JPH01259260A - アスコルビン酸の検出用器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、体液、殊に尿又は飲食品中のアスコルビン酸
を検出するための検出用器具に関する。

（従来の技術） アスコルビン酸はヒタミンＣとして知られ、医薬品を始
め飲食品に多く含まれている。アスコルビン酸を多く摂
取すると、血液中の濃度が」二昇し尿中に排泄されるよ
うになる。臨床検査において、アスコルビン酸は尿糖や
潜血の検査て負誤差を与えることか知られているため、
これらの正確な検査を行なうためには被検尿中のアスコ
ルビン酸の検出試験が必要となる。

更に飲食品の品質の維持をヂエツクするためにもアスコ
ルビン酸の含有量を調べることも有用とされている。

このようにアスコルビンの検出試験の用途は多いが、迅
速でかつ簡便に試験できることが必要である。従来、こ
のような目的でアスコルビン酸を検出するのに、特定の
指示薬を用い、それがアスコルビン酸によって還元され
て色調が変化するのを利用した方法がある。このような
指示薬として最も良く知られているものに、２．６−シ
クロロフエノールイントフＪ、ノールがある。

このような指示薬を用いて）′スコルヒン酸を検出する
場合、これを吸着させたスティックの形態か使用するの
に便利である。２，６−シクロロフエノールイノトフエ
ノールを用いる場合、アスコルビン酸と反応して濃青色
が退色するためこれを単独で担体に吸着させるよりも、
メチルレットやニュートラルレットのようなアスコルビ
ン酸と反応しない色素も同時に吸着させて色調のハノク
グラウンドを補正する方が観察しやずいという利点があ
る。

（発明が解決しようとする課題） しかしながら、このような２，６−ンクロロフエノール
インドフエノールを指示薬とする従来の方法では呈色が
あまり鮮明でなく、判別しにくい場合があり、またアス
コルビン酸のｉ度が２０１１ｇ／ｄｆｆ以下でないと正
しく検出てきない。アスコルビン酸は健康人でも美容や
健康のため最近は多量に摂取する傾向にあり、尿中のア
スコルビン酸の濃度が２５１１ｇ／ｄｉ２を越え桑と尿
糖や潜血の検査に影響を与えることから、体液、殊に尿
中のアスコルビン酸の検出には高濃度域まで正確に検出
できることが必要である。更に飲食品においてもアスコ
ルビン酸を高濃度で含有するものが多いことから、同様
なことが言える。

本発明の目的は、このような従来のアスコルビン酸の検
出法を改良し、広範囲の濃度のアスコルビン酸を容易に
検出することができるアスコルビン酸の検出用器具を提
供することにある。

（課題を解決するための手段） 本発明者らは、上述のような課題を解決し、その目的を
達成するために鋭意研究を進めた結果、２．６−シクロ
ロフエノールインドフエノールにアメ−１ルピン酸オキ
ングーセを加えることにより広範囲の濃度のアスコルビ
ン酸の検出が可能であることを見い出し、更に研究を進
めた結果、担体にこれらと共にアスコルビン酸と反応し
ない色素も同時に吸着さＵ″ることを特徴とするアスコ
ルビン酸の検出用器具を完成するに至った。

即ち、本発明は２，６−シクロロフエノールインドフエ
ノール、アスコルビン酸オキシダーゼおよびアスコルビ
ン酸と反応しない色素を吸液性担体に含浸させることに
より、簡易に広い範囲のアスコルビン酸を検出すること
かできるアスコルビン酸の検出用器具を提供するしので
ある。

本発明では、指示薬の２．６−ノクロロフエノールイン
トフエノールにアスコルビン酸オキシダーゼを共存させ
ることにより、アスコルビン酸に対しては指示薬の退色
による色調の変化に続き粒千秋での凝集数の変化へとそ
の反応が広範囲の濃度のアスコルビン酸に適応させるこ
とができる。

また本発明では色調のバックグラウンドの補正にアスコ
ルビン酸と反応しない色素を用いることにより、肉眼で
の色の識別が容易になり正確な判定を行うことができる
。

このように本発明のアスコルビン酸検出用器具は、広範
囲の濃度のアスコルビン酸を正確に検出することができ
るものである。

本発明のアスコルビン酸の検出用器具に用いる２、６−
シクロロフ千ノールインドフェノールは通常アルカリ金
属塩の形態をとる。このとき、アルカリ金属塩としては
ナトリウＪ１、カリウムが好ましい。またアスコルビン
酸と反応しない色素は、本発明の目的にかなうものであ
れば特に限定されないが、例としてアクリジン及びその
塩、アクリジンレッド、アクリジンオレンジ、アクリジ
ンイエロー、２．７−ジアミツアクリジン、３．６−ジ
アミツアクリジンのような蛍光性の色素や、メチルレッ
ド、メチルレッド、ニュートラルレッド、オレンジ■な
どが挙げられる。

本発明のアスコルビン酸の検出用器具は、迅速かつ簡便
に試験できるために、スティックの形態にするのが好ま
しい。このにうなスティックを作製するには、まず２．
６−シクロロフエノールインドフエノールとアスコルビ
ン酸オキシダーゼ及びアスコルビン酸と反応しない色素
を含む緩衝溶液を担体に含浸し、乾燥させて試験紙を作
る。このときの緩衝溶液としては特に限定はないが、リ
ン酸緩衝液が好ましく、ｐＨは通常６．０〜７，５、と
りわけ６．５〜７２が好ましい。また、この緩衝溶液に
は、アスコルビン酸オキシダーゼを賦活化させるために
２価の銅イオンや濃厚化の作用がある保護剤などを同時
に加えることもできる。この上うな２価の銅イオンを有
する添加物の例としては、酢酸銅、硫酸銅、塩化銅（ｎ
）などがあるが、なかでら酢酸銅か好ましい。またこの
ような保護剤の例としては、アルギン酸プロピレングリ
コール、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、カルボキシ
メチルセルロースなどがあるが、なかでもアルギン酸プ
［ｌピレンクリ−Ｊ−ルか好ましい。

このような試薬を吸収さ且る担体の体として（Ｊ、濾紙
、カラス繊維紙、ポリエステルフリースなどが挙げられ
る。次に、これらの試薬を含浸した試験紙をプラスチノ
クン−１−ｒｉとの支１−１体に貼合し、スティックの
形態とする。

本発明のアスコルビン酸の検出用器具を作製するに際し
て、試験紙に含浸させる試薬の濃度は一概に定めること
ができないか、２．６−シクロロフエノールインドフエ
ノールは通常ＩＯ〜１００１１９／ｄＱ、好ましく　Ｌ
Ｊ、　３０〜６０Ｈ／ｄＱの濃度て、またアスコルヒン
酸オキノターセは通常２〜１００に単位／ｄρ、好まし
くは５〜４０に単位／ｄ１２の活性値で、更にアスコル
ビン酸と反応しない色素は通ｔ　Ｉ　−５０ｍｇ／　ｄ
（１、好ましくは２−２０ｍｇ／ｄρの濃度でそれぞれ
緩衝溶液に含有させ、これを吸液性担体に含浸させる。

ここでアスコルビン酸オギノグーセの溶液中の活性値を
変化さ■ることによってアスコルビン酸の検出範囲を変
化させることができる。即ち、アスコルヒン酸オキノタ
ーゼの活性値を高くすることによって、より高値のアス
コルビン酸か検出できろが、低値のカットオフ値（」高
くなる。例えばアスコルヒン酸オギノターセ力月ＯＫ単
位／ｄＱ、のとき（」０〜ｌ　ＯＯｙｔｔ’ｉ／ｄＱの
アスコルビン酸が検出てき、４０　ＫＭｉ位／Ｑになれ
ば、２０〜３００靜／ｄρのアスコルビン酸が検出てき
る。

このようにして作製したアスコルビン酸の検出用器具は
、体液、殊に尿又は飲食品中に浸し、その呈色及び粒子
の凝集状態を既知のアスコルビン酸濃度に対する呈色と
比較することにより、アスコルビン酸を検出しその濃度
を求めることができる。

（実施例） 次に本発明の実施例を示すが、これら（ｊ本発明を何隻
限定するものではない。

実施例Ｉ Ｉ　試薬の調製 ２．６−ンクロロフエノールインドフエノールナトリウ
ム５０ｍｇ、アスコルヒン酸オギノグーゼ＝７− １０に単位、アクリジンレッド７屑９、酢酸銅２０即、
アルギン酸プロピレングリコール１０ｇ、リン酸−カリ
ウム１４ｇ、リン酸二すトリウム（無水）４．０９Ｊを
精製水１００Ｍｇに溶解する。

２　スティックの作製 試薬を濾紙（東洋濾紙５１４Ａ）に含浸させ、５０〜５
５℃で１５時間乾燥後、その小片をプラスチツクシート
に貼合してスティックを作製した。

実施例２ 実施例１の試薬の調製のうち、アスコルビン酸オギノグ
ーゼを４０に単位に変える以外は同様にしてスティック
を作製した。

実施例３ 実施例１の試薬の調製のうち、アクリンンレ・ソト７ｙ
ｎｇを３．６−ンアミノアクリジン３π９に変える以外
は同様にしてスティックを作製した。

尺靴外上 実施例１〜３て作製したスティックを、次のような既知
の濃度のアスコルビン酸溶液に浸すと、３０秒後に色調
と粒子凝集状態が観察され、アス＝１ルヒン酸の検出が
できることがわかった。

（発明の効果） 本発明のアスコルビン酸の検出用器具は、従来のタイプ
のものに比へ広範囲の濃度のアスコルビン酸を迅速かつ
簡便に検出できることから、体液、殊に尿の臨床検査の
分野に大きく寄与できると共に、高麹度のアスコルビン
酸を含有する飲食品の検出試験にも有用なものである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、２，６−シクロロフェノールインドフェノール、ア
   スコルビン酸オギンダーゼおよびアスコルビン酸と反応
   しない色素を吸液性担体に含浸させて成るアスコルビン
   酸の検出用器具。