JP5917951B2 - Antioxidant ability determination tool - Google Patents
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Description
この発明は、抗酸化能判定具に関し、特に、簡易迅速に試料の抗酸化能を判定できる抗酸化能判定具に関する。 The present invention relates to an antioxidant capacity determination tool, and more particularly to an antioxidant capacity determination tool that can easily and quickly determine the antioxidant capacity of a sample.
従来、食品などが有する抗酸化能を測定する方法は種々知られており、例えば、ORAC(Oxygen Radical Absorbance Capacity)法や、DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)法などが知られている。 Conventionally, various methods for measuring the antioxidant capacity of foods and the like are known, for example, ORAC (Oxygen Radial Absorbance Capacity) method, DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) method and the like are known. Yes.
また、本出願人によるPAO(Potential Anti Oxidant)法が提案されている(特許文献1)。PAO法は、試料の添加により還元された銅試薬が、発色試薬によって色が変化することを利用して試料の抗酸化能の有無を測定する方法である。 Further, a PAO (Potential Anti Oxidant) method by the present applicant has been proposed (Patent Document 1). The PAO method is a method for measuring the presence or absence of antioxidant ability of a sample by utilizing the fact that a copper reagent reduced by the addition of the sample changes its color depending on the coloring reagent.
また、特許文献2には、尿の抗酸化度を測定することにより生体内のストレスを判定する方法等が記載されている。この方法は、2,4,6−トリス(2−ピリジル)−1,3,5−トリアジンと3価の鉄を含有する金属塩とを含む指示薬を含有する測定キットと尿を反応させると、尿の抗酸化度に応じて前記指示薬成分の色が変化することを利用して尿の抗酸化度の高低を測定する方法である。
従来の抗酸化能を測定する方法は、試験、研究のために利用されるものが多く、試料の抗酸化能を測定するのに長時間要するものがある。また、抗酸化能の測定に使用する器具、装置が高価なものや、操作方法も特殊な操作を要するものもある。 Many conventional methods for measuring antioxidant capacity are used for testing and research, and some methods require a long time to measure the antioxidant capacity of a sample. In addition, there are some instruments and devices that are used for measuring the antioxidant capacity, and there are some that require special operations.
従って、高価な装置や特殊な操作方法を要せず、短時間で試料の抗酸化能を判定したいという要望には十分応えられていなかった。 Therefore, an expensive apparatus or a special operation method is not required, and the request for determining the antioxidant capacity of a sample in a short time has not been sufficiently met.
そこで、本発明は、高価な装置や特殊な操作方法を要せず、簡便迅速に試料の抗酸化能を判定できる抗酸化能判定具を提供することを目的とする。 Therefore, an object of the present invention is to provide an antioxidant capacity determination tool that can easily and quickly determine the antioxidant capacity of a sample without requiring an expensive apparatus or a special operation method.
上記課題を解決するため、以下の発明を提案する。 In order to solve the above problems, the following invention is proposed.
請求項1の発明は、
支持体に備えられた試料滴下部と、
前記試料滴下部から近い順に前記支持体に備えられた第一観測部、第二観測部及び第三観測部とを備えてなり、
前記第一観測部には発色試薬が含まれ、
前記第二観測部には遷移金属を含む試薬が含まれ、
前記第三観測部には還元剤が含まれ、
前記発色試薬が、前記試料滴下部に滴下された試料とともに前記第二観測部に浸潤し、更に、前記試料滴下部に滴下された前記試料及び前記第二観測部に含まれている前記遷移金属とともに前記第三観測部に浸潤する、前記試料の抗酸化能の有無を判定する、抗酸化能判定具であって、
前記発色試薬は、前記第二観測部に含まれている前記遷移金属が前記試料滴下部に滴下された前記試料に含まれている抗酸化物質によって還元された際に発色するとともに、前記第三観測部に浸潤してきた前記遷移金属が前記還元剤によって還元された際に発色するキレート発色剤である
抗酸化能判定具である。
The invention of claim 1
A sample dropping portion provided in the supporting lifting member,
Comprising a first observation unit, a second observation unit and a third observation unit provided on the support in order from the sample dropping unit;
The first observation part includes a coloring reagent,
The second observation part includes a reagent containing a transition metal,
The third observation part includes a reducing agent ,
The coloring reagent infiltrates the second observation part together with the sample dropped on the sample dropping part, and further, the sample dropped on the sample dropping part and the transition metal contained in the second observation part infiltrating the third observation unit with judges whether the antioxidant capacity of the sample, an anti-oxidation ability determination device,
The coloring reagent develops color when the transition metal contained in the second observation part is reduced by the antioxidant contained in the sample dropped on the sample dropping part, and the third reagent It is a chelate color former that develops color when the transition metal that has infiltrated the observation section is reduced by the reducing agent.
An anti-oxidation ability determination device.
請求項2の発明は、前記第三観測部における発色により前記試料滴下部に滴下された前記試料が前記第三観測部にまで浸潤したことを確認し、
前記第一観測部における発色状態と、前記第二観測部における発色状態との比較により前記試料の抗酸化能の有無を判定する
請求項1記載の抗酸化能判定具である。
The invention of
2. The antioxidant capacity determination tool according to claim 1, wherein the presence or absence of the antioxidant capacity of the sample is determined by comparing the color development state in the first observation section and the color development state in the second observation section .
請求項3の発明は、 前記遷移金属は銅、鉄、又は亜鉛から選択される請求項1又は2記載の抗酸化能判定具。
The invention according to
請求項4の発明は、前記支持体は紙材又は繊維材よりなる請求項1乃至3のいずれか一項記載の抗酸化能判定具である。 A fourth aspect of the present invention is the antioxidant capacity determination device according to any one of the first to third aspects, wherein the support is made of a paper material or a fiber material.
本発明によれば、高価な装置や特殊な操作方法を要せず、簡便迅速に試料の抗酸化能を判定できる抗酸化能判定具を提供することができる。 ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, an antioxidant apparatus determination tool which can determine the antioxidant capacity of a sample simply and rapidly without requiring an expensive apparatus and a special operation method can be provided.
以下、添付図面を参照して本発明の一実施形態について説明する。 Hereinafter, an embodiment of the present invention will be described with reference to the accompanying drawings.
図1は、本発明の抗酸化能判定具の一実施形態を示す図である。濾紙などの紙材又は繊維材よりなる支持体2に、抗酸化能を判定すべき試料を滴下する試料滴下部3、発色試薬が含まれた第一観測部4、遷移金属を含む試薬が含まれた第二観測部5及び還元剤が含まれた第三観測部6が備えられ、抗酸化能判定具1が構成される。
FIG. 1 is a diagram showing an embodiment of the antioxidant capacity determination tool of the present invention. Included are a
本発明では、抗酸化能判定具1を構成する支持体2において、試料滴下部3とする箇所から近い順に、第一観測部4、第二観測部5、第三観測部6としている。そこで、図1図示のように、抗酸化能判定具1を構成する支持体2の一端側を試料滴下部3とし、ここから近い順に、第一観測部4、第二観測部5、第三観測部6とし、前述した発色試薬、遷移金属を含む試薬、還元剤が、それぞれの箇所に含浸されているようにすることが望ましい。
In this invention, in the
支持体2は、抗酸化能の判定に適宜な形状であればよく、本実施形態では1枚の濾紙をスティック状に形成した。
The
本発明は、後述するように、支持体2の試料滴下部3に抗酸化能を判定すべき試料を滴下し、滴下した試料が支持体2が備えている吸水性、浸透性により支持体2中を浸透していくことにより試料の抗酸化能を判定するものである。そこで、支持体2は吸水性、浸透性を備えている部材であれば、種々の材質から構成することができる。例えば、支持体2を濾紙などの紙材又は繊維材とすることで、抗酸化能判定具の構成を単純、安価なものとすることができる。
In the present invention, as will be described later, a sample whose antioxidant ability is to be determined is dropped on the
支持体2を展開し、支持体2の一端側である試料滴下部3に抗酸化能を判定すべき試料を滴下すると、支持体2の吸水性、浸透性により前記試料は、試料滴下部3から第一観測部4、第二観測部5、第三観測部6の順に支持体2中に浸潤していく。
When the
例えば、図1図示のように、ガラス製や金属製などの基板7の上に支持体2を展開し、支持体2の一端側の試料滴下部3に抗酸化能を判定すべき試料、例えば果汁などを滴下する。滴下された試料(果汁)は、支持体2の吸水性、浸透性により、試料滴下部3から第一観測部4、第二観測部5、第三観測部6の順に矢印8の方向に沿って支持体2中を浸潤していく。
For example, as shown in FIG. 1, a
そこで、第一観測部4では試料(果汁)と発色試薬とが混合し、第二観測部5では試料(果汁)と試薬とが混合し、第三観測部6では試料(果汁)と還元剤とが混合する。
Therefore, the first observation unit 4 mixes the sample (fruit juice) and the coloring reagent, the
第二観測部5に含まれる試薬には遷移金属、例えば、2価の銅(Cu2+)が含まれている。試料(果汁)が第二観測部5に到達すると、試料(果汁)に含まれている抗酸化物質により2価の銅(Cu2+)は還元され1価の銅(Cu1+)となる。この還元された1価の銅(Cu1+)が、第一観測部4で試料(果汁)と混合し、試料(果汁)中に溶解している発色試薬と反応する。この反応によって生じた色を検出することで試料(果汁)が抗酸化能を有するか否か判定することができる。
The reagent contained in the
第三観測部6はポジティブコントロールの役割を果たす部分である。すなわち、試料滴下部3に滴下された試料が第二観測部5を経由して第三観測部6に到達したことを確認するために用いられる部分である。
The
試料滴下部3に滴下された試料は、第一観測部4で発色試薬と混合し、第二観測部5で遷移金属を含んでいる試薬と混合する。そこで、第三観測部6に到達した試料には、第一観測部4に含まれていた発色試薬、第二観測部5の試薬に含まれていた遷移金属がそれぞれ溶解している。
The sample dropped on the
例えば、前述したように、第二観測部5に含まれる試薬に遷移金属として2価の銅(Cu2+)が含まれていて、第三観測部6に含まれる還元剤として尿酸を用いている場合、試料が第三観測部6に到達すると、尿酸に含まれている抗酸化物質により試料に溶解している2価の銅(Cu2+)は還元され、1価の銅(Cu1+)となる。そして、この1価の銅(Cu1+)が、試料に溶解している発色試薬と反応することによって生じた色を検出することで試料が第三観測部6に到達したか否か判定することができる。
For example, as described above, the reagent included in the
次に、本発明の抗酸化能判定具1を用いて、試料が抗酸化能を備えているか否かを判定するプロセスの一例を図2を用いて説明する。 Next, an example of a process for determining whether or not a sample has antioxidant ability using the antioxidant ability determining tool 1 of the present invention will be described with reference to FIG.
図2(a)のように、濾紙製でスティック状の支持体2からなる本発明の抗酸化能測定具1を展開し、試料滴下部3に試料を滴下する。
As shown in FIG. 2 (a), the antioxidant capacity measuring instrument 1 of the present invention comprising a stick-
支持体2の吸水性、浸透性により試料は、試料滴下部3から第一観測部4、第二観測部5、第三観測部6の順に支持体2中を矢印8の方向に沿って浸潤していく。
Due to the water absorption and permeability of the
第一観測部4では滴下された試料と第一観測部4に含有されている発色試薬であるキレート発色剤とが混合し、キレート発色剤が試料中に溶解する。 In the first observation unit 4, the dropped sample and the chelate color former, which is a color development reagent contained in the first observation unit 4, are mixed, and the chelate color former is dissolved in the sample.
第二観測部5ではキレート発色剤が溶解している試料が、遷移金属である2価の銅(Cu2+)を含んでいて第二観測部5に含有されている試薬と混合する。そこで、第二観測部5に含有されている試薬に含まれている遷移金属である2価の銅(Cu2+)が試料中に溶解する。
In the
第三観測部6では、第一観測部4に含有されていたキレート発色剤および、第二観測部5に含有されている試薬に含まれている遷移金属(2価の銅(Cu2+))が溶解している試料が、第三観測部6に含有されている還元剤、例えば、尿酸と混合する。
In the
そこで、試料が抗酸化能を有する場合には、図2(b)で示されるような発色パターンになる。 Therefore, when the sample has an antioxidant ability, a coloring pattern as shown in FIG.
すなわち、試料滴下部3に滴下された試料が第二観測部5に到達すると、試料に含まれている抗酸化物質により、第二観測部5の試薬に含まれている2価の銅(Cu2+)が1価の銅(Cu1+)に還元される還元反応が生じる。そして、この1価の銅(Cu1+)と、第一観測部4で試料に溶解したキレート発色剤とが反応して発色し、発色パターン5aが形成される。このとき、第一観測部4では発色反応は生じておらず、支持体2が有する発色パターン4aのままである。
That is, when the sample dropped on the
また、試料滴下部3に滴下された試料が第三観測部6に到達すると、第三観測部6に含まれている尿酸に含まれている抗酸化物質により、第二観測部5で試料に溶解した試薬に含まれている2価の銅(Cu2+)が1価の銅(Cu1+)に還元される還元反応が生じる。そして、この1価の銅(Cu1+)が、試料に溶解している第一観測部4のキレート発色剤と反応して発色し、発色パターン6aが形成される。
Further, when the sample dropped on the
そこで、図2(b)図示の発色パターンになった場合には、試料が抗酸化能を備えていると判定することができる。 Therefore, when the color pattern shown in FIG. 2B is obtained, it can be determined that the sample has an antioxidant ability.
一方、試料が抗酸化能を有さない場合の発色パターンは図2(c)図示のようになる。 On the other hand, the color development pattern when the sample does not have antioxidant ability is as shown in FIG.
すなわち、試料滴下部3に滴下された試料が第二観測部5に到達し、第二観測部5に含まれている遷移金属、例えば、2価の銅(Cu2+)を含んでいる試薬と、第二観測部5に到達した試料とが混合しても、試料が抗酸化能を有さないので、遷移金属(2価の銅(Cu2+))との間に還元反応は生じない。
That is, the sample dropped on the
このため、第二観測部5では発色反応も生じず、支持体2が有する発色パターン5bのままである。また、第一観測部4でも発色反応は生じておらず、支持体2が有する発色パターン4bのままである。
For this reason, the second observing
一方、試料滴下部3に滴下された試料が第三観測部6に到達すると、第三観測部6に含まれている尿酸が有する抗酸化物質により、第二観測部5で試料に溶解した試薬に含まれている2価の銅(Cu2+)が1価の銅(Cu1+)に還元される還元反応が生じる。そして、この1価の銅(Cu1+)が、試料に溶解している第一観測部4のキレート発色剤と反応して発色し、発色パターン6bが形成される。
On the other hand, when the sample dropped on the
こうして、第二観測部5で発色反応が生じなくても、第三観測部6で発色パターンを確認できることにより、試料滴下部3に滴下された試料が第二観測部5を経由して第三観測部6まで到達できたことを確認できる。
Thus, even if the color development reaction does not occur in the
そして、試料滴下部3に滴下された試料が第二観測部5を経由して第三観測部6まで到達しているにもかかわらず、第二観測部5で発色反応が生じていないことから、試料が抗酸化能を備えていない、と判定することができる。
Since the sample dropped on the
なお、図2(d)図示のような発色パターンとなり、第一観測部4、第二観測部5、第三観測部6のいずれにおいても発色反応が発生し、それぞれ、発色パターン4c、5c、6cが形成される場合は、判定不能ということになる。
2 (d), the color development reaction occurs in any of the first observation unit 4, the
上述したように、本発明の抗酸化能判定具1は極めて簡単、かつ単純な構成にすることができる。 As described above, the antioxidant capacity determination tool 1 of the present invention can be configured to be extremely simple and simple.
また、抗酸化能を備えているかどうか判定すべき試料を試料滴下部3へ滴下した後、第二観測部5及び第三観測部6それぞれに発色パターンが形成されるまでの要する時間は約3分ほどである。そこで、迅速に、かつ1ステップで半定量の測定結果を得ることができる。
In addition, after the sample to be determined whether it has anti-oxidation ability is dropped onto the
しかも、試薬等の調整も必要なく、判定者は、抗酸化能を備えているかどうか判定すべき試料を試料滴下部3に滴下するだけなので使用方法も簡単である。
Moreover, there is no need for adjustment of reagents or the like, and the judging person simply drops the sample to be judged whether or not it has anti-oxidation ability onto the
なお、前述した図2(b)図示のような発色パターンが形成されている抗酸化能判定具1をスキャナなどの光学機器を用いて分析すれば、抗酸化能の定量測定も可能である。 In addition, if the antioxidant ability determination tool 1 in which the coloring pattern as shown in FIG. 2B is formed is analyzed using an optical device such as a scanner, the antioxidant ability can be quantitatively measured.
前記では、抗酸化能判定具1を構成する支持体2の第二観測部5に含有されている遷移金属を銅とし、第一観測部4に含まれている発色試薬(キレート発色剤)には、抗酸化物質によって銅の還元反応が生起された際に発色(色の変化)を起こすものが使用されていた。
In the above, the transition metal contained in the
しかし、第二観測部5に含有されている試薬に含まれている遷移金属は銅に限られない。第二観測部5に含有されている試薬に含まれている遷移金属を鉄や亜鉛とし、これらと試料が有する抗酸化物質との還元反応を利用して試料が抗酸化能を備えているかどうか判定することができる。なお、これらの場合、第一観測部4に含まれている発色試薬(キレート発色剤)には、抗酸化物質によって鉄や亜鉛の還元反応が生起した際に発色(色の変化)を起こす発色試薬(キレート発色剤)が使用されることになる。
However, the transition metal contained in the reagent contained in the
(実験例)
尿酸水溶液及び蒸留水を試料として用いて本発明の抗酸化能判定具1を用いた抗酸化能の判定について確認実験を行った。
(Experimental example)
A confirmation experiment was performed on the determination of the antioxidant ability using the antioxidant ability determining tool 1 of the present invention using an aqueous uric acid solution and distilled water as samples.
本実験例で使用する抗酸化能判定具9は、脱脂綿よりなる支持体10に、試料を滴下する試料滴下部11、キレート発色剤が含まれた第一観測部12、2価の銅(Cu2+)を含む試薬が含まれた第二観測部13及び尿酸が含まれた第三観測部14を備えている。
Antioxidant
試料を尿酸水溶液とした場合、図3(a)で示されるように、第一観測部12では支持体10の有する発色パターン12aが観測され、第二観測部13では、尿酸が有する抗酸化物質により、尿酸水溶液と混合した試薬に含まれている2価の銅(Cu2+)が1価の銅(Cu1+)に還元され、この1価の銅(Cu1+)と、第一観測部12で尿酸水溶液に混合、溶解しているキレート発色剤とが反応し、発色パターン13aが観測された。
When the sample is a uric acid aqueous solution, as shown in FIG. 3A, the
第三観測部14でも、尿酸水溶液に第二観測部13で混入、溶解した2価の銅(Cu2+)が、第三観測部14に含まれている還元剤(尿酸)によって1価の銅(Cu1+)に還元され、この1価の銅(Cu1+)と、第一観測部12で尿酸水溶液に混合、溶解しているキレート発色剤とが反応し、発色パターン14aが観測された。
Also in the
このような図3(a)図示の各発色パターンにより、試料滴下部11に滴下する試料が、尿酸水溶液のように、抗酸化能を有する場合、前述した図2(b)図示の発色パターンが形成され、本発明の抗酸化能判定具9を用いて試料が抗酸化能を備えているか否かを簡便に判定できることを確認できた。
When the sample dripped onto the
試料を蒸留水とした場合、図3(b)で示されるように、第一観測部12及び第二観測部13では、それぞれ支持体10の有する発色パターン12b、13bが観測された。また、第三観測部14では、第三観測部14に含まれている尿酸が有する抗酸化物質により、前記蒸留水に第二観測部13で混入・溶解した前記試薬に含まれている2価の銅(Cu2+)が1価の銅(Cu1+)に還元され、この1価の銅(Cu1+)と、第一観測部12で蒸留水に混入・溶解したキレート発色剤とが反応して発色し、発色パターン14bが観測された。
When the sample was distilled water, as shown in FIG. 3B, the
このような図3(b)図示の各発色パターンにより、試料滴下部11に滴下する試料が、蒸留水のように、抗酸化能を有しない場合、前述した図2(c)図示の発色パターンが形成され、本発明の抗酸化能判定具9を用いて試料が抗酸化能を備えているか否かを簡便に判定できることを確認できた。
When the sample dripped onto the
以上、添付図面を参照して本発明の好ましい実施形態を説明したが、本発明はかかる実施形態に限定されるものではなく、特許請求の範囲の記載から把握される技術的範囲において種々に変更可能である。 The preferred embodiments of the present invention have been described above with reference to the accompanying drawings, but the present invention is not limited to such embodiments, and various modifications can be made within the technical scope grasped from the description of the claims. Is possible.
1、9 抗酸化能判定具
2、10 支持体
3、11 試料滴下部
4、12 第一観測部
5、13 第二観測部
6、14 第三観測部
DESCRIPTION OF
Claims (4)
前記試料滴下部から近い順に前記支持体に備えられた第一観測部、第二観測部及び第三観測部とを備えてなり、
前記第一観測部には発色試薬が含まれ、
前記第二観測部には遷移金属を含む試薬が含まれ、
前記第三観測部には還元剤が含まれ、
前記発色試薬が、前記試料滴下部に滴下された試料とともに前記第二観測部に浸潤し、更に、前記試料滴下部に滴下された前記試料及び前記第二観測部に含まれている前記遷移金属とともに前記第三観測部に浸潤する、前記試料の抗酸化能の有無を判定する、抗酸化能判定具であって、
前記発色試薬は、前記第二観測部に含まれている前記遷移金属が前記試料滴下部に滴下された前記試料に含まれている抗酸化物質によって還元された際に発色するとともに、前記第三観測部に浸潤してきた前記遷移金属が前記還元剤によって還元された際に発色するキレート発色剤である
抗酸化能判定具。 A sample dropping portion provided in the supporting lifting member,
Comprising a first observation unit, a second observation unit and a third observation unit provided on the support in order from the sample dropping unit;
The first observation part includes a coloring reagent,
The second observation part includes a reagent containing a transition metal,
The third observation part includes a reducing agent ,
The coloring reagent infiltrates the second observation part together with the sample dropped on the sample dropping part, and further, the sample dropped on the sample dropping part and the transition metal contained in the second observation part infiltrating the third observation unit with, determines the presence or absence of antioxidant capacity of the sample, an anti-oxidation ability determination device,
The coloring reagent develops color when the transition metal contained in the second observation part is reduced by the antioxidant contained in the sample dropped on the sample dropping part, and the third reagent It is a chelate color former that develops color when the transition metal that has infiltrated the observation section is reduced by the reducing agent.
Antioxidant capacity determination tool.
前記第一観測部における発色状態と、前記第二観測部における発色状態との比較により前記試料の抗酸化能の有無を判定する
請求項1記載の抗酸化能判定具。 Confirm that the sample dropped on the sample dropping part by color development in the third observation part has infiltrated the third observation part,
The antioxidant capacity determination tool according to claim 1, wherein the presence or absence of the antioxidant capacity of the sample is determined by comparing the color development state in the first observation section and the color development state in the second observation section .
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