JP3776203B2 - ICAM-1 production inhibitor - Google Patents

Description

【００１０】
［式中、Ｒ¹は直鎖または分岐のＣ_1-6アルキル基、２−ハロゲノシクロプロピル基または（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ_1-6アルキルフェニル基を示し；
Ｒ⁵はフェニル基またはＣ_1-6アルコキシフェニル基を示し；
Ｒ⁷はハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ_1-6アルキル基、ハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ_1-6アルコキシル基、または１もしくは２のＣ_1-6アルキル基を置換基として有していてもよいアミノメチル基を示し；
Ｘは水素原子またはハロゲン原子を示し；
Ｚは炭素原子または窒素原子で表わされる部分構造を示す。ただし、Ｚが窒素原子で表わされる部分構造のとき、Ｒ⁷は１もしくは２のＣ_1-6アルキル基を置換基として有していてもよいアミノメチル基である。］
で表わされる化合物またはその塩を有効成分とするＴＮＦ−αの誘導に由来するＩＣＡＭ−１の産生阻害剤を提供するものである。
【００２２】
【発明の実施の形態】
本発明のＴＮＦ−α誘導効果阻害能を有する、一般式（１）で表わされる化合物の置換基について以下に述べる。なお、本願明細書において、例えば、「Ｃ_1-6」とは、炭素数が１から６であることを示している。
【００２３】
置換基Ｒ¹は、直鎖または分岐鎖のＣ_1-6アルキル基、２−ハロゲノシクロプロピル基又は（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ _1-6 アルキルフェニル基を示す。ここで、アルキル基としてはメチル基およびエチル基が好ましい。
【００２４】
（１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｃ_1-6アルキル基のアルキル部分は、直鎖、分岐鎖または環状のいずれでもよく、メチル基が最も好ましい。
【００３４】
一般式（１）中、Ｒ⁵は、フェニル基又はＣ _1-6 アルコキシフェニル基を示す。また、フェニル基上においてはそのいずれの位置にこの置換基があってもよい。
【００３６】
Ｘは、ハロゲン原子または水素原子であるが、ハロゲン原子の場合はフッ素原子が好ましく、Ｘとしてはこれらのうち、フッ素原子または水素原子が好ましい。
【００３９】
Ｒ ⁷ で示されるハロゲン原子を置換基として有していてもよいＣ_1-6アルキル基またはＣ_1-6アルコキシル基におけるハロゲン原子としてはフッ素原子または塩素原子が好ましく、特にフッ素原子が好ましい。フッ素原子を置換基として有するアルキル基またはアルコキシル基としては、直鎖状のアルキル基またはアルコキシル基が好ましい。かかるアルキル基またはアルコキシル基上のフッ素原子の数は特に限定はないが、モノ置換からパーフルオロ置換でよい。具体的には、モノフルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基等のフルオロアルキル基；モノフルオロメトキシ基、ジフルオロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基、２，２，２−トリフルオロエトキシ基等のフルオロアルコキシ基が挙げられる。
【００４５】
本発明のＴＮＦ−αの誘導に由来するＩＣＡＭ−１の産生阻害剤の好ましい具体例としては、次の式（４）〜（７）で表わされる化合物またはその塩が挙げられる。
【００４６】
【化１３】

【００４７】
式（１）の化合物は、例えば次の反応式にしたがって製造することができる。
【００４８】
【化１】

【００４９】
［式中、Ｘ′は、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ_1-3アルキルスルホニル基、またはベンゼンスルホニル基、トルエンスルホニル基等のアリールスルホニル基等の、脱離基としての機能を有する置換基であり、Ｙ′は、水酸基、Ｃ _1-6 アルコキシ基、または式（１０）：
【００５０】
【化１５】

【００５１】
（式中、Ｒ⁹およびＲ¹⁰は、フッ素原子または低級アルキルカルボニルオキシ基を示す。）で表わされるホウ素含有置換基であり、Ｒ¹ 、Ｒ ⁵ 、Ｒ ⁷ 、ＸおよびＺは、前記と同じ］
【００５２】
すなわち、一般式（８）で表わされる化合物を式（９）で表わされる化合物あるいはその酸付加塩と反応させることによって製造することができる。
【００５３】
Ｙ′がＣ _1-6 アルコキシ基のとき、相当するカルボン酸への変換は、通常のカルボン酸エステルの加水分解に用いられる酸または塩基の存在下で行い、脱保護が必要な場合は保護基に対応した適当な条件で保護基を除去して式（１）で示される目的化合物を得ることができる。
【００５４】
式（８）の化合物において、Ｙ′が式（１０）で表わされる化合物の場合には、式（９）の化合物と反応を行った後に酸性または塩基性化合物で処理することにより相当するカルボン酸に変換することができる。
【００５５】
式（８）の化合物と式（９）の化合物との反応は、無溶媒または不活性溶媒中行うことができる。ここで不活性溶媒としては例えばジメチルスルホキシド、ピリジン、アセトニトリル、トリエチルアミン、エタノール、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、水、３−メトキシブタノール等を挙げることができる。またはこれらの溶媒は混合物として使用してもよい。
【００５６】
反応温度は、通常、室温〜２００℃の範囲であり、好ましくは２５℃〜１５０℃の範囲である。反応時間は３０分〜４８時間で、通常は３０分〜２時間程度で完結する。
【００５７】
反応は、無機塩基または有機塩基のような酸受容体、例えば、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属炭酸塩または炭酸水素塩、あるいはトリエチルアミン、ピリジン、１，８−ジアザビシクロウンデセン等の有機塩基性化合物の存在下で行うのが有利である。
【００５８】
式（１）の化合物はエナンチオマーまたはジアステレオマーの存在する場合があるが、本発明化合物をヒトや動物に投与する際は単一のエナンチオマーまたはジアステレオマーからなるものを投与することが好ましい。なお、この「単一のエナンチオマーまたはジアステレオマーからなる」とは、他のエナンチオマーまたはジアステレオマーを全く含有しない場合だけではなく、物理定数や、生理活性に対して影響がない程度であれば他のエナンチオマーまたはジアステレオマーが含まれていてもよいという意味である。
【００５９】
化合物（１）は、遊離体のままでもよいが、無機酸または有機酸の酸付加塩としてあるいはカルボキシル基の塩としてもよい。酸付加塩とする場合の例としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩等の無機酸塩類、あるいは酢酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩等の有機酸塩類を挙げることができる。
【００６０】
またカルボキシル基の塩としては、例えばリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、またトリエチルアミン塩やＮ−メチルグルカミン塩、トリス−（ヒドロキシルメチル）アミノメタン塩等を挙げることができる。
【００６１】
またこれらの化合物（１）の遊離体、酸付加塩およびカルボキシル基の塩は、それぞれ水和物として存在することもある。
【００６２】
一方、カルボン酸部分がエステルである本発明化合物は、合成中間体やプロドラッグとして有用である。ここで合成中間体として用いる場合、例えば、アルキルエステル類やベンジルエステル類、アルコキシアルキルエステル類、フェニルアルキルエステル類およびフェニルエステル類等が好ましい。
【００６３】
また、プロドラッグとして用いる場合は、生体内で容易に切断されてカルボン酸の遊離体を生成するようなエステルが好ましく、例えば、アセトキシメチルエステル、ピバロイルオキシメチルエステル、エトキシカルボニルエステル、コリンエステル、ジメチルアミノエチルエステル、５−インダニルエステル、フタリジニルエステル、５−アルキル−２−オキソ−１，３−ジオキソール−４−イルメチルエステル、３−アセトキシ−２−オキソブチルエステル等のオキソアルキルエステル等が好ましい。
【００６５】
化合物（１）は、またＴＮＦ−αに起因する、ＩＣＡＭ−１産生の阻害作用を有しており、種々の細胞接着を抑制することからＩＣＡＭ−１に基づく細胞接着に起因する疾患、例えば慢性関節リウマチ、関節炎などの炎症性疾患、心筋の虚血再灌流障害、気管支喘息、糸球体腎炎、臓器移植時の拒絶反応等の治療剤として有用である。
【００６６】
化合物（１）をＴＮＦ−αの誘導に由来するＩＣＡＭ−１の産生阻害剤として使用する場合、投与量は、患者の年齢、性別、症状等により異なるが、成人一日当たり５mg〜２ｇ、好ましくは５０mg〜１０００mgの範囲とするのが好ましい。この場合、一日量を一日１回、あるいは２〜３回に分けて投与すればよく、また一日量は必要によっては上記の量を超えてもよい。
【００６７】
化合物（１）を含有するＴＮＦ−αの誘導に由来するＩＣＡＭ−１の産生阻害剤は、その投与法、剤型に特に制限はなく、通常用いられている各種製剤の調製法にてその投与法にあった剤型にすればよい。
【００６８】
経口用製剤としては例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤や、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤または油性もしくは水性の懸濁液等を挙げることができる。
【００６９】
注射剤としては溶液を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としても良く、必要に応じて安定剤、防腐剤、溶解補助剤を使用してもよい。また一投与量毎に容器に収納してもよく、また多投与量を同一の容器に収納してもよい。
【００７０】
また外用製剤として溶液剤、懸濁液、乳濁液、軟膏、ゲル、クリーム、ローション、スプレー等が挙げられる。
【００７１】
固形製剤としては活性化合物とともに製剤学上許容されている添加物を含み、例えば充填剤類や増量剤類、結合剤類、崩壊剤類、溶解促進剤類、湿潤剤類、潤滑剤類等を必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。
【００７２】
液体製剤としては溶液、懸濁液、乳液剤等を挙げることができ、添加剤として懸濁化剤、乳化剤等を含んでいてもよい。
【００７３】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００７４】
実施例１
８−ジフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−１−（トランス−２−フルオロシクロプロピル）−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（４）の合成
【００７５】
【化１６】

【００７６】
８−ジフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロ−６，７−ジフルオロ−１−（トランス−２−フルオロシクロプロピル）−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１−８）（１００mg，０．２８６mmol）、１−（２−メトキシフェニル）ピペラジン（１−９）（１１０mg，０．５７２mmol）、トリエチルアミン（０．２５ml）、アセトニトリル（５ml）を混合して４時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し、残留物をエタノールで結晶化して濾取し、８３．３mgの標記化合物（４）を無色結晶として得た。得られた化合物（４）の物性は以下の通りである。
【００７７】
融点：２１８−２２０℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４２−１．５０（１Ｈ，ｍ），１．９０−２．０１（１Ｈ，ｍ），３．１６−３．３０（４Ｈ，ｍ），３．５０−３．３７（２Ｈ，ｍ），３．６９−３．７６（２Ｈ，ｍ），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．４３−４．５０（１Ｈ，ｍ，Ｎ−ＣＨ），４．６４（１Ｈ，ｄｍ，Ｊ＝６１Ｈｚ，−ＣＨＦ−），６．６１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７７Ｈｚ，７２Ｈｚ，−ＯＣＨＦ₂），６．９１−７．２２（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ），８．７１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），１４．３４（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＯＯＨ）
元素分析値：Ｃ₂₅Ｈ₂₃Ｆ₄Ｎ₃Ｏ₅として
計算値：Ｃ，５７．５８；Ｈ，４．４５；Ｎ，８．０６
分析値：Ｃ，５７．３７；Ｈ，４．５１；Ｎ，７．９０
【００７８】
参考例１
３，４−デヒドロ−４−フェニルピペリジン（Ａ−９）の合成
【００７９】
【化１７】

【００８０】
４−ヒドロキシ−４−フェニルピペリジン（４９７mg，２．８０mmol）をトルエン（５０ml）に溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８００mg，４．２１mmol）を加え、２３時間加熱環流して脱水した。反応液を減圧乾固し、残留物に１規定水酸化ナトリウム水溶液（５０ml）を加えてクロロホルムで抽出（２×５０ml）した。有機層を飽和食塩水（２×５０ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去して４４７mg（定量的）の標記化合物（Ａ−９）を淡黄色油状物として得た。得られた化合物（Ａ−９）の物性は以下の通りである。
【００８１】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：２．４７（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−），３．１１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，−ＣＨ₂−），３．５３（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−），６．１４（１Ｈ，ｍ，＝ＣＨ−），７．２２−７．４０（Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃＨ）
【００８２】
参考例２
４−フェニルピペリジン（Ｂ−９）の合成
【００８３】
【化１８】

【００８４】
３，４−デヒドロ−４−フェニルピペリジン（４４７mg，２．８１mmol）、エタノール（５０ml）、５％パラジウム炭素（３２５mg）を混合し、１気圧水素雰囲気下、室温で１５時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧乾固して４２５mg（９４％）の標記化合物（Ｂ−９）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｂ−９）の物性は以下の通りである。
【００８５】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．６０−１．７５（２Ｈ，ｍ），２．５８−２．６６（１Ｈ，ｍ），２．７２−２．７８（２Ｈ，ｍ），３．１８−３．２１（２Ｈ，ｍ），７．１８−７．３２（５Ｈ，ｍ）
【００８６】
実施例２
６−フルオロ−１−メチル−４−オキソ−７−（４−フェニル−１−ピペリジニル）−８−トリフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（２−１）の合成
【００８７】
【化１９】

【００８８】
６，７−ジフルオロ−１−メチル−４−オキソ−８−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（２−８）（８７．２mg，０．２８４mmol；特開平８−１８３７７５号）、４−フェニルピペリジン（Ｂ−９）（６８．６mg，０．４２５mmol）、トリエチルアミン（１１９μｌ，０．８５２mmol）、アセトニトリル（４ml）を混合し、１７時間加熱環流した。反応液を放冷して析出した結晶を濾取し、エタノールから再結晶して６４．２mg（５０％）の標記化合物（２−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（２−１）の物性は以下の通りである。
【００８９】
融点：２６８．５−２７０℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．９７（４Ｈ，ｂｒｏａｄ，２×−ＣＨ₂−），２．７９−２．８７（１Ｈ，ｍ），３．７９（２Ｈ，ｂｒｏａｄ ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，−ＣＨ₂−），４．０２（２Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−），７．２３−７．３７（５Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），１４．６３（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＯＯＨ）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７３４，１６１８，１４８８（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₃Ｈ₂₀Ｆ₄Ｎ₂Ｏ₃・１／４Ｈ₂Ｏとして
計算値：Ｃ，６０．９９；Ｈ，４．５６；Ｎ，６．１９
分析値：Ｃ，６０．９４；Ｈ，４．６３；Ｎ，６．２４
【００９０】
実施例３
７−（３，４−デヒドロ−４−フェニル−１−ピペリジニル）−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−１−メチル−８−トリフルオロメチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（５）の合成
【００９１】
【化２０】

【００９２】
６，７−ジフルオロ−１−メチル−４−オキソ−８−トリフルオロメチル−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（２−８）（９０mg，０．２９３mmol），３，４−デヒドロ−４−フェニルピペリジン（Ａ−９）（７０mg，０．４４mmol）、トリエチルアミン（０．０８ml）、アセトニトリル（５ml）を混合し、１２時間加熱環流した。反応液を濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）にて精製後、得られた粗結晶をエタノールから再結晶して１５mg（１１％）の標記化合物（５）を淡黄色結晶として得た。得られた化合物（５）の物性は以下の通りである。
【００９３】
融点：２２７．５−２２９℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：２．７９（２Ｈ，ｂｓ，−ＣＨ₂−），３．７８（２Ｈ，ｂｓ，−ＣＨ₂−），４．０３（３Ｈ，ｓ，−ＣＨ₃），４．２０（２Ｈ，ｂｓ，−ＣＨ₂−），６．１２（１Ｈ，ｂｓ），７．２５−７．４５（５Ｈ，ｍ，Ａｒ），８．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），１４．６（１Ｈ，ｓ，ＣＯＯＨ）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７６２，１７３４，１６２０，１５６２（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₃Ｈ₁₈Ｆ₄Ｎ₂Ｏ₃として
計算値：Ｃ，６１．８８；Ｈ，４．０６；Ｎ，６．２８
分析値：Ｃ，６１．７４；Ｈ，４．１４；Ｎ，６．２４
【００９４】
実施例４
８−ジフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−（４−フェニル−１−ピペリジニル）−１−［４−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）メチルフェニル］−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（６）の合成
【００９５】
【化２１】

【００９６】
８−ジフルオロメトキシ−１，４−ジヒドロ−６，７−ジフルオロ−１−［４−（１，２，４−トリアゾール−１−イル）メチルフェニル］−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（４−８）（８１．１mg，０．１８１mmol；ＤＥ−Ａ−４４２５６５９号）、４−フェニルピペリジン（Ｂ−９）（４３．７mg，０．２７１mmol）、トリエチルアミン（５０ml，０．３６２mmol）、アセトニトリル（３ml）を混合し、２４時間加熱環流した。反応液を氷冷し、析出した結晶を濾取した。濾液を濃縮して残留物をエタノールで結晶化し、濾取した。濾取した結晶を合わせてエタノールから再結晶して３８．６mg（３５％）の標記化合物（６）を無色結晶として得た。得られた化合物（６）の物性は以下の通りである。
【００９７】
融点：１８０−１８３℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．８０（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−），１．９３（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−），２．６９（１Ｈ，ｍ，−ＣＨＰｈ−），３．２６（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−），３．４４（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−），５．４８（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ₂−），６．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７５Ｈｚ，−ＯＣＨＦ₂），７．２１−７．２６（２Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．３１−７．３６（２Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．４３（１Ｈ，ｄ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．０３（１Ｈ，ｓ，ｔｒｉａｚｏｌｅ Ｈ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．１４（１Ｈ，ｓ，ｔｒｉａｚｏｌｅ Ｈ），８．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７３０，１６２２，１６００，１５０４（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₃₁Ｈ₂₆Ｆ₃Ｎ₅Ｏ₄・３／４Ｈ₂Ｏとして
計算値：Ｃ，６１．７４；Ｈ，４．５８；Ｎ，１１．６１
分析値：Ｃ，６１．７８；Ｈ，４．８７；Ｎ，１１．０１
【００９８】
参考例３
メチル ３−エテニル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｃ）の合成
【００９９】
【化２２】

【０１００】
テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（６．１８ｇ）、塩化リチウム（２５．９ｇ）、無水ジオキサン（５００ml）の混合物にメチル ２，４，５−トリフルオロ−３−トリフルオルメタンスルホニルオキシベンゾアート（Ｃ′）（５７．３７ｇ，０．１７０mmol）、テトラビニルスズ（３３．６ml）の無水ジオキサン（５００ml）溶液を窒素雰囲気下１５分間で滴下した後、１５時間加熱環流した。
反応液を減圧濃縮し、残留物にフッ化カリウム水溶液（１リットル）を加えてエーテル抽出（３×５００ml）した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムに付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（９８：２）で溶出して目的物を含むフラクションを得た。減圧蒸留し、沸点：８２℃／２mmHgの無色油状物（Ｃ）２１．８ｇ（５９％）を得た。得られた化合物（Ｃ）の物性は以下の通りである。
【０１０１】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．９３（３Ｈ，ｓ，ＣＯＯＣＨ₃），５．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，ＣＨ＝ＣＨｃｉｓＨ），６．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８Ｈｚ，ＣＨ＝ＣＨｔｒａｎｓＨ），６．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１，１８Ｈｚ，ＣＨ＝ＣＨ₂），７．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６，９，１０Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１０２】
参考例４
メチル ３−ホルミル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｄ）の合成
【０１０３】
【化２３】

【０１０４】
メチル ３−エテニル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｃ）（２１．８ｇ，０．１０１mol）をメタノール（５００ml）に溶解し、−７８℃に冷却してオゾンを２時間吹き込んだ。過剰のオゾンを窒素ガスをバブルして除き、ジメチルスルフィド（１４ml）を加えて室温まで昇温した。さらにジメチルスルフィド（１４ml）を追加して３０分間撹拌した後、反応液を減圧濃縮した。残留物に水（５００ml）を加えてエーテル抽出（５００ml）した。抽出液を水（３００ml）、飽和食塩水（２×３００ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去し、２１．４ｇの化合物（Ｄ）を含む淡黄色油状物を得た。これは、−ＣＨＯ＋−ＯＴｆ（３：２）の混合物である。得られた混合物の物性は以下の通りである。
【０１０５】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．９８（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），８．０４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７，９，９Ｈｚ，Ｈ−６），１０．３５（１Ｈ，ｓ，−ＣＨＯ）
【０１０６】
参考例５
２，３，６−トリフルオロ−５−メトキシカルボニル安息香酸（Ｅ）の合成
【０１０７】
【化２４】

【０１０８】
メチル ３−ホルミル−２，４，５−トリフルオロベンゾアート（Ｄ）（２１．２ｇ）、２−メチル−２−ブテン（１５６ml）を第三級ブタノール（５００ml）に溶解し、ＮａＣｌＯ₂（１５．６ｇ）、りん酸二水素ナトリウム（１５．６ｇ）の水溶液（２００ml）を２０分間で滴下した後、さらに室温で１時間撹拌した。反応液中の２−メチル−２−ブテンを減圧留去し、第三級ブタノールを真空ポンプで減圧下留去した。残留物に飽和重曹水（２００ml）を加え、ジクロロメタン（３×２００ml）で洗浄した。水層を濃塩酸でpH２とし、酢酸エチル（３００ml＋２００ml）で抽出した。有機層を５％チオ硫酸ナトリウム（Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ
₃，２×２５０ml）、水（２×２５０ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去し、９．３１ｇの標記化合物（Ｅ）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｅ）の物性は以下の通りである。
【０１０９】
融点：９４−９９℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．９６（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），７．９４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６．３５，８．７９，９．７６Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１１０】
参考例６
３−カルバモイル−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｆ）の合成
【０１１１】
【化２５】

【０１１２】
２，３，６−トリフルオロ−５−メトキシカルボニル安息香酸（Ｅ）（２．２１ｇ，９．７７mmol）、ジメチルホルムアミド（触媒量，２滴）をジクロロメタン（４０ml）に溶解し、オキザリルクロリド（２．５６ml，２９．３mmol）を５分間で滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、残留物をエーテル（３０ml）に溶解した。エーテル溶液に、氷冷下、２８％アンモニア水（５ml）を加えて１０分間撹拌した（結晶析出）。反応液を減圧濃縮し、結晶を濾取した。結晶をジクロロメタンに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を留去した。残留した結晶をイソプロピルエーテルで洗い、１．７４ｇ（７６％）の標記化合物（Ｆ）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｆ）の物性は以下の通りである。
【０１１３】
融点：１４５−１４７℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．９５（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），６．００（ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＯＮＨ₂），７．８８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７，９，９Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１１４】
参考例７
３−シアノ−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｇ）の合成
【０１１５】
【化２６】

【０１１６】
３−カルバモイル−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｆ）（１．７２ｇ，７．３８mmol）、ピリジン（１．４９ml，１８．４mmol）を１，４−ジオキサン（２０ml）に溶解し、氷冷下、無水トリフルオロ酢酸（１．１５ml，８．１１mmol）を加えた。室温で４時間撹拌した後、ピリジン（１．４９ml，１８．４mmol）、無水トリフルオロ酢酸（１．１５ml，８．１１mmol）を加え、さらに１３時間撹拌した。反応液を２規定塩酸（２×５０ml）、水（５０ml）、飽和重曹水（５０ml）、水（５０ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去して１．０４ｇ（６６％）の標記化合物（Ｇ）を淡黄色固体として得た。得られた化合物（Ｇ）の物性は以下の通りである。
【０１１７】
融点：４２−４４℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．９８（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），８．０８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６，９，１０Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１１８】
参考例８
３−シアノ−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｈ）の合成
【０１１９】
【化２７】

【０１２０】
３−シアノ−２，４，５−トリフルオロ安息香酸メチルエステル（Ｇ）（３．１１ｇ，１４．５mmol）、１−（２−メトキシフェニル）ピペラジン（２．９８ｇ，１５．５mmol）、トリエチルアミン（３．２９ml，２１．７mmol）をジメチルスルホキシド（１５ml）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応液に水（３００ml）を加えて酢酸エチル（２００ml＋２×１００ml）で抽出した。有機層を水洗（３×１５０ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残留物をイソプロピルエーテルで洗い、５．１８ｇ（９２％）の標記化合物（Ｈ）を淡黄色結晶として得た。得られた化合物（Ｈ）の物性は以下の通りである。
【０１２１】
融点：１３０−１３４℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．２２−３．２４（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−×２），３．７３−３．７５（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），３．９３（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），６．９４−６．９８（３Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．０２−７．０６（１Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１３Ｈｚ，Ｈ−６）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７３０，１７１０（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₀Ｈ₁₉Ｆ₂Ｎ₃Ｏ₃として
計算値：Ｃ，６２．０１；Ｈ，４．９４；Ｎ，１０．８９
分析値：Ｃ，６１．７７；Ｈ，５．００；Ｎ，１０．６５
【０１２２】
参考例９
３−アミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｉ）の合成
【０１２３】
【化２８】

【０１２４】
３−シアノ−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｈ）（５．１８ｇ，１３．４mmol）、ラネーニッケル（２０ml）、エタノール（２００ml）を混合し、１気圧水素雰囲気下で２３時間撹拌した。触媒を濾別して濾液を減圧濃縮し、残留物をイソプロピルエーテルで洗い、４．０８ｇ（７８％）の無色結晶を得た。母液を減圧乾固して６８３mg（１３％）の標記化合物（Ｉ）を無色結晶として得た。得られた化合物（Ｉ）の物性は以下の通りである。
【０１２５】
融点：１１５−１１６℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：３．２０（４Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂−×２），３．３８（４Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），３．９２（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），４．００（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，−ＣＨ₂ＮＨ₂），６．８８−７．０３（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１２６】
参考例１０
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｊ）の合成
【０１２７】
【化２９】

【０１２８】
３−アミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｉ）（４．７１ｇ，１２．０mmol）をテトラヒドロフラン（１５０ml）に溶解し、Ｂｏｃ₂Ｏ（２．６３ｇ，１２．０mmol）のテトラヒドロフラン溶液（３０ml）を滴下した後、室温で１５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルムで溶出して６．０１ｇ（定量的）の標記化合物（Ｊ）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｊ）の物性は以下の通りである。
【０１２９】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４３（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ₃）₃）３．２３（４Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂−×２），３．３４（４Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），３．９２（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ₃），４．５５（２Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂ＮＨＢｏｃ），５．０６（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨＢｏｃ），６．８８−７．０５（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１３０】
参考例１１
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸（Ｋ）の合成
【０１３１】
【化３０】

【０１３２】
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸メチルエステル（Ｊ）（６．０１ｇ，１２．２mmol）をメタノール（２００ml）に溶解し、１規定水酸化ナトリウム水溶液（１８．３ml）を加え、 室温で１７時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、残留物を水（１００ml）に溶解した。１０％クエン酸水溶液で酸性とし、酢酸エチル（２００ml）で抽出した。有機層を水洗（２×２００ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して５．５７ｇ（９７％）の標記化合物（Ｋ）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｋ）の物性は以下の通りである。
【０１３３】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４４（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ₃）₃），３．２２（４Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂−×２），３．３８（４Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂−×２），３．８９（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．５５（２Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂ＮＨＢｏｃ），５．１０（１Ｈ，ｂｒｏａｄｓ，−ＮＨＢｏｃ），６．８８−７．０５（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２Ｈｚ，Ｈ−６）
【０１３４】
参考例１２
エチル ３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイルアセタアート（Ｌ）の合成
【０１３５】
【化３１】

【０１３６】
マグネシウム（０．３４０ｇ，１４．０mmol）とエタノール（５０ml）を混合し、四塩化炭素（０．５ml）を加えて室温で１時間撹拌した。これにエチル 水素 マロナート（１．８５ｇ，１４．０mmol）のテトラヒドロフラン溶液（２０ml）を滴下して室温で２時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物をテトラヒドロフラン（１５０ml）に溶解した。
３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］安息香酸（Ｋ）（５．５７ｇ，１１．７mmol）をテトラヒドロフラン（８０ml）に溶解し、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（２．０８ｇ，１２．８mmol）を加えて室温で６時間撹拌した。これにエチル 水素 マロナート マグネシウム塩のテトラヒドロフラン溶液を滴下し、室温で１６時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物にクロロホルム（２００ml）、１０％クエン酸水溶液（２００ml）を加え撹拌した。有機層を分取し、水層をクロロホルム（１００ml）抽出した。合わせた有機層を水洗（２００ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）で溶出して３．５８ｇ（５６％）の標記化合物（Ｌ）を淡黄色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｌ）の物性は以下の通りである。
【０１３７】

【０１３８】
参考例１３
エチル ２−［３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイル］−３−メチルアミノアクリレート（Ｍ）の合成
【０１３９】
【化３２】

【０１４０】
エチル ３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイルアセタアート（Ｌ）（７０３mg，１．２８mmol）をベンゼン（３０ml）に溶解し、ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール（０．８５２ml，６．４２mmol）を加えて１時間加熱環流した。ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール（０．８５２ml，６．４２mmol）を追加し、さらに２．５時間加熱環流した後、溶媒を留去した。残留物をトルエンに溶解し、メチルアミン塩酸塩（４０２mg，４．９３mmol）、トリエチルアミン（１．０３ml，７．３９ml）を加えて室温で１７時間撹拌した。反応液を水洗（５０ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をフラッシュカラムに付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）で溶出して６４３mg（８６％）の標記化合物（Ｍ）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（Ｍ）の物性は以下の通りである。
【０１４１】

【０１４２】
実施例５
エチル ８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（５−１）の合成
【０１４３】
【化３３】

【０１４４】
Ａ）
エチル ２−［３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイル］−３−メチルアミノアクリレート（Ｍ）（６４３mg，１．０９mmol）をジメチルホルムアミド（１０ml）に溶解し、６０％水素化ナトリウム（８８mg，２．２０mmol）を加えて２０分間撹拌した。反応液を氷水（１００ml）に注加し、析出した結晶を濾取した。析出物をクロロホルムに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付してクロロホルムで溶出し、２４８mgの黄色アモルファスを得た（構造不明）。クロロホルム−メタノール（９５：５）で溶出し、１８７mg（３０％）の標記化合物（５−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（５−１）の物性は以下の通りである。
【０１４５】
融点：１７８−１８１℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），１．５６（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ₃）₃），２．９−３．８（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．９０（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．０６（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），４．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，−ＣＨ₂ＮＨＢｏｃ），４．９０（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨＢｏｃ），６．９０−７．０４（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．４２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）（ＡＸ０２５６３Ａ）
ＩＲ：ν_max(KBr)：３２８０，３０７２，１７２８，１６９８，１６２０（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₃₀Ｈ₃₇ＦＮ₄Ｏ₆として
計算値：Ｃ，６３．３７；Ｈ，６．５６；Ｎ，９．８５
分析値：Ｃ，６２．９５；Ｈ，６．５９；Ｎ，９．４３
【０１４６】
Ｂ）
エチル ２−［３−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−２，５−ジフルオロ−４−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］ベンゾイル］−３−メチルアミノアクリレート（Ｍ）（１．０４ｇ，１．７７mmol）をジメチルホルムアミド（３０ml）に溶解し、炭酸カリウム（４８８mg，３．５３mmol）を加えて室温で２０時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物に１０％クエン酸水溶液（７０ml）を加え酢酸エチル（２００ml）で抽出した。有機層を水（２×５０ml）、飽和食塩水（５０ml）で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を留去した。残留物をイソプロピルエーテルで洗い９３６mg（９３％）の標記化合物（５−１）を無色結晶として得た。
【０１４７】
実施例６
８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（６−１）の合成
【０１４８】
【化３４】

【０１４９】
エチル ８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（５−１）（１４２mg，０．２５０mg）をエタノール（３０ml）に溶解し、１規定水酸化ナトリウム水溶液（０．５０ml）を加えて１８時間加熱環流した後、反応液を減圧濃縮した。残留物に１０％クエン酸水溶液を加えて酢酸エチルで抽出（１００ml）し、有機層を飽和食塩水（２×５０ml）で洗浄した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去し、１４２mgの淡黄色結晶を得た。イソプロピルエーテルで洗い、１２４mg（９２％）の標記化合物（６−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（６−１）の物性は以下の通りである。
【０１５０】
融点：１６３−１６６℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４５（９Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣ（ＣＨ₃）₃）
，３．０−３．５（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．１８（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），４．８５（３Ｈ，ｂｒｏａｄ ｓ，−ＣＨ₂ＮＨＢｏｃ，−ＮＨＢｏｃ），６．９０−７．２６（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７１０，１６２０（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₈Ｈ₃₃ＦＮ₄Ｏ₆として
計算値：Ｃ，６２．２１；Ｈ，６．１５；Ｎ，１０．３６
分析値：Ｃ，６１．９２；Ｈ，６．０９；Ｎ，１０．０５
【０１５１】
実施例７
８−アミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸二塩酸塩（７−１）の合成
【０１５２】
【化３５】

【０１５３】
８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（６−１）（１１８mg，０．２１８mmol）に濃塩酸（５ml）を加えて室温で１５分間撹拌した後、水（２０ml）を加えて減圧乾固した。残留物を含水エタノールから再結晶し、９０．２mg（８０％）の標記化合物（７−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（７−１）の物性は以下の通りである。
【０１５４】
融点：２４８−２５０℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）δ：３．４−４．０（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，４×−ＣＨ₂−），３．９７（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．２５（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），７．１０−７．３０（２Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．３０−７．７０（２Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．９７（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７２６，１６１８，１６０６，１５０２，１４６８，１４３２（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₃Ｈ₂₅ＦＮ₄Ｏ₄・２ＨＣｌとして
計算値：Ｃ，５３．８１；Ｈ，５．３０；Ｎ，１０．９１
分析値：Ｃ，５３．８２；Ｈ，５．２１；Ｎ，１０．７２
【０１５５】
実施例８
エチル ８−アミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（８−１）の合成
【０１５６】
【化３６】

【０１５７】
エチル ８−第三級ブトキシカルボニルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（５−１）（７５．５mg，０．１３２mmol）にトリフルオロ酢酸（５ml）を加えて室温で１５分間撹拌した後、減圧乾固した。残留物に飽和重曹水（５０ml）を加えクロロホルム抽出（３×５０ml）した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去し、７０．１mgの標記化合物（８−１）を無色アモルファスとして得た。得られた化合物（８−１）の物性は以下の通りである。
【０１５８】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），２．８−３．８（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．２６（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ₂ＮＨ₂），４．２９（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），６．９０−７．０６（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．４４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
【０１５９】
実施例９
エチル ８−ジメチルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラートの（９−１）の合成
【０１６０】
【化３７】

【０１６１】
エチル ８−アミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（８−１）（７０．１mg）、パラホルムアルデヒド（３０mg）、５％パラジウム炭素（１００mg）、エタノール（３０ml）を混合し、１気圧水素雰囲気下、２日間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧濃縮した。残留物をプレパラティブＴＬＣ（展開溶媒；クロロホルム−メタノール９５：５）で精製し、３０．０mgの標記化合物（９−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（９−１）の物性は以下の通りである。
【０１６２】
融点：１８７−１９０℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），２．０１（６Ｈ，ｓ，−Ｎ（ＣＨ₃）₂），３．０−３．５（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．９０（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．１２（５Ｈ，ｓ，−ＣＨ₂ＮＨ₂，Ｎ₁−ＣＨ₃），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），６．９０−７．０３（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．３９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
【０１６３】
実施例１０
８−ジメチルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（７）の合成
【０１６４】
【化３８】

【０１６５】
エチル ８−ジメチルアミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（９−１）（６５．４mg，０．１３２mmol）をエタノール（２０ml）に溶解し、１規定水酸化ナトリウム水溶液（０．２６３ml）を加え、１６時間加熱環流した。反応液を減圧乾固し、残留物を水（１０ml）に溶解して１規定塩酸（０．２６３ml）を加え、クロロホルムで抽出（２×５０ml）した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をイソプロパノールから再結晶し、４０．８mg（６６％）の標記化合物（７）を無色結晶として得た。得られた化合物（７）の物性は以下の通りである。
【０１６６】
融点：２７４−２７９℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．９９（６Ｈ，ｓ，−Ｎ（ＣＨ₃）₂），３．１−３．６（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．０４（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），６．９１−７．０７（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）１４．８７（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＨ）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７３２，１６１６，１４３６（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₅Ｈ₂₉ＦＮ₄Ｏ₄として
計算値：Ｃ，６３．４２；Ｈ，５．９９；Ｎ，１２．３３
分析値：Ｃ，６３．３９；Ｈ，６．０１；Ｎ，１２．１８
【０１６７】
実施例１１
エチル １，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−８−（４−ニトロフェニルスルホニルアミノメチル）−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（１１−１）の合成
【０１６８】
【化３９】

【０１６９】
エチル ８−アミノメチル−１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（８−１）（３２０mg，０．６８７mmol）をジクロロメタン（５０ml）に溶解し、２，６−ルチジン（０．１９０ml，１．６５mmol）、ｐ−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（１８２mg，０．８２５mmol）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液を水洗（２×１００ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマログラフィーに付し、クロロホルム−メタノール（９５：５）で溶出し、４０８mg（９１％）の標記化合物（１１−１）を黄色結晶として得た。得られた化合物（１１−１）の物性は以下の通りである。
【０１７０】
融点：１３７−１４２℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），２．５−３．８（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．８８（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．１６（３Ｈ，ｓ，−Ｎ₁−ＣＨ₃），４．３５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），４．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，−ＣＨ₂ＮＨ−），６．３１（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨＳＯ₂−），６．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．００（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．０９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．２１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．３５（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），８．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ）
【０１７１】
実施例１２
エチル １，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−８−（Ｎ−メチル−Ｎ−４−ニトロフェニルスルホニルアミノメチル）−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（１２−１）の合成
【０１７２】
【化４０】

【０１７３】
エチル １，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−８−（４−ニトロフェニルスルホニルアミノメチル）−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（１１−１）（４０２mg，０．６１５mmol）、ジメチルホルムアミド（１０ml）、炭酸カリウム（２６６mg，１．９３mmol）、ヨウ化メチル（８０μｌ，１．２９mmol）を混合して室温で３時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物に水３０mlを加えてクロロホルム抽出（６０ml）した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して残留物をイソプロピルエーテルで洗い、３８４mg（９４％）の標記化合物（１２−１）を黄色結晶として得た。得られた化合物（１２−１）の物性は以下の通りである。
【０１７４】
融点：２８２−２８４℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），２．１０（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ₃ＳＯ₂−），２．７−２．９（４Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×２），３．２−３．４（４Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×２），３．８６（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．２４（３Ｈ，ｓ，−Ｎ₁ＣＨ₃），４．４２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），４．９１（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ₂Ｎ−），６．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），６．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），６．９９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），７．０８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．４５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．４６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７２０，１６１０，１５３２，１４９８，１４４０（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₃₂Ｈ₃₄ＦＮ₅Ｏ₈Ｓとして
計算値：Ｃ，５３．８１；Ｈ，５．３０；Ｎ，１０．９１
分析値：Ｃ，５３．８２；Ｈ，５．２１；Ｎ，１０．７２
【０１７５】
実施例１３
エチル １，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−８−メチルアミノメチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（１３−１）の合成
【０１７６】
【化４１】

【０１７７】
エチル １，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−８−（Ｎ−メチル−Ｎ−４−ニトロフェニルスルホニルアミノメチル）−１−メチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（１２−１）（３７７mg，０．５８９mmol）をジメチルホルムアミド（５ml）に溶解し、炭酸カリウム（２４４mg，１．７７mmol）、チオフェノール（７３μｌ，０．７０７mmol）を加えて室温で２２時間撹拌した。反応液を減圧乾固し、残留物に水（３０ml）を加え酢酸エチル（１００ml）で抽出した。抽出液を水洗（３×３０ml）し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して２１１mg（７９％）の標記化合物（１３−１）を淡黄色油状物として得た。得られた化合物（１３−１）の物性は以下の通りである。
【０１７８】
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），２．５１（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ₃），２．８−３．２（４Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×２），３．２５−３．８（４Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×２），３．９０（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．２９（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），４．４２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，−ＣＨ₂ＣＨ₃），６．９０−７．０７（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．４３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
【０１７９】
実施例１４
１，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−８−メチルアミノメチル−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１４−１）の合成
【０１８０】
【化４２】

【０１８１】
エチル １，４−ジヒドロ−６−フルオロ−７−［４−（２−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−１−メチル−８−メチルアミノメチル−４−オキソキノリン−３−カルボキシラート（１３−１）（２１１mg，０．４６４mmol）、エタノール（２０ml）、１規定水酸化ナトリウム（０．９８２ml，０．９８２mmol）を混合して１８時間加熱環流した。反応液を減圧乾固し、残留物を水（１０ml）に溶解して塩酸でpH７．４とし、クロロホルム抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残留物をエタノールから再結晶して９４．９mg（４４％）の標記化合物（１４−１）を無色結晶として得た。得られた化合物（１４−１）の物性は以下の通りである。
【０１８２】
融点：２１７−２１８℃
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：２．５１（３Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨ（ＣＨ₃）），２．８−３．８（８Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＣＨ₂−×４），３．９１（３Ｈ，ｓ，−ＯＣＨ₃），４．４２（３Ｈ，ｓ，Ｎ₁−ＣＨ₃），６．９１−７．０８（４Ｈ，ｍ，ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈ），８．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，Ｈ−５），８．６６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２）
ＩＲ：ν_max(KBr)：１７２８，１６１６，１５００，１４６４（cm^-1）
元素分析値：Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＦＮ₄Ｏ₄・Ｈ₂Ｏとして
計算値：Ｃ，６２．１９；Ｈ，６．０９；Ｎ，１２．０９
分析値：Ｃ，６２．１６；Ｈ，５．８８；Ｎ，１１．８９
【０１８３】
試験例１
実施例１、３、４および１０で製造した化合物（４）〜（７）を用いてＩＣＡＭ−１産生阻害試験を行った。対照として次式
【０１８４】
【化４３】

【０１８５】
で表わされるベンゾチオフェン誘導体を用いた。
【０１８６】
９６穴マイクロプレートの各ウエルにHuman umblical vein endotherial cells(HUBIC)を８×１０³個ずつ播種し、５％ＣＯ₂ 存在下、３７℃で４８時間前培養した。４８時間後、各ウエルにhuman-ＴＮＦ−αを最終濃度が１０００Ｕ／mlになるように、また、各試験検体を最終濃度が０．０５，０．５，５μｇ／mlになるように、それぞれ５０μｌずつ加え、５％ＣＯ₂ 存在下、３７℃でさらに４時間培養した。細胞を０．１％ＢＳＡ含有Hank's Balanced Salt Solution(HBSS)で５回洗浄後、１μｇ／mlに調製したマウス抗ヒトＩＣＡＭ−１抗体を１０μｌずつ各ウエルに加え、室温で４５分間反応させた。反応終了後、細胞を０．１％ＢＳＡ含有ＨＢＳＳで５回洗浄し、ペルオキシダーゼ標識マウスＩｇの３０００倍希釈液を各ウエルに１００μｌずつ加え、室温でさらに９０分反応させた。細胞を０．１％ＢＳＡ含有ＨＢＳＳで５回洗浄後、各ウエルに反応基質としてＡＢＴＳ Peroxidase Substrate System(ABTS)を１００μｌずつ加え、室温で２０分反応した。反応停止は、１％ＳＤＳ溶液５０μｌずつを各ウエルに加えることにより行った。反応停止後、吸光度計を用い、吸収波長４０５nmで各ウエルの溶液の発色割合を測定した。結果を図１に示す。
【０１８７】
対照化合物であるベンゾチオフェン誘導体は０．０５μｇ／mlでＩＣＡＭ−１産生を阻害した。この阻害効果は文献記載値（Boshelli, D. H., Karmer, J. B., Connor, D. T., Lesch, M. E., Schrier, D. J., Ferin, M. A., Wright, C. D.:J. Med. Chem. 37, 7176-718(1994)）とほぼ同等であると判断された。一方、試験化合物（４）〜（７）はいずれも５μｇ／mlでＩＣＡＭ−１産生阻害効果を示し、そのうち化合物（６）が最も強い阻害活性を示し、０．０５μｇ／mlでほぼ完全にＩＣＡＭ−１産生を阻害した。
【０１８８】
試験例２
化合物（４）〜（７）を用いて、ＴＮＦ−α刺激によるＯＭ−１０．１細胞からのｐ２４蛋白質産生阻害試験を行った。ＨＩＶ全遺伝子を組み込んだＯＭ−１０．１細胞を１×１０⁵／mlに調製し、試験薬剤存在下で２時間preincubation した後、ＴＮＦ−αを１０Ｕ／mlの濃度になるように加え、細胞を刺激した。５％ＣＯ₂ 存在下、３７℃で３日間培養後、培養上清中のｐ２４抗原量をＥＬＩＳＡキットで測定し、その５０％阻害濃度をＥＣ₅₀で示した。結果を表１に示す。
【０１８９】
【表１】

【０１９０】
化合物（４）〜（７）はいずれもＴＮＦ−α刺激によりＯＭ−１０．１細胞から産生するｐ２４蛋白質を０．１７μＭ以下の低濃度で阻害した。なかでも化合物（６）はＥＣ₅₀値が０．０１７μＭと最も強い阻害活性を示した。
【０１９１】
試験例３
化合物（４）〜（７）を用いて、抗ＨＩＶ活性試験を行った。ＭＴ−４細胞の１×１０⁵ cells/ml懸濁液に、ＭＯＩ：０．０２の割合でＨＩＶ−１・III Ｂを感染させ、その感染細胞液を各薬剤の２倍段階希釈液の入っている９６穴マイクロプレートに等量ずつ分注し、３７℃で４日間培養した。培養終了後ＭＴＴ法（Pauwels, R. et. al.,：J. Virol. Methods, 20, 309-321(1988)）を用いて各薬剤の抗ＨＩＶ効果を測定し、その５０％阻害濃度をＥＣ₅₀で示した。結果を表２に示す。
【０１９２】
【表２】

【０１９３】
化合物（４）〜（７）はＭＴ４細胞を用いた急性感染系でもＥＣ₅₀値が０．５４μＭ以下の強いＨＩＶ増殖抑制効果を示した。なかでも化合物（６）はそのＥＣ₅₀値が０．０２５μＭと低濃度で抗ＨＩＶ効果を示した。また、上記したように化合物（４）〜（７）のＩＣＡＭ−１産生阻害活性、ＴＮＦ−α刺激によるＯＭ−１０．１細胞からのｐ２４蛋白質産生阻害活性、および抗ＨＩＶ活性の強さはほぼ相関していた。
【０１９４】
【発明の効果】
本発明によれば、ＴＮＦ−αの誘導効果に起因する種々の疾患、例えば慢性関節リウマチ、セプティックショック、潰瘍性大腸炎等、あるいはＨＩＶ遺伝子の複製・転写の促進によるＡＩＤＳの発症を押さえること等に有効性を示す、ＴＮＦ−α誘導効果阻害剤を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 ＴＮＦ−α誘導効果阻害剤による、ＩＣＡＭ−１の産生阻害を示す図である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention inhibits various effects induced by TNF-α (tumor necrosis factor) such as various phenomena observed during inflammation such as cell differentiation / activation and fever, and HIV gene replication / transcription enhancement. -It relates to an α-inducing effect inhibitor.
[0002]
[Prior art]
TNF-α is a cytokine produced mainly from cells such as macrophages, and acts on many types of cells to differentiate / proliferate by inhibiting tumor cell division / anti-tumor activity, inhibiting hematopoiesis, and inducing apoptosis. It causes various functions and biological phenomena such as regulation of inflammation, increase in lymphocyte viscosity, bridging to the immune system by division of T lymphocytes, fever factors, inflammation and tissue repair by activation of phospholipase A2, and the like.
[0003]
Among these functions, for example, regarding inflammation, TNF-α acts on almost all cells involved in inflammation, and cytokines such as IL-6, IL-8, G-CSF, GM-CSF, M-CSF, Induces the production of cell adhesion molecules such as ICAM-1 and induces many phenomena observed during inflammation, such as prostaglandin E2, protease, acute phase protein, ACTH production, cell differentiation / activation, bone resorption, It is also considered to be involved in synovial proliferation and the like (Masatoshi Yamazaki: Cytokine 94—from basic to latest information; Nippon Medical Museum, 109-117 (1994), etc.).
[0004]
On the other hand, it has been pointed out that TNF-α may be deeply involved in the development or extension of AIDS in HIV-infected persons. That is, when HIV infects a cell, it is first incorporated into the DNA of the host cell, from which self-gene replication is performed, and at that time, cytokines such as TNF-α may promote the gene expression. (Gruters, RA, Otto, SA, Al, BJM, Verhoeven, AJ, Verweij, CL, Van Lier, RA, W., Miedama, F .: Fur. J. Immunol., 21, 167-172 (1991), etc. ). In fact, it has been confirmed that when a persistently infected cell in which the HIV gene is incorporated is treated with TNF-α, replication and transcription of the HIV gene are markedly enhanced (Butera, ST, Folks, TM: AIDS Res. Hum Retroviruses, 8, 991-995 (1992)).
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
From the above findings, any compound capable of selectively inhibiting various cytokines and the like produced and induced by TNF-α will be induced by TNF-α, such as various diseases involving inflammation and HIV gene expression. There is a possibility of showing effectiveness in suppression.
[0006]
Accordingly, an object of the present invention is to provide an inhibitory effect inhibitor by TNF-α.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
In view of this situation, the present inventors have conducted intensive research to achieve the above object, and as a result, the compound represented by the following general formula (1) or a salt thereof effectively inhibits various effects induced by TNF-α. As a result, the present invention has been completed.
[0008]
That is, the present invention relates to the general formula (1)
[0009]
Embedded image

[0010]
[Wherein R¹Is linear or branched C_1-6Alkyl group, 2-halogenocyclopropyl groupOr(1,2,4-triazol-1-yl) -C_1-6Represents an alkylphenyl group;
R^FiveIs a phenyl groupOrC_1-6Represents an alkoxyphenyl group;
R⁷May have a halogen atom as a substituent_1-6C which may have an alkyl group or a halogen atom as a substituent_1-6An alkoxyl group,Or 1Or 2 C_1-6An aminomethyl group optionally having an alkyl group as a substituent;
X represents a hydrogen atom or a halogen atom;
Z is a carbon atomOrThe partial structure represented by a nitrogen atom is shown. However, when Z is a partial structure represented by a nitrogen atom, R⁷Is 1 or 2 C_1-6It is an aminomethyl group which may have an alkyl group as a substituent. ]
Of TNF-α containing a compound represented by the formula or salt thereof as an active ingredientOf ICAM-1 derived fromInhibitors are provided.
[0022]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The substituent of the compound represented by the general formula (1) having the ability to inhibit the TNF-α induction effect of the present invention is described below. In the present specification, for example, “C_1-6"Indicates that the number of carbon atoms is 1 to 6.
[0023]
  Substituent R¹Is a straight chainOrBranched C_1-6An alkyl group,2-halogenocyclopropyl group or (1,2,4-triazol-1-yl) -C _1-6 Represents an alkylphenyl group; here,As the alkyl group, a methyl group and an ethyl group are preferable.
[0024]
  (1,2,4-triazol-1-yl) -C_1-6Alkyl groupThe alkyl part of may be linear, branched or cyclic, andA til group is most preferred.
[0034]
  In general formula (1), R^FiveIsPhenyl group or C _1-6 An alkoxyphenyl group is shown. MaPhenyl groupaboveIn that positionthisThere may be a substituent.
[0036]
X is a halogen atom or a hydrogen atom, and in the case of a halogen atom, a fluorine atom is preferable, and among these, X is preferably a fluorine atom or a hydrogen atom.
[0039]
  R ⁷ Indicated byRuC which may have a rogen atom as a substituent_1-6Alkyl group or C_1-6The halogen atom in the alkoxyl group is preferably a fluorine atom or a chlorine atom, particularly preferably a fluorine atom. The alkyl group or alkoxyl group having a fluorine atom as a substituent is preferably a linear alkyl group or alkoxyl group. The number of fluorine atoms on the alkyl group or alkoxyl group is not particularly limited, and may be mono-substituted to perfluoro-substituted. Specifically, fluoroalkyl groups such as monofluoromethyl group, difluoromethyl group, trifluoromethyl group, 2,2,2-trifluoroethyl group; monofluoromethoxy group, difluoromethoxy group, trifluoromethoxy group2, 2,2-trifluoroethoxy groups and the like.
[0045]
  Of the present inventionICAM-1 production inhibitor derived from induction of TNF-αPreferable specific examples of the compounds include compounds represented by the following formulas (4) to (7) or salts thereof.
[0046]
Embedded image

[0047]
The compound of the formula (1) can be produced, for example, according to the following reaction formula.
[0048]
[Chemical 1]

[0049]
  [Wherein X ′ is, for example, a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, C_1-3A substituent having a function as a leaving group such as an alkylsulfonyl group, or an arylsulfonyl group such as a benzenesulfonyl group or a toluenesulfonyl group, and Y ′ isHydroxyl group, C _1-6 Alkoxy groupOr formula (10):
[0050]
Embedded image

[0051]
  (Wherein R⁹And R^TenRepresents a fluorine atom or a lower alkylcarbonyloxy group. And a boron-containing substituent represented by R)¹ , R ^Five , R ⁷ , X andZIs the same as above]
[0052]
That is, it can be produced by reacting the compound represented by the general formula (8) with the compound represented by the formula (9) or an acid addition salt thereof.
[0053]
  Y 'C _1-6 Alkoxy groupIn this case, the conversion to the corresponding carboxylic acid is carried out in the presence of an acid or base used for the usual hydrolysis of the carboxylic acid ester. When deprotection is required, the protecting group is used under appropriate conditions corresponding to the protecting group. Can be removed to obtain the target compound represented by the formula (1).
[0054]
In the compound of the formula (8), when Y ′ is a compound represented by the formula (10), the corresponding carboxylic acid is obtained by treating with the compound of the formula (9) and then treating with an acidic or basic compound. Can be converted to
[0055]
The reaction of the compound of formula (8) and the compound of formula (9) can be carried out without solvent or in an inert solvent. Examples of the inert solvent include dimethyl sulfoxide, pyridine, acetonitrile, triethylamine, ethanol, chloroform, dimethylformamide, dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, tetrahydrofuran, water, and 3-methoxybutanol. Alternatively, these solvents may be used as a mixture.
[0056]
The reaction temperature is usually in the range of room temperature to 200 ° C, preferably in the range of 25 ° C to 150 ° C. The reaction time is 30 minutes to 48 hours, and is usually completed in about 30 minutes to 2 hours.
[0057]
The reaction can be an acid acceptor such as an inorganic base or an organic base, for example, an alkali or alkaline earth metal carbonate or bicarbonate, or an organic basic such as triethylamine, pyridine, 1,8-diazabicycloundecene. It is advantageous to carry out in the presence of the compound.
[0058]
The compound of formula (1) may exist as an enantiomer or a diastereomer, but when the compound of the present invention is administered to humans or animals, it is preferable to administer a compound consisting of a single enantiomer or diastereomer. The term “consisting of a single enantiomer or diastereomer” is not limited to the case where no other enantiomer or diastereomer is contained, as long as the physical constant and physiological activity are not affected. It means that other enantiomers or diastereomers may be included.
[0059]
The compound (1) may be in a free form, but may be an acid addition salt of an inorganic acid or an organic acid or a salt of a carboxyl group. Examples of acid addition salts include inorganic acid salts such as hydrochloride, sulfate, nitrate, hydrobromide, hydroiodide, phosphate, acetate, methanesulfonate, benzene Examples thereof include organic acid salts such as sulfonate, toluenesulfonate, citrate, maleate, fumarate, and lactate.
[0060]
Examples of the carboxyl group salt include alkali metal salts such as lithium salt, sodium salt and potassium salt, alkaline earth metal salts such as magnesium salt and calcium salt, ammonium salt, triethylamine salt and N-methylglucamine salt, And tris- (hydroxylmethyl) aminomethane salt.
[0061]
In addition, the free form, acid addition salt and carboxyl group salt of these compounds (1) may each exist as a hydrate.
[0062]
On the other hand, the compound of the present invention in which the carboxylic acid moiety is an ester is useful as a synthetic intermediate or prodrug. Here, when used as a synthetic intermediate, for example, alkyl esters, benzyl esters, alkoxyalkyl esters, phenylalkyl esters and phenyl esters are preferred.
[0063]
In addition, when used as a prodrug, an ester that is easily cleaved in vivo to produce a free form of carboxylic acid is preferable. For example, acetoxymethyl ester, pivaloyloxymethyl ester, ethoxycarbonyl ester, choline ester Oxoalkyl esters such as dimethylaminoethyl ester, 5-indanyl ester, phthalidinyl ester, 5-alkyl-2-oxo-1,3-dioxol-4-ylmethyl ester, 3-acetoxy-2-oxobutyl ester Etc. are preferred.
[0065]
Compound (1) also has an inhibitory effect on ICAM-1 production caused by TNF-α, and suppresses various cell adhesions, so that diseases caused by cell adhesion based on ICAM-1 such as chronic It is useful as a therapeutic agent for inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis and arthritis, ischemia-reperfusion injury of the myocardium, bronchial asthma, glomerulonephritis, and rejection at the time of organ transplantation.
[0066]
  Compound (1)ICAM-1 production inhibitor derived from induction of TNF-αThe dose varies depending on the patient's age, sex, symptoms, etc., but it is preferably 5 mg to 2 g, preferably 50 mg to 1000 mg per adult day. In this case, the daily dose may be administered once or divided into 2 to 3 times per day, and the daily dose may exceed the above amount if necessary.
[0067]
  Contains compound (1)ICAM-1 production inhibitor derived from induction of TNF-αThere are no particular restrictions on the administration method and dosage form, and the dosage form suitable for the administration method may be used in the preparation methods of various commonly used preparations.
[0068]
Examples of oral preparations include tablets, powders, granules, capsules, solutions, syrups, elixirs, and oily or aqueous suspensions.
[0069]
As an injection, after storing the solution in a container, it may be a preparation prepared at the time of use as a solid preparation by lyophilization or the like, and a stabilizer, preservative, or dissolution aid may be used as necessary. Further, each dose may be stored in a container, and multiple doses may be stored in the same container.
[0070]
Examples of external preparations include solutions, suspensions, emulsions, ointments, gels, creams, lotions, and sprays.
[0071]
Solid preparations include pharmaceutically acceptable additives as well as active compounds, such as fillers, extenders, binders, disintegrants, dissolution promoters, wetting agents, lubricants, etc. It can be selected and mixed as necessary to prepare a formulation.
[0072]
Examples of the liquid preparation include solutions, suspensions, emulsions and the like, and suspending agents, emulsifiers and the like may be included as additives.
[0073]
【Example】
EXAMPLES Next, although an Example is given and this invention is demonstrated further in detail, this invention is not limited to a following example.
[0074]
Example 1
8-Difluoromethoxy-1,4-dihydro-6-fluoro-1- (trans-2-fluorocyclopropyl) -7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -4-oxoquinoline-3 -Synthesis of carboxylic acid (4)
[0075]
Embedded image

[0076]
8-Difluoromethoxy-1,4-dihydro-6,7-difluoro-1- (trans-2-fluorocyclopropyl) -4-oxoquinoline-3-carboxylic acid (1-8) (100 mg, 0.286 mmol) , 1- (2-methoxyphenyl) piperazine (1-9) (110 mg, 0.572 mmol), triethylamine (0.25 ml) and acetonitrile (5 ml) were mixed and heated to reflux for 4 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was crystallized from ethanol and collected by filtration to obtain 83.3 mg of the title compound (4) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (4) are as follows.
[0077]
Melting point: 218-220 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.42-1.50 (1H, m), 1.90-2.01 (1H, m), 3.16-3.30 (4H, m), 3.50-3.37 ( 2H, m), 3.69-3.76 (2H, m), 3.91 (3H, s, -OCH_Three), 4.43-4.50 (1H, m, N-CH), 4.64 (1H, dm, J = 61 Hz, -CHF-), 6.61 (1H, dd, J = 77 Hz, 72 Hz, -OCHF₂), 6.91-7.22 (4H, m, aromatic H), 8.07 (1H, d, J = 12 Hz), 8.71 (1H, s, H-2), 14.34 (1H, broadcast, -COOH)
Elemental analysis value: C_{twenty five}H_{twenty three}F_FourN_ThreeO_FiveAs
Calculated values: C, 57.58; H, 4.45; N, 8.06
Analytical value: C, 57.37; H, 4.51; N, 7.90
[0078]
Reference example 1
Synthesis of 3,4-dehydro-4-phenylpiperidine (A-9)
[0079]
Embedded image

[0080]
4-Hydroxy-4-phenylpiperidine (497 mg, 2.80 mmol) is dissolved in toluene (50 ml), p-toluenesulfonic acid monohydrate (800 mg, 4.21 mmol) is added, and the mixture is heated to reflux for 23 hours for dehydration. did. The reaction mixture was evaporated to dryness, 1N aqueous sodium hydroxide solution (50 ml) was added to the residue, and the mixture was extracted with chloroform (2 × 50 ml). The organic layer was washed with saturated brine (2 × 50 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was evaporated to obtain 447 mg (quantitative) of the title compound (A-9) as a pale yellow oil. The physical properties of the obtained compound (A-9) are as follows.
[0081]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 2.47 (2H, m, —CH₂−), 3.11 (2H, t, J = 6 Hz, −CH₂-), 3.53 (2H, m, -CH₂-), 6.14 (1H, m, = CH-), 7.22-7.40 (H, m, aromaticH)
[0082]
Reference example 2
Synthesis of 4-phenylpiperidine (B-9)
[0083]
Embedded image

[0084]
3,4-dehydro-4-phenylpiperidine (447 mg, 2.81 mmol), ethanol (50 ml), 5% palladium on carbon (325 mg) were mixed, and the mixture was stirred at room temperature for 15 hours under 1 atm hydrogen atmosphere. The catalyst was removed by filtration, and the filtrate was dried under reduced pressure to obtain 425 mg (94%) of the title compound (B-9) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (B-9) are as follows.
[0085]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.60-1.75 (2H, m), 2.58-2.66 (1H, m), 2.72-2.78 (2H, m), 3.18-3.21 ( 2H, m), 7.18-7.32 (5H, m)
[0086]
Example 2
Synthesis of 6-fluoro-1-methyl-4-oxo-7- (4-phenyl-1-piperidinyl) -8-trifluoromethoxy-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid (2-1)
[0087]
Embedded image

[0088]
6,7-difluoro-1-methyl-4-oxo-8-trifluoromethyl-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid (2-8) (87.2 mg, 0.284 mmol; JP-A-8-183775 No.), 4-phenylpiperidine (B-9) (68.6 mg, 0.425 mmol), triethylamine (119 μl, 0.852 mmol) and acetonitrile (4 ml) were mixed and heated to reflux for 17 hours. The reaction mixture was allowed to cool and the precipitated crystals were collected by filtration and recrystallized from ethanol to give 64.2 mg (50%) of the title compound (2-1) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (2-1) are as follows.
[0089]
Melting point: 268.5-270 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.97 (4H, broadcast, 2 × -CH₂-), 2.79-2.87 (1H, m), 3.79 (2H, broadcast, J = 12.7 Hz, -CH₂-), 4.02 (2H, broadcast, -CH₂−), 7.23-7.37 (5H, m, aromatic H), 8.16 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.63 (1H, s, H-2), 14 .63 (1H, broadcast, -COOH)
IR: ν_max(KBr): 1734, 1618, 1488 (cm^-1)
Elemental analysis value: C_{twenty three}H₂₀F_FourN₂O_Three・ 1 / 4H₂As O
Calculated values: C, 60.99; H, 4.56; N, 6.19
Analytical value: C, 60.94; H, 4.63; N, 6.24
[0090]
Example 3
7- (3,4-dehydro-4-phenyl-1-piperidinyl) -1,4-dihydro-6-fluoro-1-methyl-8-trifluoromethyl-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid (5) Synthesis of
[0091]
Embedded image

[0092]
6,7-Difluoro-1-methyl-4-oxo-8-trifluoromethyl-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid (2-8) (90 mg, 0.293 mmol), 3,4-dehydro- 4-phenylpiperidine (A-9) (70 mg, 0.44 mmol), triethylamine (0.08 ml) and acetonitrile (5 ml) were mixed and heated to reflux for 12 hours. The reaction mixture was concentrated, and the residue was purified by silica gel column chromatography (chloroform: methanol = 10: 1). The obtained crude crystals were recrystallized from ethanol to give 15 mg (11%) of the title compound (5). Was obtained as pale yellow crystals. The physical properties of the obtained compound (5) are as follows.
[0093]
Melting point: 227.5-229 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 2.79 (2H, bs, —CH₂-), 3.78 (2H, bs, -CH₂-), 4.03 (3H, s, -CH_Three), 4.20 (2H, bs, -CH₂-), 6.12 (1H, bs), 7.25-7.45 (5H, m, Ar), 8.16 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.60 (1H, s, H-2), 14.6 (1H, s, COOH)
IR: ν_max(KBr): 1762, 1734, 1620, 1562 (cm^-1)
Elemental analysis value: C_{twenty three}H₁₈F_FourN₂O_ThreeAs
Calculated values: C, 61.88; H, 4.06; N, 6.28
Analytical value: C, 61.74; H, 4.14; N, 6.24
[0094]
Example 4
8-Difluoromethoxy-1,4-dihydro-6-fluoro-7- (4-phenyl-1-piperidinyl) -1- [4- (1,2,4-triazol-1-yl) methylphenyl] -4 -Oxoquinoline-3-carboxylic acid (6) synthesis
[0095]
Embedded image

[0096]
8-difluoromethoxy-1,4-dihydro-6,7-difluoro-1- [4- (1,2,4-triazol-1-yl) methylphenyl] -4-oxoquinoline-3-carboxylic acid (4 -8) (81.1 mg, 0.181 mmol; DE-A-4425659), 4-phenylpiperidine (B-9) (43.7 mg, 0.271 mmol), triethylamine (50 ml, 0.362 mmol), acetonitrile ( 3 ml) was mixed and heated to reflux for 24 hours. The reaction solution was ice-cooled, and the precipitated crystals were collected by filtration. The filtrate was concentrated and the residue was crystallized with ethanol and collected by filtration. The crystals collected by filtration were combined and recrystallized from ethanol to obtain 38.6 mg (35%) of the title compound (6) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (6) are as follows.
[0097]
Melting point: 180-183 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.80 (2H, m, —CH₂-), 1.93 (2H, m, -CH₂-), 2.69 (1H, m, -CHPh-), 3.26 (2H, m, -CH₂-), 3.44 (2H, m, -CH₂-), 5.48 (2H, s, -CH₂−), 6.21 (1H, t, J = 75 Hz, −OCHF₂), 7.21-7.26 (2H, m, aromatic H), 7.31-7.36 (2H, m, aromatic H), 7.43 (1H, d, aromatic H), 8.03 ( 1H, s, triazole H), 8.13 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.14 (1H, s, triazole H), 8.62 (1H, s, H-2)
IR: ν_max(KBr): 1730, 1622, 1600, 1504 (cm^-1)
Elemental analysis value: C₃₁H₂₆F_ThreeN_FiveO_Four・ 3 / 4H₂As O
Calculated value: C, 61.74; H, 4.58; N, 11.61
Analytical value: C, 61.78; H, 4.87; N, 11.01.
[0098]
Reference example 3
Methyl Synthesis of 3-ethenyl-2,4,5-trifluorobenzoate (C)
[0099]
Embedded image

[0100]
To a mixture of tetrakistriphenylphosphine palladium (6.18 g), lithium chloride (25.9 g) and anhydrous dioxane (500 ml), methyl 2,4,5-trifluoro-3-trifluoromethanesulfonyloxybenzoate (C ′) (57.37 g, 0.170 mmol) and a solution of tetravinyltin (33.6 ml) in anhydrous dioxane (500 ml) were added dropwise in a nitrogen atmosphere over 15 minutes, and then heated under reflux for 15 hours.
The reaction solution was concentrated under reduced pressure, and an aqueous potassium fluoride solution (1 liter) was added to the residue, followed by extraction with ether (3 × 500 ml). The extract was washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off. The residue was applied to a silica gel column and eluted with n-hexane-ethyl acetate (98: 2) to obtain a fraction containing the desired product. Distillation under reduced pressure gave 21.8 g (59%) of a colorless oily substance (C) having a boiling point of 82 ° C./2 mmHg. The physical properties of the obtained compound (C) are as follows.
[0101]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.93 (3H, s, COOCH_Three), 5.73 (1H, d, J = 11 Hz, CH = CHcisH), 6.12 (1H, d, J = 18 Hz, CH = CHtransH), 6.70 (1H, dd, J = 11, 18 Hz, CH = CH₂), 7.65 (1H, ddd, J = 6, 9, 10 Hz, H-6)
[0102]
Reference example 4
Methyl Synthesis of 3-formyl-2,4,5-trifluorobenzoate (D)
[0103]
Embedded image

[0104]
Methyl 3-ethenyl-2,4,5-trifluorobenzoate (C) (21.8 g, 0.101 mol) was dissolved in methanol (500 ml), cooled to −78 ° C. and blown with ozone for 2 hours. Excess ozone was removed by bubbling nitrogen gas, dimethyl sulfide (14 ml) was added, and the temperature was raised to room temperature. Dimethyl sulfide (14 ml) was further added and stirred for 30 minutes, and then the reaction solution was concentrated under reduced pressure. Water (500 ml) was added to the residue, followed by ether extraction (500 ml). The extract was washed with water (300 ml) and saturated brine (2 × 300 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off to obtain a pale yellow oil containing 21.4 g of compound (D). . This is a mixture of -CHO + -OTf (3: 2). The physical properties of the obtained mixture are as follows.
[0105]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.98 (3H, s, —COOCH)_Three), 8.04 (1H, ddd, J = 7, 9, 9 Hz, H-6), 10.35 (1H, s, -CHO)
[0106]
Reference Example 5
Synthesis of 2,3,6-trifluoro-5-methoxycarbonylbenzoic acid (E)
[0107]
Embedded image

[0108]
Methyl 3-formyl-2,4,5-trifluorobenzoate (D) (21.2 g), 2-methyl-2-butene (156 ml) was dissolved in tertiary butanol (500 ml), and NaClO was dissolved.₂(15.6 g) and an aqueous solution (200 ml) of sodium dihydrogen phosphate (15.6 g) were added dropwise over 20 minutes, and the mixture was further stirred at room temperature for 1 hour. 2-Methyl-2-butene in the reaction solution was distilled off under reduced pressure, and tertiary butanol was distilled off under reduced pressure using a vacuum pump. Saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (200 ml) was added to the residue and washed with dichloromethane (3 × 200 ml). The aqueous layer was adjusted to pH 2 with concentrated hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate (300 ml + 200 ml). The organic layer was washed with 5% sodium thiosulfate (Na₂S₂O
_Three, 2 × 250 ml) and water (2 × 250 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and then evaporated to give 9.31 g of the title compound (E) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (E) are as follows.
[0109]
Melting point: 94-99 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.96 (3H, s, —COOCH)_Three), 7.94 (1H, ddd, J = 6.35, 8.79, 9.76 Hz, H-6)
[0110]
Reference Example 6
Synthesis of 3-carbamoyl-2,4,5-trifluorobenzoic acid methyl ester (F)
[0111]
Embedded image

[0112]
2,3,6-trifluoro-5-methoxycarbonylbenzoic acid (E) (2.21 g, 9.77 mmol), dimethylformamide (catalytic amount, 2 drops) were dissolved in dichloromethane (40 ml), and oxalyl chloride ( 2.56 ml, 29.3 mmol) was added dropwise over 5 minutes, followed by stirring at room temperature for 1 hour. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was dissolved in ether (30 ml). To the ether solution, 28% aqueous ammonia (5 ml) was added under ice-cooling and stirred for 10 minutes (crystal precipitation). The reaction solution was concentrated under reduced pressure, and the crystals were collected by filtration. The crystals were dissolved in dichloromethane, dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off. The remaining crystals were washed with isopropyl ether to obtain 1.74 g (76%) of the title compound (F) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (F) are as follows.
[0113]
Melting point: 145-147 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.95 (3H, s, —COOCH_Three), 6.00 (broad s, -CONH₂), 7.88 (1H, ddd, J = 7, 9, 9 Hz, H-6)
[0114]
Reference Example 7
Synthesis of 3-cyano-2,4,5-trifluorobenzoic acid methyl ester (G)
[0115]
Embedded image

[0116]
3-carbamoyl-2,4,5-trifluorobenzoic acid methyl ester (F) (1.72 g, 7.38 mmol) and pyridine (1.49 ml, 18.4 mmol) are dissolved in 1,4-dioxane (20 ml). Under ice-cooling, trifluoroacetic anhydride (1.15 ml, 8.11 mmol) was added. After stirring at room temperature for 4 hours, pyridine (1.49 ml, 18.4 mmol) and trifluoroacetic anhydride (1.15 ml, 8.11 mmol) were added, and the mixture was further stirred for 13 hours. The reaction mixture was washed with 2N hydrochloric acid (2 × 50 ml), water (50 ml), saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (50 ml) and water (50 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to give 1.04 g (66% The title compound (G) was obtained as a pale yellow solid. The physical properties of the obtained compound (G) are as follows.
[0117]
Melting point: 42-44 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.98 (3H, s, —COOCH)_Three), 8.08 (1H, ddd, J = 6, 9, 10 Hz, H-6)
[0118]
Reference Example 8
Synthesis of 3-cyano-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid methyl ester (H)
[0119]
Embedded image

[0120]
3-cyano-2,4,5-trifluorobenzoic acid methyl ester (G) (3.11 g, 14.5 mmol), 1- (2-methoxyphenyl) piperazine (2.98 g, 15.5 mmol), triethylamine ( 3.29 ml, 21.7 mmol) was dissolved in dimethyl sulfoxide (15 ml) and stirred at room temperature for 2 hours. Water (300 ml) was added to the reaction mixture, and the mixture was extracted with ethyl acetate (200 ml + 2 × 100 ml). The organic layer was washed with water (3 × 150 ml) and dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off. The residue was washed with isopropyl ether to obtain 5.18 g (92%) of the title compound (H) as pale yellow crystals. The physical properties of the obtained compound (H) are as follows.
[0121]
Melting point: 130-134 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.22-3.24 (4H, m, —CH₂− × 2), 3.73-3.75 (4H, m, —CH₂− × 2), 3.89 (3H, s, —OCH_Three), 3.93 (3H, s, -COOCH_Three), 6.94-6.98 (3H, m, aromatic H), 7.02-7.06 (1H, m, aromatic H), 7.76 (1H, dd, J = 6.8, 13 Hz, H-6)
IR: ν_max(KBr): 1730, 1710 (cm^-1)
Elemental analysis value: C₂₀H₁₉F₂N_ThreeO_ThreeAs
Calculated values: C, 62.01; H, 4.94; N, 10.89
Analytical value: C, 61.77; H, 5.00; N, 10.65
[0122]
Reference Example 9
Synthesis of 3-aminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid methyl ester (I)
[0123]
Embedded image

[0124]
3-cyano-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid methyl ester (H) (5.18 g, 13.4 mmol), Raney nickel (20 ml), ethanol ( 200 ml) and stirred for 23 hours under 1 atmosphere of hydrogen. The catalyst was removed by filtration and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was washed with isopropyl ether to obtain 4.08 g (78%) of colorless crystals. The mother liquor was evaporated to dryness to give 683 mg (13%) of the title compound (I) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (I) are as follows.
[0125]
Melting point: 115-116 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 3.20 (4H, broadcast s, —CH₂− × 2), 3.38 (4H, m, —CH₂− × 2), 3.89 (3H, s, —OCH_Three), 3.92 (3H, s, -COOCH_Three), 4.00 (2H, d, J = 2 Hz, -CH₂NH₂), 6.88-7.03 (4H, m, aromatic H), 7.53 (1H, dd, J = 6.8, 12 Hz, H-6)
[0126]
Reference Example 10
Synthesis of 3-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid methyl ester (J)
[0127]
Embedded image

[0128]
3-Aminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid methyl ester (I) (4.71 g, 12.0 mmol) dissolved in tetrahydrofuran (150 ml) And Boc₂A tetrahydrofuran solution (30 ml) of O (2.63 g, 12.0 mmol) was added dropwise, followed by stirring at room temperature for 15 hours. The reaction solution was concentrated under reduced pressure, and the residue was subjected to silica gel column chromatography and eluted with chloroform to obtain 6.01 g (quantitative) of the title compound (J) as a colorless amorphous substance. The physical properties of the obtained compound (J) are as follows.
[0129]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.43 (9H, s, —COOC (CH_Three)_Three) 3.23 (4H, broadcast s, -CH₂− × 2), 3.34 (4H, broadcasts, —CH₂− × 2), 3.89 (3H, s, —OCH_Three), 3.92 (3H, s, -COOCH_Three), 4.55 (2H, broadcast, -CH₂NHBoc), 5.06 (1H, broadcast, -NHBoc), 6.88-7.05 (4H, m, aromatic H), 7.57 (1H, dd, J = 6.8, 12 Hz, H-6) )
[0130]
Reference Example 11
Synthesis of 3-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid (K)
[0131]
Embedded image

[0132]
3-Tertiary butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid methyl ester (J) (6.01 g, 12.2 mmol) in methanol (200 ml), 1N aqueous sodium hydroxide solution (18.3 ml) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 17 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was dissolved in water (100 ml). Acidified with 10% aqueous citric acid solution and extracted with ethyl acetate (200 ml). The organic layer was washed with water (2 × 200 ml) and dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off to obtain 5.57 g (97%) of the title compound (K) as a colorless amorphous. The physical properties of the obtained compound (K) are as follows.
[0133]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.44 (9H, s, —COOC (CH_Three)_Three), 3.22 (4H, broadcasts, -CH₂− × 2), 3.38 (4H, broadcasts, —CH₂− × 2), 3.89 (3H, s, —OCH_Three), 4.55 (2H, broadcasts, -CH₂NHBoc), 5.10 (1H, broadcasts, —NHBoc), 6.88-7.05 (4H, m, aromatic H), 7.64 (1H, dd, J = 6.8, 12 Hz, H-6) )
[0134]
Reference Example 12
ethyl Synthesis of 3-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoyl acetate (L)
[0135]
Embedded image

[0136]
Magnesium (0.340 g, 14.0 mmol) and ethanol (50 ml) were mixed, carbon tetrachloride (0.5 ml) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. To this was added dropwise a solution (20 ml) of ethyl hydrogen malonate (1.85 g, 14.0 mmol) in tetrahydrofuran, and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The reaction solution was evaporated to dryness and the residue was dissolved in tetrahydrofuran (150 ml).
3-tert-butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoic acid (K) (5.57 g, 11.7 mmol) in tetrahydrofuran (80 ml) ), N, N′-carbonyldiimidazole (2.08 g, 12.8 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 6 hours. To this was added dropwise a tetrahydrofuran solution of ethyl hydrogen malonate magnesium salt, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was evaporated to dryness, and chloroform (200 ml) and 10% aqueous citric acid solution (200 ml) were added to the residue and stirred. The organic layer was separated, and the aqueous layer was extracted with chloroform (100 ml). The combined organic layers were washed with water (200 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and the solvent was distilled off. The residue was subjected to silica gel column chromatography and eluted with n-hexane-ethyl acetate (3: 1) to obtain 3.58 g (56%) of the title compound (L) as a pale yellow amorphous. The physical properties of the obtained compound (L) are as follows.
[0137]

[0138]
Reference Example 13
ethyl Synthesis of 2- [3-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoyl] -3-methylaminoacrylate (M)
[0139]
Embedded image

[0140]
Ethyl 3-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoyl acetate (L) (703 mg, 1.28 mmol) is converted to benzene ( 30 ml), dimethylformamide dimethyl acetal (0.852 ml, 6.42 mmol) was added and heated to reflux for 1 hour. Dimethylformamide dimethylacetal (0.852 ml, 6.42 mmol) was added, and the mixture was further refluxed with heating for 2.5 hours, and then the solvent was distilled off. The residue was dissolved in toluene, methylamine hydrochloride (402 mg, 4.93 mmol) and triethylamine (1.03 ml, 7.39 ml) were added, and the mixture was stirred at room temperature for 17 hours. The reaction solution was washed with water (50 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and the solvent was distilled off. The residue was applied to a flash column and eluted with n-hexane-ethyl acetate (1: 1) to give 643 mg (86%) of the title compound (M) as a colorless amorphous. The physical properties of the obtained compound (M) are as follows.
[0141]

[0142]
Example 5
ethyl 8-tert-butoxycarbonylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate Synthesis of (5-1)
[0143]
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[0144]
A)
Ethyl 2- [3-tert-butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoyl] -3-methylaminoacrylate (M) (643 mg, 1.09 mmol) was dissolved in dimethylformamide (10 ml), 60% sodium hydride (88 mg, 2.20 mmol) was added and stirred for 20 minutes. The reaction solution was poured into ice water (100 ml), and the precipitated crystals were collected by filtration. The precipitate was dissolved in chloroform and dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off. The residue was subjected to silica gel column chromatography and eluted with chloroform to obtain 248 mg of yellow amorphous (structure unknown). Elution with chloroform-methanol (95: 5) gave 187 mg (30%) of the title compound (5-1) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (5-1) are as follows.
[0145]
Melting point: 178-181 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.43 (3H, t, J = 7.3 Hz, −CH₂CH_Three), 1.56 (9H, s, -COOC (CH_Three)_Three), 2.9-3.8 (8H, broadcast, -CH₂-X4), 3.90 (3H, s, -OCH_Three), 4.06 (3H, s, N₁-CH_Three), 4.40 (2H, q, J = 7.3 Hz, -CH₂CH_Three), 4.78 (2H, d, J = 4.4 Hz, -CH₂NHBoc), 4.90 (1H, broadcast, -NHBoc), 6.90-7.04 (4H, m, aromatic H), 8.20 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8. 42 (1H, s, H-2) (AX02563A)
IR: ν_max(KBr): 3280, 3072, 1728, 1698, 1620 (cm^-1)
Elemental analysis value: C₃₀H₃₇FN_FourO₆As
Calculated value: C, 63.37; H, 6.56; N, 9.85
Analytical value: C, 62.95; H, 6.59; N, 9.43
[0146]
B)
Ethyl 2- [3-tert-butoxycarbonylaminomethyl-2,5-difluoro-4- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] benzoyl] -3-methylamino acrylate (M) (1. 04 g, 1.77 mmol) was dissolved in dimethylformamide (30 ml), potassium carbonate (488 mg, 3.53 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 20 hours. The reaction mixture was evaporated to dryness, 10% aqueous citric acid solution (70 ml) was added to the residue, and the mixture was extracted with ethyl acetate (200 ml). The organic layer was washed with water (2 × 50 ml) and saturated brine (50 ml), dried over anhydrous sodium sulfate, and the solvent was distilled off. The residue was washed with isopropyl ether to obtain 936 mg (93%) of the title compound (5-1) as colorless crystals.
[0147]
Example 6
8-tert-butoxycarbonylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid Synthesis of (6-1)
[0148]
Embedded image

[0149]
Ethyl 8-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxy Lat (5-1) (142 mg, 0.250 mg) was dissolved in ethanol (30 ml), 1N aqueous sodium hydroxide solution (0.50 ml) was added and the mixture was refluxed with heating for 18 hours, and then the reaction mixture was concentrated under reduced pressure. To the residue was added 10% aqueous citric acid solution, and the mixture was extracted with ethyl acetate (100 ml), and the organic layer was washed with saturated brine (2 × 50 ml). The extract was dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off to obtain 142 mg of pale yellow crystals. Washing with isopropyl ether gave 124 mg (92%) of the title compound (6-1) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (6-1) are as follows.
[0150]
Melting point: 163-166 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.45 (9H, s, —COOC (CH_Three)_Three)
, 3.0-3.5 (8H, broadcast, -CH₂− × 4), 3.91 (3H, s, —OCH_Three), 4.18 (3H, s, N₁-CH_Three), 4.85 (3H, broadcasts, -CH₂NHBoc, -NHBoc), 6.90-7.26 (4H, m, aromatic H), 8.15 (1H, d, J = 12Hz, H-5), 8.64 (1H, s, H-2) )
IR: ν_max(KBr): 1710, 1620 (cm^-1)
Elemental analysis value: C₂₈H₃₃FN_FourO₆As
Calculated values: C, 62.21; H, 6.15; N, 10.36
Analytical value: C, 61.92; H, 6.09; N, 10.05
[0151]
Example 7
8-aminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid dihydrochloride (7 -1) Synthesis
[0152]
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[0153]
8-tert-butoxycarbonylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid Concentrated hydrochloric acid (5 ml) was added to (6-1) (118 mg, 0.218 mmol), and the mixture was stirred at room temperature for 15 minutes, and then water (20 ml) was added and dried under reduced pressure. The residue was recrystallized from hydrous ethanol to obtain 90.2 mg (80%) of the title compound (7-1) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (7-1) are as follows.
[0154]
Melting point: 248-250 ° C
¹H-NMR (D₂O) δ: 3.4-4.0 (8H, broadcast, 4 × -CH₂-), 3.97 (3H, s, -OCH_Three), 4.25 (3H, s, N₁-CH_Three), 7.10-7.30 (2H, m, aromatic H), 7.30-7.70 (2H, m, aromatic H), 8.21 (1H, d, J = 12 Hz, H-5) , 8.97 (1H, s, H-2)
IR: ν_max(KBr): 1726, 1618, 1606, 1502, 1468, 1432 (cm^-1)
Elemental analysis value: C_{twenty three}H_{twenty five}FN_FourO_Four・ As 2HCl
Calculated value: C, 53.81; H, 5.30; N, 10.91
Analytical value: C, 53.82; H, 5.21; N, 10.72
[0155]
Example 8
ethyl 8-Aminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (8-1) Synthesis of
[0156]
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[0157]
Ethyl 8-tertiary butoxycarbonylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxy To lat (5-1) (75.5 mg, 0.132 mmol) was added trifluoroacetic acid (5 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 15 minutes, and then dried under reduced pressure. Saturated aqueous sodium hydrogen carbonate (50 ml) was added to the residue, followed by extraction with chloroform (3 × 50 ml). The extract was washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to give 70.1 mg of the title compound (8-1) as a colorless amorphous product. The physical properties of the obtained compound (8-1) are as follows.
[0158]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.42 (3H, t, J = 7.3 Hz, −CH₂CH_Three), 2.8-3.8 (8H, broadcast, -CH₂− × 4), 3.91 (3H, s, —OCH_Three), 4.26 (2H, s, -CH₂NH₂), 4.29 (3H, s, N₁-CH_Three), 4.40 (2H, q, J = 7.3 Hz, -CH₂CH_Three), 6.90-7.06 (4H, m, aromatic H), 8.15 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.44 (1H, s, H-2)
[0159]
Example 9
ethyl 8-dimethylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (9- 1) Synthesis
[0160]
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[0161]
Ethyl 8-aminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (8-1 ) (70.1 mg), paraformaldehyde (30 mg), 5% palladium carbon (100 mg) and ethanol (30 ml) were mixed, and the mixture was stirred for 2 days under 1 atmosphere of hydrogen. The catalyst was removed by filtration, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative TLC (developing solvent; chloroform-methanol 95: 5) to obtain 30.0 mg of the title compound (9-1) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (9-1) are as follows.
[0162]
Melting point: 187-190 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.41 (3H, t, J = 7.3 Hz, −CH₂CH_Three), 2.01 (6H, s, -N (CH_Three)₂), 3.0-3.5 (8H, broadcast, -CH₂-X4), 3.90 (3H, s, -OCH_Three), 4.12 (5H, s, -CH₂NH₂, N₁-CH_Three), 4.40 (2H, q, J = 7.3 Hz, -CH₂CH_Three), 6.90-7.03 (4H, m, aromatic H), 8.17 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.39 (1H, s, H-2).
[0163]
Example 10
8-dimethylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid (7) Composition
[0164]
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[0165]
Ethyl 8-dimethylaminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (9- 1) (65.4 mg, 0.132 mmol) was dissolved in ethanol (20 ml), 1N aqueous sodium hydroxide solution (0.263 ml) was added, and the mixture was heated to reflux for 16 hours. The reaction mixture was evaporated to dryness, the residue was dissolved in water (10 ml), 1N hydrochloric acid (0.263 ml) was added, and the mixture was extracted with chloroform (2 × 50 ml). The extract was dried over anhydrous sodium sulfate and the solvent was distilled off. The residue was recrystallized from isopropanol to obtain 40.8 mg (66%) of the title compound (7) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (7) are as follows.
[0166]
Melting point: 274-279 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.99 (6H, s, —N (CH_Three)₂), 3.1-3.6 (8H, broadcast, -CH₂− × 4), 3.91 (3H, s, —OCH_Three), 4.04 (3H, s, N₁-CH_Three), 6.91-7.07 (4H, m, aromatic H), 8.13 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.61 (1H, s, H-2) 14.87. (1H, s, -COOH)
IR: ν_max(KBr): 1732, 1616, 1436 (cm^-1)
Elemental analysis value: C_{twenty five}H₂₉FN_FourO_FourAs
Calculated values: C, 63.42; H, 5.99; N, 12.33
Analytical value: C, 63.39; H, 6.01; N, 12.18
[0167]
Example 11
ethyl 1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -8- (4-nitrophenylsulfonylaminomethyl) -1-methyl-4-oxoquinoline-3- Synthesis of carboxylate (11-1)
[0168]
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[0169]
Ethyl 8-aminomethyl-1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (8-1 ) (320 mg, 0.687 mmol) was dissolved in dichloromethane (50 ml), 2,6-lutidine (0.190 ml, 1.65 mmol) and p-nitrobenzenesulfonyl chloride (182 mg, 0.825 mmol) were added, Stir for hours. The reaction solution was washed with water (2 × 100 ml), dried over anhydrous sodium sulfate and the solvent was distilled off. The residue was subjected to silica gel column chromatography and eluted with chloroform-methanol (95: 5) to obtain 408 mg (91%) of the title compound (11-1) as yellow crystals. The physical properties of the obtained compound (11-1) are as follows.
[0170]
Melting point: 137-142 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.44 (3H, t, J = 7.3 Hz, −CH₂CH_Three), 2.5-3.8 (8H, broadcast, -CH₂− × 4), 3.88 (3H, s, —OCH)_Three), 4.16 (3H, s, -N)₁-CH_Three), 4.35 (2H, q, J = 7.3 Hz, -CH₂CH_Three), 4.66 (2H, d, J = 5.6 Hz, -CH₂NH-), 6.31 (1H, broadcast, -NHSO₂−), 6.69 (1H, d, J = 7 Hz, aromatic H), 6.90 (1H, d, J = 7 Hz, aromatic H), 7.00 (1H, t, J = 7 Hz, aromatic H) 7.09 (1H, t, J = 7 Hz, aromatic H), 7.85 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.21 (2H, d, J = 9 Hz, aromatic H), 8.35 (1H, s, H-2), 8.36 (2H, d, J = 9 Hz, aromatic H)
[0171]
Example 12
ethyl 1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -8- (N-methyl-N-4-nitrophenylsulfonylaminomethyl) -1-methyl-4 -Oxoquinoline-3-carboxylate (12-1) synthesis
[0172]
Embedded image

[0173]
Ethyl 1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -8- (4-nitrophenylsulfonylaminomethyl) -1-methyl-4-oxoquinoline-3 -Carboxylate (11-1) (402 mg, 0.615 mmol), dimethylformamide (10 ml), potassium carbonate (266 mg, 1.93 mmol), methyl iodide (80 μl, 1.29 mmol) were mixed and mixed at room temperature for 3 hours. Stir. The reaction solution was dried under reduced pressure, and 30 ml of water was added to the residue, followed by extraction with chloroform (60 ml). The extract was dried over anhydrous sodium sulfate, the solvent was distilled off, and the residue was washed with isopropyl ether to obtain 384 mg (94%) of the title compound (12-1) as yellow crystals. The physical properties of the obtained compound (12-1) are as follows.
[0174]
Melting point: 282-284 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.43 (3H, t, J = 7.3 Hz, −CH₂CH_Three), 2.10 (3H, s, -NCH_ThreeSO₂-), 2.7-2.9 (4H, broadcast, -CH₂-X2), 3.2-3.4 (4H, broadcast, -CH₂-X2), 3.86 (3H, s, -OCH_Three), 4.24 (3H, s, -N)₁CH_Three), 4.42 (2H, q, J = 7.3 Hz, -CH₂CH_Three), 4.91 (2H, s, -CH₂N−), 6.59 (1H, d, J = 8 Hz, aromatic H), 6.89 (1H, d, J = 8 Hz, aromatic H), 6.99 (1H, t, J = 8 Hz, aromatic H) ), 7.08 (1H, t, J = 8 Hz, aromatic H), 8.07 (2H, d, J = 9 Hz, aromatic H), 8.24 (1H, d, J = 12 Hz, H-5) , 8.45 (2H, d, J = 9 Hz, aromatic H), 8.46 (1H, s, H-2),
IR: ν_max(KBr): 1720, 1610, 1532, 1498, 1440 (cm^-1)
Elemental analysis value: C₃₂H₃₄FN_FiveO₈As S
Calculated value: C, 53.81; H, 5.30; N, 10.91
Analytical value: C, 53.82; H, 5.21; N, 10.72
[0175]
Example 13
ethyl 1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-8-methylaminomethyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (13-1 ) Synthesis
[0176]
Embedded image

[0177]
Ethyl 1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -8- (N-methyl-N-4-nitrophenylsulfonylaminomethyl) -1-methyl- 4-Oxoquinoline-3-carboxylate (12-1) (377 mg, 0.589 mmol) was dissolved in dimethylformamide (5 ml), potassium carbonate (244 mg, 1.77 mmol), thiophenol (73 μl, 0.707 mmol). And stirred at room temperature for 22 hours. The reaction mixture was evaporated to dryness, water (30 ml) was added to the residue, and the mixture was extracted with ethyl acetate (100 ml). The extract was washed with water (3 × 30 ml) and dried over anhydrous sodium sulfate, and then the solvent was distilled off to obtain 211 mg (79%) of the title compound (13-1) as a pale yellow oil. The physical properties of the obtained compound (13-1) are as follows.
[0178]
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 1.41 (3H, t, J = 7.3 Hz, −CH₂CH_Three), 2.51 (3H, s, -NCH_Three), 2.8-3.2 (4H, broadcast, -CH₂-X2), 3.25-3.8 (4H, broadcast, -CH₂-X2), 3.90 (3H, s, -OCH_Three), 4.29 (3H, s, N₁-CH_Three), 4.42 (2H, q, J = 7.3 Hz, -CH₂CH_Three), 6.90-7.07 (4H, m, aromatic H), 8.16 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.43 (1H, s, H-2).
[0179]
Example 14
1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-8-methylaminomethyl-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid (14-1 )
[0180]
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[0181]
Ethyl 1,4-dihydro-6-fluoro-7- [4- (2-methoxyphenyl) -1-piperazinyl] -1-methyl-8-methylaminomethyl-4-oxoquinoline-3-carboxylate (13- 1) (211 mg, 0.464 mmol), ethanol (20 ml), 1N sodium hydroxide (0.982 ml, 0.982 mmol) were mixed and heated to reflux for 18 hours. The reaction mixture was evaporated to dryness, the residue was dissolved in water (10 ml), adjusted to pH 7.4 with hydrochloric acid, and extracted with chloroform. The extract was dried over anhydrous sodium sulfate and the solvent was distilled off. The residue was recrystallized from ethanol to obtain 94.9 mg (44%) of the title compound (14-1) as colorless crystals. The physical properties of the obtained compound (14-1) are as follows.
[0182]
Melting point: 217-218 ° C
¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 2.51 (3H, broadcast, —NH (CH_Three)), 2.8-3.8 (8H, broadcast, -CH₂− × 4), 3.91 (3H, s, —OCH_Three), 4.42 (3H, s, N₁-CH_Three), 6.91-7.08 (4H, m, aromatic H), 8.14 (1H, d, J = 12 Hz, H-5), 8.66 (1H, s, H-2).
IR: ν_max(KBr): 1728, 1616, 1500, 1464 (cm^-1)
Elemental analysis value: C_{twenty four}H₂₇FN_FourO_Four・ H₂As O
Calculated values: C, 62.19; H, 6.09; N, 12.09
Analytical value: C, 62.16; H, 5.88; N, 11.89
[0183]
Test example 1
Using the compounds (4) to (7) prepared in Examples 1, 3, 4 and 10, ICAM-1 production inhibition test was conducted. The following formula as a control
[0184]
Embedded image

[0185]
The benzothiophene derivative represented by this was used.
[0186]
Human umblical vein endotherial cells (HUBIC) 8 x 10 in each well of 96-well microplate^ThreeSeed one by one, 5% CO₂Pre-cultured in the presence at 37 ° C. for 48 hours. 48 hours later, human-TNF-α was added to each well so that the final concentration was 1000 U / ml, and each test specimen was adjusted so that the final concentration was 0.05, 0.5, 5 μg / ml. Add 50 μl at a time, 5% CO₂The cells were further cultured at 37 ° C. for 4 hours in the presence. After the cells were washed 5 times with Hank's Balanced Salt Solution (HBSS) containing 0.1% BSA, 10 μl of mouse anti-human ICAM-1 antibody prepared to 1 μg / ml was added to each well and allowed to react at room temperature for 45 minutes. After completion of the reaction, the cells were washed 5 times with 0.1% BSA-containing HBSS, and a 3000-fold diluted solution of peroxidase-labeled mouse Ig was added to each well in an amount of 100 μl, followed by further reaction at room temperature for 90 minutes. After the cells were washed 5 times with HBSS containing 0.1% BSA, 100 μl of ABTS Peroxidase Substrate System (ABTS) was added to each well as a reaction substrate, and reacted at room temperature for 20 minutes. The reaction was stopped by adding 50 μl of 1% SDS solution to each well. After stopping the reaction, the color development ratio of the solution in each well was measured using an absorptiometer at an absorption wavelength of 405 nm. The results are shown in FIG.
[0187]
The control compound, benzothiophene derivative, inhibited ICAM-1 production at 0.05 μg / ml. This inhibitory effect is described in the literature (Boshelli, DH, Karmer, JB, Connor, DT, Lesch, ME, Schrier, DJ, Ferin, MA, Wright, CD: J. Med. Chem. 37, 7176-718 (1994). ). On the other hand, all of the test compounds (4) to (7) showed ICAM-1 production inhibitory effect at 5 μg / ml, of which compound (6) showed the strongest inhibitory activity, and almost completely ICAM at 0.05 μg / ml. -1 production was inhibited.
[0188]
Test example 2
Using the compounds (4) to (7), a p24 protein production inhibition test from OM-10.1 cells by TNF-α stimulation was performed. 1 × 10 OM-10. 1 cells incorporating the entire HIV gene^FiveAfter preincubation for 2 hours in the presence of the test drug, TNF-α was added to a concentration of 10 U / ml to stimulate the cells. 5% CO₂After culturing at 37 ° C. for 3 days in the presence, the amount of p24 antigen in the culture supernatant was measured with an ELISA kit, and its 50% inhibitory concentration was determined as EC.₅₀It showed in. The results are shown in Table 1.
[0189]
[Table 1]

[0190]
Compounds (4) to (7) all inhibited p24 protein produced from OM-10.1 cells by TNF-α stimulation at a low concentration of 0.17 μM or less. Especially, compound (6) is EC.₅₀The value was 0.017 μM, indicating the strongest inhibitory activity.
[0191]
Test example 3
Anti-HIV activity test was conducted using the compounds (4) to (7). 1 × 10 of MT-4 cells^FiveCells / ml suspension is infected with HIV-1 · III B at a MOI ratio of 0.02, and the infected cell solution is equivalent to a 96-well microplate containing a 2-fold serial dilution of each drug. The aliquots were dispensed and cultured at 37 ° C. for 4 days. After completion of the culture, the MTT method (Pauwels, R. et. Al., J. Virol. Methods,20, 309-321 (1988)), the anti-HIV effect of each drug was measured, and its 50% inhibitory concentration was determined as EC.₅₀It showed in. The results are shown in Table 2.
[0192]
[Table 2]

[0193]
Compounds (4) to (7) are ECs even in acute infection systems using MT4 cells.₅₀A strong HIV growth inhibitory effect with a value of 0.54 μM or less was shown. Among these, compound (6) is its EC.₅₀The anti-HIV effect was exhibited at a low concentration of 0.025 μM. In addition, as described above, the ICAM-1 production inhibitory activity of compounds (4) to (7), the p24 protein production inhibitory activity from OM-10.1 cells stimulated by TNF-α, and the strength of anti-HIV activity are almost the same. It was correlated.
[0194]
【The invention's effect】
According to the present invention, various diseases caused by TNF-α-inducing effects, such as rheumatoid arthritis, septic shock, ulcerative colitis, etc., or suppression of the onset of AIDS by promoting HIV gene replication / transcription Thus, a TNF-α-inducing effect inhibitor that exhibits efficacy, etc. can be obtained.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a graph showing inhibition of ICAM-1 production by a TNF-α-inducing effect inhibitor.

Claims (5)

General formula (1)

[Wherein R ¹ represents a linear or branched C _1-6 alkyl group, a 2-halogenocyclopropyl group or a (1,2,4-triazol-1-yl) -C _1-6 alkylphenyl group;
R ⁵ represents a phenyl group or a C _1-6 alkoxyphenyl group;
R ⁷ is a C _1-6 alkyl group optionally having a halogen atom as a substituent, a C _1-6 alkoxyl group optionally having a halogen atom as a substituent, or 1 or 2 of C _1-6 An aminomethyl group optionally having an alkyl group as a substituent;
X represents a hydrogen atom or a halogen atom;
Z represents a partial structure represented by a carbon atom or a nitrogen atom. However, when Z is a partial structure represented by a nitrogen atom, R ⁷ is an aminomethyl group optionally having 1 or 2 C _1-6 alkyl group as a substituent. ]
An inhibitor of ICAM-1 production derived from induction of TNF-α, comprising a compound represented by the formula: The following formula (4):

An inhibitor of ICAM-1 production derived from induction of TNF-α, comprising a compound represented by the formula: The following formula (5):

An inhibitor of ICAM-1 production derived from induction of TNF-α, comprising a compound represented by the formula: The following formula (6):

An inhibitor of ICAM-1 production derived from induction of TNF-α, comprising a compound represented by the formula: The following formula (7):

An inhibitor of ICAM-1 production derived from induction of TNF-α, comprising a compound represented by the formula:

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