JP7194931B2 - Skin condition evaluation method using stratum corneum hole as index - Google Patents

Skin condition evaluation method using stratum corneum hole as index Download PDF

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本発明は,肌状態を評価する方法に関する。具体的には,角層ホールの存在及び/又はその存在率を指標として肌状態を評価する方法及びシステム,肌状態改善効果についての候補化粧料又は美容処置のスクリーニング方法,並びに美容カウンセリング方法を提供する。 The present invention relates to a method for evaluating skin condition. Specifically, it provides a method and system for evaluating skin condition using the existence and/or existence rate of stratum corneum holes as an index, a screening method for candidate cosmetics or cosmetic treatments for skin condition improving effect, and a beauty counseling method. do.

角層は,皮膚のもっとも外側にあり外界からの異物の侵入を防ぐバリア機能や体内からの水分の蒸散を抑制する保湿機能を有する。しかし,角層のバリア機能や保湿機能が低下すると,肌荒れ,乾燥肌などのさまざまなトラブルを引き起こす。そこで,角層の状態を把握する試みが種々検討されている。 The stratum corneum is the outermost layer of the skin and has a barrier function to prevent the invasion of foreign substances from the outside and a moisturizing function to suppress the evaporation of water from the body. However, when the barrier function and moisturizing function of the stratum corneum deteriorate, it causes various problems such as rough skin and dry skin. Therefore, various attempts to grasp the condition of the stratum corneum have been investigated.

特許文献1には,テープに皮膚角質細胞を貼着し,着色板に貼付け,テープを着色板から剥離させて角質細胞を着色板に固定し,得られた角質細胞標本を用いて角質細胞を顕微鏡観察する皮膚角質細胞のダメージ度の測定法が開示されている。特許文献2には,角層シートに対して染料の水溶液を接触させる工程,上記染料を洗浄する工程,角層シートにおける上記染料の染色強度を測定する工程を含む,角層状態の評価方法が開示されている。特許文献3には,角層細胞間脂質におけるオルソロンビック構造の存在比率を指標とする敏感肌の評価方法が開示されている。角層内構造における新たな指標を用いて肌状態を評価できる客観的な方法があることが望ましい。 In Patent Document 1, skin corneocytes are attached to a tape, attached to a colored plate, the tape is peeled off from the colored plate to fix the corneocytes to the colored plate, and the obtained corneocyte specimen is used to extract corneocytes. A method for measuring the degree of damage of skin corneocytes by microscopic observation is disclosed. Patent Document 2 discloses a method for evaluating the condition of the stratum corneum, which includes a step of contacting the stratum corneum sheet with an aqueous solution of a dye, a step of washing the dye, and a step of measuring the staining intensity of the dye in the stratum corneum sheet. disclosed. Patent Literature 3 discloses a method for evaluating sensitive skin using, as an index, the abundance ratio of orthorhombic structures in intercellular lipids of the stratum corneum. It is desirable to have an objective method that can assess skin condition using new indices in the stratum corneum structure.

特許第3262443号公報Japanese Patent No. 3262443 特許第6243123号公報Japanese Patent No. 6243123 特開2017-161328号公報JP 2017-161328 A

高橋元次,化粧品講座(第II講)基礎化粧品と皮膚(I),色材協会誌,62(7), 430-438(1989)Motoji Takahashi, Cosmetics Lecture (Lecture II) Basic Cosmetics and Skin (I), Shikizai Kyokai, 62(7), 430-438(1989) 橿淵暢夫ら,角層細胞による肌評価法の開発,粧技誌,23(1),55-57,1989Nobuo Kashibuchi et al., Development of skin evaluation method using stratum corneum cells, Cosmetic Journal, 23(1), 55-57, 1989 広瀬ら,人の顔面皮膚における不全角化細胞の発生頻度と部位差,粧技誌,23(1),5-8,1989Hirose et al., Occurrence frequency and site difference of parakeratotic cells in human facial skin, Cosmetic Journal, 23(1), 5-8, 1989 Egawa et. al., In situ visualization of intracellular morphology of epidermal cells using stimulated Raman scattering microscopy, Journal of Biomedical Optics, August 2016, 21(8): 86017. doi: 10.1117/1.JBO.21.8.086017.Egawa et. al., In situ visualization of intracellular morphology of epidermal cells using stimulated Raman scattering microscopy, Journal of Biomedical Optics, August 2016, 21(8): 86017. doi: 10.1117/1.JBO.21.8.086017.

上述のように,角層内構造における新たな指標による肌状態の評価方法が望まれる。さらに,肌状態の悪化を予防/改善するための化粧料や美容処置を探索する際や美容カウンセリングを行う際にも,このように肌状態を評価できる新たな指標があることが望ましい。 As described above, there is a demand for a skin condition evaluation method based on a new index for the structure of the stratum corneum. Furthermore, it is desirable to have such a new index that can evaluate skin conditions when searching for cosmetics or beauty treatments for preventing/improving skin conditions or when providing beauty counseling.

本発明者らの鋭意研究の結果により,核小体が消失しているもののケラチンにより充填されておらず核膜部分が円状に残っている空洞状の角層ホールの存在が肌状態に関連することが新たに発見された。すなわち,対象に角層ホールが存在する場合又はその存在率が高い場合に,肌の状態が悪いことがわかった。 As a result of intensive research by the present inventors, the presence of hollow stratum corneum holes, in which the nucleolus has disappeared but is not filled with keratin and the nuclear envelope portion remains in a circular shape, is related to skin conditions. newly discovered to do. That is, it was found that the skin condition was poor when the stratum corneum hole was present in the subject or when the presence rate thereof was high.

本願は以下の発明を提供する。
(1)対象における肌状態の評価方法であって,
対象の角層における角層ホールの存在を測定し,角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する,前記方法。
(2)
対象における肌状態の評価方法であって,
対象の角層における角層ホールの存在率を指標として該対象の肌状態を評価する,前記方法。
(3)
前記角層ホールの存在率は,全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合である,(2)に記載の方法。
(4)
前記対象の角層の画像を取得することを更に含み,
前記角層ホールの存在又は存在率は,取得された画像において測定される,(1)~(3)のいずれか1項に記載の方法。
(5)
1又は複数のコンピュータにより実行される肌状態の評価方法であって,
対象の角層の画像における角層ホールに関するデータを取得する手順;
取得したデータを参照し,前記対象の角層に角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する手順;及び,
評価された結果を表示する手順;を有する,前記方法。
(6)
1又は複数のコンピュータにより実行される肌状態の評価方法であって,
あらかじめ設定した角層ホールの存在率の基準値に関するデータを取得する手順;
対象の角層の画像における角層ホールに関するデータを取得する手順;
取得したデータを参照し,前記対象の全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を角層ホールの存在率として算出する手順;
算出した角層ホールの存在率が前記基準値より高い場合該対象の肌状態は悪いと評価する手順;及び,
評価された結果を表示する手順;を有する,前記方法。
(7)
肌状態改善効果についての候補化粧料又は美容処置のスクリーニング方法であって,
皮膚に対する候補化粧料又は美容処置の適用前及び後に得られた対象の角層の画像における角層ホールの存在率を測定すること;
前記測定した角層ホールの存在率を適用前後で比較すること;
前記適用後の角層ホールの存在率が適用前のものよりも低い場合に,前記候補化粧料又は美容処置は肌状態改善効果があると判断すること;
を含む,前記方法。
(8)
対象の美容行為を支援する美容カウンセリング方法であって,
(1)~(6)のいずれか1項に記載の方法により評価された結果を対象に提示することを含む,前記方法。
(9)
(7)に記載のスクリーニング方法により肌状態改善効果があると判断された美容処置又は化粧料を,前記対象に提案することを更に含む,(8)に記載の方法。
(10)
肌状態を評価するシステムであって,
対象の角層の画像を取得する画像取得部;
取得された画像から対象の角層ホールに関するデータを取得するデータ取得部;
データ取得部により取得されたデータを参照し,角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部;及び,
前記評価部により評価した結果を表示する表示部を有する,前記システム。
(11)
肌状態を評価するシステムであって,
あらかじめ設定した角層ホールの存在率の基準値に関するデータを記憶するデータベース部;
対象の角層の画像を取得する画像取得部;
取得された画像から対象の角層ホールに関するデータを取得するデータ取得部;
データ取得部により取得されたデータを参照し,前記対象の全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を角層ホールの存在率として算出する算出部;
算出した角層ホールの存在率が前記基準値より高い場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部;及び,
前記評価部により評価した結果を表示する表示部を有する,前記システム。
The present application provides the following inventions.
(1) A method for evaluating skin condition in a subject,
The above method, wherein the presence of stratum corneum holes in the stratum corneum of the object is measured, and the skin condition of the object is evaluated as poor if stratum corneum holes are present.
(2)
A method for evaluating skin condition in a subject, comprising:
The above method, wherein the skin condition of the target is evaluated using the existence rate of stratum corneum holes in the target stratum corneum as an index.
(3)
The method according to (2), wherein the existence rate of stratum corneum holes is the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells.
(4)
further comprising acquiring an image of the stratum corneum of the subject;
The method according to any one of (1) to (3), wherein the presence or presence rate of the stratum corneum hole is measured in the acquired image.
(5)
A skin condition evaluation method performed by one or more computers, comprising:
A procedure for obtaining data about stratum corneum holes in an image of the stratum corneum of a subject;
a procedure of referring to the acquired data and evaluating that the subject's skin condition is poor if a stratum corneum hole exists in the subject's stratum corneum;
displaying the evaluated results.
(6)
A skin condition evaluation method performed by one or more computers, comprising:
A procedure for obtaining data on a preset reference value for the existence rate of stratum corneum holes;
A procedure for obtaining data about stratum corneum holes in an image of the stratum corneum of a subject;
A step of referring to the acquired data and calculating the ratio of the number of cells having a stratum corneum hole to the total number of stratum corneum cells of the subject as the existence ratio of the stratum corneum hole;
a procedure for evaluating that the subject's skin condition is poor when the calculated existence rate of stratum corneum holes is higher than the reference value; and
displaying the evaluated results.
(7)
A method of screening candidate cosmetics or cosmetic treatments for skin condition improving effects, comprising:
measuring the prevalence of stratum corneum holes in images of the stratum corneum of a subject obtained before and after application of a candidate cosmetic or cosmetic treatment to the skin;
Comparing the measured stratum corneum hole abundance ratio before and after application;
Determining that the candidate cosmetic or cosmetic treatment has an effect of improving skin condition when the prevalence of stratum corneum holes after application is lower than that before application;
The above method, including
(8)
A beauty counseling method for supporting a subject's beauty treatment, comprising:
A method comprising presenting to a subject the results evaluated by the method according to any one of (1) to (6).
(9)
The method according to (8), further comprising proposing to the subject a cosmetic treatment or cosmetic judged to have an effect of improving skin condition by the screening method according to (7).
(10)
A system for evaluating skin condition,
an image acquisition unit that acquires an image of the target stratum corneum;
a data acquisition unit that acquires data on the target stratum corneum hole from the acquired image;
an evaluation unit that refers to the data acquired by the data acquisition unit and evaluates that the subject's skin condition is poor if a stratum corneum hole exists;
The system, further comprising a display section for displaying the results evaluated by the evaluation section.
(11)
A system for evaluating skin condition,
a database unit that stores data on a preset reference value for the existence rate of stratum corneum holes;
an image acquisition unit that acquires an image of the target stratum corneum;
a data acquisition unit that acquires data on the target stratum corneum hole from the acquired image;
a calculation unit that refers to the data acquired by the data acquisition unit and calculates the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells of the target as the existence ratio of stratum corneum holes;
an evaluation unit that evaluates that the subject's skin condition is poor when the calculated existence ratio of stratum corneum holes is higher than the reference value;
The system, further comprising a display section for displaying the results evaluated by the evaluation section.

本発明により,角層ホールの存在又は存在率を指標として肌状態を客観的に評価することが可能になる。さらに,肌状態の評価が可能になることにより,候補化粧料又は美容処置の適用前後における角層ホールの存在又は存在率を評価することで,肌状態改善効果を確認することが可能になる。適切な美容カウンセリングをすることも可能になる。 INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, it becomes possible to objectively evaluate the skin condition using the presence or presence rate of stratum corneum holes as an index. Furthermore, by enabling the evaluation of skin condition, it is possible to confirm the skin condition improvement effect by evaluating the existence or existence rate of stratum corneum holes before and after application of candidate cosmetics or cosmetic treatments. Appropriate beauty counseling is also possible.

図1は,各対象の皮膚組織の角層における代表的な2930 cm-1の波数の画像及び2850 cm-1の波数の画像を示す。矢印は,代表的な角層ホールを示す。FIG. 1 shows representative 2930 cm −1 and 2850 cm −1 wavenumber images in the stratum corneum of skin tissue from each subject. Arrows indicate representative stratum corneum holes. 図2は,各対象の皮膚組織の角層における角層ホール数を示す。FIG. 2 shows the number of stratum corneum holes in the stratum corneum of the skin tissue of each subject. 図3は,各対象の皮膚組織の角層における角層ホールの存在率を示す。FIG. 3 shows the abundance of stratum corneum holes in the stratum corneum of the skin tissue of each subject. 図4は,各対象の皮膚組織の角層における2850cm-1/2930cm-1の輝度値の比を示す。FIG. 4 shows the luminance value ratio of 2850 cm −1 /2930 cm −1 in the stratum corneum of the skin tissue of each subject. 図5は,各対象の皮膚組織の角層における角層ホールの存在率とふっくらさを示す。FIG. 5 shows the abundance and plumpness of stratum corneum holes in the stratum corneum of the skin tissue of each subject.

以下,本発明の実施の形態について詳述する。本発明は,以下の実施の形態に限定されるものではなく,発明の本旨の範囲内で種々変形して実施できる。 Embodiments of the present invention will be described in detail below. The present invention is not limited to the following embodiments, and can be modified in various ways within the scope of the spirit of the invention.

本発明は,角層ホールが肌の状態と関連するという新たな発見に基づく。 The present invention is based on the new discovery that stratum corneum holes are associated with skin conditions.

正常な角層細胞では,ターンオーバーの過程で核が消失し消失後にケラチンが充填される脱核が起こるため核を有さない。しかし,ターンオーバーに乱れが生じ不全角化がおこると,未熟な細胞が角層に達してしまい角層には核を有した状態の有核細胞がみられるようになるため,有核細胞の存在は不全角化の指標として知られている(非特許文献1~3)。 Normal stratum corneum cells do not have nuclei because the nucleus disappears during the turnover process and keratin fills up after the nucleus disappears. However, when turnover is disturbed and parakeratosis occurs, immature cells reach the stratum corneum and nucleated cells with nuclei can be seen in the stratum corneum. Its presence is known as an indicator of parakeratosis (1-3).

しかしながら,従来技術では,角層ホールと肌状態とが密接に関連することについて知られていなかった。例えば,テープではがした皮膚の角層細胞を染色する方法において,角質細胞内にゴーストと呼ばれるものが見られたという報告がある(非特許文献1)。また,Scrub techniqueにより皮膚表面より角質細胞を採取した後に染色する方法においてもNuclear Ghostの存在を認めている(非特許文献2)。しかし,これらの方法では,核のゴーストと肌状態の関係は不明であった。さらには,非特許文献2では,Nuclear Ghostと肌評価項目との関連は認められなかったという実験結果も報告されている。また,このような方法では,角層表面を採取し,固定・標識・染色といった処理を施すため,その過程で物理的・化学的な変化が生じてしまう可能性もあり,核のゴーストが角層ホールと対応するのか否かも不明である。 However, in the prior art, it was not known that stratum corneum holes and skin conditions are closely related. For example, there is a report that in a method of staining horny layer cells of skin peeled with tape, what is called a ghost was observed in the horny cells (Non-Patent Document 1). In addition, the presence of Nuclear Ghost is also recognized in a method in which keratinocytes are collected from the surface of the skin by the scrub technique and then stained (Non-Patent Document 2). However, with these methods, the relationship between nuclear ghosts and skin conditions was unclear. Furthermore, Non-Patent Document 2 reports an experimental result that no association was found between Nuclear Ghost and skin evaluation items. In addition, in such a method, the surface of the stratum corneum is collected and processed by fixing, labeling, and staining. It is also unknown whether it corresponds to a stratum hole.

本願発明者らは,生の状態のまま表皮の真の構造を計測できる非侵襲的な技術を開発し(非特許文献4),固定/標識/染色などの処理を施していない表皮における細胞内小器官,核,角層内構造等を精査に観察することを可能にした。その結果,肌荒れなど肌状態が悪いときの角層内構造について新たな知見を得た。 The inventors of the present application have developed a non-invasive technique that can measure the true structure of the epidermis in its raw state (Non-Patent Document 4). It enabled detailed observation of organelles, nuclei, stratum corneum structures, etc. As a result, we obtained new knowledge about the structure of the stratum corneum when the skin is in poor condition such as rough skin.

驚くべきことに,肌状態が悪い対象では,角層細胞において核小体が消失しているもののケラチンにより充填されておらず核膜部分が円状に残っている空洞(角層ホール)が見られ,この角層ホールが肌の状態と関連することが初めて発見された。つまり,角層ホールが肌状態の評価指標として使用できることが初めて発見された。 Surprisingly, in subjects with poor skin conditions, nucleoli have disappeared in stratum corneum cells, but cavities (horny stratum corneum holes) that are not filled with keratin and remain circular in the nuclear envelope are observed. It was discovered for the first time that this hole in the stratum corneum is associated with the condition of the skin. In other words, it was discovered for the first time that stratum corneum holes can be used as an evaluation index for skin conditions.

皮膚は外側から表皮,真皮,皮下組織に分けられ,表皮は更に細胞の分化の程度により角質層,顆粒層,有棘層,基底層に分けられる(非特許文献1)。本明細書において,「角層」は角質層のこと指し,「角層細胞」は角層に存在する細胞を指す。「角層細胞」は,「角質細胞」と称されることもある。通常,角層細胞は角層に何層にも幾重に重なっており,角層細胞の重なりの程度や角層の厚みは体の各部位により異なる。ある実施形態では,角層を深度により三等分し,最も外側の部分を「角層上層」,中間部を「角層中層」,顆粒層に隣り合う部分を「角層下層」と称することがある。 The skin is divided into epidermis, dermis, and subcutaneous tissue from the outside, and the epidermis is further divided into stratum corneum, stratum granulosum, stratum spinosum, and stratum basale according to the degree of cell differentiation (Non-Patent Document 1). As used herein, "horny layer" refers to the stratum corneum, and "horny layer cells" refer to cells present in the stratum corneum. "Corneocyte" is sometimes referred to as "keratinocyte". Normally, stratum corneum cells overlap the stratum corneum in many layers, and the degree of overlap of stratum corneum cells and the thickness of the stratum corneum differ depending on the part of the body. In one embodiment, the stratum corneum is divided into three parts by depth, the outermost part is called "upper stratum corneum", the middle part is called "middle stratum corneum", and the part adjacent to the granular layer is called "lower stratum corneum". There is

本明細書において,「全角層細胞数」とは,角層ホールの存在率を求める際の総数として使用される全ての角層細胞の数を指す。つまり,測定対象において角層ホールを有する細胞と有さない細胞を含めた細胞の総数を指す。例えば,対象の角層上層の画像において観察される角層細胞の総数であってもよい。 As used herein, the term “total number of stratum corneum cells” refers to the number of all stratum corneum cells used as the total number when determining the existence rate of stratum corneum holes. In other words, it refers to the total number of cells including cells with and without stratum corneum holes in the measurement object. For example, it may be the total number of stratum corneum cells observed in the image of the upper stratum corneum of the object.

角層ホールの存在率は以下の式により求められる。

Figure 0007194931000001
The existence rate of stratum corneum holes is obtained by the following formula.
Figure 0007194931000001

本明細書において,「角層ホールが存在する場合」とは,観察した角層細胞において角層ホールが全く見られない場合のみならず,観察した角層細胞において見られる角層ホールの数が非常に少ない場合を含んでもよい。例えば,角層ホールの存在率が0.5未満,0.4未満,0.3未満,0.2未満,又は0.1未満の場合を指すものであってもよい。 In the present specification, "when stratum corneum holes are present" means not only the case where no stratum corneum holes are observed in the observed stratum corneum cells, but also the case where the number of stratum corneum holes observed in the observed stratum corneum cells is May include very few cases. For example, it may refer to cases where the existence rate of stratum corneum holes is less than 0.5, less than 0.4, less than 0.3, less than 0.2, or less than 0.1.

本明細書において,角層ホールとは,角層細胞において核小体が消失しているもののケラチンにより充填されておらず核膜部分の円状に残っている空洞を指す。例えば,角層ホールは,角層についてそれぞれ2850 cm-1及び2930 cm-1の波数の画像を取得した場合,2850 cm-1で表される脂質や2930 cm-1で表されるタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を角層ホールとすることができる。しかし,角層ホールの測定は上記方法に限定されず,角層ホールを測定可能な任意の方法が採用できる。 As used herein, the stratum corneum hole refers to a circular cavity remaining in the nuclear membrane portion that is not filled with keratin although the nucleolus has disappeared in the stratum corneum cell. For example, stratum corneum holes contain lipids expressed at 2850 cm -1 and proteins expressed at 2930 cm -1 when images of the stratum corneum are acquired at wavenumbers of 2850 cm -1 and 2930 cm -1 respectively. A cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm can be used as a stratum corneum hole. However, the measurement of the stratum corneum hole is not limited to the above method, and any method capable of measuring the stratum corneum hole can be adopted.

本明細書において,肌状態が悪いとは,乾燥肌,敏感肌,荒れ肌,ビニール肌,炎症,かゆみ,張り・弾力がない,ツヤがない,透明感がない,きめが粗い,赤み,くすみ,べたつきといった任意の好ましくない肌状態であってもよく,官能評価や視感評価により示されるものであってもよく,肌のバリア機能や水分保持機能の低下と関連することが知られているものであってもよい。代替的及び/又は追加的に,肌状態が悪いとは,角層状態と関連が高いことが知られているものであってもよいし,例えば,特許文献1~3に記載の方法のように,特定の指標により示されるものであってもよい。ある実施形態では,例えば,角層細胞の配列状態の乱れ,透明度の低下,脂質量の減少,水分量の減少,経皮水分蒸散量の増加,肌理(キメ)の乱れ,等であってもよい。また,実施例に記載のように視感評価による角層細胞のふっくらさを指標としてもよい。更に,細胞間脂質の多い角層は良好な状態にありバリア機能が保持されているということは広く知られている。よって,肌状態が悪いとは細胞間脂質の量が少ないことを指してもよい。また,2850cm-1の輝度値が脂質の量と対応するため,2850cm-1の数値が低いと細胞間脂質の量が少ないことを示すことが知られている(非特許文献4)。また,2930cm-1の輝度値がタンパクの量と対応していることも知られている(非特許文献4)。よって,例えば,角層について2850 cm-1の波数の画像を取得し,2850cm-1の輝度値を脂質の量として評価し,2850cm-1(脂質)の数値を用いて細胞間脂質の量が少ないほど肌状態が悪いとしてもよく,あるいは,角層についてそれぞれ2850 cm-1及び2930 cm-1の波数の画像を取得し,2850cm-1/2930cm-1の輝度値の比を脂質/タンパクの比として評価し,2850cm-1(脂質)/2930cm-1(タンパク)の数値を用いて細胞間脂質/タンパクの値が少ないほど肌状態が悪いとしてもよい。本明細書において,肌状態改善効果とは,上述の1つ又は複数の指標による好ましくない肌状態を改善する効果をいう。 In this specification, poor skin condition means dry skin, sensitive skin, rough skin, vinyl skin, inflammation, itching, lack of tension/elasticity, lack of gloss, lack of transparency, rough texture, redness, dullness, It may be any undesirable skin condition such as stickiness, it may be indicated by sensory evaluation or visual evaluation, and it is known to be associated with a decrease in skin barrier function and moisture retention function. may be Alternatively and/or additionally, poor skin condition may be known to be highly associated with stratum corneum condition, such as the methods described in Patent Documents 1 to 3. In addition, it may be indicated by a specific index. In some embodiments, for example, disturbance of the arrangement of stratum corneum cells, decrease in transparency, decrease in lipid content, decrease in water content, increase in transepidermal water loss, texture disturbance, etc. good. Further, as described in Examples, the plumpness of the stratum corneum cells by visual evaluation may be used as an index. Furthermore, it is widely known that the stratum corneum, which contains a large amount of intercellular lipids, is in good condition and retains its barrier function. Therefore, poor skin condition may indicate a low amount of intercellular lipids. In addition, it is known that since the luminance value at 2850 cm -1 corresponds to the amount of lipids, a low value at 2850 cm -1 indicates a small amount of intercellular lipids (Non-Patent Document 4). It is also known that the luminance value at 2930 cm -1 corresponds to the amount of protein (Non-Patent Document 4). Therefore, for example, a 2850 cm -1 wave number image of the stratum corneum is acquired, the brightness value of 2850 cm -1 is evaluated as the amount of lipids, and the value of 2850 cm -1 (lipids) is used to estimate the amount of intercellular lipids. Alternatively, acquire images of the stratum corneum at wavenumbers of 2850 cm -1 and 2930 cm -1 , respectively, and compare the luminance value ratio of 2850 cm -1 /2930 cm -1 to the lipid/protein ratio. It may be evaluated as a ratio, and the lower the intercellular lipid/protein value, the worse the skin condition, using the numerical value of 2850 cm -1 (lipid)/2930 cm -1 (protein). In this specification, the skin condition improving effect refers to the effect of improving an unfavorable skin condition according to one or more of the indicators described above.

ある実施形態では,本発明の方法は,対象の角層における角層ホールの存在を測定し,角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する。ある実施形態では,本発明の方法は,全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合である角層ホールの存在率を指標として,角層ホールの存在率が高いほど該対象の肌状態が悪いと評価する。角層ホールの存在率を指標とする評価は,基準値との比較,或いは対照の角層ホールの存在率との比較により行うことができる。 In one embodiment, the methods of the present invention measure the presence of stratum corneum holes in the stratum corneum of a subject and assess the subject's skin condition as poor if stratum corneum holes are present. In one embodiment, in the method of the present invention, the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells is used as an index, and the higher the ratio of stratum corneum holes, the better the skin of the subject. Evaluate as bad. Evaluation using the stratum corneum hole abundance rate as an index can be performed by comparison with a reference value or comparison with the stratum corneum hole abundance rate of a control.

角層ホールの存在を測定するための角層試料は,限定されないものの,生の状態のままの角層であってもよい。生の状態のままの角層とは,in situ又はin vivoの状態の角層を指すもの,及び/又は固定,標識,染色といった処理を何ら施されていない角層を指す。一例として,角層は,採取されたものではなく,生きている状態のヒトの皮膚におけるものである場合がある。しかしながら,角層ホールが観察可能であれば,角層が生の状態であるか否か,固定,標識,染色といった処理を施したか否かを問わず任意の試料が使用できる。 The stratum corneum sample for measuring the presence of stratum corneum holes may be, but is not limited to, stratum corneum in its raw state. The intact stratum corneum refers to the stratum corneum in its in situ or in vivo state and/or to stratum corneum that has not undergone any treatment such as fixation, labeling or staining. As an example, the stratum corneum may be in living human skin rather than harvested. However, as long as the stratum corneum hole can be observed, any sample can be used regardless of whether the stratum corneum is in a raw state or not, and whether or not it has undergone a treatment such as fixation, labeling, or staining.

ある実施形態では,本発明の方法は,対象の角層の画像を取得することを更に含み,前記角層ホールの存在又は存在率は,取得された画像において測定される。 In one embodiment, the method of the present invention further comprises acquiring an image of the stratum corneum of the subject, and the presence or percentage of said stratum corneum holes is measured in the acquired image.

画像を得る方法は,角層ホールの存在又は存在率が測定できる方法であれば,任意の方法が採用できる。非線形光学法であっても線形光学法であってもよいが,ある実施形態では,角層ホールをより精査に測定するために非線形光学法が好ましい場合もある。ある実施形態では,非線形光学法は,非線形ラマン分光法,非線形多光子励起法,非線形共焦点法,及び非線形レーザー走査法からなる群より選択される1又は複数の方法であってもよい。非線形ラマン分光法としては,例えば,誘導ラマン散乱分光法又はコヒーレント反ストークスラマン散乱分光法などが挙げられる。画像取得方法は,2次元のみならず3次元の空間情報を取得できる方法が好ましい場合もある。従来の方法では,これらの角層の最表面を物理的に剥離したものを処理して用いていたが,角層表面からの深度を変えて画像を撮像できると,角層ホールのさらなる精密な検査が可能になるからである。 Any method can be used to obtain an image as long as it can measure the presence or rate of existence of stratum corneum holes. Either non-linear or linear optical methods may be used, although non-linear optical methods may be preferred in certain embodiments for more precise measurements of stratum corneum holes. In some embodiments, the nonlinear optical method may be one or more methods selected from the group consisting of nonlinear Raman spectroscopy, nonlinear multiphoton excitation, nonlinear confocal methods, and nonlinear laser scanning methods. Nonlinear Raman spectroscopy includes, for example, stimulated Raman scattering spectroscopy or coherent anti-Stokes Raman scattering spectroscopy. In some cases, the image acquisition method is preferably a method capable of acquiring not only two-dimensional but also three-dimensional spatial information. In the conventional method, the outermost surface of the stratum corneum was physically peeled off and then used. This is because inspection becomes possible.

また,本願にかかる方法は,美容目的であり,医師や医療従事者が行う医療行為は除かれることがある。 In addition, the method according to the present application is for cosmetic purposes, and may exclude medical practices performed by doctors and medical professionals.

ある実施形態では,例えば,本発明は,誘導ラマン散乱分光法又はコヒーレント反ストークスラマン散乱分光法などの非線形ラマン分光法により取得された対象の角層,好ましくは角層上層の画像における角層ホールの存在率を指標とし,角層ホールの存在率が高いほど対象の肌状態が悪いと評価することを含む美容目的の肌状態の評価方法であってもよい。 In certain embodiments, for example, the present invention relates to stratum corneum holes in images of the stratum corneum of interest, preferably the stratum corneum, obtained by nonlinear Raman spectroscopy, such as stimulated Raman scattering spectroscopy or coherent anti-Stokes Raman scattering spectroscopy. A skin condition evaluation method for cosmetic purposes may also be used, in which the higher the existence ratio of stratum corneum holes is, the worse the skin condition is evaluated.

本発明の別の態様では,本発明は,肌状態の評価方法を応用した,肌状態改善効果についての候補化粧料又は美容処置のスクリーニング方法にも関する。この方法は,具体的には,皮膚に対する候補化粧料又は美容処置の適用前及び後に得られた対象の角層,好ましくは角層上層の画像における角層ホールの存在率を測定すること;前記測定した角層ホールの存在率を適用前後で比較すること;前記適用後の角層ホールの存在率が適用前のものよりも低い場合に,前記候補化粧料又は美容処置は肌状態改善効果があると判断することを含む。この評価方法により,化粧料又は美容処置が肌状態改善効果を有するか否かについてのスクリーニングが可能となり,製品開発や新たな肌ケアの提案が可能になる。 In another aspect of the present invention, the present invention also relates to a method of screening candidate cosmetics or cosmetic treatments for skin condition improving effects, applying the skin condition evaluation method. Specifically, the method comprises measuring the prevalence of stratum corneum holes in images of the stratum corneum, preferably the stratum corneum, of a subject obtained before and after application of a candidate cosmetic or cosmetic treatment to the skin; Compare the measured stratum corneum hole abundance ratio before and after application; if the stratum corneum hole abundance ratio after application is lower than that before application, the candidate cosmetic or cosmetic treatment is effective in improving skin condition. including determining that there is This evaluation method enables screening as to whether or not cosmetics or cosmetic treatments have an effect on skin condition improvement, and enables product development and proposals for new skin care.

本明細書において化粧料とは,皮膚に適用される化粧料をいい,例えば化粧水,乳液,美容液,クリーム,ファンデーションなどをいうが,これらに限定されず,肌状態の改善を直接の目的とするものではないが,皮膚に塗布されるもの全てを含むことを意図し,例えば,日焼け止め剤,虫除け剤,脱毛剤,育毛剤,シェービングローション,アフターシェービングローションなども包含するものとする。化粧料に含まれる成分には,基剤として水,エタノール,グリセリン,ポリエチレングリコールなどのアルコール類が含まれ,保湿剤としてグリシン,ベタイン,ピロリドンカルボン酸Naなどのアミノ酸類,フルクトース,マルチトール,マンニトール,トレハロースなどの糖類,さらに有効成分としてヒアルロン酸,コラーゲン,セラミドなど,そして賦形剤としてクエン酸ナトリウム,クエン酸,乳酸ナトリウム,防腐剤として安息香酸塩,ソルビン酸などが含まれてもよいが,これらに限定されるものではない。 As used herein, the term "cosmetics" refers to cosmetics applied to the skin, such as lotions, milky lotions, beauty essences, creams, foundations, etc., but is not limited to these. However, it is intended to include everything that is applied to the skin, such as sunscreens, insect repellents, hair removers, hair restorers, shaving lotions, and aftershave lotions. Ingredients contained in cosmetics include alcohols such as water, ethanol, glycerin, and polyethylene glycol as bases, glycine, betaine, amino acids such as sodium pyrrolidonecarboxylate, fructose, maltitol, and mannitol as moisturizing agents. , sugars such as trehalose, active ingredients such as hyaluronic acid, collagen, and ceramide, excipients such as sodium citrate, citric acid, and sodium lactate, and preservatives such as benzoate and sorbic acid. , but not limited to these.

本明細書において候補化粧料とは,肌状態改善効果について調査が行われる化粧料のことをいい,製品として販売されている化粧料の他,開発段階の化粧料も含み,さらに化粧料の開発において化粧料用に選択された溶液であってもよい。例えば,化粧料に用いるある物質の肌状態改善効果を調べるため,当該物質のみを含む水溶液であってもよく,あるいは,糖類,多価アルコール,アミノ酸類,有機酸,保湿剤,増粘剤,若しくは緩衝剤として含まれる成分,又は有効成分などの任意の物質を含む水溶液が用いられてもよいし,溶媒として水以外を含む溶液や水性溶媒,油性溶媒といった各種溶媒が使用されてもよい。 In the present specification, candidate cosmetics refer to cosmetics for which investigations are conducted for skin condition improving effects. It may be a solution selected for cosmetics in. For example, in order to investigate the skin condition improving effect of a substance used in cosmetics, an aqueous solution containing only the substance may be used, or sugars, polyhydric alcohols, amino acids, organic acids, moisturizers, thickeners, Alternatively, an aqueous solution containing any substance such as a component contained as a buffering agent or an active component may be used, and various solvents such as a solution containing other than water, an aqueous solvent, and an oily solvent may be used.

美容処置としては,特に限定されないが,例えば化粧料の塗布,マッサージの適用,スチームの適用などの美容に有効と考えられている任意の処置が含まれる。美容処置は,一回の処置であってもよいし,数日から数週間にわたって行われる継続的な処置であってもよい。美容処置は個人的に行われてもよいし,美容室や,化粧品の販売店,エステサロンなどで行われてもよい。 Cosmetic treatments include, but are not limited to, any treatment considered cosmetically beneficial, such as applying cosmetics, applying massage, applying steam, and the like. A cosmetic procedure may be a one-time procedure or an ongoing procedure over a period of days to weeks. The cosmetic treatment may be performed privately, or may be performed at a beauty salon, a cosmetics store, an esthetic salon, or the like.

本発明の更に別の態様では,本発明は,肌状態を評価するシステムに関する。本発明のシステムは,対象の角層,好ましくは角層上層の画像を取得する画像取得部;取得された画像から対象の角層ホールに関するデータを取得するデータ取得部;データ取得部により取得されたデータを参照し,角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部;及び,前記評価部により評価した結果を表示する表示部を有するものであってもよく,あるいは,あらかじめ設定した角層ホールの存在率の基準値に関するデータを記憶するデータベース部を更に有し,上記評価部の代わりに,データ取得部により取得されたデータを参照し,前記対象の全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を角層ホールの存在率として算出する算出部;及び算出した角層ホールの存在率が前記基準値より高い場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部を有するものであってもよい。 In yet another aspect of the invention, the invention relates to a system for evaluating skin condition. The system of the present invention includes an image acquisition unit that acquires an image of the target stratum corneum, preferably the upper stratum corneum; a data acquisition unit that acquires data on the target stratum corneum hole from the acquired image; an evaluation unit that refers to the obtained data and evaluates that the subject's skin condition is bad if there is a stratum corneum hole; and a display unit that displays the results evaluated by the evaluation unit, or , further comprising a database unit for storing data relating to the reference value of the stratum corneum hole existence rate set in advance, and referring to the data acquired by the data acquisition unit instead of the evaluation unit, A calculation unit that calculates the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the number of cells as the stratum corneum hole abundance ratio; It may have an evaluation unit.

上記画像取得部は,ラマン顕微鏡,多光子顕微鏡,共焦点顕微鏡,レーザー走査顕微鏡,及び光干渉断層撮影機からなる群より選択される1又は複数の装置であってもよい。ラマン顕微鏡としては,誘導ラマン散乱顕微鏡又はコヒーレント反ストークスラマン散乱顕微鏡等の非線形ラマン顕微鏡が挙げられる。 The image acquisition unit may be one or more devices selected from the group consisting of Raman microscopes, multiphoton microscopes, confocal microscopes, laser scanning microscopes, and optical coherence tomographs. Raman microscopes include non-linear Raman microscopes such as stimulated Raman scattering microscopes or coherent anti-Stokes Raman scattering microscopes.

例えば,本発明の肌状態を評価するシステムは,あらかじめ設定した角層ホールの存在率の基準値に関するデータを記憶するデータベース部;対象の角層,好ましくは角層上層の画像を取得する画像取得部;取得された画像から対象の角層ホールに関するデータを取得する誘導ラマン散乱顕微鏡又はコヒーレント反ストークスラマン散乱顕微鏡等の非線形ラマン顕微鏡を含むデータ取得部;データ取得部により取得されたデータを参照し,前記対象の全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を角層ホールの存在率として算出する算出部;算出した角層ホールの存在率が前記基準値より高い場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部;及び,前記評価部により評価した結果を表示する表示部を有するものであってもよい。 For example, the system for evaluating the skin condition of the present invention includes a database unit that stores data relating to a preset reference value for the existence rate of stratum corneum holes; part; a data acquisition part including a non-linear Raman microscope such as a stimulated Raman scattering microscope or a coherent anti-Stokes Raman scattering microscope that acquires data about the stratum corneum hole of interest from the acquired image; see data acquired by the data acquisition part , a calculation unit that calculates the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells of the subject as the existence rate of stratum corneum holes; if the calculated abundance rate of stratum corneum holes is higher than the reference value, It may have an evaluation unit that evaluates that the condition is bad; and a display unit that displays the result of evaluation by the evaluation unit.

また,本発明は,本発明の肌状態の評価方法及び又はシステムにより評価された結果を対象に提示することを含む,対象の美容行為を支援する美容カウンセリング方法を提供する。この美容カウンセリング方法は,本発明の候補化粧料又は美容処置の評価方法により肌状態改善効果があると判断された美容処置又は化粧料を対象に提案することを更に含んでもよく,例えば,本発明の美容カウンセリング方法における提案は,本発明の肌状態の評価方法及び又はシステムにより肌状態が悪いと評価された対象に対し肌状態の改善を目的とするものであってもよく,肌状態が悪いと評価されなかった対象に対し肌状態悪化の予防を目的とするものであってもよい。 The present invention also provides a beauty counseling method for supporting a subject's beauty treatment, including presenting the subject with the results evaluated by the skin condition evaluation method and/or system of the present invention. This beauty counseling method may further include proposing a cosmetic treatment or cosmetic determined to have an effect of improving skin condition by the evaluation method of the candidate cosmetic or cosmetic treatment of the present invention. The proposal in the beauty counseling method may be aimed at improving the skin condition of a subject evaluated as having poor skin condition by the skin condition evaluation method and/or system of the present invention. It may be intended to prevent deterioration of the skin condition for subjects who were not evaluated as.

以下,具体例を挙げて,本発明を更に具体的に説明するが,本発明は下記の実施例により限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to specific examples, but the present invention is not limited to the following examples.

測定装置:
測定には,非特許文献4に記載の誘導ラマン散乱(SRS)顕微鏡を使用した。レーザー光源として,Ti:sapphireレーザー(790 nm,76 MHz,ポンプ光)及び波長可変Yb fiberレーザー(1014~1046 nm,38 MHz,ストークス光)を用いた。レーザースキャナー挿入時のレーザー強度は,それぞれ120 mWとした。CH伸縮振動領域(2800~3100 cm-1)のSRS画像は,80×80 μm(500×500 pixels),水平方向解像度1 μm,30 frames/sで取得した。
measuring device:
A stimulated Raman scattering (SRS) microscope described in Non-Patent Document 4 was used for the measurement. A Ti:sapphire laser (790 nm, 76 MHz, pump light) and a tunable Yb fiber laser (1014-1046 nm, 38 MHz, Stokes light) were used as laser light sources. The laser intensity when the laser scanner was inserted was 120 mW for each. SRS images in the CH stretching region (2800 to 3100 cm -1 ) were acquired at 80 × 80 μm (500 × 500 pixels), horizontal resolution of 1 μm, and 30 frames/s.

皮膚組織の測定:
下記の表1に示すように,様々な年齢(30代~70代)の健康な対象9名の腹部又は瞼の皮膚を非特許文献4に記載の方法に従い,化学的処理を行わないそのままの状態で上記SRS顕微鏡により測定した。得られたデータの3次元画像構築には,脂質由来の2850 cm-1,タンパク由来の2930 cm-1の官能基特有の輝度による深さ方向0.5 μm~1 μm毎に取得した水平断面画像を用いた。

Figure 0007194931000002
Skin tissue measurements:
As shown in Table 1 below, the skin of the abdomen or eyelids of 9 healthy subjects of various ages (30s to 70s) was treated as it was without chemical treatment according to the method described in Non-Patent Document 4. was measured by the above SRS microscope in the state. To construct a three-dimensional image of the obtained data, horizontal cross-sectional images acquired at intervals of 0.5 μm to 1 μm in the depth direction with the functional group-specific luminance of 2850 cm −1 derived from lipids and 2930 cm −1 derived from proteins were used. Using.
Figure 0007194931000002

角層ホールの測定:
各対象の皮膚組織の角層上層における角層細胞についてそれぞれ2850 cm-1及び2930 cm-1の波数の画像を取得した。それぞれ2850 cm-1及び2930 cm-1の波数の画像の中で,脂質やタンパクの直径約10μm~20μmの空洞を角層ホールとしてその存在を確認し数をカウントし,各サンプルについて3回測定を行いその平均値を算出した。また,得られた画像における全角層細胞数をカウントし,全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を上述の式に従い算出し,角層ホールの存在率とした。
Stratum corneum hole measurement:
Wavenumber images of 2850 cm −1 and 2930 cm −1 were obtained for stratum corneum cells in the upper stratum corneum of the skin tissue of each subject, respectively. Cavities with a diameter of about 10 μm to 20 μm in lipids and proteins were identified as stratum corneum holes in the 2850 cm -1 and 2930 cm -1 wavenumber images, respectively. and calculated the average value. In addition, the total number of stratum corneum cells in the obtained image was counted, and the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells was calculated according to the above formula and defined as the existence rate of stratum corneum holes.

肌状態の測定:
1)2850cm-1/2930cm-1の輝度値による評価
上述のように,細胞間脂質の多い角層は良好な状態にありバリア機能が保持されているということは広く知られているため,上記方法にて取得した各対象の角層の2850 cm-1及び2930 cm-1の波数の画像における2850cm-1/2930cm-1の輝度値の比を脂質/タンパクの比として肌状態の評価に使用した。つまり,2850cm-1/2930cm-1の値が少ない程,細胞間脂質の量が少なく肌状態が悪いとした。
2)ふっくらさによる評価
専門パネル3名が角層ホールの測定に使用した皮膚組織を目視にて観察し,ふっくらさを以下の評価基準に従い3段階評価した。
ふっくらさ=3:良い,2:普通,1:悪い
Measurement of skin condition:
1) Evaluation by luminance value of 2850 cm -1 /2930 cm -1 The ratio of luminance values at 2850 cm -1 /2930 cm -1 in the 2850 cm -1 and 2930 cm -1 wave number images of the stratum corneum of each subject obtained by the method is used as the lipid/protein ratio to evaluate the skin condition. did. In other words, the lower the value of 2850cm -1 /2930cm -1 , the lower the amount of intercellular lipid and the worse the skin condition.
2) Evaluation by Plumpness The skin tissue used for the measurement of stratum corneum holes was visually observed by three expert panels, and the plumpness was evaluated in three stages according to the following evaluation criteria.
Plumpness = 3: good, 2: normal, 1: bad

結果:
図1は,各対象の皮膚組織の表皮の角層上層における2930 cm-1の波数の画像及び2850 cm-1の波数の画像を示す。図1に示すように,対象F,Gには角層ホールが多く見られたが,対象A,E,H,Iには角層ホールが見られなかった。
result:
FIG. 1 shows a 2930 cm −1 wavenumber image and a 2850 cm −1 wavenumber image in the upper stratum corneum of the epidermis of each subject's skin tissue. As shown in FIG. 1, many stratum corneum holes were found in subjects F and G, but no stratum corneum holes were found in subjects A, E, H and I.

図2は,各対象の角層上層の画像における角層ホール数を示す。図3は,図2と同じ画像における対象A~Fの角層ホールの存在率を示す。図2,3により対象C,D,F,Gのみに角層ホールが見られ,とくに対象FとGでは角層ホール数とその存在率が高いことがわかる。一方,対象A,B,E,H,Iでは角層ホールが見られなかった。また,対象C,Dの角層ホールの数は非常に少なく,存在率は0.1にも満たなかった。 FIG. 2 shows the number of stratum corneum holes in images of the upper stratum corneum of each subject. FIG. 3 shows the existence rate of stratum corneum holes in objects A to F in the same image as in FIG. 2 and 3, stratum corneum holes are found only in subjects C, D, F, and G, and in particular, in subjects F and G, the number of stratum corneum holes and their abundance are high. On the other hand, in subjects A, B, E, H, and I, stratum corneum holes were not observed. In addition, the number of stratum corneum holes in subjects C and D was very small, and the existence ratio was less than 0.1.

図4は,対象A~Fの2850cm-1/2930cm-1の輝度値の比を示す。図4に示すように,対象A~Eでは2850cm-1/2930cm-1の輝度値の比が比較的高く,ひいては細胞間脂質の量が多く肌状態が良いことが示唆されるが,対象Fでは数値が低く肌状態が悪いことが示唆される。 FIG. 4 shows the ratio of luminance values at 2850 cm −1 /2930 cm −1 for objects A to F. As shown in Fig. 4, in subjects A to E, the ratio of luminance values at 2850 cm -1 /2930 cm -1 is relatively high, suggesting that the amount of intercellular lipids is high and the skin condition is good. In , the numerical value is low, suggesting that the skin condition is poor.

図3と図4を比較すると,角層ホールの数が多く角層ホールの存在率が高い対象の2850cm-1/2930cm-1の輝度値の比が低いことが分かる。また,図5より,角層ホール数が多い及び/又は角層ホールの存在率が高い対象はふっくらさの値が低いが,角層ホールが存在しない及び/又は角層ホールの存在率が低い対象はふっくら差の値が高いという関連性も認められた。したがって,角層ホールが存在する場合や角層ホールの存在率が高い対象の肌状態は悪いことが示唆される。特に,対象EとFは年齢が近いにもかかわらず,その角層ホールの数と肌状態が対照的であることは注目に値する。 Comparing FIG. 3 and FIG. 4, it can be seen that the ratio of the luminance value at 2850 cm -1 /2930 cm -1 is low in the target with a large number of stratum corneum holes and a high abundance of stratum corneum holes. In addition, from Fig. 5, subjects with a large number of stratum corneum holes and/or a high abundance of stratum corneum holes have a low plumpness value, but no stratum corneum holes and/or a low abundance of stratum corneum holes. A correlation was also observed in that the subject had a high plumpness difference value. Therefore, it is suggested that the skin condition of subjects with stratum corneum holes or with a high ratio of stratum corneum holes is poor. In particular, although subjects E and F were close in age, it is worth noting that the number of stratum corneum holes and skin conditions are contrasting.

正常な角層細胞の分化の過程において核が消失し消失後にケラチンが充填される脱核のメカニズムはあまり良くわかっていない。しかし,角層ホールは,角層細胞の分化の過程で核の消失とタンパクの充填ステップに何らかの問題が生じている,ひいては,肌細胞の分化やターンオーバーが正常に行われていないことを示唆している可能性が考えられる。また,角層ホールは,角層のバリア機能や保湿機能が損なわれていることを示唆していることも考えられる。 The mechanism of denucleation, in which nuclei disappear and are filled with keratin after disappearance in the process of normal stratum corneum cell differentiation, is not well understood. However, stratum corneum holes suggest that some problems occur in the nucleus disappearance and protein filling steps in the process of stratum corneum cell differentiation, and that skin cell differentiation and turnover are not performed normally. It is possible that In addition, the stratum corneum hole may suggest that the barrier function and moisturizing function of the stratum corneum are impaired.

以上の実験結果から,角層ホールが存在する場合に肌状態が悪く,そしてその存在率が高い場合より肌状態が悪いことがわかった。よって,角層ホールの存在及び/又は存在率を指標とすることで,簡便かつ客観的に肌状態を評価できる。 From the above experimental results, it was found that the skin condition was worse when stratum corneum holes were present, and worse than when the ratio of holes was high. Therefore, by using the existence and/or existence rate of the stratum corneum hole as an index, the skin condition can be easily and objectively evaluated.

本発明により,角層ホールの存在及び/又は存在率を指標とすることで,肌状態を簡易かつ客観的に評価することが可能になり,このような方法/システムに基づいて肌状態の悪化を予防及び/又は改善するための化粧品や美容処置のスクリーニング,並びに美容カウンセリングが可能になる。 According to the present invention, it is possible to easily and objectively evaluate the skin condition by using the presence and/or the existence ratio of the stratum corneum hole as an index, and the deterioration of the skin condition based on such a method/system. It becomes possible to screen cosmetics and cosmetic treatments for preventing and/or ameliorating , as well as cosmetic counseling.

Claims (11)

対象における肌状態の評価方法であって,
対象の角層における角層ホールの存在を測定し,角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する,前記方法
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す。
A method for evaluating skin condition in a subject, comprising:
The above-mentioned method, wherein the presence of stratum corneum holes in the stratum corneum of the subject is measured, and the skin condition of the subject is evaluated as poor when the stratum corneum holes are present ;
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method.
対象における肌状態の評価方法であって,
対象の角層における角層ホールの存在率を指標として該対象の肌状態を評価する,前記方法
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す
A method for evaluating skin condition in a subject, comprising:
The above method , wherein the skin condition of the subject is evaluated using the ratio of stratum corneum holes in the stratum corneum of the subject as an index;
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method .
前記角層ホールの存在率は,全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合である,請求項2に記載の方法。 3. The method according to claim 2, wherein the existence ratio of stratum corneum holes is the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells. 前記対象の角層の画像を非線形光学法又は線形光学法により取得することを更に含み,
前記角層ホールの存在又は存在率は,取得された画像において測定される,請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。
further comprising acquiring an image of the stratum corneum of the subject by a nonlinear optical method or a linear optical method ;
The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the presence or rate of stratum corneum holes is measured in the acquired image.
1又は複数のコンピュータにより実行される肌状態の評価方法であって,
非線形光学法又は線形光学法により取得された対象の角層の画像における角層ホールに関するデータを取得する手順;
取得したデータを参照し,前記対象の角層に角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する手順;及び,
評価された結果を表示する手順;を有する,前記方法
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す。
A skin condition evaluation method performed by one or more computers, comprising:
A procedure for obtaining data about stratum corneum holes in an image of the stratum corneum of a subject obtained by nonlinear or linear optics ;
a procedure of referring to the acquired data and evaluating that the subject's skin condition is poor if a stratum corneum hole exists in the subject's stratum corneum;
displaying the evaluated results ;
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method.
1又は複数のコンピュータにより実行される肌状態の評価方法であって,
あらかじめ設定した角層ホールの存在率の基準値に関するデータを取得する手順;
非線形光学法又は線形光学法により取得された対象の角層の画像における角層ホールに関するデータを取得する手順;
取得したデータを参照し,前記対象の全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を角層ホールの存在率として算出する手順;
算出した角層ホールの存在率が前記基準値より高い場合該対象の肌状態は悪いと評価する手順;及び,
評価された結果を表示する手順;を有する,前記方法
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す。
A skin condition evaluation method performed by one or more computers, comprising:
A procedure for obtaining data on a preset reference value for the existence rate of stratum corneum holes;
A procedure for obtaining data about stratum corneum holes in an image of the stratum corneum of a subject obtained by nonlinear or linear optics ;
A step of referring to the acquired data and calculating the ratio of the number of cells having a stratum corneum hole to the total number of stratum corneum cells of the subject as the existence ratio of the stratum corneum hole;
a procedure for evaluating that the subject's skin condition is poor when the calculated existence rate of stratum corneum holes is higher than the reference value; and
displaying the evaluated results ;
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method.
肌状態改善効果についての候補化粧料又は美容処置のスクリーニング方法であって,
皮膚に対する候補化粧料又は美容処置の適用前及び後に非線形光学法又は線形光学法により取得された対象の角層の画像における角層ホールの存在率を測定すること;
前記測定した角層ホールの存在率を適用前後で比較すること;
前記適用後の角層ホールの存在率が適用前のものよりも低い場合に,前記候補化粧料又は美容処置は肌状態改善効果があると判断すること;
を含む,前記方法
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す。
A method of screening candidate cosmetics or cosmetic treatments for skin condition improving effects, comprising:
measuring the prevalence of stratum corneum holes in images of the stratum corneum of a subject obtained by nonlinear or linear optics before and after application of a candidate cosmetic or cosmetic treatment to the skin;
Comparing the measured stratum corneum hole abundance ratio before and after application;
Determining that the candidate cosmetic or cosmetic treatment has an effect of improving skin condition when the prevalence of stratum corneum holes after application is lower than that before application;
the method , comprising
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method.
対象の美容行為を支援する美容カウンセリング方法であって,
請求項1~6のいずれか1項に記載の方法により評価された結果を対象に提示することを含む,前記方法。
A beauty counseling method for supporting a subject's beauty treatment, comprising:
A method comprising presenting to a subject the results evaluated by the method according to any one of claims 1-6.
請求項7に記載のスクリーニング方法により肌状態改善効果があると判断された美容処置又は化粧料を,前記対象に提案することを更に含む,請求項8に記載の方法。 9. The method according to claim 8, further comprising proposing to the subject a cosmetic treatment or cosmetic determined to be effective in improving skin condition by the screening method according to claim 7. 肌状態を評価するシステムであって,
対象の角層の画像を非線形光学法又は線形光学法により取得する画像取得部;
取得された画像から対象の角層ホールに関するデータを取得するデータ取得部;
データ取得部により取得されたデータを参照し,角層ホールが存在する場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部;及び,
前記評価部により評価した結果を表示する表示部を有する,前記システム
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す。
A system for evaluating skin condition,
an image acquisition unit that acquires an image of the target stratum corneum by a nonlinear optical method or a linear optical method ;
a data acquisition unit that acquires data on the target stratum corneum hole from the acquired image;
an evaluation unit that refers to the data acquired by the data acquisition unit and evaluates that the subject's skin condition is poor if a stratum corneum hole exists;
The system having a display unit for displaying the results evaluated by the evaluation unit ,
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method.
肌状態を評価するシステムであって,
あらかじめ設定した角層ホールの存在率の基準値に関するデータを記憶するデータベース部;
対象の角層の画像を非線形光学法又は線形光学法により取得する画像取得部;
取得された画像から対象の角層ホールに関するデータを取得するデータ取得部;
データ取得部により取得されたデータを参照し,前記対象の全角層細胞数に対する角層ホールを有する細胞数の割合を角層ホールの存在率として算出する算出部;
算出した角層ホールの存在率が前記基準値より高い場合該対象の肌状態は悪いと評価する評価部;及び,
前記評価部により評価した結果を表示する表示部を有する,前記システム
ここで,角層ホールは,非線形光学法又は線形光学法により取得された画像において観察される角層細胞において,脂質及びタンパクが存在しない直径約10μm~20μmの空洞を指す。
A system for evaluating skin condition,
a database unit that stores data relating to a preset reference value for the existence rate of stratum corneum holes;
an image acquisition unit that acquires an image of the target stratum corneum by a nonlinear optical method or a linear optical method ;
a data acquisition unit that acquires data on the target stratum corneum hole from the acquired image;
a calculation unit that refers to the data acquired by the data acquisition unit and calculates the ratio of the number of cells having stratum corneum holes to the total number of stratum corneum cells of the target as the existence ratio of stratum corneum holes;
an evaluation unit that evaluates that the subject's skin condition is poor when the calculated existence ratio of stratum corneum holes is higher than the reference value;
The system having a display unit for displaying the results evaluated by the evaluation unit ,
Here, the stratum corneum hole refers to a cavity with a diameter of about 10 μm to 20 μm in which lipids and proteins do not exist in stratum corneum cells observed in images obtained by nonlinear optical method or linear optical method.
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