JP6310575B2 - ランタニドキレートのための新規発色団構造 - Google Patents

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Description

本発明は、発光ランタニドイオンの周りに、フルオレニル−、フルオレニルエチニル、９Ｈ−カルバゾリル−、９Ｈ−カルバゾリルエチニル−、ジベンゾチオフェニル−、ジベンゾチオフェニルエチニル−、ジベンゾフラニル又はジベンゾフラニルエチニルピリジン発色団を有する新規ランタニドキレート設計に関する。この３員環発色団は、ランタニドイオンと共に高いモル吸光係数及びルミネセンスを有する。本発明は更に、生体特異的反応体に結合させるキレート、及び種々のアッセイにおけるその使用にも関する。
時間分解蛍光光度法（ＴＲＦ）用途に最適な発光ランタニドキレートは、次のようないくつかの要件を満たさなければならない。１）基底状態と励起状態のいずれにおいても光化学的に安定でなければならい、２）速度論的及び化学的に安定でなければならない、３）励起波長はできるだけ高くなければならない（好ましくは３００ｎｍ超）、４）効率的なカチオン発光、すなわち、高いルミネセンス効率、すなわち、輝度（励振係数×量子収率、εΦ）を有さなければならない、５）ルミネセンス減衰時間が長くなければならない、６）キレートが良好な水溶性を有していなければならない、６）標識化のため、生体特異的結合反応体への共有結合を可能にする反応性基を有していなければならない、並びに７）標識化生体分子の親和性及び非特異的結合特性が保持されなければならない。
一般的に、励起エネルギーは、配位子の三重項状態を通じて、配位子から特定のランタニドイオンに移動する。しかし、配位子が低エネルギーの電荷移動（ＣＴ）状態を示す場合、感作が、三重項の関与なく、緩和ＣＴ状態から直接起こる可能性がある（Ａｎｄｒａｕｄ，Ｃ．，Ｍａｕｒｙ，Ｏ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００９，４３５７）。更に、配位子の一重項状態を直接通る励起も実証されている。
１〜３個の別々の４−（フェニルエチニル）ピリジン（米国特許第４，９２０，１９５号；Ｔａｋａｌｏ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７９，７８９）及び４−フェニルピリジン（欧州特許第０１９５４１３号；国際公開第８７／０７９５５号）を含有する標識キレートが公開されて以来、設計された配位子構造が多数の特許、特許出願及び刊行物において利用されてきた。ルミネセンス強度を改善するために一般的に使用されている１つの方法は、構造設計内に組み合わされた数個の独立した発色団部分、すなわち、４−（フェニルエチニル）ピリジン及び４−フェニルピリジンを有することによって、キレートのモル吸光係数を増強することであり、これは、高い安定性及びルミネセンス量子収率をもたらす（例えば、米国特許出願公開第２０１３／２１０１６５（Ａ１）号及び米国特許出願公開第２０１３／１８３７７１（Ａ１）号参照）。
ルミネセンス強度は、発色団のモル吸光係数を量子収率と共に増大することによっても改善されることが一般的に知られている。モル吸光係数は、芳香族発色団のπ電子共役を増すことによって増強できる。同時に、励起波長は通常は赤色側にシフトする。しかし、共役が増大すると、通常は三重項状態及び／又はＣＴのエネルギーレベルが低下し、量子収率及び減衰時間の低下が観察される。この理由から、実際の生体標識用途において、ランタニドキレートに使用される単一発色団のモル吸光係数は、最も良い場合で数万である。更に、発色団の芳香族共役が増すと、キレートの水溶性が低下し、ランタニド標識及び標識化生体分子の非特異的結合特性及び凝集物形成が増大する。４−フェニルエチニルピリジン及び４−フェニルピリジン系キレート標識に関しては、４−［４−（フェニルエチニル）フェニルエチニル］ピリジン、４−（４−フェニル−１，３−ブタジイン−１，４−ジイル）ピリジン、４−（ビフェニル−エチニル）ピリジン、４−ビフェニルピリジン、４−（ベンゾイルフェニルエチニル）ピリジン、ナフチルエチニルピリジン及び４−（２−フルオレニルエチニル）−ピリジン（例えば、Ｔａｋａｌｏ，Ｈ．，ａｔ ａｌ．Ｊ．Ａｌｌｏｙｓ ａｎｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，２２５（１９９５）５１１；Ｄ’Ａｌｅｏ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｏｒｇ Ｃｈｅｍ．，４７（２００８）１０２６９；Ｐｉｃｏｔ Ａ．，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４６（２００７）２６５９参照）等の、より高い芳香族共役発色団の候補が公開されている。しかし、開示されたキレート設計は、親塩基キレートと比べて、ルミネセンス強度の有意な改善を示していない。例えば、Ｐｉｃｏｔ ｅｔ ａｌ．は、４−（２−（７−ヘキシルオキシ−９，９’−ジヘキシルフルオレニル）エチニル）−２，６−ビス（ジエチルカルバモイル）ピリジン・［ＯＴｆ］３のユーロピウムキレートについて、「室温で有意な放出は観察されない」及び「［おそらく、ピリジン配位子のＣＴ又は三重項状態が］室温で、エネルギーが低すぎるため、ユーロピウムイオンを感作しない」と記載している。
多数の発色団を有するキレート及び配位子に関して周知の課題は、高い水溶性を付与すると同時に、起こり得るいかなるバイオプロセスに対しても不活性であるような、好適な構造設計を見出すことである。発色団の追加は、配位子及びキレートの水への溶解性を低下し、標識化プロセス中の生体特異的結合反応体凝集物の形成及び標識化生体分子の非特異的結合特性を増大することが知られている。凝集物は、精製の問題を生じ、標識化物質の収率を低下させる。更に、標識化分子の非特異的結合が増大すると、生体特異的アッセイのバックグラウンドルミネセンスが増強され、そのためアッセイ感度が低下する。
以前に公開された構造と反対に、この新規発色団ランタニドキレート設計は、改善されたルミネセンス強度（すなわち、輝度）及び高い励起波長を示した。これらの発色団は、観察されたルミネセンス強度の主な理由である、驚くべき高いモル吸光係数を示した。
本発明の第１の態様は、式（Ｉ）又は式（ＩＩＩ）の発色団部分を１つ以上含む発光ランタニドキレートに関する。
本発明の第２の態様は、本明細書で定義される式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の部分を１つ以上含む発光ランタニドキレートに共役した生体特異的結合反応体を含む検出可能分子に関する。
本発明の第３の態様は、式（ＩＩ）又は式（ＩＶ）の発色団部分を１つ以上含む発光ランタニドキレート配位子に関する。
本発明の第４の態様は、生体特異的結合アッセイの実施方法に関し、この方法は、ａ）検体と、本明細書の定義による発光ランタニドキレートで標識化された生体特異的結合反応体との間でバイオ複合体を形成する工程、ｂ）上記バイオ複合体を、励起波長を有する放射線で励起させ、これにより励起バイオ複合体を形成する工程、及びｃ）上記励起バイオ複合体から放出される発光放射線を検出する工程を含む。
本発明の第５の態様は、（例えば、１又は２光子励起に基づく）固有ルミネセンスの時間分解蛍光光度測定を利用した特異的生体親和性に基づく結合アッセイにおける、本明細書に定義する検出可能分子の使用に関する。
本発明の第６の態様は、本明細書の定義による発光ランタニドキレートと共役した固体担体物質に関する。
本発明による構造的改良を、いくつかの異なるキレート構造に使用した（実施例参照）。改良が導入されたこれらのキレートでは、従来の置換パターンを有するキレートと比較して、モル係数（ε、すなわち、吸光係数）が有意に増大した。驚くべきことに、吸光係数が一般的に５０００〜３００００ｃｍ−１Ｍ−１であるところ、１０００００ｃｍ−１Ｍ−１／発色団さえも超える吸光係数が、新規ランタニド標識を用いて得られた。芳香族構造の共役は高いが、観察された三重項状態は、少なくとも中程度の量子収率（Φ）を提供するのに十分な高さである。これらの特徴の結果として、観察された全体的なルミネセンス効率（εΦ、すなわち、輝度）は、他の類似の標識設計と比較して、有意に高い。更に、３４０ｎｍさえも超える励起波長（λｅｘｃ）が得られ、これは低価格のＬＥＤベースの装置による励起をもたらす。
本発明の目的は、固有ルミネセンスの蛍光光度測定又は時間分解蛍光光度測定を利用した、特異的生体親和性に基づく結合アッセイ（例えば、イムノアッセイ（均一系及び不均一系の両方）、核酸ハイブリダイゼーションアッセイ、受容体結合アッセイ、酵素アッセイ、免疫細胞化学的アッセイ、免疫組織化学的アッセイ、及び細胞ベースアッセイ）で使用するための、改善されたランタニドキレート標識を得るための手段を提供することである。本発明のキレートは、３４０ｎｍを超える波長でも、例えば、アッセイ感度、及びバックグラウンドに関連する、生体親和性に基づく改善された結合アッセイを得るための手段を提供する。
発光ランタニドキレート
本発明の１つの態様は、式（Ｉ）又は式（ＩＩＩ）の発色団部分を１つ以上含む発光ランタニドキレートに関する。
式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＲ１−、−ＣＲ１Ｒ２−、＞Ｃ＝Ｏ、及び＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｒ１（＞Ｃ（＝Ｏ）のオキシム）から選択され；式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、
水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、水素、Ｃ１〜１２アルキル（特にＣ１〜６アルキル）、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、親水性基（任意選択的にスペーサーを含む）、反応性基（任意選択的にスペーサーを含む）、オリゴペプチド、ポリペプチド及びヌクレオチドから選択され；
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ、発色団部分とキレートの他の部分との間の結合を表し、
Ｒ６は、水素、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−Ｉ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＯＣＨ３−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＯＣＨ２、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−ＳＣＨ３、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＯＣＨ２、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＣＨ３、−ＣＯＮ（ＣＨ３）２、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＯＮＨＣ（ＣＨ２ＯＨ）３、−ＮＨＣＯＣＨ３、−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、反応性基Ｚ、及び親水性基から選択され；Ｌｎ３＋はランタニドイオンである。
一実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、
水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は水素、Ｃ１〜１２アルキル（特に、Ｃ１〜６アルキル）、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、及び−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−から選択される。
別の実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択される。
実施形態（他の実施形態と組み合わされてもよい）において、Ｒ１及びＲ２の１つは、存在する場合、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は反応性基（任意選択的にスペーサーを含む）であり、特に、Ｒ５は−ＮＣＳであり、Ｒ１及びＲ２のもう一方は、Ｒ５が反応性基ではないことを除いて、上記の定義の通りである。この１つの変形において、Ｒ１及びＲ２の１つは、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−ＮＣＳ、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−ＮＣＳであり、特に、−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ４−ＮＣＳである。
更に別の実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及び−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択され；特に、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、ＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＳＯ３Ｈ、−ＣＨ２ＳＯ３ −、ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−ＣＨ２ＰＯ３Ｈ２、−ＣＨ２ＰＯ３ ２−、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及び−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択される。
本明細書で言及するとき、−（ＣＨ２）１〜６は、１、２、３、４、５又は６個の炭素原子を有する直鎖アルキル鎖を意味する。本明細書の好ましい例は、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−及び−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−であり、特に、−ＣＨ２−である。
現在、いくつかの種類の置換基、すなわち、カルボン酸型及びスルホン酸型の置換基が特に興味深いと考えられる。したがって、好ましい実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−ＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２、−ＣＯＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＯＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＯＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択され、特に、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
一実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ及び−ＣＨ２−ＣＯＯ−から選択される。
別の実施形態において、Ｘは−ＣＲ１Ｒ２−であり、式中、Ｒ１及びＲ２はいずれも水素である。
一実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択され、特に、
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択される。
置換基がカルボキシレート、スルホネート、ホスホネート、ホスフェート等である場合、対イオンとしてカチオン、例えば、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋等を含んでもよいことが理解されるべきである。
一実施形態において、Ｘは、フルオレノン発色団に対応する＞Ｃ＝Ｏである。
別の実施形態において、Ｘはフルオレノンオキシム発色団に対応する＞Ｃ＝Ｎ−ＯＲ１である。この実施形態の１つの変形において、Ｒ１は、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、水素、Ｃ１〜１２アルキル（特に、Ｃ１〜６アルキル）、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −から選択される。
別の実施形態において、Ｘは、ジベンゾチオフェンに対応する−Ｓ−である。
更に別の実施形態において、Ｘは、ジベンゾフランに対応する−Ｏ−である。
更に別の実施形態において、Ｘは、９Ｈ−カルバゾリルに対応する−ＮＲ１−である。この実施形態の１つの変形において、Ｒ１は、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、水素、Ｃ１〜１２アルキル（特に、Ｃ１〜６アルキル）、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −から選択される。
更に別の実施形態において、Ｘは、フルオレンに対応する−ＣＲ１Ｒ２−である。この実施形態の１つの変形において、Ｒ１及びＲ２は、好ましくは独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、水素、Ｃ１〜１２アルキル（特に、Ｃ１〜６アルキル）、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −から選択される。
親水性基の例は、単糖及びオリゴ糖、例えば、単糖及び二糖、オリゴアルキレングリコール（例えば、１〜２０個の繰返し単位を有するもの）、例えば、オリゴエチレングリコール及びオリゴプロピレングリコール等である。
一実施形態において、親水性基は、単糖、二糖、−（ＣＨ２）１〜６ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−Ｃ（ＣＨ２ＯＨ）３−（ＣＨ２）１−３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０〜５−Ｈ、−（ＣＨ２）１〜３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−５−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜６−Ｈ、及び−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜６−Ｃ１〜４アルキル、特に、単糖から選択される。
本文脈において、用語「単糖」は、非環式又は環式のいずれかの形態のＣ５〜Ｃ７炭水化物を意味することを意図する。単糖の例は、Ｃ６炭水化物であり、例えば、以下から選択される。
本文脈において、用語「二糖」は、好ましくはグリコシド結合によって、互いに結合した２個の単糖（上記参照）を意味することを意図する。
他の考えられる実施形態において、親水性基（規定の通り）はキレート構造に存在するが、式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の発色団部分には存在しない。
いくつかの代替的な実施形態において、置換基Ｒ１及び／又はＲ２は、好ましくはスペーサーを含む反応性基Ｚを含む（更に下記参照）。このような場合、反応性基Ｚは、生体特異的結合反応体の標識を容易にするか、又は固体担体物質との共有結合の形成を容易にする。キレートが重合基を反応性基として有する場合、キレートを固体担体（例えば粒子）中に、粒子の製造と同時に、導入してもよい。
存在する場合、反応性基Ｚは、典型的には、アジド（−Ｎ３）、アルキニル（−Ｃ≡ＣＨ）、アルキレン（−ＣＨ＝ＣＨ２）、アミノ（−ＮＨ２）、アミノオキシ（−Ｏ−ＮＨ２）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アルデヒド（−ＣＨＯ）、ヒドラジド（−ＣＯＮＨＮＨ２）メルカプト（−ＳＨ）、マレイミド、マレイミドの活性化誘導体、イソシアナト（−ＮＣＯ）、イソチオシアナト（−ＮＣＳ）、ジアゾニウム（−Ｎ＋Ｎ）、ブロモアセトアミド、ヨードアセトアミド、反応性エステル、ピリジル−２−ジチオ、及び６−置換４−クロロ−１，３，５−トリアジン−２−イルアミノから選択され、特に、反応性基は、イソチオシアナト（−ＮＣＳ）基を含む。６−置換４−クロロ−１，３，５−トリアジン−２−イルアミノ中の置換基は、水素、ハロゲン、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキル、置換アミノ又はチオエーテルからなる群から選択でき、好ましくは、クロロ、フルオロ、エトキシ、２−メトキシエトキシ、２−シアノエトキシ、２，２，２−トリフルオロエトキシ、チオフェノキシ、又はエトキシカルボニル−チオメトキシからなる群から選択できる。置換アミノ又はチオエーテルは、好ましくは一置換又は二置換であり、各置換基は、好ましくはＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキル−Ｏ−、フェニル、カルボニル又はカルボキシルから独立して選択される。
反応性基Ｚは、生体特異的結合反応体（更には下記参照）と反応すると、上記生体特異的結合反応体への結合（例えば、下記の種類のうちの１つ）を確立する：チオ尿素（−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−）、アミノアセトアミド（−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＮＨ−）、アミド（−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＣＨ３−ＣＯ−及び−ＣＯ−ＮＣＨ３−）、オキシム（−Ｏ−Ｎ＝ＣＨ−）、ヒドラゾン（−ＣＯ−ＮＨ−ＮＨ＝ＣＨ−）（及び脂肪族チオエーテル（Ｓ）ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、６−置換−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン、
（式中、ｎ＝１〜６）、及びトリアゾール（例えば、いわゆる”クリック”ケスミトリーによって形成される）。
他の考えられる実施形態において、反応性基Ｚ（規定のとおり）はキレート構造内に存在するが、式（Ｉ）の発色団部分には存在しない。
反応性基Ｚが存在する場合、基Ｚは、必要又は望ましい場合に、反応性基Ｚが生体特異的結合反応体との反応に関与できる位置に配置されるよう、スペーサー、すなわち、距離形成ビラジカルを含んでもよいことが理解されるべきである。同様に、Ｒ１及びＲ２のいずれかが親水性基を含む場合、この親水性基はスペーサーを含んでもよい。いずれの場合も、スペーサーは、配位子又はキレートの合成の過程で容易に導入することができる。
「スペーサー」という用語は、例えば、共役基又はコア構造のピリジン部分と、例えば、反応性基Ｚ又は親水性基との間の距離形成基を意味することを意図する。スペーサーは、典型的には、連結箇所と反応性基（又は親水性基）との間に１〜２０結合（例えば、３〜１５結合又は５〜１２結合）の長さを有する。上記スペーサーは１〜５つの部分で形成され、各部分は、フェニレン、−Ｃ１〜１０アルキレン−、エチンジイル（−Ｃ≡Ｃ−）、エチレンジイル（−Ｃ＝Ｃ−）、エーテル（−Ｏ−）、チオエーテル（−Ｓ−）、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、アミド（−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＣＨ３−及び−ＮＣＨ３−Ｃ（＝Ｏ）−）、カルボニル（−ＣＯ−）、エステル（−ＣＯＯ−及び−ＯＯＣ−）、スルホアミド（−ＳＯ２−ＮＨ−、−ＳＯ２−ＮＲ’−）、スルホン（−ＳＯ２−）、ホスフェート（−Ｏ−ＰＯ２−Ｏ−）、ジアザ（−Ｎ＝Ｎ−）、第三級アミン、チオ尿素（−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−）、オキシム（−Ｏ−Ｎ＝ＣＨ−）、ヒドラゾン（−ＣＯ−ＮＨ−ＮＨ＝ＣＨ−）及びトリアゾールからなる群から選択され、式中、Ｒ’は１〜１０個の炭素原子からなるアルキル基を表す。
いくつかの実施形態において、置換基Ｒ１及び／又はＲ２の少なくとも１つは、オリゴペプチド、ポリペプチド又はポリヌクレオチドを含む。
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、発色団部分とキレートの他の部分、例えば、発色団部分とキレート化部分との間の結合を表す。少なくとも２個のカルボン酸又はリン酸基、これらの酸のエステル、アミド又は塩を含むキレート化部分は、直接的に又は環式若しくは非環式Ｎ−及び／若しくはＯ−含有炭化水素鎖を介してのいずれかで、発色団部分の芳香族単位に結合する。式（Ｉ）及び／又は（ＩＩＩ）の発色団部分が、従来のキレート内の任意の他の発色団部分に置き換わってよいことは理解されるべきである。したがって、式（Ｉ）及び／又は（ＩＩＩ）の発色団部分を、式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の発色団部分と類似の又は異なる他の発色団部分を有する従来のキレートに単純に組み込むことができることが理解される。実施例の節に実例が提供されている。
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、キレートの他の部分に対する結合、例えば、別の発色団部分に対する結合（一般にはリンカーを介する）、又は錯体形成基（例えば、−ＣＯＯＨ／−ＣＯＯ−）に対する結合、又は単に末端基若しくは水素原子に対する結合を表わす。
１つの変形において、Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４の１つ又は両方は、−（ＣＨ２）１〜３Ｎ（Ｒ７）−（ＣＨ２）１〜３−であってもよく、式中、Ｒ７は−（ＣＨ２）１〜６−アリールであり、ここで、アリール（例えば、フェニル）は、上記定義による反応性基Ｚで置換されてもよい。
別の変形において、Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４の１つ又は両方は、−（ＣＨ２）１〜３Ｎ（Ｒ８）−（ＣＨ２）１〜３−Ｃｈｒ、−（ＣＨ２）１〜３Ｏ（ＣＨ２）１〜３−Ｃｈｒ、又は−（ＣＨ２）１〜３Ｓ（ＣＨ２）１〜３−Ｃｈｒであってもよく、式中、Ｒ８は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、
−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜１０ＯＨ、−（ＣＨ２）１−１０ＯＲ５、−（ＣＨ２）１〜１０ＮＨ２、−（ＣＨ２）１〜１０ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜１０ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜１０ＳＨ、−（ＣＨ２）１〜１０ＳＲ５から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、
−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、及び反応性基Ｚから選択され、式中、Ｃｈｒは別の発色団部分を表す。
更に別の変形（これは他の実施形態と組み合わされてもよい）において、Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４の１つ又は両方は、独立して、−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２及び−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
更に別の変形（これは他の実施形態と組み合わされてもよい）において、Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４の１つ又は両方は、独立して、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ−、−ＰＯ３Ｈ２−ＰＯ３ ２−、−Ｐ（ＣＨ３）Ｏ２Ｈ、−−Ｐ（ＣＨ３）Ｏ２−、−Ｐ（Ｐｈ）Ｏ２Ｈ及び−Ｐ（Ｐｈ）Ｏ２ −から選択される。
代表的なＲ３及びＲ４並びに開示されたピリジン系発色団部分を本発明の発色団で置き換えることができるキレート設計の例は、例えば、以下の刊行物のものである。Ｈｏｖｉｎｅｎ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，２０（２００９）４０４；Ｈｅ．，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｌｅｔｔ．，１３（２０１１），５０３６；Ｗａｎｇ．，Ｑ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２（２０１３）８４６１；Ｂｕｔｌｅｒ，Ｓ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ Ｅｕｒ．Ｊ．，１９（２０１３）９５１１及び国際公開第２０１３／０１１２３６号。
一実施形態において、基−Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４は、それぞれ独立して、−（ＣＨ２）１〜６Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＯＲ５、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＳＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、
−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＯＲ５、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＳＨ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＳＲ５、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＮＨ２、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５から選択され、式中、Ｒ５は、水素、Ｃ１〜１２アルキル、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、
−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、親水性基（任意選択的にスペーサーを含む）、反応性基（任意選択的にスペーサーを含む）、オリゴペプチド、ポリペプチド及びヌクレオチドから選択される。
特に興味深い１つの変形において、基−Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４は、それぞれ独立して、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、
−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、及び−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−から選択される。一実施形態（これは、他の実施形態と組み合わされてもよい）において、Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４の１つ又は両方は、独立して、ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２及び
−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
一実施形態（これは他の実施形態と組み合わされてもよい）において、Ｒ３及び−ＣＨ２−Ｒ４の１つは、独立して、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、及び−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、親水性基（任意選択的にスペーサーを含む）、反応性基（任意選択的にスペーサーを含む）、オリゴペプチド、ポリペプチド及びヌクレオチドから選択される。１つの変形において、Ｒ５は反応性基（任意選択的にスペーサーを含む）である。
置換基Ｒ６は、典型的には、水素、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−Ｉ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＣＨ３、−ＣＯＮ（ＣＨ３）２、−ＮＨＣＯＣＨ３、反応性基Ｚ、及び親水性基から選択される。いくつかの実施形態において、Ｒ６は存在しない。他の実施形態において、１つのＲ６は、反応性基である（上記参照）。
いくつかの興味深い実施形態において、キレートは、例えば、化合物４７、４８、４９、５０、５３、５４、５７、５８、６４、６５、６６、７８、７９及び８０で例示されるような発色団基を合計で２又は３個有する。
「ランタニドイオン」又は「Ｌｎ３＋」という用語は、元素周期表のランタニド系列の三価イオン、例えば、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、及びジスプロシウム（ＩＩＩ）、すなわち、Ｅｕ３＋、Ｔｂ３＋、Ｓｍ３＋又はＤｙ３＋を意味することを意図する。多くの実施形態において、ユーロピウム（ＩＩＩ）（Ｅｕ３＋）が好ましい。
更に、本発明は、多標識の可能性をもたらす、全てのランタニドに対する高発光性の標識を提供する。
いくつかの特定の実施形態において、キレートは、以下の構造式（Ａ−Ｉ）、（Ａ−ＩＩＩ）、（Ｂ−Ｉ）、（Ｂ−Ｉ＊）、（Ｂ−ＩＩＩ）、（Ｂ−ＩＩＩ＊）、（Ｃ−Ｉ）、（Ｃ−ＩＩＩ）、（Ｄ−Ｉ）及び（Ｄ−ＩＩＩ）の１つを有する：
（Ａ−Ｉ）は、１４、４０、４１、４２の化合物に対応し、
（Ａ−ＩＩＩ）は、化合物１１、１２、２６、２７、２８、３０に対応し、
（Ｂ−Ｉ）は、化合物４５、４６、４７、４８、４９、５０に対応し、
（Ｂ−Ｉ＊）：
（Ｂ−ＩＩＩ）は、化合物５２、５３、５４、５６、５７、５８に対応し：
（Ｂ−ＩＩＩ＊）：
（Ｃ−Ｉ）は、化合物６４、６５、６６に対応し
（式中、ｎ＝１〜５である）
（Ｃ−ＩＩＩ）：
（式中、ｎ＝１〜５である）
（Ｄ−Ｉ）は、化合物７８、７９に対応し：
（式中、ｎ＝１〜５である）
（Ｄ−ＩＩＩ）：
式（Ａ−Ｉ）、（Ａ−ＩＩＩ）、（Ｂ−Ｉ）、（Ｂ−Ｉ＊）、（Ｂ−ＩＩＩ）、（Ｂ−ＩＩＩ＊）、（Ｃ−Ｉ）、（Ｃ−ＩＩＩ）、（Ｄ−Ｉ）及び（Ｄ−ＩＩＩ）のそれぞれにおいて、Ｘ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６及びＲ８は、それぞれ、上記式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）に関して定義された基Ｘ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６及びＲ８を表す。式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）に関して上に記載された各規定、実施形態、変形及び優先性（等）は、式（Ａ−Ｉ）、（Ａ−ＩＩＩ）、（Ｂ−Ｉ）、（Ｂ−Ｉ＊）、（Ｂ−ＩＩＩ）、（Ｂ−ＩＩＩ＊）、（Ｃ−Ｉ）、（Ｃ−ＩＩＩ）、（Ｄ−Ｉ）及び（Ｄ−ＩＩＩ）の対応する実施形態、変形及び優先性ともみなされるべきである。
１つの好ましい実施形態において、キレートは、式（Ａ−Ｉ）又は（Ａ−ＩＩＩ）を有する。本発明の１つの変形において、Ｘは、−ＮＨＲ１又は−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択される。特に、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択され；特に水素、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
別の好ましい実施形態において、キレートは、式（Ｂ−Ｉ）又は（Ｂ−Ｉ＊）又は（Ｂ−ＩＩＩ）又は（Ｂ−ＩＩＩ＊）を有する。本発明の１つの変形において、Ｘは、−ＮＨＲ１又は−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択される。特に、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択され；特に水素、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
更に別の好ましい実施形態において、キレートは、式（Ｃ−Ｉ）又は（Ｃ−ＩＩＩ）を有する。本発明の１つの変形において、Ｘは、−ＮＨＲ１又は−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択される。特に、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、
−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択され；特に、水素、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
更に別の好ましい実施形態において、キレートは、式（Ｄ−Ｉ）又は（Ｄ−ＩＩＩ）を有する。本発明の１つの変形において、Ｘは、−ＮＨＲ１又は−ＣＲ１Ｒ２−であり、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択される。特に、Ｒ１及びＲ２は、存在する場合、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及び−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２から選択され、式中、Ｒ５は、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、及び−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−から選択され；特に水素、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される。
更に、Ｅｕ３＋が、式（Ａ−Ｉ）、（Ａ−ＩＩＩ）、（Ｂ−Ｉ）、（Ｂ−Ｉ＊）、（Ｂ−ＩＩＩ）、（Ｂ−ＩＩＩ＊）、（Ｃ−Ｉ）、（Ｃ−ＩＩＩ）、（Ｄ−Ｉ）及び（Ｄ−ＩＩＩ）のキレートにおいて好ましいが、Ｔｂ３＋、Ｓｍ３＋又はＤｙ３＋から選択される任意の他のランタニドで置換されてもよいと考えられる。
特に興味深いのは、構造１１、１２、１４、４９、５４、６６、及び８０のいずれか１つをベースとするランタニドキレートである。
ランタニドキレート化配位子
したがって、本発明の別の態様は、式（ＩＩ）又は式（ＩＶ）の発色団部分を１つ以上含むランタニドキレート化配位子に関し、
式中、Ｘ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ６のそれぞれは、それぞれ、式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）に関する上記定義による基Ｘ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ６を表す。
いくつかの興味深い実施形態において、ランタニドキレート化配位子は、上記（Ａ−Ｉ）、（Ａ−ＩＩＩ）、（Ｂ−Ｉ）又は（Ｂ−ＩＩＩ）の１つ（Ｅｕ３＋を除く）を有する。
検出可能分子
本発明の更に別の態様は、上記定義による発光ランタニドキレートと共役した生体特異的結合体を含む検出可能分子に関する。共役は通常、上記キレートの反応性基によって得られる。
生体特異的結合反応体は、サンプル中の検体を定量又は定性分析するために、その検体と特異的に結合できることが必要である。
生体特異的結合反応体の例としては、抗体、抗原、受容体配位子、特異的結合タンパク質、ＤＮＡプローブ、ＲＮＡプローブ、オリゴペプチド、オリゴヌクレオチド、修飾オリゴヌクレオチド（例えばＬＮＡ修飾オリゴヌクレオチド）、修飾ポリヌクレオチド（例えばＬＮＡ修飾ポリヌクレオチド）、タンパク質、オリゴ糖、多糖、リン脂質、ＰＮＡ、ステロイド、ハプテン、ドラッグ、受容体結合配位子、及びレクチンから選択されるものが挙げられる。
好ましい実施形態において、生体特異的結合反応体は、抗体、例えば、トロポニンＩ抗体（抗ＴｎＩ）から選択される。
生体特異的結合アッセイの実施方法
本発明のまた更なる態様は、生体特異的結合アッセイの実施方法に関し、この方法は以下の工程を含む：
ａ）検体と、本明細書の定義によるランタニドキレートで標識化された生体特異的結合反応体との間でバイオ複合体を形成する工程、
ｂ）励起波長を有する放射線で上記バイオ複合体を励起させ、これにより励起バイオ複合体を形成する工程、及び
ｃ）上記励起バイオ複合体から放出される発光放射線を検出する工程。
工程ｂ）において、励起波長は、好ましくは３００ｎｍ以上、例えば、約３２０〜３８０ｎｍであり、励起の有意な拡張は３６０ｎｍ〜３８０ｎｍで得られる。
本発明の方法は、当業者には明白であると思われる従来のアッセイ工程に従う。
つまり、本発明の更なる態様は、固有ルミネセンスの時間分解蛍光光度測定を利用した特異的生体親和性に基づく結合アッセイにおける、上記定義による検出可能分子の使用に関する。一実施形態において、特異的生体親和性に基づく結合アッセイは、不均一系イムノアッセイ、均一系イムノアッセイ、ＤＮＡハイブリダイゼーションアッセイ、受容体結合アッセイ、免疫細胞化学的アッセイ、又は免疫組織化学的アッセイである。
固体担体
本発明の更に別の態様は、上記定義による発光ランタニドキレートと共役した固体担体物質に関する。発光ランタニドキレートは通常、共有結合又は非共有結合のいずれかにより固体担体物質に固定化される。
いくつかの興味深い実施形態では、固体担体物質は、ナノ粒子、マイクロ粒子、スライド、プレート、及び固相合成樹脂から選択される。
新規ランタニドキレート配位子並びに対応する発光ランタニドキレート及び標識化生体特異的結合反応体は、開鎖（すなわち非環式）の配位子構造をベースとし、この構造はキレート化ランタニドイオンの驚くほど効率的な励起をもたらす。同時に、発光ランタニドキレート及び標識化生体特異的結合反応体の重要な特徴を、凝集物の追加形成及び精製問題を生じることなく、全て保持することができる。
本発明のキレートは、以下のような、単一標識のいくつかの重要な特徴を組み合わせることを目的とする：
（ａ）より長い波長へのシフト（実施例を参照）により、計器製造におけるコスト削減及び計器小型化の可能性をもたらすと予想されるＵＶ ＬＥＤを励起源として使用することを可能にする。
（ｂ）高い吸光係数（ε）と適切な量子収率（Φ）との組み合わせにより、高感度の時間分解バイオアッセイにおいて拡張された輝度（ε×Φ）の使用をもたらす。
（ｃ）キレートを、異なるランタニドに適用できる。
（ｄ）シグナルの損失なく、標識化度を低下することができる。
（ｅ）標識化度の低下により、生体分子の親和性の改善及びアッセイ中の非特異的結合の減少が可能になる。より速い反応速度が可能となり、アッセイ感度を向上させることもできるより低いバックグラウンドが見られる。
（ｆ）特に、数個の芳香族発色団部分を有するキレートに関して、水溶性の向上を伴う発色団部分の望ましくない吸光特性の低下。これは、標識化抗体の非特異的結合を低減し、アッセイ感度の向上をもたらす。
以下の非限定的実施例は、本発明を更に実証することを目的とする。
ＦＣ＝フラッシュクロマトグラフィー。ＲＴ＝室温。マイクロウェーブ合成装置はＩｎｉｔｉａｔｏｒシステム（Ｂｉｏｔａｇｅ）であった。１Ｈ ＮＭＲ及び１３Ｃ ＮＭＲスペクトルは、ＳｉＭｅ４を内部標準として使用して、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ５００ ＤＲＸ（Ｂｒｕｋｅｒ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で記録し、ケミカルシフトδはｐｐｍ単位である。質量スペクトルは、Ｖｏｙａｇｅｒ ＤＥ Ｐｒｏ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）質量分析計で記録した。ＨＰＬＣは、ＤｉｏｎｅｘのＵｌｔｉｍａｔｅ ３０００ダイオードアレイ検出器を含むＤｉｏｎｅｘのＵｌｔｉｍａｔｅ ３０００システムで実施した。使用したカラムは、ＴｈｅｒｍｏＨｙｐｅｒｓｉｌ １５０×４ｍｍ ５μ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ（登録商標）ＯＤＳであった。使用した溶離液は、１００ｍＭ ＴＥＡＡ及びＣＨ３ＣＮであった。ＨＰＬＣは、７５％のＨ２Ｏ、２０％の１００ｍＭ ＴＥＡＡ及び５％のＣＨ３ＣＮから開始して、３０分以内に、３０％のＨ２Ｏ、２０％のＴＥＡＡ及び５０％のＣＨ３ＣＮに至る溶離液グラジエントを使用して実施した。ＨＰＬＣに関して、試料濃度は、水１ｍＬ中に約１ｍｇのキレートであった。試料体積は、２０〜２５μＬであった。モル吸光係数（ε）、励起最大波長（λｅｘｃ）、ルミネセンス寿命（τ）、量子収率（Φ）、及び三重項段階エネルギー（Ｔ）の計器、測定及び計算原理については、例えば、Ｒａｅｓａｅｎｅｎ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｊ．Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ，１４６，２１１−２１７を参照。
実施例１．化合物１の合成
２−ブロモフルオレン（０．７４ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボラン（１．２２ｇ、４．８ｍｍｏｌ）及びＫＯＡｃ（０．８８ｇ、９．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）のＣＨ２Ｃｌ２錯体（０．１２ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を６０℃で２２時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ＋２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、２０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：０．８８ｇ（１００％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．３７（１２Ｈ，ｓ）；７．３２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．１Ｈｚ）；７．３８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．８０（１Ｈ，ｄ．Ｊ＝７．７Ｈｚ）；７．８２（１Ｈ，ｄ．Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；８．００（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２４．９９；３６．７４，８３．７８；１１９．２９；１２０．３９；１２５．１４；１２６．７６；１２７．２３；１３１．２９；１３３．４０；１３４．７６；１４１．５４；１４２．４７；１４３．９２；１４４．５９。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）２９３．１９；測定値２９３．５１。
実施例２．化合物２の合成
２−ブロモフルオレン（１．２３ｇ、５ｍｍｏｌ）を、ＮａＨ（０．３６ｇ、１５ｍｍｏｌ）と乾燥ＤＭＦ（２５ｍＬ）の混合物に、アルゴン下で添加した。５分間撹拌した後、ＢｒＣＨ２ＣＯＯｔＢｕ（２．２１ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１０分間及び６５℃で２３時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初に５％、次いで１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：１．８９ｇ（８０％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０６（１８Ｈ，ｓ）；２．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ）；２．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ）；７．３３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．５Ｈｚ）、７．３５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．５Ｈｚ）；７．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び１．７Ｈｚ）；７．５０−７．７３（１Ｈ，ｍ）、７．５５（１Ｈ，ｄ．Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．６４−７．６８（１Ｈ，ｍ）；７．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２７．５８；４４．４２；５０．７０；８０．４３；１１９．８１；１２０．８０；１２１．０３；１２３．９６；１２７．５９；１２７．６５；１２７．９４；１３０．７２；１３９．４６；１３９．６８；１４８．０２；１５０．５１。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４７３．１３及び４７５．１２；測定値４７３．１４及び４７５．１３。
実施例３．化合物３の合成
この化合物３は、２−ブロモフルオレンと｛２−［２−（２−メトキシエトキシ）−エトキシ］エトキシ｝−ｐ−トルエンスルホネートから、実施例２に記載の合成と類似の方法を用いて合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初にＣＨ２Ｃｌ２、次いで５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：１００％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２．２５−２．３９（４Ｈ，ｍ）；２．６４−２．７１（４Ｈ，ｍ）；３．０４−３．１４（４Ｈ，ｍ）；３．１９（６Ｈ，ｓ）；３．２２−３．２６（４Ｈ，ｍ）；３．３２−３．３５（４Ｈ，ｍ）；３．３５−３．３９（４Ｈ，ｍ）；７．３３−７．２８（２Ｈ，ｍ）；７．５２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び１．８Ｈｚ）；７．５４−７．５７（１Ｈ，ｍ）；７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．８１−７．８４（１Ｈ，ｍ）；７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３８．３８；５１．２７：５７．３９；６６．２４；６９．７１；６９．４３ ６９．５６；７１．１１；１２０．１３；１２０．３８；１２１．６５；１２３．１９；１２６．４４；１２７．２９；１２７．５２；１２７．７０；１３８．８３；１３９．１２；１４８．５６；１５１．５７。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５３７．１９及び５３９．１８；測定値５３６．９１及び５３９．７３。
実施例４．化合物４の合成
この化合物４は、実施例１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初に１０％、次いで２０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：１００％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０３（１８Ｈ，ｓ）；１．３６（１２Ｈ，ｓ）；２．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ）；２．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ）；７．３２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．３Ｈｚ）；７．３５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．３Ｈｚ）；７．５５−７．５８（１Ｈ，ｍ）；７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．６９−７．７２（１Ｈ，ｍ）；７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５及び０．７Ｈｚ）；９．９４（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２４．９３；２８．１１；４４．５５；５０．５６；８０．１６；８３．５１；１１９．０４；１２０．１６；１２４．１７；１２７．６４；１２７．６８；１３０．２３；１３４．４４；１３４．７４；１４０．３９：１４３．４７；１４７．５５；１４８．８５；１６９．３２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５２１．３１；測定値５２０．９９。
実施例５．化合物５の合成
化合物２（０．４８ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（３５ｍｇ、５０μｍｏｌ）、ＣｕＩ（１０ｍｇ、５０μｍｏｌ）のジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍＬ）及び乾燥ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。トリメチルシリルアセチレン（０．１９８ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）を添加した後、混合物を、１２０℃のマイクロウェーブ合成装置内に２５分間置いた。混合物をＥｔ２Ｏ（３０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：０．４７ｇ（９６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．２５（９Ｈ，ｓ）、０．８４（１８Ｈ，ｓ）；２．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；７．３２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．３Ｈｚ）；７．３５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．１Ｈｚ）；７．４３（１Ｈ，ｄｄ；Ｊ＝７．８及び１．１Ｈｚ）；７．５７−７．６０（１Ｈ，ｍ）；７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）；７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．７９−７．８２（１Ｈ，ｍ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：−０．１２；２６．９４；４４．０９；５０．５６；７９．０７；９３．７５；１０６．２６；１１９．８２；１２０．１２；１２０．２０；１２４．０５；１２７．４５；１２７．４８；１２７．５６；１３０．９１；１３９．７８；１４１．４６；１４８．３３；１４８．５６；１６８．３３。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４９１．２５；測定値４９１．０５。
実施例６．化合物６の合成
この化合物６は、実施例５に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物３から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初にＣＨ２Ｃｌ２、次いで１％〜２％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：６７％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．２５（９Ｈ，ｓ）、２．２６−２．４０（４Ｈ，ｍ）、２．５６−２．６７（４Ｈ，ｍ）；３．０３−３．１３（４Ｈ，ｍ）；３．１９（６Ｈ，ｓ）；３．２１−３．２６（４Ｈ，ｍ）；３．３２−３．３５（４Ｈ，ｍ）；３．３５−３．３９（４Ｈ，ｍ）；７．３４−７．３９（２Ｈ，ｍ）；７．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び１．２Ｈｚ）；７．５４−７．５８（１Ｈ，ｍ）；７．６９（１Ｈ，ｓ）；７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．８１−７．７５（１Ｈ，ｍ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：−０．１３；３８．４５；５０．９７；５７．９２；６６．２４；６９．２２；６９．４２；６９．５７；７１．１１；９３．９４；１０６．０３；１２０．０４；１２０．３８；１２０．５９；１２３．１９；１２６．４２；１２７．２９；１２７．８８；１３０．９１；１３９．０３；１４０．６１；１４９．２０；１４９．２２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５５５．３２；測定値５５５．５５。
実施例７．化合物７の合成
化合物５（０．４５ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムフルオリド（０．３４ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中混合物を、アルゴン下、室温で１時間撹拌した。混合物を１０％クエン酸（１５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２×１５ｍＬ）で素早く洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：０．３５ｇ（９１％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．８６（１８Ｈ，ｓ）；２．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；４．１６（１Ｈ，ｓ）；７．３２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．３Ｈｚ）；７．３５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．３Ｈｚ）；７．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び１．１Ｈｚ）；７．５７−７．６０（１Ｈ，ｍ）；７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）；７．７７−７．８１（２Ｈ，ｍ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２６．９６；４４．０９；５０．５６；７９．０７；８０．３８；８４．３９；１１９．７７；１１９．８１；１２０．１０；１２４．０７；１２７．４１；１２７．４９；１２７．５７；１３１．０７；１３９．７６；１４１．３７；１４８．３９；１４８．４４；１６８．３０。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４１９．２２；測定値４１９．１２。
実施例８．化合物８の合成
この化合物８は、実施例７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物６から合成した。収率：９９％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２．２６−２．３９（４Ｈ，ｍ）；２．６０−２．６９（４Ｈ，ｍ）；３．０６−３．１２（４Ｈ，ｍ）；３．１９（６Ｈ，ｓ）；３．２２−３．２６（４Ｈ，ｍ）；３．３２−３．３５（４Ｈ，ｍ）；３．３５−３．３８（４Ｈ，ｍ）；４．２０（１Ｈ，ｓ）；７．３３−７．３９（２Ｈ，ｍ）；７．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び１．２Ｈｚ）；７．５５−７．５９（１Ｈ，ｍ）；７．７０（１Ｈ，ｓ）；７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．８２−７．８６（１Ｈ，ｍ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３８．４３；５０．９４；５７．９２；６６．２７；６９．２１；６９．４２；６９．５６；８０．６３；８４．１９；１２０．０４；１２０．１７；１２０．３７；１２３．２２；１２６．５４；１２７．２８；１２７．８５；１３０．９５；１３９．０３；１４０．５３；１４９．１９；１４９．２１。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４８３．２８；測定値４８３．１４。
実施例９．化合物９の合成
化合物１（０．２６０ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−［（４−ブロモピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレンニトリロ）］テトラキス（アセテート）（Ｈ．Ｔａｋａｌｏ，ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ａｃｔａ Ｃｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．，Ｓｅｒ Ｂ，４２，６１４）（０．３１４ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びＣｓＣＯ３（０．２６６、０．８０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（１１ｍｇ、９．５μｍｏｌ）を添加した後、この混合物を８５℃で２０時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）及び０．５％トリエチルアミン）により精製した。収率：０．１４ｇ（３９％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．４０（３６Ｈ，ｓ）；３．４７（８Ｈ，ｓ）；３．９８（４Ｈ，ｓ）；４．０２（２Ｈ，ｓ）；７．３７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び０．７Ｈｚ）；７．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．４及び０．７Ｈｚ）；７．７７（２Ｈ，ｓ）；７．９５（１Ｈ，ｓ）；７．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．６８；３６．４３；５５．２６；５９．２２；８０．１５；１１７．９９；１２０．３９；１２０．５５；１２３．２５；１２５．１７；１２５．４５；１２６．８４；１２７．１９；１３６．２５；１４０．３１；１４１．９７；１４３．３９；１４３．８７；１４８．１８；１５９．０３；１６９．９９。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７５８．４４；測定値７５８．８６。
実施例１０．化合物１０の合成
化合物４（７８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−［（４−ブロモピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレンニトリロ）］テトラキス（アセテート）（６７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、ＣｓＣＯ３（５５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１ｍｇ、９．５μｍｏｌ）及びＨ２Ｏ（９μＬ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した後、この混合物を８５℃で２．５時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初に１５％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）、次いで４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）及び１％トリエチルアミン）により精製した。収率：７６ｍｇ（７７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．８６（１８Ｈ，ｓ）；１．４０（３６Ｈ，ｓ）；３．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ）；３．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ）；３．４７（８Ｈ，ｓ）；３．９９（４Ｈ，ｓ）；７．３４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．２Ｈｚ）；７．３７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．１Ｈｚ）；７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ及び１．２Ｈｚ）；７．７４（２Ｈ，ｓ）；７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２６．８６；２７．６９；４４．０７；５０．５２；５４．７９；５５．２７；５９．２０；７８．９５；８０．１０；１１８．２５；１１９．９５；１２０．１５；１２２．２９；１２３．９９；１２６．０２；１２７．１７；１２７．４０；１３６．４９；１３９．７４；１４１．４３；１４８．３７；１４８．５０；１４９．０９；１５８．８１；１６８．１９；１６９．８９。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）９８６．５８；測定値９８７．３９。
実施例１１．化合物１１の合成
化合物９（７０ｍｇ、９２μｍｏｌ）のＣＦ３ＣＯＯＨ（２．７ｍＬ）溶液を、室温で２時間撹拌した。加熱せずに蒸発させた後、混合物をＥｔ２Ｏ（１０ｍＬ）でトリチュレートし、遠心分離して、生成物をＥｔ２Ｏ（２×５ｍＬ）で洗浄した。収率：５８ｍｇ（８３％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６７（８Ｈ，ｓ）；４．０７（２Ｈ，ｓ）；４．３２（４Ｈ，ｓ）；７．４１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；７．４６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；７．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；８．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．１９（１Ｈ，ｓ）；８．２７（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３６．４４；５４．９４；５６．１０；１１５．２６；１２０．１０；１２０．８４；１２０．８９；１２４．１７；１２５．３０；１２６．４７；１２６．９６；１２７．７８；１３３．５１；１３９．９１；１４４．７７；１４４．２０；１５５．２７，１５７．８０；１７２．４５。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）５３５．１９；測定値５３５．０６。
実施例１２．化合物１２の合成
この化合物１２は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物１０から合成した。収率：９８％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．１６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．５８（８Ｈ，ｓ）；４．１５（４Ｈ，ｓ）；７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．３８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．９１（２Ｈ，ｓ）；７．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；８．０７（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：４２．００；４９．５０；５４．８１；５８．１１；１１８．８８；１２０．４４；１２０．５７；１２２．０９；１２２．２３；１２３．７１；１２６．４４；１２７．４１；１２７．５９；１３５．３３；１３９．１９；１４１．６７；１４９．３９；１５０．４６；１５７．７３；１７１．１３；１７２．５０。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）６５１．２０；測定値６５１．２９。
実施例１３．化合物１３の合成
化合物７（９２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−［（４−ブロモピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレンニトリロ）］テトラキス（アセテート）（１３５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）及びＴＨＦ（２ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（１４ｍｇ、２０μｍｏｌ）、ＣｕＩ（８ｍｇ、４０μｍｏｌ）を添加した後、この混合物を５５℃で２０時間撹拌した。蒸発乾固した後、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、２０％〜３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）により精製した。収率：９０ｍｇ（４５％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．８６（１８Ｈ，ｓ）；１．４２（３６Ｈ，ｓ）；２．９７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．４４（８Ｈ，ｓ）；３．９２（４Ｈ，ｓ）；７．３５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．２及び１．３Ｈｚ）；７．３８（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．２及び１．２Ｈｚ）；７．５５−７．５８（１Ｈ，ｍ）；７．５７（２Ｈ，ｓ）；７．５９−７．６４（２Ｈ，ｍ）；７．８３−７．８６（２Ｈ，ｍ）；７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２６．９６；２７．８１；４４．１０；５０．６１；５５．５４；５９．１８；７９．０９；８０．３４；８７．２９；９３．９０；１１９．２５；１２０．０９；１２０．２６；１２２．０６；１２４．０６；１２７．５７；１２７．５９；１２７．６７；１３０．９９；１３１．１４；１３９．６８；１４２．１０；１４８．５９；１４８．６５；１５９．２７；１６８．２７；１７０．０５。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１０１０．５８；測定値１０１１．０７。
実施例１４．化合物１４の合成
この化合物１４は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物１３から合成した。収率：８７％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．０４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ）；３．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ）；３．５１（８Ｈ，ｓ）；３．９７（４Ｈ，ｓ）；７．３４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．２Ｈｚ）；７．３７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．１Ｈｚ）；７．５８（２Ｈ，ｓ）；７．６１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６及び１．２Ｈｚ）；７．６１−７．６４（１Ｈ，ｍ）；７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）；７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：４１．９０；４９．５４；５４．５５；５８．９８；８７．３６；９４．１７；１１９．３２；１２０．４１；１２０．６３；１２２．３１；１２３．７０；１２７．０９；１２７．９１；１３１．２９；１３１．３７；１３９．１２；１４１．５６；１４９．６３；１４９．７５；１５９．２４；１７１．２７；１７２．４２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）６７５．２０；測定値６７５．１６。
実施例１５．化合物１５の合成
３−ブロモ−９Ｈ−カルバゾール（０．２５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、無水酢酸（０．９５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（５ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中混合物を、室温で２２時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を添加した後、混合物を１５分間撹拌した。有機相を分離し、５％ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）、水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。収率：０．２９ｇ（１００％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２．８９（３Ｈ，ｓ）；７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；７．５７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．３及び１．２Ｈｚ）；７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８及び２．１Ｈｚ）；８．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）；８．２３−８．２８（２Ｈ，ｍ）；８．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．３５；１１５．９１；１１６．０７；１１８．１４；１２０．６８；１２２．７２；１２３．６４；１２４．３５；１２７．６２，１２８．１０；１２９．６８；１３６．９４；１３８．２２；１７０．４２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）２８７．９９及び２８９．９９；測定値２８８．０３及び２８８．８３。
実施例１６．化合物１６の合成
塩化ブロモアセチル（１００μｌ、１．２ｍｍｏｌ）を、ジ（ｔｅｒｔ−ブチル）イミノビス（アセテート）（０．２４５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、乾燥Ｋ２ＣＯ３（０．６９１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及び乾燥ＭｅＣＮ（５ｍＬ）の混合物に、氷浴にて添加し、この混合物を０℃で３０分間及び室温で２時間撹拌した。ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）を添加した後、混合物を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。収率：０．３４ｇ（９３％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．４０（９Ｈ，ｓ）；１．４３（９Ｈ，ｓ）；３．９４（２Ｈ，ｓ）；４．１４（２Ｈ，ｓ）；４．２１（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．３３；２７．７４；４９．３９；５１．１４；８０．８９；８１．５７；１６６．９２；１６７．６０；１６７．９０。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３６６．０８及び３６７．０８；測定値３６７．７８及び３６８．８０。
実施例１７．化合物１７の合成
３−ブロモ−９Ｈ−カルバゾール（０．２２ｇ、０．９ｍｍｏｌ）、化合物１６（０．６６ｇ、１．８ｍｍｏｌ）、乾燥Ｋ２ＣＯ３（０．２５ｇ、１．８ｍｍｏｌ）及び乾燥ＭｅＣＮ（１０ｍＬ）の混合物を、４８時間還流した。ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）を添加した後、この混合物を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％〜３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）により精製した。収率：０．４１ｇ（８５％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３７（９Ｈ，ｓ）；１．５１（９Ｈ，ｓ）；３．９７（２Ｈ，ｓ）；４．４４（２Ｈ，ｓ）；５．３２（２Ｈ，ｓ）；７．２３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．８及び０．７Ｈｚ）；７．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）；７．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．４７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．８及び１．０Ｈｚ）；７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．７及び２．０Ｈｚ）；８．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．７３；２７．８０；２７．８０；４３．８７；４９．５２；５０．１７；８０．８６；８１．９４；１０９．３５；１１１．１３；１１１．１５；１１９．４７；１２０．８１；１２１．３３；１２２．８４；１２４．２８；１２６．４６；１２７．９７；１３９．５５；１４１．１１；１６７．７６；１６８．５８。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５３１．１４及び５３３．１４；測定値５３０．９４及び５３２．９０。
実施例１８．化合物１８の合成
この化合物１８は、実施例１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物１５から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％〜３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：９８％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５（１２Ｈ，ｓ）；２．９０（３Ｈ，ｓ）；７．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．５３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び０．９Ｈｚ）；７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；８．２７−８．３１（２Ｈ，ｍ）；８．４７（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２４．６４；２７．４６；８３．６７；１１５．６２；１１６．０４；１２０．２６；１２３．６７；１２５．１２；１２５．３１；１２６．３４；１２７．４２；１３３．４９；１３８．０６；１４０．１４；１７０．５８。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３３６．１７；測定値３３７．０４。
実施例１９．化合物１９の合成
この化合物１９は、実施例１に記載の合成と類似の方法を用いて、３−ブロモジベンゾフラン（Ｌｉ，Ｗ．，ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，５２，１７９９）から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、５％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：４８％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５（１２Ｈ，ｓ）；７．４２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び０．６Ｈｚ）；７．５４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び１．２Ｈｚ）；７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７及び１．２Ｈｚ）；８．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７及び０．６Ｈｚ）；８．４９（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２４．７６；８３．８１；１１１．３３；１１１．６４；１２１．５１；１２３．２８；１２３．３９；１２３．４９；１２７．７７；１２７．８３；１３３．８０；１５５．５１；１５７．６３。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）２９５．１４；測定値２９５．０５。
実施例２０．化合物２０の合成
この化合物２０は、実施例１に記載の合成と類似の方法を用いて、３−ブロモジベンゾチオフェン（Ｔｅｄｊａｍｕｌｉａ，Ｍ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍ．，２０，１４８５）から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：４５％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．４０（１２Ｈ，ｓ）；７．４２−７．４８（２Ｈ，ｍ）；７．８２−７．９０（３Ｈ，ｍ）；８．２２−８．２７（１Ｈ，ｍ）；８．６２（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２４．９３；８３．９６；１２１．８４；１２２．１２；１２２．７２；１２４．４６；１２６．６８；１２８．２７；１３２．５５；１３５．１０；１３５．５９；１３９．１７；１４２．７６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３１１．１２；測定値３１１．１８。
実施例２１．化合物２１の合成
この化合物２１は、実施例１に記載の合成と類似の方法を用いて、２−ブロモ−９−フルオレノンから合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：８８％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３２（１２Ｈ，ｓ）；７．４３（１Ｈ，ｔｄ；Ｊ＝７．４及び０．８Ｈｚ）；７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．０Ｈｚ）；７．８１（１Ｈ，ｓ）；７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．４及び０．８Ｈｚ）；７．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．４及び１．０Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２４．６９；８４．０９；１２０．８２；１２１．７２；１２３．９９；１２９．０１；１２９．７６；１３０．１０；１３２．６８；１３３．５３；１３５．４３；１４１．５４；１４３．５５；１４６．５９；１９２．８８。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３０７．１４；測定値３０７．９３。
実施例２２．化合物２２の合成
この化合物２２は、実施例１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物１７から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：９１％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３４（１２Ｈ，ｓ）；１．３８（９Ｈ，ｓ）；１．５２（９Ｈ，ｓ）；３．８９（２Ｈ，ｓ）；４．４６（２Ｈ，ｓ）；５．３２（２Ｈ，ｓ）；７．２３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．５及び０．８Ｈｚ）；７．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．４４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．５及び０．９Ｈｚ）；７．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５及び０．９Ｈｚ）；８．２４（１Ｈ，ｄ＝７．５Ｈｚ）；８．４８（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２４．７８；２７．７３；２７．８０；４３．８０；４９．５４；５０．２０；８０．８５；８１．９３；８３．３８；１０８．６４；１０９．１８；１１９．５７；１２０．４１；１２２．１１；１２２．３５；１２５．８２；１２７．１６；１２８．１１；１３１．７３；１４０．８５；１４２．９１；１６７．７８；１６７．７９；１６８．６０。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５７９．３２；測定値５７９．２３。
実施例２３．化合物２３の合成
化合物１８（０．１７ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−［（４−ブロモピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレンニトリロ）］テトラキス（アセテート）（０．２２ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ＣｓＣＯ３（０．１８ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．４ｍＬ）及び１，２−エタンジオール（１．４ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（８ｍｇ、６．６μｍｏｌ）を添加した後、混合物を８５℃で１時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初に４０％〜５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）、次いで１０％トリエチルアミン含有５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））にて精製した。収率：８０ｍｇ（３２％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．４０（３６Ｈ，ｓ）；３．４９（８Ｈ，ｓ）；３．９９（４Ｈ，ｓ）；７．２１（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び０．８Ｈｚ）；７．４３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び１．０Ｈｚ）；７．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）；７．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８，５及び１．７Ｈｚ）；７．８２（２Ｈ，ｓ）；８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；８．５２（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．６８；５５．２８；５９．２６；８０．１３；１１１．２１；１１１．４１；１１８．００；１１８．３４；１１８．８６；１２０．０９；１２２．２９；１２２．９４；１２４．２７；１２５．９５；１２８．１８；１４０．１２；１４０．１８；１４９．０３；１５８．７２；１７０．０２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７５９．４３；測定値７６０．２８。
実施例２４．化合物２４の合成
この化合物２４は、実施例１０に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物１９から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、２０％〜４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：７２％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３９（３６Ｈ，ｓ）；３．５０（８Ｈ，ｓ）；４．０１（４Ｈ，ｓ）；７．４６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．８及び０．６Ｈｚ）；７．５８（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．８及び１．３Ｈｚ）；７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．８１（２Ｈ，ｓ）；７．８４−７．８７（２Ｈ，ｍ）；８．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び０．６Ｈｚ）；８．５１（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．７９；５５．４６；５９．４２；８０．２６；１１１．９２；１１２．３１；１１８．６５；１１９．４８；１２１．２６；１２３．３４；１２３．４２；１２４．４３；１２６．４９；１２８．１１；１３３．４５；１４８．２２；１５５．９０；１５６．０４；１５９．１５；１７０．１１。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７６０．４１；測定値７６０．９８。
実施例２５．化合物２５の合成
この化合物２５は、実施例１０に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２０から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、２０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：６８％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．４６（３６Ｈ，ｓ）；３．５６（８Ｈ，ｓ）；４．１４（４Ｈ，ｓ）；７．４８（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝３．６及び０．６Ｈｚ）；７．４９（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝３．６及び０．４Ｈｚ）；７．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３及び１．２Ｈｚ）；７．８６−７．８９（１Ｈ，ｍ）、７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；７．９６（２Ｈ，ｓ）；８．３２−８．３７（１Ｈ，ｍ）；８．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２８．２０；５５．９８；６０．１９；８１．００；１１８．７５；１２０．２７；１２２．０２；１２２．８５；１２３．０８；１２４．４６；１２５．７８；１２６．９７；１３５．０７；１３５．５２；１３６．２３；１３９．８４；１４０．０３；１４９．１８；１５９．５７；１７０．６６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７７６．３９；測定値７７６．９４。
実施例２６．化合物２６の合成
この化合物２６は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２３から合成した。収率：７３％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６１（８Ｈ，ｓ）；４．２０（４Ｈ，ｓ）；７．２５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び０．７Ｈｚ）；７．４６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び１．１Ｈｚ）；７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．９３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７及び１．１Ｈｚ）；８．１１（２Ｈ，ｓ）；８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；８．７２（１Ｈ，ｓ）；１１．６１（１Ｈ．ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：５４．８８；５７．４３；１１１．３４，１１１．６７；１１８．６８；１１９．１６；１２０．３７；１２２．３１；１２３．１５；１２４．０７；１２５．６７；１２６．２２；１４０．２６；１４０．８３；１５２．３６；１５６．６７；１７２．６２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）５３６．１８；測定値５３６．２１。
実施例２７．化合物２７の合成
この化合物２７は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２４から合成した。収率：７０％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６４（８Ｈ，Ｓ）；４．２３（４Ｈ，ｓ）；７．４９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；７．６０（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．７及び１．２Ｈｚ）；７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）；８．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６及び１．５Ｈｚ）；８．１１（２Ｈ，ｓ）；８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ）；８．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：５４．８２；５７．５６；１１１．８１；１１２．４３；１１９．４８；１２０．０６；１２１．２９；１２３．０５；１２３．４０；１２４．５０；１２６．７４；１２８．１６；１３１．６２；１５０．８６；１５５．９５；１５６．３４；１５７．０７；１７２．３７。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）５３７．１６；測定値５３６．８４。
実施例２８．化合物２８の合成
この化合物２８は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２５から合成した。収率：６７％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６３（８Ｈ，ｓ）；４．２４（４Ｈ，ｓ）；７．５９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ）；７．６１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３，５Ｈｚ）；８．００（１ ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４及び１．５Ｈｚ）；８．０８−８．１２（１Ｈ，ｍ）；８．１９（２Ｈ，ｓ）；８．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；８．５０−８．５５（１Ｈ，ｍ）；８．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：５５．５０；５８．２６；１１９．９９；１２１．１１；１２２．８４；１２３．７８；１２４．５０；１２５．５２；１２６．１４；１２８．１７；１３３．５５；１３５．２３；１３６．４３；１３９．６５；１４１．０９；１５７．８２；１５８．５１，１７３．１０。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）５５３．１６；測定値５５２．８０。
実施例２９．化合物２９の合成
この化合物２９は、実施例２３に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２２から合成した。反応時間は６時間であった。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、２０％〜５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：５５％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３９（３６Ｈ，ｓ）；３．４８（８Ｈ，ｓ）；３．９８（４Ｈ，ｓ）；７．４４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び０．７Ｈｚ）；７．６６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．０Ｈｚ）；７．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．７８（２Ｈ，ｓ）；７．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．４及び１．０Ｈｚ）；７．９３（１Ｈ，ｓ）；７．９７−７．９９（２Ｈ，ｍ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．６７；５５．３８；５９．２２；８０．１９；１１７．８８；１２１．５６；１２１．７３；１２１．８７；１２４．０４；１２９．７６；１３３．３８；１３３．４９；１３４．１７；１３５．５０；１３８．８９；１４３．２８；１４４．２７；１４６．６９；１５９．２８；１７０．００；１９２．４５：ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７７２．４１；測定値７７３．０３。
実施例３０．化合物３０の合成
この化合物３０は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物２９から合成した。収率：７７％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６１（８Ｈ，ｓ）；４．１６（４ｈ，ｓ）；７．４５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．６及び０．７Ｈｚ）；７．６５−７．７０（２Ｈ，ｍ）；７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、８．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．０２（２Ｈ，ｓ）；８．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ）；８．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び１．４Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：５４．７８；５８．００；１１９．０２；１２１．７０；１２１．９６；１２２．１６；１２４．０８；１２９．９３；１３３．５５；１３３．８４；１３４．２５；１３５．５３；１３７．７９；１３９．８７；１４３．１７；１４４．９２；１５７．７６；１７２．３５；１９２．４０。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）５４９．１６；測定値５４９．３７。
実施例３６．化合物３６の合成
７−ヨード−２−ニトロフルオレン（１．７ｇ、５ｍｍｏｌ；Ｍａｒｈｅｖｋａ，Ｖ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２８，１８．）、ＳｎＣｌ２×２Ｈ２Ｏ（５．６ｇ、２５ｍｍｏｌ）の乾燥ＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中混合物を、１８時間還流した。低温のこの混合物をＨ２Ｏ（７０ｍＬ）に注ぎ、固体ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ及び２×１００ｍＬ）で抽出して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。収率：１．５ｇ（９７％）。％．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：３．７６（２＋２Ｈ，ｓ）；６．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び２．１Ｈｚ）；６．８４（１Ｈ，ｓ）；７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．７８（１Ｈ，ｓ）；１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：３６．５２；８９．５２；１１１．５２；１１４．１０；１２０．２４；１２０．８７；１３１．９４；１３３．７９；１３５．５８；１４１．８２；１４４．６０；１４４．７３；１４６．３３。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３０７．９９；測定値３０７．８９。
実施例３７．化合物３７の合成
この化合物３７は、実施例１３に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物３６から合成した。反応時間３時間。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：９９％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．２６（９Ｈ，ｓ）、３．７６（２＋２Ｈ，ｓ）；６．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０及び２．０Ｈｚ）；６．８４（１Ｈ，ｓ）；７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．５３（２＋２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．５６（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．１０；３６．５６；９３．２５；１０６．３０；１１１．６１；１１４．１１；１１８．２７；１１９．２８；１２１．１０；１２８．２６；１３０．８８；１３２．３０；１４２．０３；１４２．６１；１４５．６９，１４６．２５。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）２７８．１３；測定値２７８．１２。
実施例３８．化合物３８の合成
この化合物３８は、実施例７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物３７から合成した。収率：９５％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：３．０７（１Ｈ，ｓ）；３．７８（２＋２Ｈ，ｓ）；６．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び２．１Ｈｚ）；６．８５（１Ｈ，ｓ）；７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．５７（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：３６．５８；７６．３７；８４．７４；１１１．６０；１１４．１２；１１８．１９；１１８．３４；１２１．１５；１２８．３９；１３１．０３；１３２．１６；１４２．１３；１４２．９２；１４５．６６；１４６．３４。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）２０６．０９；測定値２０５．８２。
実施例３９．化合物３９の合成
この化合物３９は、実施例１３に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物３８から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、３０％〜５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：５１％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．４２（３６Ｈ，ｓ）；３．４４（８Ｈ，ｓ）；３．７８（２Ｈ，ｓ）；３．９１（４Ｈ，ｓ）；６．６１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２及び１．６Ｈｚ）；６．７８（１Ｈ，ｓ）；７．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．５３（２Ｈ，ｓ）；７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．６２（１Ｈ，ｓ）；７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２８．２６；３６．４９；５５．９４；５５．９４；８０．７９；８７．２２；９４．９５；１１０．５０；１１３．５２；１１６．７７；１１８．６４；１２１．８５；１２２．４６；１２８．２６；１２８．９８；１３１．０３；１３１．８８；１４２．４９；１４４．３１；１４６．００；１４９．８１；１５９．５８；１７０．５１。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７９７．４４；測定値７９７．４３。
実施例４０．化合物４０の合成
この化合物４０は、実施例１１に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物３９から合成した。収率：９１％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６０（８Ｈ，ｓ）；３．８８（２Ｈ，ｓ）；４．１０（４Ｈ，ｓ）；６．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．０３（１Ｈ，ｓ）；７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．６８（２Ｈ，ｓ）；７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．７４（１Ｈ，ｓ）；７．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３６．０２；５４．４５；５７．９１；８６．６３；９６．３０；１１２．９０；１１５．６１；１１６．７９；１１８．００；１２１．６６；１２３．１３；１２８．１３；１２８．１５；１３０．８５；１３１．７０；１３３．１４；１４２．４４；１４３．３６；１４５．４６；１４５．５３；１５７．３９；１７１．９６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）５７４．２１；測定値５７４．０９。
実施例４１．化合物４１の合成
四酸４０（４４ｍｇ、４８μｍｏｌ）をＨ２Ｏ（０．７８ｍＬ）に溶解し、固体ＮａＨＣＯ３でｐＨを６．５に調節した。ＥｕＣｌ３×６Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ、５５μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（０．３９ｍＬ）溶液を１５分間以内に添加し、固体ＮａＨＣＯ３でｐＨを５〜７に維持した。１．５時間撹拌した後、１Ｍ ＮａＯＨでｐＨを８．５に上昇させ、沈殿を遠心分離で除去し、上清をアセトンでトリチュレートし、沈殿を遠心分離し、アセトンで洗浄した。生成物を、それ以上精製せずに次の工程に使用した。
実施例４２．化合物４２の合成
アミノキレート４１（４８μｍｏｌ）の水溶液（１．３ｍＬ）を、ＳＣＣｌ２（２６μＬ、０．３４ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（４０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びＣＨＣｌ３（１．３ｍＬ）の混合物に、１０分以内に添加した。３０分間撹拌した後、Ｈ２Ｏ相をＣＨＣｌ３（３×１．３ｍＬ）で洗浄し、アセトンでトリチュレートし、沈殿を遠心分離してアセトンで洗浄した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）７８６．０３；測定値７８７．５０。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：３０．９分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：３４６及び３６０ｎｍ。
実施例４３．化合物４３の合成
化合物７（０．２３ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−｛［２−（４−アミノフェニル）エチルイミノ］ビス（メチレン）ビス（４−ブロモピリジン−６，２−ジイル）ビス（メチレン−ニトリロ）｝テトラキス（アセテート）（Ｔａｋａｌｏ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７９，７８９）（０．２３ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の乾燥トリエチルアミン（２ｍＬ）及び乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（１０ｍｇ、１４μｍｏｌ）、ＣｕＩ（５．３ｍｇ、２８μｍｏｌ）を添加した後、この混合物を５５℃で２２時間撹拌した。蒸発乾固した後、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１０ｍＬ）で洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物をＦＣ（シリカゲル、５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：０．２５ｇ（６５％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．８５（３６Ｈ，ｓ）；１．４０（３６Ｈ，ｓ）；２．６４−２．７１（４Ｈ，ｍ）；２．８７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．０８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．４５（８Ｈ，ｓ）；３．８７（４Ｈ，ｓ）；３．９５（４ｈ，ｓ）；４．７７（２Ｈ，ｓ）；６．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；６．８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．３２−７．３９（４Ｈ，ｍ）；７．４９（２Ｈ，ｓ）；７．５６−７．６５（６Ｈ，ｍ）；７．７８−７．８３（４Ｈ，ｍ）；７．８８（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２６．８４；２７．６８；３２．１７；４３．９５；５０．４７；５５．４２；５６．１３；５９．１０；５９．２０；７８．９８；８０．１９；８７．２２；９３．８３；１１３．９０；１１９．２２；１２０．０２；１２０．１０；１２２．０６；１２２．１９；１２３．９８；１２６．９４；１２７．４７；１２７．５４；１２８．８０；１３０．９３；１３１．０２；１３１．９１；１３９．５３；１４１．８８；１４６．３７；１４８．４６；１４８．５３；１５９．１０；１５９．１９；１６８．１７；１６９．９１。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１６６６．９１；測定値１６６５．４７。
実施例４４．化合物４４の合成
この化合物４４は、実施例４３に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物８から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２〜１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：４４％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．４０（３６Ｈ，ｓ）；２．２６−２．４１（８Ｈ，ｍ）；２．６１−２．７４（４＋８Ｈ，ｍ）；３．００−３．１０（８Ｈ，ｍ）；３．１６（１２Ｈ，ｓ）；３．１９−３．２３（８Ｈ，ｍ）；３．２９−３．３２（８Ｈ，ｍ）；３．３２−３．３６（８Ｈ，ｍ）；３．４４（８Ｈ，ｓ）；３．８５（４Ｈ，ｓ）；３．９５（４Ｈ，ｓ）；４．７４（２Ｈ，ｓ）；６．４７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；６．８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．３２−７．４２（４Ｈ，ｍ）；７．５０（２Ｈ，ｓ）；７．５３−７．６１（６Ｈ，ｍ）；７．７２−７．７９（４Ｈ．ｍ）；７．８３（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．６５；３２．１２；３８．４４；５１．０５；５５．３３；５６．３３；５７．８８；５９．０６；５９．３３；６６．２６；６９．１８；６９．４１；６９．５４；７１．０９；８０．１８；８７．４９；９３．７４；１１３．８９；１１９．７６；１２０．１９；１２０．４２；１２１．９９；１２２．３０；１２３．３０；１２６．５８；１２６．９０；１２７．３３；１２８．０６；１２８．７９；１２９．５３；１３０．９３；１３１．０６；１３８．９０；１４１．０８；１４９．３６；１４９．４２；１５９．０２；１５９．３０；１６９．８７。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１７９５．０２；測定値１７９４．４６。
実施例４５．化合物４５の合成
化合物４３（１３０ｍｇ、７８μｍｏｌ）のＣＦ３ＣＯＯＨ（２．３ｍＬ）溶液を、室温で２時間撹拌した。加熱せずに蒸発させた後、混合物をＥｔ２Ｏ（１０ｍＬ）でトリチュレートし、遠心分離して、生成物をＥｔ２Ｏ（５×５ｍＬ）で洗浄した。収率：１０５ｍｇ（８６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２．９４−３．１４（２＋８Ｈ，ｍ）；３．２８−３．３７（２Ｈ，ｍ）；３．５６（８Ｈ，ｓ）；４．０７（４Ｈ，ｓ）；４．５９（４Ｈ，ｓ）；６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；７．０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；７．３４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．３８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）；７．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）；７．６５（２Ｈ，ｓ）；７．７９（２Ｈ，ｓ）；７．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．８９（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２９．２６；４１．７３；４９．４２；５４．４１；５４．９６；５６．６１；５８．９９；８６．５９；９５．２０；１１７．３０；１１８．９２；１２０．３３；１２０．５４；１２３．６１；１２３．９３；１２４．５１；１２６．９７；１２７．４７；１２７．８９；１２９．４４；１３１．３０；１３１．８６；１３８．９２；１４１．６９；１４９．４９；１４９．６９；１５１．１５；１５７．７０；１５７．９６；１６０．１１；１７１．１２；１７２．２４。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１２１７．４２；測定値１２１７．６３。
実施例４６．化合物４６の合成
この化合物４６は、実施例４５に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物４４から合成した。収率：１００％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２．３０−２．４２（８Ｈ，ｍ）；２．６２−２．７２（８Ｈ，ｍ）；３．０３−３．１３（８＋２Ｈ，ｍ）；３．１４−３．１９（２Ｈ，ｍ）；３．１７（１２Ｈ，ｓ）；３．２０−３．２６（８Ｈ，ｍ）；３．２９−３．３６（８Ｈ．ｍ）；３．３６−３．３９（８Ｈ，ｍ）；３．５６（８Ｈ，ｓ）；４．０９（４Ｈ，ｓ）；４．５９（４Ｈ，ｓ）；６．９４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）；７．１４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）；７．３６−７．４２（４Ｈ，ｍ）；７．５６−７．６２（４Ｈ，ｍ）；７．６４（２Ｈ，ｓ）；７．７９（２Ｈ，ｓ）、７．８３−７．８９（６Ｈ，ｍ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２９．３８；３８．４４；５１．０９；５４．３９；５５．１２；５６．６４；５７．８９；５８．９５；６６．２６；６９．２０；６９．４１；６９．５５；７１．０９；８６．８０；９５．２０；１１８．７８；１１９．３０；１２０．３０；１２０．５６；１２３．３４；１２３．９４；１２４．５１；１２６．６６；１２７．３８；１２８．１８；１２９．５８；１３１．１８；１３１．９８；１３８．８７；１４１．４８；１４９．３６；１４９．５３；１５１．１５；１５７．８８；１５８．１４；１５９．９７；１７２．１６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１５６９．７７；測定値１５６９．３３。
実施例４７．化合物４７の合成
化合物４５（９４ｍｇ、６０μｍｏｌ）をＨ２Ｏ（０．９６ｍＬ）に溶解し、固体ＮａＨＣＯ３でｐＨを６．５に調節した。ＥｕＣｌ３×６Ｈ２Ｏ（２５ｍｇ、６９μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（０．４８ｍＬ）溶液を１５分間以内に添加し、固体ＮａＨＣＯ３でｐＨを５〜７に維持した。室温で２．５時間撹拌した後、１Ｍ ＮａＯＨでｐＨを８．５に上昇させ、沈殿を遠心分離で除去し、上清をフェノールで抽出した（約０．７５ｇ）。フェノール相をＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ（１０ｍＬ）で処理し、水相をＥｔ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄した。ＮａＣｌ（１７．５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を添加した後、混合物をアセトンでトリチュレートし、沈殿を遠心分離し、アセトンで洗浄した。生成物を、それ以上精製せずに次の工程に使用した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１４７７．２２；測定値１４７７．７８。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：２２．０分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：３４５ｎｍ。
実施例４８．化合物４８の合成
この化合物４８は、実施例４７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物４６から合成した。生成物がアセトンに可溶であることから、フェノール抽出後、水相を蒸発乾固した。生成物を、それ以上精製せずに次の工程に使用した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１７４１．６５；測定値１７４１．５０。
実施例４９．化合物４９の合成
この化合物４９は、実施例４２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物４７から合成した。０．５時間の反応時間後、混合物をＥｔ２Ｏ（２×５ｍＬ）で洗浄し、水溶液を蒸発乾固した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量（ネガティブモード）：計算値１５１８．１７；測定値１５１８．７８。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：３４．６分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：３５０ｎｍ。
実施例５０．化合物５０の合成
この化合物５０は、実施例４２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物４８から合成した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１７８３．６８；測定値１７８３．５９。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：２４．９分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：３４０及び３４９ｎｍ。
実施例５１．化合物５１の合成
化合物４（０．３３ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−｛［２−（４−アミノフェニル）エチルイミノ］ビス（メチレン）ビス（４−ブロモピリジン−６，２−ジイル）ビス（メチレン−ニトリロ）｝テトラキス（アセテート）（Ｔａｋａｌｏ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７９，７８９）（０．２１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、ＣｓＣＯ３（０．２３ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）及び１，２−エタンジオール（１ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１０ｍｇ、８．４μｍｏｌ）を添加した後、この混合物を８５℃で３．５時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初に２〜３％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（不純物）、次いで５〜１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（生成物））により精製した。収率：０．１３ｇ（３８％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．８４（３６Ｈ，ｓ）；１．３７（３６Ｈ，ｓ）；２．７０−２．７６（４Ｈ，ｍ）；２．９８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．０５（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ）；３．３９（８Ｈ，ｓ）；３．９１（４Ｈ，ｓ）；４．０２（４ｈ，ｓ）；６．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；６．８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．３４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．３６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；７．７５（４Ｈ，ｓ）；７．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）７．８８（２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．９６（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：．２４．８４；２６．８４；２７．６６；４３．９２；５０．５１；５４．６０；５５．２６；５９．２５；５９．４１；７８．９５；８０．０８；１１３．８５；１１８．０７；１１８．２８；１１９．８７；１２０．２２；１２２．３７；１２４．０１；１２６．１０；１２７．１９；１２７．４０；１２８．２４；１２８．８２；１３５．９６；１３６．４３；１３９．６０；１４１．３０；１４６．３２；１４８．４２；１４８．９９；１５８．８２；１５９．５２；１６８．２５；１６９．８６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１６１８．９２；測定値１６１８．８８。
実施例５２．化合物５２の合成
この化合物５２は、４時間の反応時間を有し、実施例４５に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５１から合成した。収率：９３％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．０１（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．１７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．３０−３．３７（４Ｈ，ｍ）；３．５９（８Ｈ，ｓ）；４．１６（４Ｈ，ｓ）；４．６５（４Ｈ，ｓ）；６．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；６．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．３４（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び０．７Ｈｚ）；７．３８（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．０Ｈｚ）；７．６３（２ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．７７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９及び０．９Ｈｚ）；７．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．８７（２Ｈ，ｓ）；７．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；８．０１（２Ｈ，ｓ）；８．０６（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２９．３１；４１．９７；４９．５０；５４．５９；５４．９８；５６．９２；５９．２４；１１５．２９；１１８．２８；１１９．９１；１２０．３８；１２０．５２；１２０．６０；１２１．８５；１２３．７３；１２６．２７；１２７．４１；１２７．５５；１２９．２３；１３５．３６；１３９．２０；１４１．４６；１４９．３０；１５０．５０；１５１．４３；１５７．５７；１５７．８３；１５９．７９；１７１．１３；１７２．４２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１１６９．４２；測定値１１６９．４９。
実施例５３．化合物５３の合成
この化合物５３は、実施例４７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５２から合成した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量（ネガティブモード）：計算値１４２８．２１；測定値１４２８．０３。
実施例５４．化合物５４の合成
この化合物５４は、実施例４２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５３から合成した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量（ネガティブモード）：計算値１４７０．１７；測定値１４７１．３６。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：２４．７分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：３２６ｎｍ。
実施例５５．化合物５５の合成
化合物２２（０．１９ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、テトラ（ｔｅｒｔ−ブチル）２，２’，２’’，２’’’−｛［２−（４−アミノフェニル）エチルイミノ］ビス（メチレン）ビス（４−ブロモピリジン−６，２−ジイル）ビス（メチレン−ニトリロ）｝テトラキス（アセテート）（Ｔａｋａｌｏ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７９，７８９）（０．１１ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、ＣｓＣＯ３（０．１２ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１ｍＬ）中混合物をアルゴンで脱気した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１０ｍｇ、８．４μｍｏｌ）及びＨ２Ｏ（１０μＬ、０．５５ｍｍｏｌ）を添加した後、この混合物を８５℃で３．５時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、最初に４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）、次いで４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃）及び１０％トリエチルアミン）により精製した。収率：０．１２ｇ（６３％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３６（３６＋１８Ｈ，ｓ）；１．５３（１８Ｈ，ｓ）；２．７６−２．８３（４Ｈ，ｍ）；３．４７（８Ｈ，ｓ）；３．９７（４Ｈ，ｓ）；３．９９（４Ｈ，ｓ）；４．００（４Ｈ，ｓ）；４．４４（４Ｈ，ｓ）；４．６９（２Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ）；５．２６（４Ｈ，ｓ）；６．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；６．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；７．１５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．４３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．４６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）；７．７５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．７及び１．１Ｈｚ）；７．８２（４Ｈ，ｓ）；８．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）；８．４９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：２７．７１；２７．７９；３５．８０；４３．８８；４９．５３；５０．２１；５４．９２；５５．４９；５９．５７；５９．７０；８０．１９；８０．８４；８１．９４；１０９．３４；１０９．７１；１１３．９５；１１８．０２；１１８．２６；１１８．３４；１１９．３７；１２０．２７；１２２．３２；１２２．９４；１２４．４４；１２６．００；１２６．０２；１２７．３８；１２８．８３；１２９．０２；１４１．２２；１４８．７２；１５８．８１；１５９．３５；１６２．３１；１６７．７９；１６８．５８；１７０．１２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１７３４．９５；測定値１７３５．１８。
実施例５６．化合物５６の合成
この化合物５６は、実施例５２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５５から合成した。収率：９４％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．０５−３．１３（２Ｈ，ｍ）；３．３１−３．４３（２Ｈ，ｍ）；３．６１（８Ｈ，ｓ）；４．０３（４Ｈ，ｓ）；４．１８（４Ｈ，ｓ）；４．４９（４Ｈ，ｓ）；４．６８（４Ｈ，ｓ）；５．３４（４Ｈ，ｓ）；６．７３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；７．４４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；７．４７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；７．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）；７．８８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６及び１．１Ｈｚ）；７．９８（２Ｈ，ｓ）；８．１３（２Ｈ，ｓ）；８．１８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）；８．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：３４．７５；４５．８９；４８．６９；４９．４９；５４．７７；５５．３０；５７．１１；５９．２６；１０９．６２；１０９．９８；１１８．１９；１１８．８３；１１９．５１；１１９．５７；１１９．８３；１２０．３５；１２０．５２；１２２．２６；１２３．０３；１２４．５２；１２６．２５；１２７．３７；１２９．５１；１４１．３８；１４１．７２；１５０．２６；１５７．８６；１５８．１２；１５９．４１；１６７．９１；１７０．２８；１７０．９７；１７２．５８。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）１２８６．４５；測定値１２８６．４６。
実施例５７．化合物５７の合成
この化合物５７は、実施例４７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５６から合成した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量（ネガティブモード）：計算値１５４４．２５；測定値１５４３．９９。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：１８．４分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：２８５（ｓｈ）、３００及び３２９ｎｍ。
実施例５８．化合物５８の合成
この化合物５８は、実施例４２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５７から合成した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量（ネガティブモード）：計算値１５８６．２０；測定値１５８５．１７。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：２１．１分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：２８５、２９８及び３４０ｎｍ。
実施例５９．化合物１１、１２、１４、２７及び２８のＥｕ（ＩＩＩ）キレートのルミネセンス測定
配位子１１、１２、１４、２７、２８、及び３５を有するＥｕ（ＩＩＩ）錯体のルミネセンスパラメータを、１０ｍＭ ＮＨ３−ＨＣｌ緩衝液中、ｐＨ８．３で測定した。モル吸光係数（ε）、励起最大波長（λｅｘｃ）、ルミネセンス寿命（τ）、量子収率（Φ）、ルミネセンス効率の計算値（ε×Φ）及び三重項段階（Ｔ）を表１に示す。参照配位子２，２’，２’’，２’’’−［（４−フェニルエチニルピリジン−２，６−ジイル）ビス（メチレンニトリロ）］テトラキス−（酢酸）（Ｌａｔｖａ，Ｍ，ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ，７５，１４９）を参照として使用して、本発明の配位子の改善を、従来技術の７座配位子と比較して実証した。
配位子２８に関して、参照配位子と比較してキレートの吸光係数が低下した理由として、アンテナ発色団からのエネルギーがＥｕ（ＩＩＩ）イオンに移動する際に通る低ＣＴ状態又は三重項状態によるものである可能性が最も高い。ただし、低ＣＴ及び／又は三重項状態を考慮しても、参照配位子と比較して、なお高い量子収率を有し、そのため、より高い発光を与える（すなわち、より明るい）。
実施例６０．キレート４９及び５４並びにタンパク質へのカップリング
標識は、１０ｍＭホウ酸緩衝液中、ｐＨ８．６〜９．０で、３０倍モル過剰のキレートを用いて実施した。反応は、通常、＋４℃又は室温で、一晩実施した。標識化抗体を、Ｓｕｐｅｒｆｅｘ ２００ ＨＲ １０／３０又はＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ＨｉＬｏａｄ ２６／６０ゲル濾過カラムで、トリス−生理食塩水−アジド（トリス８６．１ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ９．０ｇ／Ｌ、及びＮａＮ３０．５ｇ／Ｌ）、ｐＨ７．７５を溶離液として用いて精製した。抗体を含有する画分をプールし、ユーロピウム濃度を、ユーロピウム標準物質を基準にして測定した。精製した抗体共役及び標識化率（すなわち、タンパク質１つ当たりのキレート）を、タンパク質収率を計算することによって、又は２８０ｎｍにおける吸光度を測定し、添加したキレートによって生じた吸収を減算することによって、定量した。
先に公開された９座配位子標識｛２，２’，２’’，２’’’−｛［２−（４−イソチオシアナト−フェニル）エチルイミノ］ビス（メチレン）ビス｛４−｛［４−（α−ガラクトピラノキシ）フェニル］エチニル｝−ピリジン−２，６−ジイル｝ビス（メチレンニトリロ）｝テトラキス（アセタト）｝ユーロピウム（ＩＩＩ）（ｖｏｎ Ｌｏｄｅｎ，Ｐ．，ｅｔ ａｌ．，２００３，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．７５，３１９３）を参照標識として使用した。
実施例６１．キレート標識化抗体を用いて実施したモデルイムノアッセイ
２つの標識４９及び５４を、モデルｃＴｎＩアッセイで試験した。ｃＴｎＩイムノアッセイは、ビオチン化捕捉ｃＴｎＩ抗体を上記の標識化ｃＴｎＩ検出抗体と共に使用し、公開された方法（ｖｏｎ Ｌｏｄｅｎ，Ｐ．，ｅｔ ａｌ．，２００３，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．７５，３１９３）の主要原理に従って実施した。混合アッセイ／洗浄用緩衝液は、５ｍｍｏｌのＨＥＰＥＳ、２．１ｇ／ＬのＮａＣｌ、０．１ｍｍｏｌのＥＤＴＡ、０．０５５ｇ／ＬのＴｗｅｅｎ ２０及び１ｇ／ＬのＧｅｒｎａｌｌ ＩＩを含有し、ｐＨ７．７５であった。捕捉ビオチン化抗体を、アッセイウェル内でプレインキュベートした。それぞれ２０μＬ及び１０μＬのアッセイ緩衝液に希釈した標準物質、続いて、検出標識抗体を、上記ウェルに入れた。３６℃で１時間インキュベートした後、ウェルを洗浄、乾燥し、測定した。
表２は、試験したキレート標識４９及び５４が、参照Ｅｕ標識と比較して、有意に改善されたシグナルレベルを与えることを示す。
タンパク質内でカップリングした後の標識４９は、３５０ｎｍ付近にブロードな励起を示し、これが低価格のＬＥＤベースの装置による励起をもたらすことは、記載すべきである。
実施例６２．化合物５９の合成
この化合物５９は、実施例２に記載の合成と類似の方法を用いて、２−ブロモフルオレン及びＢｒＣＨ２ＣＯＯＥｔから合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、４％〜１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：５０％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０１（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；３．０１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）；３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）；３．９３（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；７．３２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．２Ｈｚ）；７．３７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．２Ｈｚ）；７．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び１．８Ｈｚ）；７．６６−７．６９（１Ｈ，ｍ）；７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．５０−７．５３（１Ｈ，ｍ）；７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４１７．０７及び４１９．０７；測定値４１７．７２及び４１９．７９。
実施例６３．化合物６０の合成
この化合物６０は、実施例５に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物５９から合成した。反応時間２０分。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：８８％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．２７（９Ｈ，ｓ）；１．００（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；３．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ）；３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ）；３．９２（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；７．３１（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．１Ｈｚ）；７．３６（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．４及び１．１Ｈｚ）；７．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び１．３Ｈｚ）；７．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．６３（１Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ）；７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．０１；１３．８４；４２．０７；４９．７３；６０．２２；９４．２９；１０５．６９；１１９．７３；１２０．２７；１２１．７６；１２３．８２；１２７．３９；１２７．８０；１２８．００；１３１．９０；１３９．４３；１４０．４８；１４８．５６；１４８．８８；１７０．３６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４３５．２０；測定値４３５．１０。
実施例６４．化合物６１の合成
この化合物６１は、実施例７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物６０から合成した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：１００％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．００（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；３．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）；３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）；３．１１（１Ｈ，ｓ）；３．９１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；３．９２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；７．３２（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ及び１．２Ｈｚ）；７．３７（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．５及び１．２Ｈｚ）；７．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）；７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．８５；４２．０４；４９．７７；６０．２２；７７．２３；８４．２１；１１９．８１；１２０．３３；１２０．６８；１２３．８１；１２７．６６；１２７．９２；１２８．０５；１３２．０６；１３９．２９；１４０．８１；１４８．６２；１４８．８９：１７０．３１。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３６３．１６；測定値３９３．９８。
実施例６５．化合物６３の合成
化合物６１（９１ｍｇ、２５２μｍｏｌ）、化合物６２（国際公開第２０１３２６７９０号）（１１６ｍｇ、１０５μｍｏｌ）の乾燥トリエチルアミン（１ｍＬ）及びＴＨＦ（２ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。ビス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（１０ｍｇ、１４μｍｏｌ）、ＣｕＩ（６ｍｇ、２８μｍｏｌ）を添加した後、混合物を５５℃で１８時間撹拌した。蒸発乾固の後、生成物をＦＣ（シリカゲル、１％ＴＥＡ含有７０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：１２５ｍｇ（７１％）。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｎａ＋）１６９０．６２及び１６９２．６２、測定値１６９０．９６及び１６９２．７０。
実施例６６．化合物６４の合成
化合物６３（１１３ｍｇ、６７μｍｏｌ）及び０．５Ｍ ＫＯＨのＥｔＯＨ（９ｍＬ）中混合物を、室温で０．５時間撹拌し、Ｈ２Ｏを添加した（２ｍＬ）。室温で３時間撹拌した後、ＥｔＯＨを蒸発させ、混合物を室温で５時間撹拌し、ｐＨを６Ｍ ＨＣｌで約６．５に調節した。ＥｕＣｌ３×６Ｈ２Ｏ（２５ｍｇ、６７μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）溶液を１０分間以内に添加し、固体ＮａＨＣＯ３でｐＨを５〜７に維持した。室温で２０時間撹拌した後、ｐＨを、１Ｍ ＮａＯＨで８．５に上昇させ、この混合物を一晩撹拌して、沈殿を遠心分離で除去し、上清をフェノールで抽出した（０．７５ｇで１回、３×０．５ｇ）。合わせたフェノール相を、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）で処理し、水相をＥｔ２Ｏ（２×２０ｍＬ）で洗浄し、アセトンでトリチュレートした。沈殿を遠心分離し、アセトンで洗浄した。生成物を、それ以上精製せずに次の工程に使用した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１６０２．０９、測定値１６０２．２５。
実施例６７．化合物６５の合成
この化合物６５は、実施例４２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物６４から合成した。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１６４４．１５、測定値１６４３．０１。
実施例６８．化合物６６の合成
タウリン（１２．５ｍｇ、１００μｍｏｌ）の５０ｍＭ Ｎａ２ＣＯ３緩衝液（ｐＨ９．８；０．５５ｍＬ）溶液を、化合物６５（１６．４ｍｇ、１０μｍｏｌ）の５０ｍＭ Ｎａ２ＣＯ３緩衝液（ｐＨ９．８；０．５５ｍＬ）溶液に加えた。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を蒸発乾燥固し、生成物を逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−１８カラム）を用いて精製した。溶媒は、Ａ：トリエチル酢酸アンモニウム緩衝液（２０ｍＭ、ｐＨ７）及び、Ｂ：５０％アセトニトリル／トリエチル酢酸アンモニウム緩衝液（２０ｍＭ、ｐＨ７）であった。グラジエントは、５％の溶媒Ｂから開始して、溶媒Ｂの量を２５分間で１００％まで直線的に増やした。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：２０．９分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：２８０及び３５２ｎｍ。
実施例６９．化合物６７の合成
７−ヨード−２−ニトロフルオレン（０．５１ｇ、１．５ｍｍｏｌ）、乾燥Ｋ２ＣＯ３（０．８３ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及びＢｒＣＨ２ＣＯＯＥｔ（０．４８ｍＬ、４．４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ中混合物を、１００℃で１時間撹拌した。混合物を濾過し、ＤＭＦで洗浄して、濾液を蒸発乾固した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、５％〜１５％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点５０〜６５℃））により精製した。収率：０．５１ｇ（６７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０３（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）；３．１２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）；３．９４（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０及び１．２Ｈｚ）；７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；７．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）；８．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４及び１，９Ｈｚ）；８．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．８２；４１．６７；４９．９９；６０．５６；９５．２４；１１９．３５；１２０．１６；１２２．７６；１２４．２０；１３３．３０；１３７．５２；１３７．５５；１４５．６６；１４７．４５；１４９．２２；１５１．８７；１６９．４３。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５１０．０４；測定値５１０．２９。
実施例７０．化合物６８の合成
化合物６７（０．５０ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）及びＳｎＣｌ２×ＨＣｌ（１．０３ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）の乾燥ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中混合物を、２．５時間還流した。低温の混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）に注ぎ、固体ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×４０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、３０％〜４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点５０〜６５℃））により精製した。収率：０．３９ｇ（８３％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０６（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；２．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．０１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．７−３．９（２Ｈ，ｂｓ）；３．９６（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．２及び７．１Ｈｚ）；３．９７（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．２及び７．１Ｈｚ）；６．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び２．０Ｈｚ）；６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）；７．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．６１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０及び１．４Ｈｚ）；７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．８９；４１．７６；４９．４４；６０．１７；８９．８２；１１０．３５；１１４．７８；１２０．２５；１２０．９６；１２９．８１；１３２．７５；１３６．６０；１４０．１６；１４６．７４；１４９．９９；１５０．２１；１７０．４６。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４８０．０７；測定値４７９．９２。
実施例７１．化合物６９の合成
この化合物６９は、実施例１３に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物６８から合成した。反応時間３時間。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（沸点４０〜６５℃））により精製した。収率：１００％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．２６（９Ｈ，ｓ）；１．０４（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；２．９９（４Ｈ，ｓ）；３．９４（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．２及び７．１Ｈｚ）；３．９６（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．２及び７．１Ｈｚ）；６．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１及び２．０Ｈｚ）；６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）；７．４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８及び１．１Ｈｚ）；７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．４６（１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．０６；１３．９０；４１．９３；４９．３５；６０．２１；９３．４７；１０６．１０；１１０．５９；１１４．８４；１１８．３５；１１９．７６；１２１．２７；１２７．１４；１３０．３０；１３１．８９；１４１．００；１４６．７２；１４７．７４；１５１．０８；１７０．６４。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４５０．２１；測定値４４９．９３。
実施例７２．化合物７０の合成
この化合物７０は、実施例７に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物６９から合成した。収率：１００％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０４（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；２．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．０７（１Ｈ，ｓ）；３．９５（２×２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．３及び７．２Ｈｚ）；６．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２及び２．０Ｈｚ）；６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）；７．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９及び１．１Ｈｚ）；７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．９１；４１．９１；４９．３９；６０．２２；７６．５３；８４．５６；１１０．５２；１１４．８６；１１８．４３；１１８．６６；１２１．３３；１２７．３８：１３０．１３；１３２．０５；１４１．３３；１４６．８５；１４７．８０；１５１．０８；１７０．５９。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）３７８．１７；測定値３７７．９５。
実施例７３．化合物７１の合成
化合物７０（１．０４ｇ、２．７６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ溶液（１５ｍＬ）を、氷水上で、１０分以内に、乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）と無水トリフルオロ酢酸（１．５３ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。氷上で１０分間、及び室温で３０分間撹拌した後、溶液を氷水（１００ｍＬ）に注ぎ、固体ＮａＨＣＯ３で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×４０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。収率：１．３１ｇ（１００％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０１（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；３．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．１３（１Ｈ，ｓ）；３．９２（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．３及び７．２Ｈｚ）；３．９３（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．３及び７．２Ｈｚ）；７．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９及び１．３Ｈｚ）、７．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３及び１．９Ｈｚ）；７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）、７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ）；７．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）、８．１２（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．８２；４２．０６；４９．９４；６０．４５；７７．６２；８３．９７；１１２．２３；１１４．５３；１１６．１４；１１６．８２；１１９．１３；１１９．８７；１２０．２８；１２０．９２；１２０．９９；１２７．５３；１３２．２８；１３５．００；１３７．４９；１３９．８８；１４８．４９；１５０．２３；１５４．１６；１５４．４７；１５４．７５；１７０．１２。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４７４．１６；測定値４７４．９５。
実施例７４．化合物７２の合成
化合物７１（１．１０ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）、６−ブロモ−２，６−ジヒドロキシメチルピリジン（Ｔａｋａｌｏ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ａｃｔａ Ｃｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．Ｓｅｒ Ｂ，４２，６１４）（０．４４ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の乾燥トリエチルアミン（５ｍＬ）及び乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中混合物を、アルゴンで脱気した。ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（２８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を添加した後、この混合物を５５℃で２３時間撹拌した。蒸発乾固及びＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）の添加の後、低温の混合物を濾過し、生成物を冷ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。収率：０．９７ｇ（８０％）。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．７９（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；３．１２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ）；３．１９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ）；３．７８（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；４．５５（４Ｈ，ｓ）；５．５１（２Ｈ，ｓ）；７．３６−７．５６（２Ｈ，ｂｓ）；７．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９及び１．３Ｈｚ）；７．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３及び１．８Ｈｚ）；７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；７．９０−７．９４（２Ｈ，ｍ）、１１．３９（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：１３．９８；４２．５１；５０．４９；５９．９１；８８．１３；９４．２８；１１２．８３；１１５．１３；１１７．０４；１１７．４２；１１９．７１；１１９．８４；１２０．６４；１２１．３０；１２１．４１；１２７．６３；１３１．９５；１３６．４０；１３７．４１；１４１．３６；１４９．４７；１４９．８５；１５４．３６；１５４．５８；１５５．０２；１６９．５９。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）６１１．２０；測定値６１２．４７。
実施例７５．化合物７３の合成
化合物７１（０．９６ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨフリー乾燥ＣＨＣｌ３（６５ｍＬ）懸濁液に、ＰＢｒ３（０．２２ｍＬ、２．３６ｍｍｏｌ）を加えた。６０℃で３日間撹拌した後、混合物を５％ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で中和した。水相をＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、０．５％〜３％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：０．７２ｇ（６２％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０２（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；３．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ）；３．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ）；３．９４（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．４及び７．２Ｈｚ）；３．９５（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．４及び７．２Ｈｚ）；４．５４（２Ｈ，ｓ）；７．４８（２Ｈ，ｓ）；７．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９及び１．２Ｈｚ）；７．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２及び１．９Ｈｚ）；７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）；７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）；８．１０（１Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．８７；３３．０４；４２．０４；５０．００；６０．４９；８６．７０；９５．３６；１１２．４８；１１４．５３；１１６．８２；１１９．１２；１２０．１０；１２０．３５；１２０．５３；１２１．１８；１２４．５２；１２７．４４；１３２．２０；１３３．６７；１３５．１８；１３７．３７；１４０．６０；１４８．８３；１５０．４２；１５４．１８；１５４．４２；１５４．７８；１５６．９７；１７０．０４。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋２Ｈ＋）７３８．０４、７３６．０３及び７４０．０３；測定値７３７．９５、７３５．８５及び７４０．０１。
実施例７６．化合物７５の合成
化合物７３（０．７１ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）、乾燥Ｋ２ＣＯ３及び化合物７４（国際公開第２０１３２６７９０号）（０．６７ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）の乾燥ＭｅＣＮ（３０ｍＬ）中混合物を、６５℃で４時間撹拌した。固体物質を濾過し、ＭｅＣＮで洗浄した後、濾液を蒸発乾固した。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、５％〜１０％ＥｔＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率０．６９ｇ（５７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．０１（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；１．２９（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）；１．４１（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）；１．６５−１．８５（１Ｈ，ｂｓ）；３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．１３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．４Ｈｚ）；３．５２（４Ｈ，ｓ）；３．９３（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．３及び７．１Ｈｚ）；３．９４（２Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝１４．３及び７．１Ｈｚ）；３．９９（４Ｈ，ｓ）；４．１３（４Ｈ，ｓ）；４．１９（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）；４．４５（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）、７．４６（２Ｈ，ｓ）；７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３及び１．５Ｈｚ）；７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）；７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）；７．９０（１Ｈ，ｓ）；８．１２（２Ｈ，２×ｓ）；８．１７（２Ｈ，ｓ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１３．７９；１４．１７；１４．１８；４２．０４；４９．９１；５５．３１；５９．６３；５９．７６；６０．３１；６０．３７；６０．５９；６２．１５；８７．６０；９４．１６；１１２．１７；１１４．４７；１１６．７７；１１６．７７；１１９．０６；１１９．９４；１２０．２７；１２０．７３；１２１．０１；１２３．３３；１２６．８６；１２７．２３；１２９．１９；１３２．３０；１３４．０１；１３７．４５；１４０．２１；１４８．４８；１４８．７４；１５０．２３；１５４．４０；１５４．６９；１５４．９９；１５８．４０；１６１．８５；１６４．０６；１６９．９０；１７０．９５。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１２６５．２５、１２６３．２１及び１２６７．２５；測定値１２６５．８６，１２６３．０１及び１２６７．８１。
実施例７７．化合物７７の合成
この化合物７７は、実施例７３に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物７５及び７６（国際公開第２０１３２６７９０号）から合成した。反応時間２３時間。生成物を、ＦＣ（シリカゲル、５％〜２５％ＥｔＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。収率：７５％。１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．７９（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；１．１８（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；１．２０（１２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；１．２１（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；１．３２（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；３．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ）；３．１７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ）；３．３２（４Ｈ，ｓ）；３．７０（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；３．０７（４Ｈ，ｓ）；４．０３（４Ｈ，ｓ）；４．０６（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；４．１６（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；４．１７（８Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；４．３３（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；４．７９（４Ｈ，ｓ）；４．８７（８Ｈ，ｓ）、６．２５（４Ｈ，ｓ）；７．４６（２Ｈ，ｓ）；７．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；７．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３及び１．６Ｈｚ）；７．７７（２Ｈ，２×２ｓ）；７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；７．８４（１Ｈ，ｓ）；７．８６（２Ｈ，２×２ｓ）；７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）：１９２０．６９；測定値１９２０．３１。
実施例７８．化合物７８の合成
この化合物７８は、実施例６６に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物７７から合成した。生成物を、それ以上精製せずに次の工程に使用した。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：１４．４分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：２６０及び３６４ｎｍ。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１８３４．０３、測定値１８３３．９５。
実施例７９．化合物７９の合成
この化合物７９は、実施例４２に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物７８から合成した。生成物を、それ以上精製せずに次の工程に使用した。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：１９．９分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：２５５及び３６１ｎｍ。ＭＡＬＤＩ ＴＯＦ−ＭＳ質量：計算値（Ｍ＋Ｈ＋）１８７６．０９、測定値１８７７．０６。
実施例８０．化合物８０の合成
この化合物８０は、実施例６８に記載の合成と類似の方法を用いて、化合物７９から合成した。Ｒｆ（ＨＰＬＣ）：１３．９分。ＵＶ（ＨＰＬＣ）：２５５及び３５７ｎｍ。
実施例８１．タウリンと共役した新規キレートの光物理的特性（キレート６６及び８０）
調製したイソチオシアネート活性化キレート（６５及び７９）を、上記実施例６８のように、タウリンと共役した。生成物を、セミ分取逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−１８カラム）で精製した。生成物の画分を蒸発させた後、残渣を５０ｍＭ ＴＲＩＳ緩衝液に溶解した。
５０ｍＭ ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．７５）中の新規キレート（６６及び８０）について、測定した光物理的特性である励起波長（λｅｘｃ）、ルミネセンス減衰時間（τ）、モル吸光係数（ε）、推定ルミネセンス効率（εΦ）を表３に示す。９座配位子標識｛２，２’，２’’，２’’’−｛［２−（４−イソチオシアナト−フェニル）エチルイミノ］ビス（メチレン）ビス｛４−｛［４−（α−ガラクトピラノキシ）フェニル］−エチニル｝−ピリジン−２，６−ジイル｝ビス（メチレンニトリロ）｝テトラキス（アセタト）｝−ユーロピウム（ＩＩＩ）（ｖｏｎ Ｌｏｄｅｎ，Ｐ．，ｅｔ ａｌ．，２００３，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．７５，３１９３）を参照標識として使用した。
実施例５８．キレート６６による抗体の標識化
ＴｎＩ標識化抗体を、実施例６１に記載のように調製した。
５０ｍＭ ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．７５）中のキレート６６による標識化ｃＴｎＩについて、光物理的特性の測定により、３５４ｎｍの励起波長（λｅｘｃ）、４６０μｓのルミネセンス減衰時間（τ）、１４２０００ｃｍ−１Ｍ−１のモル吸光係数（ε）及び１０５００ｃｍ−１Ｍ−１のルミネセンス効率（εΦ）を得た。
乾燥測定により、１６５００ｃｍ−１Ｍ−１のルミネセンス効率が得られ、これは、実施例６１に記載のように実施したドライイムノアッセイの後のシグナル測定に基づく推定ルミネセンス効率を表す。

Claims (15)

  1. 式（Ｉ）又は式（ＩＩＩ）の１つ以上の発色団部分を含む発光ランタニドキレートであって、
    式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＲ１−、−ＣＲ１Ｒ２−、＞Ｃ＝Ｏ、及び＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｒ１（＞Ｃ（＝Ｏ）のオキシム）から選択され、式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、
    −（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ（Ｒ５）２、−（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、
    −（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ３Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）ＮＥｔＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、
    −（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ５、−（ＣＨ２）１〜６Ｃ（＝Ｏ）Ｒ５、−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ６Ｈ４−Ｒ５、−ＣＯＲ５、−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＨＲ５、及び−ＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＮＣＨ３Ｒ５から選択され、式中、Ｒ５は、水素、Ｃ１〜１２アルキル（特に、Ｃ１〜６アルキル）、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、
    −（ＣＨ２）１〜６Ｎ＋（ＣＨ３）２（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６−Ｏ−ＰＯ３ ２−、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３Ｈ２、−（ＣＨ２）１〜６ＰＯ３ ２−、親水性基（任意選択的にスペーサーを含む）、反応性基（任意選択的にスペーサーを含む）、オリゴペプチド、ポリペプチド及びヌクレオチドから選択され、
    Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、前記発色団部分と前記キレートの他の部分との間の結合を表し、
    Ｒ６は、水素、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−Ｉ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＯＣＨ３−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＯＣＨ２、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−ＳＣＨ３、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＯＣＨ２、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−Ｓ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＣＨ３、−ＣＯＮ（ＣＨ３）２、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＯＮＨＣ（ＣＨ２ＯＨ）３、−ＮＨＣＯＣＨ３、−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＯＨ、−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、反応性基Ｚ、及び親水性基から選択され、
    Ｌｎ３＋はランタニドイオンである、発光ランタニドキレート。
  2. Ｘが−ＣＲ１Ｒ２−である、請求項１に記載の発光ランタニドキレート。
  3. Ｘが＞Ｃ（＝Ｏ）、−Ｓ−、−Ｏ−及び−ＮＲ１−から選択される、請求項１に記載の発光ランタニドキレート。
  4. Ｒ１及びＲ２が、それぞれ独立して、水素、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）１〜６ＣＯＯ−、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）１〜６ＳＯ３ −、−ＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＮＨＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２、−ＣＯＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＯＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＯＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択され、特に、水素、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯＨ）２、及び−ＣＨ２ＣＯＮ（ＣＨ２ＣＯＯ−）２から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレート。
  5. Ｒ１及びＲ２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ及び−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜４ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択され、特に、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレート。
  6. 前記１つ以上の発色団部分が前記式（Ｉ）の発色団部分である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレート。
  7. １つ以上の発色団部分が前記式（ＩＩＩ）の発色団部分である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレート。
  8. 構造式
    （Ａ−Ｉ）
    （Ａ−ＩＩＩ）
    （Ｂ−Ｉ）
    （Ｂ−Ｉ＊）
    （Ｂ−ＩＩＩ）
    （Ｂ−ＩＩＩ＊）
    （Ｃ−Ｉ）
    （式中、ｎ＝１〜５である）
    （Ｃ−ＩＩＩ）
    （式中、ｎ＝１〜５である）
    （Ｄ−Ｉ）
    （式中、ｎ＝１〜５である）
    又は（Ｄ−ＩＩＩ）
    （式中、ｎ＝１〜５である）
    の１つを有し、
    ここで、構造式（Ａ−Ｉ）、（Ａ−ＩＩＩ）、（Ｂ−Ｉ）、（Ｂ−Ｉ ＊ ）、（Ｂ−ＩＩＩ）、（Ｂ−ＩＩＩ ＊ ）、（Ｃ−Ｉ）、（Ｃ−ＩＩＩ）、（Ｄ−Ｉ）、又は（Ｄ−ＩＩＩ）において、Ｘ及びＲ ６ はそれぞれ請求項１における構造式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）について記載のＸ及びＲ ６ を示し、そしてＲ ８ は−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＣＯＯＨ、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＣＯＯ − 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＳＯ ３ Ｈ、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＳＯ ３ − 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ −Ｏ−ＰＯ ３ Ｈ ２ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ −Ｏ−ＰＯ ３ ２− 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＰＯ ３ Ｈ ２ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＰＯ ３ ２− 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＨＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＣＨ ３ Ｒ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＥｔＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ Ｎ（Ｒ ９ ） ２ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＣＨ ３ Ｃ（＝Ｏ）Ｒ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＨ ３ Ｒ ９ 、
    −（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ Ｃ（＝Ｏ）Ｒ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ −Ｃ ６ Ｈ ４ −Ｒ ９ 、−ＣＯＲ ９ 、−ＣＯ（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＨＲ ９ 、及び−ＣＯ（ＣＨ ２ ） １〜６ ＮＣＨ ３ Ｒ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜１０ ＯＨ、−（ＣＨ ２ ） １−１０ ＯＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜１０ ＮＨ ２ 、−（ＣＨ ２ ） １〜１０ ＮＨＲ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜１０ ＮＣＨ ３ Ｒ ９ 、−（ＣＨ ２ ） １〜１０ ＳＨ、−（ＣＨ ２ ） １〜１０ ＳＲ ９ から選択され、Ｒ ９ は−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＣＯＯＨ、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＣＯＯ − 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＳＯ ３ Ｈ、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＳＯ ３ − 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ −Ｏ−ＰＯ ３ Ｈ ２ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ −Ｏ−ＰＯ ３ ２− 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＰＯ ３ Ｈ ２ 、−（ＣＨ ２ ） １〜６ ＰＯ ３ ２− 、及び反応性基Ｚから選択される、
    請求項１〜７のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレート。
  9. 請求項１〜８のいずれか一項の定義による前記式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の発光ランタニドキレートと共役した生体特異的結合反応体を含む、検出可能分子。
  10. 前記生体特異的結合反応体が、抗体、抗原、受容体配位子、特異的結合タンパク質、ＤＮＡプローブ、ＲＮＡプローブ、オリゴペプチド、オリゴヌクレオチド、修飾オリゴヌクレオチド、修飾ポリヌクレオチド、タンパク質、オリゴ糖、多糖、リン脂質、ＰＮＡ、ステロイド、ハプテン、ドラッグ、受容体結合配位子、及びレクチンから選択される、請求項９に記載の検出可能分子。
  11. 前記生体特異的結合反応体が抗体である、請求項９又は１０に記載の検出可能分子。
  12. 式（ＩＩ）又は式（ＩＶ）の１つ以上の発色団部分を含むランタニドキレート化配位子であって、
    式中、Ｘ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ６のそれぞれは、それぞれ、請求項１〜８のいずれか一項の定義による前記基Ｘ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ６を表す、ランタニドキレート化配位子。
  13. 生体特異的結合アッセイを実施する方法であって、前記方法が、
    ａ）検体と、請求項１〜８のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレートで標識化された生体特異的結合反応体との間でバイオ複合体を形成する工程、
    ｂ）励起波長を有する放射線で前記バイオ複合体を励起させ、これにより励起バイオ複合体を形成する工程、及び
    ｃ）前記励起バイオ複合体から放出される発光放射線を検出する工程を含む、方法。
  14. 固有ルミネセンスの時間分解蛍光光度測定を利用した特異的生体親和性に基づく結合アッセイにおける、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の検出可能分子の使用。
  15. 請求項１〜８のいずれか一項に記載の発光ランタニドキレート又は請求項１２に記載のランタニドキレート化配位子と共役した固体担体物質。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10472521B2 (en) 2015-12-16 2019-11-12 Becton, Dickinson And Company Photostable fluorescent polymeric tandem dyes including luminescent metal complexes
CN105758832A (zh) * 2016-04-06 2016-07-13 上海奥普生物医药有限公司 一种基于微球的杯式时间分辨荧光降钙素原分析试剂盒及其制备方法和应用
EP3470398B1 (en) 2017-10-13 2022-05-04 Novaled GmbH Organic electronic device comprising an organic semiconductor layer
EP3470412B1 (en) 2017-10-13 2020-07-22 Novaled GmbH Organic electronic device comprising an organic semiconductor layer
EP3990446A1 (en) * 2019-06-25 2022-05-04 Radiometer Turku Oy Novel luminescent lanthanide chelate reporters, biospecific binding reactants labelled with novel luminescent lanthanide chelate reporters and their use
FI128833B (en) * 2019-12-09 2021-01-15 Abacus Diagnostica Oy Luminescent lanthanide (III) chelates
CN112608466B (zh) * 2019-12-10 2023-01-20 青岛大学 一种单体化合物、其制备方法、水溶性荧光共轭分子及其制备方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4761481A (en) 1985-03-18 1988-08-02 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Substituted pyridine derivatives
SE8502573D0 (sv) 1985-05-23 1985-05-23 Jouko Kanakre Fluorescent lanthanide chelates useful as labels of physiologically active materials
WO1987007955A1 (en) 1986-06-17 1987-12-30 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Homogeneous fluoroassay methods employing fluorescent background rejection and water-soluble rare earth metal chelate fluorophores
US20100314994A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-16 Chi Ming Che Platinum (II) Isoqulinoline-Pyridine-Benzene Based Complexes, Methods for Making Same, and Organic Light-Emitting Diodes Including Such Complexes
US20120100628A1 (en) * 2010-10-21 2012-04-26 Ndsu Research Foundation Emissive and broadband nonlinear absorbing metal complexes and ligands as oled, optical switching or optical sensing materials
FR2978149B1 (fr) 2011-07-18 2014-01-10 Cisbio Bioassays Nouveaux agents complexants et complexes de lanthanide correspondant, et leur utilisation comme marqueurs luminescents
US9944657B2 (en) 2011-08-19 2018-04-17 Radiometer Turku Oy Luminescent lanthanide chelates having three chromophores an their use
CN103890137B (zh) * 2011-08-19 2016-08-24 Dhr芬兰公司 具有三个发色团的发光镧系元素螯合物及其用途
CN104125997B (zh) * 2011-12-22 2017-03-08 雷度米特图尔库公司 具有提升的激发性质的新型发光镧系元素螯合物

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