JP4277104B2 - Manufacturing method of biosensor connecting sheet - Google Patents
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Description
本発明は、バイオセンサ連接シートの製造方法またはバイオセンサ連接シートに関する。 The present invention relates to a biosensor connection sheet manufacturing method or a biosensor connection sheet.
従来、使い捨て型のセンサ（特許文献１、特許文献３）としては、定量性を確保するために立体構造をとり、さらに毛細管現象（特許文献５、特許文献６）などを利用して試料液が自動的にセンサの内部に導入する仕組みが知られている（特許文献７）。たとえば図１に示すように、このような構成のセンサは、電気絶縁性の基板１上に、スペーサ３、更にカバー２を積層して組み立てられる。基板上には電極パターン４、カバー上には毛細管現象に必要な空気が抜けるために必要な空気排出口７が開けられている。基板１、スペーサ３、カバー２により検出部に一定量の試料液１２を毛細管現象により導入するための、片方に空気排出口７を備えた試料導入口６、試料搬送路８が形成される。また、これらの構成部品は各々所定の形状に予め打ち抜いておく必要があり、立体加工における各部品の正確な重ねあわせのための位置決めも必要となる。このため、構成部品の数が増えるに従って立体加工の工程が複雑になるという問題があった。
さらに、これらのセンサに分子識別素子やメデイエータなどの試薬の塗布（特許文献２、特許文献４）や妨害物質の影響から回避するための膜（特許文献８）の形成などを必要とする場合は、さらに複雑な工程となるという問題があった。
Furthermore, when these sensors require application of reagents such as molecular identification elements and mediators (
上述した従来のセンサは製造に多くの工程、材料を要し、複雑な構造をとらざるを得なかった。その結果として、製造ラインに多大な設備投資を必要とし、また製品の歩留まりも充分ではなく、コスト的に負担が大きかった。当然、材料調達時、製造時の環境負荷も大きいものであった。さらに特性上では複雑な工程、特に基板積層時の位置合わせなどのため、製造されたセンサ特性のばらつきの指標である変動係数（ＣＶ）も充分ではなかった。 The conventional sensor described above requires many processes and materials for manufacturing, and has to take a complicated structure. As a result, a large capital investment was required for the production line, the product yield was not sufficient, and the cost was high. Naturally, the environmental load at the time of material procurement and manufacturing was also large. Furthermore, the coefficient of variation (CV), which is an index of variations in the manufactured sensor characteristics, is not sufficient due to complicated processes, particularly alignment during substrate lamination.
本件発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究し、試料搬送溝が電極と直交し、かつ試薬層と重なるように、シート状基板とシート状カバーとを連続的に順次送り出して接着することにより、複雑な位置あわせを要することなく、簡便に、しかも大量に、複数のバイオセンサが連接したバイオセンサ連接シートが得られることを見いだし本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下を含む。
In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors have conducted intensive research, and successively fed out and adhered the sheet-like substrate and the sheet-like cover sequentially so that the sample transport groove is orthogonal to the electrode and overlaps the reagent layer. As a result, it has been found that a biosensor connection sheet in which a plurality of biosensors are connected can be obtained simply and in large quantities without requiring complicated alignment, and the present invention has been completed.
That is, the present invention includes the following.
〔１〕 本発明に係るバイオセンサ連接シートの製造方法は、長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状基板と、長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状カバーとを、接着剤層を介して接着することにより、
電気絶縁性の基板と、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、該接着剤層を介して基板と結合する電気絶縁性のカバーと、試料搬送路とを含むバイオセンサを、２以上含むバイオセンサ連接シートを得る方法であって、
前記シート状基板の接着面側には、Ｘ軸方向と平行又は直交する正負の少なくとも１組の電極が対向して、少なくとも１セット形成され、
前記シート状基板または前記シート状カバーの接着面側には、接着剤層が設けられ、該接着剤層によりパターン形成された試料搬送溝が前記電極と直交する向きに、少なくとも１つ形成され、
前記１組の電極または前記試料搬送溝の少なくとも一方が２つ以上存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差するようにＹ軸方向を位置決めして、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着することを特徴とする。
本発明において「１組の電極」は、いわゆる２極法だけではなく、３極法以上の電極を含む。
〔２〕 前記シート状基板と前記シート状カバーとを、Ｘ軸方向に連続的に送り出して接着することが好ましい。
〔３〕 前記１組の電極が、前記シート状基板のＹ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＸ軸方向に、１本形成されていてもよい。
〔４〕 前記１組の電極が、前記シート状基板のＸ軸方向に１セット形成され、
前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＹ軸方向に２本以上形成されていてもよい。
〔５〕 前記１組の電極が、前記シート状基板のＹ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＸ軸方向に２本以上形成されていてもよい。
〔６〕 前記１組の電極が、前記シート状基板のＸ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＹ軸方向に２本以上形成されていてもよい。
〔７〕 前記Ｘ軸方向と平行な向きに形成された各電極または前記Ｘ軸方向と平行な向きに形成された各試料搬送溝が、Ｘ軸方向に連続的に形成されていてもよい。
〔８〕 前記各１組の電極表面の一部または全部に、さらに試薬層が塗布された反応検出部が存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、前記電極と前記試料搬送溝とが交差し、かつ前記試薬層と前記試料搬送溝とが重なるように位置決めして、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着することできる。
〔９〕 本発明のバイオセンサ連接シートの製造方法においては、前記接着剤層と、前記試料搬送溝とを、前記シート状基板表面に形成して、前記基板と前記カバーとを接着することができる。
〔１０〕 本発明のバイオセンサ連接シートの製造方法においては、前記接着剤層と、前記試料搬送溝とを、前記シート状カバー表面に形成して、前記基板と前記カバーとを接着することがより好ましい。
〔１１〕 前記シート状基板または前記シート状カバーの同一表面上に、試料搬送溝と連通する試料導入口および空気排出口を設け、該試料導入口と該空気排出口とが、電極を挟んで対向するように接着してもよい。
〔１２〕 前記シート状基板または前記シート状カバーの同一表面上に、試料搬送路と連通する、少なくとも１つの試料導入口と、少なくとも２つの空気排出口とを設け、該試料導入口と該空気排出口とが、電極を挟んで対向するように接着してもよい。
〔１３〕 前記基板と前記カバーとに挟まれた接着剤層断面に、試料搬送路と連通する試料導入口および空気排出口が内包されていてもよい。
〔１４〕 前記基板と前記カバーとに挟まれた接着剤層断面に、試料搬送路と連通する、少なくとも１つの試料導入口と、少なくとも２つの空気排出口とが内包されていてもよい。
〔１５〕 本発明に係るバイオセンサ連接シートは、電気絶縁性の基板と、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、該接着剤層を介して基板と結合する電気絶縁性のカバーと、試料搬送路とを含むバイオセンサを、２以上含むバイオセンサ連接シートであって、
長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状基板と、長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状カバーと、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、試料搬送路とを含み、
前記シート状基板の接着面側の表面には、Ｘ軸方向と平行又は直交する正負の１組の電極が対向して、少なくとも１セット形成され、
前記シート状基板の接着面側または前記シート状カバーの接着面側の表面には、接着剤層が形成され、該接着剤層によりパターン形成された試料搬送溝が前記電極と直交する向きに、少なくとも１つ形成され、
前記１組の電極または前記試料搬送溝の少なくとも一方が２つ以上存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とが一致し、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差していることを特徴とする。
〔１６〕 前記バイオセンサ連接シートにおいて、前記Ｘ軸方向に形成された各電極および／または前記Ｘ軸方向に形成された各試料搬送溝は、Ｘ軸方向に連続的に設けられていることが好ましい。
〔１７〕 前記各１組の電極近傍または電極表面の一部もしくは全部に、さらに試薬層が塗布された反応検出部が存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とが一致し、前記電極と前記試料搬送溝とが交差し、かつ前記試薬層と前記試料搬送溝とが重っていてもよい。
[1] The method for producing a biosensor connecting sheet according to the present invention includes an electrically insulating sheet-like substrate in which the longitudinal direction is the X-axis direction and the short direction is the Y-axis direction; By bonding an electrically insulating sheet-like cover whose short direction is the Y-axis direction via an adhesive layer,
A biosensor including an electrically insulating substrate, an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, an electrically insulating cover coupled to the substrate through the adhesive layer, and a sample transport path; A method for obtaining a biosensor connecting sheet comprising two or more,
At least one set of positive and negative electrodes that are parallel or orthogonal to the X-axis direction is opposed to and formed on the adhesive surface side of the sheet-like substrate,
An adhesive layer is provided on the adhesive surface side of the sheet-like substrate or the sheet-like cover, and at least one sample transport groove patterned by the adhesive layer is formed in a direction perpendicular to the electrodes,
There are two or more of at least one of the set of electrodes or the sample transport groove,
The sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like substrate are aligned with the X-axis direction of the sheet-like cover, and the Y-axis direction is positioned so that the electrode and the sample transport groove intersect, It is characterized by adhering a sheet-like cover.
In the present invention, “one set of electrodes” includes not only a so-called two-pole method but also electrodes of a three-pole method or more.
[2] It is preferable that the sheet-like substrate and the sheet-like cover are continuously fed out in the X-axis direction and bonded.
[3] Two or more sets of the one set of electrodes may be formed in the Y-axis direction of the sheet-like substrate, and one sample transport groove may be formed in the X-axis direction of the sheet-like cover.
[4] The one set of electrodes is formed in one set in the X-axis direction of the sheet-like substrate,
Two or more sample transport grooves may be formed in the Y-axis direction of the sheet-like cover.
[5] Two or more sets of the one set of electrodes may be formed in the Y-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more of the sample transport grooves may be formed in the X-axis direction of the sheet-like cover.
[6] Two or more sets of the one set of electrodes may be formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more of the sample transport grooves may be formed in the Y-axis direction of the sheet-like cover.
[7] Each electrode formed in a direction parallel to the X-axis direction or each sample transport groove formed in a direction parallel to the X-axis direction may be continuously formed in the X-axis direction.
[8] There is a reaction detection part further coated with a reagent layer on part or all of the surface of each set of electrodes,
The X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover are made to coincide, the electrode and the sample transport groove intersect, and the reagent layer and the sample transport groove overlap each other. The sheet-like substrate and the sheet-like cover can be bonded together.
[9] In the biosensor connection sheet manufacturing method of the present invention, the adhesive layer and the sample transport groove may be formed on the surface of the sheet-like substrate, and the substrate and the cover may be bonded. it can.
[10] In the method for manufacturing a biosensor connection sheet of the present invention, the adhesive layer and the sample transport groove may be formed on the surface of the sheet-like cover, and the substrate and the cover may be bonded. More preferred.
[11] On the same surface of the sheet-like substrate or the sheet-like cover, a sample introduction port and an air discharge port communicating with the sample transport groove are provided, and the sample introduction port and the air discharge port sandwich the electrode. You may adhere | attach so that it may oppose.
[12] On the same surface of the sheet-like substrate or the sheet-like cover, at least one sample introduction port and at least two air discharge ports communicating with the sample conveyance path are provided, the sample introduction port and the air You may adhere | attach so that a discharge port may oppose on both sides of an electrode.
[13] A sample introduction port and an air discharge port communicating with the sample transport path may be included in a cross section of the adhesive layer sandwiched between the substrate and the cover.
[14] The cross section of the adhesive layer sandwiched between the substrate and the cover may include at least one sample inlet and at least two air outlets communicating with the sample transport path.
[15] The biosensor connecting sheet according to the present invention comprises an electrically insulating substrate, an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, and an electrically insulating material bonded to the substrate through the adhesive layer. A biosensor connecting sheet including two or more biosensors including a cover and a sample conveyance path,
An electrically insulating sheet-like substrate whose longitudinal direction is the X-axis direction and the short direction is the Y-axis direction, and an electrically insulating sheet-like cover whose longitudinal direction is the X-axis direction and whose transverse direction is the Y-axis direction And an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, and a sample transport path,
At least one set of positive and negative electrodes parallel to or orthogonal to the X-axis direction is opposed to the surface on the adhesive surface side of the sheet-like substrate,
An adhesive layer is formed on the adhesive surface side of the sheet-like substrate or the adhesive surface side of the sheet-like cover, and the sample transport groove patterned by the adhesive layer is oriented in a direction perpendicular to the electrodes. At least one formed,
There are two or more of at least one of the set of electrodes or the sample transport groove,
The X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover coincide with each other, and the electrode and the sample transport groove intersect each other.
[16] In the biosensor connecting sheet, each electrode formed in the X-axis direction and / or each sample transport groove formed in the X-axis direction may be provided continuously in the X-axis direction. preferable.
[17] A reaction detection part further coated with a reagent layer is present in the vicinity of each set of electrodes or part or all of the electrode surface,
Even if the X-axis direction of the sheet-like substrate coincides with the X-axis direction of the sheet-like cover, the electrode and the sample transport groove intersect, and the reagent layer and the sample transport groove overlap each other. Good.
本発明に係るバイオセンサ連接シートの製造方法によれば、前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差するようにＹ軸方向を位置決めして、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着するだけで、複雑な位置あわせを要することなく、簡便に、複数のバイオセンサが連接したバイオセンサ連接シートを得ることができる。このため生産性、経済性に優れ、かつ環境負荷の少ないバイオセンサの製造が可能となる。 According to the biosensor connecting sheet manufacturing method of the present invention, the X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover are matched, and the electrode and the sample transport groove intersect each other. By simply positioning the Y-axis direction and adhering the sheet-like substrate and the sheet-like cover, a biosensor connection sheet in which a plurality of biosensors are connected can be easily obtained without requiring complicated alignment. be able to. This makes it possible to manufacture a biosensor that is excellent in productivity and economy and has a low environmental load.
以下、本発明に係るバイオセンサの製造方法について、基板、カバー、接着剤層、電極、試薬層などの原料、さらに製造方法等について説明する。 Hereinafter, the biosensor manufacturing method according to the present invention will be described with respect to raw materials such as a substrate, a cover, an adhesive layer, an electrode, a reagent layer, and a manufacturing method.
基板、カバー、接着剤層、試料搬送溝、電極、試薬層
基板、カバー
本発明で用いることのできる電気絶縁性の基板としては、バイオセンサとしての使用に対して、必要な特性、たとえば、耐薬品性、耐熱性、耐屈曲性、寸法安定性などを有し、電気絶縁性であればよい。形状も限定されないが、板状、シート状が挙げられ、シート状の場合ロール状に巻くことができるものが好ましい。
Substrate, cover, adhesive layer, sample transport groove, electrode, reagent layer
Substrate, cover The electrically insulating substrate that can be used in the present invention has characteristics required for use as a biosensor, such as chemical resistance, heat resistance, bending resistance, and dimensional stability. However, it only needs to be electrically insulating. The shape is not limited, but examples thereof include a plate shape and a sheet shape. In the case of the sheet shape, those that can be wound into a roll shape are preferable.
前記基板の厚さは特に限定されないが、たとえば好ましくは１０〜２０００μｍ、さらに好ましくは１００〜５００μｍである。
基板の幅は製造するバイオセンサ、接着するために用いる装置の許容幅により異なり限定されないが、通常、０．３ｃｍ〜２ｃｍ程度の範囲にあればよい。
Although the thickness of the said board | substrate is not specifically limited, For example, Preferably it is 10-2000 micrometers, More preferably, it is 100-500 micrometers.
The width of the substrate varies depending on the allowable width of the biosensor to be manufactured and the apparatus used for bonding, and is not limited, but it may be in the range of about 0.3 cm to 2 cm.
このような基板としては、たとえば、プラスチック、生分解性材料、紙のいずれかを好ましく用いることができる。
プラスチックとしては、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレンナフタレート、ポリエーテルニトリル、ポリカーボネート、ポリアミドイミド、フェノール樹脂などが挙げられる。シート状に用いる場合ポリエチレンテレフタレートなどを好ましく用いることができる。
生分解性材料としては、好ましくはポリ乳酸が挙げられる。
As such a substrate, for example, plastic, biodegradable material, or paper can be preferably used.
Examples of the plastic include polyethylene terephthalate, polyethylene naphthalate, polyether nitrile, polycarbonate, polyamideimide, and phenol resin. When used in a sheet form, polyethylene terephthalate or the like can be preferably used.
The biodegradable material is preferably polylactic acid.
前記電気絶縁性のカバーとしては、前記基板と同様の材料を用いることができる。
前記カバーの厚さは特に限定されないが、たとえば好ましくは１０〜２０００μｍ、さらに好ましくは１００〜５００μｍである。
As the electrically insulating cover, the same material as the substrate can be used.
Although the thickness of the said cover is not specifically limited, For example, Preferably it is 10-2000 micrometers, More preferably, it is 100-500 micrometers.
基板、カバーの両方または片方に、バイオセンサを切り離すためのミシン目、切れ目が設けられていてもよい。さらに、ミシン目または切れ目は、前記１組の電極または試料搬送溝が、２セット（または２本）以上形成されている基板またはシートに、形成されていることが好ましい。ミシン目または切れ目の位置は、２セット（または２本）以上形成された１組の電極または試料搬送溝を、それぞれ隔てる位置であればよい。
基板とカバーのうちでは、基板とカバーのいずれか片方にミシン目又は切れ目設けられていることが好ましい。片方に設けられていれば、バイオセンサ連接シートを各バイオセンサに切り離す際の目印となるとともに、製造工程における位置あわせを減少させ、より簡便な製造方法とすることができる。
Perforations and cuts for separating the biosensor may be provided on both or one of the substrate and the cover. Further, it is preferable that the perforations or cuts are formed on a substrate or sheet on which two sets (or two) or more of the one set of electrodes or sample transport grooves are formed. The position of the perforation or cut may be a position that separates a set of electrodes or sample transport grooves formed in two sets (or two) or more.
Of the substrate and the cover, it is preferable that a perforation or a cut is provided on one of the substrate and the cover. If it is provided on one side, it becomes a mark when the biosensor connecting sheet is separated into each biosensor, and the positioning in the manufacturing process is reduced, so that a simpler manufacturing method can be obtained.
一方、ミシン目または切れ目が基板及びシートの両方に設けられている場合、製造工程における位置あわせを容易に行えるメリットがある。
ミシン目、切れ目の形状、寸法は特に限定されず、製造工程時に分離しない強度を保てればよい。
On the other hand, when perforations or cuts are provided in both the substrate and the sheet, there is an advantage that alignment in the manufacturing process can be easily performed.
There are no particular limitations on the shape and dimensions of the perforations and cuts, and it is only necessary to maintain strength that does not separate during the manufacturing process.
電極
本発明で用いることのできる電極材料としては、カーボン、白金や金、銀／塩化銀、銀、銅、パラジウム、イリジウム、鉛、ニッケル、チタン、酸化錫、白金黒などの金属類が挙げられる。これらは導電性に優れる。
電極の厚さは接着剤層の厚さより小さければ限定はされないが、通常、２００〜２０００オングストローム程度、好ましくは５００〜１０００オングストローム程度であることが望ましい。また、カーボン電極を基板上に形成させる場合、電極の厚さは接着剤層の厚さより小さければ限定はされないが、通常１〜１００μｍ程度、好ましくは３〜２０μｍ程度であることが望ましい。
このような範囲にあると、基板上に形成される電極のエッジが鋸状にならず、精度の高い電極となる。また、電極の剥離、断線を防止することができる。
Electrodes Examples of electrode materials that can be used in the present invention include metals such as carbon, platinum, gold, silver / silver chloride, silver, copper, palladium, iridium, lead, nickel, titanium, tin oxide, and platinum black. . These are excellent in conductivity.
Although the thickness of the electrode is not limited as long as it is smaller than the thickness of the adhesive layer, it is usually about 200 to 2000 angstrom, preferably about 500 to 1000 angstrom. When the carbon electrode is formed on the substrate, the thickness of the electrode is not limited as long as it is smaller than the thickness of the adhesive layer, but it is usually about 1 to 100 μm, preferably about 3 to 20 μm.
In such a range, the edge of the electrode formed on the substrate does not have a saw-like shape, and the electrode is highly accurate. In addition, electrode peeling and disconnection can be prevented.
このような電極は、蒸着法、スパッタリング法、メッキ法、ＣＶＤ法、塗布乾燥などにより基板に容易にパターン形成することができる。 Such an electrode can be easily patterned on a substrate by vapor deposition, sputtering, plating, CVD, coating and drying, and the like.
前記カーボンとしては、カーボンナノチューブ、カーボンマイクロコイル、カーボンナノホーン、フラーレン、デンドリマーおよびそれらの誘導体なども用いることができる。またこれらのカーボン粉末を用いることが好ましい。これらはその特性（構造、導電性など）から分子識別素子の固定化、電極材料に適している。 As the carbon, carbon nanotubes, carbon microcoils, carbon nanohorns, fullerenes, dendrimers, and derivatives thereof can also be used. Moreover, it is preferable to use these carbon powders. These are suitable for immobilization of molecular identification elements and electrode materials because of their characteristics (structure, conductivity, etc.).
前記カーボン粉末は、白金、金に比べると若干導電性に劣るものの、ペースト状となし、基板に塗布等することにより、銀粉末と同様、スクリーン印刷法などにより簡単に電極を形成することができる。さらに、白金や金などの微粒子状物質などもペースト状にして印刷により加工ができる。 The carbon powder is slightly inferior in conductivity compared to platinum and gold, but it can be easily formed by a screen printing method or the like, similar to silver powder, by applying a paste or the like to a substrate. . Furthermore, fine particles such as platinum and gold can be pasted and processed by printing.
タンパク質センサの場合、ニッケルを電極材料とすることが好ましい。ニッケルは所定の条件によりタンパク質のアミノ基を酸化し、タンパク質センサとなる。ＦＩＡ（フローインジェクションアナリシス）化も可能である。
前記電極は、＋電極と−電極とが対向する１組の電極を形成している。
このような電極は、＋と−とからなる２本の電極から構成されていてもよいし、２本以上であってもよい。
また、前記電極は、アレイを形成していてもよい。なお、本明細書において「アレイ」とは、整列配置されていることを意味する。
In the case of a protein sensor, nickel is preferably used as the electrode material. Nickel oxidizes the amino group of a protein under a predetermined condition to become a protein sensor. FIA (flow injection analysis) is also possible.
The electrodes form a pair of electrodes in which the + electrode and the − electrode face each other.
Such an electrode may be composed of two electrodes consisting of + and −, or may be two or more.
The electrodes may form an array. In the present specification, “array” means being arranged in an array.
接着剤層、試料搬送溝
本発明で用いることのできる接着剤層を形成する接着剤としては、アクリル樹脂系のものなどが挙げられる。
これらのうちでは、熱硬化性樹脂または光硬化性樹脂を好ましく用いることができる。
前記接着剤層の厚さは特に限定されないが、たとえば好ましくは５〜５００μｍ、更に好ましくは１０〜１００μｍ程度の範囲にあればよい。
Adhesive Layer, Sample Conveying Groove As the adhesive forming the adhesive layer that can be used in the present invention, an acrylic resin-based one can be used.
Among these, a thermosetting resin or a photocurable resin can be preferably used.
Although the thickness of the said adhesive bond layer is not specifically limited, For example, Preferably it is 5-500 micrometers, More preferably, it should just exist in the range of about 10-100 micrometers.
流路搬送溝の深さは、接着剤層の厚さに対応し、好ましくは５〜５００μｍ、更に好ましくは１０〜１００μｍ程度の範囲にあればよい。溝の幅は、好ましくは５０〜５０００μｍ、さらに好ましくは３００〜２０００μｍ、より好ましくは５００〜１０００μｍである。 The depth of the flow path conveying groove corresponds to the thickness of the adhesive layer, and is preferably in the range of about 5 to 500 μm, more preferably about 10 to 100 μm. The width of the groove is preferably 50 to 5000 μm, more preferably 300 to 2000 μm, and more preferably 500 to 1000 μm.
このような流路搬送溝あるいは流路搬送路は、接着剤層によりパターン形成される。接着剤層はスクリーン印刷法により、所望の流路搬送路を形成するよう形成することが好ましい。 Such a channel conveying groove or channel channel is patterned by an adhesive layer. The adhesive layer is preferably formed by screen printing so as to form a desired flow path conveyance path.
また接着剤層中に試薬を含ませ、スクリーン印刷法により接着剤層、更に必要に応じ試薬層を同時形成することも可能である。 It is also possible to include a reagent in the adhesive layer and simultaneously form the adhesive layer and, if necessary, the reagent layer by screen printing.
試薬層
本発明において、試薬層を用いる場合、試薬層としては、酵素、抗体、核酸、プライマー、ペプチド核酸、核酸プローブ、微生物、オルガネラ、レセプタ、細胞組織、クラウンエーテルなどの分子識別素子、メデイエータ、挿入剤、補酵素、抗体標識物質、基質、無機塩類、界面活性剤、脂質などを含有させることができる。これらは１種単独でまたは複数を組み合わせて用いることができる。
試料液が血液などの場合には、抗血液凝固剤としてヘパリンやプロリキシン−Ｓ、エチレンジアミン四酢酸、クエン酸の金属塩などを含有させてもよい。
Reagent layer When a reagent layer is used in the present invention, the reagent layer may be an enzyme, an antibody, a nucleic acid, a primer, a peptide nucleic acid, a nucleic acid probe, a microorganism, an organelle, a receptor, a cell tissue, a molecular identifier such as crown ether, a mediator, Intercalating agents, coenzymes, antibody labeling substances, substrates, inorganic salts, surfactants, lipids and the like can be included. These can be used singly or in combination.
When the sample solution is blood or the like, heparin, prolyxin-S, ethylenediaminetetraacetic acid, a metal salt of citric acid, or the like may be included as an anticoagulant.
前記酵素としては、オキシダーゼ又はデヒドロゲナーゼなどの酵素、例えばグルコースオキシダーゼ、フルクトシルアミンオキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ、尿酸オキシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、アルコールオキシダーゼ、グルタミン酸オキシダーゼ、ピルビン酸オキシダーゼ、グルコースデヒドロゲナーゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ、アルコールデヒドロゲナーゼ、コレステロールエステラーゼ、プロテアーゼ、ＤＮＡポリメラーゼなどが挙げられる。これらの酵素は、１種単独でまたは複数を組み合わせて用いることができる。 Examples of the enzyme include enzymes such as oxidase or dehydrogenase, such as glucose oxidase, fructosylamine oxidase, lactate oxidase, urate oxidase, cholesterol oxidase, alcohol oxidase, glutamate oxidase, pyruvate oxidase, glucose dehydrogenase, lactate dehydrogenase, alcohol dehydrogenase, cholesterol Examples include esterase, protease, and DNA polymerase. These enzymes can be used alone or in combination.
また、試薬層は、酵素単独ではなく、メデイエータと組合わせて含有させてもよい。このメデイエータとしてはフェリシアン化カリウム、フェロセン、ベンゾキノンから選択される。また、試薬層は塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの無機塩類とキンヒドロンとの組合せを含有させてもよい。 Further, the reagent layer may be contained in combination with a mediator instead of the enzyme alone. This mediator is selected from potassium ferricyanide, ferrocene, and benzoquinone. The reagent layer may contain a combination of inorganic salts such as sodium chloride and potassium chloride and quinhydrone.
試薬層にはプライマー、ＤＮＡポリメラーゼ、デオキシリボヌクレオチド三リン酸の組合せを含有させることもできる。さらに、試薬層にはプライマー、ＤＮＡポリメラーゼ、デオキシリボヌクレオチド三リン酸に、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの無機塩類とキンヒドロンを組合せて含有させることもできる。 The reagent layer may contain a combination of primer, DNA polymerase, and deoxyribonucleotide triphosphate. Further, the reagent layer may contain a combination of inorganic salts such as sodium chloride and potassium chloride and quinhydrone in primer, DNA polymerase, deoxyribonucleotide triphosphate.
バイオセンサをDNAチップとして用いる場合には試薬層として核酸プローブを固定化することができる。この場合には電極をアレイ状に配置させることが好適である。 When using a biosensor as a DNA chip, a nucleic acid probe can be immobilized as a reagent layer. In this case, it is preferable to arrange the electrodes in an array.
本発明では、該試薬層の表面に、界面活性剤、脂質などの試料液の移動を円滑にする化合物を被覆させることもできる。試薬層の表面に界面活性剤などが被覆されていれば、空気酸化による劣化をさらに抑制することができる。試料液が血液などの場合には、抗血液凝固剤としてヘパリンやプロリキシン−Ｓ、エチレンジアミン四酢酸、クエン酸の金属塩などを被覆してもよい。 In the present invention, the surface of the reagent layer can be coated with a compound that facilitates movement of the sample liquid such as a surfactant and lipid. If the surface of the reagent layer is coated with a surfactant or the like, deterioration due to air oxidation can be further suppressed. When the sample solution is blood or the like, heparin, prolixin-S, ethylenediaminetetraacetic acid, a metal salt of citric acid, or the like may be coated as an anticoagulant.
試薬層の厚さは特に限定されないが、たとえば好ましくは０．０５〜３００μｍ、 さらに好ましくは１〜１００μｍである。
試薬層は、前記各１組の電極表面の一部または全部に形成し、電極とともに反応検出部を構成することとなる。
Although the thickness of a reagent layer is not specifically limited, For example, Preferably it is 0.05-300 micrometers, More preferably, it is 1-100 micrometers.
The reagent layer is formed on a part or all of the surface of each set of electrodes, and constitutes a reaction detection unit together with the electrodes.
このような試薬層は、デスペンサなどにより滴下して乾燥するデスペンサー法、粘度を調節したスクリーン印刷法などにより形成することができ、これらのうちでは、デスペンサ法が好ましい。この試薬層の電極表面または基板表面への固定化は乾燥を伴う吸着法または共有結合法により行うことができる。
試薬層は一箇所に限らず、二箇所以上設置することができ、その際には２種類以上の異種の試薬層を設けてもよい。
Such a reagent layer can be formed by a dispenser method in which the reagent layer is dropped by a dispenser or the like and dried, a screen printing method in which the viscosity is adjusted, and the like, and among these, the dispenser method is preferable. The reagent layer can be immobilized on the electrode surface or substrate surface by an adsorption method involving drying or a covalent bonding method.
The reagent layer is not limited to one place, and two or more places can be provided. In that case, two or more kinds of different reagent layers may be provided.
試薬層が１種の場合は検知する物質は一つであるが、同時に、例えば２種類の物質を検知する場合は、図１０に示したように、異なる試薬層を一枚の電気絶縁性平面基板上に形成することもできる（たとえば、特開平１−２９１１５３号公報）。
２箇所以上の試薬層を設けた場合には、図１０に示したように、試薬層の中間に互いの溶解した試薬層の混合を防ぐために、これらの間に凸状の間仕切り部を備えることもできる。凸状の間仕切り部は、カーボン、レジスト、吸水性材料などを用いスクリーン印刷法などによって形成することができる。
When there is only one reagent layer, the number of substances to be detected is one. However, when two kinds of substances are detected at the same time, for example, as shown in FIG. It can also be formed on a substrate (for example, JP-A-1-291153).
When two or more reagent layers are provided, as shown in FIG. 10, a convex partition is provided between them in order to prevent mixing of the dissolved reagent layers in the middle of the reagent layer. You can also. The convex partition portion can be formed by a screen printing method using carbon, a resist, a water-absorbing material, or the like.
この場合、凸部の初期の厚みは接着剤層より薄くし、かつ折り曲げた場合、凸部の上部、左右は空いていなければならない。これは試料の通過を促すためである。
凸上の間仕切り部が吸水性材料の場合は、試料通過後、膨潤により互いの溶解試薬が混合しない機能を持つことができる。また電極が４本（図２０）でなく、３本で構成される場合は、図示してはいないが、たとえば真中の１本を共通対極として使用することもできる。
In this case, the initial thickness of the convex portion should be thinner than the adhesive layer, and when bent, the upper and left and right sides of the convex portion must be open. This is to facilitate the passage of the sample.
When the convex partition is made of a water-absorbing material, it can have a function of preventing mutual dissolution reagents from mixing due to swelling after passing through the sample. Further, when the number of electrodes is not four (FIG. 20) but three, it is not shown, but for example, the middle one can be used as a common counter electrode.
本発明では、試料搬送路から送り込まれる試料が、電極、または電極上の試薬層と接触することにより、電極における電気的な変化をモニタするバイオセンサの製造方法を提供する。
電極にニッケル電極を用いた場合には、試薬層がなくてもタンパク質を検知するたんぱく質センサ（たとえば、ＵＳ５６５３８６４）として用いることができる。また電極に白金電極を用いた場合には本センサを導電率センサ、過酸化水素センサ、更に酸素透過膜、電解質を併用すれば酸素センサとして利用することができる。
The present invention provides a method for producing a biosensor that monitors an electrical change in an electrode by bringing a sample fed from a sample transport path into contact with the electrode or a reagent layer on the electrode.
When a nickel electrode is used as the electrode, it can be used as a protein sensor (for example, US Pat. No. 5,653,864) that detects protein even without a reagent layer. When a platinum electrode is used as the electrode, this sensor can be used as an oxygen sensor by combining a conductivity sensor, a hydrogen peroxide sensor, an oxygen permeable membrane, and an electrolyte.
一方、試薬層を用いる場合、酵素とメデイエータを用いた血糖センサ、尿糖センサ、糖化ヘモグロビンセンサ（たとえば、特開２００１−２０４４９４号公報）、乳酸センサ、尿酸センサ、コレステロールセンサ、アルコールセンサ、グルタミン酸センサ、ピルビン酸センサ、リン酸センサ、ピロリン酸センサ、銀／塩化銀電極とキンヒドロン、無機塩を用いたｐＨセンサ（たとえば、特開平９−２２２４１４号公報）、ｐＨセンサとプライマー、ＤＮＡポリメラーゼなどを用いた一塩基多型センサ、固定化核酸プローブを用いたＤＮＡチップなどの各種バイオセンサを製造でき、各種の化学的、物理的状態を検出するセンサとして応用することができる。 On the other hand, when a reagent layer is used, blood glucose sensor, urine sugar sensor, glycated hemoglobin sensor (for example, JP-A-2001-204494), lactate sensor, uric acid sensor, cholesterol sensor, alcohol sensor, glutamic acid sensor using an enzyme and a mediator , Pyruvate sensor, phosphate sensor, pyrophosphate sensor, silver / silver chloride electrode and quinhydrone, pH sensor using inorganic salt (for example, Japanese Patent Laid-Open No. 9-222414), pH sensor and primer, DNA polymerase, etc. Various biosensors such as single nucleotide polymorphism sensors and DNA chips using immobilized nucleic acid probes can be manufactured, and can be applied as sensors for detecting various chemical and physical states.
バイオセンサ連接シートの製造方法
本発明に係るバイオセンサ連接シートの製造方法は、手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状基板と、長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状カバーとを、接着剤層を介して接着することにより、
電気絶縁性の基板と、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、該接着剤層を介して基板と結合する電気絶縁性のカバーと、試料搬送路とを含むバイオセンサを、２以上含むバイオセンサ連接シートを得る方法であって、
前記シート状基板の接着面側には、Ｘ軸方向と平行又は直交する正負の１組の電極が対向して、少なくとも１セット形成され、
前記シート状基板または前記シート状カバーの接着面側には、接着剤層が設けられ、該接着剤層によりパターン形成された試料搬送溝が前記電極と直交する向きに、少なくとも１つ形成され、
前記１組の電極または前記試料搬送溝の少なくとも一方が２つ以上存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差するようにＹ軸方向を位置決めして、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着することを特徴とする。
Manufacturing method of biosensor connecting sheet The manufacturing method of the biosensor connecting sheet according to the present invention includes an electrically insulating sheet-like substrate in which the hand direction is the X-axis direction and the short direction is the Y-axis direction, and the longitudinal direction is X. By adhering the electrically insulating sheet-like cover whose axial direction is the Y-axis direction via the adhesive layer,
A biosensor including an electrically insulating substrate, an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, an electrically insulating cover coupled to the substrate through the adhesive layer, and a sample transport path; A method for obtaining a biosensor connecting sheet comprising two or more,
On the adhesive surface side of the sheet-like substrate, at least one set of positive and negative electrodes parallel or orthogonal to the X-axis direction is opposed, and is formed.
An adhesive layer is provided on the adhesive surface side of the sheet-like substrate or the sheet-like cover, and at least one sample transport groove patterned by the adhesive layer is formed in a direction perpendicular to the electrodes,
There are two or more of at least one of the set of electrodes or the sample transport groove,
The sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like substrate are aligned with the X-axis direction of the sheet-like cover, and the Y-axis direction is positioned so that the electrode and the sample transport groove intersect, It is characterized by adhering a sheet-like cover.
なお、本明細書において、シート状基板およびシート状カバーの長手方向をＸ軸方向とし、Ｘ軸方向と垂直であるシート状基板およびシート状カバーの短手方向をＹ軸方向という。 In this specification, the longitudinal direction of the sheet-like substrate and the sheet-like cover is referred to as the X-axis direction, and the short direction of the sheet-like substrate and the sheet-like cover that is perpendicular to the X-axis direction is referred to as the Y-axis direction.
このような方法によれば、前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、前記電極と前記試料搬送溝とが交差するようにＹ軸方向の位置を調整して、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着するだけで、簡易に、複数のバイオセンサを含むバイオセンサ連接シートを製造することが可能である。特に、前記電極と前記試料搬送溝のいずれかが、Ｘ軸方向に連続的に形成されている場合、Ｘ軸方向の位置合わせが不要である。
なお、前記試料搬送溝は、前記シート状基板と前記シート状カバーとを貼り合わせることにより試料搬送路となる。
According to such a method, the X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover coincide with each other, and the position in the Y-axis direction is adjusted so that the electrode and the sample transport groove intersect. And it is possible to manufacture a biosensor connecting sheet including a plurality of biosensors simply by adhering the sheet substrate and the sheet cover. In particular, when either the electrode or the sample transport groove is continuously formed in the X-axis direction, alignment in the X-axis direction is not necessary.
The sample transport groove becomes a sample transport path by bonding the sheet-shaped substrate and the sheet-shaped cover together.
通常、バイオセンサの製造においては、たとえば、
１）基板に電極を形成（通常の形成条件）
２）接着剤層と試薬層を形成したシート状カバーと電極基板の貼り合せ
３）圧着
４）センサの切り出し
５）乾燥
６）包装
の工程が挙げられる。
Usually, in biosensor manufacturing, for example,
1) Electrode formation on the substrate (normal formation conditions)
2) Bonding of a sheet-like cover on which an adhesive layer and a reagent layer are formed and an electrode substrate 3) Crimping 4) Cutting out a sensor 5) Drying 6) Packaging steps.
本発明の製造方法においては、前記シート状基板およびシート状カバーを張り合わせればよいが、上記１）と２）の工程を実施するに際し、（ｉ）板状のものを貼り合わせる態様、あるいは（ｉｉ）前記シート状基板およびシート状カバーをそれぞれロール状に巻いて、２本のロールからそれぞれ平面状に伸ばした部材を連続的に張り合わせる態様が挙げられる。このうちでは、（ｉｉ）の態様が好ましい。すなわち、前記シート状基板と前記シート状カバーとを、Ｘ軸方向に連続的に送り出して接着することが好ましい。 In the production method of the present invention, the sheet-like substrate and the sheet-like cover may be bonded to each other. However, when the steps 1) and 2) are performed, ii) A mode in which the sheet-like substrate and the sheet-like cover are respectively wound in a roll shape, and members each stretched in a planar shape from two rolls are continuously bonded together. Among these, the mode (ii) is preferable. That is, it is preferable that the sheet-like substrate and the sheet-like cover are continuously fed out in the X-axis direction and bonded.
（ｉｉ）のロール状にして形成する場合、ロールから送り出された前記シート状基板および前記シート状カバーを連続して圧着により連続的に一定速度で貼り合せができる装置を用いることができる。
シート状基板とシート状カバーの送り出し速度は、好ましくは１〜５０ｃｍ／ｓ、さらに好ましくは５〜２０ｃｍ／ｓ程度にすることが好ましい。
このような速度範囲にすることにより、試料搬送溝が潰れることなく、また、基板とカバーとを、適切な密着性をもって接着させることができる。
接着は、接着剤層により圧着して行うことが好ましい。圧着の圧力は、バイオセンサが破損しない程度で、しかも、基板とカバーとが密着すればよく特に限定されないが、たとえば、０．５〜１０ｋｇ／ｃｍ2程度の範囲にあればよい。
加圧の際の温度は、用いる基板、カバーの材質にもよるが、好ましくは５〜７０℃、さらに好ましくは３０〜５０℃（酵素あり）、あるいは好ましくは５０〜２００℃、さらに好ましくは１００〜１５０℃（酵素なしでの基板への電極パターン形成）の範囲である。
When forming in the form of a roll of (ii), an apparatus capable of continuously bonding the sheet-like substrate and the sheet-like cover fed out from the roll continuously at a constant speed by pressure bonding can be used.
The feeding speed of the sheet-like substrate and the sheet-like cover is preferably 1 to 50 cm / s, more preferably about 5 to 20 cm / s.
By setting it as such a speed range, a sample conveyance groove | channel is not crushed and a board | substrate and a cover can be adhere | attached with appropriate adhesiveness.
Bonding is preferably performed by pressure bonding with an adhesive layer. The pressure of the pressure bonding is not particularly limited as long as the biosensor is not damaged and the substrate and the cover are in close contact with each other. For example, the pressure may be in the range of about 0.5 to 10 kg / cm 2 .
The temperature at the time of pressurization depends on the substrate used and the material of the cover, but is preferably 5 to 70 ° C, more preferably 30 to 50 ° C (with enzyme), or preferably 50 to 200 ° C, more preferably 100. It is the range of -150 degreeC (electrode pattern formation to the board | substrate without an enzyme).
（ｉｉ）の態様の場合、（ａ）使用するロールには既に電極および接着剤層、流路搬送溝が形成されているものであっても、（ｂ）基板あるいはカバーをロールから平面状に伸ばした状態のときに電極、接着剤層、流路搬送溝を形成してもよい。 In the case of (ii), even if (a) the roll to be used already has electrodes, an adhesive layer, and a channel conveying groove, (b) the substrate or cover is made flat from the roll. You may form an electrode, an adhesive bond layer, and a flow-path conveyance groove | channel in the extended state.
（ａ）の場合、ロールのY軸方向に平行した電極パターンを形成し、ロール状に巻くことが好ましい。また、電極パターン上にたとえば離型紙を基板の裏面にコーティングすることが好ましい。これにより電極パターンとシート基板との接着を防止できる。また、ロールのX軸方向に平行した電極パターンを形成させる場合、金属薄膜をテープ状のプラスチック基板上に形成することが好ましい。これにより、電極の歪みを防止できる。 In the case of (a), it is preferable that an electrode pattern parallel to the Y-axis direction of the roll is formed and wound into a roll shape. Moreover, it is preferable to coat a release paper, for example, on the back surface of the substrate on the electrode pattern. Thereby, the adhesion between the electrode pattern and the sheet substrate can be prevented. Moreover, when forming the electrode pattern parallel to the X-axis direction of a roll, it is preferable to form a metal thin film on a tape-shaped plastic substrate. Thereby, distortion of an electrode can be prevented.
（ｂ）の場合、ロールから平面上に伸ばされた基板上に、蒸着またはスクリーン印刷などの方法により、電極パターンを形成することができる。
上記のうちでは、（ｂ）ロールから平面状に延ばした状態のときに、電極、接着剤層をパターン形成し、さらに、次いで貼り合わせることが好ましい。
In the case of (b), an electrode pattern can be formed on a substrate extended from a roll onto a plane by a method such as vapor deposition or screen printing.
Among the above, it is preferable that (b) the electrode and the adhesive layer be formed into a pattern when the flat surface is extended from the roll, and then bonded together.
貼り合わせの方法については、例えば、シート状カバーに関し、ロール状のシート状カバーの内側に接着剤層（必要に応じて試薬搬送路をパターン形成して）および試薬層を形成させておき、上記１）の工程で形成されたシート上基板との貼り合せをする方法が挙げられる。 About the method of bonding, for example, regarding the sheet-like cover, an adhesive layer (with a reagent transport path formed as necessary) and a reagent layer are formed inside the roll-like sheet-like cover, and the above-mentioned The method of bonding with the board | substrate on a sheet | seat formed at the process of 1) is mentioned.
本発明では、たとえば、前記Ｘ軸方向と平行な向きに形成された各電極または前記Ｘ軸方向と平行な向きに形成された各試料搬送溝が、Ｘ軸方向に連続的に形成されている場合、Ｘ軸方向の位置決めを不要とすることができ、センサーチップの極めて効率的な連続生産が可能となる。 In the present invention, for example, each electrode formed in a direction parallel to the X-axis direction or each sample transport groove formed in a direction parallel to the X-axis direction is continuously formed in the X-axis direction. In this case, positioning in the X-axis direction can be eliminated, and extremely efficient continuous production of sensor chips is possible.
一方、上記のような態様でない場合、本発明では、必要に応じ、シート状カバー、シート状基板に位置決めがあってもよいことはいうまでもない。この場合、たとえば、位置決め用穴あるいは位置決め用印などが、シート状カバーおよびシート状基板のＸ軸方向に、シートの片側にあるいはシート両側に設けられていることが好ましい。この場合も、センサーチップの連続的な大量生産が可能となる。 On the other hand, if not in the above-described manner, it goes without saying that in the present invention, the sheet-like cover and the sheet-like substrate may be positioned as necessary. In this case, for example, it is preferable that positioning holes or positioning marks are provided on one side of the sheet or on both sides of the sheet in the X-axis direction of the sheet-like cover and the sheet-like substrate. Also in this case, continuous mass production of sensor chips becomes possible.
電極と試料搬送溝との、より具体的な態様としては、好ましくは下記の（１）〜（４）の態様が挙げられる。
（１）前記１組の電極が、前記シート状基板のＹ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＸ軸方向に、１本形成されている態様。（たとえば、図２、図１０など）
（２）前記１組の電極が、前記シート状基板のＸ軸方向に１セット形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＹ軸方向に２本以上形成されている態様。（たとえば、図４、図６、図８、図９など）
（３）前記１組の電極が、前記シート状基板のＹ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＸ軸方向に２本以上形成されている態様。（たとえば、図１１など）
（４）前記１組の電極が、前記シート状基板のＸ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＹ軸方向に２本以上形成されている態様。（たとえば、図１３、図１５、図１７など）
More specific embodiments of the electrode and the sample transport groove include the following embodiments (1) to (4).
(1) A mode in which two or more sets of the one set of electrodes are formed in the Y-axis direction of the sheet-like substrate, and one sample transport groove is formed in the X-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 2, FIG. 10, etc.)
(2) A mode in which one set of the one set of electrodes is formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more sample transport grooves are formed in the Y-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 4, FIG. 6, FIG. 8, FIG. 9 etc.)
(3) A mode in which two or more sets of the one set of electrodes are formed in the Y-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more of the sample transport grooves are formed in the X-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 11 etc.)
(4) A mode in which two or more sets of the one set of electrodes are formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more of the sample transport grooves are formed in the Y-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 13, FIG. 15, FIG. 17, etc.)
如何なる態様の製造方法を用いるかは、所望するバイオセンサの種類などにより異なり限定されない。 Which aspect of the manufacturing method is used depends on the type of biosensor desired and is not limited.
前記Ｘ軸方向と平行な向きに形成された各電極、前記Ｘ軸方向と平行な向きに形成された各試料搬送溝は、Ｘ軸方向に連続的に形成されていることが好ましい。
たとえば、前記態様（１）においては、前記シート状カバーのＸ軸方向に形成された試料搬送溝は、Ｘ軸方向に連続的に設けられていることが好ましい。
前記態様（２）においては、前記シート状基板のＸ軸方向に１セット形成された電極は、Ｘ軸方向に連続的に設けられていることが好ましい。
前記態様（３）においては、前記シート状カバーのＸ軸方向に２本以上形成された試料搬送溝は、それぞれＸ軸方向に連続的に設けられていることが好ましい。
前記態様（４）においては、前記シート状基板のＸ軸方向に２セット以上形成された各電極の対は、それぞれＸ軸方向に連続的に設けられていることが好ましい。
このように、電極又は試料搬送溝がＸ軸方向に連続的に設けられている場合、Ｘ軸方向の位置あわせをする必要がない。
Each electrode formed in a direction parallel to the X-axis direction and each sample transport groove formed in a direction parallel to the X-axis direction are preferably formed continuously in the X-axis direction.
For example, in the aspect (1), it is preferable that the sample transport groove formed in the X-axis direction of the sheet-like cover is continuously provided in the X-axis direction.
In the aspect (2), it is preferable that one set of electrodes formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate is continuously provided in the X-axis direction.
In the aspect (3), it is preferable that two or more sample transport grooves formed in the X-axis direction of the sheet-like cover are continuously provided in the X-axis direction.
In the aspect (4), it is preferable that two or more pairs of electrodes formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate are continuously provided in the X-axis direction.
Thus, when the electrode or the sample transport groove is continuously provided in the X-axis direction, there is no need to align in the X-axis direction.
また、前記各１組の電極近傍または電極表面の一部もしくは全部に、さらに試薬層が塗布された反応検出部が存在していてもよい。この場合、前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、前記電極と前記試料搬送溝とが交差し、かつ前記試薬層と前記試料搬送溝とが重なるように、Ｙ軸方向の位置決めして、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着することできる。
したがって、この場合においても、前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、前記電極と前記試料搬送溝とが交差し、かつ前記試薬層と前記試料搬送溝とが重なるように位置決めするだけで、簡易に、複数のバイオセンサを含むバイオセンサ連接シートを製造することができる。
また、本発明では、複数個のバイオセンサが連接しているシートとして得ることができる。
In addition, a reaction detection unit to which a reagent layer is further applied may be present in the vicinity of each set of electrodes or part or all of the electrode surface. In this case, the X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover are made to coincide, the electrode and the sample transport groove intersect, and the reagent layer and the sample transport groove overlap. In addition, the sheet-like substrate and the sheet-like cover can be bonded by positioning in the Y-axis direction.
Therefore, also in this case, the X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover are made to coincide, the electrode and the sample transport groove intersect, and the reagent layer and the sample transport groove The biosensor connecting sheet including a plurality of biosensors can be easily manufactured simply by positioning so as to overlap each other.
Moreover, in this invention, it can obtain as a sheet | seat where the some biosensor is connected.
本発明では、前記接着剤層と、前記試料搬送溝とを、前記シート状基板表面に形成して、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着してもよいし、前記接着剤層と、前記試料搬送溝とを、前記シート状カバー表面に形成して、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着してもよい。これらのうちでは、後者の方法が好ましい。電極の形成を基板に行い、試料搬送溝の形成をカバーに行うことにより、歩留まりの向上を図り、作業効率を向上させることができる。
前記試薬層は、スペーサの材料として用いる接着剤に混合させてもよい。
In this invention, the said adhesive layer and the said sample conveyance groove | channel may be formed in the said sheet-like board | substrate surface, and the said sheet-like board | substrate and the said sheet-like cover may be adhere | attached, The sample transport groove may be formed on the surface of the sheet-like cover, and the sheet-like substrate and the sheet-like cover may be bonded. Of these, the latter method is preferred. By forming the electrodes on the substrate and forming the sample transport groove on the cover, the yield can be improved and the working efficiency can be improved.
The reagent layer may be mixed with an adhesive used as a spacer material.
本発明では、前記シート状基板または前記シート状カバーの同一表面上に、試料搬送路と連通する試料導入口および空気排出口を有することができる。あるいは、前記シート状基板または前記シート状カバーの同一表面上に、試料搬送路と連通する、少なくとも１つの試料導入口と、少なくとも２つの空気排出口とを有するようにしてもよい。この場合も、試料導入口と空気排出口とが、電極を挟んで対向して試料搬送溝でつながるように、予め、基板またはカバー上に形成するだけでよく、位置あわせの負担が大幅に減少する。 In the present invention, a sample introduction port and an air discharge port communicating with the sample transport path can be provided on the same surface of the sheet substrate or the sheet cover. Alternatively, on the same surface of the sheet-like substrate or the sheet-like cover, at least one sample introduction port and at least two air discharge ports communicating with the sample transport path may be provided. Also in this case, it is only necessary to form the sample inlet and the air outlet on the substrate or cover in advance so that the sample inlet and the air outlet are opposed to each other with the sample transfer groove therebetween, and the burden of alignment is greatly reduced. To do.
さらに、本発明では、前記シート状基板と前記シート状カバーとに挟まれた接着剤層断面に、試料搬送路と連通する試料導入口および空気排出口が内包され、バイオセンサの使用時に、各バイオセンサを切り離した際、試料導入口および空気排出口が露出する構造となるようにしてもよい。また、前記シート状基板と前記シート状カバーとに挟まれた接着剤層断面に、試料搬送路と連通する、少なくとも１つの試料導入口と、少なくとも２つの空気排出口とが内包されるようにして、バイオセンサの使用時に、各バイオセンサを切り離した際、試料導入口および空気排出口が露出する構造となるようにしてもよい。
この場合、実際の使用においては、各バイオセンサをバイオセンサ連接シートから切り取ることにより、試料導入口および空気排出口を露出させることとなるから、試料搬送路の密閉状態を維持することが容易である。また、試料導入口と空気排出口と、電極との位置あわせをする必要がないので、生産効率が著しく高い。
Furthermore, in the present invention, a sample introduction port and an air discharge port communicating with the sample transport path are included in the cross section of the adhesive layer sandwiched between the sheet-like substrate and the sheet-like cover. When the biosensor is separated, the sample inlet and the air outlet may be exposed. Further, at least one sample introduction port and at least two air discharge ports communicating with the sample conveyance path are included in the cross section of the adhesive layer sandwiched between the sheet substrate and the sheet cover. When the biosensor is used, the sample introduction port and the air discharge port may be exposed when each biosensor is separated.
In this case, in actual use, the sample introduction port and the air discharge port are exposed by cutting each biosensor from the biosensor connection sheet, so that it is easy to maintain the sealed state of the sample transport path. is there. Moreover, since it is not necessary to align the sample introduction port, the air discharge port, and the electrode, the production efficiency is remarkably high.
このような試料導入口は試料搬送路に試料を注入できる位置であれば、試料搬送路の一端であっても中間地点であってもよい。 As long as such a sample introduction port is a position where a sample can be injected into the sample conveyance path, it may be one end or an intermediate point of the sample conveyance path.
前記発明において、試料導入口の周辺及び試料搬送溝の表面に界面活性剤、脂質を塗布することもできる。界面活性剤や脂質を塗布することにより、試料の移動を円滑にさせることが可能となる。また、試料導入口の先端部は曲線部を持つ構造とすることができる。 In the above invention, a surfactant or lipid may be applied to the periphery of the sample introduction port and the surface of the sample transport groove. By applying a surfactant or lipid, the sample can be moved smoothly. Moreover, the tip part of the sample introduction port can have a structure having a curved part.
前記接着剤層の一部は非接着剤領域であり、該非接着剤領域の一部が、端子接続用露出部を形成させていてもよい。また、前記端子接続用露出部を形成する前記非接着剤領域は、非接着層または脱着性粘着層であってもよい。 A part of the adhesive layer may be a non-adhesive region, and a part of the non-adhesive region may form an exposed portion for terminal connection. The non-adhesive region forming the terminal connection exposed portion may be a non-adhesive layer or a removable adhesive layer.
本発明では、複数個のバイオセンサを含むバイオセンサ連接シートが得られるが、前記各バイオセンサの境界部分の基板及びカバーに、各バイオセンサの切り離し用のミシン目または切れ目をあらかじめ設けて、基板とカバーの位置あわせすることが好ましい。 In the present invention, a biosensor connection sheet including a plurality of biosensors can be obtained. The substrate and the cover at the boundary portion of each biosensor are provided with perforations or cuts for separating each biosensor in advance. And the cover are preferably aligned.
バイオセンサ連接シート
本発明に係るバイオセンサ連接シートは、電気絶縁性の基板と、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、該接着剤層を介して基板と結合する電気絶縁性のカバーと、試料搬送路とを含むバイオセンサを、２以上含むバイオセンサ連接シートであって、
長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状基板と、長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状カバーと、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、試料搬送路とを含み、
前記シート状基板の接着面側の表面には、Ｘ軸方向と平行又は直交する正負の１組の電極が対向して、少なくとも１セット形成され、
前記シート状基板の接着面側または前記シート状カバーの接着面側の表面には、接着剤層が形成され、該接着剤層によりパターン形成された試料搬送溝が前記電極と直交する向きに、少なくとも１つ形成され、
前記１組の電極または前記試料搬送溝の少なくとも一方が２つ以上存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とが一致し、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差していることを特徴とする。
Biosensor connection sheet The biosensor connection sheet according to the present invention includes an electrically insulating substrate, an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, and an electrically insulating material that is bonded to the substrate through the adhesive layer. A biosensor connecting sheet including two or more biosensors including a cover and a sample transport path,
An electrically insulating sheet-like substrate whose longitudinal direction is the X-axis direction and the short direction is the Y-axis direction, and an electrically insulating sheet-like cover whose longitudinal direction is the X-axis direction and whose transverse direction is the Y-axis direction And an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, and a sample transport path,
At least one set of positive and negative electrodes parallel to or orthogonal to the X-axis direction is opposed to the surface on the adhesive surface side of the sheet-like substrate,
An adhesive layer is formed on the adhesive surface side of the sheet-like substrate or the adhesive surface side of the sheet-like cover, and the sample transport groove patterned by the adhesive layer is oriented in a direction perpendicular to the electrodes. At least one formed,
There are two or more of at least one of the set of electrodes or the sample transport groove,
The X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover coincide with each other, and the electrode and the sample transport groove intersect each other.
このようなバイオセンサ連接シートは、前記Ｘ軸方向に形成された各電極または前記Ｘ軸方向に形成された各試料搬送溝は、Ｘ軸方向に連続的に設けられていることが好ましい。
また、前記各１組の電極近傍または電極表面の一部もしくは全部に、さらに試薬層が塗布された反応検出部が存在し、前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とが一致し、前記電極と前記試料搬送溝とが交差し、かつ前記試薬層と前記試料搬送溝とが重っていてもよい。
また、前記バイオセンサ連接シートの製造方法において記載した各種の態様、構成材料を採用することができる。
In such a biosensor connecting sheet, each electrode formed in the X-axis direction or each sample transport groove formed in the X-axis direction is preferably provided continuously in the X-axis direction.
Further, there is a reaction detection unit coated with a reagent layer in the vicinity of each set of electrodes or in part or all of the electrode surface, and the X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover May coincide, the electrode and the sample transport groove intersect, and the reagent layer and the sample transport groove may overlap.
Moreover, various aspects and constituent materials described in the method for producing the biosensor connecting sheet can be employed.
たとえば、本発明のバイオセンサ連接シートにおいて、電極と試料搬送溝との、より具体的な態様としては、前述のように好ましくは下記の（１）〜（４）の態様が挙げられる。
（１）前記１組の電極が、前記シート状基板のＹ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＸ軸方向に、１本形成されている態様。（たとえば、図２、図１０など）
（２）前記１組の電極が、前記シート状基板のＸ軸方向に１セット形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＹ軸方向に２本以上形成されている態様。（たとえば、図４、図６、図８、図９など）
（３）前記１組の電極が、前記シート状基板のＹ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＸ軸方向に２本以上形成されている態様。（たとえば、図１１など）
（４）前記１組の電極が、前記シート状基板のＸ軸方向に２セット以上形成され、前記試料搬送溝が、前記シート状カバーのＹ軸方向に２本以上形成されている態様。（たとえば、図１３、図１５、図１７など）
For example, in the biosensor connecting sheet of the present invention, the more specific embodiments of the electrode and the sample transport groove include the following embodiments (1) to (4) as described above.
(1) A mode in which two or more sets of the one set of electrodes are formed in the Y-axis direction of the sheet-like substrate, and one sample transport groove is formed in the X-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 2, FIG. 10, etc.)
(2) A mode in which one set of the one set of electrodes is formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more sample transport grooves are formed in the Y-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 4, FIG. 6, FIG. 8, FIG. 9 etc.)
(3) A mode in which two or more sets of the one set of electrodes are formed in the Y-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more of the sample transport grooves are formed in the X-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 11 etc.)
(4) A mode in which two or more sets of the one set of electrodes are formed in the X-axis direction of the sheet-like substrate, and two or more of the sample transport grooves are formed in the Y-axis direction of the sheet-like cover. (For example, FIG. 13, FIG. 15, FIG. 17, etc.)
さらに、本発明では、前記シート状基板と前記シート状カバーとに挟まれた接着剤層断面に、試料搬送路と連通する試料導入口および空気排出口が内包され、バイオセンサの使用時に、各バイオセンサを切り離した際、試料導入口および空気排出口が露出する構造となるようにしてもよい。また、前記シート状基板と前記シート状カバーとに挟まれた接着剤層断面に、試料搬送路と連通する、少なくとも１つの試料導入口と、少なくとも２つの空気排出口とが内包されるようにして、バイオセンサの使用時に、各バイオセンサを切り離した際、試料導入口および空気排出口が露出する構造となるようにしてもよい。 Furthermore, in the present invention, a sample introduction port and an air discharge port communicating with the sample transport path are included in the cross section of the adhesive layer sandwiched between the sheet-like substrate and the sheet-like cover. When the biosensor is separated, the sample inlet and the air outlet may be exposed. Further, at least one sample introduction port and at least two air discharge ports communicating with the sample conveyance path are included in the cross section of the adhesive layer sandwiched between the sheet substrate and the sheet cover. When the biosensor is used, the sample introduction port and the air discharge port may be exposed when each biosensor is separated.
電極がアレイを形成していてもよい。このようにアレイを形成しているバイオセンサは、基板又はカバーの同一表面上に少なくとも１つの試料導入口が存在し、試料導入口と連通する試料搬送路の先には少なくとも一組の電極と交差していることが好ましい。
前記少なくとも１つの試料導入口は、該試料導入口から分岐する少なくとも２本の試料搬送路に連通し、前記試料搬送路の先には少なくとも一組の電極と交差していてもよい。
なお本明細書において「アレイ」とは、整列配置されていることを意味する。
The electrodes may form an array. In the biosensor forming the array in this manner, at least one sample introduction port exists on the same surface of the substrate or cover, and at least one set of electrodes is provided at the tip of the sample transport path communicating with the sample introduction port. It is preferable that they intersect.
The at least one sample introduction port may communicate with at least two sample conveyance paths branched from the sample introduction port, and may cross at least one pair of electrodes at the tip of the sample conveyance path.
In the present specification, “array” means being arranged in an array.
１つの試料導入口から少なくとも２本の試料液搬送路が分岐する場合、試料液がアレイ状の全ての試薬層に到達できるよう、試料搬送路内に界面活性剤を被覆したり、あるいは、試料液が血液などの場合には、抗血液凝固剤としてヘパリンやプロリキシン−Ｓ、エチレンジアミン四酢酸、クエン酸の金属塩などを被覆してもよい。 When at least two sample liquid transport paths branch from one sample introduction port, the sample transport path may be coated with a surfactant so that the sample liquid can reach all the reagent layers in the array, or the sample When the liquid is blood or the like, heparin, prolyxin-S, ethylenediaminetetraacetic acid, a metal salt of citric acid or the like may be coated as an anticoagulant.
このようなバイオセンサ連接シートは、それぞれを切り離して、個別のバイオセンサとして用いることができる。たとえば、試薬層の種類を変えることにより以下のような使用方法を採用できる。 Such biosensor connecting sheets can be used as individual biosensors by separating them. For example, the following usage method can be adopted by changing the type of the reagent layer.
例えば、酵素センサでは、検体の測定対象によって分子識別素子としての酵素の種類を変える。例えば測定対象が血糖（グルコース）、尿糖の場合はグルコースオキシターゼまたはグルコースデヒドロゲナーゼ、測定対象が糖化ヘモグロビンである場合は、フルクトシルアミンオキシダーゼとプロテアーゼの混合物、測定対象が乳酸の場合は乳酸オキシターゼ、測定対象が総コレステロールなどの場合はコレステロールエステラーゼとコレステロールオキシダーゼの混合物、測定対象が尿酸の場合は尿酸オキシダーゼ、測定対象がエタノールの場合はアルコールオキシターゼ、測定対象がグルタミン酸の場合はグルタミン酸オキシダーゼ、測定対象がピルビン酸の場合はピルビン酸オキシダーゼなどを用いる。 For example, in an enzyme sensor, the type of enzyme serving as a molecular identification element is changed depending on the subject to be measured. For example, glucose oxytase or glucose dehydrogenase when the measurement target is blood glucose (glucose), urine sugar, a mixture of fructosylamine oxidase and protease when the measurement target is glycated hemoglobin, lactate oxidase when the measurement target is lactic acid, measurement Mixture of cholesterol esterase and cholesterol oxidase when the target is total cholesterol, urate oxidase when the measurement target is uric acid, alcohol oxidase when the measurement target is ethanol, glutamate oxidase when the measurement target is glutamic acid, and pyruvine In the case of acid, pyruvate oxidase or the like is used.
上記酵素センサでは、酵素とともに電子伝達体（メディエータ）が使用される。メディエータにはフェリシアン化カリウム、フェロセン、フェロセン誘導体、ニコチンアミド誘導体、フラビン誘導体、ベンゾキノンおよびキノン誘導体などを用いる。 In the enzyme sensor, an electron carrier (mediator) is used together with the enzyme. As the mediator, potassium ferricyanide, ferrocene, ferrocene derivatives, nicotinamide derivatives, flavin derivatives, benzoquinone, quinone derivatives and the like are used.
ｐＨセンサの場合は、銀／塩化銀電極と他の電極を設けた基板上に塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの無機塩とキンヒドロンの試薬層を用いる。この場合、電極間電位の変化を測定することになる。 In the case of a pH sensor, an inorganic salt such as sodium chloride or potassium chloride and a quinhydrone reagent layer are used on a substrate provided with a silver / silver chloride electrode and another electrode. In this case, the change in the interelectrode potential is measured.
一塩基多型（ＳＮＰｓ）センサ(A.Ahmadian et al.,Biotechniques,32,748,2002)の場合は、上記ｐＨセンサ上に、更にプライマー、ＤＮＡポリメラーゼ、デオキシリボヌクレオチド三リン酸などの混合物を試薬として用い、試料中の被検体ＤＮＡとプライマーが相補する場合のｐＨの変化を測定する。 In the case of single nucleotide polymorphism (SNPs) sensors (A. Ahmadian et al., Biotechniques, 32, 748, 2002), a mixture of primer, DNA polymerase, deoxyribonucleotide triphosphate, etc. is used as a reagent on the above pH sensor. The change in pH when the analyte DNA in the sample and the primer are complementary is measured.
免疫センサでは、抗原抗体反応を利用し、例えばヒト血清アルブミンを測定する場合は、分子識別素子として抗アルブミンを用いる。なお、免疫センサにおいては、抗原抗体複合体の形成によって変動する電極間電位を測定することになる。 An immunosensor uses an antigen-antibody reaction, and for example, when measuring human serum albumin, anti-albumin is used as a molecular identification element. In an immunosensor, an interelectrode potential that varies with the formation of an antigen-antibody complex is measured.
微生物センサでは、分子識別素子として、例えばPseudomonas fluorescence（測定対象；グルコース）、Trichosporon brassicae（測定対象；エタノール）などの微生物を用いる。これらの微生物は、酸素呼吸（好気性）し、あるいは酸素のない環境で代謝物を生成するので、酸素呼吸量または代謝産物を電気的にとらえることになる。 In the microorganism sensor, microorganisms such as Pseudomonas fluorescence (measuring object: glucose) and Trichosporon brassicae (measuring object: ethanol) are used as the molecular identification element. Since these microorganisms breathe oxygen (aerobic) or produce metabolites in an oxygen-free environment, they will capture oxygen respiration or metabolites electrically.
オルガネラセンサでは、分子識別素子として細胞小器官を用いる。例えばミトコンドリアの電子伝達粒子を用いると、ＮＡＤＨが測定できる。この原理としては、ミトコンドリアの電子伝達粒子によりＮＡＤＨが酸化され、この際酸素が消費されるので、この酸素を指標としてＮＡＤＨやＮＡＤＰＨを測定することができる。 In the organelle sensor, an organelle is used as a molecular identification element. For example, NADH can be measured by using mitochondrial electron transfer particles. As this principle, NADH is oxidized by mitochondrial electron transfer particles, and oxygen is consumed at this time. Therefore, NADH and NADPH can be measured using this oxygen as an index.
レセプタセンサでは、分子識別素子として受容体である例えば細胞膜などを用いる。検体としては、ホルモンとか神経トランスミックが対象となる。測定原理としては、受容の変化を電位に変換し、電極を通じて測定することになる。 In the receptor sensor, a receptor such as a cell membrane is used as a molecular identification element. Specimens include hormones and neurotransmission. As a measurement principle, a change in acceptance is converted into a potential and measured through an electrode.
組織センサでは、分子識別素子として動植物の組織を用いる。動植物の組織としては、例えばカエルの皮膚とか、動物の肝切片、キウリ、バナナの皮などが使用できる。測定原理としては、例えばカエルの皮膚組織を用いたナトリウムセンサでは、カエルの皮膚組織がナトリウムイオンを選択的に透過し、その際皮膚組織の電位が変化するので、この電位変化を測定しナトリウムイオン量を求める。 Tissue sensors use animal and plant tissues as molecular identification elements. As animal and plant tissues, for example, frog skin, animal liver slices, cucumbers, banana peels and the like can be used. As a measurement principle, for example, in a sodium sensor using frog skin tissue, the frog skin tissue selectively permeates sodium ions, and the potential of the skin tissue changes at that time. Find the amount.
ここで述べたバイオセンサの応用途のひとつとして他にＤＮＡチップ（特開平５−１９９８９８号公報）が挙げられる。図２０、２２、２５に示すような電極のアレイ上（ＵＳ ４２２５４１０）に検出すべき多種類の目的遺伝子に対して相補性を持つ一本鎖の核酸プローブが多種類固定化されている。１電極に１種の核酸プローブが固定化されている。多数の目的遺伝子の存在の有無を確認するには、一本鎖に変性された遺伝子サンプルと核酸プローブのハイブリダイズ処理を行い、その後、二本鎖核酸に特異的に結合し、かつ電気化学的に活性な二本鎖認識体を添加する。洗浄後、基板を緩衝液存在下で折りたたみ、アレイ電極を作用極、上部の大きな電極を対極として電圧を電極ごとに順次印加していくと、二本鎖が形成されている場合、二本鎖の挿入剤が酸化され、酸化電流が流れる。二本鎖の形成されていない電極では挿入剤に起因する電流は流れない。電流の発生した電極の位置で核酸プローブの種類がわかるので目的遺伝子の存在の有無、定性が可能となる。なお、上記二本鎖認識体としてはアクリジンオレンジなどのインターカレーター（挿入剤）、トリス（フェナントロリン）コバルト錯体などのメタロインターカレーターなどを用いることができる Another example of the application of the biosensor described here is a DNA chip (Japanese Patent Laid-Open No. 5-199898). Many kinds of single-stranded nucleic acid probes having complementarity to many kinds of target genes to be detected are immobilized on an array of electrodes (US 4225410) as shown in FIGS. One type of nucleic acid probe is immobilized on one electrode. In order to confirm the presence or absence of a large number of target genes, a single-stranded denatured gene sample and a nucleic acid probe are hybridized, and then specifically bound to a double-stranded nucleic acid and electrochemically An active double-stranded recognizer is added to After washing, the substrate is folded in the presence of buffer solution, the array electrode is the working electrode, the upper electrode is the counter electrode, and voltage is applied to each electrode sequentially. The insertion agent is oxidized and an oxidation current flows. No current due to the intercalating agent flows at the electrode where the double strand is not formed. Since the type of the nucleic acid probe is known at the position of the electrode where the current is generated, the presence or absence of the target gene and the qualitativeness are possible. In addition, as said double strand recognition body, metallointercalators, such as intercalators (inserting agent), such as acridine orange, a tris (phenanthroline) cobalt complex, etc. can be used.
上述のようなバイオセンサを用いて測定する場合には、装置に上記バイオセンサを取り付け、バイオセンサに生じた電気的な値を測定する。
この装置は、バイオセンサの電気的な値を計測する計測部と、計測された値を表示する表示部とが備えられている。この計測部の計測方法としては、ポテンシャルステップクロノアンペロメトリーまたはクーロメトリー、ボルタンメトリー法などを用いることができる。また、この装置には計測値を保存するためのメモリを備えることもできる。また、測定値を遠隔的に管理する場合にはブルートゥースなどの無線手段を搭載してもよい。
When measurement is performed using the biosensor as described above, the biosensor is attached to the apparatus, and the electrical value generated in the biosensor is measured.
This apparatus includes a measurement unit that measures an electrical value of the biosensor and a display unit that displays the measured value. As a measuring method of the measuring unit, potential step chronoamperometry, coulometry, voltammetry, or the like can be used. In addition, this apparatus can be provided with a memory for storing measurement values. In addition, when managing the measurement values remotely, wireless means such as Bluetooth may be installed.
また、本発明のバイオセンサ連接シートにおいて、連接したバイオセンサを全て切り離さずに、基板の一部を結合ベルトとしてバイオセンサに連結させながら、バイオセンサを独立させて切り離して、バイオセンサを収納することができる。この場合、結合ベルトとなる基板部分には、収納用に折り曲げ可能な切り込みを有していることが好ましい。 Further, in the biosensor connection sheet of the present invention, the biosensor is housed by separating the biosensor independently while connecting a part of the substrate to the biosensor as a coupling belt without separating all the connected biosensors. be able to. In this case, it is preferable that the substrate portion serving as the coupling belt has a notch that can be bent for storage.
以下、本発明を実施例を用いて説明するが、本発明は本実施例に何ら限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although this invention is demonstrated using an Example, this invention is not limited to a present Example at all.
図２９は、シート状基板とシート状カバーとを、連続的に貼り合わせて、本発明に係るバイオセンサ連接シートを製造する例を示すものである。
シート状基板を巻いたローラーからシート上基板を送り出し、ついで、スクリーン印刷機により、電極パターンを印刷する。さらに、電極パターンを加熱して電極パターンを形成する。ついで、シート状カバーに関し、ロール状のシート状カバーの内側に接着剤層（必要に応じて試薬搬送路をパターン形成して）および試薬層を形成させておき、上記のようにして形成したシート状基板と貼り合せる。最後に、得られたバイオセンサ連接シートから個々のバイオセンサを打ち抜く。
FIG. 29 shows an example in which a biosensor connection sheet according to the present invention is manufactured by continuously laminating a sheet-like substrate and a sheet-like cover.
The substrate on the sheet is sent out from the roller around which the sheet-like substrate is wound, and then the electrode pattern is printed by a screen printer. Further, the electrode pattern is formed by heating the electrode pattern. Next, with respect to the sheet-like cover, an adhesive layer (with a reagent transport path formed as necessary) and a reagent layer are formed inside the roll-like sheet-like cover, and the sheet is formed as described above. Affixed to the substrate. Finally, individual biosensors are punched out from the obtained biosensor connection sheet.
図２ａは、バイオセンサ連接シートを組み立てる前の電極基板の平面図を示している。一枚の電気絶縁性で表面が平らで長い板部材、すなわち基板１の一部分で、その表面に２本一組の電極を含むパターン４がＹ軸方向に、複数個、規則的に、連接した状態で配列して形成されている。ここで「表面が平ら」とは人工的に型や切削、接着、エッチングなどで形成された凹凸がないことを意味する。連接されている電極を含むパターン４の両側には、バイオセンサ連接シートを組み立てた後に切り離すための切れ目５の部分が示されている。
この電極のパターン４は、Ｙ軸方向に形成され、図２ｂに示すＸ軸方向に連続的に形成された試薬搬送溝２５と直交する。また、この電極のパターン４の上部に、必要に応じて試薬層１０を設けることができる。
FIG. 2a shows a plan view of the electrode substrate before the biosensor connection sheet is assembled. One sheet of electrically insulating, flat and long plate member, that is, a part of the
This
図２bは、同じくバイオセンサ連接シートを組み立てる前のカバー２の平面図を示し、一枚の電気絶縁性で表面が平らで長い板部材、すなわちカバー２の一部分で、その表面にスペーサーを担う接着剤層３が形成されている。上下２本の前記接着剤層３の間、つまり、接着剤層が存在しない領域である試料搬送溝２４がＸ軸方向に連続的に形成されている。試料搬送溝２４は、後述する試料搬送路８を形成させるための溝である。
FIG. 2b also shows a plan view of the
このような図２aに示す基板と、図２ｂに示すカバーとを、Ｘ軸方向を同一にして接着する。試薬層１０が形成されている場合には、試薬層１０と試料搬送溝２４とが重複するように、試薬層１０あるいは試料搬送溝２４のいずれかを形成し、位置合わせして接着する。
Such a substrate shown in FIG. 2a and a cover shown in FIG. 2b are bonded with the same X-axis direction. When the
図２cは、本発明によって組み立てられたバイオセンサ連接シートから切り離した一つのバイオセンサの平面図を示す。前記基板１の電極４が形成されている面とカバー２の接着剤層３が形成されている面が重なり合うことで、複数のバイオセンサが連接した状態でバイオセンサ連接シートが形成され、図２aの基板１上の電極を含むパターン４の間隔に基づいて規定された境界線、すなわち、切れ目５に沿って切り離されたバイオセンサを示している。
FIG. 2c shows a plan view of one biosensor separated from the biosensor connection sheet assembled according to the present invention. The surface of the
本発明のバイオセンサ製造方法の特徴の一つは、上記バイオセンサの２枚の基板とカバーとを、貼り合せるのみの組立工程であって、試料搬送溝２４がＸ軸方向に連続的に形成されているので、基板とカバーとのＸ軸方向の位置決めを要せず、Ｙ軸方向の位置決めだけが必要である点にある。通常の場合、複数の積層工程を要するために、このように単純な位置決めのみではバイオセンサを組み立てることはできない。
One of the features of the biosensor manufacturing method of the present invention is an assembly process in which the two substrates and the cover of the biosensor are simply bonded together, and the
図２dは図２cの図で、カバー部材のみを除いた場合の構成図を示す。基板１上の形成してある２本１組の電極パターン４の上部には、試料搬送路８が直交し、その直交部分は反応検出部９となる。各バイオセンサを切り離し後、バイオセンサの切断面には、前記試料搬送路８の左端には試料導入口６が、また、右端には空気排出口が形成され、前記試料搬送路８内には必要に応じて、図示したような試薬層１０が形成されてもよい。
FIG. 2d is a diagram of FIG. 2c, and shows a configuration diagram when only the cover member is removed. A
図２eは、バイオセンサの使用例を示す。この図において、試料液１２は試料導入口６から導入され、試料搬送路８を搬送されて、電極４が直交する反応検出部９を満たす。このとき、空気排出口７からは試料液の搬送によって排出される空気が排出される。反応検出部９により検知された電気信号は端子１１を介して、測定器に送られる。
FIG. 2e shows an example of biosensor usage. In this figure, the
図３は図２dで示したバイオセンサがカバーを取り付けた場合における断面図を示す。 FIG. 3 shows a cross-sectional view of the biosensor shown in FIG.
実施例１の方法を適用して、図４に示す別のバイオセンサ連接シートを作製できる。
図４a〜bは、２本の電極がＸ軸方向に連続的に基板上に並列に設けられ（図４a(1)）、その上にパターン化された接着剤層、Ｙ軸方向と平行な流路搬送溝２５およびミシン目を設けた、Ｘ軸方向に長大なカバー（図４a(2)）を貼り合せて、図４ｂで示すバイオセンサ連接シートの製造工程を示す。
この場合、製造された連接式のバイオセンサ（図４b）には端子部分１１がカバー２の一部である端子保護カバー１４で覆われている。ここで、前記端子保護カバー１４には図４ｃ(1)で示すように、接着剤層は設けていない。また、バイオセンサの使用時には、前記端子保護カバー１４をミシン目１３に沿って、折り返す（図４c(1)）か、折りたたむ（図４c(2)）か、切り取る（図４c(3)）ことにより端子を露出させる。
By applying the method of Example 1, another biosensor connecting sheet shown in FIG. 4 can be produced.
4A and 2B, two electrodes are continuously provided in parallel on the substrate in the X-axis direction (FIG. 4a (1)), and an adhesive layer patterned thereon is parallel to the Y-axis direction. A manufacturing process of the biosensor connection sheet shown in FIG. 4B is shown by attaching a long cover (FIG. 4A (2)) in the X-axis direction provided with the flow path conveying groove 25 and perforation.
In this case, the
このバイオセンサ連接シートの製造工程では、電極がＸ軸方向に連続的に設けられているので、基板とカバーとのＸ軸方向の位置決めを要せず、Ｙ軸方向を調節するだけでよい。すなわち、２枚の基板およびカバーを長大なまま貼り合わせる連続的な加工法を採るだけでよい。そのためには、基板及びカバーはともに切断されていない連続したものであることが好ましい。しかし、その構造をとろうとすると端子部分１１がカバー２によってバイオセンサの内側に隠れてしまう。その問題を克服するため、カバー２に、図４ｂに示すようなミシン目１３を設ける。これにより、ミシン目１３は、カバー２を長大な構造で維持する役割と、バイオセンサの使用時、端子保護カバー１４で覆われた端子１１を露出させる役割の両者を果たすことができる。
図５は、図４c(1)-(2)で示したバイオセンサの断面図を示す。
In the manufacturing process of the biosensor connecting sheet, since the electrodes are continuously provided in the X-axis direction, positioning of the substrate and the cover in the X-axis direction is not required, and only the Y-axis direction needs to be adjusted. That is, it is only necessary to adopt a continuous processing method in which the two substrates and the cover are bonded together while being long. For this purpose, it is preferable that the substrate and the cover are both continuous and not cut. However, the
FIG. 5 shows a cross-sectional view of the biosensor shown in FIGS. 4c (1)-(2).
実施例１の方法を適用して、図６に示す別のバイオセンサ連接シートを作製できる。図６および図７は、図４とほぼ同じ方法により製造が可能である。図４で示す場合と異なる部分は、カバー２の接着剤層３内にあるスペーサーのない空間１８に２つの貫通穴１７が形成されていることで、図６ｃで示すように、これらの貫通穴１７はバイオセンサを形成時、試料導入口６と空気排出口７となる。即ち、試料導入口６および空気排出口７はバイオセンサの基板の間以外にも形成することができる。
By applying the method of Example 1, another biosensor connecting sheet shown in FIG. 6 can be produced. 6 and 7 can be manufactured by substantially the same method as FIG. 4 differs from the case shown in FIG. 4 in that two through
さらに、図６ｃに示すバイオセンサは、図４ｃと同じく、端子１１が端子保護カバー１４によって覆われており、使用時に２本のミシン目１３に従って端子保護カバー１４を折りたたむことで、端子１１が表に出る構造である。図７aでは、一度折り畳んだ端子保護カバー１４の形状を維持するための微小な粘着部分１９を設けている。
Furthermore, in the biosensor shown in FIG. 6c, the terminal 11 is covered with the terminal
実施例１の方法を適用して、図８に示す別のバイオセンサ連接シートを作製できる。図８は図４とほぼ同じ方法により製造できる。図４と異なる部分は、図４ではカバー２の接着剤層３の繰り返しパターンからもわかるように、同じ向きにバイオセンサが形成され（図４ｃ参照）、図８ｃでは２つのバイオセンサが反対向きになるように形成される。
また、図８ｃでは、端子保護カバー１４用のミシン目１３が１本のみ設けられている。このように、端子保護カバー１４用のミシン目１の本数については特に限定はされない。
By applying the method of Example 1, another biosensor connecting sheet shown in FIG. 8 can be produced. FIG. 8 can be manufactured by substantially the same method as FIG. 4, the biosensors are formed in the same direction (see FIG. 4 c), as can be seen from the repeated pattern of the
Further, in FIG. 8c, only one
実施例１の方法を適用して、図９に示す別のバイオセンサ連接シートを作製できる。
図９において、図４との違いは、図９a(2)に示すカバー２が、脱着性の粘着層１５の上に規則的に形成されており、そのために、図９a(1)に示す電極４を設けた基板１との貼り合わせによって形成されるバイオセンサには端子１１が露出している。図９の製法では、長大なテープなどで、粘着層１５の表面にカバー２を規則的に形成することで、図４と同様にバイオセンサのＸ軸方向への位置あわせを不要とすることができる。
By applying the method of Example 1, another biosensor connection sheet shown in FIG. 9 can be produced.
In FIG. 9, the difference from FIG. 4 is that the
実施例１の方法を適用して、図１０に示す別のバイオセンサ連接シートを作製できる。
図１０は図２に示したバイオセンサを２組の電極ごとに切り分けて形成している。このような構造により、試薬層は一箇所に限らず、二箇所以上設置することができ、その際には２種類以上の異種の試薬層を設けてもよい。また、２箇所以上の試薬層を設けた場合にはこれらの間に凸状の間仕切り部２０が備えることもできる。そして、この凸状の間仕切り部はスクリーン印刷法で形成することができる。この凸部の間仕切り部はカーボン、レジストまたは吸水性材料のいずれかから構成することができる。
また、図１０では、ミシン目が基板及びカバーの両方に設けられているが、いずれか片方でもよい（図示せず）。いずれか片方の場合、位置合わせがより容易である。
By applying the method of Example 1, another biosensor connecting sheet shown in FIG. 10 can be produced.
10 is formed by cutting the biosensor shown in FIG. 2 into two sets of electrodes. With such a structure, the reagent layer is not limited to one place but can be installed in two or more places. In that case, two or more kinds of different reagent layers may be provided. Moreover, when two or more reagent layers are provided, the
In FIG. 10, the perforation is provided on both the substrate and the cover, but either one may be provided (not shown). In either case, alignment is easier.
実施例１の方法を適用して、図１１〜１８に示す別のバイオセンサ連接シートを作製できる。
図１１から図１８は、図２から１０に示したバイオセンサの製造方法において、基板とカバーに設けられたバイオセンサ形成用のパターンが複数の列を成している場合を示している。具体的には、図１１と１２は図２、図１３と１４は図４、図１５と１６は図８、図１７と１８は図９に示されたバイオセンサ形成用のパターンが複数の列をそれぞれ成している。
By applying the method of Example 1, another biosensor connecting sheet shown in FIGS.
FIGS. 11 to 18 show a case where the biosensor forming patterns provided on the substrate and the cover form a plurality of rows in the biosensor manufacturing method shown in FIGS. Specifically, FIGS. 11 and 12 are shown in FIG. 2, FIGS. 13 and 14 are shown in FIG. 4, FIGS. 15 and 16 are shown in FIG. 8, and FIGS. Each of them.
実施例１と同様にして製造できる本発明のバイオセンサ連接シートの別の例を図１９〜２６に示す。
図１９〜図２６は、Ｙ軸方向の位置決めとＸ軸方向の位置決めが必要であるが、一度に大量のバイオセンサを含む、バイオセンサ連接シートを製造することができる。
この方法は、電極がアレイを形成しているバイオセンサを連接した状態で製造する工程、および、製造されたアレイ型バイオセンサの構成図や断面図、使用例などを示している。
Another example of the biosensor connection sheet of the present invention that can be manufactured in the same manner as in Example 1 is shown in FIGS.
19 to 26 require positioning in the Y-axis direction and positioning in the X-axis direction, but a biosensor connecting sheet including a large amount of biosensors can be manufactured at one time.
This method shows a process of manufacturing a biosensor in which electrodes form an array, and a configuration diagram, a cross-sectional view, and a usage example of the manufactured array biosensor.
図１９aは、１枚の長大な基板上に直列した１０組の電極２１を含むパターンが左右方向に複数個、連接した状態で、５つのパターンずつ平行して並んでいる。これにカバー２（図１９b）の接着剤層を含むカバーが重なると、図２０aの平面図に示す連接した状態のバイオセンサが製造される。ここでは、連接して製造されたセンサを切り離すため、切り離す部分は、電極の配線２２や端子１１に損傷を与えないための十分な空きスペースを設けている。図２０bはこのようにして製造されたアレイ型バイオセンサの平面図および断面図を示す。このアレイ型バイオセンサは電極の配線２２および端子１１が基板１の内部に位置し、基板１とカバー２の間に挟まれたバイオセンサ上端中央に試料導入口６があり、それと連通して試料搬送路８が１０組の電極２１と直交して形成され、空気排気口７はカバー２の下端中央に設けられている。このアレイ型バイオセンサの使用例を図２０c〜dに示す。
In FIG. 19a, a plurality of patterns including 10 sets of
図２１〜２３には、１個の試料導入口６につながる試料搬送路８が複数本分岐し、各試料搬送路８には直列した１０組の電極２１が直交するように形成され、その先には空気排出口７が設けられたアレイ型バイオセンサの製造工程（図２１a、b）および、製造されるアレイ型バイオセンサの展開図（図２２a）、平面図（図２２b）、断面図（図２３）を示す。
21 to 23, a plurality of
同様に、図２４〜２６には、試料導入口６、試料搬送路８、電極２１を含む反応検出部９、空気排出口７を１セットとした２０行１０列のアレイ型バイオセンサの製造工程（図２４a,b）および、製造されるアレイ型バイオセンサの展開図（図２５a）、平面図（図２５b）、断面図（図２６）を示す。
Similarly, FIGS. 24 to 26 show a manufacturing process of an array-type biosensor of 20 rows and 10 columns including a
図２１〜２６に示す２種類のアレイ型バイオセンサはいずれも、基板１およびカバー２が脱着剤層を有した長大なテープ上に規則的に形成された状態のものを貼り合わせることで製造される。この方式は、図１７、１８で示した方法と同じである。
Each of the two types of array-type biosensors shown in FIGS. 21 to 26 is manufactured by laminating a
図１９〜２６に示す３種類のアレイ型バイオセンサはいずれも、各電極２１上に、試薬層１０を設けることもでき、たとえば、塩基配列の異なるＤＮＡを、各組の電極上にある試薬層に固定化することで、一塩基多型（ＳＮＰｓ）を含め、複数のＤＮＡ配列の検出に用いることができる。この形態のバイオセンサは、一定量の測定試料液を試料搬送路８に取り込むことができるので、測定の再現性があり、平面基板上に試料液を滴下して反応を検出するタイプにくらべ、微量試料液の測定時における蒸発および乾燥の影響を受けにくいなどの特徴がある。
In any of the three types of array-type biosensors shown in FIGS. 19 to 26, the
図２７および２８は、長大な基板１とカバー２とを連続的に貼り合わせることで連接して製造される本発明によるバイオセンサの製造方法の応用例を示している。図２７a (1),(2)は長大な２枚の板部材の平面図であり、図２７a (1)には電極を含むパターン４が基板１を成す板部材に連接した状態で設けられ、 図２７a (2)には個々のバイオセンサを規定するための接着剤層３がスペーサーとしてパターン化された状態で設けられている。特に、図２７a (1)に示す基板１を成す板部材には、個々のバイオセンサを規定する基板１部分の一部を除く周囲に切れ目（カット部分）５が入っており、その基板１と平行して、上部には、等間隔にミシン目１３が設けられた長大な板部材が連接した状態で設けられている。この部分は、図２７bに示すように、バイオセンサを連接するための、折り曲げ自在なベルトの役目を果たす。図２７c(1)は連接したバイオセンサの一部を平面図で示し、図２７c(2)はそのバイオセンサを連接した状態のまま使用する場合の例を示している。このようにして製造されたバイオセンサは図２８aに示すように、連接した状態のままの保存ができ、使用時または使用後に切り離すことができる（図２８b）。
27 and 28 show an application example of the manufacturing method of the biosensor according to the present invention, which is manufactured by continuously joining the
このような形態のバイオセンサを作ることにより、例えば、連接した状態のバイオセンサが規則的に折り畳まれたり、ロール状になって収納することで、カセット式のバイオセンサを実現することができる。 By making such a form of biosensor, a cassette-type biosensor can be realized by, for example, regularly connecting the biosensor in a connected state or storing it in a roll shape.
１ 基板
２ カバー
３ 接着剤層
４ 電極を含むパターン
５ カット部分
６ 試料導入口
７ 空気排出口
８ 試料搬送路
９ 反応検出部
１０ 試薬層
１１ 端子
１２ 試料液
１３ ミシン目
１４ 端子保護カバー
１５ 脱着剤層
１６ バイオセンサ本体
１７ 貫通穴
１８ スペーサーのない空間
１９ 脱着用接着剤
２０ 凸部
２１ 電極
２２ 配線
２３ スペーサー用板部材
２４ 試料搬送溝
DESCRIPTION OF
Claims (4)
電気絶縁性の基板と、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、該接着剤層を介して基板と結合する電気絶縁性のカバーと、試料搬送路とを含むバイオセンサを、２以上含むバイオセンサ連接シートを得る方法であって、
前記シート状基板の接着面側の表面には、Ｘ軸方向と平行又は直交する正負の１組の電極が対向して、少なくとも１セット形成され、
前記シート状基板または前記シート状カバーの接着面側の表面には、接着剤層が形成され、該接着剤層によりパターン形成された試料搬送溝が前記電極と直交する向きに、少なくとも１つ形成され、
前記１組の電極または前記試料搬送溝の少なくとも一方が２つ以上存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とを一致させ、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差するようにＹ軸方向を位置決めして、前記シート状基板と前記シート状カバーとを接着することを特徴とするバイオセンサ連接シートの製造方法。 An electrically insulating sheet-like substrate whose longitudinal direction is the X-axis direction and the short direction is the Y-axis direction, and an electrically insulating sheet-like cover whose longitudinal direction is the X-axis direction and whose transverse direction is the Y-axis direction Are bonded through an adhesive layer,
A biosensor including an electrically insulating substrate, an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, an electrically insulating cover coupled to the substrate through the adhesive layer, and a sample transport path; A method for obtaining a biosensor connecting sheet comprising two or more,
At least one set of positive and negative electrodes parallel to or orthogonal to the X-axis direction is opposed to the surface on the adhesive surface side of the sheet-like substrate,
An adhesive layer is formed on the surface of the sheet-like substrate or the cover of the sheet-like cover, and at least one sample transport groove patterned by the adhesive layer is formed in a direction perpendicular to the electrodes. And
There are two or more of at least one of the set of electrodes or the sample transport groove,
The sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like substrate are aligned with the X-axis direction of the sheet-like cover, and the Y-axis direction is positioned so that the electrode and the sample transport groove intersect, A method for producing a biosensor connecting sheet, comprising bonding a sheet-like cover.
長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状基板と、長手方向がＸ軸方向で、短手方向がＹ軸方向である電気絶縁性のシート状カバーと、該基板上に形成された電極と、接着剤層と、試料搬送路とを含み、
前記シート状基板の接着面側の表面には、Ｘ軸方向と平行又は直交する正負の１組の電極が対向して、少なくとも１セット形成され、
前記シート状基板の接着面側または前記シート状カバーの接着面側の表面には、接着剤層が形成され、該接着剤層によりパターン形成された試料搬送溝が前記電極と直交する向きに、少なくとも１つ形成され、
前記１組の電極または前記試料搬送溝の少なくとも一方が２つ以上存在し、
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とが一致し、かつ前記電極と前記試料搬送溝とが交差していることを特徴とするバイオセンサ連接シート。 A biosensor including an electrically insulating substrate, an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, an electrically insulating cover coupled to the substrate through the adhesive layer, and a sample transport path; A biosensor connecting sheet comprising two or more,
An electrically insulating sheet-like substrate whose longitudinal direction is the X-axis direction and the short direction is the Y-axis direction, and an electrically insulating sheet-like cover whose longitudinal direction is the X-axis direction and whose transverse direction is the Y-axis direction And an electrode formed on the substrate, an adhesive layer, and a sample transport path,
At least one set of positive and negative electrodes parallel to or orthogonal to the X-axis direction is opposed to the surface on the adhesive surface side of the sheet-like substrate,
An adhesive layer is formed on the adhesive surface side of the sheet-like substrate or the adhesive surface side of the sheet-like cover, and the sample transport groove patterned by the adhesive layer is oriented in a direction perpendicular to the electrodes. At least one formed,
There are two or more of at least one of the set of electrodes or the sample transport groove,
The biosensor connecting sheet, wherein the X-axis direction of the sheet-like substrate and the X-axis direction of the sheet-like cover coincide with each other, and the electrode and the sample transport groove intersect each other.
前記シート状基板のＸ軸方向と前記シート状カバーのＸ軸方向とが一致し、前記電極と前記試料搬送溝とが交差し、かつ前記試薬層と前記試料搬送溝とが重っていることを特徴とする請求項２または３に記載のバイオセンサ連接シート。 In the vicinity of each set of electrodes or a part or all of the electrode surface, there is a reaction detection part further coated with a reagent layer,
The X-axis direction of the sheet-like substrate coincides with the X-axis direction of the sheet-like cover, the electrode and the sample transport groove intersect, and the reagent layer and the sample transport groove overlap each other. The biosensor connecting sheet according to claim 2 or 3 , wherein
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