JP4825645B2 - DNA extraction method - Google Patents

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Description

本発明は、複数のウェルを備えるウェルプレートを用いて実施されるＤＮＡの抽出方法に関する。   The present invention relates to a DNA extraction method performed using a well plate having a plurality of wells.

近年、種々の目的で生物からＤＡＮを抽出することが行われている。そのときに、検体の数が多数であれば、ウェルプレートが使用される。ウェルプレートを用いて行うＤＮＡ抽出技術は、多数提案されている（例えば、特許文献１参照。）。
特開２００２−３６９６８２公報（図１） In recent years, DAN is extracted from living organisms for various purposes. At that time, if the number of specimens is large, a well plate is used. Many DNA extraction techniques performed using a well plate have been proposed (see, for example, Patent Document 1).
Japanese Patent Laid-Open No. 2002-369682 (FIG. 1)

特許文献１を次図に基づいて説明する。
図６は従来のウェルプレートの斜視図であり、ウェルプレート１００は、矩形の基板１０１に、８個×１２列＝９６個のウェル１０２を備えた試験具である。これで、９２個の検体を処理することができる。 Patent document 1 is demonstrated based on the following figure.
FIG. 6 is a perspective view of a conventional well plate, and the well plate 100 is a test device including a rectangular substrate 101 and 8 × 12 rows = 96 wells 102. Thus, 92 specimens can be processed.

特許文献１の段落番号［００３８］第５行〜第６行に「２）楊枝で各ウェルに大腸菌が形成したコロニーをピックし殖菌する。」との記載がある。検体（大腸菌）が単一種類であれば、取扱いに注意を払う必要は殆ど無いが、検体が複数の種類で構成される場合には次に述べるような問題が発生する。   In paragraph No. [0038] lines 5 to 6 of Patent Document 1, there is a description “2) Pick colonies formed by Escherichia coli in each well with a toothpick and propagate them”. If the sample (E. coli) is of a single type, there is almost no need to pay attention to handling, but if the sample is composed of a plurality of types, the following problems will occur.

図７は植物の先端部を処理するときの説明図であり、Ａ種の植物１０３の先端部１０４と、Ｂ種の植物１０５の先端部１０６と、Ｃ種の植物１０７の先端部１０８とを処理対象とする。そして、先端部１０４を植物１０３から切断し、ウェル１１１に入れる。同様に、先端部１０６を植物１０５から切断し、ウェル１１２に入れ、先端部１０８を植物１０７から切断し、ウェル１１３に入れる。そして、ウェル１１１〜１１３へリン酸バッファなどの試薬を入れ、シェイクしてＤＮＡを分離し、抽出する。   FIG. 7 is an explanatory diagram when processing the front end portion of the plant. The front end portion 104 of the A type plant 103, the front end portion 106 of the B type plant 105, and the front end portion 108 of the C type plant 107. It becomes a processing target. Then, the tip 104 is cut from the plant 103 and placed in the well 111. Similarly, the tip 106 is cut from the plant 105 and placed in the well 112, and the tip 108 is cut from the plant 107 and placed in the well 113. Then, a reagent such as a phosphate buffer is put into the wells 111 to 113 and shaken to separate and extract the DNA.

図７での作業は、人手で行う。人為的ミスはある確率で発生するため、先端部１０４をウェル１１２やウェル１１３に入れることはあり得る。仮に、投入ミスであっても、事後にその事実を発見することは困難である。そこで、このような人為的ミスの発生を防ぐ方法が求められる。   The work in FIG. 7 is performed manually. Since a human error occurs with a certain probability, it is possible to put the tip 104 into the well 112 or the well 113. Even if it is a mistake, it is difficult to discover the fact after the fact. Therefore, a method for preventing the occurrence of such an artificial mistake is required.

本発明は、ウェルへの投入ミスを解消することができるＤＮＡの抽出方法を提供することを課題とする。   An object of the present invention is to provide a DNA extraction method that can eliminate errors in loading into wells.

請求項１に係る発明は、複数のウェルを備える第１のウェルプレートと、この第１のウェルプレートと同形であるが、ウェルの底が抜けている第２のウェルプレートと、この第２のウェルプレートの下面に沿って摺動させるカッタープレートと、前記第２のウェルプレートの上下面を塞ぐ第１蓋及び第２の蓋とを準備するステップと、
前記第１のウェルプレートのウェルに各々種を入れて、これらの種を発芽、成長させるステップと、
前記第１のウェルプレートに前記第２のウェルプレートを、上下のウェルが連通するようにして載せ、成長した植物の先端部が第２のウェルプレートまで延びたら、第１のウェルプレートと第２のウェルプレートとの間に前記カッタープレートを挿入して、植物の先端部をカッタープレートの上に載せるステップと、
前記第２のウェルプレートの上面に前記第１の蓋を被せてひっくり返し、前記第１の蓋が底板になった状態で第２のウェルプレートのウェルに試薬を入れるステップと、
前記第２のウェルプレートの上面を第２の蓋で塞ぎ、第１の蓋及び第２の蓋で上下面が塞がれた第２のウェルプレートをシェイクすることで、試薬中に植物のＤＮＡを抽出するステップと、からなることを特徴とするＤＮＡの抽出方法である。 The invention according to claim 1 includes a first well plate having a plurality of wells, a second well plate having the same shape as the first well plate, but with the well bottom omitted, and the second well plate Preparing a cutter plate that slides along the lower surface of the well plate, and a first lid and a second lid that block the upper and lower surfaces of the second well plate;
Placing seeds into each well of the first well plate to germinate and grow these seeds;
When the second well plate is placed on the first well plate so that the upper and lower wells communicate with each other, and the tip of the grown plant extends to the second well plate, the first well plate and the second well plate Inserting the cutter plate between the well plate and placing the tip of the plant on the cutter plate;
Putting the first lid on the top surface of the second well plate and turning it over, and putting the reagent into the wells of the second well plate with the first lid being a bottom plate;
The upper surface of the second well plate is closed with a second lid, and the second well plate whose upper and lower surfaces are closed with the first lid and the second lid is shaken, whereby plant DNA is contained in the reagent. A method for extracting DNA, comprising the steps of:

請求項２に係る発明は、試薬を入れるステップで、植物の撹拌、粉砕を促すためにビーズを、試薬と共にウェルに入れることを特徴とする。   The invention according to claim 2 is characterized in that in the step of adding a reagent, beads are placed in a well together with the reagent in order to promote stirring and crushing of the plant.

請求項３に係る発明は、試薬を入れるステップで、第２のウェルプレートのウェルに対応する孔が設けられている多孔プレートと、この多孔プレートの下面を塞ぐシャッタプレートとからなるビーズプレートを用い、孔に１個ずつ前記ビーズを入れ、ビーズプレートを第２のウェルプレートに載せ、シャッタプレートを引き抜くことで、第２のウェルプレートのウェルにビーズを入れることを特徴とする。   The invention according to claim 3 uses a bead plate comprising a perforated plate provided with holes corresponding to the wells of the second well plate and a shutter plate for closing the lower surface of the perforated plate in the step of adding the reagent. The beads are put into the wells of the second well plate by putting the beads one by one in the hole, placing the bead plate on the second well plate, and pulling out the shutter plate.

請求項１に係る発明では、第１のウェルプレートに種を播き、発芽育成させる。第２のウェルプレートを重ね、植物の先端部が第２のウェルプレートへ進入したら、切断する。植物の先端部は第２のウェルプレートに移る。この第２のウェルプレートに試薬を入れてＤＮＡの抽出を行う。第１のウェルプレートと第２のウェルプレートは同形又はほぼ同形である。
第１のウェルプレートの番地と同一である第２のウェルセルプレートのウェルへ植物の先端部が移るため、所定の番地のウェルへ先端部を確実に入れることができる。すなわち、ウェルへの投入ミスを未然に防止することができる。 In the invention according to claim 1, seeds are sown and germinated and grown in the first well plate. The second well plate is overlaid and cut when the tip of the plant enters the second well plate. The tip of the plant is transferred to the second well plate. A reagent is put into the second well plate to extract DNA. The first well plate and the second well plate have the same shape or substantially the same shape.
Since the tip of the plant is transferred to the well of the second well cell plate which is the same as the address of the first well plate, the tip can be reliably put into the well of the predetermined address. That is, it is possible to prevent a mistake in inputting into the well.

請求項２に係る発明では、ウェルへ植物の先端部及び試薬と共にビーズを投入する。そして、シェークする。ビーズが植物の先端部の分離、細分化を促すため、短い時間でＤＮＡを抽出することができる。   In the invention which concerns on Claim 2, a bead is thrown into a well with the front-end | tip part and reagent of a plant. Then shake. Since the beads promote separation and fragmentation of the tip of the plant, DNA can be extracted in a short time.

請求項３に係る発明では、ビーズプレートを用いることで、一度に多数個のビーズをウェルへ投入することができ、ビーズ投入に要する時間を大幅に短縮することができる。   In the invention according to claim 3, by using the bead plate, a large number of beads can be put into the well at a time, and the time required for putting the beads can be greatly shortened.

本発明を実施するための最良の形態を添付図に基づいて以下に説明する。なお、図面は符号の向きに見るものとする。
図１は本発明に係るウェルプレートの斜視図、図２は本発明に係るウェルプレートの断面図、図３は本発明に係るウェルプレートの底面図である。 The best mode for carrying out the present invention will be described below with reference to the accompanying drawings. The drawings are viewed in the direction of the reference numerals.
1 is a perspective view of a well plate according to the present invention, FIG. 2 is a cross-sectional view of the well plate according to the present invention, and FIG. 3 is a bottom view of the well plate according to the present invention.

第１のウェルプレート１１及び第２のウェルプレート１２は、図２に示されるように、筐体１３に上下が開放された筒状の複数のウェル１４を備え、底１５に、対向する一対の溝１６、１６を備えた樹脂成形品である。樹脂は、ウェル１４内の植物に外部から光を当てることができるように透明樹脂を使用する。   As shown in FIG. 2, the first well plate 11 and the second well plate 12 include a plurality of cylindrical wells 14 that are open at the top and bottom of the housing 13, and a pair of opposing wells on the bottom 15. This is a resin molded product provided with grooves 16 and 16. As the resin, a transparent resin is used so that the plant in the well 14 can be exposed to light from the outside.

なお、第１のウェルプレート１１は、ウェル１４に底があってもよい。しかし、実験具の種類を増やしたくないので、本実施例では、第１のウェルプレート１１及び第２のウェルプレート１２は同一品とする。   The first well plate 11 may have a bottom in the well 14. However, since it is not desired to increase the types of experimental tools, in this embodiment, the first well plate 11 and the second well plate 12 are the same product.

一対の溝１６、１６へは、図３に示されるように、メッシュ板１８、カッタープレート１９又は第１，第２の蓋２１、２２を交互に差し込むことができる。
そして、立方体形状の筐体１３は、図１に示されるように、上面２３に「１」〜「１２」及び「Ａ」〜「Ｈ」の文字を備えている。そこで、ウェル１４には、例えば（１−Ａ）番地のごとく、個々に番地を付すことにする。 As shown in FIG. 3, the mesh plate 18, the cutter plate 19, or the first and second lids 21 and 22 can be alternately inserted into the pair of grooves 16 and 16.
As shown in FIG. 1, the cubic housing 13 includes characters “1” to “12” and “A” to “H” on the upper surface 23. Therefore, the wells 14 are individually assigned addresses, for example, (1-A).

次に、ビーズプレート２５について、その構造例を説明する。
図４は本発明に係るビーズプレートの斜視図であり、ビーズプレート２５は、多数個（この例では９６個）のビーズ２６を一度の操作でウェル１４へ入れることができる治具であり、第２のウェルプレート１２のウェルに対応する孔２７が設けられている多孔プレート２８と、この多孔プレート２８の下面を塞ぐシャッタプレート２９とからなる。
孔２７に１個ずつビーズ２６を入れ、ビーズプレート２５を第２のウェルプレート１２に載せ、シャッタプレート２９を引き抜くことで、ウェルにビーズ２６を入れることができる。 Next, a structural example of the bead plate 25 will be described.
FIG. 4 is a perspective view of a bead plate according to the present invention. The bead plate 25 is a jig that can insert a large number (96 in this example) of beads 26 into the well 14 in one operation. It comprises a perforated plate 28 provided with holes 27 corresponding to the wells of the second well plate 12 and a shutter plate 29 for closing the lower surface of the perforated plate 28.
One bead 26 is put in the hole 27 one by one, the bead plate 25 is placed on the second well plate 12, and the shutter plate 29 is pulled out, whereby the bead 26 can be put in the well.

以上に説明した第１，第２のウェルプレート１１、１２及びビーズプレート２５を用いて実施するＤＮＡ抽出作業を次に説明する。
図５は本発明に係るＤＮＡの抽出方法を説明するフロー図である。このフローに入る当たり、第１のウェルプレート１１（図１）と、この第１のウェルプレート１１と同形であるが、ウェルの底が抜けている第２のウェルプレート１２（図２）と、この第２のウェルプレート１２の下面に沿って摺動させるカッタープレート１９（図３）と、第２のウェルプレート１２の上下面を塞ぐ第１の蓋２１及び第２の蓋２２（図３）と、ビーズプレート２５（図４）とを準備する。 Next, the DNA extraction operation performed using the first and second well plates 11 and 12 and the bead plate 25 described above will be described.
FIG. 5 is a flowchart for explaining the DNA extraction method according to the present invention. Upon entering this flow, a first well plate 11 (FIG. 1), and a second well plate 12 (FIG. 2) that has the same shape as the first well plate 11, but the bottom of the well is missing, The cutter plate 19 (FIG. 3) that slides along the lower surface of the second well plate 12, and the first lid 21 and the second lid 22 (FIG. 3) that block the upper and lower surfaces of the second well plate 12. A bead plate 25 (FIG. 4) is prepared.

次に、図５（ａ）に示されるように、第１のウェルプレート１１の底をメッシュ板１８で塞ぐ。メッシュ板１８のメッシュ（網目）は、水や空気は通すが、種３０Ａ、３０Ｂ（位置を特定するために，Ａ，Ｂなどのアルファベットを添える。以下同様）は通さない大きさとする。そして、ウェル１４Ａ、１４Ｂに種３０Ａ、３０Ｂを入れる。   Next, as shown in FIG. 5A, the bottom of the first well plate 11 is closed with a mesh plate 18. The mesh (mesh) of the mesh plate 18 allows water and air to pass therethrough, but does not allow seeds 30A and 30B (with alphabets such as A and B attached to specify the position; the same applies hereinafter). And seed 30A, 30B is put into well 14A, 14B.

次に、（ｂ）に示されるように、第１のウェルプレート１１に第２のウェルプレート１２を重ね、第１のウェルプレート１１を、水槽３１の水３２に浸す。この水３２は養分が溶かし込んであり、温度調節が施された、管理された水である。そして、ランプ３３で管理された照度の光線を種３０Ａ、３０Ｂに加える。これで、いわゆる水耕栽培が開始される。   Next, as shown in (b), the second well plate 12 is overlaid on the first well plate 11, and the first well plate 11 is immersed in the water 32 of the water tank 31. This water 32 is controlled water in which nutrients are dissolved and the temperature is adjusted. Then, the illuminance light beam managed by the lamp 33 is added to the seeds 30A and 30B. Thus, so-called hydroponics is started.

（ｃ）に示されるように、種３０Ａ、３０Ｂが発芽し、成長し、植物３４Ａの先端部３５Ａ及び植物３４Ｂの先端部３５Ｂが第２のウェルプレート１２へ進入したら、第１のウェルプレート１１と第２のウェルプレート１２との間にカッタープレート１９を挿入する。   As shown in (c), when the seeds 30A and 30B germinate and grow, and the tip 35A of the plant 34A and the tip 35B of the plant 34B enter the second well plate 12, the first well plate 11 A cutter plate 19 is inserted between the first well plate 12 and the second well plate 12.

（ｄ）に示されるように、先端部３５Ａ、３５Ｂはカッタープレート１９の上に残る。すなわち、先端部３５Ａ、３５Ｂは第２のウェルプレート１２のウェル１４Ａ、１４Ｂに残される。この状態で、第２のウェルプレート１２の上面に第１の蓋２１を被せる。そして、（ｅ）に示されるように、第２のウェルプレート１２をひっくり返す。この結果、ウェル１４Ａが図右、ウェル１４Ｂが図左になる。次に、カッタープレート１９を除く。   As shown in (d), the tip portions 35 </ b> A and 35 </ b> B remain on the cutter plate 19. That is, the tip portions 35A and 35B are left in the wells 14A and 14B of the second well plate 12. In this state, the first lid 21 is placed on the upper surface of the second well plate 12. Then, as shown in (e), the second well plate 12 is turned over. As a result, the well 14A is on the right and the well 14B is on the left. Next, the cutter plate 19 is removed.

次に、（ｆ）に示されるように、第１の蓋２１で底を形成した第２のウェルプレート１２のウェル１４Ａ、１４Ｂへリン酸バッファなどの試薬３６を注ぐとともに、ビーズ２６、２６を入れる。ビーズ２６、２６は図４で説明したビーズプレート２５を用いて一度に入れる。   Next, as shown in (f), a reagent 36 such as a phosphate buffer is poured into the wells 14A and 14B of the second well plate 12 whose bottom is formed by the first lid 21, and the beads 26 and 26 are added. Put in. The beads 26 and 26 are put at once using the bead plate 25 described in FIG.

次に、（ｇ）に示されるように、第２のウェルプレート１２の溝１６、１６に第２の蓋２２をセットする。これで、第２のウェルプレート１２は第１、第２の蓋２１、２２で上下面が蜜に塞がれたことになる。この状態で、第２のウェルプレート１２をシェイクする。このシェイクにより、植物の先端部は試薬中に分離する。   Next, as shown in (g), the second lid 22 is set in the grooves 16 and 16 of the second well plate 12. As a result, the upper and lower surfaces of the second well plate 12 are closed with nectar by the first and second lids 21 and 22. In this state, the second well plate 12 is shaken. This shake separates the tip of the plant into the reagent.

所定のシェイクが終了すると、（ｈ）に示されるように、ＤＮＡ用液３７Ａ、３７Ｂが得られる。そして、第２の蓋２２が下になるようにする。第２のウェルプレート１２には（ａ）に示される第１のウェルプレート１１と同一の番地が付されている。
この結果、第２のウェルプレート１２のウェル１４Ａには、（ａ）での種３０Ａから得られたＤＮＡ用液３７Ａが存在し、第２のウェルプレート１２のウェル１４Ｂには、（ａ）での種３０Ｂから得られたＤＮＡ用液３７Ｂが存在する。
すなわち、本発明によれば、植物の先端部３５Ａ、３５Ｂ（（ｃ）参照）を、誤った番地のウェルへ入れる心配は皆無である。 When the predetermined shake is completed, DNA solutions 37A and 37B are obtained as shown in (h). Then, the second lid 22 is placed below. The second well plate 12 is assigned the same address as the first well plate 11 shown in FIG.
As a result, in the well 14A of the second well plate 12, the DNA solution 37A obtained from the seed 30A in (a) is present, and in the well 14B of the second well plate 12 in (a). There is a DNA solution 37B obtained from the seed 30B.
That is, according to the present invention, there is no worry that the tip portions 35A and 35B (see (c)) of the plant are put into the wells of the wrong address.

一方、第１のウェルプレート１１は、（Ｄ）に示されるように、植物３４Ａ、３４Ｂが残っている。そこで、新しい第２のウェルプレート１２を載せ、（Ｅ）に示されるように成長を促す。次に、（ｃ）へ飛んで、カッタープレート１９で先端部３５Ａ、３５Ｂを切断すれば、また、ＤＮＡ用液が得られる。したがって、同一の種３０Ａ、３０Ｂから多数回ＤＮＡ用液が得られる。   On the other hand, as shown in (D), the plants 34A and 34B remain in the first well plate 11. Therefore, a new second well plate 12 is placed to promote growth as shown in (E). Next, if it flies to (c) and the front-end | tip parts 35A and 35B are cut | disconnected with the cutter plate 19, the liquid for DNA will also be obtained. Therefore, a DNA solution can be obtained many times from the same seed 30A, 30B.

以上に述べたＤＮＡの抽出方法は、次のようにまとめることができる。
複数のウェル１４Ａ、１４Ｂを備える第１のウェルプレート１１と、この第１のウェルプレート１１と同形であるが、ウェル１４Ａ、１４Ｂの底が抜けている第２のウェルプレート１２と、この第２のウェルプレート１２の下面に沿って摺動させるカッタープレート１９と、第２のウェルプレート１２の上下面を塞ぐ第１蓋２１及び第２の蓋２２とを準備するステップと、
前記第１のウェルプレート１１のウェル１４Ａ、１４Ｂに各々種３０Ａ、３０Ｂを入れて、これらの種３０Ａ、３０Ｂを発芽、成長させるステップと、
前記第１のウェルプレート３１に前記第２のウェルプレート１２を、上下のウェル１４Ａ、１４Ｂが連通するようにして載せ、成長した植物３４Ａ、３４Ｂの先端部３５Ａ、３５Ｂが第２のウェルプレート１２まで延びたら、第１のウェルプレート１１と第２のウェルプレート１２との間に前記カッタープレート１９を挿入して、植物３４Ａ、３４Ｂの先端部３５Ａ、３５Ｂをカッタープレート１９の上に載せるステップと、
前記第２のウェルプレート１２の上面２３に前記第１の蓋２１を被せてひっくり返し、前記第１の蓋２１が底板になった状態で第２のウェルプレート１２のウェル１４Ａ、１４Ｂに試薬３６を入れるステップと、
前記第２のウェルプレート１２の上面２３を第２の蓋２２で塞ぎ、第１の蓋２１及び第２の蓋２２で上下面が塞がれた第２のウェルプレート１２をシェイクすることで、試薬中に植物のＤＮＡを抽出するステップと、からなることを特徴とする。 The DNA extraction method described above can be summarized as follows.
A first well plate 11 having a plurality of wells 14A and 14B, a second well plate 12 having the same shape as the first well plate 11 but with the bottoms of the wells 14A and 14B missing, and the second well plate 11 Preparing a cutter plate 19 that slides along the lower surface of the well plate 12 and a first lid 21 and a second lid 22 that block the upper and lower surfaces of the second well plate 12;
Placing seeds 30A and 30B in the wells 14A and 14B of the first well plate 11, respectively, and germinating and growing these seeds 30A and 30B;
The second well plate 12 is placed on the first well plate 31 so that the upper and lower wells 14A and 14B communicate with each other, and the tips 35A and 35B of the grown plants 34A and 34B are the second well plate 12. The cutter plate 19 is inserted between the first well plate 11 and the second well plate 12, and the tips 35A and 35B of the plants 34A and 34B are placed on the cutter plate 19; ,
The upper surface 23 of the second well plate 12 is covered with the first lid 21 and turned over, and the reagent 36 is applied to the wells 14A and 14B of the second well plate 12 with the first lid 21 serving as a bottom plate. Step to insert,
The upper surface 23 of the second well plate 12 is closed with a second lid 22, and the second well plate 12 whose upper and lower surfaces are closed with the first lid 21 and the second lid 22 is shaken, And a step of extracting plant DNA into the reagent.

第１のウェルプレート１１の番地と同一である第２のウェルセルプレート１２のウェル１４Ａ、１４Ｂへ植物３４Ａ、３４Ｂの先端部３５Ａ、３５Ｂが移るため、ウェル１４Ａ、１４Ｂへの投入ミスを未然に防止することができる。この結果、実験の信頼性を高めることができる。   Since the tip portions 35A and 35B of the plants 34A and 34B are moved to the wells 14A and 14B of the second well cell plate 12 which is the same as the address of the first well plate 11, an erroneous insertion into the wells 14A and 14B is obviated. Can be prevented. As a result, the reliability of the experiment can be improved.

又、図３を参照すれば、ウェルプレートに、メッシュ板で底を形成すれば水耕栽培が可能となり、上下のウェルプレート間にカッタプレートを差し込めば植物の先端をカットすることができ、蓋を差し込めば底を形成することができる。すなわち、ウェルプレートの形態を容易に変更することができる。   Referring to FIG. 3, hydroponic cultivation is possible by forming the bottom of the well plate with a mesh plate, and the tip of the plant can be cut by inserting a cutter plate between the upper and lower well plates. The bottom can be formed by inserting. That is, the form of the well plate can be easily changed.

尚、本発明は、稲科植物のＤＮＡの抽出に好適であるが、葉野菜など他の植物のＤＮＡの抽出に適用することは差し支えない。   The present invention is suitable for extracting DNA of rice plants, but may be applied to extraction of DNA of other plants such as leafy vegetables.

本発明は、稲科植物のＤＮＡの抽出に好適である。   The present invention is suitable for extracting DNA of rice plants.

本発明に係るウェルプレートの斜視図である。It is a perspective view of the well plate which concerns on this invention. 本発明に係るウェルプレートの断面図である。It is sectional drawing of the well plate which concerns on this invention. 本発明に係るウェルプレートの底面図である。It is a bottom view of the well plate which concerns on this invention. 本発明に係るビーズプレートの斜視図である。It is a perspective view of the bead plate concerning the present invention. 本発明に係るＤＮＡの抽出方法を説明するフロー図である。It is a flowchart explaining the extraction method of DNA which concerns on this invention. 従来のウェルプレートの斜視図である。It is a perspective view of the conventional well plate. 植物の先端部を処理するときの説明図である。It is explanatory drawing when processing the front-end | tip part of a plant.

符号の説明Explanation of symbols

１１…第１のウェルプレート、１２…第２のウェルプレート、１３…筐体、１４、１４Ａ、１４Ｂ…ウェル、１９…カッタープレート、２１…第１の蓋、２２…第２の蓋、２３…ウェルプレートの上面、２５…ビーズプレート、２６…ビーズ、２７…孔、２８…多孔プレート、２９…シャッタプレート、３０Ａ、３０Ｂ…種、３４Ａ、３４Ｂ…植物、３５Ａ、３５Ｂ…植物の先端部、３６…試薬、３７Ａ、３７Ｂ…ＤＮＡ用液。   DESCRIPTION OF SYMBOLS 11 ... 1st well plate, 12 ... 2nd well plate, 13 ... Housing | casing, 14, 14A, 14B ... Well, 19 ... Cutter plate, 21 ... 1st lid | cover, 22 ... 2nd lid | cover, 23 ... Upper surface of well plate, 25 ... bead plate, 26 ... bead, 27 ... hole, 28 ... perforated plate, 29 ... shutter plate, 30A, 30B ... species, 34A, 34B ... plant, 35A, 35B ... plant tip, 36 ... Reagents, 37A, 37B ... Solution for DNA.

Claims (3)

複数のウェルを備える第１のウェルプレートと、この第１のウェルプレートと同形であるが、ウェルの底が抜けている第２のウェルプレートと、この第２のウェルプレートの下面に沿って摺動させるカッタープレートと、前記第２のウェルプレートの上下面を塞ぐ第１蓋及び第２の蓋とを準備するステップと、
前記第１のウェルプレートのウェルに各々種を入れて、これらの種を発芽、成長させるステップと、
前記第１のウェルプレートに前記第２のウェルプレートを、上下のウェルが連通するようにして載せ、成長した植物の先端部が第２のウェルプレートまで延びたら、第１のウェルプレートと第２のウェルプレートとの間に前記カッタープレートを挿入して、植物の先端部をカッタープレートの上に載せるステップと、
前記第２のウェルプレートの上面に前記第１の蓋を被せてひっくり返し、前記第１の蓋が底板になった状態で第２のウェルプレートのウェルに試薬を入れるステップと、
前記第２のウェルプレートの上面を第２の蓋で塞ぎ、第１の蓋及び第２の蓋で上下面が塞がれた第２のウェルプレートをシェイクすることで、試薬中に植物のＤＮＡを抽出するステップと、からなることを特徴とするＤＮＡの抽出方法。 A first well plate having a plurality of wells, a second well plate that has the same shape as the first well plate, but has a bottom of the well, and a lower surface of the second well plate. Preparing a cutter plate to be moved, and a first lid and a second lid for closing the upper and lower surfaces of the second well plate;
Placing seeds into each well of the first well plate to germinate and grow these seeds;
When the second well plate is placed on the first well plate so that the upper and lower wells communicate with each other, and the tip of the grown plant extends to the second well plate, the first well plate and the second well plate Inserting the cutter plate between the well plate and placing the tip of the plant on the cutter plate;
Putting the first lid on the top surface of the second well plate and turning it over, and putting the reagent into the wells of the second well plate with the first lid being a bottom plate;
The upper surface of the second well plate is closed with a second lid, and the second well plate whose upper and lower surfaces are closed with the first lid and the second lid is shaken, whereby plant DNA is contained in the reagent. And a step of extracting the DNA. 前記試薬を入れるステップでは、植物の撹拌、粉砕を促すためにビーズを、試薬と共にウェルに入れることを特徴とする請求項１記載のＤＮＡの抽出方法。   The method for extracting DNA according to claim 1, wherein in the step of adding the reagent, beads are put in a well together with the reagent in order to promote stirring and crushing of the plant. 前記試薬を入れるステップでは、前記第２のウェルプレートのウェルに対応する孔が設けられている多孔プレートと、この多孔プレートの下面を塞ぐシャッタプレートとからなるビーズプレートを用い、前記孔に１個ずつ前記ビーズを入れ、ビーズプレートを第２のウェルプレートに載せ、前記シャッタプレートを引き抜くことで、第２のウェルプレートのウェルに前記ビーズを入れることを特徴とする請求項２記載のＤＮＡの抽出方法。   In the step of adding the reagent, a bead plate including a perforated plate provided with holes corresponding to the wells of the second well plate and a shutter plate closing the lower surface of the perforated plate is used. 3. The DNA extraction according to claim 2, wherein the beads are put into the wells of the second well plate by placing the beads one by one, placing the bead plate on the second well plate, and pulling out the shutter plate. Method.
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