【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
抗 ウ イ ル ス 剤
発明の技術分野
本発明は、抗ウィルス剤として使用できるヌクレオチド同族体に関するものであ
る。本発明は特に、ヘルペス群つイにスと、ＨＴＬＶ −ｍ （Ｉ（ＩＶ ）
Ｏ如きＲＮＡ −レトロウィルスとの両者に有効な非環式プリンホスホネートヌ
クレオチド同族体に関する。
発明の背景
人体に影響を及ぼす！種のヘルペス群ウィルスが知られており、シかしてこれら
は、庖疹ヘルイスウィルス（水痘ウィルス〕、単純ヘルペスウィルス！およびＩ
ｔ（顔面ヘル（スウィルスおよび性器ヘルイスウィルス〕、サイトメガロウィル
ス（巨大細胞封入疾患のウィルス〕およびニジスタイン−パーフィルス（単核症
ウィルス〕である。これらのヘル（スウィルスは、２本の鎖を有するＤＮＡ ′
ｔ−含む中程度の寸法のウィルスである。ヌクレオカグシッドの直径は約／ ０
０ ｎｍ″″Ｃわシ、そしてこれは脂質含有エンペロー！で包囲されている。ウ
ィリオンの直径は／！０−２００！１！Ｉｎ″″Ｃある。
ウイリオンは、抗体が存在する場合でさえ、宿主生物の全生涯にわ次って潜伏感
染性を有する。
ＲＮＡウィルス族のウィルス粒子は、紡節に記載のウィルスとは、非常に異なる
種類のウィルス粒子である。
この種胞のなかで特に興味深いものは、レトロウィルスであって、これは大抵の
僅婚つイリオンを包含し、その例にはＴ細胞白血病ウィルス（ＨＴＩ、Ｖ −Ｉ
ＩＩ ） Ｃ現在では、人体免疫不全ウィルス（ＨＩＶ ）と称されている〕が
ろけられる。ＨＩＶおよびその近縁ウィルスは、エイズ病（ＡＩＤＳ ）の病原
ウィルスでちると信じられている。
多数の抗ウィルス剤が既に知られている。ヨードデオキシウリジンやｊ−Ｅ−ブ
ロモビニルアオンウリジンの如きヌクレオシド同族体は、ウィルス性チミジンキ
ナーゼによって（ただし、宿主生物のＴＫによらずに〕ヌクレオチド系のものに
変換され、次いでトリホスフェートに変換され、ウィルスのＤＮＡ中に入った後
においてのみその複［’に抑制し、すなわち薬効をあられすの＋あると思われる
。これらの同族体は、 ＴＫ−でわるヘルペスウィルス種には奏効しない。また
、この種の若干の薬剤に抵抗性を有するＴＫ＋種のウィルスも報告されている〔
フィールド、Ｈｏ等、「Ｊ、 Ｉｎｆ・ｃｔＤｉｓｅａｓｅ Ｊ （／ ９１
／ ） ／ ’Ａ３ ：２ざ／；ヒラメ、Ａ。
等、＠Ａｅｔｓ＋ Ｖｌｒｏｌ ’ （／り７タン２３：２２乙〕。この機構で
働く薬剤がＥＮＡウィルスに有効であろうということは今迄全く予想されていな
かった。
本発明の抗ウィルス剤は、ホスフェートでなくホスホネートである非環式ヌクレ
オチド同族体でおる。多数の種類のヌクレオチドのホスホネート同族体がエンゼ
ル、肌によって記載されている（ 「Ｃｋｅｍ、ＲｅｖｉｅｖｓＪ（／り７７〕
、／／：（３）３４１ター３６７〕。直接環式ヌクレオチド同族体であるホスホ
ネート化合物はまた、米国特許第３．ｊ乙０，１Ａ７ｒ号、独国峙許出願（ＤＥ
）第３，０４１！；−３７３−号Ｃ■ＡＩ ）（公ＩＪａ／９１ｒ２年７月／日
）、米国特許第３．弘≠４，７７３号、英国特許第１、２ ＋７−３．２ ／
３ 号、’ａ５％許出Ｈ第２００ ｇ ｆ Ｊ ｌＩＬ号（公開日ｌり７０年り
月／７日：ホルマン、Ｊｏ等の論文［： 「Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎａｌ曇ｎ
Ｃｈｅｗ、 Ｊ （／ ９１４’ ）りｇ−１０７〕：ハングトン、Ａ、等の論
ｉ ｊ１３ ｉ ｏ Ｃｂｅｍ１ ｓ ｔ ｒｙＪ（／り７３ン／２：／７３０
−／７３乙〕；ジョーン ズ、Ｇ、 Ｌ等の論文（［Ｊ、 Ａ！＋１． Ｃｈｅ
ｍ、 Ｓｏｅ、 Ｊ （／り乙、ｒ）り０ ： ６３３７−！３３１］ニーｅｙ
）ゴメ’Ｊ、Ｊ、 Ａ。
等の論文（「Ｊ−Ｍｅｄ、 Ｃｈ＠ｍ、 Ｊ （／ ５’ ７り〕２２：１０タ
ー／／／、ｌ：および英国特許第４２≠３，２１≠号にも記載されている。これ
らの文献には一般に、これらのホスホネートの長所は、ヌクレオチドに似た構造
を有し、しかもホスホネート基によって安定性が一層高くなっていることである
と記載されている。これらのホスホネートは、それに対応するヌクレオチドが奏
効する治療分野と同じ分野で有利に使用できると思われる。
たとえば、前記の（−Ｊ、 Ｍ＠ｄ、 Ｃｈｅｗ、 Ｊに記載のモンゴメリの論
文には、ｌ！？ｌＩ記のホスホネートは、化学的治療剤でちるよ一フルオロウ２
シルの場合と同様に、ＤＮ人合成の際の必須酵素であるチミジレートーシンセタ
ーゼの活動７に阻止する作用を有するから、これは細胞毒剤（ｃｙｔｏｔｏ工１
ｃｍｇ・ｎｔｓ ）として有利に使用できることが開示されている。この酵素の
活動は実際に、！−フルオロウラシルの同化生成物、すなわちこのウラシルに対
応するモノホスフェートによって抑制される。
前記の文献に記載の化合物はすべて、りが−スまたはデオキシぎ−ス中の７ラノ
一ス環式構造を有する。
環式フラノース構造の代シに非環式連鎖を有するヌクレオシド同族体もまた、周
知の抗ウィルス剤である。
仏国特許出願の公開公＠第２３と４７ｇ１号には、これらの非環式プリンヌクレ
オシドおよびヌクレオチドが開示されている。このような化合物はまた欧州特許
出願の公開公報Ｎ１１ｔ９０７２号および第７４１３０１ｓ号にも開示されてい
る。単純ヘルペスウィルスに対する若干の前記化合物の抗ウィルス作用は既に確
認されておシ、これに関する文献の例にはケ！Ｊ−１ＪｅＬ、等の論文（「Ｊ−
Ｍａｄ、 Ｃｂｅｍ、 Ｊ （／りＩ／）３４１ニア！２１−／！３／”Ｊがあ
げられる。
サンフレア、Ｍ、Ｈ，等の論文（「Ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂ、ＡｇｅｎｔｓＣｈ＊
ｍｏｔｈｅｒ、 Ｊ （／ ９１０ ） ／ざニア≠／−７４１６：抄録は「Ｃ
ｈ＠ｗ、 Ａｂｓｔｒａｅｔｓ Ｊ （／りざ／〕り！Ｉｔ： ２ｔ７０／Ｖ）
には、アシルクルビル〔すなわちター（２−ヒドロキシエトキシメチル）−グア
ニン〕に敏感なウィルス種は、ＤＮＡ−ポリメラーゼ（これはそのトリホスホネ
ートに敏感である）の生成をもたらすウィルスであることが記載されている。同
じグループのノぐウェルＤ、Ｊ、等の論文［「Ｄｅｗ、 ＡｎｔＬｖｉｒａｌ
Ｔｈｅｒａｐｙ Ｊ （／りどの＋１３ ： ｊ ／ ： 「Ｃｈ＊、ｍ、ムｂ
ｓｔｒａｃｔｓ Ｊ （／りｆ／）り≠： ／ ６７７／乙ｒ〕には、アシクロ
ビルは試験管内試験において帯状水痘ウィルス、エグシスイインー／ぐ一ウィル
ス、サイトメガロウィルスおよびＢ−ウィルスに有効であシ、しかしてアシクロ
ビルは、ヘルペスウィルスの場合に特定されたようなウィルス性チミジンキナー
ゼによるホスホリル化のための基１ｉｉ （ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）を提供し、そ
の結果生じたトリホスフェート型のものがヘルペスウィルスのＤＮＡ−ポリメラ
ーゼの活動を阻止することが開示されている。
プリンヌクレオシド同族体において、りが−スまたはデオキシリカース残基の代
シに非環式エーテル鎖を含む一連のホスホネートは、ヘルペスウィルス型のＤＮ
Ａウィルスと、 ＨＩＭの如きＲＮＡウィルスとの両者に対し、細胞毒剤として
有効であることが今や発見された。この同族体の化学構造はアシクロビルの化学
構造に似ていると思われるかもしれないが、実際は決してそうでまい。す々わち
本発明のホスホネート化合物は、非ホスホリル化物でおるアシクロビルとは大き
く相異するのでちる。ウィルス感染部の拡大を防ぐ本発明の化合物の作用機構は
、決してアシクロビルの作用機構と同一ではない。なぜならば、ウィルス性チミ
ジンキナーゼによるホスホリル化が起シ得ないからである。
前記の引用文献の発行日よシ後に、ター（３−ホスホノ−／−プロポキシメチル
コグアニンの抗へ／ｌ／”ｅスウイルス作用に関する文献（欧州特許第７７３．
乙コ弘号公報：発行日ｌりざｔ年ｊ月３日〕が発行され、さらにまた、ター（３
−ホスホノ−／−ヒドロキシメチル−７−プロポキシメチルコグアニンの抗へル
イスウィルス作用に関する文献〔デューク、 Ａ、Ｅ、等、「Ａｎｔｌｖｉｒａ
ｌ Ｒ＊ｓ、 Ｊ （／りｆ＆）乙：２タター３０♂；プリスペ、Ｅ、Ｊ、等、
「Ｊ、 Ｍａｄ、 Ｃｈｅｍ、 Ｊ （／りざ乙ンコタ：乙７／−６７よ〕が発
行された。
発明の開示
本発明は、サイトメガロウィルスの如きヘルペスウィルス型のウィルスと、 Ｒ
ＮＡ−レトロウィルス星のウィルスとの両者の感染を防止する効果をもつ抗ウィ
ルス剤である鎖式構造（すなわち非環式構造〕のアルコキシメチルヌクレオシド
同族体のホスホネートに関するものである。これらの化合物は感染細胞内に侵入
し、ウィルスを効果的に不活性化する。
一層具体的にいえば、本発明は、次式
（ここにＢは雪喚または非置換プリン塩基ｔ−表わし、特にアデニン、グアニン
またはそのハロゲン誘導体でちる塩基を表わし：Ｒ１は■、メチル基、ヒドロキ
シメチ）％／基、ハロメチル基、アジドメチル基およびシアノ基からなる群から
選択され；Ｒ２はＨ，メチル基、ヒドロキシメチル基、ハロメチル基、アジドメ
チル基、シアノ基およびＯＨからなる群から選択され：ただし、Ｒ２がＯＨ基で
ある場合には、これに結合した炭素原子が酸化され、したがってそこに存在する
ＨおよびＲ２が一緒になって、＝０になっていてもよ〈；そしてｎはＯ−ｊの整
数である〕の化合物に関するものでちる。
本発明の化合物はさらに、薬学的に許容され得る当該ホスホネート基の一塩基性
または二塩基性の塩、または七ノーまたはジ−エステルの形のものを包含し、さ
らにまた、当該アミン置換プリン基の酸付加塩の形のものを包含する。さらにま
た、Ｒ／またはＲ２が−ＣＭ２０Ｈ″ｒ：ある場合には、またはＲ２がＯＨであ
る場合には、これらのアルコールのアシル（／−乙Ｃ〕エステルもまた本発明の
範囲内に入る。
さらに、ｎが０．／または２でらシ、かつＲ／がＣＨ２０Ｈである場合には、式
（１）の化合物は環式構造のものを包含し、すなわち、Ｒ／基と、ホスホネート
中のＯＨ基のうちの７つとの間で、形式的な脱水（ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｒａ
ｔｉｏｎ ）が起ったときには、次式の形の化合物になシ、したがって本発明は
また、式（／ａ）の化合物、およびその塩およびエステルヲも包含する。
本発明はまた、式（１）または式（／ａ）の化合物を含有する薬用組成物にも関
する。さらにｔｆｃ本発明は、式（１）または式（／ａ）の化合ｖＪｔ−使用し
てヘルペスウィルス型のウィルス、およびＲＮＡレトロウィルスの如きウィルス
の感染症を治療または予防する方法にも関する。
本発明の化合物は、ホスホン酸またはそのエステルまたは薬学的に許容され得る
その塩の形で使用できる。
この化合物はまた、当該プリン塩基の酸付加塩の形で使用することも可能である
。
ホスホン酸基の塩は、無機または有機塩基との垣であシ、この塩は一塩基性塩ま
たは二塩基性塩であってよい、無機塩基から誘導される塩の例にはナトリウム塩
、カリウム塩、リチウム塩；アルカリ土類金属の塩たとえばマグネシウム塩およ
びカルシウム塩：遷移金属の塩ニアルミニウム塩があげられる。アンモニウム塩
、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩が好ましい。適当
な有機塩基は、ホスホン酸基と塩を形成できかつ無毒性でちる有機塩基であって
、その例にはエタノールアミン、トリエチルアミン、イングロビルアミンの如き
種々のアミン：およびリジンおよびアルギニンの如きアミノ酸があげられる。
本発明の化合物のホスホン酸基はまた、モノエステ／Ｉ／またはジエステルの形
のものであってもよい、このエステルは炭素原子ｌ−２個のアルキルアルコール
、アルキル−アリールアルコールまたはアリール−アルコールから形成できる。
アルキルアルコールは、飽和または不飽和の、直鎖状、分校状または環式ヒドロ
カルビルアルコールでちってよく、そしてこれは、１個また２個の余分のヒドロ
キシル置換基で置換されていてもよく、あるいはＮ、Ｏおよび／またはｓＨ子を
有する複素環式基を含んでいてもよい。このような基の例にはメチル基、イソツ
チル基、ｎ−オクチル基、２−ブテニル基、弘−ヒドロキシ−１＋＋”ｅメチル
基等がわげられる。アリールアルコールまたはアリール−アルキルアルコールと
のエステルの場合には、該エステルはフェニル置換基金有し、しかしてこの２エ
ニル基は任意的にｌ−２個のハロゲン原子、アルコキシ基またはヒドロキシル残
基で置換されていてもよい、この種類のエステルのうちで代表的なものはフェニ
ルエステル、３−ヒドロキシフェニルエステル、ベンシルエステルおよび２−フ
ェニルエチルエステルである。アルキシ（／−４Ｃ）エステルが特に好ましい。
Ｂで示されるプリン置換基は垣基性であるから、本発明の化合物はまた酸付加塩
として使用できる。この酸付７ＸＪ塩は、遊ｎ垣基の形の本発明の化合物の生物
学的作用および性質を保っておシ、かつ、不所望の性質は写し乏いものであるべ
きである。この塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸の如き無機酸、または酢鼠、プロ
ピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、酒石醒、桂皮酸、メ
タンスルホン酸、ｐ−）メタンスルホン酸、サリテ／Ｉ／酸等の有機酸から誘導
されたものであシ得る。
Ｒ／は本葉、メチル基、置換メチル基およびシアン基からなる群から構成される
装置換メチル基の例にはＣＨ２０Ｈ、ＣＩ（２Ｎ３、ＣＨ２Ｃｌ ％ＣＨ２Ｂｒ
％ ＣＨ２Ｆ 、 ＣＨ２１があげられる。Ｒコもまたこの群から選択される
が、Ｒ２はまたＯＨ″′Ｃあってもよい、また、Ｒ２がＯＨであるときには、Ｒ
コが結合している炭素原子と同じ炭素原子に結合しているＨと一緒に々つてオキ
サイドの形で存在し得、すなわち、＝Ｏの形で存在し得る。また、Ｒ２またはＲ
／がＣＨ２０Ｈである場合には、わるいはＲ２がＯＨ’１１”ある場合には、酢
酸、プロピオン酸、ラフ酸、ヘキサン酸のエステルの如きアシ／／エステル（ｌ
−乙Ｃ〕もまた本発明の範囲内に包含される。
本発明の化合物のプリン基は、次式
の核を有するアデニンまたはグアニンから誘導された基である。上式にはまた、
各原子の位置を示す数字も示されている。原子の位置を示す数は、この環系に置
換基が存在するか否かにかかわらず、以下の記載の中で常に使用されるでおろう
。ター位置の結合基は、非環式または環式の糖類誘導基と結合し得る。さらに、
コー、乙−およびｇ−位置に、置換基が存在し得る。
グアニンの場合には、乙−位置の置換基はヒドロキシル基でち＃）（これは互変
異性を示す）、アデニンの場合には、との置換基は−Ｎ′Ｈ２である。グアニン
は２−位置に−ＮＨ２ｔ−有し、アデニンの２−位置は非置換である。これらの
同族体およびその置換同族体が本発明の化合物の好ましい具体例である。また、
乙−位置にヒドロキシル基またはアミン基の代シにハロゲン原子Ｃ％に塩素また
は臭素原子）ｔ−含むグアニン−またはアデニン同族体も好ましい。２−５乙−
および！２位置に存在し得る置換基として一般に好ましいものは、ヒドロキシル
基、アミノ基およびハロゲン原子である。
ここにハロゲン原子は、弗素、塩素、臭素および沃素原子を意味する。
式（１）の化合物において、ｎの値は好ましくは０−２でちる。
本発明の化合物の代表的な例を以下に示す。
ター〔３′−ジエチルホスホノ−／′−グロビルオキシメチル〕グアニン；
ター（３′−ジエチルホスホノ−／′−プロピルオキシメチ／ｌ／）アデニン：
ター（３′−ジー！−グロビルホスホノー／′−グロビルオキシメチル〕アデニ
ン：
ター（３′−ジー１−プロピルホスホノ−／′−グロピルオキシメチル）グアニ
ン；
？−（ｊ’−１−プロピルホスホノ−／′−プロピルオキシメチル〕グアニン；
ター（３′−ジプチルホスホノ−／′−カープチルオキシメチルングアニン：
乙−クロロータ−（ｌＡ′−ジプチルホスホノ−／’−ｎ −ブチルオキシメチ
ルフグアニン：
乙−クロロータ−〔≠′−ジプチルホスホノー／′−！ｌ −ブチルオキシメチ
ル〕アデニン；
乙−クロロ−ター（！′−ホスホノー７′−ｎ−インチルオキシメチル−／′−
クロロメチル〕グアニン；６−クロ；−ター（！′−ホスホノー／′−ｎ−ペン
チルオキシメチル−ｌ′−クロロメチル）アデニン：６−クロロ−ター（！′−
ホスホノー／′−ｎ−ペンチルオキシメチ／Ｉ／）アデニン；
乙−クロロータ−（４ｔ′−ホスホノ−／’−ｎ−ペンチルオキシメチル）アデ
ニン；
乙−クロロータ−（弘′−ホスホノー／′−ｎ−ベンチ〃オキシメチル）グアニ
ン；
９− （Ｊ’−ホスホノ−／′−ｎ−へキシルオキシメチル−／′−ヒドロキシ
メチル）グアニン；！−プロモーター（ｔ′−ホスホノ−／′−−−ヘキシルオ
キシメチルー／′−ヒドロキシメチルンーグアニン：ざ一クロローター（６′−
ホスホノ−／′−−−へキシルオキシメチル−／′−ヒドロキシメチル〕−グア
ニン；ター（乙ｌ−ホスホノ−／′−ｎ−へキシルオキシメチル−／′−ヒドロ
キシメチル〕アデニン：と−クロロ−ター（１４１Ｉ′−ホスホノ−／′−ｎ−
へキシルオキシメチル−／′−ヒドロキシメチ／Ｌ−）アデニン；♂−プロモー
ター（ＩＩ−ホスホノ−７７−ｎ−へキシルオキシメチル−／′−ヒドロキシメ
チル）アデニン；６−クロロ−ター（６′−ホスホノ−／’−ｎ−へキシルオキ
シメチル−／′−ヒドロキシメチｘ）アデニン；６−クロロ−ター（６′−ホス
ホノ−／′−ｎ−へキシルオキシメチル−６′−ケトコグアニン：乙−クロロー
タ−（４Ｌ′−ホスホノ−／′−ｎ−ベンチルオΦジメチルー／′−ヒドロキシ
メチルコグアニン；２−クロロ−ター〔！′−ホスホノー／′−カーインチルオ
キシメチル−！′−クト〕アグニン：乙−クロロータ−（≠′−ホスホノー／′
−！ｌ−ツチルオキシメチルー弘′−ケト〕アデニン；
およびその種々のエステルおよび塩。
下記の反応式（１）は、本発明に係る一般式（１）の化合物の一般的製法を示す
ものである。
反応式（１）に示したように、中間体でらるアルー−ル［（Ｒ’０）２Ｐ（０）
ＣＨＣ証）（ＣＨ２八口へＲ／）ＯＲ）管理機の存在下にホルムアルデヒドで処
理することによって、これに対応するクロロメチルエーテルが得られる。次いで
、たとえばｏビア等の方法（「Ｃａｎ、 Ｊ、 Ｃｂｅｍ、 Ｊ （１５Ｐｌｒ
２ンｔｏ’、ｚ弘７−６！３ ）によってシレート化プリン（１ｉｌｔｔｅｄ
ｐａｒｉｎｇ ）等を使用して塩素原子をプリン塩基で置換することによって、
プリン塩基Ｂを式中の非環式基に結合させる。
この結果得られたジエステル化合物は勿論本発明の化合物である。これは、マツ
ケナの方法（１’−Ｔｅｔ。
Ｌｅｔｔｓ、 Ｊ （／り７７）／！、？〕の変法によって遊離酸の形の化合物
に変換できる。
モノエステルは、前Ｃのジエステルをジョーンズおよびモアアットの論文（「Ｊ
、 Ａｎｔ Ｃｈｅｗ、 Ｓｏｅ、 ＪＣＩ９１．１）りＯ：よ３３７〕に記載
の方法に従って／Ｎ−水酸化ナトリウムで処理することによって製造できる。同
時に％プリン基中の乙−クロロ基が−ＯＨで置換されるであろう。
ｎ記の中間体でおるアルコールは、Ｒ／およびＲ２の性状に応じて種々の適当な
製法によって製造できる。
Ｒ／およびＲ，２０両者がメチル基またはＨである場合には、このアルコールは
下Ｃの反応式（２）に従って製造できる。
（Ｒ’Ｏ）、Ｐ＋ＢｒＣＨ２（ＣＨ２）ｎＣＨ２Ｂｒ（Ｒ’Ｏ） ２Ｐ（０）Ｃ
Ｈ（Ｒ２） ＣＣＨ２） ｎＣＨ（Ｒ／）ＯＨ〔反応式（２）〕
反応式（２）は、エバーハードおよびクエストハイマーの方法（［Ｊ、Ａｍ、Ｃ
ｈｅｍ、５ｏｅｅＪ （／ ５／Ｊｊ）ざ７：２３３ ）に従ってトリプルキル
ホスファイト（ここにＲ′はアルキル基である〕と対称ジブロモアルカンとの縮
合反応を示す反応式である。
しかしながら、Ｒ２がＨ″′ＣあシそしてＲ／がヒドロキシメチル基またはメチ
ル基である場合には、所望アルコール中間体は下肥の反応式（３）に従って製造
できる。
（Ｒ’０）２Ｐ（０）ＣＨ３＋Ｂ ｒＣＨ２（ＣＨ２）！ＩＣ；ＣＨ２””ＫＲ
’Ｏ） ２Ｐ （０）ＣＨ２（ＣＨ２） ｎＣＨ−ＣＨ２反応式（３）に記載の
最初の縮合反応は、サビブナツク等の方法（「Ｂｎｙｔｂ、 Ｃｏｒｎ、 Ｊ
（／り７り）り： １ＩＬｆｆ ７：１に従って実施できる。その結果得られた
不飽和ブチルホスホネートをメターノ量−オキシ安息香酸で処理することによっ
てエポキシドが得られる０次いで該エポキシドを氷酢酸中でＵ、−エテレートと
反応させることによって開環させ、アセトキシメチル中間体（Ｒ／＋ヒドロキシ
メチル基）を得る。あるいは該エポキシドをジ〆ランおよび硼水素化ナトリウム
で還元して、Ｒ／とじてメチル基を含む虫取ＰＩｌｌを得る。
Ｒ／が■であシそしてＲ２がＯＨである場合には、下記の反応式（４）に従って
シリルエーテル誘導体の形のアルコール中間体ｔ−製造する。
（Ｒ’０）２ＰＣＩ
この場合には、！−）シフ、Ｔ等の論文（「Ｇ＠ｎ。
Ｃｂ＠ｍ、 ＵＳＳＲ，Ｊ （／り７７ ） ＩＡ７ ： ｊ ４４ ＆ −＜
−）に記載の方法に従って中間ホスホネートを製造し、アルキルクロロシランで
処理し、アルクンの官能基化を行って所望アルコールを得るのでちる。
式（１）および式（／１〕の化合物は塩またはエステルの形に製造でき、また、
これらのエステルまたは塩は、遊離９または遊離プリン塩基の形の化合物に再変
換できる。
遊離ホスホン酸の形の化合物は、所望に応じて、適当な塩基で処理することによ
って一垣基性または二塩基性の塩に変換できる。これらの塩は、遊離酸の形の化
合物を、薬学的に許容され得る塩基（たとえば既述の塩基）１モル当量以上また
は２モル当！以上で処理することによって製造できる。この反応は水中で実施で
き、あるしへは、不活性な水混和性有機溶媒と水との混合物の中で実施でき、反
応温度は０−７００℃、好ましくは室温である。不活性々水混和性有機溶媒の代
表的な例には、メタノール、エタノールおよびオキサンがらげられる。その結果
得られる塩の化学量論的組成は、反応成分類Ｑ化学組成すなわち成分比率 Antiviral Agent Technical Field of the Invention The present invention relates to nucleotide homologs that can be used as antiviral agents.
Ru. The present invention particularly provides acyclic purine phosphonate antibodies that are effective against both the herpes group and RNA-retroviruses such as HTLV-m(I(IV)O).
Concerning cleotide congeners. Background of the invention Affects the human body! Species of herpes group viruses are known, and these include herpes virus (varicella virus), herpes simplex virus! Will
These viruses are medium-sized viruses that contain two strands of DNA. The diameter of the nucleokagsid is approximately / 00 nm''C, and it is surrounded by a lipid-containing envelope.
The diameter of Irion is /! 0-200!1! There is In''''C. Virions remain latent throughout the life of the host organism, even when antibodies are present.
It has dyeing property. The RNA virus family of virus particles is a very different type of virus particle than the viruses described in the Spinal Section. Of particular interest among these seed vacuoles are retroviruses, which include most monogamous viruses, such as T-cell leukemia virus (HTI, The virus, called the immunodeficiency virus (HIV), is destroyed. HIV and its related viruses are believed to be the causative agents of AIDS disease (AIDS). A large number of antiviral agents are already known. iododeoxyuridine and j-E-b
Nucleoside congeners such as lomovinylaoneuridine are
It is converted into a nucleotide system by enzymes (but not by TK of the host organism), and then into triphosphates, and only after entering the viral DNA can it be inhibited in its multiplication, i.e., have no medicinal effect. It is thought that there are some types of herpesvirus.These homologues are not effective against TK- herpesvirus species.Also, TK+ viruses that are resistant to some drugs of this type have also been reported [ Field, Ho et al., ``J, Inf・ctDisease J (/91/)/'A3:2za/; Flounder, A. et al., @Aets+Vlrol' (/ri7tan 23:22 O). Working in this organization Until now, it had never been predicted that the drug would be effective against the ENA virus.
won. The antiviral agent of the present invention is an acyclic nucleotide that is a phosphonate rather than a phosphate.
It is a homolog of Otide. Phosphonate congeners of numerous types of nucleotides are
Direct cyclic nucleotide homologs, such as phosphorus nucleotides, have been described by Kem.
nate compounds are also described in U.S. Patent No. 3. j Otsu No. 0,1A7r, German patent application (DE) No. 3,041! ;-373-CAI) (Public IJa/July/91r2), U.S. Patent No. 3. Hiroshi ≠ No. 4,773, British Patent No. 1, 2 +7-3.2/3, 'a5% Permit H No. 200 g f J IL (Published 70 years after publication date 1/7: Holman, Jo et al.'s paper [: Liebigs Annal Cloud Chew, J (/914') g-107]: Hangton, A., et al. -/73〕; Papers by Jones, G, L, etc. ([J, A!+1. , J. A. et al.
-///, l: and also in British Patent No. 42≠3,21≠. this
The literature generally states that the advantage of these phosphonates is that they have a structure similar to that of a nucleotide, yet have greater stability due to the phosphonate group. These phosphonates are
It appears that it can be used advantageously in the same therapeutic areas where it is effective. For example, Montgomery's theory as described in (-J, M@d, Chew, J.
In the sentence, l! ? The phosphonate described in II is a chemical therapeutic agent, and as in the case of Chirufluoro2, it is a thymidylate synthetase, which is an essential enzyme in DNA synthesis.
It has been disclosed that it can be advantageously used as a cytotoxic agent (cytototoxic agent 1 cmg·nts) because it has an inhibitory effect on the activity 7 of cytotoxic enzymes. The activity of this enzyme is actually! - an assimilated product of fluorouracil, i.e.
suppressed by the corresponding monophosphate. All the compounds described in the above-mentioned literature have a 7-lanose ring structure in phosphorous or deoxyglycose. Nucleoside congeners with an acyclic linkage in place of the cyclic furanose structure also
It is a known antiviral agent. The French patent application No. 23 and 47g1 describes these acyclic purine nuclei.
Osides and nucleotides are disclosed. Such compounds are also disclosed in European Patent Application Publication No. N11t9072 and No. 741301s.
Ru. The antiviral activity of some of the above compounds against herpes simplex virus has already been established.
It is recognized that there are examples of literature on this! Papers such as J-1JeL, etc.
can be lost. The paper by Sunflare, M. H., et al. 2t70/V) contains acylcurvil [i.e. ter(2-hydroxyethoxymethyl)-guar
Viral species that are sensitive to DNA-polymerase (which
It has been described that it is a virus that causes the production of same
The paper by Noguwell D, J, etc. of the same group ["Dew, AntLviral Therapy J (/Rido +13: j /: "Ch*, m, mb structs J (/rif/)ri ≠: / 677 /Otr] is Acyclo
Bill was diagnosed with varicella zoster virus in in vitro tests.
is effective against B-viruses, cytomegaloviruses, and B-viruses;
Viral thymidine kinases such as those identified in the case of the herpes virus
provides a substrate for phosphorylation by
The resulting triphosphate type is the herpesvirus DNA-polymer.
It has been disclosed that the method inhibits the activity of Among the purine nucleoside congeners, a series of phosphonates containing acyclic ether chains in place of ligase or deoxylicase residues have been shown to be effective against both DNA viruses of the herpesvirus type and RNA viruses such as HIM. However, it has now been discovered that it is effective as a cytotoxic agent. Although the chemical structure of this congener might be thought to be similar to that of acyclovir, this is in fact far from the case. The phosphonate compounds of the present invention are significantly different from acyclovir, which is a non-phosphorylated compound.
Because they are very different. The mechanism of action of the compounds of the present invention in preventing the spread of viral infection is by no means the same as that of acyclovir. Because viral stains
This is because phosphorylation by gin kinase cannot occur. After the publication date of the above-mentioned cited document, a document on the anti-hemovirus activity of ter(3-phosphono-/-propoxymethyl coguanine) (European Patent No. 773. published on June 3, 2013], and furthermore, the
References on virus action [Duke, A. (/Rizao Tonkota: Otsu 7/-67) is issued.
carried out. DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention provides an antiviral agent that is effective in preventing infection by both herpesvirus-type viruses such as cytomegalovirus and RNA-retrovirus star virus.
It concerns phosphonates of alkoxymethyl nucleoside congeners of chain structure (i.e. acyclic structure) that are virus-fighting agents.These compounds enter infected cells and effectively inactivate the virus. Specifically, the present invention is based on the following formula (where B represents a t-substituted or unsubstituted purine base, in particular a base such as adenine, guanine or a halogen derivative thereof; R1 represents a methyl group, a hydroxyl group,
R2 is selected from the group consisting of H, methyl, hydroxymethyl, halomethyl, azidomethyl, halomethyl, azidomethyl and cyano;
selected from the group consisting of thyl group, cyano group and OH; provided that when R2 is an OH group, the carbon atom attached to it is oxidized and thus the H and R2 present therein together become = 0〈; and n is an integral of O−j
It is related to the compound of [number]. The compounds of the invention further include pharmaceutically acceptable monobasic or dibasic salts, or heptano- or di-ester forms of the phosphonate group;
Furthermore, acid addition salt forms of the amine-substituted purine group are also included. Moreover,
In addition, if R/or R2 is -CM20H″r: or R2 is OH.
Acyl (/-C) esters of these alcohols also fall within the scope of the present invention.Furthermore, when n is 0./ or 2 and R/ is CH20H, , the compound of formula (1) encompasses a cyclic structure, i.e., formal dehydration has occurred between the R/ group and seven of the OH groups in the phosphonate. Sometimes, the present invention also encompasses compounds of formula (/a), and salts and esters thereof. It also relates to medicinal compositions containing compounds of
do. The present invention further relates to methods of treating or preventing infections caused by viruses such as herpesvirus-type viruses and RNA retroviruses using the compound vJt-of formula (1) or formula (/a). The compounds of the invention can be used in the form of phosphonic acid or its ester or pharmaceutically acceptable salt thereof. The compounds can also be used in the form of acid addition salts of the purine bases. Salts of phosphonic acid groups may be formed with inorganic or organic bases; these salts may be monobasic salts or
Examples of salts derived from inorganic bases, which may be dibasic or dibasic salts, include sodium salts, potassium salts, lithium salts; alkaline earth metal salts such as magnesium salts and
Calcium salts: Examples include salts of transition metals, nialium salts. Ammonium, potassium, sodium, calcium and magnesium salts are preferred. Suitable organic bases are organic bases that can form salts with phosphonic acid groups and are non-toxic, including various amines such as ethanolamine, triethylamine, inglobilamine; and amino acids such as lysine and arginine. can be given. The phosphonic acid groups of the compounds according to the invention may also be in the form of monoesters/I/or diesters, which esters are formed from alkyl alcohols, alkyl-aryl alcohols or aryl-alcohols of l-2 carbon atoms. Can be formed. Alkyl alcohols are saturated or unsaturated, linear, branched or cyclic hydrocarbons.
Carbyl alcohol may be used, and this may contain one or two extra hydrocarbons.
It may be substituted with xyl substituents or it may contain heterocyclic groups having N, O and/or sH atoms. Examples of such groups include methyl, isobutyl,
In the case of esters with aryl alcohols or aryl-alkyl alcohols, the esters have a phenyl substitution fund. However, these two
The nyl group may be optionally substituted with 1-2 halogen atoms, alkoxy groups or hydroxyl residues; typical among this type of esters are phenyl groups.
ester, 3-hydroxyphenyl ester, benzyl ester and 2-phenyl ester.
phenyl ethyl ester. Particularly preferred are alkoxy(/-4C) esters. Since the purine substituent represented by B is radical, the compounds of the invention can also be used as acid addition salts. This acidified 7XJ salt should preserve the biological effects and properties of the free radical form of the compounds of the invention, and should exhibit minimal undesirable properties.
It is possible. This salt can be used with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, or
Pionic acid, glycolic acid, oxalic acid, malonic acid, succinic acid, tartaric acid, cinnamic acid, medicinal acid
It may be derived from organic acids such as tansulfonic acid, p-)methanesulfonic acid, salicate/I/acid, and the like. R/ is composed of the group consisting of a true methyl group, a substituted methyl group, and a cyan group. Examples of substituted methyl groups include CH20H, CI(2N3, CH2Cl%CH2Br%CH2F, CH21. Although also selected from this group, R2 may also be OH'''C, and when R2 is OH, it may also be H bonded to the same carbon atom to which R Let's go together
It can be present in the side form, ie in the form =O. In addition, if R2 or R / is CH20H, it is bad, or if R2 is OH'11", vinegar
Also included within the scope of this invention are acyl//esters (l-C) such as esters of acids, propionic acid, rough acid, hexanoic acid. It is a group derived from adenine or guanine with
It will always be used in the description below whether or not substituents are present. The linking group at the ter position can be linked to an acyclic or cyclic saccharide-derived group. Furthermore, substituents may be present at the co, ot- and g-positions. In the case of guanine, the substituent at the O-position is a hydroxyl group (#) (this is a tautomeric
In the case of adenine (indicating isomerism), the substituent with is -N'H2. Guanine has -NH2t- in the 2-position, and the 2-position of adenine is unsubstituted. These congeners and substituted congeners thereof are preferred embodiments of the compounds of this invention. In addition, in place of the hydroxyl group or amine group at the B-position, chlorine or halogen atom C% is added.
is a bromine atom) t-containing guanine- or adenine analogs are also preferred. 2-5 Otsu- and! Generally preferred substituents that may be present at the 2-position are a hydroxyl group, an amino group and a halogen atom. Here, halogen atoms mean fluorine, chlorine, bromine and iodine atoms. In the compound of formula (1), the value of n is preferably 0-2. Representative examples of the compounds of the present invention are shown below. ter[3'-diethylphosphono-/'-globyloxymethyl]guanine; ter(3'-diethylphosphono-/'-propyloxymethy/l/)adenine: ter(3'-di!-globil) Phosphono/'-globyloxymethyl]adeni
Ter(3'-di-1-propylphosphono-/'-glopyloxymethyl)guani
hmm; ? -(j'-1-propylphosphono-/'-propyloxymethyl]guanine; ter(3'-dipylphosphono-/'-carptyloxymethylguanine): O-chlorota-(lA'-dipylphosphono-/'- n-butyloxymethy
Lufuguanine: Otsu-Chlorota- [≠′-diptylphosphono/′-! l -butyloxymethy
[le]adenine; O-chloro-ter(!'-phosphono7'-n-inthyloxymethyl-/'-chloromethyl]guanine; 6-chloro;-ter(!'-phosphono/'-n-pene)
Tyloxymethyl-l'-chloromethyl)adenine: 6-chloro-ter(!'-phosphono/'-n-pentyloxymethy/I/)adenine; -pentyloxymethyl)ade
Nin; Otsu-chlorota-(Hiro'-phosphono/'-n-benchi〃oxymethyl)guani
9-(J'-phosphono-/'-n-hexyloxymethyl-/'-hydroxymethyl)guanine;! -promoter (t'-phosphono-/'--hexyl-o-
oxymethyl-/'-hydroxymethyl-guanine: 6'-phosphono-/'--hexyloxymethyl-/'-hydroxymethyl]-guar
Ter(l-phosphono-/'-n-hexyloxymethyl-/'-hydro)
[xymethyl]adenine: and-chloro-ter(141I'-phosphono-/'-n-hexyloxymethyl-/'-hydroxymethy/L-)adenine; ♂-promo
ter(II-phosphono-77-n-hexyloxymethyl-/'-hydroxymethyl
6-chloro-ter(6'-phosphono-/'-n-hexyloxy)
dimethyl-/'-hydroxymethyx)adenine; 6-chloro-ter(6'-phosph)
Hono-/'-n-hexyloxymethyl-6'-ketocoguanine: Otsu-chloro
ter(4L'-phosphono-/'-n-benthyl-dimethyl-/'-hydroxy methylcoguanine; 2-chloro-ter[!'-phosphono-/'-carinthyl-
Xymethyl! ′-ct]agnine: ot-chlorota-(≠′-phosphono/′-!l-tutyloxymethyl-hiro′-keto)adenine; and its various esters and salts. The following reaction formula (1) is This shows a general method for producing the compound of the general formula (1) according to the invention.As shown in the reaction formula (1), the intermediate is an allyl [(R'0)2P(0) CHC (Proof) (R/ to CH2 Yaguchi) OR) Treated with formaldehyde in the presence of a control machine.
The corresponding chloromethyl ether is obtained by processing. The chlorine atom is then converted to a purine base using, for example, a sylated purine by the method of Ovia et al. The purine base B is attached to the acyclic group in the formula by substitution with
The monoester can be converted to the free acid form of the compound by a modification of Kenna's method (1'-Tet.Letts, J(/ri77)/!,?). It can be produced by treatment with /N-sodium hydroxide according to the method described in (J, Ant Chew, Soe, JCI91.1).
Sometimes the o-chloro group in the purine group will be replaced with -OH. The alcohol which is the intermediate of item n can be produced by various suitable production methods depending on the properties of R/ and R2. When R/ and R,20 are both methyl groups or H, this alcohol can be produced according to reaction formula (2) below. (R'O), P+BrCH2(CH2)nCH2Br(R'O) 2P(0)C H(R2) CCH2) nCH(R/)OH [Reaction formula (2)] Reaction formula (2) is based on Everhard and Condensation of triple-kyl phosphite (where R' is an alkyl group) with a symmetric dibromoalkane according to the method of Questheimer ([J, Am, Chem, 5oeeJ (/5/Jj) 7:233)].
This is a reaction formula showing a combination reaction. However, if R2 is H'''C and R/ is a hydroxymethyl group or a methyl
In the case of the alcohol group, the desired alcohol intermediate can be produced according to Shimohi's reaction formula (3). (R’0)2P(0)CH3+B rCH2(CH2)! IC; CH2""KR 'O) 2P (0) CH2(CH2) nCH-CH2 The first condensation reaction described in the reaction formula (3) is carried out by the method of Savivnack et al. ) can be carried out according to 1ILff 7:1 by treating the resulting unsaturated butylphosphonate with methano-oxybenzoic acid.
The epoxide is then ring-opened by reacting with U,-etherate in glacial acetic acid to yield the acetoxymethyl intermediate (R/+hydroxymethyl group). Alternatively, the epoxide is reduced with dirane and sodium borohydride to obtain a methyl group-containing insect repellent PIll. When R/ is a and R2 is OH, an alcohol intermediate in the form of a silyl ether derivative is prepared according to reaction scheme (4) below. (R’0)2PCI In this case,! -) The intermediate phosphonate was prepared according to the method described in the paper of Schiff, T. et al. and functionalization of the alkune is carried out to obtain the desired alcohol.Compounds of formula (1) and formula (/1) can be prepared in the form of salts or esters, and these esters or salts can be prepared in the form of free 9 or reconverted to the free purine base form of the compound.
Can be exchanged. The free phosphonic acid form of the compound can be prepared, if desired, by treatment with a suitable base.
can be converted into monobasic or dibasic salts. These salts are formed in the free acid form.
The compound can be added in an amount of 1 molar equivalent or more of a pharmaceutically acceptable base (e.g. the base mentioned above) or
is 2 moles! It can be manufactured by the above processing. This reaction can be carried out in water.
The reaction can be carried out in a mixture of an inert water-miscible organic solvent and water;
The reaction temperature is 0-700°C, preferably room temperature. Alternatives to inert and water-miscible organic solvents
Typical examples include methanol, ethanol and oxane. The stoichiometric composition of the resulting salt is the reaction component Q chemical composition, i.e. the component ratio.
【たと
えば当量比】に左右され、己であろう。
塩は、常法に従って酸性樹脂または有機酸（これはあま多好ましくないンで中和
することによってホスホン柴化合物に再変換できる。
酸 付 加 垣
プリン基の酸付加塩は、本発明の化合ｖＪを既述の有機９−！！たけ無機酸の如
き任意の酸と反応させることによって製造できる。すなわち、遊離塩基の形の化
合物を、メタノールまたはエタノールの如き極性有機溶媒に溶解し、ｏ−１ｏｏ
℃の温度好ましくは室温におｈて酸を添加する。得られた塩は沈澱物として得ら
れ、あるいは、極性の比較的低い溶媒の添五によって溶液から析出させることが
できる。
また、酸付加塩は、適当な塩基で処理することによって遊離塩基の形に再変換で
きる。
ホスホン酸エステル
所望ホスホン酸エステ〃は、ジョーンズおよびモファットの方法（「Ｊ、 Ａｘ
ｎ、 Ｃｈｅｍ、 Ｓｏｃ、 Ｊ （／り乙ｒ］９０：、ｆ３３７〕に従って２
エニルエステルにエステル交換反応を行うことによって製造できる。後記実施例
にはジエチルエステルの製法が記載されているけれども、これに対応するフェニ
ルエステルも＠似の製法によって製造でき、すなわち、実施例に記載の出発物質
であるエチルホスホネートエステルの代シに、フェニルホスホネートエステ／Ｉ
／ヲ出発物質として使用することによって製造できる。
このエステルは、ベンジルのヒトログノリシス（すなわち水素添加分解）反ＦＪ
まｆｃはトリニチルシリルエステルの加水分解反応によって、遊離酸の形の化合
物に再変換できる。これらの反応に使用されるエステルは、既述のエステル交換
方法によって製造できる。
Ｒ／／Ｒ２−アルコールのエステル
これらのエステルは、後記の合成方法によって直接に製造できる。
Ｄ、薬効および投与方法
本発明の化合＠（薬学的に許容され得る塩およびエステルヲ包含する〕はヘルイ
スウイルスおよヒＲＮＡし）ロウイルスに対し抗ウィルス活性を有する。この化
合物は薬用製剤の形で使用するのが便利でちる。薬用製剤は、／ｆｉｔたはそれ
以上の該化合物と、薬学的に許容され得る担体とを含有してなるものでちる。「
レミンＦンズ、ファーマセウチカル、サイエンシズ」、最新版（Ｅ、Ｗ、マーチ
ン１％、米国一’ンシルバニア州イーストンのマツク出版社発行〕には、当業界
で知られている代表的な担体および製剤の製法が開示されている。
この化合物は局所的投与、経口投与、非経口投与（たとえば静脈注射〕、筋肉内
注射、腹腔内注射等の種々の方法で投与できる。投与方法はウィルス感染性疾病
のｙ１類や症状に応じて適宜決定できる。内部感染症の場合には、この組成物は
６口投与または非経口投与用製剤として使用でき、投与量は約０．／−３００ダ
／陶、好ましくは／、０−３０ｒ４／ＫｅＣ晴乳動物の体重〕である。人に対し
ては単位量投与用製剤の形で／日当シｌ−≠回投与でき、投与量は１−ｒｚｏｑ
＜単位投与量〕であシ得る。
経口投与の場合には、微粉状また拡粒状の薬剤が使用でき、しかしてこの薬剤は
希釈剤、分散剤および／または表面活性剤を含有し得、そして水剤、シロップ剤
、乾燥状態のカプセル剤または装入製剤（ａａｅｈ・ｔ）、または非水性溶液ま
たは懸濁液（この場合には沈澱防止剤が配合できる）、錠剤（この場合には結合
剤および滑剤が配合できる〕、または水中またはシロップ中懸濁液製剤の形で投
与できる。必要に応じて、着香剤、防腐剤、沈澱防止剤、濃化剤または乳化剤が
配合できる０錠剤および粒剤が好適な経口投与用製剤であシ、そしてこれらは所
望に応じて被覆できる。
口部や皮膚等における局所的感染症の場合には、本組成ｖＪを軟膏剤、クリーム
剤、エアロゾル製剤、粉剤として、好ましくは軟膏剤またはクリーム剤として患
者の身体の感染部に付着させるのが有利である。すなわち、この組成物は水溶性
軟膏基剤等と混合してなる軟膏剤として使用でき、わるいは水性クリーム基剤等
と混合して力るクリーム剤として使用でき、これらの製剤における活性薬剤の！
ｌ！は約０．０７−７０％＜Ｗ／す、好ましくは０．／−７％、一層好ましくは
約Ｏ６！−である。ま穴、庖疹性角膜炎の如きフィルス感染性眼病の場合には、
医薬分野で公知の薬剤放出速度調節製剤を用いて治療できる。
本発明の化合物や組成物の投与の際の正確な投与方法は、治療すべき患者の状態
、治療法の種中等に応じて担当医師の判断によって適宜決定されるであろう。
Ｅ、実施例
次に本発明の実施例を示すが、本発明は決して実施例の記載の範囲内のみに限定
されるものでないことが理解されるべきである。
例１
２−クロロ−９−（３’−ジエチルホスホノ−／′−グロビルオキシメチル〕グ
アニンの製造
Ｉ
（これは、正確にいえばグアニン誘導体ではない、々ぜならば６−位置に−ｏｎ
が存在しないからである。好ましくは、１Ｂ２はコープミノ−６−クロロプリン
と称されるべきである。しかし慣用名として″″６６−クロログアニン２用され
ている。）
ジエチＡ／−３−プロモグロビルホスホネートからジエチル−３−ヒドロキシプ
ロピルホスホネート全製造する操作を次の如く行った（工程ｌおよび２）、エバ
ーハード、Ａ−等の方法（「Ｊ、 Ａ！ｌ１１ｅ Ｃｈｅｗ、 Ｓｅｅ、 Ｊ（
／！＃！ｒ）、ｔ７：２！３−２乙０〕によって製造されたジエチル−３−ブロ
モゾロビルホスホネート（／、ｚ、Ｏｙ：４ｔｇミリ％ −ｙｗ ） ’ｋ Ｎ
ａ０Ａｅ −３ａ２ｏ （／ ２．Ｏｆ ）と−緒に、水蒸気浴で加熱されたＤ
ＭＦＣ／２！ｄ）中で攪拌した。コ時間後に反応混合物を真空中で蒸発乾個し、
Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｅ ｆ加えて分已操作を行い、水性相の抽出操作１１回行
った。酢酸エチル抽出物を塩水で１回洗浄し、Ｎ１□Ｓ０４で乾燥し、濾過し、
真空中で蒸発乾個した。薄黄色の油状物の形の生成物がｚｌ？得られた（収率ｇ
９％〕。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、） ： δ／、３（ｔｒ、乙ａ）：／、ｊ−！Ｏ（ｍ
−４’Ｈ）ニー２−ＯＪ（２−０Ｊ（：４’、／（ｄｑ、乙Ｈ〕。
５ｉＧＦ上の薄層りｏマドグラフィ（： ＥｔＯＡｅ ： ＣＨ２Ｃｌ２（２：
／）で展開〕におけるＲｌｈｏ、３０でちった。単離されｆｃ−）エチル−３−
７セトキシグロビルホスホネー）（’ｕｓ’：４４／ミＩＪ モル） Ｏ無水Ｅ
ｔＯＨ２０Ｏｔｄ中溶液を、ダウエクス−、！０（Ｈ”）３０−と−緒に攪拌し
た（このダウエクス−！Ｏは、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＨでそれぞれ３回づつ洗浄し
たものであった〕。室温で４’１日間放置した後に、的記の場合と同様な方法で
調製されたダウエクス樹脂（１０ｍ）を添加した。を時間後に反応混合物を濾過
し、真空中で蒸発させた。このようにして定量的収率で得られた黄色油状物ヲ、
一定の直径ニア！インチｔ−有するナイロン管中にシリカ（≠００？〕を充填し
てなるコラムを用いる乾式りｐマドグラフィによって精製した。コラムの溶離操
作は／：りＭｅＯＨ： ＥｔＯＡｅを用いて行い、大体の見当で該当画分を回収
し、／ ： ／ ＥｔＯＨ： ＥｔＯＡｅ中に入れてスラリーを作成した。濾過
および真空蒸発操作の後に、薄青黄色の油状つ（よ３３Ｐ：収率６６％）が得ら
れたが、これは３−ヒドロキシゾロビルホスホン酸ジエチルエステルであった。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、、Ｄ２０） ：δ／、３０（ｔｒ、乙Ｈ）、／、 ６
０−２． ＯＪ’ （ｍ −４’ ）ｆ ） ： ｊ、 ｌ ７ （ｔｒ −−
２Ｈ） ：！Ａ／ｊ（ｃｑ、４’Ｈ）。５ＩＧＦ上の薄層りａｙトグラフイ（／
：りＭｅＯＨ： ＥｔＯＡｅで展開）におけるＲｆはｏｎであった。
ジエチ／Ｉ／−３−クロロメトキシゾロビルホスホネートへの変換反応は、ケ’
） −ｓ Ｊ−Ｌｍ等の方法〔「Ｊ。
Ｍ台ａ、ｃｈ・シＪ（／りざ／）２≠：１ｚ２ｒ−ｉｚ３ｉ〕に従って行った。
ロビンス、Ｍ、Ｊ、等の方法［「ＣＨ，Ｊ、 Ｃｈｅｗｓ Ｊ（／ ９１２ ）
６０ ： ！４１７−！に！ ）Ｋ［ッテシレート化（５ｆｌａｔ＠ｄ ）さ
れ、かりＨ，（ＣＮ）２で処理されたコープミノ−６−クロロプリン（（７，ｊ
Ｐ：Ｑり！ミリモルフをベンゼン（４ｔＯｍ）中に入れ、これに、既述の方法に
よってｖ４製されたジエチル−３−クロロメトキシゾロビルホスホネート（２６
ｒミリモル〕の溶液を添加した。反応混合物を２時間還流し、冷却し、ＣＨＣｌ
、 （≠ｏｏｗｔ）を添加した。有機相をＮａＨＣＯｓの飽和水溶液および／
Ｍ −ＫＩ水溶液の各々１０−づつで順次洗浄した。有機溶液をＮ１□Ｓ０４で
乾燥し、濾過し、蒸発させた。黄色のガム状物が７２Ｏ■得られた。この粗生成
物の一部は加水分解！！験に使用した。残シの粗生成物にはシリカコラムクロマ
トグラフィ操作全行つ九。粗製の反応生成物を、シリカ充填コラム中を通した。
展開剤は！ ： ３ ＥｔＯＡｅ ： ｎ−ＰｒＯＨであり九。同じ混合溶媒を
用いて洛ｔ１１操作を行い、７４種の画分を得ｆｃが、各面分の量は１０−２０
−であった。画分７−７２を集め、無色の油状物（２よ♂■〕全得たが、これは
自然に結晶化したｅ Ｃ）Ｔ２Ｃ１２・Ｅｔ２０中で信相操作を行い、２群の白
色の固体（２Ｑ７ダ）を得た。Ｉ！ｌ ｐ ＊１０ター／１０℃、収享２１ｒ％
。出発物質であるプリン（４ｔよコミリモルンに反応を行うことによって、所望
のジエチルエステル化合物が収率４を乙−で得られた。
分析値： （” （Ｃ，、Ｈ２，ＣｌＮ５０４Ｐ）Ｃ，Ｈ，Ｎ ）評スペクトル
：１ＦＩｌ＆！（ξ）：Ｐ’／、、ｉ！弘Ａ（ｇ乙ｔｏｏ）。
３１０ （７２００）：ｐ”４７．２弘７（６ざ００）。
ＪＯＩＣ７４ｔ００）：ｐ１４／／ 、２１１７Ｃｔｔ００）。
３０１（７１００）。
質量スペクトル：ゾ・Ｊ ７７ （Ｍ” ）。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、） ：δ乙３ （ｔｒ 、 ６Ｈ） 、／、！；２−
ＪＬＩＩ （ｍ 、４？Ｈ） 、３．！ｒｌ （ｔｒ 、２Ｈ） 、＋１．０り
（ｄｑ ｅ ４’ Ｈ）−よ４’Ｊ’ （ｓ 、広いベース地、！Ｈ）。
７、 ｌｒり（１，／Ｈ）、５ＩＧＦ上で！ ： ３ ＥｔＯＡｅ ：ｎ−Ｐｒ
ｏ）Ｉを用いて展開させる薄層クロマトグラフィでは、Ｒｆがｏ、ｔ、ｔ−ｏ″
Ｔ：あった。
例２
５’ −（３’−エチルホスホノ−／′−プロピルオキシメチル〕グアニンの：
Ｊ、造
Ａ０例１の方法で製造した乙−クロロータ−（３′−ジエチルホスホノ−／′−
プロピルオキシメチル〕グアニｙＣ７！ｒ１９：ｏ、２ミリ−ｖ−ル） ｋ ／
Ｎ −ＮａＯＨ水溶液（！−〕と混合し、７時間還流させた。冷却後の反応混
合物をダウエクス！Ｏｘと（ピリジニウム型〕で中和し、濾過し、水で充分に洗
浄した。溶液を一部蒸発させてピリジンを除去し、次いで凍結友燥した。オレン
ジ色の残留物（７” 呼） ＋ Ｉ２０に再び溶清し、遠心分離操作を行って不
溶性物質を除去した。ケイシャ操作を行った後に溶液にクロマトグラフィ操作を
、ウオットマンーＤＥ−ｊコーセルロース（ＨＣＯ３型〕のコラム（寸法Ｑり×
！ＩＬｔ個〕ヲ用いて行った。この操作では最初のＨ２０溶離作業の後にＩ２０
および０．２ Ｍ−ＮＨ４ＨＣＯｓ各／！金用いて線形勾配を形成させた０画分
４ｔ３−４ｔ７（各面分の量は７−〕から、３回のａ’結乾燥操作の後に線毛の
ような白色固体生成物（，２弘ｍｐ；収率３を嗟〕が得られた。
電子線衝撃質量スペクトル（ＴＭＳ誘導体〕におけるｍ／ｅの値は５１１ｔ７で
あった（ ＴＭＳ誘導体のｒ〕。化学的イオン化ｒＲ′ｊｌスペクトル（ＴＭＳ
誘導体〕における１・の値はｊ４Ｌざであった（ ＴＭＳｓ誘導体のＭ＋十五〕
。
’Ｈ−ｈ’ＭＲ（Ｄ２０）のデータ：δ／、／り（ｔｒ＊ＪＦり、／、 ！１ｔ
−４り（ｍ 、４’ Ｈ） 、Ｊ、 ！り（ｔｒｓｕａ）、ｊ、り０（ａｑ、２
′Ｈ）、！、４’７ （１ｍ 、２ＦＩ） 、１．２ （ｂｒｔ、／Ｈ）。
５ｉＧＦ上Ｔノ薄層りＯｆｆトグラフイ（７： ３ ＣＥＩ、ＣＮ ：０、 ／
Ｎ−朋、Ｃ１７）Ｃ溶液で展開）では、Ｒｆ＝Ｏ，≠０であった。
ダウエクス−！Ｏ×♂のコラム内の通過操作によって得られた物質は、式Ｃ，、
Ｈ，、Ｎ５０５Ｐ−Ｉ（２０を有するものであった。
計算値：Ｃ−３７，ざ２チ、Ｈ−よ７７％、Ｎ−２０，０６チ測定値二〇−３と
２７チ、■−よ♂≠チ、Ｎ−／！２乙！チこの物質のαスイクトル測定案験の結
果は次の通シであつ九。
匠スイクトル：λゆ、！（す：声／、２！！（／／、りＯθ〕、２７１ （）Ｉ
１部） ：Ｐ’７．２！２ （／２Ｊ’ ００ ） −−’７／（肩部） ：ｒ
／／ 、２！ｔ７ｃ１０，７００）、２乙７（肩部）。
なお、加水分解によるモノエステルの生成のときには、プリン環の脱ハロゲン反
応が同時に起る。
Ｂ、改良方法に従って次の操作を行った。６−クロロータ（３′−ジエチルホス
ホノ−７′−プロピルオキシメチルコグアニンＣｌＡ２７？：／／、３ミリモル
〕および／Ｎ −ＮａＯＨ水溶液ｒ、２００ｍ１）の混合物を７時間にわたって
穏やかに速流した。冷却され次反応混合物をダウエクス！Ｏｘ♂（ピリジニウム
形〕で中和し、かつ脱塩した。この樹ムａ七戸別し、Ｐ液を充分に水洗した。
この水性Ｐ液の一部を蒸発させてピリジンを除去し、次いで凍結乾燥した。残留
物すなわち乾燥物（３，乙♂？〕をＩ２０ （３０ｄ ：声ｒ）に溶解し、この
水溶液にＤＥＡＥ−セル；−ス（クオツドマン−ＤＥ−Ｉ２：）ＩＣ０３″″形
：ＬＪ’×１００ｃｎ）上でクロマトグラフィ操作を行った。ｉｋ初に、基總の
高さが一定になるまで水洗操作を行い、其後に、Ｉ２０および０． ／Ｎ−ＮＨ
４ＨＣＯ３の各々ｆ２Ｊ用いて線形勾配を作シ、溶離操作を行った。
得られた画分♂ター／３り（各２０ｄ）’ｆｃ系め、一定の重量になるまで凍結
乾燥し′ｆｃ（乾燥物の重量ユ２よ？〕。
この物質を、最伝量のＩ２０およびそれと同量のＥ ｔＯＨに溶解し、この溶液
を冷い／ Ｎ −ＨＣｌ中で処理した。
表記の化合物（／、Ｊ／ｌ：収率３弘−〕が微細白色粉末の形で得られた。
電子線衝撃質量スペクトル（ＴＭＳ ｌ！誘導体：ｍ／・ｊ４！７（ＴＭＳ、誘
導体の一部。化学的イオン比質量ス”ｅ／ｉｔ’（ＴＭＳ誘導体）：ｍ／＠！≠
ｔ（ＴＭＳ、誘導体のＭ”＋Ｈ） ＊非誘導体温化合＠） （ｕｎｄ＠ｒｉｖａ
ｔｉｚ＊ｄ・ｏｍｐｏｕｎｄ ）に対する化学的イオン比質量スイクト／Ｉ／
：ゾ・３３２（Ｍ” ＋Ｉ（）、 ’ｕ−ＮＭＲ（ｐＭｓｏ−Ｃ６） ：δ／、
１７（ｔｒ、ｊＥ）、／、３−／、Ｊ’ （ｍ、４ＬＨ）、Ｊ、ｔ、ｔＪ’（ｔ
ｒ。
２ Ｈ）、３．ｒ！ （ｄｑ 、 ２Ｈ）、Ｉ３０（＊、２Ｈ）、６．４’Ａ
（ｂｒｓ 、 、２Ｈ）、Ｉ７り（ｍ ｓ ／ Ｈ）−紫外線スペク） ／ｌ／
： Ｕ’Ｖ ：、λ、１Ｉ１１．工（＃） ： ｐｌ（／ 、 ２ ｊ ！ Ｃ
Ｉ２，１００）、２７ｊ （！郁）：ｐＨ７，コタコ（Ｉ３．コ００）、２７２
（肩部〕、Ｐｄ／／、２！７（／／、≠００）、２６７（肩部〕。この物質の化
学式はＣ１１Ｈ１８Ｎ５０５Ｐす鉗２０であった。
計算値：Ｃ−ＪＪ’、Ｌ２％、ｌｌ−１６３％、Ｎ−２０，！ＩＳ測定値’、Ｃ
−３１，ｊ２チ、Ｈ−よりＯチ、Ｎ−２０，３弘チ５ＩＧＦ上ＩＺ）薄１ｉｉ／
＊’Ｆ ）／’９フイＣ７’、３ＣＨ，ＣＭ ：０、／ Ｎ −ＮＨ４Ｃｌ−
’Ｉ″艮開） ： Ｒｆ冑Ｏ，ゲ。
例３
モノエステルから遊離酸への変換反応：り（３′−ホスホノ−／′−プロピルオ
キシメチ／Ｉ／）グアニンの製造マツククナ等の方法［「Ｔ＠ｔｓ Ｌｅｔｔｅ
ｒｓ Ｊ （／り７７年）／Ｊ−！〕の変法によって、り（３′−エチルホスホ
ノ−１′−ゾロビルオキシメチルコグアニン（２００ダ；０、Ｊ−７ミリ’ｌｉ
−／Ｉ’）、ＣＨＣｌ５（ｌｒ、３ ｄ ）およびヘキサメチルジシラザン（１
，３ｔｉ）の混合物に、室温にシいて攪拌下にツコモトリメチ〃シラン（０，乙
／−；弘６０ミリモル〕を添コした。７２時間後に反応混合物を蒸発乾個し、Ｉ
２０を加えてスラリーにし、炉遇し、アセトンで洗浄した。白色の固体生＃：物
（ｌｊｊｒ＋）が得られた。
１Ｈ−心化によってエチル基の不存在が確認された。
５ｉＧＦ上の薄層クロマトグラフィ（７： ３ ＣＨ，ＣＮ ：０、 ／ Ｎ
−ＮＵ、ＣＩ ）では、Ｒｆｏ、２０において単一スイットが認められた。メウ
エクス、ｔＯＸ、２（Ｎａ）によってナトリウム塩が生じ、凍結乾燥後に白色固
体生成物（／／１ＩｔＩＩ９：収率Ｊｉｌ）が得られた。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ＠ａ６＋ｐ２０） ：δ／、ＡＩ＜ｒｎ、弘Ｈ）、３．
６０ （ｔｒ ｅ −２Ｈ）、ｉ４’ｌ （ａ 、２Ｈ）、７り乙（＊ ｅ ／
Ｈ） ＃紫外線スペクトル＝λｍｋＫ（す：ｐＨ／。
２ｊｔＣ１０ＪＯＯ）、２７１ （Ｎｉ） ；ｐｌ（７、２６６（／ ／、 ｆ
００ ）、２７０ （ｌｌｉｌｉ）：Ｐ）Ｉ／／ 、２６６（／ら２００）、
２乙？（肩部〕。
微量分析（化学式Ｃ，Ｈ，３Ｎ５０５Ｐ’Ｎｍ’Ｈ２０）計算値：Ｃ−３／、４
ｔ！Ｐチ、Ｈ−４’、μ／チ、Ｎ−２０，μ／チ、ｐ−ｙｏコチ
測定値：Ｃ−３７，３２％、Ｈ１’、ｊｊ％、Ｎ−，２０，１０％。
Ｐ−乙２１チ
質量スイクトル二が命！り／ （ＴＭＳ４誘導体のＭ＋）。
例≠
６−クロロータ（７′−ジエチルホスホノ−／Ｉ−ヘグトキシメチル〕グアニン
の製造
ＣＩ
例／の方法と同様な方法によって、／、７−ジブロモへブタンおよびトリエチル
ホスファイトからジエチル−７−クロロメトキシへグチルホスホネートヲ製造し
た。これを、シレート化コーアミノー乙−クロロプリンおよびシアン化第二水銀
と反応させた。この反応は、例／記載の乙−クロロータ（３−ジニチルホヌホノ
ー／−ゾロピルオキシメチル）グアニンの製法と同様な方法に従って行った。無
色ガムの形の生成物が得られた（収率３２％〕。
αスペクトル：λｍａｗ（’） ” ｐ’ ／ −２４’乙乙ｍ（乙り７０〕、
３ ／ Ｏｎｍ （７／ ９０ ） ： ｐ’ ７−２４’ ７ Ｅｌｍ （６
乙ｊＯ）、３１０ｎｒｎ（７／１０）：ｐＨ／／−２’１ｌｎｒｎＣＡＡＡＯ）
、３０！Ｐｒｘｍ（７／４ＬＯ）。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、） ：δ／、 ／ −／、り（ｒｎ 、 ／ ｌｒＨ
） 、３．ＩＡＩ（１，コＨ）、≠／ ０ （ａｑ 、４１Ｈ）、よｔ７（番。
コ■〕、ｊ、ｊＪ’（ｍ、ｊＨ）、７りｊ（ｓ、／Ｈ）。
５ＩＧＦ上の薄層クロマトグラフィ〔酢酸エチル：エタノール（１００：／）を
使用〕：Ｒｔｏ、ｉｓ。
分析の結果得られた化学式： Ｃ，、Ｉ（２，ＣＩＮ、Ｏ，Ｐ−Ｈ２０例！
モノエステルへの変換反応：り（７′−エチルホスホノ−／′−へグチルオキシ
メチルフグアニンの製造例２記載のター（３′−エチルホスホノ−／′−プロピ
ルオキシメチｙ）グアニンの製法の場合と同様な方法に従って、例≠の６−クロ
ロータ（７′−ジエチルホスホノ−／−へブチルオキシメチル）グアニンの加水
分解反応’（ｉ−、／Ｎ−水酸化す）＋Ｊウム水溶液中でμ時間還流させること
によって行い、生成＃！Ｊを単離した（収率３０嘩〕。
５ｉＧＦ上のクロマトグラフィ〔アセトニトリル：０．ＩＮ−塩化アンモ二ウム
水溶液（７：Ｊ））：ＲｆＯ，ｊ。
プロトン−ＮＭＲ（Ｄ２０） ：δ−／、／ 、／、ｊ （ｍ、／Ｊ’Ｈ）、Ｊ
、ｊ（ｔｏコＨ〕、３．り０ （ｄｑ ｅ ２Ｂ ）、よ４ｔ！（雪。
コＨ）。
α−スイクトル：λｒｎ＊ｘ＜す：声７．コｊコ（／二２００）。
質ｔ スヘ／ ） ＃ ： ｍ／＊ Ａ ０３ （ＴＭＳ、 Ｗ導体ｏｒ）。
例６
９ （３’−エチルホスホノ−７′−にドロキシメチル−／Ｉ−ゾロビルオキシ
メチル〕グアニンの製造Ａ、ジエチ／Ｌ／−３．≠−エポキシツタンホスホネー
トの製造
サビブナツク等の方法（「Ｓｙ！１． Ｃｏ工、」（ｌり７り）７”、４ｔ１７
〕に従ってジエチＡ／−３ＩｌＩＬ−エポキシブタンホスホネートを合成した。
数回の合成操作において、中間オレフィン化合物の酸化反応によって、不純Ｗｔ
金含有る白色固体が得られた。粗製の無希釈反応生成物を濾過して不純物を除去
し、得られた固体生成物を氷冷ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し穴、Ｐ液の蒸発および残留
物の蒸留によって、所望のエポキシド化合物が収率７！−で得られた。
Ｂ、ジエチル−３−ヒドロキシ−≠−７セトキシ！チルホスホネートの製造
ジエテ／Ｉ、 −３，４Ｌ−工？キシブタンホスホネート（ユｒｉｐ：ｉコミリ
モル〕の氷酢酸（１０−）中溶液を攪拌しながら、これに室温において乾燥不活
性雰囲気中でＢＦ、エテレートＣ０，２ｔｌ）’ｃ添加した。１時間攪拌した後
に％Ｈ２０（２０ｄ）ｆ：添加し、反応混合ｐｆｌＪを７０分間攪拌し、真全中
で蒸発させた。２倍量のＨ２Ｏを添加し、再び蒸発させてＨＯＡｅ共沸混共沸混
合主１させた。シロップ状の残留物にＮａＨＣＯｓの飽和水溶液（３０ｗｔ）お
よびＥｔ２０（２０ｍ）を加えてコ相に分けた。水性相をＣＨＣｌ、 （３Ｘ２
０ｔｔ）で抽出した＃ＣＨＣｌ３濾過し、蒸発させた。無色の油状生成物（Ｚ／
４４：収率乙７％〕が得られた。この物質の’ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ 、＋Ｄ
Ｏ）スイクトルデータにおいて、ユ／δの一０ＣＯＣ２！、 ノシングレット
と、ｔ３コδの（Ｃ！！、ＣＨ２０）、ＰＯのトリブレットとの強度比の測定に
よって、この物質の純度は？！−でおることが判った。 ＧＣ／ＭＳデータ（Ｔ
ＭＳ誘導誘導体上、主成分の画分の測定グラフはゾ・２乙７のところに極端に強
い吸収ピークを示し、かつ、 ｍ／ｅ ２ Ｊ ７のところに弱い吸収ピークを
示した。このデータは、次式
の所望異性体の化学構造を示唆するものであシ、換言すれば、生成物中の主成分
は、次式
の不所望異性体でなめことを示唆するものであった。
Ｃ，＋−クロロータｃＪ／−ジエチルホスホノ−７′−７七トキシメチ／ｌ／−
／’−グゾロルオキシメチル〕グアニンの製造
例２の６−クロロータ（３′−ジエチ〃ホスホノー７′−プロピルオ謳ジメチル
）グアニンの製法と同様な方法に従って、下記の操作を行うことによって６−ク
ロロータ（３′−ジニテルホスホノー７′−７セトキシメチｙ−／’−プロピ／
／オキシメチル）グアニンを製造した。
シレー）化Ａ−／クロロアニンＣ１／２ミリモル）ヲ、ジエチ／１． 、３−ク
ロロメトキシ−≠−７セトキシプチルホスホネート（１五−ｈ’ＭＲ：！ｒ、ｊ
弘δ、ダブレット、−０ＣＨ２Ｃ１） （／ Ｏｒミリモルフとのカップリング
反応を行った。この反応のために、還流管３時間行い、次いで室温において１週
間放置した。前の合成工程のときには通常のＭ裏操作の後にＴＭＳ基が残留して
いたために、今回の精製操作の開始前に反応混合物にＥｔＯＨ（ｌｌＬｏｏ−）
を添加して７時間攪拌した。
黄色のガム状の粗生成物（３矢り？；収阜７２％）が得られた。これをフラッシ
ュクロマトグラフイニヨってＮ製した。このクロマトグラフィでは吸着剤（ベー
力社製のフラッシュクロマドグ：７フイ用シリカ）（３３０ｆ）を使用し、溶離
操作は２チ、Ｊ″−およびざチＥｔＯＨ含有溶液（溶媒ｕ ＣＨＣｌ、 ）を順
次用いて行った。適当な画分を集めることによって、乙−クロロータ（３′−ジ
エチルホスホノ−／′−ア七トキシメチルー７′−プロピルオキシメチル）グア
ニン（７，！ＰＪ−Ｐ ： ａ率／ｌ、ｆｂ）が、薄貢色油状物の形で得られた
。５ＩＧＦ上の薄層クロマトグラフィ（！Ｐ： ／ ＣＭ２Ｃ１２： ＥｔＯＨ
）では、Ｒｔｏ、ｔｉにおいて単一スポットが認められた。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、＋Ｄ、Ｏ） ：δ／、Ｊ（１）（ｔｒ）、／、 ４ｔ
ｊ −Ｑ１０（ｍ）、Ｊ、ｊｒ（ｄ）、３．ＩＡ−ＩＡココアｍ）、よＪ″Ｏ（
非対称製のａ）ｓ７．ざ弘（櫨ン。積分の結果から、芳香族と一０ＣＲ，とのゾ
ロトン比はｌ：２であシ、ｊ：！０δ（−０ＣＨ，Ｎ−）のアップフィールド（
ｕｐｆｉ＠ｌｄ）では、ゾロトンが２０％過剰に存在することが見出された。紫
外線スペクトル：λ！１Ｉｌｌ、、（ＥｔＯＨ） ：コ弘ざ、３／八ＴＯＤ２４
．− ／ ４１．≠／■〔例１の６−クロロータ（３′−ジエチルホスホノ−７
′−ゾロビルオキシメテＪＬＩ）−グアニンＯＴＯＤ２４． ！ ／ ａ、り／
り〕。
Ｄ、モノエステルへの変換反応および加水分解反応：り（３′−エチルホスホノ
−／′−ヒドロキシメチルー７′−ｆロピルオキシメチル〕グアニンの製造／
Ｎ −ＮａＯＨ水溶液Ｃｌ３０ｔ）を用いて、６−クロロータ（３′−ジエチル
ホスホノ−ｌ′−アセトキシメチル−７′−プロピルオキシメチル）グアニン（
２り！？：／７．７ミリモル〕の加水分解反応を、例ＪＢ［り（３′−エチルホ
スホノ−ｌ′−ゾロｔｈ−オキシメチル］グアニンの製造〕の場合と同様な方法
に従って行つ九。生成物をＤＥＡＥ−セファデックス（２Ｊ’Ｘり７傷、ム−よ
へＨＣＯ，〕から単離し、精製の九めにクラマドグラフィを、同様な第２コラム
上で、Ｈ２Ｏおよび０、／Ｎ−Ｎ）ｉ４ＨＣＯ。
（各２りの線形勾配を利用して行つ７’ｅ、 ＨＰＬＣＣ／ｆイ／７／（Ｖｙｄ
ｍ＊）−ＴＰｊ／Ｊ’ｊ４’、／ ％ ＣＨ，ｃＮ 。
０、０ ／ ２ Ｊ” Ｎ−蟻酸トリエチルアンモニウム中、−３；２−７分、
２ｊ２λ〕、を行い、かつ、紫外線スペクトル、全光学密度［ＴＯＤＣＰＨ７）
、２Ｊ″コ〕（数回の凍結乾燥操作の後に得られた生＃：物の重量基準〕の測定
実験を行つｙｃ、り（３′−エチ〃ホスホノー／′−ヒドロキシメチル−／′−
プロピルオキシメチ〃）グアニンの２８の純粋な画分が得られた（ｑ！ｐ画分の
重量／、Ｏｆ。
２タチ、ＪｊＴＯＤ（ｆＩＨ７ン２ｊ２／ダン。１つの画分における異性体比率
（ＨＰＬＣＧＣ’って測冗〕は３：２でわシ、他の１つの両分すなわち第２画分
における異性体比率は／：ｌ″′Ｃあった。後者の試料の微量分析によって得ら
れた化学式は、Ｃ１２”２ＯＮ５０６’・／／ＩＡＮＨ，・／Ｈ２０であつ次。
計算値：Ｃ−３７，６７％、■−よりｔチ、Ｎ −／ ９． ／ ７−Ｃ−ｊ７
．４ｔ７％、ｌｌ−６，６０％、Ｎ−／Ｙｌ乙−匠スペクト＃ ： ２４．工（
す：ＰＨ八へ！６（ｌシ≠００）、２７６（肩部）：ｐＨ７，２！コ（／ ３．
ｊ ００ ）、２７０（肩部）：ｍ／／、コ１６（／／、１００コ、コロ６（
Ｍ都］。
’Ｉ’ｌ−ＮＭＲ（Ｄ２０） ：δ／、 −２−２（６−％ｖ ｅ Ｊ Ｈ）、
ｉ、３ｓ−／、ｆｌｒ（ｍ、４ｔＨ）、ｊｉｆｆ−４’、（７（ｍ、ｊＨ）、工
！λ（１，２Ｈ）、〜２り（非常に広いシングレット、１１［）。
ＢＩＧＦよ（Ｄ４＠り”）／’９フイ：ＲｆＯ，ｊコ（７：ｊ ＯＨ，ＣＮ ：
０． ／ Ｎ −Ｎｕ、ＣＩ ） ｅ例７
ター（３′−ホスホノ−／′−ヒドロキシメチルー／′−グｐピルオキシメチル
〕グアニンの製造
り（３′−エチルホスホノ＠−ｌ′−ヒドロキシメチル−／／−７”ロビルオキ
シメチル）グアニン（２０４ｔＩＩＩｉＩ；部分的アンモニウム塩としてｏ、！
−ミリー＆／ｌ／） ｋ ｆ ｃＩそトリメチルシラン（ＱＪ’ｄ：Ａ、／Ｊミ
リモル〕で処理した。この処理は、ｑ８４Ａの２（３′−ホスホノ−／′−グゾ
ロルオキシメテ〃］ダアニンの製造のときの処理操作の場合と同様な１口に従っ
て行った０反応媒質中への出発物質の浴甥を促進するために、ｌ、！−ジアデビ
Ｖ ／ Ｅ” （ｊ−４”−０） ｔ ７ テ／ −ｊ −エフ （０，０７Ｊ
’ １１ｔ：０．５λミリ七ル］七添加した０反応混合物七室温において一晩中
攪拌し友後に、蒸発乾詔した。！！留りをＨ２Ｏ（ｊ ｄ ）に溶解し [and
For example, it depends on the equivalence ratio], and it will be self. The salts can be reconverted to phosphonic acid compounds by neutralization with acidic resins or organic acids (which are less preferred) according to conventional methods. like the organic 9-!!take inorganic acids mentioned above.
It can be produced by reacting with any acid. i.e. in the free base form
The compound is dissolved in a polar organic solvent such as methanol or ethanol and the acid is added at a temperature of o-10°C, preferably at room temperature. The resulting salt is obtained as a precipitate.
Alternatively, it can be precipitated from solution by adding a relatively less polar solvent. Acid addition salts can also be reconverted to the free base form by treatment with a suitable base.
Wear. Phosphonate Esters The desired phosphonate esters can be prepared by transesterifying the 2-enyl esters according to the method of Jones and Moffat (J. It can be produced.Although the example below describes the production method of diethyl ester, the corresponding phenyl ester
The phenylphosphonate esters can also be prepared by a similar method, ie, by using phenylphosphonate ester/I/I as the starting material in place of the ethylphosphonate ester starting material described in the examples. This ester is produced by the hydrolysis reaction (i.e. hydrogenolysis) of benzyl in the free acid form.
Can be converted back into objects. The esters used in these reactions can be produced by the transesterification methods described above. Esters of R//R2-alcohols These esters can be prepared directly by the synthetic methods described below. D. Efficacy and Administration Methods The compounds of the present invention (including pharmaceutically acceptable salts and esters) are
It has antiviral activity against viruses and human RNA viruses. This transformation
It is convenient to use the compound in the form of a medicinal preparation. The pharmaceutical preparation contains /fit or more of the compound and a pharmaceutically acceptable carrier. "Remin F's, Pharmaceuticals, Sciences", latest edition (E, W, March
1%, Published by Matsuku Publishing Co., Easton, Pennsylvania, USA] discloses typical carriers and preparation methods for formulations known in the art. This compound can be administered in a variety of ways, including topical administration, oral administration, parenteral administration (e.g., intravenous injection), intramuscular injection, and intraperitoneal injection.The administration method depends on the class Y1 of the viral infectious disease and the symptoms. In case of internal infections, this composition can be used as a formulation for oral or parenteral administration, and the dosage is about 0./-300 da/te, preferably /, 0-30 r/4/. KeC is the body weight of a healthy mammal].For humans, it can be administered in the form of a unit dosage formulation, 1-≠ times per day, and the dosage can be 1-rzoq <unit dose]. For oral administration, the drug can be used in finely powdered or expanded granule form, which may contain diluents, dispersants and/or surfactants, and can be formulated into solutions, syrups, dry capsules, etc. agent or charge formulation (aaeh/t), or non-aqueous solution or
or suspension (in which case suspending agents may be incorporated), tablets (in which case binders and lubricants may be incorporated), or suspension formulations in water or syrup.
I can give. Tablets and granules, which may contain flavoring agents, preservatives, suspending agents, thickening agents, or emulsifying agents, are suitable formulations for oral administration and may be used where appropriate.
Can be coated as desired. In the case of local infections in the mouth, skin, etc., this composition VJ can be administered as an ointment, cream, aerosol preparation, or powder, preferably as an ointment or cream.
Advantageously, it is applied to the infected part of the person's body. That is, this composition can be used as an ointment by mixing with a water-soluble ointment base, etc., or can be used as a cream by mixing with an aqueous cream base, etc., and the active agent in these preparations can be used as an ointment. l! is about 0.07-70%<W/s, preferably 0. /-7%, more preferably about O6! − is. F. fils-infected eye diseases such as pharyngeal keratitis and herpes keratitis can be treated using drug release rate controlled formulations known in the pharmaceutical art. The exact method of administering the compound or composition of the present invention will be determined as appropriate by the physician in charge, depending on the condition of the patient to be treated, the type of treatment method, etc. E. Examples Next, examples of the present invention will be shown, but it should be understood that the present invention is by no means limited to the scope described in the examples. Example 1 2-chloro-9-(3'-diethylphosphono-/'-globyloxymethyl]g
Preparation of anine I (which is not strictly a guanine derivative, since -on is not present in the 6-position. Preferably, 1B2 should be called copemino-6-chloropurine) However, the common name is ``''66-chloroguanine 2.
The entire process for producing lopylphosphonate was carried out as follows (steps 1 and 2):
Diethyl-3-broth produced by the method of Hard, A- et al.
DMFC/2 heated in a steam bath with mozolovir phosphonate (/, z, Oy: 4tg mm% -yw)'kNa0Ae -3a2o (/2.Of)! d) stirred inside. After several hours, the reaction mixture was evaporated to dryness in vacuo, and the aqueous phase was extracted 11 times by adding H2O and EtOAf in portions.
It was. The ethyl acetate extract was washed once with brine, dried over N1S04, filtered and evaporated to dryness in vacuo. The product in the form of a light yellow oil is zl? Obtained (yield g 9%).'H-NMR (CDCI, ): δ/, 3(tr, Oa):/, j-!O(m-4'H) 2-OJ(2 -0J(:4', /(dq, otH). A solution of ethyl-3-7cetoxyglovylphosphonate ('us': 44/mIJ mol) in anhydrous EtOH20Otd was stirred with Douex-,!0(H'')30-.
(This DOWEX-!O was washed three times each with H2O and EtOH.
] After standing for 4'1 day at room temperature, Dowex resin (10 m) prepared in the same manner as in Matoki was added. After an hour the reaction mixture was filtered and evaporated in vacuo. A yellow oil was thus obtained in quantitative yield, with a constant diameter. Purification was carried out by dry pomatography using a column of silica (≠00?) packed in a nylon tube with a
The preparation was carried out using /: MeOH: EtOAe, and the relevant fractions were collected with rough idea and placed in /: / EtOH: EtOAe to create a slurry. After filtration and vacuum evaporation, a pale blue-yellow oil (Y33P: yield 66%) was obtained.
However, this was 3-hydroxyzorobylphosphonic acid diethyl ester. 'H-NMR (CDCI, D20): δ/, 30 (tr, H), /, 6 0-2. OJ' (m -4')f): j, l7 (tr--2H):! A/j (cq, 4'H). Rf was on in the thin layer aytograph on 5IGF (developed with MeOH:EtOAe). The conversion reaction to diethyl/I/-3-chloromethoxyzorobylphosphonate is carried out by the method of J-Lm et al. 1z2r-iz3i]. The method of Robbins, M, J, et al.
Coopmino-6-chloropurine ((7,j P:Q-ri!) treated with P:Q-2 is placed in benzene (4 tOm) and added to it according to the method described above.
A solution of diethyl-3-chloromethoxyzolobylphosphonate (26 r mmol) prepared in v4 was added. The reaction mixture was refluxed for 2 h, cooled and CHCl, (≠oowt) was added. The organic phase was diluted with NaHCOs. The organic solution was dried with N1S04, filtered and evaporated. A yellow gum was obtained. A portion was used for hydrolysis experiments.The remaining crude product was prepared using silica column chroma
Complete topography operation nine times. The crude reaction product was passed through a column packed with silica. The developing agent! : 3 EtOAe: n-PrOH and 9. A Rakut11 operation was performed using the same mixed solvent, and 74 fractions were obtained, fc being 10-20- in each fraction. Fractions 7-72 were collected and a colorless oil (2 and 2) was obtained, but this crystallized naturally.
A colored solid (2Q7 da) was obtained. I! l p *10 ter/10°C, cooling 21r%. The desired diethyl ester compound was obtained in a yield of 4 by reacting the starting material purine (4t).Analytical value: (''(C,,H2,ClN504P)C,H, N) Evaluation spectrum: 1 FIl &! (ξ): P'/,, i! Hiro A (g oto too). 310 (7200): p"47.2 Hiro 7 (6za 00). JOIC74t00): p14// , 2117Ctt00). 301 (7100). Mass spectrum: J77 (M”).'H-NMR (CDCI, ): δ3 (tr, 6H), /,!;2-JLII (m,4?H),3.!rl ( tr, 2H), +1.0ri (dq e 4'H) -yo4'J' (s, wide base,!H). 7, lrri (1, /H), on 5IGF!: 3 Thin layer chromatography developed with EtOAe:n-Pro)I showed Rf: o, t, t-o''T:. Example 2 5'-(3'-Ethylphosphono-/'-propyloxymethyl)guanine: J, Preparation A0-Chlorota-(3'-diethylphosphono-/'-propyloxymethyl) ] GuaniyC7!r19: o, 2 m-v-l) k/N-NaOH aqueous solution (!-) and refluxed for 7 hours. After cooling, the reaction mixture
Dowex the compound! Neutralize with Ox (pyridinium type), filter, and wash thoroughly with water.
Purified. The solution was partially evaporated to remove pyridine and then lyophilized. Oren
Red-colored residue (7”) + Relyse in I20 and centrifuge to remove waste.
Soluble substances were removed. After the Keisha operation, the solution was subjected to a chromatography operation using a column (dimension Q x !ILt pieces) of Wotman-DE-j cocellulose (HCO3 type). In this operation, after the first H20 elution operation, I20 and 0.2 M-NH4HCOs each/! from 0 fractions 4t3-4t7 (the amount of each surface is 7-) to form a linear gradient, after three times a' drying operation, pili were A white solid product (2000 mp; yield of 3) was obtained. The value of m/e in electron beam impact mass spectrum (TMS derivative) was 511t7 (r of TMS derivative). The value of 1 in the chemical ionization rR'jl spectrum (TMS derivative) was j4Lza (M+15 of TMSs derivative).'H-h'MR (D20) data: δ/, /ri(tr *JFri,/, !1t -4ri (m, 4'H), J, !ri (trsua), j, ri0 (aq, 2'H),!, 4'7 (1m, 2FI), 1.2 (brt, /H). In the T-thin layer Off toography on 5iGF (7:3 CEI, CN: 0, /N-Tomo, C17) developed with C solution), Rf = O, ≠ 0. The material obtained by passing through the column of DOWEX-! Chi, H-yo 77%, N-20,06 Chi measurement value 20-3 and 27 Chi, -yo♂≠ Chi, N-/!2 Otsu! Chi Results of α quictor measurement experiment of this substance
The result is the following passage. Takumi Suiktor: λyu! (su: voice/, 2!! (//, riOθ), 271 ()I part 1) :P'7.2!2 (/2J' 00) --'7/(shoulder) :r/ /, 2!t7c10,700), 2ot7 (shoulder). In addition, when producing monoesters by hydrolysis, dehalogenation reaction of the purine ring is performed.
reactions occur at the same time. B. The following operations were performed according to the improved method. 6-Chlorota(3'-diethylphos)
Hono-7'-propyloxymethylcoguanine ClA27? ://, 3 mmol] and /N-NaOH aqueous solution r, 200 ml) was gently flowed over a period of 7 hours. Cool and then dowex the reaction mixture! The tree was neutralized with Ox♂ (pyridinium form) and desalted. The tree was separated into seven rooms, and the P solution was thoroughly washed with water. A portion of the aqueous P solution was evaporated to remove the pyridine, and then frozen. Dried.Residue, that is, dried matter (3, Otsu♂?) was dissolved in I20 (30d: voice r), and this aqueous solution was subjected to chromatography on a DEAE-cell (Quadman-DE-I2: IC03'' type: LJ' x 100cn). First, wash with water until the height of the base is constant, then wash with I20 and 0. A linear gradient was created using f2J of /N-NH4HCO3, and elution was performed. The resulting fractions (20 d each) were freeze-dried to a constant weight (dry weight: 2?). and the same amount of EtOH and this solution was treated in cold /N-HCl. The indicated compound (/, J/l: yield 3 h) was obtained in the form of a fine white powder. Electron impact mass spectrum (TMS l! derivative: m/・j4!7 (TMS, induced
Part of a conductor. Chemical ion ratio mass ``e/it'' (TMS derivative): m/@!≠ t (TMS, M''+H of derivative) Target ion ratio mass suikt/I/: zo・332(M" +I(), 'u-NMR(pMso-C6): δ/, 17(tr, jE), /, 3-/, J' (m, 4LH), J, t, tJ' (t r. 2 H), 3.r! (dq, 2H), I30 (*, 2H), 6.4'A (brs, , 2H), I7ri (m s/H)-ultraviolet spec) /l/: U'V:, λ, 1I11. Engineering (#): pl (/, 2 j !CI2,100), 27j (!Iku): pH7, Kotako (I3) .ko00), 272 (shoulder), Pd//, 2!7 (//, ≠00), 267 (shoulder).
The scientific formula was C11H18N505P Suzuki 20. Calculated values: C-JJ', L2%, ll-163%, N-20,! IS measurement value', C -31, j2chi, Ochi from H-, N-20, 3 Hirochi 5IGF upper IZ) thin 1ii/ *'F )/'9fi C7', 3CH, CM: 0, / N -NH4Cl- 'I'Display): RfO, Ge. Example 3 Conversion reaction of monoester to free acid: ri(3'-phosphono-/'-propylo
Production of guanine (Kishimethi/I/) By a modification of the method of Matsukukuna et al.
In a mixture of no-1'-zorobyloxymethylcoguanine (200 da; 0, J-7 m'li-/I'), CHCl5 (lr, 3 d) and hexamethyldisilazane (1,3 ti), The reaction mixture was brought to room temperature and added with stirring while stirring. After 72 hours, the reaction mixture was evaporated to dryness, and I20 was added to form a slurry. A white solid raw product #: (ljjr+) was obtained. The absence of ethyl groups was confirmed by 1H-centering. Thin layer chromatography on 5iGF (7:3 CH, CN:0, / N-NU, CI), a single switch was observed at Rfo, 20.
Ex, tOX, 2(Na) produces sodium salt, which becomes a white solid after freeze-drying.
A product (//1ItII9: yield Jil) was obtained. 'H-NMR (DMSO@a6+p20): δ/, AI<rn, Hiroshi H), 3. 60 (tr e -2H), i4'l (a, 2H), 7ri Otsu (* e / H) # Ultraviolet spectrum = λmkK (su: pH /. 2jtC10JOO), 271 (Ni); pl (7, 266 (/ /, f 00), 270 (llili):P) I//, 266 (/ et al. 200), 2 Otsu? (Shoulder). Microanalysis (Chemical formula C, H, 3N505P'Nm'H20) Calculated values: C-3/, 4t!Pchi, H-4', μ/chi, N-20, μ/chi, p-yo Kochi Measured values: C-37, 32%, H1', jj%, N-, 20, 10%.P-yo 21chi Mass swictor 2 is life!/ (TMS4 derivative M+).Example≠ Preparation of 6-chlorota(7'-diethylphosphono-/I-hegtoxymethyl)guanine CI Example 2: Preparation of diethyl-7-chloromethoxyhegtyl from 7-dibromohebutane and triethyl phosphite by a method similar to that of Example/. Manufacture phosphonates
Ta. This was reacted with sylated coamino-chloropurine and mercuric cyanide. This reaction is similar to the example/description of
-/-Zolopyloxymethyl)guanine was prepared according to the same method. Nothing
A product in the form of a colored gum was obtained (yield 32%). α Spectrum: λmaw(')"p'/-24'Onm (70), 3/Onm (7/90): p' 7-24' 7 Elm (6 otsujO), 310nrn (7/10): pH//-2'1lnrnCAAO), 30!Prxm (7/4LO).'H-NMR (CDCI,): δ/ , / -/, ri (rn, / lrH), 3. IAI (1, koH), ≠ / 0 (aq, 41H), yot7 (number. ko■), j, jJ' (m, jH) , 7 (s, /H). Thin layer chromatography on 5IGF [using ethyl acetate:ethanol (100:/)]: Rto, is. Chemical formula obtained as a result of analysis: C,, I (2, 20 examples of CIN, O, P-H! Conversion reaction to monoester: ter(3'-ethylphosphono-/'-propyloxy) described in Production Example 2 of methylfuguanine
Following the same method as for the preparation of 6-chloroxymethy)guanine,
The hydrolysis reaction of rotor(7'-diethylphosphono-/-hebutyloxymethyl)guanine' (i-,/N-hydroxylation)+J was carried out by refluxing for μ hours in an aqueous solution, producing #! J was isolated (yield 30%). Chromatography on 5iGF [acetonitrile:0.IN-ammonium chloride aqueous solution (7:J)]: RfO,j. Proton-NMR (D20): δ-/, / , /, j (m, /J'H), J, j (tokoH), 3.ri0 (dq e 2B), yo4t! (snow. α-Squictor: λrn * Example 6 9 Preparation of (3'-ethylphosphono-7'-droxymethyl-/I-zorobyloxymethyl)guanine A, diethyl/L/-3.≠-Epoxytutan phosphonate
Production of diethyl A/-3IlIL-epoxybutane phosphonate was synthesized according to the method of Sabibnack et al. The oxidation reaction of the olefinic compound yielded a white solid containing impure Wt gold.The crude neat reaction product was filtered to remove impurities, and the resulting solid product was washed with ice-cold CH2Cl2 and filtered. Evaporation of the P solution and distillation of the residue gave the desired epoxide compound in a yield of 7!-. B. Preparation of diethyl-3-hydroxy-≠-7cetoxy!-thylphosphonate Diethe/I, -3, 4L-technical xybutane phosphonate (URIP: icomiri)
A stirred solution of 1 mol] of glacial acetic acid (10-) was added to a dry inert solution at room temperature.
BF and etherate C0,2tl)'c were added in a neutral atmosphere. After stirring for 1 hour
%H20(20d)f: was added and the reaction mixture pflJ was stirred for 70 minutes and evaporated in pure water. Add twice the amount of H2O and evaporate again to form HOAe azeotrope.
I made 1 joint master. Add a saturated aqueous solution of NaHCOs (30 wt) to the syrupy residue.
and Et20 (20 m) were added to separate into co-phases. The aqueous phase was extracted with CHCl, (3×20tt) #CHCl3, filtered and evaporated. A colorless oily product (Z/44: yield 7%) was obtained. The 'H-NMR (CDCI, +D O) sigmtre data of this material showed that U/δ was 10 COC2!, No singlet. , for measuring the intensity ratio of t3coδ (C!!, CH20) and PO triblet.
So, what is the purity of this substance? ! - It turned out that it was. GC/MS data (TMS-derived derivative, the measurement graph of the main component fraction shows extremely strong
It showed a strong absorption peak and a weak absorption peak at m/e 2 J7. This data suggested the chemical structure of the desired isomer of the following formula; in other words, the main component in the product was the undesired isomer of the following formula. . C,+-Chlorota cJ/-diethylphosphono-7'-77toxymethy/l/-/'-guzololoxymethyl]guanine Production of 6-chlorota(3'-diethylphosphono-7'-propylo) of Example 2 6-dimethyl) guanine is produced by the following procedure.
Lorota (3'-diniterphosphono7'-7cetoxymethy-/'-propy//oxymethyl)guanine was prepared. 1. , 3-k
Coupling reaction with lolomethoxy-≠-7cetoxybutylphosphonate (15-h'MR:!r, j hiroδ, doublet, -0CH2C1) (/Or millimorph) was carried out.For this reaction, the reflux tube was for 3 hours, then at room temperature for 1 week.
I left it for a while. During the previous synthesis step, TMS groups remained after the usual M back operation.
Therefore, before starting the current purification operation, EtOH (llLoo-) was added to the reaction mixture and stirred for 7 hours. A yellow gummy crude product (3 arrows?; yield 72%) was obtained. Flash this
The chromatograph was manufactured by N. In this chromatography, an adsorbent (flash chromadog: 7-fiber silica manufactured by Baeriki Co., Ltd.) (330f) was used, and the elution procedure was carried out using 2-, 2- and 3-EtOH-containing solutions (solvent u CHCl, ) in sequence.
I used it next. By collecting appropriate fractions, the 3′-chloro rotor
Ethylphosphono-/'-a7toxymethyl-7'-propyloxymethyl) guar
Nin (7,!PJ-P: a/l, fb) was obtained in the form of a light-coloured oil. Thin layer chromatography on 5IGF (!P:/CM2C12:EtOH) showed a single spot at Rto, ti. 'H-NMR (CDCI, +D, O): δ/, J (1) (tr), /, 4t j -Q10 (m), J, jr (d), 3. IA-IA cocoa m), yoJ″O (asymmetric a) s7.
The roton ratio is l:2, j:! In the upfield (upfi@ld) of 0δ(-0CH,N-), zolotone was found to be present in 20% excess. purple
External spectrum: λ! 1Ill,, (EtOH): Ko Hiroza, 3/8 TOD24. -/41. ≠/[6-Chlorota(3'-diethylphosphono-7'-zorobyloxymethe JLI)-guanine OTOD24. ! / a, ri/ ri]. D. Conversion reaction to monoester and hydrolysis reaction: Production of ri(3'-ethylphosphono-/'-hydroxymethyl-7'-f-ropyloxymethyl)guanine/N-NaOH aqueous solution Cl30t) using 6 The hydrolysis reaction of -chlorota(3'-diethyl phosphono-l'-acetoxymethyl-7'-propyloxymethyl)guanine (2!?: /7.7 mmol) was carried out in Example JB
[Production of sulfono-l'-zoloth-oxymethyl]guanine]. The product was isolated from DEAE-Sephadex (2J'X 7 scratches, HCO) and subjected to chromatography for the ninth stage of purification on a similar second column with H2O and 0,/N. -N)i4HCO. (Performed using each two linear gradients7'e, HPLCC/fi/7/(Vyd m*)-TPj/J'j4',/% CH,cN.0,0/2 J" -3; 2-7 min, 2j2λ] in triethylammonium N-formate, and ultraviolet spectrum, total optical density [TODCPH7), 2J''] (the raw material obtained after several freeze-drying operations). When carrying out the experiment, 28 pure fractions of (3'-ethy〃phosphono/'-hydroxymethyl-/'-propyloxymethy〃)guanine were obtained ( The weight of the q!p fraction/, Of.2, JjTOD (fIH7n2j2/dan. The isomer ratio in one fraction (HPLCGC' is a redundancy) is 3:2, and the ratio of the other one is The isomer ratio in both fractions, i.e., the second fraction, was /:l'''C.
The chemical formula is C12"2ON506'//IANH,/H20. Calculated value: C-37, 67%, - from t, N -/ 9./ 7-C-j7 .4t7% , ll-6, 60%, N-/Yl Otsu-Takumi Spect #: 24.Eng. .j 00), 270 (shoulder): m//, ko 16 (//, 100 ko, coro 6 (M)).'I'l-NMR (D20): δ/, -2-2 (6 -%ve J H), i, 3s-/, flr(m, 4tH), jiff-4', (7(m, jH), k !λ(1,2H), ~2ri (very wide Singlet, 11[). BIGF Yo (D4@ri”)/'9 Fui: RfO, j ko (7: j OH, CN: 0. /N-Nu,CI) eExample 7 Production of ter(3'-phosphono-/'-hydroxymethyl-/'-gp-pyloxymethyl)guanine (3'-ethylphosphono@-l'-hydroxymethyl-/ /-7” Robiloki
trimethylsilane (QJ’d: A, /J mi)
treated with Rimol]. This treatment
Follow the same procedure as in the production of Roloxymethe] Daanine.
To facilitate the bathing of the starting material into the reaction medium, l,! -Diadevi V/E" (j-4"-0) t7Te/-j-F (0,07J' 11t: 0.5λ milli7yl) The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. After that, it was evaporated to dryness!! The residue was dissolved in H2O (j d ).
【該残留
物は水に易占でみる】、数滴の／ Ｍ −ＲＣＩで処理して俄性化し、再び蒸発
操作を打つ九ｅ ＥｔＯＨ中で信相操作を行い、次いで評退した。
灰色がかつた白色固体の形Ｏ１ｊ：成りが得られた（／６１ダ；収率２３５６）
。
５ｉＧＦ上の薄層クロマトグラ２イ（７：／：、２−１ＰｒＯＨ：旧、ＯＨ：
）１２０ ）におけるＲｆは０． ／ざでちった。
αスペクトル：λ。、！：ｐｉ−１／、２．３−乙、２７ＩＣ肩部〕；ＰＨ７，
２６２，２７２ＣＮＭ部）：Ｐ）Ｉ／／ 、２！！、２６ｇ（肩部〕。
’Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２０） ：δ： ／、 、３’ ！ −／、 Ｉ ！ （ｒｎ
、 ４１ Ｈ）、３、５−３．り５（ｍ、ｊＨ）、ｉ３Ｉ （ｄ ）、Ｚ９ｊ
（ｂｒｓ ｅ ／ Ｈ）。
質量スペクトル：ソ・乙り３（ＴＭＳ５誘導体のＵ＋ ）。
例！
り（３′−ホスホノ−／′−ヒドロキシメチルー／′−プロ２ルオキシメチル）
グアニンの環状エステルの製造；ラナ、Ｈ，Ｇ、等の方法（「Ｊ、 Ａｍ、 Ｃ
ｈｅｗ、 ｌ５ｏｅ＊ Ｊ（／り乙／）♂ｊ：Ａ！ＰＪ’）と同様な方法に従っ
て〜り（３′−ホスホノ−／′−ヒドロキシメチルー／′−プロピルオキシ）グ
アニン（例り参照：ｏ、ｏｉｉｔ：０．０３３ミリモル）と乾燥ピリジン（６−
）との混合物を、還流下にＮ’、Ｎ’−ジシクロヘキシル−≠−モルホリンカ／
ｌ／がキシアミジン＜ｏ、ｏｉｏｔ：ｏ、ｏ３４ｔミリモ／１／）で！Ａ理した
。完全な溶液が生じた後に、ジシクｏ ヘ＊ シｙ カ／ｌ／ ＆ジイミド（０
，０／２７ ’、０．０Ｊ’ｌ”ミリモル）の熱ピリジン（４Ｌｓｄ）中溶液を
一度に添加し、反応混合物すなわち反応穴を穏和な還流下に２−棒時間加熱した
。次いで反応混合物を蒸発乾個した。残留ｖｌＪ七Ｈ２０中に入れて信相し、濾
過した。Ｆ液を蒸発乾個し、ＭｅＯＨに溶解した。５ＩＧＦ上の薄層クロマトグ
ラフィにおける単一スポットは、１ＰｒＯＨ：ＮＨ４ＯＨ：ＨｚＯ（７：／：２
）を使用した場合にはＲｆ −０，７０において認められ、Ｃｍ３ＣＮ ： ０
．０ ／ Ｎ −ＮＨ４Ｃｌ （７： ３ ）を使用した場合にはＲｆ−０，４
ｔ／において認められ、Ｍ・ＯＨを使用しｙｃ場合にはＲｆ−０，７１において
認められた。
αスペクトル：λ−、ｘ’、ｐＨ７，２ｊ／ 、２７ｊ＜肩部ン。
質量スペクトル： ｍ／＊ ｊ ３ ／ （ＴＭＳ３誘導体のＭ＋）。
例り
ｒ−プロモータＣ３１−エチルホスホノ−ＩＩ−ｆロビルオキシメチル）グアニ
ンの製造
例コにおいて製造されたり（３′−エチルホスホノ−／′−グゾロルオキシメチ
ル〕グアニン（５ｉ’７ｗ９：０、２♂６ミリモル〕とＨ２Ｏ（ｊｍ）との混合
＠會、ロビンス、Ｍ、Ｊ、等の方法（「Ｊ、 Ｍａｄ、 Ｃｈｅｗ、 Ｊ （１
５；’ｒす、２７：／４ＬｆＡ−／！タコ〕に従って、Ｂｒｚの１２０中飽和溶
液で攪拌下に処理した。この処理は、臭素の色が残存する程度まで行った（Ｊ−
１−）。室温において３０分間攪拌した後に、Ｎ＊ｒｌＳＯ５の結晶によって脱
色した０反応混合物Ｔｈ濾過し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＨで洗浄した。白色固体生
成物（タタダ；収率ｒ７−）が得られた。この生成物は、５ＩＣＦを用いる薄層
クロマトグラフィ（Ｒｆ−０，３３： Ｃ１ｉ、ＣＮ ： ０．ＩＮ −ＮＨ４
Ｃ１（７：ｊ））によって均質であることが確認された。
’Ｉ（−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ４） ：δｔ／り（ｔｒ ｅＪＨ）−／、３−４
り（ｍ 、 ＩＩ Ｈ） ｅ ｊ、 Ｊ″Ｊ （ｔｒ ｖ−２１１！ ） −ｊ
、タコ（ｄｑ ｐ、２Ｈ）＊Ｊ：ｊＪ （５−２Ｈ） −１ｒ、Ａ♂（ｂｒａ
ｅ２Ｈン。
αスペクトル：λｍａｘ（す： ＰＨ／ 、 ｊ 、４； ０ （／１．、．４
ｌ−００）：ｐＨ７，２６ｏｃｉ ｌ、、 １ＩＬｏｏ ン ：ｐ）Ｉ／／ 、
＝２ Ａ タ（／シ乙００）。
この化合物の）ＩＰＬＣ試験：パイダック−ＴＰ−！／ど！≠−コラム（ｌＩＬ
、乙Ｘ ２ ！ Ｏｍ ）、／！仕分間０−１００−非線形勾配〔ここに０−１
００％はＡ中のＢの割合を示し、しかしてＡは０．０ ／ ２ ｊ Ｎ −Ｅｔ
、Ｎ−ＨＣ０□ＨＣｐＨ３，０）でろ）、ＢＦｉ！％口、α水溶液でわる：この
溶媒は、ウォーターズ、モデル−ｔｔｏ−溶媒ゾログラマーにおける「プログラ
ムナざ」のものでおる〕。
このＨＰＬＣ試験によって、出発原料的Ｊ″−の存在が確認された。
例／記載のＤＥＡＥセ２アデツクス上のクロマドグ２フイ（水＞ ｘ ヒ０．
／ Ｎ −ＮＨ，ＨＣＯ，の線形勾酊）によって、出発原料を含まない表記の目
的化合物が得られた。
例１θ
り（３′−エチルホスホノ−３′−ヒドロキシ−７′−ゾロピ〃オキシメチル）
グアニンの製造
／、ＥｔＯＨ
２，ＣＩＨ２−Ｃ預■０
Ａ、ジエチル／−１−ツチルジメチルシリルオキシアリルホスホネートの製造
ガジｌフ等の方法（「Ｊ、 Ｇｅｍ、 Ｃｈｅｍ−ＵＳＳＲＪ（／り７７）≠７
：、２１Ｉｔ１５’（英訳版ｐ、２２３３））によって製造されたゾエチル／−
ヒドロキシアリルホスホネー） ＣＡ１．Ｉ？；０．３！ｒ！モｂ）ｃｏ乾燥Ｄ
ＭＦ（／７０ｄ）中溶液をイミダゾール（乙０．１．１弘？；ｏ、ｒｒ♂モル〕
と混合し、次いでｔ−ツチルジメチルクロロシラン（６３，と７２：０．１ＩＬ
２ｊモル〕で処理した。この処理は、コー’Ｊ−１Ｅ、Ｊ・等の方法〔「Ｊ・Ａ
ｍ、 Ｃｈ＠ｍ、 Ｓｅｅ、 Ｊ （／り７２〕り４！：乙／９０〕に従って行
った。反応混合物を２ｊ時間攪拌し、 Ｅｔ、０（７！Ｏｄ）と混合した。コ相
からなるこの溶液をｕ２ｏｃＪｘ２！０−）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で
乾燥し、重力濾過乏行い、蒸発乾個した。無色の油状生成物が定量的収率でＩ１
０？得られた。
５ｉＧＦ上の薄層クロマトグラフィ（α５”２中の１０％ＥｔＯＡｃ溶液、可視
化するために燐モリブデン酸２％を添加、加熱ンではスポットがＲｆ（１）、１
ｌｔ４Ｌにおいて認められ、ＲｆＯ５６１において微量の不純物が認められた。
’Ｈ−ｋ”ＭＲ（ＣＤＣＩ、） ：δ０．Ｉ ＯｋヨＵＯ，／ ｊ （ｓ 、
＠。
！Ｆｌ）、０．２７（−０りＨ）、／、ＪＪ（ｔｒ、７Ｈ）。
１Ａ２０（ｄｑ、≠Ｈ）、≠ｊ７（ａａ、／ｎ）、よ１Ｏ−ｊ：４ｊ（ｍｅ−２
Ｈ）、１１７−乙、Ｊ ４’ （ｍ −／ Ｈ） ＊Ｂ、ジエチ／１／／−ｔ−
ツチルジメチルシリルオキシ−３−ヒドロキシゾロビルホスフエートの製造ジエ
ｆｋ／−ｔ−プチルジメチルシリルオキシアリルホスホネー）（７ＡＰ：０．２
４ｔ７モル）をトルエンと３回共沸し、乾燥ＴＨＦ （≠００−〕に溶解させた
。
ＴＩ（Ｆ中の７Ｍ−シボ２ン溶液（／ ｊ Ｏｔｎ！ ）を、コｊ℃において！
ｌｔｊ分間を要して滴下し、次いで反応混合物１−／時間攪拌した。氷冷によっ
て温度を２０℃に維持しながらＨ２Ｏ（乙よ一〕ヲ添加することによって前記の
ハイドロがレーション反応を停止させた。３Ｎ−ＮａＯＨ（２０ｙｄ ）を添加
し、真後に３０チａ２ｏ２（Ｊ’Ｏｉ）を滴下したが、この滴下は、水冷によっ
て温度を４Ｌ０℃に保ちながら行った。−を間欠的に測定し、アルカリ性でない
ときには、３Ｎ−ＮａＯＨ（２０ｄ＋１０ｒｔｔ）′ｔ−２回にわたって添加し
た。Ｈ２Ｏ２の添加後に、反応混合ａｉｌＩＪをさらに２０分間にわたって３ｊ
℃に保った。混和性の改善のためにＥｔＯＨ（１ＡＯｔｄ） ’Ｉｉ−添加した
。反応混合物をＥｔ２０ （ど００−〕中に注入し、Ｈ２Ｏ（３００−ンおよび
固体ＮａＣ１（コ！−）を添加し、よく攪拌し、冷蔵庫に一晩中入れた０反応混
合物はコ相に分かれ、１１２０層を、 ＮａＣ１ｆ飽和させ九Ｈ２０で充分に洗
浄してエマルジョンの量を最少限に減少させた。この１１２０層である溶液をＭ
ｇＳＯ４で乾燥し、済過し、蒸発させた。
黄色油状物の形の生成物（７０，２ｊ）：収率♂７チンが得られた。
５ｉＧＦ上の薄層クロマトグラフィ（ＥｔＯＡｅ 、 ｊ−燐そリツデン散、加
熱〕では、２つのスポットがそれぞれＲｌＯ，３！およびＲｆ Ｏ，ｊ ｊにお
いて約２：３の比率で認められた。既述の製造操作の参照下に、Ｐ、ｆ Ｏ，ｊ
ｒ！のつ質は揶２アルコール化合物であシ、Ｂ、１０．３６の物質はｇ／アルコ
ール化合物でちると同定された。
’Ｈ−ＮＴ１但（ＣＤ０１ｇ） ：δ０．０１３およびｏ、ｉｉ３〔畠。
１ ＃ ３１１ ＃ ３Ｈ＃ −８ｉ（ＣＨ，）２ ） 、０．１１２ 〔ｍ、
タ ′Ｈ１ＳｉＣ（ＣＭ、）ｓ ）、／、３／４’および／、Ｊ／７（ｔｒ 、
ｔｒ 。
乙Ｈ、−Ｐ（ＱＣ）１２Ｃｆｉ３）２）、ｔター２／（ｍ、、２Ｈ。
ＨｏｃＥ２ｃＨ，−ン、３．乙りｂよびｓ、 Ｉ ｙ ｃ ｄｄｑ ｅ ｄｑ
＃ −２ａ ｅＨＯＣ旦２〕、久０７−ＩＡ２２（ｒｎ、ｊＫ、−ＰＯＣ■２Ｃ
Ｈ，および−ＣＨＰＯ−） 。
クロマトグラフィによる２種のアルコール化合物の分離効１を高めるために、粗
製物質をカクドハリー等の方法（「Ｔ＊ｔ＊ Ｌ＠ｔｔｅｒｓ Ｊ （／り７り
〕り！〕に従ってトリチル化した。トリチル化アルコール混合物ｔ−シリカ上の
クロマトグラフィによって、溶離剤としてＣＨ２Ｃｌ、、ならびにＣＨ２Ｃｌ２
とＥｔＯＡｅ ／ ０％、３０チおよび！Ｏチとの混合−を順次使用し、最後に
ＥｔＯＡｅを使用して、各化合物に分離した。 ５ｉＧＦ上のＴＬＣ（ＣＨ２Ｃ
ｌ２中にＥｔＯムｅ１０−を含有する溶離液を使用〕によるトリチル化第１アル
コールの処理の場合のＲｆ線０．６であった。コイおよびクン２つの方法（「Ｃ
ｍｒｂｏｈｙむ１ｔ＠Ｒｅｓ、Ｊ （／ タフ／）／７ ：≠３り〕によって、
ＣＨＣｌ、中にＨＣｌｔ−１％含有する液を用いて０℃においてトリチル基を
迅速に除去する操作を行った。シリカ上のクロマトグラフィ（ＣＭ２Ｃ１２％お
よびＣＨ２Ｃｌ中にＥｔＯＡｃ ｆ ／ ０％含むシ戊、ならびにＥｔＯＡｅを
使用）によって、ジエチル／−１−ブチルジメチル−シリルオキシ−３−ヒドロ
キシゾロビルホスホネー）１．１’）が得られたー
Ｃ，乙−クロロ−５Ｐ（ｊ’−ジエチルホスホノ−３′−１−ブチルジメチルシ
リルオキシ−／′−グゾロルオキシ〕グアニンの製造
禍／記戦の６−クロロータ（３′−ジエチルホスホノ−／′−プロピルオキシメ
チル〕グアニンの製法と同様な方法によって、ジエチル／−１−ブチルジメチル
シリルオキシ−３−クロロメトキシゾロビルホスホネート（０，０２０七〃〕と
６−クロログアニンとのカップリング反応を行ったー
シリカ上のクロマトグラフィ（溶離剤：ＩＯ’、／ＥｔＯＡｅ ： １ＰｒＯＨ
）によって白色固体生成物（，２，ｊ Ｐ ：収率２６％〕が得られた。ＲｌＯ
，７り：融点／２０−７２３℃。
’Ｅ−ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、） ：δ１２０３および０．／１１ｔ（診、諺。
乙Ｈ〕、Ｏ３り／（Ｓ、りＨｊ、ｔ３！および／、３ｒ（ｔｒ ｅ ｔｒ ｅ
６Ｈ）、／、７７−１３２（ｒｎ、２Ｈ）、３、Ａ４ｔ （ｔｒ 、 ２Ｈ）、
３．１１−弘ｊ７（ｍ 、 ｊＨ）、よｊ ４Ｌ （ｂｒｍ、 、２Ｈ） 、ｊ
： ４’ ｊ （ｓ −ｊ Ｈ） 、’７：り≠（ｓ、／Ｈ）。
Ｄ、 ４−クロロータ（３′−ジエチルホスホノ−３′−ヒドロキシ−／′−グ
ゾロルオキシメテル）グアニンの製造
乙−クロロータ（３−ジエチルホスホノ−ｊ’−ｔ−ブチルジメチルシリルオキ
シ−／′−プロピルオキシメチル〕グアニン（／、乙２ ） ： ３．≠ミリモ
ル）の乾燥Ｗ （３０ｄ ）中溶液に７Ｍ−テトラブチルアンモニウムフルオラ
イド＜３．７３ｍ）’ｃ！℃において添加することによって該グアニン化合物中
のｔ−ブチルジメチルシリル基を除去した０反応混合＊を！℃において２２分間
攪拌した後に、これを蒸発乾個し、シリカ上でクロマトグラフィ操作を行った。
溶離剤は／：／ＥｔＯＡｅ ： １Ｐｒｏ１’Ｉ″″Ｃあった。適当な画分を蒸
発でせ、ＥｔＯＡｅから再結晶することによって、２−クロロータ（３′−ジエ
チル−ホスホノ−３′−ヒドロキシ−／′−クロピルオキシメチル〕グアニンが
得られた（Ｏ３りｊ？：収率７／％：白色固体：融点／／１−／／ｇ℃〕。
５ＩＧＦ上Ｏ薄ｉり０−ｆ）グラフィ（／ ０ ’、 ／ ＥｔＯＡｅ ：１Ｐ
ｒＯＨ）においては、ＲｆＯ，２／でらつ穴。
微量分析：式： Ｃ，３１Ｈ２，ＣｌＮ５０５Ｆ計算値：Ｃ−３９，６！チ；五
−よ３ざチ：Ｎ−／７．７タチ測定値：Ｃ−３９，、ｔり％：Ｈ−ｊ：ｊ４’％
：Ｎ−／７．Ｊｊ％’ＰＩ−ｈ”ＭＲ（ＣＤＣＩ、） ：δ／、ｊ／（ｔｒ）、
７．１２−２．／Ｊ−（ｍン、３．乙ｊ−３，１！（ｒｎ）、３．タコー弘≠２
（ｍ）、ｊ、４’Ａ （ｓ ）、ｉ！’り（ｂｒａ ）、７！ｔ（Ｓ）Ｗスペク
トル：λ ：２≠３．３０ｔ
ｍ＆Ｘ
Ｅ、モノエステルへの変換反応および脱ハロゲン反応６−クロロータ（３′−ジ
エチルホスホノ−３′−ヒドロキシ−／′−グゾロルオキシメチル〕グアニン（
Ｏ０乙４Ｌｊ ） ： ／、６弘ミリモル）の加水分解反応を／ Ｎ −ＮａＯ
Ｈ（３１！ ｄ）の存在下に行った。この反応は事例３のり（３′−エチルホス
ホノ−／′−グゾロルオキシメチル〕グアニンの合成のときの反応実施方法と同
様な方法に従って行った。ＤＥＡＥ−セファデックス−クロマトグラフィによっ
て、所望生成’Ｉ’ｍ（ＪｊＷ：収率６％〕が得られた。５ｉＧＦ上のＲｆＯｌ
ｌＩｔと（７：３ＣＨ，ＣＮ ： ０． ／ Ｎ −ＮＨ４Ｃｌ ） 。
’Ｈ−ＮＭＲ（Ｏ２０） ：δ／、ｊ／（ｔｒ）、！、７２−２．２０（ｍ）、
３．７１＝ −ＩＡＩ （ｍ）、！ｒ、ＡＩ （ｓ ）−ＵＶ ス４ り）
ｈ ：λ！！ｌ、、 ：ｐｌ（／ 、 ２！ｔ 、 ２７１ （肩部〕：ＰＪ（
７，２！／、２７０（肩部）：ＰＨ１１，２Ｊ−！。
コ乙ｊ（）［、）。
質量スペクトル： ｍ／ｅ ６３ ！ （ＴＭＳ、 Ｒ導体のＭｌ）。
例／ｌ
既述の方法と同様な方法によって、次表に記載の本発明の化合ｖＩを製造した。
／ ＧＨＨ／ ホスホン酸
２ ＧＨＨ／ モノエチルエステル
３ ＧＨＨ／ ジエチルエステル
ｊ Ｇ ＣＨ２０ＨＨ／ モノエチルエステル乙 Ｇ ＣＨ２０ＨＨ／ ホスホ
ン酸
７ Ｇ ＣＨ，ＩＨ／ モノエチルエステル♂ ＧＨ’ Ｈｊ モノエチルエス
テル１０ ＊ ＨＥ ／ ジエチルエステル／／ 本 ＨＨｊ ジエチルエステ
ル
／２＊＊ＨＨ／ モノエチルエステル
／３＊＊＊ＨＨ／ モノエチルエステル＃ＧＨＯＨ／ モノエチルエステル
＊乙−クロログアニン（乙−クロローコーアミノグリン）＊本ｆ−ｆｏモグアニ
ン
＊＊＊２−ＮＨ２−アデニン（コ、乙−ジアミノプリン）Ｆ、生物学的試験
ヘル（スウィルスおよびＲＮＡ−レトロウィルスに対する抗ウイルス剤としての
本発明の化合物の効力を評価するために、試験管内試験を行った０種々の種類の
ヘルヘスウイルスヲ使用シた。 ＲＮＡ−レトロｔイ、ｈスに対する抗ウィルス
活性の評価の場合には、感染したＢ−リン／母ツラストイド株化細胞七ＨＩ’Ｖ
−基層（５ｕｂｓｔｒａｔｅ ）として使用した。
ヘルペス群ウィルスに対する活性
ここで使用されたヘルペスウィルスは、マツクジラ工種風の／型ヘルイスウィル
ス（チミジンキナーゼ陽性ウィルス） （ｈｓｖ −／ＴＫ” ）であった。こ
の種類の試料ヲ調製し、ＭＡ−１０４Ｌ細胞内でタイターし、そして、使用時ま
で一タＯ℃に冷凍した。さらにまた、ＨＦ ！ （Ｉ（ＳＶ −／ＴＫ” ）、
Ｅ−／９１．を種（ＨＳＶ −ｘ ）、ＮＪＢ ｆｆｉ （ＭＣＲｆｆ ）、Ａ
Ｄ−／乙り３ （ＨＣＭＶ ）も使用した。
ヘルペス群ウィルスの試験のために、連続的に継代接種した猿の腎臓の細胞（Ｍ
Ａ−１０４’）を使用した。
増殖用織地は、最少必須織地（ＭＥＭ ）にＮａＥＣＯ３（０，／チ）およびグ
ンタミシン（！０μｊ）ｔ−追加してなるものであった。
ケイシャによって媒質を除去した後の細胞からなる単層（確ユされた２４１時間
型単層）を含むり６−クエルーミクＩ：Ｉタイターグレートに、種々の濃度（８
度差一１ｔｏｚ、。）の試験化合物を添加し、これを細胞上で／−分間にわたっ
てインキュベーション処理し、真後に、紀胞培地中ｏｚｏｓｓ染量（ＣＣＩＤ、
。） ８Ｅ３２０１０、ｌ−のウィルス試料（０，／ｍ）？加えた・グレートに
７′′ラスナツクラツプで覆い、３７℃にお匹て培養した。この試験では、毒性
検査用の対照試料（ウィルスを含まず、上Ｅの各濃度の化合物と試験織地上官む
］、ウィルス対照試料（化合物を含まず、ウィルスと試験織地を含む）、細胞対
照試料（化合物およびウィルスの代シに試験媒地を含む〕もまた使用した。７２
時間後に細胞を顕微鏡で検査し、細胞毒性およびウィルスの細胞病理学的作用（
ＣＰＥ ）について調べた。さらに、同じグレートにおいて並行してビダラビン
の実験を行った。この対照試験化合物は織地に２０００ ｉｔｔ／ｄのｇ＆度で
添加して、対照化合物含有試料Ｃｐｏｓｉｔｉマ・ｃｏｎｔｒｏｌ ）として使
用した。
活性化合物によるウィルスのＣＰＥの抑制の度合″を観察することによって抗ウ
ィルス活性’ｃＷ価した。抗ウィルス活性はＥＤ５゜で表わした。ここにＥＤ、
、は、５０％ＣＰＥ抑制の達成のために要する化合物の投与ｉｔ−意味する。
さらにまた、ウィルスレート（ＶＲ）を測定した。
ＶＲは、観察された細胞毒性を考慮に入れて定められる抗ウィルス活性の数量的
表現値でちる〔シトウニｙ等、「＾ｐｐ１． Ｍｉｅｒａｂｌｏｌ、 Ｊ （／
り７／ン２２：７り７〕。
一般に、ＶＲＯ，／−０，μは抗ウィルス活性が低いことを意味し、Ｖ Ｒ（７
，ｊ −０，りは中程度の抗ウィルス活性を意味し、ｖＲ／、Ｏは高い抗ウィル
ス活性を意味する。
とＯ試験の結果を第２表および第３表に示す。これらの表から明らかなように、
化合物／および化合物コ〔すなわち？−（３′−ホスホノ−７′−ゾロポキシメ
チル〕グアニノおよびそのモノエテルエステ−／’ ） ＯＨＳＶ−／ＴＫ＋に
対する抗ウィルス活性は、ビ〆ラビンの抗ウィルス活性と同程度に高い。
ＨＳＶ−／ＴＫ＋に対する抗ウイルス活性化合物ｌ ビグニアｔ’ｙ
ＶＢ ／、４Ｌ／、３
ＥＤ５． １０ 岸ｆ／ｍｌ １０ μ？／−別の試験でｔｉ 、ＨＳＶ −／
ＴＫ＋に対する化合ｖＪｌの■はｏ、 ｘ ’１’ ６つた。この化合物は、ね
ずみのＱ■に対し第３表
ＨＳＶ−／ＴＫ＋ＩＣｎｆｂＫ’）イｙス活住ＶＲ）ａ ）／、４ＬＯ，１０，
７
ＥＤ５゜ く／、０μν讐＜ｉ、ｖμＶＩｔ ｌＯμν讐 １０μ／鷹ＭＴＤ
３２０ ＞１０００ １０ ／。
本最高許容投与量（μ？／−］
別の試験では、ＨＳＶ −／ＴＫ＋に対する化合Ｐａ２（ＤＶＲはｏ３ 、 ｏ
、ｔ 、 ｏ、り、 ０．４Ｌ、 ０．３および０．７でちった。
化合物コはねずみのＣＭｖに対して活性を示しくＶＲ−０、ｔ 、 ／、ｔ＜
、 、２−３ ）、また、人のＣＭＶに対しても活性を示した（Ｐ：Ｄ５゜−１
０μ／−）。
人のげに対する化合＠ｊ〔ター（３′−ホスホノ−／′−ヒト；キシーメチルプ
ロポキシメチル〕グアニンモノメチルエステル〕のＥＤ５゜は０．／−３，２μ
Ｐ／−である、これはＥＳＶ −／ＴＫ＋およびＥＳＶ −２に対し穏和な効果
を奏する。
モルモツｌ−’を用いて化合物λの生体内試験を行い、）ＩＳＶ −／ＴＫ＋に
対する抗ウィルス剤としての効果を調べた。試験動物に前記ウィルスを接種し、
／♂時間後に化合＠２をコ種の濃度〔Ｏ９≠チおよび／−コチ（飽和）水溶液〕
で投与し、１日後に接種個所の庖疹の直径を測定した。対照試料として、アシク
ロビルの、５″％溶液またはポリ（ビニルアルコールンの７．４ｔ％溶液を使用
した。また、随伴病変部（５ａｔｅｌｌｉｔ＠１ｅ＊ｉｏｒ、ｓ）も勿論調べた
。
これらの試験の結果、病変部の平均個数として第μ表に示す。第μ表から明らか
なように、化合＆３２は少なくとも飽和溶液の形でＨＶＳ −ＴＫ＋ウィルスに
対して可動でちる。
ＴＫ” ／、７ ／、０ ０．タ ２１随伴病変部 タ ４ｔ 乙 ７７
人のサイトメガロウィルスに対する化合物コおよび化合物ｊの抗ウィルス活性を
調べる九めに、２捏の実験を行ったが、その結果を第５表に示す。
Ｄ５Ｄ
九九有効投与ｆｔ。
（ロ）最膓許容投与貴、すなわち、細胞内に約ｊＯ−のｍ胞！Ｉ性作用を裟わす
ときの投与量であって、この値に、別の対照試験を２６−クエルー！イクロプレ
ートで行って赴胞Ｏ脚向形尺、形態変化、および粒子の状態（ｇｒ＝ｎｔＩｌき
ｒｔｔｙ ）を調べ、その結失から算出された値である。
アガロース層の存在下に生長したＭＢＣ−を細胞を用いて行った試験において、
アシクロビル使用時のデータを集めた。この試験では、ウィルス接種の７日後に
プラーク′ｔ−調べた。第５表に記載の如く、化合物ｌおよびアシクロビルは人
のＣＭＶに対して大体同程度の抑制効果を奏し、細胞毒性も大体同じである。化
合物！はアシクロビルよりも一層強力な抗ＣＭＶ効果を奏し、一方、細胞毒性は
決して大きくない。
ＲＮＡ−レトロウィルスに対する活性
ＲＮＡ−レトロウィルスに対する本発明の化合物の抗ウィルス活性を、既述の試
験管内試験の場合と同様な方法によって調べた。この活性は、当該化合物のリバ
ースートランスクリックーゼ抑制率によって表わすことができる。
リパースートランスクリックーゼ試験のために、モロニーのねずみの白血病ライ
にス（′ＭＫＬｖ〕ま九は鳥の骨髄性白血病ウィルス（ＡＭＶ ） （七イカガ
クまたはベーりンガマンハイムンからのり冨−ンーＶパーストランスクリグター
ゼ（ＢＴ）（ベテスダ、リサーチ、ヲがラドリーズ〕を使用して、ポリヌクレオ
チド−テングレートおよびオリゴグオキシヌクレオテドーグ乏イマーから反応条
件下にＤＮＡ合ｇを行った〔ハウツ、Ｇ、Ｅ、等ｒ Ｊ＊ Ｖｌｒｏｉ Ｊ （
／り７り〕コタ：Ｊ−７７”Ｊ。
λｍＶ −ＲＴ Ｃ）試験に使用された反応混合物（１００戸ｊ）は、トリスー
ハイドロクロシイド（−１０）（！ＯｍＭ ）、ＭｇＣ１２（６餌〕、ＫＣＩ
（ｌｌＬＯｍＭ ）、牛の血清アルブミン＜ｉｏｏμｌｉ’ ／ｌｄ ） 、ジ
チオトレイトー／Ｉ／（／ ｍＭ ） 、ポリアデニル酸（ファーマシア社）（
Ｑ ／ ｍＭ ）、オリゴ（６丁）１２−１８ （７アー？ シフ社ン（０，／
ｍＭ ） 、７’オキシチミジントリホスフエート（ｄＴＴＰ ） （０，４
ｔｍＭ ） 、およびトリチェート化（り３．ＩＣ１／ミリモル〕されたｄＴＴ
Ｐにニーイングランド、ニエクレア社） （０，／ ｍＭ ）からなるものであ
った。次いで、試験化合物を、種々の濃度の希釈液（容量１０μ！〕の形で添加
した。試験は２回行ってその結果全確認した。希釈はＤＭＳＯの１０％水浴液を
用いて行った。
全活性（ｔｏｔａｌ ａｅｔｉｖｌｔｙ ）は次の方法で測定した。乾燥したウ
オットマンー３ｇ−円板フイルター上でスポット形成痩存を行い、液体シンチレ
ーション技術を用いて放射能を測定した。効力検定試験段階では、最初に、 Ｍ
ＭＬＶまたは原からのＲＴ （／ ０ユニツト〕を添加し、反応混合物を３７℃
において培養した。液体試料（１０μ）を所定の時間毎に（時間の関数として〕
除去し、停止用混合物（ＥＤＴＡ （０，２！ ｍＭ ）、イース） −ｔＲＮ
Ａ （英国のＢＤＨ−パイオクミカルズ社）（０，２■／−〕、ピロ燐酸ナトリ
ウム（／ ＯｍＭ ） ） ２０μ！中で反応全停止させ九〇試料＜３０μり全
つオットマンー３ｍ−円板フイルター上にスポットし、氷冷された１０チＴＣＡ
および／チピＩ：ｌ燐酸ナトリウム中で攪拌下に７０分間回分洗浄しｆ’ｃｃ１
０ｘｌ／円板フィルター）。
次（・・１て、氷冷されたｊ １１ ＴＣＡ中で≠分間Ｏ回分洗浄操作を３回行
−１最後にＰｊ％エタノールで７分間洗浄した５円板フィルターｔ−加熱ラング
で転触し、酸不溶性生既物の放射能を液体シンチレーション計数操作によって渉
ｊ足し−０さらに、／ ０ ！ｊ ＤＭＳＯ′ｔ−用いて７’？ンク試験を行っ
た。ホスホノ紐酸、トリナトリクム塩（シグマ、ケミ力〃社）の水浴液′ｔ−ポ
ジ対照試料（ｐｏ＊ｌｔｌマ拳ｅｏｎｔｒ＊ｌ ）として、／ｍＶの最終ｓｉで
使用した。
ＨＩｖに対する抗りイルス活性を次の方法で調べた。
パーレーシノウシ等によって最初に文献に記載されたＬＡＹの単離１伝に類似の
方法によって感染性ａｒｖ ｔ−細胞媒地中で試験した。ただし本例では、アン
チ−ＬＡＹ−ネｆチツドナーからの単核ｊｄ胞Ｏ代シに、′Ｅｆ１実に感染し几
りンΔツラストイドに胞を使用し九ｅＥ胞ｆ＆地から骨られたＨＩＴ ｔ−ＲＰ
ＭＩ −／ Ａ≠０培均試料中に入れ、液体青紫中に貯蔵した。 ＲＰＭＩ −
／６４！０巧地試料は、子牛の全血清２０％およびグリセロール２０ｆＡｋ含有
し、そしテ／ ０００ ＴＣＩＤ −Ｊ” ＯＨｆｆ Ｆｔム４（２）ｔ’６ツ
＊、ａｈ媒ｑから得られ７’！ ／ ０００ ＴＣＩＤ −ｊＯＦＩｒＶノ存在
下に９７ ／４７ラストイド細胞（７０’ ）’を培養し、次いで細胞ｔ−ＲＰ
ＭＩ−／４≠Ｏ培地中で培養した。培地を３日毎に交換して３週間培養し、６日
日からｌ１日百日での期間は３日毎に培地′ｋｙＪ、査してウィルス性のリバー
ストランスクリグターゼの活性１−調べた。この検査では、１ｏｏ−グレースー
スピンコー２！−ロータ超遠心ｉｔ−用いる超遠心操作によってウィルスｔ−濃
縮し、すなわちベレット化し、このペレットを試験してリバーストランスクリプ
ターゼ（、ＲＴ ）を詞べた。
ベレットの試験は、λ量体−テンプレートーポリーｒ人−オリゴｄＴの存在下に
”Ｐ −ｄＴＴＰ ’（ｉ−用いて行った。
／ ０’個のリン−４２ラストイド細胞の培養の前に、感染中和用の試験化合物
をＨｒＶ含有試料（１０ＴＣＩＤ−！０）と−緒にして２２℃において３０分間
培養した。
この試験の結果は次の通シであった。化合物／〔ター（３−ホスホノ−／−ゾロ
ポキシメチ／１／）グアニン〕は濃度ｆｍＭにおいてリバーストランスクリデタ
ーゼの作用ｆ７６％抑制した。化合物２（モノエチルエステルの形の化合物）の
濃度／ｍＭにおける抑制率は１００チでちった。この活性は）ＨＶに対するＥＤ
５゜値に反映し、ＥＤ５ｏ値はそれぞれ１ＩＬｏ−ｓｏμＰ／−および３０μ？
／−であった。
Ｇ１組成物
本発明の化合物を基本成分とする組成物すなわち製剤の具体例を以下に示す。筋
肉内注射または腹腔内注射用の組成物は、下記の！成分のうちの第１番目から第
≠番目までの≠成分を先ず混合し、次いで最下段に記載の成分を添加することに
よって調製した。
本発明の化合物 ／？
ポリ（エチレングリコ−々〕 ！０？
ｆ−ピレングリコー／Ｉ／！ｒＯｆ
ツクィーン−ｒＯ（沈澱防止剤） ／、！Ｐ注射用食塩水 ２００ｄ。
この注射用組成物は透明な溶液でちシ、これを濾過し、滅菌容器に入れて密封し
た。
静脈注射用組成物は、活性化合物ｌ？？注射用食塩水２よ０１ｓｔＫ溶解するこ
とによって調製した。これを濾過後に滅菌容器に入れた。
局所塗布用のクリーム剤を次の製法によって調製した。本発明の活性化合物（１
０ｆ−）′ｔ−鉱物油（２０？）％石油ゼリー（ｌＡｏｙン、メチ／ｌ／／ゾロ
ビル混合パラベンＣ０，３？＞およびノニオン系表面活性ｉ！１ＩＪ（ｊ ？
）と共に攪拌した。この混合物に真後に５０℃にお込て水（／！；０ｄｌ）を添
加して高速攪拌を行い、クリーム状にした。このクリーム状混合物を冷却し、蓋
付チューブに入れた。
経口投与用組成物を次の方法によって調製した０本発明の化合物（／（７５Ｌ）
、２クトースＣ１００’ｆ−）および澱粉（／Ｐ）’ｅメタノール中でステアリ
ン酸マグネシウム＜０．／ｆ）と混合し、粒状物を得た。
次いで攪拌下にゆるやかに加熱してメタノールを除去し友、得られた混合物の一
部を経口投与用粒状粉剤として保管し、混合物の残部は手動式製錠機に入れ、錠
剤（１錠２！Ｏη）を調製した。
本明細書の実施例および処方例は本発明の例示のために記載されたものにすぎず
、本発明の範囲は決してこれらの実施例および処方例のみに限定されるものでは
なく、すなわち本発明の範囲社、請求の範囲に基いて定められるべきものである
ことが理解されるべきである。
国際調査報告
ｌＮｍ＋ａ＋、＊＋ａ＋。工＋＊＋、ｓｓエ ？Ｃ″：／′ＪＳε７１０３４４
Ｇ国際調査報告
ＬＩＳ ８７０３４４６
ＳＡ ２０４フ３ [The residue was diluted with water], treated with a few drops of /M-RCI, evaporated again, evaporated in EtOH, and then discarded. A grayish white solid form O1j was obtained (/61 da; yield 2356). The Rf in thin layer chromatography on 5iGF (7:/:, 2-1PrOH: old, OH: )120) is 0. / Zadechita. α Spectrum: λ. ,! : pi-1/, 2.3-Otsu, 27 IC shoulder]; PH7, 262, 272 CNM part): P) I//, 2! ! , 26g (shoulder).'H-NMR (D20): δ: /, , 3'!-/, I! (rn, 41 H), 3, 5-3.ri5 (m, jH), i3I (d), Z9j (brs e/H). Mass spectrum: So-Otori 3 (U+ of TMS5 derivative). Example! Ri(3'-phosphono-/'-hydroxymethyl-/'-pro2-oxymethyl) guanine Production of cyclic ester of
Teri(3'-phosphono-/'-hydroxymethyl-/'-propyloxy)
A mixture of anine (see example: o, oiit: 0.033 mmol) and dry pyridine (6- :o, o34t Milimo/1/)! I got it right. After a complete solution has formed, a solution of diimide (0,0/27', 0.0 J'l'' mmol) in hot pyridine (4 Lsd) is added all at once; The reaction mixture or reaction hole was heated under mild reflux for 2 hours.The reaction mixture was then evaporated to dryness.
passed. Solution F was evaporated to dryness and dissolved in MeOH. Thin layer chromatography on 5IGF
A single spot in Rf is observed at Rf -0,70 when using 1PrOH:NH4OH:HzO (7:/:2) and Cm3CN:0. When 0/N-NH4Cl (7:3) was used, it was observed at Rf-0,4 t/, and when MOH was used at yc, it was observed at Rf-0,71. α spectrum: λ-, x', pH 7, 2j/, 27j<shoulder n. Mass spectrum: m/* j 3 / (M+ of TMS3 derivative). For example r-promoter C31-ethylphosphono-II-frobyloxymethyl)guani
Production of (3'-ethylphosphono-/'-guzololoxymethymer)
Mixing of guanine (5i'7w9:0, 2♂6 mmol) with H2O (jm) by the method of @kai, Robins, M, J, et al. ("J, Mad, Chew, J (1 5;'r According to
The solution was treated with stirring. This treatment was carried out to such an extent that the color of bromine remained (J-1-). After stirring for 30 minutes at room temperature, desorption was performed by crystals of N*rlSO5.
The colored reaction mixture was filtered and washed with H2O and EtOH. white solid raw
A product (tatada; yield r7-) was obtained. The product was confirmed to be homogeneous by thin layer chromatography using 5ICF (Rf-0,33: C1i, CN: 0.IN-NH4C1(7:j)). 'I(-NMR(DMSO-d4): δt/ri(treJH)-/, 3-4 ri(m, IIH) e j, J″J (tr v-211!) -j, octopus(dq p, 2H) *J:jJ (5-2H) -1r, A♂(bra e2Hn. α Spectrum: λmax(S: PH/, j, 4; 0 (/1., .4 l-00): pH 7,26ocil,, 1ILoo n:p)I//, =2 A ta(/shiot00).)IPLC test of this compound:Paidac-TP-!/Do!≠-column(lIL, OtsuX 2 !Om ), /!0-100-nonlinear gradient between sorting [where 0-1 00% indicates the proportion of B in A, so A is 0.0 / 2 j N -Et , N-HC0□ HC pH 3,0)), BFi!%, α aqueous solution: This solvent is
It is from Munaza]. This HPLC test confirmed the presence of the starting material J''- (Linear gradient of water> According to the description, starting materials are not included.
A target compound was obtained. Example 1 Production of θ (3'-ethylphosphono-3'-hydroxy-7'-zolopioxymethyl) guanine /, EtOH 2, CIH2-C Deposit 0 A, Production of diethyl/-1-tutyldimethylsilyloxyallylphosphonate CA1.I? ;0.3!r!Mob) co-dried solution in DMF (/70d) was mixed with imidazole (Otsu 0.1.1 h?;o, rr♂ mol) and then t-tutyldimethylchlorosilane (63 , and 72:0.1IL 2jmol].This treatment was carried out by the method of Koh'J-1E, J. et al. !:Otsu/90]
It was. The reaction mixture was stirred for 2j hours and mixed with Et,0 (7!Od). This solution consisting of co-phase was washed with u2ocJx2!0-). The organic phase was dried with MgSO4, gravity filtered and evaporated to dryness. Quantitative yield of colorless oily product I10? Obtained. Thin layer chromatography on 5iGF (10% EtOAc solution in α5”2, visible
2% of phosphomolybdic acid was added to increase the temperature, and spots were observed at Rf(1) and 1lt4L when heated, and a trace amount of impurity was observed at RfO561. 'H-k'MR (CDCI,): δ0.IOkyoUO, / j (s, @.!Fl), 0.27 (-0riH), /, JJ (tr, 7H). 1A20 (dq , ≠H), ≠j7 (aa, /n), 1O-j: 4j (me-2 H), 117-Otsu, J 4' (m -/H) *B, Jiechi/1//-t - Preparation of tutyldimethylsilyloxy-3-hydroxyzorobyl phosphate Die fk/-t-butyldimethylsilyloxyallylphosphonate) (7AP: 0.2 4t 7 mol) was azeotroped with toluene three times, and dried THF ( ≠00−]. A 7M solution of TI (Otn!) in TI (F) was added dropwise over ! minutes at 0°C, and the reaction mixture was then stirred for 1 hour. By ice cooling
The above hydroration reaction was stopped by adding H2O (J'Oi) while maintaining the temperature at 20°C. 3N-NaOH (20yd) was added, immediately followed by 30 ) was dripped, but this dripping was interrupted by water cooling.
The temperature was maintained at 4L0°C. - is measured intermittently, and if it is not alkaline, 3N-NaOH (20d+10rtt)'t- is added twice.
Ta. After the addition of H2O2, the reaction mixture ailIJ was kept at 3j C for an additional 20 minutes. EtOH(1AOtd)'Ii- was added to improve miscibility. Pour the reaction mixture into Et20 (00-), add H2O (300-) and solid NaC1 (000-), stir well and place the reaction mixture in the refrigerator overnight.
The compound was separated into co-phases, and the 1120 layer was saturated with 1f NaCl and thoroughly washed with 9H20.
The amount of emulsion was reduced to a minimum by purification. The 1120 layer solution was dried with MgSO4, filtered and evaporated. The product (70,2j) in the form of a yellow oil: Yield ♂7tin was obtained. Thin layer chromatography on 5iGF (EtOAe,
heat], the two spots are RlO,3! and Rf O,j to
It was observed at a ratio of approximately 2:3. With reference to the manufacturing operations already described, P, f O, j r! The substance is a 2-alcohol compound, B, the substance of 10.36 is g/alco
It was identified as a single compound. 'H-NT1 (CD01g): δ0.013 and o, ii3 [Hata. 1 #311 #3H# -8i(CH,)2) , 0.112 [m, ta'H1SiC(CM,)s), /, 3/4' and /, J/7(tr, tr. , -P(QC)12Cfi3)2), tter2/(m,,2H.HocE2cH, -n, 3.Otori b and s, I y c ddq e dq # -2a eHOCdan2], Ku07 -IA22 (rn, jK, -POC2CH, and -CHPO-). In order to increase the separation efficiency of two alcohol compounds by chromatography,
The prepared material was tritylated according to the method of Kakudohari et al. Each compound was separated using a mixture of CH2Cl2 and EtOAe/0%, 30% and !0% sequentially, and finally EtOAe. tritylated primary alkyl by using an eluent containing
The Rf line for call processing was 0.6. Trityl groups were generated at 0°C using CHCl, a solution containing 1% HClt, by two methods (C. A quick removal operation was performed. Chromatography on silica (CM2C12% and
diethyl/-1-butyldimethyl-silyloxy-3-hydro
xyzolovirphosphono-3'-1-butyldimethylsiloxane) was obtained.
Production of lyloxy-/'-guzoloroxy]guanine 6-chlorota(3'-diethylphosphono-/'-propyloxymethane
A coupling reaction between diethyl/-1-butyldimethyl silyloxy-3-chloromethoxyzorobylphosphonate (0,0207) and 6-chloroguanine was carried out using a method similar to that used for producing chloro]guanine.
Chromatography on silica (eluent: IO', /EtOAe: 1PrOH) gave a white solid product (26% yield). 'E-NMR (CDCI, ): δ1203 and 0./11t (diagnosis, proverb. OtsuH), O3ri/(S,riHj, t3! and/, 3r (tr e tr e 6H), /, 77 -132 (rn, 2H), 3, A4t (tr, 2H), 3.11-Hiroj7 (m, jH), Yoj 4L (brm, , 2H), j: 4' j (s -j H) , '7: Ri≠(s, /H).D, Production of 4-chlorota(3'-diethylphosphono-3'-hydroxy-/'-guololoxymether)guanine No-j'-t-butyldimethylsilyloxy
C-/'-propyloxymethyl]guanine (/, Otsu2): 3. ≠ Milimo
A solution of 7M-tetrabutylammonium fluoride in dry W (30d) of
Ido<3.73m)’c! 0 reaction mixture* in which the t-butyldimethylsilyl group in the guanine compound was removed by adding at ℃! After stirring for 22 minutes at °C, it was evaporated to dryness and chromatographed on silica. The eluent was /:/EtOAe: 1Pro1'I''''C. Steam the appropriate fractions.
2-chlororota (3'-dietate) was obtained by decoupling and recrystallization from EtOAe.
Tyl-phosphono-3'-hydroxy-/'-chloropyloxymethyl]guanine was obtained (O3?: yield 7/%, white solid: melting point //1-//g°C).5 on IGF. In the O-thin 0-f) graph (/0', /EtOAe:1P rOH), RfO,2/Deratsu-hole. Trace analysis: Formula: C,31H2,ClN505F Calculated value: C-39,6! 5 - 3 Zachi: N-/7.7 Tachi Measured value: C-39,, Tri%: H-j: j4'%: N-/7. Jj%'PI-h''MR(CDCI,): δ/, j/(tr), 7.12-2./J-(mn, 3.oj-3,1!(rn), 3. Hiroshi Tako≠2 (m), j, 4'A (s), i!'ri (bra), 7!t (S) W spec
Tor: λ: 2≠3.30t m&X E, conversion reaction to monoester and dehalogenation reaction 6-chlororota (3'-di
The hydrolysis reaction of ethylphosphono-3'-hydroxy-/'-gzoloroxymethyl]guanine (004Lj): /, 6 mmol) was carried out in the presence of /N-NaOH (31!d). This reaction is shown in Example 3 (3'-ethyl phosphorus).
The reaction method is the same as that used in the synthesis of hono-/'-guzololoxymethyl]guanine.
I followed various methods. DEAE-Sephadex-chromatography
The desired product 'I'm (JjW: 6% yield) was obtained with RfOllIt on 5iGF (7:3CH, CN: 0./N-NH4Cl). 'H-NMR (O20): δ/, j/(tr),! , 72-2.20 (m), 3.71= -IAI (m), ! r, AI (s) - UV S4) h: λ! ! l,, :pl(/, 2!t, 271 (shoulder):PJ(7,2!/, 270(shoulder):PH11,2J-!.kootj()[,).Mass spectrum: m/e 63! (TMS, Ml of R conductor).Example/l By a method similar to that described above, the compounds vI of the present invention described in the following table were prepared: / GHH/ Phosphonic acid 2 GHH/ Mono Ethyl ester 3 GHH/ Diethyl ester j G CH20HH/ Monoethyl ester O G CH20HH/ Phospho
phosphoric acid 7 G CH, IH/ Monoethyl ester ♂ GH’ Hj Monoethyl ester
Tel 10 * HE / Diethyl Ester // Book HHj Diethyl Ester
Le /2**HH/ Monoethyl ester /3***HH/ Monoethyl ester #GHOH/ Monoethyl ester *Otsu-Chloroguanine (Otsu-Chloro-Co-Aminogrin) *This f-fo Moguani
Biological Tests To evaluate the efficacy of the compounds of the invention as antiviral agents against viral and RNA-retroviruses, In vitro tests were carried out using different types of Herpesviruses.In the case of evaluation of antiviral activity against RNA-retroviruses, infected B-phosphorus/mother thuloid cell lines were used. HI'V - used as a substrate.Activity against herpes group viruses The herpes virus used here was a pine whale virus type/type herpes virus.
(thymidine kinase positive virus) (hsv-/TK”).
Prepare the type of sample, titrate in MA-104L cells, and wait until use.
It was then frozen at 0°C. Yet again, HF! (I(SV-/TK)), E-/91. (HSV-x), NJBffi (MCRff), AD-/Otori 3 (HCMV) were also used. For testing of herpes group viruses. Serially passaged monkey kidney cells (MA-104') were used in the experiment.The growth fabric was a minimally essential fabric (MEM) containing NaECO3 (0,/T) and glycan.
It was made by adding Tamicin (!0 μj) t-. A monolayer of cells (241-hour type monolayer confirmed) after removal of the medium by Keisha was treated with 6-Querumic I:I titer at various concentrations (8 degrees difference - 1 toz, .). Add the test compound and allow it to run on the cells for /- minutes.
Immediately after incubation, a virus sample (0,/m) of ozoss staining amount (CCID, .) 8E32010, l-? The added grate was covered with a 7'' lath nutclap and incubated at 37°C. This test included a control sample for toxicity testing (containing no virus and containing the compound at each concentration listed above and the test fabric), a virus control sample (containing no compound and containing the virus and the test fabric), and a cell sample.
Control samples (containing test medium in place of compound and virus) were also used. Cells were examined microscopically after 72 hours for cytotoxicity and viral cytopathological effects (CPE). In addition, Vidarabine experiments were conducted in parallel on the same grate.The control test compound was added to the fabric at 2000 itt/d and used as a control compound-containing sample.
used. Anti-virus studies were conducted by observing the degree of inhibition of viral CPE by active compounds.
The virus activity was determined by cW titer. Antiviral activity was expressed as ED5°. Here ED, , means the dose of compound required to achieve 50% CPE inhibition. Furthermore, the viral rate (VR) was measured. The VR is a quantitative expression of antiviral activity determined taking into account the observed cytotoxicity [Sitouniy et al. In general, VRO,/-0,μ means low antiviral activity, VR(7,j-0,ri means moderate antiviral activity, and vR/,O means high antiviral activity.
means activity. The results of the and O tests are shown in Tables 2 and 3. As is clear from these tables, compounds/and compound co[i.e. -(3'-phosphono-7'-zolopoxime
Chiru]guanino and its monoether ester/' ) OHSV-/TK+
The antiviral activity against this virus is as high as that of birabin. Antiviral active compound against HSV-/TK+ Bignia t’y VB /, 4L/, 3 ED5.10 Kishi f/ml 10 μ? /- In another study, the compound vJl against ti, HSV-/TK+ was o, x'1'6. This compound is
Table 3 for Zumi's Q ■ 1000 10/. The highest tolerated dose (μ?/-) In another study, compound Pa2 (DVR was o3, o, t, o, li, 0.4L, 0.3 and 0.7) against HSV-/TK+ Compound K showed activity against mouse CMv (VR-0, t, /, t<, , 2-3), and also showed activity against human CMV (P:D5°- 10μ/-).Compound @j[ter(3'-phosphono-/'-human;
The ED5° of lopoxymethyl [guanine monomethyl ester] is 0. /-3,2μ P/-, which has a mild effect on ESV-/TK+ and ESV-2. Compound λ was tested in vivo using guinea pigs l-', and
We investigated its effectiveness as an antiviral agent. Test animals were inoculated with the above virus, and after /♂ hours, Compound @2 was administered at the same concentration [O9≠T and /- Flathead (saturated) aqueous solution]. One day later, the diameter of the herpes at the inoculated site was measured. did. As a control sample, Ashiku
We used a 5''% solution of Lobil or a 7.4t% solution of poly(vinylalcoholone).In addition, we also examined the accompanying lesions (5atellit@1e*ior, s).As a result of these tests, the lesions Table 1 shows the average number of . 21 Concomitant Lesions Ta 4t Otsu 77 To investigate the antiviral activity of Compound K and Compound J against human cytomegalovirus, we conducted two experiments, and the results are shown in Table 5. Effective dose ft. (b) The most tolerated dose, i.e., the dose at which about 100 m cells in the cell is suppressed, and this value was used in another control test. Queluu! Ikropre
This value was calculated from the results obtained by examining the grain size, morphological changes, and state of the particles (gr=ntIlkirtty). Data were collected using acyclovir in a study using MBC- cells grown in the presence of an agarose layer. In this test, plaques were examined 7 days after virus inoculation. As shown in Table 5, Compound 1 and acyclovir have approximately the same inhibitory effect on human CMV and have approximately the same cytotoxicity. transformation
Compound! It has a stronger anti-CMV effect than acyclovir, while its cytotoxicity is not as great. Activity against RNA-retroviruses The antiviral activity of the compounds of the present invention against RNA-retroviruses was determined using the previously described assay.
The investigation was conducted using the same method as in vitro testing. This activity is determined by the compound's
- It can be expressed by the rate of inhibition of S-trans clickase. Moloney's murine leukemia virus ('MKLv) and avian myeloid leukemia virus (AMV) were used for the lipase transcritase test.
Norifu-n-V Perth Transcriptor from Ku or Behringamannheimn
Polynucleo
Reaction conditions from titanate and oligonucleotide oligomers
The reaction mixture used in the test (100 (10) (!OmM), MgC12 (6 feeds), KCI (11LOmM), bovine serum albumin <iooμli'/ld),
Thiothreitol/I/(/mM), polyadenylic acid (Pharmacia) (Q/mM), Oligo (6-choice) 12-18 (7A? Schiff Co., Ltd. (0,/mM), 7'oxythymidine triphosph ate (dTTP) (0.4 tmM), and tricated (3.IC1/mmol) dTTP (Nie England, Nieclea) (0./mM).
It was. The test compounds were then added in the form of dilutions (volume 10 μ!) of various concentrations. The test was carried out twice and the results were fully confirmed. Dilutions were carried out using a 10% water bath in DMSO. The activity (total aetivlty) was measured by the following method.
Ottoman - 3g - Perform spot formation on the disc filter and liquid scintillation.
Radioactivity was measured using a fusion technique. In the potency assay test phase, M MLV or original RT (/0 units) was first added and the reaction mixture was incubated at 37°C. ] Remove and stop mixture (EDTA (0,2!mM), Ease) -tRNA (BDH-Piochemicals, UK) (0,2/-), sodium pyrophosphate
Um(/OmM) ) 20μ! The reaction was completely stopped in a vacuum chamber, and 90 samples <30 µm were spotted on an ottoman-3 m disk filter and washed in batches for 70 minutes with stirring in ice-cold 10 TCA and /Ti I:l sodium phosphate. f'cc1 0xl/disc filter). Next (...1) Wash the filter 3 times for ≠ minutes in ice-cooled TCA - 1 Finally, wash the 5-disk filter with Pj% ethanol for 7 minutes - Rotate the filter with a heating rung. In addition, the radioactivity of acid-insoluble living matter was determined by liquid scintillation counting, and a 7'?ink test was performed using DMSO't-. Chemiriki Co., Ltd.'s water bath liquid 'T-PO'
It was used as a control sample (po*ltl eontr*l) with a final si of /mV. The antiviral activity against HIV was examined by the following method. The isolation of LAY was tested in an infectious arv t-cell medium by a method analogous to the isolation story of LAY first described in the literature by Parley Shinox et al. However, in this example,
A mononuclear jd follicle from a Chi-LAY-Nef chid donor was infected with 'Ef1 fruit, and a HIT t-RP MI-/A was recovered from the ground using the follicle on a cylindrical turastoid. ≠0 medium samples and stored in liquid blue-violet. The RPMI-/64!0 sample contained 20% total calf serum and 20fAk of glycerol and was obtained from 4(2)t'6*, ah media. 97/47 rustoid cells (70')' were cultured in the presence of 7'!/000 TCID-jOFIrV, and then the cells were cultured in t-RP MI-/4≠O medium. The medium was changed every 3 days. The cells were cultured for 3 weeks, and the medium was checked every 3 days from the 6th day to the 11th day to check for viral reversals.
Activity 1 of transcrictase was investigated. In this test, 1oo-Grace-Spinco2! - Rotor ultracentrifugation
It is compacted, or pelletized, and the pellet is tested for reverse transcription.
Tase (, RT) was spoken. Berrett's test was performed using "P-dTTP' (i-) in the presence of λ-mer-template-polymer-oligodT prior to culturing of 0' phosphorus-42 lastoid cells. Test compounds for infection neutralization were incubated with HrV-containing samples (10TCID-!0) for 30 minutes at 22°C. The results of this test were as follows: Phosphono-/-Zoro
poxymethy/1/)guanine] is a reverse transcritator at a concentration of fmM.
The effect of enzyme f was suppressed by 76%. The inhibition rate of Compound 2 (compound in the form of monoethyl ester) at concentration/mM was less than 100%. This activity is reflected in the ED5° values for) HV, with ED5o values of 1ILo-soμP/- and 30μ?, respectively. It was /-. G1 Composition Specific examples of compositions or preparations containing the compound of the present invention as a basic component are shown below. logic
Compositions for intramuscular or intraperitoneal injection are listed below! The first to the ≠th ≠ ingredients are mixed first, and then the ingredients listed in the bottom row are added.
Therefore, it was prepared. Compound of the present invention /? Poly(ethylene glycol) !0?f-pyrene glycol/I/!rOf Tsuqueen-rO (precipitating agent) /, !P saline solution for injection 200d.This composition for injection is a clear solution. Filter, place in a sterile container and seal.
Ta. Intravenous compositions contain the active compound l? ? Dissolve saline solution for injection 2-01stK.
It was prepared by After filtration, this was placed in a sterilized container. A cream for topical application was prepared by the following method. The active compound of the invention (10f-)'t-mineral oil (20?)% petroleum jelly (lAoyin, methi/l//zolo
Bill mixed paraben C0.3? > and nonionic surface activity i! Stirred with 1 IJ (j?). Immediately after this mixture was heated to 50℃ and water (/!; 0 dl) was added.
The mixture was added to the mixture and stirred at high speed to form a cream. This creamy mixture was cooled and placed in a tube with a lid. A composition for oral administration was prepared by the following method: a compound of the present invention (/(75L), 2ctose C100'f-) and starch (/P)'e stearyl in methanol.
Magnesium phosphate<0. /f) to obtain granules. The methanol is then removed by gentle heating with stirring, and a portion of the resulting mixture is stored as a granular powder for oral administration, and the remainder of the mixture is placed in a manual tablet machine to form tablets.
(1 tablet 2!Oeta) was prepared. The Examples and Prescription Examples herein are merely described to illustrate the present invention, and the scope of the present invention is by no means limited to these Examples and Prescription Examples; that is, the present invention It should be understood that the scope of the invention shall be determined based on the scope of the claims. International search report lNm+a+, *+a+. Engineering + * +, ss e? C'':/'JSε710344 G International Search Report LIS 8703446 SA 204 F3