JP4067208B2 - Biospecific reaction measuring method and apparatus - Google Patents

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Description

【0001】 [0001]
【発明の属する技術分野】 BACKGROUND OF THE INVENTION
本発明は、生物学的特異反応による試料中の物質の測定方法及び測定装置に関するものである。 The present invention relates to measuring method and apparatus of a substance in a sample by biological specificity reactions. このような測定方法及び装置はとりわけ臨床検査や食品検査等の分野に利用される。 Such measuring methods and apparatus are inter alia used in fields such as clinical testing and food inspection.
【0002】 [0002]
【従来の技術】 BACKGROUND OF THE INVENTION
被測定物質を特異的に捕獲できるリガンドを保持させた反応固相、例えば多孔質マトリックスを用い、被測定物質をフロースルータイプで測定する生物学的特異反応測定法は、特表昭61−502214号、特開平4−318462号、特開平6−50973号等に示されているように公知である。 The reaction solid phase is retained ligand that can specifically capture the substance to be measured, for example, a porous matrix, biological specificity reaction measurement method for measuring a substance to be measured in a flow-through type, Kohyo Akira 61-502214 No., JP 4-318462, it is known as shown in JP-a-6-50973 Patent like. このような測定法に使用される装置としては、通常、上部開口部を有するコンテナーに吸収材を収容すると共に当該吸収材の上方に被測定物質と特異的に反応するリガンドを固定化した多孔質マトリックスを設けた装置が用いられる。 Such a device used in the assay, typically porous immobilized ligand which specifically reacts with the substance to be measured above the absorbent material accommodates the absorbing material container having an upper opening device having a matrix is ​​used. 係る装置を用いた被測定物質の測定は、例えば被測定物質が抗原の場合、上部開口部に被測定物質(即ち、抗原)液を加えて、被測定物質と特異的に反応するリガンド(即ち、抗体)を固定化した多孔質マトリックスを通過させ、抗原を捕獲させる。 Measurement of the substance to be measured using the apparatus according, for example, when the substance to be measured is an antigen, the substance to be measured to the upper opening (i.e., antigen) solution was added to the ligand which specifically reacts with the material to be measured (i.e. , antibody) passed through a fixed porous matrix, thereby trapping the antigen. 次いで、上部開口部に、標識(例えば、酵素)を結合させた抗体液を添加することにより、当該抗体をマトリックス上に捕獲された抗原と結合させ、更に標識に基づくシグナル(例えば、発光、放射能等)を測定することにより抗原の測定が行われる。 Then, the upper opening, labeled (e.g., enzyme) by adding an antibody solution was bound, the antibodies bound to the antigen captured on the matrix, further signal based on the label (e.g., light-emitting, radiation measurement of the antigen is carried out by measuring the ability and the like). なお、多孔質マトリックスを通過した各液は、前記の吸収材に吸収される。 Each liquid has passed through the porous matrix is ​​absorbed into the absorbent material.
【0003】 [0003]
【発明が解決しようとする課題】 [Problems that the Invention is to Solve
上述の被測定物質を特異的に捕獲できるリガンドを保持させた反応固相(以下、便宜上、反応マトリックスと称する)を用い、被測定物質をフロースルータイプで測定する生物学的特異反応測定法によれば、簡便に被測定物質の測定を行うことができるという効果を奏する。 Solid was held specifically capture can ligand substance to be measured above the reaction phase (hereinafter, for convenience, referred to as the reaction matrix) used, the biological specificity reaction measurement method for measuring a substance to be measured in a flow through type According, an effect that can be performed easily measure the substance to be measured. しかし、コンテナー内の吸収材においても標識に基づくシグナル(非特異的シグナル)が発生する。 However, the signal (non-specific signal) is generated based on the labels in the absorbent material in the container. そのため、反応マトリックスのシグナルを測定する際に、吸収材からの非特異的シグナルの影響を受けることになり、反応マトリックスのシグナルを高精度で測定することができなくなるという問題がある。 Therefore, when measuring the signal of the reaction matrix, will be influenced by the non-specific signal from the absorber material, there is a problem that the signal of the reaction matrix can not be measured with high accuracy. 係る問題を解消するための手段として、例えば、吸収材から透過してくる非特異的光シグナルを低減させることを目的として、吸収材と反応マトリックスの間に透過光低減要素を装着した装置が提案されている(特開平8−506420号)。 As a means for solving problems according, for example, for the purpose of reducing non-specific light signal coming transmitted from the absorbent material, the absorbent material and the device equipped with a transmitted light reduction element between the reaction matrix proposed is (JP-a-8-506420). 係る装置によれば、吸収材からの透過光をある程度は低減することができるが、その影響を完全に排除することは困難であった。 According to this device, but the transmitted light from the absorbing material to some extent can be reduced, it is difficult to completely eliminate the influence.
【0004】 [0004]
係る問題点を解消するために、本発明者等は、反応マトリックスを用いるフロースルータイプの生物学的特異反応測定装置を用いて被測定物質を測定をする方法において、吸収材からの非特異的シグナルの影響を排除し得る方法を検討した結果、標識物を反応後、反応マトリックスを移動させ、標識物を吸収していない吸収材上でシグナル発生物質液(例えば、酵素標識に対する基質液等)を添加すれば、吸収材内での非特異的シグナルの発生を防止でき、反応マトリックスのみのシグナルを測定することが可能となるので、より感度の高い測定ができることを見出し本発明を完成した。 To solve the problems according, the present inventors have found that a method for measuring a substance to be measured using a biological specificity reaction measuring apparatus of the flow-through type using a reaction matrix, nonspecific from absorber results of examining the method capable of eliminating the influence of the signal, after the reaction the label, the reaction matrix is ​​moved, the signal generating substance solution in absorber on not absorb label (e.g., a substrate solution for the enzyme label, etc.) be added, it is possible to prevent the occurrence of non-specific signal at the absorption material within, it becomes possible to measure the signal of only the reaction matrix, and completed the present invention found that it is more sensitive measurements.
本発明は係る知見に基づいてなされたもので、本発明は、臨床検査の分野で通常行われる血清、血漿及びその他の体液中の成分をフロースルータイプの生物学的特異反応測定方法及びその装置において、吸収材からの非特異的シグナルの影響を排除でき、測定精度を著しく高めることのできる測定方法及び測定装置を提供する。 The present invention has been made based on this finding, the present invention is a clinical test serum usually carried out in the field of plasma and other flow components in a body fluid through type biospecific reaction measurement method and apparatus in, you can eliminate the influence of non-specific signals from the absorbent material, to provide a measuring method and apparatus the measurement accuracy can be significantly increased.
【0005】 [0005]
【課題を解決するための手段】 In order to solve the problems]
上記の課題を解決するためになされた本発明の要旨は、被測定成分を捕獲できるリガンドを保持させた反応固相(即ち、反応マトリックス)を用いるフロースルータイプの生物学的特異反応測定において、反応マトリックスを吸収材上で移動させ、その後にシグナル発生物質液を添加することによって、吸収材内での非特異的シグナルの発生を防止し、反応マトリックスのみのシグナルを測定することからなる生物学的特異反応測定法及び反応マトリックスが吸収材上を移動可能に形成されていることからなる生物学的特異反応測定装置である。 Gist of the present invention has been made to solve the aforementioned problem, a solid reaction was allowed to hold a ligand capable of capturing the components to be measured phase (i.e., the reaction matrix) in biological specificity reaction measuring the flow-through type using a the reaction matrix is ​​moved on the absorbent material, followed by the addition of signal-generating substance mixture, to prevent the occurrence of non-specific signal at the absorption material inside, it consists of measuring the signal of only the reaction matrix biology specificity reaction assays and reactions matrix is ​​biologically specific reaction measuring apparatus consists of is movably formed on the absorber.
【0006】 [0006]
【発明の実施の形態】 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
本発明は上記の構成からなり、本発明の測定法及び装置の基本的原理であるフロースルータイプの生物学的特異反応測定法及び装置は前述のように公知であり、反応マトリックス、吸収材、コンテナー等については前掲の文献を参照することができる。 The present invention consists the above configuration, the measurement method and biological specificity reaction measuring method and apparatus of the flow-through type which is the basic principle of the apparatus of the present invention are known, as described above, the reaction matrix, absorbent, it can be referred to supra literature for containers and the like.
本発明は、標識物を反応後、反応マトリックスを移動させ、その後にシグナル発生物質液を添加することを特徴とするものであり、係る測定に使用される装置の一例を図面に基づいて説明する。 The present invention, after the reaction label, the reaction matrix is ​​moved, which then is characterized by adding the signal emitting substance solution will be described with reference to the drawings of an example of a device used to measure according .
【0007】 [0007]
図1は本発明の測定法に使用される装置の一例を示す図であり、(A)は側面概略図、(B)は平面概略図、(C)は(B)のX−X線断面概略図、(D)は(B)のY−Y線断面概略図である。 Figure 1 is a diagram showing an example of a device used in the measurement method of the present invention, (A) is a side schematic view, (B) is a plan schematic view, (C) is sectional view taken along line X-X of (B) schematic, (D) is a line Y-Y cross-sectional schematic view of (B). また、図2は、当該装置の使用状態を示す断面概略図である。 2 is a cross-sectional schematic view showing the use state of the device. 更に、図3は本発明の測定法に使用される装置の他の例の使用状態を示す断面概略図である。 Furthermore, FIG. 3 is a sectional schematic view showing a usage state of another example of a device used in the measurement method of the present invention.
図1及び2に示される反応装置は、プラスチック等からなるコンテナー1に、2つの吸収材2−1及び2−2(例えば、ガラス繊維等)が仕切り板3を介して収容されている。 The reaction apparatus shown in Figure 1 and 2, a container 1 made of plastic or the like, two absorbent 2-1 and 2-2 (e.g., glass fibers, etc.) are accommodated via the partition plate 3. コンテナー1の上部には蓋体4が設けられており、蓋体4は、吸収材2−1に対向する位置に開口部5を有し、開口部5には反応マトリックス6が固定されたマトリックス保持部材7が嵌め込まれている。 The upper container 1 is the cover 4 is provided, the matrix cover 4 has an opening 5 at a position facing the absorbent material 2-1, in the opening 5 of the reaction matrix 6 is fixed holding member 7 is fitted. 蓋体4は、コンテナー1の側面に設けられた溝8に嵌合するように形成された突起部材9を有し、当該突起部材9と溝8により、蓋体4はコンテナー1に結合されていると共にコンテナー1上を移動することが可能となっている。 Lid 4 has a projecting member 9 formed to fit into a groove 8 provided on the side surface of the container 1, by the projection member 9 and the groove 8, the lid member 4 is coupled to the container 1 it is possible to move on the container 1 with am. 即ち、蓋体4をコンテナー1上で移動させると、蓋体4に設けられた反応マトリックス6を、吸収材2−1上から吸収材2−2上に移動させることが可能なようになっている。 That is, when moving the lid 4 on the container 1, the reaction matrix 6 provided on the lid 4, so that can be moved on the absorber material 2-2 over absorbent 2-1 there.
【0008】 [0008]
上記の装置には、必要に応じて、前処理フィルター10を設けてもよく、前処理フィルター10を設けることにより試料中の夾雑物を除去することができるので、反応マトリックス6の目詰まりが防止され、測定精度・分析感度の向上が図れる。 In the apparatus described above, if desired, may be provided with a preprocessing filter 10, it is possible to remove impurities in the sample by providing the pre-processing filter 10, preventing clogging of the reaction matrix 6 It is, thereby improving the measurement accuracy and analytical sensitivity. 前処理フィルター10は、蓋体4の開口部5に適合するように作製されたフィルター保持部材11に固定されている。 Preprocessing filter 10 is fixed to the filter holding member 11 fabricated to fit into the opening 5 of the cover 4. 当該前処理フィルター10は、試料中の夾雑物を除去できるものであれば特に限定はされないが、フィルターの表面で夾雑物を捕獲するスクリーンフィルターと、フィルターの内部で夾雑物を捕獲するデプスフィルターが例示される。 The preprocessing filter 10 is not particularly limited as long as it can remove contaminants in the sample, a screen filter for trapping contaminants in the surface of the filter, is depth filters to capture contaminants within the filter It is exemplified. 前処理フィルター10の好ましい態様としては、保留粒子径の異なる2種以上のデプスフィルターで構成され、より好ましくは反応マトリックス6に対応する側から順に、保留粒子径が0.2〜0.4μmのデプスフィルターと1μm以上のデプスフィルターで構成される。 A preferred embodiment of the pretreatment filter 10 is composed of two or more of the depth filter having different retaining particle size, from the side and more preferably corresponding to the reaction matrix 6 in this order, retaining particle size of 0.2~0.4μm consisting of more depth filter depth filter and 1μm. 更に必要に応じて、保留粒子径の異なる他のデプスフィルターやスクリーンフィルターを組み合わせてもよい。 Further, if necessary, it may be combined with different other depth filter and screen filter with particle retention size.
【0009】 [0009]
係る構成からなる反応装置を使用して被測定物質を測定する本発明の方法の一例として被測定物質である抗原を測定する例の概略を図2に基づいて説明する。 Will be described with reference to schematic example of measuring the antigen is a substance to be measured in FIG substance to be measured using a reactor having the configuration according as an example of the method of the invention for measuring. まず、前処理フィルター10が固定されたフィルター保持部材11を、蓋体4の開口部5に嵌合させる(Aの状態)。 First, preprocessing filter 10 is a filter holding member 11 fixed, is fitted into the opening 5 of the cover 4 (the state A). その後、被測定物質である抗原を含有する試料液を前処理フィルター10に供給する。 Thereafter, supply the sample solution containing the antigen to be measured substance preprocessing filter 10. 前処理フィルター10で濾過された試料液は、抗体(モノクローナル抗体又はポリクローナル抗体)を保持(感作)させた反応マトリックス6を通過し、抗原は当該反応マトリックス6に捕獲されると共に通過した試料液は吸収材2−1に吸収される。 Sample solution was filtered through a pretreatment filter 10, the antibody through the reaction matrix 6 is held (sensitizing) a (monoclonal or polyclonal antibody), a sample solution having passed through with an antigen is captured in the reaction matrix 6 It is absorbed by the absorbent material 2-1. 次いで、標識化された抗体を前処理フィルター10を介して供給し、標識化された抗体を反応マトリックス6に捕獲された抗原と結合させる(Bの状態)。 Then, the labeled antibody is supplied through a pre-processing filter 10 causes the labeled antibody is bound to the antigen captured by the reaction matrix 6 (the state B). その後、フィルター保持部材11を取り除き、開口部5から適当な洗浄液を供給し、反応マトリックス6を洗浄する。 Then, remove the filter holder member 11, to supply a suitable cleaning fluid from the opening 5, to wash the reaction matrix 6.
ついで、蓋体4を移動させることにより、洗浄された反応マトリックス6が吸収材2−2上にくるように移動させる(Cの状態)。 Then, by moving the lid body 4, it was washed reaction matrix 6 is moved in such a manner that on the absorber material 2-2 (C state). その後、開口部5からシグナル発生物質液を供給することによりシグナルを発生させ、反応マトリックス6のシグナルをシグナル測定装置により測定することにより抗原(被測定物質)を測定(定量又は定性)することができる。 Thereafter, a signal is generated by supplying a signal emitting substance solution from the opening 5, to measure the antigen (the substance to be measured) by measuring the signal of the reaction matrix 6 by a signal measuring device (quantitative or qualitative) it can. なお、反応マトリックス6を通過したシグナル発生物質液は吸収材2−2に吸収される。 Incidentally, the signal generating substance solution that has passed through the reaction matrix 6 is absorbed by the absorbent material 2-2.
この方法では、吸収材2−2には前記の標識化された抗体が吸収されていないので、シグナル発生物質を吸収してもシグナルを発生することがない。 In this way, since the absorbent 2-2 antibody labeled the has not been absorbed, it does not even absorb signal emitting substance to generate a signal. 従って、非特異的シグナルの影響を受けることなく、反応マトリックス6のシグナルを測定することができ、測定精度を著しく高めることが可能となる。 Accordingly, without being affected by the non-specific signals, signal reaction matrix 6 can be measured, it is possible to significantly enhance the measurement accuracy.
【0010】 [0010]
図3は、本発明の測定法に使用される装置の他の例の使用状態を示す断面概略図である。 Figure 3 is a cross-sectional schematic view showing another example of use state of the apparatus used in the measuring method of the present invention. この装置では、コンテナー1内に3つの吸収材(2−3、2−4、2−5)が仕切り板3を介して収容されている。 In this apparatus, three absorber (2-3,2-4,2-5) are housed through the partition plate 3 in the container 1. なお、図1及び2の装置と同じ部材には同じ符号を付してある。 Incidentally, the same members as the apparatus of FIG 1 and 2 are denoted by the same reference numerals.
図3に示される装置を用いた本発明の方法を、被測定物質である抗原を測定する例をもって説明する。 The method of the present invention using the apparatus shown in Figure 3, will be described with an example of measuring the antigen is a substance to be measured.
まず、図2の(A)と同様にして、前処理フィルター10が固定されたフィルター保持部材11を、蓋体4の開口部5に嵌合させる(Aの状態)。 First, in the same manner as in FIG. 2 (A), the preprocessing filter holding member 11 the filter 10 is fixed is fitted into the opening 5 of the lid 4 (A state). その後、被測定物質である抗原を含有する試料液を前処理フィルター10に供給する。 Thereafter, supply the sample solution containing the antigen to be measured substance preprocessing filter 10. 前処理フィルター10で濾過された試料液は、抗体(モノクローナル抗体又はポリクローナル抗体)を保持(感作)させた反応マトリックス6を通過し、抗原は当該反応マトリックス6に捕獲されると共に通過した試料液は吸収材2−3に吸収される。 Sample solution was filtered through a pretreatment filter 10, the antibody through the reaction matrix 6 is held (sensitizing) a (monoclonal or polyclonal antibody), a sample solution having passed through with an antigen is captured in the reaction matrix 6 It is absorbed by the absorbent material 2-3. 次いで、標識化された抗体を前処理フィルター10を介して供給し、標識化された抗体を反応マトリックス6に捕獲された抗原と結合させる。 Then, the labeled antibody is supplied through a pre-processing filter 10 causes the labeled antibody is bound to the antigen captured by the reaction matrix 6. その後、フィルター保持部材11を取り除く。 Then, remove the filter holder member 11.
ついで、蓋体4を移動させることにより、反応マトリックス6が吸収材2−4上にくるように移動させる(Bの状態)。 Then, by moving the lid 4, the reaction matrix 6 is moved in such a manner that on the absorber material 2-4 (a state of B). この状態で、開口部5から適当な洗浄液を供給し、反応マトリックス6を洗浄する。 In this state, supplying a suitable cleaning liquid from the opening 5, to wash the reaction matrix 6. 反応マトリックス6を通過した洗浄液は吸収材2−4に吸収される。 Washing liquid which has passed through the reaction matrix 6 is absorbed by the absorbent material 2-4.
上記の洗浄後、更に蓋体4を移動させることにより、洗浄された反応マトリックス6が吸収材2−5上にくるように移動させる(Cの状態)。 After the above washing, further by moving the lid body 4, was washed reaction matrix 6 is moved so that on the absorber material 2-5 (state of C). その後、開口部5からシグナル発生物質液を供給することによりシグナルを発生させ、反応マトリックス6のシグナルをシグナル測定装置により測定することにより抗原(被測定物質)を測定(定量又は定性)することができる。 Thereafter, a signal is generated by supplying a signal emitting substance solution from the opening 5, to measure the antigen (the substance to be measured) by measuring the signal of the reaction matrix 6 by a signal measuring device (quantitative or qualitative) it can. なお、反応マトリックス6を通過したシグナル発生物質液は吸収材2−5に吸収される。 Incidentally, the signal generating substance solution that has passed through the reaction matrix 6 is absorbed by the absorbent material 2-5.
この方法では、標識化された抗体は吸収材2−3に吸収されており、そして中間に洗浄液のみを吸収した吸収材2−4が存在するので、シグナル発生物質液を吸収した吸収材2−5でのシグナル発生を実質上完全に防止することができる。 In this method, labeled antibody has been absorbed into the absorbent material 2-3, and the absorption member 2-4 which has absorbed only washing liquid to the intermediate are present, absorbent which has absorbed the signal emitting substance solution 2- the signal generation in 5 can be substantially completely prevented. 従って、非特異的シグナルの影響を受けることなく、反応マトリックス6のシグナルを測定することができ、測定精度を一層高めることが可能となる。 Accordingly, without being affected by the non-specific signals, signal reaction matrix 6 can be measured, it is possible to further improve the measurement accuracy.
【0011】 [0011]
上記のシグナル測定としては、例えば、化学発光測定、蛍光測定、比色測定等が例示される。 The signal measurement described above, for example, chemiluminescence, fluorescence measurement, colorimetric measurement, and the like. なお、当該測定は、測定法に応じて計器的測定、目視的測定の何れであってもよい。 Incidentally, the measurement is instrument measurement according to the measurement method may be either a visual measurement. また、標識として酵素、蛍光物質等が利用できること;シグナル発生物質(化学発光基質、蛍光源物質、色原物質等)により標識に基づく光シグナルを発生させること及びその光学的測定法等はこの分野で周知である。 Further, the enzyme as a label, that a fluorescent substance or the like can be used; signal emitting substance (chemiluminescent substrate, a fluorescent source material, chromogenic substances, etc.) to generate a light signal and an optical measuring method based on labeled by the field in is well known.
なお、上記の測定法及び装置において、試料の性状によっては、前処理フィルター10での濾過工程は省略することもできる。 In the above measuring method and apparatus, the properties of samples, filtration step in the preprocessing filter 10 may be omitted. また、上記の例では、吸収材は仕切り板3により複数の吸収材(2−1と2−2及び2−3、2−4と2−5)に分離されているが、吸収材の種類及び充填量によっては、仕切り板3を設けることなく実施することもできる。 Further, in the above example, the absorbent material has been separated into a plurality of absorbent material (2-1 and 2-2 and 2-3, 2-4 and 2-5) by the partition plate 3, the type of absorbent material and some filling amount can be performed without providing the partition plate 3. 更に、反応終了後、コンテナー1から蓋体4を取り外すことにより、シグナルが発生した反応マトリックス6を保存することもできる。 Furthermore, after the completion of the reaction, by removing the cover 4 from the container 1, it is also possible to store the reaction matrix 6 a signal occurs. また、蓋体4の移動を容易にするため、蓋体4の表面に凹凸部を設けて蓋体4を掴みやすくしてもよい。 In order to facilitate the movement of the cover 4 may be easily grasp the lid 4 is provided an uneven portion on the surface of the cover 4. このように、本発明は適宜変更して実施することができる。 Thus, the present invention can be carried out appropriately changed.
【0012】 [0012]
本発明の測定法は、生物学的特異反応に基づいて被測定物質を測定する方法であれば何れの方法にも適用でき、このような例として、抗原−抗体反応、核酸のハイブリダイゼーション、糖鎖−レクチンの反応、酵素−基質又は阻害剤との反応、生理活性物質−受容体反応、ビオチン−アビジン反応等が挙げられる。 Measurement of the present invention can be applied to any method as long as it is a method for measuring a test substance based on a biological specificity reactions, as such an example, the antigen - antibody reaction, nucleic acid hybridization, sugar chain - reaction of lectin, enzyme - reaction with substrate or inhibitor, bioactive substance - receptor reaction, biotin - avidin reaction, and the like. 従って、本発明の方法及び装置の測定対象となる物質としては、例えば、抗原、抗体、DNA、cDNA、RNA、糖類、酵素及びその阻害剤、生理活性物質及びその受容体、ビオチン化物質、アビジン化物質等が例示できる。 Therefore, the measurement target substance serving of the method and apparatus of the present invention, for example, antigens, antibodies, DNA, cDNA, RNA, sugars, enzymes and their inhibitors, biologically active substances and their receptors, biotinylated substances, avidin substances and the like.
【0013】 [0013]
【発明の効果】 【Effect of the invention】
本発明方法及び装置によれば、吸収材からの非特異的シグナルの影響を完全に排除することができるので、分析感度・測定精度を著しく高めることができるという効果を奏する。 According to the present invention a method and apparatus, it is possible to completely eliminate the influence of non-specific signals from the absorbent material, an effect that can significantly increase the analytical sensitivity and measurement accuracy.
【0014】 [0014]
【実施例】 【Example】
以下、具体的な例を挙げて本発明を説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。 The present invention will be described below with a specific example, the present invention is not limited to the examples.
実施例1 Example 1
▲1▼反応装置の作製 ▲ 1 ▼ Production of reactor
図1に示すように、0.45μmの孔径を持つニトロセルロースメンブラン上に抗HBs抗原モノクローナル抗体を感作させた感作メンブラン(反応マトリックス6)を反応マトリックス保持部材7に保持し、その下方に吸収材2−1及び2−2を備えた反応装置を作製した。 As shown in FIG. 1, and held in the reaction matrix holding member 7 a nitrocellulose membrane on anti-HBs antigen monoclonal antibody sensitized membrane obtained by sensitization (reaction matrix 6) with a 0.45μm pore size thereunder the reactor having a absorbent 2-1 and 2-2 were prepared.
▲2▼HBs抗原の測定 ▲ 2 ▼ HBs measurement of antigen
上記の装置を用いてHBs抗原の免疫測定を行った。 It was immunoassay of HBs antigen using the above apparatus. 即ち、当該装置の開口部5にPBS緩衝液100μlを添加した後、4倍希釈調製した試料200μlを添加し、3分後にペルオキシダーゼ標識した抗HBs抗原モノクローナル抗体液100μlを添加した。 That is, after the addition of PBS buffer 100μl into the opening 5 of the device, and adding the sample 200μl was 4-fold diluted preparation was added anti-HBs antigen monoclonal antibody solution 100μl which was peroxidase labeled after 3 minutes. PBS緩衝液を主成分とする洗浄液200μlを2回添加して洗浄した後、化学発光基質液100μlを添加して発光測定器にて発光シグナルを測定することにより免疫測定を行った。 After washing the washing liquid 200μl mainly composed of PBS buffer is added twice, was immunoassay by measuring the luminescent signal by emitting measuring device with the addition of chemiluminescent substrate solution 100 [mu] l. なお、上記の測定において、試料として、HBs抗原を5 IU/mlとなるように1%BSA−PBS中に調製した陽性コントロール試料(PC)と、HBs抗原を含まない1%BSA−PBSのみの陰性コントロール試料(NC)を用いて実施した。 Note that in the above measurement, as a sample, a positive control sample prepared in 1% BSA-PBS as the HBs antigen becomes 5 IU / ml (PC), 1% BSA-PBS only without the HBs antigen negative control samples (NC) was performed using.
免疫測定は、標識抗体液を添加し、洗浄を行った後、吸収材2−1上にあった反応マトリックス6を吸収材2−2上に移動させ、化学発光物質を添加する本発明の方法(スライド型)と、同一の吸収材上で標識抗体液及び化学発光物質を添加する方法(固定型)とで行い、発光カウントを測定した。 Immunoassays, addition of labeled antibody solution, after washing, the method of the present invention that the reaction matrix 6 was on absorbent material 2-1 is moved onto the absorbent material 2-2, the addition of chemiluminescent substance and (slide type), performed in on the same absorbent method of adding a labeled antibody solution and chemiluminescence (fixed) and luminescence was measured counts. その結果を表1に示す。 The results are shown in Table 1. 表1に示されるように、スライド型で得られる陽性コントロール(PC)と陰性コントロール(NC)のシグナルを比較すると、明らかにスライド型の方が比が大きく、スライド型での測定の方が高感度であることが判明した。 As shown in Table 1, when comparing the signal of the positive control obtained with slide (PC) and negative control (NC), apparently towards a slide-type large specific, who measured the slide type high it was found that the sensitivity.
【0015】 [0015]
【表1】 [Table 1]

【図面の簡単な説明】 BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS
【図1】本発明に係る装置の一例を示す概略図である。 1 is a schematic diagram showing an example of an apparatus according to the present invention. 図中、(A)は側面概略図、(B)は平面概略図、(C)は(B)のX−X線断面概略図、(D)は(B)のY−Y線断面概略図である。 In the figure, (A) is a side schematic view, (B) is a plan schematic view, (C) is sectional view taken along line X-X schematic view of (B), (D) is a line Y-Y cross-sectional schematic view of (B) it is.
【図2】図1の装置の使用状態を示す断面概略図である。 2 is a cross-sectional schematic view showing the use state of the apparatus of FIG.
【図3】本発明に係る装置の他の例の使用状態を示す断面概略図である。 3 is a cross-sectional schematic view showing a usage state of another example of apparatus according to the present invention.
【符号の説明】 DESCRIPTION OF SYMBOLS
1 コンテナー2−1〜2−5 吸収材3 仕切り板4 蓋体5 開口部6 反応マトリックス7 反応マトリックス保持部材8 溝9 突起部材 1 container 2-1 to 2-5 absorber 3 the partition plate 4 lid 5 opening 6 reaction matrix 7 reaction matrix holding member 8 groove 9 protruding member
10 前処理フィルター 10 pre-processing filters
11 フィルター保持部材 11 filter holding member

Claims (5)

  1. 被測定物質を捕獲できるリガンドを保持させた反応固相が吸収材上で移動可能に形成されたフロースルータイプの生物学的特異反応装置を用い、反応固相に発生したシグナルを測定する生物学的特異反応測定法において、 試料液を前記反応固相に供給する工程と、試料液が供給された当該反応固相に、標識化されており且つ被測定物質と生物学的特異反応に基づいて結合し得る物質の液を供給する工程と、当該反応固相を吸収材上で移動させる工程と、標識に基づいて発生したシグナルを測定する工程と、を備えたことを特徴とする生物学的特異反応測定法。 Using biological specificity reactor a flow-through type reaction solid phase is retained ligand capable of capturing a substance to be measured is movably formed on the absorber, measure the signal generated in the reaction solid phase organisms in histological specific reaction measurement method, the basis of the step of supplying a sample liquid to the reaction solid phase, to the reaction solid phase the sample solution is supplied, and which is labeled to be measured substance and biological specificity reactions and supplying a liquid substance capable of binding Te, organism, wherein the step Before moving the reaction solid phase on absorbent, and measuring the signal generated on the basis of the label, further comprising a histological specific reaction measurement method.
  2. 前記測定工程において、シグナル測定を計器的測定で行うことを特徴とする請求項1の生物学的特異反応測定法。 In the measuring step, biological specificity reaction measurement method according to claim 1, characterized in that the signal measured by instrumental measurement.
  3. 前記移動工程と測定工程の間に、前記反応固相にシグナル発生物質液を供給する工程をさらに備えたことを特徴とする請求項1記載の生物学的特異反応測定法。 Wherein during the movement process and the measurement process, biological specificity reaction measurement method according to claim 1, further comprising a step of supplying a signal emitting substance solution into the reaction solid phase.
  4. 前記標識が酵素であり、前記シグナル発生物質液が化学発光基質液であることを特徴とする請求項3記載の生物学的特異反応測定法。 The label is an enzyme, biological specificity reaction measurement method according to claim 3, wherein the signal emitting substance fluid is a chemiluminescent substrate solution.
  5. 請求項1〜4の何れか1項に記載の生物学的特異反応測定法に用いられ、反応固相が吸収材上で移動可能に形成されていることを特徴とする生物学的特異反応測定装置。 Used in biological specificity reaction measurement method according to any one of claims 1 to 4, it biological specificity reaction measuring, characterized in that the reaction solid phase is movably formed on the absorber apparatus.
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