JP5774687B2

JP5774687B2 - Tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188-labeled cyclic RGD derivative, method for producing the same, and pharmaceutical composition for diagnosis or treatment of neovascular diseases involving the same as an active ingredient

Info

Publication number: JP5774687B2
Application number: JP2013512534A
Authority: JP
Inventors: ビョンチョルイ; サンウンキム; ジソンキム; ビョンソクムン; ジェホジョン
Original assignee: バイオイメージングコリアカンパニーリミテッド
Priority date: 2010-05-24
Filing date: 2011-05-24
Publication date: 2015-09-09
Anticipated expiration: 2031-05-24
Also published as: EP2583966A2; WO2011149250A2; US9439986B2; EP2583966B1; JP2013533852A; US20130064766A1; EP2583966A4; WO2011149250A3; CN102985413A; CN102985413B; KR20110128732A; KR101383655B1

Description

本発明は、トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体、その製造方法及びそれを有効成分として含む新生血管関連疾患の診断または治療用薬学的組成物に関するものである。 The present invention relates to a tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188-labeled cyclic RGD derivative, a method for producing the same, and a pharmaceutical composition for diagnosis or treatment of neovascular-related diseases comprising the same as an active ingredient.

癌の完全治癒が現代医学の重要課題になった時点で、標的分子と特異的に反応する放射性追跡子を用いて、非浸湿的に癌の早期診断及び治療のために疾病の分子水準変化観察が可能な核医学的診断及び治療技術の重要性は広く知られている。 When complete cure of cancer has become an important issue in modern medicine, the molecular level of the disease can be changed for early diagnosis and treatment of cancer in a non-wet manner using a radioactive tracer that reacts specifically with the target molecule The importance of observable nuclear medicine diagnosis and treatment techniques is widely known.

既存の陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）用放射性医薬品である［^１８Ｆ］−ＦＤＧ（２−フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース）は、広く体内癌診断で広く使用されてはいるが、脳腫瘍の診断や、炎症と腫瘍との区別ができないというなどの短所があり、また癌の新生血管生成及び転移症侯に対する情報を提供するには限界性がある。 [ ¹⁸ F] -FDG (2-fluoro-2-deoxy-D-glucose), an existing radiopharmaceutical for positron emission tomography (PET), has been widely used in in vivo cancer diagnosis, but There are disadvantages such as inability to distinguish between inflammation and tumor, and there is a limit to providing information on neovascularization of cancer and metastatic disease.

癌の新生血管作用は、原発性または転移性腫瘍において必須であり、癌組織は新生血管による営養分と酸素供給がなければ、１−２ｍｍ^３以上成長することができない。このように新生血管作用が起きる間、原発性癌細胞が血管内に流入して他の場所に移動して転移癌を形成するようになる。したがって、新生血管映像ターゲットはすべての固形性腫瘍で共通的に使用することができるという可能性を有している。治療面では既存の抗癌化学療法は、癌の細胞が早く成長する特徴を用いた治療であるので、細胞周期が早い骨髄細胞、胃腸関係細胞など正常細胞に毒性を示す一方、新生血管作用ターゲット治療は、長期投与でも比較的少ない副作用と血管細胞が治療の対象という点で耐性を示す可能性が少ない。 Cancer's neovascular effects are essential in primary or metastatic tumors, and cancerous tissue cannot grow more than 1-2 mm ³ without nutrients and oxygen supply by the new blood vessels. Thus, while the neovascular action occurs, primary cancer cells flow into the blood vessels and move to other places to form metastatic cancer. Therefore, there is a possibility that the neovascular image target can be commonly used in all solid tumors. In terms of treatment, existing anti-cancer chemotherapy is a treatment that uses the characteristics that cancer cells grow faster, so it is toxic to normal cells such as bone marrow cells and gastrointestinal cells that have a fast cell cycle, while it is a target for neovascularization. Treatment is relatively unlikely to be resistant in that it has relatively few side effects and vascular cells being treated, even with long-term administration.

癌の成長メカニズム過程としての新生血管は、癌組織近くの血管内α_ｖβ_３インテグリン（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）の過多分布を始めとして進行することが知られている。インテグリンは、細胞の付着や移動などに関与するα及びβサブユニットで構成されたヘテロダイマー細胞膜タンパク質であり、細胞によって多くの種類が存在する。その中で新生血管には、ビトロネクチン受容体とも呼ばれるα_ｖβ_３種が重要で、平常の血管内皮細胞には発現せず、癌による新生血管作用が活性化になった場合にのみ発現する。このインテグリンと相互作用するタンパク質には、共通的にアルギニン−グリシン−アスパラギン酸（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ，ＲＧＤ）ペプチドシーケンスが存在して結合部位の役割をする。このような化合物を基にα_ｖβ_３インテグリン正常機能を防ぐより高い結合親和度を有する拮抗物質として、環形ペプチド構造であるサイクリックＲＧＤ（ｃｙｃｌｉｃＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ，ｃＲＧＤ）ペプチド化合物があり、今まで多くの国内外の研究機関を通じてこの化合物に多様な放射性同位元素を導入して、癌の新生血管映像化研究が進められてきた。 It is known that neovascularization as a growth mechanism process of cancer proceeds with an excessive distribution of intravascular α _v β ₃ integrin (integrin) near cancer tissue. Integrins are heterodimeric cell membrane proteins composed of α and β subunits involved in cell attachment and migration, and there are many types depending on the cell. Among them, α _v β ₃ species called vitronectin receptors are important for new blood vessels, and are not expressed in normal vascular endothelial cells, but are expressed only when the neovascular action by cancer is activated. The protein that interacts with this integrin commonly has an arginine-glycine-aspartic acid (Arg-Gly-Asp, RGD) peptide sequence and serves as a binding site. As an antagonist having a higher binding affinity that prevents normal function of α _v β ₃ integrin based on such a compound, there is a cyclic RGD (cyclic Arg-Gly-Asp, cRGD) peptide compound having a cyclic peptide structure, Until now, various radioisotopes have been introduced into this compound through many domestic and overseas research institutes, and cancer neovascularization research has been promoted.

多様なサイクリックＲＧＤ誘導体に用いた放射性同位元素は、ＰＥＴ用フルオリン−１８、ガリウム−６８と銅−６４等と、ＳＰＥＣＴ用でテクネシウム−９９ｍ、ヨード−１２３、インジウム−１１１等が標識核種に使用され、肝組織での排出を早く誘導するために単糖類を付着させることで放射性追跡子の薬物動態を良くしたり、より高い結合親和度を有するようにしたりするために２個または４個のサイクリックＲＧＤを付着した放射性追跡子が研究された（参照論文: 非特許文献１〜７）。しかし、多様な放射性同位元素標識サイクリックＲＧＤ誘導体が開発されたが、高い肝摂取及び腸での排出速度が遅い短所を有していて、腫瘍組織対正常組織間の蓄積の割合が低くくて映像の限界性を有していて、治療用放射性同位元素標識放射性追跡子の場合、正常組織にも損傷を及ぼすため、いまだに臨床適用研究が活発ではないのが現状である。 Radioisotopes used for various cyclic RGD derivatives are fluorin-18 for PET, gallium-68 and copper-64, and technesium-99m, iodo-123, indium-111, etc. are used for labeled nuclides for SPECT. 2 or 4 to improve the pharmacokinetics of the radiotracer by attaching a monosaccharide to induce rapid elimination in liver tissue or to have a higher binding affinity. Radiotracers with cyclic RGD attached have been studied (reference papers: Non-Patent Documents 1-7). However, a variety of radioisotope-labeled cyclic RGD derivatives have been developed, but have the disadvantages of high liver intake and slow intestinal excretion, and a low rate of accumulation between tumor tissue and normal tissue. In the case of a radioisotope labeled with therapeutic radioisotope, which has a limit of imaging, it is still active in clinical application research because it damages normal tissues.

さまざまな放射性同位元素の中で、テクネシウム−９９ｍとレニウム−１８８は、すべての病院で単光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳｉｎｇｌｅＰｈｏｔｏｎＥｍｉｓｓｉｏｎＣｏｍｐｕｔｅｄＴｏｍｏｇｒａｐｈｙ；ＳＰＥＣＴ）スキャナと発生器さえあれば、簡単な標識方法と分離工程を通じてＳＰＥＣＴ映像を通じた診断を行なうことができて活用的、実用的な面で優れた放射性同位元素であり、同じ前駆体を用いて治療目的にレニウムを選択して標識することができる長所を有している。 Among various radioisotopes, technesium-99m and rhenium-188 are simple labels in all hospitals with a single photon emission computed tomography (SPECT) scanner and generator. It is a radioisotope that can be diagnosed through SPECT images through the method and the separation process, and is excellent in practical and practical aspects. It can select and label rhenium for therapeutic purposes using the same precursor. Has the advantage of being able to.

しかし、既存のテクネシウム−９９ｍとレニウム−１８８標識方法では、標識ポケットのサイズが大きくて体内安定性が低く前駆体合成が容易でないため、効果的な放射性追跡子を開発するのに多くの制約を有している。それとは異なりトリカルボニルテクネシウム−９９ｍとトリカルボニルレニウム−１８８は、前駆体合成が容易で、標識ポケットが小さくて安定していて、簡単な製造工程の変化で放射性追跡子の電荷を変化させることができる。それとともに体内で安定し、標識された放射性追跡子が体内代謝時に甲状腺に集まらないで早く体外に排出されることによって、相対的に良い映像を提供するなど、効率性が高い同位元素追跡子として重要視されている。このようなトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８の利用は、まだ微々であるが、新しい放射性医薬品開発のために国内外で研究が進行されている。 However, the existing technesium-99m and rhenium-188 labeling methods have many limitations in developing effective radioactive tracers due to the large size of the label pocket, low stability in the body, and difficulty in precursor synthesis. Have. In contrast, tricarbonyltechnesium-99m and tricarbonylrhenium-188 are easy to synthesize precursors, have small label pockets and are stable, and can change the charge of the radioactive tracer through simple manufacturing process changes. it can. At the same time, it is stable in the body, and the labeled radioactive tracer is released from the body quickly without being collected in the thyroid gland during metabolism in the body, providing a relatively good image, etc. It is important. Although the use of such tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 is still insignificant, research is ongoing at home and abroad for the development of new radiopharmaceuticals.

そこで、本発明者らは癌の新生血管作用の有力バイオマーカーであるα_ｖβ_３インテグリンターゲット映像及び治療用医薬品として、新しいトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体を合成して、多様な生物学的評価結果を通じて、それらトリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識ＲＧＤ誘導体が優れた新生血管関連疾患の診断及び治療が可能な物質であることを確認して本発明を完成した。 Therefore, the present inventors synthesized a novel tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative as an α _v β ₃ integrin target image which is a potent biomarker of cancer neovascular action and a therapeutic drug. The present invention was completed by confirming that these tricarbonyltechnesium or rhenium-labeled RGD derivatives were excellent substances capable of diagnosing and treating neovascular diseases, through various biological evaluation results.

Haubner, R., Wester, H-J., Weber, W.A., Mang, C., Ziegler, S. I., Goodman, S. L., Senekowitsch-Schmidtke, R., Kessler, H., Schwaiger, M., Cancer Res., 2001年,第61巻，p.1781-1785Haubner, R., Wester, HJ., Weber, WA, Mang, C., Ziegler, SI, Goodman, SL, Senekowitsch-Schmidtke, R., Kessler, H., Schwaiger, M., Cancer Res., 2001 61, p.1781-1785 Jeong, J.M., Hong, M.K., Chang, Y.S., Lee, Y.S., Kim, Y.J., Cheon, G.J., Lee, D.S., Chung, J.K., Lee, M.C., J. Nucl. Med., 2008年,第49巻，p.830-836Jeong, JM, Hong, MK, Chang, YS, Lee, YS, Kim, YJ, Cheon, GJ, Lee, DS, Chung, JK, Lee, MC, J. Nucl. Med., 2008, Vol. 49, p.830-836 Chen, W., Park, R., Tohme, M., Shahinian, A.H., Bading, J.R., Conti, P.S. Bioconjugate Chem., 2004, 15:41-49Chen, W., Park, R., Tohme, M., Shahinian, A.H., Bading, J.R., Conti, P.S.Bioconjugate Chem., 2004, 15: 41-49 Liu, S., Hsieh, W.Y., Kim, Y.S., Mohammel, S. I., Bioconjugate Chem., 2005 年,第16巻，p.1580-1588Liu, S., Hsieh, W.Y., Kim, Y.S., Mohammel, S. I., Bioconjugate Chem., 2005, Vol. 16, p.1580-1588 Haubner, R., Wester, H-J., Reuning, U., Senekowitsch-Schmidtke, R., Diefenbach, B., Kessler, H., Stocklin G., Schwaiger, M., J. Nucl. Med., 1999 年,第40巻，p.1061-1071Haubner, R., Wester, HJ., Reuning, U., Senekowitsch-Schmidtke, R., Diefenbach, B., Kessler, H., Stocklin G., Schwaiger, M., J. Nucl. Med., 1999 40, p.1061-1071 Janssen, M., Oyen, W.J.G., Dijkgraaf, I., Massuger, L.F.A.G., Frielink, C., Edwards, D.S., Rajopadyhe, M., Boonstra, H., Corsten, F.H.M., Boerman, O.C., Cancer Res., 2002 年,第62巻，p.6146-6151Janssen, M., Oyen, WJG, Dijkgraaf, I., Massuger, LFAG, Frielink, C., Edwards, DS, Rajopadyhe, M., Boonstra, H., Corsten, FHM, Boerman, OC, Cancer Res., 2002 Year 62, p.6146-6151 Wu, Y., Zhang, X., Xiong, Z., Cheng, Z., Fisher, D.R., Liu, S., Gambhir, S.S., Chen, X., J. Nucl. Med., 2005 年,第46巻，p.1707-1718Wu, Y., Zhang, X., Xiong, Z., Cheng, Z., Fisher, DR, Liu, S., Gambhir, SS, Chen, X., J. Nucl. Med., 2005, 46th Volume, p.1707-1718

本発明の目的は、新生血管関連疾患の診断または治療に有用に用いることができるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を提供することにある。 An object of the present invention is to provide a tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188-labeled cyclic RGD derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof that can be usefully used for diagnosis or treatment of neovascular-related diseases. .

本発明の他の目的は、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の製造方法を提供することにある。 Another object of the present invention is to provide a method for producing the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative.

本発明のまた他の目的は、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体を提供することにある。 It is another object of the present invention to provide a precursor of the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative.

本発明のまた他の目的は、前記トリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む、新生血管関連疾患の診断または治療用薬学的組成物を提供することにある。 Still another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for diagnosing or treating neovascular diseases, comprising the tricarbonyltechnesium or rhenium labeled cyclic RGD derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. There is to do.

前記目的を達成するために、本発明は、下記化学式１のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。 In order to achieve the above object, the present invention provides a tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative represented by the following chemical formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

（前記式中１、Ｍ、Ｒ^１、Ｘ及びＹは本明細書で定義したとおりである） (In the formula, 1, M, R ¹ , X and Y are as defined in the present specification)

また、本発明は、トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の製造方法を提供する。 The present invention also provides a method for producing tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative.

さらに、本発明は、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体を提供する。 Furthermore, the present invention provides a precursor of the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative.

また、本発明は、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む新生血管関連疾患の診断または治療用薬学的組成物を提供する。 The present invention also provides a pharmaceutical composition for diagnosing or treating neovascular diseases, which comprises the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. To do.

本発明のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体は、腫瘍によって誘導される新生血管作用で活性化になったビトロネクチン受容体とも呼ばれるα_ｖβ_３インテグリンにサブナノモル単位の高い親和度を有し、癌細胞が移植された動物でトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の初期摂取後、高い腫瘍映像を反映して肝臓と腸での摂取率が、既存に知られた放射性同位元素標識サイクリックＲＧＤ誘導体に比べて顕著に低くて選択的にα_ｖβ_３インテグリンが活性化した癌細胞にのみ作用することが分かり、このような結果を基に、テクネシウム−９９ｍ標識に使用した同一な前駆体を用いた治療核種であるレニウム−１８８標識誘導体の場合、生理食塩水のみ注入した腫瘍動物モデルとは異なり、尾静脈注入時に効果的な腫瘍の成長阻害と治療効能を示すことから、あつらえ形新生血管関連疾患の診断または治療用医薬品として有用に用いることができる。 The tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative of the present invention has a high sub-nanomolar affinity for α _v β ₃ integrin, also called vitronectin receptor activated by neovascular action induced by tumors. After initial ingestion of tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD derivative in animals transplanted with cancer cells, the ingestion rate in the liver and intestine reflects the high tumor image, and the known radioisotope see that the element labeled cyclic selectively alpha _v beta ₃ integrin notably lower than that RGD derivative acts only on cancer cells activated, based on these results, were used in technetium -99m labeled In the case of a rhenium-188 labeled derivative which is a therapeutic nuclide using the same precursor, physiological saline Unlike viewed implanted tumor animal models, because it exhibits an effective tumor growth inhibiting and treatment efficacy of at tail vein injection, it can be usefully employed as a diagnostic or therapeutic pharmaceutical custom shaped neovascular-related diseases.

本発明の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、腫瘍摂取及び臓器別排出結果を示すグラフである。It is a graph which shows the tumor ingestion and excretion result according to organ in the body tumor model mouse | mouth of the tricarbonyl technesium-99m labeling cyclic RGD derivative by one Example of this invention. 本発明の他の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、腫瘍摂取及び臓器別排出結果を示すグラフである。It is a graph which shows the tumor ingestion and excretion result according to organ in the in-vivo tumor model mouse of the tricarbonyltechnesium-99m labeled cyclic RGD derivative by other one Example of this invention. 本発明のまた他の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、腫瘍摂取及び臓器別排出結果を示すグラフである。It is a graph which shows the tumor ingestion and the discharge | emission result according to organ in the internal tumor model mouse of the tricarbonyltechnesium-99m labeling cyclic RGD derivative by another one Example of this invention. 本発明の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、ＳＰＥＣＴ映像を撮影した写真である。It is the photograph which image | photographed the SPECT image | video in the in-vivo tumor model mouse of the tricarbonyltechnesium-99m labeling cyclic RGD derivative by one Example of this invention. 本発明の他の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、ＳＰＥＣＴ映像を撮影した写真である。6 is a photograph of a SPECT image of a tricarbonyltechnesium-99m labeled cyclic RGD derivative in vivo tumor model mouse according to another embodiment of the present invention. 本発明のまた他の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、ＳＰＥＣＴ映像を撮影した写真である。FIG. 5 is a photograph of a SPECT image taken in a body tumor model mouse of a tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD derivative according to another embodiment of the present invention. 本発明の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、臓器摂取率グラフ及び時間帯別に腫瘍対肝臓、腫瘍対腎臓そして腫瘍対正常細胞の摂取率グラフである。FIG. 6 is an organ uptake rate graph and an uptake rate graph of tumor vs. liver, tumor vs. kidney, and tumor vs. normal cells by time zone in an in vivo tumor model mouse of a tricarbonyltechnesium-99m labeled cyclic RGD derivative according to an embodiment of the present invention. is there. 本発明の一実施例によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の体内腫瘍モデルマウスでの、サイクリックＲＧＤ誘導体（ｃＲＧＤｙＶ）注入後のＳＰＥＣＴ映像を撮影した写真である。It is the photograph which image | photographed the SPECT image | video after the cyclic | annular cyclic | annular RGD derivative (cRGDyV) injection | pouring in the in-vivo tumor model mouse of the tricarbonyl technesium-99m labeling cyclic RGD derivative by one Example of this invention. 本発明の一実施例によるトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体のモデルマウスの腫瘍の大きさ及び体重に及ぼす影響を示すグラフである。It is a graph which shows the influence which it has on the tumor size and body weight of the model mouse | mouth of the tricarbonyl rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative by one Example of this invention. 本発明の一実施例によるトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体のモデルマウスの腫瘍の大きさ及び体重に及ぼす影響を示すＳＰＥＣＴ映像及び関心領域別臓器の摂取率グラフである。It is a SPECT image and the uptake rate graph of the organ according to the region of interest showing the influence of the tricarbonyl rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative on the tumor size and body weight of the model mouse according to one embodiment of the present invention. 本発明の一実施例によるトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体注入後、モデルマウスの腫瘍の大きさ及びトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤＳＰＥＣＴ映像摂取率に及ぼす影響を示し、腫瘍組織スライスをＣＤ−３１染色とＱ−ｄｏｔ−二個のＲＧＤ誘導体を利用した共焦点顕微鏡写真である。After injection of tricarbonylrhenium-188-labeled cyclic RGD derivative according to one embodiment of the present invention, the effect on tumor size and tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD SPECT video uptake rate of model mice is shown. Is a confocal micrograph using CD-31 staining and Q-dot-2 RGD derivatives.

以下、本発明を詳細に説明する。 Hereinafter, the present invention will be described in detail.

本発明は、下記化学式１で表されるトリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。 The present invention provides a tricarbonyltechnesium or rhenium labeled cyclic RGD derivative represented by the following chemical formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

（前記化学式１で、Ｍは^９９ｍＴｃ、^１８８Ｒｅまたは^{１８５，１８７}Ｒｅで、
Ｒ^１は、Ｎ，Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｎＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨまたはＮ（ＣＨ_２ＣＯＮＨ）_ｎＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨで、Ｘは直接結合、 (In Formula 1, M is ^99m Tc, ¹⁸⁸ Re or ^185,187 Re,
R ¹ is N, N (CH ₂ CH ₂ O) _n CH ₂ CH ₂ CONH or N (CH ₂ CONH) _n CH ₂ CH ₂ CONH, X is a direct bond,

または、 Or

で、ここで、Ａ^１およびＡ^２は、各々アスパラギン酸、リジン、グルタミン酸、チロシン、システイン、スレオニンおよびセリンからなる群から選択されるアミノ酸で、Ｒ^２はＮＨまたはＮＨ（Ｚ）_ｎＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨで、Ｚは−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−または−ＣＨ_２ＣＯＮＨ−で、ｎは０ないし８の整数で、Ｙは、 Where A ¹ and A ² are each an amino acid selected from the group consisting of aspartic acid, lysine, glutamic acid, tyrosine, cysteine, threonine and serine, and R ² is NH or NH (Z) _n CH ₂ CH ₂ CONH, Z is —CH ₂ CH ₂ O— or —CH ₂ CONH—, n is an integer of 0 to 8, and Y is

で、ここでＲ^３はＨまたはＯＨで、Ｒ^４は−（ＣＨ_２）_ｍ−または−（ＣＨ_２）_ｍ−ＣＯＯ−で、ｍは１ないし８の整数で、前記ＹはＲ^１に直接結合するか、Ｘの中でＲ^２に結合する） Where R ³ is H or OH, R ⁴ is — (CH ₂ ) _m — or — (CH ₂ ) _m —COO—, m is an integer of 1 to 8, and Y is directly connected to R ¹ . Or bind to R ² in X)

好ましくは、前記トリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識サイクリックＲＧＤ誘導体は、下記化学式１Ａないし化学式１Ｃで表される化合物の群から選択することができる。 Preferably, the tricarbonyltechnesium or rhenium labeled cyclic RGD derivative may be selected from the group of compounds represented by the following chemical formulas 1A to 1C.

（前記化学式１Ａないし１Ｃにおいて、前記Ｍ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ａ^１およびＡ^２は、前記化学式１で定義したのと同様である） (In the chemical formulas 1A to 1C, the M, R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , A ¹ and A ² are the same as defined in the chemical formula 1)

本発明による前記化学式１で表されるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の好ましい例は、下記に示すとおりである。 Preferred examples of the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188-labeled cyclic RGD derivative represented by Formula 1 according to the present invention are as follows.

１）サイクリック｛（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
２）サイクリック｛（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
３）サイクリック｛（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
４）サイクリック｛（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−ＮＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
５）サイクリック｛（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−ＮＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
６）サイクリック｛（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−ＮＨ_２（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
７）サイクリック｛（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
８）サイクリック｛（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
９）サイクリック｛（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝、
１０）（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２、
１１）（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２、
１２）（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２、
１３）｛トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２、（ｎ＝０−８）、
１４）｛トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２、（ｎ＝０−８）、
１５）｛トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２、（ｎ＝０−８）、
１６）｛トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛（ポリエチレングリコール）_ｎ−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］｝_２、（ｎ＝０−８）、
１７）｛トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛（ポリエチレングリコール）_ｎ−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］｝_２、（ｎ＝０−８）、
１８）｛トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛（ポリエチレングリコール）_ｎ−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］｝_２、（ｎ＝０−８）、
１９）（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−｛アスパラギン酸−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、
２０）（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−｛アスパラギン酸−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、
２１）（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−｛アスパラギン酸−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、
２２）｛トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛アスパラギン酸−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、（ｎ＝０−８）、
２３）｛トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛アスパラギン酸−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、（ｎ＝０−８）、
２４）｛トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛アスパラギン酸−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、（ｎ＝０−８）、
２５）｛トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛アスパラギン酸−（ポリエチレングリコール）_ｎ−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、（ｎ＝０−８）、
２６）｛トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛アスパラギン酸−（ポリエチレングリコール）_ｎ−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、（ｎ＝０−８）、及び
２７）｛トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）_ｎ−アスパラギン酸｝−｛アスパラギン酸−（ポリエチレングリコール）_ｎ−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２｝_４、（ｎ＝０−８）。 1) cyclic {(tricarbonyl [ ^<99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine},
2) cyclic {(tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine},
3) cyclic {(tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-lysine) ^-arginine -glycine-aspartic acid-D-phenylalanine},
4) cyclic {(tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonylmethyl _{_{_{_{-NH 2 (CH 2 CH 2 O}}}} ) 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine - aspartic acid - D-phenylalanine},
5) Cyclic {(tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-NH ₂ (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid- D-phenylalanine},
6) Cyclic {(tricarbonyl ^{- [185, 187} Re] rhenium -N-alpha-bis - hydroxycarbonylmethyl _{_{_{_{-NH 2 (CH 2 CH 2 O}}}} ) 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine - Aspartic acid-D-phenylalanine},
7) Cyclic {(tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonyl methyl - glycine _{_{_{_{-CONH (CH 2 CH 2 O)}}}} 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine - aspartic acid -D-phenylalanine},
8) Cyclic {(tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid -D-phenylalanine},
9) Cyclic {(Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine -Aspartic acid-D-phenylalanine},
10) (Tricarbonyl [ ^99m Tc] Technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ ,
11) (Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ ,
12) (tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ ,
13) {tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonyl methyl - (polyethylene _{glycol) n} - aspartate} - [Cyclic (lysine - arginine - glycine - aspartic acid -D- _{phenylalanine)] 2} , (N = 0-8),
14) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ , (N = 0-8),
15) {Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n ^-aspartic acid}-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine) )] ₂ , (n = 0-8),
16) {Tricarbonyl [ ^99m Tc] technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{(polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid) -D-phenylalanine)]} ₂ , (n = 0-8),
17) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{(polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid) -D-phenylalanine)]} ₂ , (n = 0-8),
18) {Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n ^-aspartic acid}-{(polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine) -Aspartic acid-D-phenylalanine)]} ₂ , (n = 0-8),
19) (Tricarbonyl [ ^<99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ ,
20) (Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ ,
21) (Tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ ,
22) {Tricarbonyl [ _< ^99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D- Phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
23) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D- Phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
24) {Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n ^-aspartic acid}-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid) -D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
25) {Tricarbonyl [ _< ^99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- (polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine) -Aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
26) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- (polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine) ^-Aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8), and 27) {Tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- (polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ (n = 0-8).

本発明による化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体は、ＲＧＤサイクリックを１個ないし４個含むことができる。 The cyclic RGD derivative of Formula 1 according to the present invention may include 1 to 4 RGD cyclics.

本発明による化学式１で表されるサイクリックＲＧＤ誘導体は、薬学的に許容可能な塩の形態で使用することができる。前記塩では、薬学的かつ生理学的に許容される多様な有機酸または無機酸によって形成された酸付与塩が有用である。相応しい有機酸では、例えばカルボキシル酸、ホスホン酸、スルホン酸、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸ン、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタリンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸などを使用することができ、相応しい無機酸としては、例えば塩酸、硫酸またはリン酸などを使用することができる。 The cyclic RGD derivative represented by Chemical Formula 1 according to the present invention can be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt. Among the salts, acid-added salts formed with various pharmaceutically and physiologically acceptable organic acids or inorganic acids are useful. Suitable organic acids include, for example, carboxylic acid, phosphonic acid, sulfonic acid, acetic acid, propionic acid, octanoic acid, decanoic acid, glycolic acid, lactic acid, fumaric acid, succinic acid, adipic acid, malic acid, tartaric acid, citric acid, glutamic acid, Aspartic acid, maleic acid, benzoic acid, salicylic acid, phthalic acid, phenylacetic acid, benzenesulfonic acid, 2-naphthalenesulfonic acid, methylsulfuric acid, ethylsulfuric acid, dodecylsulfuric acid, and the like can be used. For example, hydrochloric acid, sulfuric acid or phosphoric acid can be used.

本発明による前記化学式１で表されるサイクリックＲＧＤ誘導体は、薬学的に許容可能な塩だけではなく、通常の方法によって製造され得るすべての塩、水和物及び溶媒化物をすべて含むことができる。 The cyclic RGD derivative represented by Formula 1 according to the present invention may include not only pharmaceutically acceptable salts but all salts, hydrates and solvates that can be produced by a usual method. .

また、本発明は、前記化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体を製造する方法を提供する。 The present invention also provides a method for producing the cyclic RGD derivative of Formula 1.

具体的に、本発明によるサイクリックＲＧＤ誘導体は、下記スキーム１及びスキーム２に示された方法でに製造することができる。 Specifically, the cyclic RGD derivative according to the present invention can be produced by the methods shown in the following Scheme 1 and Scheme 2.

製法１
本発明において、放射性同位元素であるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体は、下記スキーム１に示したように、
化学式２の前駆体化合物にトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８を反応させて、化学式１のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体を製造する工程を含む方法で製造することができる。 Manufacturing method 1
In the present invention, the cyclic RGD derivative labeled with the radioisotope tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188, as shown in the following scheme 1,
A step of reacting a precursor compound of Formula 2 with tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 to produce a cyclic RGD derivative labeled with tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 of Formula 1. It can be manufactured by the method including.

（前記スキーム１で、Ｍは^９９ｍＴｃまたは^１８８Ｒｅで、Ｒ^１、Ｘ及びＹは前記化学式１で定義したのと同様である） (In Scheme 1, M is ^99m Tc or ¹⁸⁸ Re, and R ¹ , X and Y are the same as defined in Formula 1)

具体的に、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８を化合物（^９９ｍＴｃ（ＣＯ）_３（Ｈ_２０）_３ ^＋または^１８８Ｒｅ（ＣＯ）_３（Ｈ_２０）_３ ^＋）を蒸留水溶媒０．５〜５ｍｌに希釈して、化学式２の前駆体が入っている反応容器に入れて、７０〜８０℃で３０〜６０分間加熱して反応させることで、化学式１のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体を製造することができる。 Specifically, tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 is converted into a compound ( ^99m Tc (CO) ₃ (H ₂ 0) ₃ ⁺ or ¹⁸⁸ Re (CO) ₃ (H ₂ 0) ₃ ⁺ ) in distilled water. Dilute to 0.5 to 5 ml of solvent, put in a reaction vessel containing the precursor of Chemical Formula 2, and react by heating at 70 to 80 ° C. for 30 to 60 minutes. Cyclic RGD derivatives labeled with 99m or tricarbonylrhenium-188 can be produced.

本発明による前記製法１において、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８化合物は、従来から知られた方法にしたがって合成することができ、好ましくは下記文献による方法を用いることができる。 In the said manufacturing method 1 by this invention, the said tricarbonyl technesium-99m or a tricarbonyl rhenium-188 compound can be synthesize | combined in accordance with the conventionally known method, Preferably the method by the following literature can be used.

参照論文：Alberto, R., Schibli, R., Egli, A., Schubiger, A.P., Abram, U., Kaden, T.A., J. Am. Chem. Soc. 1998年,第120巻，p.7987-7988; Alberto, R., Schibli, R., Schubiger, A.P., Abram, U., Pietzsch, H-P., Johannsen, B., J. Am. Chem. Soc. 1999 年,第121巻，p.6076-6077; Schibli, R., Netter, M., Scapozza, L., Birringer, M., Schelling, P., Dumas, C., Schoch, J., Schubiger, P.A., J. Organomet. Chem. 2003年,第668巻，p.67-74; Schibli, R., Schwarzbach, R., Alberto, R., Ortner, K., Schmalle, H., Dumas, C., Egli, A., Schubiger, P.A. Bioconjuate Chem. 2002年,第13巻，p.750-756。 Reference paper: Alberto, R., Schibli, R., Egli, A., Schubiger, AP, Abram, U., Kaden, TA, J. Am. Chem. Soc. 1998, 120, p.7987- 7988; Alberto, R., Schibli, R., Schubiger, AP, Abram, U., Pietzsch, HP., Johannsen, B., J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, p.6076- 6077; Schibli, R., Netter, M., Scapozza, L., Birringer, M., Schelling, P., Dumas, C., Schoch, J., Schubiger, PA, J. Organomet. Chem. 2003, 668, 67-74; Schibli, R., Schwarzbach, R., Alberto, R., Ortner, K., Schmalle, H., Dumas, C., Egli, A., Schubiger, PA Bioconjuate Chem 2002, vol.13, p.750-756.

製造されたトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体は、さらに、常温に冷却して、ｔＣ１８Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジまたは高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行なって分離／精製することができる。 The produced cyclic RGD derivative labeled with tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 is further cooled to room temperature and separated by tC18 Sep-Pak cartridge or high performance liquid chromatography (HPLC). Can be purified.

製法２
本発明において、非放射性同位元素であるトリカルボニル^{１８５，１８７}Ｒｅを導入したサイクリックＲＧＤ誘導体は、下記スキーム２に示したように、
化学式２の前駆体に（ＮＥｔ_４）_２Ｒｅ（ＣＯ）_３Ｂｒ_３を入れて反応させて、化学式１Ａのトリカルボニル^{１８５，１８７}Ｒｅが導入されたサイクリックＲＧＤ誘導体を製造する工程を含む方法で製造することができる。 Manufacturing method 2
In the present invention, a cyclic RGD derivative into which tricarbonyl ^185,187 Re, which is a non-radioactive isotope, is introduced, as shown in Scheme 2 below,
(NEt ₄ ) ₂ Re (CO) ₃ Br ₃ is added to the precursor of Formula 2 and reacted to produce a cyclic RGD derivative in which tricarbonyl ^185,187 Re of Formula 1A is introduced. Can be manufactured.

（前記スキーム２で、Ｒ^１、Ｘ及びＹは前記化学式１で定義したのと同様で、化学式１Ａは化学式１に含まれる） (In Scheme 2, R ¹ , X and Y are the same as defined in Chemical Formula 1, and Chemical Formula 1A is included in Chemical Formula 1)

具体的に、前記試薬（ＮＥｔ_４）_２Ｒｅ（ＣＯ）_３Ｂｒ_３を蒸留水溶媒０．５〜５ｍｌに希釈して化学式２の前駆体が入っている反応容器に入れて、７０〜８０℃で５５〜６５分間加熱して反応させることで、化学式１Ａのトリカルボニル^{１８５，１８７}Ｒｅが導入されたサイクリックＲＧＤ誘導体を製造することができる。 Specifically, the reagent (NEt ₄ ) ₂ Re (CO) ₃ Br ₃ is diluted to 0.5 to 5 ml of distilled water solvent and placed in a reaction vessel containing the precursor of Formula 2, and 70 to 80 ° C. The cyclic RGD derivative into which tricarbonyl ^185,187 Re of formula 1A is introduced can be produced by heating and reacting for 55 to 65 minutes.

前記化学式１Ａのトリカルボニル^{１８５，１８７}Ｒｅが導入されたサイクリックＲＧＤ誘導体は、スキーム１のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体の基準物質で、トリカルボニルレニウム−１８８が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体とは同一物質なので高性能液体クロマトグラフィーで同じ保持値を有し、トリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識化合物が標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体とは、１−２分程度の保持値の差を示す。 The cyclic RGD derivative into which tricarbonyl ^185,187 Re of the formula 1A is introduced is a reference substance of the cyclic RGD derivative labeled with tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 in scheme 1, and is tricarbonylrhenium-188. Is the same substance as the cyclic RGD derivative labeled, and has the same retention value in high performance liquid chromatography, and the cyclic RGD derivative labeled with the tricarbonyltechnesium-99m labeled compound is about 1-2 minutes. Indicates the difference in retention values.

製造された^{１８５，１８７}Ｒｅが導入されたサイクリックＲＧＤ誘導体は、追加的に、常温に冷却して、ｔＣ１８Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジまたは高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行なって分離／精製することができる。 The manufactured cyclic RGD derivative introduced with ^185,187 Re may be additionally cooled to room temperature and separated / purified by performing a tC18 Sep-Pak cartridge or high performance liquid chromatography (HPLC). it can.

さらに、本発明は、前記化学式１のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む、新生血管関連疾患の診断または治療用薬学的組成物を提供する。 Furthermore, the present invention provides a pharmaceutical composition for diagnosis or treatment of neovascular-related diseases comprising, as an active ingredient, the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188-labeled cyclic RGD derivative of Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof. A composition is provided.

また、本発明は、対象に前記化学式１のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を診断学的に有効な量で投与する工程を含む、対象内の新生血管関連疾患の診断方法を提供する。 The present invention also includes the step of administering to the subject a tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD derivative of Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof in a diagnostically effective amount. A method for diagnosing a blood vessel-related disease is provided.

また、本発明は、対象に前記化学式１のトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を治療学的に有効な量で投与する工程を含む、対象内の新生血管関連疾患の治療方法を提供する。 The present invention also includes the step of administering to the subject a tricarbonylrhenium-188 labeled cyclic RGD derivative of Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof in a therapeutically effective amount. Methods of treating vascular related diseases are provided.

本発明による化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体は、アミンと２個のヒドロキシカルボニルメチル基からなる標識ポケットにトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ、トリカルボニルレニウム−１８８またはトリカルボニルレニウム反応物が結合して、テクネシウム−９９ｍを中心に３個のカルボニル、アミン、２個のヒドロキシ基が八面体構造に形成された化合物である。 In the cyclic RGD derivative of Formula 1 according to the present invention, tricarbonyltechnesium-99m, tricarbonylrhenium-188 or tricarbonylrhenium reactant is bonded to a label pocket composed of an amine and two hydroxycarbonylmethyl groups, and technesium- A compound in which three carbonyls, amines, and two hydroxy groups are formed in an octahedral structure centering on 99m.

前記化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体は、１個、２個または４個のサイクリックＲＧＤを構成することができ、その中で２個のサイクリックＲＧＤを構成する場合、腫瘍によって誘発された新生血管作用バイオマーカーであるα_ｖβ_３インテグリンにより高い結合親和度を有して、サイクリックＲＧＤと標識グループ間のリンカーであるアスパラギン酸に多様なポリエチレングリコール鎖を導入して、２個のサイクリックＲＧＤが同時に２個のα_ｖβ_３インテグリンに結合可能な構造（ｂｉｖａｌｅｎｔ）を形成することで、より高い腫瘍映像を反映することができ、それを通じた治療効果も増進することができる。このように２個のサイクリックＲＧＤを構成する化合物は、腫瘍が移植されたネズミでの体内分布実験で血管内皮細胞でトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８サイクリックＲＧＤ誘導体に含まれるポケットグループが有する（−）イオンによって肝臓と大腸で早く排出されることによって、腫瘍対比正常臓器の割合が高い結果を得た。 The cyclic RGD derivative of Formula 1 can constitute one, two, or four cyclic RGDs, and in the case of constituting two cyclic RGDs, neovascularization induced by a tumor The α _v β ₃ integrin, which is an action biomarker, has a high binding affinity and introduces two cyclic RGDs by introducing various polyethylene glycol chains into aspartic acid, which is a linker between cyclic RGD and the labeling group. By forming a bivalent that can bind to two α _v β ₃ integrins at the same time, a higher tumor image can be reflected and the therapeutic effect through it can be enhanced. Thus, the compounds constituting two cyclic RGDs are pockets contained in tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 cyclic RGD derivatives in vascular endothelial cells in a biodistribution experiment in mice transplanted with tumors. By the (−) ion of the group, the liver and the large intestine were quickly excreted, resulting in a high percentage of normal organs compared to the tumor.

また、本発明による化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体は、４個のサイクリックＲＧＤを構成して腫瘍によって誘発された新生血管作用バイオマーカーであるα_ｖβ_３インテグリンにより高い結合親和度を有することができ、サイクリックＲＧＤと標識グループ間のリンカーであるアスパラギン酸に多様なポリエチレングリコール鎖を導入して４個のサイクリックＲＧＤが同時にいくつかのα_ｖβ_３インテグリンに結合可能な構造を形成して高い腫瘍映像を反映することができ、それを通じた治療効果も増進することができる。 In addition, the cyclic RGD derivative of Formula 1 according to the present invention has a high binding affinity for α _v β ₃ integrin, which is a neovascularization biomarker composed of 4 cyclic RGDs and induced by tumor. A variety of polyethylene glycol chains are introduced into aspartic acid, which is a linker between cyclic RGD and labeling group, to form a structure in which four cyclic RGDs can simultaneously bind to several α _v β ₃ integrins. A high tumor image can be reflected, and the therapeutic effect through it can be enhanced.

さらに、４個のサイクリックＲＧＤを構成するサイクリックＲＧＤ誘導体も、高いα_ｖβ_３インテグリン結合親和度と、血管内皮細胞でトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８サイクリックＲＧＤ誘導体に含まれるポケットグループが有する（−）イオンによって、肝臓と大腸で早く排出され得る。 Furthermore, cyclic RGD derivatives constituting four cyclic RGDs are also included in tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 cyclic RGD derivatives with high α _v β ₃ integrin binding affinity and vascular endothelial cells. It can be excreted early in the liver and large intestine by (−) ions of the pocket group.

したがって、本発明による化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体は、腫瘍によって誘導される新生血管作用で活性化になったビトロネクチン受容体とも呼ばれるα_ｖβ_３インテグリンにサブナノモル単位の高い親和度を有し、癌細胞が移植された動物で、トリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体初期摂取後、高い腫瘍映像を反映して肝臓と腸での摂取率が既存の知られた放射性同位元素標識サイクリックＲＧＤ誘導体に比べて、顕著に低くてより良い映像を提供しながら選択的にα_ｖβ_３インテグリンが活性化した癌細胞にのみ作用することが分かり、テクネシウム−９９ｍ標識に使用された同一前駆体を使用した治療核種であるレニウム−１８８標識誘導体の場合、生理食塩水だけを注入した腫瘍動物モデルとは異なり、尾静脈注入時に効果的な腫瘍の成長阻害と治療効能を示すことから、あつらえ形新生血管関連疾患の診断または治療用医薬品として有用に用いることができる。 Therefore, the cyclic RGD derivative of Formula 1 according to the present invention has a high sub-nanomolar affinity for α _v β ₃ integrin, also called vitronectin receptor activated by neovascular action induced by tumor, Radioactive isotope-labeled cyclic RGD derivative with known uptake rate in liver and intestine reflecting high tumor image after initial ingestion of tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD derivative in animals transplanted with cells Compared to the above, it was found that α _v β ₃ integrin acts selectively only on cancer cells activated while providing a significantly lower and better image, and the same precursor used for technesium-99m labeling was used. Animal model in which only physiological saline is injected in the case of rhenium-188-labeled derivative which is a treated nuclide Are different, because they exhibit an effective tumor growth inhibiting and treatment efficacy of at tail vein injection, can be usefully employed as a diagnostic or therapeutic pharmaceutical custom shaped neovascular-related diseases.

ここで、診断は前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩を対象に、静脈注射で投与して単光子放射型コンピュータ断層撮影法で新生血管関連疾患の診断をすることが好ましく、診断を通じて癌の新生血管映像を取得した場合、同一前駆体が使用されたトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体を用いてあつらえ形治療を行うことができる。 Here, the diagnosis is neovascular-related diseases diagnosed by single photon emission computed tomography after intravenous administration to the tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof. When a neovascular image of cancer is acquired through diagnosis, a custom-shaped treatment can be performed using a tricarbonylrhenium-188 labeled cyclic RGD derivative using the same precursor.

本発明において、新生血管関連疾患は、血栓症、心筋虚血、固形化腫瘍または転移癌等、α_ｖβ_３インテグリンが過多に分布する疾患が好ましい。 In the present invention, the neovascular-related disease is preferably a disease in which α _v β ₃ integrin is excessively distributed such as thrombosis, myocardial ischemia, solid tumor or metastatic cancer.

本発明の前記化学式１のサイクリックＲＧＤ誘導体またはその薬学的に許容可能な塩は、臨床投与時に静脈注射で投与し、人体に対する投与量は、患者の年齢、体重、性別、投与形態、健康状態及び疾患の程度によって調節することができ、体重が７０Ｋｇである成人患者を基準にする時、一般的診断の場合１〜２０ｍＣｉ／ｄｏｓｅで、好ましくは３〜７ｍＣｉ／ｄｏｓｅで、また医師または薬剤師の判断によって一定時間間隔で１日１回ないし数回にで分けて投与することもできる。併せて、治療の場合は１〜１０００ｍＣｉ／ｄｏｓｅで、好ましくは１〜５００ｍＣｉ／ｄｏｓｅで、また医師または薬剤師の判断によって一定時間間隔で１日１回ないし数回に分けて投与することもできる。 The cyclic RGD derivative of Formula 1 of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered intravenously at the time of clinical administration, and the dose to the human body is the age, weight, sex, dosage form, health status of the patient. And can be adjusted according to the degree of disease and is based on an adult patient weighing 70 Kg, in the case of general diagnosis 1-20 mCi / dose, preferably 3-7 mCi / dose, and the doctor or pharmacist Depending on the judgment, it may be administered once or several times a day at regular time intervals. In addition, in the case of treatment, the dose may be 1 to 1000 mCi / dose, preferably 1 to 500 mCi / dose, and may be administered once or several times a day at regular time intervals according to the judgment of a doctor or pharmacist.

また、本発明は、下記化学式２で表されるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識のためのサイクリックＲＧＤ誘導体前駆体を提供する。 In addition, the present invention provides a cyclic RGD derivative precursor for labeling tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 represented by the following chemical formula 2.

（前記化学式２において、Ｒ^１、Ｘ及びＹは前記化学式１で定義したのと同様である） (In Chemical Formula 2, R ¹ , X and Y are the same as defined in Chemical Formula 1)

好ましくは、前記トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識のためのサイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体は、下記化学式２Ａないし化学式２Ｃで表される化合物の群から選択することができる。 Preferably, the precursor of the cyclic RGD derivative for labeling the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 can be selected from the group of compounds represented by the following chemical formulas 2A to 2C.

（前記化学式２Ａないし２Ｃにおいて、前記Ｍ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ａ^１およびＡ^２は前記化学式１で定義したのと同様である） (In the chemical formulas 2A to 2C, M, R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , A ¹ and A ² are the same as defined in the chemical formula 1)

前記トリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識のためのサイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体は、下記で説明する実施例を通じて製造することができるが、これに制限されない。 The precursor of the cyclic RGD derivative for labeling the tricarbonyl technesium or rhenium can be prepared through the examples described below, but is not limited thereto.

以下、本発明を実施例によって詳しく説明する。但し、下記の実施例は、本発明の内容が下記の実施例によって限定されるのではない。 Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples. However, in the following examples, the content of the present invention is not limited by the following examples.

＜製造例１＞本発明によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体の出発物質（３）の製造 <Production Example 1> Production of starting material (3) of precursor of tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative according to the present invention

本発明によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体の出発物質に用いる前記化学式３の化合物は、文献（Haubner, R., Wester, H-J., Reuning, U., Senekowitsch-Schmidtke, R., Diefenbach, B., Kessler, H., Stocklin G., Schwaiger, M., J. Nucl. Med., 1999年,第40巻,p.1061-1071）によって合成した。 The compound of Formula 3 used as a starting material for the precursor of the tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative according to the present invention is described in the literature (Haubner, R., Wester, HJ., Reuning, U., Senekowitsch). -Schmidtke, R., Diefenbach, B., Kessler, H., Stocklin G., Schwaiger, M., J. Nucl. Med., 1999, 40, p.1061-1071).

＜製造例２＞ベンジル１−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート（７）の製造 <Production Example 2> Production of benzyl 1-amino-3,6,9,12-tetraoxapentadecane-15-oate (7)

（工程１）
１−（Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−アミノ）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカノン酸（１−（Ｂｏｃ−ａｍｉｎｏ）−３，６，９，１２−ｔｅｔｒａｏｘａｐｅｎｔａｄｅｃａｎｏｉｃａｃｉｄ，２２４ｍｇ，０．６１ｍｍｏｌ，５）をアルゴンガス下でアセトニトリル（５ｍｌ）に溶解してセシウムカーボネート（ＣｓＣＯ_３，５９６ｍｇ，１．８３ｍｍｏｌ）とベンジルクロライド（２１１μｌ，１．８３ｍｍｏｌ）を加えた後、８０℃下で３０分間撹拌させた。反応容器を常温で冷却させて減圧下で溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーを通じて分離して目的化合物（６）を得た。 (Process 1)
1- (N- (t-butyloxycarbonyl) -amino) -3,6,9,12-tetraoxapentadecanoic acid (1- (Boc-amino) -3,6,9,12-tetraoxapentadecanoic acid, 224 mg, 0.61 mmol, 5) was dissolved in acetonitrile (5 ml) under argon gas, cesium carbonate (CsCO ₃ , 596 mg, 1.83 mmol) and benzyl chloride (211 μl, 1.83 mmol) were added, and then 80 ° C. Stir for 30 minutes under. The reaction vessel was cooled at room temperature and the solvent was removed under reduced pressure, followed by separation through column chromatography to obtain the target compound (6).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.38-7.30 (m, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.64-3.59 (m, 12H), 3.53 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.30 (m, 2H), 2.65 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.38-7.30 (m, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.64-3.59 (m, 12H), 3.53 ( t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.30 (m, 2H), 2.65 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H).

（工程２）
工程１で得た化学式６の化合物（２６０ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）をメチレンクロライド（１０ｍｌ）で溶解して、０℃下でトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，１ｍｌ）を加えた後、室温で１時間撹拌した後、飽和ナトリウムバイカーボネート（ｓａｔｕｒａｔｅｄＮａＨＣＯ_３，２５ｍｌ）を加えてメチレンクロライド（１００ｍｌ×３）溶液で抽出した後、有機溶媒層を減圧下で除去して、目的化合物であるベンジル１−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート（７）を得た。 (Process 2)
The compound of formula 6 (260 mg, 0.57 mmol) obtained in step 1 was dissolved in methylene chloride (10 ml), trifluoroacetic acid (TFA, 1 ml) was added at 0 ° C., and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Thereafter, saturated sodium bicarbonate (saturated NaHCO ₃ , 25 ml) was added and extracted with a methylene chloride (100 ml × 3) solution, and then the organic solvent layer was removed under reduced pressure to obtain the target compound benzyl 1-amino-3. , 6,9,12-tetraoxapentadecane-15-oate (7) was obtained.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.53 (s, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.78 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.65-3.62 (m, 12H), 3.58 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.93 (brs, 2H), 2.66 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.51 (brs, 2H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.53 (s, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.78 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.65-3.62 (m, 12H), 3.58 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.93 (brs, 2H), 2.66 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.51 (brs, 2H).

＜製造例３＞トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはトリカルボニルレニウム−１８８化合物［^９９ｍＴｃ（ＣＯ）_３（Ｈ_２Ｏ）_３ ^＋または^１８８Ｒｅ（ＣＯ）_３（Ｈ_２Ｏ）_３ ^＋］の製造
標識されるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８化合物は、文献（Alberto, R., Schibli, R., Egli, A., Schubiger, A.P., Abram, U., Kaden, T.A., J. Am. Chem. Soc. 1998年,第120巻,p.7987-7988; Alberto, R., Schibli, R., Schubiger, A.P., Abram, U., Pietzsch, H-P., Johannsen, B., J. Am. Chem. Soc. 1999年,第121巻,p.6076-6077; Schibli, R., Netter, M., Scapozza, L., Birringer, M., Schelling, P., Dumas, C., Schoch, J., Schubiger, P.A., J. Organomet. Chem. 2003年,第668巻,p.67-74; Schibli, R., Schwarzbach, R., Alberto, R., Ortner, K., Schmalle, H., Dumas, C., Egli, A., Schubiger, P.A. Bioconjuate Chem. 2002年,第13巻,p.750-756）に記載された方法を行なって製造した。 <Production Example 3> Production of tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 compound [ ^99m Tc (CO) ₃ (H ₂ O) ₃ ⁺ or ¹⁸⁸ Re (CO) ₃ (H ₂ O) ₃ ⁺ ] Tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 compounds are described in the literature (Alberto, R., Schibli, R., Egli, A., Schubiger, AP, Abram, U., Kaden, TA, J. Am. Chem. Soc 1998, 120, p.7987-7988; Alberto, R., Schibli, R., Schubiger, AP, Abram, U., Pietzsch, HP., Johannsen, B., J. Am. Chem. Soc 1999, 121, p. 6076-6077; Schibli, R., Netter, M., Scapozza, L., Birringer, M., Schelling, P., Dumas, C., Schoch, J., Schubiger , PA, J. Organomet. Chem. 2003, 668, 67-74; Schibli, R., Schwarzbach, R., Alberto, R., Ortner, K., Schmalle, H., Dumas, C , Egli, A., Schubiger, PA Bioconjuate Chem. 2002, Vol. 13, p.750-756) It was.

＜実施例１〜５＞本発明によるトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の前駆体の製造
＜実施例１＞サイクリック｛（トリカルボニル−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝（２ａ）の製造 <Examples 1 to 5> Preparation of precursor of tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative according to the present invention <Example 1> Cyclic {(tricarbonyl-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl -Lysine) -Arginine-Glycine-Aspartate-D-Phenylalanine} (2a)

（工程１）
前記製造例１で製造された化学式３の化合物（２４０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルブロモアセテート（１１５μｌ，０．７７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ，５ｍｌ）とＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ，１３０μｌ，０．７７ｍｍｏｌ）に溶解して５０℃下で１２時間撹拌させた。反応後、溶媒を減圧下で除去して得られた化合物は、有機溶媒であるメタノールとジクロロメタン（１０：９０＝ＭｅＯＨ：ＣＨ_２Ｃｌ_２）溶液でカラムクロマトグラフィーを通じて分離して化学式４の化合物を得た。 (Process 1)
The compound of Formula 3 (240 mg, 0.26 mmol) and t-butyl bromoacetate (115 μl, 0.77 mmol) prepared in Preparation Example 1 were mixed with acetonitrile (CH ₃ CN, 5 ml) and N, N′-diisopropylethylamine ( DIEA, 130 μl, 0.77 mmol) and stirred at 50 ° C. for 12 hours. After the reaction, the compound obtained by removing the solvent under reduced pressure is separated through column chromatography with methanol and dichloromethane (10: 90 = MeOH: CH ₂ Cl ₂ ), which are organic solvents, to obtain the compound of Formula 4. Obtained.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｎａ^＋）＝１１６３．４ MALDI-TOF MS (M + Na ⁺ ) = 1163.4

（工程２）
前記工程１で製造された化学式４の化合物を、ＴＦＡ：Ｅｔ_３ＳｉＨ：Ｈ_２Ｏ（９５：２．５：２．５，１０ｍｌ）に溶解して常温で１２時間反応させた後、すべての溶液を減圧下でほとんど蒸発させた後に、ジエチルエーテルを添加して得られた固体をロ過した。このようにして得られた白色固体を充分にエーテルで洗浄した後、乾燥して化学式２Ａの化合物を製造した。 (Process 2)
The compound of Formula 4 prepared in Step 1 was dissolved in TFA: Et ₃ SiH: H ₂ O (95: 2.5: 2.5, 10 ml) and reacted at room temperature for 12 hours. After almost evaporating the solution under reduced pressure, the solid obtained by adding diethyl ether was filtered. The white solid thus obtained was thoroughly washed with ether and then dried to produce the compound of Formula 2A.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｎａ^＋）＝７２０．８ MALDI-TOF MS (M + Na ⁺ ) = 720.8

＜実施例２＞サイクリック｛（トリカルボニル−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝（２ｂ）の製造 <Example 2> Cyclic {(tricarbonyl-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid-D -Phenylalanine} (2b) Production

（工程１）
出発物質として化学式３の化合物の代わりに化学式８のグリシン−メチルエステル−ヒドロクロライドを使用することを除き、前記実施例１の工程１と同一な方法で行なって化学式９の化合物を得た。 (Process 1)
The compound of Formula 9 was obtained in the same manner as in Step 1 of Example 1 except that glycine-methyl ester-hydrochloride of Formula 8 was used instead of the compound of Formula 3 as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 3.71 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.53 (s, 4H), 1.44 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 3.71 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.53 (s, 4H), 1.44 (s, 18H).

（工程２）
前記工程１で製造された化学式９の化合物（５５０ｍｇ，１．７３ｍｍｏｌ）をメタノール（ＭｅＯＨ，１０ｍｌ）に溶解した後、１Ｍ水酸化リチウム（１ＭＬｉＯＨ，３．４ｍｌ，３．４ｍｍｏｌ）を加えて５０℃下で１時間の間撹拌させた後、１Ｎ塩酸（１ＮＨＣｌ，３．８ｍｌ，２．２ｍｍｏｌ）を加えて中和させて有機溶媒層を減圧下で除去して化学式１０の化合物を得た。 (Process 2)
The compound of Formula 9 (550 mg, 1.73 mmol) prepared in Step 1 was dissolved in methanol (MeOH, 10 ml), 1M lithium hydroxide (1M LiOH, 3.4 ml, 3.4 mmol) was added, and 50 was added. The mixture was stirred at 1 ° C. for 1 hour, neutralized by adding 1N hydrochloric acid (1N HCl, 3.8 ml, 2.2 mmol), and the organic solvent layer was removed under reduced pressure to obtain the compound of Formula 10. .

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 3.48 (s, 2H), 3.47 (s, 4H), 1.48 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 3.48 (s, 2H), 3.47 (s, 4H), 1.48 (s, 18H).

（工程３）
前記工程２で製造された化学式１０の化合物（６０ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）をＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５１ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロホスファート（１４４ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）とともにアルゴン下で、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（５ｍｌ）に溶解して３０分間撹拌させた後、前記製造例２で製造された化学式７の化合物（４７ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（１３３μｌ，０．７６２ｍｍｏｌ）を入れて常温で１６時間撹拌させた。減圧下でＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドを除去した後、カラムクロマトグラフィーを通じて分離して目的化合物（１１）を得た。 (Process 3)
The compound of Formula 10 (60 mg, 0.19 mmol) prepared in Step 2 was converted into N-hydroxybenzotriazole (51 mg, 0.38 mmol), O-benzotriazole-N, N, N ′, N′-tetramethyl- After dissolving in uronium-hexafluorophosphate (144 mg, 0.38 mmol) in N, N′-dimethylformamide (5 ml) under argon and stirring for 30 minutes, the compound of formula 7 prepared in Preparation Example 2 was prepared. The compound (47 mg, 0.13 mmol) and N, N′-diisopropylethylamine (133 μl, 0.762 mmol) were added and stirred at room temperature for 16 hours. After removing N, N′-dimethylformamide under reduced pressure, separation through column chromatography gave the target compound (11).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.09 (brs), 7.34 (brs, 5H), 5.13 (s, 2H), 3.76-3.36 (m, 22H), 2.65-2.64 (m, 2H), 1.45 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.09 (brs), 7.34 (brs, 5H), 5.13 (s, 2H), 3.76-3.36 (m, 22H), 2.65-2.64 (m, 2H), 1.45 ( s, 18H).

（工程４）
反応容器に１０％パラジウムチャコール（１０％Ｐｄ／Ｃ，３４ｍｇ，０．０３２ｍｍｏｌ）を窒素充填下に入れて前記工程３で製造された化学式１１の化合物（７０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍｌ）に溶解して反応容器に加えた後、反応容器内を水素ガスに転換して常温で水素ガス下で１６時間の間撹拌させた。セライト（ｃｅｌｉｔｅ）フィルターを通じてパラジウムを除去した後、減圧下でメタノールを除去して目的化合物（１２）を得た。 (Process 4)
10% Palladium charcoal (10% Pd / C, 34 mg, 0.032 mmol) was placed in a reaction vessel under nitrogen filling, and the compound of Formula 11 (70 mg, 0.11 mmol) prepared in Step 3 was methanol (5 ml). Then, the reaction vessel was converted into hydrogen gas and stirred at room temperature for 16 hours under hydrogen gas. After removing palladium through a celite filter, methanol was removed under reduced pressure to obtain the target compound (12).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.02 (brs), 8.20 (brs), 3.75-3.70 (m, 2H), 3.63-3.56 (m, 14H), 3.52-3.47 (m, 2H), 3.38-3.36 (m, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz), 1.44 (s, 18H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 9.02 (brs), 8.20 (brs), 3.75-3.70 (m, 2H), 3.63-3.56 (m, 14H), 3.52-3.47 (m, 2H), 3.38- 3.36 (m, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz), 1.44 (s, 18H).

（工程５）
反応物質として前記工程４で製造された化学式１２の化合物と前記製造例１で製造された化学式３の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程５と同一な方法で行なって目的化合物（１３）を得た。 (Process 5)
The target compound was prepared in the same manner as in Step 5 of Example 2 except that the compound of Formula 12 prepared in Step 4 and the compound of Formula 3 prepared in Preparation Example 1 were used as reactants. (13) was obtained.

ＥＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝１４４４．７ ESI MS (M + H ⁺ ) = 1444.7

（工程６）
出発物質として前記工程５で製造された化学式１３の化合物の化合物を使用することを除き、前記実施例１の工程２と同一な方法で行なって目的化合物（２ｂ）を得た。 (Step 6)
The target compound (2b) was obtained in the same manner as in Step 2 of Example 1 except that the compound of the compound of Formula 13 prepared in Step 5 was used as a starting material.

ＥＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝１０２４．５． ESI MS (M + H ⁺ ) = 1024.5.

＜実施例３＞（トリカルボニル−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２（２ｃ）の製造 <Example 3> Production of (tricarbonyl-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ (2c)

（工程１）
出発物質としてＯ，Ｏ’−ダイベンジルアスパラギン酸ヒドロクロライドを使用することを除き、前記実施例１の工程１と同一な方法で行なって目的化合物（１５）を得た。 (Process 1)
The target compound (15) was obtained in the same manner as in Step 1 of Example 1 except that O, O′-dibenzylaspartic acid hydrochloride was used as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.36-7.26 (m, 10 H), 5.14-5.06 (m, 4H), 3.99 (dd, J = 9.2, 5.2 Hz, 1H), 3.61-3.50 (m 4H), 2.94 (dd, J = 16.8, 9.6 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 16.4, 5.6 Hz, 1H), 1.42 (s, 18H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.36-7.26 (m, 10 H), 5.14-5.06 (m, 4H), 3.99 (dd, J = 9.2, 5.2 Hz, 1H), 3.61-3.50 (m 4H ), 2.94 (dd, J = 16.8, 9.6 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 16.4, 5.6 Hz, 1H), 1.42 (s, 18H).

（工程２）
出発物質として前記工程１で製造された化学式１５の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程２と同一な方法で行なって目的化合物（１６）を得た。 (Process 2)
The target compound (16) was obtained in the same manner as in Step 2 of Example 2 except that the compound of Formula 15 prepared in Step 1 was used as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.60 (brs, 2H), 3.90 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.55-3.40 (m, 4H), 2.98 (dd, J = 16.4, 5.2 Hz, 1H), 2.66 (dd, J = 16.8, 7.6 Hz, 1H), 1.46 (s, 18H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 9.60 (brs, 2H), 3.90 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.55-3.40 (m, 4H), 2.98 (dd, J = 16.4, 5.2 Hz, 1H), 2.66 (dd, J = 16.8, 7.6 Hz, 1H), 1.46 (s, 18H).

（工程３）
出発物質として前記工程２で製造された化学式１６の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程５と同一な方法で行なって目的化合物（１７）を得た。 (Process 3)
The target compound (17) was obtained in the same manner as in Step 5 of Example 2 except that the compound of Formula 16 prepared in Step 2 was used as a starting material.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｎａ^＋）＝２１７１．０６ MALDI-TOF MS (M + Na ⁺ ) = 2171.06

（工程４）
出発物質として前記工程３で製造された化学式１７の化合物を使用することを除き、前記実施例１の工程２と同一な方法で行なって目的化合物（２ｃ）を得た。 (Process 4)
The target compound (2c) was obtained in the same manner as in Step 2 of Example 1 except that the compound of Formula 17 prepared in Step 3 was used as a starting material.

ＥＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝１４２０．５ ESI MS (M + H ⁺ ) = 1420.5

＜実施例４＞｛トリカルボニル−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸｝−｛（ポリエチレングリコール）４−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］｝_２（２ｄ）の製造 <Example 4> {Tricarbonyl-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid}-{(polyethylene glycol) 4- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)]} ₂ Production of (2d)

（工程１）
出発物質として化学式３の化合物の代わりに化学式１６の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程５と同一な方法で行なって化学式１８の化合物を得た。 (Process 1)
The compound of Formula 18 was obtained in the same manner as in Step 5 of Example 2 except that the compound of Formula 16 was used instead of the compound of Formula 3 as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.46 (brt, 1H), 7.38-7.30 (m, 10H), 6.84 (brs, 1H), 5.13 (s, 4H), 3.87 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 3.63-3.61 (m, 24H), 3.57-3.53 (m 4H), 3.51-3.42 (m 6H), 3.31-3.27 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 10.8, 6.4 Hz, 1H), 2.65 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 2.38 (dd, J = 14.8, 6.4 Hz, 1H), 1.44 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.46 (brt, 1H), 7.38-7.30 (m, 10H), 6.84 (brs, 1H), 5.13 (s, 4H), 3.87 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 3.63-3.61 (m, 24H), 3.57-3.53 (m 4H), 3.51-3.42 (m 6H), 3.31-3.27 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 10.8, 6.4 Hz, 1H), 2.65 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 2.38 (dd, J = 14.8, 6.4 Hz, 1H), 1.44 (s, 18H).

（工程２）
出発物質として前記工程１で製造された化学式１８の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程６と同一な方法で行なって化学式１９の化合物を得た。 (Process 2)
The compound of Formula 19 was obtained in the same manner as in Step 6 of Example 2 except that the compound of Formula 18 prepared in Step 1 was used as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.57 (brt, 1H), 7.82 (brs, 1H), 5.13 (s, 4H), 3.92 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.77-3.70 (m, 4H), 3.64-3.55 (m, 31H), 3.47-3.30 (m 2H), 3.34-3.29 (m 3H), 2.81 (dd, J = 22, 7.2 Hz, 1H), 2.59 (t, J = 12 Hz, 4H), 2.46 (dd, J = 20.4, 5.2 Hz, 1H), 1.45 (s, 18H). ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.57 (brt, 1H), 7.82 (brs, 1H), 5.13 (s, 4H), 3.92 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.77-3.70 (m, 4H), 3.64-3.55 (m, 31H), 3.47-3.30 (m 2H), 3.34-3.29 (m 3H), 2.81 (dd, J = 22, 7.2 Hz, 1H), 2.59 (t, J = 12 Hz , 4H), 2.46 (dd, J = 20.4, 5.2 Hz, 1H), 1.45 (s, 18H).

（工程３）
出発物質として前記工程２で製造された化学式１９の化合物と前記製造例１で製造された化学式３の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程５と同一な方法で行なって化学式２０の化合物を得た。 (Process 3)
Except using the compound of Formula 19 prepared in Step 2 and the compound of Formula 3 prepared in Preparation Example 1 as starting materials, the same procedure as in Step 5 of Example 2 was used. To give a compound.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｎａ^＋）＝２６６５．８７ MALDI-TOF MS (M + Na ⁺ ) = 2665.87

（工程４）
出発物質として前記工程３で製造された化学式２０の化合物を使用することを除き、前記実施例１の工程２と同一な方法で行なって目的化合物（２ｄ）を得た。 (Process 4)
The target compound (2d) was obtained in the same manner as in Step 2 of Example 1 except that the compound of Formula 20 prepared in Step 3 was used as the starting material.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｎａ^＋）＝１９１４．６５ MALDI-TOF MS (M + Na ⁺ ) = 1914.65

＜実施例５＞｛トリカルボニル−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−（ポリエチレングリコール）４−アスパラギン酸｝−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２（２ｅ）の製造 <Example 5> {Tricarbonyl-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) 4-aspartic acid}-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ (2e )Manufacturing of

（工程１）
出発物質として前記製造例２で製造された化学式７の化合物を使用することを除き、前記実施例１の工程１と同一な方法で行なって化学式２１の化合物を得た。 (Process 1)
The compound of Formula 21 was obtained in the same manner as in Step 1 of Example 1 except that the compound of Formula 7 prepared in Preparation Example 2 was used as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.37-7.34 (m, 5H), 5.14 (s, 4H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.63-3.58 (m, 14H), 3.49 (s 4H), 2.94 (t, J = 5.8 Hz 2H), 2.65 (t, J = 6.6 Hz 2H), 1.45 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.37-7.34 (m, 5H), 5.14 (s, 4H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.63-3.58 (m, 14H), 3.49 ( s 4H), 2.94 (t, J = 5.8 Hz 2H), 2.65 (t, J = 6.6 Hz 2H), 1.45 (s, 18H).

（工程２）
出発物質として前記工程１で製造された化学式２１の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程６と同一な方法で行なって化学式２２の化合物を得た。 (Process 2)
The compound of Formula 22 was obtained in the same manner as in Step 6 of Example 2 except that the compound of Formula 21 prepared in Step 1 was used as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.97 (brs, 1H), 3.74 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.64-3.60 (m, 14H), 3.50 (s, 4H), 2.95 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.44 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.97 (brs, 1H), 3.74 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.64-3.60 (m, 14H), 3.50 (s, 4H), 2.95 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.44 (s, 18H).

（工程３）
出発物質として前記工程２で製造された化学式２２の化合物とＯ，Ｏ’−ダイベンジルアスパラギン酸ヒドロクロライドを使用することを除き、前記実施例２の工程５と同一な方法で行なって化学式２３の化合物を得た。 (Process 3)
Except for using the compound of Formula 22 prepared in Step 2 and O, O′-dibenzylaspartic acid hydrochloride prepared in Step 2 as starting materials, the same procedure as in Step 5 of Example 2 was used. A compound was obtained.

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.27 (m, 10H), 5.13 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 5.06 (d, J = 0.8 Hz, 2H), 4.94-4.90 (m, 1H), 3.67 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.64-3.55 (m, 14H), 3.47 (s, 4H), 3.06 (dd, J = 22, 4.8 Hz, 1H), 2.94-2.87 (m, 3H), 2.49 (td, J = 6.8, 2.0 Hz, 2H), 1.44 (s, 18H)。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.27 (m, 10H), 5.13 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 5.06 (d, J = 0.8 Hz, 2H), 4.94-4.90 (m, 1H) , 3.67 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.64-3.55 (m, 14H), 3.47 (s, 4H), 3.06 (dd, J = 22, 4.8 Hz, 1H), 2.94-2.87 (m, 3H ), 2.49 (td, J = 6.8, 2.0 Hz, 2H), 1.44 (s, 18H).

（工程４）
出発物質として前記工程３で製造された化学式２３の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程６と同一な方法で行なって化学式２４の化合物を得た。 (Process 4)
The compound of Formula 24 was obtained in the same manner as in Step 6 of Example 2 except that the compound of Formula 23 prepared in Step 3 was used as a starting material.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.49 (brs, 1H), 7.61 (brd, J = 4.4 Hz, 1H), 4.69 (brs, 1H), 3.68-3.41 (m, 20H), 2.99-2.94 (m, 3H), 2.78 (dd, J = 24, 7.2 Hz, 1H), 2.52 (brs, 1H), 1.45 (s, 18H)。 ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 9.49 (brs, 1H), 7.61 (brd, J = 4.4 Hz, 1H), 4.69 (brs, 1H), 3.68-3.41 (m, 20H), 2.99-2.94 ( m, 3H), 2.78 (dd, J = 24, 7.2 Hz, 1H), 2.52 (brs, 1H), 1.45 (s, 18H).

（工程５）
出発物質として前記工程４で製造された化学式２４の化合物と前記製造例１で製造された化学式３の化合物を使用することを除き、前記実施例２の工程５と同一な方法で行なって化学式２５の化合物を得た。 (Process 5)
Except using the compound of Formula 24 prepared in Step 4 and the compound of Formula 3 prepared in Preparation Example 1 as starting materials, the same procedure as in Step 5 of Example 2 was used. To give a compound.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｎａ^＋）＝２４１８．７０ MALDI-TOF MS (M + Na ⁺ ) = 2418.70

（工程６）
出発物質として前記工程５で製造された化学式２５の化合物を使用することを除き、前記実施例１の工程２と同一な方法で行なって目的化合物（２ｅ）を得た。 (Step 6)
The target compound (2e) was obtained in the same manner as in Step 2 of Example 1 except that the compound of Formula 25 prepared in Step 5 was used as a starting material.

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝１６６７．８ MALDI-TOF MS (M + H ⁺ ) = 1667.8

＜比較例１＞サイクリック｛（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝の製造 Comparative Example 1 ^{Production of} Cyclic {(Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-lysine) ^-arginine -glycine-aspartic acid-D-phenylalanine}

前記実施例１で製造された化学式２Ａの前駆体化合物（２．６ｍｇ，０．００２ｍｍｏｌ）とビス−（Ｎ−テトラエチル）−トリブロモトリカルボニルレニウム（（ＮＥｔ_４）_２ＲｅＢｒ_３（ＣＯ）_３，１．６ｍｇ，０．００２５ｍｍｏｌ）を水：メタノール（ｖ／ｖ＝１／１，１ｍｌ）で溶解して、１時間２０分間撹拌させた後、窒素ガスを用いて溶媒を除去して水に溶解して高性能液体クロマトグラフィーを用いて目的化合物を合成し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析を用いて目的化合物の質量を分析した（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝９９０．８５）。 The precursor compound of Formula 2A prepared in Example 1 (2.6 mg, 0.002 mmol) and bis- (N-tetraethyl) -tribromotricarbonylrhenium ((NEt ₄ ) ₂ ReBr ₃ (CO) ₃ , 1.6 mg, 0.0025 mmol) was dissolved in water: methanol (v / v = 1/1, 1 ml) and stirred for 1 hour and 20 minutes, then the solvent was removed using nitrogen gas and dissolved in water. Then, the target compound was synthesized using high performance liquid chromatography, and the mass of the target compound was analyzed using MALDI-TOF mass spectrometry (MALDI-TOF MS (M + H ⁺ ) = 990.85).

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、０．１％トリフルオロ酢酸が含まれたアセトニトリル（２０％）と蒸留水（８０％）を移動相にして最終３０分後には９０：１０割合に増加させる勾配条件を用いて、静止相にはＣ１８カラム（ＹＭＣ，５μｍ，１０×２５０ｍｍ）を用いて分当り２ｍｌで移動相を流して検出器（２１４ｎｍ，ＵＶ）で検出した結果、参考例１の目的化合物が２１．８分に検出された。 High performance liquid chromatographic separation conditions are as follows: gradient containing 0.1% trifluoroacetic acid in acetonitrile (20%) and distilled water (80%) in mobile phase and increasing to 90:10 ratio after the final 30 minutes. As a result of detecting with a detector (214 nm, UV) using a C18 column (YMC, 5 μm, 10 × 250 mm) as the stationary phase and flowing the mobile phase at 2 ml per minute using the conditions, the target compound of Reference Example 1 Was detected at 21.8 minutes.

＜実施例７＞サイクリック｛（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝の製造 Example 7 Cyclic {(Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine)- Of arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine}

前記実施例１で製造された化学式２Ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例２で製造された化学式２Ｂの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例１と同一な方法で行なって目的化合物を合成して、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析を用いて目的化合物の質量を分析した（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝１２９３．４）。 The same procedure as in Reference Example 1 was performed except that the precursor compound of Formula 2B prepared in Example 2 was used instead of the precursor compound of Formula 2A prepared in Example 1. The compound was synthesized, and the mass of the target compound was analyzed using MALDI-TOF mass spectrometry (MALDI-TOF MS (M + H ⁺ ) = 1293.4).

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（２１４ｎｍ，ＵＶ）を通じて実施例７の目的化合物が２１．６分に検出された。 The high performance liquid chromatography separation was performed under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Example 7 was detected at 21.6 minutes through a detector (214 nm, UV).

＜実施例８＞（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２の製造 Example 8 (Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ Manufacturing of

前記実施例１で製造された化学式２Ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例３で製造された化学式２Ｃの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例１と同一な方法で行なって目的化合物を合成して、ＥＳＩ質量分析を用いて目的化合物の質量を分析した（ＥＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝１６８８．５）。 The same procedure as in Reference Example 1 was performed except that the precursor compound of Formula 2C prepared in Example 3 was used instead of the precursor compound of Formula 2A prepared in Example 1. The compound was synthesized and the mass of the target compound was analyzed using ESI mass spectrometry (ESI MS (M + H ⁺ ) = 1688.5).

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（２１４ｎｍ，ＵＶ）を通じて参考例３の目的化合物が１９．２分に検出された。 High performance liquid chromatography separation was performed under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Reference Example 3 was detected at 19.2 minutes through a detector (214 nm, UV).

＜実施例９＞（トリカルボニル−［^{１８５，１８７}Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−[サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）]_２の製造 Example 9 (Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine)-[cyclic (lysine - arginine - glycine - aspartic acid -D- phenylalanine)] ₂ of the production

前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例５で製造された化学式２ｅの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例１と同一な方法で行なって目的化合物を合成して、ＥＳＩ質量分析を用いて目的化合物の質量を分析した（ＥＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）＝２００７．７）。 The same procedure as in Reference Example 1 was conducted except that the precursor compound of Formula 2e prepared in Example 5 was used instead of the precursor compound of Formula 2a prepared in Example 1. The compound was synthesized, and the mass of the target compound was analyzed using ESI mass spectrometry (ESI MS (M + H ⁺ ) = 2007.7).

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（２１４ｎｍ，ＵＶ）を通じて実施例９の目的化合物が２０．８分に検出された。 The high performance liquid chromatography was separated under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Example 9 was detected at 20.8 minutes through a detector (214 nm, UV).

＜参考例２＞サイクリック｛（トリカルボニル−［^１８８レニウム］−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝の製造 <Reference Example 2> cyclic production of {(tricarbonyl ^{- [188} Rhenium] -N-alpha-bis - hydroxycarbonyl methyl - lysine) - arginine - - glycine aspartate -D- phenylalanine}

アンモニウムボラン（ＮＨ_３−ＢＨ_３ｃｏｍｐｌｅｘ，５ｍｇ）をゴム栓を有する１０ｍｌバイアルに入れて、ＣＯガスを１０分間吹き入れた後、リン酸（Ｈ_３ＰＯ_４，６μｌ）と^１８８ＲｅＯ_４−（１０ｍＣｉ，１ｍｌ）を入れて反応中に内部圧力を緩衝するために空の２０ｍｌ注射器をさして６０℃で１５分間撹拌した。反応が終わって室温まで冷やした後、１００ｍＭＰＢＳ（２００μｌ）と飽和されたナトリウムバイカーボネート（５０μｌ）で中和して、レニウムトリカルボニル化合物［^１８８Ｒｅ（Ｈ_２Ｏ）_３（ＣＯ）_３ ^＋］を合成し、ラジオ薄層クロマトグラフィー（Ｒａｄｉｏ−ＴＬＣ）を通じて反応化合物合成を確認した。 Ammonium borane (NH ₃ —BH ₃ complex, 5 mg) was placed in a 10 ml vial with a rubber stopper, CO gas was blown in for 10 minutes, phosphoric acid (H ₃ PO ₄ , 6 μl) and ¹⁸⁸ ReO ₄ — (10 mCi). In order to buffer the internal pressure during the reaction, an empty 20 ml syringe was pointed and stirred at 60 ° C. for 15 minutes. After the reaction was completed, the mixture was cooled to room temperature, neutralized with 100 mM PBS (200 μl) and saturated sodium bicarbonate (50 μl), and rhenium tricarbonyl compound [ ¹⁸⁸ Re (H ₂ O) ₃ (CO) ₃ ⁺ ]. The reaction compound synthesis was confirmed through radio thin layer chromatography (Radio-TLC).

得られた［^１８８Ｒｅ（Ｈ_２Ｏ）_３（ＣＯ）_３ ^＋］と前記実施例１で製造された化学式２Ａの前駆体化合物（０．５ｍｇ）を入れて、７５℃で６０分間加熱して氷水に浸して冷やした後、ｔＣ１８Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジ分離を通じて精製し、再び高性能液体クロマトグラフィーに注入して目的化合物を精製した。 The obtained [ ¹⁸⁸ Re (H ₂ O) ₃ (CO) ₃ ⁺ ] and the precursor compound of formula 2A prepared in Example 1 (0.5 mg) were added and heated at 75 ° C. for 60 minutes. After cooling in ice water, the product was purified through tC18 Sep-Pak cartridge separation, and injected again into high performance liquid chromatography to purify the target compound.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（ｇａｍｍａ−ｒａｙ，ＮａＩ）を通じて参考例２の目的化合物が２１．８分に検出された。それは、前記参考例１の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間と一致した。減衰補正された放射化学的収率は５０−６０％であって、放射化学的純度は９７％以上である。 Separation under high performance liquid chromatography was performed under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Reference Example 2 was detected at 21.8 minutes through a detector (gamma-ray, NaI). This coincided with the retention time of the compound of Reference Example 1 in the detector (UV, 214 nm). The attenuation corrected radiochemical yield is 50-60% and the radiochemical purity is greater than 97%.

＜実施例１１＞サイクリック｛（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝の製造 Example 11 Cyclic {(Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine -Aspartic acid-D-phenylalanine}

前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例２で製造された化学式２ｂの前駆体化合物を使用することを除き、前記実施例９と同一な方法で行なって目的化合物を製造した。 The same procedure as in Example 9 was used except that the precursor compound of Formula 2b prepared in Example 2 was used instead of the precursor compound of Formula 2a prepared in Example 1. The compound was prepared.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（ｇａｍｍａ−ｒａｙ，ＮａＩ）を通じて実施例１１の目的化合物が２１．６分に検出された。それは、前記実施例７の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間と一致した。減衰補正された放射化学的収率は５０−６０％であっって、放射化学的純度は９７％以上である。 The high performance liquid chromatography was separated under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Example 11 was detected at 21.6 minutes through a detector (gamma-ray, NaI). This coincided with the retention time of the compound of Example 7 in the detector (UV, 214 nm). The attenuation corrected radiochemical yield is 50-60% and the radiochemical purity is greater than 97%.

＜実施例１２＞（トリカルボニル［^１８８Ｒｅ］レニウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２の製造 Example 12 Preparation of (Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂

前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例３で製造された化学式２ｃの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例２と同一な方法で行なって目的化合物を製造した。 The same procedure as in Reference Example 2 was performed except that the precursor compound of Formula 2c prepared in Example 3 was used instead of the precursor compound of Formula 2a prepared in Example 1. The compound was prepared.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（ｇａｍｍａ−ｒａｙ，ＮａＩ）を通じて実施例１２の目的化合物が１９．２分に検出された。それは、前記実施例８の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間と一致した。減衰補正された放射化学的収率は５０−６０％であって、放射化学的純度は９７％以上である。 The high performance liquid chromatography was separated under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Example 12 was detected at 19.2 minutes through a detector (gamma-ray, NaI). This coincided with the retention time of the compound of Example 8 in the detector (UV, 214 nm). The attenuation corrected radiochemical yield is 50-60% and the radiochemical purity is greater than 97%.

前記参考例２及び実施例１１並びに１２の場合、前記参考例１及び実施例９並びに８の化合物に含む非放射性同元素^{１８５，１８７}Ｒｅが放射性同位元素^１８８Ｒｅに変わった化合物であり、分析方法では質量分析で検証された参考例１、７、及び８の化合物の各々の高性能液体クロマトグラフィーでの保持時間（ｔ_Ｒ）と参考例２及び実施例１１並びに１２の化合物の保持時間が一致することを通じて、参考例２及び実施例１１並びに１２で製造された化合物がレニウム−１８８のみが変わった化合物であることを証明した。 In the case of Reference Example 2 and Examples 11 and 12, the non-radioactive same elements ^{185 and 187} Re contained in the compounds of Reference Example 1 and Examples 9 and 8 are compounds in which the radioactive isotope ¹⁸⁸ Re is changed, and the analysis method in reference example, which is verified by mass spectrometry 1, 7, and retention time of each retention time on high performance liquid chromatography (t _R) and the compound of reference example 2 and example 11 and 12 match the compound of 8 through that, the compound prepared in reference example 2 and example 11 and 12 proved to be a compound in which only rhenium-188 has changed.

＜参考例３＞サイクリック｛（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝の製造 Reference Example 3 Production of Cyclic {(Tricarbonyl [ ^99m Tc] Technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine}

ナトリウムカボネート（Ｎａ_２ＣＯ_３，４ｍｇ）、ナトリウムボロハイドライド（ＮａＢＨ_４，５．５ｍｇ）及びＬ−酒石酸ナトリウム二水和物（５ｍｇ）を１０ｍｌのゴム栓を有するバイアルに入れて、ＣＯガスを１０分間注入した。そこに発生器で得た^９９ｍＴｃＯ_４ ⁻（１０ｍＣｉ，１ｍｌ）を注射器で入れて内部圧力を緩衝するために空の２０ｍｌ注射器を栓に突刺した。バイアルを７５℃で２５分間加熱した。以後、前記バイアルを氷水に浸して冷やした後、１００ｍＭＰＢＳ（２００μｌ）と１Ｎ塩酸（１ＮＨＣｌ，１８０μｌ）を用いて中性化させた。合成されたトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ化合物［^９９ｍＴｃ（Ｈ_２Ｏ）_３（ＣＯ）_３ ^＋］は、ラジオ薄層クロマトグラフィー（Ｒａｄｉｏ−ＴＬＣ）を通じて確認した。得られた［^９９ｍＴｃ（Ｈ_２Ｏ）_３（ＣＯ）_３ ^＋］と前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物（０．５ｍｇ）を入れて、７５℃で３０分間加熱して氷水に浸して冷やした後、ｔＣ１８Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジ分離を通じて精製し、再び高性能液体クロマトグラフィーに注入してトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ化合物が標識された化合物を製造した。 Sodium carbonate (Na ₂ CO ₃ , 4 mg), sodium borohydride (NaBH ₄ , 5.5 mg) and sodium L-tartrate dihydrate (5 mg) were placed in a vial with a 10 ml rubber stopper and the CO gas was Infused for 10 minutes. ^99m TcO ₄ ⁻ (10 mCi, 1 ml) obtained with the generator was put there with a syringe, and an empty 20 ml syringe was inserted into the stopper to buffer the internal pressure. The vial was heated at 75 ° C. for 25 minutes. Thereafter, the vial was cooled by immersing it in ice water, and neutralized with 100 mM PBS (200 μl) and 1N hydrochloric acid (1N HCl, 180 μl). The synthesized tricarbonyltechnesium- ^99m compound [ ^99m Tc (H ₂ O) ₃ (CO) ₃ ⁺ ] was confirmed through radio thin layer chromatography (Radio-TLC). The obtained [ ^99m Tc (H ₂ O) ₃ (CO) ₃ ⁺ ] and the precursor compound of formula 2a (0.5 mg) prepared in Example 1 were added and heated at 75 ° C. for 30 minutes. After cooling by immersing in ice water, the product was purified through tC18 Sep-Pak cartridge separation and injected into high performance liquid chromatography again to produce a compound labeled with tricarbonyltechnesium-99m compound.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、０．１％トリフルオロ酢酸が含まれたアセトニトリル（２０％）と蒸留水（８０％）を移動相にして最終３０分後には９０：１０の割合に増加させる勾配条件を用いて、静止相ではＣ１８カラム（ＹＭＣ，５μｍ，１０×２５０ｍｍ）を用いて分当り２ｍｌで移動相を流して検出器（ｇａｍｍａｒｒａｙ，ＮａＩ）で検出した結果、前記参考例３の目的化合物が２０．６分に検出された。それは、前記参考例１の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間（２１．８分）と１分の差がある。減衰補正された放射化学的収率は６０−７０％であって、放射化学的純度は９７％以上である。 High performance liquid chromatography separation conditions are as follows: acetonitrile (20%) containing 0.1% trifluoroacetic acid and distilled water (80%) are used as the mobile phase and the ratio is increased to 90:10 after the final 30 minutes. with a gradient condition, C18 column with a stationary phase (YMC, 5μm, 10 × 250mm ) detector by passing a mobile phase in minutes per 2ml using (gammar ray, NaI) result detected by, of reference example 3 The target compound was detected at 20.6 minutes. It is 1 minute different from the retention time (21.8 minutes) of the compound of Reference Example 1 in the detector (UV, 214 nm). The attenuation corrected radiochemical yield is 60-70% and the radiochemical purity is greater than 97%.

＜実施例１４＞サイクリック｛（トリカルボニル［^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン｝の製造 <Example 14> Cyclic {(tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonyl methyl - glycine _{_{_{_{-CONH (CH 2 CH 2 O)}}}} 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine -Aspartic acid-D-phenylalanine}

前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例２で製造された化学式２ｂの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例３と同一な方法で行なって目的化合物を製造した。 The same procedure as in Reference Example 3 was performed except that the precursor compound of Formula 2b prepared in Example 2 was used instead of the precursor compound of Formula 2a prepared in Example 1. The compound was prepared.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（ｇａｍｍａ−ｒａｙ，ＮａＩ）を通じて参考例３の目的化合物が２１．４分に検出された。それは、前記実施例７の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間（２１．６分）と０．２分の差がある。減衰補正された放射化学的収率は６０−７０％であって、放射化学的純度は９７％以上である。 Separation under high performance liquid chromatography was performed under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Reference Example 3 was detected at 21.4 minutes through a detector (gamma-ray, NaI). It is different from the retention time (21.6 minutes) of the compound of Example 7 in the detector (UV, 214 nm) by 0.2 minutes. The attenuation corrected radiochemical yield is 60-70% and the radiochemical purity is greater than 97%.

＜実施例１５＞（トリカルボニル^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−アスパラギン酸）−［サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）］_２の製造 <Example 15> (Tricarbonyl ^99m Tc) Technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂

前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例３で製造された化学式２ｃの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例３と同一な方法で行なって目的化合物を製造した。 The same procedure as in Reference Example 3 was performed except that the precursor compound of Formula 2c prepared in Example 3 was used instead of the precursor compound of Formula 2a prepared in Example 1. The compound was prepared.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（ｇａｍｍａ−ｒａｙ，ＮａＩ）を通じて実施例１５の目的化合物が１８．４分に検出された。それは、前記実施例８の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間（１９．２分）と０．８分の差がある。減衰補正された放射化学的収率は６０−７０％であって、放射化学的純度は９７％以上である。 The high performance liquid chromatography separation was performed under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Example 15 was detected at 18.4 minutes through a detector (gamma-ray, NaI). It differs from the retention time (19.2 minutes) of the compound of Example 8 in the detector (UV, 214 nm) by 0.8 minutes. The attenuation corrected radiochemical yield is 60-70% and the radiochemical purity is greater than 97%.

＜実施例１６＞（トリカルボニル^９９ｍＴｃ］テクネシウム−Ｎ−α−ビス−ヒドロキシカルボニルメチル−グリシン−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＮＨ−リジン）−[サイクリック（リジン−アルギニン−グリシン−アスパラギン酸−Ｄ−フェニルアラニン）]_２の製造 <Example 16> (Tricarbonyl ^99m Tc) Technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine)-[cyclic (lysine-arginine) -Glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂

前記実施例１で製造された化学式２ａの前駆体化合物の代わりに前記実施例５で製造された化学式２ｅの前駆体化合物を使用することを除き、前記参考例３と同一な方法で行なって目的化合物を合成した。 The same procedure as in Reference Example 3 was performed except that the precursor compound of Formula 2e prepared in Example 5 was used instead of the precursor compound of Formula 2a prepared in Example 1. The compound was synthesized.

高性能液体クロマトグラフィー分離条件は、前記参考例１と同一な条件で分離し、検出器（ｇａｍｍａ−ｒａｙ，ＮａＩ）を通じて実施例１６の目的化合物が１９．９分に検出された。それは、前記実施例９の化合物の検出器（ＵＶ，２１４ｎｍ）での保持時間（２０．８分）と０．９分の差がある。減衰補正された放射化学的収率は５０−７０％であって、放射化学的純度は９７％以上である。 The high performance liquid chromatography was separated under the same conditions as in Reference Example 1, and the target compound of Example 16 was detected at 19.9 minutes through a detector (gamma-ray, NaI). It is different from the retention time (20.8 minutes) in the detector (UV, 214 nm) of the compound of Example 9 by 0.9 minutes. The attenuation corrected radiochemical yield is 50-70% and the radiochemical purity is greater than 97%.

前記参考例３及び実施例１４ないし１６の化合物の場合、前記参考例１及び実施例７並びに８の化合物が含む非放射性同位元素^{１８５，１８７}Ｒｅが、放射性同位元素^９９ｍＴｃに変わった化合物であり、分析方法では質量分析で検証された参考例１及び実施例７並びに８の化合物の各々の高性能液体クロマトグラフィーでの保持時間（ｔ_Ｒ）と参考例３及び実施例１４並びに１６の保持時間が１分内外の差が出ながら前駆体の大部分が高い収率で標識されることを通じて、前記参考例３及び実施例１４ないし１６の化合物がテクネシウム−９９ｍのみ変わった化合物であることを証明した（テクネシウムとレニウムは、周期律表上で同族の金属イオンであって前駆体と同一反応性を有している）。 In the case of the compounds of Reference Example 3 and Examples 14 to 16, the non-radioactive isotopes ^{185 and 187} Re included in the compounds of Reference Example 1 and Examples 7 and 8 are compounds in which the radioactive isotope ^99m Tc is changed. , analytical methods in mass spectrometry verified reference example 1 and example 7 as well as the holding time at each of the high performance liquid chromatography of the compound of 8 (t _R) of reference example 3 and example 14 and 16 retention time It is proved that the compounds of Reference Example 3 and Examples 14 to 16 are compounds in which only technesium-99m is changed through the fact that most of the precursors are labeled with a high yield with a difference of 1 min or less. (Technesium and rhenium are metal ions of the same family on the periodic table and have the same reactivity as the precursor).

＜実験例１＞トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の生物学的活性測定
＜１−１＞結合親和力（ＩＣ_５０）値測定
本発明によるトリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識サイクリックＲＧＤ誘導体の新生血管作用の有力バイオマーカーであるα_ｖβ_３インテグリンに対する結合活性を調べるために、次のような実験を行なった。 <Experimental Example 1> Measurement of biological activity of tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative <1-1> Measurement of binding affinity (IC ₅₀ ) value Tricarbonyltechnesium or rhenium labeled cyclic RGD according to the present invention In order to examine the binding activity to α _v β ₃ integrin, which is a potent biomarker of neovascular action of the derivatives, the following experiment was conducted.

α_ｖβ_３インテグリンが過多発現したことが知られたヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を牛胎児血清（ＦＢＳ）、ヒドロコチソン、ヒト線維芽細胞基本成長因子（ｈＦＧＦ−Ｂ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、Ｒ３−ＩＧＦ−１、アスコルビン酸、人体上皮成長因子（ｈＥＧＦ）、ＧＡ−１０００、及びヘパリンが含まれた内皮細胞塩基担体−２（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｂａｓａｌｍｅｄｉｕｍ−２；ＥＢＭ−２）に３７℃、５％ＣＯ_２の条件下で培養した。１×１０^６個のＨＵＶＥＣ細胞をエッペンドルフチューブに分注した後、２μＣｉのトリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体を添加して、同時に０、０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、１、３、５ｎＭの競争反応基準物質サイクリックＲＧＤ（ｃＲＧＤｙＶ）を各チューブ別に添加して３７℃、５％ＣＯ_２の条件下で１時間の間結合反応を誘導した。反応が終わったＨＵＶＥＣ細胞を１００ｍＭリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で３回水洗した後、ガンマカウンターで競争反応を通じて特異的に結合したトリカルボニルテクネシウムまたはレニウム標識サイクリックＲＧＤ誘導体の放射能を測定した。測定された放射エネルギーの値と競争反応を誘導した基準物質サイクリックＲＧＤの濃度別値を用いて、非線形回帰曲線を完成した後、それを基にＩＣ_５０値を算出した。ＩＣ_５０値の算出は、シグマプロットソフトウェアを用いた。 Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) known to have overexpressed α _v β ₃ integrin were transformed into fetal bovine serum (FBS), hydrocotisone, human fibroblast basic growth factor (hFGF-B), vascular endothelial growth factor ( VEGF), R3-IGF-1, Ascorbic acid, Human Epidermal Growth Factor (hEGF), GA-1000, and Endothelial Cell Basal Medium-2 (EBM-2) containing 37. ° C., and cultured under the conditions of 5% CO _2. After dispensing 1 × 10 ⁶ HUVEC cells into an Eppendorf tube, 2 μCi of tricarbonyltechnesium-99m or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative was added at the same time, 0, 0.01, 0.05, 0 .1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1, 3, 5 nM competitive reaction reference material cyclic RGD (cRGDyV) was added to each tube at 37 ° C., 5% CO ₂ . The binding reaction was induced for 1 hour under conditions. After the reaction was completed, HUVEC cells were washed three times with 100 mM phosphate buffered saline (PBS), and then the radioactivity of the tricarbonyltechnesium or rhenium-labeled cyclic RGD derivative specifically bound through competitive reaction was measured with a gamma counter. . A non-linear regression curve was completed using the measured radiant energy value and the concentration-specific value of the reference substance cyclic RGD that induced a competitive reaction, and an IC ₅₀ value was calculated based on the nonlinear regression curve. IC ₅₀ values were calculated using sigma plot software.

前記方法で本発明の化合物のα_ｖβ_３インテグリンとの結合親和力（ＩＣ_５０）を測定して、その結果を下記表１に示した。 The binding affinity (IC ₅₀ ) of the compound of the present invention with α _v β ₃ integrin was measured by the above method, and the results are shown in Table 1 below.

表１に示したように、サイクリックＲＧＤを１個導入した誘導体である参考例３及び参考例２の化合物はそれぞれＩＣ_５０値が１．６ｎＭ、１．４ｎＭを示し、同一前駆体に放射性同位元素のみを変えた場合に、α_ｖβ_３インテグリンとの結合親和力に差がないことを示した。実施例１４の場合もまたＰＥＧ連結基を導入した時にも参考例２及び参考例３に比べて大きな影響力がないことを確認しました。サイクリックＲＧＤを２個導入した誘導体である実施例１５及び実施例１２の化合物はサブナノモルの結合数値である０．４ｎＭと０．５ｎＭを示して最も優れた結合親和力を示し、この場合も同様にテクネシウム−９９ｍとレニウム−１８８を同じ前駆体に導入するかしないかによる結合親和力に差異がないことが示され、ＰＥＧ連結基を導入した実施例１６の場合にも実施例１２と１５と同様に結合親和力に格別な影響がありませんでした。 As shown in Table 1, the compounds of Reference Example 3 and Reference Example 2 , which are derivatives introduced with one cyclic RGD, show IC ₅₀ values of 1.6 nM and 1.4 nM, respectively. It was shown that there was no difference in binding affinity with α _v β ₃ integrin when only the elements were changed. In the case of Example 14 as well, it was confirmed that there was no significant influence compared to Reference Example 2 and Reference Example 3 when the PEG linking group was introduced. The compounds of Example 15 and Example 12, which are derivatives introduced with two cyclic RGDs, show the best binding affinity with subnanomol binding values of 0.4 nM and 0.5 nM. It was shown that there was no difference in binding affinity depending on whether or not technesium-99m and rhenium-188 were introduced into the same precursor, and also in the case of Example 16 in which a PEG linking group was introduced, as in Examples 12 and 15 There was no significant effect on binding affinity.

したがって、本発明によるサイクリックＲＧＤ誘導体は、導入するサイクリックＲＧＤが多いほどα_ｖβ_３インテグリンに高い結合親和力を示すことが分かる。 Therefore, it can be seen that the cyclic RGD derivative according to the present invention shows higher binding affinity for α _v β ₃ integrin as the cyclic RGD to be introduced increases.

＜１−２＞体内腫瘍モデルマウスでのトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体の腫瘍摂取及び臓器別排出程度の評価
先天的胸腺欠損マウス（７週齢，ＢＡＬＢ／ｃ−ｎｕＳｌｃｓｔｒａｉｎ、以下ヌードマウス）を用いて本発明で得られた三種類のトリカルボニルテクネシウム−９９ｍ標識サイクリックＲＧＤ誘導体（参考例３及び実施例１４並びに１５）の時間による腫瘍モデルマウスの腫瘍と臓器別摂取及び排出程度を実験した。 <1-2> Evaluation of tumor uptake and excretion by organ of tricarbonyltechnesium-99m labeled cyclic RGD derivative in in vivo tumor model mice Congenital athymic mice (7 weeks old, BALB / c-nu Slc strain, hereinafter Intake and excretion by tumor and organ of tumor model mice by time of three types of tricarbonyltechnesium-99m-labeled cyclic RGD derivatives ( Reference Example 3 and Examples 14 and 15) obtained in the present invention using nude mice) The degree was experimented.

ヌードマウスの腫瘍形成は、ヒト膠芽腫Ｕ８７−ＭＧ細胞株（１×１０^６／１００μｌｉｎＰＢＳ）を皮下注射した後、約２週間の成長期間を経て０．４〜０．５ｃｃの大きさの腫瘍形成モデルのみを選別して実験に用いた。 Tumor formation in nude mice, after human glioblastoma U87-MG cell line ^{(1 × 10 6 / 100μl in} PBS) were injected subcutaneously, the 0.4~0.5cc through growth period of about 2 weeks size Only the tumor formation model was selected and used for the experiment.

以後、参考例３及び実施例１４並びに１５で製造された化合物を生理食塩水に溶解して各匹当たり１００μｌ（２０μＣｉ）ずつ尾静脈を通じて注射した。体内分布時間帯は、１０、３０、６０、１２０、２４０分に決定し、個体数は各時間帯に４〜５匹を用いた。各時間帯別にマウスを犠牲にして血液、腫瘍及び各臓器（肝臓、肺、脾臓、腎臓、小腸、大腸、甲状腺、筋肉、脳）を摘出して各臓器の重さ（ｇ）及びガンマカウンターを用いて薬物の臓器摂取率（ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ）を測定した。各臓器の薬物摂取率は、％ＩＤ／ｇ（ｐｅｒｃｅｎｔｉｎｊｅｃｔｅｄｄｏｓｅｐｅｒｇｒａｍ）単位で計算して、その結果を図１〜３に示した。％ＩＤ／ｇ値の算出は、下記の数式１によって計算した。 Thereafter, the compounds prepared in Reference Example 3 and Examples 14 and 15 were dissolved in physiological saline, and 100 μl (20 μCi) per animal was injected through the tail vein. The biodistribution time zone was determined at 10, 30, 60, 120, and 240 minutes, and 4 to 5 animals were used in each time zone. Blood, tumor and organs (liver, lung, spleen, kidney, small intestine, large intestine, thyroid gland, muscle, brain) are removed at the sacrifice of the mouse for each time period, and the weight (g) and gamma counter of each organ are removed. The drug organ uptake rate (radioactivity) was measured. The drug intake rate of each organ was calculated in units of% ID / g (percent injected dose per gram), and the results are shown in FIGS. The% ID / g value was calculated by the following formula 1.

［数１］
％ＩＤ／ｇ＝（薬物の摂取率／薬物の注射量×１００）／各臓器の重さ（ｇ）・・・数式１ [Equation 1]
% ID / g = (drug intake rate / injection amount of drug × 100) / weight of each organ (g) Equation 1

測定結果を下記の表２〜４に示した。 The measurement results are shown in Tables 2 to 4 below.

表２〜４と図１〜３に示したように、参考例３及び実施例１４並びに１５の化合物の時間別腫瘍及び臓器の摂取及び排出程度を詳しくみると、参考例３の化合物は初期に低い腫瘍摂取と高い肝臓と小腸摂取を有し、すべての臓器で時間が経過することにしたがって早く排出されることを確認することができた。薬物注射後１０分に５％ＩＤ／ｇを上位だった肝摂取率は時間が経つにつれて早く排出されて２時間後には０．３％ＩＤ／ｇの非常に低い摂取率を示した。肝臓で代謝された薬物は、大部分腸を通じて体外に排出されることが確認され、注射後２時間までも４％ＩＤ／ｇ水準を維持することからして活発な腸排出が進行していることを確認することができる。その外、血液を含む脳、筋肉組織での特異的摂取率は示されず、甲状腺の摂取率も０．０１〜０．０５％ＩＤ／ｇ水準を維持することからして、生体内で前記薬物の安定性を確認した。腫瘍の摂取率は、注射後１０分に１．４３％ＩＤ／ｇから２時間後の０．３３％ＩＤ／ｇに早い初期摂取率を示す一方、時間が経つにつれて漸次的にその摂取率が減少する様相を確認した。 As shown in Tables 2-4 and 1-3, looking in detail about intake and discharge Hourly tumors and organs of the compound of Reference Example 3 and Example 14 and 15, the compound of Reference Example 3 initially With low tumor intake and high liver and small intestine intake, we were able to confirm that all organs were excreted as time passed. The liver intake rate, which topped 5% ID / g 10 minutes after drug injection, was expelled as time passed, and showed a very low intake rate of 0.3% ID / g 2 hours later. Drugs metabolized in the liver are confirmed to be excreted from the body mostly through the intestine, and active intestinal excretion is progressing because the level remains at 4% ID / g for 2 hours after injection. I can confirm that. In addition, the specific intake rate in the brain and muscle tissue including blood is not shown, and the intake rate of the thyroid gland is maintained at the 0.01-0.05% ID / g level. The stability of was confirmed. The tumor intake rate shows an early initial intake rate from 1.43% ID / g 10 minutes after injection to 0.33% ID / g 2 hours later, while the intake rate gradually increases over time. A decreasing aspect was confirmed.

サイクリックＲＧＤのリジンにＰＥＧ鎖を連結して標識ポケットが有する（−）イオンとサイクリックＲＧＤのアルギニンが有する（＋）イオン間の相殺効果を減らすために合成した実施例１４の化合物の時間別腫瘍及び臓器の摂取及び排出程度は、薬物注射後１０分に５．３％ＩＤ／ｇの摂取率を示し、肝の場合時間が経つにつれて早く代謝されて注射後４時間には０．６４％ＩＤ／ｇの非常に低い摂取率を示し、肝臓で代謝された薬物は大部分腸を通じて体外に排出されることを確認することができた。注射後２時間からは、小腸を過ぎた薬物の大腸摂取率が急激に増加することからして、この時期が体外への排出が始まっている時間であることを確認した。少量の薬物は、腎臓でのろ過過程を通じて膀胱に集まってから小便で排出されることが分かった。血液を含む脳、筋肉組織での特異的な摂取率は示されず、甲状腺の摂取率も０．０１〜０．２０％ＩＤ／ｇ水準を維持することからして生体内で前記薬物の安定性を確認した。腫瘍の摂取率は、注射後１０分に５．４３％ＩＤ／ｇで比較的高い水準を示し、時間が経って代謝が進行するにつれて徐々に減少して前記薬物の４時間目の摂取率は１．４１％ＩＤ／ｇ値を示した。 Time-specification of the compound of Example 14 synthesized to reduce the offset effect between the (−) ion of the label pocket and the (+) ion of the cyclic RGD arginine by linking the PEG chain to the lysine of cyclic RGD The degree of uptake and excretion of tumors and organs showed an intake rate of 5.3% ID / g 10 minutes after drug injection, and in the case of liver, it was rapidly metabolized over time and 0.64% after 4 hours after injection. It showed a very low intake rate of ID / g, and it was confirmed that most of the drug metabolized in the liver was excreted from the body through the intestine. From 2 hours after the injection, since the large intestine intake rate of the drug that passed through the small intestine increased rapidly, it was confirmed that this time was the time when excretion outside the body began. A small amount of drug was found to collect in the urine after collecting in the bladder through the kidney filtration process. No specific uptake rate in the brain and muscle tissue including blood is shown, and the uptake rate of the thyroid gland maintains 0.01 to 0.20% ID / g level, so the stability of the drug in vivo It was confirmed. The uptake rate of the tumor showed a relatively high level of 5.43% ID / g 10 minutes after the injection, and gradually decreased as the metabolism progressed over time. A 1.41% ID / g value was indicated.

２個のサイクリックＲＧＤを導入した実施例１５の化合物での時間別腫瘍及び臓器の摂取及び排出程度は、薬物注射後１０分に３．１％ＩＤ／ｇで非常に低い初期の肝摂取率を示し、非常に早い肝代謝速度を示して４時間後には１％ＩＤ／ｇ水準まで急激に減少した。肝臓で代謝が進行された前記薬物は、非常に早い速度で腎臓を通じて小便で排出されていることを確認することができ、小便を通じた体外排出に起因した腎臓の最大摂取率は注射後６０分に一時１２％ＩＤ／ｇを上回った。小腸と大腸を含む前記薬物の腸を通じた排出は５％ＩＤ／ｇ台未満で不備な水準であって、投与された大部分の薬物が小便を通じて体外に排出されることを確認した。血液を含む脳、筋肉組織での特異的が摂取率は示されず、甲状腺の摂取率も０．１％ＩＤ／ｇ水準を持続的に維持することからして、生体内で前記薬物の安定性を確認した。初期１０分の腫瘍の摂取率は１２．４４％ＩＤ／ｇで非常に高く、早い薬物の腫瘍集積能力を示し、注射後１時間までその摂取を維持した。以後、徐々に腫瘍から薬物が抜け出ることを確認することができたが、注射後４時間目にも６％ＩＤ／ｇを越える非常に高い腫瘍摂取率を確認した。 Initial liver intake rate of 3.1% ID / g at 10 minutes after drug injection was very low at the time of tumor and organ uptake and excretion with the compound of Example 15 into which two cyclic RGDs were introduced. And showed a very fast liver metabolic rate, and after 4 hours it decreased rapidly to the 1% ID / g level. The drug whose metabolism has progressed in the liver can be confirmed to be excreted through the kidney at a very fast rate, and the maximum intake rate of the kidney due to extracorporeal excretion through the urine is 60 minutes after injection. Temporarily exceeded 12% ID / g. Excretion of the drug including the small intestine and large intestine through the intestine was less than 5% ID / g level, and it was confirmed that most of the administered drug was discharged out of the body through urine. Specificity in the brain and muscle tissue including blood is not shown, but the thyroid intake rate is also maintained at the 0.1% ID / g level continuously. It was confirmed. The initial 10-minute tumor uptake rate was very high at 12.44% ID / g, indicating a fast tumor accumulation capacity of the drug and maintaining that up to 1 hour after injection. Thereafter, it was confirmed that the drug gradually escaped from the tumor, but a very high tumor intake rate exceeding 6% ID / g was confirmed even 4 hours after the injection.

＜１−３＞体内腫瘍モデルマウスでのトリカルボニルテクネシウム−９９ｍサイクリックＲＧＤ誘導体のＳＰＥＣＴ映像評価
腫瘍モデルマウスの製作は、前記＜１−２＞と同一な方法で製作した。腫瘍形成マウスモデルを用いて本発明による参考例３及び実施例１４並びに１５の化合物（０．５〜１ｍＣｉ）を生理食塩水１００μｌに溶解して尾静脈に注射して、映像獲得時間の間の動物モデルの麻酔は２％イソフルランガスを用い、注射時間から１８０分間マウス映像を小動物専用単光子放射型コンピュータ断層撮影機（Ｂｉｏｓｃａｎ，ｎａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴ）を通じて静止画像を獲得した。映像プロトコルは次のように放射と送信を繰り返した。 <1-3> SPECT image evaluation of tricarbonyltechnesium-99m cyclic RGD derivative in in vivo tumor model mouse The tumor model mouse was produced by the same method as in <1-2> above. Using the tumorigenic mouse model, the compounds of Reference Example 3 and Example 14 and 15 (0.5-1 mCi) according to the present invention were dissolved in 100 μl of physiological saline and injected into the tail vein, during the image acquisition time . The animal model was anesthetized using 2% isoflurane gas, and a mouse image was obtained for 180 minutes from the injection time through a single photon emission computed tomography machine (Bioscan, nanoSPECT / CT) dedicated to small animals. The video protocol repeated emission and transmission as follows.

［２０分放射＋送信］×９回 [20 minutes emission + transmission] x 9 times

前記参考例３及び実施例１４並びに１５の化合物のＳＰＥＣＴ映像を図４〜６に示した。 SPECT images of the compounds of Reference Example 3 and Examples 14 and 15 are shown in FIGS.

参考例３の化合物の場合、薬物注射初期１０分後から腫瘍に摂取され約１時間まで観察が可能だった。大部分の薬物が肝代謝を経て腸に早く排出されることを確認することができ、一部薬物だけが腎臓を通じて小便で排出されることが分かる。 In the case of the compound of Reference Example 3 , it was ingested by the tumor from 10 minutes after the initial drug injection and could be observed for about 1 hour. It can be confirmed that most drugs are rapidly excreted into the intestine through liver metabolism, and only some drugs are excreted by urine through the kidney.

実施例１４の化合物の場合、薬物注射初期１０分後から腫瘍の高い摂取率を示しそれは約３時間まで観察が可能だった。前記参考例３の化合物と類似に肝代謝を経て腸に早く排出されることを確認することができ、一部薬物だけが腎臓を通じて小便で排出されることが分かる。 The compound of Example 14 showed a high tumor uptake rate 10 minutes after the initial drug injection, which could be observed up to about 3 hours. Similar to the compound of Reference Example 3 , it can be confirmed that it is rapidly excreted into the intestine through liver metabolism, and it can be seen that only a part of the drug is excreted by urine through the kidney.

実施例１５の化合物の場合、薬物注射初期１０分後から非常に高い腫瘍摂取率を示して３時間以上持続することを確認することができた。参考例３及び実施例１４の化合物とは相異して肝臓で代謝された薬物を大部分が腎臓を通じて小便で排出されることを確認することができる。図７では、腫瘍を基準で肝臓、腎臓、筋肉の相対的な摂取比率をグラフで表示し、前記結果を通じて表４の実施例１５の化合物の腫瘍摂取及び臓器別排出程度評価と、図６での実施例１５の化合物のＳＰＥＣＴ映像評価実験との間の同一性を観察することができる。 In the case of the compound of Example 15, a very high tumor uptake rate was exhibited 10 minutes after the initial drug injection, and it was confirmed that it lasted for 3 hours or more. Unlike the compounds of Reference Example 3 and Example 14, it can be confirmed that most of the drugs metabolized in the liver are excreted by urine through the kidney. In FIG. 7, the relative intake ratios of the liver, kidneys, and muscles are displayed in a graph based on the tumor. Based on the results, evaluation of the degree of tumor intake and excretion by organ of the compound of Example 15 in Table 4 is shown in FIG. The identity of the compound of Example 15 with the SPECT image evaluation experiment can be observed.

＜１−４＞体内腫瘍モデルマウスでの競争反応基準物質サイクリックＲＧＤ誘導体（ｃＲＧＤｙＶ）注入フトリカルボニルテクネシウム−９９ｍサイクリックＲＧＤ誘導体のＳＰＥＣＴ映像評価
サイクリックＲＧＤ誘導体の特異的腫瘍摂取を確認するために、競争反応基準物質サイクリックＲＧＤ（ｃＲＧＤｙＶ）を投与した後、ＳＰＥＣＴ／ＣＴ映像を獲得した。基準物質には、サイクリックＲＧＤ−タイロシン−バリン誘導体を１８ｍｇ／Ｋｇの濃度で尾静脈注射した。基準物質注射後１０分後にテクネシウム−９９ｍが標識された実施例１５の化合物（１ｍＣｉ／２００μｌ）を尾静脈に注射した。注射と同時にＳＰＥＣＴ／ＣＴ映像を獲得し、その条件は下記のとおりである。 <1-4> SPECT image evaluation of competitive reaction reference substance cyclic RGD derivative (cRGDyV) injection tricarbonyltechnesium-99m cyclic RGD derivative in in vivo tumor model mouse To confirm specific tumor uptake of cyclic RGD derivative After the competitive reaction reference substance cyclic RGD (cRGDyV) was administered, SPECT / CT images were acquired. As a reference substance, cyclic RGD-tylosin-valine derivative was injected into the tail vein at a concentration of 18 mg / Kg. Ten minutes after injection of the reference substance, the compound of Example 15 (1 mCi / 200 μl) labeled with technesium-99m was injected into the tail vein. A SPECT / CT image is acquired simultaneously with the injection, and the conditions are as follows.

映像獲得時間の間、動物モデルの痲酔は２％イソフルランガスを用い、動物モデルの腫瘍の大きさは０．４ｃｃだった。ＣＴ映像は、４５Ｋｖ、１７８μＡの条件下で４分３０秒間撮影し、ＳＰＥＣＴ映像は、注射と同時に１０分おきに総９回（注射後９０分）獲得して図８に示した。 During the video acquisition time, the animal model was intoxicated with 2% isoflurane gas and the animal model tumor size was 0.4 cc. CT images were taken for 4 minutes and 30 seconds under conditions of 45 Kv and 178 μA, and SPECT images were acquired 9 times every 90 minutes (90 minutes after injection) at the same time as the injection, and are shown in FIG.

図８に示したように、α_ｖβ_３インテグリンに特異的結合をすると知られたサイクリックＲＧＤ（ｃＲＧＤｙＶ）を注入した後、本発明による実施例１５の化合物のＳＰＥＣＴ映像が図６の実施例１５の化合物の映像対比腫瘍摂取が２５分で９４％以上減少することを通じて、α_ｖβ_３インテグリンに特異的結合を通じた腫瘍映像が反映されることの証拠とした。 As shown in FIG. 8, after injecting cyclic RGD (cRGDyV) known to specifically bind to α _v β ₃ integrin, a SPECT image of the compound of Example 15 according to the present invention is shown in FIG. This was evidence that tumor imaging through specific binding to α _v β ₃ integrin was reflected through a reduction in tumor uptake of 15 compounds by 94% or more in 25 minutes.

＜１−５＞体内腫瘍モデルマウスでのトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の腫瘍成長阻害及び治療性能評価
トリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の腫瘍成長抑制能力を確認するため、治療効果実験を行なった。 <1-5> Tumor Growth Inhibition and Treatment Performance Evaluation of Tricarbonylrhenium-188 Labeled Cyclic RGD Derivative in Body Tumor Model Mice In order to confirm the ability of tricarbonylrhenium-188 labeled cyclic RGD derivative to inhibit tumor growth, treatment was performed. An effect experiment was conducted.

週１回ずつ４週間総４回、レニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体である実施例５を注射した。治療効果判定モデルは、３００μＣｉの少ない放射能注射グループと６００μＣｉの多い放射能注射グループに分けて作り、同じ時点に滅菌生理食塩水を注射する対照群と毎日１００μｇのサイクリックＲＧＤ（ｃＲＧＤｙＶ）を腹腔に注射する比較群とを設定した。実施例１１の化合物と滅菌生理食塩水の注射は、尾静脈を通じて投薬した。週１回、ＣＴ映像を獲得して皮下腫瘍の成長程度及び大きさを映像で測定し、週３回ノギスを用いた腫瘍の実測及び動物モデルの体重を総４週間持続的に測定してグラフに表示して、その結果を図９に示した。 Example 5 which is a rhenium-188 labeled cyclic RGD derivative was injected once a week for a total of 4 times for 4 weeks. The therapeutic effect judgment model is divided into a radiotherapy injection group with a small amount of 300 μCi and a radioinjection group with a high amount of 600 μCi. A control group in which sterile saline is injected at the same time point and 100 μg of cyclic RGD (cRGDyV) daily are injected into the peritoneal cavity. And a comparative group to be injected. Injection of the compound of Example 11 and sterile saline was dosed through the tail vein. Once a week, CT images were acquired to measure the extent and size of subcutaneous tumor growth, and the tumors were measured using calipers three times a week and the weight of the animal model was continuously measured for a total of 4 weeks. The results are shown in FIG.

図９に示したように、初期０．６９、０．７ｃｃの腫瘍の大きさを示した滅菌生理食塩水投与群とサイクリックＲＧＤ投与群は、時間が経つにつれて腫瘍の成長速度が急激に増加することを確認した。治療２週目には、それぞれ３．０、３．９ｃｃまで成長し、３週目には２個のグループとも８．０ｃｃまで成長し、治療最後の週にはそれぞれ１３．０、１２，９ｃｃで非常に早い腫瘍の成長を示した。２個のグループ間の腫瘍成長速度は、有意的差異を有さず体重も初期２３ｇから滅菌生理食塩水投与群が３３ｇ、サイクリックＲＧＤ投与群が３０ｇで、非常に大きな増加幅を示した。それは、既存の動物の重さから腫瘍が急速に成長したことによる結果であると思慮される。実施例１１の３００μＣｉ投与群の初期腫瘍は、０．２３ｃｃの大きさから週１回ずつ４週間にわたった治療が終わる時点で、０．６６ｃｃまで腫瘍の成長を確認した。滅菌生理食塩水投与群とサイクリックＲＧＤ投与群に比べて約５０％程度の腫瘍成長抑制能力を有していることを確認した。放射エネルギーによる体重の変化は、治療前２０ｇから４週間の治療後２５ｇに増加したが、実際治療過程で動物の重さは減少することが観察され、約５ｇの重さの増加は成長した腫瘍の重さであると思慮される。より高い放射エネルギーを放出する６００μＣｉ投与群の腫瘍成長は、初期０．３ｃｃから２週目０．３ｃｃ、３週目０．７ｃｃ、最後の治療が終わる時点では１．４ｃｃで、非常に遅い腫瘍成長速度を示し、それは滅菌生理食塩水投与群とサイクリックＲＧＤ投与君に比べて約９０％、低い放射エネルギー治療群（３００μＣｉ）に比べて約７９％程度の腫瘍成長抑制能力を示した。４回にわたった投与薬物の高い放射エネルギーに起因した動物の体重変化は、治療前１９．９ｇから漸次的に減少して治療が終わる時点の重さは１７．０９ｇで、約１４％減少した。それは、生命倫理審議委員会（ＩＲＢ）が提示する腫瘍の放射治療の前後体重変化が、２０％を越えてはいけないという基準において、腫瘍成長抑制を示した結果である。 As shown in FIG. 9, the growth rate of the tumor increased rapidly with time in the sterilized physiological saline administration group and the cyclic RGD administration group that showed the initial tumor size of 0.69 and 0.7 cc. Confirmed to do. In the second week of treatment, it grew to 3.0 and 3.9 cc, respectively, and in the third week, both groups grew to 8.0 cc. Showed very fast tumor growth. The tumor growth rate between the two groups was not significantly different, and the body weight increased from 23 g in the initial stage to 33 g in the sterilized physiological saline administration group and 30 g in the cyclic RGD administration group. It is thought to be the result of the rapid growth of the tumor from the weight of the existing animal. The initial tumor in the 300 μCi administration group of Example 11 was confirmed to grow to 0.66 cc at the time when treatment was completed once a week for 4 weeks from a size of 0.23 cc. It was confirmed that the tumor growth inhibitory ability was about 50% compared to the sterilized physiological saline administration group and the cyclic RGD administration group. The change in body weight due to radiant energy increased from 20 g before treatment to 25 g after 4 weeks of treatment, but in fact it was observed that the weight of the animal decreased during the course of treatment, with an increase of about 5 g in weight indicating a grown tumor It is thought that it is the weight of. Tumor growth in the 600 μCi group that released higher radiant energy was 0.3 cc from the initial stage to 0.3 cc in the second week, 0.7 cc in the third week, 1.4 cc at the end of the last treatment, and very slow tumor It showed a growth rate, which was about 90% of the ability to suppress tumor growth compared to the sterilized saline administration group and the cyclic RGD administration group, and about 79% of the low radiant energy treatment group (300 μCi). Animal weight change due to the high radiant energy of the drug administered over 4 doses was gradually reduced from 19.9 g before treatment and the weight at the end of treatment was 17.09 g, decreased by about 14% . It is the result of showing tumor growth inhibition on the basis that the change in body weight before and after radiation treatment of tumors presented by the Bioethics Board (IRB) should not exceed 20%.

＜１−６＞体内腫瘍モデルマウスでのトリカルボニルレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体の腫瘍成長阻害及び治療性能評価２
同じ腫瘍大きさ（０．３ｃｃ）の体内腫瘍モデルマウス二匹を用いて、レニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体である実施例１２の化合物（６００μＣｉ／２００μｌ）を注射したモデルと注射しない腫瘍モデルを、３日後に実施例１５の化合物を用いてＳＰＥＣＴ映像撮影した結果を図１０に示した。 <1-6> Tumor Growth Inhibition and Treatment Performance Evaluation 2 of Tricarbonylrhenium-188 Labeled Cyclic RGD Derivative in In vivo Tumor Model Mice 2
Two in vivo tumor model mice having the same tumor size (0.3 cc) were used to inject a model in which the compound of Example 12 (600 μCi / 200 μl), which is a rhenium-188-labeled cyclic RGD derivative, was injected, and a tumor model that was not injected. FIG. 10 shows the results of SPECT video shooting using the compound of Example 15 three days later.

注射時間から６０分間マウス映像を小動物専用単光子放射型コンピュータ断層撮影機（Ｂｉｏｓｃａｎ、ｎａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴ）を通じて、静止画像を獲得した。映像プロトコルは、次のように放射と送信を繰り返した。 Mouse images were acquired for 60 minutes from the injection time through a single photon emission computed tomograph (Bioscan, nanoSPECT / CT) dedicated to small animals. The video protocol repeated emission and transmission as follows.

［１０分放射＋送信］×６回 [10 minutes emission + transmission] x 6 times

実施例１２の化合物投与群と正常群間の腫瘍、肝臓、腎臓、筋肉の相対的な摂取割合をグラフにして図１０に示し、２個のグループ間の腫瘍を直接除去した後、腫瘍周辺の血管分布を写真に撮影して図１１に示した。 The relative intake ratio of the tumor, liver, kidney, and muscle between the compound administration group of Example 12 and the normal group is shown as a graph in FIG. 10, and after removing the tumor between the two groups directly, The blood vessel distribution was photographed and shown in FIG.

図１０及び図１１に示したように、初期０．３ｃｃの腫瘍大きさは、実施例１２の化合物を注射したモデルでは０．３５ｃｃに育ち、投与しないモデルは０．６５ｃｃの腫瘍大きさを示し、腫瘍のＳＰＥＣＴ映像比較のためにテクネシウム標識サイクリックＲＧＤ誘導体である実施例１５の化合物を注入して、二つのグループ間の映像を比較時、腫瘍での摂取の割合が実施例１２の化合物を投与した群で５９％減少することを確認することができた。また二つのグループ間の腫瘍写真で、実施例１２の化合物を投与したモデルの腫瘍が、投与しないモデルの腫瘍とは異なり、周辺の血管分布が確実に少なく、腫瘍を取り囲んだ血管の数も急激に減ったことを確認し、摘出した腫瘍組織スライスをＣＤ−３１血管染色した時にも、実施例１２を投与した腫瘍細胞では明確に管が観察されなかった。また、腫瘍組織スライドにＱ−ｄｏｔが導入された二個のＲＧＤ誘導体を利用したα_ｖβ_３インテグリン分布評価実験で、図１１のように実施例１２を投与した腫瘍組織で大部分のインテグリンが損傷されていることを確認できた。 As shown in FIGS. 10 and 11, the initial tumor size of 0.3 cc grew to 0.35 cc in the model injected with the compound of Example 12 , and the non-administered model exhibited a tumor size of 0.65 cc. Injecting the compound of Example 15 which is a technesium-labeled cyclic RGD derivative for comparison of SPECT images of the tumor, and comparing the images between the two groups, the proportion of ingestion in the tumor is the compound of Example 12 It was confirmed that there was a 59% decrease in the administered group. In addition, in the tumor photographs between the two groups, the tumor of the model administered with the compound of Example 12 is different from the tumor of the model not administered, the peripheral blood vessel distribution is surely small, and the number of blood vessels surrounding the tumor is also sharp. Even when the excised tumor tissue slice was stained with CD-31 blood vessels, no tube was clearly observed in the tumor cells administered with Example 12. In addition, in the α _v β ₃ integrin distribution evaluation experiment using two RGD derivatives in which Q-dot was introduced into the tumor tissue slide, most integrin was found in the tumor tissue administered with Example 12 as shown in FIG. I was able to confirm that it was damaged.

したがって、本発明によるトリカルボニルレニウム−１８８標識されたサイクリックＲＧＤ誘導体は、腫瘍の成長阻害及び腫瘍の新生血管作用抑制力が優れているので、腫瘍の新生血管作用から誘発される疾病の治療に有用に用いることができる。 Therefore, the tricarbonylrhenium-188-labeled cyclic RGD derivative according to the present invention is excellent in tumor growth inhibition and tumor neovascular action-suppressing ability, so that it can be used for the treatment of diseases induced by tumor neovascular action. It can be usefully used.

一方、本発明による前記化合物は、目的によって多くの形態製剤化が可能である。下記には、本発明による前記化合物を活性成分として含むいくつかの製剤化方法を例示するが、本発明がこれに限定されるのではない。 On the other hand, the compound according to the present invention can be formulated in many forms depending on the purpose. In the following, several preparation methods comprising the compound according to the present invention as an active ingredient are exemplified, but the present invention is not limited thereto.

＜製剤例＞注射剤の製造
本発明の化学式１の化合物５ｍＣｉ
エタノール１００ｍｇ
生理食塩水２０００ｍｇ <Preparation Example> Production of Injectable Compound 5mCi of Formula 1 of the Present Invention
Ethanol 100mg
Saline 2000mg

本発明の化学式１の化合物をエタノールとともに蒸留水に溶解させて、滅菌フィルターを通過させて滅菌バイアルに貯蔵後、通常の方法によって注射剤を製造した。 The compound of Formula 1 of the present invention was dissolved in distilled water together with ethanol, passed through a sterilizing filter and stored in a sterilized vial, and then an injection was produced by a usual method.

Claims

A compound represented by the following chemical formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

(The chemical formula 1 means the following chemical formula 1A, chemical formula 1B, or chemical formula 1C:

(In Formula 1A,
M is ^99m Tc, ¹⁸⁸ Re or ^185,187 Re,
R ¹ is

And
N is an integer of 4 to 8,
R ³ is —H or —OH;
R ⁴ is — (CH ₂ ) _m — or — (CH ₂ ) _m —COO—,
m is an integer from 1 to 8,
When R ⁴ is — (CH ₂ ) _m —COO—, the oxygen atom bonding part is bonded to R ² or the alkylene group bonding part is bonded to R ² . );

(In chemical formula 1B,
M is ^99m Tc, ¹⁸⁸ Re, or ^185,187 Re,
R ¹ is

Or

And
N is an integer of 0 to 8,
A ¹ is an amino acid selected from the group consisting of aspartic acid, lysine, glutamic acid, tyrosine, cysteine, threonine, and serine;
R ² is —NH ₂ —,
R ³ is —H or —OH;
R ⁴ is — (CH ₂ ) _m — or — (CH ₂ ) _m —COO—,
m is an integer from 1 to 8,
When R ⁴ is — (CH ₂ ) _m —COO—, the oxygen atom bonding part is bonded to R ² or the alkylene group bonding part is bonded to R ² . );as well as

(In Formula 1C,
M is ^99m Tc, ¹⁸⁸ Re, or ^185,187 Re,
R ¹ is

Or

And
N is an integer of 0 to 8,
A ¹ and A ² are amino acids selected from the group consisting of aspartic acid, lysine, glutamic acid, tyrosine, cysteine, threonine, and serine;
R ² is —NH ₂ —,
R ³ is —H or —OH;
R ⁴ is — (CH ₂ ) _m — or — (CH ₂ ) _m —COO—,
m is an integer from 1 to 8,
When R ⁴ is — (CH ₂ ) _m —COO—, the oxygen atom bonding part is bonded to R ² or the alkylene group bonding part is bonded to R ² . ).

The compound represented by Formula 1 is
4) cyclic {(tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonylmethyl _{_{_{_{-NH 2 (CH 2 CH 2 O}}}} ) 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine - aspartic acid - D-phenylalanine},
5) Cyclic {(tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-NH ₂ (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid- D-phenylalanine},
6) Cyclic {(tricarbonyl ^{- [185, 187} Re] rhenium -N-alpha-bis - hydroxycarbonylmethyl _{_{_{_{-NH 2 (CH 2 CH 2 O}}}} ) 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine - Aspartic acid-D-phenylalanine},
7) Cyclic {(tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonyl methyl - glycine _{_{_{_{-CONH (CH 2 CH 2 O)}}}} 4 CH 2 CH 2 CONH- lysine) - arginine - glycine - aspartic acid -D-phenylalanine},
8) Cyclic {(tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine-aspartic acid -D-phenylalanine},
9) Cyclic {(Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-glycine-CONH (CH ₂ CH ₂ O) ₄ CH ₂ CH ₂ CONH-lysine) -arginine-glycine -Aspartic acid-D-phenylalanine},
10) (Tricarbonyl [ ^99m Tc] Technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ ,
11) (Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ ,
12) (tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ ,
13) {tricarbonyl ^[99m Tc] technetium -N-alpha-bis - hydroxycarbonyl methyl - (polyethylene _{glycol) n} - aspartate} - [Cyclic (lysine - arginine - glycine - aspartic acid -D- _{phenylalanine)] 2} , (N = 0-8),
14) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ , (N = 0-8),
15) {Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n ^-aspartic acid}-[cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine) )] ₂ , (n = 0-8),
16) {Tricarbonyl [ ^99m Tc] technesium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{(polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid) -D-phenylalanine)]} ₂ , (n = 0-8),
17) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{(polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid) -D-phenylalanine)]} ₂ , (n = 0-8),
18) {Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n ^-aspartic acid}-{(polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine) -Aspartic acid-D-phenylalanine)]} ₂ , (n = 0-8),
19) (Tricarbonyl [ ^<99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ ,
20) (Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ ,
21) (Tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl-aspartic acid)-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ ,
22) {Tricarbonyl [ _< ^99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D- Phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
23) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D- Phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
24) {Tricarbonyl- [ ^185,187 Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n ^-aspartic acid}-{aspartic acid- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid) -D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
25) {Tricarbonyl [ _< ^99m > Tc] technesium-N- [alpha] -bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- (polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine) -Aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8),
26) {Tricarbonyl [ ¹⁸⁸ Re] Rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- (polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine) ^-Aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8), and 27) {Tricarbonyl- [ ^185,187Re ] rhenium-N-α-bis-hydroxycarbonylmethyl- (polyethylene glycol) _n -aspartic acid}-{aspartic acid- (polyethylene glycol) _n- [cyclic (lysine-arginine-glycine-aspartic acid-D-phenylalanine)] ₂ } ₄ , (n = 0-8)
The compound according to claim 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein the compound is selected from the group consisting of:

As shown in Scheme 1 below,
The manufacturing method of the compound represented by Chemical formula 1 of Claim 1 including the process of making tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonyl rhenium-188 react with the precursor compound of Chemical formula 2:

(The chemical formula 1 means the following chemical formula 1A, chemical formula 1B, or chemical formula 1C,
The chemical formula 2 means the following chemical formula 2A, 2B, or 2B,
When the chemical formula 2 means the chemical formula 2A, the chemical formula 1 means the chemical formula 1A,
When the chemical formula 2 means the chemical formula 2B, the chemical formula 1 means the chemical formula 1B,
When the chemical formula 2 means the chemical formula 2C, the chemical formula 1 means the chemical formula 1C. :

(In Formula 1A,
M is ^99m Tc or ¹⁸⁸ Re;
R ¹ , R ³ , and R ⁴ are the same as defined in Chemical Formula 1A of Claim 1. );

(In chemical formula 1B,
M is ^99m Tc or ¹⁸⁸ Re;
R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , and A ¹ are the same as those defined in Chemical Formula 1B of Claim 1. );

(In Formula 1C,
M is ^99m Tc or ¹⁸⁸ Re;
A ¹ , A ² , R ¹ , R ² , R ³ , and R ⁴ are the same as those defined in Chemical Formula 1C of Claim 1. );

(In Chemical Formula 2A, R ¹ , R ³ , and R ⁴ are the same as those defined in Chemical Formula 1A of Claim 1);

(In Formula 2B, A ¹ , R ¹ , R ² , R ³ , and R ⁴ are the same as defined in Formula 1B of Claim 1); and

(In Chemical Formula 2C, R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , A ¹ , and A ² are the same as those defined in Chemical Formula 1C of Claim 1).

In claim 3, the step comprises diluting tricarbonyltechnesium-99m or tricarbonylrhenium-188 to 0.5-5 ml of distilled water solvent and placing in a reaction vessel containing the precursor of Formula 2; The production method according to claim 3, wherein the compound represented by Chemical Formula 1B or Chemical Formula 1C is produced by heating and reacting at -80 ° C for 30-60 minutes.

As shown in Scheme 2 below,
(NEt ₄ ) ₂ Re (CO) ₃ Br ₃ is added to the precursor compound of Formula 2 and reacted to produce a compound in which tricarbonyl ^185,187 Re of Formula 1a is introduced. Method for producing the represented compound:

(Formula 1a is included in Formula 1 of Claim 1,
The chemical formula 1a means the following chemical formula 1A, chemical formula 1B, or chemical formula 1C,
The chemical formula 2 means the following chemical formula 2A, 2B, or 2B,
When the chemical formula 2 means the chemical formula 2A, the chemical formula 1a means the chemical formula 1A,
When the chemical formula 2 means the chemical formula 2B, the chemical formula 1a means the chemical formula 1B,
When the chemical formula 2 means the chemical formula 2C, the chemical formula 1a means the chemical formula 1C. :

(In Formula 1A,
M is ^185,187 Re,
R ¹ , R ³ , and R ⁴ are the same as defined in Chemical Formula 1A of Claim 1. );

(In chemical formula 1B,
M is ^185,187 Re,
R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ , and A ¹ are the same as those defined in Chemical Formula 1B of Claim 1. );

(In Formula 1C,
M is ^185,187 Re,
A ¹ , A ² , R ¹ , R ² , R ³ , and R ⁴ are the same as those defined in Chemical Formula 1C of Claim 1. );

6. The process according to claim 5, wherein the step comprises diluting the reagent (NEt ₄ ) ₂ Re (CO) ₃ Br ₃ in 0.5 to 5 ml of distilled water solvent and placing it in a reaction vessel containing the precursor of Formula 2. The method according to claim 5, wherein the compound introduced with tricarbonyl ^185,187 Re of the formula 1a is produced by heating and reacting at 70 to 80 ° C. for 55 to 65 minutes.

A pharmaceutical composition for diagnosing neovascular-related diseases, comprising as an active ingredient the compound represented by Chemical Formula 1 of claim 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

The diagnostic pharmaceutical composition according to claim 7, wherein the composition is administered intravenously to a subject, and a neovascular-related disease is diagnosed by single photon emission computed tomography.

The neovascular-related diseases, thrombosis, wherein the myocardial ischemia is alpha _v disease beta ₃ integrin is distributed excessively selected from the group consisting of solidified tumors and metastases, according to claim 7 or 8 A diagnostic pharmaceutical composition as described in 1. above.

A pharmaceutical composition for treating a neovascular-related disease, comprising as an active ingredient the compound represented by Chemical Formula 1 of claim 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

The pharmaceutical composition for treating neovascular related diseases according to claim 10, wherein the composition is administered intravenously to a subject.

The neovascular-related disease is a disease in which α _v β ₃ integrin selected from the group consisting of thrombosis, myocardial ischemia, solid tumor and metastatic cancer is excessively distributed. A pharmaceutical composition for the treatment of neovascular-related diseases according to 1.

Precursor for labeling technesium-99m, rhenium-188, or rhenium-185,187 represented by the following chemical formula 2:

(Chemical Formula 2 means the following Chemical Formula 2A, Chemical Formula 2B, or Chemical Formula 2C: