JP5518062B2

JP5518062B2 - オーロラキナーゼ阻害剤および抗悪性腫瘍剤を含む治療用組み合わせ

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Publication number: JP5518062B2
Application number: JP2011519103A
Authority: JP
Inventors: ペゼンテイ，エンリコ; デインカルチ，マウリツイオ; バツリナーリ，ダリオ; モル，ユルゲン
Original assignee: ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ
Priority date: 2008-07-24
Filing date: 2009-07-03
Publication date: 2014-06-11
Anticipated expiration: 2029-07-03
Also published as: AR072871A1; EP2344156B1; CN102105147B; TW201008944A; EP2344156A1; WO2010009967A1; CN102105147A; HK1154344A1; JP2011528680A; ES2703739T3; US20110117212A1

Description

本発明は、一般に癌の処置分野に関し、より詳細にはオーロラキナーゼ阻害剤と、相乗的もしくは追加的な抗悪性腫瘍作用を有する、白金誘導体および／または代謝拮抗剤および／またはトポイソメラーゼＩ阻害剤および／または微小管阻害剤とを含む抗腫瘍組成物を提供する。

プロテインキナーゼ（ＰＫ）の機能障害は多数の疾患の特徴である。ヒト癌に関与するオンコジーンおよびプロトオンコジーンの多くはＰＫをコードする。ＰＫの高い活性は多くの非悪性疾患、例えば良性前立腺肥大、家族性腺腫症、ポリープ症、神経線維腫症、乾せん、アテローム性動脈硬化症を伴う血管平滑筋細胞増殖、肺線維症、関節炎、糸球体腎炎ならびに術後狭窄および再狭窄にも関与している。

ＰＫは炎症状態およびウイルスや寄生生物の増殖にも関与している。ＰＫは神経変性障害の病原性および発生において重要な役割も果たし得る。

ＰＫの機能障害または非調節の一般的参考のために、例えばＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＣｈｅｍｉｃａｌＢｉｏｌｏｇｙ，１９９９，３，４５９−４６５を参照されたい。

癌細胞の成長に関与するとして当分野において公知の幾つかのプロテインキナーゼの中には、オーロラキナーゼ、特にオーロラ−２がある。

オーロラ−２は多数の各種腫瘍タイプにおいて過剰発現していることが分かっている。この遺伝子座は、乳癌［ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．，１９９９，５９（９），２０４１−４］および結腸癌を含めた多くの癌においてしばしば増幅される染色体領域である２０ｑ１３に位置している。

２０ｑ１３増幅はリンパ節転移陰性乳癌の患者における悪い予後と相関しており、高いオーロラ−２発現は膀胱癌患者における悪い予後および短い生存時間を示している［Ｊ．Ｎａｔｌ．ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．，２００２，９４（１７），１３２０−９］。癌における異常な中心体機能におけるオーロラ−２の役割の一般的参考のために、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２００３，２：５８９−５９５も参照されたい。

当分野においてプロテインキナーゼ阻害剤として、幾つかの複素環式化合物が知られている。これらのうち、３−カルボキサミド−ピラゾールおよび３−ウレイド−ピラゾールおよびこれらの誘導体が、国際特許出願ＷＯ０１／１２１８９、国際特許出願ＷＯ１２１８８、国際特許出願ＷＯ０２／４８１１４および国際特許出願ＷＯ０２／７０５１５においてプロテインキナーゼ阻害剤として開示されている。

ピラゾール部分を含み、キナーゼ阻害活性を有する縮合二環式化合物も、ＷＯ００／６９８４６、ＷＯ０２／１２２４２、ＷＯ０３／０２８７２０およびＷＯ０３／９７６１０に開示されている。

特定のテトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール誘導体は、オーロラキナーゼの強力なＡＴＰ競合性阻害剤であることが明らかにされている（Ｆａｎｃｅｌｌｉ，Ｄ．，ｅｔａｌ．：ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００５，ｖｏｌ．４８，ｎｏ．８，ｐ．３０８０−３０８４、ＰＣＴ／ＷＯ２００５００５４２７）。

国際公開第０１／１２１８９号国際公開第１２１８８号国際公開第０２／４８１１４号国際公開第０２／７０５１５号国際公開第００／６９８４６号国際公開第０２／１２２４２号国際公開第０３／０２８７２０号国際公開第０３／９７６１０号国際公開第２００５００５４２７号

ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＣｈｅｍｉｃａｌＢｉｏｌｏｇｙ，１９９９，３，４５９−４６５ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．，１９９９，５９（９），２０４１−４Ｊ．Ｎａｔｌ．ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．，２００２，９４（１７），１３２０−９ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２００３，２：５８９−５９５Ｆａｎｃｅｌｌｉ，Ｄ．，ｅｔａｌ．：ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００５，ｖｏｌ．４８，ｎｏ．８，ｐ．３０８０−３０８４

驚くべきことに、上記テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール誘導体の抗悪性腫瘍作用、即ち特に増殖性疾患の進行遅延もしくは処置、特に他の化学療法に抵抗性の腫瘍の処置は、特定の抗悪性腫瘍剤と組み合わせて投与される場合に大きく向上することを見出した。特に、こうした組み合わせの抗悪性腫瘍作用は、いずれかのタイプの組み合わせ成分単独で達成することができる作用よりも大きい、即ち組み合わせ成分のうちただ１つを用いた単独療法の作用よりも大きい。

故に、本発明は、増殖性障害、特に癌の処置に特に適した、テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール誘導体と既知の医薬剤との新規な組み合わせを提供する。より詳細には、本発明の組み合わせは、抗腫瘍剤としての治療に非常に有用であり、毒性および副作用の両方の観点から、市販されている抗腫瘍薬に関連する欠点がない。

本発明は、第１の態様において、（ａ）式（Ａ）の化合物１と：

（ｂ）白金誘導体、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤および抗微小管剤からなる群から選択される１つまたは複数の抗悪性腫瘍剤とを含む治療用組み合わせを提供し、ここでこれらの活性成分は、いずれの場合も遊離の形態またはこれらの医薬的に許容される塩もしくはいずれかの水和物の形態にて存在する。

本発明はまた、上述の組み合わせの同時、別々または連続的使用のための組み合わせた調製物を提供する。

本発明はまた、医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤とさらに混合される上述の組み合わせを含む医薬組成物を提供する。

本発明はさらに、増殖性障害を処置するまたは進行を遅延させる方法を提供し、この方法は、こうした処置または遅延が必要な患者に、上述の組み合わせを治療的に有効な量で投与することによる。

本発明は、第１の実施形態において、（ａ）式（Ａ）の化合物１と：

（ｂ）白金誘導体、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤および抗微小管剤からなる群から選択される１つまたは複数の抗悪性腫瘍剤とを含む治療用組み合わせを提供し、これらの活性成分は、いずれの場合も遊離の形態またはこれらの医薬的に許容される塩もしくはいずれかの水和物の形態で存在する。

さらなる実施形態において、本発明に従う組み合わせは、同時、別々または連続的使用のための組み合わせた調製物を提供する。

さらなる実施形態は、増殖性障害を処置するまたは進行を遅延させる方法における本発明に従う組み合わせに関し、この方法は、処置または遅延を必要とする被験者に、治療用組み合わせを同時、連続的または別々に投与することを含む。

なおさらなる実施形態において、本発明は、医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合された治療用組み合わせを含む医薬組成物を提供する。

別の実施形態は、増殖性障害の処置のための薬剤の調製における上記で定義された式（Ａ）の化合物１の使用に関し、前記処置は、被験者への、上記で定義された式（Ａ）の化合物１と、白金誘導体、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤および抗微小管剤からなる群から選択される１つまたは複数の抗腫瘍剤との同時、連続または別々の投与を含む。

式（Ａ）の化合物１は、化学名Ｎ−｛５−［（２Ｒ）−２−メトキシ−２−フェニルエタノイル］−ｌ，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル｝−４−（４−メチルピペラジン−ｌ−イル）ベンズアミドを有する。これは、ＷＯ２００５／００５４２７（本明細書に参考として組み込まれる。）に記載されるように調製でき、プロテインキナーゼ阻害活性が賦与され、故に抗悪性腫瘍剤として治療に有用である。

式（Ａ）の化合物１の医薬的に許容される塩には、無機または有機酸、例えば、硝酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、過塩素酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、シュウ酸、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、メシル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、イセチオン酸およびサリチル酸などとの酸付加塩が含まれる。

本発明の好ましい実施形態によれば、白金誘導体は、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、ロバプラチンおよびサトラプラチンからなる群から選択される。オキサリプラチンは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）の下での形態で投与できる。

本発明のより好ましい実施形態によれば、白金誘導体はシスプラチンまたはオキサリプラチンである。

代謝拮抗剤としては、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、カペシタビン、ゲムシタビン、シトシンアラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）、ペメトレキセド、メトトレキサートおよびエダトレキサートが挙げられるが、これらに限定されない。カペシタビンは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＸＥＬＯＤＡ（登録商標）の下での形態で投与できる。ゲムシタビンは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）の下での形態で投与できる。ペメトレキセドは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＡＬＩＭＴＡ（登録商標）の下での形態で投与できる。

本発明のより好ましい実施形態によれば、代謝拮抗剤はゲムシタビン、５−ＦＵまたはＡｒａ−Ｃである。

トポイソメラーゼＩ阻害剤としては、トポテカン、イリノテカン、ＳＮ−３８および９−ニトロカンプトテシンが挙げられるが、これらに限定されない。イリノテカンは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）の下での形態で投与できる。トポテカンは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標）の下での形態で投与できる。ＳＮ−３８は、イリノテカンのインビボ加水分解によって得られるイリノテカンの活性代謝物である。

本発明のより好ましい実施形態によれば、トポイソメラーゼＩ阻害剤は、イリノテカンまたはＳＮ３８である。

抗微小管剤としては、パクリタキセル、ドセタキセルおよびエポチロン誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。パクリタキセルは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＴＡＸＯＬ（登録商標）の下での形態で投与できる。ドセタキセルは、例えば販売されているような形態、例えば商標名ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）の下での形態で投与できる。

本発明のより好ましい実施形態によれば、抗微小管剤は、ドセタキセルおよびパクリタキセルである。

本発明において、組み合わせの活性成分のそれぞれは、相乗的な抗悪性腫瘍作用を生じるのに有効な量で提供される。

本発明はまた、抗悪性腫瘍治療が必要なヒトを含む哺乳類における抗悪性腫瘍剤を用いた抗悪性腫瘍治療によって生じる副作用を低下させるための方法を提供し、この方法は、相乗的に抗悪性腫瘍作用を生じるのに有効な量で、上記で定義された式（Ａ）の化合物１と、白金誘導体、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤および抗微小管剤からなる群から選択される１つまたは複数の抗悪性腫瘍剤とを含む組み合わせた調製物を、前記哺乳類に投与することを含む。

本明細書で使用される場合、「相乗的な抗悪性腫瘍作用」という用語は、上記で定義される式（Ａ）の化合物１と、哺乳類には白金誘導体、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、またはヒトを含む哺乳類には抗微小管剤との組み合わせの有効量を投与することによる、腫瘍の成長阻害、好ましくは腫瘍の完全な退縮を意味する。

本明細書で使用される場合、「組み合わせた調製物」という用語は、特に上記で定義された組み合わせ成分（ａ）および（ｂ）を独立に投与でき、または組み合わせ成分（ａ）および（ｂ）の区別された量を有する様々な一定の組み合わせの使用によって、即ち同時または異なる時点で投与できることを意味する「キット・オブ・パーツ」を規定する。次いでキット・オブ・パーツの要素は、例えば同時に投与されることができ、または経時的にずらすことができ、即ちキット・オブ・パーツのいずれかの要素に関して異なる時点で、等しいまたは異なる時間間隔で投与できる。最も好ましくは、時間間隔は、パーツの組み合わせた使用において処置される疾患に対する作用が組み合わせ成分（ａ）および（ｂ）のいずれか１つだけの使用によって得られる作用よりも大きくなるように選択される。組み合わせた調製物において、投与されるべき組み合わせ成分（ａ）と組み合わせ成分（ｂ）との総量比は、例えば処置されるべき患者の分集団の必要性または特定の疾患、患者の年齢、性別、体重などによって異なり得る個々の患者の必要性に対処するために、変更され得る。好ましくは、少なくとも１つの有益な作用、例えば組み合わせのパートナー（ａ）および（ｂ）の作用の相互向上性、特に相乗作用、例えば添加作用を上回るもの、追加の有利な作用、副作用の低減、毒性の低減、または組み合わせ成分（ａ）および（ｂ）のうち１つまたは両方の非有効投与量での組み合わせた治療作用、および非常に好ましくは組み合わせ成分（ａ）および（ｂ）の強い相乗作用がある。

本明細書で使用される場合、「投与される」または「投与する」という用語は、非経口および／または経口投与を意味する。「非経口」とは、静脈内、皮下、および筋肉内投与を意味する。

主題の発明の方法において、式（Ａ）の化合物の投与に関して、一般に使用される治療の過程は、２１日間の連続した日数までの間は体表面積の１００ｍｇ／ｍ^２／日から１５００ｍｇ／ｍ^２／日の範囲である。より好ましくは使用される治療過程は、２１日間の連続した日数までの間は体表面積の約１５０ｍｇ／ｍ^２／日から約３５０ｍｇ／ｍ^２／日である。

特に好ましいレジメンにおいて、式（Ａ）の化合物は、３週間のサイクルの１日目および８日目において３時間の点滴に関しては体表面積の１９０または２５０ｍｇ／ｍ^２／日の用量にて投与される。他の可能な治療スケジュールは、例えば２００８年５月８日に公開されたＷＯ２００８／０５２９３１（本明細書に参考として組み込まれる。）に開示されている。

式（Ａ）の化合物は、種々の剤形、例えば錠剤、カプセル、糖衣錠またはフィルムコーティング錠、液剤または懸濁液剤の形態において経口にて；坐剤として直腸にて；非経口的に、例えば筋肉内にてまたは静脈内および／またはくも膜下腔内および／または脊髄内注射または点滴を通して投与できる。

主題の発明の方法において、白金誘導体、好ましくはカルボプラチンの投与に関して一般に使用される治療過程は、全身曝露（ＡＵＣ値として表される。）、患者の腎臓機能および投与スケジュールに依存する。１から４週のスケジュールにわたって２から６のＡＵＣを目標とするレジメンが通常採用される。より好ましくは４週のスケジュールにわたって４から６のＡＵＣを標的目標とするレジメンが使用される。オキサリプラチンの投与に関して、一般に使用される治療過程は、２から３週毎に１０ｍｇ／ｍ^２／日から１００ｍｇ／ｍ^２／日である。より好ましくは、一般に使用される治療過程は、２週間毎に１回で１日目に約３０ｍｇ／ｍ^２／日から８５ｍｇ／ｍ^２／日である。

代謝拮抗剤、好ましくはゲムシタビンの投与に関して、一般に使用される治療過程は、毎週投与として２００ｍｇ／ｍ^２／日から２０００ｍｇ／ｍ^２／日である。より好ましくは、一般に使用される治療過程は、２１日サイクルの１日目および８日目、または２８日サイクルの１日目、８日目および１５日目において約８００ｍｇ／ｍ^２／日から１２５０ｍｇ／ｍ^２／日である。

トポイソメラーゼＩ阻害剤、好ましくはトポテカンの投与に関して、一般に使用される治療過程は、２から１０の連続する日数の間は毎日０．１ｍｇ／ｍ^２から２ｍｇ／ｍ^２である。より好ましくは、一般に使用される治療過程は、２１日サイクルにおいて３から５の連続する日数の間は毎日約０．５ｍｇ／ｍ^２から１．５ｍｇ／ｍ^２である。

イリノテカンの投与に関して、一般に使用される治療過程は、６週間サイクルの１日目、８日目、１５日目および２２日目において一日５０ｍｇ／ｍ^２から３５０ｍｇ／ｍ^２であり、より好ましくは、一般に使用される治療過程は、６週間のサイクルの１日目、８日目、１５日目および２２日目において一日約１２５ｍｇ／ｍ^２から１８０ｍｇ／ｍ^２である。

抗微小管剤、好ましくはドセタキセルの投与に関して、一般に使用される治療過程は、３週間毎に約５０ｍｇ／ｍ^２／日から１００ｍｇ／ｍ^２／日であり、または２０ｍｇ／ｍ^２／日から１００ｍｇ／ｍ^２／日である。好ましくは、３週間のサイクルの１日目および８日目において３時間の点滴によって投与される。

本発明の抗悪性腫瘍治療は、特に、癌腫、例えば膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、肝臓癌、肺癌（小細胞肺癌を含む。）、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、胃癌、子宮頸癌、甲状腺癌、前立腺癌および皮膚癌（扁平上皮癌を含む。）；リンパ系の造血性腫瘍、例えば白血病、急性リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、ヘアリー細胞リンパ腫およびバーキット・リンパ腫；骨髄系の造血性腫瘍、例えば急性および慢性骨髄性白血病、骨髄形成異常症候群および前骨髄球性白血病；多発性骨髄腫；間葉起源の腫瘍、例えば線維肉腫および横紋筋肉腫；中枢および末梢神経系の腫瘍、例えば星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫およびシュワン細胞腫；他の腫瘍、例えばメラノーマ、セミノーマ、奇形癌、骨肉腫、色素性乾皮症、角膜黄色腫、甲状腺濾胞状癌およびカポジ肉腫が含まれるが、これらに限定されない癌のあらゆる形態を処置するために好適である。

上記で述べたように、本発明の組み合わせの作用は、対応する毒性の増大なしに顕著に増大する。換言すれば、本発明の組み合わせた治療は、本発明の組み合わせ成分（ａ）および／または成分（ｂ）の抗腫瘍作用を向上させ、それによって腫瘍に関して最も有効で、毒性の少ない処置となる。

本発明に従う医薬組成物は、抗癌治療に有用である。

本発明はさらに、好適な容器の手段において、（ａ）上記で定義された式（Ａ）の化合物と、（ｂ）白金誘導体、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤および抗微小管剤からなる群から選択される１つまたは複数の抗悪性腫瘍剤とを含む商業用のパッケージを提供し、活性成分は、いずれの場合も遊離の形態またはこれらの医薬的に許容される塩もしくはいずれかの水和物の形態にて存在し、同時、別々または連続的なこれらの使用に関する説明書も伴う。

本発明に従うパッケージにおいて、パートナー（ａ）および（ｂ）のそれぞれは、単一容器手段内にまたは別個の容器手段内に存在する。

本発明の別の実施形態は、上述のような医薬組成物または製品を含む商業用のパッケージである。

細胞有糸分裂および増殖の調節におけるオーロラ・キナーゼ・プロテインの重要な役割のために、本発明の組み合わせはまた、種々の細胞増殖性障害、例えば良性前立腺肥大、家族性腺腫症、ポリープ症、神経線維腫症、乾せん、アテローム性動脈硬化症を伴う血管平滑筋細胞増殖、肺線維症、関節炎、糸球体腎炎ならびに術後狭窄および再狭窄の処置においても有用である。

本発明の組み合わせは、アポトーシスのモジュレータとして、癌、ウイルス感染症の処置、ＨＩＶ感染者におけるＡＩＤＳ進行の予防、自己免疫疾患および神経変性障害の予防に有用でもあり得る。

本発明の組み合わせの活性は、例えば本発明を例示することを目的とするが、限定するものではないインビトロおよびインビボ試験にて次のように示される。

インビトロ細胞毒性活性試験のための材料および方法
指数関数的に成長したヒト卵巣癌（Ａ２７８０）および／またはヒト結腸癌（ＨＣＴ−１１６）株化細胞を播種し、加湿した５％ＣＯ_２雰囲気中にて３７℃で温置した。薬物を実験培地に添加し、暗所中、３７℃にて７２時間温置した。上記で定義された式（Ａ）の化合物１および抗悪性腫瘍剤のスカラー用量を、播種の２４時間後に媒質に添加した。次の処置スケジュールの１つまたは両方を試験した：同時投与（両方の薬物を細胞に７２時間投与する。）および連続的投与（他方の試薬の２４時間後に化合物１を投与する。）。薬物溶液は、使用直前に調製した。処置の終わりに、読み取り機としてＥｎｖｉｓｉｏｎ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いる細胞内のアデノシン三リン酸のモニタリングシステム（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ−Ｐｒｏｍｅｇａ）によって細胞増殖を決定した。阻害活性を、ＡｓｓａｙＥｘｐｌｏｒｅｒ（ＭＤＬ）プログラムを用いて、処置データとコントロールデータとを比較して評価した。細胞成長の５０％を阻害する用量を、Ｓ字補間曲線を用いて計算した。組み合わせ指数（Ｃ．Ｉ．）は、相互に非排他的な薬物に関するＣｈｏｕ−Ｔａｌａｌａｙの式（ＡｄｖＥｎｚｙｍｅＲｅｇｕｌ１９８４；２２：２７−５５）に基づく複数の薬剤作用分析に関するコンピュータプログラムを用いて計算したが、ここでＣ．Ｉ．＜１は、追加作用よりも大きいことを示す（Ｃ．Ｉ．＞３は強力な拮抗作用を示し；１．３＜Ｃ．Ｉ．＜３は拮抗作用；０．８＜Ｃ．Ｉ．＜１．３は加算性；０．３＜Ｃ．Ｉ．＜０．８は相乗作用；Ｃ．Ｉ．＜０．３は強い相乗性）。

シスプラチンを用いる組み合わせのインビトロ細胞毒性活性
表１に示される結果は、ヒト卵巣癌Ａ２７８０およびヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６株化細胞両方において、シスプラチンと組み合わせた化合物１の投与が相乗的な抗腫瘍作用をもたらしたことを示している。

オキサリプラチンを用いる組み合わせのインビトロ細胞毒性活性
表２に示される結果は、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６株化細胞において、オキサリプラチンと組み合わせた化合物１の投与が相乗的な抗腫瘍作用をもたらしたことを示している。

５−ＦＵを用いる組み合わせのインビトロ細胞毒性活性
表３に示される結果は、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６株化細胞において、５−ＦＵと組み合わせた化合物１の投与が相乗的な抗腫瘍作用をもたらしたことを示している。

ＳＮ３８を用いる組み合わせのインビトロ細胞毒性活性
表４に示される結果は、ヒト卵巣癌Ａ２７８０において、トポイソメラーゼＩ阻害剤ＳＮ３８と組み合わせた化合物１の投与が相乗的な抗腫瘍作用をもたらしたことを示している。

ＡｒａＣを用いる組み合わせのインビトロ細胞毒性活性
表５に示される結果は、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６株化細胞において、ＡｒａＣと組み合わせた化合物１の投与が相乗的な抗腫瘍作用をもたらしたことを示している。

ゲムシタビンと組み合わせたインビボ抗腫瘍効能
Ｈａｒｌａｎ（イタリア）からのＢａｌｂ，Ｎｕ／Ｎｕオスマウスを、紙フィルターカバー、餌、滅菌された床および酸性化水を備えたケージ中に維持した。ＢＸ−ＰＣ３ヒト膵癌のフラグメントを胸腺欠損マウスに皮下移植した。この腫瘍モデルはゲムシタビンに対して感受性であることが以前から示されていたため、またゲムシタビンは膵癌のための標準的な処置であるため、この腫瘍モデルを選択した。ゲムシタビンを用いた処置は、腫瘍が触知可能となった腫瘍移植後９日目に開始した。化合物は、処置直前に調製した。

式（Ａ）の化合物１は、連続した９日間の間１日２回１５ｍｇ／ｋｇの用量にて、１０ｍｌ／ｋｇの体積で腹腔内経路によって投与した（９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６および１７日目）。ゲムシタビンは、４日毎に３回、８０ｍｇ／ｋｇの用量にて１０ｍｌ／ｋｇ体積で静脈内投与した。（９、１３、１７日目）。組み合わせた場合、ゲムシタビンは、９、１３、１７日目で投与し、化合物１はゲムシタビン投与の３日後に投与した。腫瘍成長および体重を３日毎に測定した。腫瘍成長をノギスによって評価した。２つの直径を記録し、腫瘍重量を次の式に従って計算した：長さ（ｍｍ）×幅^２／２。抗腫瘍処置の作用は、腫瘍成長阻害のパーセンテージ（ＴＧＩ％）として評価した。毒性は、体重減少の基準により評価した。結果を表６に報告する。代謝拮抗剤ゲムシタビンと組み合わせた化合物１は、追加的／相乗的作用を生じた。

シスプラチンを用いる組み合わせにおけるインビボ抗腫瘍効能
Ｈａｒｌａｎ（イタリア）からのＢａｌｂ，Ｎｕ／Ｎｕオスマウスを、紙フィルターカバー、餌、滅菌された床および酸性化水を備えたケージ中に維持した。Ａ２７８０ヒト卵巣癌細胞は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から得て、１０％ＦＢＳで補完されたＲＰＭＩ媒質中の連続培地として３７℃、５％ＣＯ_２にてインビトロで維持した。インビボ実験に関して、８×１０^６Ａ２７８０細胞を、胸腺欠損マウスにて皮下移植した。この腫瘍モデルは白金誘導体に対して感受性であるため、また卵巣癌におけるこの薬物の使用を基準にして選択された。

処置は腫瘍が触知可能となった時に開始した（１３日目）。両方の化合物を処置直前に調製した。

式（Ａ）の化合物１は、１３から１７日目までは１日２回（ＢＩＤ）１５ｍｇ／ｋｇの用量にて、１０ｍｌ／ｋｇの体積で腹腔内経路によって投与した。シスプラチンは、５日目に８ｍｇ／ｋｇの用量にて１０ｍｌ／ｋｇ体積で静脈内経路によって投与した。組み合わせた場合、化合物１は１から５日目にて投与し、シスプラチンは１７日目に投与した。腫瘍成長および体重を３日毎に測定した。腫瘍成長をノギスによって評価した。２つの直径を記録し、腫瘍重量を次の式に従って計算した：長さ（ｍｍ）×幅^２／２。動物は腫瘍移植後の３７日目、処置開始から２４日目にて屠殺し、腫瘍を計量した。抗腫瘍処置の作用は、対照に関して処置された群の腫瘍成長阻害のパーセンテージとして評価した。毒性は、体重減少の基準により評価した。結果を表７に報告する。

アルキル化剤シスプラチンと組み合わせた式（Ａ）の化合物１は明確な相乗作用を生じた。いずれの処置群においても毒性は観察されなかった。

イリノテカンを用いる組み合わせのインビボ抗腫瘍効能
Ｈａｒｌａｎ（イタリア）からのＢａｌｂ，Ｎｕ／Ｎｕオスマウスを、紙フィルターカバー、餌、滅菌された床および酸性化水を備えたケージ中に維持した。Ａ２７８０ヒト卵巣癌細胞は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から得て、１０％ＦＢＳで補完されたＲＰＭＩ媒質中の連続培地として３７℃、５％ＣＯ_２にてインビトロで維持した。インビボ実験に関して、８×１０^６Ａ２７８０を、胸腺欠損マウスにて皮下移植した。この腫瘍モデルは白金誘導体に対して感受性であるため、また卵巣癌におけるこの薬物の使用を基準にして選択された。

式（Ａ）の化合物１は、１３から１７日目において１日２回（ＢＩＤ）３０ｍｇ／ｋｇの用量にて、１０ｍｌ／ｋｇの体積で腹腔内経路によって投与した。イリノテカンは、１日目にて６０ｍｇ／ｋｇの用量にて１０ｍｌ／ｋｇ体積で静脈内経路により投与した。組み合わせた場合、化合物１は１から５日目にて投与し、イリノテカンは１日目に投与した。腫瘍成長および体重を３日毎に測定した。腫瘍成長をノギスによって評価した。２つの直径を記録し、腫瘍重量を次の式に従って計算した：長さ（ｍｍ）×幅^２／２。動物は腫瘍移植後の３７日目、処置開始から２４日目にて屠殺し、腫瘍を計量した。抗腫瘍処置の作用は、対照に関して処置された群の腫瘍成長阻害のパーセンテージとして評価した。毒性は、体重減少の基準により評価した。結果を表８に報告する。

トポイソメラーゼＩ阻害剤イリノテカンと組み合わせた式（Ａ）の化合物１は明確な相乗作用を生じた。いずれの処置群においても毒性はなかった。

ドセタキセルを用いた組み合わせのインビボ抗腫瘍効能
Ｈａｒｌａｎ（イタリア）からのＢａｌｂ，Ｎｕ／Ｎｕオスマウスを、紙フィルターカバー、餌、滅菌された床および酸性化水を備えたケージ中に維持した。２．５×１０^６ＤＵ１４５前立腺癌細胞（ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ製）を、胸腺欠損マウスにて皮下注射した。この腫瘍モデルは、ドセタキセルがインビボモデルの成長を阻害することが以前に示されている（参考として：ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２００４Ｏｃｔ１５，（６４）：７４２６−３１を参照）ため、また前立腺癌におけるこの薬物の使用の基準（参考として：Ａｐｐｒｏｖａｌｓｕｍｍａｒｙ：ｄｏｃｅｔａｘｅｌｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｎｄｒｏｇｅｎ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｈｏｒｍｏｎｅ−ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒ，Ｃｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２００４Ｄｅｃ１５；１０（２４）：８１４７−５１を参照）により選択された。

処置は、腫瘍が触知可能となった時である腫瘍細胞の注射から１０日後に開始した。ドセタキセルは、処置の直前に調製した。式（Ａ）の化合物は、化合物の既知の安定性に基づいて毎日調製した。

化合物１は、９日間（１０から１８日目）の間１日２回（ＢＩＤ）３０ｍｇ／ｋｇの用量にて、１０ｍｌ／ｋｇの体積で腹腔内経路によって投与した。ドセタキセルは、細胞注射の日から１０、１４、１８日目にて７．５ｍｇ／ｋｇの用量にて１０ｍｌ／ｋｇ体積で静脈内経路により投与した。組み合わせた場合、化合物１は１１、１２、１３、１５、１６、１７、１９、２０および２１日目にてドセタキセル処置との間の間隔で投与した。腫瘍成長および体重を３日毎に測定した。腫瘍成長をノギスによって評価した。２つの直径を記録し、腫瘍重量を次の式に従って計算した：長さ（ｍｍ）×幅^２／２。抗腫瘍処置の作用は、腫瘍の指数関数的な成長の発生における遅延として評価した（参考としてＡｎｔｉｃａｎｃｅｒｄｒｕｇｓ７：４３７−６０，１９９６を参照）。この遅延（Ｔ−Ｃ曲線）は、所定のサイズ（１ｇ）に到達するのに必要な処置群（Ｔ）および対照群（Ｃ）の腫瘍の時間（日単位）の差として規定した。毒性は、体重減少の基準にて評価した。結果を以下の表に報告した。ドセタキセルと組み合わせた式（Ａ）の化合物は明らかな相乗作用を生じた：化合物１がドセタキセルと組み合わせた場合に観察されるＴ−Ｃは、単一の処置によって得られたＴ−Ｃ（９）の単純な添加によって予測されるものより優れていた（１１．５日）。いずれの処置群でも毒性は観察されなかった。結果を表９に報告する。

Claims

（ａ）式（Ａ）の化合物１と：

（ｂ）シスプラチン、オキサリプラチン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シトシンアラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）、ＳＮ−３８、イリノテカンおよびドセタキセルからなる群から選択される１つまたは複数の抗悪性腫瘍剤との組み合わせを含む腫瘍治療用組成物であって、組み合わせの活性成分が、いずれの場合も遊離の形態またはこれらの医薬的に許容される塩もしくはいずれかの水和物の形態にて存在する組成物。
同時、別々または連続使用のための組み合わせた調製物である、請求項１に記載の腫瘍治療用組成物。
医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合する、請求項１に記載の組成物を含む腫瘍治療用医薬組成物。
増殖性障害を処置するまたはこの進行を遅延させるための薬剤の調製のための、請求項１または２に記載の組成物の使用。
治療が必要なヒトを含む哺乳類における抗悪性腫瘍剤を用いた抗悪性腫瘍治療によって生じる副作用を低下させるための薬剤の調製のための、請求項１または２に記載の組成物の使用。
好適な容器の手段において、（ａ）請求項１に記載の式（Ａ）の化合物１と、（ｂ）シスプラチン、オキサリプラチン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シトシンアラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）、ＳＮ−３８、イリノテカンおよびドセタキセルからなる群から選択される１つまたは複数の抗悪性腫瘍剤との組み合わせを含む腫瘍治療用組成物を含有する商業用のパッケージであって、活性成分が、いずれの場合も遊離の形態またはこれらの医薬的に許容される塩もしくはいずれかの水和物の形態にて存在し、同時、別々または連続的にそれを使用することに関する説明書も伴う、パッケージ。