JP6543862B2 - Method and apparatus for detecting and quantifying biological origin dirt - Google Patents
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Description
本発明は、生体由来汚れの検出定量方法および検出定量装置に関する。 TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for detecting and quantifying biological origin dirt and a detection and quantification device.
近年、院内感染の問題が大きくなってきており、感染リスクを低減させることが医療機関においての必須課題となっている。
一般的に医療器具は高価であるため、可能な限り洗浄リサイクルが行われる。感染因子となる細菌やウイルスが存在している可能性のある血液、体液、組織片等の生体由来汚れが付着した医療器具は、通常、感染リスクを低減させるため、洗浄（第１工程）と消毒（第２工程）の２工程を経て洗浄リサイクルが行われる。
In recent years, the problem of nosocomial infection has been increasing, and reducing the risk of infection has become an essential issue in medical institutions.
Since medical instruments are generally expensive, cleaning and recycling is performed as much as possible. Medical devices to which biological origin stains such as blood, body fluids, tissue fragments, etc., in which bacteria or viruses that may be infectious agents may be attached, are usually washed (step 1) to reduce the risk of infection. Cleaning and recycling are performed through two steps of disinfection (the second step).
洗浄（第１工程）の方法には、浸漬洗浄、用手洗浄、および超音波洗浄機やウォッシャーディスインフェクター等による機械洗浄などがある。
しかし、上記のような洗浄を行っても、医療器具に生体由来汚れが残存している場合がある。その場合、消毒（第２工程）の効果が十分に発揮されず感染の可能性が高くなる。このため洗浄後の医療器具の清浄度を確認する必要がある。
Examples of the method of cleaning (first step) include immersion cleaning, manual cleaning, and machine cleaning using an ultrasonic cleaner, washer disinfector, or the like.
However, even if the cleaning as described above is performed, there may be cases where biomedical contamination remains on the medical device. In that case, the effect of the disinfection (the second step) is not sufficiently exerted and the possibility of infection is increased. For this reason, it is necessary to confirm the cleanliness of the medical device after cleaning.
また、最近では、患者の痛み、発熱、出血、感染症などの合併症抑制や、患者の早期回復、早期社会復帰、入院期間の短縮等に伴う経済的負担軽減などの観点から、内視鏡、腹腔鏡、手術支援ロボット等を使用するなどして、従来に比べて低侵襲な治療や検査が数多く実施されている。
内視鏡、腹腔鏡、手術支援ロボットに使用され医師の手に相当するアーム状の器具（例えば、ｄａ Ｖｉｎｃｉ Ｓｕｒｇｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍに使用されるＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）、ダヴィンチ鉗子、操作鉗子など）は、複雑な操作を可能にするため多数の精密部品から構成された複雑な内部構造を有する。また、これらは分解しにくい構造となっていることが多いため、通常の器具よりも洗浄が困難であり、汚れが落ちにくい。加えて、汚れの落ち具合の確認もしにくい。
そのため、特に内視鏡、腹腔鏡、ＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）、ダヴィンチ鉗子、操作鉗子等の最新医療器具の清浄度を評価することを目的とし、最新医療器具から生体由来汚れを抽出する方法が求められている。
In recent years, endoscopes have been included from the viewpoints of suppressing complications such as pain, fever, hemorrhage and infections in patients, and reducing the economic burden associated with early recovery of patients, early return to society, and shortening of hospitalization period. A number of less invasive treatments and examinations have been carried out in comparison with the prior art, using laparoscopes, surgery support robots and the like.
Arm-shaped instruments used in endoscopes, laparoscopes, surgery support robots and corresponding to the hands of doctors (eg, EndoWrist®, Da Vinci forceps, manipulation forceps, etc. used in the da Vinci Surgical System) It has a complex internal structure composed of a large number of precision parts to enable complex operation. In addition, since these are often difficult to be disassembled, they are more difficult to clean than ordinary instruments and dirt is difficult to remove. In addition, it is difficult to check the degree of dirt removal.
Therefore, there is a method to extract biological origin dirt from the latest medical devices, in particular to evaluate the cleanliness of the latest medical devices such as endoscopes, laparoscopes, EndoWrist (R), Da Vinci forceps, manipulation forceps etc. It has been demanded.
洗浄後の操作鉗子等の清浄度を評価するための抽出方法として、例えば非特許文献１には、各施設から回収した１０回使用後のＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）を先端部とシャフト部に分解し、試験管に分解した先端部と抽出液（０．２ＮａＯＨ／１％ＳＤＳ）を入れ、７０℃６０分浸漬と超音波処理を繰り返し行い、残留蛋白質を抽出する方法が開示されている。
As an extraction method for evaluating the cleanliness of the operation forceps and the like after cleaning, for example, in Non-Patent
非特許文献２には、ダヴィンチ鉗子内腔に、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＡＴＣＣ６６３３（ｓｐｏｒｅ ｆｏｒｍ）を加えた汚染血液を５０ｍＬシリンジで２回注入し、４時間の自然乾燥後、４５分間の洗浄処理を行い、その後、卓上超音波洗浄器を用いて残存生菌の抽出を５分間行う方法を開示されている。非特許文献２に記載の方法では、滅菌水１００ｍＬに鉗子先端を埋没させた状態で、鉗子内筒に５０ｍＬシリンジで２回循環注入し、鉗子先端を流す方法により、残存生菌を抽出している。 In Non-Patent Document 2, contaminated blood containing Bacillus subtilis ATCC 6633 (spore form) is injected twice into the da Vinci forceps lumen with a 50 mL syringe, and after 45 minutes of natural drying for 4 hours, washing treatment is performed, Thereafter, a method is disclosed in which extraction of remaining viable bacteria is performed for 5 minutes using a table-top ultrasonic cleaner. In the method described in Non-Patent Document 2, in a state where the forceps tip is buried in 100 mL of sterile water, circulation injection is performed twice with a 50 mL syringe into the forceps inner cylinder, and the remaining viable bacteria are extracted by flowing the forceps tip. There is.
非特許文献３には、ロボット支援手術で使用された操作鉗子の外表面と鉗子表面の蛋白質量については、蒸留水０．５ｍＬを含ませたコメガーゼで拭き取ることで測定し、内腔部分の蛋白質量については、拭い終わった操作鉗子をポリ袋内に挿入し、二つのフラッシュポートから蒸留水各１００ｍＬを注入し、ポリ袋の中の空気を排除しながら操作鉗子全体を温水を張った超音波洗浄槽に袋越しに入れ、超音波発振機を出力させ、３０分間後にポリ袋内の溶液を十分に攪拌して蛋白質を抽出する方法が開示されている。
In
しかしながら、非特許文献１に記載の方法では、ＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）から残留蛋白質を抽出するに際して先端部とシャフト部に分解するため、ＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）の再利用が困難であり、器具の再利用という観点では抽出方法として不向きである。また、ＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）の先端部のみ蛋白質の抽出を行い、シャフト部や本体部からは蛋白質を抽出していないため、清浄度を正確に評価しにくい。さらに、抽出液として高温高濃度のアルカリ水溶液を用い、しかも長時間の超音波処理によって蛋白質を抽出しているため、非常に精細な構造を有するＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）の部品の腐食や故障のおそれがある。
However, in the method described in
非特許文献２に記載の方法のように、浸透作用性や分散作用性が低い滅菌水を使用し、超音波処理を５分間行っただけでは、器具内部の汚れを十分に抽出できない。また、物理的ストレスがかかる超音波照射で蛋白質を抽出しているため、ダヴィンチ鉗子が故障するおそれがある。 As in the method described in Non-Patent Document 2, the use of sterile water having low permeability and dispersive activity and ultrasonication for 5 minutes alone can not sufficiently extract the inside of the instrument. In addition, Da Vinci forceps may break down because the protein is extracted by ultrasonic irradiation that is physically stressed.
非特許文献３の方法では、操作鉗子を外表面と鉗子表面と内腔部分とに分けて蛋白質を抽出しているため、作業が煩雑である。また、操作鉗子の内腔部分の抽出に浸透作用性や分散作用性が低い蒸留水を使用しているため器具内部の汚れを十分に抽出できない。さらに、物理的ストレスがかかる超音波照射で蛋白質を抽出しているため、操作鉗子が故障するおそれがある。
In the method of
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、検査対象物を分解することなく、また故障の原因となる物理的ストレスを検査対象物にかけずに、簡便かつ効率よく生体由来汚れを抽出して検出定量する方法および装置を提供することを目的とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, and can easily and efficiently extract biological contamination without decomposing the test object and without applying the physical stress causing the failure to the test object. It is an object of the present invention to provide a method and apparatus for detecting and quantifying.
本発明は以下の態様を有する。
［１］ 検査対象物に付着した生体由来汚れを検出定量する方法であって、前記検査対象物に界面活性剤を含む抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出する抽出工程と、抽出した生体由来汚れを検出定量する検出定量工程と、を有する、生体由来汚れの検出定量方法。
［２］ 前記抽出液を循環させて前記検査対象物に繰り返し流動的に接触させる、［１］に記載の生体由来汚れの検出定量方法。
［３］ 前記検査対象物が使用後に洗浄を行った器具である、［１］又は［２］に記載の生体由来汚れの検出定量方法。
［４］ 前記抽出液の粘度が０．１〜５００ｍＰａ・ｓである、［１］〜［３］のいずれか１つに記載の生体由来汚れの検出定量方法。
［５］ 前記検査対象物が液注入口を有するマニピュレータであり、液注入口にアダプタを装着して抽出液を注入し、マニピュレータに抽出液を流動的に接触させる、［１］〜［４］のいずれか１つに記載の生体由来汚れの検出定量方法。
The present invention has the following aspects.
[1] A method for detecting and quantifying bio-based dirt adhering to a test object, wherein an extraction liquid containing a surfactant is brought into fluid contact with the test subject to extract bio-based dirt. And detecting and quantifying the extracted biological origin dirt, and detecting and quantifying the biological origin dirt.
[2] The method for detecting and quantifying bio-based dirt according to [1], wherein the extract is circulated and repeatedly and fluidly contacted with the test object.
[3] The method for detecting and quantifying biological origin dirt according to [1] or [2], which is an instrument in which the test object is washed after use.
[4] The method according to any one of [1] to [3], wherein the viscosity of the extract is 0.1 to 500 mPa · s.
[5] The object to be inspected is a manipulator having a liquid inlet, and an adapter is attached to the liquid inlet to inject the extract, and the manipulator is brought into fluid contact with the extract, [1] to [4] The method for detecting and quantifying biological origin dirt according to any one of the above.
［６］ 検査対象物に付着した生体由来汚れを検出定量する装置であって、前記検査対象物に界面活性剤を含む抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出する抽出手段と、抽出した生体由来汚れを検出定量する検出定量手段とを具備し、前記抽出手段は、前記検査対象物を収容する容器と、前記容器に前記抽出液を連続的に供給する供給手段とを備える、生体由来汚れの検出定量装置。
［７］ 前記容器から排出された抽出液は前記供給手段へ返送され、抽出液は容器と供給手段との間で循環して前記検査対象物に繰り返し流動的に接触する、［６］に記載の生体由来汚れの検出定量装置。
[6] An apparatus for detecting and quantifying bio-based soil attached to a test object, wherein an extracting solution containing a surfactant is brought into fluid contact with the test subject to extract bio-based soil. And detecting and quantifying means for detecting and quantifying the extracted biological origin dirt, and the extracting means comprises a container for containing the inspection object, and a supplying means for continuously supplying the liquid extract to the container. , Biometric stain detection device.
[7] The extract liquid discharged from the container is returned to the supply means, and the extract liquid is circulated between the container and the supply means to repeatedly and fluidly contact the object to be inspected, as described in [6]. Detection and quantification device of biological origin dirt.
本発明の生体由来汚れの検出定量方法および検出定量装置によれば、検査対象物を分解することなく、また故障の原因となる物理的ストレスを検査対象物にかけずに、簡便かつ効率よく生体由来汚れを抽出して検出定量できる。 According to the detection and quantification method and the detection and quantification device of the biological origin dirt of the present invention, the biological origin can be simply and efficiently derived without degrading the inspection target and without applying the physical stress causing the failure to the inspection target. It can detect and quantify stains.
以下、本発明を詳細に説明する。
「生体由来汚れの検出定量方法」
本発明の生体由来汚れの検出定量方法は、検査対象物に付着した生体由来汚れを検出定量する方法であって、以下に示す抽出工程と、検出定量工程とを有する。
本発明において、「生体由来汚れ」とは、手術等によって付着した汚れであり、例えば血液、体液、組織片などが挙げられる。
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
"Determination and quantification method of biological origin dirt"
The method for detecting and quantifying biological origin dirt according to the present invention is a method for detecting and quantifying biological origin dirt attached to an object to be examined, and includes an extraction step and a detection and quantification step described below.
In the present invention, “biologically-derived stain” is a stain attached by surgery or the like, and examples thereof include blood, body fluid, tissue fragments and the like.
＜検査対象物＞
検査対象物としては、生体由来汚れが付着している可能性があるものであれば特に限定されない。
検査対象物としては、例えば、手術、検査、治療等に使用される医療用器具、食品の製造や加工に使用される食品用器具等の器具が挙げられる。また、これら器具を使用した後に洗浄を行ったものや、洗浄と消毒を行ったものを検査対象物としてもよい。これらの中でも、使用後に洗浄を行った器具が再利用可能か否か確認する、あるいは器具の洗浄方法の適正さを確認するという観点から、検査対象物としては、使用後に洗浄、あるいは洗浄と消毒を行った器具が好適である。
<Inspection object>
The inspection object is not particularly limited as long as there is a possibility that biological origin dirt is attached.
Examples of the test object include devices such as medical devices used for surgery, examination, treatment, etc., and food devices used for manufacturing and processing food. Moreover, it is good also considering what wash | cleaned after using these instruments, and what wash | cleaned and disinfected is made into a test object. Among these, from the viewpoint of confirming whether or not the device which has been cleaned after use can be reused, or from the viewpoint of confirming the appropriateness of the cleaning method of the device, the inspection object is cleaning after cleaning, or cleaning and disinfection The device which performed the above is suitable.
医療用器具としては、例えば内視鏡、腹腔鏡、手術支援ロボットに使用され医師の手に相当するアーム状の器具（以下、「マニピュレータ」という。）、鑷子、鉗子、剪刀、吸引管、カテーテル、注射針などが挙げられる。これらの中でも、本発明は、抽出や清浄度の確認が困難な医療用器具、具体的には精密な部品で構成され分解が困難な医療用器具（例えば、内視鏡、腹腔鏡、マニピュレータ）に対して好適であり、その中でも特にマニピュレータに対して好適である。 As medical instruments, for example, endoscopes, laparoscopes, arm-like instruments used in operation support robots and corresponding to the hands of doctors (hereinafter referred to as "manipulators"), forceps, forceps, scissors, suction tubes, catheters And injection needles. Among these, the present invention is a medical instrument whose extraction and cleanliness are difficult to check, specifically, a medical instrument composed of precise parts and difficult to disassemble (for example, an endoscope, a laparoscope, a manipulator) Are particularly suitable for manipulators, among others.
マニピュレータとしては、例えばｄａ Ｖｉｎｃｉ Ｓｕｒｇｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍに使用されるＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）、ダヴィンチ鉗子、操作鉗子などが挙げられる。
マニピュレータは、一般的に、先端部とシャフト部と本体部とで構成される。
マニピュレータの先端部は、手術等の精密な操作を行う鑷子、鉗子、剪刀等の治具からなる。
マニピュレータのシャフト部は、本体部と先端部を連結するものであり、先端部の治具を駆動させるワイヤーを挿通するため管状構造となっている。
マニピュレータの本体部（「ハウジング部」ともいう。）は、先端部の操作を可能とするためワイヤー、プーリー等の精密な部品で構成された内部構造を有する。また、本体部は、洗浄液等を注入するための液注入口（「メインフラッシュポート」ともいう。）を有し、液注入口から注入された洗浄液等が、本体部内を伝わった後、シャフト部内を経由して先端部の空隙部より排出される構造をとっている。このような構造により、マニピュレータの使用後にマニピュレータ内部の洗浄が可能となる。
Examples of the manipulator include EndoWrist (registered trademark), Da Vinci forceps, operation forceps, and the like used in the da Vinci Surgical System.
The manipulator generally comprises a tip, a shaft and a main body.
The tip portion of the manipulator is made of a jig such as forceps, forceps, or scissors for performing precise operations such as surgery.
The shaft portion of the manipulator connects the main body portion and the distal end portion, and has a tubular structure for inserting a wire for driving a jig at the distal end portion.
The main body (also referred to as a "housing") of the manipulator has an internal structure made of precision parts such as wires and pulleys in order to enable the operation of the tip. In addition, the main body has a liquid injection port (also referred to as a "main flush port") for injecting a cleaning liquid or the like, and after the cleaning liquid or the like injected from the liquid injection port is transmitted through the main body, The structure is such that it is discharged from the air gap of the tip through Such a structure enables cleaning of the inside of the manipulator after use of the manipulator.
＜抽出工程＞
抽出工程は、検査対象物に界面活性剤を含む抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出する工程である。以下、検査対象物に接触させる前の抽出液を「接触前抽出液」ともいい、生体由来汚れが抽出された抽出液を「生体由来汚れ抽出液」ともいう。
<Extraction process>
The extraction step is a step of fluidly bringing an extract liquid containing a surfactant into contact with the test object to extract biological contamination. Hereinafter, the extract before contacting the test object is also referred to as "pre-contact extract", and the extract from which biological origin dirt is extracted is also referred to as "biological origin dirt extract".
（抽出液）
抽出工程で使用する抽出液は、界面活性剤を含む。
界面活性剤としては、生体由来汚れに対して強い洗浄性を有し、検査対象物に対して腐食の影響を与えにくいものであれば特に限定されず、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤、両性界面活性剤が挙げられる。これらは１種又は２種以上を使用することができる。これらの中でも、生体由来汚れ（特に蛋白質）の抽出効率が高く、検査対象物を腐食しにくい観点から、アニオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤、両性界面活性剤が好ましく、アニオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤がより好ましい。
(Extract)
The extract used in the extraction step contains a surfactant.
The surfactant is not particularly limited as long as it has strong detergency against biological stains and is hardly affected by corrosion on the test object, and anionic surfactant, cationic surfactant, Nonionic surfactants and amphoteric surfactants can be mentioned. One or more of these can be used. Among them, anionic surfactants, nonionic surfactants and amphoteric surfactants are preferable, from the viewpoint of high extraction efficiency of biological origin dirt (especially protein) and hardly corroding the test object, and anionic surfactants and nonionic surfactants. Surfactants are more preferred.
アニオン界面活性剤としては特に限定はなく、例えば、炭素数１０〜２２の石鹸、炭素数１４〜２４のアルキルベンゼンスルホン酸塩、炭素数１０〜２２の高級アルコール硫酸エステル塩、アルキル基の炭素数１０〜２２でありポリオキシエチレン基のオキシエチレン単位の繰り返し数が１〜１０のポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、炭素数１０〜２２のα−スルホ脂肪酸エステル、炭素数８〜１８のα−オレフィンスルホン酸塩、炭素数１０〜２２のアルカンスルホン酸塩、炭素数１０〜２２のモノアルキルリン酸エステル塩等が挙げられる。これらの中でも、生体由来汚れ（特に蛋白質）の抽出効率が高く、検査対象物を腐食しにくい観点から、炭素数１０〜２２の石鹸、炭素数１４〜２４のアルキルベンゼンスルホン酸塩、炭素数１０〜２２の高級アルコール硫酸エステル塩、アルキル基の炭素数１０〜２２でありポリオキシエチレン基のオキシエチレン単位の繰り返し数が１〜１０のポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、炭素数８〜１８のα−オレフィンスルホン酸塩、炭素数１０〜２２のアルカンスルホン酸塩が好ましく、炭素数１０〜２２の高級アルコール硫酸エステル塩、炭素数８〜１８のα−オレフィンスルホン酸塩、炭素数１０〜２２のアルカンスルホン酸塩がより好ましく、炭素数１０〜２２の高級アルコール硫酸エステル塩が特に好ましい。これらは１種又は２種以上を使用することができる。 The anionic surfactant is not particularly limited, and examples thereof include soaps having 10 to 22 carbon atoms, alkyl benzene sulfonates having 14 to 24 carbon atoms, higher alcohol sulfate esters having 10 to 22 carbon atoms, and 10 carbon atoms of an alkyl group. -22, polyoxyethylene alkyl ether sulfate having 1 to 10 repeating number of oxyethylene units of polyoxyethylene group, 1 to 22 carbon α-sulfo fatty acid ester, 8 to 18 carbon α-olefin sulfone An acid salt, a C10-C22 alkanesulfonic acid salt, a C10-C22 monoalkyl phosphoric acid ester salt etc. are mentioned. Among them, soap having 10 to 22 carbon atoms, alkyl benzene sulfonate having 14 to 24 carbon atoms, and 10 to 10 carbon atoms from the viewpoint of high extraction efficiency of biological origin dirt (especially protein) and corrosion resistance of the test object. 22 higher alcohol sulfuric acid ester salts, polyoxyethylene alkyl ether sulfates having 10 to 22 carbon atoms in the alkyl group and having 1 to 10 repeating oxyethylene units of the polyoxyethylene group, α 8 to 18 carbon atoms Olefin sulfonate, alkane sulfonate having 10 to 22 carbon atoms are preferable, higher alcohol sulfate ester salt having 10 to 22 carbon atoms, α-olefin sulfonate having 8 to 18 carbon atoms, alkane having 10 to 22 carbon atoms Sulfonic acid salts are more preferred, and C10-22 higher alcohol sulfuric ester salts are particularly preferred. One or more of these can be used.
両性界面活性剤としては特に限定はなく、例えば、アルキルアミノ脂肪酸塩、アルキルベタイン、アルキルアミンオキシド等が挙げられる。これらは１種又は２種以上を使用することができる。 The amphoteric surfactant is not particularly limited, and examples thereof include alkylamino fatty acid salts, alkyl betaines, alkylamine oxides and the like. One or more of these can be used.
ノニオン界面活性剤としては特に限定はなく、例えば、高級アルコールアルキレンオキサイド付加物、アルキルフェノールアルキレンオキサイド付加物、脂肪酸アルキレンオキサイド付加物、多価アルコール脂肪酸エステルアルキレンオキサイド付加物、高級アルキルアミンアルキレンオキサイド付加物、脂肪酸アミドアルキレンオキサイド付加物、ポリオキシプロピレンのアルキレンオキサイド付加物のポリアルキレングリコール型；グリセロール脂肪酸エステル、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ソルビトール脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルの多価アルコール型等が挙げられる。ここで述べた高級アルコールは通常炭素数８〜２２の直鎖又は分岐の不飽和又は飽和の高級アルコールである。また、アルキルフェノールは通常炭素数６〜２２の直鎖又は分岐の不飽和又は飽和のアルキルフェノールである。また、脂肪酸は通常炭素数１０〜２２の不飽和又は飽和の脂肪酸である。また、多価アルコールは通常炭素数３〜１２の多価アルコールである。また、高級アルキルアミンは通常炭素数８〜２２の直鎖又は分岐の不飽和又は飽和の高級アルキルアミンである。アルキレンオキサイドは、具体的には、エチレンオキサイド、プロピレンオキサイド、１，２−、２，３−、１，３−および１，４−ブチレンオキサイドなどが挙げられ、エチレンオキサイド、プロピレンオキサイドが好ましい。また、アルキレンオキサイドは同一であっても異なっていてもよく、異なっている場合は、ブロック付加でもランダム付加でも交互付加でも構わない。アルキレンオキサイドの付加モル数は１〜８０が好ましく、２〜６０がより好ましく、５〜４０が特に好ましい。これらの中でも、生体由来汚れ（特に蛋白質）の抽出効率が高く、検査対象物を腐食しにくい観点から、高級アルコールアルキレンオキサイド付加物、アルキルフェノールアルキレンオキサイド付加物、脂肪酸アルキレンオキサイド付加物、多価アルコール脂肪酸エステルアルキレンオキサイド付加物、高級アルキルアミンアルキレンオキサイド付加物、脂肪酸アミドアルキレンオキサイド付加物、ポリオキシプロピレンのアルキレンオキサイド付加物のポリアルキレングリコール型；グリセロール脂肪酸エステルが好ましく、高級アルコールアルキレンオキサイド付加物、アルキルフェノールアルキレンオキサイド付加物、脂肪酸アルキレンオキサイド付加物、多価アルコール脂肪酸エステルアルキレンオキサイド付加物、高級アルキルアミンアルキレンオキサイド付加物、脂肪酸アミドアルキレンオキサイド付加物がより好ましい。これらは１種又は２種以上を使用することができる。 The nonionic surfactant is not particularly limited. For example, higher alcohol alkylene oxide adducts, alkylphenol alkylene oxide adducts, fatty acid alkylene oxide adducts, polyhydric alcohol fatty acid ester alkylene oxide adducts, higher alkylamine alkylene oxide adducts, Examples thereof include fatty acid amide alkylene oxide adducts, polyalkylene glycol types of alkylene oxide adducts of polyoxypropylene, glycerol fatty acid esters, pentaerythritol fatty acid esters, sorbitol fatty acid esters, polyhydric alcohol types of sucrose fatty acid esters, and the like. The higher alcohol mentioned here is usually a linear or branched unsaturated or saturated higher alcohol having 8 to 22 carbon atoms. The alkylphenol is usually a linear or branched unsaturated or saturated alkylphenol having 6 to 22 carbon atoms. The fatty acid is usually an unsaturated or saturated fatty acid having 10 to 22 carbon atoms. The polyhydric alcohol is usually a polyhydric alcohol having 3 to 12 carbon atoms. The higher alkylamine is usually a linear or branched unsaturated or saturated higher alkylamine having 8 to 22 carbon atoms. Specific examples of the alkylene oxide include ethylene oxide, propylene oxide, 1,2-, 2,3-, 1,3- and 1,4-butylene oxide, and ethylene oxide and propylene oxide are preferable. The alkylene oxides may be the same or different, and when they are different, block addition, random addition or alternation addition may be used. 1-80 are preferable, as for the addition mole number of alkylene oxide, 2-60 are more preferable, and 5-40 are especially preferable. Among these, higher alcohol alkylene oxide adducts, alkylphenol alkylene oxide adducts, fatty acid alkylene oxide adducts, polyhydric alcohol fatty acids, from the viewpoint of high extraction efficiency of biological origin dirt (especially protein) and hardly corroding the test object. Ester alkylene oxide adduct, higher alkylamine alkylene oxide adduct, fatty acid amide alkylene oxide adduct, polyalkylene glycol type of alkylene oxide adduct of polyoxypropylene, glycerol fatty acid ester is preferable, higher alcohol alkylene oxide adduct, alkylphenol alkylene Oxide adducts, fatty acid alkylene oxide adducts, polyhydric alcohol fatty acid ester alkylene oxide adducts, higher alkyl esters Emissions alkylene oxide adducts, fatty acid amide alkylene oxide adducts are more preferred. One or more of these can be used.
界面活性剤の濃度は、生体由来汚れの抽出効率が高まり、経済的でもある観点から、抽出液１００質量％中、０．０１〜１０質量％が好ましく、０．１〜５質量％がより好ましい。 The concentration of the surfactant is preferably 0.01 to 10% by mass, and more preferably 0.1 to 5% by mass in 100% by mass of the extract, from the viewpoint that the extraction efficiency of biological origin dirt is enhanced and is also economical. .
界面活性剤を希釈する溶媒としては、水が好ましく、具体的には、水道水、イオン交換水、蒸留水、ＲＯ水等が挙げられる。これらは１種又は２種以上を使用することができる。 As a solvent for diluting the surfactant, water is preferable, and specifically, tap water, ion exchanged water, distilled water, RO water and the like can be mentioned. One or more of these can be used.
抽出液は、検査対象物を損なわない程度であれば、アルカリ剤を含んでいてもよい。
アルカリ剤としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、燐酸ナトリウム、燐酸カリウムなどが挙げられる。これらは１種又は２種以上を使用することができる。
アルカリ剤の濃度は、生体由来汚れの抽出効率が高まり、検査対象物を腐食しにくい観点から、抽出液１００質量％中、１０質量％以下が好ましく、５質量％以下がより好ましく、０質量％（アルカリ剤を含まないこと）が特に好ましい。
The extract may contain an alkaline agent as long as it does not impair the test object.
Examples of the alkali agent include sodium hydroxide, potassium hydroxide, sodium carbonate, sodium hydrogencarbonate, potassium carbonate, potassium hydrogencarbonate, sodium phosphate, potassium phosphate and the like. One or more of these can be used.
The concentration of the alkali agent is preferably 10% by mass or less, more preferably 5% by mass or less, in 100% by mass of the extract, from the viewpoint of enhancing extraction efficiency of biological origin dirt and preventing corrosion of the inspection object. (Having no alkali agent) is particularly preferred.
また、抽出液は、検査対象物を損なわない程度であれば、有機溶剤を含んでいてもよい。
有機溶剤としては、例えばメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類；ジメチルエーテル、エチルメチルエーテル、ジエチルエーテル等のエーテル類；酢酸メチル、サリチル酸メチル等のエステル類；アセトン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン等のケトン類；エチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類；エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル等のグリコールエーテル類；シクロヘキサン、メチルシクロヘキサン等の脂環式炭化水素類；ノルマルヘキサン、ノルマルヘプタン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類などが挙げられる。これらは１種又は２種以上を使用することができる。
In addition, the extract may contain an organic solvent as long as it does not damage the inspection object.
Examples of the organic solvent include alcohols such as methanol, ethanol and isopropyl alcohol; ethers such as dimethyl ether, ethyl methyl ether and diethyl ether; esters such as methyl acetate and methyl salicylate; ketones such as acetone, methyl ethyl ketone and diethyl ketone Glycols such as ethylene glycol and propylene glycol; glycol ethers such as ethylene glycol monomethyl ether, ethylene glycol monoethyl ether and ethylene glycol monobutyl ether; alicyclic hydrocarbons such as cyclohexane and methylcyclohexane; normal hexane, normal heptane And aliphatic hydrocarbons such as benzene, toluene, and aromatic hydrocarbons such as xylene. One or more of these can be used.
抽出液の粘度は、０．１〜５００ｍＰａ・ｓが好ましく、０．２〜１００ｍＰａ・ｓがより好ましい。抽出液の粘度が０．１ｍＰａ・ｓ以上であれば、生体由来汚れに対する抽出液の浸透性が高まる。一方、抽出液の粘度が５００ｍＰａ・ｓ以下であれば、検査対象物の細部にまで抽出液が行き渡りやすくなる。また、後述する抽出手段を用い、抽出液を循環させて検査対象物に繰り返し接触させる場合、抽出液が円滑に流れる。
抽出液の粘度は、キャノン・フェンスケ粘度計等の毛細管粘度計を用い、液温２０℃で接触前抽出液の粘度を測定することで求められる。
0.1-500 mPa * s is preferable and, as for the viscosity of an extraction liquid, 0.2-100 mPa * s is more preferable. If the viscosity of the extract is 0.1 mPa · s or more, the permeability of the extract to biological origin dirt is enhanced. On the other hand, if the viscosity of the extract is 500 mPa · s or less, the extract easily spreads to the details of the test object. In addition, when the extract is circulated to be repeatedly brought into contact with the inspection object using the extraction means described later, the extract flows smoothly.
The viscosity of the extract is determined by measuring the viscosity of the extract before contact at a liquid temperature of 20 ° C. using a capillary viscometer such as a Cannon-Fenske viscometer.
（接触方法）
抽出工程では、検査対象物に抽出液を流動的に接触させる。接触方法としては、抽出液が流れていれば特に制限されないが、例えば後述する容器に検査対象物を収容し、容器内に抽出液を連続的に流すことで検査対象物に抽出液を流動的に接触させる方法などが挙げられる。
検査対象物に抽出液を流動的に接触させることで、検査対象物を分解することなく、また故障の原因となる超音波処理等の物理的ストレスを検査対象物にかけずに、簡便かつ効率よく生体由来汚れを抽出できる。
(Contact method)
In the extraction step, the extract is fluidly brought into contact with the test object. The contact method is not particularly limited as long as the extract is flowing, but for example, the test object is accommodated in a container described later, and the extract is fluidly flowed in the container by continuously flowing the extract into the container. And the like.
By bringing the extract fluidly in contact with the test object, the test object is not disassembled, and physical stress such as ultrasonic treatment that causes a failure is not applied to the test object simply and efficiently. Biologically derived dirt can be extracted.
少量で、効率よく生体由来汚れを抽出できる観点から、抽出液を循環させて検査対象物に繰り返し流動的に接触させることが好ましい。抽出液を循環させるとは、検査対象物を通過した生体由来汚れ抽出液を再び検査対象物に流動的に接触させる操作を繰り返すことである。例えば、容器に検査対象物を収容して抽出液を流動的に接触させる場合は、容器から排出された生体由来汚れ抽出液を再び容器に供給する操作を繰り返せばよい。 From the viewpoint of efficient extraction of biological origin stains with a small amount, it is preferable to circulate the extract solution and to repeatedly and fluidly contact the test object. To circulate the extract is to repeat the operation of bringing the biological soil extract that has passed through the test object into fluid contact with the test object again. For example, in the case where the test object is accommodated in the container and the extract liquid is brought into fluid contact, the operation of supplying the biological soil extract extracted from the container to the container again may be repeated.
検査対象物がマニピュレータである場合、マニピュレータの液注入口にアダプタを装着して抽出液を注入し、マニピュレータに抽出液を流動的に接触させることが好ましい。液注入口から注入された抽出液は、マニピュレータの本体部内を伝わった後、シャフト部内を経由して先端部の空隙部より排出される。これにより、マニピュレータ内部の生体由来汚れも十分に抽出できる。 When the object to be inspected is a manipulator, it is preferable that an adapter be attached to the liquid inlet of the manipulator to inject the extract, and the manipulator be in fluid contact with the extract. Extracted liquid injected from the liquid injection port is transmitted through the inside of the main body of the manipulator, and then discharged from the gap of the tip through the inside of the shaft. Thereby, biological origin dirt inside a manipulator can also be extracted enough.
検査対象物を容器に収容して抽出液を接触させる場合、容器を傾斜させた状態で抽出液を検査対象物に接触させることが好ましい。容器を傾斜させることで、抽出液量が少ない場合でも容器内に滞留する抽出液量を減少できる。
また、容器の材質が柔らかく圧縮等によって形態が変わる場合、容器内を減圧した状態で検査対象物に抽出液を接触させることが好ましい。容器内を減圧させることで、容器と検査対象物との隙間が少なくなり、検査対象物の内部および周囲に集中的に抽出液を接触させることができる。
In the case where the inspection object is contained in a container and brought into contact with the extraction liquid, it is preferable that the extraction liquid be brought into contact with the inspection object while the container is inclined. By tilting the container, the amount of extract remaining in the container can be reduced even when the amount of extract is small.
When the material of the container is soft and the form is changed due to compression or the like, it is preferable to bring the extract liquid into contact with the inspection object in a state where the pressure in the container is reduced. By reducing the pressure in the container, the gap between the container and the test object is reduced, and the extract can be intensively brought into contact with the inside and the periphery of the test object.
抽出液の流速は特に限定されるものではないが、抽出効率および検査対象物にかかる負荷を考慮すると、１０〜１０，０００ｍＬ／分が好ましく、２０〜５，０００ｍＬ／分がより好ましい。 Although the flow rate of the extract is not particularly limited, it is preferably 10 to 10,000 mL / min, and more preferably 20 to 5,000 mL / min, considering the extraction efficiency and the load on the test object.
抽出液の使用量（抽出液量）は、検出対象となる検査対象物の大きさ、表面積、使用状況等に応じて調節すればよく、特に限定されるものではないが、抽出工程によって得られた生体由来汚れ抽出液中の抽出成分を検出することを考慮すると、出来うる限り少ない量を選択することが好ましい。 The amount of extraction solution used (extraction solution volume) may be adjusted according to the size, surface area, use condition, etc. of the test object to be detected, and is not particularly limited. In consideration of detecting the extract component in the biological origin soil extract, it is preferable to select the smallest possible amount.
抽出液の温度は特に限定されるものではないが、抽出効率および検査対象物にかかる負荷を考慮すると、０〜１５０℃が好ましく、１０〜８０℃がより好ましく、３０〜６０℃が特に好ましい。
抽出液は、予め超音波処理などにより気泡を取り除いておくことが好ましい。気泡を取り除くことで、生体由来汚れの抽出効果がより高まる。
Although the temperature of the extract is not particularly limited, it is preferably 0 to 150 ° C., more preferably 10 to 80 ° C., and particularly preferably 30 to 60 ° C. in consideration of the extraction efficiency and the load applied to the test object.
It is preferable to remove bubbles from the extract in advance by ultrasonic treatment or the like. Removal of the air bubbles further enhances the extraction effect of biological origin dirt.
抽出時間は、抽出液の流速や温度等に応じて調節すればよく、特に限定されるものではないが、生体由来汚れの抽出効率が高まり、経済的でもある観点から、０．１〜１００時間が好ましく、０．５〜５０時間がより好ましい。 The extraction time may be adjusted according to the flow rate and temperature of the extract, etc., and is not particularly limited, but from the viewpoint of enhancing the extraction efficiency of biological origin dirt and being economical, 0.1 to 100 hours Is preferable, and 0.5 to 50 hours is more preferable.
＜検出定量工程＞
検出定量工程は、抽出工程にて抽出した生体由来汚れを検出定量する工程である。
抽出工程によって検査対象物から抽出された成分は、手術等によって付着した汚れであり、主に生体由来汚れである。生体由来汚れを検出する方法としては、生体由来汚れ中の蛋白質、核酸、糖、脂肪、ＡＴＰ、ヘモグロビン等を検出する方法が挙げられるが、これらを検出する方法であれば特に限定されない。例えば、蛋白質検出方法としては、ＣＢＢ法、ＢＣＡ法等が挙げられる。核酸検出方法としては、ＵＶ法等が挙げられる。糖検出方法としては、フェノール硫酸法、ソモギ法、ベルトラン法、酵素法、ＨＰＬＣあるいはＧＣ、ＧＣ−ＭＳを使用した方法等が挙げられる。脂肪検出方法としては、酵素法、ＨＰＬＣあるいはＧＣ、ＧＣ−ＭＳを使用した方法等が挙げられる。ＡＴＰ検出方法としては、生物学的発光法等が挙げられる。ヘモグロビン検出方法としては、ＳＬＳ−Ｈｂ法、シアンメトグロビン法、オルトトリジン法、グアヤック法、免疫法等が挙げられる。これらの中でも、定量の簡便さ、正確性の観点から、抽出液をアルカリ環境下でビシンコニン酸および銅（II）を含む蛋白質検出液と反応させ、得られた反応液を分光光度計にて５６２ｎｍの吸光度を測定するＢＣＡ法、抽出液にルシフェラーゼなどを含むＡＴＰ検出液を接触させ、得られた接触液の発光量を測定する生物学的発光法、抽出液にラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を含むヘモグロビン発色試薬を反応させ、得られた反応液を分光光度計にて５４０ｎｍの吸光度を測定するＳＬＳ−Ｈｂ法が好ましい。
<Detection and quantification process>
The detection and quantification step is a step of detecting and quantifying the biological origin dirt extracted in the extraction step.
The components extracted from the test object in the extraction step are stains attached by surgery or the like, and are mainly biological stains. Examples of methods for detecting biological origin dirt include methods for detecting proteins, nucleic acids, sugars, fats, ATP, hemoglobin and the like in biological origin dirt, but there is no particular limitation as long as they are methods for detecting these. For example, as a protein detection method, CBB method, BCA method, etc. are mentioned. As a nucleic acid detection method, UV method etc. are mentioned. As a sugar detection method, a method using phenol sulfuric acid method, Somogi method, Bertrand method, enzymatic method, HPLC or GC, GC-MS, etc. may be mentioned. As a fat detection method, a method using enzyme method, HPLC or GC, GC-MS, etc. may be mentioned. Examples of ATP detection methods include biological luminescence methods and the like. The hemoglobin detection method includes the SLS-Hb method, the cyanmethoglobin method, the orthotolysin method, the guaiac method, the immunization method and the like. Among these, the extract is reacted with a protein detection solution containing bicinchoninic acid and copper (II) in an alkaline environment from the viewpoint of simplicity and accuracy of determination, and the obtained reaction solution is measured with a spectrophotometer at 562 nm The BCA method for measuring the absorbance, the biological light emission method for measuring the luminescence of the contact solution obtained by bringing the extract into contact with the ATP detection solution containing luciferase etc., the extract contains sodium lauryl sulfate (SLS) The SLS-Hb method is preferable, in which a hemoglobin coloring reagent is reacted, and the obtained reaction solution is measured for absorbance at 540 nm with a spectrophotometer.
＜作用効果＞
以上説明した本発明の生体由来汚れの検出定量方法は、検査対象物に抽出液を流動的に接触させて生体由来汚れを抽出するので、検査対象物を分解することなく、また故障の原因となる超音波処理等の物理的ストレスを検査対象物にかけずに、簡便かつ効率よく生体由来汚れを抽出し、抽出した生体由来汚れを検出定量できる。
本発明の生体由来汚れの検出定量方法は、検査対象物を分解する必要がなく、物理的ストレスを検査対象物にかけることもないので、精密な部品で構成され分解が困難な医療用器具（例えば、内視鏡、腹腔鏡、マニピュレータ）に対して好適であり、その中でも特にマニピュレータに対して好適である。
<Function effect>
The method for detecting and quantifying the bio-based soil according to the present invention described above extracts the bio-based soil by bringing the extract fluidly brought into contact with the test object to extract the bio-based soil. The biological origin soil can be extracted simply and efficiently without applying physical stress such as ultrasonic treatment to the object to be examined, and the extracted biological origin soil can be detected and quantified.
The method for detecting and quantifying biological origin dirt according to the present invention does not require decomposition of the object to be inspected and does not apply physical stress to the object to be inspected. For example, it is suitable for endoscopes, laparoscopes, manipulators), and in particular for manipulators.
検出定量工程により生体由来汚れを検出定量し、検査対象物の清浄度を確認する。洗浄が不十分などの理由により検査対象物に生体由来汚れがまだ付着していると判断した場合は、検査対象物を洗浄した後に前記抽出工程と検出定量工程を再度行い、生体由来汚れを検出定量する。
生体由来汚れが十分に除去されていると判断された検査対象物は、再利用することができる。なお、抽出工程後の検査対象物には抽出液が付着しているため、検査対象物を濯いで残留した抽出液を除去した後に再利用することが好ましい。検査対象物を濯ぐ方法としては特に限定されるものではないが、例えば、すすぎ液としてイオン交換水、蒸留水、ＲＯ水等の水を使用し、すすぎ液を循環して検査対象物に繰り返し接触させる方法などが挙げられる。また、検査対象物を濯いだ後に、防錆潤滑剤等で検査対象物に処理を施してもよい。
The biological origin dirt is detected and quantified by the detection and quantification process, and the cleanliness of the test object is confirmed. If it is determined that the biological contamination is still attached to the test object due to insufficient cleaning, etc., the extraction process and the detection and quantification process are performed again after the test object is washed, and the biological contamination is detected. Quantify.
The test object judged to be sufficiently removed from the biological soil can be reused. In addition, since the extract adheres to the test object after the extraction process, it is preferable to rinse after the test object to remove the remaining extract and to reuse it. The method for rinsing the test object is not particularly limited. For example, water such as ion exchanged water, distilled water, RO water, etc. is used as the rinse liquid, and the rinse liquid is circulated to repeat the test object. The method of making it contact etc. are mentioned. In addition, after the object to be inspected is rinsed, the object to be inspected may be treated with a rustproof lubricant or the like.
本発明の生体由来汚れの検出定量方法に用いる装置としては、検査対象物に抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出できる抽出手段と、抽出した生体由来汚れを検出定量する検出定量手段とを備えるものであれば特に限定されない。
以下、生体由来汚れの検出定量装置の一例について説明する。
As an apparatus used for the method for detecting and quantifying biological origin dirt according to the present invention, an extraction means capable of extracting the biological origin dirt by bringing the extract fluidly brought into contact with the test object, detection for detecting and quantifying the extracted biological origin dirt It will not be limited in particular as long as it comprises a quantitative means.
Hereinafter, an example of a detection and quantification device of biological origin dirt will be described.
「生体由来汚れの検出定量装置」
図１は、本発明の生体由来汚れの検出定量装置の一例を示す概略構成図である。
この例の生体由来汚れの検出定量装置１は、抽出手段１０と、検出定量手段２０とを具備する。
"Determination and quantification device of biological origin dirt"
FIG. 1 is a schematic configuration view showing an example of a detection and quantification device of biological origin dirt according to the present invention.
The detecting and quantifying
＜抽出手段１０＞
抽出手段１０は、検査対象物１１に界面活性剤を含む抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出する手段である。
この例の抽出手段１０は、検査対象物１１を収容する容器１２と、容器１２に界面活性剤を含む抽出液を連続的に供給する供給手段１３とを備える。
<Extraction means 10>
The extraction means 10 is a means for fluidly bringing the
The extraction means 10 of this example comprises a
（容器）
容器１２としては、検査対象物１１を収容できる形状であれば特に制限されないが、抽出液が検査対象物１１の内部および周囲に漏れなく接触できる形状が好ましい。このような形状としては、例えば箱状、筒状、袋状などが挙げられる。また、抽出液の蒸発や漏洩防止の観点から、容器１２としては検査対象物１１を収容して密閉できるものが好ましい。
(container)
The
容器１２の材質としては特に限定されないが、耐高温性、耐低温性、耐溶剤性、耐圧等を有していることが好ましく、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリエステル、ＡＳ樹脂、ＡＢＳ樹脂、ポリエチレンテレフタレート、（メタ）アクリル樹脂、ポリビニルアルコール、ポリ塩化ビニリデン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリアセタール、ポリブチレンテレフタレート、フッ素樹脂等の熱可塑性樹脂；フェノール樹脂、メラミン樹脂、ユリア樹脂、ウレタン樹脂、エポキシ樹脂、不飽和ポリエステル樹脂等の熱硬化性樹脂；石英ガラス、ソーダガラス、カリガラス、ホウケイ酸ガラス、鉛ガラス等のガラス；アルミニウム、金、銀、銅、鉛、チタン等の金属；ステンレス、ジュラルミン・チタン合金等の合金；真鍮、トタン等のメッキ加工した金属などが挙げられる。これらの中でも、易成型性の観点から、熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂、ガラスが好ましい。
The material of the
容器１２は、例えば図２に示すように、排出口１４を有していてもよい。排出口１４は、返送配管１３ｃに着脱可能である。
また、容器１２は、密閉を可能にする部材を有していてもよい。密閉を可能にする部材としては、例えば図３（ａ）、（ｂ）に示すように、容器１２の開口部を封止するキャップ１５が挙げられる。容器１２の開口部とキャップ１５との接触部分は、液漏れを防止するため、パッキン１５ａ等によりシールすることが好ましい。また、容器１２が袋状である場合、例えば図４（ａ）、（ｂ）に示すように、容器１２の内側にチャック１６を設けて密閉を可能としてもよい。
なお、図２〜４、および後述する図５〜９において、図１と同じ構成要素には同じ符号を付して、その説明を省略する。
The
Also, the
In FIGS. 2 to 4 and FIGS. 5 to 9 described later, the same components as in FIG. 1 are denoted by the same reference numerals, and the description thereof is omitted.
また、容器１２に収容される検査対象物１１がマニピュレータである場合、容器１２は、例えば図３、４に示すように、供給配管１３ｂと検査対象物とを連結するアダプタ１７を備えていてもよい。容器１２がアダプタ１７を備えていれば、容器１２に収容された検査対象物の内部および周囲に効率よく抽出液を接触させることができる。
アダプタ１７の形状としては、例えば図５（ａ）に示すような円柱と円錐を組わせた形状や、図６（ａ）に示すような直方体状が挙げられるが、供給配管１３ｂとマニピュレータの液注入口とを連結することができ、マニピュレータの内部および周囲への確実な送液を行う機能があれば、これらに限定されるものではない。
When the
Examples of the shape of the
また、アダプタ１７の周面には、細孔１７ａが形成されていてもよい。アダプタ１７の周面に細孔１７ａが形成されていれば、図５（ｂ）や図６（ｂ）に示すように、マニピュレータ１１ａの液注入口１１ｂにアダプタ１７を装着して抽出液を注入したときに、細孔１７ａからも抽出液が放出されるので、マニピュレータ１１ａの周囲にも効率よく抽出液を接触できる。
細孔１７ａの形成箇所はアダプタ１７の周面に限定されず、例えば図７（ａ）、（ｂ）に示すように、アダプタ１７の端面でもよい。
また、アダプタ１７は、図８（ａ）、（ｂ）に示すように、マニピュレータ１１ａとの接触部が抽出液の圧に応じて広げられ、抽出液が漏れ出る材質や構造であってもよい。
In addition, a
The formation location of the
Further, as shown in FIGS. 8 (a) and 8 (b), the
アダプタ１７の材質としては特に限定されないが、耐高温性、耐低温性、耐溶剤性、耐圧等を有していることが好ましく、例えば、天然ゴム、ニトリルゴム、クロロプレンゴム、エチレンプロピレンゴム、シリコーンゴム、ブチルゴム、スチレンゴム、ウレタンゴム、フッ素ゴム等のゴム類；ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリエステル、ＡＳ樹脂、ＡＢＳ樹脂、ポリエチレンテレフタレート、（メタ）アクリル樹脂、ポリビニルアルコール、ポリ塩化ビニリデン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリアセタール、ポリブチレンテレフタレート、フッ素樹脂等の熱可塑性樹脂；フェノール樹脂、メラミン樹脂、ユリア樹脂、ポリウレタン、エポキシ樹脂、不飽和ポリエステル樹脂等の熱硬化性樹脂；石英ガラス、ソーダガラス、カリガラス、ホウケイ酸ガラス、鉛ガラス等のガラス；アルミニウム、金、銀、銅、鉛、チタン等の金属；ステンレス、ジュラルミン・チタン合金等の合金；真鍮、トタン等のメッキ加工した金属等が挙げられる。アダプタ１７とマニピュレータ１１ａとの接着性の観点から、ゴム類、熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂が好ましい。
The material of the
（供給手段）
この例の供給手段１３は、供給手段本体１３ａと、供給配管１３ｂと、返送配管１３ｃとを備える。
供給手段本体１３ａとしては、容器１２に抽出液を送り込むことができれば特に限定されず、例えばポンプ、シリンジ等が挙げられる。抽出液の流速等を容易に変更でき、かつ抽出液を一定に供給できる等の観点からポンプが好ましい。
ポンプとしては、例えば往復ポンプ、回転ポンプ等の容積式ポンプ；遠心ポンプ、プロペラポンプ、粘性ポンプ等の非容積式ポンプ；渦流ポンプ、噴流ポンプ、水中ポンプ、シリンジポンプ等の特殊型ポンプが挙げられる。これらの中でも、送液量の大きさから容積式ポンプ、非容積式ポンプが好ましく、抽出液量を一定に制御しやすい点で、容積式ポンプがより好ましい。
(Supply means)
The supply means 13 of this example comprises a supply means
The supply means
Examples of pumps include positive displacement pumps such as reciprocating pumps and rotary pumps; non-positive displacement pumps such as centrifugal pumps, propeller pumps and viscous pumps; special type pumps such as vortex pumps, jet pumps, submersible pumps, and syringe pumps . Among these, a positive displacement pump and a non-positive displacement pump are preferable in view of the amount of liquid feed, and a positive displacement pump is more preferable in terms of easy control of the amount of extraction liquid.
供給配管１３ｂは、供給手段本体１３ａから送り出された抽出液を容器１２へ供給するための送液管である。
返送配管１３ｃは、容器１２から排出された抽出液を供給手段本体１３ａへ返送するための送液管である。
容器１２と供給手段本体１３ａとは、供給配管１３ｂおよび返送配管１３ｃで連結されている。
The
The
The
供給配管１３ｂおよび返送配管１３ｃの材質としては特に限定されないが、耐高温性、耐低温性、耐溶剤性、耐圧等を有していることが好ましく、例えば、アダプタ１７の説明において先に例示した材質などが挙げられる。
供給配管１３ｂおよび返送配管１３ｃの内径や肉厚は、供給手段本体１３ａの排出口や吸込口等の口径、耐圧等に応じて選択されればよく、特に限定されるものではない。
The materials of the
The inner diameter and thickness of the
（他の構成部材）
抽出手段１０は、例えば図９に示すように、必要に応じて、傾斜手段１８や調温手段１９等を有していてもよい。
(Other components)
For example, as shown in FIG. 9, the
傾斜手段１８は、容器１２を一定の斜度に保持する手段である。抽出液量が少ない場合、傾斜手段１８の併用により容器１２内に滞留する抽出液量が減少し、循環効率を向上させることができる。傾斜手段１８は、容器１２を一定の角度に保持することができるものであれば、限定されるものではない。
The tilting means 18 is a means for holding the
調温手段１９は、容器１２と供給手段１３との間で循環する抽出液の温度を一定にするための手段である。抽出液の温度を一定にすることが可能であれば、調温手段１９の機構、構造、設置場所等は、特に限定されない。また調温手段１９を用いる代わりに、調温された室内に検出定量装置を設置してもよい。
The temperature control means 19 is a means for making the temperature of the extract circulating between the
抽出手段１０は、超音波発生手段、容器減圧手段、温度計や流量計などの各測定手段、コック等（いずれも図示略）をさらに有していてもよい。
超音波発生手段は、容器１２と供給手段１３との間で循環する抽出液に発生する気泡を除くための手段である。抽出液に発生する気泡を除くことで、生体由来汚れの抽出効果がより高まる。抽出液に発生する気泡を除くことが可能であれば、超音波発生手段の機構、構造等は、特に限定されない。超音波発生手段の設置場所については、超音波の振動がマニピュレータ１１ａ等の検査対象物へ影響しにくい場所であれば、特に限定されないが、供給配管または返送配管の途中に設置することが好ましい。
超音波照射時間は、５分以内が好ましく、１分以内が好ましい。
The extraction means 10 may further include ultrasonic wave generation means, container pressure reduction means, measurement means such as a thermometer and a flow meter, and a cock (all not shown).
The ultrasonic wave generation means is a means for removing air bubbles generated in the extract liquid circulating between the
The ultrasonic irradiation time is preferably 5 minutes or less, and more preferably 1 minute or less.
容器減圧手段は、容器１２を減圧圧縮するための手段である。容器１２の材質が柔らかく圧縮等によって形態が変わる場合、容器１２を減圧圧縮することで容器１２とマニピュレータ１１ａ等の検査対象物との隙間が少なくなり、検査対象物の内部および周囲に集中的に抽出液を接触させることができる。容器減圧手段としては、容器１２を減圧できるものであれば限定されるものではなく、ポンプ、アスピレータ等が挙げられる。減圧は、容器１２の排出口にコックを備え付け、排出口のコックを介して減圧したり、供給配管１３ｂや返送配管１３ｃにコックを備え付け、供給配管１３ｂや返送配管１３ｃのコックを介して減圧したりする等の方法が挙げられる。
The vessel depressurizing means is a means for decompressing and compressing the
（他の実施形態）
抽出手段１０は上述したものに限定されない。例えば、図示例の抽出手段１０は、抽出液を容器１２と供給手段１３との間で循環させているが、抽出液は循環させなくてもよい。
(Other embodiments)
The extraction means 10 is not limited to the one described above. For example, although the extraction means 10 of the illustrated example circulates the extraction liquid between the
＜検出定量手段＞
検出定量手段２０は、抽出手段１０により抽出した生体由来汚れを検出定量する手段である。
検出定量手段２０としては、生体由来汚れを検出定量できるものであれば特に限定されず、分光光度計、ＨＰＬＣ、ＧＣ、ＧＣ−ＭＳなど、生体由来汚れの検出方法に応じた装置、生体由来汚れの検出方法に応じた試薬、および試験管、ピペットなどの器具を備えていればよい。
<Detection and quantification means>
The detection and quantification means 20 is a means for detecting and quantifying the biological origin dirt extracted by the extraction means 10.
The detection and quantification means 20 is not particularly limited as long as it can detect and quantify biological origin dirt, and a device according to a detection method of biological origin dirt such as a spectrophotometer, HPLC, GC, GC-MS, etc., biological origin dirt A reagent corresponding to the method of detection of and a device such as a test tube or a pipette may be provided.
＜作用効果＞
以上説明した本発明の生体由来汚れの検出定量装置は、検査対象物に抽出液を流動的に接触させて生体由来汚れを抽出する抽出手段を備えるので、検査対象物を分解することなく、また故障の原因となる超音波処理等の物理的ストレスを検査対象物にかけずに、簡便かつ効率よく生体由来汚れを抽出し、抽出した生体由来汚れを検出定量できる。
本発明の生体由来汚れの検出定量装置は、検査対象物を分解する必要がなく、物理的ストレスを検査対象物にかけることもないので、精密な部品で構成され分解が困難な医療用器具（例えば、内視鏡、腹腔鏡、マニピュレータ）に対して好適であり、その中でも特にマニピュレータに対して好適である。
<Function effect>
The apparatus for detecting and quantifying biological origin dirt according to the present invention described above comprises extraction means for fluidly bringing the extract into contact with the object to be examined to extract biological origin dirt, so that it does not disassemble the object to be examined. A biological origin dirt can be extracted simply and efficiently, without applying physical stress, such as ultrasonication which causes a failure, to a test object, and the extracted origin derived biological origin can be detected and quantified.
The apparatus for detecting and quantifying biological origin dirt according to the present invention does not have to disassemble the object to be examined, and does not apply physical stress to the object to be examined, so it is a medical instrument composed of precise parts and difficult to disassemble For example, it is suitable for endoscopes, laparoscopes, manipulators), and in particular for manipulators.
以下に、実施例および比較例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例により限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of examples and comparative examples, but the present invention is not limited by the following examples.
＜評価用器具の作製＞
ヘパリン添加羊血液（株式会社日本バイオテスト研究所製）と、イオン交換水にて濃度１質量％に調整した硫酸プロタミン（ナカライテスク株式会社製）溶液とを、ヘパリン添加羊血液：硫酸プロタミン溶液＝１０：１（体積比）となるよう混合し、模擬蛋白質汚染液を調整した。
模擬蛋白質汚染液５μＬを未使用のマニピュレータ（ＥｎｄｏＷｒｉｓｔ（登録商標）インストゥルメント、先端（グリップ）形状：ＰＲＥＣＩＳＥ ＢＩＰＯＬＡＲ ＦＯＲＣＥＰＳ、インテュイティブサージカル合同会社製）の先端部に塗布した。さらに、模擬蛋白質汚染液１５μＬを本体部（ハウジング部）の液注入口（メインフラッシュポート）からハウジング部内に注入した。ついで、恒温恒湿室（２０℃・６５％ｒ.ｈ.）にて１時間乾燥し、評価用器具とした。
なお、ＢＣＡ法にて測定したところ、塗布した模擬蛋白質汚染液の合計２０μＬ中には、３３４０μｇの蛋白質が含まれていた。
<Production of evaluation instruments>
Heparinized sheep blood (made by Japan Biotest Laboratories Co., Ltd.) and a protamine sulfate (made by Nacalai Tesque, Inc.) solution adjusted to a concentration of 1 mass% with ion-exchanged water, heparinized sheep blood: protamine sulfate solution = It mixed so that it might be set to 10: 1 (volume ratio), and adjusted the simulated protein contamination liquid.
5 μL of the simulated protein contamination solution was applied to the tip of an unused manipulator (EndoWrist (registered trademark) instrument, tip (grip) shape: PRECISE BIPOLAR FORCEPS, Intuitive Surgical GK). Furthermore, 15 μL of the simulated protein contamination solution was injected into the housing from the liquid inlet (main flush port) of the main body (housing). Then, it was dried in a constant temperature and humidity chamber (20 ° C., 65% r. H.) For 1 hour to obtain a device for evaluation.
As a result of measurement by the BCA method, 3340 μg of protein was contained in a total of 20 μL of the applied simulated protein-contaminated solution.
「実施例１」
抽出手段として、図９に示す抽出手段１０を用いた。
容器１２としては、返送配管１３ｃに着脱可能なシリコーン製の排出口１４を有する、チャック１６付きのポリエチレン製容器を用いた。供給手段本体１３ａとしては、ポンプ（アズワン株式会社製、「小型耐薬ギヤポンプＧＰＵ−２」）を用いた。供給配管１３ｂおよび返送配管１３ｃとしては、シリコーン製の送液管を用いた。調温手段２１としては、自立コイル式熱交換器（アズワン株式会社製）をオイルバスに入れたものを用いた。
容器１２に、先に作製した評価用器具を収容した。評価用器具（マニピュレータ）の液注入口に、図５（ａ）に示すシリコーン製のアダプタ１７を装着し、容器１２内の空気を排出しながらチャック１６を閉じて、容器１２内を密閉した。さらに、アダプタ１７に供給配管１３ｂの一端を接続し、他端を供給手段本体１３ａのポンプ排出口１３ｄに接続した。
容器１２の排出口１４に返送配管１３ｃの一端を接続し、他端を供給手段本体１３ａのポンプ吸込口１３ｅに接続した。
容器１２を傾斜手段１８に設置し、調温手段２１のオイルバスに返送配管１３ｃを浸漬させた。
"Example 1"
The extraction means 10 shown in FIG. 9 was used as the extraction means.
As the
The
One end of the
The
上述した抽出手段１０を用い、以下の抽出条件にて抽出手段１０を稼働し、抽出液を循環させながら評価用器具に流動的に接触させた（抽出工程）。
なお、抽出液の粘度は、キャノン・フェンスケ粘度計（柴田科学株式会社製、「粘度計Ｎｏ．５０」）を用い、液温２０℃で測定した。
＜抽出条件＞
ポンプ流量：１３０ｍＬ／分
抽出液量：１００ｍＬ
傾斜角度：６°
抽出液：１質量％のドデシル硫酸ナトリウム水溶液
抽出液の粘度：１．１ｍＰａ・ｓ
抽出温度：５０℃
抽出時間：１、３、５、７、１０、１５、２０、２５、５０時間
Using the extraction means 10 described above, the extraction means 10 was operated under the following extraction conditions, and it was brought into fluid contact with the evaluation instrument while circulating the extract (extraction step).
The viscosity of the extract was measured at a liquid temperature of 20 ° C. using a Canon-Fenske viscometer (manufactured by Shibata Scientific Co., Ltd., “Viscometer No. 50”).
<Extraction conditions>
Pump flow rate: 130 mL / min Extract volume: 100 mL
Inclination angle: 6 °
Extract: 1 wt% sodium dodecyl sulfate aqueous solution viscosity: 1.1 mPa · s
Extraction temperature: 50 ° C
Extraction time: 1, 3, 5, 7, 10, 15, 20, 25, 50 hours
各抽出時間になるまで抽出手段１０を稼働した後、抽出手段１０から抽出液（生体由来汚れ（模擬蛋白質）抽出液）を抜き取り、以下に示すＢＣＡ法により蛋白質を検出定量した（検出定量工程）。結果を表１及び図１０に示す。
また、抽出処理後のマニピュレータの状態を以下に示す方法により確認した。結果を表１に示す。
After operating the extraction means 10 until each extraction time, the extract (biogenic stain (simulated protein) extract) was extracted from the extraction means 10, and proteins were detected and quantified by the BCA method shown below (detection and determination step) . The results are shown in Table 1 and FIG.
In addition, the state of the manipulator after the extraction processing was confirmed by the method described below. The results are shown in Table 1.
＜ＢＣＡ法による蛋白質の検出定量方法＞
模擬蛋白質抽出液１ｍＬ（模擬蛋白質抽出液に含まれる蛋白質量が２００μｇ／ｍＬ以上の場合はイオン交換水で２００μｇ／ｍＬ以下となるよう希釈した。）に対して、 ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ Ａ（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）５０ｍＬと、ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｂ（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）１ｍＬとを混合した蛋白質検出液２ｍＬを添加して攪拌後、６０℃で３０分間反応させ、その後１５℃で５分間放置した。得られた試料の５６２ｎｍにおける吸光度を分光光度計（株式会社パーキンエルマージャパン製、「Ｌａｍｂｄａ６５０Ｓ」）にて測定し、下記方法により作成したＢＣＡ法用の検量線の数式に代入して抽出蛋白質量を算出した。また、下記式より抽出率を求めた。
抽出率（％）＝抽出蛋白質量（μｇ）×１００／３３４０（μｇ）
<Method for detecting and quantifying proteins by BCA method>
BCA Protein Assay Reagent A (Thermo Fisher) was used against 1 mL of the mock protein extract (diluted with ion exchange water to be 200 μg / mL or less if the protein content in the mock protein extract is 200 μg / mL or more). 2 mL of a protein detection solution prepared by mixing 50 mL of Scientific Co., Ltd. and 1 mL of BCA Protein Assay Reagent B (manufactured by Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.) is added and stirred, then reacted at 60 ° C. for 30 minutes, and then It was left at 15 ° C. for 5 minutes. The absorbance at 562 nm of the obtained sample was measured with a spectrophotometer ("Lambda 650S" manufactured by PerkinElmer Japan Co., Ltd.), and substituted into the formula of the calibration curve for the BCA method prepared by the following method to extract the mass of the extracted protein. Calculated. Moreover, the extraction rate was calculated | required from the following formula.
Extraction rate (%) = extracted protein mass (μg) × 100/3340 (μg)
（ＢＣＡ法用の検量線の作成）
牛血清アルブミン溶液（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）をイオン交換水にて濃度１質量％に調整したドデシル硫酸ナトリウム溶液で適宜希釈し、各濃度（０、０．２５、０．５、１、５、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬ）の希釈液を得た。
ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ Ａ（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）５０ｍＬと、ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｂ（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）１ｍＬとを混合した蛋白質検出液２ｍＬに、先に調製した各希釈液１ｍＬを添加して攪拌した後、６０℃で３０分間反応させ、その後１５℃で５分間放置して各接触液を得た。得られた各接触液の５６２ｎｍにおける吸光度を分光光度計（株式会社パーキンエルマージャパン製、「Ｌａｍｂｄａ６５０Ｓ」）にて測定し、希釈液中の蛋白質濃度に対する各吸光度をプロットし、検量線を作成した。なお、蛋白質濃度０、０．２５、０．５、１、５、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬの吸光度は直線状に得られた。
(Creating a calibration curve for the BCA method)
A bovine serum albumin solution (manufactured by Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.) is appropriately diluted with sodium dodecyl sulfate solution adjusted to a concentration of 1% by mass with ion exchanged water, and each concentration (0, 0.25, 0.5, 1 , 50, 100, 150, 200 μg / mL) were obtained.
Each dilution previously prepared in 2 mL of a protein detection solution prepared by mixing 50 mL of BCA Protein Assay Reagent A (manufactured by Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.) and 1 mL of BCA Protein Assay Reagent B (manufactured by Thermo Fisher Scientific Inc.) After 1 mL of the solution was added and stirred, it was reacted at 60 ° C. for 30 minutes and then left at 15 ° C. for 5 minutes to obtain each contact solution. The absorbance at 562 nm of each contact solution obtained was measured with a spectrophotometer ("Lambda 650S" manufactured by PerkinElmer Japan Co., Ltd.), and each absorbance was plotted against the protein concentration in the diluted solution to create a calibration curve. The absorbance at a protein concentration of 0, 0.25, 0.5, 1, 5, 50, 100, 150, 200 μg / mL was obtained linearly.
＜マニピュレータの状態＞
抽出処理後のマニピュレータをイオン交換水で十分に濯いだ後、マニピュレータを手動で作動し、先端部がスムーズに稼動するか否かを目視にて確認した。また、確認後、マニピュレータを分解し、内部の部品の状態を目視にて確認した。以下の評価基準にてマニピュレータの状態を評価した。「○」を合格とする。
○：部品に故障や錆等の腐食が見られず、稼動もスムーズである。
△：部品に故障や錆等の腐食は見られないが、スムーズな稼動ができない。
×：部品に故障または錆等の腐食が見られ、スムーズな稼動もできない。
<State of manipulator>
After the extraction process was thoroughly rinsed with ion-exchanged water, the manipulator was manually operated to visually confirm whether or not the tip operates smoothly. In addition, after confirmation, the manipulator was disassembled, and the state of internal parts was visually confirmed. The condition of the manipulator was evaluated according to the following evaluation criteria. Pass "○".
○: No failure or corrosion such as rust is observed on parts, and operation is smooth.
Δ: No failure or corrosion such as rust is observed on parts, but smooth operation is not possible.
X: The parts show corrosion or corrosion such as rust, and smooth operation is also impossible.
「実施例２」
比較例１、２との対比のために、実施例１と同様にして抽出工程および検出定量工程を行った。ただし、抽出時間を１５時間とした。また、抽出処理後のマニピュレータの状態を実施例１と同様にして確認した。これらの結果を表２に示す。
"Example 2"
The extraction step and the detection and quantification step were performed in the same manner as in Example 1 for comparison with Comparative Examples 1 and 2. However, the extraction time was 15 hours. Further, the state of the manipulator after the extraction process was confirmed in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 2.
「比較例１」
評価用器具をチャック付きのポリ袋の中に収容し、評価用器具（マニピュレータ）の液注入口から抽出液（０．２Ｎの水酸化ナトリウムにて濃度１質量％に調整したドデシル硫酸ナトリウム溶液）をシリンジで１００ｍＬ注入した後、ポリ袋内の空気を排除して評価用器具の全体が完全に抽出液に浸漬するようにして密閉した。
次いで、ポリ袋全体を５０℃の温水を張った超音波ピペット洗浄機（東京理化器械株式会社製、「ＡＵ−１７５ＣＲ」）に入れ、超音波照射を１５分間行った後、５０℃の温水中で１時間放置した。この超音波照射と放置とを１セットとし、１２セット（超音波照射時間と放置時間の合計：１５時間）行った（抽出工程）。
次いで、ポリ袋中の模擬蛋白質抽出液を抜き取り、実施例１と同様にして蛋白質を検出定量した（検出定量工程）。ただし、検量線は、以下のようにして作成したものを用いた。また、抽出処理後のマニピュレータの状態を実施例１と同様にして確認した。これらの結果を表２に示す。
"Comparative example 1"
A device for evaluation is housed in a plastic bag with a chuck, and an extraction solution (sodium dodecyl sulfate solution adjusted to a concentration of 1 mass% with 0.2 N sodium hydroxide) from the liquid inlet of the device for evaluation (manipulator) After injecting 100 mL with a syringe, the air in the plastic bag was removed and the entire evaluation instrument was sealed so as to be completely immersed in the extract.
Next, the entire plastic bag is placed in an ultrasonic pipet washer (“AU-175 CR” manufactured by Tokyo Rika Kikai Co., Ltd.) covered with 50 ° C. warm water and subjected to ultrasonic irradiation for 15 minutes, and then in 50 ° C. hot water Left for 1 hour. The ultrasonic irradiation and the standing were set as one set, and 12 sets (the total of the ultrasonic irradiation time and the standing time: 15 hours) were performed (extraction step).
Then, the simulated protein extract in the plastic bag was withdrawn, and the protein was detected and quantified in the same manner as in Example 1 (detection and quantification step). However, the calibration curve used was prepared as follows. Further, the state of the manipulator after the extraction process was confirmed in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 2.
（ＢＣＡ法用の検量線の作成）
牛血清アルブミン溶液（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）を０．２Ｎの水酸化ナトリウムにて濃度１質量％に調整したドデシル硫酸ナトリウム水溶液で適宜希釈し、各濃度（０、０．２５、０．５、１、５、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬ）の希釈液を得た。
得られた希釈液を用いた以外は、実施例１と同様にして検量線を作成した。なお、蛋白質濃度０、０．２５、０．５、１、５、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬの吸光度は直線状に得られた。
(Creating a calibration curve for the BCA method)
A bovine serum albumin solution (manufactured by Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.) is appropriately diluted with an aqueous solution of sodium dodecyl sulfate adjusted to a concentration of 1 mass% with 0.2 N sodium hydroxide, and each concentration (0, 0.25, 0 .5, 1, 5, 50, 100, 150, 200 μg / mL) were obtained.
A calibration curve was prepared in the same manner as in Example 1 except that the obtained diluted solution was used. The absorbance at a protein concentration of 0, 0.25, 0.5, 1, 5, 50, 100, 150, 200 μg / mL was obtained linearly.
「比較例２」
抽出液としてイオン交換水を用い、超音波照射を連続１５時間行った以外は、比較例１と同様にして抽出工程を行った。
次いで、ポリ袋中の模擬蛋白質抽出液を抜き取り、実施例１と同様にして蛋白質を検出定量した（検出定量工程）。ただし、検量線は、以下のようにして作成したものを用いた。また、抽出処理後のマニピュレータの状態を実施例１と同様にして確認した。これらの結果を表２に示す。
"Comparative example 2"
The extraction step was performed in the same manner as in Comparative Example 1 except that ion-exchanged water was used as the extract and ultrasonic irradiation was performed continuously for 15 hours.
Then, the simulated protein extract in the plastic bag was withdrawn, and the protein was detected and quantified in the same manner as in Example 1 (detection and quantification step). However, the calibration curve used was prepared as follows. Further, the state of the manipulator after the extraction process was confirmed in the same manner as in Example 1. The results are shown in Table 2.
（ＢＣＡ法用の検量線の作成）
牛血清アルブミン溶液（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製）をイオン交換水で適宜希釈し、各濃度（０、０．２５、０．５、１、５、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬ）の希釈液を得た。
得られた希釈液を用いた以外は、実施例１と同様にして検量線を作成した。なお、蛋白質濃度０、０．２５、０．５、１、５、５０、１００、１５０、２００μｇ／ｍＬの吸光度は直線状に得られた。
(Creating a calibration curve for the BCA method)
A bovine serum albumin solution (manufactured by Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.) is appropriately diluted with ion-exchanged water, and each concentration (0, 0.25, 0.5, 1, 5, 50, 100, 150, 200 μg / mL) Dilutions of
A calibration curve was prepared in the same manner as in Example 1 except that the obtained diluted solution was used. The absorbance at a protein concentration of 0, 0.25, 0.5, 1, 5, 50, 100, 150, 200 μg / mL was obtained linearly.
表１および図１０から明らかなように、実施例１の場合、蛋白質の抽出率は抽出時間１５時間以上で９９．５％以上であった。このことから、マニピュレータの汚れの抽出には、実施例１の条件下では１５時間の循環処理で十分であることが確認できた。また、５０時間抽出処理を行ってもマニピュレータの故障は認められなかった。 As is clear from Table 1 and FIG. 10, in the case of Example 1, the protein extraction rate was 99.5% or more at an extraction time of 15 hours or more. From this, it could be confirmed that the circulation process of 15 hours was sufficient under the conditions of Example 1 for the extraction of the stain of the manipulator. In addition, no failure of the manipulator was found after 50 hours of extraction processing.
表２から明らかなように、実施例２の場合、蛋白質の抽出率は９９％以上であった。また、マニピュレータの故障も認められなかった。
一方、超音波照射により抽出を行った比較例１の場合、実施例２と同程度の抽出率であったが、抽出処理後のマニピュレータの内部に黒色および白色沈殿物が発生していた。また、ワイヤー断線も認められた。
抽出液としてイオン交換水を用いて超音波照射により抽出を行った比較例２の場合、抽出率が低かった。また、抽出処理後のマニピュレータの先端部がスムーズに稼働しなかった。
As apparent from Table 2, in the case of Example 2, the protein extraction rate was 99% or more. In addition, no failure of the manipulator was observed.
On the other hand, in the case of the comparative example 1 which extracted by ultrasonication, although it was an extraction rate comparable as Example 2, the black and white precipitate had generate | occur | produced inside the manipulator after an extraction process. In addition, wire breakage was also recognized.
In the case of Comparative Example 2 in which extraction was performed by ultrasonic irradiation using ion exchange water as the extract, the extraction rate was low. In addition, the tip of the manipulator after the extraction processing did not operate smoothly.
本発明の生体由来汚れの検出定量方法および検出定量装置によれば、マニピュレータ等の精密で複雑な構造を有する検査対象物を分解することなく、また故障の原因となる物理的ストレスを検査対象物にかけずに、簡便かつ効率よく生体由来汚れを抽出して検出定量できる。よって、本発明の本発明の生体由来汚れの検出定量方法および検出定量装置は、医療機関等で再利用されているマニピュレータ等の検査対象物の清浄度評価や、医療用洗浄機等の性能評価に特に好適に利用できる。 According to the method for detecting and quantifying biological origin dirt and the detection and quantification device of the present invention, physical stress causing the failure can be inspected without degrading the inspection object having a precise and complicated structure such as a manipulator. Biologically derived soils can be extracted and detected and quantified conveniently and efficiently without being subjected to the treatment. Therefore, the method for detecting and quantifying biological origin dirt according to the present invention and the detection and quantification apparatus according to the present invention evaluate the cleanliness of an inspection object such as a manipulator reused in a medical institution etc., and evaluate the performance of a medical washing machine etc Particularly preferably.
１ 検出定量装置
１０ 抽出手段
１１ 検査対象物
１１ａ マニピュレータ
１１ｂ 液注入口
１２ 容器
１３ 供給手段
１３ａ 供給手段本体
１３ｂ 供給配管
１３ｃ 返送配管
１３ｄ ポンプ排出口
１３ｅ ポンプ吸込口
１４ 排出口
１５ キャップ
１５ａ パッキン
１６ チャック
１７ アダプタ
１７ａ 細孔
１８ 傾斜手段
１９ 調温手段
２０ 検出定量手段
DESCRIPTION OF
Claims (6)
前記検査対象物に界面活性剤を含む抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出する抽出工程と、
抽出した生体由来汚れを検出定量する検出定量工程と、
を有し、
前記抽出液の粘度が０．１〜５００ｍＰａ・ｓである、生体由来汚れの検出定量方法。 A method for detecting and quantifying bio-based dirt adhering to a test object, comprising:
An extraction process of fluidly contacting an extract containing a surfactant with the test object to extract biological contamination;
A detection and quantification step of detecting and quantifying the extracted biological origin dirt;
I have a,
The viscosity of the extraction liquid is Ru 0.1~500mPa · s der detection method of quantifying biological fouling.
前記検査対象物に界面活性剤を含む抽出液を流動的に接触させて、生体由来汚れを抽出する抽出手段と、抽出した生体由来汚れを検出定量する検出定量手段とを具備し、
前記抽出手段は、前記検査対象物を収容する容器と、前記容器に前記抽出液を連続的に供給する供給手段とを備え、
前記抽出液の粘度が０．１〜５００ｍＰａ・ｓである、生体由来汚れの検出定量装置。 An apparatus for detecting and quantifying bio-based dirt adhering to an inspection object, comprising:
The extraction target is fluidly brought into contact with an extract liquid containing a surfactant to the inspection object, and the detection means comprises detection means for detecting the biological origin stain, and detection and quantification means for detecting and quantifying the extracted biological origin dirt.
The extraction means comprises a container for containing the inspection object, and a supply means for continuously supplying the extract to the container .
The viscosity of the extract is Ru 0.1~500mPa · s der, biological fouling of detecting quantification device.
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