JP4273157B2 - Kefir-like carbonate-containing yogurt with antiallergic effect and method for producing the same - Google Patents

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Description

本発明は、抗アレルギー効果のあるケフィア様炭酸含有ヨーグルトおよびその製造方法に関するものであり、さらに詳しくは、乳糖非発酵性酵母菌と乳糖発酵性乳酸菌を種菌としてつくられる、製造後の過剰なガス生成を抑えたケフィア様炭酸含有ヨーグルトであって、好ましくは乳糖非発酵性酵母菌として抗アレルギー効果を有するサッカロミセス・セレビシエを、また乳糖発酵性乳酸菌として少なくともラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスを含む混合乳酸菌を種菌として製造されるI型アレルギー症状の改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルトに関するものである。   The present invention relates to a kefir-like carbonic acid-containing yogurt having an antiallergic effect and a method for producing the same, and more particularly, an excess gas after production produced by using non-lactose yeast and lactose-fermenting lactic acid bacteria as seeds. A kefir-like carbonate-containing yogurt with reduced production, preferably Saccharomyces cerevisiae having an antiallergic effect as a non-lactose fermenting yeast, and at least Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus as a lactose-fermenting lactic acid bacterium The present invention relates to a kefir-like carbonic acid-containing yogurt that is effective in improving type I allergic symptoms produced by using a mixed lactic acid bacterium as an inoculum.

従来、酵母菌と乳酸菌の共生関係を利用してつくる発酵乳としては、中央アジアから旧ソ連邦の広い地域にかけて伝統的に食されているケフィアがよく知られている。
ケフィアは、酵母菌と乳酸菌から構成されるカリフラワー状の形をしたケフィア粒といわれる種菌を乳に加え、発酵させてつくられる酸乳で、適度な酸味に加え、さわやかな炭酸感が味わえることが特徴である。またケフィアは保健的機能性に富んだ食品としても良く認知されており、今までに抗アレルギー、胃腸病、糖尿病、高血圧、抗癌作用などの効用が見つかっている。
特に近年、先進国を中心にアトピー性皮膚炎、花粉症、食物アレルギーといったI型アレルギー疾患の患者が年々増加していることから、ケフィアによるアレルギー治療は大いに期待されるところである。
Conventionally, kefir traditionally eaten from Central Asia to a wide area of the former Soviet Union is well known as fermented milk made using the symbiotic relationship between yeast and lactic acid bacteria.
Kefir is a sour milk made by adding inoculum called kefir grains in the shape of cauliflower composed of yeast and lactic acid bacteria to milk and fermenting it. In addition to moderate acidity, it can taste a refreshing carbonic feeling It is a feature. Kefir is also well-recognized as a food with good health and functionality, and has been found to have anti-allergic, gastrointestinal, diabetes, hypertension, and anticancer effects.
Particularly in recent years, patients with type I allergic diseases such as atopic dermatitis, hay fever and food allergies are increasing year by year mainly in developed countries, and therefore allergy treatment with kefir is highly expected.

このように味覚的にも保健機能的にも優れたケフィアではあるが、従来のケフィア粒を使った工業的生産には技術的課題が存在している。
それは、ケフィア粒を構成している酵母菌の中には乳糖を資化してアルコール発酵をおこない、その結果多量のエタノールと炭酸ガスを生成する菌種が含まれていることである。そのため、過剰に生成された炭酸ガスが原因で、しばしば容器の膨張や破裂が生じることが問題となっている。
Thus, although it is a kefir excellent in taste and health function, there are technical problems in industrial production using conventional kefir grains.
That is, some yeasts that make up kefir grains contain bacterial species that assimilate lactose and perform alcoholic fermentation, resulting in a large amount of ethanol and carbon dioxide. Therefore, the problem is that the container often expands or ruptures due to excessively generated carbon dioxide gas.

こうしたトラブルを防ぐ手段として、ケフィア粒を使わずに特定の酵母菌種、具体的には乳糖非発酵性酵母菌種、ならびに乳酸菌種を種菌として併用することで過剰な炭酸ガス生成を抑えたケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製法がすでに提案されている(特許文献1〜5参照)。   As a means to prevent such troubles, kefir suppresses excessive carbon dioxide generation by using a specific yeast species, specifically non-lactose-fermenting yeast species, and lactic acid bacteria species as seed bacteria without using kefir grains. A method for producing a similar carbonate-containing yogurt has already been proposed (see Patent Documents 1 to 5).

これらによれば、乳糖非発酵性酵母を唯一の酵母種菌として、この酵母菌と乳酸菌を併用して乳を発酵させることにより、酵母菌による乳糖からのアルコール発酵を抑えることが出来き、過剰なガス生成を心配すること無くケフィア様炭酸含有ヨーグルトの工業的生産が可能となるのである。
この場合、乳糖非発酵性酵母菌は、乳酸菌による乳酸発酵の過程で蓄積されたグルコースやガラクトースを利用することでアルコール発酵をおこない、僅かな量のエタノールと炭酸ガスを生成することになる。
According to these, the lactose non-fermentable yeast is the only yeast inoculum, and by fermenting milk using this yeast and lactic acid bacteria in combination, alcohol fermentation from lactose by the yeast can be suppressed, and excess This enables industrial production of kefir-like carbonic acid-containing yogurt without worrying about gas generation.
In this case, the lactose non-fermentable yeasts undergo alcoholic fermentation by using glucose and galactose accumulated in the process of lactic acid fermentation by lactic acid bacteria, and generate a small amount of ethanol and carbon dioxide.

しかしながら現在までのところ、乳糖非発酵性酵母菌を唯一の酵母種菌として乳酸菌と併用して乳を発酵させる製法では、過剰な炭酸ガス生成を抑えたケフィア様炭酸含有ヨーグルトは提供できるものの、望まれているような抗アレルギー効果のあるケフィア様炭酸含有ヨーグルトを提供するには至っていない。   However, to date, the method of fermenting milk using lactose non-fermentable yeast as the only yeast inoculum together with lactic acid bacteria can provide kefir-like carbonate-containing yogurt that suppresses excessive carbon dioxide production, but is desirable. It has not yet been possible to provide a kefir-like carbonic acid-containing yogurt with an antiallergic effect.

このような状況のもと、最近になって、エンテロコッカス・フェカリス(特許文献6〜7参照)、ラクトバチルス・ロイテリ(特許文献7参照)、ラクトバチルス・アシドフィルス(特許文献8参照)、ラクトバチルス・パラカゼイ(特許文献9参照)といった乳酸菌種の中から抗アレルギー作用を有する菌株が見出され、それら菌株を使った抗アレルギー剤が提案されている。   Under such circumstances, recently, Enterococcus faecalis (see Patent Documents 6 to 7), Lactobacillus reuteri (see Patent Document 7), Lactobacillus acidophilus (see Patent Document 8), Lactobacillus Strains having an antiallergic action are found among lactic acid bacteria species such as Paracasei (see Patent Document 9), and antiallergic agents using these strains have been proposed.

そしてこれにより、それら有用乳酸菌株と乳糖非発酵性酵母菌を併用することで抗アレルギー効果のあるケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造が可能となったが、この方法においても製法上充分満足できるものではない。   As a result, it became possible to produce kefir-like carbonic acid-containing yogurt with antiallergic effects by using these useful lactic acid strains and lactose non-fermenting yeast in combination. Absent.

その理由としては、上記乳酸菌種はいずれも乳中での増殖性が悪く、そのためにこれら乳酸菌を種菌にしてケフィア様炭酸含有ヨーグルトをつくる場合、ヨーグルト状に固まる(カード形成)まで長い時間を必要とするからである。   The reason for this is that all of the above lactic acid bacteria species are poorly proliferative in milk. Therefore, when using these lactic acid bacteria as seed bacteria to produce kefir-like carbonate-containing yogurt, it takes a long time to solidify into yogurt (card formation). Because.

それを解決する手段としては、ヨーグルトミックスに乳酸菌の増殖促進物質、例えば大豆ペプチドや酵母エキスを添加し種菌の増殖力を高める方法が考えられるが、一般に増殖促進物質の添加は製造コストがかかるうえ、ヨーグルトの味にも悪い影響を与えるので現実的な対処法とはいえない。   As a means for solving this problem, a method of increasing the growth ability of inoculum by adding a lactic acid bacteria growth promoting substance such as soybean peptide or yeast extract to the yogurt mix can be considered. This is not a realistic solution because it adversely affects the taste of yogurt.

すなわち、このようにすでに見出だされている有用乳酸菌株をもってしても、抗アレルギー効果のあるケフィア様炭酸含有ヨーグルトを工業的に製造することは難しいのが現状である。
特公昭49−11432号公報 特開昭63−263044号公報 特開昭64−47338号公報 特開平1−317355号公報 特開平9−154483号公報 特開平11−199495号公報 特開2000−095697 特開2004−026729 特開2005−139160
That is, it is difficult to industrially produce kefir-like carbonic acid-containing yogurt having an antiallergic effect even with useful lactic acid strains already found in this way.
Japanese Patent Publication No. 49-11432 JP-A 63-263044 JP-A-64-47338 JP-A-1-317355 JP-A-9-154483 JP-A-11-199495 JP 2000-095597 JP-A-2004-026729 JP2005-139160

本発明の第1の目的は、種菌として酵母菌と乳酸菌を併用してつくられるケフィア様炭酸含有ヨーグルトであって、特に製造後の過剰なガス生成が抑えられ、且つアトピー性皮膚炎、花粉症、通年性鼻炎などI型アレルギーの改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルトを提供することであり、
本発明の第2の目的は、そのようなケフィア様炭酸含有ヨーグルトを工業的に容易に製造できる方法を提供することである。
The first object of the present invention is a kefir-like carbonic acid-containing yogurt produced by using yeast and lactic acid bacteria in combination as an inoculum, and is capable of suppressing excessive gas production, particularly after production, and atopic dermatitis, hay fever Providing a kefir-like carbonic acid-containing yogurt effective in improving type I allergies such as perennial rhinitis,
The second object of the present invention is to provide a method by which such a kefir-like carbonic acid-containing yogurt can be easily produced industrially.

上記課題を解決するために本発明者らは創意工夫を重ねた結果、乳糖非発酵性酵母菌サッカロミセス・セレビシエ、特に乳糖非発酵性酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)にI型アレルギー症状を改善する効果があることを見出し、さらにこの酵母菌と乳糖発酵性乳酸菌を種菌としてケフィア様炭酸含有ヨーグルトを製造することで本発明を完成させるに至った。   In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors have made ingenious efforts, and as a result, lactose non-fermenting yeast Saccharomyces cerevisiae, particularly lactose non-fermenting yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain (patent biological deposit center deposit number) FERM AP-21124) was found to have an effect of improving type I allergic symptoms, and the present invention was completed by producing kefir-like carbonate-containing yogurt using this yeast and lactose-fermenting lactic acid bacteria as seeds. .

本発明の請求項1記載の、製造後の過剰な炭酸ガス生成を抑えた、I型アレルギー症状の改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルトは、乳糖非発酵性で、且つ抗アレルギー作用を有する酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)と乳糖発酵性乳酸菌を含有することを特徴とする。 The kefir-like carbonic acid-containing yogurt which is effective in improving type I allergic symptoms and suppresses excessive carbon dioxide production after production according to claim 1 of the present invention is a yeast that is non-fermentative in lactose and has an antiallergic action Saccharomyces cerevisiae S4-A strain (patent biological deposit center deposit number FERM AP-21124) derived from horse milk, which is a bacterium Saccharomyces cerevisiae , and lactose-fermenting lactic acid bacteria.

本発明の請求項2は、請求項1記載のケフィア様炭酸含有ヨーグルトにおいて、前記乳糖発酵性乳酸菌が、少なくともラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスを含む混合乳酸菌であることを特徴とする。 Claim 2 of the present invention, in the kefir-like carbonated yogurt claim 1 Symbol placement, the lactose fermenting lactic acid bacteria, characterized in that it is a mixed lactic acid bacteria comprising at least Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus .

本発明の請求項3は、獣乳に対して、必要に応じて生クリーム、脱脂粉乳、乳清パウダーを含む乳成分、酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)の非発酵性糖、保型剤、離水防止剤を適量添加混合して調製される原料を主成分として含む主原料に対して、必須の種菌として乳糖非発酵性で且つ抗アレルギー作用を有する前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと乳糖発酵性乳酸菌を併用して所定量接種して醗酵せしめることを特徴とする製造後の過剰な炭酸ガス生成を抑えた、I型アレルギー症状の改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造方法である。 According to claim 3 of the present invention, Saccharomyces cerevisiae S4-A derived from horse milk, which is a milk component including yeast cream, skim milk powder, and whey powder as needed, and yeast milk Saccharomyces cerevisiae. An essential inoculum for the main raw material containing as a main ingredient a raw material prepared by adding and mixing appropriate amounts of non-fermentable sugars, shape-preserving agents, and water separation preventing agents of the strain (patent biological deposit center deposit number FERM AP-21124) wherein having an anti-allergic action and in non-lactose fermenting with a combination of yeast Saccharomyces cerevisiae and lactose fermenting lactic acid bacteria with reduced excess carbon dioxide produced after manufacture, characterized in that allowed to fermentation by a predetermined amount inoculated as This is a method for producing a kefir-like carbonic acid-containing yogurt effective in improving type I allergic symptoms.

本発明の請求項4は、請求項3記載のケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造方法において、前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと乳糖発酵性乳酸菌の接種量が、前記主原料に対してそれぞれ0.5〜10質量%であることを特徴とする。 Claim 4 of the present invention is a method of manufacturing a kefir-like carbonated yogurt according to claim 3 Symbol placement, inoculum of the yeast Saccharomyces cerevisiae and lactose fermenting lactic acid bacteria, respectively the main raw material 0.5 -10% by mass.

本発明の請求項1は、乳糖非発酵性で、且つ抗アレルギー作用を有する酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)と乳糖発酵性乳酸菌を含有することを特徴とするケフィア様炭酸含有ヨーグルトであり、
馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株は、薬物塗布によって皮膚炎を誘発させたアトピー性皮膚炎発症モデルマウスに対して皮膚炎症状の改善および皮膚炎発症にともなう痒みの抑制をもたらす微生物として、本発明者らが中華人民共和国・内蒙古自治区で採取した馬乳酒から分離した株であり、アトピー性皮膚炎、花粉症、通年性鼻炎などI型アレルギーの改善に確実に有効である上、前記S4−A株と乳糖発酵性乳酸菌を併用して乳を発酵させることにより、前記S4−A株による乳糖を利用したアルコール発酵が抑えられる一方、前記乳糖発酵性乳酸菌によって生成された乳糖分解物であるグルコースおよびガラクトースを、前記S4−A株が利用することによってアルコール発酵が僅かに生ずることから、過剰な炭酸ガス生成のないケフィア様炭酸含有ヨーグルトを工業的に容易に生産可能となり、特に製造後の過剰なガス生成が抑えられ、そのためこのケフィア様炭酸含有ヨーグルトの保存中において、容器の膨張や破裂を防止する効果があるという顕著な効果を奏する
Claim 1 of the present invention is Saccharomyces cerevisiae S4-A strain derived from horse milk, which is a yeast Saccharomyces cerevisiae that is non-lactose and has an anti-allergic action (patent biological deposit center deposit number FERM AP-21124). ) and a kefir-like carbonated yogurt, characterized by containing lactose fermenting lactic acid bacteria,
Saccharomyces cerevisiae S4-A strain derived from horse milk is a microorganism that improves dermatitis and suppresses itchiness associated with the onset of dermatitis in a model mouse with atopic dermatitis that has induced dermatitis by drug application As a strain isolated from horse milk liquor collected by the present inventors in the Inner Mongolia Autonomous Region of the People's Republic of China, and is surely effective in improving type I allergies such as atopic dermatitis, hay fever and perennial rhinitis. In addition, by fermenting milk using the S4-A strain and lactose-fermenting lactic acid bacteria together, alcohol fermentation using lactose by the S4-A strain can be suppressed, while lactose decomposition produced by the lactose-fermenting lactic acid bacteria Since the glucose and galactose, which are the products, are used by the S4-A strain, alcohol fermentation slightly occurs. Kefir-like carbonic acid-containing yogurt that does not generate sucrose can be easily produced industrially, and excessive gas generation after production is suppressed, thus preventing expansion and rupture of the container during storage of this kefir-like carbonic acid-containing yogurt There is a remarkable effect that there is an effect .

本発明の請求項は、請求項1記載のケフィア様炭酸含有ヨーグルトにおいて、前記乳糖発酵性乳酸菌が、少なくともラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスを含む混合乳酸菌であることを特徴とするものであり、
前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと、前記乳糖発酵性乳酸菌として、少なくともラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスを含む混合乳酸菌を種菌に用いることでヨーグルトのカード形成までの時間を短縮できるので生産効率を向上できるとともに、過剰な炭酸ガス生成を確実に抑制でき、しかもI型アレルギーの改善に有効であるというさらなる顕著な効果を奏する。
Claim 2 of the present invention, in the kefir-like carbonated yogurt claim 1 Symbol placement, the lactose fermenting lactic acid bacteria, characterized in that it is a mixed lactic acid bacteria comprising at least Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus Is,
Since the yeast Saccharomyces cerevisiae and the lactose-fermenting lactic acid bacterium are mixed with lactic acid bacteria containing at least Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus as the inoculum, the time until yogurt card formation can be shortened, thereby improving production efficiency. In addition to the improvement, the production of excessive carbon dioxide gas can be reliably suppressed, and there is a further remarkable effect that it is effective in improving type I allergy.

本発明の請求項は、獣乳に対して、必要に応じて生クリーム、脱脂粉乳、乳清パウダーを含む乳成分、酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)の非発酵性糖、保型剤、離水防止剤を適量添加混合して調製される原料を主成分として含む主原料に対して、必須の種菌として乳糖非発酵性で且つ抗アレルギー作用を有する前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと乳糖発酵性乳酸菌を併用して所定量接種して醗酵せしめることを特徴とする製造後の過剰な炭酸ガス生成を抑えた、I型アレルギー症状の改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造方法であり、
本発明のケフィア様炭酸含有ヨーグルトを工業的に容易に製造できるという顕著な効果を奏する。
According to claim 3 of the present invention, Saccharomyces cerevisiae S4-A derived from horse milk, which is a milk component including yeast cream, skim milk powder, and whey powder as needed, and yeast milk Saccharomyces cerevisiae. An essential inoculum for the main raw material containing as a main ingredient a raw material prepared by adding and mixing appropriate amounts of non-fermentable sugars, shape-preserving agents, and water separation preventing agents of the strain (patent biological deposit center deposit number FERM AP-21124) wherein having an anti-allergic action and in non-lactose fermenting with a combination of yeast Saccharomyces cerevisiae and lactose fermenting lactic acid bacteria with reduced excess carbon dioxide produced after manufacture, characterized in that allowed to fermentation by a predetermined amount inoculated as , A method for producing kefir-like carbonic acid-containing yogurt that is effective in improving type I allergic symptoms,
The kefir-like carbonic acid-containing yogurt of the present invention has a remarkable effect that it can be easily produced industrially.

本発明の請求項は、請求項記載のケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造方法において、前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと乳糖発酵性乳酸菌の接種量が、前記主原料に対してそれぞれ0.5〜10質量%であることを特徴とするものであり、
両種菌の接種量が多すぎると乳酸や炭酸による酸味・発泡感が強くなる恐れがあり、接種量が少なすぎると発酵までの時間がかかったり、炭酸感が弱くなったりする恐れがあるが、この接種量の範囲内でより優れた本発明のケフィア様炭酸含有ヨーグルトを工業的に容易に製造できるというさらなる顕著な効果を奏する。
Claim 4 of the present invention is the method for producing kefir-like carbonic acid-containing yogurt according to claim 3 , wherein the inoculum of the yeast Saccharomyces cerevisiae and lactose-fermenting lactic acid bacteria is 0.5 to It is characterized by being 10% by mass,
If the amount of both inoculums is too large, the acidity / foaming feeling due to lactic acid or carbonic acid may increase, and if the amount of inoculation is too small, it may take time until fermentation or the carbonic acid may weaken. Within the range of the inoculation amount, the kefir-like carbonic acid-containing yogurt of the present invention, which is superior, can be produced industrially easily.

以下、本発明を詳細に説明する。以下の説明において%は、質量%を示す。
本発明で使用する酵母菌サッカロミセス・セレビシエは、乳糖非発酵性で、且つ抗アレルギー作用を有する菌株であれば特に限定されるものではない。
本発明で使用する酵母菌S4−A株は、本発明者らが中華人民共和国・内蒙古自治区において昔から伝統的製法でつくられている馬乳酒から分離した酵母菌であり、本発明において好ましく使用できる。
本菌株は、馬乳酒を適宜希釈したのち、その希釈液をポテトデキストロース寒天培地上に塗沫することによって分離できる。そしてこのようにして得られる菌株は、食経験が豊富なことから、安全性には何ら問題のない菌株である。
Hereinafter, the present invention will be described in detail. In the following description,% indicates mass%.
The yeast Saccharomyces cerevisiae used in the present invention is not particularly limited as long as it is a lactose non-fermentative and has an antiallergic action.
The yeast strain S4-A used in the present invention is a yeast strain isolated from horse milk liquor that has been traditionally produced in the People's Republic of China and Inner Mongolia Autonomous Region by the present inventors. Can be used.
This strain can be isolated by appropriately diluting horse milk liquor and then smearing the diluted solution on a potato dextrose agar medium. And since the strain obtained in this way has abundant food experience, it is a strain with no problem in safety.

酵母菌S4−A株は、以下の菌学的性質を有し、28S rDNA D1/D2領域の塩基配列解析によってサッカロミセス・セレビシエと同定された菌種である。   The yeast strain S4-A has the following mycological properties and is a bacterial species identified as Saccharomyces cerevisiae by nucleotide sequence analysis of the 28S rDNA D1 / D2 region.

酵母菌S4−A株と、標準酵母菌サッカロミセス・セレビシエ(S−288C)の炭素類の資化性を対比した結果を表1に示す。   Table 1 shows the results of comparing the assimilation of carbons of the yeast strain S4-A and the standard yeast Saccharomyces cerevisiae (S-288C).

さらに酵母菌S4−A株の特筆すべき特性としては、薬物塗布によって皮膚炎を誘発させたアトピー性皮膚炎発症モデルマウスに本菌株を経口投与した場合、明らかな皮膚炎症状の改善および皮膚炎発症にともなう痒みの抑制をもたらすことである。
このことから酵母菌S4−A株は、IgE抗体量の上昇によって引き起こされるI型アレルギー反応を改善する機能をもった微生物であると云える。
Furthermore, as a remarkable characteristic of the yeast strain S4-A, when this strain is orally administered to a model mouse for the development of atopic dermatitis in which dermatitis is induced by application of a drug, clear improvement of skin inflammation and dermatitis are observed. It is to suppress the itch that accompanies the onset.
From this, it can be said that the yeast strain S4-A is a microorganism having a function of improving the type I allergic reaction caused by an increase in the amount of IgE antibody.

また、その抗アレルギー作用は培養菌体そのもので認められることから、本菌株は抗アレルギー効果を発揮せしめる目的でさまざまな発酵食品に利用することができる。
特に本菌株は乳糖非発酵性であることから、乳糖発酵性乳酸菌と併用することで過剰な炭酸ガス生成を抑えたケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造に使用できる。
In addition, since the antiallergic action is observed in the cultured cells themselves, this strain can be used for various fermented foods for the purpose of exerting the antiallergic effect.
In particular, since this strain is non-lactose fermentable, it can be used for the production of kefir-like carbonic acid-containing yogurt that suppresses excessive carbon dioxide generation by using it together with lactose-fermenting lactic acid bacteria.

Figure 0004273157
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通常、酵母の培養には、バクトトリプトン、酵母エキス、麦芽エキスおよびぶどう糖を成分とする培地が適しており、本発明における酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株も同培地で培養できる。
一方、コスト面を考慮するならば、酵母エキス1〜2%およびぶどう糖1〜5%から成る液体培地で培養することが望ましく、同組成の液体培地で培養したS4−A株はそのまま種菌として使用できる。
また酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株の種菌は乳を成分とする培地でもつくることができ、その場合は、10%脱脂乳に酵母エキス1〜2%と本菌株の資化性糖であるグルコース、ガラクトースあるいはスクロースを1〜5%の範囲で任意に添加すればよい。
Usually, a medium containing bactotryptone, yeast extract, malt extract and glucose as components is suitable for yeast culture, and the yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain of the present invention can also be cultured in the same medium.
On the other hand, from the viewpoint of cost, it is desirable to culture in a liquid medium composed of yeast extract 1 to 2% and glucose 1 to 5%, and the S4-A strain cultured in the liquid medium of the same composition is used as an inoculum as it is. it can.
In addition, the inoculum of the yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain can also be prepared in a medium containing milk, in which case it is 10% skim milk and 1-2% yeast extract and an assimilating sugar of this strain. What is necessary is just to add glucose, galactose, or sucrose arbitrarily in 1 to 5% of range.

本菌株に関しては、その他培養条件も通常の酵母菌と変わるものではなく、例えば、酵母エキス1〜2%およびぶどう糖1〜5%から成る液体培地で、培養温度20℃〜37℃、培養時間18〜24時間の範囲で撹拌あるいは振とう培養することによって、菌数濃度がおよそ6×106 〜9×106 コロニー数/mlの酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株の種菌をつくることができる。 Regarding this strain, the other culture conditions are not different from those of normal yeast. For example, a liquid medium composed of yeast extract 1 to 2% and glucose 1 to 5%, culture temperature 20 ° C. to 37 ° C., culture time 18 By incubating or shaking culture in a range of ˜24 hours, an inoculum of the yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain having a bacterial count concentration of about 6 × 10 6 to 9 × 10 6 colonies / ml can be produced. .

本発明のケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造には、乳糖非発酵性酵母菌で、且つ抗アレルギー作用を有するS4−A株と乳糖発酵性乳酸菌が種菌として使用される。
酵母菌S4−A株は、乳中の主たる糖である乳糖を分解してアルコール発酵をおこなうことはできないが、乳糖発酵性乳酸菌による乳酸発酵の過程で分解され乳中に蓄積される乳糖分解物、すなわちグルコースとガラクトースを資化することでアルコール発酵をおこない、その結果ヨーグルトに炭酸ガスとアルコールを付与することができる。
In the production of the kefir-like carbonic acid-containing yogurt of the present invention, lactose non-fermenting yeast and S4-A strain and lactose-fermenting lactic acid bacteria having antiallergic action are used as seeds.
Saccharomyces cerevisiae strain S4-A cannot decompose lactose, which is the main sugar in milk, but cannot undergo alcoholic fermentation, but it is decomposed in the process of lactic acid fermentation by lactose-fermenting lactic acid bacteria and accumulated in milk That is, alcohol fermentation is performed by assimilating glucose and galactose, and as a result, carbon dioxide and alcohol can be imparted to the yogurt.

その際に酵母菌S4−A株と併用できる乳酸菌は、乳糖発酵性を有し、乳中での増殖性に優れた菌種であれば特に制限されるものではないが、好ましくは増殖性ならびに生酸性に優れた乳酸菌種、すなわちヨーグルト製造において常用されているラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスの混合乳酸菌を種菌として用いることが望ましい。   In this case, the lactic acid bacteria that can be used in combination with the yeast strain S4-A are not particularly limited as long as they have lactose fermentability and are excellent in growth ability in milk. It is desirable to use a lactic acid bacterium species excellent in bioacidity, that is, a mixed lactic acid bacterium of Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus commonly used in yogurt production as a seed bacterium.

そしてそのときの両乳酸菌の混合比は、通常のヨーグルト製造に用いられる比率であれば何ら問題はない。   And the mixing ratio of both lactic acid bacteria at that time will not have any problem if it is a ratio used for normal yogurt manufacture.

上記ラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスの混合乳酸菌とその他菌種、例えばラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・ジョンソニー、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・クリスパタス、ラクトバチルス・アミロボラス、ラクトバチルス・ガリナラム、ラクトバチルス・ロイテリ、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・クレモリス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティスから選ばれる少なくとも1種は併用して種菌とすることができる。   Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus mixed lactic acid bacteria and other bacterial species, such as Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus amylovorus , Lactobacillus gallinarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis, Lactococcus cremoris, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bibi At least one selected from Fidobacterium longum and Bifidobacterium addresscentis can be used in combination as an inoculum.

特に抗アレルギー作用のある乳酸菌株と本発明の酵母菌S4−A株を併用することで、両菌株による抗アレルギー効果が相乗的に期待できる。   In particular, by using the lactic acid strain having antiallergic action in combination with the yeast S4-A strain of the present invention, the antiallergic effect of both strains can be expected synergistically.

本発明のケフィア様炭酸含有ヨーグルトは獣乳を原料として作られるが、必要に応じて生クリーム、脱脂粉乳、乳清パウダーなどの乳成分を原料乳に適量添加してヨーグルト用ミックスをつくることができる。   The kefir-like carbonate-containing yogurt of the present invention is made from animal milk as a raw material, but if necessary, milk ingredients such as fresh cream, skim milk powder, and whey powder can be added to the raw milk to make a mix for yogurt. it can.

また、添加できる甘味原料は、本発明で使用されるサッカロミセス・セレビシエS4−A株の非発酵性糖であれば特に制限はなく、甘味度にあわせて原料乳に添加できる。具体的にはキシリトール、トレハロース、エリスリトール、ソルビトール、マンニトール、ラクチトール、イノシトールなどの糖アルコールが挙げられる。   The sweet ingredients that can be added are not particularly limited as long as they are non-fermentable sugars of the Saccharomyces cerevisiae S4-A strain used in the present invention, and can be added to the raw milk according to the degree of sweetness. Specific examples include sugar alcohols such as xylitol, trehalose, erythritol, sorbitol, mannitol, lactitol, and inositol.

さらにヨーグルトの保型性を高めたり、離水防止の目的でゼラチンや寒天などを加えることができるほか、適度な芳香を付与する目的で香料も添加することができる。   Furthermore, gelatin or agar can be added for the purpose of enhancing the shape retention of yogurt or preventing water separation, and a fragrance can be added for the purpose of imparting an appropriate fragrance.

このように調製されたヨーグルトミックスは通常のヨーグルト製造の場合と同様の殺菌条件で処理を施したのちに使用される。   The yogurt mix thus prepared is used after being treated under the same sterilization conditions as in the case of normal yogurt production.

本発明では、上記ヨーグルトミックスに乳糖非発酵性で、且つ抗アレルギー作用を有する酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株と乳糖発酵性乳酸菌の両種菌を接種し、発酵させることで目的のケフィア様炭酸含有ヨーグルトが製造できるが、その際、酵母菌と乳酸菌の種菌接種量は、ヨーグルトミックス量に対してそれぞれ0.5〜10%量の範囲であれば任意に添加できる。   In the present invention, the desired kefir-like carbonic acid is obtained by inoculating and fermenting the above-mentioned yogurt mix with both yeasts Saccharomyces cerevisiae S4-A strain and lactose-fermenting lactic acid bacteria that are non-lactose and anti-allergic. Containing yogurt can be produced, and in that case, the inoculum of the yeast and lactic acid bacteria can be added arbitrarily as long as it is in the range of 0.5 to 10% of the amount of yogurt mix.

しかしながら、両種菌の接種量が多すぎると乳酸や炭酸による酸味・発泡感が強くなり、接種量が少なすぎると発酵までの時間がかかったり、炭酸感が弱くなったりするので、通常はヨーグルトミックスの量に対して酵母菌1%量、乳酸菌3%量の割合で種菌を接種するのが好ましい。   However, if the amount of both inoculums is too large, the acidity / foaming feeling due to lactic acid or carbonic acid will become strong, and if the amount of inoculation is too small, it will take time until fermentation or the carbonic acid will weaken. It is preferable to inoculate the inoculum with 1% yeast and 3% lactic acid bacteria.

後発酵タイプのケフィア様炭酸含有ヨーグルトは、通常のヨーグルトと同じくミックスの容器への充填に続き、恒温室内での発酵工程を経て作られるが、その際、容器の密閉には紙やアルミシール、さらにはスクリュータイプの蓋が使用できる。   The post-fermentation type kefir-like carbonate-containing yogurt is made through a fermentation process in a thermostatic chamber following filling of the mix container, just like normal yogurt, but at that time, the container is sealed with paper, aluminum seal, Furthermore, a screw-type lid can be used.

また、発酵は20〜39℃の広い温度帯でおこなうことができるが、カードが凝固するまでに要する時間や出来上がりのヨーグルトの風味・炭酸感を考慮すると、35〜37℃で発酵させるのが望ましく、そのときの培養時間は8〜18時間である。この場合、発酵時間が短いと酸味と炭酸感の弱いヨーグルトが、また発酵時間が長いと酸味と炭酸感の強いヨーグルトができるので、好みに応じて適宜発酵時間を設定する。   Fermentation can be carried out in a wide temperature range of 20 to 39 ° C, but it is desirable to ferment at 35 to 37 ° C in consideration of the time required for the curd to solidify and the flavor and carbonated feeling of the finished yogurt. The culture time at that time is 8 to 18 hours. In this case, if the fermentation time is short, yogurt with a weak acidity and carbonic feeling can be obtained, and if the fermentation time is long, a yogurt with a strong acidity and carbonic feeling can be obtained. Therefore, the fermentation time is appropriately set according to preference.

こうしてつくられるケフィア様炭酸含有ヨーグルトの品質は、酸度:1〜1.2%、エタノール含量:0.1〜0.3%、容器内圧:0.03〜0.05MPa、乳酸菌数:1×109 〜3×109 /ml、酵母菌数:3×106 〜6×106 コロニー数/mlである。 The quality of the kefir-like carbonic acid-containing yogurt thus produced is as follows: acidity: 1 to 1.2%, ethanol content: 0.1 to 0.3%, container internal pressure: 0.03 to 0.05 MPa, number of lactic acid bacteria: 1 × 10 9 to 3 × 10 9 / ml, number of yeasts: 3 × 10 6 to 6 × 10 6 colonies / ml.

さらに10℃で4週間保存後の容器内圧は0.06〜0.07MPaであり、製造直後とほぼ変わらない。すなわち、アルコール発酵が抑制され、過剰な炭酸ガスが生成されていないことがわかる。
一方、前発酵タイプのヨーグルトは、種菌を接種したヨーグルトミックスをタンク内にて適温で発酵させたのち、冷却撹拌、容器充填の工程を経てつくることができる。
Furthermore, the internal pressure of the container after storage at 10 ° C. for 4 weeks is 0.06 to 0.07 MPa, which is almost the same as that immediately after production. That is, it turns out that alcohol fermentation is suppressed and excess carbon dioxide gas is not produced | generated.
On the other hand, a pre-fermentation type yogurt can be produced through a process of cooling and stirring and filling a container after fermenting a yogurt mix inoculated with an inoculum at an appropriate temperature in a tank.

次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明は本発明の主旨を逸脱しない限り実施例に限定されるものではない。   EXAMPLES Next, although an Example is given and this invention is demonstrated still in detail, this invention is not limited to an Example, unless it deviates from the main point of this invention.

(実施例1)
試験方法:アレルギー抑制効果
(酵母菌体の調製)
ポテトデキストロース寒天培地上で増殖した酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株のコロニーを、バクトトリプトン1.0%、酵母エキス0.5%、麦芽エキス0.3%、ぶどう糖5.0%から成る液体培地100mlに接種し、30℃で24時間振とう培養した。
続いてこの培養液を同じ成分組成の液体培地10リットルに移し、30℃で24時間通気撹拌培養した。培養終了後、遠心分離によって菌体を集め、さらに蒸留水で2回洗浄した。その後、この洗浄菌体を凍結乾燥処理することで粉末化し、得られた粉末菌体をマウスの投与試験に供した。
(Example 1)
Test method: Allergy suppression effect (preparation of yeast cells)
A colony of the yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain grown on potato dextrose agar medium consists of 1.0% bactotryptone, 0.5% yeast extract, 0.3% malt extract, and 5.0% glucose. 100 ml of liquid medium was inoculated and cultured with shaking at 30 ° C. for 24 hours.
Subsequently, this culture solution was transferred to 10 liters of a liquid medium having the same component composition, and cultured with aeration and stirring at 30 ° C. for 24 hours. After completion of the culture, the cells were collected by centrifugation and further washed twice with distilled water. Thereafter, the washed cells were pulverized by freeze-drying, and the obtained powder cells were subjected to a mouse administration test.

(動物種)
NC/Ngaマウス 雌性 5週齢 32匹
(Animal species)
NC / Nga mouse Female 5 weeks old 32

(区分け)
各群のマウスには、固型飼料(オリエンタル酵母工業(株))および水を自由摂取させた。
(1)対照群:蒸留水0.3ml/匹/日を74日間強制経口投与した群(8匹)
(2)S4−A株 0.1mg群:S4−A菌体0.1mg/匹/日を74日間強制経口投与した群(8匹)
(3)S4−A株 1.0mg群:S4−A菌体1.0mg/匹/日を74日間強制経口投与した群(8匹)
(4)S4−A株 10.0mg群:S4−A菌体10.0mg/匹/日を74日間強制経口投与した群(8匹)
(Division)
Each group of mice was given a solid feed (Oriental Yeast Co., Ltd.) and water ad libitum.
(1) Control group: group (8 animals) in which 0.3 ml of distilled water / animal / day was orally administered for 74 days
(2) S4-A strain 0.1 mg group: group (8 animals) in which S4-A cells 0.1 mg / animal / day was forcibly orally administered for 74 days
(3) S4-A strain 1.0 mg group: group (8 mice) forcibly orally administered S4-A cells 1.0 mg / animal / day for 74 days
(4) S4-A strain 10.0 mg group: group (8 mice) in which S4-A cells 10.0 mg / animal / day were forcibly administered orally for 74 days

(試験菌体の投与方法および投与期間)
S4−A株の粉末菌体は蒸留水で懸濁したのち、経口ゾンデで強制投与した。期間は、ピクリルクロライド[PCl:2, 4, 6 − trinitrochlorobenzene、東京化成工業(株)]で感作する14日前から感作後60日目まで連続投与した(計74日間)。
(Method and period of administration of test cells)
The powder cells of the S4-A strain were suspended in distilled water and then forcibly administered with an oral sonde. The period was continuously administered from 14 days before sensitization with picryl chloride [PCl: 2, 4, 6-trinitrochlorobenzene, Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.] to 60 days after sensitization (74 days in total).

(PClによる感作)
あらかじめ背部と腹部を毛狩りしておいたマウスの背部、腹部、後脚フットパットに、5%PCl溶液をそれぞれ50μl、50μl、25μlずつマイクロピペットで滴下し、塗布した(感作0日目)。
初回感作から4日目に1%PCl溶液を左右耳介部の表裏に10μlずつ計40μl、さらに背部に150μl塗布し、その後は7日毎に同じ感作を8回(56日間)繰り返した。
(Sensitization with PCl)
A 5% PCl solution was dropped onto the back, abdomen, and hind leg footpads of mice whose hairs had been hunted in the back and abdomen in advance with 50 μl, 50 μl, and 25 μl of micropipette, respectively, and applied (Day 0 of sensitization). .
On the 4th day after the first sensitization, 10 μl of a 1% PCl solution was applied to the front and back of the left and right auricles, and a total of 40 μl was applied to the back. Thereafter, the same sensitization was repeated 8 times (56 days) every 7 days.

(皮膚炎症状の観察)
皮膚炎症状の観察は、Leung らのClinical Skin Condition Scoreをもとに評価した。
すなわち、PCl塗布後の耳介部および背部皮膚について(1)紅斑・発赤・出血、(2)浮腫・丘疹、(3)痂皮・乾燥、(4)組織剥離・糜爛の状態を各々4段階評価し(スコア0 ;無症状、スコア1 ;皮膚面積の25%未満の範囲で発症、スコア2 ;皮膚面積の25%以上50%未満の範囲で発症、スコア3 ;皮膚面積の50%以上の範囲で発症)、これらスコアの合計点数を臨床スコアとした。
背部および耳介部の臨床スコアの測定は、PCl溶液を塗布したのち、2日目および7日目に実施した。また耳介部については臨床スコアによる評価に加え、肥厚(耳の厚さ)の測定もThickness Dial Gage を用いて実施した。なお、耳介肥厚はPCl溶液塗布後1日目および6日目に測定した。
(Observation of skin inflammation)
Skin inflammation was observed based on Leung et al.'S Clinical Skin Condition Score.
That is, for the auricle and back skin after PCl application, (1) erythema / redness / bleeding, (2) edema / papules, (3) crust / dry, (4) tissue detachment / wrinkle in 4 stages each (Score 0; asymptomatic, score 1; onset less than 25% of the skin area, score 2; onset in the range of 25% to less than 50% of the skin area, score 3; The total score of these scores was taken as the clinical score.
The clinical score of the back and auricle was measured on the 2nd and 7th days after applying the PCl solution. In addition to the evaluation by clinical score, the thickness of the auricle was also measured using Thickness Dial Gage. The auricle thickening was measured on the 1st and 6th days after application of the PCl solution.

(痒みによる引っかき行動の計測)
皮膚症状の悪化に伴う痒み度合いを調べるため、マウス用自動掻痒測定装置(MicroAct)を用いてマウスの背部引っかき行動を測定した。
最初に、マウスの後肢に小型強力磁石(横1mm、縦3mm)を埋め込む手術を行った。この手術は引っかき行動測定の最低1日以上前に行った。観察箱に入れたマウスが後肢で引っかき行動を起こすと後肢に埋め込まれた磁石の動きにより、観察箱内の磁場が変化する。その磁場の変化を観察箱の電磁コイルが感知して、情報をconnection boxに伝える。
Connection boxは送られてきた情報を整理して、パソコンの画面上に波形として表示する。この波形を解析することにより引っかき行動回数を測定することができる。
引っかき行動はPCl溶液塗布後24時間後に測定し、S4−A株菌体の投与は引っかき行動測定60分前に行い、続いて投与50分後にマウスを観察箱に移して10分間順化させのち、引っかき行動を60分間測定した。
(Measurement of scratching behavior by itching)
In order to examine the degree of itching associated with worsening skin symptoms, the mouse's back scratching behavior was measured using a mouse automatic pruritus measuring device (MicroAct).
First, an operation was performed in which a small powerful magnet (1 mm wide, 3 mm long) was implanted in the hind limb of a mouse. This operation was performed at least one day before measuring scratching behavior. When a mouse placed in the observation box is scratched by the hind limb, the magnetic field in the observation box changes due to the movement of the magnet embedded in the hind limb. The change in the magnetic field is detected by the electromagnetic coil of the observation box, and information is transmitted to the connection box.
The Connection box organizes the sent information and displays it as a waveform on the computer screen. By analyzing this waveform, the number of scratching actions can be measured.
Scratching behavior was measured 24 hours after application of the PCl solution, and S4-A strain cells were administered 60 minutes before measuring the scratching behavior, and then 50 minutes after administration, the mice were transferred to the observation box and allowed to acclimate for 10 minutes. The scratching behavior was measured for 60 minutes.

試験結果:アレルギー抑制効果
(S4−A株による皮膚炎症状の緩和)
背部および耳介の皮膚炎症状の観察結果はそれぞれ図1と図2に示した。
図1に示すように、背部の皮膚炎症状を観察した結果、対照群では感作32日目以降症状の悪化が見られ臨床スコアが増加した。一方、S4−A株投与群の場合、0.1mg投与群では対照群に比べ臨床スコアの有意な低減効果は見られなかったものの、1mg投与群では感作41日目以降、10mg投与群では感作39日目以降、臨床スコアの増加が有意に抑制された。
Test result: Allergy suppression effect (relief of skin inflammation by S4-A strain)
The observation results of skin inflammation in the back and auricle are shown in FIGS. 1 and 2, respectively.
As shown in FIG. 1, as a result of observing the skin inflammation on the back, the control group showed worsening of symptoms after the 32nd day of sensitization, and the clinical score increased. On the other hand, in the case of the S4-A strain administration group, the 0.1 mg administration group did not show a significant clinical score reduction effect as compared to the control group, but the 1 mg administration group started from the 41st day of sensitization and the 10 mg administration group did not. From the 39th day of sensitization, the increase in clinical score was significantly suppressed.

図2に示すように、耳介の皮膚炎症状も同様に観察した結果、対照群では感作11日目以降症状の悪化が見られ臨床スコアが増加したのに対して、S4−A株投与群の場合、0.1mg投与群では対照群に比べ感作13日目および32日目で臨床スコアが有意に低かったが、それ以外の日にちでは有意な低減効果は見られなかった。一方、1および10mg投与群では感作13日目以降、臨床スコアの増加が有意に抑制された。   As shown in FIG. 2, the skin inflammation of the auricle was also observed in the same manner. As a result, in the control group, the symptom worsened after the 11th day of sensitization and the clinical score increased. In the case of the group, the clinical score was significantly lower in the 0.1 mg-administered group on the 13th and 32nd days of sensitization than in the control group, but no significant reduction effect was observed on other days. On the other hand, in the 1 and 10 mg administration groups, the increase in clinical score was significantly suppressed from day 13 of sensitization.

さらに耳介肥厚の測定結果を図3に示した。図3より、対照群では感作開始直後から耳介肥厚が増加し、感作後61日目には感作前の2.5倍程度にまで増加した。一方、S4−A株投与群では、0.1mgおよび1mg投与群において対照群に比べ感作10日目以降で耳介肥厚の増加が有意に抑制され、10mg投与群では感作5日目以降で同じく耳介肥厚の増加が有意に抑制されることが認められた。   Further, the measurement results of auricle thickening are shown in FIG. From FIG. 3, in the control group, the auricle thickening increased immediately after the start of sensitization, and increased to about 2.5 times that before sensitization on the 61st day after sensitization. On the other hand, in the S4-A strain administration group, the increase in ear thickening was significantly suppressed after the 10th day of sensitization in the 0.1 mg and 1 mg administration groups compared to the control group, and in the 10 mg administration group after the 5th day of sensitization. It was also found that the increase in auricular thickening was also significantly suppressed.

(痒みによる引っかき行動の計測)
引っかき行動回数の測定結果を図4に示した。対照群では感作初日に比べ、5日目以降で引っかき行動回数が有意に増加したのに対してS4−A株投与群では、0.1mg投与群において感作後26日目以降、1mg投与群においては感作後47日目以降で感作初日に比べ引っかき行動回数が有意に増加した。そして、10mg投与群では試験期間を通して引っかき行動の有意な増加は認められなかった。
(Measurement of scratching behavior by itching)
The measurement result of the number of scratching behaviors is shown in FIG. Compared to the first day of sensitization, the number of scratching behaviors was significantly increased in the control group after day 5, whereas in the S4-A strain administration group, administration of 1 mg was carried out in the 0.1 mg administration group from day 26 after sensitization. In the group, after 47 days after sensitization, the number of scratching behaviors increased significantly compared to the first day of sensitization. In the 10 mg administration group, no significant increase in scratching behavior was observed throughout the test period.

このように本発明の酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株は、経口摂取によってI型アレルギー症状を劇的に改善する能力をもっており、抗アレルギー食品に応用できることがわかった。   Thus, it was found that the yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain of the present invention has the ability to dramatically improve type I allergic symptoms by oral ingestion and can be applied to antiallergic foods.

(実施例2)
次に、酵母菌サッカロミセス・セレビシエS4−A株および混合乳酸菌を種菌とする抗アレルギー作用のあるケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造実施例を示す。
(Example 2)
Next, a production example of a kefir-like carbonic acid-containing yogurt having an antiallergic action using the yeast Saccharomyces cerevisiae S4-A strain and a mixed lactic acid bacterium as an inoculum is shown.

(酵母菌S4−A株の種菌調製)
濃度0.5%量の酵母エキスおよび1%量のぶどう糖を成分とする液体培地100mlにサッカロミセス・セレビシエS4−A株のコロニーを接種し、30℃で20時間浸とう培養した。こうして得られたS4−A株の種菌は6×107 コロニー/mlの生菌数であった。
(Inoculum preparation of yeast S4-A strain)
A colony of Saccharomyces cerevisiae S4-A strain was inoculated into 100 ml of a liquid medium containing 0.5% concentration of yeast extract and 1% of glucose as components, followed by immersion culture at 30 ° C. for 20 hours. The inoculum of the S4-A strain thus obtained was a viable count of 6 × 10 7 colonies / ml.

(乳酸菌株の種菌調製)
ラクトバチルス・ブルガリカス菌およびストレプトコッカス・サーモフィルス菌の種菌は、いずれも定法に従い10%還元脱脂乳培地にて37℃、16時間培養したものを用いた。またラクトバチルス・アシドフィルス菌の種菌は、濃度0.1%量の酵母エキスを含む10%還元脱脂乳培地で37℃、16時間培養したものを用いた。
(Inoculum preparation of lactic acid strain)
As the inoculum of Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus, those cultured in a 10% reduced skim milk medium at 37 ° C. for 16 hours according to a conventional method were used. The Lactobacillus acidophilus inoculum used was cultured in a 10% reduced skim milk medium containing a yeast extract with a concentration of 0.1% at 37 ° C. for 16 hours.

(ケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造)
牛乳1000g、脱脂粉乳250g、生クリーム250g、キシリトール100g、水3200gを成分とするヨーグルトミックスを均質化(150Kg/ml)、殺菌処理(95℃、40秒)したのち、40℃まで冷却した。
次にこのミックスに酵母菌S4−A株の種菌50g、ラクトバチルス・ブルガリカス菌の種菌50g、ストレプトコッカス・サーモフィルス菌の種菌50g、ラクトバチルス・アシドフィルス菌の種菌50gを加えて10分間撹拌した後、鉄製スクリュー蓋付ガラス瓶に90gずつ充填し、蓋をした。
なお発酵は37℃の恒温室内で10時間おこない、発酵後は冷蔵庫内にて冷却・保存した。
このようにして出来上がったヨーグルトの品質は、酸度:1.0%、酵母菌数:3.5×106 コロニー/ml、乳酸菌数:1.5×109 コロニー/mlであった。さらにヨーグルト中のエタノール濃度をエタノール測定用Fキット(ロッシュ)で測定したところ、0.17%であった。
また、缶テスター(横山計器)を用いて容器内圧力を測定した結果、0.05MPaであった。
10人のパネラーを対象にした味覚試験では、全員がヨーグルト本来の酸味と風味に加え、酵母菌による炭酸味とアルコール味を感じた。
(Production of kefir-like carbonate-containing yogurt)
A yoghurt mix containing 1000 g of milk, 250 g of skim milk powder, 250 g of fresh cream, 100 g of xylitol and 3200 g of water was homogenized (150 Kg / ml), sterilized (95 ° C., 40 seconds), and then cooled to 40 ° C.
Next, after adding 50 g of inoculum of yeast strain S4-A, 50 g of inoculum of Lactobacillus bulgaricus, 50 g of inoculum of Streptococcus thermophilus, and 50 g of inoculum of Lactobacillus acidophilus to this mix and stirring for 10 minutes Each glass bottle with an iron screw lid was filled with 90 g each and covered.
Fermentation was carried out in a constant temperature room at 37 ° C. for 10 hours, and after fermentation, it was cooled and stored in a refrigerator.
The quality of the yogurt thus obtained was as follows: acidity: 1.0%, yeast number: 3.5 × 10 6 colonies / ml, lactic acid bacteria number: 1.5 × 10 9 colonies / ml. Furthermore, when the ethanol concentration in the yogurt was measured with an F kit for ethanol measurement (Roche), it was 0.17%.
Moreover, it was 0.05 MPa as a result of measuring the pressure in a container using a can tester (Yokoyama meter).
In a taste test for 10 panelists, everyone felt the sourness and flavor of yeast in addition to the original sourness and flavor of yogurt.

本発明のケフィア様炭酸含有ヨーグルトは、種菌として乳糖非発酵性で、且つ抗アレルギー作用を有する酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)と乳糖発酵性乳酸菌を併用して醗酵せしめて工業的に容易に製造でき、特に製造後の過剰なガス生成が抑えられ、そのためこのケフィア様炭酸含有ヨーグルトの保存中において、容器の膨張や破裂を防止する効果があり、且つアトピー性皮膚炎、花粉症、通年性鼻炎などI型アレルギーの改善に有効であるという顕著な効果を奏するものであり、
本発明の製造方法により本発明のケフィア様炭酸含有ヨーグルトを工業的に容易に製造できるという顕著な効果を奏するので、産業上の利用価値が高い。
The kefir-like carbonate-containing yogurt of the present invention is a yeast Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces cerevisiae S4-A strain (patent biological deposit center deposit number) FERM AP-21124) and lactose-fermenting lactic acid bacteria can be fermented together and easily manufactured industrially, and in particular, excessive gas production after production can be suppressed. Therefore, during storage of this kefir-like carbonate-containing yogurt, It has the effect of preventing the swelling and rupture of, and has a remarkable effect of being effective in improving type I allergy such as atopic dermatitis, hay fever, perennial rhinitis,
Since the kefir-like carbonic acid-containing yogurt of the present invention can be easily produced industrially by the production method of the present invention, the industrial utility value is high.

マウスを使用したアレルギー抑制効果の確認試験における、マウス背部の臨床スコアに対するS4−A株投与の効果を示すグラフである。It is a graph which shows the effect of S4-A stock | strain administration with respect to the clinical score of a mouse | mouth back in the confirmation test of the allergy suppression effect using a mouse | mouth. マウスを使用したアレルギー抑制効果の確認試験における、マウス耳介部の臨床スコアに対するS4−A株投与の効果を示すグラフである。It is a graph which shows the effect of S4-A strain administration with respect to the clinical score of a mouse | mouth ear part in the confirmation test of the allergy suppression effect using a mouse | mouth. マウスを使用したアレルギー抑制効果の確認試験における、マウス耳介肥厚に対するS4−A株投与の効果を示すグラフである。It is a graph which shows the effect of S4-A strain administration with respect to mouse | mouth ear thickening in the confirmation test of the allergy suppression effect using a mouse | mouth. マウスを使用したアレルギー抑制効果の確認試験における、マウスの引っかき行動に対するS4−A株投与の効果を示すグラフである。It is a graph which shows the effect of S4-A stock | strain administration with respect to the scratching behavior of a mouse | mouth in the confirmation test of the allergy suppression effect using a mouse | mouth.

Claims (4)

乳糖非発酵性で、且つ抗アレルギー作用を有する酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)と乳糖発酵性乳酸菌を含有することを特徴とする、製造後の過剰な炭酸ガス生成を抑えた、I型アレルギー症状の改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルト。 Saccharomyces cerevisiae S4-A strain (patent biological deposit center deposit number FERM AP-21124) derived from horse milk liquor, which is a non-lactose fermentative and antiallergic yeast Saccharomyces cerevisiae , and contains lactose-fermenting lactic acid bacteria A kefir-like carbonic acid-containing yogurt effective in improving type I allergic symptoms, wherein excessive carbon dioxide production after production is suppressed. 前記乳糖発酵性乳酸菌が、少なくともラクトバチルス・ブルガリカスとストレプトコッカス・サーモフィルスを含む混合乳酸菌であることを特徴とする請求項1記載のケフィア様炭酸含有ヨーグルト。 The lactose fermenting lactic acid bacteria, at least Lactobacillus bulgaricus and claim 1 Symbol placement kefir-like carbonated yogurt characterized in that it is a mixed lactic acid bacteria comprising Streptococcus thermophilus. 獣乳に対して、必要に応じて生クリーム、脱脂粉乳、乳清パウダーを含む乳成分、酵母菌サッカロミセス・セレビシエである馬乳酒由来のサッカロミセス・セレビシエS4−A株(特許生物寄託センター寄託番号FERM AP−21124)の非発酵性糖、保型剤、離水防止剤を適量添加混合して調製される原料を主成分として含む主原料に対して、必須の種菌として乳糖非発酵性で且つ抗アレルギー作用を有する前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと乳糖発酵性乳酸菌を併用して所定量接種して醗酵せしめることを特徴とする製造後の過剰な炭酸ガス生成を抑えた、I型アレルギー症状の改善に有効なケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造方法。 Saccharomyces cerevisiae S4-A strain derived from horse milk, which is a milk component containing milk cream, skim milk powder, and whey powder as needed, and yeast Saccharomyces cerevisiae (patent biological deposit center deposit number) FERM AP-21124) is a non-fermentable lactose as an essential inoculum and is an anti-fermentative and anti-fermenting agent for the main raw material containing as a main ingredient a raw material prepared by adding and mixing appropriate amounts of non-fermentable sugar, shape-retaining agent, and water separation inhibitor in combination with the yeast Saccharomyces cerevisiae and lactose fermenting lactic acid bacteria with antiallergic suppressing excess carbon dioxide produced after manufacture, characterized in that allowed to fermentation by a predetermined amount inoculated, the improvement of the type I allergic symptoms A method for producing an effective kefir-like carbonate-containing yogurt. 前記酵母菌サッカロミセス・セレビシエと乳糖発酵性乳酸菌の接種量が、前記主原料に対してそれぞれ0.5〜10質量%であることを特徴とする請求項記載のケフィア様炭酸含有ヨーグルトの製造方法。 The method for producing a kefir-like carbonate-containing yogurt according to claim 3 , wherein the inoculum of the yeast Saccharomyces cerevisiae and the lactose-fermenting lactic acid bacterium is 0.5 to 10% by mass with respect to the main raw material, respectively. .
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