JP5366474B2 - Gibberellin signaling pathway inhibitor for plants containing D-allose as an active ingredient and use thereof - Google Patents

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Description

本発明は、D−アロースを有効成分とする植物のジベレリンシグナル経路抑制剤に関し、植物の生長を制御することを可能にするものである。ジベレリン(GA)は植物の発芽、伸長生長、花芽形成などを制御する植物ホルモンである。例えば、イネの SLR1タンパクはGA情報伝達を負に制御する転写因子であり、上流からのGAシグナルに依存したSLR1タンパクの分解がGAの引き起こす様々な反応において必須であることが明らかとなっている。D−アロースで処理したイネを用いて、D−アロースのジベレリンシグナル経路に対する影響を検定した結果、D−アロースはHXK(ヘキソキナーゼ)依存性シグナル経路を経て、ジベレリンシグナル経路を制御できることが明らかとなった。本発明は、こうしたD−アロースの特性を利用して、植物の生長の制御を可能とするものであり、農業生産技術分野において、例えば、イネの徒長による倒伏や、イネばか苗病による生長過多を防止して、米の収量増加を図ることができる有用な薬剤を提供するものである。   The present invention relates to a plant gibberellin signal pathway inhibitor containing D-allose as an active ingredient, and makes it possible to control plant growth. Gibberellin (GA) is a plant hormone that controls plant germination, elongation growth, flower bud formation and the like. For example, rice SLR1 protein is a transcription factor that negatively regulates GA signal transduction, and it has been clarified that degradation of SLR1 protein depending on upstream GA signal is essential in various reactions caused by GA. . As a result of assaying the influence of D-allose on the gibberellin signal pathway using rice treated with D-allose, it became clear that D-allose can control the gibberellin signal pathway via an HXK (hexokinase) -dependent signal pathway. It was. The present invention makes it possible to control the growth of plants by utilizing such characteristics of D-allose. In the agricultural production technical field, for example, lodging by rice chiefs or excessive growth due to rice seedling disease is possible. It is intended to provide a useful drug capable of preventing rice and increasing rice yield.

植物ホルモンの一種であるジベレリンは、entジベラン骨格をもつ化合物の総称であるが、幹/節間伸長を含む様々な生物学的プロセスにおいて重要な役割を演じており(非特許文献1及び2参照)、発芽や休眠など作物の重要形質を司るホルモンとして農業上利用されてきた。イネにおける節間伸長は、単子葉植物におけるジベレリンシグナル伝達の典型的なモデル系である。   Gibberellin, a kind of plant hormone, is a general term for compounds having an ent gibberane skeleton, and plays an important role in various biological processes including stem / internode elongation (see Non-Patent Documents 1 and 2). ), And has been used in agriculture as a hormone that controls important characteristics of crops such as germination and dormancy. Internode elongation in rice is a typical model system for gibberellin signaling in monocots.

一方、イネの突然変異体eui(elongated upper-most internode)は出穂時に節間を異常に伸長させる表現型を示す。eui植物体のもっとも伸長する上部の節間の内生ジベレリン含量を測定したところ、野生型と比べてGA4の異常な蓄積が認められている。イネ出穂時における節間伸長に関連するイネのゲノム上の遺伝子領域について研究が進められ、節間伸長に関連する遺伝子領域がある程度特定されている(非特許文献3参照)。 On the other hand, rice mutants eui (e longated u pper-most i nternode) denotes a phenotype which abnormally extending the internode Heading time. When the endogenous gibberellin content between the most elongated upper nodes of the eui plant was measured, abnormal accumulation of GA 4 was observed compared to the wild type. Studies have been conducted on gene regions on the rice genome related to internode elongation at the time of heading rice, and gene regions related to internode elongation have been specified to some extent (see Non-Patent Document 3).

幾つかの希少糖、例えば、D−プシコース、D−フラクトース、D−アロース、L-ガラクトースが様々な植物の生長調整剤として有効であり、イネなどの病害虫防御関連遺伝子の発現を誘導し、さらには生育調節活性を持つことが明らかになった。例えば、希少糖は植物によって異物と認識され、植物抵抗性遺伝子群を起動し病原菌・病害虫に対する抵抗性増大を促す作用を有する。D−プシコースなどの希少糖を植物病害抵抗性増幅剤として使用する技術に係る発明が特許されている(特許文献1参照)。   Some rare sugars such as D-psicose, D-fructose, D-allose, L-galactose are effective as growth regulators of various plants, induce the expression of pest defense related genes such as rice, Was found to have growth-regulating activity. For example, a rare sugar is recognized as a foreign substance by a plant, and has a function of activating a plant resistance gene group to promote an increase in resistance against pathogenic bacteria and pests. An invention relating to a technique using a rare sugar such as D-psicose as a plant disease resistance amplifying agent has been patented (see Patent Document 1).

また、植物の全身獲得抵抗性の誘導の効果を利用した農薬などの提供、あるいは植物病原菌だけでなく、有害微生物の増殖抑制剤の提供を目的として、植物の全身獲得抵抗性の誘導の効果を利用した農薬、植物病害抑制剤、植物生長調節因子の誘導剤(病害抵抗性、虫害抵抗性、果実の成熟、休眠打破、発芽調節、乾燥耐性、そのほか低温耐性、高温耐性、塩類耐性、重金属耐性などの環境ストレス耐性および開花促進からなる植物ホルモン的な作用の誘導剤)、ならびに、微生物の増殖抑制剤としての使用に係る発明が開示されている(特許文献2参照)。希少糖としては、アルドース(D−アロース、D−アルトロースまたはL−ガラクトース)またはケトース(D−プシコース、またはD−プシコースとD−フラクトースの混合物)などが用いられている。   In addition, for the purpose of providing agricultural chemicals using the effect of induction of systemic acquired resistance of plants, or the growth inhibitor of harmful microorganisms as well as plant pathogens, the effect of inducing acquired systemic resistance of plants Pesticides used, plant disease inhibitors, plant growth regulator inducers (disease resistance, insect resistance, fruit ripening, dormancy breaking, germination control, drought resistance, low temperature resistance, high temperature resistance, salt resistance, heavy metal resistance And the like, and an invention relating to use as a microbial growth inhibitor (see Patent Document 2). As the rare sugar, aldose (D-allose, D-altrose, or L-galactose) or ketose (D-psicose, or a mixture of D-psicose and D-fructose) is used.

さらに、植物生長調節剤、植物生長調節方法の提供を目的として、希少糖を有効成分とする植物生長調節剤に係る発明が開示されている。希少糖はD−プシコース、D−プシコースとD−フラクトースの混合物、D−アロースおよびL−ガラクトースからなる群から選ばれる希少糖を用いている植物生長調節剤が開示されている(特許文献3参照)。
しかしながら、これらの希少糖の植物に対する作用機構については解明されていなかった。
Furthermore, for the purpose of providing a plant growth regulator and a plant growth regulator, an invention relating to a plant growth regulator comprising a rare sugar as an active ingredient is disclosed. As a rare sugar, a plant growth regulator using a rare sugar selected from the group consisting of D-psicose, a mixture of D-psicose and D-fructose, D-allose and L-galactose is disclosed (see Patent Document 3). ).
However, the mechanism of action of these rare sugars on plants has not been elucidated.

特許第4009720号公報Japanese Patent No. 4009720 特開2006−8669号公報JP 2006-8669 A 特開2006−188482号公報JP 2006-188482 A 161-188 (Elsevier Science B.V., 1999)161-188 (Elsevier Science B.V., 1999) Rev. Plant Biol. 55, 197-223 (2004)Rev. Plant Biol. 55, 197-223 (2004) (2004)Mol. Gen. Genomics. 272, 149-155(2004) Mol. Gen. Genomics. 272, 149-155

このような状況の中で、本発明者らは、上記の従来技術に鑑みて、希少糖の植物に対する生理活性作用の機構を明らかにすることにより、農作物の産生過程において有用な植物生長調整剤を開発することを目標として鋭意研究を積み重ねることにより、希少糖の中でもD−アロースが植物のジベレリンシグナル経路抑制作用を有することを見出し、更に研究を重ねることにより本発明を完成させるに至った。   Under such circumstances, in view of the above prior art, the present inventors have clarified the mechanism of bioactive action of rare sugars on plants, thereby enabling useful plant growth regulators in the production process of agricultural crops. As a result of intensive research with the goal of developing a novel saccharide, D-allose has been found to have a plant gibberellin signal pathway inhibitory action among rare sugars, and further research has led to the completion of the present invention.

本発明の目的は、D−アロースを主成分とする植物のジベレリンシグナル経路抑制剤を提供することである。また、本発明の目的は、農業場面でのジベレリン作用を抑制したい場面において、植物体にD−アロースを施用して生長を抑制する植物の生長抑制方法、及び生長抑制剤を提供することであり、例えば、イネばか苗病菌が分泌するジベレリンに起因する徒長、節間伸長に係る問題を、D−アロースを汚染籾および植物体に処理することにより解決することを可能とするものである。   The objective of this invention is providing the gibberellin signal pathway inhibitor of the plant which has D-allose as a main component. Another object of the present invention is to provide a plant growth suppression method and a growth inhibitor that suppresses growth by applying D-allose to a plant body in a scene where it is desired to suppress the gibberellin action in an agricultural scene. For example, it is possible to solve the problems related to the length and internode elongation caused by gibberellin secreted by rice sapling seedling fungus by treating D-allose with contaminated cocoons and plants.

また、本発明の目的は、農薬の使用量を飛躍的に減少させる可能性のある、植物の全身獲得抵抗性の誘導効果を利用した農薬、植物病害抑制剤、植物生長調節因子の誘導剤を、D−アロースを有効成分とすることにより提供するものである。また、本発明の目的は、D−アロースを、種子、植物の根、茎、葉面、花の組織、細胞などに溶液状態もしくは固体状態で葉面散布、切り枝基部を溶液に浸漬、土壌灌注などの方法により施用して実施する植物生長抑制方法を提供することである。更に具体的には、本発明の目的は、イネの徒長によりイネが倒伏することを防止し、また、イネの病気による様々な影響を軽減し、米の収量を増加させることが可能な植物の生長抑制剤を提供することである。   In addition, an object of the present invention is to provide a pesticide, a plant disease inhibitor, and a plant growth regulator inducer that uses the effect of inducing resistance to plant whole body acquisition, which may drastically reduce the amount of pesticide used. It is provided by using D-allose as an active ingredient. Further, the object of the present invention is to spray D-allose on seeds, plant roots, stems, leaves, flower tissues, cells, etc. in a solution state or in a solid state, soak the cutting base in the solution, soil An object of the present invention is to provide a method for suppressing plant growth, which is carried out by applying by a method such as irrigation. More specifically, the object of the present invention is to prevent the planting of rice by the head of rice, reduce the various effects of rice diseases, and increase the yield of rice. It is to provide a growth inhibitor.

本発明は、D−アロースを有効成分とすることを特徴とする植物のジベレリンシグナル経路抑制剤に係るものであり、D−アロースの作用機構は、HXK依存性シグナル経路を経て、ジベレリンシグナル経路を抑制する。さらに詳細には、D−アロースは、HXK依存性シグナル経路を経て、ジベレリンシグナル経路中のSLR1タンパク系からα-アミラーゼに至までの経路を阻害する。本発明を適用することが可能な植物としては、ジベレリンシグナル経路を有する植物であればその種類などが限定されるものではない。本発明が適用できる植物の例としては、単子葉植物が挙げられ、具体的には、イネ科植物を挙げることができるが、さらに具体的には、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、トウモロコシ、サトウキビ、ライグラス類、ケンタッキーブルーグラス、フェスク類、ベントグラス類、ノシバ、コウライシバ、およびバミューダグラスが挙げられる。また、本発明は、D−アロースにより植物のジベレリンシグナル経路を抑制する植物の生長抑制剤であり、例えば、イネばか苗病による徒長の抑制剤、イネの倒伏防止剤としての用途を挙げることができる。   The present invention relates to a plant gibberellin signal pathway inhibitor characterized by comprising D-allose as an active ingredient, and the mechanism of action of D-allose is through the HXK-dependent signal pathway and the gibberellin signal pathway. Suppress. More specifically, D-allose inhibits the pathway from the SLR1 protein system to the α-amylase in the gibberellin signal pathway via an HXK-dependent signal pathway. The plant to which the present invention can be applied is not limited in its kind as long as it has a gibberellin signal pathway. Examples of plants to which the present invention can be applied include monocotyledonous plants, specifically, grasses, and more specifically, rice, wheat, barley, rye, oats, corn. , Sugarcane, ryegrass, Kentucky bluegrass, fescues, bentgrass, wild buckwheat, red mulberry, and Bermudagrass. In addition, the present invention is a plant growth inhibitor that suppresses the gibberellin signaling pathway of plants by D-allose. For example, it can be used as an inhibitor of plant growth caused by rice sapling seedling disease, or as a rice lodging inhibitor. it can.

また、本発明は、上記のジベレリンシグナル抑制剤を植物体に施用することにより植物のジベレリンシグナル経路を抑制する方法に関するものであり、例えば、植物体の根、茎、葉、種子、芽、花の組織や細胞にD−アロースを施用することよりなる植物のジベレリンシグナル経路抑制方法である。D−アロースを植物に施用するにあたり、D−アロースは、0.01〜20重量%の溶液の形で施用するのが好ましい。また、D−アロースを農地や培地などに施用するには、例えば、0.1〜1000kg/haとするのが好ましい。また、本発明の植物のジベレリンシグナル経路抑制方法が適用できる植物の例としては上記の植物が挙げられる。また、本発明は、植物のジベレリンシグナル経路を抑制することによる植物の生長抑制方法に係るものである。本発明は、上記の例示した植物の中で、特にイネの生長抑制方法として、イネばか苗病に罹病したイネの徒長抑制や、イネの倒伏防止や、さらに、芝草の生長を抑制しその状態を適正に保つ方法である。   The present invention also relates to a method for suppressing the gibberellin signal pathway of a plant by applying the above-described gibberellin signal inhibitor to the plant body, for example, the root, stem, leaf, seed, bud, flower of the plant body. This is a method for inhibiting the gibberellin signal pathway in plants, which comprises applying D-allose to the tissues and cells. In applying D-allose to plants, D-allose is preferably applied in the form of a 0.01 to 20% by weight solution. Moreover, in order to apply D-allose to agricultural land, a culture medium, etc., it is preferable to set it as 0.1-1000 kg / ha, for example. Moreover, said plant is mentioned as an example of the plant which can apply the gibberellin signal pathway inhibition method of the plant of this invention. The present invention also relates to a method for inhibiting plant growth by inhibiting the plant gibberellin signal pathway. The present invention, among the plants exemplified above, particularly as a method for suppressing rice growth, suppresses the growth of rice afflicted with rice seedling disease, prevents the lodging of rice, and further suppresses the growth of turfgrass and its state It is a method to keep the proper.

本発明により次の効果が奏される。
D−アロースはジベレリン(GA)シグナル経路を抑制することを利用して、農業場面でGA作用を抑制したい場面での応用が期待され、GAシグナル経路を有する植物に対して生長抑制作用などを発揮することができる。例えば、イネばか苗病は、病原菌が分泌するGAにより徒長が引き起こされるが、この病原菌に感染した籾をD−アロースで処理することにより、徒長を抑えることが可能となった。
また、D−アロースを植物体に施用することにより生長しすぎによる倒伏の防止や芝草の伸長の防止が可能となる。特に、本発明の生長抑制剤をイネに施用することにより、感染したイネばか苗病などの病気の症状を軽減すること、徒長による倒伏を防止することが達成できることにより、米の収量の増加が期待される。
The following effects are exhibited by the present invention.
D-allose is expected to be applied in the scene where it is desired to suppress GA action in agriculture using the inhibition of gibberellin (GA) signal pathway, and exhibits growth inhibitory action on plants with GA signal pathway can do. For example, rice sapling is caused by GA secreted by the pathogen, but it became possible to suppress the pupa by treating cocoons infected with the pathogen with D-allose.
Moreover, by applying D-allose to a plant body, it becomes possible to prevent lodging due to overgrowth and to prevent the growth of turfgrass. In particular, by applying the growth inhibitor of the present invention to rice, it is possible to reduce the symptoms of diseases such as infected rice seedling disease and to prevent lodging by the chief, thereby increasing the yield of rice. Be expected.

本発明は、D−アロース(以下、単に「アロース」とも言う。)と各種植物ホルモン生産・ホルモンシグナル経路との関係について、各種生理作用を検定することにより、その作用メカニズムを解明した結果、D−アロースは植物ホルモン、特にジベレリンのシグナル伝達系を阻害することを見出したことに基づくものである。以下に、D−アロースの作用メカニズムについてその概要を説明する。   In the present invention, as a result of elucidating the mechanism of action by examining various physiological actions regarding the relationship between D-allose (hereinafter also simply referred to as “allose”) and various plant hormone production / hormone signal pathways, -Allose is based on the finding that it inhibits the signal transduction system of plant hormones, especially gibberellins. Below, the outline | summary is demonstrated about the action mechanism of D-allose.

ジベレリン(GA)は植物の発芽、伸長生長、花芽形成などを制御する植物ホルモンである。近年シロイヌナズナやイネの突然変異体を用いた研究からGA情報伝達に関わる因子がいくつか同定された。イネの生育を促進するホルモン系の研究は、GAの研究が進んでいる。例えば、イネのSLR1タンパクはGA情報伝達を負に制御する転写因子であり、上流からのGAシグナルに依存したSLR1タンパクの分解がGAの引き起こす様々な反応に必須であることが明らかとなっている。そこで、D−アロースを処理したイネで、ヘキソキナーゼ(HXK)の各種阻害剤を用いて、D−アロース作用のシグナル経路を検定した結果、D−アロースの作用はHXK依存性シグナル経路を経ることが明らかとなった。さらに、D−アロースの作用とGA経路との関係を検定した結果、D−アロースで処理することにより生長抑制がかかったイネに対して、GA(ジベレリンA)で同時処理しても生長抑制が回復しないことから、GA生産はD−アロースにより抑制されていないと考えられた。 Gibberellin (GA) is a plant hormone that controls plant germination, elongation growth, flower bud formation and the like. In recent years, several factors involved in GA signaling have been identified from studies using Arabidopsis and rice mutants. Research on hormone systems that promote rice growth is progressing in GA research. For example, rice SLR1 protein is a transcription factor that negatively regulates GA signal transduction, and it has been clarified that degradation of SLR1 protein depending on upstream GA signal is essential for various reactions caused by GA. . Then, as a result of testing the signal pathway of D-allose action in rice treated with D-allose using various inhibitors of hexokinase (HXK), the action of D-allose may go through an HXK-dependent signal pathway. It became clear. Furthermore, as a result of examining the relationship between the action of D-allose and the GA pathway, rice that was inhibited from growth by treatment with D-allose was also inhibited from growth even if treated simultaneously with GA (gibberellin A 3 ). Therefore, it was considered that GA production was not suppressed by D-allose.

そこで、GAシグナル系への影響を見るために、GAシグナル経路の活性指標酵素であるα-アミラーゼ活性を測定した結果、D−アロース処理による抑制が認められた。D−アロースの作用はGAの添加で相補されず、またα-アミラーゼ活性が阻害されることから、D−アロースはGAシグナル経路を阻害する可能性が示された。更に、SLR1タンパクとの関係について検定すると、GAは核のGAシグナル抑制タンパクSLR1の分解を促進し、SLR1タンパクの分解によりGAシグナル経路が活性化された。SLR1の欠損変異株であるslr1イネでD−アロースの作用を検定した結果、SLR1欠損により徒長形質を示すslr1株でも、D−アロースは強く抑制作用を示した。上記の結果と欠損変異株slr1を用いた試験結果から、D−アロースは、HXK依存性シグナル経路を経て、GAシグナル経路中のSLR1タンパク系からα-アミラーゼに至るまでの経路を阻害することが明らかとなった。本発明は、このような知見を根拠とするものである。   Therefore, in order to see the effect on the GA signal system, α-amylase activity, which is an activity indicator enzyme of the GA signal pathway, was measured, and as a result, suppression by D-allose treatment was observed. The action of D-allose is not complemented by the addition of GA, and α-amylase activity is inhibited, indicating that D-allose may inhibit the GA signal pathway. Furthermore, when assayed for the relationship with the SLR1 protein, GA promoted the degradation of the nuclear GA signal suppressor protein SLR1, and the GA signal pathway was activated by the degradation of the SLR1 protein. As a result of assaying the action of D-allose in slr1 rice, which is a mutant mutant of SLR1, D-allose exhibited a strong inhibitory action even in the slr1 strain showing a prominent trait due to SLR1 deficiency. From the above results and the test results using the defective mutant slr1, D-allose can inhibit the pathway from the SLR1 protein system to the α-amylase in the GA signal pathway via the HXK-dependent signal pathway. It became clear. The present invention is based on such knowledge.

次に、本発明について更に詳細に説明する。
本発明に係るD−アロースを有効成分とする植物のジベレリンシグナル経路抑制剤、及びその抑制方法は、ジベレリンシグナル経路を有している植物のいずれにも適用できるが、例えば、単子葉植物のイネ科植物が挙げられ、更に具体的には、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、トウモロコシ、サトウキビ、ライグラス類、ケンタッキーブルーグラス、フェスク類、ベントグラス類、ノシバ、コウライシバ、およびバミューダグラスを挙げることができる。
本発明においては、本発明が適用される植物の中で、イネを典型的な一例として以下に詳細に説明する。
Next, the present invention will be described in more detail.
The plant gibberellin signal pathway inhibitor and its inhibition method comprising D-allose according to the present invention as an active ingredient can be applied to any plant having a gibberellin signal pathway. More specifically, examples include rice, wheat, barley, rye, oats, corn, sugarcane, ryegrass, Kentucky bluegrass, fescue, bentgrass, wild buckwheat, damselfly, and Bermudagrass. it can.
In the present invention, among plants to which the present invention is applied, rice will be described in detail below as a typical example.

本発明で用いるD−アロースは、希少糖研究の中で特に各種生理活性を有することが判明してきた希少糖である。D−アロース(D−アロヘキソース)は、アルドース(アルドヘキソース)に分類されるアロースのD体であり、融点が178℃の六炭糖(C12)である。このD−アロースの製法としては、D−アロン酸ラクトンをナトリウムアマルガムで還元する方法による製法がある。また、シェイクワット・ホセイン・プイヤンなどによる「ジャーナル・オブ・ファーメンテーション・アンド・バイオエンジニアリング」第85巻、539ないし541頁(1993年)に記載されている、L−ラムノース・イソメラーゼを用いてD−プシコースから合成する製法が知られている。更に、近年では、特開2002−17392号公報に記載されているように、D−プシコースを含有する溶液にD−キシロース・イソメラーゼを作用させて、D−プシコースからD−アロースを生成する製法が提案されている。この文献に記載されている製法によれば、D−アロースの生産は、未反応のD−プシコースと共に、新たに生成したD−アロースを含有している酵素反応液として得られる。 D-allose used in the present invention is a rare sugar that has been found to have various physiological activities in the research on rare sugars. D-allose (D-allohexose) is a D-form of allose classified as aldose (aldohexose), and is a hexose having a melting point of 178 ° C. (C 6 H 12 O 6 ). As a production method of this D-allose, there is a production method by a method of reducing D-alonic acid lactone with sodium amalgam. Also, using L-rhamnose isomerase described in “Journal of Fermentation and Bioengineering” Vol. 85, pp. 539 to 541 (1993) by Sheikhwat Hossein Puiyang etc. A process for synthesizing from D-psicose is known. Furthermore, in recent years, as described in JP-A No. 2002-17392, there is a production method for producing D-allose from D-psicose by allowing D-xylose isomerase to act on a solution containing D-psicose. Proposed. According to the production method described in this document, production of D-allose is obtained as an enzyme reaction solution containing newly produced D-allose together with unreacted D-psicose.

D−アロースに変換可能な基質を酵素反応でD−アロースに変換する際に用いる酵素の種類は限定されないが、D−プシコースからD−アロースを生産することができる酵素「L-ラムノースイソメラーゼ」が好ましいものとして例示される。L-ラムノースイソメラーゼは、「ジャーナル・オブ・ファーメンテーション・アンド・バイオエンジニアリング(Journal of Fermentation and Bioengineering)」第85巻、539乃至541頁(1998年)で発表されている酵素である。L-ラムノースからL-ラムニュロースへの異性化反応ならびにL-ラムニュロースからL-ラムノースへの異性化を触媒する酵素であるL-ラムノースイソメラーゼは、D−アロースとD−プシコースの間の異性化にも作用するので、D−プシコースからD−アロースを生産することができる酵素である。   The type of enzyme used when converting a substrate that can be converted to D-allose into D-allose by an enzymatic reaction is not limited, but the enzyme “L-rhamnose isomerase” that can produce D-allose from D-psicose is available. Illustrated as preferred. L-rhamnose isomerase is an enzyme published in "Journal of Fermentation and Bioengineering", Vol. 85, 539-541 (1998). L-rhamnose isomerase, an enzyme that catalyzes the isomerization reaction from L-rhamnose to L-rhamnulose and the isomerization from L-rhamnulose to L-rhamnose, is also used for isomerization between D-allose and D-psicose. Since it acts, it is an enzyme that can produce D-allose from D-psicose.

D−アロースまたはD−アロースに他の糖類などと混合した本発明の植物病害防除剤は、そのまま使用してもかまわないが、通常は担体と混合して用いられ、必要に応じて界面活性剤、湿潤剤、固着剤、増粘剤、防腐剤、着色剤、安定剤などの製剤用補助剤を添加して、水和剤、フロアブル剤、顆粒水和剤、粉剤、乳剤などが一般的に知られた方法によって適宜製剤化して用いられる。   The plant disease control agent of the present invention mixed with D-allose or D-allose with other saccharides and the like may be used as it is, but is usually used by mixing with a carrier, and if necessary, a surfactant. , Wetting agents, sticking agents, thickeners, preservatives, coloring agents, stabilizers and other formulation aids are added, and wettable powders, flowable powders, granular wettable powders, powders, and emulsions are generally used. It is appropriately formulated by a known method and used.

本発明で用いられる担体は、処理すべき部位への有効成分であるアロースの到達を助け、また有効成分化合物の貯蔵、輸送、取扱いを容易にするために配合される合成または天然の無機または有機物質を意味し、通常農園芸用薬剤に使用されるものであれば固体または液体のいずれでも使用でき、特定の担体に限定されるものではない。例えば、固体担体としては、ベントナイト、モンモリロナイト、カオリナイト、珪藻土、白土、タルク、クレー、バーミキュライト、石膏、炭酸カルシウム、非晶質シリカ、硫安などの無機物質、大豆粉、木粉、鋸屑、小麦粉、乳糖、ショ糖、ぶどう糖などの植物性有機物質および尿素などが挙げられる。液体担体としては、トルエン、キシレン、クメンなどの芳香族炭化水素類およびナフテン類、n−パラフィン、iso−パラフィン、流動パラフィン、ケロシン、鉱油、ポリブテンなどのパラフィン系炭化水素類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジオキサン、ジエチレングリコールジメチルエーテルなどのエーテル類、エタノール、プロパノール、エチレングリコールなどのアルコール類、エチレンカーボネート、プロピレンカーボネート、ブチレンカーボネートなどのカーボネート類、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどの非プロトン性溶媒および水などが挙げられる。   The carrier used in the present invention is a synthetic or natural inorganic or organic compounded to help reach the active ingredient allose to the site to be treated and to facilitate the storage, transport and handling of the active ingredient compound. It means a substance, and any solid or liquid can be used as long as it is usually used for agricultural and horticultural medicines, and is not limited to a specific carrier. For example, as a solid carrier, bentonite, montmorillonite, kaolinite, diatomaceous earth, white clay, talc, clay, vermiculite, gypsum, calcium carbonate, amorphous silica, ammonium sulfate and other inorganic substances, soy flour, wood flour, sawdust, wheat flour, Examples include plant organic substances such as lactose, sucrose, and glucose, and urea. Liquid carriers include aromatic hydrocarbons such as toluene, xylene, cumene and naphthenes, paraffinic hydrocarbons such as n-paraffin, iso-paraffin, liquid paraffin, kerosene, mineral oil, polybutene, acetone, methyl ethyl ketone, etc. Ketones, ethers such as dioxane and diethylene glycol dimethyl ether, alcohols such as ethanol, propanol and ethylene glycol, carbonates such as ethylene carbonate, propylene carbonate and butylene carbonate, aprotic solvents such as dimethylformamide and dimethyl sulfoxide, and water Is mentioned.

更に、本発明のD−アロースを有効成分とするジベレリンシグナル経路抑制剤の効力を増強するために、製剤の剤型、処理方法などを考慮して目的に応じてそれぞれ単独に、または組み合わせて次のような補助剤を使用することもできる。補助剤として通常農薬製剤に乳化、分散、拡展、湿潤などの目的で使用される界面活性剤としては、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン樹脂酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸ジエステル、高級アルコールのポリオキシアルキレン付加物、ポリオキシエチレンエーテル、エステル方型シリコン、およびフッ素系界面活性剤などの非イオン性界面活性剤;アルキルサルフェート、ポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェート、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールイミン、アルキルホスフェート、トリポリ燐酸ナトリウムなどのアニオン性界面活性剤;アクリル酸とアクリロニトリル、アクリルアミドメチルプロパンスルホン酸から導かれるポリアニオン型高分子界面活性剤;アルキルトリメチルアンモニウムクロライド、メチルポリオキシエチレンアルキルアンモニウムクロライド、アルキルN−メチルピリジニウムブロマイド、モノメチル化アンモニウムクロライドなどのカチオン性界面活性剤;ジアルキルジアミノエチルベンタイン、アルキルジメチルベンジルベンタインなどの両性界面活性剤;などが挙げられるがこれらに限定されるものではない。   Furthermore, in order to enhance the efficacy of the gibberellin signal pathway inhibitor containing D-allose of the present invention as an active ingredient, each of them can be used alone or in combination depending on the purpose in consideration of the dosage form and treatment method of the preparation. Adjuvants such as can also be used. As surfactants usually used for the purpose of emulsifying, dispersing, spreading and wetting in agricultural chemical formulations, sorbitan fatty acid esters, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, sucrose fatty acid esters, polyoxyethylene fatty acid esters, Nonionic surfactants such as polyoxyethylene resin acid esters, polyoxyethylene fatty acid diesters, polyoxyalkylene adducts of higher alcohols, polyoxyethylene ethers, ester-type silicon, and fluorosurfactants; alkyl sulfates; Anionic surfactants such as polyoxyethylene alkyl ether sulfate, phosphatidylcholine, phosphatidylethanolimine, alkyl phosphate, sodium tripolyphosphate; acrylic acid and acrylonitrile, acrylic Polyanionic polymer surfactants derived from imidomethylpropanesulfonic acid; cationic surfactants such as alkyltrimethylammonium chloride, methylpolyoxyethylenealkylammonium chloride, alkyl N-methylpyridinium bromide, monomethylated ammonium chloride; dialkyldiamino Examples include, but are not limited to, amphoteric surfactants such as ethyl bentine and alkyl dimethyl benzyl bentine.

結合剤としては、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、CMCナトリウム、ベントナイトなどが挙げられる。崩壊剤としては、CMCナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、安定剤としては、ヒンダードフェノール系の酸化防止剤やベンゾトリアゾール系、ヒンダードアミン系の紫外線吸収剤などが挙げられる。pH調整剤としてリン酸、酢酸、水酸化ナトリウムなどが用いられ、防菌防黴のために1,2−ベンゾイソチアゾリン−3−オンなどの工業用殺菌剤、防菌防黴剤などが添加される。増粘剤としては、キサンタンガム、グアーガム、CMCナトリウム、アラビアゴム、ポリビニルアルコール、モンモリロナイトなどが使用される。消泡剤としてシリコーン系化合物、凍結防止剤としてプロピレングリコール、エチレングリコールなどを必要に応じて使用しても良い。しかし、これらの成分は以上に例示したものに限定されるものではない。   Examples of the binder include sodium alginate, polyvinyl alcohol, gum arabic, CMC sodium, bentonite and the like. Examples of the disintegrant include CMC sodium and croscarmellose sodium, and examples of the stabilizer include hindered phenol-based antioxidants, benzotriazole-based, and hindered amine-based ultraviolet absorbers. Phosphoric acid, acetic acid, sodium hydroxide, etc. are used as pH adjusters, and industrial fungicides such as 1,2-benzisothiazolin-3-one, antibacterial fungicides, etc. are added for antibacterial and fungicidal purposes. The As the thickener, xanthan gum, guar gum, CMC sodium, gum arabic, polyvinyl alcohol, montmorillonite and the like are used. A silicone compound as an antifoaming agent and propylene glycol, ethylene glycol or the like as an antifreezing agent may be used as necessary. However, these components are not limited to those exemplified above.

D−アロースの施用方法としては、例えば、植物体である茎、葉、花の組織や細胞への散布処理、苗箱処理、土壌表面への散布処理、土壌表面への散布処理後の土壌の混和、土壌中への注入処理、土壌中へ注入処理した土壌の混和、土壌潅注処理、潅注処理した土壌の混和、培養液や培地への混和、植物種子への吹き付け処理、植物種子への塗沫処理、植物種子への浸漬処理または植物種子への粉衣処理、花への吹き付けや浸漬処理などが挙げられるが、通常当業者が利用するどの様な施用方法にても十分な効力を発揮する。   Examples of the application method of D-allose include, for example, spray treatment of plant bodies such as stems, leaves, and flower tissues and cells, seedling box treatment, spray treatment to the soil surface, and soil treatment after the spray treatment to the soil surface. Mixing, injection into soil, mixing of soil injected into soil, soil irrigation, mixing of irrigated soil, mixing into culture solution or medium, spraying onto plant seeds, coating onto plant seeds Splash treatment, soaking treatment on plant seeds or dressing treatment on plant seeds, spraying or soaking treatment on flowers, etc., but usually shows sufficient efficacy in any application method used by those skilled in the art To do.

D−アロースの施用量は対象作物、対象病害、病害の発生程度、化合物の製剤の型、施用方法および各種環境条件などによって変動するが、散布または潅注する場合にはアロースの有効成分量をヘクタール当たり0.1〜1000kgが適当であり、望ましくはヘクタール当り1〜500kgである。溶液で散布する場合の施用濃度は0.01〜20重量%が望ましい。また、種子処理の場合の使用量は、種子1kg当たり0.01から100g、好ましくは0.1から50gである。D−アロースの施用は、適当な担体で、適当な濃度に希釈した後に行われる。例えば、D−アロースを植物種子に接触させる場合は、そのまま植物種子をD−アロースの溶液中に浸漬してもかまわないが、D−アロースの使用量は、これら例示された範囲に限定されるものではなく、製剤の形態や処理対象となる植物種子の種類により変わり得るものである。   The dose of D-allose varies depending on the target crop, target disease, degree of disease occurrence, type of compound preparation, application method and various environmental conditions, but when spraying or irrigating, the amount of active ingredient in allose is hectares. 0.1 to 1000 kg per hectare is suitable, preferably 1 to 500 kg per hectare. The application concentration when sprayed with a solution is preferably 0.01 to 20% by weight. The amount used for seed treatment is 0.01 to 100 g, preferably 0.1 to 50 g, per 1 kg of seed. The application of D-allose is performed after dilution to an appropriate concentration with an appropriate carrier. For example, when D-allose is brought into contact with plant seeds, the plant seeds may be immersed in the D-allose solution as they are, but the amount of D-allose used is limited to these exemplified ranges. It is not a thing but can change with the form of a formulation, and the kind of plant seed used as a process target.

本発明でいう植物とは、ジベレリンシグナル経路を有する植物をすべて含むものであり、単子葉植物が例示されるが、具体的には、イネ科植物が挙げられ、更に具体的には、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、トウモロコシ、サトウキビ、ライグラス類、ケンタッキーブルーグラス、フェスク類、ベントグラス類、ノシバ、コウライシバ、およびバミューダグラスを挙げることができる。また、本発明でいう「植物体」とは、植物個体を構成する全ての部位を総称するものであり、例えば、茎、葉、根、種子、花の組織、細胞、プロトプラストなどが挙げられる。   The plant as used in the present invention includes all plants having a gibberellin signal pathway, and examples thereof include monocotyledonous plants. Specific examples include gramineous plants, and more specifically, rice, Mention may be made of wheat, barley, rye, oats, corn, sugar cane, ryegrass, Kentucky bluegrass, fescue, bentgrass, turkeys, cucumbers, and Bermudagrass. In addition, the “plant” in the present invention is a general term for all parts constituting a plant individual, and examples thereof include stems, leaves, roots, seeds, floral tissues, cells, protoplasts, and the like.

次に、D−アロースが、植物ホルモン、特にジベレリンのシグナル伝達系を阻害することを、D−プシコースと対比しながら実験例に基づいて以下に詳細に説明する。
D−アロースをD−プシコースと14Cでラベルして実験することにより、何れもイネのプロトプラストに取り込まれることを明らかにした。そこで、取り込みのキネティクス解析と細胞内へ取り込まれた後の代謝に関する研究を進展させた。その結果、14C-D−プシコースと14C-D−アロースの取り込みは、それぞれ Vmax 313μg protein/hr, Km 19.3mM および Vmax 625μg protein/hr, Km 46.0mM であった、また14C-D−プシコースはイネ細胞内で急速に代謝されることはないが、14C-D−アロースはリン酸化されることを明らかにした。
Next, the fact that D-allose inhibits the signal transduction system of plant hormones, particularly gibberellins, will be described in detail below based on experimental examples in comparison with D-psicose.
By labeling D-allose with D-psicose and 14 C and conducting experiments, it was clarified that both were incorporated into rice protoplasts. Therefore, research on kinetic analysis of uptake and metabolism after uptake into cells was advanced. As a result, 14 C-D-psicose and 14 C-D-allose uptake, respectively Vmax 313μg protein / hr, Km 19.3mM and Vmax 625μg protein / hr, were Km 46.0 mm, also 14 C-D- Psicose was not metabolized rapidly in rice cells, but 14 CD-allose was found to be phosphorylated.

D−プシコースやD−アロースでイネを処理すると、核へのシグナル伝達により遺伝子発現挙動に大きな動きが見られ、さらに生長抑制作用が見られる。そこで、核へのグルコース・シグナル伝達経路として知られるヘキソキナーゼ(HXK)依存性経路やD−アロース非依存性経路と、これらの希少糖シグナルとの関係を明らかにした。HXK阻害剤であるD−Mannose, N-Acetyl-D−Glucosamine (D−GlucNAc), D−Mannoheptuloseを用いて、希少糖作用への影響を検討した結果、これらの阻害剤は何れもD−プシコースによるイネ生長抑制作用を阻害しなかったが、D−アロースによる作用はこれらの阻害剤により濃度依存的に阻害され、生長が促進された(図1)。   When rice is treated with D-psicose or D-allose, a large movement is observed in the gene expression behavior due to signal transmission to the nucleus, and further, a growth inhibitory action is observed. Therefore, the relationship between these rare sugar signals and a hexokinase (HXK) -dependent pathway or D-allose-independent pathway known as a glucose signaling pathway to the nucleus was clarified. As a result of investigating the effect on the action of rare sugars using D-Mannose, N-Acetyl-D-Glucosamine (D-GlucNAc) and D-Mannoheptulose which are HXK inhibitors, these inhibitors are all D-psicose. It did not inhibit the rice growth-inhibiting action by, but the action by D-allose was inhibited by these inhibitors in a concentration-dependent manner and the growth was promoted (FIG. 1).

また、D−アロースのみが細胞内に取り込まれた後にリン酸化されることから、D−プシコースの作用はHXK非依存性シグナル経路を経て伝達されるが、D−アロースの作用はHXK依存性シグナル経路を経ることが明らかとなった(図2)。シロイヌナズナなどにおけるホルモンシグナル伝達の制御は、HXK依存性または非依存性のシグナル経路で、大きく異なることが報告されている。これらのことから、D−アロースとD−プシコースの両希少糖は同様に生長抑制作用を示すが、生長抑制に至るまでの細胞内での作用機構は異なると考えられた。   In addition, since only D-allose is phosphorylated after being taken into the cell, the action of D-psicose is transmitted through an HXK-independent signal pathway, but the action of D-allose is an HXK-dependent signal. It became clear that it went through a route (Fig. 2). It has been reported that the regulation of hormone signaling in Arabidopsis and the like differs greatly in HXK-dependent or independent signal pathways. From these results, it was considered that both rare sugars of D-allose and D-psicose show growth inhibitory action, but the mechanism of action in the cells until the growth inhibition is different.

そこで、D−プシコースやD−アロースと、各種植物ホルモン生合成やホルモンシグナル経路との関係について比較検討を進めた。
希少糖の植物ホルモンに対する作用を検定するために、希少糖の処理法として行っていた根からの吸収法(播種5日目のイネ苗を希少糖水溶液に浮かべて、根から吸収させる方法)とともに、ジベレリン研究で一般に用いられるマイクロドロップ法を採用した。この方法でも、希少糖の特異性は再現され、D−プシコースとD−アロースに強い生育抑制作用が認められた(図3)。根からの吸収法の場合、抑制に0.5 mM水溶液を大量に用意する必要があったが、マイクロドロップ法では子葉鞘と第一葉の間に、100mMの水溶液を1 μlドロップすれば良く、少量かつ簡便に希少糖作用を検定することが可能になった。使用する希少糖の濃度は、マイクロドロップ法の方が高く100mM/Lであるが、1 μlのみ使うため、使用総量は本処理法で著しく抑えられるようになった。
Then, comparative examination was advanced about the relationship between D-psicose and D-allose, various plant hormone biosynthesis, and a hormone signal pathway.
In order to test the action of rare sugars on plant hormones, along with the absorption method from the roots used as a treatment method for rare sugars (the method of floating rice seedlings on the fifth day of sowing in a rare sugar aqueous solution and absorbing them from the roots) The microdrop method commonly used in gibberellin research was adopted. Even with this method, the specificity of the rare sugar was reproduced, and a strong growth inhibitory action was observed for D-psicose and D-allose (FIG. 3). In the case of the absorption method from the root, it was necessary to prepare a large amount of 0.5 mM aqueous solution for suppression, but in the microdrop method, it is sufficient to drop 1 μl of 100 mM aqueous solution between the cotyledon sheath and the first leaf. Thus, it has become possible to test the action of rare sugar in a small amount and with ease. The concentration of rare sugar used is 100 mM / L in the microdrop method, but since only 1 μl is used, the total amount used can be significantly reduced by this treatment method.

希少糖をドロップ処理して生長抑制がかかったイネにジベレリン(ジベレリン A3, GA)を同時処理すると、D−プシコース処理区では抑制の回復が起こるが、D−アロース処理区ではGAによる回復は弱いことが明らかになった(図4)。このことから、D−プシコースによる生育抑制には、GA生産の抑制(または活性型GAへの変換阻害・不活性型GAへの変換促進)またはGAと密接にリンクした他のホルモンシグナル系の関与が示唆された。一方、D−アロースでは高濃度(100mM)のGA添加区でも強い生育抑制が見られ、D−プシコースで見られたような抑制の回復は認められなかった(図4)。   When gibberellin (gibberellin A3, GA) is treated simultaneously with rice that has been subjected to growth inhibition by dropping rare sugars, the recovery of inhibition occurs in the D-psicose-treated group, but the recovery by GA is weak in the D-allose-treated group. It became clear (Fig. 4). Therefore, growth inhibition by D-psicose is related to inhibition of GA production (or inhibition of conversion to active GA, promotion of conversion to inactive GA) or other hormone signal systems closely linked to GA. Was suggested. On the other hand, with D-allose, strong growth inhibition was observed even in the GA-added group at a high concentration (100 mM), and recovery of inhibition as seen with D-psicose was not observed (FIG. 4).

現在、活性型GAは、核のSLR1タンパクの分解を誘起し、本タンパクの分解によりGAシグナル経路の活性化が起こることが解明されている。このGAシグナル活性化の指標としてα-アミラー活性の誘導測定がよく用いられる。そこで、無胚半種子におけるα-アミラーゼ活性に及ぼす希少糖の影響を検定したところ、D−プシコースはα-アミラーゼ活性誘導にまったく影響を及ぼさなかったが、D−アロースは抑制作用を示した。このように、D−アロース作用はGA添加で相補されず、またα-アミラーゼ活性が阻害されていることから、D−アロースはGAシグナル経路を阻害する可能性が示された。
このように、D−アロースは無胚半種子検定でα-アミラーゼの誘導抑制がみられ、GAシグナル経路の阻害が示唆されたが、D−プシコースにはこのような活性は認められなかった。
At present, it has been elucidated that activated GA induces degradation of nuclear SLR1 protein, and activation of the GA signal pathway occurs by degradation of this protein. As an indicator of GA signal activation, induction measurement of α-amyloid activity is often used. Then, when the influence of rare sugars on α-amylase activity in embryoless half seeds was assayed, D-psicose had no effect on α-amylase activity induction, but D-allose showed an inhibitory action. Thus, D-allose action is not complemented by GA addition, and α-amylase activity is inhibited, indicating that D-allose may inhibit the GA signal pathway.
Thus, D-allose showed inhibition of α-amylase induction in the embryoless half-seed assay, suggesting inhibition of the GA signal pathway, but D-psicose did not show such activity.

先にも述べたように、イネにおいては、活性型GAは核のGAシグナル抑制タンパクSLR1の分解を促進し、SLR1の分解によりGAシグナル経路が活性化されることが解明されている。そこでSLR1の欠損変異株であるslr1に、希少糖を作用させる試験を行った。その結果、SLR1欠損により徒長形質を示すslr1株においても、D−アロースは強く抑制作用を示し、D−プシコースも抑制を示した(図5)。上記の結果とslr1を用いた結果から、D−アロースは、HXK依存性シグナル経路を経て、GAシグナル経路中のSLR1タンパク分解系からα-アミラーゼに至るまでの経路を阻害することが明らかとなった(図6)。
一方、D−プシコースは、GA添加により、抑制作用が完全ではないが回復する(図4)。また、α-アミラーゼ誘導に影響を与えないことから、GA生産(活性型GAへの変換阻害・不活性型GAへの変換促進を含む)の抑制が起きていて、GAシグナル経路に阻害はないと考えた。しかしながら、D−プシコースもslr1変異体の徒長を抑制した(図5)。このことより、D−プシコースはGA生産やGAシグナル経路に直接作用するのではなく、GAにリンクした他のホルモンシグナル伝達経路に影響していると考察した。
As described above, it has been elucidated that, in rice, activated GA promotes the degradation of nuclear GA signal suppression protein SLR1, and the GA signal pathway is activated by the degradation of SLR1. Therefore, a test was conducted in which a rare sugar was allowed to act on slr1, which is a mutant mutant of SLR1. As a result, D-allose also showed a strong inhibitory action, and D-psicose also showed a suppression in the slr1 strain exhibiting a prominent trait due to SLR1 deficiency (FIG. 5). From the above results and the results using slr1, it is clear that D-allose inhibits the pathway from the SLR1 proteolytic system to the α-amylase in the GA signal pathway via the HXK-dependent signal pathway. (FIG. 6).
On the other hand, D-psicose recovers by GA addition although the inhibitory effect is not perfect (FIG. 4). In addition, since it does not affect the induction of α-amylase, suppression of GA production (including inhibition of conversion to active GA and promotion of conversion to inactive GA) occurs, and there is no inhibition in the GA signal pathway. I thought. However, D-psicose also suppressed the slr1 mutant length (FIG. 5). From this, it was considered that D-psicose does not directly act on GA production or GA signal pathway, but affects other hormone signaling pathways linked to GA.

次に、本発明の詳細を実施例に基づいて説明するが、本発明はこれらの実施例によってなんら限定されるものではない。   Next, although the detail of this invention is demonstrated based on an Example, this invention is not limited at all by these Examples.

(イネ室内試験)
本実施例では、D−アロースによるイネ生育阻害作用に対するジベレリンの添加効果を検証した。品種日本晴のイネの種子(籾)を、希少糖を10〜1000mg/LとGA3(ジベレリン)を0.1〜25mg/Lを含む寒天に植え付け、播種後7日目の草丈を調査した。その結果を図7に示す。D−アロースの生長抑制作用が、D−アロースが約10mg/L以上の濃度で明らかに認められた。D−アロースを約100mg/L以上含有する培地では、GA3の生長促進作用は完全に無効とされることが明らかになった。一方、D−プシコースではこのような高濃度の条件下でも共存するジベレリンの生長促進効果の影響が顕著に現れている。
(Rice laboratory test)
In this example, the effect of adding gibberellin on the rice growth inhibitory action of D-allose was examined. Rice seeds (rice cake) of the cultivar Nipponbare were planted in agar containing 10 to 1000 mg / L of rare sugar and 0.1 to 25 mg / L of GA3 (gibberellin), and the plant height on the seventh day after sowing was investigated. The result is shown in FIG. The growth-inhibiting action of D-allose was clearly observed at a concentration of about 10 mg / L or more of D-allose. It was revealed that the growth promoting action of GA3 was completely abolished in a medium containing about 100 mg / L or more of D-allose. On the other hand, in D-psicose, the effect of the effect of promoting the growth of gibberellin which coexists even under such high concentration conditions is noticeable.

(イネ育苗時の生育抑制試験)
本実施例では、D−アロースによる処理がイネの初期生育に及ぼす影響を明らかにする試験を行った。4×4cmのポットにイネ(品種:日本晴)を6粒植え、播種時と一週間後の二回、D−アロース水溶液5mLによる灌注処理を行った後、25日目に5個体を無作為に選んでその根、及び葉の生育状態を調査した。灌注処理のD−アロースの量は、4〜62.5kg/haとなるように調整し、D−アロースを用いないものを対照例とした。
(Growth inhibition test during rice seedling)
In this example, a test was conducted to clarify the effect of treatment with D-allose on the initial growth of rice. 6 seeds of rice (variety: Nipponbare) were planted in a 4 x 4 cm pot, and after 5 days of sowing and irrigation with 5 mL of D-allose aqueous solution, 5 individuals were randomly selected on the 25th day. The roots and leaves were examined for growth conditions. The amount of D-allose for the irrigation treatment was adjusted to 4 to 62.5 kg / ha, and a sample without D-allose was used as a control example.

試験結果を図8に示す。例えば、第4葉高を測定した結果、D−アロース無処理での葉高を100%とした場合に、4kg/haの施用で約89%、10kg/haの施用で約90%、25kg/haの施用で約82%、62.5kg/haの施用で約79%と生長が抑制された。一方、根の長さおよび重量を測定したところ、試験した施用量の範囲において、アロースを施用することにより根の長さは無処理の92〜119%の値が得られ、根の重量は113〜127%の値が得られた。   The test results are shown in FIG. For example, as a result of measuring the fourth leaf height, when the leaf height is 100% without D-allose treatment, about 89% is applied at 4 kg / ha, about 90% at 25 kg / ha is applied at 10 kg / ha. Growth was suppressed to about 82% by application of ha and about 79% by application of 62.5 kg / ha. On the other hand, when the length and weight of the roots were measured, in the range of application rates tested, by applying allose, root lengths of 92 to 119% with no treatment were obtained, and the root weight was 113. A value of ˜127% was obtained.

図8に見られるように、D−アロース処理を行うことにより、イネの第4葉高、第3葉高、第3鞘高は低くなり、また乾燥茎の重量は抑制された。しかしながら、D−アロース処理により、根長および根の乾燥重は、無処理の苗と比較して若干の増加または同などの値を示した。これにより、D−アロースによる生育抑制作用は、茎、葉の地上部のみに主に影響することが明らかとなった。また、D−アロースの施用量が多いほど生育抑制効果が増進することが明らかとなった。   As can be seen in FIG. 8, by performing the D-allose treatment, the fourth leaf height, third leaf height, and third sheath height of rice were lowered, and the weight of the dried stem was suppressed. However, with D-allose treatment, the root length and root dry weight showed a slight increase or the same value as compared to the untreated seedling. Thereby, it became clear that the growth inhibitory action by D-allose mainly affects only the above-ground part of a stem and a leaf. It was also revealed that the growth inhibitory effect was enhanced as the application amount of D-allose was increased.

(イネ圃場散布試験)
本実施例は、D−アロースを散布した時のイネに対する生長抑制作用を実験により示すものである。
イネ(品種:幸風)を浸種・催芽後、育苗箱で2週間育苗し、田植えを行った。田植え20日後の茎葉にD−アロースを5重量%の濃度となるように調製した液を10a当たり200Lになるような液量で散布した。散布10日後の生育状態を図9に示した。D−アロース散布区のイネの草丈は無処理区の約70%であり、顕著な生育抑制効果が認められた。
(Rice field spray test)
In this example, the growth inhibitory effect on rice when D-allose is sprayed is shown by experiments.
After soaking and germinating rice (variety: Kofu), the seedlings were grown in a seedling box for 2 weeks and planted in rice. A solution prepared to a concentration of 5% by weight of D-allose was sprayed on the stems and leaves 20 days after rice planting at a volume of 200 L per 10a. The growth state 10 days after spraying is shown in FIG. The plant height of rice in the D-allose sprayed area was about 70% of that in the untreated area, and a remarkable growth inhibitory effect was observed.

(イネ圃場田面水処理試験)
本実施例は、D−アロースを田面水に処理した時のイネに対する生長抑制作用を実験により示すものである。
イネ(品種:幸風)を浸種・催芽後、育苗箱で2週間育苗し、田植えを行った。田植え20日後の田面水にD−アロースを5重量%の濃度となるように調製した液を10aあたり32kgになるように処理した。散布10日後の生育状態を図10に示した。D−アロース散布区のイネの草丈は無処理区の約90%であり、顕著な生育抑制効果が認められた。
(Rice field water treatment test for rice)
In this example, the growth-inhibiting effect on rice when D-allose is treated with paddy water is shown by experiments.
After soaking and germinating rice (variety: Kofu), the seedlings were grown in a seedling box for 2 weeks and planted in rice. A solution prepared to have a concentration of 5% by weight of D-allose in the rice surface water 20 days after rice planting was treated to 32 kg per 10a. The growth state 10 days after spraying is shown in FIG. The plant height of rice in the D-allose sprayed area was about 90% of that in the untreated area, and a remarkable growth inhibitory effect was observed.

(イネばか苗病室内試験)
本実施例では、イネ個体への点滴処理によるイネばか苗病の防除効果について検討した。イネ(品種:短銀坊主)の健全籾とばか苗病菌保菌籾を播種した後、3日間生育させた苗を試験に供試した。イネの葉鞘に0.1〜5重量%のD−アロースを含む水溶液を1μL点滴処理した後、10日経過したイネの草丈を図11に示した。D−アロースで処理したイネの生長では、イネばか苗病菌が生産するジベレリンによる徒長が顕著に抑制された。
(In-house test for rice idiot)
In the present Example, the control effect of the rice seedling disease by the drip treatment to a rice individual was examined. After seeding rice (variety: Tan Ginbo) with healthy cocoons and idiot-bearing fungi, seedlings grown for 3 days were used for the test. FIG. 11 shows the plant height of rice after 10 days after instilling 1 μL of an aqueous solution containing 0.1 to 5% by weight of D-allose on the leaf sheath of rice. In the growth of rice treated with D-allose, the length of gibberellin produced by the rice sapling fungus was significantly suppressed.

(イネばか苗病育苗時の試験)
本実施例では、播種時潅注処理によるイネばか苗病の防除ついて検討した。土壌を詰めた5×5cmのポットに1、0.5、0.1重量%のD−アロース水溶液を10mL潅注処理した後、催芽させたイネばか苗病保菌籾(品種:短銀坊主)をポット当たり4g播種した。これを28℃で2日間、25℃で14日間生育させた後、草丈を調査し、発病個体の比率を求めた。D−アロース水溶液1、0.5、0.1重量%処理区および無処理区の発病率はそれぞれ、17.9、29.7、33.3、71.8%で、D−アロースを潅注処理することによりイネばか苗病菌が生産するジベレリンによるイネの徒長が抑制できた。
(Examination at the time of rice idiot seedling raising)
In this example, the control of rice seedling disease by irrigation treatment at the time of sowing was examined. After irrigating 10 mL of 1, 0.5, 0.1% by weight D-allose aqueous solution in a 5 x 5 cm pot filled with soil, germinate rice seedlings with rice seedling disease (variety: short silver shaved) 4g was seeded per pot. This was grown at 28 ° C. for 2 days and at 25 ° C. for 14 days, and then the plant height was examined to determine the proportion of diseased individuals. D-allose aqueous solution 1, 0.5, 0.1% by weight The treatment rates of the treated group and untreated group were 17.9, 29.7, 33.3, 71.8%, respectively, and D-allose was irrigated It was possible to suppress the rice chief due to gibberellin produced by the rice sapling fungus.

(イネ以外の植物での生育抑制試験)
本実施例は、イネ以外のイネ科の植物である、タイヌビエ、オオムギ、トウモロコシ、イタリアンライグラス、およびベントグラスを用いて、D−アロースによる生育阻害を示すものである。
ポットにタイヌビエ、オオムギ、トウモロコシ、イタリアンライグラス、ベントグラスを植え、発芽が揃った播種11日後に1重量%を最高濃度とし0.0156重量%を最小濃度とするD−アロース水溶液を植物体に散布し、散布25日後に地上部の生体重を測定して得た生育抑制の調査結果を図12に示す。
(Growth inhibition test in plants other than rice)
This example shows growth inhibition by D-allose using Taenobie, barley, corn, Italian ryegrass, and bentgrass, which are plants of the family Gramineae other than rice.
Pots were planted with cereals, barley, corn, Italian ryegrass and bentgrass, and 11 days after sowing, the plants were sprayed with a D-allose aqueous solution having a maximum concentration of 1% by weight and a minimum concentration of 0.0156% by weight. FIG. 12 shows the results of investigation on growth inhibition obtained by measuring the weight of the ground part 25 days after spraying.

散布25日後の地上重量を、無処理区を100%として比較した結果は、例えば0.5重量%のD−アロースの散布区では、タイヌビエでは約22%、オオムギでは約62%、トウモロコシでは約73%、イタリアンライグラスでは約42%、ベントグラスでは約28%の値が得られた。また、0.0625重量%のD−アロース散布でもタイヌビエ、ベントグラスでは十分な生育抑制効果があった。   The result of comparing the ground weight after 25 days of spraying with the untreated section as 100% is, for example, about 22% for Tainubier, about 62% for barley, about 62% for corn and about 0.5% for D-allose. A value of 73%, about 42% for Italian ryegrass, and about 28% for bentgrass were obtained. Further, even when 0.0625% by weight of D-allose was sprayed, Tainubier and bentgrass had a sufficient growth inhibitory effect.

本発明は、従来の農薬のような有機合成により有害元素を含むことなく、炭素、酸素、水素のみから成る単糖であるD−アロースを、様々な植物種の生長をいろいろな場面で制御する作用を有する薬剤として使用することにより、農業生産技術の向上に有用な新しい技術を提供するものである。D−アロースにより、植物のGAシグナル経路を抑制することが可能となったため、農業場面でGA作用を抑制したい場面での応用が期待され、GAシグナル経路を有する植物の全てに対して様々な制御が可能となった。例えば、イネばか苗病は、病原菌が分泌するGAにより徒長が引き起こされるが、D−アロースを汚染籾に処理することにより、徒長が抑えられる。また、D−アロースを植物体に施用することにより、生長過多による倒伏防止や芝草に施用することにより伸長防止が可能となる。特に、本発明の生長抑制剤をイネに施用することにより、例えば、感染した病気の症状を軽減することや、徒長による倒伏を防止することが可能となり、米の収量の増加が期待される。
本発明は、こうしたD−アロースの特性を利用して、植物の生長などの制御を可能とするものであり、農業生産技術分野において有用である。
The present invention controls D-allose, which is a monosaccharide consisting only of carbon, oxygen, and hydrogen, in various scenes, without containing harmful elements by organic synthesis like conventional agricultural chemicals. By using it as a drug having an action, it provides a new technology useful for improving agricultural production technology. Since D-allose can suppress the GA signal pathway of plants, it is expected to be applied in scenes where it is desired to suppress GA action in agriculture, and various controls are performed on all plants having the GA signal pathway. Became possible. For example, rice sapling seedling disease is caused by GA secreted by pathogenic bacteria, but by treating D-allose with contaminated rice cake, the pupa can be suppressed. Moreover, by applying D-allose to a plant body, it becomes possible to prevent elongation due to excessive growth and to prevent elongation by applying it to turfgrass. In particular, by applying the growth inhibitor of the present invention to rice, for example, it is possible to reduce symptoms of infectious diseases and prevent lodging by a chief, and an increase in rice yield is expected.
The present invention makes it possible to control the growth of plants using the characteristics of D-allose and is useful in the field of agricultural production technology.

ヘキソキナーゼ(HXK)阻害剤の、希少糖を施用した植物の生長作用に対する影響を示す図面である。It is drawing which shows the influence with respect to the growth effect | action of the plant which applied rare sugar of the hexokinase (HXK) inhibitor. D−プシコースとD−アロースの植物に対する作用の相違を示す概略図である。It is the schematic which shows the difference in the effect | action with respect to a plant of D-psicose and D-allose. マイクロドロップ法によりD−アロースなどの希少糖をイネに施用した場合のイネの生長への影響を示す図面である。It is drawing which shows the influence on the growth of rice at the time of applying rare sugars, such as D-allose, to a rice by microdrop method. ジベレリンの添加が、D−プシコースの作用を相補し、D−アロース作用には影響を及ぼさないことを示す図面である。It is a figure which shows that addition of gibberellin complements the action of D-psicose and does not affect the action of D-allose. SLR1欠損変異株slr1の徒長形質は、D−アロース処理で強く抑制されるが、D−プシコース処理でも抑制されることを示す図面に代える写真である。This is a photograph in place of a drawing showing that the progeny of the SLR1-deficient mutant slr1 is strongly suppressed by D-allose treatment, but is also suppressed by D-psicose treatment. D−アロースは、HXK依存性シグナル経路を経てGAシグナル経路のDELLAタンパク系からα-アミラーゼまでの経路に影響を及ぼすことを示す概略図である。FIG. 4 is a schematic diagram showing that D-allose affects the pathway from the DELLA protein system of the GA signal pathway to α-amylase via the HXK-dependent signal pathway. D−アロースおよびD−プシコースによるイネの生育阻害作用に対するジベレリンの添加の影響を示す図面である。It is drawing which shows the influence of the addition of gibberellin with respect to the growth inhibitory effect of rice by D-allose and D-psicose. D−アロースを0〜62.5kg/haの割合で施用したイネの根および葉の生長を比較した図面である。It is the figure which compared the growth of the root and leaf of a rice which applied D-allose in the ratio of 0-62.5 kg / ha. 5%のD−アロースを散布した後、10日経過した時点でのイネの生育抑制を示す図面に代える写真である。It is the photograph replaced with drawing which shows the growth suppression of rice when 10 days passed after spraying 5% D-allose. D−アロースを32kg/10aの量で田面水に処理した後、10日経過した時点でのイネの生育抑制を示す図面に代える写真である。It is the photograph replaced with drawing which shows the growth suppression of the rice at the time of having passed 10 days after processing D-allose in the amount of 32 kg / 10a to Ta surface water. イネばか苗病保菌籾を、D−アロース処理した後の生育状態を示す図面に代える写真である。It is a photograph replaced with drawing which shows the growth state after carrying out D-allose treatment of the rice sapling seedling blight. 5種類のイネ科植物にD−アロースを散布した後、25日経過した時点で測定した生育抑制を示す図面である。It is drawing which shows the growth suppression measured when 25 days passed, after spraying D-allose to five kinds of gramineous plants.

Claims (13)

D−アロースを有効成分とすることを特徴とする植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   A plant gibberellin signal pathway inhibitor characterized by comprising D-allose as an active ingredient. HXK依存性シグナル経路を経て、ジベレリンシグナル経路を抑制する請求項1に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   The plant gibberellin signal pathway inhibitor according to claim 1, which inhibits the gibberellin signal pathway via an HXK-dependent signal pathway. HXK依存性シグナル経路を経て、ジベレリンシグナル経路中のSLR1蛋白系からα-アミラーゼに至までの経路を阻害する請求項1または2に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   3. The plant gibberellin signal pathway inhibitor according to claim 1 or 2, which inhibits the pathway from the SLR1 protein system to the α-amylase in the gibberellin signal pathway through the HXK-dependent signal pathway. 上記植物が、ジベレリンシグナル経路を有する植物である請求項1から3のいずれか一項に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   The plant gibberellin signal pathway inhibitor according to any one of claims 1 to 3, wherein the plant is a plant having a gibberellin signal pathway. 上記植物が、単子葉植物である請求項1から4のいずれか一項に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   The plant gibberellin signal pathway inhibitor according to any one of claims 1 to 4, wherein the plant is a monocotyledonous plant. 上記植物が、イネ科植物である請求項1から5のいずれかに記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   The plant gibberellin signal pathway inhibitor according to any one of claims 1 to 5, wherein the plant is a gramineous plant. 上記植物が、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、トウモロコシ、サトウキビ、ライグラス類、ケンタッキーブルーグラス、フェスク類、ベントグラス類、ノシバ、コウライシバ、およびバミューダグラスからなる群から選ばれた植物である請求項5または6に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制剤。   The plant is a plant selected from the group consisting of rice, wheat, barley, rye, oats, corn, sugarcane, ryegrass, kentucky bluegrass, fescue, bentgrass, wild buckwheat, peony, and bermudagrass. 5. The plant gibberellin signal pathway inhibitor according to 5 or 6. 請求項1から7のいずれか一項に記載のジベレリンシグナル抑制剤を植物体に施用することを特徴とする植物のジベレリンシグナル経路抑制方法。   A method for inhibiting a gibberellin signal pathway in a plant, comprising applying the gibberellin signal inhibitor according to any one of claims 1 to 7 to a plant body. 植物体が、根、茎、葉、種子、芽、花の組織、または細胞である請求項に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制方法。 The method for inhibiting a gibberellin signal pathway of a plant according to claim 8 , wherein the plant is a root, stem, leaf, seed, bud, flower tissue, or cell. D−アロースが、0.01〜20重量%の溶液である請求項またはに記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制方法。 The method for inhibiting a gibberellin signal pathway in plants according to claim 8 or 9 , wherein D-allose is a 0.01 to 20% by weight solution. D−アロースを、0.1〜1000kg/ha施用する請求項から10のいずれか一項に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制方法。 The method for inhibiting a gibberellin signal pathway of a plant according to any one of claims 8 to 10 , wherein D-allose is applied in an amount of 0.1 to 1000 kg / ha. 上記植物が、単子葉植物である請求項から11のいずれか一項に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制方法。 The said plant is a monocotyledonous plant, The gibberellin signal pathway suppression method of the plant as described in any one of Claim 8 to 11 . 上記植物が、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、オートムギ、トウモロコシ、サトウキビ、ライグラス類、ケンタッキーブルーグラス、フェスク類、ベントグラス類、ノシバ、コウライシバ、およびバミューダグラスからなる群から選ばれた請求項から2のいずれか一項に記載の植物のジベレリンシグナル経路抑制方法。 The plant is rice, wheat, barley, rye, oats, corn, sugarcane, ryegrass, Kentucky bluegrass, fescue, bentgrass acids, Zoysia japonica, Zoysia tenuifolia, and from the claims 8 selected from the group consisting of Bermudagrass 1 3. The method for inhibiting a gibberellin signal pathway in a plant according to any one of 2 above.
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