との間の相関に基づいて、ヒトの消費のための用量
は１．０−７．５■／ｋｇ体重であると評価され、この
量を越えない種々の注射プロトコールの後、以下の実施
例に説明されるように適当な時間内に光療法が用いられ
る。

本発明の色素が癌治療剤として作用する能力は一つには
色素が空気飽和溶液中で−・量体酸素を発生する能力の
反映である。（本明細書中で用いられる「空気飽和溶液
」なる用語は大気中に暴露された色素の溶液を意味する
。）種々のカルコゲノピリリウム色素の研究において、
セレンまたはテルル原子を含むこれらの色素のみが照射
時に一量体酸素の著しい発生を示す。幸いに、セレノピ
リリウム及びテルルピリリウム色素はそれらのピリリウ
ム及びチオピリリウム類似体に比較して光測にシフトし
た吸収極大を有する。すなわち、これらの色素はその高
量子効率のために癌細胞を殺すのに有効なだけでなく、
一般に、最も好ましい波長、ずなわち、７００ｎｍまた
はそれ以上において作用する。表■はカルコゲノピリリ
ウム色素の例、−量体酸素の発生に関するそれらの量子
効率及びそれらの吸収極大を含む（この表中、Ｐｈ−フ
ェニル、Ｍｅ−メチル、ｔ−Ｂｕ−第三ブチル）。

表−ｌ カルコゲノピリリウム色素の一量体酸素発生の量子効率
（φ）及び吸収極大（λ、、ヨＸ）ＴｅＴｅｔ−ＢｕＨ Ｔｅ　Ｔｅ　　ｔ−ｂｕ　Ｍｅ ＴｅＴｅｔ−ＢｕＨ Ｔｅ　　Ｔｅ　　ｔ−Ｂｕ　　ＣＮ ＴｅＴｅ　　Ｐｈ　　Ｈ ＣＩ 　　ＣＩ 　　Ｂｒ ＢＦ４ 　ＢＦ４ ０．０７　７０５　　ｎｍ Ｏ，００５７９０ｎｍ Ｏ，０７７０５ｎｍ ０．０８　７９０　　ｎｍ ０．００５　１０６０　　ｎｍ （Ｒ２０） （Ｒ２０） （Ｒ２０） （ＭｅＯＨ） （ＭｅＯＨヅＣ） ０．００５ずｒ＊ ５ｅＳｅｔ−ＢｕＨ ＴｅＳｔ−ｂｕＨ ＴｅＴｅｔ−ＢｕＨ Ｔｅｎｔ−ＢｕＨ ５ｅ　Ｔｅ　ｔ−Ｂｕ　Ｍｅ Ｓｅ　　Ｓｅ　ｔ−Ｂｕ　Ｍｅ ＳｅＳｔ−ｂｕＨ ５ｅａｔ−ＢｕＨ ＴｅＴｅ　　Ｐｈ　　Ｈ Ｔｅ　Ｔｅ　　Ｐｈ　　Ｍｅ Ｈ Ｈ Ｈ Ｈ Ｈ Ｍｅ　　Ｈ Ｈ Ｈ ＰＦ６ 　ＰＦ６ 　　Ｃ１ ＣｌＯ４ ＣｌＯ４ ＰＦ６ 　ＰＦ６ 　ＣｌＯ４ ＢＦ４ 　ＰＦ６ ０．０１４７３０　ｎｍ ０．０７　７４５　　ｎｍ ０．１３　８３０　　ｎｍ ０．０６　７００　ｎｍ ０．０１　８０３　　ｎｍ ０．００５　７９０　ｎｍ ０．００８　７００　ｎｍ ０．００５　６６０　　ｎｍ ０．０８　７６０　　ｎｍ ０．０１　８４３　ｎｍ （Ｒ２０） （Ｒ２０） （ＣＨ２Ｃ１２） （Ｒ２０） （ＣＨ２Ｃ１２） （ＭｅＯＨ） （Ｒ２０） （Ｒ２０） （ＭｅＯＨ） （ＣＨ２Ｃ１２） ＊　この化合物は溶液中では不安定な傾向にあったが、
Ｒ１としての他の部分が安定性をよくすることができる
。

＊＊　推定した。

これらの全ては少なくとも０．００５のφ値を存する。

これに対して、表■の比較例のφ値はこれより小さい。

また、表■のλｍ、ｌＸは各場合において６５０ｎｍま
たはそれ以上、はとんどの場合７００ｎｍより大きい。

盟−二凹 カルコゲノピリリウム色素の一量体酸素発生の量子効率
（φ）及び吸収極大（λ□Ｘ）５Ｓｔ−ＢｕＨ ＰＦ６ ≦０．００１６６０　ｎｍ　（Ｒ２０）Ｃ，Ｅ。

２　　Ｓ　　Ｏｔ−ＢｕＨＨＨＩ　　ＰＦ６＜０．００
１６３０　ｎｍ　（Ｒ２０）くとも約１５ジユール／　
ｃｒ？＋のオーダーである。色素が０．００５またはそ
れよりわずかに大きいφ値を有するならば増大した量が
有用である。露光波長はλ□８と合うように選ぶべきで
ある。好ましい露光方法としては、たとえば、レーザー
色素ＬＤＳ７５１を用いる常用のアルゴンポンプ色素レ
ーザー、または４００ｍ石英ファイハーオプチックスを
連結した固定波長が＞　７００ｎｍ、たとえば、８００
±２ｎｍのレーザーダイオードのようなレーザーが挙げ
られる。

７３０ｎｍより小さい波長の光を遮断するカットオフフ
ィルターと共にタングステン光も有用である。

これらの比較例のλ、Ｘは各側において７００ｎｍより
小さいことに注目すべきである。

ｐｔｄに必要な露光量は、使用する波長が７００ｎｍま
たはそれ以上、すなわち、はとんどの体組織を透過する
のに有効な波長であるならば一般に少な〔実施例］ 以下の実施例は癌の治療における本発明の詳細な説明す
る。

空気飽和メタノール中での照射時に一量体酸素を発生す
る表Ｉからのいくつかのセレノピリリウム色素及びテル
ルピリリウム色素を、光力学療法用の薬剤としての有効
性について哺乳類細胞培養物中で試験管内で試験した。

これらの結果は表Ｖにまとめる。試験した細胞系はυ２
５１（ヒト神経膠１１ｆｆｉ）　、Ｂ４６黒色腫（マウ
ス黒色腫）及びＦＡＤＩＩ　（ヒト扁平上皮癌）であっ
た。対照として、ｌｌ５ＫＩ（正常ヒト皮膚繊維芽細胞
）及びｃｖ−１（正常サル腎細胞）を用いた。

試験管内細胞培養物は、ウシ胎児血清を１０％まで補い
且つＩ、−グルタミンで４．５ｍＭに調整した、抗生物
質非含有増殖培地り肝トＦ１２中で増殖させた。

ＤＭＥＭ−Ｆ１２はＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　ｍｏｄｉｆ
ｉｅｄ　ＩＥａｇｌｅ’ｓ　ｍｅｄｉｕｍ（Ｇｉｂｃｏ
）とｔ（ａｍ’ｓ　ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ｍ１ｘｔｕｒｅ
　Ｆ１２（Ｇｉｂｃｏ）との１：１混合物である。細胞
接種の前に、ウェルからウェルへの光の散乱を最小にす
るために各ウェルの外壁にスプレーペイントを塗布して
マルチウェルプレートを黒くした。やや融合した細胞培
養物をトリプシン処理し、ウェル２ｃＩＩｌ当り細胞１
０５個の濃度で着床させた。色素及び／または光に暴露
する前に、細胞を増湿大気中で３７°Ｃにおいて一夜イ
ンキユヘートした。

カルコゲノビリリウム色素の原液を、９５％エタノール
中暗所で音波破砕することによってＬｍＭの濃度で調製
した。これらの原液を増殖培地で所望の濃度に希釈した
。色素は、全実験手法を通して照射時間までは光から保
護した。色素暴露の標準処置時間は１時間であった。色
素含有培地を照射前に新鮮な増殖培地と取り替えた。１
８〜２４時間後に、残っている代謝活性細胞をＭ　Ｔ　
Ｔ比色定量分析及び／細胞数計測によって評価した。分
析は一般に三重反復試験で１０％未満の標準偏差で実施
した。死亡率パーセントは処置サンプルの平均光学濃度
及びＭ　Ｔ　Ｔ分析に関する対照（未処置）サンプルの
平均光学濃度ならびに細胞計測法に関するこれら２群の
平均細胞数から求めた。（表Ｖ参照）。

これらの分析には３種の光源からの近赤外線及び可視光
線を用いた。低ミリワノ］・の多重波長効果を評価する
ためにタングステン光（１００〜２００ｍＷ）を用いた
。レーザー色素ＬＤＳ７５１（Ｅｘｃｉｔｏｎ　Ｃｈｅ
ｍｉｃａｌＣｏ、＋　Ｉｎｃ、、　Ｄａｙｔｏｎ、　０
ｈｉｏ）を含む、ピーク波長が７８５±５ｎｍのアルゴ
ンポンプ色素レーザー（Ｍｏｄｅｌ１５〇　八ｕｒｏｒ
ａ、　　Ｃｏｏｐｅｒ　　Ｌａ５ｅｒｓｏｎｉｃｓ、　
　ｒｎｃ、、＋　　５ａｎｔａＣ１ａｒａ、　Ｃａ１ｉ
ｆｏｒｎｉａ）を、１／１ＩＩ１石英ファイバーオプチ
ックスによって、均一な光強度分布を与えるミクロレン
ズアセンブリーに連結した。第三に、固定波長が８００
±２ｎｍのレーザーダイオード（ｉｏｄｅ１２４３０−
８２．５ｐｅｃｔｒａ　Ｄｉｏｄｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏ
ｒｉｅｓ、　Ｉｎｃ、＋Ｓａｎ　Ｊｏｓｅ、　Ｃａ１ｉ
ｆｏｒｎｉａ）は近赤外の光エネルギーを生じた。ダイ
オードは透明で光った端部を有する４００ｔｍの石英フ
ァイバーオブチンクスと連結した。レーザー照射実験に
おいては、ウェル底部がらのファイバー先端の距離は、
レーザー照射が標的面積２ｃ＋］を正確に覆うように調
節した。ディスクルパワーメーター（Ｍｏｄｅｌ　２０
００．　Ｃｏｈｅｒｅｎｔ、　Ｉｎｃ、。

八ｕｂｕｒｎ、　Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａ）を用いてレー
ザー源のエネルギーの出力を測定した。

濠−一■ 咄乳頻細胞におりる光力学療法に関する光増感剤として
のセレノビリリウム及びテルロビリリウム色素の試験管
内試験看 対照 １Ｃ１ 対照 ５　ｘ　１０　”　　ＨＳＫＩ ５　ｘ　１０　” ５　ｘ　１０−８ ５　ｘ　１０−８ ５　ｘ　１０　’ ＶＩ ＡＤＵ 対照 ３　　５　Ｃ１ １ｘ　１０　’　　　ＨＳＫＩ 対照 １　ｘ　１０　’ １ｘ　１０−７ １、　ｘ　１０７ １　ｘ　１０　’ ＶＩ ＡＤＵ ９９．０ １００　、０ ８５．０ ９９．０ ９９．０ ９９．０ １００．０ ９０．０ ９９．０ ９７．０ ６５．０ ０．０３ ０．１ ９９．０ ９９．０ ５８．０ ０．１゜ ０．０５ ９　　Ｃ１ ９Ｃ１ Ｃ１ １ｘ　１Ｏ−６ＣＶＩ　　１５ １　ｘ　１Ｏ−６Ｂ−１６１５ １ｘ　：ＬＯ−６ＦＡＤＵ　　１５ 対照 ４　　ＢＦ４　１ｘｌＯ−６ＣＶＩ　　５０４　　ＢＦ
４　１　ｘ　１Ｏ−６Ｕ２５１　５０対照 ２　Ｃ１ ２Ｃ１ ２Ｃ１ １ｘ　１Ｏ−７ＨＳＫＩ　　５０ １　ｘ　１０　’　　Ｕ２５１　５０ １　ｘ　１０　’　　Ｕ２５１　５０ 対照 ８　　ＣＥ−３Ｃ１ 比較例 ＣＥ−３Ｃ１ 比較例 ＧＥ−３Ｃ１ Ｘ１Ｏ−６ １ｘ　１０−６ １　ｘ　１０　’ ＶＩ ＡＤＵ １００．０　　９９．ＯＡ ９９．０　　　０．２　　　　Ａ ９９．０　　　０．２　　　　Ａ ９９．０　　９５．ＯＡ １００．０　　７５．ＯＢ １００．０　　９９．ＯＡ ８３．０　　７４．ＯＡ ５５．０　　　１．ＯＡ １００　、０ ９９．０ ９９．０ ９９．０ ９９．０ ９９．０ Ｈ３Ｋ　１、正常ヒト皮膚繊維芽細胞；　ｃｖ　ｉ、正
常サル腎細胞、　Ｕ２５１、ヒト神経膠原ｉ　Ｂ−１６
、マウス黒色腫；　ＦＡＤｔｌ、ヒト扁平上皮細胞。

ｂＡ、約７３０ｎｍＯカットオフフィルターを有するタ
ングステン光源；Ｂ、７８５±５ｎｍに発光極大を有す
る色素レーザー；Ｃ１８００±２ｎｍに発光を有するダ
イオードレーザ−；　Ｄ、　５００ｎｍのカットオフフ
ィルターを有するタングステン光源。

表Ｖから、問題の癌細胞のほとんどが光エネルギーへの
暴露後だけではなく、本発明の色素によって有効に殺さ
れたことがわかる。（光治療効果を証明するためには暗
所における生存レベルよりも露光後の生存が少なくとも
５％減少することが必要である。） 表１の色素１をラット脳中の神経膠原に投与した。この
ような部位は、体重４００ｇの２４匹のラットの脳中に
ＲＴ−１ラツト神経膠腫癌細胞を移植することによって
得た。最少用量の９５％エタノール中に色素１を溶解さ
せ、そしてリン酸塩緩衝食塩水でＩＩＩＩＭに希釈する
ことによって色素１の１ｍＭ濃度の原液を調製した。Ｒ
Ｔ−１神経膠腫細胞をＯ日日にラットの皮質中に注射し
た。色素による処置は１２日目に行った。ラット当り１
．５■（２，５μ…ｏｌ）を投与するのに充分な量の原
液（約２ｍＬ）を大腿動脈または頚動脈注射によって投
与した。動物を所定の時間に殺し、所定の組織を除き、
色素量を定量するまで冷凍した。組織をホモジネートし
、ホモジネートの脂質抽出を行い、そして色素の波長に
おいて一定の容量で抽出物の光学濃度を測定することに
よって所定の組織の色素含量を分光分析によって試験し
た。あるいは、色素１のトリチウム標識サンプルを注射
中に用い、組織ホモジネートをシンチレーションバイア
ル中に直接入れた。

次いで、色素含量をトリチウム計測によって測定した。

（注射後０．２５及び１．０時間の列挙した値が比較例
のみなのは、脳中濃度が高すぎるか腫瘍中濃度が低すぎ
るかのいずれかであるからである。）表■のデータから
、注射後短時間で腫瘍塊中にかなり高い色素濃度が得ら
れることがわかる。色素はこの動物モデルにおいて血液
脳関門を通過するようである。表■中に使用する「脳」
とは正常脳細胞を指し、「腫瘍」とは腫瘍細胞を指す。

表−■ 腫瘍保持ラットの器官組織中における色素１の分布比較
例 比較例 ｎプ阪ｑイクリ ｎプ１４帽り１ １λＭ］１３ ＝え江り会１Ｂ口１１３ ；−乙ケ鉦ｄり１１３ １■プＩＭ可り１ １１プしくイク１ １）プＬｑ帽り１ １ＪプＬクイク１ ｍり１１４ ＝良＝む撫Ｈり１１４ ２．５ ２．５ ０．２５暇脳 腫瘍 肝臓 電盤 ０．５０１１ｗＩ脳 月」ｉ艮１し 肝臓 １．０１１柵脳 腫瘍 ＩＣ−楠■ｉ 月ｎ声（ ０，３３日柵脳 引敦Ｉ剪 ９．１（５，４） ７．４ １８．０ ３２．０ １７．０ ４．７ ０．０ １．３（１，１） １３．２（３，３） ０．９ １６．０ ８サンプル調製に関して：Ｈ１組織のホモジネートを直
接使用；Ｄ、過酸化水素及びＰＣＡを用いてホモジネー
トを消化させた；し、ホモジネートの脂質抽出。

５分析方法に関して：Ａ、ｌ−リチウノ、計測；Ｂ、光
学濃度の分光光度測定。

これらの実施例から、この動脈投与の場合には脳中の神
経膠原に対する露光の最適時間は注射後約０．３５〜約
０．５時間であり、これはその時間においては薬物は正
常細胞から出たが癌細胞にはまだ保持されていたためで
あることが証明される。

移植された咄乳頻＋ｔｉ瘍を保持する体重２５０ｇのラ
ットで色素５を塩化物塩として用いて同様な結果が得ら
れた。表■参照。

麦−一■ 腫瘍保持ラットの器官組織における色素５の分布比較例 用焚 ２．５　２時間　　腫瘍　　　Ｌ 肝臓　　　Ｌ 心臓　　　Ｉ。

腎臓　　　ｌ。

４時間　腫瘍　　　Ｌ 肝臓　　　Ｉ。

ノＣ４繊　　　　　■。

腎臓　　　Ｌ ３ザンプル調製に関して：Ｈ１組織のホモジネートを直
接用いた；Ｄ、過酸化水素及びＰＣＡを用いてホモジネ
ートを消化した；し、ホモシネ−１〜の脂質抽出。

５分析方法に関して：Ａ、トリチウム計測；Ｂ、光学濃
度の分光光度測定。

５．５ ４．１ １．３ り０．５ ３．３ ３．８ り０．５ り０．５ ＸＭ−例」１ ０日日にＲＴ−１神経膠腫細胞を移植し且つ１２日日日
色素２．５μｍｏ＋を大腿動脈に注射することによって
処置した体重４００ｇのラットに関して色素１を用いて
生存試験を行った。注射の１時間後に処置ラットに対し
て、拡散先端を有する石英ファイバーオブチックスを用
いて光源として前述の色素レーザーを照射した。総照射
エネルギーは７８５ｎｍにおいて５０Ｊｃｍ”２であっ
た。３つの対照群を用いた：未処置動物、色素のみで処
置した動物、及び光のみで処置した動物。〔群当りのラ
ットの数ば：レーザー及び色素処置に関して１０匹、対
照（未処置）に関して６匹、色素のみに関して１４匹及
びレーザーのみに関して６匹。〕平均生存時間のデータ
を表■に列挙する。表■は時間の関数としての生存動物
の数を表ず。表■及び■のデータから、色素１及び光で
処置した動物は対照群の動物に関して生存が延長された
ことが示される。

濠−ニ胃 群ごとの平均生存時間（日数） ３平均生存時間（日数）。

ス一二■ 日数ごとの生存動物の割合 ≧１５ 〉１９ 〉２２ ン２６ 〉３３ 〉４０ ０．７０ ０．７０ ０．７０ ０．６０ ０．５０ ０．５０ ０．５０ ０．５０ ０．３３ ０．３３ ０．３３ ０．３３ ０．５０ ０．４３ ０．４３ ０．４３ ０．４３ ０．４３ ０日は腫瘍細胞移植の日である。処置は１２日日日行っ
た。

０．６７ ０．５０ ０．３３ ０．３３ ０．３３ ０．３３ ４７日目からは対照動物はすべて死んだが、充分に処置
された動物の３０％はまだ生存していたことは明白であ
る。

〔発明の効果〕

本発明の有利な技術的効果は、宿主の体のほとんどを透
過する波長の光を吸収する色素の能力によって、宿主の
体の任意の場所での治療を可能にする、ｐａｔに関する
色素が提供されることである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、光治療効果を生ずるのに十分なエネルギーを有する
   約６５０〜１０００ｎｍの波長の光に空気飽和溶液中で
   暴露された時に、少なくとも０．００５の一量体酸素量
   子効率を有する、治療上有効な量のセレノ−又はテルロ
   ピリリウム色素と医薬として許容され得る担体を含んで
   なる、宿主哺乳類の体に含まれる癌、神経膠腫又は黒色
   腫細胞を治療するのに有効な組成物。 ２、前記色素が以下の構造式を有する請求項１記載の組
   成物： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＾１，Ｒ＾４，Ｒ＾５及びＲ＾８は、それぞ
   れ独立に、水素、アリール、ヘテロアリール又は炭素数
   １〜１２のアルキルから選ばれ；Ｒ＾２，Ｒ＾３，Ｒ＾
   ６及びＲ＾７は、それぞれ独立に、水素、並びに炭素数
   １〜１２の、アルキル、アリール、アルキルチオ、アリ
   ールチオ、アルコキシ、アルキルセレノ、アリールセレ
   ノ、アルキルテルロ及びアリールテルロ；並びにハロ、
   ヒドロキシ及びアミノから選ばれ；Ｒ＾９，Ｒ＾１＾０
   及びＲ＾１＾１はそれぞれ独立に水素、炭素数１〜１２
   の、アルキル及びアルコキシ、ハロならびにシアノから
   選ばれ；ｎは０，１または２であり；Ｘ＾１及びＸ＾２
   は、それぞれ独立に、Ｏ，Ｓ，ＳｅまたはＴｅであるが
   、Ｘ＾１及びＸ＾２の少なくとも１方がＳｅまたはＴｅ
   でなければならず；そしてＺはカチオンに関して不活性
   な水溶性アニオンである〕。