JPH01224398A - Novel peptide - Google Patents
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Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の背景〕
この発明は、新規ペプチドに関する。さらに具体的には
、本発明は、逆転写酵素阻害活性を有する新規ペプチド
に関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION BACKGROUND OF THE INVENTION This invention relates to novel peptides. More specifically, the invention relates to novel peptides with reverse transcriptase inhibitory activity.
生理活性を有するペプチドがいろいろ見出され、また合
成されている。Various physiologically active peptides have been discovered and synthesized.
生理活性の多様性ならびにペプチドの多様性からいって
、生理活性ペプチドに対しては不断の希求があるといえ
る。Considering the diversity of physiological activities and the diversity of peptides, it can be said that there is a constant desire for bioactive peptides.
要旨 本発明は上記の希求に応えるものである。 Abstract The present invention meets the above needs.
すなわち、本発明による新規ペプチドは、下記の一般式
（Ｉ）で示される逆転写酵素阻害活性を有するもの、で
ある。That is, the novel peptide according to the present invention has reverse transcriptase inhibitory activity represented by the following general formula (I).
Ｒ１−Ｃｙｓ −Ａ−Ｂ−Ｃｙｓ −Ｃ−Ｄ−Ｅ −Ｇ
ｌｙ−Ｈｉｓ−Ｆ−Ｇ−Ｈ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ −Ｒ２（
Ｉ）
（式中、Ｒ１及びＲ２は、同一でも異なっていてもよく
て、１２個以下の任意のアミノ酸残基または水素原子を
示す。Ａ及びＢのどちらか一方は芳６環を有するアミノ
酸残基であり、他方は任意のアミノ酸残基である。Ｃ及
びＥは、任意のアミノ酸残基である。Ｆは、芳香環を有
するアミノ酸残基である。Ｄは、側鎖に陽電荷または陰
電荷を有するアミノ酸残基であり、Ｈは側鎖に陽電荷を
有するアミノ酸残基であ、る。ＧはＡｌａまたはＳｅｒ
である。ここで、Ｃｙｓ、ＧｌｙＳＨｉｓ。R1-Cys -A-B-Cys -C-D-E -G
ly-His-FGH-Asp-Cys-R2(
I) (In the formula, R1 and R2 may be the same or different and represent 12 or less arbitrary amino acid residues or hydrogen atoms. Either A or B is an amino acid residue having an aromatic hexacyclic ring. group, and the other is any amino acid residue.C and E are any amino acid residues.F is an amino acid residue having an aromatic ring.D is a positive or negative charge on the side chain. is an amino acid residue with a charge, H is an amino acid residue with a positive charge on the side chain, G is Ala or Ser
It is. Here, Cys, GlySHis.
ＡｓｐＳＡｌａ及びＳｅｒは、それぞれシスティン、グ
リシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、アラニン及びセ
フリンの残基を表す。）
効果
本発明による新規ペプチドは逆転写酵素阻害活性を有し
ており、ウィルス粒子を用いた逆転写酵素反応を阻害す
ることから、例えば抗ウィルス剤として有用である。AspSAla and Ser represent cysteine, glycine, histidine, aspartic acid, alanine and sephrin residues, respectively. ) Effects The novel peptide according to the present invention has reverse transcriptase inhibitory activity and inhibits the reverse transcriptase reaction using virus particles, and is therefore useful as, for example, an antiviral agent.
新規ペプチド
本発明による新規ペプチドは、前記の一般式％式％
Ｒ１およびＲ２は、同一でも異なっていてもよくて、１
２個以下の任意のアミノ酸残基または水素原子を示す。Novel peptide The novel peptide according to the present invention has the general formula % R1 and R2 may be the same or different, and 1
Indicates up to two arbitrary amino acid residues or hydrogen atoms.
具体的には、たとえば、Ｒ１がＡｓ ｐ−Ａ ｒ ｇ−
Ａｓ ｐ−Ｇ ｌ ｎまたは水素原子であり、Ｒ２がＰ
ｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ −Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ −Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏまた
はＰｒｏである組合せ、Ｒ１がＡｓｐ−Ｇｌｎまたは水
素原子で、Ｒ−がＰｒｏ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ −Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−ＰｒｏまたはＰｒｏである組合せ、がある。Specifically, for example, R1 is As p-A r g-
As p-G l n or a hydrogen atom, and R2 is P
ro-Lys-Lys-Pro-Arg-Gly-P
A combination of ro-Arg -Gly-Pro-Arg-Pro or Pro, R1 is Asp-Gln or a hydrogen atom, and R- is Pro-Lys-Arg-Pro-A
rg-Gly-Pro-Arg-Gly-Pro-A
There are combinations that are rg-Pro or Pro.
ＡおよびＢの一方としての芳香環を有するアミノ酸残基
は、典型的なチロシンおよびフェニルアラニン（Ｐｈｅ
）の外に、トリプトファン（Ｔ ｒ ｐ）を包含するも
のとする。本発明で代表的なのは、千ロジン（Ｔｙｒ）
である。Amino acid residues with an aromatic ring as one of A and B include typical tyrosine and phenylalanine (Phe
), tryptophan (T r p) is included. Typical in the present invention is 1,000 rosin (Tyr).
It is.
ＡおよびＢの他方は、任意のアミノ酸残基である。Ｃお
よびＥも任意のアミノ酸残基である。ここで、「任ゼ゛
のアミノ酸」とは、たとえば、共立出版四刊＝ 「化学
大辞典」、第１巻、第２６３直に記載されているアミノ
酸の一つを意味する。具体的なアミノ酸残基は、たとえ
ばＡまたはＢについてはアラニン（Ａｌａ）またはスレ
オニン（Ｔｈｒ）、Ｃについてはリジン（Ｌｙｓ）また
はグルタミン酸（Ｇｌｕ）、Ｈについてはリジンまたは
グルタミン（Ｇｌｎ）、である。The other of A and B is any amino acid residue. C and E are also arbitrary amino acid residues. Here, the term "nominal amino acid" means, for example, one of the amino acids listed in Kyoritsu Shuppan 4th edition, "Chemistry Dictionary", Volume 1, No. 263. Specific amino acid residues are, for example, alanine (Ala) or threonine (Thr) for A or B, lysine (Lys) or glutamic acid (Glu) for C, and lysine or glutamine (Gln) for H.
Ｆは芳香環を有するアミノ酸残基であって、前記のＡま
たはＢの一方と同一でも異なっていてもよい。具体例は
前記した通りであるが、Ｆとしてはトリプトファンが代
表的である。F is an amino acid residue having an aromatic ring, and may be the same as or different from either A or B described above. Specific examples are as described above, and F is typically tryptophan.
Ｄは側鎖に陽電荷または陰電荷を有するアミノ酸残基で
あって、前者としてはリジン、アルギニン（Ａ ｒ ｇ
） 、ヒスチジン（Ｈｉｓ）およびトリプトファンを、
後者としてはアスパラギン酸（Ａｓｐ）およびグルタミ
ン酸を、それぞれ例示することができる。本発明では、
Ｄはグルタミン酸が代表的である。D is an amino acid residue having a positive or negative charge on the side chain, and examples of the former include lysine, arginine (Arg
), histidine (His) and tryptophan,
Examples of the latter include aspartic acid (Asp) and glutamic acid. In the present invention,
D is typically glutamic acid.
Ｈは側鎖に陽電荷を有するアミノ酸であって、その具体
例はＤについて前記した通りである。本発明では、Ｈは
リジンが代表的である。H is an amino acid having a positive charge in its side chain, and specific examples thereof are as described above for D. In the present invention, H is typically lysine.
Ｇはアラニンまたはセリンである。本発明では、Ｇはア
ラニンが代表的である。G is alanine or serine. In the present invention, G is typically alanine.
上記のところから、本発明による一般式（Ｉ）のペプチ
ドの具体例は、下記の一般式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）
で示されるものである。From the above, specific examples of the peptide of general formula (I) according to the present invention include the following general formula (II) or (III).
This is shown in .
Ｒ１−Ｃｙｓ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｇｌ
ｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ
−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｒ’−（ＩＩ）
Ｒ３−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙ ｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇ
ｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉ ｓ −Ｔｒｐ−Ａｌａ−
Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｒ４（Ｉｎ）
（式中、Ｒ１はＡｓｐ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｉｎまたは
水素原子、Ｒ２はＰｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−ＰｒｏまたはＰｒｏ、Ｒ３はＡｓｐ−Ｇｉｎまたは
、水素原子、Ｒ４はＰｒｏ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−ＰｒｏまたはＰｒｏ）
なお、本発明によるペプチドを構成するアミノ酸はＬ−
アミノ酸であることが望ましい。R1-Cys-Ala-Tyr-Cys-Lys-Gl
u-Lys-Gly-His-Trp-Ala-Lys
-Asp-Cys-R'-(II) R3-Cys-Thr-Tyr-Cys-Glu-G
lu-Gln-Gly-His-Trp-Ala-
Lys-Asp-Cys-R4(In) (wherein, R1 is Asp-Arg-Asp-Gin or a hydrogen atom, R2 is Pro-Lys-Lys-Pro-A
rg-Gly-Pro-Arg-Gly-Pro-Ar
g-Pro or Pro, R3 is Asp-Gin or a hydrogen atom, R4 is Pro-Lys-Arg-Pro-
Arg-Gly-Pro-Arg-Gly-Pro-A
rg-Pro or Pro) The amino acids constituting the peptide according to the present invention are L-
Preferably it is an amino acid.
本発明による新規ペプチドは、逆転写酵素阻害活性を有
するという特性を持つものである。従って、この特性が
有意に保存されている限り、Ｒ１の上流側（Ｎ−末端の
延長上）およびＲ２の一ド流側（Ｃ−末端の延長上）に
アミノ酸がいくつか付加したものも式（Ｉ）のペプチド
の均等物として本発明の範囲に入るものである。The novel peptide according to the present invention has the property of having reverse transcriptase inhibitory activity. Therefore, as long as this property is significantly conserved, it is also possible to add some amino acids upstream of R1 (on the N-terminal extension) and downstream of R2 (on the C-terminal extension). It falls within the scope of the present invention as an equivalent of the peptide (I).
ペプチドの製造
本発明による新規ペプチドは、合目的的な任意の方法に
よって製造することができる。Production of Peptides The novel peptides according to the invention can be produced by any convenient method.
一つの方法は、前記の一般式（Ｉ）のアミノ酸配列のペ
プチド部分を含む天然ポリペプチドから該部分を切出す
ことである。この場合の天然ポリペプチドは、天然物由
来のものの外にそのようなポリペプチドをコードするＤ
ＮＡ、特にｃ Ｄ Ｎ Ａ ％を利用して遺伝子工学的
に製造したものであってもよい。One method is to excise the peptide portion of the amino acid sequence of general formula (I) above from a naturally occurring polypeptide. In this case, natural polypeptides include those derived from natural products as well as D
It may be produced by genetic engineering using NA, especially cDNA.
このような天然物依存の方法の外に、しかもそれより有
利なものとして、合成化学的方法がある。In addition to, and even more advantageous than, such natural product-based methods, there are synthetic chemical methods.
単位アミノ酸の縮合によって所定アミノ酸配列のペプチ
ドを合成化学的に製造する方法は周知であって、そのた
めの装置すなわちペプチド合成機も市販されている。ペ
プチド合成に関する綜説としては、たとえば、日本生化
学会編「生化学実験講座／タンパク質の化学Ｉ−ＩＶＪ
（Ｉ９７７年東京化学同人発行）および泉屋信夫著
［合成化学シリーズ−ペプチド合成Ｊ （Ｉ９７５年
丸茜株式会社）を挙げることができる。A method for synthetically producing a peptide with a predetermined amino acid sequence by condensation of unit amino acids is well known, and equipment for this purpose, ie, a peptide synthesizer, is also commercially available. For a comprehensive theory on peptide synthesis, for example, see "Biochemistry Experimental Course/Chemistry of Proteins I-IVJ" edited by the Biochemical Society of Japan.
(published by Tokyo Kagaku Dojin in 1977) and Nobuo Izumiya [Synthetic Chemistry Series - Peptide Synthesis J (published by Maru Akane Co., Ltd. in 1975).
具体的には、本発明のペプチドは、公知のＭｅｒｒｉ１
’１ｅｌｄ固体支持法（Ｍｅｒｒｉｌ’１ｅｌｄ、 Ｊ
、Ａｍｅｒ。Specifically, the peptide of the present invention is a known Merri1
'1eld solid support method (Merril'1eld, J
, Amer.
Ｃｈｅｍ、 Ｓｏｅ、 ８５． ２１４９−５４
（Ｉ９６３） ： ５ｃｉｅｎｃｅ １５０゜１７８
−８５ （Ｉ９６５） ）により調製するのが好ましい
。Chem, Soe, 85. 2149-54
(I963): 5science 150°178
-85 (I965)).
この方法は、古典的ペプチド合成に使用される多くの同
様の化学反応及びｇ？：、ＪＭを用いるものであるが、
この方法によれば、架橋ポリスチレン、スチレン−ジビ
ニルベンゼンコポリマーなどの固相支持体にそのカルボ
キシ末端が固定されたペプチド鎖か得られる。この方法
では、単にポリマーを洗浄するだけで、各工程での過剰
の試薬を除去できるので、この方法は非常に多くの操作
が簡略化された方法と言える。This method combines many similar chemistries used in classical peptide synthesis and g? :, which uses JM, but
According to this method, a peptide chain whose carboxy terminus is fixed to a solid support such as crosslinked polystyrene or styrene-divinylbenzene copolymer is obtained. In this method, excess reagents from each step can be removed by simply washing the polymer, so this method can be said to be a method that greatly simplifies many operations.
Ｍｃｒｒｉ（’１ｅｌｄのペプチド合成法によって式（
Ｉ）のペプチドを合成するには、以下の方法を用いるこ
とが好ましい。The formula (
To synthesize the peptide I), it is preferable to use the following method.
すなわち、４− （オキシメチル）−フェニルアセトア
ミドメチル樹脂（Ｐ Ａ Ｍ樹脂：樹脂）と称される樹
脂から合成をはじめる。このＰＡＭ樹脂は市販品で、ま
た保護プロリンＰＡＭ樹脂（Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＰＡＭ樹
脂：Ｂｏｃ−樹脂）としても入手力輸１能である。この
保護プロリンＰ Ａ Ｍ樹脂を出発原料としてペプチド
合成機を用い式（Ｉ）に示されるペプチドのアミノ酸配
列に従って保訛アミノ酸を常法に従って順次縮合させる
。この様にして得られる保護ペプチドＰ Ａ Ｍ樹脂を
弗化水素（ＨＦ）で処理し、保護基を除くと共にＰＡＭ
樹脂からペプチドを切断する。That is, synthesis begins with a resin called 4-(oxymethyl)-phenylacetamidomethyl resin (PAM resin). This PAM resin is commercially available and is also available as protected proline PAM resin (Boc-Pro-PAM resin: Boc-resin). Using this protected proline PAM resin as a starting material, modified amino acids are successively condensed using a peptide synthesizer according to the amino acid sequence of the peptide represented by formula (I) according to a conventional method. The protected peptide PAM resin obtained in this way is treated with hydrogen fluoride (HF) to remove the protecting group and to remove the PAM resin.
Cleave the peptide from the resin.
この粗ペプチドをゲル罎過、及びＨＰＬＣにより精製す
ることにより、高純度の式（Ｉ）のペプチドを得る。A highly pure peptide of formula (I) is obtained by purifying this crude peptide by gel filtration and HPLC.
実験例
合成例
以下の合成例では、下記の表−１に示したアミノ酸配列
のペプチドを合成した。Ｐ−１およびＰ−３は本発明外
のペプチドであり、残りが本発明による新規ペプチドあ
る。Experimental Examples Synthesis Examples In the following synthesis examples, peptides having the amino acid sequences shown in Table 1 below were synthesized. P-1 and P-3 are peptides outside the present invention, and the rest are novel peptides according to the present invention.
表 １
Ｐ−Ｉ Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−５ｅｒ−Ｇ
１４Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−ＡｒＩ
Ｐ−２Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｉｎ−Ｃ）
ｚＬｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙ＋Ｐ
−３Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇ１４
Ｓｅ ｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ
Ｐ−４Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｉｎ−Ｃｙｓ−Ａｔ
；Ｇｌｙ−Ｈｉ ｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−ＡＳＩ
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒ＋Ｐ−
５Ｃｙｓ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｇ１＋Ｌ
ｙｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒ。Table 1 P-I Ala-Thr-Val-Val-5er-G
14Gin-Gly-Gly-Glu-Arg-ArI
P-2Leu-Asp-Arg-Asp-Gin-C)
zLys-Gly-His-Trp-Ala-Ly+P
-3Pro-Lys-Lys-Pro-Arg-G14
Ser-Leu-Leu P-4Asp-Arg-Asp-Gin-Cys-At
;Gly-His-Trp-Ala-Lys-ASI
Arg-Gly-Pro-Arg-Gly-Pr+P-
5Cys-Ala-Tyr-Cys-Lys-G1+L
ys-Asp-Cys-Pr.
Ｐ−６Ａｓｐ−Ｇｉｎ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙ
＋Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒ＋Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ＋Ｐ−７
Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇ１＋Ｌｙ
ｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒ。P-6Asp-Gin-Cys-Thr-Tyr-Cy
+Trp-Ala-Lys-Asp-Cys-Pr+P
ro-Arg-Gly-Pro-Arg-Pr+P-7
Cys-Thr-Tyr-Cys-Glu-G1+Ly
s-Asp-Cys-Pr.
／−Ｇｉｎ−Ａｒｇ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｚ −
Ａ ｒ ｇ−Ｐ ｒ ｏ−Ｇ １ ｎ−Ｌ ｅ ｕ；−
Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−５−ＡＳｐ
−Ｃｙｓ−Ｐｒ。/-Gin-Arg-Gin-Asp-Arg-Z-
A r g-P r o-G 1 n-L eu;-
Ala-Tyr-Cys-Lys-Glu-5-ASp
-Cys-Pr.
ｉ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｉｎ−Ａｌａ−ｈ−Ｔ
ｙｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−）−Ｃｙｓ−
Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−）−Ａｒｇ−Ｐｒ。i-Pro-Arg-Pro-Gin-Ala-h-T
yr-Cys-Lys-Glu-Lys-)-Cys-
Pro-Lys-Lys-Pro-)-Arg-Pr.
Ｊ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉ ｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ｓ−
Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−）−Ｌｙｓ
−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−〕
」−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−以下の
合成例では、前記したＭｅｒｒｉｌ’ｉｅ閉の固相合成
法により、保護プロリンＰＡＭ樹脂０．５ｓｎｏｌ （
Ｂ ｏ ｃ−Ｐ ｒ ｏ−ＰＡＭ樹脂、０．７６ｍ＊ｏ
ｌ／ｇ）を使用し、＾ｐｐｌｉｅｄ ＢｉｏｓｙｓＬｅ
ｗｓＰｅｐｔｉｄｅ ５ｙｎＬｈｅｓｉｚｅｒ ４３０
Ａ （米国、アプライド舎バイオシステムズ社製）、ペ
プチド合成機にて合成を行なった。本合成において使用
したＮ−保護アミノ酸（Ｎ−保護基はすべてＢｏｃｍｔ
−ブチルオキシカルボニル基を使用した。）は、以下の
通りである。J-Lys-Gly-His-Trp-Ala-s-
Glu-Glu-Gin-Gly-His-)-Lys
-Arg-Pro-Arg-Gly-] -Gin-Gly-His-Trp-Ala- In the following synthesis example, the protected proline PAM resin 0.5 snol (
Boc-Pro-PAM resin, 0.76m*o
l/g) and ＾pplied BiosysLe
wsPeptide 5ynLhesizer 430
A (manufactured by Applied Biosystems, USA), synthesis was performed using a peptide synthesizer. N-protected amino acids used in this synthesis (all N-protecting groups are Bocmt
-butyloxycarbonyl group was used. ) is as follows.
Ｂｏｃ−Ａｌａ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニンＢｏｃ−Ａｒｇ
（Ｍｔ ｓ） −Ｂｏｃ−Ｎｇ−メシチレンスルホニ
ル−し−アルギニン
Ｂｏｃ−Ａｓｐ （ＯＢｚ １）−Ｂｏｃ−Ｌ−アスパ
ラギン酸−β−ベンジルエステル
Ｂｏｃ−Ｃｙｓ （４−ＭｅＢｚ １）−Ｂｏｃ−４−
メチルベンジル−Ｌ−システィン
Ｂｏｃ−Ｇｉｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−グルタミンＢｏｃ−Ｇ
ｌ ｕ （ＯＢｚ １）−Ｂｏａ −Ｌ−グルタミン酸
−γ−ベンジルエステル
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｂｏｃ−Ｌ−グリシンＢｏｃ−Ｈｉ
ｓ （Ｔｏｓ）ｍＢｏｃ−Ｎ−トシル−Ｌ−ヒスチジ
ン
Ｂｏｃ−Ｌｙｓ （ＣＩ−Ｚ）−Ｂｏａ−Ｎ′ニー４
−クロロベンジルオキシカルボニル−し−リジン
Ｂｏａ−ＰｒｏｍＢｏｃ−Ｌ−プロリンＢｏａ−Ｔｈｒ
（Ｂｚｌ）−Ｂｏａ−０−ベンジル−し−スレオニン
Ｂｏｃ−Ｔｒｐ （ＣＨＯ）−Ｂｏｃ−Ｎ−ホルミル−
し−トリプトファン
Ｂｏｃ−Ｔｙｒ （Ｂｒ−Ｚ）−Ｂｏｃ−０−４−ブロ
モベンジルオーキシカルボニル−し−チロシン
得られた保護ペプチド樹脂（Ｉｇ）を、ＨＦ−ｍ−クレ
ゾール−エタンジチオール（２０ｍｌ−１ｍｌ −５０
０ｇｇ）を用い０℃で１時間処理して樹脂から脱離させ
た。粗ペプチドを水に溶解させ、希アンモニア水で水冷
下ｐＨ８，０とし、３０分攪拌した後、１Ｎ酢酸にてｐ
Ｈ６，０とし、この溶液に２−メルカプトエタノール（
５００ｕｊ？）を加えて、３７℃で２４時間インキュベ
ートした。Boc-Ala-Boc-L-alanine Boc-Arg
(Mt s) -Boc-Ng-mesitylenesulfonyl-dis-arginine Boc-Asp (OBz 1)-Boc-L-aspartic acid-β-benzyl ester Boc-Cys (4-MeBz 1)-Boc-4-
Methylbenzyl-L-cysteine Boc-Gin-Boc-L-glutamine Boc-G
lu (OBz 1)-Boa-L-glutamic acid-γ-benzyl ester Boc-Gly-Boc-L-glycine Boc-Hi
s (Tos) mBoc-N-tosyl-L-histidine Boc-Lys (CI-Z)-Boa-N'nie 4
-Chlorobenzyloxycarbonyl-shi-lysineBoa-PromBoc-L-prolineBoa-Thr
(Bzl)-Boa-0-benzyl-threonine Boc-Trp (CHO)-Boc-N-formyl-
-Tryptophan Boc-Tyr (Br-Z)-Boc-0-4-bromobenzyloxycarbonyl-d-tyrosine The obtained protected peptide resin (Ig) was mixed with HF-m-cresol-ethanedithiol (20ml-1ml). -50
0gg) at 0°C for 1 hour to remove it from the resin. The crude peptide was dissolved in water, adjusted to pH 8.0 with dilute ammonia water under water cooling, stirred for 30 minutes, and then purified with 1N acetic acid.
H6.0 and add 2-mercaptoethanol (
500uj? ) and incubated at 37°C for 24 hours.
次に、この溶液について５ｃｐｈａｄｃｘ Ｇ −２
５（Ｎｎｃ） （ファルマシア社製）を用い、ＩＮ酢
酸を溶出液とするゲル濾過カラムクロマトグラフィーを
行ない、目的物を含む分画を集め、凍結乾燥した。これ
を２％２−メルカプトエタノール水に溶解させ、高速液
体クロマトグラフィーにより精製した。Next, for this solution, 5 cphadcx G −2
5 (Nnc) (manufactured by Pharmacia), gel filtration column chromatography was performed using IN acetic acid as an eluent, and fractions containing the target product were collected and freeze-dried. This was dissolved in 2% 2-mercaptoethanol water and purified by high performance liquid chromatography.
下２のＰ−１〜Ｐ−７のペプチドはすべて上記操作によ
り合成、精製した。All of the peptides P-1 to P-7 in 2 below were synthesized and purified by the above procedure.
Ｐ−４〜Ｐ−７のペプチドの高速液体クロマトグラフィ
ー精製方法、６Ｎ塩酸加水分解後のアミノ酸分析値は、
下記の通りである。High performance liquid chromatography purification method of peptides P-4 to P-7, amino acid analysis values after 6N hydrochloric acid hydrolysis,
It is as follows.
（イ）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ Ｌ Ｃ）ボ
ンブ：ウォーターズ （ウォーターズ社製）カラム：
ヌクレオシル５Ｃ，８（Ｉ０Ｘ２５０關）溶出液＝Ａ液
−水（０，１％トリフルオロ酢酸含有）
Ｂ液−アセトニトリル（０，１％トリ
フルオロ酢酸含白゛）
グラジェント：Ａ液に対するＢ液の混合割合を直線的に
変化させた。(a) High performance liquid chromatography (HPLC) bomb: Waters (manufactured by Waters) column:
Nucleosil 5C,8 (I0X250) Eluent = Solution A - Water (contains 0.1% trifluoroacetic acid) Solution B - Acetonitrile (contains 0.1% trifluoroacetic acid) Gradient: Solution of B to solution A The mixing ratio was varied linearly.
流速：２ｍｌ／分
検出：ＵＶ２３３ｎｍ
（ロ）アミノ酸分析
試料を６Ｎ塩酸（０，１％フェノール含有）にて１１０
℃、２４時間加水分解した。これを、日立アミノ酸分折
機８３５−５０型で分析した。分析結果は表−２に示し
た。Flow rate: 2ml/min Detection: UV233nm (b) Amino acid analysis sample was added to 6N hydrochloric acid (containing 0.1% phenol) at 110%
Hydrolysis was carried out at ℃ for 24 hours. This was analyzed using a Hitachi amino acid spectrometer model 835-50. The analysis results are shown in Table-2.
Ｐ−４： Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｉｎ−Ｃｙｓ
−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃ
ｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌ
ｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ。P-4: Asp-Arg-Asp-Gin-Cys
-Ala-Tyr-Cys-Lys-Glu-Lys-
Gly-His-Trp-Ala-Lys-Asp-C
ys-Pro-Lys-Lys-Pro-Arg-Gl
y-Pro-Arg-Gly-Pro-Arg-Pr.
高速液体クロマトグラフィー、
グラジェント：１５−３５％、３０分
保持時間：１５．６分
Ｐ−５： Ｃｙｓ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ −Ｌｙ
ｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ −Ｔｒｐ−Ａｌ
ａ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ −Ｐｒ。High performance liquid chromatography, gradient: 15-35%, 30 minutes retention time: 15.6 minutes P-5: Cys-Ala-Tyr-Cys-Ly
s-Glu-Lys-Gly-His-Trp-Al
a-Lys-Asp-Cys-Pr.
高速液体クロマトグラフィー、
グラジェント：１５−４０％、３０分
保持時間：１０．５分
Ｐ−６： Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ
−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉ ｓ
−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−
Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ。High performance liquid chromatography, gradient: 15-40%, 30 minutes retention time: 10.5 minutes P-6: Asp-Gln-Cys-Thr-Tyr
-Cys-Glu-Glu-Gin-Gly-His
-Trp-Ala-Lys-Asp-Cys-Pro-
Lys-Arg-Pro-Arg-Gly-Pro-A
rg-Gly-Pro-Arg-Pr.
高速液体クロマトグラフィー、
グラジェント：１５−４０％、３０分
保持時間：１５．２分
Ｐ−７： Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ
−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉ ５−Ｔｒｐ−Ａｌａ
−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒ。High performance liquid chromatography, gradient: 15-40%, 30 minutes retention time: 15.2 minutes P-7: Cys-Thr-Tyr-Cys-Glu
-Glu-Gln-Gly-Hi 5-Trp-Ala
-Lys-Asp-Cys-Pr.
高速液体クロマトグラフィー、
グラジェント：１５−４０％、
表 ２
＊ 基準値
林 この条件ではシスティンは定量的には回収されなか
った。High performance liquid chromatography, gradient: 15-40%, Table 2 *Reference value Hayashi Cysteine was not quantitatively recovered under these conditions.
試験例
本発明による新規ペプチドについて逆転写酵素阻害活性
を試験した。Test Example The novel peptide according to the present invention was tested for reverse transcriptase inhibitory activity.
ａ）試験ウィルスの精製
Ｍ１細胞培養上清に放出されるＣ型レトロウィルスを試
験ウィルスとして用いた。Ｍ１細胞は米国メリーランド
州ロックビルのアメリカン・タイプ・カルチュアやコレ
クション（ＡＴＣＣ）に寄託されていて、受託番号ＡＴ
ＣＣＴｌＢ１９２が付与されているので、請求によりこ
の寄託機関から入手できる。a) Purification of test virus Type C retrovirus released into the M1 cell culture supernatant was used as the test virus. M1 cells have been deposited at the American Type Culture Collection (ATCC) in Rockville, Maryland, USA, with accession number AT.
CCTlB192 and is available from this depository on request.
Ｍ１細胞を１０％牛脂児血清を付加したイーグルＭＥＭ
培地で７２時間培養し、遠心分離（４０００ｒｐｍ 、
３０分、４℃）により培養上清を得た。この培養上清４
リツトルにポリエチレングリコール＃６０００及び塩化
ナトリウムをそれぞれ１０％と２゜４％になるように加
えた後、４℃で一晩撹拌した。この溶液から、遠心分離
（４０００ｒｐｍ 、３０分、４℃）により、沈殿とし
てウィルスを濃縮した。この沈殿をＮＴＥ（Ｉ００ｍＭ
ＮａＣ１，１０ｍＭ ）リス・ＨＣｌ５ｐＨ７，
４，１ｍＭ ＥＤＴＡ）に懸濁させて、６０ｍ１とし
た。一方、３０ｍ１の容量の遠心管に６５％のショ糖を
含むＮＴＥ溶液を６ｍｌ入れ、その上に２０９６のショ
糖を含むＮＴＥ溶液を混和しないように入れておく。こ
の上にウィルスの濃縮懸濁液を上層し、遠心分離（日立
、ＲＰＳ−２５０−ター、２４００Ｏｒｐｍ、１２０分
、４℃）に付した。この条件で、ウィルス粒子は２０％
ショ糖溶液を通過して、６５％ショ糖溶液の上に集まる
。このウィルスを回収し、ＮＴＥに懸濁させて３０ｍ１
とする。これを遠心分Ｍ（Ｅｌ立、ＲＰＳ−２５０−タ
ー、２４０００ｒｐｍ 、９０分、４℃）に付して、ウ
ィルス粒子を沈殿させた。これを２ｍｌのＮＴＥによく
懸濁させた。そして、ＮＴＥ中の２０〜６５９６シヨ糖
勾配を通して遠心分＃１（日立、ＲＰＳ−２５０−ター
、２４００Ｏｒｐｍ、９０分、４℃）を行った。この条
件で、ウィルスは遠心管の中に単一のバンドを形成する
ので、これを回収し、ＮＴＥを加えて３０ｍ１とし、遠
心分Ｉ４（日立、ＲＰＳ−２５０−ター、２４００Ｏｒ
ｐｍ 、１２０分、４℃）によりウィルス粒子を沈殿さ
せる。この沈殿を５００μｌのＴＥ（Ｉ０ｍＭ トリス
、ＨＣｌ５ ｐＨ７，４，１ｍＭ ＥＤＴＡ）に懸濁
させて、蛋白質含量が１Ｐｇ／μｍの試験ウィルスを得
た。これを分注して一８０℃で凍結した。Eagle MEM with M1 cells supplemented with 10% tallow serum
Cultured in medium for 72 hours, centrifuged (4000 rpm,
30 minutes at 4°C) to obtain a culture supernatant. This culture supernatant 4
Polyethylene glycol #6000 and sodium chloride were added to the bottle at a concentration of 10% and 2.4%, respectively, and the mixture was stirred at 4°C overnight. From this solution, the virus was concentrated as a precipitate by centrifugation (4000 rpm, 30 minutes, 4°C). This precipitate was dissolved in NTE (I00mM
NaCl, 10mM) Lis HCl5 pH 7,
4.1mM EDTA) to make 60ml. On the other hand, put 6 ml of NTE solution containing 65% sucrose in a centrifugal tube with a capacity of 30 ml, and put NTE solution containing 2096 sucrose on top of it without mixing. A concentrated virus suspension was layered on top of this and centrifuged (Hitachi, RPS-250-tar, 2400 rpm, 120 minutes, 4°C). Under these conditions, virus particles are 20%
Pass through the sucrose solution and collect on top of the 65% sucrose solution. Collect this virus, suspend it in NTE and
shall be. This was subjected to centrifugation M (El standing, RPS-250-tar, 24,000 rpm, 90 minutes, 4°C) to precipitate virus particles. This was well suspended in 2 ml of NTE. Centrifugation #1 (Hitachi, RPS-250-tar, 2400 rpm, 90 minutes, 4°C) was then performed through a 20-6596 sucrose gradient in NTE. Under these conditions, the virus forms a single band in the centrifuge tube, which is collected, added NTE to make 30 ml, and centrifuged in I4 (Hitachi, RPS-250-tar, 2400Or
pm, 120 min, 4°C) to precipitate virus particles. This precipitate was suspended in 500 μl of TE (10 mM Tris, HCl5 pH 7,4, 1 mM EDTA) to obtain a test virus with a protein content of 1 Pg/μm. This was divided into portions and frozen at -80°C.
ｂ）逆転写酵素活性の測定
精製ウィルス約５μｇを、０．（’）２％ノニデットＰ
−４０，３０ｍＭ塩化ナトリウム、４０ｍＭＴｒ ｉ
５−ＨＣＬ ｐＨ８，１，５ｍ Ｍジチオスレイトール
、１ｍＭ ｄＡＴＰ、１ｍＭｄＧＴＰ、１ｍＭ ｄ
ＴＴＰ、２μＣｉ”２Ｐ−ｄＣＴＰ （４００Ｃｉ／ｍ
ｍｏ １） 、３ｍＭ塩化マグネシウム、の溶液中で３
７℃で２時間反応させる。そして、１０％トリクロロ酢
酸を等量論えて、合成されたＤＮＡ （デオキシリボ核
酸）を沈殿させ、グラスファイバーフィルター（ワット
マン ＧＦ／Ｃ，２，４ｃｍ）で濾過を行ない、フィル
ター上に合成りＮＡを回収する。このフィルタ−を５９
６トリクロロ酢酸及びエタノールで洗浄し、乾燥させる
。フィルターに残存している放射性ＤＮＡの放射活性を
液体シンチレーションカウンターで測定して、逆転写酵
素活性を評価する。b) Measurement of reverse transcriptase activity Approximately 5 μg of purified virus was injected into 0.0 μg of purified virus. (') 2% Nonidet P
-40, 30mM Sodium Chloride, 40mM Tri
5-HCL pH 8, 1, 5m M dithiothreitol, 1mM dATP, 1mM dGTP, 1mM d
TTP, 2μCi”2P-dCTP (400Ci/m
mo 1), 3mM magnesium chloride, in a solution of
React at 7°C for 2 hours. Then, the synthesized DNA (deoxyribonucleic acid) was precipitated with an equal amount of 10% trichloroacetic acid, and filtered with a glass fiber filter (Whatman GF/C, 2.4 cm) to collect the synthesized NA on the filter. do. This filter is 59
Wash with 6 trichloroacetic acid and ethanol and dry. The radioactivity of the radioactive DNA remaining on the filter is measured using a liquid scintillation counter to evaluate reverse transcriptase activity.
Ｃ）逆転写酵素阻害活性の検定
表１に示す合成ペプチドを逆転写酵素活性に対する試験
剤として検定に用いた。検定は、前項ｂ）逆転写酵素活
性の測定において述べた逆転写酵素反応系に、予め、試
験剤を種々の濃度で加えておき、以下、同様の操作を行
って、合成された放射性ＤＮＡの放射活性をａｌｌＪ定
した。C) Assay for reverse transcriptase inhibitory activity The synthetic peptides shown in Table 1 were used in the assay as test agents for reverse transcriptase activity. For the assay, test agents are added in advance at various concentrations to the reverse transcriptase reaction system described in the previous section b) Measurement of reverse transcriptase activity. Radioactivity was determined as allJ.
検定結果は、試験剤が存在しない状態で合成されたＤＮ
Ａの放射活性の測定値を１００％として、試験剤存在下
で合成されたＤＮＡの放射活性の測定値を％で表した。The assay results are based on the DN synthesized in the absence of the test agent.
The measured value of the radioactivity of DNA synthesized in the presence of the test agent was expressed in %, with the measured value of the radioactivity of A being taken as 100%.
次第に増加する量の試験剤を加えたときの逆転写酵素活
性に及ぼす影響を第１図および第２図に示す。The effect on reverse transcriptase activity of adding increasing amounts of test agent is shown in FIGS. 1 and 2.
すなわち、第１図はＲＮＡ依存性ＤＮＡ合成の阻害の一
例を示すものであって、Ｍ１細胞由来のウィルスに含ま
れる逆転写酵素の阻害は、まず表１に示した合成ペプチ
ドのＰ−１、Ｐ−２およびＰ−３を用いて、試験した。That is, FIG. 1 shows an example of inhibition of RNA-dependent DNA synthesis. Inhibition of reverse transcriptase contained in virus derived from M1 cells was first achieved by using the synthetic peptides P-1, P-1, and P-1 shown in Table 1. Tests were conducted using P-2 and P-3.
試験剤の濃度は、横座標に示す通りである。逆転写酵素
によるＤＮＡ合成は、トリクロロ酢酸により沈殿しうる
ＤＮＡに取り込まれた３２Ｐ−ｄＣＴＰの放射活性の１
ｌｌｌＪ定値（カウント数／分、ｃｐｍ）により測定し
た。The concentration of the test agent is shown on the abscissa. DNA synthesis by reverse transcriptase involves the release of 1 of the radioactivity of 32P-dCTP incorporated into DNA, which can be precipitated with trichloroacetic acid.
Measured by lllJ constant value (counts/min, cpm).
試験剤による３２Ｐ−ｄＣＴＰの取り込みの減少は、未
処理対照（Ｉ００％）に対する％として縦座標に示す通
りである。The reduction in 32P-dCTP uptake by the test agent is shown on the ordinate as a % of the untreated control (I00%).
第２図は、ＲＮＡ依存性ＤＮＡ合成の阻害の他の例を示
すものであって、Ｍ１細胞由来のウィルスに含まれる逆
転写酵素の阻害を表１に示した合成ペプチドＰ−４、Ｐ
、−５、Ｐ−６およびＰ−７を試験剤として用いたもの
に対応する。FIG. 2 shows another example of inhibition of RNA-dependent DNA synthesis, in which synthetic peptides P-4 and P-4 shown in Table 1 were used to inhibit reverse transcriptase contained in viruses derived from M1 cells.
, -5, P-6 and P-7 were used as test agents.
一方、試験剤の阻害活性の示標として、逆転写酵素活性
を５０％阻害するときの試験剤の濃度を採用し、これを
■Ｃ５ｏ値として表３にその値を示した。On the other hand, as an indicator of the inhibitory activity of the test agent, the concentration of the test agent at which the reverse transcriptase activity was inhibited by 50% was used, and this value was shown in Table 3 as the ■C5o value.
表３Table 3
第１図および第２図は、いずれも、ＲＮＡ依存性ＤＮＡ
合成の阻害についての本発明新規ペプチドの効果を示す
グラフである。
出願人代理人 佐 藤 −雄
Ｐ−１」−・
第１図Both Figures 1 and 2 show RNA-dependent DNA
1 is a graph showing the effect of the novel peptide of the present invention on inhibition of synthesis. Applicant's agent Sato -Yu P-1'' - Figure 1
Claims (1)
有する新規ペプチド。 Ｒ＾１−Ｃｙｓ−Ａ−Ｂ−Ｃｙｓ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｇｌｙ
−Ｈｉｓ−Ｆ−Ｇ−Ｈ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｒ＾２（ I
） （式中、Ｒ＾１及びＲ＾２は、同一でも異なっていても
よくて、１２個以下の任意のアミノ酸残基または水素原
子を示す。Ａ及びＢのどちらか一方は芳香環を有するア
ミノ酸残基であり、他方は任意のアミノ酸残基である。 Ｃ及びＥは、任意のアミノ酸残基である。Ｆは、芳香環
を有するアミノ酸残基である。Ｄは、側鎖に陽電荷また
は陰電荷を有するアミノ酸残基であり、Ｈは側鎖に陽電
荷を有するアミノ酸残基である。ＧはＡｌａまたはＳｅ
ｒである。ここで、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、
Ａｌａ及びＳｅｒは、それぞれシステイン、グリシン、
ヒスチジン、アスパラギン酸、アラニン及びセリンの残
基を表す。）[Scope of Claims] A novel peptide having reverse transcriptase inhibitory activity represented by general formula (I) below. R^1-Cys-A-B-Cys-C-D-E-Gly
-His-F-G-H-Asp-Cys-R^2( I
) (In the formula, R^1 and R^2 may be the same or different and represent 12 or less arbitrary amino acid residues or hydrogen atoms. Either A and B has an aromatic ring. One is an amino acid residue, the other is any amino acid residue. C and E are arbitrary amino acid residues. F is an amino acid residue having an aromatic ring. D is a positive charge on the side chain. or an amino acid residue with a negative charge, H is an amino acid residue with a positive charge on the side chain, G is Ala or Se
It is r. Here, Cys, Gly, His, Asp,
Ala and Ser are cysteine, glycine, and
Represents histidine, aspartic acid, alanine and serine residues. )
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63050532A JPH01224398A (en) | 1988-03-03 | 1988-03-03 | Novel peptide |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63050532A JPH01224398A (en) | 1988-03-03 | 1988-03-03 | Novel peptide |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01224398A true JPH01224398A (en) | 1989-09-07 |
Family
ID=12861605
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63050532A Pending JPH01224398A (en) | 1988-03-03 | 1988-03-03 | Novel peptide |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01224398A (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005123760A3 (en) * | 2004-06-15 | 2006-05-18 | Theryte Ltd | Treating cancer |
| EP3556766A4 (en) * | 2016-12-16 | 2020-07-22 | Avixgen Inc. | Cytoplasmic transduction peptide and intracellular messenger comprising same |
| US11208433B2 (en) | 2017-12-28 | 2021-12-28 | Avixgen Inc. | Peptide for inhibiting skin inflammation and composition for preventing or treating skin inflammation containing the same |
-
1988
- 1988-03-03 JP JP63050532A patent/JPH01224398A/en active Pending
Cited By (5)
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| JP2008509882A (en) * | 2004-06-15 | 2008-04-03 | セライト リミテッド | Cancer treatment |
| US8748389B2 (en) | 2004-06-15 | 2014-06-10 | Theryte Limited | Treating cancer |
| EP3556766A4 (en) * | 2016-12-16 | 2020-07-22 | Avixgen Inc. | Cytoplasmic transduction peptide and intracellular messenger comprising same |
| US11208433B2 (en) | 2017-12-28 | 2021-12-28 | Avixgen Inc. | Peptide for inhibiting skin inflammation and composition for preventing or treating skin inflammation containing the same |
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