JP7333512B2 - Estimation method of UPE (biophoton) amount - Google Patents

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特許法第30条第2項適用 International Investigative Dermatology(IID)2018要旨集(LATE BREAKING ABSTRACTS) 発行日:平成30年5月16日 [刊行物等] ポスター(Noninvasive imaging of UV-induced oxidative stress in human skin using ultra-weak photon emission) 発行者:土田 克彦(Katsuhiko Tsuchida)、岩佐 琥偉(Torai Iwasa)、小林 正樹(Masaki Kobayashi) 公開日:平成30年5月16日International Investigative Dermatology (IID) 2018 Abstracts (LATE BREAKING ABSTRACTS) Published: May 16, 2018 [Publications, etc.] Poster (Noninvasive imaging of UV-induced oxide ive stress in human skin using ultra-weak photon emission) Published by: Katsuhiko Tsuchida, Torai Iwasa, Masaki Kobayashi Published: May 16, 2018

本発明は、紫外線照射時の皮膚組織由来のUPE(Ultra-weak photon emission)量を推定する方法に関する。より詳細には、皮膚に電磁波を照射し、放出されるUPEを測定する方法において、あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織から放出されるUPE(発生)量の検出結果を用いて、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する方法に関する。 The present invention relates to a method for estimating the amount of UPE (Ultra-weak photon emission) derived from skin tissue when irradiated with ultraviolet rays. More specifically, in the method of measuring the UPE emitted by irradiating the skin with electromagnetic waves, the results of detecting the amount of UPE (generated) emitted from multiple skin tissues obtained when the skin is subdivided in advance are used. and a method for estimating the amount of UPE (generated) derived from each skin tissue.

UPE(Ultra-weak photon emission)とは、生体から放射される微弱な発光であり、生体内での生化学反応に伴う発光現象である。エネルギー代謝を始めとする、主に活性酸素が関与する生化学反応過程で放射される発光であり、そのメカニズムも多岐にわたる。またUPEはバイオフォトン、生物フォトン、生体極微弱発光、生体極微弱化学発光などと呼ばれることもある。 UPE (Ultra-weak photon emission) is weak luminescence emitted from living organisms, and is a luminescence phenomenon associated with biochemical reactions in living organisms. It is luminescence emitted in biochemical reaction processes mainly involving active oxygen, including energy metabolism, and its mechanism is also diverse. UPE is also called biophoton, biological photon, biological extremely weak luminescence, biological extremely weak chemiluminescence, and the like.

すなわち、UPEによる発光は主に、生化学反応過程における酸化還元反応により産生されるエネルギーにより生じる。特にUPEによる発光は、活性酸素やフリーラジカルの生成を伴う生化学反応において生じ、実際の発光は、生体を構成する多様な物質の酸化的修飾過程で生じる分子の励起による。 That is, luminescence by UPE is mainly caused by energy produced by redox reactions in biochemical reaction processes. In particular, luminescence from UPE occurs in biochemical reactions that accompany the generation of active oxygen and free radicals, and actual luminescence is due to the excitation of molecules that occur during the oxidative modification process of various substances that make up living organisms.

生体における活性酸素の産生は、生体内における代謝過程や、紫外線、放射線、薬剤、環境汚染物質などの外的要因が引き起こす酸化ストレスと深く関連している。また、生体における活性酸素の産生によるUPEの増加は、酸化ダメージなどのストレスと関連しており、例えば紫外線などの電磁波の照射によって皮膚の酸化が進むと、UPEの放出量が増加する。特に外部刺激によって増加したUPEは遅延発光と呼ばれる。 The production of reactive oxygen species in living organisms is closely related to oxidative stress caused by metabolic processes in living organisms and external factors such as ultraviolet rays, radiation, drugs, and environmental pollutants. In addition, an increase in UPE due to the production of active oxygen in the body is related to stress such as oxidative damage. Especially UPE increased by an external stimulus is called delayed luminescence.

紫外線(UV)が皮膚に与える研究の一環として、角質層や表皮に対する紫外線の透過率を測定した研究結果が報告されている(非特許文献1)。紫外線は、その波長によりUVA(320~400nm)とUVB(280~320nm)に分類されているが、この研究はUVBについてなされたものである。 As part of research into the effect of ultraviolet rays (UV) on the skin, research results have been reported in which the transmittance of ultraviolet rays to the stratum corneum and epidermis was measured (Non-Patent Document 1). Ultraviolet rays are classified into UVA (320-400 nm) and UVB (280-320 nm) according to their wavelength, and this study was conducted on UVB.

一方、UPEを計測する技術として、超高感度CCD(Charge Coupled Device、電荷結合素子)を用いた方法が紹介されており(非特許文献2)、光電子増倍管(PMT)を備えたフォトンカウンターを用いた方法も紹介されている(非特許文献3)。 On the other hand, as a technique for measuring UPE, a method using an ultra-sensitive CCD (Charge Coupled Device) has been introduced (Non-Patent Document 2), and a photon counter equipped with a photomultiplier tube (PMT) has been introduced. A method using is also introduced (Non-Patent Document 3).

Photochemistry and Photobiology Vol. 40, No. 4, pp. 485-494, 1984Photochemistry and Photobiology Vol.40, No.4, pp.485-494, 1984 Electrochemistry, 82(4), 294-298 (2014)Electrochemistry, 82(4), 294-298 (2014) J Photochem Photobiol B. 2014 Oct 5;139:63-70. doi: 10.1016/j.jphotobiol.2013.10.003. Epub 2013 Oct 26.J Photochem Photobiol B. 2014 Oct 5;139:63-70. doi: 10.1016/j.jphotobiol.2013.10.003. Epub 2013 Oct 26.

生体から放射される微弱な発光であり、生体内での生化学反応に伴う発光現象であるUPEの、皮膚組織から放出されるUPE(発生)量を推定する方法を提供する。 Provided is a method for estimating the amount of UPE (generated) released from skin tissue, which is weak luminescence emitted from a living body and is a luminescent phenomenon associated with biochemical reactions in the living body.

本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、皮膚に電磁波を照射し、放出されるUPE(検出)量を測定する方法において、あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織由来のUPE(発生/検出)量の検出結果を用いて、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する方法により上記の課題を解決できることを見出し、本発明を完成させるに至った。 As a result of intensive studies by the present inventors to solve the above problems, in a method of measuring the amount of UPE (detection) emitted by irradiating the skin with electromagnetic waves, the amount obtained when the skin is subdivided in advance We have found that the above problems can be solved by a method of estimating the UPE (generated/detected) amount derived from each skin tissue using the detection results of the UPE (generated/detected) amount derived from a plurality of skin tissues, and completed the present invention. reached.

本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、皮膚組織が表皮または真皮であることが好ましい。 In the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention, the skin tissue is preferably epidermis or dermis.

また本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、電磁波が紫外線であることが好ましい。 Moreover, in the method of estimating the amount of UPE (generated) of the present invention, the electromagnetic wave is preferably ultraviolet rays.

さらに本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、紫外線をUVAとすることが可能である。 Furthermore, in the method of estimating the amount of UPE (generated) of the present invention, ultraviolet rays can be UVA.

また本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、紫外線をUVAとした場合、表皮を透過するUVAの透過率を10%~35%とすることが好ましい。 Further, in the method of estimating the amount of UPE (generated) of the present invention, when ultraviolet rays are UVA, it is preferable that the transmittance of UVA passing through the epidermis is 10% to 35%.

さらに本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、紫外線をUVAとした場合、表皮のUPE(発生)量を、皮膚にUVAを照射して検出されるUPE(検出)量の12.6%~52.7%とし、真皮のUPE(発生)量を、皮膚にUVAを照射して検出されるUPE(検出)量の47.3%~87.4%とすることが好ましい。 Furthermore, in the method of estimating the UPE (generated) amount of the present invention, when ultraviolet rays are UVA, the UPE (generated) amount of the epidermis is 12.6 of the UPE (detected) amount detected by irradiating the skin with UVA. % to 52.7%, and the UPE (generated) amount in the dermis is preferably 47.3% to 87.4% of the UPE (detected) amount detected by irradiating the skin with UVA.

また本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、紫外線をUVBとすることが可能である。 Moreover, in the method of estimating the amount of UPE (generated) of the present invention, it is possible to use UVB instead of ultraviolet rays.

さらに本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、紫外線をUVBとした場合、表皮を透過するUVBの透過率を5%~20%とすることが好ましい。 Furthermore, in the method of estimating the amount of UPE (generated) according to the present invention, it is preferable that the transmittance of UVB that penetrates the epidermis is 5% to 20% when UVB is used as ultraviolet rays.

また本発明のUPE(発生)量を推定する方法において、紫外線をUVBとした場合、表皮のUPE(発生)量を、皮膚にUVBを照射して検出されるUPE(検出)量の40.2%~83.2%とし、真皮のUPE量を、皮膚にUVBを照射して検出されるUPE(検出)量の16.8%~59.8%とすることが好ましい。 Further, in the method of estimating the UPE (generated) amount of the present invention, when ultraviolet rays are UVB, the UPE (generated) amount of the epidermis is 40.2 of the UPE (detected) amount detected by irradiating the skin with UVB. % to 83.2%, and the UPE amount in the dermis is preferably 16.8% to 59.8% of the UPE (detected) amount detected by irradiating the skin with UVB.

また本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、UPEの検出方法として利用することが可能である。 Also, the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention can be used as a method for detecting UPE.

さらに本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、UPE抑制剤の評価方法として利用することが可能である。UPE抑制剤としては、抗酸化剤またはサンスクリーンであることが好ましい。 Furthermore, the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention can be used as a method for evaluating UPE inhibitors. Preferably, the UPE inhibitor is an antioxidant or a sunscreen.

また本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、UPE抑制剤のスクリーニング方法として利用することが可能である。UPE抑制剤としては、抗酸化剤であることが好ましい。さらに本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、サンスクリーン化合物のスクリーニング方法として使用することも可能である。 In addition, the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention can be used as a screening method for UPE inhibitors. Preferably, the UPE inhibitor is an antioxidant. Furthermore, the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention can also be used as a screening method for sunscreen compounds.

また本発明は、本発明のUPE(発生)量を推定する方法に用いられる、撮影装置を備えた機器にも関する。撮影装置としては、電荷結合素子カメラであることが好ましい。また、電荷結合素子カメラとして冷却CCDカメラであることが好ましい。 The present invention also relates to a device equipped with an imaging device for use in the method of estimating the UPE amount of the present invention. The imaging device is preferably a charge-coupled device camera. Further, it is preferable that the charge-coupled device camera is a cooled CCD camera.

本発明によれば、皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する方法を提供することができる。 According to the present invention, it is possible to provide a method for estimating the amount of UPE (generated) derived from skin tissue.

UVAを照射した真皮層と表皮層(左)およびUVBを照射した真皮層と表皮層(右)から放出されるUPEの観察結果を示した図である。FIG. 3 shows observation results of UPE released from UVA-irradiated dermal and epidermal layers (left) and from UVB-irradiated dermal and epidermal layers (right). UVAを照射した真皮層と表皮層からのUPEを数値化した結果(左)およびUVBを照射した真皮層と表皮層からのUPEを数値化した結果(右)を示した図である。FIG. 2 is a diagram showing the results of quantifying UPE from UVA-irradiated dermis and epidermis layers (left) and the results of quantifying UPE from UVB-irradiated dermis and epidermis layers (right). 図2のグラフの実際の数値およびUPEの増加度合を示した図である。FIG. 3 is a diagram showing the actual numerical values in the graph of FIG. 2 and the degree of increase in UPE; 表皮を透過するUVの値の一例を示した、文献値(Ultraviolet Radiation (EHC 160, 1994, 2nd edition)を示した図である。FIG. 2 is a diagram showing literature values (Ultraviolet Radiation (EHC 160, 1994, 2nd edition)) showing an example of values of UV transmitted through the epidermis. 実施例において得られた、皮膚全体のUPEに占める表皮UPEと真皮UPEの割合を示した図である。FIG. 2 is a diagram showing the ratio of epidermal UPE and dermal UPE to total skin UPE, obtained in Examples. 紫外線照射による表皮層および真皮層におけるUPE(発生)量の推定式を示した図である。FIG. 4 is a diagram showing an estimation formula for the amount of UPE (generated) in the epidermis layer and the dermis layer by ultraviolet irradiation. 紫外線照射による表皮層および真皮層におけるUPE(発生)量の推定式を示した図である。FIG. 4 is a diagram showing an estimation formula for the amount of UPE (generated) in the epidermis layer and the dermis layer by ultraviolet irradiation. 紫外線照射による表皮層および真皮層におけるUPE(発生)量の推定式を示した図である。FIG. 4 is a diagram showing an estimation formula for the amount of UPE (generated) in the epidermis layer and the dermis layer by ultraviolet irradiation. 照射した紫外線(UVA, UVB)量とUPE増加度(ΔUPE)の関係を示した図である。FIG. 4 is a diagram showing the relationship between the amount of irradiated ultraviolet rays (UVA, UVB) and the degree of increase in UPE (ΔUPE).

以下、本発明の一実施形態について詳細に説明する。本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、本発明の効果を阻害しない範囲で適宜変更を加えて実施することができる。 An embodiment of the present invention will be described in detail below. The present invention is not limited to the following embodiments, and can be implemented with appropriate modifications within the scope that does not impair the effects of the present invention.

[各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する方法]
皮膚に電磁波を照射することにより生じるUPE(発生)量は、照射した電磁波の強度に応じて変化する。また、照射した電磁波が到達する皮膚組織の種類によっても生じるUPE(発生)量は変化する。ここで、各皮膚組織へ到達する電磁波強度は、当該皮膚組織までの電磁波の透過率に応じて変化する。さらには、各皮膚組織で生じたUPE(発生)量についても、その最外部までの透過率に応じて、外部から検出されるUPE(検出)量は変化する。そこで、本発明の1の態様は皮膚に電磁波を照射し、検出されるUPE(検出)量を測定する方法において、あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織から放出されるUPE(発生)量の検出結果を用いて、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する方法に関する。当該推定方法は、あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量の検出結果を用いる。具体的に、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する方法は、以下の:
予め細分化された各皮膚組織に、電磁波を照射し、各皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量を検出する工程、及び
皮膚に照射された電磁波により放出されるUPE(検出)量から、前記各皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量の検出結果を考慮して、前記各皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する工程
を含む。
[Method for estimating the amount of UPE (generated) derived from each skin tissue]
The amount of UPE (generated) generated by irradiating the skin with electromagnetic waves changes according to the intensity of the irradiated electromagnetic waves. The amount of UPE (generated) also changes depending on the type of skin tissue that the irradiated electromagnetic wave reaches. Here, the intensity of the electromagnetic wave reaching each skin tissue changes according to the transmittance of the electromagnetic wave to the skin tissue. Furthermore, regarding the amount of UPE (generated) generated in each skin tissue, the amount of UPE (detected) detected from the outside changes according to the transmittance up to the outermost layer. Therefore, one aspect of the present invention is a method of irradiating the skin with electromagnetic waves and measuring the amount of UPE (detection) detected, wherein UPE released from a plurality of skin tissues obtained when the skin is subdivided in advance ( The present invention relates to a method for estimating the UPE (generated) amount derived from each skin tissue using the detection result of the generated) amount. The estimation method uses detection results of the amount of UPE (generated/detected) emitted from a plurality of skin tissues obtained when the skin is subdivided in advance. Specifically, the method for estimating the amount of UPE derived from each skin tissue is as follows:
A step of irradiating each skin tissue subdivided in advance with electromagnetic waves and detecting the amount of UPE (generated/detected) emitted from each skin tissue, and the amount of UPE (detected) emitted by the electromagnetic waves irradiated to the skin. estimating the amount of UPE (generated/detected) from each of the skin tissues, considering the detection result of the amount of UPE (generated/detected) released from each of the skin tissues.

前記推定工程において、前記各皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量の検出結果に基づいて算出された定数に基づき、前記各皮膚組織由来のUPE(発生)量が推定される。より具体的に各皮膚組織の定数を、検出されたUPE(検出)量に乗算することで、前記各皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定することができる。 In the estimation step, the UPE (generated/detected) amount derived from each skin tissue is estimated based on a constant calculated based on the detection result of the UPE (generated/detected) amount released from each skin tissue. More specifically, by multiplying the detected UPE (detected) amount by the constant of each skin tissue, the UPE (generated) amount derived from each skin tissue can be estimated.

真皮層より深部の組織由来のUPEは、微弱であることと、並びに真皮層の厚さのため、外側からの検出量は、通常無視できる程度に少ないと考えられる。したがって、UPE(検出)量が、UPEが表皮と真皮とからのみ生じると仮定した場合、下記式:

Figure 0007333512000001
(式中、
Kは、細分化された表皮から放出されるUPE(発生/検出)量に対する、細分化された真皮から放出されるUPE(発生/検出)量の比を表し、
TV表皮における可視光の透過率を表し、
TEは、電磁波の表皮の透過率を表す)
により定数を決定することができる。
これらの定数について、TVを、1で近似することもでき、その場合、下記式:
Figure 0007333512000002
(式中、
Kは、細分化された表皮から放出されるUPE(発生/検出)量に対する、細分化された真皮から放出されるUPE(発生/検出)量の比を表し、
TEは、電磁波の表皮の透過率を表す)
により表される。これらの定数については、図7及び図8の数式を参照することで算出することができる。 Since UPE derived from tissues deeper than the dermis layer is weak and the thickness of the dermis layer, the amount detected from the outside is usually considered to be negligible. Therefore, the amount of UPE (detected) is given by the following formula, assuming that UPE originates only from the epidermis and dermis:
Figure 0007333512000001
(In the formula,
K represents the ratio of the amount of UPE (generated/detected) released from the subdivided dermis to the amount of UPE (generated/detected) released from the subdivided epidermis,
TV represents the transmittance of visible light in the epidermis ,
TE represents the transmittance of the skin for electromagnetic waves)
The constant can be determined by
For these constants, T V can also be approximated by 1, in which case:
Figure 0007333512000002
(In the formula,
K represents the ratio of the amount of UPE (generated/detected) released from the subdivided dermis to the amount of UPE (generated/detected) released from the subdivided epidermis,
TE represents the transmittance of the skin for electromagnetic waves)
is represented by These constants can be calculated by referring to the formulas shown in FIGS.

[電磁波]
本発明において用いられる電磁波としては、電波、赤外線、可視光線、紫外線、X線、γ線などが挙げられる。これらのうち、皮膚に与えるダメージの観点から、本発明においては紫外線が好ましく用いられる。紫外線としては、UVA(波長320~400nm)とUVB(波長280~320nm)が好ましく用いられる。
[Electromagnetic waves]
Electromagnetic waves used in the present invention include radio waves, infrared rays, visible rays, ultraviolet rays, X-rays, and gamma rays. Among these, ultraviolet light is preferably used in the present invention from the viewpoint of damaging the skin. UVA (wavelength: 320 to 400 nm) and UVB (wavelength: 280 to 320 nm) are preferably used as ultraviolet rays.

電磁波は表皮でUPEを発生させるとともに、表皮を透過し真皮においてもUPEを生じさせる。電磁波の表皮の透過率をTEとして表す。電磁波の表皮の透過率は、電磁波の種類に応じて異なる。電磁波がUVを指すときは、表皮透過率をTUVとして表し、さらにUVAやUVBを指すときには、それぞれ表皮透過率はTUVA、TUVBとして表すことができる。 Electromagnetic waves generate UPE in the epidermis, and penetrate the epidermis to generate UPE in the dermis as well. Denote the transmissivity of the skin for electromagnetic waves as T E . The transmittance of the skin for electromagnetic waves varies depending on the type of electromagnetic waves. When the electromagnetic wave refers to UV, the skin transmittance can be expressed as T UV , and when it refers to UVA or UVB, the skin transmittance can be expressed as T UVA and T UVB , respectively.

また、表皮を透過するUVAの透過率(TUVA)を10%~35%とすることが好ましく、15%~30%とすることがより好ましい。また、表皮を透過するUVBの透過率(TUVB)を5%~20%とすることが好ましく、6%~15%とすることがより好ましい。 Also, the transmittance of UVA through the epidermis (T UVA ) is preferably 10% to 35%, more preferably 15% to 30%. Also, the transmittance of UVB that penetrates the epidermis (T UVB ) is preferably 5% to 20%, more preferably 6% to 15%.

[皮膚]
本発明で電磁波を照射する皮膚は、哺乳動物、例えばヒトの皮膚であってもよいし、皮膚試料であってもよく、さらに別の態様では、培養皮膚、例えば3次元皮膚モデルを用いてもよい。ヒト生体の皮膚に対し、電磁波を照射して、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定することができる。
[Skin]
The skin to be irradiated with electromagnetic waves in the present invention may be mammalian skin, such as human skin, or may be a skin sample. In still another embodiment, cultured skin, such as a three-dimensional skin model good. By irradiating the skin of a living human body with electromagnetic waves, it is possible to estimate the amount of UPE (generated) derived from each skin tissue.

[皮膚組織]
皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織由来のUPE(発生)量を検出する際に用いられる皮膚(皮膚組織)としては、例えば美容整形術の際に切除された皮膚組織から調製された、市販のものを用いることができる。一例として、BIOPEWDIC International社製のものが利用可能である。用いられる皮膚組織としては、表皮または真皮であることが好ましい。さらに別の態様では、培養皮膚、例えば3次元皮膚モデルを用いてもよい。
[Skin tissue]
The skin (skin tissue) used for detecting the amount of UPE (generated) derived from multiple skin tissues obtained when the skin is subdivided includes, for example, skin tissue excised during cosmetic surgery. Alternatively, commercially available products can be used. An example is available from BIOPEWDIC International. The skin tissue used is preferably epidermis or dermis. In yet another aspect, cultured skin, such as a three-dimensional skin model, may be used.

[皮膚の細分化]
皮膚を細分化するとは、皮膚組織を組織ごとに切り分けることをいう。ここで、真皮層より深部の組織由来のUPEの(検出)量は、通常無視できる程度に少ないと考えられる。したがってUPEを測定する方法において、UPEが表皮と真皮とからのみ生じるものと仮定することができ、その場合には、皮膚の細分化とは、皮膚組織を表皮と真皮のみについて切り分けることをいう。あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織由来のUPE(発生/検出)量とは、あらかじめ皮膚を組織別に細分化し、細分化された各皮膚組織に対して電磁波を照射することで、各皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量のことをいう。あらかじめ皮膚を組織別に細分化し、細分化された各皮膚組織に対して電磁波を照射してUPEを検出することから、この場合のUPEの発生量と検出量は同一とみなすことができる。各皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量は、電磁波を照射した際に各皮膚組織において増加したUPE量(UPE増加度)ということもできる。
[Skin segmentation]
Subdividing the skin refers to cutting the skin tissue into individual tissues. Here, the (detected) amount of UPE derived from tissues deeper than the dermis layer is generally considered to be negligible. Therefore, in the method of measuring UPE, it can be assumed that UPE arises only from the epidermis and dermis, in which case skin segmentation refers to the division of skin tissue into epidermis and dermis only. The amount of UPE (generated/detected) derived from multiple skin tissues obtained when the skin is subdivided in advance is obtained by subdividing the skin into different tissues in advance and irradiating each subdivided skin tissue with electromagnetic waves. , refers to the amount of UPE (generated/detected) emitted from each skin tissue. Since the skin is subdivided into different tissues in advance and each subdivided skin tissue is irradiated with electromagnetic waves to detect UPE, the amount of UPE generated and detected in this case can be regarded as the same. The amount of UPE (generated/detected) emitted from each skin tissue can also be said to be the amount of UPE (UPE increase) increased in each skin tissue upon irradiation with electromagnetic waves.

[UPE量]
後述する実施例で得られた結果から、本発明のUPE(発生)量を推定する方法において電磁波としてUVAを用いた場合、表皮のUPE(発生)量を12.6%~52.7%とすることが好ましく、20.9%~37.0%とすることがより好ましい。また、電磁波としてUVAを用いた場合、真皮のUPE(発生)量を47.3%~87.4%とすることが好ましく、63.0%~79.1%とすることがより好ましい。また、電磁波としてUVBを用いた場合、表皮のUPE(発生)量を40.2%~83.2%とすることが好ましく、58.6%~72.3%とすることがより好ましい。また、電磁波としてUVBを用いた場合、真皮のUPE(発生)量を16.8%~59.8%とすることが好ましく、27.7%~41.4%とすることがより好ましい。
[UPE amount]
From the results obtained in the examples described later, when UVA is used as an electromagnetic wave in the method of estimating the UPE (generated) amount of the present invention, the UPE (generated) amount of the epidermis is 12.6% to 52.7%. preferably 20.9% to 37.0%. Further, when UVA is used as electromagnetic waves, the UPE (generated) amount in the dermis is preferably 47.3% to 87.4%, more preferably 63.0% to 79.1%. Further, when UVB is used as electromagnetic waves, the amount of UPE (generated) in the epidermis is preferably 40.2% to 83.2%, more preferably 58.6% to 72.3%. Further, when UVB is used as electromagnetic waves, the amount of UPE (generated) in the dermis is preferably 16.8% to 59.8%, more preferably 27.7% to 41.4%.

[UPEの検出方法]
また、本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、UPEの検出方法として利用することが可能である。
[Detection method of UPE]
Also, the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention can be used as a method for detecting UPE.

[UPE抑制剤の評価方法]
さらに、本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、UPE抑制剤の評価方法として利用することが可能である。UPE抑制剤としては、抗酸化剤またはサンスクリーンであることが好ましい。UPE抑制剤を皮膚に塗布すると、皮膚に電磁波を照射した際に放出されるUPE(発生)量が低減する。
[Evaluation method of UPE inhibitor]
Furthermore, the method for estimating the amount of UPE (generated) according to the present invention can be used as a method for evaluating UPE inhibitors. Preferably, the UPE inhibitor is an antioxidant or a sunscreen. Applying a UPE inhibitor to the skin reduces the amount of UPE (generated) released when the skin is irradiated with electromagnetic waves.

[UPE抑制剤のスクリーニング方法]
また、本発明のUPE(発生)量を推定する方法は、UPE抑制剤のスクリーニング方法として利用することが可能である。具体的には、UPE抑制剤のスクリーニング方法は、以下の工程:
皮膚又は皮膚試料に電磁波を照射し;
照射後の皮膚又は皮膚試料に候補物質を塗布し;
放出されるUPE(検出)量を測定し;
あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量の検出結果を用いて、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定し、
候補物質を塗布していない対照群と比較して、目的の皮膚組織におけるUPE(発生)量が低減する場合に、候補物質をUPE抑制剤として選択する
を含む。このスクリーニング方法では、電磁波照射後の遅延発光に対する候補物質のUPE抑制作用に基づいて、UPE抑制剤のスクリーニングが可能になる。こうしてスクリーニングされたUPE抑制剤としては、抗酸化物質、抗炎症物質などが挙げられる。電磁波照射後に、候補物質を塗布することにより、候補物質が照射された電磁波を遮ることがなく、また電磁波により変化した候補物質が皮膚に与える影響を排除することができる。候補物質を塗布していない対照群は、候補物質を塗布していない点のみで相違する。対照群における実験は、並行して実施されてもよいし、別途実施されていてもよい。対照群は、電磁波照射後に、皮膚試料に候補物質を塗布前に測定された放出されるUPE(検出)量であってもよい。
[Screening method for UPE inhibitor]
In addition, the method for estimating the amount of UPE (generated) of the present invention can be used as a screening method for UPE inhibitors. Specifically, the method of screening for UPE inhibitors comprises the following steps:
irradiating the skin or skin sample with electromagnetic waves;
applying a candidate substance to the irradiated skin or skin sample;
measuring the amount of UPE (detected) released;
Estimate the UPE (generated) amount derived from each skin tissue using the detection results of the UPE (generated/detected) amount released from multiple skin tissues obtained when the skin is subdivided in advance,
Selecting a candidate substance as a UPE inhibitor if it reduces the amount of UPE (generated) in the skin tissue of interest compared to a control group where the candidate substance is not applied. This screening method enables screening of UPE inhibitors based on the UPE inhibitory action of candidate substances on delayed luminescence after electromagnetic wave irradiation. UPE inhibitors thus screened include antioxidants, anti-inflammatory agents, and the like. By applying the candidate substance after the electromagnetic wave irradiation, the candidate substance does not block the irradiated electromagnetic wave, and the influence of the candidate substance changed by the electromagnetic wave on the skin can be eliminated. A control group with no application of the candidate substance differs only in that no candidate substance has been applied. Experiments in control groups may be performed in parallel or separately. The control group may be the amount of released UPE (detected) measured before application of the candidate substance to the skin sample after electromagnetic irradiation.

さらなる態様では、候補物質を塗布後、UPE(検出)量を測定する前に、候補物質を除去する工程をさらに含んでもよい。候補物質を除去することにより、微弱なUPEが、塗布された候補物質により減弱されることを防ぐことができる。 A further embodiment may further comprise removing the candidate substance after applying the candidate substance and before measuring the UPE (detectable) amount. By removing the candidate substance, the weak UPE can be prevented from being attenuated by the applied candidate substance.

本発明の別の態様では、UPE抑制剤のスクリーニング方法として、以下の工程:
皮膚又は皮膚試料に候補物質を塗布し;
皮膚又は皮膚試料に電磁波を照射し、放出されるUPEのUPE(検出)量を測定し、
あらかじめ皮膚を細分化した際に得られる複数の皮膚組織から放出されるUPE(発生/検出)量の検出結果を用いて、各々の皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定し、
候補物質を塗布していない対照群と比較して、目的の皮膚組織におけるUPE(発生)量が低減する場合に、候補物質をUPE抑制剤として選択する
を含む、スクリーニング方法にも関する。このスクリーニング方法では、UPE発生に関わる電磁波を低減することで、UPE抑制作用を発揮するUPE抑制剤のスクリーニングが可能になる。候補物質を塗布していない対照群は、候補物質を塗布していない点のみで相違する。対照群における実験は、並行して実施されてもよいし、別途実施されていてもよい。候補物質は、既知の化粧品用の素材ライブラリー、化合物ライブラリー、医薬品ライブラリーに含まれる物質であってよい。
In another aspect of the present invention, a method for screening UPE inhibitors comprises the following steps:
applying a candidate substance to the skin or skin sample;
Irradiate the skin or skin sample with electromagnetic waves, measure the UPE (detection) amount of the released UPE,
Estimate the UPE (generated) amount derived from each skin tissue using the detection results of the UPE (generated/detected) amount released from multiple skin tissues obtained when the skin is subdivided in advance,
Selecting a candidate substance as a UPE inhibitor if it reduces the amount of UPE (generated) in the skin tissue of interest compared to a control group to which the candidate substance is not applied. This screening method makes it possible to screen for UPE inhibitors that exhibit UPE inhibitory action by reducing the electromagnetic waves involved in UPE generation. A control group with no application of the candidate substance differs only in that no candidate substance has been applied. Experiments in control groups may be performed in parallel or separately. Candidate substances may be substances contained in known cosmetic material libraries, compound libraries, drug libraries.

さらなる態様では、電磁波の照射後に、塗布された候補物質を除去してもよい。電磁波を照射した場合に、候補物質が微弱光を発する場合もあり、候補物質を除去することで、皮膚又は皮膚試料由来のUPE発生量を正確に推定することができる。 In a further aspect, the applied candidate substance may be removed after irradiation with electromagnetic waves. In some cases, the candidate substance emits weak light when irradiated with electromagnetic waves, and by removing the candidate substance, the amount of UPE generated from the skin or skin sample can be accurately estimated.

[UPE(発生)量を推定する方法に用いられる撮影装置を備えた機器]
また本発明は、本発明のUPE(発生)量を推定する方法に用いられる、撮影装置及び電磁波照射装置を備えた機器にも関する。撮影装置としては、電荷結合素子カメラや光電子増倍管(PMT)を備えたフォトンカウンターを用いることができる。電荷結合素子カメラとしては、冷却CCDカメラであることが好ましい。電磁波照射装置は、電磁波の種類に応じて適宜選択することができ、UVを用いる場合にはUV光源と、所望される波長のみを通過するフィルターにより構成されうる。
[Equipment equipped with an imaging device used in a method for estimating the amount of UPE (generated)]
The present invention also relates to a device provided with an imaging device and an electromagnetic wave irradiation device, which are used in the method of estimating the UPE (generated) amount of the present invention. A charge-coupled device camera or a photon counter equipped with a photomultiplier tube (PMT) can be used as an imaging device. The charge-coupled device camera is preferably a cooled CCD camera. The electromagnetic wave irradiation device can be appropriately selected according to the type of electromagnetic wave, and when UV is used, it can be composed of a UV light source and a filter that passes only desired wavelengths.

本発明の1の態様では、入力部、記憶部、処理部、撮影部及び電磁波照射部を備えたUPE測定機器に関してもよい。UPE測定機器において、以下の処理:
記憶部が、入力部から入力された各皮膚組織のUPE(発生)量推定用の定数を記憶し、
電磁波照射部が、皮膚に対し電磁波を照射し、
撮影部が、UPE(検出)量を測定し、
処理部が、記憶部に記憶された各皮膚組織のUPE(発生)量推定用の定数を、測定されたUPE(検出)量に乗じて、各皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する
が行われる。
A first aspect of the present invention may also relate to a UPE measuring device comprising an input unit, a storage unit, a processing unit, an imaging unit, and an electromagnetic wave irradiation unit. In the UPE measuring equipment, the following processes:
The storage unit stores a constant for estimating the UPE (generated) amount of each skin tissue input from the input unit,
The electromagnetic wave irradiation unit irradiates the skin with electromagnetic waves,
The imaging unit measures the amount of UPE (detection),
The processing unit multiplies the measured UPE (detected) amount by the constant for estimating the UPE (generated) amount of each skin tissue stored in the storage unit to estimate the UPE (generated) amount derived from each skin tissue. is done.

さらに別の態様では、入力部、記憶部、処理部、撮影部及び電磁波照射部を備えたUPE測定機器を作動する指令を含むプログラム、並びにかかるプログラムを格納する記憶媒体に関していてもよい。当該プログラムは、以下の処理:
記憶部が、入力部から入力された各皮膚組織のUPE(発生)量推定用の定数を記憶し、
電磁波照射部が、皮膚に対し電磁波を照射し、
撮影部が、UPE(検出)量を測定し、
処理部が、記憶部に記憶された各皮膚組織のUPE(発生)量推定用の定数を、測定されたUPE(検出)量に乗じて、各皮膚組織由来のUPE(発生)量を推定する
を行う指令を含む。
Still another aspect may relate to a program including instructions for operating a UPE measuring device having an input unit, a storage unit, a processing unit, an imaging unit and an electromagnetic wave irradiation unit, and a storage medium storing such a program. The program processes the following:
The storage unit stores a constant for estimating the UPE (generated) amount of each skin tissue input from the input unit,
The electromagnetic wave irradiation unit irradiates the skin with electromagnetic waves,
The imaging unit measures the amount of UPE (detection),
The processing unit multiplies the measured UPE (detected) amount by the constant for estimating the UPE (generated) amount of each skin tissue stored in the storage unit to estimate the UPE (generated) amount derived from each skin tissue. including directives to

本明細書において言及される全ての文献はその全体が引用により本明細書に取り込まれる。以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。本発明の趣旨を逸脱しないことを条件として、本発明の変更、例えば、本発明の構成要件の追加、削除及び置換を行うことができる。 All documents mentioned herein are hereby incorporated by reference in their entirety. The embodiments of the invention described below are for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the invention. The technical scope of the present invention is limited only by the description of the claims. Modifications of the present invention, such as additions, deletions and replacements of constituent elements of the present invention, can be made without departing from the gist of the present invention.

[実施例1]
<実験方法>
(1)約1cm四方のヒト皮膚組織を、表皮層と真皮層に分けた。
(2)紫外線照射器(デルマレイ200)を用いて、表皮層と真皮層のそれぞれの層にUVA 1,100/cm2またはUVB 230mJ/cm2を照射した。
(3)暗室下において、CCDカメラシステムを用いてUV照射皮膚(表皮層と真皮層)およびUV非照射皮膚(表皮層と真皮層)のUPEを5min 測定した。
(4)画像解析ソフト(ImageJ)を用いて、UPE強度を算出した。
(5)UV照射皮膚(表皮層と真皮層)のUPE強度からUV非照射皮膚(表皮層と真皮層)のUPE強度を差し引き、UPE増加度を求めた。
(6)真皮層のUPE増加度に関しては、さらにUVの真皮層への透過率を掛け、表皮層におけるUV強度の減衰を考慮した。
(7)(5)で求めた表皮層UPE増加度と(6)で求めた真皮UPE増加度の比率を計算し、UV照射された際の皮膚全体のUPE増加における表皮層と真皮層の寄与率を求めた。
[Example 1]
<Experimental method>
(1) A human skin tissue of about 1 cm square was divided into an epidermis layer and a dermis layer.
(2) UVA 1,100/cm 2 or UVB 230 mJ/cm 2 was irradiated to each of the epidermis layer and the dermis layer using an ultraviolet irradiator (Delmarray 200).
(3) Using a CCD camera system, the UPE of UV-irradiated skin (epidermal layer and dermal layer) and UV-unirradiated skin (epidermal layer and dermal layer) was measured for 5 min in a dark room.
(4) UPE intensity was calculated using image analysis software (ImageJ).
(5) The UPE intensity of UV-irradiated skin (epidermal layer and dermal layer) was subtracted from the UPE intensity of UV-unirradiated skin (epidermal layer and dermal layer) to determine the degree of increase in UPE.
(6) Regarding the degree of UPE increase in the dermis layer, the UV transmittance to the dermis layer was further multiplied, and the attenuation of the UV intensity in the epidermis layer was taken into consideration.
(7) Calculate the ratio of the increase in the epidermal layer UPE obtained in (5) and the increase in the dermal UPE obtained in (6), and the contribution of the epidermal and dermal layers to the UPE increase of the entire skin when exposed to UV light. asked for a rate.

図1の左側の部分に、UVAを照射した真皮層と表皮層の観察結果を示す。図に示されているように、真皮層からのUPEが顕著に観察された。また、図1の右側の部分に、UVBを照射した真皮層と表皮層の観察結果を示す。この結果においてもまた、真皮層からのUPEが顕著に観察された。 The left part of FIG. 1 shows the observation results of the dermis layer and the epidermis layer irradiated with UVA. As shown in the figure, UPE from the dermal layer was significantly observed. In addition, the right part of FIG. 1 shows the observation results of the dermis layer and the epidermis layer irradiated with UVB. Also in this result, UPE from the dermis layer was significantly observed.

図2の左側の部分に、UVAを照射した真皮層と表皮層からのUPEを数値化した結果を示す。真皮層からのUPEが顕著に観察された、図1の左側の部分の結果が数値にも反映されていた。また、図2の右側の部分に、UVBを照射した真皮層と表皮層からのUPEを数値化した結果を示す。この部分においても、真皮層からのUPEが顕著に観察された、図1の右側の部分の結果が数値にも反映されていた。 The left part of FIG. 2 shows the results of quantifying UPE from the UVA-irradiated dermis and epidermis. The results in the left part of FIG. 1, in which UPE from the dermis layer was observed remarkably, were also reflected in the numerical values. The right part of FIG. 2 shows the results of quantifying the UPE from the UVB-irradiated dermis layer and epidermis layer. Also in this part, the results of the right part of FIG. 1, in which UPE from the dermis layer was significantly observed, were reflected in the numerical values.

図2のグラフの実際の数値を図3に示す。UVAを照射した真皮のUPE増加度合(ΔUPE)は165.75であり、UVAを照射した表皮のΔUPEは8.34であった。一方、UVBを照射した真皮のΔUPEは100.26であり、UVBを照射した表皮のΔUPEは13.50であった。 Actual numerical values for the graph of FIG. 2 are shown in FIG. The degree of UPE increase (ΔUPE) of the UVA-irradiated dermis was 165.75, and the ΔUPE of the UVA-irradiated epidermis was 8.34. On the other hand, the ΔUPE of the UVB-irradiated dermis was 100.26, and the ΔUPE of the UVB-irradiated epidermis was 13.50.

なお、表皮を透過するUVの文献値(Ultraviolet radiation (EHC 160, 1994, 2nd edition))の一例を図4に示す。この文献値においては、表皮を透過するUVAの割合は19.0%であり、表皮を透過するUVBの割合は9.5%であった。 FIG. 4 shows an example of the literature value of UV transmitted through the epidermis (Ultraviolet radiation (EHC 160, 1994, 2nd edition)). In this literature value, the percentage of UVA that penetrates the epidermis was 19.0%, and the percentage of UVB that penetrated the epidermis was 9.5%.

また、本実施例において得られた、皮膚全体のUPEに占める真皮UPEの割合を図5に示す。図5に示す通り、UVAの照射時においては、
皮膚全体のUPEに占める真皮UPEの割合=真皮ΔUPE×UVA透過率 / (表皮ΔUPE + 真皮ΔUPE×UVA透過率)
で計算され、結果は79.1%となる。
同様に、UVBの照射時においては、
皮膚全体のUPEに占める真皮UPEの割合=真皮ΔUPE×UVB透過率 / (表皮ΔUPE + 真皮ΔUPE×UVB透過率)
で計算され、結果は41.4%となる。
Further, FIG. 5 shows the ratio of dermal UPE to UPE of the whole skin obtained in this example. As shown in FIG. 5, during UVA irradiation,
Percentage of dermal UPE to total skin UPE = Dermal ΔUPE x UVA transmittance / (Epidermal ΔUPE + Dermal ΔUPE x UVA transmittance)
and the result is 79.1%.
Similarly, during UVB irradiation,
Percentage of dermal UPE to total skin UPE = Dermal ΔUPE x UVB transmittance / (Epidermal ΔUPE + Dermal ΔUPE x UVB transmittance)
and the result is 41.4%.

上記の結果をまとめた、皮膚全体のUPE増加における表皮層と真皮層の寄与率の算出結果を表1に示す。 Table 1 summarizes the above results and shows the calculation results of the contribution rate of the epidermis layer and the dermis layer to the increase in UPE in the entire skin.

Figure 0007333512000003
Figure 0007333512000003

[実施例2]
実施例1とは異なる皮膚を用い、実施例1と同様に実験を行った。実施例2における、皮膚全体のUPE増加における表皮層と真皮層の寄与率の算出結果を表2に示す。
[Example 2]
An experiment was conducted in the same manner as in Example 1 using a different skin from that in Example 1. Table 2 shows the calculation results of the contribution rate of the epidermis layer and the dermis layer to the increase in UPE of the whole skin in Example 2.

Figure 0007333512000004
Figure 0007333512000004

表1、2の結果を踏まえ、UVAの表皮の透過率(10%~35%)、及びUVBの表皮の透過率(5%~20%)として、UVA及びUVBについてUPE(発生)量推定用の定数を求めると、一例として以下の推測式が導き出される。
・UVA用の推測式
表皮のUPE=Total UPE (by UVA) ×(0.126~0.527)
真皮のUPE=Total UPE (by UVA) ×(0.473~0.874)
・UVB用の推測式
表皮のUPE=Total UPE (by UVB) ×(0.402~0.832)
真皮のUPE=Total UPE (by UVB) ×(0.168~0.598)
Based on the results in Tables 1 and 2, the transmittance of the UVA epidermis (10% to 35%) and the transmittance of the UVB epidermis (5% to 20%) are used to estimate the amount of UPE (generated) for UVA and UVB. , the following estimation formula is derived as an example.
・Estimated formula for UVA Epidermal UPE=Total UPE (by UVA) ×(0.126~0.527)
Dermal UPE = Total UPE (by UVA) × (0.473-0.874)
・Estimated formula for UVB Epidermal UPE=Total UPE (by UVB) ×(0.402~0.832)
Dermal UPE = Total UPE (by UVB) × (0.168-0.598)

また、図6、図7、図8に紫外線照射による表皮層および真皮層におけるUPE量の推定式を示す。図8は、実質的に上記の表1の結果を反映したものである。 Figures 6, 7 and 8 show the formulas for estimating the amount of UPE in the epidermis layer and dermis layer by ultraviolet irradiation. FIG. 8 substantially reflects the results of Table 1 above.

[実施例3]
<実験方法>
(1)紫外線照射器(デルマレイ200)を用いて、ヒト皮膚組織に図9のグラフの横軸に示す照射量のUVA(左), UVB(右)を照射した。
(2)暗室下において、CCDカメラシステムを用いてUV照射前後の皮膚のUPEを5min 測定した。
(3)画像解析ソフト(ImageJ)を用いて、UPE強度を算出した。
(4)UV照射した皮膚のUPE強度からUV照射前の皮膚のUPE強度を差し引き、UPE増加度(ΔUPE)を求めた。
[Example 3]
<Experimental method>
(1) Using an ultraviolet irradiator (Delmarray 200), human skin tissue was irradiated with UVA (left) and UVB (right) in doses shown on the horizontal axis of the graph in FIG.
(2) UPE of the skin before and after UV irradiation was measured for 5 minutes in a dark room using a CCD camera system.
(3) UPE intensity was calculated using image analysis software (ImageJ).
(4) The UPE intensity of the skin before UV irradiation was subtracted from the UPE intensity of the UV-irradiated skin to obtain the degree of increase in UPE (ΔUPE).

図9に示す通り、UVA, UVBのいずれを照射した場合においても、照射量の増大に伴い、UPE増加度(ΔUPE)は上昇していた。 As shown in FIG. 9, the degree of increase in UPE (ΔUPE) increased with an increase in the dose of UVA or UVB irradiation.

本実験結果より、少なくともUVAでは140mJ/cm2以上、UVBでは40 mJ/cm2以上照射した際に発生するUPEが、本発明の推測式に適用されると考えられる。またこの結果が示すように、紫外線の照射量に応じてUPEは増加するため、本発明の推測式に適用されるUV照射量の上限は設定しなくてもよいものと思われる。 From the results of this experiment, it is considered that the UPE generated when at least 140 mJ/cm 2 of UVA and 40 mJ/cm 2 or more of UVB are applied to the estimation formula of the present invention. In addition, as this result shows, the UPE increases according to the UV dose, so it is considered unnecessary to set the upper limit of the UV dose applied to the estimation formula of the present invention.

また装置の特性上、UVA140 mJ/cm2以下、UVB40 mJ/cm2以下の照射量で発生するUPEを検出することは困難ではあるが、装置を変えてUPEを検出することができるのであれば、上記の結果より少ない照射量で発生するUPEに対しても本発明の推測式は適用されるものと考えられる。 In addition, due to the characteristics of the equipment, it is difficult to detect UPE generated at UVA 140 mJ/cm 2 or less and UVB 40 mJ/cm 2 or less, but if it is possible to detect UPE by changing the equipment It is considered that the estimation formula of the present invention is also applicable to UPE generated at a dose smaller than the above result.

Claims (17)

電磁波を照射された各皮膚組織由来のUPE発生量を推定する方法であって、
皮膚に電磁波を照射し、放出されるUPEを測定してUPE検出量を決定する工程;及び
あらかじめ皮膚を細分化し、電磁波を照射された細分化された皮膚組織から放出されるUPEの検出結果と、当該皮膚組織までの電磁波の透過率、並びに発生したUPEの最外部までの透過率とを考慮して、前記UPE検出量から、各皮膚組織由来のUPE発生量を推定する工程
を含む前記方法。
A method for estimating the amount of UPE generated from each skin tissue irradiated with electromagnetic waves,
A step of irradiating the skin with electromagnetic waves and measuring the amount of UPE emitted to determine the detected amount of UPE; , the step of estimating the amount of UPE generated from each skin tissue from the amount of UPE detected, taking into consideration the transmittance of electromagnetic waves to the skin tissue and the transmittance to the outermost part of the generated UPE. .
前記皮膚組織が表皮または真皮である、請求項1に記載のUPE発生量を推定する方法。 The method for estimating UPE yield according to claim 1, wherein said skin tissue is epidermis or dermis. 前記推定工程が、以下の:
(式中、
Kは、細分化された表皮から放出されるUPE発生量に対する、細分化された真皮から放出されるUPE発生量の比を表し、
表皮における可視光の透過率を表し、
は、電磁波の表皮の透過率を表す)
で表される表皮由来のUPE発生量の推定用の定数及び真皮由来のUPE発生量の推定用の定数を算出し、斯かる定数を、UPE検出量に乗じることにより、表皮由来のUPE発生量又は真皮由来UPE発生量を推定する、請求項2に記載の方法。
The estimating step includes:
(In the formula,
K represents the ratio of the amount of UPE released from the fragmented dermis to the amount of UPE released from the fragmented epidermis,
TV represents the transmittance of visible light in the epidermis ,
TE represents the transmittance of the skin for electromagnetic waves)
By calculating the constant for estimating the amount of UPE generated from the epidermis and the constant for estimating the amount of UPE generated from the dermis represented by and multiplying such a constant by the detected amount of UPE, the amount of UPE generated from the epidermis Or the method according to claim 2, which estimates the amount of UPE generated from the dermis.
前記電磁波が紫外線である、請求項2又は3に記載のUPE発生量を推定する方法。 4. The method for estimating the UPE yield according to claim 2 or 3, wherein the electromagnetic waves are ultraviolet rays. 前記紫外線がUVAである、請求項4に記載のUPE発生量を推定する方法。 5. The method of estimating UPE yield according to claim 4, wherein the ultraviolet light is UVA. 前記表皮を透過するUVAの透過率を10%~35%とする、請求項5に記載のUPE発生量を推定する方法。 The method for estimating the amount of UPE generated according to claim 5, wherein the transmittance of UVA that penetrates the epidermis is 10% to 35%. 前記表皮のUPE発生量を、皮膚にUVAを照射して検出されるUPE検出量の12.6%~52.7%とし、前記真皮のUPE発生量を、皮膚にUVAを照射して検出されるUPE検出量の47.3%~87.4%とし、前記表皮のUPE発生量と前記真皮のUPE発生量を推測するのに用いる割合(%)の合計が100%とする、請求項5または6に記載のUPE発生量を推定する方法。 The amount of UPE generated in the epidermis is 12.6% to 52.7% of the amount of UPE detected by irradiating the skin with UVA, and the amount of UPE generated in the dermis is determined by irradiating the skin with UVA. 47.3% to 87.4% of the amount of UPE detected in the above , and the sum of the ratio (%) used to estimate the amount of UPE generated in the epidermis and the amount of UPE generated in the dermis is 100%. Or the method of estimating the UPE generation amount according to 6. 前記紫外線がUVBである、請求項4に記載のUPE発生量を推定する方法。 5. The method of estimating UPE yield according to claim 4, wherein the ultraviolet light is UVB. 前記表皮を透過するUVBの透過率を5%~20%とする、請求項8に記載のUPE発生量を推定する方法。 The method for estimating the amount of UPE generated according to claim 8, wherein the transmittance of UVB that penetrates the epidermis is 5% to 20%. 前記表皮のUPE発生量を、皮膚にUVBを照射して検出されるUPE検出量の40.2%~83.2%とし、前記真皮のUPE発生量を皮膚にUVBを照射して検出されるUPE検出量の16.8%~59.8%とし、前記表皮のUPE発生量と前記真皮のUPE発生量を推測するのに用いる割合(%)の合計が100%とする、請求項8または9に記載のUPE発生量を推定する方法。 The amount of UPE generated in the epidermis is 40.2% to 83.2% of the amount of UPE detected by irradiating the skin with UVB, and the amount of UPE generated in the dermis is detected by irradiating the skin with UVB. 16.8% to 59.8% of the amount of UPE detected, and the sum of the ratio (%) used to estimate the amount of UPE generated in the epidermis and the amount of UPE generated in the dermis is 100%, or 9. The method for estimating the amount of UPE generated according to 9. 請求項1から10のいずれか一項に記載のUPE発生量を推定する方法を用いた、UPE抑制剤の評価方法。 A method for evaluating a UPE inhibitor using the method for estimating the amount of UPE generated according to any one of claims 1 to 10. UPE抑制剤が抗酸化剤またはサンスクリーンである、請求項11に記載のUPE抑制剤の評価方法。 12. A method for evaluating a UPE inhibitor according to claim 11, wherein the UPE inhibitor is an antioxidant or a sunscreen. 請求項1から10のいずれか一項に記載のUPE発生量を推定する方法を用いた、UPE抑制剤のスクリーニング方法。 A method for screening a UPE inhibitor using the method for estimating the amount of UPE generated according to any one of claims 1 to 10. UPE抑制剤が、抗酸化剤またはサンスクリーンである、請求項13に記載のUPE抑制剤のスクリーニング方法。 14. The method of screening for a UPE inhibitor according to claim 13, wherein the UPE inhibitor is an antioxidant or a sunscreen. 電磁波を照射された各皮膚組織由来のUPE発生量を推定する方法に用いられる、入力部、記憶部、処理部、撮影部及び電磁波照射部を備えた機器であって、以下の:
記憶部が、入力部から入力された各皮膚組織のUPE発生量の推定用の定数を記憶し、
電磁波照射部が、皮膚に対し電磁波を照射し、
撮影部が、UPE検出量を測定し、
処理部が、記憶部に記憶された各皮膚組織のUPE発生量の推定用の定数を、測定されたUPE検出量に乗じて、各皮膚組織由来のUPE発生量を推定する
前記機器。
A device comprising an input unit, a storage unit, a processing unit, an imaging unit, and an electromagnetic wave irradiation unit, which is used in a method for estimating the amount of UPE generated from each skin tissue irradiated with electromagnetic waves, the device comprising the following:
The storage unit stores a constant for estimating the UPE generation amount of each skin tissue input from the input unit,
The electromagnetic wave irradiation unit irradiates the skin with electromagnetic waves,
The imaging unit measures the UPE detection amount,
The device, wherein the processing unit estimates the amount of UPE generated from each skin tissue by multiplying the measured amount of UPE generated by the constant for estimating the amount of UPE generated in each skin tissue stored in the storage unit.
撮影部が電荷結合素子カメラである、請求項15に記載の機器。 16. The device of claim 15, wherein the imager is a charge-coupled device camera. 電荷結合素子カメラが冷却CCDカメラである、請求項16に記載の機器。 17. The instrument of claim 16, wherein the charge-coupled device camera is a cooled CCD camera.
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