JP4380967B2 - Preventive or therapeutic agent for viral myocarditis - Google Patents

Description

【００２４】
このセチリジンは公知の化合物であり、その製法は特に制限されない。セチリジンは、例えば、下記文献に開示の方法等によって製造することができる。本発明において、セチリジンは（±）−体（すなわち、ラセミ体）として使用することができるが、必要に応じて、光学分割その他の常法により光学異性体の一方の含有量を増大ないし単離させてもよい。
より具体的には、ここで用いる用語「セチリジンの個々の光学異性体」は、セチリジンの左旋性および右旋性のエナンチオマーを言う。より正確には、それは、少なくとも９０質量％（好ましくは少なくとも９５質量％）のセチリジンの１つの個々の光学異性体と、多くとも１０質量％（好ましくは多くとも５質量％）の他の個々の光学異性体を含むものを言う。セチリジンの右旋性のエナンチオマーは、（そのジヒドロクロリド塩の形が左旋性であるため）レボセチリジン（levocetirizine）としても知られている。それぞれの個々の光学異性体は、コンベンショナルな手段で（すなわち対応するラセミ混合物からの分割、または不斉合成により）得ることができる。
セチリジン、その個々の光学異性体、または薬理学的に許容可能な塩の製造プロセスは、ヨーロッパ特許ＥＰ−０ ０５８ １４６ Ｂ１、英国特許第２，２２５，３２０および２，２２５，３２１号、米国特許第５，４７８，９４１号、公表されたヨーロッパ特許出願ＥＰ−０ ６０１ ０２８ Ａｌ、ＥＰ−０ ８０１ ０６４ Ａｌ、および公表された国際特許出願ＷＯ ９７／３７９８２号に記載されている。
【００２５】
セチリジンは、従来より持続性選択Ｈ_１−受容体拮抗剤として、アレルギー性鼻炎、湿疹・皮膚炎等に使用されている（例えば、薬業時報社「医療薬 日本医薬品集」１９９８〜９９年版、第８３１頁を参照）。
【００２６】
（薬理学的に許容可能な塩）
セチリジンは遊離の状態でも使用可能であるが、必要に応じて、薬理学的に許容可能な塩としてもよい。このような塩を形成する方法は特に制限されないが、例えば、適当な溶媒中で、適当な酸と処理することにより、薬理学的に許容可能な塩とすることができる。この際に使用可能な溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン等が挙げられる。塩形成の際に使用可能な酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、マレイン酸、フマル酸、安息香酸、クエン酸、シュウ酸、コハク酸、酒石酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、１０−カンファースルホン酸等が挙げられる。
【００２７】
（予防または治療剤）
本発明において、セチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩は、低毒性でありため、動物とりわけ哺乳動物（例えば、ヒト、イヌ、ウサギ、マウス、ラット等）に対するウイルス性心筋炎またはそれに関連するウイルス性疾患の予防または治療剤、更にはウイルス性の細胞傷害の改善または予防剤として有用である。
【００２８】
（ウイルス性心筋炎）
本発明において、「心筋炎」とは、心筋の炎症性病変に基づく心筋障害を言う。また、「ウイルス性心筋炎」とは、感染性心筋炎のうち、ウイルスを病因（agent）とするものを言う。この「ウイルス性心筋炎」は、膠原病やサルコイドーシス等による非感染性心筋炎、ないしは細菌等（ウイルス以外）による感染性心筋炎とは、以下の点で区別することができる（このような区別に関しては、例えば、文献Viral infection of the heart, J.E.Banatvala編集、Edward Arnold社出版、ロンドン1993 pp1-257を参照することができる）。
＜心筋炎細菌等による感染性心筋炎との区別＞
ウイルス抗体、細菌に対する抗体価の測定
心筋組織からのウイルス、細菌の検出
＜非感染性心筋炎との区別＞
ウイルス抗体、細菌に対する抗体価の測定
心筋組織からのウイルス、細菌の検出
【００２９】
（ウイルス）
本発明において、ウイルス性心筋炎を引き起こすウイルスは、特に制限されない。また、ウイルス性心筋炎に関連するウイルス性疾患（ないしはウイルス性の細胞傷害）を引き起こすウイルスも、特に制限されない。
【００３０】
ウイルス性心筋炎および／又は関連するウイルス性疾患（ないしはウイルス性の細胞傷害）を引き起こすウイルスには、ＤＮＡウイルスまたはＲＮＡウイルスのいずれに属する病原ウイルスも含まれる。そのような病原ウイルスのうち、ＤＮＡウイルスとしては、例えば、ポックスウイルス、ヘルペスウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＥＢウイルス等）、アデノウイルス、パルボウイルス等を挙げることができる。
【００３１】
上記病原ウイルスのうち、ＲＮＡウイルスとしては、例えば、レオウイルス、トガウイルス、コロナウイルス、ラブドウイルス、パラミクソウイルス、オルトミクソウイルス、ブンヤウイルス、アレナウイルス、レトロウイルス、ピコルナウイルス、カリシウイルス等を挙げることができる。
【００３２】
本発明の薬剤は、とりわけ、ＲＮＡウイルスまたは肝炎ウイルスによって引き起こされるウイルス性心筋炎またはそれに関連するウイルス性疾患に罹患した患者の治療または予防に好ましく適用し得る。ここで、本発明の薬剤が特に好適に適用可能なＲＮＡウイルスとしては、オルトミクソウイルスまたはピコルナウイルスが挙げられる。
【００３３】
（関連するウイルス性疾患）
ウイルス性心筋炎に関連するウイルス性疾患の疾患は、ウイルス性心筋炎により惹起される疾患である限り、特に制限されない。このような疾患としては、例えば、ウイルス性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｅ型、Ｇ型、ＴＴＶ型）、アデノウイルス感染症、インフルエンザ、ウイルス性肺炎、ウイルス性気管支炎、ヘルペス感染症（単純ヘルペス、ＥＢウイルス（伝染性単核症）、帯状疱疹）、ポリオ、エイズ（ＨＩＶ感染症）、成人Ｔ細胞白血病（ＡＴＬ）、パピローマ、麻疹、風疹、突発性発疹、伝染性紅斑、ウイルス性脳炎、ウイルス性髄膜炎、サイトメガロウイルス感染症、流行性耳下腺炎、水痘、狂犬病、ウイルス性腸炎、ウイルス性心膜炎、コクサッキーウイルス感染症、エコーウイルス感染症、腎症候性出血熱、ラッサ熱等が挙げられる。
【００３４】
更に上記に挙げたウイルス性疾患の中でも、本発明の薬剤は、ウイルス性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｅ型、Ｇ型、ＴＴＶ型）、アデノウイルス感染症、インフルエンザ、ヘルペス感染症、ウイルス性脳炎、サイトメガロウイルス感染症、ウイルス性腸炎、ウイルス性心膜炎に対して特に好ましく適用可能である。
【００３５】
（細胞障害）
本発明の薬剤は、ウイルス性の細胞傷害の改善または予防剤としても有効である。ここに、「ウイルス性の細胞傷害」とは、心筋細胞の壊死、細胞浸潤線維化などを言う（この「ウイルス性の細胞傷害」の詳細に関しては、例えば文献Viral infection of the heart, J.E.Banatvala編集、Edward Arnold社出版、ロンドン1993 pp1-257を参照することができる）。
【００３６】
（投与法）
本発明のセチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩は、経口的または非経口的のいずれでも用いることができ、例えば吸入法、直腸投入、または局所投与等により用いることができる。本発明のセチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩の剤型は、特に制限されない。本発明のセチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩は、例えば医薬品組成物または製剤（例えば、粉末、顆粒、錠剤、ピル剤、カプセル剤、注射剤、シロップ剤、エマルジョン剤、エリキシル剤、懸濁剤、溶液剤等）として用いることができる。
【００３７】
これらの組成物または製剤は、例えば、本発明のセチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩を単独で、または必要に応じて医薬として許容可能な担体（アジュバント剤、賦形剤、補形剤及び／又は希釈剤等）と混合した後に、通常の方法に従って製剤化することにより得ることができる。
【００３８】
（非経口投与）
本発明において、非経口投与は、例えば、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射または点滴法等を含む。
【００３９】
注射用調剤、例えば無菌注射用水性懸濁物または油性懸濁物は、適当な分散化剤または湿化剤及び懸濁化剤を用いて当該分野で知られた方法で調製することができる。その無菌注射用調剤は、また、例えば水溶液等の製剤上許容可能な非経口投与可能な希釈剤または溶媒中の無菌の注射のできる溶液または懸濁液であってもよい。使用可能なビヒクル（vehicle）ないしは溶媒として許容可能なものとしては、水、リンゲル液、等張食塩液等を挙げることができる。
【００４０】
更に、通常溶媒または懸濁化溶媒として無菌の不揮発性油も使用可能である。この不揮発性油としては、任意の不揮発性油も脂肪酸、天然または合成または半合成の脂肪油または脂肪酸、および天然または合成または半合成のモノまたはジまたはトリグリセリド類も包含される。
【００４１】
直腸投与用の座剤は、その薬物と適当な低刺激性の補形剤、例えばココアバターやポリエチレングリコール類等の、常温では固体であるが腸管の温度では液体で、直腸内で融解し、薬物を放出するもの等と混合することにより、製造することができる。
【００４２】
（経口投与用の固形投与剤型）
経口投与用の固形投与剤型としては、例えば、粉剤、顆粒剤、錠剤、ピル剤、カプセル剤等を挙げることができる。このような固形投与剤型において、活性成分化合物は、少なくとも一つの添加物と混合することができる。この際、添加物としては、例えばショ糖、乳糖、セルロース糖、マンニトール、マルチトール、デキストラン、デンプン類、寒天、アルギネート類、キチン類、キトサン類、ペクチン類、トラガントガム類、アラビアゴム類、ゼラチン類、コラーゲン類、カゼイン、アルブミン、合成または半合成のポリマー類またはグリセリド類を使用することができる。
【００４３】
上記の固形投与剤型物は、通常の剤型と同様に、更に別の添加物を含むことができる。このような「別の添加物」としては、例えば不活性希釈剤、マグネシウムステアレート等の滑沢剤、パラベン類、ソルビン酸等の保存剤、アスコルビン酸、α−トコフェロール、システイン等の抗酸化剤、崩壊剤、結合化剤、増粘剤、緩衝化剤、甘味付与剤、フレーバー付与剤、パフューム剤等を挙げることができる。錠剤およびピル剤は、更に腸溶性（enteric）コーティングすることもできる。
【００４４】
（経口投与用の液剤）
経口投与用の液剤としては、例えば、医薬として許容可能なシロップ剤、エマルジョン剤、エリキシル剤、懸濁剤、溶液剤等を挙げることができる。これらは、当該分野で普通用いられる不活性希釈剤（例えば水）を含んでいてもよい。
【００４５】
（投与量）
本発明の薬剤の患者への投与量は、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、投与方法、排泄速度、薬物の組み合わせ、患者のその時に治療を行っている病状の程度に応じ、それらまたはその他の要因を考慮して決めることができる。セチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩は、低毒性であるため、安全に使用することができる。
【００４６】
当該化合物の１日の投与量は、患者の状態や体重、投与経路等によって異なる場合があるが、例えば成人のウイルス性心筋炎またはそれに関連するウイルス性疾患の治療剤として投与する場合、経口投与では、一日量約０．０１〜１５０ｍｇ、好ましくは０．１〜１００ｍｇ、静注では、一日量約０．０１〜５０ｍｇ、好ましくは０．０１〜２０ｍｇを１回または２回ないし３回に分けて投与することが好ましい。
【００４７】
【実施例】
以下に、試験例によって本発明の効果を明らかにするが、これらは単なる例示であり、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。
【００４８】
試験例１
（心不全モデルにおける生存率に対する効果）
【００４９】
マウスにおけるＥＭＣ（Encephalomyocarditis）ウィルス性心筋炎による心不全モデルにおいて、生存率に対するセチリジンの効果を比較検討した。
【００５０】
方法
【００５１】
２８日齢・雄のＤＢＡ／２マウスを３つのグループに分け、全てのグループに、心筋炎を引き起こすウイルスであるＥＭＣウイルスの１ｐｆｕ／マウス（リン酸緩衝液（ＰＢＳ）として０．１ｍｌ）を腹腔内接種した（ゼロ日）。ここでは、ＡＴＣＣ（American Type Culture Collection Manassas VA, U.S.A）から入手したＥＭＣウイルスを用い、該ＥＭＣウイルスをＰＢＳで稀釈して用いた。
【００５２】
接種後から、対照として蒸留水のみを与えた対照群（ｎ＝１０）、蒸留水で溶解したセチリジンを１ｍｇ／ｋｇ／日の量で与えたセチリジン低投与群（ｎ＝１０）、セチリジンを１０ｍｇ／ｋｇ／日の量で与えたセチリジン高投与群（ｎ＝１０）を、連日１４日後までゾンデ（和研薬社製）を用いて、一日に一回強制経口投与した。
【００５３】
１４日後までの上記３つのグループの生存率を、Kaplan-Meier法によって比較した（このKaplan-Meier法の詳細に関しては、例えば文献StatVien, SAS Institute Inc Cary, NC, U.S.A, 1998を参照することができる）。
【００５４】
結果
【００５５】
上記により得られた結果をKaplan-Meier法により解析することにより得られたデータを図１のグラフに示す。
【００５６】
上記図１に示すように、対照群（ｎ＝１０）は、１４日後で生存は１匹（生存率１０％）であった。他方、セチリジン低投与群（ｎ＝１０）の１４日後の生存は４匹（生存率４０％）、セチリジン高投与群（ｎ＝１０）の１４日後の生存は５匹（生存率５０％）であり、セチリジン投与によって濃度依存的に生存率が改善することが認められた（ｐ＜０．０５）。
【００５７】
試験例２
（心不全モデルにおける心筋の病理組織的変化に対する効果）
【００５８】
マウスにおけるＥＭＣウィルス性心筋炎による心不全モデルにおいて、心筋の病理組織的変化に対するセチリジンの効果を比較検討した。
【００５９】
試験例１と同様に、２８日齢・雄のＤＢＡ／２マウスを３つのグループに分け、全てのグループに、ＥＭＣウイルスの１ｐｆｕ／マウスを腹腔内接種した（ゼロ日）。
【００６０】
接種後から、試験例１と同様に、対照として蒸留水のみを与えた対照群（ｎ＝７）、セチリジンを１ｍｇ／ｋｇ／日の量で与えたセチリジン低投与群（ｎ＝１０）、セチリジンを１０ｍｇ／ｋｇ／日の量で与えたセチリジ高投与群（ｎ＝７）を、連日５日後までゾンデを用いて、試験例１と同様に、一日に一回強制経口投与した。
【００６１】
５日後に心臓を採取し、ホルマリン固定後ヘマトキシリン−エオジン染色を行い、心臓壊死、細胞浸潤の２項目につき、以下のようにスコア化した（このようなホルマリン固定、ヘマトキシリン−エオジン染色、スコア化の詳細に関しては、例えば文献Csculation 1999;100;1823-1829を参照することができる）。心筋細胞壊死および細胞浸潤のスコアは、２人の観察者によって独立して評価し、平均した。統計学的分析はone way analysis of variance (ANOVA)、Fisher's protected least significant difference testにより行った（このような統計学的分析法の詳細に関しては、例えば文献StatVien, SAS Institute Inc Cary, NC, U.S.A, 1998を参照することができる）。
【００６２】
＜スコア化＞
０： 病変なし、
１＋： 心臓の２５％以下の病変、
２＋： ２５％より多く、５０％以下の心臓の病変、
３＋： ５０％より多く、７５％以下の心臓の病変、
４＋： ７５％より多く、１００％以下の心臓の病変
【００６３】
結果
【００６４】
上記により測定した心重量、体重、心重量／体重比、心筋細胞壊死、および炎症細胞浸潤のデータを、下記表１に纏めた（なお、この表１には、上記した生存率データ、および後述する心筋内インテーフェロン産生に関するデータをも併せて示した）。
【表１】

この表１に示したように、心臓の病理組織学的所見（組織像）においても、セチリジン投与群により用量依存的に炎症性細胞・壊死の軽減の傾向が認められた。
【００６５】
上記試験例１および２の結果から、セチリジン塩酸塩は、ＥＭＣウイルス感染によるマウスの死亡率を改善し、ウイルス性心筋炎を改善し、ウイルス感染に有効であることが明らかになった。
【００６６】
なお、上記拡張型心筋症の動物モデルについては、Circulation.６５：１２３０−１２３５，１９８２またはCirculation. ６６：３５５−３６０，１９８２に記載されている。
【００６７】
試験例３
（心不全モデルにおける心筋内のサイトカイン産生に対する効果）
【００６８】
マウスにおけるＥＭＣウィルス性心筋炎による心不全モデルにおいて、心筋内のサイトカイン産生に対するセチリジンの効果を比較検討した。
【００６９】
試験例１と同様に、２８日齢・雄のＤＢＡ／２マウスを３つのグループに分け、全てのグループに、ＥＭＣウイルスの１ｐｆｕ／マウスを腹腔内接種した（ゼロ日）。
【００７０】
接種後から、試験例１と同様に、対照として蒸留水のみを与えた対照群（ｎ＝１０）、セチリジンを１ｍｇ／ｋｇ／日の量で与えたセチリジン低投与群（ｎ＝１０）、およびセチリジンを１０ｍｇ／ｋｇ／日の量で与えたセチリジン高投与群（ｎ＝１０）、連日７日後までゾンデを用いて、一日に一回強制経口投与した。
【００７１】
７日後にマウスから無菌的に採取した心室の重量を測定し、その採取したマウス心室を、超音波ホモジナイザー（Astrason社製、商品名：Ultrasonic Convertor）を用いてＰＢＳ（リン酸緩衝食塩液、１ｍｌ、ｐＨ＝７．４）中でホモジナイズ（条件：０℃、３０秒）し、４℃、１４，０００ｒｐｍの条件で２０分間遠心分離し、得られた上清をＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αのアッセイの試料として使用した。
【００７２】
各サイトカインの蛋白濃度は、市販のキットを使用してＥＬＩＳＡにより測定した(Circulation. １００：１１０２−１１０８，１９９９）。マウスＩＬ−２およびＩＦＮ−γのＥＬＩＳＡキットはGENZYME Corporation, Cambridge, U.S.A.から、マウスＩＬ−１２およびＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキットはENDOGEN Inc., Cambridge, U.S.A.から購入した。
【００７３】
各上清中の総蛋白濃度は、ビシンコニン酸（ＢＣＡ）法により測定し、総蛋白濃度に対するサイトカイン濃度の割合を算出した(J. Am. Coll. Cardiol. ３３：１４００−１４０７，１９９９）。各サイトカイン蛋白濃度はｐｇ／ｍｇ総蛋白またはｎｇ／ｍｇ総蛋白として表した。統計学的分析は、試験例２と同様にone way ANOVA、Fisher's protected least significant difference testにより行った。
【００７４】
結果
上記サイトカインのうち、心筋内のＩＦＮ‐ｇに関する統計学的分析結果を、図２のグラフに示す。
【００７５】
図２に示すように、セチリジン投与によって濃度依存的に、ウイルス接種の７日後における心筋内のＩＦＮ‐ｇの増加が認められた。
【００７６】
上述した表４に示したように、ウイルスに起因する細胞傷害に対してセチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩の投与によって改善効果が認められた。本発明の薬剤は、ウイルス性心筋炎またはウイルス性心筋炎に関連するウイルス性疾患の治療効果があり、また該疾患の予防にも有効である。
【００７７】
処方例１
【００７８】
（１）錠剤
【００７９】
下記組成を有するセチリジン含有錠剤を常法により製造する。
【００８０】
セチリジン １ｍｇ、乳糖 ９０ｍｇ、結晶セルロース ２５ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム ４ｍｇ。
【００８１】
処方例２
（２）ソフトカプセル剤（１カプセル中）
【００８２】
組成： セチリジン ３０ｍｇ、ポリエチレングリコール−３００ ３００ｍｇ、ポリソルベート８０ ２０ｍｇ
【００８３】
製造方法：常法により、セチリジンにポリエチレングリコール−３００およびポリソルベート８０を加え、ソフトカプセルに充填して製造する。
【００８４】
処方例３
（３）注射剤（１アンプル １０ｍｌ中）
【００８５】
組成： セチリジン ０．３％（３０ｍｇ）
ポリエチレングリコール−３００ ２０％（２ｇ）
エタノール ６０％（６ｇ）
注射用蒸留水で全量１０ｍｌとする。
【００８６】
製造方法： 常法により、セチリジンにエタノールおよびポリエチレングリコール−３００を加えて溶解し、注射用蒸留水を加えて全量１０ｍｌとする。これにより、１アンプル中セチリジンを３０ｍｇ含有した注射剤を得る。
【００８７】
【発明の効果】
上述したように本発明によれば、ウイルス性心筋炎の予防または治療剤、ウイルス性心筋炎に関連するウイルス性疾患の予防または治療剤、および／又はウイルス性の細胞傷害の改善または予防剤として有用な、セチリジンまたはその薬理学的に許容可能な塩が得られる。
【図面の簡単な説明】
【図１】試験例１におけるマウス生存率の結果を示すグラフである。白丸は対照群（セチリジン非投与）、白四角はセチリジン高投与群、白三角はセチリジン低投与群を示す。
【図２】試験例３におけるＩＦＮ−ｇ産生の測定結果を示す棒グラフである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to the prevention of viral diseases related to viral myocarditis or viral myocarditis (or caused by viral myocarditis) comprising cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient, or The present invention relates to a therapeutic agent and an agent for improving or preventing viral cell injury.
[0002]
[Prior art]
Conventionally, virus vaccines have been mainly used for the prevention of viral diseases, but vaccines are generally specific for each virus and are effective only for the corresponding virus. However, since there are many types of viruses, vaccines are currently in practical use only against very limited viruses. In addition, there are many mutant viruses, and vaccines are often not effective against the same virus. Furthermore, it is extremely difficult to develop many vaccines with few side effects.
[0003]
On the other hand, various antiviral agents (acyclovir, ganciclovir, ara A, etc.) have been developed and put into practical use, but there are no drugs that are effective only for very limited viral infections and effective for a wide range of viral diseases. It has not been issued. Moreover, these antiviral agents have strong side effects and are difficult to use widely in clinical practice. Furthermore, in recent years, interferon has been applied to the treatment of viral hepatitis and the like, but side effects such as fever frequently appear. In addition, although interferon suppresses virus growth, there is no report that it directly protects against cell damage. Furthermore, gamma globulin is widely used for the treatment of viral diseases, but the results are not always constant.
[0004]
As described above, there are many types of viruses, and it is generally difficult to perform specific treatment for each virus. Therefore, it is extremely important to prevent or treat cell damage and the like in various organs that occur in many viral diseases.
[0005]
In addition, it is known that a viral injury often accompanies a viral disease. This cell damage is considered to involve various immune reactions caused by virus infection in addition to direct damage due to virus growth. It is also extremely important to prevent or treat cell damage associated with such viral diseases.
[0006]
In general, myocarditis is a myocardial disorder based on an inflammatory lesion of the myocardium, and is etiologically classified into infectious myocarditis due to viruses, bacteria, etc., and non-infectious myocarditis due to collagen disease, sarcoidosis or the like. Most of the myocarditis encountered everyday is due to viruses, and there are many Coxsackie B, echo, herpes simplex virus, etc., and idiopathic myocarditis of unknown cause is considered to be mostly viral. In general, myocarditis often develops acutely and is almost completely cured, but cardiac dysfunction may persist for a long time.
[0007]
The clinical symptoms of myocarditis are composed of inflammatory symptoms and cardiac symptoms, and vary from almost asymptomatic to rapidly dying due to heart failure or arrhythmia. Viral myocarditis is preceded by cold symptoms such as fever, cough, and sore throat, and gastrointestinal symptoms such as diarrhea and abdominal pain. Various heart attacks such as chest pain, arrhythmia, heart failure, and Adams Stokes syndrome within 10 days. Symptoms appear.
[0008]
That is, a person who has not had an abnormality in the heart until then has cold symptoms such as fever, cough, headache, sore throat, malaise, and digestive symptoms such as nausea, vomiting, abdominal pain, diarrhea, palpitation, chest pain, breathing Acute viral myocarditis is strongly suspected when symptoms such as difficulty, swelling, facial pallor, cyanosis, arrhythmia or fainting, cold sensation of the extremities, joint pain, muscle pain, rash, etc. appear.
[0009]
When a patient who seems to have a cold is examined, myocarditis (especially viral myocarditis) may be combined, but it is regarded as one of the diseases easily overlooked as a cold.
[0010]
Therefore, to develop a drug capable of effectively treating or preventing myocarditis (especially viral myocarditis) and / or a viral disease or viral cell injury associated with it that is not always easy to make a clinical diagnosis. , Very meaningful.
[0011]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a drug that enables effective prevention or treatment of viral myocarditis regardless of the type of virus.
[0012]
Another object of the present invention is to provide a drug capable of preventing or treating a viral disease associated with viral myocarditis.
[0013]
Another object of the present invention is to provide a drug that can improve or prevent viral cell injury.
[0014]
[Means for Solving the Problems]
As a result of intensive studies, the present inventor has surprisingly found that cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof is effective and completed the present invention. That is, according to the present invention, a prophylactic or therapeutic agent for viral myocarditis comprising cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient is provided.
[0015]
The present invention further provides the following.
[0016]
(1) A preventive or therapeutic agent for a viral disease associated with viral myocarditis comprising cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
[0017]
(2) A preventive or therapeutic agent in which viral myocarditis or a viral disease related thereto is caused by RNA virus or hepatitis virus.
[0018]
(3) A preventive or therapeutic agent wherein the RNA virus is orthomyxovirus or picornavirus.
[0019]
(4) Viral diseases are viral hepatitis (types A, B, C, E, G, TTV), adenovirus infection, influenza, herpes infection, viral encephalitis, cytomegalovirus infection A prophylactic or therapeutic agent, which is viral enteritis or viral pericarditis.
[0020]
(5) An agent for improving or preventing viral cytotoxicity comprising cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
[0021]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to the drawings as necessary. In the following description, “parts” and “%” representing the quantity ratio are based on mass unless otherwise specified.
[0022]
(Cetirizine)
In the present invention, cetirizine, that is, (±)-[2- [4-[(4-chlorophenyl) phenylmethyl] -1-piperazinyl] ethoxy] acetic acid is a compound having the following structural formula.
[0023]
[Chemical 1]

[0024]
This cetirizine is a known compound, and its production method is not particularly limited. Cetirizine can be produced, for example, by the method disclosed in the following literature. In the present invention, cetirizine can be used as a (±) -form (that is, a racemate). If necessary, the content of one optical isomer is increased or isolated by optical resolution or other conventional methods. You may let them.
More specifically, the term “individual optical isomers of cetirizine” as used herein refers to the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of cetirizine. More precisely, it is at least 90% by weight (preferably at least 95% by weight) one individual optical isomer of cetirizine and at most 10% by weight (preferably at most 5% by weight) other individual optical isomers. This includes those containing optical isomers. The dextrorotatory enantiomer of cetirizine is also known as levocetirizine (because its dihydrochloride salt form is levorotatory). Each individual optical isomer can be obtained by conventional means (ie by resolution from the corresponding racemic mixture or by asymmetric synthesis).
Processes for the production of cetirizine, its individual optical isomers, or pharmacologically acceptable salts are described in European Patents EP-0 058 146 B1, British Patent Nos. 2,225,320 and 2,225,321, US Patents. No. 5,478,941, published European patent applications EP-0 601 028 Al, EP-0 801 064 Al, and published international patent application WO 97/37982.
[0025]
Cetirizine is a persistent selection H₁-As a receptor antagonist, it is used for allergic rhinitis, eczema, dermatitis, etc. (see, for example, Yakugyo Jihosha "Medical Drugs Japan Pharmaceutical Collection" 1998-99, page 831).
[0026]
(Pharmaceutically acceptable salt)
Cetirizine can be used in a free state, but may be a pharmacologically acceptable salt if necessary. The method for forming such a salt is not particularly limited. For example, it can be converted into a pharmacologically acceptable salt by treating with a suitable acid in a suitable solvent. Examples of the solvent that can be used in this case include water, methanol, ethanol, diethyl ether, tetrahydrofuran (THF), dioxane and the like. Examples of acids that can be used for salt formation include hydrochloric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, acetic acid, maleic acid, fumaric acid, benzoic acid, citric acid, oxalic acid, Examples include succinic acid, tartaric acid, malic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, 10-camphorsulfonic acid, and the like.
[0027]
(Preventive or therapeutic agent)
In the present invention, cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof has low toxicity, and thus, viral myocarditis or related to animals, particularly mammals (eg, humans, dogs, rabbits, mice, rats, etc.). It is useful as an agent for preventing or treating viral diseases, and further as an agent for improving or preventing viral cell damage.
[0028]
(Viral myocarditis)
In the present invention, “myocarditis” refers to myocardial injury based on inflammatory lesions of the myocardium. The term “viral myocarditis” refers to infectious myocarditis that uses a virus as an agent. This “viral myocarditis” can be distinguished from non-infectious myocarditis due to collagen disease or sarcoidosis or infectious myocarditis due to bacteria (other than viruses) in the following points (such distinction) (For example, refer to the document Viral infection of the heart, edited by JEBanatvala, Edward Arnold, London 1993 pp1-257).
<Difference with infectious myocarditis due to myocarditis bacteria>
Measurement of antibody titers against viral antibodies and bacteria
Detection of viruses and bacteria from myocardial tissue
<Difference from non-infectious myocarditis>
Measurement of antibody titers against viral antibodies and bacteria
Detection of viruses and bacteria from myocardial tissue
[0029]
(Virus)
In the present invention, the virus that causes viral myocarditis is not particularly limited. In addition, a virus that causes a viral disease (or viral cytotoxicity) associated with viral myocarditis is not particularly limited.
[0030]
Viruses that cause viral myocarditis and / or related viral diseases (or viral cytotoxicity) include pathogenic viruses belonging to either DNA or RNA viruses. Among such pathogenic viruses, examples of DNA viruses include poxvirus, herpes virus (herpes simplex virus, cytomegalovirus, EB virus, etc.), adenovirus, parvovirus and the like.
[0031]
Among the above-mentioned pathogenic viruses, RNA viruses include, for example, reovirus, togavirus, coronavirus, rhabdovirus, paramyxovirus, orthomyxovirus, bunyavirus, arenavirus, retrovirus, picornavirus, calicivirus, etc. Can be mentioned.
[0032]
The agent of the present invention can be preferably applied particularly to the treatment or prevention of patients suffering from viral myocarditis caused by RNA virus or hepatitis virus or viral diseases related thereto. Here, examples of RNA viruses to which the agent of the present invention can be particularly suitably applied include orthomyxovirus and picornavirus.
[0033]
(Related viral diseases)
The viral disease associated with viral myocarditis is not particularly limited as long as it is a disease caused by viral myocarditis. Examples of such diseases include viral hepatitis (type A, type B, type C, type E, type G, type TTV), adenovirus infection, influenza, viral pneumonia, viral bronchitis, herpes infection (Herpes simplex, EB virus (contagious mononucleosis), herpes zoster), polio, AIDS (HIV infection), adult T-cell leukemia (ATL), papilloma, measles, rubella, idiopathic rash, infectious erythema, Viral encephalitis, viral meningitis, cytomegalovirus infection, epidemic parotitis, chickenpox, rabies, viral enteritis, viral pericarditis, coxsackie virus infection, echovirus infection, nephrogenic bleeding Heat, Lassa heat and the like.
[0034]
Further, among the viral diseases listed above, the drug of the present invention can be used for viral hepatitis (A type, B type, C type, E type, G type, TTV type), adenovirus infection, influenza, herpes infection. The present invention is particularly preferably applicable to viral encephalitis, cytomegalovirus infection, viral enteritis, and viral pericarditis.
[0035]
(Cell damage)
The agent of the present invention is also effective as an agent for improving or preventing viral cell damage. Here, “viral cytotoxicity” refers to necrosis of cardiomyocytes, cell infiltration fibrosis, etc. (For details of this “viral cytotoxicity”, for example, refer to the document Viral infection of the heart, edited by JEBanatvala. , Edward Arnold Publishing, London 1993 pp1-257).
[0036]
(Administration method)
The cetirizine of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof can be used either orally or parenterally, for example, by inhalation, rectal injection, or topical administration. The dosage form of cetirizine of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof is not particularly limited. The cetirizine of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof is, for example, a pharmaceutical composition or formulation (eg, powder, granule, tablet, pill, capsule, injection, syrup, emulsion, elixir, suspension). It can be used as a turbid agent, a solution agent, etc.
[0037]
These compositions or preparations include, for example, the cetirizine of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof alone or, if necessary, a pharmaceutically acceptable carrier (adjuvant agent, excipient, excipient) And / or a diluent, etc.) and then, it can be obtained by formulation according to a usual method.
[0038]
(Parenteral administration)
In the present invention, parenteral administration includes, for example, subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection or infusion.
[0039]
Injectable preparations, for example, sterile injectable aqueous or oleaginous suspensions can be prepared according to methods known in the art using suitable dispersing or wetting agents and suspending agents. The sterile injectable preparation may also be a sterile injectable solution or suspension in a pharmaceutically acceptable diluent or solvent, for example as an aqueous solution. Examples of acceptable vehicles or solvents that can be used include water, Ringer's solution, and isotonic saline.
[0040]
In addition, sterile, non-volatile oils can also be used as usual solvents or suspending solvents. This non-volatile oil includes any non-volatile oil, fatty acids, natural or synthetic or semi-synthetic fatty oils or fatty acids, and natural or synthetic or semi-synthetic mono or di or triglycerides.
[0041]
Suppositories for rectal administration are solid at room temperature but liquid at the temperature of the intestinal tract, such as cocoa butter and polyethylene glycols, and appropriate hypoallergenic excipients such as cocoa butter, and melt in the rectum It can be produced by mixing with a drug-releasing agent or the like.
[0042]
(Solid dosage form for oral administration)
Examples of solid dosage forms for oral administration include powders, granules, tablets, pills, capsules and the like. In such solid dosage forms, the active ingredient compound can be mixed with at least one additive. At this time, examples of additives include sucrose, lactose, cellulose sugar, mannitol, maltitol, dextran, starches, agar, alginates, chitins, chitosans, pectins, tragacanth gums, gum arabic, gelatins. Collagens, casein, albumin, synthetic or semi-synthetic polymers or glycerides can be used.
[0043]
The above-mentioned solid dosage form can further contain other additives in the same manner as a normal dosage form. Examples of such “another additive” include inert diluents, lubricants such as magnesium stearate, preservatives such as parabens and sorbic acid, and antioxidants such as ascorbic acid, α-tocopherol and cysteine. , Disintegrating agents, binders, thickeners, buffering agents, sweetening agents, flavoring agents, perfume agents and the like. Tablets and pills can also be enteric coated.
[0044]
(Liquid for oral administration)
Examples of liquid preparations for oral administration include pharmaceutically acceptable syrups, emulsions, elixirs, suspensions, solutions and the like. These may contain inert diluents commonly used in the art (eg water).
[0045]
(Dose)
The dosage of the drug of the present invention to the patient is the age, body weight, general health condition, sex, meal, administration time, administration method, excretion rate, combination of drugs, the degree of the medical condition being treated at that time of the patient Depending on these and other factors. Cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof can be safely used because of its low toxicity.
[0046]
The daily dose of the compound may vary depending on the patient's condition, body weight, route of administration, etc. For example, when administered as a therapeutic agent for adult viral myocarditis or a related viral disease, it is administered orally. In the case of intravenous injection, the daily dose is about 0.01 to 50 mg, preferably 0.01 to 20 mg once or twice to three times. It is preferable to administer them separately.
[0047]
【Example】
Hereinafter, the effects of the present invention will be clarified by test examples, but these are merely examples, and the present invention is not limited thereto.
[0048]
Test example 1
(Effect on survival rate in heart failure model)
[0049]
The effect of cetirizine on survival was compared in a heart failure model with EMC (Encephalomyocarditis) viral myocarditis in mice.
[0050]
Method
[0051]
28-day-old male DBA / 2 mice were divided into 3 groups, and 1 pfu / mouse (0.1 ml as phosphate buffer (PBS)) of EMC virus, a virus causing myocarditis, was injected into all groups. Internal inoculation (zero day). Here, the EMC virus obtained from ATCC (American Type Culture Collection Manassas VA, U.S.A) was used, and the EMC virus was diluted with PBS.
[0052]
After inoculation, a control group (n = 10) given only distilled water as a control, a low cetirizine administration group (n = 10) given cetirizine dissolved in distilled water in an amount of 1 mg / kg / day, and 10 mg cetirizine The high cetirizine administration group (n = 10) given in an amount of / kg / day was orally administered once a day using a sonde (manufactured by Wakken Pharmaceutical Co., Ltd.) until 14 days after each day.
[0053]
The survival rates of the above three groups up to 14 days later were compared by the Kaplan-Meier method (for details of this Kaplan-Meier method, see, for example, the document StatVien, SAS Institute Inc Cary, NC, USA, 1998. it can).
[0054]
result
[0055]
Data obtained by analyzing the results obtained as described above by the Kaplan-Meier method is shown in the graph of FIG.
[0056]
As shown in FIG. 1 above, in the control group (n = 10), survival was 1 (survival rate 10%) after 14 days. On the other hand, the survival after 14 days of the low cetirizine administration group (n = 10) was 4 (survival rate 40%), and the survival after 14 days of the high cetirizine administration group (n = 10) was 5 (survival rate 50%). Yes, it was observed that cetirizine administration improved the survival rate in a concentration-dependent manner (p <0.05).
[0057]
Test example 2
(Effects on myocardial histopathological changes in heart failure models)
[0058]
The effect of cetirizine on myocardial histopathological changes was compared in a model of heart failure caused by EMC viral myocarditis in mice.
[0059]
As in Test Example 1, 28-day-old male DBA / 2 mice were divided into three groups, and all groups were inoculated intraperitoneally with 1 pfu / mouse of EMC virus (Day 0).
[0060]
After inoculation, as in Test Example 1, a control group (n = 7) given only distilled water as a control, a low cetirizine administration group (n = 10) given cetirizine in an amount of 1 mg / kg / day, cetirizine In the same manner as in Test Example 1, the cetirizi high dose group (n = 7) given 10 mg / kg / day was administered by oral gavage once a day in the same manner as in Test Example 1.
[0061]
Five days later, the heart was collected, formalin-fixed and then hematoxylin-eosin stained, and scored as follows for 2 items of cardiac necrosis and cell infiltration (such formalin-fixed, hematoxylin-eosin stained, scored For details, reference can be made, for example, to the document Csculation 1999; 100; 1823-1829). Cardiomyocyte necrosis and cell infiltration scores were assessed and averaged independently by two observers. Statistical analysis was performed by one way analysis of variance (ANOVA) and Fisher's protected least significant difference test (for details of such statistical analysis, see, for example, the literature StatVien, SAS Institute Inc Cary, NC, USA, 1998 can be referred to).
[0062]
<Scoring>
0: No lesion,
1+: lesions of 25% or less of the heart,
2+: more than 25% and less than 50% heart lesions,
3+: more than 50% and less than 75% heart lesions,
4+: more than 75% and less than 100% heart lesions
[0063]
result
[0064]
The data of heart weight, body weight, heart weight / body weight ratio, cardiomyocyte necrosis, and inflammatory cell infiltration measured as described above are summarized in the following Table 1. Data on intramyocardial interferon production are also shown).
[Table 1]

As shown in Table 1, also in the histopathological findings (histological image) of the heart, the cetirizine administration group showed a tendency to reduce inflammatory cells and necrosis in a dose-dependent manner.
[0065]
From the results of Test Examples 1 and 2 above, it was revealed that cetirizine hydrochloride improves the mortality rate of mice due to EMC virus infection, improves viral myocarditis, and is effective for virus infection.
[0066]
The animal model of dilated cardiomyopathy is described in Circulation. 65: 1230-1235, 1982 or Circulation. 66: 355-360, 1982.
[0067]
Test example 3
(Effects on cytokine production in myocardium in heart failure model)
[0068]
In a heart failure model due to EMC viral myocarditis in mice, the effect of cetirizine on cytokine production in the myocardium was compared.
[0069]
As in Test Example 1, 28-day-old male DBA / 2 mice were divided into three groups, and all groups were inoculated intraperitoneally with 1 pfu / mouse of EMC virus (Day 0).
[0070]
After inoculation, as in Test Example 1, a control group (n = 10) given only distilled water as a control, a low cetirizine administration group (n = 10) given cetirizine in an amount of 1 mg / kg / day, and A high cetirizine administration group (n = 10) given cetirizine in an amount of 10 mg / kg / day was administered by oral gavage once a day using a sonde until 7 days after each day.
[0071]
Seven days later, the aseptically collected ventricle from the mouse was weighed, and the collected mouse ventricle was PBS (phosphate buffered saline, 1 ml) using an ultrasonic homogenizer (Astrason, trade name: Ultrasonic Convertor). , PH = 7.4) (conditions: 0 ° C., 30 seconds), centrifuged at 4 ° C., 14,000 rpm for 20 minutes, and the resulting supernatant was treated with IL-2, IL-12, Used as samples for IFN-γ and TNF-α assays.
[0072]
The protein concentration of each cytokine was measured by ELISA using a commercially available kit (Circulation. 100: 1102-1108, 1999). Mouse IL-2 and IFN-γ ELISA kits were purchased from GENZYME Corporation, Cambridge, U.S.A., and mouse IL-12 and TNF-α ELISA kits were purchased from ENDOGEN Inc., Cambridge, U.S.A.
[0073]
The total protein concentration in each supernatant was measured by the bicinchoninic acid (BCA) method, and the ratio of the cytokine concentration to the total protein concentration was calculated (J. Am. Coll. Cardiol. 33: 1400-1407, 1999). Each cytokine protein concentration was expressed as pg / mg total protein or ng / mg total protein. Statistical analysis was performed by one way ANOVA and Fisher's protected least significant difference test in the same manner as in Test Example 2.
[0074]
result
Of the above cytokines, the statistical analysis results for IFN-g in the myocardium are shown in the graph of FIG.
[0075]
As shown in FIG. 2, an increase in IFN-g in the myocardium was observed 7 days after virus inoculation in a concentration-dependent manner by cetirizine administration.
[0076]
As shown in Table 4 above, an improvement effect was observed by administration of cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof against cell damage caused by the virus. The agent of the present invention has a therapeutic effect on viral myocarditis or a viral disease associated with viral myocarditis, and is also effective in preventing the disease.
[0077]
Formulation Example 1
[0078]
(1) Tablet
[0079]
A cetirizine-containing tablet having the following composition is produced by a conventional method.
[0080]
Cetirizine 1 mg, lactose 90 mg, crystalline cellulose 25 mg, magnesium stearate 4 mg.
[0081]
Formulation Example 2
(2) Soft capsule (in 1 capsule)
[0082]
Composition: cetirizine 30 mg, polyethylene glycol-300 300 mg, polysorbate 80 20 mg
[0083]
Manufacturing method: According to a conventional method, polyethylene glycol-300 and polysorbate 80 are added to cetirizine and filled into soft capsules.
[0084]
Formulation Example 3
(3) Injection (1 ampoule in 10 ml)
[0085]
Composition: Cetirizine 0.3% (30 mg)
Polyethylene glycol-300 20% (2g)
Ethanol 60% (6g)
Make up to 10 ml with distilled water for injection.
[0086]
Production method: According to a conventional method, ethanol and polyethylene glycol-300 are added and dissolved in cetirizine, and distilled water for injection is added to make a total volume of 10 ml. Thereby, an injection containing 30 mg of cetirizine in one ampule is obtained.
[0087]
【The invention's effect】
As described above, according to the present invention, as an agent for preventing or treating viral myocarditis, an agent for preventing or treating viral diseases associated with viral myocarditis, and / or an agent for improving or preventing viral cell damage. Useful cetirizine or a pharmaceutically acceptable salt thereof is obtained.
[Brief description of the drawings]
1 is a graph showing the results of mouse survival rate in Test Example 1. FIG. A white circle indicates a control group (no cetirizine administration), a white square indicates a cetirizine high administration group, and a white triangle indicates a cetirizine low administration group.
FIG. 2 is a bar graph showing measurement results of IFN-g production in Test Example 3.

Claims (4)

  Prevention of viral myocarditis containing cetirizine ([2- [4-[(4-chlorophenyl) phenylmethyl] -1-piperazinyl] ethoxy] acetic acid) or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient or Therapeutic agent.   The prophylactic or therapeutic agent for viral myocarditis according to claim 1, wherein the viral myocarditis is caused by RNA virus or hepatitis virus.   The agent for preventing or treating viral myocarditis according to claim 2, wherein the RNA virus is orthomyxovirus or picornavirus.   A preventive or therapeutic agent for a viral disease associated with viral myocarditis, comprising cetirizine or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient; wherein the viral disease is viral hepatitis (type A, B, C, E, G, TTV), adenovirus infection, influenza, herpes infection, viral encephalitis, cytomegalovirus infection, viral enteritis or viral pericarditis A preventive or therapeutic agent for a selected viral disease.

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