JP5594730B2 - Micelle dispersions composed of metal polymer complexes - Google Patents
Micelle dispersions composed of metal polymer complexes Download PDFInfo
- Publication number
- JP5594730B2 JP5594730B2 JP2010246907A JP2010246907A JP5594730B2 JP 5594730 B2 JP5594730 B2 JP 5594730B2 JP 2010246907 A JP2010246907 A JP 2010246907A JP 2010246907 A JP2010246907 A JP 2010246907A JP 5594730 B2 JP5594730 B2 JP 5594730B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- monomer
- formula
- copolymer
- present
- mmol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- GVYPTCGYBJJOHA-UHFFFAOYSA-N C(CCc1cccc(-c2ncccc2)n1)CCOC1OCCCC1 Chemical compound C(CCc1cccc(-c2ncccc2)n1)CCOC1OCCCC1 GVYPTCGYBJJOHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJWIMFZLESWFIM-UHFFFAOYSA-N ClCc1ncccc1 Chemical compound ClCc1ncccc1 NJWIMFZLESWFIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JYDJDLIAIVHHGS-UHFFFAOYSA-N OCCCCCc1cccc(-c2ncccc2)n1 Chemical compound OCCCCCc1cccc(-c2ncccc2)n1 JYDJDLIAIVHHGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Description
本発明は、金属高分子錯体からなるミセルの分散液に関する。 The present invention relates to dispersions of micelles composed of metallic polymer complex.
白金（ＩＩ）錯体であるシスプラチンは、強い抗腫瘍活性を有することが知られており、抗癌剤として臨床で汎用されている。シスプラチンの抗腫瘍作用は、シスプラチンがＤＮＡ上で１，２−鎖内架橋を形成することにより発揮されると考えられている。近年では、白金錯体の有する抗腫瘍作用に着目し、新たな白金錯体を含む抗癌剤の開発が行われている（例えば、特許文献１）。 Cisplatin, which is a platinum (II) complex, is known to have strong antitumor activity and is widely used clinically as an anticancer agent. It is believed that the antitumor action of cisplatin is exhibited by cisplatin forming 1,2-strand crosslinks on DNA. In recent years, focusing on the antitumor action of platinum complexes, development of anticancer agents containing new platinum complexes has been carried out (for example, Patent Document 1).
しかしながら、シスプラチン等の白金錯体は水に対する溶解性が低く、液剤として取り扱い難いという欠点を有していた。 However, platinum complexes such as cisplatin have the disadvantage of low solubility in water and are difficult to handle as liquid agents.
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、金属高分子錯体からなるミセルの分散液を提供することを目的とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, and an object thereof is to provide a dispersion of micelles composed of metallic polymer complex.
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ね、以下のような本発明を完成するに至った。 The inventors of the present invention have made extensive studies to solve the above problems, and have completed the present invention as described below.
（１） 金属原子に配位結合する多座配位子を有するモノマー（Ａ）と、親水性のモノマー（Ｂ）と、を少なくとも共重合させた共重合体。 (1) A copolymer obtained by copolymerizing at least a monomer (A) having a multidentate ligand coordinated to a metal atom and a hydrophilic monomer (B).
（２） 上記モノマー（Ａ）と、上記モノマー（Ｂ）とのモル比は、１：９９〜９９：１である（１）に記載の共重合体。 (2) The copolymer according to (1), wherein the molar ratio of the monomer (A) to the monomer (B) is 1:99 to 99: 1.
（３） 上記多座配位子は、ビピリジン、ジピコリルアミン、及びターピリジンからなる群から選ばれる少なくとも１種である（１）又は（２）に記載の共重合体。 (3) The copolymer according to (1) or (2), wherein the polydentate ligand is at least one selected from the group consisting of bipyridine, dipicolylamine, and terpyridine.
（４） （１）〜（３）いずれかに記載の共重合体の配位子と、金属原子とが配位結合してなる金属高分子錯体。 (4) A metal polymer complex formed by coordination bonding between the ligand of the copolymer according to any one of (1) to (3) and a metal atom.
（５） （４）に記載の金属高分子錯体からなるミセルの分散液。 (5) A micelle dispersion comprising the metal polymer complex according to (4).
本発明で用いられる共重合体によれば、金属原子に配位結合する多座配位子を有するモノマー（Ａ）と、親水性のモノマー（Ｂ）と、を少なくとも共重合させたので、多量の金属原子が安定に配位した高分子錯体のミセルを形成することができる。
この共重合体の配位子と、金属原子とが配位結合してなる金属高分子錯体は、ミセルを形成するので、液剤として取り扱い易い。
本発明の金属高分子錯体からなるミセルは、エンドサイトーシスにより細胞内へ取り込まれ、細胞に効果的に作用するものと推測される。
According to the copolymer used in the present invention, at least a monomer (A) having a polydentate ligand coordinated to a metal atom and a hydrophilic monomer (B) are copolymerized. It is possible to form a micelle of a polymer complex in which the metal atoms are coordinated stably.
The metal polymer complex formed by coordination bonding between the ligand of the copolymer and the metal atom forms a micelle and is easy to handle as a liquid agent.
It is presumed that the micelle comprising the metal polymer complex of the present invention is taken into the cell by endocytosis and effectively acts on the cell.
以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は、以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。 Hereinafter, specific embodiments of the present invention will be described in detail. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and may be implemented with appropriate modifications within the scope of the object of the present invention. be able to.
本発明の共重合体は、金属原子に配位結合する多座配位子を有するモノマー（Ａ）と、親水性のモノマー（Ｂ）と、を少なくとも共重合させたものである。モノマー（Ａ）と、モノマー（Ｂ）とは、共重合するために重合性の官能基を有していてもよい。また、モノマー（Ａ）が重合性の官能基を有していない場合であっても、モノマー（Ａ）に連鎖移動剤が導入されたマクロ連鎖移動剤を合成した後、該マクロ連鎖移動剤と、重合性の官能基を有するモノマー（Ｂ）とを共重合させてもよいし、モノマー（Ｂ）が重合性の官能基を有していない場合であっても、モノマー（Ｂ）に連鎖移動剤が導入されたマクロ連鎖移動剤を合成した後、該マクロ連鎖移動剤と、モノマー（Ａ）とを共重合させてもよい。本発明の共重合体の構造は、特に限定されず、ランダム共重合体、ブロック共重合体、又はグラフト共重合体のいずれであってもよいが、ミセル形成能が高いという点においてブロック共重合体又はグラフト共重合体であることが好ましい。なお、本発明の共重合体は、モノマー（Ａ）と、モノマー（Ｂ）と、その他のモノマーとを共重合させたものであってもよい。 The copolymer of the present invention is obtained by copolymerizing at least a monomer (A) having a multidentate ligand coordinated to a metal atom and a hydrophilic monomer (B). The monomer (A) and the monomer (B) may have a polymerizable functional group for copolymerization. Further, even when the monomer (A) does not have a polymerizable functional group, after synthesizing a macro chain transfer agent in which a chain transfer agent is introduced into the monomer (A), the macro chain transfer agent and The monomer (B) having a polymerizable functional group may be copolymerized, or even if the monomer (B) does not have a polymerizable functional group, chain transfer to the monomer (B) is possible. After synthesizing the macro chain transfer agent into which the agent has been introduced, the macro chain transfer agent and the monomer (A) may be copolymerized. The structure of the copolymer of the present invention is not particularly limited, and may be any of a random copolymer, a block copolymer, or a graft copolymer, but in terms of high micelle formation ability, It is preferably a coalescence or graft copolymer. In addition, the copolymer of this invention may copolymerize a monomer (A), a monomer (B), and another monomer.
［モノマー（Ａ）］
本発明のモノマー（Ａ）は、金属原子に配位結合する多座配位子を有する。金属原子としては、特に限定されず、典型金属元素であっても、遷移金属元素であってもよい。典型金属元素としては、例えば、亜鉛、カドミウム等が挙げられる。遷移金属元素としては、例えば、銅、コバルト、ニッケル、鉄、マンガン、クロム等の第一遷移元素、ニオブ、モリブデン、ルテニウム、ロジウム、パラジウム、銀等の第二遷移元素、タンタル、タングステン、オスミウム、イリジウム、白金、金等の第三遷移元素、ユーロピウム、ガドリニウム等のランタノイド、アクチノイド等が挙げられる。これらの中でも、亜鉛、白金、コバルト、ルテニウム、ユーロピウム、及びガドリニウムが、より安定な錯体を形成するという点において好ましい。
[Monomer (A)]
The monomer (A) of the present invention has a multidentate ligand coordinated to a metal atom. The metal atom is not particularly limited, and may be a typical metal element or a transition metal element. Examples of typical metal elements include zinc and cadmium. Examples of transition metal elements include, for example, first transition elements such as copper, cobalt, nickel, iron, manganese, and chromium, second transition elements such as niobium, molybdenum, ruthenium, rhodium, palladium, and silver, tantalum, tungsten, osmium, Third transition elements such as iridium, platinum and gold, lanthanoids such as europium and gadolinium, actinoids and the like can be mentioned. Among these, zinc, platinum, cobalt, ruthenium, europium, and gadolinium are preferable in terms of forming a more stable complex.
本発明のモノマー（Ａ）は、多座配位子を有する。配位子が多座配位子であると、キレート効果により安定な錯体を形成することができる。多座配位子としては、特に限定されず、例えば、ビピリジン、シッフ塩基、フェナントリン、オルトベンゾキノン誘導体、核酸塩基等の二座配位子、ジピコリルアミン、ターピリジン、ジエチレントリアミン、シッフ塩基、トリアザシクロアルカン、テトラキス（２’−アミノエチル）−１，２−ジアミノプロパン等の三座配位子、ポルフィリン及びその誘導体、フタロシアニン及びその誘導体、テトラアザシクロアルカン等の四座配位子、アミノアルキル・テトラアザシクロアルカン等が挙げられる。トリ（アミノアルキル）トリアザシクロアルカン、１，１４−ジアミノ−３，６，９，１２−テトラアザテトラデカン等の五座配位子、トリ（アミノアルキル）トリアザシクロアルカン、１，１４−ジアミノ−３，６，９，１２−テトラアザテトラデカン等の六座配位子が挙げられる。これらの中でも、ビピリジン、ジピコリルアミン、及びターピリジンからなる群から選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。これらによれば、形成された錯体が更に遺伝子等の生体機能分子とのコンプレックスを形成し得るからである。 The monomer (A) of the present invention has a multidentate ligand. When the ligand is a polydentate ligand, a stable complex can be formed by a chelate effect. The multidentate ligand is not particularly limited, and examples thereof include bipyridine, Schiff base, phenanthrin, orthobenzoquinone derivatives, bidentate ligands such as nucleobase, dipicolylamine, terpyridine, diethylenetriamine, Schiff base, triazacyclo Tridentate ligands such as alkanes, tetrakis (2′-aminoethyl) -1,2-diaminopropane, porphyrins and derivatives thereof, phthalocyanines and derivatives thereof, tetradentate ligands such as tetraazacycloalkanes, aminoalkyl tetra And azacycloalkane. Tridentate ligands such as tri (aminoalkyl) triazacycloalkane, 1,14-diamino-3,6,9,12-tetraazatetradecane, tri (aminoalkyl) triazacycloalkane, 1,14-diamino And hexadentate ligands such as -3,6,9,12-tetraazatetradecane. Among these, at least one selected from the group consisting of bipyridine, dipicolylamine, and terpyridine is preferable. This is because the formed complex can further form a complex with a biofunctional molecule such as a gene.
本発明のモノマー（Ａ）は、その構造中に重合可能な官能基を有していてもよい。重合可能な官能基は、特に限定されず、例えば、ビニル基、アリル基、スチリル基、メタクリロイル基、アクリロイル基等が挙げられる。本発明のモノマー（Ａ）は、これらの重合可能な官能基を介して後述のモノマー（Ｂ）と共重合してもよい。 The monomer (A) of the present invention may have a polymerizable functional group in its structure. The polymerizable functional group is not particularly limited, and examples thereof include a vinyl group, an allyl group, a styryl group, a methacryloyl group, and an acryloyl group. The monomer (A) of the present invention may be copolymerized with the monomer (B) described later via these polymerizable functional groups.
［モノマー（Ｂ）］
本発明のモノマー（Ｂ）は、親水性のモノマーである。本発明の共重合体は、親水性のモノマー（Ｂ）を有するので、極性溶媒中、特に水を含む溶媒中において優れた分散性や乳化性を示す。親水性のモノマーとしては、特に限定されず、例えば、（メタ）アクリル酸、アミノスチレン、ヒドロキシスチレン、酢酸ビニル、グリシジル（メタ）アクリレート、（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート等のヒドロキシアルキル（メタ）アクリレート、（アルキル）アミノアルキル（メタ）アクリレート、アルキレングリコールモノ（メタ）アクリレート、ポリアルキレングリコールモノ（メタ）アクリレート、ポリアルキレンオキシド変性（メタ）アクリレート、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド等の（メタ）アクリルアミド類、Ｎ−ビニル−２−ピロリドン等のＮ−ビニルラクタム類、Ｎ−ビニルホルムアミド等のＮ−ビニルアミド類、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル等のポリエチレングリコールモノアルキルエーテル等が挙げられる。本発明では、メタクリル酸（ＭＡＡ）、末端にメトキシ基、カルボキシル基、アミノ基、アジ基、又はプロパギル基を有するポリエチレングリコール（メタ）アクリレート、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル、２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）、Ｎ−ビニル−２−ピロリドン（ＮＶＰ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡＡ）が、優れた分散性や乳化性を示すという観点において好ましい。
[Monomer (B)]
The monomer (B) of the present invention is a hydrophilic monomer. Since the copolymer of the present invention has a hydrophilic monomer (B), it exhibits excellent dispersibility and emulsification in a polar solvent, particularly in a solvent containing water. The hydrophilic monomer is not particularly limited, and examples thereof include (meth) acrylic acid, aminostyrene, hydroxystyrene, vinyl acetate, glycidyl (meth) acrylate, (meth) acrylamide, and 2-hydroxyethyl (meth) acrylate. Hydroxyalkyl (meth) acrylate, (alkyl) aminoalkyl (meth) acrylate, alkylene glycol mono (meth) acrylate, polyalkylene glycol mono (meth) acrylate, polyalkylene oxide modified (meth) acrylate, N, N-dimethylacrylamide, etc. (Meth) acrylamides, N-vinyl lactams such as N-vinyl-2-pyrrolidone, N-vinylamides such as N-vinylformamide, polyethylene glycols such as polyethylene glycol monomethyl ether Call monoalkyl ether. In the present invention, methacrylic acid (MAA), polyethylene glycol (meth) acrylate having a methoxy group, carboxyl group, amino group, azide group, or propargyl group at the terminal, polyethylene glycol monomethyl ether, 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA), N-vinyl-2-pyrrolidone (NVP) and N, N-dimethylacrylamide (DMAA) are preferable from the viewpoint of exhibiting excellent dispersibility and emulsifiability.
本発明のモノマー（Ｂ）は、その構造中に重合可能な官能基を有していてもよい。重合可能な官能基は、特に限定されず、例えば、ビニル基、アリル基、スチリル基、メタクリロイル基、アクリロイル基等が挙げられる。本発明のモノマー（Ｂ）は、このような重合性基を介してモノマー（Ａ）と重合してもよい。 The monomer (B) of the present invention may have a polymerizable functional group in its structure. The polymerizable functional group is not particularly limited, and examples thereof include a vinyl group, an allyl group, a styryl group, a methacryloyl group, and an acryloyl group. The monomer (B) of the present invention may be polymerized with the monomer (A) through such a polymerizable group.
［その他のモノマー］
本発明の共重合体では、モノマー（Ａ）及びモノマー（Ｂ）以外に、その他のモノマーを有していてもよい。その他のモノマーとしては、例えば、（メタ）アクリルアミド、メチロール（メタ）アクリルアミド、メトキシメチル（メタ）アクリルアミド、エトキシメチル（メタ）アクリルアミド、プロポキシメチル（メタ）アクリルアミド、ブトキシメトキシメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−メチロール（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシメチル（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシブチル（メタ）アクリルアミド、（メタ）アクリル酸、フマル酸、マレイン酸、無水マレイン酸、イタコン酸、無水イタコン酸、シトラコン酸、無水シトラコン酸、クロトン酸、メチル（メタ）アクリレート、エチル（メタ）アクリレート、ブチル（メタ）アクリレート、２−エチルヘキシル（メタ）アクリレート、シクロヘキシル（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシブチル（メタ）アクリレート、２−フェノキシ−２−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリレート、２−（メタ）アクリロイルオキシ−２−ヒドロキシプロピルフタレート、グリセリンモノ（メタ）アクリレート、テトラヒドロフルフリル（メタ）アクリレート、ジメチルアミノ（メタ）アクリレート、グリシジル（メタ）アクリレート等が挙げられる。これらのモノマーを、単独で有していても、２種以上を組み合わせて有していてもよい。
[Other monomers]
The copolymer of the present invention may have other monomers in addition to the monomer (A) and the monomer (B). Examples of other monomers include (meth) acrylamide, methylol (meth) acrylamide, methoxymethyl (meth) acrylamide, ethoxymethyl (meth) acrylamide, propoxymethyl (meth) acrylamide, butoxymethoxymethyl (meth) acrylamide, N- Methylol (meth) acrylamide, N-hydroxymethyl (meth) acrylamide, 2-hydroxyethyl (meth) acrylamide, 2-hydroxypropyl (meth) acrylamide, 2-hydroxybutyl (meth) acrylamide, (meth) acrylic acid, fumaric acid , Maleic acid, maleic anhydride, itaconic acid, itaconic anhydride, citraconic acid, citraconic anhydride, crotonic acid, methyl (meth) acrylate, ethyl (meth) acrylate, butyl (meth ) Acrylate, 2-ethylhexyl (meth) acrylate, cyclohexyl (meth) acrylate, 2-hydroxyethyl (meth) acrylate, 2-hydroxypropyl (meth) acrylate, 2-hydroxybutyl (meth) acrylate, 2-phenoxy-2- Hydroxypropyl (meth) acrylate, 2- (meth) acryloyloxy-2-hydroxypropyl phthalate, glycerin mono (meth) acrylate, tetrahydrofurfuryl (meth) acrylate, dimethylamino (meth) acrylate, glycidyl (meth) acrylate, etc. Can be mentioned. These monomers may be used alone or in combination of two or more.
［共重合体］
上記モノマー（Ａ）と、上記モノマー（Ｂ）と、を少なくとも共重合させた本発明の共重合体によれば、多量の金属原子が安定に配位した高分子錯体のミセルを形成することができる。これにより、金属の高分子錯体が薬剤として取り扱い易くなる。
[Copolymer]
According to the copolymer of the present invention in which the monomer (A) and the monomer (B) are at least copolymerized, a polymer complex micelle in which a large amount of metal atoms are stably coordinated can be formed. it can. This facilitates handling of the metal polymer complex as a drug.
本発明の共重合体の質量平均分子量（ポリスチレンを標準物質としたＧＰＣによる測定）は、５，０００〜５，０００，０００であることが好ましく、１０，０００〜１，０００，０００であることがより好ましい。上記範囲であれば、優れた分散性や乳化性を示すナノ会合体を形成可能となる。 The weight average molecular weight (measured by GPC using polystyrene as a standard substance) of the copolymer of the present invention is preferably 5,000 to 5,000,000, and 10,000 to 1,000,000. Is more preferable. If it is the said range, it will become possible to form the nano-aggregate which shows the outstanding dispersibility and emulsification property.
本発明の共重合体におけるモノマー（Ａ）の占める割合は、特に限定されないが、好ましくは１０〜９０ｍｏｌ％であり、より好ましくは２０〜６０ｍｏｌ％である。上記範囲であれば、十分な量の遷移金属原子を配位させることができる。また、本発明の共重合体におけるモノマー（Ｂ）の占める割合は、特に限定されないが、好ましくは１０〜９０ｍｏｌ％であり、より好ましくは２０〜６０ｍｏｌ％である。 Although the ratio for which the monomer (A) accounts in the copolymer of this invention is not specifically limited, Preferably it is 10-90 mol%, More preferably, it is 20-60 mol%. If it is the said range, sufficient quantity of a transition metal atom can be coordinated. Moreover, the ratio for which the monomer (B) accounts in the copolymer of this invention is although it does not specifically limit, Preferably it is 10-90 mol%, More preferably, it is 20-60 mol%.
本発明の共重合体では、該共重合体におけるモノマー（Ａ）と、モノマー（Ｂ）とのモル比は、特に限定されないが、好ましくは１：９９〜９９：１、より好ましくは１０：９０〜９０：１０である。上記範囲であれば、共重合体に良好なミセル形成能を付与することができる。 In the copolymer of the present invention, the molar ratio of the monomer (A) to the monomer (B) in the copolymer is not particularly limited, but is preferably 1:99 to 99: 1, more preferably 10:90. ~ 90: 10. If it is the said range, favorable micelle formation ability can be provided to a copolymer.
［共重合体の合成方法］
本発明の共重合体の重合方法は、特に限定されず、従来公知の方法を用いることができるが、付加開裂連鎖移動（ＲＡＦＴ）重合、原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）等のリビングラジカル重合法が好ましい。リビングラジカル重合法によれば、合成する共重合体の分子量や分子量分布を制御することができる。以下に、金属原子に配位結合する多座配位子を有するモノマー（Ａ）と、親水性のモノマー（Ｂ）とを共重合させた本発明の共重合体の合成方法を例示する。なお、重合方法はリビングラジカル重合法による。
[Synthesis Method of Copolymer]
The polymerization method of the copolymer of the present invention is not particularly limited, and a conventionally known method can be used. Living radical polymerization methods such as addition-fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization and atom transfer radical polymerization (ATRP) can be used. preferable. According to the living radical polymerization method, the molecular weight and molecular weight distribution of the copolymer to be synthesized can be controlled. Below, the synthesis method of the copolymer of this invention which copolymerized the monomer (A) which has a multidentate ligand coordinate-bonded to a metal atom, and the hydrophilic monomer (B) is illustrated. The polymerization method is a living radical polymerization method.
まず、ＲＡＦＴによる場合について説明する。モノマー（Ｂ）と、連鎖移動剤と、重合開始剤とを所定の溶媒に溶解し、溶存酸素を含む反応容器中の酸素を完全に除いた後、重合開始剤が開裂する温度以上であって、かつ、１００℃以下の温度で２４〜４８時間加熱することにより、モノマー（Ｂ）が重合したポリマー（以下、Ｂブロックと称する）の末端に連鎖移動剤が導入されたマクロ連鎖移動剤を合成する。次に、このマクロ連鎖移動剤と、モノマー（Ａ）とを所定の溶媒に溶解し、重合開始剤が開裂する温度以上であって、かつ、１００℃以下の温度で２４〜３００時間加熱することにより、Ｂブロックと、モノマー（Ａ）が重合したポリマー（以下、Ａブロックと称する）とが直列に結合した、本発明の共重合体（ブロック共重合体）を合成することができる。なお、モノマー（Ｂ）が、例えば、ポリアルキレンオキシド鎖を有するモノマーの場合には、モノマー（Ｂ）に連鎖移動剤が導入されたマクロ連鎖移動剤を合成した後、このマクロ連鎖移動剤と、モノマー（Ａ）とを所定の溶媒に溶解し、上記と同様に加熱することにより、モノマー（Ｂ）と、モノマー（Ａ）が重合したポリマー（以下、Ａブロックと称する）とが直列に結合した、本発明の共重合体（ブロック共重合体）を合成することができる。 First, the case of RAFT will be described. The monomer (B), the chain transfer agent, and the polymerization initiator are dissolved in a predetermined solvent, and after the oxygen in the reaction vessel containing dissolved oxygen is completely removed, the polymerization initiator is at or above the temperature at which it is cleaved. In addition, a macro chain transfer agent in which a chain transfer agent is introduced at the terminal of a polymer obtained by polymerizing the monomer (B) (hereinafter referred to as B block) is synthesized by heating at a temperature of 100 ° C. or lower for 24 to 48 hours. To do. Next, the macro chain transfer agent and the monomer (A) are dissolved in a predetermined solvent and heated at a temperature not lower than the temperature at which the polymerization initiator is cleaved and not higher than 100 ° C. for 24 to 300 hours. Thus, the copolymer of the present invention (block copolymer) in which the B block and a polymer obtained by polymerizing the monomer (A) (hereinafter referred to as A block) are connected in series can be synthesized. In addition, when the monomer (B) is, for example, a monomer having a polyalkylene oxide chain, after synthesizing a macro chain transfer agent in which a chain transfer agent is introduced into the monomer (B), this macro chain transfer agent, The monomer (A) was dissolved in a predetermined solvent and heated in the same manner as described above, whereby the monomer (B) and a polymer obtained by polymerizing the monomer (A) (hereinafter referred to as A block) were connected in series. The copolymer (block copolymer) of the present invention can be synthesized.
また、モノマー（Ａ）と、モノマー（Ｂ）と、連鎖移動剤と、重合開始剤とを所定の溶媒に溶解し、重合開始剤が開裂する温度以上であって、かつ、１００℃以下の温度で２４〜３００時間加熱することにより、Ｂブロックと、Ａブロックとが櫛型に結合した、本発明の共重合体（ランダムグラフト共重合体）を合成することができる。 Further, the monomer (A), the monomer (B), the chain transfer agent, and the polymerization initiator are dissolved in a predetermined solvent, and the temperature is equal to or higher than the temperature at which the polymerization initiator is cleaved and is 100 ° C. or lower. The copolymer of the present invention (random graft copolymer) in which the B block and the A block are combined in a comb shape can be synthesized by heating for 24 to 300 hours.
ＲＡＦＴに用いられる連鎖移動剤は、特に限定されず、例えば、ブチルベンジルトリチオカルボナート、クミルジチオベンゾエート（ＣＤＢ）、４−シアノペンタン酸ジチオベンゾエート、酢酸ジチオベンゾエート、ブタン酸ジチオベンゾエート、４−トルイル酸ジチオベンゾエート等が挙げられる。 The chain transfer agent used for RAFT is not particularly limited. For example, butylbenzyl trithiocarbonate, cumyl dithiobenzoate (CDB), 4-cyanopentanoic acid dithiobenzoate, acetic acid dithiobenzoate, butanoic acid dithiobenzoate, 4- And toluic acid dithiobenzoate.
重合開始剤は、特に限定されず、例えば、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）、２，２’−アゾビス（２−メチルブチロニトリル）、ジイソプロピルペルオキシカーボネート、ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエート、ｔ−ブチルペルオキシピバレート、ｔ−ブチルペルオキシジイソブチレート、過酸化ベンゾイル、ラウロイルパーオキサイド、過硫酸アンモニウム、過硫酸カリウム等を用いることができる。重合開始剤の好適な使用量は、モノマーに対して、０．００１〜１質量％、連鎖移動剤に対して、１〜３３質量％である。 The polymerization initiator is not particularly limited. For example, 2,2′-azobisisobutyronitrile (AIBN), 2,2′-azobis (2-methylbutyronitrile), diisopropyl peroxycarbonate, t-butylperoxy -2-Ethylhexanoate, t-butylperoxypivalate, t-butylperoxydiisobutyrate, benzoyl peroxide, lauroyl peroxide, ammonium persulfate, potassium persulfate, and the like can be used. The suitable usage-amount of a polymerization initiator is 0.001-1 mass% with respect to a monomer, and 1-33 mass% with respect to a chain transfer agent.
次に、ＡＴＲＰによる場合について説明する。まず、モノマー（Ｂ）と、ハロゲン化アルキル剤と、触媒とを所定の溶媒に溶解し、反応させることにより、Ｂブロックの末端にハロゲン化アルキル剤が導入されたマクロハロゲン化アルキル剤を合成する。次に、このマクロハロゲン化アルキル開始剤と、モノマー（Ａ）とを所定の溶媒に溶解し、さらに触媒を加え、室温以上であって、かつ、１００℃以下の温度で６〜５０時間加熱することにより、Ｂブロックと、Ａブロックとが直列に結合した、本発明の共重合体（ブロック共重合体）を合成することができる。 Next, the case using ATRP will be described. First, a monomer (B), a halogenated alkyl agent, and a catalyst are dissolved in a predetermined solvent and reacted to synthesize a macrohalogenated alkyl agent having a halogenated alkyl agent introduced at the end of the B block. . Next, the macrohalogenated alkyl initiator and the monomer (A) are dissolved in a predetermined solvent, a catalyst is further added, and the mixture is heated at a temperature of room temperature or higher and 100 ° C. or lower for 6 to 50 hours. Thus, the copolymer (block copolymer) of the present invention in which the B block and the A block are bonded in series can be synthesized.
ＡＴＲＰに用いられるハロゲン化アルキル開始剤は、特に限定されず、例えば、２−ブロモイソブチリルブロミド、２−クロロイソブチリルクロリド、ブロモアセチルブロミド、ブロモアセチクロリド、ベンジルブロミド等が挙げられる。 The halogenated alkyl initiator used for ATRP is not particularly limited, and examples thereof include 2-bromoisobutyryl bromide, 2-chloroisobutyryl chloride, bromoacetyl bromide, bromoacetyl chloride, and benzyl bromide.
触媒としては、例えば、１価の銅、２価のルテニウム等の遷移金属錯体を用いることができる。 As the catalyst, for example, a transition metal complex such as monovalent copper or divalent ruthenium can be used.
なお、重合反応に用いる溶媒は、特に限定されず、例えば、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ｔ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム、１，４−ジオキサン、ジメチルスルホキシド、これらの混合液等が挙げられる。 The solvent used for the polymerization reaction is not particularly limited. For example, water, methanol, ethanol, propanol, t-butanol, benzene, toluene, N, N-dimethylformamide, tetrahydrofuran, chloroform, 1,4-dioxane, dimethyl Examples thereof include sulfoxide and a mixed solution thereof.
［共重合体のミセル化方法］
本発明の共重合体をミセル化する方法は、特に限定されず、従来公知の方法を用いることができる。例えば、本発明の共重合体を所定の溶媒に溶解し、透析膜を用いて透析することにより、ミセル化することができる。所定の溶媒としては、特に限定されず、例えば、エタノール、アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ベンゼン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド等が挙げられる。透析膜としては、分画分子量２，０００〜２０，０００の再生セルロース製膜を用いることが好ましい。なお、均一な粒子径のミセルを得るために、上記透析後にフィルター等でろ過することが好ましい。
[Method of making micelle of copolymer]
The method for micelleizing the copolymer of the present invention is not particularly limited, and a conventionally known method can be used. For example, the copolymer of the present invention can be made into micelles by dissolving in a predetermined solvent and dialyzing using a dialysis membrane. The predetermined solvent is not particularly limited, and examples thereof include ethanol, acetone, N, N-dimethylformamide, benzene, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylacetamide and the like. As the dialysis membrane, it is preferable to use a regenerated cellulose membrane having a fractional molecular weight of 2,000 to 20,000. In order to obtain micelles having a uniform particle size, it is preferable to filter with a filter or the like after the dialysis.
［金属高分子錯体］
本発明の金属高分子錯体は、本発明の共重合体の配位子と、金属原子とが配位結合してなる。本発明の金属高分子錯体は、多量の金属原子が安定に配位した高分子錯体であり、ミセルを形成する。本発明の金属高分子錯体によれば、ミセルを形成するので、液剤として取り扱い易く、また、エンドサイトーシスにより細胞内へ取り込まれるので、細胞に効果的に作用するものと推測される。
[Metal polymer complex]
The metal polymer complex of the present invention is formed by coordination bonding between the ligand of the copolymer of the present invention and a metal atom. The metal polymer complex of the present invention is a polymer complex in which a large amount of metal atoms are coordinated stably and forms micelles. According to the metal polymer complex of the present invention, micelles are formed, so that it is easy to handle as a liquid agent, and since it is taken into cells by endocytosis, it is presumed that it effectively acts on cells.
本発明の金属高分子錯体中に含まれる金属原子は、同一種であっても、異種であってもよいが、金属原子における遷移金属元素の割合は、元素組成において１０〜８０質量％であることが好ましい。なお、金属原子については、上述したので説明は省略する。 The metal atom contained in the metal polymer complex of the present invention may be the same or different, but the ratio of the transition metal element in the metal atom is 10 to 80% by mass in the element composition. It is preferable. Since the metal atom has been described above, the description thereof is omitted.
［金属高分子錯体の合成方法］
本発明の金属高分子錯体の製造方法について説明する。なお、上述した共重合体と共通する部分についての説明は省略する。本発明の金属高分子錯体の製造方法では、まず、金属錯体と、所定の溶媒と、水とを混合し、反応させることにより配位子交換金属錯体を合成する。例えば、白金高分子錯体を合成する場合、上記金属錯体としては、テトラクロロ白金（ＩＩ）酸やそのアルカリ塩が好適である。その場合の所定の溶媒としては、エタノール、メタノール、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド等が好適である。溶媒にジメチルスルホキシドを用いた場合には、配位子交換金属錯体として、テトラクロロ白金（ＩＩ）酸の２つの塩素原子が２つのジメチルスルホキシドに交換された化合物を合成することができる。
[Method of synthesizing metal polymer complex]
The manufacturing method of the metal polymer complex of this invention is demonstrated. In addition, the description about the part which is common in the copolymer mentioned above is abbreviate | omitted. In the method for producing a metal polymer complex of the present invention, first, a ligand exchange metal complex is synthesized by mixing and reacting a metal complex, a predetermined solvent, and water. For example, when synthesizing a platinum polymer complex, tetrachloroplatinic acid (II) or an alkali salt thereof is suitable as the metal complex. As the predetermined solvent in that case, ethanol, methanol, dichloromethane, dimethyl sulfoxide and the like are suitable. When dimethyl sulfoxide is used as a solvent, a compound in which two chlorine atoms of tetrachloroplatinum (II) acid are exchanged for two dimethyl sulfoxides can be synthesized as a ligand exchange metal complex.
次いで、上記配位子交換金属錯体と、本発明の共重合体とを、所定の溶媒に溶解し、室温以上であって、かつ、１５０℃以下の温度で１０〜７２時間加熱することにより、本発明の共重合体の配位子と、金属原子とが配位結合した金属高分子錯体を得ることができる。なお、所定の溶媒としては、特に限定されず、例えば、エタノール、メタノール、ジクロロメタン等が挙げられる。 Next, the ligand exchange metal complex and the copolymer of the present invention are dissolved in a predetermined solvent and heated at a temperature of room temperature or higher and 150 ° C. or lower for 10 to 72 hours, A metal polymer complex in which the ligand of the copolymer of the present invention and a metal atom are coordinate-bonded can be obtained. In addition, it does not specifically limit as a predetermined solvent, For example, ethanol, methanol, a dichloromethane etc. are mentioned.
［金属高分子錯体のミセル化方法］
本発明の金属高分子錯体は、例えば、本発明の金属高分子錯体を所定の溶媒に溶解し、透析膜を用いて透析することにより、ミセル化することができる。所定の溶媒としては、特に限定されないが、例えば、エタノール、アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ベンゼン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド等が好適である。透析膜としては、分画分子量５，０００〜３０，０００の再生セルロース製膜を用いることが好ましい。なお、均一な粒子径のミセルを得るために、上記透析後にフィルター等でろ過することが好ましい。
[Method of micellization of metal polymer complex]
The metal polymer complex of the present invention can be made into micelles, for example, by dissolving the metal polymer complex of the present invention in a predetermined solvent and dialyzing it using a dialysis membrane. The predetermined solvent is not particularly limited, and for example, ethanol, acetone, N, N-dimethylformamide, benzene, N, N-dimethylacetamide and the like are suitable. As the dialysis membrane, it is preferable to use a regenerated cellulose membrane having a molecular weight cut-off of 5,000 to 30,000. In order to obtain micelles having a uniform particle size, it is preferable to filter with a filter or the like after the dialysis.
本発明の金属高分子錯体からなるミセルは、極性溶媒に対して良好な分散性を示す。したがって、高い分散性が求められる医薬品、化粧品、塗料、触媒、細胞イメージング剤、エネルギー変換材料等への応用が期待できる。例えば、シスプラチン等の白金錯体は、細胞内のＤＮＡと結合することでＤＮＡの合成を阻害し、細胞の分裂や増殖を抑制する作用を有することから、がん治療の薬剤として有用であるが、水に対する溶解性が低く、液剤として取り扱い難いという欠点がある。しかしながら、本発明の共重合体の配位子に白金が配位された白金高分子錯体は、ミセルを形成するので、液剤として取り扱い易い。また、ミセル形成された金属の高分子錯体は、エンドサイトーシスにより細胞内へ取り込まれるので、細胞に効果的に作用するものと推測される。 A micelle comprising the metal polymer complex of the present invention exhibits good dispersibility in a polar solvent. Therefore, application to pharmaceuticals, cosmetics, paints, catalysts, cell imaging agents, energy conversion materials and the like that require high dispersibility can be expected. For example, platinum complexes such as cisplatin are useful as cancer treatment drugs because they have the action of inhibiting DNA synthesis by binding to intracellular DNA and suppressing cell division and proliferation. There is a disadvantage that the solubility in water is low and it is difficult to handle as a liquid agent. However, the platinum polymer complex in which platinum is coordinated to the ligand of the copolymer of the present invention forms a micelle and is easy to handle as a liquid agent. Moreover, since the polymer complex of micelle-formed metal is taken into the cell by endocytosis, it is presumed that it acts effectively on the cell.
［金属高分子錯体のミセルの分散液］
本発明の分散液は、本発明の金属高分子錯体からなるミセルが分散した溶液である。本発明の分散液に分散している粒子の平均粒径は、特に限定されないが、より高い分散安定性を示すためには、１０〜１０００ｎｍであることが好ましく、３０〜２００ｎｍであることがより好ましい。本発明の分散液における分散溶媒は、極性溶媒であれば特に限定されず、例えば、水、エタノール、ジクロロメタン，クロロホルム等が挙げられる。
[Dispersion of micelle of metal polymer complex]
The dispersion of the present invention is a solution in which micelles composed of the metal polymer complex of the present invention are dispersed. The average particle size of the particles dispersed in the dispersion of the present invention is not particularly limited, but is preferably 10 to 1000 nm, more preferably 30 to 200 nm in order to exhibit higher dispersion stability. preferable. The dispersion solvent in the dispersion liquid of the present invention is not particularly limited as long as it is a polar solvent, and examples thereof include water, ethanol, dichloromethane, chloroform and the like.
本発明の分散液における上記粒子の含有量は、特に限定されないが、少ないと有用性を十分に発揮することができず、多いと分散液の流動性が低下し、取り扱い難くなるので、この点を考慮しつつ、用途に応じて適宜調整するとよい。 The content of the particles in the dispersion of the present invention is not particularly limited. However, if the amount is small, the usefulness cannot be sufficiently exhibited, and if the amount is large, the fluidity of the dispersion is lowered and handling becomes difficult. It is good to adjust suitably according to a use, taking into consideration.
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated in detail, this invention is not limited to these Examples.
［モノマー（Ａ）の合成］
＜多座配位子としてビピリジンを有するモノマー（Ａ）＞
２，６−ジブロモピリジン５．９ｇ（２５ｍｍｏｌ）と、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム５７８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ、２，６−ジブロモピリジンに対して２ｍｏｌ％）とを混合した後、アルゴン雰囲気下で、テトラヒドロフランに溶解させた０．５Ｍ ２−ピリジルジンクブロマイド５０ｍｌ（２５ｍｍｏｌ、２，６−ジブロモピリジンに対して１当量）を加え、式（１）で表される化合物を得た（収量：２．６０ｇ、収率：４４％）。反応スキームを以下に示す。
[Synthesis of Monomer (A)]
<Monomer (A) having bipyridine as multidentate ligand>
After mixing 5.9 g (25 mmol) of 2,6-dibromopyridine and 578 mg (0.5 mmol, 2 mol% with respect to 2,6-dibromopyridine) of tetrakistriphenylphosphine palladium, the mixture was added to tetrahydrofuran under an argon atmosphere. 50 ml of dissolved 0.5M 2-pyridyl zinc bromide (25 mmol, 1 equivalent to 2,6-dibromopyridine) was added to obtain a compound represented by the formula (1) (yield: 2.60 g, yield). (Rate: 44%). The reaction scheme is shown below.
式（１）で表される化合物２．６ｇ（１１．１ｍｍｏｌ）に、ヨウ化銅１１４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ、式（１）で表される化合物に対して５ｍｏｌ％）と、ヨウ化ナトリウム３．３３ｇ（２．２ｍｍｏｌ、式（１）で表される化合物に対して２当量）とを加えた後、アルゴン雰囲気下で、１，４−ジオキサンに溶解させたトランス−Ｎ，Ｎ−ジメチル−シクロヘキサン−１，２−ジアミン１９０μｌ（ｄ＝０．９０２、１．２ｍｍｏｌ、２．２ｍｍｏｌ、式（１）で表される化合物に対して０．１２当量）を更に加え、１１０℃の密閉条件下で２４時間撹拌し、式（２）で表される化合物を得た（収量：３．９５７ｇ、収率：１２６％）。反応スキームを以下に示す。
To 2.6 g (11.1 mmol) of the compound represented by the formula (1), 114 mg of copper iodide (0.6 mmol, 5 mol% with respect to the compound represented by the formula (1)), and
４−ペンチン−１−オール１．７２ｇ（２０ｍｍｏｌ）に、氷浴下で、ジクロロメタン４０ｍｌと、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物３８ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ、４−ペンチン−１−オールに対して１ｍｏｌ％）とを加え、窒素雰囲気下で、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン１８５０ｍｇ（２２ｍｍｏｌ、４−ペンチン−１−オールに対して１．１当量）をゆっくりと滴下し、氷浴下で１時間撹拌し、式（３）で表される化合物を得た（収量：２．５８９ｇ、収率：７７％）。反応スキームを以下に示す。 In an ice bath, 1.72 g (20 mmol) of 4-pentyn-1-ol was added 40 ml of dichloromethane and 38 mg of p-toluenesulfonic acid monohydrate (0.2 mmol, 1 mol with respect to 4-pentyn-1-ol). And 1850 mg of 3,4-dihydro-2H-pyran (22 mmol, 1.1 equivalents to 4-pentyn-1-ol) was slowly added dropwise under a nitrogen atmosphere. The mixture was stirred for a time to obtain a compound represented by the formula (3) (yield: 2.589 g, yield: 77%). The reaction scheme is shown below.
式（２）で表される化合物３．９５７ｇ（１４ｍｍｏｌ）に、式（３）で表される化合物２．３５５ｇ（１４ｍｍｏｌ、式（２）で表される化合物に対して１当量）、ビストリフェニルホスフィンパラジウムジクロリド６４７ｍｇ（０．５６ｍｍｏｌ、式（２）で表される化合物に対して４ｍｏｌ％）、ヨウ化銅２１３．３ｍｇ（１．１２ｍｍｏｌ、式（２）で表される化合物に対して８ｍｏｌ％）、ｉ−プロピルアミン７．９５ｍｌ（５６ｍｏｌ、式（２）で表される化合物に対して４当量）、及びテトラヒドロフラン７０ｍｌの混合溶液を加え、アルゴン雰囲気下の室温で一晩撹拌し、式（４）で表される化合物を得た（収量：２．４９１ｇ、収率：６９．７％）。反応スキームを以下に示す。 To 3.957 g (14 mmol) of the compound represented by the formula (2), 2.355 g (14 mmol, 1 equivalent to the compound represented by the formula (2)) of the compound represented by the formula (3), bistriphenyl Phosphine palladium dichloride 647 mg (0.56 mmol, 4 mol% with respect to the compound represented by formula (2)), copper iodide 213.3 mg (1.12 mmol, 8 mol% with respect to the compound represented by formula (2) ), 7.95 ml of i-propylamine (56 mol, 4 equivalents relative to the compound represented by formula (2)) and 70 ml of tetrahydrofuran are added, and the mixture is stirred overnight at room temperature under an argon atmosphere. 4) was obtained (yield: 2.491 g, yield: 69.7%). The reaction scheme is shown below.
式（４）で表される化合物２．４ｇ（７．４ｍｍｏｌ）に、５％パラジウム−活性炭素５００ｍｇと、メタノール１５０ｍｌとを加えた後、水素置換条件下で一晩撹拌し、式（５）で表される化合物を得た（収量：２．２２８ｇ、収率：９２％）。反応スキームを以下に示す。 After adding 500% of 5% palladium-activated carbon and 150 ml of methanol to 2.4 g (7.4 mmol) of the compound represented by formula (4), the mixture was stirred overnight under hydrogen substitution conditions, and then the formula (5) (Yield: 2.228 g, yield: 92%) was obtained. The reaction scheme is shown below.
式（５）で表される化合物２．２２８ｇ（６．８ｍｍｏｌ）に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物６２８ｍｇ（３．３ｍｍｏｌ、式（５）で表される化合物に対して０．５当量）と、メタノール３０ｍｌとを加え、一晩撹拌し、式（６）で表される化合物を得た（収量：１．５４５ｇ、収率：９４％）。反応スキームを以下に示す。 To 2.228 g (6.8 mmol) of the compound represented by the formula (5), 628 mg (3.3 mmol of p-toluenesulfonic acid monohydrate, 0.5 equivalent to the compound represented by the formula (5) ) And 30 ml of methanol were added and stirred overnight to obtain a compound represented by formula (6) (yield: 1.545 g, yield: 94%). The reaction scheme is shown below.
式（６）で表される化合物０．７７０ｇ（３．２ｍｍｏｌ）に、無水メタクリル酸１．９５６ｇ（１２．７ｍｍｏｌ、式（６）で表される化合物に対して４当量）と、トリエチルアミン０．９６２ｇ（９．５ｍｍｏｌ、式（６）で表される化合物に対して３当量）と、脱水ジクロロメタン４０ｍｌとを加え、アルゴン雰囲気下で一晩撹拌し、本発明の重合性モノマー（Ａ）である多座配位子としてビピリジンを有する、式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）（ｂｐｙモノマー）を得た（収量：０．６８２ｇ、収率：６９％）。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるｂｐｙモノマーのＮＭＲスペクトルを図１に示す。 To 0.770 g (3.2 mmol) of the compound represented by the formula (6), 1.956 g (12.7 mmol, 4 equivalents relative to the compound represented by the formula (6)) of methacrylic anhydride, 962 g (9.5 mmol, 3 equivalents with respect to the compound represented by formula (6)) and 40 ml of dehydrated dichloromethane were added and stirred overnight under an argon atmosphere to obtain the polymerizable monomer (A) of the present invention. The monomer (A) (bpy monomer) of the present invention represented by the formula (7) having bipyridine as a multidentate ligand was obtained (yield: 0.682 g, yield: 69%). The reaction scheme is shown below. Moreover, the NMR spectrum of the bpy monomer which is the monomer (A) of the present invention represented by the obtained formula (7) is shown in FIG.
［共重合体の合成］
＜ｂｐｙ−ｇ−ＰＥＧの合成＞
式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるｂｐｙモノマー３９６．８ｍｇ（１．２８ｍｍｏｌ）に、式（８）で表される本発明のモノマー（Ｂ）１５９７ｍｇ（７６８μｍｏｌ、式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）に対して０．６当量）と、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）０．７７ｍｇ（４．７１μｍｏｌ、総モノマー（式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）＋本発明のモノマー（Ｂ））に対して０．２３ｍｏｌ％）と、ＣＤＢ ６．４３ｍｇ（２３．６μｍｏｌ、総モノマー（式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるｂｐｙモノマー＋本発明のモノマー（Ｂ））に対して１．１５ｍｏｌ％）と、総量が１１．１ｍｌとなるようにＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを加え、凍結脱気を４回行い、７０℃で二日と一晩撹拌し、式（９）で表される本発明の共重合体（ｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５））を得た（収量：２９５ｍｇ、収率：１５％）。なお、総モノマーとＡＩＢＮとＣＤＢとの重合比は、総モノマー／ＡＩＢＮ／ＣＤＢ＝１００／０．２３／１．１５であり、総モノマーは全体を１００として、式（７）で表される本発明のモノマー（Ａ）／式（８）で表される本発明のモノマー（Ｂ）＝６３／３７となるように仕込んだ。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（９）で表される本発明の共重合体であるｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５）のＮＭＲスペクトルを図２に示す。
[Synthesis of copolymer]
<Synthesis of bpy-g-PEG>
The monomer (A) of the present invention represented by formula (7) (396.8 mg, 1.28 mmol) and the monomer (B) of the present invention represented by formula (8) 1597 mg (768 μmol, 7) and 0.62 equivalents of 2,2′-azobisisobutyronitrile (AIBN) (4.71 μmol, total monomer (formula ( 7) and 0.23 mol% of the monomer of the present invention (A) + the monomer of the present invention (B)), and CDB 6.43 mg (23.6 μmol, total monomer (expressed by formula (7)) N, N-dimethylformamide is added so that the total amount becomes 11.1 ml, with respect to the monomer (A) of the present invention (bpy monomer + monomer of the present invention (B)).
［共重合体の物性評価］
得られた式（９）で表される本発明の共重合体の理論数平均分子量（Ｍｎ）、ピリジン（Ｐｙ）とポリエチレングリコール（ＰＥＧ）との転化率、ＰｙとＰＥＧとのユニット比、及び臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）を表１に示す。なお、理論数平均分子量（Ｍｎ）、ピリジン（Ｐｙ）とポリエチレングリコール（ＰＥＧ）との転化率、及びＰｙとＰＥＧとのユニット比は、ＮＭＲにより測定した。また、臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）は、ピレン可溶化試験により測定した。
[Evaluation of physical properties of copolymer]
The theoretical number average molecular weight (Mn) of the copolymer of the present invention represented by the obtained formula (9), the conversion ratio of pyridine (Py) and polyethylene glycol (PEG), the unit ratio of Py and PEG, and The critical micelle concentration (cmc) is shown in Table 1. The theoretical number average molecular weight (Mn), the conversion of pyridine (Py) and polyethylene glycol (PEG), and the unit ratio of Py and PEG were measured by NMR. The critical micelle concentration (cmc) was measured by a pyrene solubilization test.
［共重合体のミセル化］
式（９）で表される本発明の共重合体（ｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５））５０ｍｇをＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド５ｍｌに溶解させた後、透析膜（分画分子量：３５００）に入れ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに対して４００倍量の水で５日間透析を行うことによりミセルを形成させた。透析後、得られた溶液のうち、５０ｍｌをメスフラスコに回収し、濃度が１ｍｇ／ｍｌとなるように水を用いてメスアップを行った。そして、得られたミセルの粒径を、Ａｒレーザーを用いたダイナミック光散乱光度計（ＤＬＳ）により測定したところ、平均粒径２１．９±５．６ｎｍの均一な粒子が形成されていることが確認された（図３）。
[Micelleization of copolymer]
After dissolving 50 mg of the copolymer of the present invention represented by the formula (9) (bpy (65) -g-PEG (35)) in 5 ml of N, N-dimethylacetamide, a dialysis membrane (fractionated molecular weight: 3500). ) And dialysis with 400 times the amount of water against N, N-dimethylacetamide for 5 days to form micelles. After the dialysis, 50 ml of the obtained solution was collected in a measuring flask and diluted with water so that the concentration became 1 mg / ml. And when the particle size of the obtained micelle was measured with a dynamic light scattering photometer (DLS) using an Ar laser, uniform particles with an average particle size of 21.9 ± 5.6 nm were formed. It was confirmed (FIG. 3).
［白金高分子錯体の合成］
テトラクロロ白金（ＩＩ）酸カリウム３００ｍｇ（７２２μｍｏｌ）に、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）１６９ｍｇ（ｄ＝１．０９９、２．１７ｍｍｏｌ、テトラクロロ白金（ＩＩ）酸カリウムに対して３当量）と、ミリＱ水１．５ｍｌとを加え、氷浴下で２時間撹拌し、［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］を得た（収量：２４８ｍｇ、収率：８１％）。得られた［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］のＩＲスペクトルを図４に示す。１２００〜１０００ｃｍ−１付近、及び３０００ｃｍ−１付近にＤＭＳＯに由来するピークが確認され、４３０ｃｍ−１付近に［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］に由来するピークが確認された。
[Synthesis of platinum polymer complex]
300 mg (722 μmol) of potassium tetrachloroplatinate (II), 169 mg of dimethyl sulfoxide (DMSO) (d = 1.999, 2.17 mmol, 3 equivalents relative to potassium tetrachloroplatinate (II)), milli-Q water 1.5 ml was added and stirred in an ice bath for 2 hours to obtain [Pt (DMSO) 2 Cl 2 ] (yield: 248 mg, yield: 81%). The IR spectrum of the obtained [Pt (DMSO) 2 Cl 2 ] is shown in FIG. 1200~1000cm around -1, and the peak confirmed derived from DMSO near 3000 cm -1, a peak derived from [Pt (DMSO) 2 Cl 2 ] in the vicinity of 430 cm -1 was confirmed.
上記方法にて得られた［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］６０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）に、式（９）で表される本発明の共重合体（ｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５））５４４６ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ、［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］に対して１当量）と、メタノール１００ｍｌとを加え、８０℃の還流条件下で、１日間撹拌し、ｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５）−Ｐｔ錯体を得た（収量：８２２ｍｇ、収率：７４％）。得られたｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５）−Ｐｔ錯体のＩＲスペクトルを図５に示す。１６００〜１４３０ｃｍ−１付近の大きな吸収は、ｂｐｙのＣ＝Ｎ伸縮振動及びＣ＝Ｃ伸縮振動を示しており、３０１０〜３０８０ｃｍ−１付近の大きな吸収は、ｂｐｙのＣ−Ｈ伸縮振動を示している。また、ＵＶスペクトルを測定したところ、３９０ｎｍ付近に本発明の白金高分子錯体に由来するピークが確認された（図６）。 To [Pt (DMSO) 2 Cl 2 ] 60 mg (0.14 mmol) obtained by the above method, the copolymer of the present invention represented by the formula (9) (bpy (65) -g-PEG (35) ) 5446 mg (0.14 mmol, 1 equivalent to [Pt (DMSO) 2 Cl 2 ]) and 100 ml of methanol were added, and the mixture was stirred at 80 ° C. under reflux conditions for 1 day, and bpy (65) -g- A PEG (35) -Pt complex was obtained (yield: 822 mg, yield: 74%). FIG. 5 shows an IR spectrum of the obtained bpy (65) -g-PEG (35) -Pt complex. Large absorption near 1600 to 1430 cm −1 indicates bpy C═N stretching vibration and C═C stretching vibration, and large absorption near 3010 to 3080 cm −1 indicates bpy C—H stretching vibration. Yes. Further, when the UV spectrum was measured, a peak derived from the platinum polymer complex of the present invention was confirmed at around 390 nm (FIG. 6).
［白金高分子錯体のミセル化］
上記にて得られた本発明の白金高分子錯体（ｂｐｙ（６５）−ｇ−ＰＥＧ（３５）−Ｐｔ錯体）１００ｍｇをＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド５ｍｌに溶解させた後、透析膜（分画分子量：３５００）に入れ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに対して２００倍量の水で５日間透析を行うことによりミセルを形成させた。透析後、得られた溶液のうち、５０ｍｌをメスフラスコに回収し、濃度が１ｍｇ／ｍｌとなるように水を用いてメスアップを行った。そして、得られたミセルの粒径を、Ａｒレーザーを用いたダイナミック光散乱光度計（ＤＬＳ）により測定したところ、平均粒径３７．５±８．９ｎｍの均一な粒子が形成されていることが確認された（図７）。
[Micelleization of platinum polymer complex]
100 mg of the above-obtained platinum polymer complex (bpy (65) -g-PEG (35) -Pt complex) of the present invention was dissolved in 5 ml of N, N-dimethylacetamide, and then a dialysis membrane (fractionated molecular weight). : 3500), and micelles were formed by dialysis with 200 times the amount of water against N, N-dimethylacetamide for 5 days. After the dialysis, 50 ml of the obtained solution was collected in a measuring flask and diluted with water so that the concentration became 1 mg / ml. And when the particle size of the obtained micelle was measured by a dynamic light scattering photometer (DLS) using an Ar laser, uniform particles having an average particle size of 37.5 ± 8.9 nm were formed. It was confirmed (FIG. 7).
［モノマー（Ａ）の合成］
＜多座配位子としてジピコリルアミンを有するモノマー（Ａ）＞
２−クロロメチルピリジン塩酸塩１１．８１ｇ（７２ｍｍｏｌ）に、アミノプロパノール１．８ｇ（２４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム３３．２ｇ（２４０ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムブロミド（ＴＢＡＢ）０．３２２ｇ（１ｍｍｏｌ）、及び脱水アセトニトリル３００ｍｌを加え、９５℃で３日間加熱還流した。ＴＬＣにより反応の進行を確認した後、セライト濾過、濃縮、及び真空乾燥を行った。その後、カラム精製し、濃縮することにより、式（１０）で表される化合物（３−［ｂｉｓ（ｐｙｒｉｄｉｎ−２−ｙｌｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｐｒｏｐａｎ−１−ｏｌ）を獲た（収量：４．３ｇ、収率：６９．６％）。なお、カラム精製は、酢酸エチルに対してメタノールの割合を０％、５％、１０％、２０％と増やした展開溶媒を用いて行った。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（１０）で表される化合物のＮＭＲスペクトルを図８に示す。
[Synthesis of Monomer (A)]
<Monomer (A) having dipicolylamine as multidentate ligand>
2-chloromethylpyridine hydrochloride 11.81 g (72 mmol), aminopropanol 1.8 g (24 mmol), potassium carbonate 33.2 g (240 mmol), tetrabutylammonium bromide (TBAB) 0.322 g (1 mmol), and dehydrated acetonitrile 300 ml was added and heated to reflux at 95 ° C. for 3 days. After confirming the progress of the reaction by TLC, Celite filtration, concentration, and vacuum drying were performed. Thereafter, the compound (3- [bis (pyridin-2-ylmethyl) amino] propan-1-ol) represented by the formula (10) was obtained by column purification and concentration (yield: 4.3 g, Yield: 69.6%). The column purification was performed using a developing solvent in which the ratio of methanol to ethyl acetate was increased to 0%, 5%, 10%, and 20%. The reaction scheme is shown below. Moreover, the NMR spectrum of the compound represented by Formula (10) obtained is shown in FIG.
アルゴン雰囲気下で、式（１０）で表される化合物３ｇ（１１．６ｍｍｏｌ）を脱水ジクロロメタン５００ｍｌに溶解させ、氷浴条件下、塩化アクリロイル１．５０ｍｌ（１８．５６ｍｍｏｌ、式（１０）で表される化合物に対して１．６当量）を滴下し、一晩撹拌した。ＴＬＣにより反応の進行を確認した後、濃縮し、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで、無水硫酸マグネシウムを用いて脱水処理した。その後、カラム精製し、本発明のモノマー（Ａ）である多座配位子としてジピコリルアミンを有する、式（１１）で表される化合物（ＤＰＡモノマー）を得た（収量：１．０５ｇ、収率：２９．１％）。なお、カラム精製の展開溶媒には酢酸エチルを用いた。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（１１）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるＤＰＡモノマーのＮＭＲスペクトルを図９に示す。 Under an argon atmosphere, 3 g (11.6 mmol) of the compound represented by the formula (10) was dissolved in 500 ml of dehydrated dichloromethane, and 1.50 ml (18.56 mmol, represented by the formula (10) of acryloyl chloride under ice bath conditions. 1.6 equivalents) was added dropwise and stirred overnight. After confirming the progress of the reaction by TLC, the mixture was concentrated, washed with an aqueous sodium bicarbonate solution and a saturated aqueous sodium chloride solution, and then dehydrated with anhydrous magnesium sulfate. Thereafter, column purification was performed to obtain a compound (DPA monomer) represented by the formula (11) having dipicolylamine as the polydentate ligand which is the monomer (A) of the present invention (yield: 1.05 g, Yield: 29.1%). In addition, ethyl acetate was used as a developing solvent for column purification. The reaction scheme is shown below. Moreover, the NMR spectrum of the DPA monomer which is the monomer (A) of this invention represented by Formula (11) obtained is shown in FIG.
［ＲＡＦＴ剤の合成］
４−ブロモメチル安息香酸３ｇ（１３．９５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン２５ｍｌに溶解させ、４−ブロモメチル安息香酸のテトラヒドロフラン溶液を得た。次いで、アルゴン雰囲気下、１−ブタンチオール１．８０ｍｌ（１６．７４ｍｍｏｌ、４−ブロモメチル安息香酸に対して１．２当量）、ジアザビシクロウンデセン２．５ｍｌ（１６．７４ｍｍｏｌ、４−ブロモメチル安息香酸に対して１．２当量）、及び二硫化炭素１．０１ｍｌ（１６．７４ｍｍｏｌ、４−ブロモメチル安息香酸に対して１．２当量）を脱水テトラヒドロフラン７５ｍｌに加え、室温で３０分間撹拌した。撹拌後、上記４−ブロモメチル安息香酸のテトラヒドロフラン溶液を滴下し、更に室温で６時間撹拌した。ＴＬＣにより反応の進行を確認し、セライト濾過及び濃縮後、ベンゼンに溶解させた。さらに、１Ｍ塩酸及びイオン交換水で洗浄し、次いで、無水硫酸マグネシウムを用いて脱水処理した後、濃縮し、フリーズドライすることにより、式（１２）で表されるＲＡＦＴ剤を得た（収量：３．７８ｇ、収率：９３．９％）。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（１２）で表されるＲＡＦＴ剤のＮＭＲスペクトルを図１０に示す。
[Synthesis of RAFT agent]
4-Bromomethylbenzoic acid 3 g (13.95 mmol) was dissolved in 25 ml of tetrahydrofuran to obtain a tetrahydrofuran solution of 4-bromomethylbenzoic acid. Then, 1.80 ml of 1-butanethiol (16.74 mmol, 1.2 equivalents relative to 4-bromomethylbenzoic acid) and 2.5 ml of diazabicycloundecene (16.74 mmol, 4-bromomethylbenzoic acid) under an argon atmosphere 1.2 equivalents) and carbon disulfide 1.01 ml (16.74 mmol, 1.2 equivalents to 4-bromomethylbenzoic acid) were added to 75 ml of dehydrated tetrahydrofuran and stirred at room temperature for 30 minutes. After stirring, the tetrahydrofuran solution of 4-bromomethylbenzoic acid was added dropwise, and the mixture was further stirred at room temperature for 6 hours. The progress of the reaction was confirmed by TLC, filtered through celite and concentrated, and then dissolved in benzene. Further, after washing with 1M hydrochloric acid and ion-exchanged water, followed by dehydration using anhydrous magnesium sulfate, concentration and freeze-drying, a RAFT agent represented by the formula (12) was obtained (yield: 3.78 g, yield: 93.9%). The reaction scheme is shown below. Moreover, the NMR spectrum of the obtained RAFT agent represented by Formula (12) is shown in FIG.
［モノマー（Ｂ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤の合成］
アルゴン雰囲気下、式（１２）で表されるＲＡＦＴ剤７２０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ、後述するモノマー（Ｂ）に対して１０当量）を脱水ベンゼンに溶解させ、オキサリルクロライド２４２μｌ（２．８８ｍｍｏｌ、式（１２）で表されるＲＡＦＴ剤に対して１．２当量）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ｃａｔ．）を少量加え、撹拌した後、ＴＬＣにより式（１３）で表される酸塩化物の生成を確認し、濃縮した。次いで、該酸塩化物を脱水ベンゼン７ｍｌに溶解し、さらに、脱水ベンゼンに溶解させたトリエチルアミン４００μｌ（２．８８ｍｍｏｌ、式（１２）で表されるＲＡＦＴ剤に対して１．２当量）、及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（５Ｋ）１２００ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ）を加えた後、７０℃のオイルバス中で１晩撹拌した。その後、セライト濾過及び濃縮を行い、２０倍量のイソプロピルエーテルで再沈殿を行った。得られた沈殿物をクロロホルムに溶解させ、濃縮後、フリーズドライすることにより、本発明のモノマー（Ｂ）が重合したポリマーの末端にＲＡＦＴ剤が導入された、式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤を得た（収量：１０６０ｍｇ、収率：８３．３％、末端修飾率：８５％）。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤のＮＭＲスペクトルを図１１に示す。
[Synthesis of Monomer (B) -Macro-RAFT Agent]
Under an argon atmosphere, 720 mg of RAFT agent represented by the formula (12) (2.4 mmol, 10 equivalents to the monomer (B) described later) is dissolved in dehydrated benzene, and 242 μl (2.88 mmol, formula (12) of oxalyl chloride is dissolved. ) And a small amount of N, N-dimethylformamide (cat.), And after stirring, formation of an acid chloride represented by formula (13) by TLC Was confirmed and concentrated. Next, the acid chloride was dissolved in 7 ml of dehydrated benzene, and further 400 μl of triethylamine (2.88 mmol, 1.2 equivalents relative to the RAFT agent represented by the formula (12)) dissolved in dehydrated benzene, and polyethylene After adding 1200 mg (0.24 mmol) of glycol (PEG) (5K), the mixture was stirred in an oil bath at 70 ° C. overnight. Then, celite filtration and concentration were performed, and reprecipitation was performed with 20 times the amount of isopropyl ether. The obtained precipitate was dissolved in chloroform, concentrated and freeze-dried to introduce a RAFT agent at the terminal of the polymer obtained by polymerizing the monomer (B) of the present invention. (5K) -macro-RAFT agent was obtained (yield: 1060 mg, yield: 83.3%, terminal modification rate: 85%). The reaction scheme is shown below. Further, FIG. 11 shows the NMR spectrum of the PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by the formula (14) obtained.
［共重合体の合成］
＜ＤＰＡ−ｂ−ＰＥＧの合成＞
式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤２５０ｍｇ（４７μｍｏｌ）、及び式（１１）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるＤＰＡモノマー（２Ｍ）１．４２ｍｌ（２．８３ｍｍｏｌ、式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤に対して６０当量）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｍｌに溶解し、重合管に入れ、さらに、０．１Ｍのアゾビスイソブチロニトリル溶液２３５μｌ（２３．５μｍｏｌ、式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤に対して０．５当量）を加えた。凍結脱気を３回行い、９０℃のオイルバス中で５日間撹拌した。その後、セライト濾過及び濃縮を行い、２０倍量のイソプロピルエーテルで再沈殿を行った。得られた沈殿物をフリーズドライすることにより、式（１５）本発明の共重合体（ＤＰＡ（２０）−ｂ−ＰＥＧ）を得た（収量：４７０ｍｇ、収率：３５．７％）。反応スキームを以下に示す。また、得られた式（１５）で表される本発明の共重合体であるＤＰＡ−ｂ−ＰＥＧのＮＭＲスペクトルを図１２に示す。
[Synthesis of copolymer]
<Synthesis of DPA-b-PEG>
PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by the formula (14) 250 mg (47 μmol), and DPA monomer (2M) 1.42 ml which is the monomer (A) of the present invention represented by the formula (11) (2 .83 mmol, PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by the formula (14) is dissolved in 5 ml of N, N-dimethylformamide, put in a polymerization tube, and further 0.1M 235 μl of azobisisobutyronitrile solution (23.5 μmol, PEG (5K) represented by the formula (14) -0.5 equivalent with respect to the macro-RAFT agent) was added. Freeze deaeration was performed 3 times, followed by stirring in an oil bath at 90 ° C. for 5 days. Then, celite filtration and concentration were performed, and reprecipitation was performed with 20 times the amount of isopropyl ether. The obtained precipitate was freeze-dried to obtain a copolymer (DPA (20) -b-PEG) of the formula (15) of the present invention (yield: 470 mg, yield: 35.7%). The reaction scheme is shown below. In addition, FIG. 12 shows the NMR spectrum of DPA-b-PEG which is the copolymer of the present invention represented by the obtained formula (15).
［共重合体の物性評価］
式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤３００ｍｇ（５７μｍｏｌ）、及び式（１１）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるＤＰＡモノマー（２Ｍ）１．４２ｍｌ（２．８３ｍｍｏｌ、式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤に対して５０当量）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍｌに溶解した。そして、得られた溶液１．９ｍｌと、０．１Ｍのアゾビスイソブチロニトリル溶液３８μｌ（式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤に対して０．４当量）とを入れた重合管を全部で６本作製し、凍結、脱気を行い、９０℃のオイルバス中で撹拌し、重合させた。なお、各重合管には、式（１４）で表されるＰＥＧ（５Ｋ）−マクロ−ＲＡＦＴ剤が９．５μｍｏｌ、式（１１）で表される本発明のモノマー（Ａ）であるＤＰＡモノマーが４７３μｍｏｌ、アゾビスイソブチロニトリルが３．８μｍｏｌ入っている。重合して１日経過、２日経過、３日経過、５日経過、及び７日経過後に、重合管を１本回収し、ＮＭＲにより転化率を測定した。その結果を表２に示す。
[Evaluation of physical properties of copolymer]
300 mg (57 μmol) of PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by the formula (14) and 1.42 ml of DPA monomer (2M) which is the monomer (A) of the present invention represented by the formula (11) (2 .83 mmol, PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by the formula (14) was dissolved in 10 ml of N, N-dimethylformamide. Then, 1.9 ml of the obtained solution and 38 μl of 0.1 M azobisisobutyronitrile solution (0.4 equivalent to the PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by the formula (14)) A total of 6 polymerization tubes containing slag were prepared, frozen and degassed, and stirred in an oil bath at 90 ° C. for polymerization. In each polymerization tube, 9.5 μmol of PEG (5K) -macro-RAFT agent represented by formula (14) and DPA monomer which is the monomer (A) of the present invention represented by formula (11) are contained. It contains 473 μmol and 3.8 μmol azobisisobutyronitrile. After 1 day, 2 days, 3 days, 5 days, and 7 days after polymerization, one polymerization tube was recovered and the conversion was measured by NMR. The results are shown in Table 2.
表２に示すように、モノマー転化率は、重合日数の経過とともに上昇した。このことから、ゆっくりではあるが重合が定量的に、かつ、リビング重合のメカニズムに従って進行していることが明らかとなった。なお、このことは反応のキネティクス解析からも明らかとなった。 As shown in Table 2, the monomer conversion increased with the lapse of the polymerization days. From this, it became clear that the polymerization proceeded quantitatively and in accordance with the living polymerization mechanism. This was also clarified from the kinetic analysis of the reaction.
［共重合体のミセル化］
式（１５）本発明の共重合体（ＤＰＡ（２０）−ｂ−ＰＥＧ）１００ｍｇをジメチルスルホキシド１０ｍｌに溶解させた後、透析膜（分画分子量：１０００）に入れ、ジメチルスルホキシドに対して２００倍量のｐＨ９のホウ酸−水酸化ナトリウム緩衝溶液で５日間透析を行うことによりミセルを形成させた。透析後、ｐＨ９のホウ酸−水酸化ナトリウム緩衝溶液を用い、得られた溶液の濃度を０．５ｍｇ／ｍｌとなるように調整した。そして、０．２２μｍのフィルターにてろ過した後、ミセルの粒径を、Ａｒレーザーを用いたダイナミック光散乱光度計（ＤＬＳ）により測定したところ、平均粒径１２０．７±３４．０ｎｍの均一な粒子が形成されていることが確認された（図１３）。
[Micelleization of copolymer]
Formula (15) After dissolving 100 mg of the copolymer of the present invention (DPA (20) -b-PEG) in 10 ml of dimethyl sulfoxide, it was put into a dialysis membrane (fractionated molecular weight: 1000) and 200 times that of dimethyl sulfoxide. Micelles were formed by dialysis with an amount of boric acid-sodium hydroxide buffer solution of
また、式（１５）本発明の共重合体（ＤＰＡ（２０）−ｂ−ＰＥＧ）１００ｍｇをジメチルスルホキシド１０ｍｌに溶解させた後、透析膜（分画分子量：１０００）に入れ、ｐＨ９のホウ酸−水酸化ナトリウム緩衝溶液で５日間透析を行うことによりミセルを形成させた。透析後、ｐＨ９のホウ酸−水酸化ナトリウム緩衝溶液を用い、得られた溶液の濃度を０．５ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌとなるように調整した。そして、０．２２μｍのフィルターにてろ過した後、ミセルの粒径を、Ｈｅ−Ｎｅレーザーを用いたスタティック光散乱光度計（ＳＬＳ）により測定したところ、示差屈折率計により求められた屈折率増分（ｄｎ／ｄｃ）は０．１９９４、相関係数は０．９７０５、理論数平均分子量（Ｍｎ）は９６７３であった。また、これらから算出したＤＰＡユニットの数は１４．０ｕｎｉｔであった。
Further, 100 mg of the copolymer (DPA (20) -b-PEG) of the formula (15) of the present invention was dissolved in 10 ml of dimethyl sulfoxide, and then dissolved in a dialysis membrane (fractionated molecular weight: 1000). Micelle was formed by dialysis with a sodium hydroxide buffer solution for 5 days. After dialysis, a boric acid-sodium hydroxide buffer solution at
［白金高分子錯体の合成］
上記方法にて合成した［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］６０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）に、式（１５）で表される本発明の共重合体（ＤＰＡ（２０）−ｂ−ＰＥＧ）９６．７ｍｇ（０．０１ｍｍｏｌ、［Ｐｔ（ＤＭＳＯ）２Ｃｌ２］に対して１当量）と、メタノール１００ｍｌとを加え、８０℃の還流条件下で、１日間撹拌し、ＤＰＡ（２０）−ｂ−ＰＥＧ−Ｐｔ錯体を得た（収量：１３７ｍｇ、収率：９２％）。
[Synthesis of platinum polymer complex]
[Pt (DMSO) 2 Cl 2 ] synthesized in the above method (60 mg, 0.14 mmol) and the copolymer of the present invention represented by the formula (15) (DPA (20) -b-PEG) 96.7 mg (0.01 mmol, 1 equivalent to [Pt (DMSO) 2 Cl 2 ]) and 100 ml of methanol, and stirred for 1 day at 80 ° C. under reflux conditions, and DPA (20) -b-PEG- A Pt complex was obtained (yield: 137 mg, yield: 92%).
［白金高分子錯体のミセル化］
上記にて得られた本発明の白金高分子錯体（ＤＰＡ（２０）−ｂ−ＰＥＧ−Ｐｔ錯体）１００ｍｇをＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド５ｍｌに溶解させた後、透析膜（分画分子量：１０００）に入れ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに対して４００倍量のｐＨ９のホウ酸−水酸化ナトリウム緩衝溶液で５日間透析を行うことによりミセルを形成させた。透析後、得られた溶液のうち、５０ｍｌをメスフラスコに回収し、濃度が０．５ｍｇ／ｍｌとなるように、ｐＨ９のホウ酸−水酸化ナトリウム緩衝溶液を用いてメスアップを行った。そして、得られたミセルの粒径を、Ａｒレーザーを用いたダイナミック光散乱光度計（ＤＬＳ）により測定したところ、平均粒径９１．３±３０．６ｎｍの均一な粒子が形成されていることが確認された（図１４）。
[Micelleization of platinum polymer complex]
100 mg of the platinum polymer complex of the present invention obtained above (DPA (20) -b-PEG-Pt complex) is dissolved in 5 ml of N, N-dimethylacetamide, and then a dialysis membrane (fractionated molecular weight: 1000). And micelles were formed by dialysis with a boric acid-sodium hydroxide buffer solution having a
Claims (2)
前記多座配位子が、ビピリジン、ジピコリルアミン、及びターピリジンからなる群から選ばれる少なくとも１種である分散液。 The multidentate ligand of a copolymer obtained by copolymerizing at least a monomer (A) having a multidentate ligand coordinated to a metal atom and a hydrophilic monomer (B), and a metal atom Is a micelle dispersion composed of a metal polymer complex formed by coordination bonding,
A dispersion in which the polydentate ligand is at least one selected from the group consisting of bipyridine, dipicolylamine, and terpyridine .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2010246907A JP5594730B2 (en) | 2010-11-02 | 2010-11-02 | Micelle dispersions composed of metal polymer complexes |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2010246907A JP5594730B2 (en) | 2010-11-02 | 2010-11-02 | Micelle dispersions composed of metal polymer complexes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2012097211A JP2012097211A (en) | 2012-05-24 |
| JP5594730B2 true JP5594730B2 (en) | 2014-09-24 |
Family
ID=46389488
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2010246907A Expired - Fee Related JP5594730B2 (en) | 2010-11-02 | 2010-11-02 | Micelle dispersions composed of metal polymer complexes |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5594730B2 (en) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6373125B2 (en) * | 2014-08-22 | 2018-08-15 | 国立大学法人山形大学 | Transistor type heavy metal ion sensor |
| WO2022034880A1 (en) * | 2020-08-12 | 2022-02-17 | 学校法人東京理科大学 | Cell culture system, cell culture method, and culture medium additive |
| JPWO2022097580A1 (en) * | 2020-11-06 | 2022-05-12 | ||
| CN116515021A (en) * | 2023-05-19 | 2023-08-01 | 广东省科学院化工研究所 | Poly (N, N-dialkylaminoethyl) methacrylate quaternary ammonium salt, and preparation method and application thereof |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6218438B1 (en) * | 1998-11-18 | 2001-04-17 | Supratek Pharma, Inc. | Copolymer compositions for treating viral infections |
| CA2548457C (en) * | 2003-12-10 | 2010-08-24 | Toudai Tlo, Ltd. | Coordination complex of diaminocyclohexaneplatinum(ii) with block copolymer containing poly(carboxylic acid) segment and antitumor agent comprising the same |
| JP4741210B2 (en) * | 2004-08-05 | 2011-08-03 | 学校法人東京理科大学 | Novel compound, gene expression control agent and gene expression control method |
| US7872059B2 (en) * | 2007-02-14 | 2011-01-18 | Fujifilm Corporation | Composition for use in laser decomposition and pattern-forming material using the same |
| JP5651468B2 (en) * | 2008-06-26 | 2015-01-14 | 独立行政法人科学技術振興機構 | Polymer-metal complex composite having MRI contrast capability, and composition for MRI contrast and / or antitumor using the same |
| JP5467447B2 (en) * | 2008-08-28 | 2014-04-09 | 学校法人東京理科大学 | Surface modifier, modified material modified with the surface modifier and dispersion of nanoparticles, and method for producing nanoparticles |
| JP5594715B2 (en) * | 2008-09-08 | 2014-09-24 | 学校法人東京理科大学 | Method for producing polymerizable monomer and graft copolymer |
| JP2010208955A (en) * | 2009-03-06 | 2010-09-24 | Makoto Yuasa | Disease treatment drug |
-
2010
- 2010-11-02 JP JP2010246907A patent/JP5594730B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2012097211A (en) | 2012-05-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Haddleton et al. | Phenolic ester-based initiators for transition metal mediated living polymerization | |
| Anastasaki et al. | Cu (0)-mediated living radical polymerization: a versatile tool for materials synthesis | |
| Semsarilar et al. | Cationic polyelectrolyte-stabilized nanoparticles via RAFT aqueous dispersion polymerization | |
| Keddie et al. | Chain transfer kinetics of acid/base switchable N-aryl-N-pyridyl dithiocarbamate RAFT agents in methyl acrylate, N-vinylcarbazole and vinyl acetate polymerization | |
| US9005583B2 (en) | Chain-end functionalized poly(ethykene oxide) and process for the preparation of a nano-sized transition metal or metal salt using the same | |
| JP5594730B2 (en) | Micelle dispersions composed of metal polymer complexes | |
| JP6241929B2 (en) | Preparation method of heterogeneous composite metal nanoparticles | |
| Huang et al. | Homopolymerization and block copolymerization of N-vinylpyrrolidone by ATRP and RAFT with haloxanthate inifers | |
| Fu et al. | Direct ATRP of methacrylic acid with iron-porphyrin based catalysts | |
| JP6552970B2 (en) | Living radical polymerization catalyst and method for producing polymer using the same | |
| CN102307653A (en) | Novel multifunctional azo initiators for free radical polymerizations, and uses thereof | |
| Kopeć et al. | Aqueous RAFT polymerization of acrylonitrile | |
| EP2267049A1 (en) | Block copolymers | |
| JP5250641B2 (en) | pH-sensitive polyethylene oxide copolymers and methods for their synthesis | |
| Wei et al. | Synthesis of cleavable multi-functional mikto-arm star polymer by RAFT polymerization: example of an anti-cancer drug 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin (SN-38) as functional moiety | |
| JP3867400B2 (en) | Boronic acid group-containing monomer and polymer thereof | |
| JP2013017994A (en) | Separation method of metal ion | |
| Li et al. | ATNRC and SET‐NRC synthesis of PtBA‐g‐PEO well‐defined amphiphilic graft copolymers | |
| JP7113509B2 (en) | Method for producing polymer metal complex | |
| WO2018159740A1 (en) | Method for producing graft polymer, graft polymer, and initiator for graft polymer | |
| JP5467447B2 (en) | Surface modifier, modified material modified with the surface modifier and dispersion of nanoparticles, and method for producing nanoparticles | |
| CN109071697A (en) | The manufacturing method and multibranched polymer of multibranched polymer | |
| KR101336692B1 (en) | Poly(ethylene oxide)-based block copolymer bearing hydrazide moiety and iron oxide nanoparticle stabilized by the same | |
| JP6782481B2 (en) | Complex monomer of polyacid and polymerizable imidazolium compound | |
| JP4344779B2 (en) | Iron complex and method for producing polymer using iron complex as catalyst |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20131101 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20140224 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140304 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140415 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140722 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140730 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5594730 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |