JP6166042B2 - T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 - Google Patents
T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6166042B2 JP6166042B2 JP2012537998A JP2012537998A JP6166042B2 JP 6166042 B2 JP6166042 B2 JP 6166042B2 JP 2012537998 A JP2012537998 A JP 2012537998A JP 2012537998 A JP2012537998 A JP 2012537998A JP 6166042 B2 JP6166042 B2 JP 6166042B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polypeptide
- tspb
- amino acid
- human
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 72
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 title claims description 9
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 title claims description 9
- 108010042653 IgA receptor Proteins 0.000 title claims description 6
- 102100034014 Prolyl 3-hydroxylase 3 Human genes 0.000 title claims description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 279
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 246
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 236
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 150
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 110
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 102
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 91
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 86
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 73
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 67
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 62
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 claims description 45
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 41
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 38
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 38
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 38
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 37
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 37
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 34
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 claims description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 15
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 13
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 9
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 6
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 6
- 239000012503 blood component Substances 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 2
- 229940052778 neisseria meningitidis Drugs 0.000 claims description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 136
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 95
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 92
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 65
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 43
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 42
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 40
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 40
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 37
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 34
- 239000000306 component Substances 0.000 description 34
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 32
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 30
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 27
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 26
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 26
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 25
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 22
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 21
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 20
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 19
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 17
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 17
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 16
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 16
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 15
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 101000936720 Streptococcus gordonii Accessory secretory protein Asp5 Proteins 0.000 description 15
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 15
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 14
- 101710186862 Factor H binding protein Proteins 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 12
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 12
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 12
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 12
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 12
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 11
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 11
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 11
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 11
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 9
- 241000947238 Neisseria meningitidis serogroup C Species 0.000 description 9
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 9
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 9
- 239000006142 Luria-Bertani Agar Substances 0.000 description 8
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 8
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 8
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 8
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 8
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 7
- 102000028555 IgG binding proteins Human genes 0.000 description 7
- 108091009325 IgG binding proteins Proteins 0.000 description 7
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 7
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 7
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 7
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 7
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- -1 4 to 10 amino acids Chemical compound 0.000 description 6
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 6
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 6
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 6
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 6
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(3s,4s,4ar,6ar,6bs,8r,8ar,12as,14ar,14br)-8a-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-[(3s,5s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@H]5CC(C)(C)CC[C@@]5([C@@H](C[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H]([C@@H]([C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@](O)(CO)CO3)O)[C@H](O)CO2)O)[C@H](C)O1)O)O)OC(=O)C[C@@H](O)C[C@H](OC(=O)C[C@@H](O)C[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](CO)O1)O)[C@@H](C)CC)C(O)=O)[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N 0.000 description 5
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010039939 Cell Wall Skeleton Proteins 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 5
- 210000004520 cell wall skeleton Anatomy 0.000 description 5
- 239000007330 chocolate agar Substances 0.000 description 5
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 5
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 5
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 5
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 4
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 4
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 4
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 4
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 4
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000588677 Neisseria meningitidis serogroup B Species 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 238000012181 QIAquick gel extraction kit Methods 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 4
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 4
- CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N cytidylyl-(3'->5')-guanosine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)[C@@H](CO)O1 CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N 0.000 description 4
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 229940126583 recombinant protein vaccine Drugs 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 4
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 4
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 0.000 description 3
- 108700020354 N-acetylmuramyl-threonyl-isoglutamine Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 239000008049 TAE buffer Substances 0.000 description 3
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HGEVZDLYZYVYHD-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O HGEVZDLYZYVYHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 3
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 3
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 3
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 3
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 3
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 3
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 3
- 238000001881 scanning electron acoustic microscopy Methods 0.000 description 3
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N tris acetate Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N (4R)-4-[[(2S,3R)-2-[acetyl-[(3R,4R,5S,6R)-3-amino-4-[(1R)-1-carboxyethoxy]-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound C(C)(=O)N([C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](CCC(=O)O)C(N)=O)C1[C@H](N)[C@@H](O[C@@H](C(=O)O)C)[C@H](O)[C@H](O1)CO YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N 0.000 description 2
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 description 2
- 101100136076 Aspergillus oryzae (strain ATCC 42149 / RIB 40) pel1 gene Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006734 Beta-Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010087504 Beta-Globulins Proteins 0.000 description 2
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 2
- 241000588673 Neisseria elongata Species 0.000 description 2
- 241000588649 Neisseria lactamica Species 0.000 description 2
- 241000921898 Neisseria meningitidis serogroup A Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 2
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 2
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 2
- 229940066429 octoxynol Drugs 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 101150040383 pel2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101150050446 pelB gene Proteins 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 229940070741 purified protein derivative of tuberculin Drugs 0.000 description 2
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011537 solubilization buffer Substances 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N squalene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N 0.000 description 2
- 108010004034 stable plasma protein solution Proteins 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 2
- JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N (2r)-2-amino-5-[[(2r)-1-(carboxymethylamino)-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrobromide Chemical compound Br.OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCC(O)=O JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RQICVUQASA-N (2r,3s,4s,5r)-2-(hydroxymethyl)-6-octoxyoxane-3,4,5-triol Chemical compound CCCCCCCCOC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RQICVUQASA-N 0.000 description 1
- KUHSEZKIEJYEHN-BXRBKJIMSA-N (2s)-2-amino-3-hydroxypropanoic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.OC[C@H](N)C(O)=O KUHSEZKIEJYEHN-BXRBKJIMSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSBLTNPMIGYQGY-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;boric acid Chemical compound OB(O)O.OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O OSBLTNPMIGYQGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010001361 Adrenal haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010002660 Anoxia Diseases 0.000 description 1
- 241000976983 Anoxia Species 0.000 description 1
- 101000800130 Bos taurus Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 1
- 108010032608 Cohn fraction IV Proteins 0.000 description 1
- 108010060123 Conjugate Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 244000251987 Coprinus macrorhizus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010054576 Deoxyribonuclease EcoRI Proteins 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000672609 Escherichia coli BL21 Species 0.000 description 1
- 241000617590 Escherichia coli K1 Species 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 101001009599 Homo sapiens Granzyme A Proteins 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 238000012773 Laboratory assay Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010027202 Meningitis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 208000034762 Meningococcal Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010058858 Meningococcal bacteraemia Diseases 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700015872 N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000588654 Neisseria cinerea Species 0.000 description 1
- 241000588651 Neisseria flavescens Species 0.000 description 1
- 206010062212 Neisseria infection Diseases 0.000 description 1
- 241001174901 Neisseria meningitidis alpha275 Species 0.000 description 1
- 241000588659 Neisseria mucosa Species 0.000 description 1
- 241000588660 Neisseria polysaccharea Species 0.000 description 1
- 241000588645 Neisseria sicca Species 0.000 description 1
- 241001136170 Neisseria subflava Species 0.000 description 1
- 241000588656 Neisseriaceae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000331201 Nocardia pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000047703 Nonion Species 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000015094 Paraproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010064255 Paraproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000237988 Patellidae Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 241000745900 Psychrobacter meningitidis Species 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 239000008051 TBE buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 101000980463 Treponema pallidum (strain Nichols) Chaperonin GroEL Proteins 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- UVKCNDHXKZWHQA-UHFFFAOYSA-N [N+](=O)([O-])C1=CC=C(C=C1)[P] Chemical compound [N+](=O)([O-])C1=CC=C(C=C1)[P] UVKCNDHXKZWHQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000007933 aliphatic carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N almurtide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CO[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000007953 anoxia Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 1
- 230000008952 bacterial invasion Effects 0.000 description 1
- 201000009904 bacterial meningitis Diseases 0.000 description 1
- 201000005008 bacterial sepsis Diseases 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000005081 chemiluminescent agent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 229940031670 conjugate vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical compound CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 108010044804 gamma-glutamyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700026078 glutathione trisulfide Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N hirudin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(OS(O)(=O)=O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2)=O)CSSC1)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)O)CSSC1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000011575 immunodeficient mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 201000002818 limb ischemia Diseases 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000011177 media preparation Methods 0.000 description 1
- 208000037941 meningococcal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000006994 mh medium Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 108700007621 mifamurtide Proteins 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229940028444 muse Drugs 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000021603 oncosis Effects 0.000 description 1
- 230000003571 opsonizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229960005030 other vaccine in atc Drugs 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000020971 positive regulation of blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000018338 positive regulation of fibrinolysis Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 1
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- GMVPRGQOIOIIMI-DWKJAMRDSA-N prostaglandin E1 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1CCCCCCC(O)=O GMVPRGQOIOIIMI-DWKJAMRDSA-N 0.000 description 1
- 238000002331 protein detection Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 1
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- BAZAXWOYCMUHIX-UHFFFAOYSA-M sodium perchlorate Chemical compound [Na+].[O-]Cl(=O)(=O)=O BAZAXWOYCMUHIX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910001488 sodium perchlorate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- YAUZNKLMKRQDAM-UHFFFAOYSA-O trimethyl-[2-(methylcarbamoyloxy)ethyl]azanium Chemical compound CNC(=O)OCC[N+](C)(C)C YAUZNKLMKRQDAM-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFVLVVWMAFSXCK-UHFFFAOYSA-N α-cyano-4-hydroxycinnamic acid Chemical compound OC(=O)C(C#N)=CC1=CC=C(O)C=C1 AFVLVVWMAFSXCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/095—Neisseria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/22—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Neisseriaceae (F)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
- C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
- C07K16/1217—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Neisseriaceae (F)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/31—Fusion polypeptide fusions, other than Fc, for prolonged plasma life, e.g. albumin
Description
本出願は、2009年11月6日に出願された米国仮出願第61/259,032号の優先権恩典を主張し、その仮出願は、全体として、参照により本明細書に組み入れられている。
本発明は、助成金番号R01 AI064314における政府支援でなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
本開示のポリペプチドは、T細胞刺激タンパク質B(TspB)に由来する(例えば、TspBの連続したアミノ酸配列を含有する)。TspBは、様々なナイセリア株によって発現しており、またOrf6と相同であり、Orf6は、ヒト髄膜炎菌疾患の大部分を引き起こすことが知られた多くの侵襲性ナイセリア−メニンギティディス株に見出される。
NMA0776、NMA1797、およびOrf6などの遺伝子によってコードされるタンパク質と相同のタンパク質としても文献中で知られている、「T細胞刺激タンパク質B」(TspB)は、T細胞およびB細胞の刺激タンパク質である。Orf6は、N.メニンギティディスによって、特に若年成人において(Billeら、2008 PLoS One 3:e3885)、引き起こされる侵襲性疾患と関連づけられているプロファージDNAに見出される9個の遺伝子のうちの1個である(Bille Eら、2005 J.Exp.Med.201:1905〜1913)。明確にするために、本開示は、TspBまたはOrf6を交換可能に用い得る。TspB/Orf6の例のアミノ酸配列について図5および図7を参照されたい。
本ポリペプチドは、抗体を誘発するのに用いられる。誘発された抗体がTspBを結合する場合、抗体は、TspBのヒトIgへの結合を阻害し得る。そのようなポリペプチドは、抗ナイセリア免疫応答を促進する抗TspB抗体を誘発する方法に用いることができる免疫原性組成物の作製に用いられる。
1)L、I、M、V、F;
2)R、K;
3)F、Y、H、W、R;
4)G、A、T、S;
5)Q、N;および
6)D、E
本開示のポリペプチドは、本明細書に記載されているような本ポリペプチドを含有する融合タンパク質として提供することができる。例えば、上記のようなポリペプチドは、別のタンパク質のN末端に融合することができる。
上記で述べたように、リンカーは、任意で、本ポリペプチドのコンジュゲート内に存在してもよい。上記で例示された追加のエレメントを含むようにポリペプチドを改変するために用いるのに適したリンカーには「可動性リンカー」が挙げられる。適切なリンカーは、容易に選択することができ、4アミノ酸から10アミノ酸まで、5アミノ酸から9アミノ酸まで、6アミノ酸から8アミノ酸まで、または7アミノ酸から8アミノ酸までを含む、1アミノ酸(例えば、Gly)から20アミノ酸まで、2アミノ酸から15アミノ酸まで、3アミノ酸から12アミノ酸までなどの適切な様々な長さのいずれかであり得、1アミノ酸、2アミノ酸、3アミノ酸、4アミノ酸、5アミノ酸、6アミノ酸、または7アミノ酸であってもよい。
本開示のポリペプチドは、組換え方法および非組換え方法(例えば、化学合成)を含めた任意の適切な方法によって作製することができる。ポリペプチドが化学合成される場合、合成は、液相または固相を介して進行し得る。固相合成(SPPS)は、非天然アミノ酸の取り込み、ポリペプチド/タンパク質バックボーンの改変を可能にする。FmocおよびBocなどの様々な型のSPPSが本発明のポリペプチドを合成するのに利用可能である。化学合成の詳細は当技術分野において知られている(例えば、Ganesan A.2006 Mini Rev.Med Chem.6:3〜10、およびCamarero JAら、2005 Protein Pept Lett.12:723〜8)。
上記で論じたように、本ポリペプチドは、関心対象となるポリペプチドをコードする構築物を提供するように当技術分野において知られた異なるTspBの核酸を操作する組換え技術を用いて産生することができる。アミノ酸配列が提供されたならば、当業者はすぐに、遺伝暗号の知識に照らしてそのようなアミノ酸配列をコードする様々な異なる核酸を認識するであろうことは理解されよう。
本明細書では、「抗原組成物」、「抗原性組成物」、または「免疫原性組成物」は、便宜上、本明細書に開示されているような、ヒトIgのFc領域に結合するポリペプチドを含む組成物を総称的に指すために用いられ、本ポリペプチドは任意で、免疫原性を増強するためにコンジュゲートされてもよく、および/または併用して提供されてもよい。抗N.メニンギティディス抗体をヒトにおいて誘発するのに有用な組成物が、本開示によって具体的に企図される。
上記で述べたように、本ポリペプチドは、対象においてN.メニンギティディスに対する免疫応答を誘発するのに用いられる様々な抗原性組成物のいずれかと組み合わせて提供することができる。本明細書で用いられる場合の「組み合わせ」とは、別々の投与として別々に製剤化される(例えば、キット内に提供することができるような)組成物、および単一の製剤中での投与としての(すなわち、「共製剤化される」)組成物を含むことを意味する。
本明細書に記載されたポリペプチドは、一般的に、ナイセリア疾患に罹るリスクがあるヒト対象に、疾患およびその合併症の発生を防ぎ、または少なくとも部分的に停止させるために免疫原性組成物中において投与される。これを達成するのに十分な量は、「治療的有効量」として定義される。用いるのに有効な量は、例えば、免疫原性組成物、投与様式、患者の体重および全身的健康状態、ならびに処方医師の判断に依存する。免疫原性組成物の単一用量または複数回用量は、患者に必要とされ、かつ許容される用量および頻度、ならびに投与経路に依存して投与され得る。
本開示はまた、効果的なワクチンについてスクリーニングする方法、および候補作用物質(例えば、抗体)、それをコードする核酸、または抗血清を誘発するのに効果的な免疫原についてスクリーニングする方法を特徴とする。
本明細書に開示された組成物を用いるための、および上記のように方法を実施するためのキットもまた本発明によって提供される。キットは、N.メニンギティディスに対する(例えば、予防的または治療的)ワクチンの投与のために提供されてもよい。キットは、本明細書に開示されたポリペプチドまたはコード化核酸の1つまたは複数を含むことができ、それは滅菌容器内に提供されてもよく、対象への投与のための薬学的に許容される賦形剤と製剤化して提供することができる。ポリペプチドは、抗TspB抗体の産生を与える抗N.メニンギティディスワクチンの製剤(例えば、組換えTspB断片を含有する製剤、ヒト血清と培養されたTspB発現株由来の小胞など)と共に提供することができ、本開示のポリペプチドは、そのようなワクチンと別々に製剤化されてもよいし、組み合わせて製剤化されてもよい。
以下の方法および材料を下記の実施例に用いた。
髄膜炎菌株(W135群A22株、B群NMB株、C群4243株)を、0.25%(重量/体積)グルコースを含むMueller−Hinton(MH;BD)培地、Catlin 6(CDM)培地(9)、または5%(重量/体積)ヒト血清(HuS)もしくはマウス血清(MoS)を追加したCatlin 6培地中で約0.6のOD620nmまで増殖させた。ヒトドナー由来の血清を、上記のように、その血清を56℃で30分間、インキュベートすることによって熱失活させ(HuS)、プロテインGカラムにその血清を通過させることによってIgGを除去した(dHuS)。細胞をペレット化し、洗浄し、ブロッキング緩衝液(1%ウシ血清アルブミンを含有するPBS緩衝液(Sigma))中に最初の体積の80%に再懸濁した。細胞の混合物を、周期的に穏やかに撹拌しながら4℃で1時間、インキュベートした。細胞をペレット化し、フルオレセインイソチオシアネート(FITC)連結型ヤギ抗ヒト二次抗体のブロッキング緩衝液中1:200希釈溶液の200μlに再懸濁した。IgG(H+L)F(ab’)2およびIgMに対するFITC連結型抗体(Jackson ImmunoResearch、West Grove、PA)。二次抗体を加えた後、チューブを、周期的に穏やかに撹拌しながら4℃で1時間、インキュベートした。細胞を、ペレット化し、新鮮に作製されかつ濾過された400μlの0.5%ホルムアルデヒド(重量/体積)含有PBS(Steriflip、Millipore、Billerica、MA)に再懸濁した。試料をすぐに、フローサイトメトリー(BD FACSCalibur System、BD Biosciences、San Jose、CA)によって分析した。
ナイセリア−メニンギティディスW135群(NmW135)A22株の表面へのヒトIgGの結合に影響を及ぼす可能性がある細菌細胞の増殖条件を同定するためにフローサイトメトリー実験を行った。精製ヒトIgGが特定の試料に加えられる結合実験に加えて、対照の場合は、マウス血清を加えない場合および加える場合を含んだ。
ヒトIgG結合タンパク質の親和性精製。NmW135のA22株の細胞をMHまたはCDMHuS中、37℃で増殖させた。各培養条件について、7mLの5つの培養を0.15(MH)または0.2(CDMHuS)のOD620nmから開始した。OD620nmが約0.6に達したとき、5つの培養物を混合し、65mLのそれぞれの培地をさらに加えて、合計100mLにし、OD620nm=0.6までインキュベーションを続けた。細胞を10,000xgで30分間、遠心分離し、細胞をペレット化した。細胞ペレットを、10mLのフィルター処理(Steriflip、Millipore)されたPBS緩衝液中で2回、洗浄した(緩衝液中に再懸濁し、遠心分離した)。最終洗浄後、2mLのアリコート中の細胞をペレット化し、ドライアイス上で凍結させた。
NMA0776の翻訳タンパク質配列およびNCBI(ncbi.nlm.nih.gov/sutils/genom_table.cgi)で利用可能な13個のナイセリア科ゲノムのBLAST配列相同性検索を用いて、相同性タンパク質配列が侵襲性髄膜炎菌A群(Z2491)、B群(MC58)、およびC群(FAM18)、ならびにナイセリア−ゴノレア(FA1090)株および非侵襲性ナイセリア−ラクタミカ(ATCC 23970)株に見出された。推定TspB/Orf6タンパク質をコードする遺伝子の数は、1個の部分配列(ラクタミカ株ATCC 23970)から4個の完全長配列(髄膜炎菌B群MC58、C群FAM18およびN.ゴノレアFA1090株)までの範囲であった。A群、B群、およびC群の株由来の翻訳されたタンパク質配列を比較した場合、パターンが現れた。
保存された球状ドメイン(CR)を、下記のようにクローン化した(本明細書ではTspB−IGBと呼ぶ)。ゲノムDNAを、QiagenゲノムDNA単離キット(Qiagen、Valencia、CA)を用い、製造会社の使用説明書に従って、MC58株から調製した。TspB−IGBをコードするDNAを、以下のプライマーを用いるPCRによって増幅した:5’−CATGGATCCATCAGTTTCCCG−3’(配列番号49)および5’−CATAAGCTTTGCTTCCGCGCTTC−3’(配列番号50)。PCRは、Invitrogen(Carlsbad、CA)社製のPfx DNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、および緩衝液を用いるIdaho Technology(Salt Lake City、Utah)RapidCycleサーモサイクラーでの95℃での変性、50℃でのアニーリング、および72℃での伸長の30サイクルからなった。PCR断片を、QIAquick PCR精製キットを用い、製造会社の使用説明書に従って精製し、T4 DNAリガーゼ(New England Biolabs、Ipswich、MA)を用いて、20℃で一晩、プラスミドpCR2.1(Invitrogen)へライゲーションした。ライゲーション反応産物を用いて、大腸菌BL21株(DE3)(Invitrogen)を形質転換した。形質転換された大腸菌を、100μg/mlアンピシリン(Sigma)およびBlue White Selectスクリーニング試薬(Sigma)を含有するLB寒天プレートに蒔いた。Qiagenミニプラスミドプレップキットを用いてプラスミドを白色コロニーから調製し、TspB−IGB DNA断片の存在を下記のように確認した。
NMB1628の保存された球状ドメイン、続いて保存されたプロリンリッチリピートにわたるDNA断片を下記のようにクローン化した(本明細書ではTspB−IGBproと呼ぶ)。ゲノムDNAを、QiagenゲノムDNA単離キット(Qiagen、Valencia、CA)を用い、製造会社の使用説明書に従ってMC58株から調製した。TspB−IGBpro(NMB1628)をコードするDNAを、以下のプライマーを用いるPCRによって増幅した:5’−CATGGATCCATCAGTTTCCCGCGCCGCCGTCTT−3’(配列番号51)および5’−CATAAGCTTGTTCTCAAAGCTGAACGCG−3’(配列番号52)。PCRは、New England Biolabs(Ipswich、MA)社製のTaq DNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、および反応緩衝液を用いるIdaho Technology(Salt Lake City、Utah)RapidCycleサーモサイクラーでの95℃での変性、48℃でのアニーリング、および72℃での伸長の5サイクル、続いて、95℃での変性、52℃でのアニーリング、および72℃での伸長の25サイクルからなった。PCR断片を、QIAquick PCR精製キット(Qiagen)を用い、製造会社の使用説明書に従って精製した。TOPO−TAクローニングキット(Invitrogen)を用いて、製造会社の使用説明書の通り、PCR産物を、プラスミドpCR2.1(Invitrogen)へライゲーションし、ライゲーション反応産物を用いて、大腸菌TOP 10株(Invitrogen)を形質転換した。形質転換された大腸菌細胞を、100μg/mlアンピシリン(Sigma)およびX−Gal(ブロモ−クロロ−インドリル−ガラクトピラノシド、Gold Biotechnology)を含有するLB寒天プレート上に蒔いた。他の2つのゲノム遺伝子座(NMB1548およびNMB1747)由来のTspB−IGBproの増幅および組込みを排除して、正しい挿入断片を含むプラスミドDNAを有する白色コロニーについてスクリーニングするために、検証プライマー5’−GCCGCCGTCTTGTCAGGAGTC−3’(配列番号53)および5’−ATCAAGCACAGTCACTGTGAA−3’(配列番号54)を用いるコロニーPCRを実施した。その後、プラスミドDNAを、Qiagenミニ−プラスミドプレップキットを用いて、選択された形質転換体から調製し、TspB−IGBproをコードする正しい配列を、DNAシークエンシングによって検証した。
NMB1628の完全長オープンリーディングフレーム(開始コドンから停止コドンまで)を下記のようにクローン化した(本明細書ではTspB−FLと呼ぶ)。ゲノムDNAを、QiagenゲノムDNA単離キット(Qiagen、Valencia、CA)を用い、製造会社の使用説明書に従ってMC58株から調製した。TspB−FLをコードするDNAを、プラスミドpET22b(+)へクローン化するためにプライマー対5’−AGCATATGTTGGGGATGTTTTCGGT−3’(配列番号55)および5’−AGAAGCTTGACTTCACGAGATACTGTGC−3’(配列番号56)、プラスミドpQE30へクローン化するためにプライマー対5’−ACGGATCCTTGGGGATGTTTTCGGTTAA−3’(配列番号57)および5’−AGAAGCTTCTAGACTTCACGAGATACTG−3’(配列番号58)を用いるPCRによって増幅した。両方の増幅反応についてのPCRは、New England Biolabs(Ipswich、MA)社製のTaq DNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、および反応緩衝液を用いるIdaho Technology(Salt Lake City、Utah)RapidCycleサーモサイクラーでの95℃での変性、48℃でのアニーリング、および72℃での伸長の5サイクル、続いて、95℃での変性、52℃でのアニーリング、および72℃での伸長の25サイクルからなった。PCR断片を、QIAquick PCR精製キット(Qiagen)を用い、製造会社の使用説明書に従って精製した。TOPO−TAクローニングキット(Invitrogen)を用いて、製造会社の使用説明書の通り、PCR産物を、プラスミドpCR2.1(Invitrogen)へライゲーションし、ライゲーション反応産物を用いて、大腸菌TOP 10株(Invitrogen)を形質転換した。形質転換された大腸菌細胞を、100μg/mlアンピシリン(Sigma)およびX−Gal(Gold Biotechnology)を含有するLB寒天プレート上に蒔いた。Qiagenミニ−プラスミドプレップキットを用いて、TspB−FL断片の最初の増幅に用いたプライマーでのコロニーPCR中にPCR産物を生じた白色コロニーからプラスミドを調製した。正しいTspB−FL挿入断片配列を、DNAシークエンシングによって確認した。
NMA0776およびNMA1797によってコードされる保存された球状ドメインTspB−IGBを、MC58におけるNMB1628によってコードされたTspB−IGBproについて上で記載されているように、クローン化した。ゲノムDNAを、QiagenゲノムDNA単離キット(Qiagen、Valencia、CA)を用い、製造会社の使用説明書に従ってZ2491株から調製した。NMA0776のTspB−IGBをコードするDNAを、以下のプライマー:5’−CATGGATCCATCAGTATCCCGCGCCG−3’(配列番号59)および5’−CATAAGCTTTGCTTCTGCGCTTCCG−3’(配列番号60)を用いるPCRによって増幅し、一方、NMA1797のTspB−IGBをコードするDNAを、以下のプライマー:5’−CATGGATCCATCAGTTTCCCGCGCCG−3’(配列番号61)および5’−CATAAGCTTTGCTTCCGCGCTTC−3’(配列番号62)を用いるPCRによって増幅した。両方の増幅反応についてのPCRは、New England Biolabs(Ipswich、MA)社製のTaq DNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、および反応緩衝液を用いるIdaho Technology(Salt Lake City、Utah)RapidCycleサーモサイクラーでの95℃での変性、48℃でのアニーリング、および72℃での伸長の5サイクル、続いて、95℃での変性、52℃でのアニーリング、および72℃での伸長の25サイクルからなった。PCR断片を、QIAquick PCR精製キット(Qiagen)を用い、製造会社の使用説明書に従って精製した。TOPO−TAクローニングキット(Invitrogen)を用いて、製造会社の使用説明書の通り、PCR産物を、プラスミドpCR2.1(Invitrogen)へライゲーションし、ライゲーション反応産物を用いて、大腸菌TOP 10株(Invitrogen)を形質転換した。形質転換された大腸菌を、100μg/mlアンピシリン(Sigma)およびX−Gal(Gold Biotechnology)を含有するLB寒天プレート上に蒔いた。Qiagenミニ−プラスミドプレップキットを用いて、NMA0776およびNMA1797によってコードされるTspB−IGBの最初の増幅に用いたプライマーでのコロニーPCR中にPCR産物を生じた白色コロニーからプラスミドを調製した。正しいTspB−IGB挿入断片配列を、DNAシークエンシングによって確認した。
TspB−IGBタンパク質の精製を、Qiaexpressionist Handbook第5版(2003、Qiagen)に記載されているように、pQE31−TspB−IGB発現プラスミドについては変性条件下で、またはpET22b(+)−TspB−IGB発現プラスミドについては非変性条件下で、5ml Ni Sepharose HisTrap高性能HPカラム(GE BioScience、Piscataway、NJ)を用いて実施した。カラムからの画分を、Invitrogen社製のプレキャストゲルを用いるSDS−PAGEによって分析し、続いて、SimplyBlue SafeStain(Invitrogen)で染色し、Odyssey IRスキャナ(LI−COR)でゲルをスキャンすることによって記録した。変性条件下で精製されたTspB−IGBを含有する画分を混合し(合計6ml)、10mM Tris・HClおよび8M尿素を含有する100mM NaH2PO4緩衝液、pH8.0中30mlに希釈し、1日にわたって、1回に25mlのPBS緩衝液を加えることによって、周囲温度でPBS緩衝液(合計1L)中、透析した(1kDaカットオフSpectropor膜、Fisher)。最後に、再び折り畳まれたTspBタンパク質を、0.002%Tween 20および24mMスクロースを含有する4Lの2mMヒスチジン、pH6中で透析し、凍結乾燥した。非変性条件下で精製されたTspB−IGB(pET22b(+)−TspB−IGB構築物)を、0.002%Tween 20および24mMスクロースを含有する4Lの2mMヒスチジン、pH6中で透析し、凍結乾燥した。
産生され、変性条件下で精製され、その後、再び折り畳まれた、または非変性条件下で精製されたTspB−IGBポリペプチドを、様々な源由来のIgGに結合するそれらの能力について固相ELISAアッセイにより評価した。TspB−IGB(PBS中10μg/mlの濃度で100μl/ウェル)をマイクロタイタープレート(Immulon 2;Dynatech Laboratories,Inc.、Chantilly、VA)に4℃で一晩、吸着させた。PBSで3回、洗浄した後、プレートを、250μlのブロッキング緩衝液(1%ウシ血清アルブミンおよび0.1%アジ化ナトリウムを含有するPBS、pH7.4)で、室温で30〜60分間、ブロッキングした。プレートをPBSで3回、洗浄した後、4人の異なるドナー(ドナー1、3、4、および5)由来のヒト血清、ドナー3およびドナー1血清から精製されたIgG、Jackson ImmunoResearch Laboratories(West Grove、PA)製の精製ヒトIgG、IgM、およびIgA、骨髄腫細胞系から得られた(BioDesign International、Saco、ME)、およびCHO細胞において産生された(本発明者らの研究室からのmAb DA2)、精製ヒトIgG1、IgG2、IgG3、およびIgG4、4匹のマウス由来およびZymed(South San Francisco、CA)社製のマウス血清、ならびにマウス骨髄腫(全て、Southern Biotech、Birmingham、AL社製)およびハイブリドーマ(SEAM 12)細胞系から得られた精製マウスIgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、およびIgMモノクローナル抗体をウェルに加え、ブロッキング緩衝液中に段階希釈した。次の日、ウェルをPBSで5回、洗浄し、ブロッキング緩衝液中に1:3000希釈された、100μl/ウェルのアルカリフォスファターゼ連結型抗ヒトポリクローナル抗体(Jackson ImmunoResearch、West Grove、PA)または抗マウスポリクローナル抗体(IgA+IgG+IgM;Zymed、South San Francisco、CA)と周囲温度で1時間、インキュベートした。その後、プレートをPBSで洗浄し、基質緩衝液(50mM Na2CO3、1mM MgCl2、pH9.8)中に1mg/mlに希釈された100μlの新鮮に調製された基質(p−ニトロフェニルリン酸;Sigma)を各ウェルに加えた。405nmでの吸光度を、約60分後、測定した。各試料におけるIgG抗体濃度を、捕獲ELISA(マウスについてはSouthern Biotech、およびヒトについてはImmunological Consultants)によって決定した。下記の表1は結合データを要約する。
精製ヒトIgGの組換えTspB1628IGBおよびTspB1548IGBへの結合。アミノ末端にHisタグを有するpQEプラスミドから発現し、かつ非変性条件下で精製された、NMB1628およびNMB1548によりコードされるTspB IGBを、上記のように、マイクロタイタープレートのウェルに吸着させた(10μg/mlの100μl)。ブロッキング緩衝液でのブロッキング後、ブロッキング緩衝液中での精製ヒトIgGの段階希釈溶液を、ウェルに加え、4℃で一晩、放置しておいた。上記のように、プレートを洗浄し、結合したIgGを検出した。対照として、再び折り畳まれたTspB1628IGB(rTspB1628IGB)に対する抗血清(TspB1628IGBおよびTspB1548IGBに等しくよく結合する)を用いて、等量のタンパク質がプレート上にコーティングされたことを示した。
図13は、フローサイトメトリーによって決定されたように(実施例1)、2人の異なるドナー(ドナー1およびドナー2)血清由来のヒトIgGを結合する、異なる莢膜群由来のいくつかのN.メニンギティディス株の能力を示している。菌株の一部(例えば、NmCの4243株)は、IgGに強く結合したが、他のもの(例えば、NmW135のA22株)はほとんど結合しなかったかまったく結合しなかった。ほとんどIgG結合を示さなかったかまったくIgG結合を示さなかったA22株、NMB株、およびZ1092株を、以下のように、ヒト補体の存在下での選択に供した。
上の材料および方法のセクションに記載されているように免疫されたマウスから抗血清を収集した。マウスを以下で免疫した:
1)変性条件下および非変性条件下で精製された、pQEに発現したNMB1628IGB(rfTspB1628IGB)
2)pQEから産生され、かつ非変性条件下で精製されたNMB1628IGBPro(nTspB1628IGB);ならびに
3)pETから産生され、かつ非変性条件下で精製されたNMB1548(nTspB1548IGB)。
1)ミョウバンアジュバント単独
2)TspB1548IGB
3)非変性条件下で精製されたTspB1628IGB
4)変性条件下で精製され、かつ再び折り畳まれたTspB1628IGB(rfTspBIGB1628)。
TspB IGBワクチンでの免疫化によって誘発された抗体の、B群、C群、X群、Y群、およびW135群細菌の代表的なナイセリア−メニンギティディス細菌へのヒト補体成分の沈着を活性化する能力は、下記のように決定することができる。
補体媒介性殺菌抗体活性。抗TspB IGB抗血清の、ヒト補体の存在下において溶菌を媒介する能力は、血清殺菌アッセイ(SBA)によって測定することができる。殺菌アッセイを、以前に記載されているように(Moe G.R.ら、2002 Infect Immun 70:6021〜31)、チョコレート寒天プレート上で一晩増殖し、その後CDM/dHuS中で培養された対数増殖中期の細胞を用いて、実施し、またはTspB IGBを発現するように誘導されていない細胞と比較するために、0.25%グルコースを追加されたMueller Hinton培地ブロスが用いられる。チョコレート寒天プレートから採取された細胞を、培養を開始するために約0.18のOD620nmまで培地中に希釈し、その後、約0.62のOD620nmまで増殖させる。細菌をペレット化し、その後、1%BSA(Equitech)を含む、または含まない、Ca+およびMg+含有Dulbeccos緩衝食塩水(DBS;Mediatech.Manassas VA)中で洗浄する。各アッセイに用いられるヒト補体の供給源は、60%補体の存在下での試験菌株に対する内因性SBAについて評価される。
乳児ラットにおける受動防御。抗TspB−IGB抗血清は、下記のように、菌血症からの受動防御について試験することができる。この実験の結果は、TspB−IGBに基づいたワクチンの、ヒトにおいて侵襲性疾患から防御する能力を決定することができる。
代替として、ワクチンによって誘発される抗体の、ナイセリア−メニンギティディスによって引き起こされる疾患から防御する能力を評価することへのアプローチは、抗血清が、エクスビボでのヒト血液中において、ナイセリア−メニンギティディスB群を溶解すること、またはその増殖を阻害することができるかどうかを決定することである。試験される抗血清(上記のようにTsp−IGBに基づいたワクチンで免疫されたCD1マウス由来のプールされた抗血清)および試験細菌(上記のように、CDM/dHuS培地中に新鮮に増殖した約1000CFUのナイセリア株)を、下記のように、滅菌ガラスバイアル中で試験菌株に対する抗体を欠くドナーから新鮮に採取されたヒト血液中で混合し、調製し、試験する。
Claims (18)
- 配列番号28と少なくとも95%のアミノ酸配列同一性を有する連続したアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、ナイセリアT細胞刺激タンパク質B(TspB)の完全長成熟アミノ酸配列の長さより少なくとも200アミノ酸短く、かつ、ナイセリア−メニンギティディスのTspBエピトープに結合する抗体を誘発する、単離されたポリペプチド。
- 前記連続したアミノ酸配列が配列番号23〜34の一つから選択される、請求項1に記載の単離されたポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが配列番号47又は配列番号48を含む、請求項1に記載の単離されたポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが配列番号14または配列番号17を含む、請求項1に記載の単離されたポリペプチド。
- 配列番号13、14、15、16、17、18、19、20、21、または22に示されたアミノ酸配列と少なくとも85%のアミノ酸配列同一性を含む変種群ペプチド(VN)を含み、変種群ペプチドが前記連続したアミノ酸配列のC末端に隣接している、請求項1に記載の単離されたポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが担体タンパク質、及び/又は抗原にコンジュゲートしている、請求項1〜5のいずれか一項に記載の単離されたポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが300又は400アミノ酸の長さまでである、請求項1〜6のいずれか一項に記載の単離されたポリペプチド。
- N末端又はC末端に異種性のアミノ酸配列を含む、請求項1〜7のいずれか一項に記載の単離されたポリペプチド。
- 請求項1〜8のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする単離された核酸。
- 請求項1〜8のいずれか一項に記載の単離されたポリペプチド、および
薬学的に許容される賦形剤
を含む免疫原性組成物。 - 膜小胞を含む、請求項10に記載の免疫原性組成物。
- 請求項10又は11に記載の免疫原性組成物を対象に、対象において抗体の産生を誘発するのに効果的な量で投与することを含む、対象においてナイセリア−メニンギティディスに対する免疫応答を誘導する方法に使用するための、請求項10又は11に記載の免疫原性組成物。
- 前記対象がヒトである、請求項12に記載の免疫原性組成物。
- 請求項1〜8のいずれか一項に記載のポリペプチドを発現する宿主細胞を既知組成培地において培養するステップを含み、
前記既知組成培地がヒト血液成分を含み、前記培養するステップが、ポリペプチドの発現をもたらす条件下で行われる、請求項1〜8のいずれか一項に記載のポリペプチドを製造する方法。 - 前記ヒト血液成分がヒトコーン分画IVを含む、請求項14に記載の方法。
- 前記ヒト血液成分がヒト血清を含む、請求項14に記載の方法。
- 前記宿主細胞がナイセリア細菌である、請求項14に記載の方法。
- 前記ポリペプチドを含有する小胞を得るステップを含む、請求項17に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US25903209P | 2009-11-06 | 2009-11-06 | |
US61/259,032 | 2009-11-06 | ||
PCT/US2010/055505 WO2011057011A2 (en) | 2009-11-06 | 2010-11-04 | T-cell stimulating protein b and methods of use |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016000143A Division JP2016104783A (ja) | 2009-11-06 | 2016-01-04 | T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013509881A JP2013509881A (ja) | 2013-03-21 |
JP6166042B2 true JP6166042B2 (ja) | 2017-07-19 |
Family
ID=43970765
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012537998A Expired - Fee Related JP6166042B2 (ja) | 2009-11-06 | 2010-11-04 | T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 |
JP2016000143A Pending JP2016104783A (ja) | 2009-11-06 | 2016-01-04 | T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016000143A Pending JP2016104783A (ja) | 2009-11-06 | 2016-01-04 | T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8642733B2 (ja) |
EP (1) | EP2496597A4 (ja) |
JP (2) | JP6166042B2 (ja) |
AU (1) | AU2010315115B2 (ja) |
CA (1) | CA2779839A1 (ja) |
WO (1) | WO2011057011A2 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IN2015DN02993A (ja) * | 2012-09-11 | 2015-09-25 | Centers Disease Control & Prevention | |
US9845349B2 (en) | 2012-09-11 | 2017-12-19 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Regulating Bacillus anthracis lethal factor activity via an activating epitope region |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4443546A (en) * | 1980-07-07 | 1984-04-17 | The Beth Israel Hospital Association | Process and composition for propagating mammalian cells |
GB9814902D0 (en) | 1998-07-10 | 1998-09-09 | Univ Nottingham | Screening of neisserial vaccine candidates against pathogenic neisseria |
EP1524993B1 (en) * | 2002-08-02 | 2013-03-06 | GlaxoSmithKline Biologicals s.a. | Neisserial vaccine compositions comprising a combination of antigens |
GB0220197D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Univ Utrecht | Refolding method |
CN101107007B (zh) | 2005-01-27 | 2011-08-17 | 奥克兰儿童医院及研究中心 | 对脑膜炎奈瑟球菌所致疾病具有广谱保护作用的gna1870囊泡疫苗 |
US20090035328A1 (en) | 2007-08-02 | 2009-02-05 | Dan Granoff | fHbp- AND LPXL1-BASED VESICLE VACCINES FOR BROAD SPECTRUM PROTECTION AGAINST DISEASES CAUSED BY NEISSERIA MENINGITIDIS |
-
2010
- 2010-11-04 CA CA2779839A patent/CA2779839A1/en not_active Abandoned
- 2010-11-04 EP EP10829115.4A patent/EP2496597A4/en not_active Withdrawn
- 2010-11-04 WO PCT/US2010/055505 patent/WO2011057011A2/en active Application Filing
- 2010-11-04 AU AU2010315115A patent/AU2010315115B2/en not_active Ceased
- 2010-11-04 JP JP2012537998A patent/JP6166042B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2010-11-04 US US13/505,263 patent/US8642733B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2016
- 2016-01-04 JP JP2016000143A patent/JP2016104783A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2496597A2 (en) | 2012-09-12 |
WO2011057011A2 (en) | 2011-05-12 |
EP2496597A4 (en) | 2013-08-14 |
JP2013509881A (ja) | 2013-03-21 |
AU2010315115A1 (en) | 2012-05-31 |
WO2011057011A3 (en) | 2011-06-30 |
AU2010315115B2 (en) | 2015-01-29 |
US20120276120A1 (en) | 2012-11-01 |
US8642733B2 (en) | 2014-02-04 |
JP2016104783A (ja) | 2016-06-09 |
CA2779839A1 (en) | 2011-05-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10905754B2 (en) | Factor H binding proteins (fHbp) with altered properties and methods of use thereof | |
US8470340B2 (en) | Peptides presenting an epitope of a domain of factor H binding protein and methods of use | |
EP2265640B1 (en) | Chimeric factor h binding proteins (fhbp) containing a heterologous b domain and methods of use | |
US8980285B2 (en) | Vaccines for broad spectrum protection against Neisseria meningitidis | |
JP5883380B2 (ja) | キメラ因子h結合タンパク質(fhbp)およびその使用方法 | |
US20160159865A1 (en) | Non-Naturally Occurring Factor H Binding Proteins (fHbp) and Methods of Use Thereof | |
JP6166042B2 (ja) | T細胞刺激タンパク質bおよび使用方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20131029 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20141031 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20141205 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150304 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150904 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160104 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20160215 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20160308 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20160513 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170127 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170622 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6166042 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |