JP3766896B2 - Compounds and methods for the treatment of cardiovascular, inflammatory and immune diseases - Google Patents

Description

（ここで、R¹は水素、アルキル、アルケニル、アミノまたは置換アミノ、R⁴は水素、薬学的に許容できるカチオン、アロイルまたはアルコイル、Ａはアルキレンまたはアルケニレン、Ｘは酸素またはイオウ、各Ｙは水素、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、アルケニル、アルコキシアルキル、シクロアルキル、アリール、アリーロキシ、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルコキシまたは置換アリール、Ｚは酸素またはイオウ、ｍは０または１、ｎは１〜５およびｐは２〜６を表す。）
を有するN-ヒドロキシ尿素誘導体であって酵素リポキシゲナーゼを抑制するものを開示している。
5-リポキシゲナーゼに媒介される病原性の免疫性および炎症性反応が非常に多いことを考慮すると、この酵素を抑制する新規化合物および組成物を確認する必要性が残っている。
血小板活性化因子（PAF、1-O-アルキル-2-アセチル-sn-グリセロール-3-ホスホリルコリン）は、広く種々の生物学的活性を有する効力のある炎症性リン脂質媒介物である。PAFは最初に、イムノグロブリンＥ(IgE)−感作ウサギ好塩基球により放出される水溶性化合物であると確認された。PAFは、適当な免疫学的および非免疫学的刺激を受けた単核球、マクロファージ、多形核白血球(PMNs)、好酸球、好中球、天然殺菌剤のリンパ球、血小板および内皮細胞、ならびに腎臓および心臓組織によっても生み出されおよび放出されることが知られている。Hwangの「血小板活性化因子の特異的レセプター、レセプター不均質性および信号導入機構(Specific receptors of platelet-activating factor,receptor heterogeneity,and signal transduction mechanism)」，Journal of Lipid Mediators、第２巻，123（1990年））。PAFは、非常に低い濃度の血小板の凝集および脱加硫を引き起こす。PAFの効力（10^-12〜10^-9Mにおいて活性）、組織水準（ピコモル）および短い血漿半減期（２〜４分）は、トロンボキサンA₂、プロスタグランジンおよびリューコトリエンのような他の脂質メディエイタのそれらに類似している。
PAFは、広く種々の細胞および組織において見つけられる特定のPAFレセプターに結合することにより生物学的反応を媒介する。PAFおよびその類縁体についての構造活性の研究は、PAFがこれらのレセプターに結合する性能は構造特異的で立体特異的であることを示している。Shenらの「The Chemical and Biological Properties of PAF Agonists,Antagonists,and Biosynthetic Inhibitors」、Platelet-Activating Factor and Related Lipid Mediators、F.Synder、Plenum Press編集、ニューヨーク、ニューヨーク州153（1987年））。
PAFは本質的生物学的反応を媒介するが、病原性の免疫性および炎症性反応においても役割を果たすようである。多くの公表された研究が、関節炎、急性炎、喘息、内毒素性ショック、痛み、乾癬、眼炎、虚血、胃腸潰瘍化、心筋梗塞、炎症性腸疾患および急性呼吸窮迫症候群を含む人の病気においてPAFが関与していることの証拠を提供している。動物モデルも、PAFがある病原性状態において生成または増加されることを示している。
病原性の炎症性および免疫性状態におけるPAFの関与は、PAFレセプター拮抗薬を確認する実質的研究努力を刺激した。1983年において、CV-3988(rac-3-（N-n-オクタデシル-カルバモイロキシ-ω-メトキシプロピル-2-チアゾリオエチルホスフェート）と呼ばれるリン脂質類縁体がPAFレセプター拮抗薬特性を有することが報告されたTerashitaらのLife Sciences、第32巻、1975（1983年））。この分野の別の初期の研究において、Shenらは（Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)、第82巻、672（1985年））において、カドゥスレノン(kadsurenone)すなわちコショウフトカズラ(Piper futokadsura Sieb et Zucc)（中国薬草）から単離されたネオリグナン誘導体が、レセプター水準におけるPAF活性の効力のある特異性で競合的な抑制剤であることを報告した。
Hwangらは、含トリチウムPAFのPAFレセプター部位への結合を、トランス-2,5-ビス-(3,4,5-トリメトキシフェニル)テトラヒドロフラン（L-652、731）が抑制することを1985年に開示した（Hwangらの「トランス-2,5-ビス-（3,4,5-トリメトキシフェニル）テトラヒドロフラン」、Journal of Bioloical Chemistry、第260巻，15639（1985年））。L-652、731は口内活性で、体重１kg当たり30mgの投与量でPAF誘発のラット皮膚血管浸透性を抑制することがわかった。この化合物は酵素5-リポキシゲナーゼに効果がないことがわかった。Hwangらは、トランス-L-652、731（２および５位におけるアリール基がテトラヒドロフラン環の平面の反対側にある）がシス-L-652,731（2および5位におけるアリール置換基がテトラヒドロフラン環の平面の同じ側にある）より約1000倍効力があることも報告した。
1988年に、Hwangらは、L-659、989（トランス-2-（3-メトキシ-4-プロポキシフェニル-5-メチルスルホニル）-5-（3,4,5-トリメトキシフェニル）テトラヒドロフラン）が口内活性で、効力のある競合的PAFレセプター拮抗薬であり、トランス-L-652、731より10倍大きい平衡抑制定数を有することを報告した（HwangらのJ.Pharmacol.Ther.、第246巻、534（1988年））。
Biftsuらの米国特許第4,996,203号、同第5,001,123号および同第4,539,332号明細書および欧州特許出願Nos.89202593.3,90306235.4および90306234.7は、特定のクラスの2,5-ジアリールテトラヒドロフランがPAFレセプター拮抗薬であることを開示している。
BlowlesらのSynlett、1993、111頁には、PAFレセプター拮抗を有し得る限定された数の置換テトラヒドロフランが開示されている。
DanyoshiらのChem.Pharm.Bull.、1989年、1969頁には、PAF誘発ウサギ血小板凝集を抑制する2-置換-N-アルコキシカルボニルピロリジンが開示されている。
従って、本発明の目的は、炎症性または免疫性反応中に有害な酸素ラジカルを形成することにつながる走化性およびレスピラトリーバーストを低下させる化合物を提供することにある。本発明のもう一つの目的は、5-リポキシゲナーゼの生成物により媒介される病原性の免疫性または炎症性疾患の治療のための薬剤組成物を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、5-リポキシゲナーゼの生成物により媒介される病原性の免疫性または炎症性疾患の治療のための方法を提供することにある。
本発明のさらにもう一つの目的は、PAFにより媒介される病原性の免疫性または炎症性疾患の治療のための薬剤組成物を提供することにある。
本発明のもう一つの目的は、PAFにより媒介される病原性の免疫性または炎症性疾患の治療のための方法を提供することにある。
発明の概要
下記式（Ｉ）で示される化合物が提供される：

（式中：
Arは、好ましくはハロ（限定されないがフルオロを含む）、低級アルコキシ（メトキシを含む）、低級アリーロキシ（フェノキシを含む）、Ｗ、シアノもしくはR³により所望により置換されてよいアリールまたはヘテロアリール基；
ｍは、０または１；
ｑは、０または１；
ｎは、０〜６；
Ｗは、独立して-AN(OM)C(O)N(R³)R⁴、-N(OM)C(O)N(R³)R⁴、-AN(R³)C(O)N(OM)R⁴、-N(R³)C(O)N(OM)R⁴、-AN(OM)C(O)R⁴、-N(OM)C(O)R⁴-,AC(O)N(OM)R⁴、-C(O)N(OM)R⁴、-C(O)NHAまたは-A-B；
Ａは、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アルキルアリールまたはアリールアルキル基、ここで一以上の炭素をＯ、ＮまたはＳ（価数は必要に応じて水素または酸素で完全となる）で所望により置換されていてよいが、-Y-A-、-A-または-AW-は二つの隣接するヘテロ原子（すなわち-O-O-、-S-S-、-O-S-、等）を含んではならない（一つの態様において、低級アルキルは-(CH₂)_nC（低級アルキル）H-（ここでｎは１〜５）、特に-(CH₂)₂C(CH₃)-のような分岐アルキル基、または-C≡C-CH(CH₃)-を含む式-C≡C-CH（低級アルキル）-で示される低級アルキニルである。）；
Ｂは、ピリジルイミダゾールおよびベンズイミダゾールからなる群より選択されそれらはいずれもR₃で所望により置換されており、ピリジルイミダゾールまたはベンズイミダゾールは好ましくは窒素原子を介してＡに結合している；
Ｍは、水素、薬学的に許容できるカチオンまたは代謝的に開裂可能な離脱基；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、S(O)、S(O)₂、NR³またはCHR⁵；
Ｙは、Ｏ、Ｓ、S(O)、S(O)₂、NR³またはCHR⁵；
Ｚは、Ｏ、Ｓ、S(O)、S(O)₂、NR³；
R¹およびR²は、独立して水素；メチル、シクロプロピルメチル、エチル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシルおよびC_3-8シクロアルキル（例えばシクロペンチル）を含む低級アルキル；ハロ低級アルキル、例えばトリフルオロメチル；ハロ、例えばフルオロ；および-COOH；
R³およびR⁴は、独立して水素またはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、アルキルアリール、C_1-6アルコキシ-C_1-10アルキル、C_1-6アルキルチオ-C_1-10アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル；
R⁵は、水素、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アリールアルキル、アルキルアリール、-AN(OM)C(O)N(R³)R⁴、-AN(R₃)C(O)N(OM)R⁴、-AN(OM)C(O)R⁴、AC(O)N(OM)R⁴、-AS(O)_xR³、-AS(O)_nCH₂C(O)R³、-AS(O)_nCH₂CH(OH)R³または-AC(O)NHR₃、ここでｘは０〜２を表す。）。
一つの態様において、Ar基は、フェニル、トリメトキシフェニル、ジメトキシフェニル、フルオロフェニル（特に4-フルオロフェニル）、ジフルオロフェニル、ピリジル、ジメトキシピリジル、キノリニル、フリル、イミダゾリルおよびチエニル基からなる群より選択される。
一つの態様において、-A-Bは、

であり、Arは、所望により置換されていてよいアリールまたはヘテロアリール基であり、さらなる詳細は以下のセクションI.A.に記載されている。
好ましい化合物の限定しない例は：

（式中、R¹⁰は、ハロゲン、-CN、水素、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルコキシまたは低級アリーロキシである。）
である。
これらの化合物は、通常、炎症性または免疫性反応中に有害な多形核リューコサイトの酸素ラジカルを形成することにつながる走化性およびレスピラトリーバーストを低下させる。これら化合物は、PAFレセプター拮抗薬として作用する5-リポキシゲナーゼを抑制することにより、または、二重活性を示すことにより、すなわちPAFレセプター拮抗薬および5-リポキシゲナーゼの抑制剤の両方として作用することにより、この生物学的活性を示す。
本発明のもう一つの態様は、式(Ｉ)で示される化合物またはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体の有効量を薬学的に許容できるキャリヤーを組み合わせて含んでなる、ここに記載の任意の疾患のための薬剤組成物である。
好ましい態様において、前記化合物またはその薬学的に許容できる塩もしくは誘導体の一またはそれ以上の有効量を要すれば薬学的に許容できるキャリヤーに含ませて投与することにより、5-リポキシゲナーゼにより媒介される疾患を治療するためにそれら化合物が用いられる。
驚くべきことに、化合物の活性、例えば、5-リポキシゲナーゼ活性、口内利用性および生体内安定性（例えばグルクロニド化速度）が開示された化合物の光学異性体間で大きく変わり得ることが決定された。従って、本発明の一つの態様において、化合物はエナンチオマーを多く含む状態で投与される。
免疫性、アレルギー性の心臓血管の疾患は、通常の炎症、高血圧を含む心臓血管疾患、骨格筋疾患、変形性関節炎、通風、喘息、肺水腫、成人呼吸促進症候群、痛み、血小板凝集、ショック、リューマチ性関節炎、若年性リューマチ性関節炎、乾癬性関節炎、乾癬、自己免疫性ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、全身性紅斑性狼瘡、急性壊死性出血性脳障害、突発性血小板減少、多発性軟骨炎、慢性活動性肝炎、突発性スプルー、クローン病、グレーブス眼障害、原発性胆汁性肝硬変、後部ブドウ膜炎、間隙性肺線維症；アレルギー性喘息；アトピー性皮膚炎および接触皮膚炎を含む、ツタウルシ、花粉、昆虫刺毛および特定の食物のような環境的刺激に対する不適当なアレエルギー性反応。
ここに開示された化合物は、適当なものとしてリューコトリエンまたはPAFを含む生物学的経路を研究するための研究用具としても用いることができる。
以下のものは、式(Ｉ)で定義される化合物の限定しない例である。これらの例は単に例示するものであり、本発明の範囲の制限を意図するものではない。
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロチオフェン
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（3,4,5-トリメトキシフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-メチル-N-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロフラン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-N-ヒドロキシウレイジル）ブチル］テトラヒドロチオフェン、
トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-［4-N'-ブチル-N-ヒドロキシウレイジル）ブト-1-イニル］テトラヒドロチオフェン、
2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-［3-（N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン、
2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン、
2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-［3-（N'-ｎ-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン、
2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-n-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン、
2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（Ｎ-ブチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）］プロポキシテトラヒドロフラン、
2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（Ｎ-メチル-Ｎ-ヒドロキシウレイジル）］プロポキシテトラヒドロフラン、
2-（2,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン、
2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン、2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロチオフェン、および
2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロチオフェン。
式（Ｉ）で定義される他の化合物の更なる限定しない例を、次の表１、２および３および図1aおよび1bに示す。

【図面の簡単な説明】
図1aおよび1bは、選択された活性化合物の示された立体化学を有する化学構造を示す。
図２は、ラセミ化合物202、およびそのエナンチオマー、化合物216、217、234および236のグルクロニド化速度を示す。
図３は、以下に示すエナンチオマーのグルクロニド化速度を示す。

図4は、2S,5S-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N-ヒドロキシウレイジル-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物401）および2S,5R-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N-ヒドロキシウレイジルブチル）テトラヒドロフラン（化合物402）を合成するための一つのプロセスを示す。
図５は、時間（時間）に対する代謝物の％で測定した、化合物401、403、404および406（表4に示す）のグルクロニド化速度のグラフである。
発明の詳細な説明
Ｉ．化合物の説明および合成
Ａ．化合物
ここで用いる「エナンチオマーに富んだ」という用語は、その化合物の単一のエナンチオマーの少なくとも約95％、好ましくは約97％、98％、99％または100％の状態の化合物を意味する。
ここで用いるアルキルという用語は、特記しない限り、飽和した直鎖状、分岐状または環式C₁〜C₁₀炭化水素を意味し、特に、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチルおよび2,3-ジメチルブチルを含む。アルキル基は、R³を含む（限定されない）任意の適当な基、またはハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリーロキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、スルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートであって例えばGreeneらの「Protective Groups in Organic Synthesis」、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ、第２版、1991に教示されるように当業者に知られているように必要に応じて保護されている又は保護されていないものから選択される一またはそれ以上の基により所望により置換されていてよい。
ここで用いる「ハロ」という用語は、クロロ、フルオロ、ヨードまたはブロモを意味する。
ここで用いる「ハロ」という用語は、特記しない限り、C₁〜C₆の飽和した直鎖状、分岐状または環式（C₅-₆の場合）炭化水素を意味し、特に、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、3-メチルペンチル、2,2-ジメチルブチルおよび2,3-ジメチルブチルであって所望により前述のようにアルキル基により置換されているものを含む。
ここで用いる「アルケニル」という用語は、特記しない限り、少なくとも一つの二重結合を有し、所望により前述のように置換されているC₂〜C₁₀の直鎖状、分岐状または環式（C₅-₆の場合）炭化水素を意味する。
ここで用いる「低級アルケニル」という用語は、特記しない限り、C₂〜C₆のアルケニル基を意味し、特にビニルおよびアリルを含む。
「低級アルキルアミノ」という用語は、一または二の低級アルキル置換基を有するアミノ基を意味する。
ここで用いる「アルキニル」という用語は、特記しない限り、少なくとも一つの三重結合を有し所望により前述のように置換されているC₂〜C₁₀の直鎖状または分岐状炭化水素を意味する。ここで用いる「低級アルキニル」という用語は、特記しない限り、C₂〜C₆アルキニル基を意味し、特にアセチレニル、プロピニルおよび-C≡C-CH(CH₃)-を含む-C≡C-CH（アルキル）-を含む。
ここで用いる「アリール」という用語は、特記しない限り、フェニル、ビフェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルを意味する。アリール基は、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリーロキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、スルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートであって例えばGreeneらの「Protective Groups in Organic Synthesis」、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ、第２版、1991に教示されるように当業者に知られているように必要に応じて保護されている又は保護されていないものからなる群より選択される一またはそれ以上の基を含む（限定はされない）任意の適当な基で所望により置換されていてよく、好ましくは、ハロ（限定されないがフルオロを含む）、低級アルコキシ（メトキシを含む）、低級アリーロキシ（フェノキシを含む）、Ｗ、シアノまたはR³で置換することができる。
「ハロアルキル、ハロアルケニルまたはハロアルキニル」という用語は、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基であって、基中の水素原子の少なくとも一つがハロゲン原子で置換されているものを意味する。
ここで用いられる「ヘテロアリール、ヘテロ環式またはヘテロ芳香族」という用語は、芳香環に少なくとも一つのイオウ、酸素または窒素を含む芳香族基であってアリール基が所望により前述のように置換され得るものを意味する。限定されない例は、ピリル、フリル、ピリジル、1,2,4-チアジアゾリル、ピリミジル、チエニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、ピリミジル、キノリル、イソキノリル、ベンゾチエニル、イソベンゾフリル、ピラゾリル、インドリル、プリニル、カルバゾリル、ベンズイミダゾリルおよびイソキサゾリルを含む。
「アラールキル」という用語は、アルキル置換基を有するアリール基を意味する。
「アルカリール」という用語は、アリール置換基を有するアルキル基を意味する。
「有機または無機アニオン」という用語は、負の電荷を有し塩の負帯電部分として用いることのできる有機または無機基を意味する。
「薬学的に許容できるカチオン」という用語は、陽電荷を有し薬剤と共に投与することができる、例えば塩中の対カチオンとしての有機または無機基を意味する。薬学的に許容できるカチオンは当業者に知られており、限定されないがナトリウム、カリウムおよび4級アミンを含む。
「代謝的に開裂可能な離脱基」という用語は、結合している分子から生体内で開裂することができる基を意味し、限定されないが、有機または無機アニオン、薬学的に許容できるカチオン、アシル（例えばアセチル、プロピオニルおよびブチリルを含む（アルキル）C(O)）、アルキル、ホスフェート、スルフェートおよびスルホネートを含む。
「PAFレセプター拮抗薬」という用語は、30μM以下の結合定数でPAFレセプターに結合する化合物を意味する。
「5-リポキシゲナーゼ抑制剤」という用語は、破壊された細胞系において30μＭ以下で酵素を抑制する化合物を意味する。
「薬学的活性誘導体」という用語は、患者に投与する際に、ここに開示の化合物を直接または間接的に提供することのできる任意の化合物を意味する。
2,5-二置換テトラヒドロオフェン、テトラヒドロフランおよびピロリジン、ならびにここに開示の1,3-二置換シクロペンタンは、PAFレセプター拮抗薬活性を示すか酵素5-リポキシゲナーゼを抑制する、または二重の活性を有し、PAFまたは5-リポキシゲナーゼ生成物により媒介される免疫性アレルギー性または心臓血管疾患を有する人の治療に有用である。
Ｂ．立体化学
驚くべきことに、5-リポキシゲナーゼ活性、口内利用性および生体内安定性例えば（グルクロニド化速度）を含む活性化合物の活性および特性は、開示された化合物の光学異性体間で大きく変化し得ることが決定された。従って、好ましい態様において、活性化合物またはその前駆体はエナンチオマーに富んだ状態で、すなわち実質的に単一の異性体の状態で投与される。好ましいエナンチオマーは、選択された生物学的アッセイ、例えばここに詳細に記載されたアッセイにおいて種々の可能なエナンチオマーを評価することにより容易に決められる。
2,5-二置換テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェンおよびピロリジンは多くの立体化学構造を示す。中心環における炭素原子２と５とがキラルであり、すなわちその中心環は最低でも一つのジアステレオマー対として存在する。各ジアステレオマーは一組のエネンチオマーとして存在する。従って、キラルC₂およびC₅原子単独を基準にして、化合物は４つのエナンチオマーの混合物である。
中心環の炭素原子３および４の位置に非水素置換基が存在するとき、C₃およびC₄原子もキラルであり、４つのエナンチオマーの混合物でもあるジアステレオマー対として存在することもできる。
ここに開示の1,3-シクロペンタンは、多くの立体化学構造も示す。中心環の炭素原子１および３はキラルであり、すなわちその中心環は最低でも一つのジアステレオマー対として存在する。各ジアステレオマーは一組のエネンチオマーとして存在する。従って、キラルC₁およびC₃原子単独を基準にして、化合物は４つのエナンチオマーの混合物である。
中心環の炭素原子４および５の位置に非水素置換基が存在するとき、C₄およびC₅原子もキラルであり、４つのエナンチオマーの混合物でもあるジアステレオマー対として存在することもできる。
通常の当業者の一人は、キラル試薬および既知の手順を用いることにより開示された化合物のエネンチオマーを容易に合成および分離することができ、ここに開示の技術または他の既知の技術を用いることにより単離されたエネンチオマーの生物学的活性を評価することができる。キラルNMRシフト試薬、旋光計またはキラルHPLCを用いることにより、化合物の光学的偏りを決定することができる。
古典的分解法は、種々の物理的および化学的技術を含む。多くの場合、最も単純で最も効率的な技術は繰返再結晶である。再結晶は、化合物または最終的エネンチオマー生成物の調製の任意の段階において実施することができる。うまく行く場合、この単純な技術は選択される方法を代表する。
再結晶が許容できる光学純度の物質を提供できない場合、他の方法を評価することができる。化合物が塩基性の場合、大きく異なる溶解特性を有し得るジアステレオマー誘導体を形成するキラル酸を用いることができる。キラル酸の限定しない例は、リンゴ酸、マンデリン酸、ジベンゾイル酒石酸、3-ブロモカンファー-8-スルホン酸、10-カンファースルホン酸およびジ-p-トルオイル酒石酸を含む。同様に、キラル酸による遊離水酸基のアシル化は、また、物理特性が分離できる程度の充分に異なり得るジアステレオマー誘導体を形成する。
エナンチオマー的に純粋なまたはエナンチオマー富含化合物は、ラセミ混合物を、キラル分離のために設計されたクロマトグラフィーカラムを通過させることにより、または適当に変性された物質の酵素的分解により得ることができる。
Ｃ．活性化合物の合成
ここに開示された2,5-二置換テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェンおよびピロリジンは、WhittakerらのSynlet、1993年、111頁、Biorg.Med.Lett.、1993年、1499頁；AchiwaらのChem.Pharm.Bull.,1989年、1969頁を含む当業者に既知の種々の方法により調製することができる。
例えば、エナンチオマー富含物質を合成するための一つの方法を以下の図式Ｉに示す。この方法において、エネンチオマーの合成は、ケトンのキラル還元から始まる。環の閉鎖および-OH基の反応後に、ジアステレオマー分解に影響を与える当業者に知られている標準的方法によりシスとトランス異性体を分離することができる。更なるキラル中心を、以下の例に示されるものを含む、当業者に知られている技術を用いて分解することができる。

Grahamらの手順（1,3-ジアリーシクロペンタン：A New Class of Potent PAF Receptor Antagonists、197th ACSナショナル・ミーティング，ダラス，テキサス州、４月９〜14日、1989年、Division of Medicinal Chemistry、ポスターNo.25（要約））または他の既知の方法を用いて1,3-二置換シクロペンタンを調製することができる。
ヒドロキシ尿素を調製するための一般的手順を以下の図式１に示す。

図式１ ヒドロキシ尿素の調製
逆ヒドロキシ尿素を調製するための一般的手順を以下の図式２に示す。

図式２ 逆ヒドロキシ尿素の調製
ヒドロキサミン酸を調製するための一般的手順を以下の図式３に示す。

図式３ ヒドロキサミン酸の調製
逆ヒドロキサミン酸を調製するための一般的手順を以下の図式４に示す。

図式４ 逆ヒドロキサミン酸の調製
図式５は、2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-［3-（N'-置換-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(1-4)および2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-置換-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(9-12)の合成を示す。

図式６は、2-（2,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン(13)および2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン(14,15)の合成を示す。

図式７は、2-（3,4-ジメトキシフェニル）-5-［3-N'-置換-N'-ヒドロキシウレイジルプロポキシ］テトラヒドロフラン(5-8)の合成を示す。

以下の実施例は単に説明するものであって、本発明の範囲の制限を意図するものではない。
実施例１
2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-［3-（N'−置換-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(1-4)および2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-置換-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン（9-12）の調整
(a)：4-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-4-ケトン-酪酸tert-ブチルエテル（化合物101）の調製
3,4,5トリメトキシベンズアルデヒド(8.0g、0.77mmol)、ｔ-アクリル酸ブチル(5.29g、41.29mmol)および触媒3-エチル-5-（2-ヒドロキシエチル）-4-メチルチアゾリウムブロミド(3.52g、13.95mmol)をジメチルホルムアミド(DMF)50mLに溶解した。この溶液に、トリエチルアミン5.86mLを添加した。反応混合物を60℃で16時間攪拌し、室温まで冷却し、10％HCl(pH１〜２)を添加することにより急冷し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、MgSO₄で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させて油状物を得た。生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、3:1ヘキサン／酢酸エチル）で精製した(4.5g、34％)。¹H NMR(CDCl₃):1.46(2,9H);2.70(t,2H);3.24(t,2H);3.92(s,9H);7.25(s,2H).
(b)：4-（4-フルオロフェニル）-4-ケトン-酪酸t-ブチルエテル（化合物119）の調製
この化合物を、3,4,5-トリメトキシ-ベンズアルデヒドを4-フルオロベンズアルデヒドに替えて実施例１(a)に記載の方法に類似する方法を用いて調製した。¹H NMR(CDCl₃):1.45(s,9H);2.70(t,2H);3.23(t,2H);7.12(m,2H);8.02(m,2H).
(c)：4-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-4-ヒドロキシ-酪酸t-ブチルエテル（化合物102）の調製
ケトンエステル101(1.09g、3.36mmol)をTHF 10mLおよびメタノール20mLに溶解した。この混合物に、NaBH₄の水溶液（127.3mg、水５ml中に3.36mmol）を０℃で滴下して加えた。反応混合物を室温で4時間攪拌し、水で急冷し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、MgSO₄で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させて生成物(1.13g、103％)を得た。¹H NMR(CDCl₃):1.46(s,9H);2.02(m,2H);2.37(t,2H);3.84(s,3H);3.88(s,6H);4.70(m,1H);6.58(s,2H).
(d)：4-（4-フルオロフェニル）-4-ヒドロキシ-酪酸t-ブチルエテル（化合物120）の調製
この化合物を、化合物101を化合物119に替えて実施例１(c)に記載の手順に類似する手順を用いて119から調製した。¹H NMR(CDCl₃):1.44(s,9H);2.00(m,2H);2.32(m,2H);4.72(m,1H);7.01(m,2H);7.30(m,2H).
(e)：4-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-δ-ラクトン（化合物104）の調製
ヒドロキシエステル102(1.13g、1.47mmol)をメタノール４mL、水1.5mLおよび5M水酸化ナトリウム水溶液4.5mLに添加した。反応混合物を室温で30分間攪拌し、次に飽和NaHCO₃水溶液12mLを添加した。水相をエーテルで洗い、濃HClを添加することによりpH１〜２に酸性化し、ベンゼン（２×30mL）で抽出した。ベンゼン層をTLCで調べると、少量のラクトンが形成されたことが示された。ベンゼン抽出液にPPTS(10mg)を添加し、混合物を１時間還流して水を除去した。反応混合物を飽和NaHCO3溶液で洗い、減圧下に蒸発させて所望のラクトンを固形物(700mg、80％)を得た。¹H NMR(CDCl₃);2.20(m,1H);2.68(m,3H);3.85(s,3H);3.88(s,6H);5.46(m,1H);6.55(s,2H).
(f)：4-（4−フルオロフェニル）-δ-ラクトン（化合物122）の調製
この化合物を、化合物102を化合物120に替えて実施例１(e)に記載の手順に類似する手順を用いて120から調製した。¹H NMR(CDCl₃):2.20(m,1H);2.68(m,3H);5.50(m,1H);7.10(t,2H);7.32(m,2H).
(g)：2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-ヒドロキシテトラヒドロフラン（化合物105）の調製
ラクトン104(6.86g、27.22mmol)を乾燥トルエン100mLに溶解し、溶液を-70℃に冷却した。DIBALHの1.5Mトルエン溶液28mLをこの溶液に滴下して加えた。反応混合物を-70℃で１時間攪拌した。反応液を、-60℃より低い温度に維持しつつメタノール11mLを添加することにより急冷した。混合物を-20℃に温め、続いて反応温度を-10℃〜0℃に維持しつつ飽和酒石酸カリウムナトリウム水溶液96mlを添加した。反応混合物を０℃で３時間攪拌し、次に二つの相を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。併せた有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、次に減圧下で濃縮して生成物(6.51g、94％)を得た。¹H NMR(CDCl₃):1.82〜2.48(m,4H);3.84(s,3H);3.88(s,6H);4.97,5.20(m,1H);5.65,5.79(m,1H);6.56,6.70(s,2H).
(h)：2-（4-フルオロフェニル）-5-ヒドロキシテトラヒドロフラン（化合物123）の調製 この化合物を、化合物104を化合物122に替えて実施例１(g)に記載の手順に類似する手順を用いて122から調製した。¹H NMR(CDCl₃):1.79(m,1H);1.95〜2.10(m,1H);2.20〜2.32(m,1H);2.48(m,1H);5.00および5.22(m,1H);5.63および5.78(m,1H);7.04(m,2H);7.30および7.41(m,2H).
(i)：トランスおよびシス2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-フタルイミジルプロピル）テトラヒドロフラン（化合物107,108）の調製
化合物105(1.14g、4.49mmol)をジクロロメタン４mlに溶解した。この溶液にトリエチルアミン(681.4mg、6.73mmol)を添加した。反応混合物を氷浴で冷却し、トリフルオロ無水酢酸(1.41g、6.73mmol)を滴下して加えた。反応混合物を０℃で30分間攪拌し、次に3-フタルイミジルプロパノール(106)(2.4g、13.26mmol)を添加した。反応混合物を室温まで温め室温で２時間攪拌した。反応液を、飽和NaHCO₃水溶液で急冷し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、MgSO₄で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させて油状物を得、それをカラムクロマトグラフィー（シリカ，2:1ヘキサン／酢酸エチル）で精製した（107:522mg（トランス）；108:271mg（シス）；107と108との1:1混合物:110mg；合計収率46％）。¹H NMR(CDCl₃:107:1070(m,1H);1.82(m,1H);2.00(m,2H);2.02(m,1H);2.28(m,1H);3.46(m,1H);3.83(s,3H);3.84(m,3H);3.88(s,6H);4.99(t,1H);5.30(dd,1H);6.56(s,2H);7.72(m,2H);7.85(m,2H);108:1.95(m,3H);2.00(m,2H);2.20(m,1H);3.51(m,1H);3.83(s,3H);3.85(m,2H);3.88(s,6H);3.92(m,1H);4.90(m,1H);5.16(dd,1H);6.60(s,2H);7.72(m,2H);7.84(m,2H).
この分子の立体化学を決めるために、NOE相違実験を行った。
トランス異性体(107)：この実験において、4.99ppmにおけるトリプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在のみを測定するためにデータの採取を行った。これは、正のNOE効果を表し、これらプロトンの密接な空間的関係を表す。この実験において、フラン環プロトンである2.25〜2.39ppmのマルチプレットについてNOEが発見された。芳香族のプロトンについてもう一つのNOEも見られ、それはこのトリプレットがベンジルのプロトンを表すことを示している。5.30ppmにおける二重のダブレットについてはNOEが観察されず、それはこれがトランス異性体であることを示している。
シス異性体(108)：この分子の立体化学を決めるために、NOE相違実験を行った。この実験において、4.88〜4.93ppmにおけるマルチプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在のみを測定するためにデータの採取を行った。これは、正のNOE効果を表し、これらプロトンの密接な空間的関係を表す。この実験において、別のメチンフランプロトンである5.16ppmのダブレットについてNOEが発見された。芳香族のプロトンについてもう一つのNOEも見られ、それはこのトリプレットがベンジルのプロトンを表すことを示している。別のフランメチレンプロトンについて1.93〜2.90ppmにおけるマルチプレットについてもNOEが観察された。
(j)：2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-フタルイミジルプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物124、125）の調製
これらの化合物を、化合物105を化合物123に替えて実施例１(i)に記載の手順に類似する手順を用いて123から調製した。¹H NMR(CDCl₃):124（トランス）：1.65(m,1H);1.80(m,1H);2.00(m,2H);2.12(m,1H);2.31(m,1H);3.48(m,1H);3.83(s,3H);5.02(t,1H);5.28(dd,1H);7.00(t,2H);7.29(m,2H);7.71(m,2H);7.82(m,2H).125（シス）：1.90(m,2H);1.99(m,4H);2.19(m,1H);3.48(m,1H);3.82(s,2H);3.88(m,1H);4.94(m,1H);5.15(dd,1H);7.00(t,2H);7.30(m,2H);7.71(m,2H);7.84(m,2H).
(k)：3-フタルイミジルプロパノール（化合物106）の調製
3-ブロモプロパノール(4.0g、28.78mmol)、カリウムフタルイミド(8.0g、43.17mmol)および炭酸カリウム(4.0g、28.78mmol)をDMF 20mLに添加した。この反応混合物を70℃で４時間攪拌し、水で急冷し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、減圧下に蒸発させて固形物を得、それを酢酸エチルで結晶化した(3.5g、67％)。
(l)：シス2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-アミノプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物109、110）の調製
化合物107(455mg、1.03mmol)およびヒドラジン一水和物(165.3mg、5.16mmol)をエタノール２mLに添加した。反応混合物を２時間還流し、水で急冷し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、MgSO₄で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させてトランス生成物109(225mg、70％)を得た。¹H NMR(CDCl₃):1.75(m,2H);1.78(s,1H);1.96(m,1H);2.20(m,1H);2.40(m,1H);2.82(t,2H);3.55(m,1H);3.81(m,1H);3.83(s,3H);3.87(s,6H);5.00(t,1H);5.34(dd,1H);6.56(S,2H).
シス異性体110を、化合物109について記載した手順に類似する手順を用いて108から調製した。¹H NMR(CDCl3):1.76(M,2H);2.08(M,3H);2.27(M,1H);2.82(t,2H);3.55(m,1H);3.84(s,3H);3.88(s,6H);3.92(m,1H);4.95(m,1H);5.20(m,1H0;6.64(s,2H).
(m)：2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-アミノプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物126,127）の調製
これらの化合物を、化合物107および108を化合物124および125に替えて実施例１(l)に記載の手順に類似する手順を用いて124および125から調製した。¹H NMR(CDCl₃):124（トランス）：1.75(m,31H);1.96(m,1H);2.20(m,1H);2.40(m,1H);2.82(t,2H);3.54(m,1H);3.83(m,1H);5.05(t,1H);5.32(dd,1H);7.01(t,2H);7.30(m,2H).125（シス）：1.74(m,2H);1.97(m,1H);2.05(m,2H);2.25(m,1H);2.77(t,2H);3.47(m,1H);3.85(m,1H);4.95(m,1H);5.15(dd,1H);7.00(t,2H);7.34(m,2H).
(n)：トランスおよびシス2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-［3-（N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン（化合物１、３）の調製
化合物109(60mg、0.19mmol)およびトリホスゲン(23mg、0.078mmol)をジクロロメタン３mLに溶解した。この溶液にトリエチルアミン(29.3mg、0.29mmol)を添加した。反応混合物を２時間還流し、氷浴で冷却した。冷却溶液に、トリエチルアミン(34.0mg、0.34mmol)およびメチルヒドロキシアミン塩酸塩(32.2mg、0.39mmol)を添加した。反応液を室温で16時間攪拌し、水で急冷し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和NaCl溶液で洗い、減圧下に蒸発させて油状物を得、それを分取TLC（シリカ、酢酸エチル）で精製してトランス生成物1(51mg、69％)を得た。¹H NNR(CDCl₃):1.82(m,3H);1.95(m,1H);2.22(m,1H);2.40(m,1H);3.15(s,3H);3.40(m,2H);3.58(m,1H);3.84(s,3H);3.85(m,1H);3.88(s,6H);5.00(t,1H);5.33(m,1H);6.32(m,1H);6.56(s,2H);7.37(s,1H).
シス異性体3を、化合物1について記載した手順に類似する手順を用いて110から調製した。¹H NMR(CDCl₃):1.83(m,2H);2.07(m,3H);2.28(m,1H);3.13(s,3H);3.35(m,2H);3.55(m,1H);3.84(s,3H);3.87(s,6H);3.88(m,1H);4.97(m,1H);5.20(m,1H);6.22(m,1H);6.63(s,2H);7.37(s,1H).
(o)：2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-メチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン（化合物９、11）の調製
これらの化合物を、化合物109および110を化合物126および127に替えて実施例１(n)に記載の手順に類似する手順を用いて126および127から調製した。¹H NMR(CDCl₃):９（トランス）：1.70(m,1H);1.78(m,2H);1.96(m,1H);2.19(m,1H);2.40(m,1H);3.10(s,3H);3.31(m,2H);3.51(m,1H);3.83(m,1H);5.05(t,1H);5.30(dd,1H);6.38(t,1H);7.01(t,2H);7.28(m,2H).11（シス）：1.80(m,2H);2.05(m,3H);2.24(m,1H);3.06(s,3H);3.30(m,2H);3.48(m,1H);3.86(m,1H);4.98(m,1H);5.16(dd,1H);6.30(t,1H);7.02(t,2H);7.31(m,2H);8.08(bs,1H).
(p)：トランスおよびシス2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-［3-（N'-ｎ-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン（化合物２、４）の調製
化合物109(60mg、0.19mmol）およびトリホスゲン(23mg、0.078mmol)をジクロロメタン３mLに溶解した。この溶液にトリエチルアミン(29.3mg、0.29mmol)を添加した。反応混合物を２時間還流し、氷浴で冷却した。冷却溶液に、ブチルヒドロキシアミン(51.4mg、0.29mmol)を添加した。反応液を室温で16時間攪拌し、水で急冷し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和NaCl溶液で洗い、減圧下に蒸発させて油状物を得た。トランス生成物２を、分取TLC（シリカ、酢酸エチル）で分離した(46.9mg、54.7％)。¹H NMR(CDCl₃):0.93(t,3H);1.35(m,2H);1.58(m,2H);1.81(m,3H);1.96(m,1H);2.21(m,1H);2.40(m,1H);3.38(m,2H);3.50(m,2H);3.57(m,1H);3.83(s,3H);3.85(m,1H);3.88(s,6H);5.00(t,1H);5.32(m,1H);6.32(m,1H);6.56(s,2H).
シス異性体４を、化合物２について記載した手順に類似する手順を用いて110から調製した。¹H NMR(CDCl₃):0.92(t,3H);1.32(m,2H);1.58(m,2H);1.81(m,2H);2.08(m,3H);2.28(m,1H);3.35(m,2H);3.47(m,2H);3.54(m,1H);3.84(s,3H);3.87(s,6H);3.88(m,1H);4.97(m,1H);5.20(m,1H);6.22(m,1H);6.63(s,2H).
(q)：2-（4-フルオロフェニル）-5-［3-（N'-n-ブチル-N'-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン（化合物10、12）の調製
これらの化合物を、化合物109および110を化合物126および127に替えて実施例１(p)4記載の手順に類似する手順を用いて126および127から調製した。¹H NMR(CDCl₃):10（トランス）：0.90(t,3H);1.30(m,2H);1.55(m,2H);1.70(m,1H);1.78(m,2H);1.96(m,1H);2.19(m,1H);2.40(m,1H);3.31(m,2H);3.44(m,2H);3.52(m,1H);3.82(m,1H);5.05(t,1H);5.30(dd,1H);6.32(t,1H);7.00(t,2H);7.28(m,2H);7.55(bs,1H).12（シス）：0.90(t,3H);1.30(m,2H);1.52(m,2H);1.80(m,2H);2.04(m,3H);2.24(m,1H);3.30(m,2H);3.40(m,2H);3.48(m,1H);3.85(m,1H);4.98(t,1H);5.16(dd,1H);6.27(t,1H);
7.03(t,2H);7.32(m,2H);7.53(bs,1H).
実施例２
2-（3,4-ジメトキシフェニル）-5-［3-N'-置換-N'-ヒドロキシウレイジルプロポキシ］テトラヒドロフラン(5-8)の調製
(a)：4-（3',4'-ジメトキシフェニル）-4-オキシブチロニトリル(111)の調製 純物アクリロニトリル(3.2ml、0.048mol)とトリエチルアミン(5ml、0.11mol)との単一部分を、アルゴン雰囲気中、攪拌下に、3,4-ジメトキシベンズアルデヒド(7.8g、0.047mol)および3-ベンジル-5-（2-ヒドロキシエチル)-4-メチルチアゾリウムクロライド(5.3g、0.02mol）の乾燥ジメチルホルムアミド(25ml)中混合物に添加した。混合物を室温で一晩放置した。反応液を水で希釈し酢酸エチル（３×100ml）で抽出した。有機層を水（３×100ml）、ブライン（３×100ml）で抽出し、溶媒を減圧下に除去して琥珀色の油を得た。TLC（シリカゲル；酢酸エチル:ヘキサン＝1:1）による分析により、Rf0.80（出発アルデヒド）、0.50（化合物１）および0.30（未知の副産物）の三つのスポットの混合物が示された。サンプルを、シリカゲル60（230〜400メッシュ）上でのカラム（フラッシュ）クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチル:ヘキサン（＝1:1）で溶離して所望の化合物（2.26g,22％）を黄色固形物として得た。¹H NMR(CDCl₃):2.78(t,2H,J=8Hz),3.33(t,2H,J=8Nz),3.96(s,3H),3.98(s,3H),6.90(d,1H,J=8.5Hz),7.52(d,J=2Hz,2H),7.58(dd,J=2および8Hz,2H).
(b)：4-（3',4'-ジメトキシフェニル）-4-オキソ酪酸(112)の調製
4-（3',4'-ジメトキシフェニル）-4-オキソブチロニトリル(111)(2.26g、0.01mol)の酢酸(15ml)および塩酸(12N、40ml)中溶液を攪拌下に1.5時間加熱還流し、室温まで冷却した。溶媒を減圧下に除去して褐色固形物を得た。水から再結晶させることにより112を明淡褐色結晶(1.57g、66％)として得た。¹H HMR(CDCl₃):2.80(t,J=7.5Hz,2H),3.30(t,J=7.5Hz,2H),3.94(s,3H),3.96(s,3H),6.89(d,1H,J=9Hz),7.55(d,1H,J=1Hz)および7.64(dd,1H,1および9Hz).
(c)：4-（3',4'-ジメトキシフェニル）ブチロラクトン(113)の調製
ホウ水素化ナトリウム(0.89g、0.023mol)の水(４ml)中溶液を、アルゴン雰囲気中、攪拌下に、112(2.8g、0.012mol)の新しく蒸留した乾燥テトラヒドロフラン(40ml)およびメタノール(20ml)中溶液に、５分間で滴下することにより加えた。反応液を室温で一晩放置した。TLC（シリカゲル；酢酸エチル：メタノール：酢酸＝9.5：0.5：数滴）による分析により、出発材料の存在が示された。さらなるホウ水素化ナトリウム(0.5g、0.013mol)の水(２ml)中溶液を滴下することにより加え、反応液を室温で3時間放置した。TLC（前述と同じシステム）による分析により、出発材料の不存在が示された。反応液を塩酸(6N、25ml)で急冷し、室温で15分間放置した。混合物を酢酸エチル(3×75ml)で抽出した。有機抽出液を水(3×75ml)、ブライン(3×75ml)で洗い、溶媒を減圧下に除去して淡褐色の固形物(2.0g、75％)として得た。¹H NMR(CDCl₃):2.18〜2.25(m,1H),2.59〜2.70(m,3H),3.89(s,3H),3.90(s,3H),5.44〜5.49(m,1H)および6.82〜6.87(m,3H).
(d)：4-（3',4'-ジメトキシフェニル）ブチロラクトール(114)の調製
水素化ジイソブチルアルミニウム(1.5M、９ml、13.5mmol)の溶液を、ドライアイス−アセトン浴により冷却されたアルゴン雰囲気中の113(2.0g、９mmol)の乾燥トルエン(40ml)中溶液に、攪拌下、30分間で滴下することにより加えた。反応液を-78℃で１時間攪拌した。TLC（シリカゲル；酢酸エチル:ヘキサン＝１：１）による分析により、出発材料の不存在およびRf0.38における新しいスポットが示された。反応液をメタノール(20ml)で急冷し、ゆっくりと０℃まで温めた。酒石酸ナトリウムカリウムの飽和溶液(50ml)を添加し、０℃で45分間攪拌した。混合物を酢酸エチル(3×100ml)で抽出し、有機抽出液を水(3×75ml)、ブライン(3×75ml)で洗った。溶媒を減圧下に除去して暗色の琥珀色の油(1.7g、84％)を得た。¹H NMR(CDCl₃)(シス異性体とトランス異性体との混合物)1.71〜2.49(m,8H),2.91(br s,1H),3.09(br s,1H),3.89(s,6H),3.90(s,6H),4.97(m,1H),5.19(t,J=7Hz,1H),5.62(m,1H),5.77(m,1H)および6.82〜7.28(m,6H).
(e)：N-（3-ヒドロキシプロピル）フタルイミド(106)調製
3-ブロモプロパノール(4g、0.029mmol)、フタル酸カリウム(8g、0.043mmol)および炭酸カリウム(4g、0.029mmol)の乾燥DMF(50ml)中混合物を攪拌し、70℃で４時間加熱した。混合物を水(100ml)で希釈し、酢酸エチル(3×75ml)で抽出した。有機層を水（３×100ml）で洗い、乾燥（Na2SO4）した。溶媒を減圧下に除去して白色固形物を得、それをベンゼンで抽出した。ベンゼン抽出液を蒸発させて白色固形物を得、それを酢酸エチル-ヘキサンから再結晶させて白色結晶(1.27g、24％)を得た。
(f)：トランスおよびシス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-(N-フタロイル)］プロポキシテトラヒドロフラン（115および116）の調製
無水トリフリン酸(triflic an Hydride)(0.68ml、4.8mmol)を単一部分として、氷浴を用いて冷却されたアルゴン雰囲気中の114(0.72g、3.2mmol)の乾燥ジクロロメタン(20ml)およびトリエチルアミン(0.68ml、4.9mmol)中溶液に、攪拌下に加えた。反応液を０℃で30分間攪拌した。N-（3-ヒドロキシプロピル）フタルイミド(106)(1.27g、７mmol)を反応混合物に添加し、溶液が室温まで温まるまで放置し、この温度で２時間放置した。溶液を、重炭酸ナトリウム水溶液（飽和、25ml）で急冷し、酢酸エチル(3×50ml)、ブライン(3×50ml)で抽出し、乾燥（硫酸ナトリウム）した。溶媒を減圧下に除去すると、琥珀色の油(2.02g)が残った。TLC（シリカゲル；酢酸エチル：ヘキサン＝1:1）による油の分析により、Rf0.80、0.60、0.50および0.35における４つのスポットの存在が示された。Rf0.60と0.50とにおけるスポットの比は2:1であった。サンプルを、シリカゲル（230〜400メッシュ）上のカラムクロマトグラフィー（フラッシュ）により精製し、酢酸エチル：ヘキサン（＝3:7）により溶離して最初にRf0.60に透明で無色の油状物(0.40g、30％)としての物質を得、それはトランス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（N-フタロイル）］プロポキシテトラヒドロフラン(115)(0.40g、30％)と同定された。¹H NMR(CDCl₃)1.34〜1.94(m,2H),1.96〜2.05(m,2H),2.09〜2.20(m,1H),2.25〜2.36(m,1H),3.46〜3.53(m,1H),3.84(t,9Hz,2H)、ここに隠れた一つのプロトンマルチプレットもある、3.88(s,3H),3.91(s,3H),5.01(t,7.3Hz,1H).5.30(dd,J=2および5Hz,1Hz),6.82〜6.90(m,3H),7.71〜7.74(m,2H)および7.84〜7.88(m,2H).
この分子の立体化学を決めるために、NOE相違実験を行った。この実験において、5.01ppmにおけるトリプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在のみを測定するためにデータの採取を行った。これは、正のNOE効果を表し、これらプロトンの密接な空間的関係を表す。この実験において、フラン環プロトンである2.25〜2.36ppmにおけるマルチプレットについてNOEが発見された。芳香族のプロトンについてもう一つのNOEも見られ、それはこのトリプレットがベンジルのプロトンを表すことを示している。5.30ppmにおける二重のタブレットについてはNOEが観察されず、そのことはこれがトランス異性体であることを示している。
同じ溶媒系で連続して溶離することにより、無色油状物(0.21g、15％)としてRf0.50にスポットを与え、それはシス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（N-フタロイル）］プロポキシテトラヒドロフラン(116)と同定された。¹H NMR(CDCl₃)1.92〜2.12(m,6H),3.44〜3.52(m,1H),3.86(s,3H),3.88(s,3H),3.76〜3.93(m,3H),4.89〜4.94(m,1H),5.35(d,J=4Hz),6.89(d,J=8Hz),6.87(dd,J=2および8Hz),6.92(d,J=2Hz),7.69〜7.72(m,2H)および7.82〜7.85(m,2H).
この分子の立体化学を決めるために、NOE相違実験を行った。この実験において、4.89〜4.94ppmにおけるマルチプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在のみを測定するためにデータの採取を行った。これは、正のNOE効果を表し、これらプロトンの密接な空間的関係を表す。この実験において、他のメチンフランプロトンである5.35ppmにおけるタブレットについてNOEが発見された。このことは、この分子がシス異性体であることを示している。芳香族のプロトンについてもう一つのNOEも見られ、それはこのトリプレットがベンジルのプロトンを表すことを示している。他のフランメチレンプロトンを含む1.92〜2.12ppmにおけるマルチプレットについてもNOEが存在していた。
クロマトグラフィーは、また、115と116との混合物(0.342g、26％)を産出した。
(g)：トランス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-（3-アミノプロポキシ）テトラヒドロフラン(117)の調製
純物のヒドラジン水和物(150μL、3.2mmol)を、攪拌下に、115(253mg、0.62mmol)の無水エタノール(1.5ml)中溶液に添加した。溶液を５分間加熱還流すると、溶液から白色固形物が析出した。混合物を２時間加熱還流した。TLC（シリカゲル；酢酸エチル:ヘキサン＝1:１）による分析により、出発材料の不存在および最初の部分におけるスポットが示された。反応液を水(10ml)で急冷し、ジクロロメタン(5×10ml)で抽出した。有機相を水(2×10ml)、ブライン(2×10ml)で洗い、乾燥（硫酸ナトリウム）した。減圧下に溶媒を除去すると無色油状物(150mg、86％)が残った。¹H NMR(CDCl₃)1.25(brs,2H),1.68〜1.78(m,3H),1.81〜1.98(m,1H),2.14〜2.2(m,1H),2.3〜2.36(m,1H),2.80(t,J=6.5Hz,2H),3.47〜3.55(m,1H),3.78〜3.87(m,部分的に隠れている，1H),3.86(s,3H),3.88(s,3H),4.99(t,J=7Hz,1H),5.31(dd,J=2および6Hz,1H),6.80〜6.88(m,3H).
(h)：シス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-（3-アミノプロポキシ）テトラヒドロフラン(118)の調製
純物のヒドラジン水和物(125μl、2.57mmol)を、攪拌下に、116(210mg、0.51mmol)の無水エタノール(3.0ml)中溶液に添加した。溶液を５分間加熱還流すると、溶液から白色固形物が析出した。混合物を2時間加熱還流した。TLC（シリカゲル；酢酸エチル:ヘキサン＝1:1）による分析により、出発材料の不存在および最初の部分におけるスポットが示された。反応液を水(10ml)で急冷し、ジクロロメタン(5×10ml)で抽出した。有機相を水(2×10ml)、ブライン(1×10ml)で洗い、乾燥（硫酸ナトリウム）した。減圧下に溶媒を除去すると堅い油状物(105mg、73％)が残った。¹H NMR(CDCl₃)1.45(b r s,2H),1.73〜1.78(m,2H),2.01〜2.12(m,3H),2.19〜2.29(m,1H),2.81(t,J=7Hz,2H),3.48〜3.53(m,1H),3.85〜3.93(m,部分的に隠れている，1H),3.88(s,3H),3.90(s,3H),4.96〜5.01(m,1H),5.17(dd,J=3および6Hz,1H),6.83(d,J=8Hz,1H),6.89(dd,J=2および8Hz,1H)および6.96(d,J=2Hz,1H).
(i)：トランス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（N-ブチル-N-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(5)の調製
117(53mg、0.19mmol)の乾燥ジクロロメタン(3ml)中溶液にアルゴン雰囲気中、攪拌下に、トリエチルアミン（32μl,0.22mmol）および次にトリホスゲン(19mg、0.06mmol)を添加した。溶液を30分間加熱還流し、室温に冷却した。この溶液に、固体n-ブチルヒドロキシルアミン(34mg、0.38mmol)を一度に添加し、それを室温で一晩放置した。反応液を水(10ml)で急冷し、ジクロロメタン(3×10ml)で抽出した。併せた有機相を重炭酸ナトリウム水溶液（飽和、３×10ml)で洗い、乾燥（硫酸ナトリウム）した。TLC（シリカゲル；酢酸エチル）による分析により、Rf0.90、0.50、0.25および0.00の錯体混合物が示された。サンプルを、シリカゲル60（230〜400メッシュ）上のカラム（フラッシュ）クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチルにより溶離してRf0.50に乳白色の油状物(8mg、11％)としてのスポットを得た。¹H NMR(CDCl₃)0.92(t,J=7Hz,3H),1.27〜1.39(m,2H),1.51〜1.61(m,2H),1.71〜1.86(m,3H),1.88〜2.15(m,1H),2.17〜2.29(m,1H),2.32〜2.42(m,1H),3.28〜3.58(m,4H),3.81〜3.94(m,部分的に隠れている，2H),3.87(s,3H),3.90(s,3H),5.49〜5.05(m,1H),5.31〜5.38(m,1H),6.28〜6.34(m,1H)および6.81〜6.86(m,3H),IR（フィルム）3407,3193,2933,1640,1516,1263,1029cm^-1.
(j)：トランス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（N-メチル-N-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(6)の調製
117(32mg、0.11mmol)の乾燥ジクロロメタン(3ml)中溶液にアルゴン雰囲気中、攪拌下に、トリホスゲン(12mg、0.04mmol)、続いて直ちにトリエチルアミン(17μl、0.12mmol)を添加した。溶液を２時間加熱還流し、室温に冷却し、氷浴中に置いた。この反応混合物に、純物トリエチルアミン(32μl、0.23mmol)、続いてメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(19mg、0.23mmol)を添加した。反応液を室温で一晩放置した。反応液を水(10ml)で急冷し、ジクロロメタン(3×10ml)で抽出した。有機抽出液を水(3×10ml)、ブライン(3×10ml)で洗い、溶媒を減圧下に除去して琥珀色の油を得た。TLC（シリカゲル；酢酸エチル）による分析により、Rf0.30における一つの新しいスポットのみが示された。サンプルを、シリカゲル60（230〜400メッシュ）上のカラム（フラッシュ）クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチルにより溶離して所望の化合物を琥珀色の油状物(12mg、30％)として得た。¹H NMR(CDCl₃)1.73〜1.84(m,2H),1.90〜2.01(m,1H),2.03〜2.13(m,1H),2.18〜2.29(m,1H),2.32〜2.43(m,1H),3.13(s,3H),3.30〜3.44(m,2H),3.49〜3.59(m,1H),3.82〜3.92(m,部分的に隠れている，3H),3.88(s,3H),3.91(m,3H),4.96〜5.04(m,1H),5.34(dd,J=2および5Hz,1H),6.34(br t,5Hz,1H)および6.82〜6.68(m,3H),IR（フィルム）3407,3229,2935,1636,1516,1263および1029cm^-1.
(k)：シス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-(N-ブチル-N-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(7)の調製
118(50mg,0.18mmol)の乾燥ジクロロメタン(3ml)中溶液にアルゴン雰囲気中、攪拌下に、トリホスゲン(18mg、0.06mmol)、続いて直ちにトリエチルアミン(80μl、0.57mmol)を添加した。溶液を２時間加熱還流し、室温に冷却し、氷浴中に置いた。この反応混合物に、純物トリエチルアミン(50μl、0.35mmol)、続いて固体ｎ−ブチルヒドロキシルアミン(32mg,0.36mmol)を添加した。反応液を室温で一晩放置した。反応液を水(10ml)で急冷し、ジクロロメタン(3×10ml)で抽出した。有機抽出液を水(3×10ml)、ブライン(3×10ml)で洗い、溶媒を減圧下に除去して琥珀色の油を得た。TLC（シリカゲル；酢酸エチル）による分析により、Rf0.85および0.45における略当量の二つの新しいスポットが示された。サンプルを、シリカゲル60（230〜400メッシュ）上のカラム（フラッシュ）クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチルにより溶離して最初にRf0.85におけるスポットを琥珀色の油状物(26mg)として得た。同じ溶媒系で連続的に溶離することにより表記化合物を琥珀色の油状物(25mg、35％)として得た。¹H NMR(CDCl₃ 1.1(t,J=7Hz,3H),1.25〜1.37(m,2H),1.49〜1.59(m,2H),1.76〜1.84(m,2H),1.99〜2.1(m,3H),2.19〜2.26(m,1H),3.26〜3.54(m,5H),3.84〜3.92(m,部分的に隠れている，1H),3.87(s,3H),3.88(s,3H),4.96〜5.02(m,1H),5.17(d,J=4Hz,1H),6.24(t,J=4Hz,1H),6.52(br s,1H),6.83(d,J=8Hz,1H)および6.89〜95(m,2H),IR（フィルム）2913,1640,1570,1463,1262,1139および1031cm^-1.
(l)：シス2-（3',4'-ジメトキシフェニル）-5-［3-（N-メチル-N-ヒドロキシウレイジル）プロポキシ］テトラヒドロフラン(8)の調製
118(56mg,0.2mmol)の乾燥ジクロロメタン(3ml)中溶液にアルゴン雰囲気中、攪拌下に、トリホスゲン(20mg、0.07mmol)、続いて直ちにトリエチルアミン(80μl、0.57mmol)を添加した。溶液を２時間加熱還流し、室温に冷却し、氷浴中に置いた。この反応混合物に、純物トリエチルアミン(80μl、0.57mmol)、続いて固体メチルヒドロキシルアミン塩酸塩(32mg,0.39mmol)を添加した。反応液を室温で一晩放置した。反応液を水(10ml)で急冷し、ジクロロメタン(3×10ml)で抽出した。有機抽出液を水(3×10ml)、ブライン(3×10ml)で洗い、溶媒を減圧下に除去して琥珀色の油を得た。TLC（シリカゲル；酢酸エチル）による分析により、Rf0.30における一つのスポットおよび最初の位置における少しの物質が示された。サンプルを、シリカゲル60（230〜400メッシュ）上のカラム（フラッシュ）クロマトグラフィーにより精製し、酢酸エチルにより溶離して表記化合物を琥珀色の油状物(30mg、42％)として得た。¹H NMR(CDCl₃)1.76(m,2H),1.98〜2.10(m,3H),2.18〜2.26(m,1H),3.07(s,3H),3.25〜3.37(m,2H),3.46〜3.54(m,1H),3.85〜3.90(m,部分的に隠されている，1H),3.87(s,3H),3.88(s,3H),4.93〜5.00(m,1H),5.16(d,J=4Hz,1H),6.27(t,J=5Hz,1H),6.83(d,J=8Hz,1H)および6.88〜6.93(m,2H),IR（純物）2933,1643,1518,1261および1029cm^-1.
実施例３
2-（2,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン(13)および2-（4-フルオロフェニル）5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン（14,15）の調製
(a)：2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-ブロモプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物128）の調製
化合物105(1.0g、3.94mmol)をジクロロメタン４mlの溶解した。この溶液にトリエチルアミン(597mg、5.90mmol)を添加した。反応混合物を氷浴で冷却し、トリフルオロ無水酢酸(1.24g、5.90mmol)を滴下することにより加えた。反応混合物を0℃で30分間攪拌し、次に3-ブロモプロパノール(1.84g、13.27mmol)を添加した。反応混合物を室温まで温め、室温で２時間攪拌した。反応液を飽和NaHCO₃水溶液で急冷し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水および飽和NaCl溶液で洗い、MgSO₄で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させて油状物を得、それをカラムクロマトグラフィー（シリカ，4：1ヘキサン／酢酸エチル）で精製した（128：430mgおよびそのシス異性体250mg；合計収率46％）。¹H NMR(CDCl₃):128（トランス）：1.77(m,1H);1.98(m,1H);2.15(m,2H);2.20(m,1H);2.40(m,1H);3.53(t,2H);3.60(m,1H);3.83(s,3H);3.87(m,1H);3.89(s,6H);5.01(t,1H);5.35(dd,1H);6.57(s,2H).
(b)：2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-ブロモプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物129、130）の調製
これらの化合物は、化合物105を化合物123に替えて、実施例3（a）に記載の手順に類似の手順を用いて123から調製した。¹H NMR(CDCl₃):129（トランス）：1.72(m,1H);1.98(m,1H);2.14(m,2H);2.20(m,1H);2.40(m,1H);3.53(t,2H);3.60(m,1H);3.89(s,1H);5.06(t,1H);5.34(m,1H);7.02(t,2H);7.30(m,2H).130（シス）：1.98(m,1H);2.07(m,2H);2.14(m,2H);2.26(m,1H);3.52(t,2H);3.58(m,1H);3.93(m,1H);5.00(m,1H);5.20(dd,1H);7.03(t,2H);7.35(m,2H).
(c)：2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-O-ベンジルヒドロキシルアミノプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物131）の調製
化合物128(260mg、0.69mmol)を1,3-ジメチル-3,4,5,6-テトラヒドロ-2-(1H)-ピリミジノン(DMPU)２mlに溶解した。この溶液に炭酸ナトリウム(220.4mg、2.08mmol)およびベンジルヒドロキシルアミン塩酸塩(166mg、1.04mmol)を添加した。反応液を80℃で16時間攪拌し、水で急冷し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗い、MgSO₄で乾燥し、濾過し、蒸発させて油状物を得、酢酸エチル(114mg、40％)を溶媒として用いてカラム（フラッシュ）クロマトグラフィーにより精製した。¹H NMR(CDCl₃):1.72(m,1H);1.82(m,2H);1.92(m,1H);2.18(m,1H);2.36(m,1H);3.06(t,2H);3.52(m,1H);3.81(m,1H);3.83(s,3H);3.87(s,6H);4.71(s,2H);4.98(t,1H);530(dd,1H);6.55(s,2H);7.35(m,5H).
(d)：2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-O-ベンジルヒドロキシルアミノプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物132、133）の調製
これらの化合物は、化合物128を化合物129および130に替えて、実施例３(c)に記載の手順に類似の手順を用いて129および130から調製した。¹H NMR(CDCl₃):132（トランス）：1.70(m,1H);1.83(m,2H);1.94(m,1H);2.17(m,1H);2.38(m,1H);3.07(t,2H);3.52(m,1H);3.82(m,2H);4.71(s,2H);5.02(t,1H);5.30(ss,1H);7.02(t,2H);7.30(m,2H);7.36(m,5H).133（シス）：1.85(m,2H);1.96(m,1H);2.05(m,2H);2.26(m,1H);3.05(t,2H);3.50(m,1H);3.88(m,2H);4.70(s,2H);4.99(m,1H);5.17(dd,1H);5.50(bs,1H);7.00(t,2H);7.35(m,7H).
(e)：2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-O-ベンジルヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物134）の調製
化合物131(114mg、0.27mmol)をジクロロメタン３mlに溶解した。この溶液にトリメチルシリルイソシアネート(47.6mg、0.41mmol)を添加した。反応液を室温で16時間攪拌し、次に４時間還流させた。反応液を飽和塩化アンモニウム溶液で急冷し、酢酸エチルで抽出し、蒸発させて油状物を得た。生成物は酢酸エチルを溶媒として用いて分取TLCにより単離した。¹H NMR(CDCl₃):1.72(m,1H);1.94(m,3H);2.16(m,1H);2.38(m,1H);3.50(m,1H);3.62(m,2H);3.80(m,1H);3.82(s,3H);3.84(s,6H);4.81(s,2H);4.99(t,1H);5.30(m,3H);6.54(s,2H);7.37(s,5H).
(f)：2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-O-ベンジルヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物135、136）の調製
これらの化合物は、化合物131を化合物132および133に替えて、実施例３(e)に記載の手順に類似の手順を用いて132および133から調製した。¹H NMR(CDCl₃):135（トランス）：1.70(m,1H);1.93(m,3H);2.16(m,1H);2.39(m,1H);3.50(m,1H);3.62(m,2H);3.80(m,1H);4.82(s,2H);5.04(t,1H);5.30(dd,1H);5.35(bs,2H);7.00(t,2H);7.29(m,2H);7.38(s,5H).136（シス）：1.98(m,4H);2.08(m,1H);2.25(m,1H);3.48(m,1H);3.62(m,2H);3.83(m,1H);4.81(s,2H);4.98(m,1H);5.17(dd,1H);5.42(bs,1H);7.00(t,2H);7.33(m,2H);7.38(s,5H).
(g)：2-（3,4,5-トリメトキシフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物13）の調製
化合物134(90mg、0.19mmol)を酢酸エチル２mlに溶解し、次にPd/C(10％)(18mg)を添加した。反応混合物をバルーン圧で16時間水素化した。反応液を濾過し、濾過液を濃縮した。生成物を酢酸エチルを溶媒として用いて分取TLCにより単離した(68mg)。¹H NMR(CDCl₃):1.75(m,1H);1.91(m,2H);1.95(m,1H);2.20(m,1H);2.37(m,1H);3.58(m,1H);3.66(m,2H);3.81(s,3H);3.85(m,1H);3.87(s,6H);5.00(t,1H);5.35(dd,1H);5.41(bs,2H);6.35(s,2H);8.39(s,1H).
(h)：2-（4-フルオロフェニル）-5-（3-ヒドロキシウレイジルプロポキシ）テトラヒドロフラン（化合物14、15）の調製
化合物14および15を、化合物134を化合物135および136に替えて、実施例３(g)に記載の手順に類似の手順を用いて135および136から調製した。¹H NMR(CDCl₃):14（トランス）：1.72(m,1H);1.93(m,3H);2.20(m,1H);2.38(m,1H);3.58(m,1H);3.67(m,2H);3.85(m,1H);5.05(t,1H);5.33(dd,1H);5.48(bs,2H);7.00(t,2H);7.28(m,2H);8.48(bs,1H).15（シス）：1.92(m,2H);2.01(m,1H);2.10(m,2H);2.26(m,1H);3.53(m,1H);3.64(m,2H);3.87(m,1H);4.98(m,1H);5.20(dd,1H);5.43(bs,2H);7.01(m,2H);7.31(m,2H);8.43(bs,1H).
実施例４
トランス-2-｛3-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（207）
化合物207を製造するための合成図式を図式８に示す。

(a)：2-（t-ブチルジメチルシリロキシ）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物202）の調製：
2-ヒドロキシ-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(550mg、3.0mmol)、t-ブチルジメチルシリルクロライド(498mg、3.3mmol)およびイミダゾール(450mg、6.6mmol)を乾燥DMF２mlに溶解した。この溶液を乾燥アルゴン雰囲気下に一晩攪拌し、水200ml中に注ぎ、酢酸エチルとヘキサンとの2：1混合物(3×100ml)で抽出した。併せた有機抽出液を水(4×200ml)およびブライン(100ml)で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させて2-（t-ブチルジメチルシリロキシ）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物202,シス異性体とトランス異性体との混合物）830mg(93％)をいかなる精製も必要としない無色油状物として得た。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.40〜7.50(2H,m,微量異性体),7.25〜7.35(2H,m,主量異性体),7.00〜7.10(2H,m,主量異性体と微量異性体の両方),5.71〜5.75(1H,m,主量異性体),5.59〜5.62(1H,m,微量異性体),5.12〜5.20(1H,m,主量異性体),4.90〜4.98(1H,m,微量異性体),2.40〜2.55(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),2.05〜2.17(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),1.87〜2.00(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),1.67〜1.70(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),0.92(s,9H,主量異性体と微量異性体の両方),0.16(s,6H,主量異性体と微量異性体の両方)。
(b)：トランス-2-（3-テトラヒドロピラニロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物204）の調製：
2-（t-ブチルジメチルシリロキシ）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(202、593mg、2.0mmol)を乾燥塩化メチレン10mlに混入した（使用前にアルゴンを吹き入れることにより脱気した）。この溶液を-70℃に冷却した。乾燥アルゴン雰囲気中で同じ温度で攪拌しながら、トリメチルシリルブロミド(290μl、2.2mmol)を滴下することにより加えた。攪拌をさらに1.5時間続けて2-ブロモ-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(203)を製造し、それを単離しないで、更に精製することなくその後の化学処理に用いた（下記参照）。
別のフラスコで、3-テトラヒドロピラニロキシ-ブト-1-イン(370mg、2.4mmol)を乾燥THF(５ml)中に溶解した。溶液を-60℃に冷却し、乾燥アルゴン雰囲気中で同じ温度で攪拌しながら、n-ブチルリチウム(1.0ml、2.4mmol)を滴下することにより加えた。攪拌をさらに0.5時間続けた。得られる溶液を注射器で取り出し、2-ブロモテトラヒドロフラン（先に製造した）の溶液に-70℃で攪拌下に滴下することにより加えた。攪拌を-78℃でさらに1.5時間続けた。反応フラスコを冷蔵庫（-78℃）中に一晩貯蔵した（TLCによっていかなる変化も示されなかった）。反応混合物を塩化アンモニウムの2M溶液(50ml)に注ぎ込み、塩化メチレン(3×50ml)で抽出した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液，ヘキサン中10％酢酸エチル）で精製して二つの成分を得た。プロトンNMR分析により、極性のより小さい成分がトランス-2-（3-テトラヒドロピラニロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物204,280mg,45％）であると同定され、極性のより大きい成分(230mg)が二以上の化合物の混合物であることがわかった。この混合物を廃棄した。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.27〜7.30(2H,m);7.01(2H,t,J=8.7Hz),5.09(1H,t,J=7.1Hz),4.91〜4.95(2H,m),4.57〜4.64(1H,m),3.78〜3.90(1H,m),3.50〜3.60(1H,m),2.30〜2.50(2H,m),2.05〜2.17(1H,m),1.70〜1.90(3H,m),1.50〜1.65(4H,m),1.48(3H,d,J=6.6Hz).
(c)：トランス-2-（3-ヒドロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物205）の調製：
トランス-2-（3-テトラヒドロピラニロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物204、280mg、0.9mmol）をメタノール(15ml)に溶解した。この溶液にp-トルエンスルホン酸）50mg）を添加し、得られる溶液を45分間攪拌した。飽和重炭酸ナトリウム溶液(10ml)を添加した。５分間の攪拌後、溶液を水10mlに添加し、ブライン15mlで希釈し、塩化メチレン(3×30ml)で抽出した。併せた有機抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を回転式蒸発器で除去してトランス-2-（3-ヒドロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物205）212mg(100％)を得た。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.29(2H,dd,J＝8.7,5.2Hz),7.01(2H,t,J＝8.7Hz),5.09(1H,t,J＝7.4Hz),4.92(1H,t,J＝7.4Hz),4.59(1H,q,J＝6.6Hz),2.30〜2.50(2H,m),2.05〜2.15(1H,m),2.00(1H,br s),1.75〜1.88(1H,m),1.47(3H,d,J＝6.6Hz).
(d)：トランス-2-｛3-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物206）の調製：トランス-2-（3-ヒドロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物205、210mg、0.89mmol）、トリフェニルホスフィン(288mg、1.1mmol)およびN,O-ビス（フェノキシカルボニル）ヒドロキシルアミン(283mg、1.1mmol)を乾燥THF(5ml)に溶解した。溶液をアルゴン雰囲気下0℃に冷却し、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(216ml、1.1μmol)を滴下することにより加えた。同じ温度で攪拌を１時間続けた。溶媒を蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液，ヘキサン中30％酢酸エチル）で精製してトランス-2-｛3-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物206）250mg(57％)を得た。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.15〜7.45(12H,m),7.02(2H,t,J＝8.6Hz),5.32(1H,q,J＝7.0Hz),5.07(1H,t,J＝6.8Hz),4.96(1H,t,J＝5.7Hz),2.25〜2.50(2H,m),2.05〜2.20(1H,m),1.70〜1.85(1H,m),1.66(3H,d,J＝7.0Hz).
(e)：トランス-2-｛3-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物207）の調製：
トランス-2-｛3-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(206、200mg、0.41mmol)を塩化メチレン中溶液として高圧管中に溶解した。溶媒をアルゴン流を用いて蒸発させ、残渣を-78℃に冷却した。この管中においてアンモニア(8ml)を濃縮し、t-ブタノール４mlを添加した。管を密封し、室温までゆっくり温まるように放置し、室温で18時間攪拌した。圧力を非常にゆっくりと抜き、管を１時間を開けておいた。残渣をフラスコに移し、添加したトルエンにより２度回転蒸発(rotavapped)させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液，酢酸エチル中３％メタノール）で精製し、さらに分取TLC（溶媒，塩化メチレン中５％メタノール）で精製してトランス-2-｛3-（N-ヒロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物207）93mg(78％)を得た。IR（フィルム）3481,3269,2985,2877,2249,1662,1670,1510,1444,1224,1172,1037cm^-1;¹H-NMR(CDCl₃)δ8.10(1H,br s),7.26(2H,dd,J＝8.6,5.4Hz),7.00(2H,t,J＝8.6Hz),5.80(1H,br,s),5.00〜5.20(2H,m),4.80〜5.00(1H,m),2.20〜2.50(2H,m),2.00〜2.20(1H,m),1.70H,HHh
〜1.90(1H,m),1.37(3H,dd,J＝6.9,1.9Hz).
実施例５
トランス-2-｛3-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物216および217）のS,S,S-およびS,S,R-異性体の調製
トランス-2-｛3-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフランのS,S,R-およびS,S,S-異性体を調製するための一つの方法を以下の図式９に示す。

(a)：メチル3-（4-フルオロベンゾイル）プロピオネート（化合物209）の調製
3-（4-フルオロベンゾイル）プロピオン酸(1.98g、10.0mmol)のメタノール(25ml)中溶液に、濃硫酸0.5mlを添加した。得られる溶液をアルゴン雰囲気下、２時間攪拌した。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウムで中和し、メタノールを回転式蒸発器を用いて除去し、残渣を酢酸エチル50mlに溶解した。得られる溶液を飽和重炭酸ナトリウム(3×50ml)およびブライン(50ml)で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去してメチル3-（4-フルオロベンゾイル）プロピオネート(2g、94％)を得た。IR（フィルム）3448,3111,3076,3003,3958,1734,1678,1601,1423,1300,1240,1155,1099cm^-1;¹H-NMR(CDCl₃)δ7.97(2H,dd,J=9.0,5.5Hz),7.10(2H,T,J=8.9Hz),3.67(3H,s),3.25(2H,t,J=6.6Hz),2.73(2H,t,J=6.6Hz);13C-NMR(CDCl3)δ196.50,173.34,167.54,164.17,132.98,130.77,115.91,115.62,51.91,33.31,28.00.
(b)：(S)-5-（4-フルオロフェニル）-γ-ブチロラクトン（化合物210）の調製
メチル3-（4-フルオロベンゾイル）プロピオネート（化合物209、780mg、3.67mmol)の乾燥THF(2ml)中溶液を、アルゴン雰囲気中で攪拌下に、予め冷却(０℃)した(-)-DIP-クロライド(2.02g、6.25mmol)のTHF(2ml)中溶液に滴下することにより加えた。得られる溶液を同じ温度で２時間攪拌し、０〜５℃で一晩放置した。温度を０℃に維持しつつ、攪拌下に水(2ml)、続いてメタノール(5ml)およびNaOHの5M溶液(5ml)を滴下することにより加えた。反応混合物を室温で1.5時間攪拌し、冷却し、飽和重炭酸ナトリウム溶液15mlを添加した。得られる混合物をエーテル(3×50ml)で洗い、6NのHClで酸性化した。酸性混合物をトルエン(3×50ml)で抽出した。併せたトルエン抽出物をブライオン(50ml)で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去した。残渣をトルエン50ml中に再懸濁させ、そこにPPTS(10mg)を添加した。得られる溶液をDean-Stark trap（最初に留出液15mlを排出した）で２時間還流した。溶液を冷却し、飽和重炭酸塩溶液(2×50ml)で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去して(S)-5-（4-フルオロフェニル）-γ-ブチロラクトン620mg(94％)を得た。1H-NMR(CDCl3)δ7.33(2H,dd,J=8.8,5.3Hz),7.09(2H,t,J=8.7Hz),5.50(1H,dd,J=8.4,5.9Hz),2.64〜2.71(3H,m),2.17〜2.22(1H,m).
(c)：(5S)-2-ヒドロキシ-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物211）の調製(S)-5-（4-フルオロフェニル）-γ-ブチロラクトン（化合物210、620mg、3.44mmol）を（ヘキサンで）共沸的に乾燥させ、乾燥塩化メチレン(25ml)中に溶解した。溶液をアルゴン雰囲気中攪拌下に-78℃に冷却し、DIBALH（トルエン中1.5M溶液3.5ml、5.16mmol）を滴下することにより加えた。攪拌を-78℃で２時間続け、次に酒石酸カリウムナトリウムの飽和溶液(25ml)を添加した。冷却浴を除去し、攪拌をさらに２時間続けた。反応混合物を塩化メチレン(25ml)で希釈した。有機層を分離し、水(2×50ml)およびブライン(50ml)で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去して2-ヒドロキシ-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(620mg、100％)を得た。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.30〜7.41(m,2H),7.04(m,2H),5.63〜5.78(m,1H),5.00〜5.22(m,1H),2.48(m,1H),2.20〜2.32(m,1H),1.95〜2.10(m,1H),1.79(m,1H).
(d)：(5S)-2-（t-ブチルジメチルシリロキシ）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物212）の調製
(5S)-2-ヒドロキシ-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物211,620mg,3.5mmol）、t-ブチルジメチルシリルクロライド(700mg、5.25mmol)およびイミダゾール(595mg、8.75mmol)を乾燥DMF２mlに溶解した。得られる溶液を乾燥アルゴン雰囲気中で一晩攪拌し、水200ml中に注ぎ、酢酸エチルとヘキサンとの2：1混合物(3×100ml)で抽出した。併せた有機層を水(4×200ml)およびブライン(100ml)で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去して(5S)-2-（t-ブチルジメチルシリロキシ）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物212、シス異性体とトランス異性体との混合物）１g(96％)をさらなる精製の必要のない無色油状物として得た。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.40〜7.50(2H,m,微量異性体),7.25〜7.35(2H,m,主量異性体),7.00〜7.10(2H,m,主量異性体と微量異性体の両方),5.71〜5.75(1H,m,主量異性体),5.59〜5.62(1H,m,微量異性体),5.12〜5.20(1H,m,主量異性体),4.90〜4.98(1H,m,微量異性体),2.40〜2.55(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),2.05〜2.17(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),1.87〜2.00(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),1.67〜1.70(1H,m,主量異性体と微量異性体の両方),0.92(s,9H,主量異性体と微量異性体の両方),0.16(s,6H,主量異性体と微量異性体の両方)。
(e)：(2S,5S)-トランス-2-（3-t-ブチルジメチルシリロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物213）の調製
(5S)-2-（t-ブチルジメチルシリロキシ）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物212、1g、3.4mmol）を乾燥塩化メチレン（使用前にアルゴンを吹き入れることにより脱気した。）10mlに溶解した。この溶液を-70℃に冷却し、アルゴン雰囲気中、同じ温度で攪拌下に、トリメチルシリルブロミド(500μl、4.1mmol)を滴下することにより加えた。攪拌をさらに1.5時間続けて(5S)-2-ブロモ-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフランを得、それを単離することなく使用した（以下参照）。別のフラスコで、3-t-ブチルジメチルシリロキシ-ブト-1-イン(840mg、4.5mmol)を乾燥THF(10ml)中に溶解した。溶液を-60℃に冷却し、アルゴン雰囲気中、同じ温度で攪拌下に、n-ブチルリチウム（ヘキサン中2.5M溶液1.8ml、4.5mmol）を滴下することにより加えた。攪拌をさらに0.5時間続けた。得られる溶液を、カニューレを通して、-70℃で攪拌下に、2-ブロモテトラヒドロフラン（先に製造）の溶液を滴下することにより加えた。攪拌を、-78℃でさらに1.5時間続けた。反応フラスコを冷蔵庫（-78℃）中に一晩放置した（TLCはいかなる変化も示さなかった。）。反応混合物を塩化アンモニウムの2M溶液(100ml)に注ぎ込み、塩化メチレン(3×75ml)で抽出した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下に除去した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液，ヘキサン中10％酢酸エチル）で精製して二つの成分を得た。プロトンNMR分析により、極性のより小さい成分が(2S,5S)-トランス-2-（3-t-ブチルジメチルシリロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物213,765mg,65％）であると同定された。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.29(2H,m),7.01(2H,t,J=8.7Hz),5.09(1H,t,J=7.1HZ),4.91〜4.97(2H,m),4.55〜4.62(1H,m),2.26〜2.50(2H,m),2.05〜2.17(1H,m),1.75〜1.88(1H,m),1.38(3H,d,J=6.6Hz),0.90(9H,s),0.12(6H,s).より極性の大きい成分は、(2R,5S)-シス-2-（3-t-ブチルジメチルシリロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物214,190mg,16％）であると確認された。
(f)：(2S,5S)-トランス-2-（3-ヒドロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物215）の調製
(2S,5S)-トランス-2-（3-t-ブチルジメチルシリロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物213、765mg、2.2mmol）をTHF 20mlに溶解した。この溶液を０℃に冷却し、そこにTBAF(THF中1M溶液6.6ml)を添加した。得られる溶液を０℃で2時間攪拌し、溶媒を減圧下に除去した。残渣を酢酸エチル(100ml)に溶媒し、水(3×100ml、それぞれの場合に分離層にブライン５mlを添加)および続いてブライン(50ml)で洗い、硫酸ナトリウムで洗い、溶媒を減圧下に除去して(2S,5S)-トランス-2-（3-ヒドロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物215）500mg(97％)を得た。1H-NMR(CDCl3)δ7.29(2H,dd,J＝8.7,5.2Hz),7.01(2H,t,J=8.7Hz),5.09(1H,t,J=7.4Hz),4.92(1H,t,J=7.4Hz),4.59(1H,q,J=6Hz),2.30〜2.50(2H,m),2.05〜2.15(1H,m),1.75〜1.88(1H,m),1.72(1H,br s),1.47(3H,d,J＝6.6Hz).
(2S,5S)-トランス-2-（3-ヒドロキシ-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物215、500mg、2.13mmol）、(R)-α-メトキシ-フェニル酢酸（1.06g,6.4mmol）およびDMAP(86mg、0.7mmol)を乾燥塩化メチレン(3ml)に溶解した。DCC(1.5g、7.24mmol)を添加し、得られる溶液を室温でアルゴン雰囲気中、３時間攪拌した（数分間で多くの白色固体が沈殿した）。固体を濾去し、濾液を減圧下に濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液、ヘキサン中８％酢酸エチル）で精製して二つのジアステレオマーエステルを得た。極性のより小さいものが(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-ヒドロキシ-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物216、250mg、30％、¹H-NMRから95％を超える）から確認された。¹H-NMR(CDCl₃HHH
)δ7.25〜7.50(7H,m),7.02(2H,t,J＝8.5Hz),5.52〜5.60(1H,m),5.06(1H,t,J＝6.8Hz),4.88〜4.94(1H,m),4.78(1H,s),3.43(3H,s),2.25〜2.47(2H,m),2.00〜2.13(1H,m),1.75〜1.88(1H,m),1.37(3H,d,J＝6.7Hz).極性のより大きいものは(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-ヒドロキシ-ブト-1-イニル｝-5-(4-フルオロフェニル)テトラヒドロフラン（化合物217、230mg、29％、¹H-NMRから72％）から確認された。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.22〜7.50(7H,m),7.01(2H,t,J＝8.7Hz),5.50〜5.60(1H,m),4.98(1H,t,J＝7.2Hz),4.79〜4.85(1H,m),4.79(1H,s),3.44(3H,s),2.20〜2.40(2H,m),1.88〜1.98(1H,m),1.72〜1.80(1H,m),1.51(3H,d,J＝6.7Hz).これらの二つのエステルを塩基性加水分解（KOHの1Mエタノール溶液10ml中で50℃において30分間攪拌してから、通常の処理を行う）することにより、それぞれのアルコール；(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-ヒドロキシ-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物218、150mg、98％）およびそのジアステレオマー(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-ヒドロキシ-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物221、50mg、100％）を得た。これらの両方のアルコールの¹H-NMRスペクトルは218のものと同一であった。
(g)：(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-(N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物219）の調製
(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-ヒドロキシ-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物218、150mg、0.64mmol）、トリフェニルホスフィン(200mg、0.77mmol)およびN,O-ビス（フェノキシカルボニル）ヒドロキシルアミン(200mg、0.77mmol)を乾燥THF(3ml)に溶解した。溶液を０℃に冷却し、そこに乾燥アルゴン雰囲気中、攪拌下にジイソプロピルアゾジカルボキシレート(142μl、0.77mmol)を滴下することにより加えた。攪拌を同じ温度で1時間続けた。溶媒を回転式蒸発器で蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液，ヘキサン中30％酢酸エチル）で精製して(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル）-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(219)225mg(72％)を得た。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.15〜7.45(12H,m),7.02(2H,t,J＝8.6Hz),5.32(1H,q J＝7.0Hz),5.07(1H,t,J＝6.8Hz),4.96(1H,t,J＝5.7Hz),2.25〜2.50(2H,m),2.05〜2.20(1H,m),1.70〜1.85(1H,m),1.66(3H,d,J＝7.0Hz).
(h)：(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物222）の調製
(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-ヒドロキシ-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物221、150mg、0.64mmol）から出発して、218と同様の手順に従って、(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物222）を得た。1H-NMRは219と同一であった。
(i)：(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（CMI-947）（化合物220）の調製：
(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物219、225mg）を高圧管中に塩化メチレン中溶液として溶解した。溶媒をアルゴン流で蒸発させて、残渣を-78℃に冷却した。この管内でアンモニア10mlを濃縮し、t-ブタノール2mlを添加した。管を密封し、室温までゆっくり温まるように放置した。それを室温で18時間攪拌させた。圧力を非常にゆっくりと抜き、管を１時間開けておいた。残渣をフラスコに移し、トルエンを添加して減圧下に２回濃縮した。残渣を分取TLC（溶離液，塩化メチレン中５％メタノール）で精製して(2S,5S)-トランス-2-｛3-(R)-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン(CMI-947,220)120mg(90％)を得た。IR（フィルム）3209,2985,2874,1653,1510,1449,1336,1224,1157,1037cm^-1,¹H-NMR(CD3 OD)δ7.34(2H,dd,J＝8.7,5.4Hz),7.04(2H,t,J＝8.8Hz),5.00〜5.10(2H,m),4.85〜4.95(1H,m),2.25〜2.50(2H,m),2.00〜2.15(1H,m),1.78〜1.85(1H,m),1.38(3H,d,J=7.0Hz).
(j)：(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-(4-フルオロフェニル)テトラヒドロフラン（CMI-948）（化合物223）の調製：
(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-（N-フェノキシカルボニロキシ-N-フェノキシカルボニル-アミノ）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（化合物222,225mg）から出発して、219と同様の手順に従って、(2S,5S)-トランス-2-｛3-(S)-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフラン（CMI-948,223）110mg（83％）を得た。IR（フィルム）3200,2985,2881,1643,1510,1442,1222,1035cm^-1;1H-NMR(CD3 OD)δ7.34(2H,dd,J＝8.7,5.5Hz),7.04(2H,t,J=8.9Hz),5.00〜5.10(2H,m),4.85〜4.95(1H,m),2.25〜2.50(2H,m),2.00〜2.15(1H,m),1.70〜1.85(1H,m),1.38(3H,d,J=7.0Hz).
実施例６
トランス-2-｛3-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフランR,R,S-およびR,R,R-異性体（化合物234および236）の調製
トランス-2-｛3-（N-ヒドロキシウレイジル）-ブト-1-イニル｝-5-（4-フルオロフェニル）テトラヒドロフランのS,S,R-およびS,S,.S-異性体を調製するための一つの方法を以下の図式10に示す。

(a)4-（4-フルオロフェニル）-4-オキソ-メチルブタノエート（化合物209）の調製
3-（4-ベンゾイル）プロピオン酸(208)(5.0g)のメタノール(20ml)中溶液に、攪拌下に、数滴の硫酸を添加した。一晩（19時間）攪拌した後、反応液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和し、メタノールを減圧下に除去した。残渣を酢酸エチル(50ml)中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液(3×15ml)、水(2×15ml)およびブライン(2×15ml)で洗い、乾燥(Na₂SO₄)し、濾過し、濃縮して淡色結晶性固形物(5.3g、98％)を得た。¹H-NMR:2.79(t,2H),3.30(T,2H),3.71(S,3H),7.14(T,2H),8.02(m,2H).
(b)：R-4-（4-フルオロフェニル）-γ-ブチロラクトン（化合物224）の調製
冷却(０℃)された(+)-DIPクロライド(25g、77.9mmol)の乾燥THF(20ml)中溶液に、アルゴン雰囲気中、攪拌下に、ケト−エステル209(10.07g、48.0mmol)の乾燥THF(20ml)中溶液をゆっくりと添加した。反応液を冷蔵庫(４℃)内に30時間置き、次に氷浴に戻し、攪拌下に水(10ml)、メタノール(30ml)および10％NaOH水溶液(60ml)を添加した。氷浴を除去した。エステルの全てを加水分解したとき、飽和重炭酸ナトリウム水溶液(80ml)を添加した。水溶液をエーテル(2×100ml)で抽出し、次にpH２に酸性化し、ベンゼン(2×180ml)で抽出した。併せたベンゼン層にピリジニウム-p-トルエンスルホネート(60ml)を添加し、次にディーン-シュターク・トラップを用いて加熱還流した。反応が完了した時点で、ベンゼン溶液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液(150ml)およびブライン(2×50ml)で洗い、乾燥(Na₂SO₄)し、濾過し、濃縮して白色結晶性固形物を得(7.92g、91％)、それは先例の文献に基づきＲ構造であると確認された。¹H-NMR:2.10〜2.25(m,1H),2.68(m,3H),5.50(m,1H),7.08(t,2H),7.30(m,2H).
(c)：シスおよびトランス-5R-5-（4-フルオロフェニル）-2-ヒドロキシテトラヒドロフラン（化合物225）の調製
ドライアイス／アセトン浴中で冷却されたラクトン224(7.25g、40.3mmol)の乾燥トルエン(50ml)中溶液に、攪拌下に、水素化ジイソブチルアルミニウム（トルエン中1.5M溶液）（1.5当量、40ml）を添加した。反応が完了した時点に、メタノール(10ml)をゆっくりと添加し、次に飽和L-酒石酸ナトリウムカリウム水溶液(60ml)を添加し、氷浴を除去した。この溶液を一晩（16時間）貯蔵し、層を分離し、水柱フラクションを酢酸エチル(2×50ml)で抽出した。併せた有機層を水(3×30ml)およびブライン(3×30ml)で洗い、乾燥(Na₂SO₄)し、濾過し、濃縮した。生成物は二つのジアステレオマーの混合物(50／50)である無色油状物(6.32g,86％)であった。¹H-NMR:1.7(m,1H),1.9〜2.3(m,2H),2.42(m,1H),3.60(bs,0.5H),3.72(bs,0.5H),4.98(t,0.5H),5.20(t,0.5H),5.60(bs,0.5H),5.72(m,0.5H),7.00(t,2H),7.25(m,1H),7.40(m,1H).
(d)：シスおよびトランス-5R-5-（4-フルオロフェニル）-2-t-ブチルジメチルシロキシテトラヒドロフラン（化合物226）の調製：
ラクトール225(6.32g、34.7mmol)の塩化メチレン(140ml)中溶液に、攪拌下に、イミダゾール（1.1当量、38.2mmol、2.60g））およびTBD<Sクロライド(5.77g)を添加した。一晩攪拌した後、反応液を濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカのプラグを通して濾過して、二つのジアステレオマーの混合物(2：1)である無色油状物(9.61g、93％)であった。¹H-NMR:0.14(s,6H),0.92(s,9H),1.7(m,1H),1.9〜2.2(m,2H),2.4〜2.5(m,1H),4.9(m,0.33H),5.16(t,0.66H),5.59(m,0.33H),5.71(dd,0.66H),7.00(m,2H),7.25(m,1.33H),7.40(m,0.66H).
ラセミ混合体および5位変性を有するこの化合物のサンプルについて、この中心における各構造の存在をキラル溶媒和剤［2,2,2-トリフルオロ-1-（9-アンスリル）エタノール，2.2mg基剤，40mgCSA］を用いて検出することができた。これらの条件は、化合物226が検出できる量の5Ｓ異性体を有さないことを示した。
対照として、５位がラセミ混合体である化合物226の2：1ジアステレオマー混合物(2.2mg)をCSA(40mg)で処理した。4.86〜4.92ppm(0.33H)のマルチプレットが、4.64〜4.72および4.78〜4.84ppmにおける二つのマルチプレットになった。他のジアステレオマー（同じスペクトル）について、5.66〜5.70ppmにおける二重のダブレットが5.64〜5.68および5.70〜5.74ppmにおける二組のddになった。キラルが低下した化合物について、4.62〜4.70において小さいマルチプレット（W/CSA）が現れ、二重のダブレットが5.68〜5.70ppmにおいて現れる。他の異性体の証拠は見られなかった。
(e)：2R,5R-トランス-5-（4-フルオロフェニル）-2-（3-t-ブチルジメチルシロキシ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物227）の調製：
-78℃に冷却された226(500mg、1.69mmol)の乾燥脱気塩化メチレン(10ml)中溶液に、TMSブロミド(0.25ml、1.86mmol)を添加した。これを４時間攪拌した。3-t-ブチルジメチルシロキシ-1-ブチン(0.31g、1.68mmol)およびTHF(5ml)を含む別のフラスコに、n-ブチルリチウム（ヘキサン中1.6M、1.26ml、2.02mmol）を添加した。30分後、溶液をカニューレにより前記溶液に移した。２時間後、反応液を２M塩化アンモニウム水溶液(25ml)に注入し、塩化メチレン(3×25ml)中に抽出し、乾燥(Na₂SO₄)し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中５％酢酸エチル）によりトランス生成物を透明油状物(280mg、48％)として得た。¹H NMR:0.17(d,6H),0.91(s,9H),1.42(d,3H),1.8(m,1H),2.25〜2.50(m,2H),4.58(m,1H),4.91(m,1H),5.09(m,1H),7.0(t,2H),7.30(m,2H).
(f)：2R,5R-トランス-5-（4-フルオロフェニル）-2-（3-ヒドロキシ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物228）の調製：
氷浴中で冷却された227(0.38g、1.1mmol)のTHF(5ml)中溶液の攪拌下に、テトラブチルアンモニウムフルオライド(0.86g、3.3mmol)を添加した。氷浴を除去した。30分後に、溶媒を除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中25％酢酸エチル）により分離した。生成物は無色油状物(170mg、67％)であった。¹H NMR:1.48(d,3H),1.8(m,1H),2.1(m,1H),2.3〜2.5(m,2H),4.58(m,1H),4.91(t,1H),5.1(t,1H),7.0(t,2H),7.29(m,2H).
228のヒドロキシ官能基をR-アルファ-メトキシフェニル酢酸（DDC,DMAP,CH₂Cl₂,クロマトグラフィーにかけた後に55％）でエステル化し、得られるジアステレオマー（229＋230）を分離（フラッシュクロマトグラフィー）し、カルビトール炭素におけるRおよびＳ異性体を単離した。エステルを塩基加水分解(KOH、78％)により除去してカルビノール231および232を得た。MosHeRモデルを基に完全な構造を確認した。
(g)：2R,5R-トランス-5-（4-フルオロフェニル）-2-（3R-3-N,O-ビスフェノキシカルボニル ヒドロキシルアミノ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物233）の調製：
冷却（氷浴）された2R,5R-トランス-5-（4-フルオロフェニル）-2-（3S-3-ヒドロキシ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン(231)(29mg、0.12mmol)、トリフェニルホスフィン(39mg、0.15mmol)およびN,O-ビスフェノキシカルボニル ヒドロキシルアミン(37mg,0.14mmol)のTHF（3ml）中溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(0.029ml、0.15mmol)をゆっくりと添加した。氷浴を除去し、反応が完了した時点（数分）で、溶媒を除去した。生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中15％酢酸エチル）により無色油状物(32mg、53％)として得た。¹H NMR:1.65(d,3H),1.8(m,1H),2.1(m,1H),2.4(m,2H),4.94(m,1H),5.08(m,1H),5.30(m,1H),7.0(t,2H),7.15〜7.40(m,2H).
(h)：2R,5R-トランス-5-（フルオロフェニル）-2-（3R-3-N-ヒドロキシウレイジル-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物234）の調製：
化合物233(32mg)を、攪拌棒を備えるスクリューキャップ付きで容器内で-78℃で、凝縮アンモニア（約３ml）およびt-ブタノール（約２ml）と併せた。容器を密封し、冷却浴を除去した。室温で一晩攪拌した後、圧力を抜き、溶媒を除去した。生成物を研和（ヘキサン中25％酢酸エチル）して白色固形物(14mg,74％)を得た。1H NMR:1.41(d,3H),1.8(m,1H),2.1(m,1H),2.3〜2.5(m,2H),4.93(t,1H),5.08(t,1H),5.20(m,1H),5.38(bs,1H),7.0(t,2H),7.29(m,2H).
電気スプレーMS：M＋1＝293
エステル230からのRRS異性体（CMI-957）の合成を、エステル29からのRRR異性体(CMI-954)の合成と同様にして行った。
実施例７
2S,5S-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N-ヒドロキシウレイジル-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物４０１、図４）および2S,5R-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N-ヒドロキシウレイジルブチル）テトラヒドロフラン（化合物402,図4）の調製
4S-（4-フルオロフェノキシメチル）-γ-ブチロラクトン（化合物301,図4）の調製(S)-γ-ブチロラクトン(1.0g、8.61mmol)、4-フルオロフェノール（1.16g,10.35mmol）およびトリフェニルホスフィン(2.49g、9.49mmol)のTHF(10ml)中溶液に、攪拌下、ジイソプロポキシルアゾジカルボキシレート(1.87μl、9.46mmol)を滴下することにより加えた。添加後に、反応混合物を80℃で16時間攪拌した。溶媒を除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、2：1ヘキサン／酢酸エチル）により分離した(1.38g、76.3％)。¹H NMR(CDCl₃):2.27(m,1H);2.42(m,1H);2.60(m,1H);4.04(m,1H);4.15(m,1H);4.85(m,1H);6.84(m,2H);6.98(m,2H).
2S-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-ヒドロキシ-テトラヒドロフラン（化合物302,図４）の調製
ラクトン301(1.38g、27.22mmol)の乾燥トルエン(24ml)中溶液に、攪拌下、-78℃で、DIBALKHの1.5Mトルエン溶液(6.76ml、10.13mmol)を滴下することにより加えた。反応混合物を-78℃で２時間攪拌した。反応液を、温度を-60℃より低く維持しながら、更なるメタノール(1.7ml)の添加により急冷した。混合物を-20℃まで温め、続いて反応温度を-10〜0℃に維持しつつ飽和酒石酸ナトリウムカリウム水溶液(10ml)を添加した。反応混合物を室温で一晩攪拌し、次に二つの相を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。併せた有機層を水、飽和NACl溶液で洗い、次に減圧下に濃縮して油状物を得、それをフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、1：1ヘキサン／酢酸エチル）により精製した(1.41g,101％)。¹H NMR(CDCl₃):1.80(m,1H);2.05(m,2H);2.26(m,1H);3.93(m,2H);4.04(m,2H);4.47(m,0.5H);4.61(m,0.5H);5.57(m,0.5H);5.66(m,0.5H);6.88(m,2H);6.98(m,2H).
2S-(4-フルオロフェノキシメチル)-5-（t-ブチルジメチルシロキシ）テトラヒドロフラン（化合物303,図４）の調製
ラクトール302(1.41g、6.65mmol)の塩化メチレン(25ml)中溶液に、攪拌下、イミダゾール(498.1mg、7.32mmol)およびTBDMSクロライド(1.10g、7.32mmol)を添加した。反応混合物を、室温で一晩攪拌し、次に反応液を濾過し、濾液を濃縮した。粗生成物を溶媒として9：1ヘキサン／酢酸エチルを用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、二つのジアステレオマー（約2：1）の混合物である無色油状物(1.22g、56.2％)を得た。¹H NMR(CDCl₃):0.11(s,6H);0.90(s,9H);1.80〜2.10(m,3H);2.22(m,1H);3.91(m,2H);4.38(m,0.33H);4.50(m,0.67H);5.52(m,0.33H);5.59(m,0.67H);6.86(m,2H);6.96(m,2H).
2S,5S-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-t-ブチルジメチルシロキシ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物304,図４）および2S,5R-シス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-t-ブチルジメチルシロキシ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物305,図４）の調製
-78℃に冷却された303(720mg、2.21mmol)の乾燥塩化メチレン（10ml）中溶液に、攪拌下、TMSブロミド(349.8μl、2.65mmol)を添加した。反応混合物を、-78℃で４時間攪拌した。4-t-ブチルジメチルシロキシ-1-ブチン(812.8mg、4.42mmol)およびTHF(10ml)を含む別のフラスコに、n-ブチルリチウム（ヘキサン中2.5M、2.65ml、6.63mmol）を添加した。30分後、溶液をカニューレにより前記溶液に移した。2時間後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液を添加し、塩化メチレンで抽出し、mgSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、95：5ヘキサン／酢酸エチル）により二つの生成物、すなわちトランス化合物304(210mg)とシス化合物305(160mg)、およびこれら二つの化合物の混合物(50mg)を得た。合計収率は48.5％である。¹H NMR(CDCl₃):304:0.10(s,6H);0.91(s,9H);1.87(m,1H);2.01(m,1H);2.22(m,2H);2.43(t,2H);3.72(t,2H);3.92(d,2H);4.47(m,1H);4.73(m,1H);6.86(m,2H);6.95(t,2H).305:0.09(s,6H);0.90(s,9H);1.92〜2.20(m,4H);2.42(m,2H);3.70(t,2H);3.92(m,1H);4.07(m,1H);4.29(m,1H);4.62(m,1H);6.86(m,2H);6.96(t,2H).
化合物304および305の調製において、4-t-ブチルジメチルシリル以外の当業者に知られている酸素保護基を所望により用いることができる。
この分子の立体化学を決めるために、304と305の両方についてNOE相違実験を行った。304のNOE相違実験において、4.73ppmにおけるマルチプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在を測定するためにのみデータの採取を行った。これは正のNOE効果を表し、これらプロトンの親密な空間的関係を示す。この実験において、フラン環プロトンである2.22ppmにおけるマルチプレットについてNOEが発見された。ここで4.47ppmにおけるマルチプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在を測定するためにのみデータの採取を行った。フラン環プロトンである2.22ppmにおけるマルチプレットについてNOEが発見された。また、このマルチプレットに近接するメチレン上のプロトンである3.92ppmにおけるプロトンについてもう一つのNOEが発見され、そのことはこのマルチプレットがメチレンに近接するプロトンを表すことを示している。
305のNOE相違実験において、4.62ppmにおけるトリプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在を測定するためにのみデータの採取を行った。これは正のNOE効果を表し、これらプロトンの親密な空間的関係を示す。この実験において、他のメチンフランプロトンである4.29ppmにおけるマルチプレットについてNOEが発見された。また、フランプロトンである2.17ppmにおけるマルチプレットについてもう一つのNOEが見られた。ここで4.29ppmにおけるマルチプレットに非常に低い比周波数脱カップリングパルスを照射し、信号の増加の存在を測定するためにのみデータの採取を行った。他のメチンフランプロトンである4.62ppmにおけるトリプレットについてNOEが発見された。また、このマルチプレットに近接するメチレン上のプロトンである3.92および4.07ppmにおけるプロトンについてもう一つのNOEが発見され、そのことはこのマルチプレットがメチレンに近接するプロトンを表すことを示している。また、フランプロトンである2.11ppmにおけるマルチプレットについてもう一つのNOEが見られた。
2S,5S-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-t-ヒドロキシ-1-ブチル）テトラヒドロフラン（化合物306,図4）の調製
氷浴中で冷却された304(210mg、0.54mmol)のTHF(1.4ml)中溶液に、攪拌下、テトラブチルアンモニウムフルオライド(420.3mg、1.61mmol)を添加した。氷浴を除去し、反応液を室温で1時間攪拌した。溶媒を除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、1：1ヘキサン／酢酸エチル）により分離した(124mg、83.2%).¹H NMR(CDCl₃):1.88(m,1H);2.02(m,1H);2.25(m,2H);2.50(m,2H);3.72(t,2H);3.93(d,2H);4.48(m,1H);4.76(m,1H);6.84(m,2H);6.96(t,2H).
2S,5S-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N,O-ビスフェノキシカルボニルヒドロキシルアミノ-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物307,図４）の調製
冷却（氷浴）された化合物306(124.0mg、0.45mmol)、トリフェニルホスフィン(128.9mg、0.49mmol)およびN,O-ビスフェノキシカルボニル ヒドロキシルアミン（147.3mg、0.54mmol）のTHF(5ml)中溶液に、ジイソプロポキシル-アゾジカルボキシレート(94.1μl、0.48mmol)を添加した。氷浴を除去し、反応液を室温まで温め、室温で30分間攪拌した。溶媒を除去し、生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ，4：1ヘキサン／酢酸エチル）により精製した(195mg、82.0％)。¹H NMR(CDCl₃):1.85(m,1H);2.03(m,1H);2.22(m,2H);2.75(m,2H);3.92(d,2H);4.05(m,2H);4.47(m,1H);4.76(m,1H);6.84(m,2H);6.95(m,2H);7.26(m,5H);7.41(m,5H).
2S,５Ｓ-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N-ヒドロキシウレイジル-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物401,図４）の調製
頭部スクリュー付き容器に、-78℃でNH₃を仕込んだ（約１〜２ml）。メタノール20ml中に予め溶解しておいた化合物307（195.0mg,0.37mmol）を、この冷たい液体窒素に添加した。容器を密封し、ドライアイス浴で除去した。反応混合物を室温で16時間攪拌した。反応混合物を再度ドライアイス浴で冷却し、圧力を抜いた。容器を開け、溶媒を除去した。生成物を溶媒として酢酸エチルを用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーにより単離して固形物(108mg、91.7％)を得た。¹H NMR(CDCl₃):1.84(m,1H);2.01(m,1H);2.22(m,2H);2.55(t,2H);3.75(t,2H);3.94(m,2H);4.48(m,1H);4.74(t,1H);5.25(bs,2H);6.86(m,2H);6.98(m,2H).
2S,5S-トランス-2-（4-フルオロフェノキシメチル）-5-（4-N-ヒドロキシウレイジル-1-ブチニル）テトラヒドロフラン（化合物402）の調製
化合物１(75mg、0.23mmol)を酢酸エチル2mlに溶解し、次にPd/C(10％)(15mg)を添加し、バルーン圧で16時間水素化した。反応液を濾過し、濾液を濃縮した。生成物を溶媒として酢酸エチルを用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーにより単離した(70mg、92.2％)。¹H NMR(CDCl₃):1.50〜1.70(m,8H);2.10(m,2H);3.58(m,2H);3.91(m,2H);4.08(m,1H);4.40(m,1H);5.15(bs,2H);6.87(m,2H);6.97(t,2H);7.40(bs,1H).
II．薬剤組成物
炎症性疾患、特にPAFまたは5-リポキシゲナーゼ生成物により媒介される病気を患っているヒト、ウマ、イヌ、ウシおよび他の動物、特に哺乳動物を、酸素ラジカルの形成を低下させる薬学的に許容できるキャリヤーまたは希釈剤中に含まれる前記化合物、薬学的に許容できる誘導体またはその塩の一種またはそれ以上の有効量をそれら患者に投与することにより治療することができる。活性材料は、液体、クリーム、ゲルまたは固体状あるいはエアロゾル状で、任意の適当な経路により、例えば、経口、非経口、静脈内、皮内、皮下または局所的に投与することができる。
ここで用いられるように、「薬学的に許容できる塩または錯体」という用語は、前記化合物の所望の生物学的活性を保持し最少の望ましくない毒物学的効果を示す塩または錯体を意味する。そのような塩の非限定的例は、(a)無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸および硝酸等）とで形成される酸付加塩、および、酢酸、蓚酸、酒石酸、琥珀酸、林檎酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモイン酸、アルギニン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸およびポリガラクトゥロン酸(polygalacturonic acid)のような有機酸とで形成される塩；(b)亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウム、ナトリウムおよびカリウム等のような金属カチオン、またはアンモニア、Ｎ，Ｎ-ジベンジルエチレンジアミン、D-グルコサミン、テトラエチルアンモニウムまたはエチレンジアミンから形成されるカチオンとで形成される塩基付加塩；または(c)(a)と(b)との組み合わせ、例えばタンニン酸亜鉛塩等、を含む。化合物は、また、当業者に知られている薬学的に許容できる4級塩、特に、式-NR₃ ⁺で（式中、Ｒはアルキルまたはベンジル、およびＺはクロライド、ブロミド、ヨージド、-O-アルキル、トルエンスルホネート、メチルスルホネート、スルホネート、ホスフェートまたはカルボキシレート（例えば、ベンゾエート、スクシネート、アセテート、グリコレート、マレエート、マレート、シトレート、タルタレート、アスコルベート、ベンゾエート、シンナモエート、マンデロエート、ベンジロエートおよびジフェニルアセテート）を含む対イオンを表す。）で示されるものを含む４級アンモニウム塩として投与することもできる。
活性化合物は、治療される患者において重度の毒性効果を引き起こすことなく治療的に有効な量で患者に分与されるのに充分な量で薬学的に許容できるキャリヤーまたは希釈剤中に含まれる。前記症状の全てに対する活性化合物の好ましい投与量は１日当たり約10ng/kg〜300mg/kg、好ましくは0.1〜100mg/kg、より一般的には１日当たり患者の体重１kgに対して0.5〜約25mgである。心臓血管適応症に対する好ましい投与量は10ng/kg〜20mg/kgである。典型的局所投与量は適当なキャリヤー中において0.01〜３重量％/重量である。薬学的に許容できる誘導体の有効な投与量範囲は、投与すべき親化合物の重量を基準に計算することができる。誘導体がそのものが活性を示す場合、有効投与量は誘導体の重量を用いて前述のように見積もる、または当業者に知られている他の手段を用いて見積もることができる。
化合物は、限定されないが、単位投与形態当たり１〜3000mg、好ましくは５〜500mgの活性成分を含むものを含む任意の適当な単位投与形態で都合良く投与される。経口投与量は25〜250mgであることが通常都合が良い。
好ましくは、活性成分は約0.00001〜30mM、好ましくは約0.1〜30μMの活性化合物のピーク血漿濃度を達成するように投与される。これは、例えば、要すれば塩水または水性媒体中に含まれる活性成分の溶液または組成物の静脈内注入により、あるいは活性成分のボーラスとしての投与により達成され得る。
薬剤組成物中の活性化合物の濃度は、薬剤の吸収、分布、不活性化および分泌速度、ならびに当業者に知られている他の因子に依存する。緩和すべき症状の重さによっても投与量が変化することに注目すべきである。さらに、いかなる特別の物質についても、組成物の投与を管理または監督する人の専門的判断および個人の必要に従って特定の投与量を時間に対して調整すべきであること、およびここに開示の濃度範囲は単なる例であり特許請求の範囲の組成物の範囲または実施の制限を意図するものではないことを理解すべきである。活性成分は一度に投与する、または変化する時間間隔で投与すべき多くの少ない投与量に分割することができる。
経口組成物は、通常、不活性希釈剤または可食キャリヤーに含まれる。それらはゲラチンカプセルに封入するまたは圧縮して錠剤にすることができる。経口治療投与の目的のために、活性化合物は賦形剤に組み込み、錠剤、トローチまたはカプセル状で用いることができる。薬学的に相溶性のある結合剤および／またはアジュバント材料を組成物の一部として含むことができる。
錠剤、丸剤、カプセルおよびトローチ等は任意の以下の性質が類似している成分または化合物を含むことができる：微結晶性セルロース、ガムトラガカントまたはゼラチンのような結合剤；澱粉またはラクトースのような賦形剤、アルギン酸、Primogelまたはコーンスターチのような分散剤；ステアリン酸マグネシウムまたはSterotesのような潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素のような滑剤；スクロースまたはサッカリンのような甘味料；または、ペッパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ風味剤のような風味剤。投与単位形態がカプセルの場合、前述の種類の材料に加えて、脂肪油のような液体キャリヤーを含むことができる。さらに、投与単位形態は、投与単位の物理的形態を改良する種々の他の材料、例えば糖の被膜、シェラックまたは溶腸性剤を含むことができる。
活性化合物または薬学的に許容できる塩あるいはその誘導体は、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハまたはチューインガム等の成分として投与することができる。シロップは、活性成分に加えて、甘味料としてのスクロース、および特定の防腐剤、染料および着色剤ならびに風味料を含み得る。
活性化合物または薬学的に許容できる塩あるいはその誘導体は、所望の作用を損なわない他の活性材料、または抗生物質、抗真菌剤、他の抗炎症剤または抗ウイルス性化合物のような所望の作用を補足する材料と混合して用いることもできる。
非経口、皮内、皮下または局所適用のために用いられる溶液または懸濁液は以下の成分を含むことができる：注入用水、塩水溶液、固定油(fixed oil)、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒のような滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンのような殺菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムのような酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸のようなキレート化剤；アセテート、シトレートまたはホスフェートのような緩衝剤および塩化ナトリウムまたはデキストロースのような張度を調整するための薬剤。非経口製剤は、アンプル、使い捨て注射器またはガラスまたはプラスチック製の複投与量バイアル中に封入し得る。
静脈内に投与した場合、好ましいキャリヤーは整理食塩水またはホスフェート緩衝塩水(PBS)である。
一つの様態において、活性化合物は、移植およびマイクロカプセル化投与系を含む放出制御製剤のような体からの迅速な排出に対して化合物を保護するキャリヤーを用いて調製される。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸のような生分解性で生物適合性のポリマーを用いることができる。そのような製剤を調製する方法は当業者に明らかである。それら材料は、Alza社（カリフォルニア州）およびScios Nova社（ボルチモア、メリーランド州）から市販品として得ることもできる。
リポソームの懸濁液も薬学的に許容することのできるキャリヤーであり得る。これらは、例えば米国特許第4,522,811号明細書（その全てをここで参照として組み込む）の開示されているような当業者に知られている方法によって調製することができる。例えば、リポソーム製剤は、適当な脂質（例えばステアロイルホスファチジルエタノールアミン、ステアロイルホスファチジルコリン、アラカドイルホスファチジルコリンおよびコレステロール）を無機溶媒に溶解し、次にその無機溶媒を蒸発させて容器の表面に乾燥脂質の薄いフィルムを残すことにより調製することができる。活性化合物またはそのモノホスフェート、ジホスフェートおよび／またはトリホスフェート誘導体を、次に、容器内に導入する。次に容器を手で旋回させて容器の側部から脂質材料を外し、脂質凝集物を分散させ、それによりリポソームの懸濁液を形成する。
III．生物学的活性
化合物がPAFレセプターに結合する性能を含む化合物がPAFレセプター拮抗薬として作用する性能および化合物の種々のPAF媒介経路への効果を評価するために広く種々の生物学的アッセイが用いられてきた。これら既知のアッセイのいかなるものも、ここに開示の化合物がPAFレセプター拮抗薬として作用する性能を評価するために用いることができる。
例えば、PAFは血液濃縮および微小循環の増加した透過性を誘発し、血漿体積の低下を導くことが知られている。PAF媒介急性循環虚脱を、マウスのような動物モデルにおけるPAF誘発の減少血漿体積への化合物の効果を分析することによりその化合物がPAF拮抗薬として作用する性能を評価するためのアッセイの基礎として用いることができる。
熱、低血圧、白血球増加、およびグルコースおよび脂質代謝の妨害を含む種々の生理学的反応を刺激するエイコサノイド、PAFおよび潰瘍壊死因子(TNF)を含む化学メディエイタの放出を、内毒素血症が引き起こす。内毒素血症は激しいショックおよび死に至り得る。エンドトキシン誘発のマウス死亡率は、エンドトキシン性ショックへの化合物の薬理学的効果を評価するための有用な動物モデルである。
化合物がPAFレセプター拮抗薬として作用する性能を評価するために用いられる二つの他の共通のアッセイは、生体外における血小板凝集およびラットにおける低血圧であるShenらの「The Chemical and Biological Properties of PAF Agonists,Antagonists,and Biosynthetic Inhibitors」、Platelet-Activating Factor and Related Lipid Mediators、F.Snyder、Plenum Press編集ニューヨーク州153（1987年）。
また、化合物が酵素5-リポキシゲナーゼを抑制する性能を評価するために広く種々の生物学的アッセイが用いられてきた。例えば、リューコトリエン生合成についての研究において、ラット好塩基球性白血病細胞(RBL)のサイトゾル5-リポキシゲナーゼが広く利用されてきた。5-リポキシゲナーゼを抑制する化合物はリューコトリエンの水準を低下させる。
化合物が酵素5-リポキシゲナーゼを抑制する性能を評価するために用いられるもう一つの生物学的アッセイは、イオノファ刺激ヒト全血からのLTB₄を抑制することにより誘発される炎症の古典的薬理学的モデルに基づく。
実施例５
化合物がPAFレセプターに結合する性能
(a)ヒト血小板薄膜の調製
アメリカ赤十字血液サービス(Dedham、マサチューセッツ州)から得られる血小板濃縮物からヒト血小板薄膜を調製する。血小板洗浄溶液(150mM NaCl、10mM Tris、および２mM EDTA、pH7.5)により数回洗浄した後、血小板ペレットを、５mM MgCl₂、10mM Tris、および２mM EDTA中にpH7.0で再懸濁させる。次に細胞を液体窒素で迅速に凍結させ、室温でゆっくり解凍する。凍結および解凍手順を少なくとも３回繰り返す。薄膜フラグメントをさらに分離するために、溶解薄膜懸濁液を、10mM MgCl₂、10mM Tris、および２mM EDTA(pH7.0)中で調製された0.25、1.03および1.5Mスクロースの不連続スクロース濃度傾斜物の上部で層分離し、63,500×gで２時間遠心分離する。0.25〜1.03Mの薄膜フラクション（薄膜Ａ）および1.03〜1.5Mの薄膜フラクション（薄膜Ｂ）を別々に収集した。薄膜製剤のタンパク濃度は、標準としてウシ血清アルブミン(BSA)を用いてローリー法(Lowry's method)により決める。次に薄膜を小さいフラクション（各４ml）に分離し、-80℃で貯蔵し、使用前に解凍する。
(b)[³H]PAF結合抑制
[³H]PAFがヒト血小板薄膜上の特定のレセプターに結合する性能を、10mM MgCl₂の存在下にpH7.0の最適条件で評価する。10mM MgCl₂、10mM Tris、および0.25％のBAS(pH7.0)中に[³H]PAF0.15pmol(0.3nM濃度)および既知の量の非標識化PAFまたはPAFレセプター拮抗薬を含む最終的に0.5mlの溶液に、薄膜タンパク(100μg)を添加する。０℃で４時間培養した後、結合および非結合[³H]PAFを、減圧下にワットマン(Whatman)GF/Cガラス繊維を通して分離する。このアッセイ条件下において、フィルター結合[³H]PAFの劣化は検出されないはずである。非特異的結合は、高濃度の非標識化PAF、PAF類似体またはPAFレセプター拮抗薬のいずれかによる置き換えが見られない過剰の非標識化PAF(1mM)の存在下における合計結合と定められる。特異的結合は、合計結合と非特異的結合との間の相違と定められる。
試験化合物の相対的効力を決めるために、抑制剤の不存在下における合計結合を０％抑制とし、１mM非標識化PAFの存在下における合計結合を100％とすることにより、抑制剤の存在下における[³H]PAF結合を抑制％として標準化する。化合物により抑制％は、以下の式により計算することができる。
抑制％＝［（合計結合−化合物の存在下における合計結合）／非特異的結合］×100％
IC₅₀は、特異的[³H]PAF結合の50％抑制を得るのに必要な抑制剤の濃度として計算され、非線形回帰コンピューターソフトウェアプログラム、GraphPadInplot、バージョン3.0（グラフパッドソフトウェア製、サンディエゴ、カリフォルニア州）により計算される。
実施例６
PAF誘発血液濃縮への化合物の効果
(a)動物
チャールスリバーラボラトリー（ウィルミントン，マサチューセッツ州）から、16〜20gと秤量された雌CD-1マウスを得る。水道水および齧歯目実験室用チャウ（5001、プリナミルズ、セントルイス、ミズーリ州）を任意に提供する。マウスを使用前に平均４日間飼育室に入れておく。
(b)ヘマトクリット測定
PAF（1-O-アルキル-2-アセチル-sn-グリセリル-3-ホスホリルコリン、Sigma Chemical社製）を、0.9％NaCl溶液中の0.25％ウシ血清アルブミン(BAS)中に溶解する。投与量-反応研究を除いては、PAF溶液10μｇ(10ml/kg)を尾の静脈に注射する。全ての試験化合物を、0.5DMSO塩水溶液に溶解し、PAF試行の15分前に３mg/kg体重の量で静脈内注射する。PAF投与の15分後にヘパリンを加えたマイクロヘマトクリット管(O.D.1.50mm)に尾端部を切断して入れることにより30〜50μｌの血液を採取する。全ての試験化合物は、マウスにおいてPAF（10μg/kg,静脈内）またはAA（0.5mg/耳）の15分前に３mg/kgの量で静脈内に与えられる。
実施例７
ラットの好塩基球白血病細胞のサイトゾル5-リポキシゲナーゼへの化合物の効果
(a)酵素調製
洗浄ラットRBL細胞(4×108)を、10％エチレングリコール/1mM EDTA（緩衝液Ａ）を含むpH7.4の50Mリン酸カリウム緩衝液20ml中に懸濁させた。細胞懸濁物を20KHzで30秒間音波破砕し、音波破砕物を10,000×ｇで10分間遠心分離し、続いて更に105,000×ｇで１時間遠心分離した。5-リポキシゲナーゼを含む上澄み溶液（サイトゾルフラクション）を-70℃で貯蔵した。標準としてウシ血清アルブミンを用いてブラッドフォードの手順（ブラッドフォード染色試薬(Bradford Dye Reagent)）に従ってタンパク濃度を決定した。
(b)酵素アッセイ
5-リポキシゲナーゼの通常のアッセイにおいて、混合物は、pH7.4のリン酸カリウム緩衝液50mM、２mM CaCl₂、２mM ATP、25Mララキドン酸(0.1Ci)および酵素（タンパク50〜100mg）を200リッターの最終体積中に含んでいた。反応を24℃で３分間行った。混合物を、エチルエーテル：メタノール：0.2Mクエン酸(=30:4:1)の氷冷混合物0.2mlで抽出した。抽出物を、石油エーテル：エチルエーテル：酢酸(=15:85:0.1)の溶媒系中において-10℃で薄層クロマトグラフィーに付した。真正アラキドン酸およびその代謝物に相当するシリカゲル領域を削り取り計数のためにシンチレーションバイアル内に入れた。酵素活性は、３分間で酸化されたアラキドン酸の量として表した。このアッセイにおいて、前述した代表的化合物９、11、14および15は活性を示した。
実施例８
RBL-1細胞抽出物中における可溶性5-リポキシゲナーゼの抑制
RBL-1細胞を、ATCCからの仕様により回転フラスコ中において成長させた(2×10⁶/ml)。細胞を採取し、カルシウム非含有およびマグネシウム非含有PBS中で２回洗った。細胞を、50mM K₂HPO₄ pH7.4,10％PEG-8000、１mM EDTA、１mM PMSF中に２×10⁷/mlの濃度で懸濁させ、次に音波破砕する。溶解物を、100,000×gで４℃において１時間遠心分離し、上澄み液（サイトゾル）を除去し、-70℃で貯蔵する。
RBL-１サイトゾル中における5-L0活性を、以下のように決める：５mM CaCl₂、２mM ATP、50mM K₂HPO₄ pH7.4、変化する濃度の試験化合物（DMSOに溶解した化合物10mlから）、および50％の[¹⁴C]アラキドン酸基剤を酸素化生成物（各サイト製剤について実験的に決められる）に転化する濃度のRBL-1サイトゾルからなる反応液0.2mlを、室温で10分間培養する。エタノール貯蔵部からの[¹⁴C]アラキドン酸５mlを添加することにより反応を開始（最終濃度＝9.5mM）し、３分間進行させる。反応を、冷たいエチルエーテル：メタノール：0.2Mクエン酸(=30:4:1)を添加することにより終了させ、10,000×ｇで１分間遠心分離させる。有機層50mlを取り出してガラスキャピラリーピペットに入れ、シリカゲル60A TLCプレート（ワットマン製＃LK6D）上に滴下する。プレートを、石油エーテル：エチルエーテル：酢酸(=15;85;0.1)中、室温で30分間現像する。プレートをコダックXAR-5フィルムに24時間晒す。フィルムを現像し、濃度計を用いてスキャンニングし、アラキドン酸およびその生成物のピーク領域を計算する。抑制％は、対照サンプル（試験化合物でない）に対する、試験化合物を含むサンプル中における酸素化生成物に転化した[¹⁴C]アラキドン酸の量から決める。
表５は、ラセミ化合物202、およびそのエナンチオマー、化合物216、217、234および236によるRBL-1細胞抽出物中における可溶性5-リポキシゲナーゼの抑制のデータを提供する。
実施例９
イオノファ刺激ヒト全血中におけるリューコトリエンB₄製造の抑制
ヒト血液を取り出しヘパリンを加えた血液収集管中に入れ、その１mlを1.5ml微細(microfuge)管に入れる。DMSOに溶解した濃度の異なる試験化合物５mlを、血液サンプルに添加し、37℃で30分間培養する。DMSO中のカルシウムイオノファ(５ml)(A23187)を最終濃度50mMになるように添加し、サンプルを37℃で15分間培養する。次に、サンプルを1100×g（2500rpm、H1000Bローター、Sorvall遠心分離機）で４℃において10分間遠心分離する。上澄み100mlを1.5ml微細管に移し、冷たいエタノール400mlを加え、タンパクを氷上で30分間沈殿させる。サンプルを110×gで４℃において10分間遠心分離し、上澄みを、市販のEIAキット（Cayman Chemical社製）を用いて製造者に指示に従ってLTB₄について検定する。
表５は、ラセミ化合物202、およびそのエナンチオマー、化合物216、217、234および236によるイオノファ刺激ヒト全血中におけるリューコトリエンB₄製造の抑制についてのデータを示す。
実施例９
早死(ex-vivo)マウスおよびラット全血5-リポキシゲナーゼ評価
チャールスリバーラボラトリーから、18〜25gと秤量されたCD-1雌マウスおよび150〜230gと秤量されたCD雌ラットを得た。化合物を、マウスに投与(0.5mg/ml)するために0.9％NaCl中0.5％DMSO中に溶解し、ラットに用いる(5mg/ml)ためにアルコール媒体（ベンジルアルコール２％、エタノール１％、PEG300の40％、プロピレングリコール10％、DiH₂O中５％デキストロース＋3.5％pluronic F-68の47％）中に溶解した。断頭により殺す15分前に動物に化合物(5mg/ml)または対応するビヒクル（塩水中0.5％DMSO、マウスについて10ml/kg；アルコールビヒクル，ラットについて1.ml/kg）を注射した。ヘパリンを添加した全血(0.3ml)を、２mMカルシウムイオノファA23187(A23187の最終濃度は20mM)の３mlを含む1.5ml Eppendorf遠心分離管中に添加した。サンプルを、37℃の水浴中30分間培養し、次に２分間遠心分離した。血漿を希釈(×120)し、EIAを用いてLTB₄について検定した。
表５は、ラセミ化合物202、およびそのエナンチオマー、化合物216、217、234および236の投与についての早死マウスおよびラット全血5-リポキシゲナーゼ値のデータを提供する。
実施例10
グルクロニド化速度
グルクロニド化速度は、ここに開示の化合物の生体内代謝安定性の基準である。
ヒトミクロソームタンパク２mg/ml、５mM塩化マグネシウム、100mM Tris HCl(pH=7.4)、0.1〜1.0mM基剤および３mM UDP-グルクロン酸を含む反応混合物を用いて生体外グルクロニド化反応を実施した。37℃で０（対照）、15、30、45、60、90、120、180、240分培養した後、40μlの反応混合物を80μlのアセトニトリルと混合し、遠心分離して沈殿タンパクを除去した。逆相HPLCにより上澄みのアリコートを分析して親化合物の消滅および代謝物の形成を決めた。
表５は、ラセミ化合物202、およびそのエナンチオマー、化合物216、217、234および236のグルクロニド化速度のデータを提供し、図２はそれを示す。
図３は、示されたエナンチオマーのグルクロニド化速度を示す。
実施例11
ラット好塩基球白血病細胞のサイトゾル5-リポキシゲナーゼへの化合物の効果
RBL-2H3細胞を、Carterらの(J Pharm Exp Ther 256(3);929〜937頁、1991年)による組織培養フラスコ内で成長させた。細胞を採取し、カルシウムおよびマグネシウム非含有D-PBS中で５回洗った。細胞を、10mM BES,10mM PIPES pH6.8、１mM EDTA中に２×10⁷/mlの濃度で懸濁させ、次に音波破砕する。音波破砕物を、20,000×gで４℃において20分間遠心分離した。次に、上澄み液（サイトゾル）を除去し、-70℃で貯蔵する。
RBL-2H3製剤中における5-L0活性を、以下のように決める：0.7mM CaCl₂、100mM NaCl、１mM EDTA、10mM BES、10MM PIPES pH7.4、変化する濃度のDMSOに溶解した試験化合物（アッセイにおいて最終的に7.5％DMSO）、および15％のアラキドン酸基剤混合物を酸素化生成物（各RBL-2H3製剤について実験的に決められる）に転化する量のRBL-2H3製剤からなる反応液0.1mlを、室温で20分間培養する。アラキドン酸基剤混合物５μl（検定毎に0.028％NH₄OH中[¹⁴C]アラキドン酸0.944nmolおよびアラキドン酸6.06nmol）を添加することにより反応を開始し、37℃で５分間進行させる。反応を、(ｉ)エチルエーテル中トリフェニルホスフィン1.66mg/ml；(ii)メタノール；および(iii)0.2Mクエン酸の混合物(=30:4:1)0.12mlを添加することにより終了させ、1000×gで１分間遠心分離させる。有機層50μlを取り出してガラスキャピラリーピペットに入れ、シリカゲル60A TLCプレート（ワットマン製#6KDF）上に滴下する。プレートを、エチルエーテル：酢酸(=100:0.1)中、室温で25分間現像する。プレートをコダックX-OMAT ARフィルムに40時間晒す。フィルムを現像し、濃度計を用いてスキャンニングし、アラキドン酸およびその生成物のピーク領域を計算する。抑制％は、対照サンプル（試験化合物でない）に対する、試験化合物を含むサンプル中における酸素化生成物に転化した[¹⁴C]アラキドン酸の量から決める。
結果を表４に示す。
実施例12
イオノファ刺激ヒト全血中におけるリューコトリエンB₄製造の抑制
ヒト血液を取り出しヘパリンを加えた血液収集管内に入れ、その１mlを1.5ml微細管に入れる。DMSOに溶解した濃度の異なる試験化合物(5ml)を、血液サンプルに添加し、37℃で15分間培養する。DMSO中のカルシウムイオノファ(5ml、A23187)を最終濃度50mMになるように添加し、サンプルを37℃で30分間培養する。次に、サンプルを1100×g(2500rpm、H1000Bローター、Sorvall遠心分離機)で40℃において10分間遠心分離する。上澄み(100ml)を1.5ml微細管に移し、冷たいエタノール400mlを加え、タンパクを氷上で30分間沈殿させる。サンプルを110×gで４℃において10分間遠心分離し、上澄みを、市販のEIAキット（Cayman Chemical社製）を用いて製造者の仕様書に指示に従ってLTB₄について検定する。
結果を表５に示す。

実施例４
早死マウス全血5-リポキシゲナーゼ評価
チャールスリバーラボラトリーから、18〜25gと秤量されたCD-1雌マウスおよび150〜230gと秤量されたCD雌ラットを得た。化合物を、マウスに投与(0.5mg/ml)するために0.9％NaCl中0.5％DMSO中に溶解し、ラットに用いる(5mg/ml)ためにアルコール媒体（ベンジルアルコール２％、エタノール１％、PEG300の４０％、プロピレングリコール10％、DiH₂O中５％デキストロース+3.5％プルロニックF-68の47％）中に溶解した。断頭により殺す15分前に動物に化合物(5mg/ml)または対応するビヒクル（塩水中0.5％DMSO、マウスについて10ml/kg；アルコールビヒクル，ラットについて１ml/kg）を注射した。ヘパリンを添加した全血(0.3ml)を、２mMカルシウムイオノファA23187（A23187の最終濃度は20mM）の３mlを含む1.5mlエッペンドルフ遠心分離管中に添加した。サンプルを、37℃の水浴中30分間培養し、次に２分間遠心分離した。血漿を希釈(×120)し、EIAを用いてLTB₄について検定した。
結果を表５に示す。
実施例５
グルクロニド化研究
グルクロニド化速度は、ここに開示の化合物の生体内代謝安定性の基準である。
ヒトミクロソームタンパク２mg/ml、５mM塩化マグネシウム、100mM Tris HCl(pH=7.4)、0.1〜1.0mM基剤および３mM UDP-グルクロン酸を含む反応混合物を用いて生体外グルクロニド化反応を実施した。37℃で０（対照）、15、30、45、60、90、120、180、240分培養した後、40μlの反応混合物を80μlのアセトニトリルと混合し、遠心分離して沈殿タンパクを除去した。逆相HPLCにより上澄みのアリコートを分析して親化合物の消滅および代謝物の形成を決めた。
結果を表５に示す。
実施例６
好酸球浸潤アッセイ
肺における炎症性細胞の蓄積は、喘息の病源姓特徴の一つである。患者にアレルゲンが吸引された後、血液および肺洗浄液中における白血球の増加、特に好酸球の増加が観察された。好酸球はアレルギー性炎症において、粒状タンパクの細胞毒特性および炎症性メディエイタを放出する効果を有する重要な効果器細胞のようである。アレルゲン誘発好酸球の肺への流入の防止は、新規抗喘息薬剤のための説得力のある目標であると考えられる。
リューコトリエンはアラキドン酸5-リポキシゲナーゼ(5-LO)経路の生成物である。リポキシゲナーゼ代謝物(LTB₄、5-オキソ-15-ヒドロキシ-エイコサテトラエン酸)は、補充好酸球への効力のある活性を有すると確認された。急性の気管支収縮を遮断することができ、アレルゲンの作用を結果として起こる肺細胞への好酸球のその後の蓄積を減少させることができる5-LO抑制剤は、喘息の予防および治療のために有益であり得る。
肺への好酸球の浸潤は、アレルゲン誘発モルモットまたはマウスからの気管支肺胞洗浄液(BALF)中の細胞の数を数えることにより測定することができる。
モルモットモデル：体重400〜500gの雌のHartleyモルモットを、0.9％NaCl0.5ml中のOVA20μgおよびAl(OH)₃ 100mgを１日目および２日目に腹腔内注射することにより卵白アルブミン(OVA)に対して感作した。動物を0.5％OVA（0.9％NaCl中）エアロゾルで15日目および16日目に処理した。化合物を10％PEG200または0.5％カルボキシメチルセルロース中で調製し、３回経口投与した（各処理の１時間前および２回の処理の間）。ヒスタミン放出誘発死を防止するために、各処理の15分前にピリラミン（３mg/kg、腹腔内）を与えた。最初の処理に続いて24時間後（または最後の処理の４時間後）に、麻酔をかけて動物の頚動脈から採血した。DPBS(w/o Ca²⁺、Mg²⁺)中0.5mM EDTA2×10mlを用いて、37℃において気管カニューレ挿入によりBALを実施した。BAL液体中の合計細胞数を、Sysmex微小細胞計数器(F-800)により測定し、サイトスピン製剤において差異のある細胞を数えた。全細胞または好酸球蓄積についての抑制％＝［（ビヒクル−偽物(sham)）−（処理物−偽物）］／（ビヒクル−偽物）×100。
マウスモデル：体重21〜23gの雄のC57 BL/6の雄マウスを、0.9％NaCl 0.2ml中のOVA 10μgおよびAl(OH)₃１mgを１日目に投与することによりOVAに対して感作した。エアロゾル化した１％OVAまたは塩水を14日目〜21日目に毎日30分間吸引した後に過敏症が発現した。化合物を10％PEG200または0.5％カルボキシメチルセルロース中で調製し、18日目〜22日目に１日２回、20mg/kgの量で経口投与した。最後のOVAの吸引の４時間後に、麻酔をかけて動物の頚動脈から採血した。0.5mMナトリウムEDTAを含むDPBS(w/o Ca²⁺、Mg²⁺)２×１mlを用いて、37℃において気管カニューレ挿入によりBALを実施した。BAL液体中の合計細胞数を、シスメックス微小細胞計数器(F-800)により測定した。シスメックス微小細胞計数器(F-800)によりBAＬ液体中の差異のある細胞を数えた。サイトスピン製剤および白色ギームザ染料上において差異のある細胞を数えた。全細胞または好酸球蓄積についての抑制％＝［（ビヒクル−偽物）−（処理物−偽物）］／（ビヒクル−偽物）×100。（YeadonらのAgents Actions、第38巻、８〜17頁、1993年；Brusselle G.G.らのALA'94、A754；Schwenk U.らのJ.Biol.Biochem.第267巻：12482〜12488頁、1992年；およびClinic M.らのCur.Poin.Immunol.第６巻、860〜864頁、1994年）

炎症性または免疫性反応中の酸素ラジカルの形成を低下させる化合物に関する本発明の修正および変化は、前述の本発明の詳細な説明より当業者に明白である。そのような修正および変化は添付の特許請求の範囲内に入るものとされる。Field of Invention
The present invention is in the field of 2,5-disubstituted tetrahydrothiophene, tetrahydrofuran, pyrrolidine and 1,3-disubstituted cyclopentane. These compounds act by inhibiting 5-lipoxygenase, an enzyme that acts as a PAF receptor antagonist, or by acting dually, ie both as a PAF receptor antagonist and a 5-lipoxygenase inhibitor Shows biological activity.
Background of the Invention
Leukotrienes are potent local mediators that play a major role in inflammatory and allergic reactions including arthritis, asthma, psoriasis and thrombosis. Leukotriene is a linear eicosanoid produced by the oxidation of arachidonic acid by lipoxygenase. Arachidonic acid is oxidized by 5-lipoxygenase to the hydroperoxide 5-hydroperoxy-eicosatetraenoic acid (5-HPETE), which is leukotriene B_Four, C_FourOr D_FourLeukotriene A that can be converted to_FourConverted into Leukotriene C, currently a potent bronchoconstrictor_Four, D_FourAnd E_FourAre known to be anaphylactic slow-reactive substances. Research efforts to develop specific receptor antagonists or leukotriene biosynthesis inhibitors have been made to prevent or minimize pathogenic inflammatory responses mediated by these compounds.
European patent applications Nos. 90117171.0 and 901177171.0 disclose indole, benzofuran and benzothiophene lipoxygenase inhibitor compounds.
Recently, trans-2,5-bis- (3,4,5-trimethoxyphenyl) tetrahydrothiophene (L-653, 150), a tetrahydrothiophene derivative of L-652, 731, is an effective PAF antagonist. It was reported to be a mild inhibitor of 5-lipoxygenase. It has been disclosed that certain 2,5-diaryltetrahydrothiophenes are PAF antagonists and leukotriene synthesis inhibitors. Biftu et al., Abstr. Of 6th Int. Conf. On Prostaglandins and Related Compounds, June 3-6, 1986, Florence, Italy; Biftu US Pat. No. 4,757,084); WO 92/15294; WO 94/01430; WO 94/04537; and WO 94/06790.
WO 92/13848 describes certain racemic lipoxygenase-inhibited hydroxamic acids and structures:

(Where R¹Is hydrogen, alkyl, alkenyl, amino or substituted amino, R^FourIs hydrogen, pharmaceutically acceptable cation, aroyl or alcoyl, A is alkylene or alkenylene, X is oxygen or sulfur, each Y is hydrogen, halo, cyano, hydroxy, alkyl, alkoxy, alkylthio, alkenyl, alkoxyalkyl, cycloalkyl , Aryl, aryloxy, arylalkyl, arylalkenyl, arylalkoxy or substituted aryl, Z represents oxygen or sulfur, m represents 0 or 1, n represents 1 to 5 and p represents 2 to 6. )
An N-hydroxyurea derivative having an enzyme that inhibits the enzyme lipoxygenase is disclosed.
Given the very high number of pathogenic immune and inflammatory responses mediated by 5-lipoxygenase, there remains a need to identify new compounds and compositions that inhibit this enzyme.
Platelet activating factor (PAF, 1-O-alkyl-2-acetyl-sn-glycerol-3-phosphorylcholine) is a potent inflammatory phospholipid mediator with a wide variety of biological activities. PAF was first identified as a water-soluble compound released by immunoglobulin E (IgE) -sensitized rabbit basophils. PAFs are mononuclear cells, macrophages, polymorphonuclear leukocytes (PMNs), eosinophils, neutrophils, natural fungicidal lymphocytes, platelets and endothelial cells that have received appropriate immunological and non-immunological stimuli As well as being produced and released by kidney and heart tissue. Hwang, “Specific receptors of platelet-activating factor, receptor heterogeneity, and signal transduction mechanism”, Journal of Lipid Mediators, Vol. 2, 123 ( 1990)). PAF causes very low concentrations of platelet aggregation and devulcanization. PAF efficacy (10^-12~Ten^-9Active in M), tissue level (picomolar) and short plasma half-life (2-4 min)₂Similar to those of other lipid mediators, such as prostaglandins and leukotrienes.
PAF mediates biological responses by binding to specific PAF receptors found in a wide variety of cells and tissues. Structure activity studies on PAF and its analogs show that the ability of PAF to bind to these receptors is structure specific and stereospecific. Shen et al., “The Chemical and Biological Properties of PAF Agonists, Antagonists, and Biosynthetic Inhibitors”, Platelet-Activating Factor and Related Lipid Mediators, edited by F. Synder, Plenum Press, New York, 153 (1987).
PAF mediates intrinsic biological responses but appears to play a role in pathogenic immune and inflammatory responses. Many published studies have been conducted on humans including arthritis, acute inflammation, asthma, endotoxic shock, pain, psoriasis, ophthalmitis, ischemia, gastrointestinal ulceration, myocardial infarction, inflammatory bowel disease and acute respiratory distress syndrome. Provides evidence that PAF is involved in the disease. Animal models have also shown that PAF is generated or increased in certain pathogenic states.
The involvement of PAF in pathogenic inflammatory and immune conditions has stimulated substantial research efforts to identify PAF receptor antagonists. In 1983, a phospholipid analog called CV-3988 (rac-3- (Nn-octadecyl-carbamoyloxy-ω-methoxypropyl-2-thiazolioethyl phosphate) was reported to have PAF receptor antagonist properties. Terashita et al., Life Sciences, Volume 32, 1975 (1983)). In another early study in this area, Shen et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. (USA), 82, 672 (1985)) found that kadsurenone or pepper perch (Piper futokadsura Sieb et Zucc) (Chinese medicinal herb) reported that a neolignan derivative is a competitive specific and potent inhibitor of PAF activity at the receptor level.
Hwang et al., 1985, demonstrated that trans-2,5-bis- (3,4,5-trimethoxyphenyl) tetrahydrofuran (L-652, 731) inhibited the binding of tritium-containing PAF to the PAF receptor site in 1985. (Hwang et al., “Trans-2,5-bis- (3,4,5-trimethoxyphenyl) tetrahydrofuran”, Journal of Bioloical Chemistry, Vol. 260, 15639 (1985)). L-652 and 731 were oral activities and were found to suppress PAF-induced rat skin vascular permeability at a dose of 30 mg / kg body weight. This compound was found to have no effect on the enzyme 5-lipoxygenase. Hwang et al., Trans-L-652, 731 (the aryl group at the 2 and 5 positions are opposite to the plane of the tetrahydrofuran ring) is cis-L-652,731 (the aryl substituent at the 2 and 5 positions is the plane of the tetrahydrofuran ring). It is also reported to be about 1000 times more effective than the same side of
In 1988, Hwang et al. Reported that L-659, 989 (trans-2- (3-methoxy-4-propoxyphenyl-5-methylsulfonyl) -5- (3,4,5-trimethoxyphenyl) tetrahydrofuran) It is an oral active and potent competitive PAF receptor antagonist and reported to have an equilibrium suppression constant 10 times greater than trans-L-652, 731 (Hwang et al., J. Pharmacol. Ther., 246). 534 (1988)).
Biftsu et al., U.S. Pat.Nos. 4,996,203, 5,001,123 and 4,539,332, and European patent applications Nos. It is disclosed.
Blowles et al., Synlett, 1993, p. 111 disclose a limited number of substituted tetrahydrofurans that can have PAF receptor antagonism.
Danyoshi et al., Chem. Pharm. Bull., 1989, p. 1969, discloses 2-substituted-N-alkoxycarbonylpyrrolidines that inhibit PAF-induced rabbit platelet aggregation.
Accordingly, it is an object of the present invention to provide compounds that reduce chemotaxis and respiratory burst that lead to the formation of harmful oxygen radicals during inflammatory or immune reactions. Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for the treatment of pathogenic immune or inflammatory diseases mediated by the product of 5-lipoxygenase.
Another object of the present invention is to provide a method for the treatment of pathogenic immune or inflammatory diseases mediated by the product of 5-lipoxygenase.
Yet another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for the treatment of pathogenic immune or inflammatory diseases mediated by PAF.
Another object of the present invention is to provide a method for the treatment of pathogenic immune or inflammatory diseases mediated by PAF.
Summary of the Invention
A compound of the following formula (I) is provided:

(Where:
Ar is preferably halo (including but not limited to fluoro), lower alkoxy (including methoxy), lower aryloxy (including phenoxy), W, cyano or R^ThreeAn aryl or heteroaryl group optionally substituted by
m is 0 or 1;
q is 0 or 1;
n is 0-6;
W is independently -AN (OM) C (O) N (R^Three) R^Four, -N (OM) C (O) N (R^Three) R^Four, -AN (R^Three) C (O) N (OM) R^Four, -N (R^Three) C (O) N (OM) R^Four, -AN (OM) C (O) R^Four, -N (OM) C (O) R^Four-, AC (O) N (OM) R^Four, -C (O) N (OM) R^Four, -C (O) NHA or -A-B;
A is a lower alkyl, lower alkenyl, lower alkynyl, alkylaryl or arylalkyl group, wherein one or more carbons are optionally O, N or S (valence is complete with hydrogen or oxygen as required) Although optionally substituted, -YA-, -A- or -AW- must not contain two adjacent heteroatoms (ie, -OO-, -SS-, -OS-, etc.) (in one embodiment) , Lower alkyl is-(CH₂)_nC (lower alkyl) H- (where n is 1 to 5), especially-(CH₂)₂C (CH_ThreeBranched alkyl groups such as)-or -C≡C-CH (CH_Three)-Is a lower alkynyl represented by the formula -C≡C-CH (lower alkyl)-. );
B is selected from the group consisting of pyridylimidazole and benzimidazole, both of which are R_ThreeOptionally substituted with pyridylimidazole or benzimidazole, preferably linked to A via a nitrogen atom;
M is hydrogen, a pharmaceutically acceptable cation or a metabolically cleavable leaving group;
X is O, S, S (O), S (O)₂, NR^ThreeOr CHR^Five;
Y is O, S, S (O), S (O)₂, NR^ThreeOr CHR^Five;
Z is O, S, S (O), S (O)₂, NR^Three;
R¹And R²Are independently hydrogen; methyl, cyclopropylmethyl, ethyl, isopropyl, butyl, pentyl, hexyl and C_3-8Lower alkyl, including cycloalkyl (eg, cyclopentyl); halo lower alkyl, eg, trifluoromethyl; halo, eg, fluoro; and —COOH;
R^ThreeAnd R^FourIs independently hydrogen or alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, arylalkyl, alkylaryl, C_1-6Alkoxy-C_1-10Alkyl, C_1-6Alkylthio-C_1-10Alkyl, heteroaryl or heteroarylalkyl;
R^FiveIs hydrogen, lower alkyl, lower alkenyl, lower alkynyl, arylalkyl, alkylaryl, -AN (OM) C (O) N (R^Three) R^Four, -AN (R_Three) C (O) N (OM) R^Four, -AN (OM) C (O) R^Four, AC (O) N (OM) R^Four, -AS (O)_xR^Three, -AS (O)_nCH₂C (O) R^Three, -AS (O)_nCH₂CH (OH) R^ThreeOr -AC (O) NHR_ThreeWhere x represents 0-2. ).
In one embodiment, the Ar group is selected from the group consisting of phenyl, trimethoxyphenyl, dimethoxyphenyl, fluorophenyl (especially 4-fluorophenyl), difluorophenyl, pyridyl, dimethoxypyridyl, quinolinyl, furyl, imidazolyl and thienyl groups. The
In one embodiment, -A-B is

And Ar is an optionally substituted aryl or heteroaryl group, further details are described in Section IA below.
Non-limiting examples of preferred compounds are:

(Where R^TenIs halogen, —CN, hydrogen, lower alkyl, lower alkenyl, lower alkynyl, lower alkoxy or lower aryloxy. )
It is.
These compounds usually reduce chemotaxis and respiratory bursts that lead to the formation of deleterious polymorphonuclear leucosite oxygen radicals during inflammatory or immune reactions. These compounds can either inhibit 5-lipoxygenase, which acts as a PAF receptor antagonist, or by exhibiting dual activity, ie acting as both a PAF receptor antagonist and an inhibitor of 5-lipoxygenase, This biological activity is demonstrated.
Another embodiment of the present invention is any of the compounds described herein comprising an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt or derivative thereof in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. A pharmaceutical composition for a disease.
In a preferred embodiment, the compound or a pharmaceutically acceptable salt or derivative thereof is mediated by 5-lipoxygenase by administering an effective amount of one or more of the compound or a pharmaceutically acceptable carrier, if required. These compounds are used to treat diseases.
Surprisingly, it has been determined that the activity of a compound, such as 5-lipoxygenase activity, oral availability and in vivo stability (eg, glucuronidation rate) can vary significantly between the disclosed compound optical isomers. Thus, in one embodiment of the invention, the compound is administered in a state rich in enantiomers.
Immune and allergic cardiovascular diseases include normal inflammation, cardiovascular diseases including hypertension, skeletal muscle disease, osteoarthritis, ventilation, asthma, pulmonary edema, adult respiratory distress syndrome, pain, platelet aggregation, shock, Rheumatoid arthritis, juvenile rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis, psoriasis, autoimmune uveitis, allergic encephalomyelitis, systemic lupus erythematosus, acute necrotizing hemorrhagic encephalopathy, idiopathic thrombocytopenia, multiple Includes chondritis, chronic active hepatitis, idiopathic sprue, Crohn's disease, Graves' eye disorders, primary biliary cirrhosis, posterior uveitis, interstitial pulmonary fibrosis; allergic asthma; atopic dermatitis and contact dermatitis Inadequate allergic responses to environmental stimuli such as poison ivy, pollen, insect sting and certain foods.
The compounds disclosed herein can also be used as research tools for studying biological pathways involving leukotrienes or PAF as appropriate.
The following are non-limiting examples of compounds defined by formula (I). These examples are illustrative only and are not intended to limit the scope of the invention.
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-methyl-N'-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-butyl-N'-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-butyl-N′-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-methyl-N-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-butyl-N-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-butyl-N-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-methyl-N'-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-butyl-N'-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-Fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-butyl-N'-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrothiophene
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (3,4,5-trimethoxyphenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-methyl-N-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-methyl-N-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrofuran,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N'-butyl-N-hydroxyureidyl) butyl] tetrahydrothiophene,
Trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- [4-N′-butyl-N-hydroxyureidyl) but-1-ynyl] tetrahydrothiophene,
2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- [3- (N'-methyl-N'-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran,
2- (4-fluorophenyl) -5- [3- (N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran,
2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- [3- (N′-n-butyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran,
2- (4-fluorophenyl) -5- [3- (N′-n-butyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran,
2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-butyl-N-hydroxyureidyl)] propoxytetrahydrofuran,
2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-methyl-N-hydroxyureidyl)] propoxytetrahydrofuran,
2- (2,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran,
2- (4-Fluorophenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran, 2- (4-fluorophenyl) -5- [3- (N'-methyl-N'-hydroxyureidyl) propoxy] Tetrahydrothiophene, and
2- (4-Fluorophenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrothiophene.
Further non-limiting examples of other compounds defined by formula (I) are shown in the following Tables 1, 2 and 3 and FIGS. 1a and 1b.

[Brief description of the drawings]
FIGS. 1a and 1b show chemical structures with the indicated stereochemistry of selected active compounds.
FIG. 2 shows the glucuronidation rates of racemic compound 202 and its enantiomers, compounds 216, 217, 234 and 236.
FIG. 3 shows the glucuronidation rates of the enantiomers shown below.

FIG. 4 shows 2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran (compound 401) and 2S, 5R-trans-2- ( 1 shows one process for the synthesis of 4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidylbutyl) tetrahydrofuran (compound 402).
FIG. 5 is a graph of the glucuronidation rate of compounds 401, 403, 404 and 406 (shown in Table 4) measured in% of metabolite over time (hours).
Detailed Description of the Invention
I. Compound description and synthesis
A. Compound
As used herein, the term “enantiomerically enriched” means a compound that is at least about 95%, preferably about 97%, 98%, 99% or 100% of the single enantiomer of the compound.
As used herein, the term alkyl, unless stated otherwise, is a saturated linear, branched or cyclic C₁~ C_TenMeans hydrocarbons, in particular methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, cyclopentyl, isopentyl, neopentyl, hexyl, isohexyl, cyclohexyl, 3-methylpentyl, 2,2-dimethylbutyl and Contains 2,3-dimethylbutyl. The alkyl group is R^ThreeAny suitable group including, but not limited to, halo, hydroxyl, amino, alkylamino, arylamino, alkoxy, aryloxy, nitro, cyano, sulfonic acid, sulfate, phosphonic acid, phosphate or phosphonate, such as Greene et al. “Protective Groups in Organic Synthesis”, John Wiley & Sons, 2nd Edition, 1991, protected or unprotected as necessary as known to those skilled in the art It may be optionally substituted by one or more groups selected from those.
The term “halo” as used herein means chloro, fluoro, iodo or bromo.
The term “halo” as used herein is C unless otherwise stated.₁~ C₆Of saturated linear, branched or cyclic (C_Five-₆) Means hydrocarbon, in particular methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, cyclopentyl, isopentyl, neopentyl, hexyl, isohexyl, cyclohexyl, 3-methylpentyl, 2,2- Includes dimethylbutyl and 2,3-dimethylbutyl, optionally substituted with an alkyl group as described above.
The term “alkenyl” as used herein, unless otherwise indicated, is a C having at least one double bond and optionally substituted as described above.₂~ C_TenLinear, branched or cyclic (C_Five-₆In the case of) means hydrocarbon.
As used herein, the term “lower alkenyl” refers to C, unless stated otherwise.₂~ C₆An alkenyl group, especially including vinyl and allyl.
The term “lower alkylamino” refers to an amino group having one or two lower alkyl substituents.
The term “alkynyl” as used herein, unless otherwise indicated, is a C having at least one triple bond and optionally substituted as described above.₂~ C_TenOr a straight or branched hydrocarbon. As used herein, the term “lower alkynyl” refers to C unless otherwise stated.₂~ C₆Means an alkynyl group, especially acetylenyl, propynyl and -C≡C-CH (CH_Three) -Containing -C≡C-CH (alkyl)-.
The term “aryl” as used herein means phenyl, biphenyl or naphthyl, preferably phenyl, unless otherwise specified. Aryl groups are halo, hydroxyl, amino, alkylamino, arylamino, alkoxy, aryloxy, nitro, cyano, sulfonic acid, sulfate, phosphonic acid, phosphate or phosphonate, such as Greene et al., “Protective Groups in Organic Synthesis”, One selected from the group consisting of protected or unprotected as required as known to those skilled in the art as taught in John Wiley and Sons, 2nd edition, 1991 It may be optionally substituted with any suitable group, including (but not limited to) more groups, preferably halo (including but not limited to fluoro), lower alkoxy (including methoxy), lower aryloxy ( Including phenoxy), W, cyano or R^ThreeCan be substituted.
The term “haloalkyl, haloalkenyl or haloalkynyl” means an alkyl, alkenyl or alkynyl group in which at least one of the hydrogen atoms in the group has been replaced with a halogen atom.
The term “heteroaryl, heterocyclic or heteroaromatic” as used herein is an aromatic group containing at least one sulfur, oxygen or nitrogen in the aromatic ring, wherein the aryl group is optionally substituted as described above. Mean what you get. Non-limiting examples include pyryl, furyl, pyridyl, 1,2,4-thiadiazolyl, pyrimidyl, thienyl, isothiazolyl, imidazolyl, tetrazolyl, pyrazinyl, pyrimidyl, quinolyl, isoquinolyl, benzothienyl, isobenzofuryl, pyrazolyl, indolyl, purinyl, Includes carbazolyl, benzimidazolyl and isoxazolyl.
The term “aralkyl” refers to an aryl group having an alkyl substituent.
The term “alkaryl” refers to an alkyl group having an aryl substituent.
The term “organic or inorganic anion” means an organic or inorganic group that has a negative charge and can be used as the negatively charged portion of a salt.
The term “pharmaceutically acceptable cation” means an organic or inorganic group as a counter cation in a salt, for example, which has a positive charge and can be administered with a drug. Pharmaceutically acceptable cations are known to those skilled in the art and include but are not limited to sodium, potassium and quaternary amines.
The term “metabolically cleavable leaving group” means a group that can be cleaved in vivo from an attached molecule, including but not limited to organic or inorganic anions, pharmaceutically acceptable cations, acyls. (Eg, (alkyl) C (O) containing acetyl, propionyl and butyryl), alkyl, phosphate, sulfate and sulfonate.
The term “PAF receptor antagonist” means a compound that binds to the PAF receptor with a binding constant of 30 μM or less.
The term “5-lipoxygenase inhibitor” means a compound that inhibits an enzyme at 30 μM or less in a disrupted cell line.
The term “pharmaceutically active derivative” means any compound capable of directly or indirectly providing a compound disclosed herein when administered to a patient.
2,5-disubstituted tetrahydroofenes, tetrahydrofuran and pyrrolidine, and the 1,3-disubstituted cyclopentanes disclosed herein exhibit PAF receptor antagonist activity, inhibit the enzyme 5-lipoxygenase, or have dual activity And is useful in the treatment of people with immune allergic or cardiovascular disease mediated by PAF or 5-lipoxygenase products.
B. Stereochemistry
Surprisingly, the activity and properties of active compounds, including 5-lipoxygenase activity, oral availability and in vivo stability, such as (glucuronidation rate), can vary widely between optical isomers of the disclosed compounds. It has been determined. Thus, in a preferred embodiment, the active compound or precursor thereof is administered in an enantiomerically enriched state, ie substantially in the form of a single isomer. Preferred enantiomers are readily determined by evaluating the various possible enantiomers in the selected biological assay, eg, the assay described in detail herein.
2,5-disubstituted tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene and pyrrolidine exhibit many stereochemical structures. Carbon atoms 2 and 5 in the central ring are chiral, ie the central ring exists as at least one diastereomeric pair. Each diastereomer exists as a set of enantiomers. Therefore, chiral C₂And C_FiveBased on an atom alone, the compound is a mixture of four enantiomers.
When a non-hydrogen substituent is present at carbon atoms 3 and 4 in the central ring, C_ThreeAnd C_FourThe atoms are also chiral and can exist as diastereomeric pairs that are also a mixture of the four enantiomers.
The 1,3-cyclopentane disclosed herein also exhibits many stereochemical structures. The central ring carbon atoms 1 and 3 are chiral, ie the central ring exists as at least one diastereomeric pair. Each diastereomer exists as a set of enantiomers. Therefore, chiral C₁And C_ThreeBased on an atom alone, the compound is a mixture of four enantiomers.
When non-hydrogen substituents are present at carbon atoms 4 and 5 in the central ring, C_FourAnd C_FiveThe atoms are also chiral and can exist as diastereomeric pairs that are also a mixture of the four enantiomers.
One of ordinary skill in the art can readily synthesize and separate the enantiomers of the disclosed compounds by using chiral reagents and known procedures, by using the techniques disclosed herein or other known techniques. The biological activity of the isolated enantiomer can be evaluated. By using a chiral NMR shift reagent, polarimeter or chiral HPLC, the optical bias of the compound can be determined.
Classical decomposition methods involve a variety of physical and chemical techniques. In many cases, the simplest and most efficient technique is repeated recrystallization. Recrystallization can be performed at any stage in the preparation of the compound or final enantiomer product. If successful, this simple technique represents the method chosen.
If recrystallization cannot provide an acceptable optical purity material, other methods can be evaluated. When the compound is basic, chiral acids can be used that form diastereomeric derivatives that can have significantly different solubility characteristics. Non-limiting examples of chiral acids include malic acid, mandelic acid, dibenzoyl tartaric acid, 3-bromocamphor-8-sulfonic acid, 10-camphorsulfonic acid and di-p-toluoyl tartaric acid. Similarly, acylation of free hydroxyl groups with chiral acids also forms diastereomeric derivatives that can differ sufficiently that the physical properties can be separated.
Enantiomerically pure or enantiomerically enriched compounds can be obtained by passing the racemic mixture through a chromatography column designed for chiral separation, or by enzymatic degradation of appropriately modified materials.
C. Synthesis of active compounds
The 2,5-disubstituted tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene and pyrrolidine disclosed herein are described in Whittaker et al. Synlet, 1993, 111, Biorg. Med. Lett., 1993, 1499; Achiwa et al., Chem. Pharm. Bull., 1989, p. 1969, and can be prepared by various methods known to those skilled in the art.
For example, one method for synthesizing enantiomer-rich materials is shown in Scheme I below. In this method, the synthesis of enantiomers begins with a chiral reduction of the ketone. After ring closure and reaction of the —OH group, the cis and trans isomers can be separated by standard methods known to those skilled in the art that affect diastereomeric degradation. Additional chiral centers can be resolved using techniques known to those skilled in the art, including those shown in the examples below.

Graham et al. (1,3-Diarycyclopentane: A New Class of Potent PAF Receptor Antagonists, 197th ACS National Meeting, Dallas, Texas, April 9-14, 1989, Division of Medicinal Chemistry, poster. No. 25 (summary)) or other known methods can be used to prepare 1,3-disubstituted cyclopentanes.
The general procedure for preparing hydroxyurea is shown in Scheme 1 below.

Scheme 1 Preparation of hydroxyurea
The general procedure for preparing reverse hydroxyurea is shown in Scheme 2 below.

Scheme 2 Preparation of reverse hydroxyurea
The general procedure for preparing hydroxamic acid is shown in Scheme 3 below.

Scheme 3 Preparation of hydroxamic acid
The general procedure for preparing reverse hydroxamic acid is shown in Scheme 4 below.

Scheme 4 Preparation of reverse hydroxamic acid
Scheme 5 shows 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- [3- (N′-substituted-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (1-4) and 2- (4- 1 shows the synthesis of fluorophenyl) -5- [3- (N′-substituted-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (9-12).

Scheme 6 shows 2- (2,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (13) and 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-hydroxyureidyl The synthesis of propoxy) tetrahydrofuran (14,15) is shown.

Scheme 7 shows the synthesis of 2- (3,4-dimethoxyphenyl) -5- [3-N′-substituted-N′-hydroxyureidylpropoxy] tetrahydrofuran (5-8).

The following examples are merely illustrative and are not intended to limit the scope of the present invention.
Example 1
2- (3,4,5-Trimethoxyphenyl) -5- [3- (N'-substituted-N'-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (1-4) and 2- (4-fluorophenyl)- Preparation of 5- [3- (N'-substituted-N'-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (9-12)
(a): Preparation of 4- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -4-ketone-tert-butyl ether butyrate (Compound 101)
3,4,5 trimethoxybenzaldehyde (8.0 g, 0.77 mmol), t-butyl acrylate (5.29 g, 41.29 mmol) and catalyst 3-ethyl-5- (2-hydroxyethyl) -4-methylthiazolium bromide (3.52 g, 13.95 mmol) was dissolved in 50 mL of dimethylformamide (DMF). To this solution, 5.86 mL of triethylamine was added. The reaction mixture was stirred at 60 ° C. for 16 hours, cooled to room temperature, quenched by adding 10% HCl (pH 1-2) and extracted with dichloromethane. The organic layer is washed with water and saturated NaCl solution, MgSO_Four, Filtered and evaporated under reduced pressure to give an oil. The product was purified by column chromatography (silica, 3: 1 hexane / ethyl acetate) (4.5 g, 34%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.46 (2,9H); 2.70 (t, 2H); 3.24 (t, 2H); 3.92 (s, 9H); 7.25 (s, 2H).
(b): Preparation of 4- (4-fluorophenyl) -4-ketone-t-butyl ether butyrate (Compound 119)
This compound was prepared using a method analogous to that described in Example 1 (a), replacing 3,4,5-trimethoxy-benzaldehyde with 4-fluorobenzaldehyde.¹H NMR (CDCl_Three): 1.45 (s, 9H); 2.70 (t, 2H); 3.23 (t, 2H); 7.12 (m, 2H); 8.02 (m, 2H).
(c): Preparation of 4- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -4-hydroxy-butyric acid t-butyl ether (Compound 102)
Ketone ester 101 (1.09 g, 3.36 mmol) was dissolved in 10 mL of THF and 20 mL of methanol. To this mixture, NaBH_FourOf water (127.3 mg, 3.36 mmol in 5 ml of water) was added dropwise at 0 ° C. The reaction mixture was stirred at room temperature for 4 hours, quenched with water and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated NaCl solution, MgSO_Four, Filtered and evaporated under reduced pressure to give the product (1.13 g, 103%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.46 (s, 9H); 2.02 (m, 2H); 2.37 (t, 2H); 3.84 (s, 3H); 3.88 (s, 6H); 4.70 (m, 1H); 6.58 (s, 2H) .
(d): Preparation of 4- (4-fluorophenyl) -4-hydroxy-butyric acid t-butyl ether (compound 120)
This compound was prepared from 119 using a procedure analogous to that described in Example 1 (c), replacing compound 101 with compound 119.¹H NMR (CDCl_Three): 1.44 (s, 9H); 2.00 (m, 2H); 2.32 (m, 2H); 4.72 (m, 1H); 7.01 (m, 2H); 7.30 (m, 2H).
(e): Preparation of 4- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -δ-lactone (compound 104)
Hydroxy ester 102 (1.13 g, 1.47 mmol) was added to 4 mL of methanol, 1.5 mL of water and 4.5 mL of 5M aqueous sodium hydroxide. The reaction mixture is stirred at room temperature for 30 minutes and then saturated NaHCO._Three12 mL of an aqueous solution was added. The aqueous phase was washed with ether, acidified to pH 1-2 by adding concentrated HCl and extracted with benzene (2 × 30 mL). Examination of the benzene layer by TLC showed that a small amount of lactone was formed. PPTS (10 mg) was added to the benzene extract and the mixture was refluxed for 1 hour to remove water. The reaction mixture was washed with saturated NaHCO 3 solution and evaporated under reduced pressure to give the desired lactone as a solid (700 mg, 80%).¹H NMR (CDCl_Three); 2.20 (m, 1H); 2.68 (m, 3H); 3.85 (s, 3H); 3.88 (s, 6H); 5.46 (m, 1H); 6.55 (s, 2H).
(f): Preparation of 4- (4-fluorophenyl) -δ-lactone (compound 122)
This compound was prepared from 120 using a procedure similar to that described in Example 1 (e), replacing compound 102 with compound 120.¹H NMR (CDCl_Three): 2.20 (m, 1H); 2.68 (m, 3H); 5.50 (m, 1H); 7.10 (t, 2H); 7.32 (m, 2H).
(g): Preparation of 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5-hydroxytetrahydrofuran (Compound 105)
Lactone 104 (6.86 g, 27.22 mmol) was dissolved in 100 mL of dry toluene and the solution was cooled to -70 ° C. 28 mL of a 1.5M solution of DIBALH in toluene was added dropwise to this solution. The reaction mixture was stirred at -70 ° C for 1 hour. The reaction was quenched by adding 11 mL of methanol while maintaining the temperature below -60 ° C. The mixture was warmed to −20 ° C., followed by the addition of 96 ml of saturated aqueous potassium sodium tartrate solution while maintaining the reaction temperature between −10 ° C. and 0 ° C. The reaction mixture was stirred at 0 ° C. for 3 hours and then the two phases were separated. The aqueous layer was extracted with ethyl acetate. The combined organic layers were washed with water and saturated NaCl solution, then concentrated under reduced pressure to give the product (6.51 g, 94%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.82 to 2.48 (m, 4H); 3.84 (s, 3H); 3.88 (s, 6H); 4.97, 5.20 (m, 1H); 5.65, 5.79 (m, 1H); 6.56, 6.70 (s, 2H) ).
(h): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5-hydroxytetrahydrofuran (Compound 123) This compound was replaced with a procedure similar to that described in Example 1 (g), substituting Compound 122 for Compound 104. And prepared from 122.¹H NMR (CDCl_Three): 1.79 (m, 1H); 1.95-2.10 (m, 1H); 2.20-2.32 (m, 1H); 2.48 (m, 1H); 5.00 and 5.22 (m, 1H); 5.63 and 5.78 (m, 1H) ); 7.04 (m, 2H); 7.30 and 7.41 (m, 2H).
(i): Preparation of trans and cis 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-phthalimidylpropyl) tetrahydrofuran (compounds 107 and 108)
Compound 105 (1.14 g, 4.49 mmol) was dissolved in 4 ml of dichloromethane. To this solution was added triethylamine (681.4 mg, 6.73 mmol). The reaction mixture was cooled in an ice bath and trifluoroacetic anhydride (1.41 g, 6.73 mmol) was added dropwise. The reaction mixture was stirred at 0 ° C. for 30 minutes and then 3-phthalimidylpropanol (106) (2.4 g, 13.26 mmol) was added. The reaction mixture was warmed to room temperature and stirred at room temperature for 2 hours. The reaction solution is saturated NaHCO._ThreeQuenched with aqueous solution and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated NaCl solution, MgSO_Four, Filtered and evaporated under reduced pressure to give an oil which was purified by column chromatography (silica, 2: 1 hexane / ethyl acetate) (107: 522 mg (trans); 108: 271 mg (cis) ); 1: 1 mixture of 107 and 108: 110 mg; total yield 46%).¹H NMR (CDCl_Three: 107: 1070 (m, 1H); 1.82 (m, 1H); 2.00 (m, 2H); 2.02 (m, 1H); 2.28 (m, 1H); 3.46 (m, 1H); 3.83 (s, 3H ); 3.84 (m, 3H); 3.88 (s, 6H); 4.99 (t, 1H); 5.30 (dd, 1H); 6.56 (s, 2H); 7.72 (m, 2H); 7.85 (m, 2H) ; 108: 1.95 (m, 3H); 2.00 (m, 2H); 2.20 (m, 1H); 3.51 (m, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.85 (m, 2H); 3.88 (s, 6H ); 3.92 (m, 1H); 4.90 (m, 1H); 5.16 (dd, 1H); 6.60 (s, 2H); 7.72 (m, 2H); 7.84 (m, 2H).
In order to determine the stereochemistry of this molecule, NOE difference experiments were performed.
Trans isomer (107): In this experiment, a triplet at 4.99 ppm was irradiated with a very low specific frequency decoupling pulse and data collected to determine only the presence of an increase in signal. This represents a positive NOE effect and represents a close spatial relationship between these protons. In this experiment, NOE was found for the 2.25-2.39 ppm multiplet, which is a furan ring proton. Another NOE is also seen for aromatic protons, indicating that this triplet represents a benzylic proton. NOE is not observed for double doublets at 5.30 ppm, indicating that this is the trans isomer.
Cis isomer (108): NOE difference experiments were performed to determine the stereochemistry of this molecule. In this experiment, multiplets at 4.88-4.93 ppm were irradiated with very low specific frequency decoupling pulses and data was collected to measure only the presence of signal increase. This represents a positive NOE effect and represents a close spatial relationship between these protons. In this experiment, NOE was found for 5.16 ppm doublet, another methine furan proton. Another NOE is also seen for aromatic protons, indicating that this triplet represents a benzylic proton. NOE was also observed for multiplets at 1.93-2.90 ppm for another furan methylene proton.
(j): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-phthalimidylpropoxy) tetrahydrofuran (compounds 124 and 125)
These compounds were prepared from 123 using a procedure analogous to that described in Example 1 (i), replacing compound 105 with compound 123.¹H NMR (CDCl_Three): 124 (transformer): 1.65 (m, 1H); 1.80 (m, 1H); 2.00 (m, 2H); 2.12 (m, 1H); 2.31 (m, 1H); 3.48 (m, 1H); 3.83 (s, 3H); 5.02 (t, 1H); 5.28 (dd, 1H); 7.00 (t, 2H); 7.29 (m, 2H); 7.71 (m, 2H); 7.82 (m, 2H) .125 ( Cis): 1.90 (m, 2H); 1.99 (m, 4H); 2.19 (m, 1H); 3.48 (m, 1H); 3.82 (s, 2H); 3.88 (m, 1H); 4.94 (m, 1H) ); 5.15 (dd, 1H); 7.00 (t, 2H); 7.30 (m, 2H); 7.71 (m, 2H); 7.84 (m, 2H).
(k): Preparation of 3-phthalimidylpropanol (Compound 106)
3-Bromopropanol (4.0 g, 28.78 mmol), potassium phthalimide (8.0 g, 43.17 mmol) and potassium carbonate (4.0 g, 28.78 mmol) were added to 20 mL of DMF. The reaction mixture was stirred at 70 ° C. for 4 hours, quenched with water and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with water and saturated NaCl solution and evaporated under reduced pressure to give a solid which was crystallized with ethyl acetate (3.5 g, 67%).
(l): Preparation of cis 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-aminopropoxy) tetrahydrofuran (compounds 109 and 110)
Compound 107 (455 mg, 1.03 mmol) and hydrazine monohydrate (165.3 mg, 5.16 mmol) were added to 2 mL of ethanol. The reaction mixture was refluxed for 2 hours, quenched with water and extracted with dichloromethane. The organic layer is washed with water and saturated NaCl solution, MgSO_Four, Filtered, and evaporated under reduced pressure to give trans product 109 (225 mg, 70%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.75 (m, 2H); 1.78 (s, 1H); 1.96 (m, 1H); 2.20 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 2.82 (t, 2H); 3.55 (m, 1H) ; 3.81 (m, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.87 (s, 6H); 5.00 (t, 1H); 5.34 (dd, 1H); 6.56 (S, 2H).
The cis isomer 110 was prepared from 108 using a procedure similar to that described for compound 109.¹H NMR (CDCl3): 1.76 (M, 2H); 2.08 (M, 3H); 2.27 (M, 1H); 2.82 (t, 2H); 3.55 (m, 1H); 3.84 (s, 3H); 3.88 ( s, 6H); 3.92 (m, 1H); 4.95 (m, 1H); 5.20 (m, 1H0; 6.64 (s, 2H).
(m): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-aminopropoxy) tetrahydrofuran (compounds 126, 127)
These compounds were prepared from 124 and 125 using a procedure similar to that described in Example 1 (l), replacing compounds 107 and 108 with compounds 124 and 125.¹H NMR (CDCl_Three): 124 (trans): 1.75 (m, 31H); 1.96 (m, 1H); 2.20 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 2.82 (t, 2H); 3.54 (m, 1H); 3.83 (m, 1H); 5.05 (t, 1H); 5.32 (dd, 1H); 7.01 (t, 2H); 7.30 (m, 2H). 125 (cis): 1.74 (m, 2H); 1.97 (m, 1H); 2.05 (m, 2H); 2.25 (m, 1H); 2.77 (t, 2H); 3.47 (m, 1H); 3.85 (m, 1H); 4.95 (m, 1H); 5.15 (dd, 1H ); 7.00 (t, 2H); 7.34 (m, 2H).
(n): Preparation of trans and cis 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- [3- (N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (compounds 1 and 3)
Compound 109 (60 mg, 0.19 mmol) and triphosgene (23 mg, 0.078 mmol) were dissolved in 3 mL of dichloromethane. To this solution was added triethylamine (29.3 mg, 0.29 mmol). The reaction mixture was refluxed for 2 hours and cooled in an ice bath. To the cooled solution was added triethylamine (34.0 mg, 0.34 mmol) and methylhydroxyamine hydrochloride (32.2 mg, 0.39 mmol). The reaction was stirred at room temperature for 16 hours, quenched with water and extracted with dichloromethane. The organic layer was washed with saturated NaCl solution and evaporated under reduced pressure to give an oil that was purified by preparative TLC (silica, ethyl acetate) to give trans product 1 (51 mg, 69%).¹H NNR (CDCl_Three): 1.82 (m, 3H); 1.95 (m, 1H); 2.22 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 3.15 (s, 3H); 3.40 (m, 2H); 3.58 (m, 1H) ; 3.84 (s, 3H); 3.85 (m, 1H); 3.88 (s, 6H); 5.00 (t, 1H); 5.33 (m, 1H); 6.32 (m, 1H); 6.56 (s, 2H); 7.37 (s, 1H).
Cis isomer 3 was prepared from 110 using a procedure similar to that described for compound 1.¹H NMR (CDCl_Three): 1.83 (m, 2H); 2.07 (m, 3H); 2.28 (m, 1H); 3.13 (s, 3H); 3.35 (m, 2H); 3.55 (m, 1H); 3.84 (s, 3H) ; 3.87 (s, 6H); 3.88 (m, 1H); 4.97 (m, 1H); 5.20 (m, 1H); 6.22 (m, 1H); 6.63 (s, 2H); 7.37 (s, 1H).
(o): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- [3- (N′-methyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (compounds 9 and 11)
These compounds were prepared from 126 and 127 using procedures similar to those described in Example 1 (n), replacing compounds 109 and 110 with compounds 126 and 127.¹H NMR (CDCl_Three): 9 (trans): 1.70 (m, 1H); 1.78 (m, 2H); 1.96 (m, 1H); 2.19 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 3.10 (s, 3H); 3.31 (m, 2H); 3.51 (m, 1H); 3.83 (m, 1H); 5.05 (t, 1H); 5.30 (dd, 1H); 6.38 (t, 1H); 7.01 (t, 2H); 7.28 ( m, 2H) .11 (cis): 1.80 (m, 2H); 2.05 (m, 3H); 2.24 (m, 1H); 3.06 (s, 3H); 3.30 (m, 2H); 3.48 (m, 1H) ); 3.86 (m, 1H); 4.98 (m, 1H); 5.16 (dd, 1H); 6.30 (t, 1H); 7.02 (t, 2H); 7.31 (m, 2H); 8.08 (bs, 1H) .
(p): trans and cis 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- [3- (N′-n-butyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (compounds 2 and 4) Preparation of
Compound 109 (60 mg, 0.19 mmol) and triphosgene (23 mg, 0.078 mmol) were dissolved in 3 mL of dichloromethane. To this solution was added triethylamine (29.3 mg, 0.29 mmol). The reaction mixture was refluxed for 2 hours and cooled in an ice bath. To the cooled solution was added butylhydroxyamine (51.4 mg, 0.29 mmol). The reaction was stirred at room temperature for 16 hours, quenched with water and extracted with dichloromethane. The organic layer was washed with saturated NaCl solution and evaporated under reduced pressure to give an oil. Trans product 2 was separated by preparative TLC (silica, ethyl acetate) (46.9 mg, 54.7%).¹H NMR (CDCl_Three): 0.93 (t, 3H); 1.35 (m, 2H); 1.58 (m, 2H); 1.81 (m, 3H); 1.96 (m, 1H); 2.21 (m, 1H); 2.40 (m, 1H) ; 3.38 (m, 2H); 3.50 (m, 2H); 3.57 (m, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.85 (m, 1H); 3.88 (s, 6H); 5.00 (t, 1H); 5.32 (m, 1H); 6.32 (m, 1H); 6.56 (s, 2H).
Cis isomer 4 was prepared from 110 using a procedure similar to that described for compound 2.¹H NMR (CDCl_Three): 0.92 (t, 3H); 1.32 (m, 2H); 1.58 (m, 2H); 1.81 (m, 2H); 2.08 (m, 3H); 2.28 (m, 1H); 3.35 (m, 2H) ; 3.47 (m, 2H); 3.54 (m, 1H); 3.84 (s, 3H); 3.87 (s, 6H); 3.88 (m, 1H); 4.97 (m, 1H); 5.20 (m, 1H); 6.22 (m, 1H); 6.63 (s, 2H).
(q): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- [3- (N′-n-butyl-N′-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (compounds 10 and 12)
These compounds were prepared from 126 and 127 using procedures similar to those described in Example 1 (p) 4, replacing compounds 109 and 110 with compounds 126 and 127.¹H NMR (CDCl_Three): 10 (trans): 0.90 (t, 3H); 1.30 (m, 2H); 1.55 (m, 2H); 1.70 (m, 1H); 1.78 (m, 2H); 1.96 (m, 1H); 2.19 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 3.31 (m, 2H); 3.44 (m, 2H); 3.52 (m, 1H); 3.82 (m, 1H); 5.05 (t, 1H); 5.30 ( dd, 1H); 6.32 (t, 1H); 7.00 (t, 2H); 7.28 (m, 2H); 7.55 (bs, 1H) .12 (cis): 0.90 (t, 3H); 1.30 (m, 2H) ); 1.52 (m, 2H); 1.80 (m, 2H); 2.04 (m, 3H); 2.24 (m, 1H); 3.30 (m, 2H); 3.40 (m, 2H); 3.48 (m, 1H) ; 3.85 (m, 1H); 4.98 (t, 1H); 5.16 (dd, 1H); 6.27 (t, 1H);
7.03 (t, 2H); 7.32 (m, 2H); 7.53 (bs, 1H).
Example 2
Preparation of 2- (3,4-dimethoxyphenyl) -5- [3-N'-substituted-N'-hydroxyureidylpropoxy] tetrahydrofuran (5-8)
(a): Preparation of 4- (3 ', 4'-dimethoxyphenyl) -4-oxybutyronitrile (111) Single part of pure acrylonitrile (3.2ml, 0.048mol) and triethylamine (5ml, 0.11mol) In an argon atmosphere with stirring, 3,4-dimethoxybenzaldehyde (7.8 g, 0.047 mol) and 3-benzyl-5- (2-hydroxyethyl) -4-methylthiazolium chloride (5.3 g, 0.02 mol). ) In dry dimethylformamide (25 ml). The mixture was left overnight at room temperature. The reaction was diluted with water and extracted with ethyl acetate (3 × 100 ml). The organic layer was extracted with water (3 × 100 ml), brine (3 × 100 ml) and the solvent was removed under reduced pressure to give an amber oil. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate: hexane = 1: 1) showed a mixture of three spots: Rf 0.80 (starting aldehyde), 0.50 (compound 1) and 0.30 (unknown by-product). The sample was purified by column (flash) chromatography on silica gel 60 (230-400 mesh) eluting with ethyl acetate: hexane (= 1: 1) to give the desired compound (2.26 g, 22%) in yellow Obtained as a solid.¹H NMR (CDCl_Three): 2.78 (t, 2H, J = 8Hz), 3.33 (t, 2H, J = 8Nz), 3.96 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 6.90 (d, 1H, J = 8.5Hz), 7.52 (d, J = 2Hz, 2H), 7.58 (dd, J = 2 and 8Hz, 2H).
(b): Preparation of 4- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -4-oxobutyric acid (112)
A solution of 4- (3 ', 4'-dimethoxyphenyl) -4-oxobutyronitrile (111) (2.26 g, 0.01 mol) in acetic acid (15 ml) and hydrochloric acid (12N, 40 ml) was heated with stirring for 1.5 hours. Refluxed and cooled to room temperature. The solvent was removed under reduced pressure to give a brown solid. Recrystallization from water gave 112 as light and light brown crystals (1.57 g, 66%).¹H HMR (CDCl_Three): 2.80 (t, J = 7.5Hz, 2H), 3.30 (t, J = 7.5Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 6.89 (d, 1H, J = 9Hz) 7.55 (d, 1H, J = 1Hz) and 7.64 (dd, 1H, 1 and 9Hz).
(c): Preparation of 4- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) butyrolactone (113)
A solution of sodium borohydride (0.89 g, 0.023 mol) in water (4 ml) was stirred under an argon atmosphere with 112 (2.8 g, 0.012 mol) freshly distilled dry tetrahydrofuran (40 ml) and methanol (20 ml). To the medium solution was added dropwise over 5 minutes. The reaction was left at room temperature overnight. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate: methanol: acetic acid = 9.5: 0.5: several drops) showed the presence of starting material. Additional sodium borohydride (0.5 g, 0.013 mol) in water (2 ml) was added dropwise and the reaction was left at room temperature for 3 hours. Analysis by TLC (same system as above) indicated the absence of starting material. The reaction was quenched with hydrochloric acid (6N, 25 ml) and left at room temperature for 15 minutes. The mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 75 ml). The organic extract was washed with water (3 × 75 ml), brine (3 × 75 ml) and the solvent was removed under reduced pressure to give a light brown solid (2.0 g, 75%).¹H NMR (CDCl_Three): 2.18 to 2.25 (m, 1H), 2.59 to 2.70 (m, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 5.44 to 5.49 (m, 1H) and 6.82 to 6.87 (m, 3H) ).
(d): Preparation of 4- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) butyrolactol (114)
A solution of diisobutylaluminum hydride (1.5M, 9 ml, 13.5 mmol) was stirred into a solution of 113 (2.0 g, 9 mmol) in dry toluene (40 ml) in an argon atmosphere cooled by a dry ice-acetone bath with stirring. It was added dropwise over 30 minutes. The reaction was stirred at -78 ° C for 1 hour. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate: hexane = 1: 1) showed the absence of starting material and a new spot at Rf 0.38. The reaction was quenched with methanol (20 ml) and slowly warmed to 0 ° C. A saturated solution of sodium potassium tartrate (50 ml) was added and stirred at 0 ° C. for 45 minutes. The mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 100 ml) and the organic extract was washed with water (3 × 75 ml), brine (3 × 75 ml). The solvent was removed under reduced pressure to give a dark amber oil (1.7 g, 84%).¹H NMR (CDCl_Three) (Mixture of cis and trans isomers) 1.71 to 2.49 (m, 8H), 2.91 (br s, 1H), 3.09 (br s, 1H), 3.89 (s, 6H), 3.90 (s, 6H) ), 4.97 (m, 1H), 5.19 (t, J = 7Hz, 1H), 5.62 (m, 1H), 5.77 (m, 1H) and 6.82 to 7.28 (m, 6H).
(e): Preparation of N- (3-hydroxypropyl) phthalimide (106)
A mixture of 3-bromopropanol (4 g, 0.029 mmol), potassium phthalate (8 g, 0.043 mmol) and potassium carbonate (4 g, 0.029 mmol) in dry DMF (50 ml) was stirred and heated at 70 ° C. for 4 hours. The mixture was diluted with water (100 ml) and extracted with ethyl acetate (3 × 75 ml). The organic layer was washed with water (3 × 100 ml) and dried (Na 2 SO 4). The solvent was removed under reduced pressure to give a white solid that was extracted with benzene. The benzene extract was evaporated to give a white solid which was recrystallized from ethyl acetate-hexane to give white crystals (1.27 g, 24%).
(f): Preparation of trans and cis 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-phthaloyl)] propoxytetrahydrofuran (115 and 116)
Triflic an Hydride (0.68 ml, 4.8 mmol) as a single part, 114 (0.72 g, 3.2 mmol) of dry dichloromethane (20 ml) and triethylamine (0.68 in argon atmosphere cooled using an ice bath) to a solution in ml, 4.9 mmol) with stirring. The reaction was stirred at 0 ° C. for 30 minutes. N- (3-hydroxypropyl) phthalimide (106) (1.27 g, 7 mmol) was added to the reaction mixture and allowed to stand until the solution warmed to room temperature and left at this temperature for 2 hours. The solution was quenched with aqueous sodium bicarbonate (saturated, 25 ml), extracted with ethyl acetate (3 × 50 ml), brine (3 × 50 ml) and dried (sodium sulfate). Removal of the solvent under reduced pressure left an amber oil (2.02 g). Analysis of the oil by TLC (silica gel; ethyl acetate: hexane = 1: 1) showed the presence of 4 spots at Rf 0.80, 0.60, 0.50 and 0.35. The spot ratio at Rf 0.60 and 0.50 was 2: 1. The sample was purified by column chromatography (flash) on silica gel (230-400 mesh), eluting with ethyl acetate: hexane (= 3: 7) first to a clear, colorless oil (0.40 g, 30%), which is trans-2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-phthaloyl)] propoxytetrahydrofuran (115) (0.40 g, 30%) Identified.¹H NMR (CDCl_Three1.34 to 1.94 (m, 2H), 1.96 to 2.05 (m, 2H), 2.09 to 2.20 (m, 1H), 2.25 to 2.36 (m, 1H), 3.46 to 3.53 (m, 1H), 3.84 (t, 9Hz, 2H), with one proton multiplet hidden here, 3.88 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 5.01 (t, 7.3Hz, 1H) .5.30 (dd, J = 2 and 5Hz 1Hz), 6.82 to 6.90 (m, 3H), 7.71 to 7.74 (m, 2H) and 7.84 to 7.88 (m, 2H).
In order to determine the stereochemistry of this molecule, NOE difference experiments were performed. In this experiment, a triplet at 5.01 ppm was irradiated with a very low specific frequency decoupling pulse and data was collected to measure only the presence of an increase in signal. This represents a positive NOE effect and represents a close spatial relationship between these protons. In this experiment, NOE was found for multiplets at 2.25 to 2.36 ppm, which is a furan ring proton. Another NOE is also seen for aromatic protons, indicating that this triplet represents a benzylic proton. No NOE was observed for the double tablet at 5.30 ppm, indicating that this is the trans isomer.
Sequential elution with the same solvent system gave a spot on Rf0.50 as a colorless oil (0.21 g, 15%), which was cis 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3 -(N-phthaloyl)] propoxytetrahydrofuran (116).¹H NMR (CDCl_Three) 1.92 ~ 2.12 (m, 6H), 3.44 ~ 3.52 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.76 ~ 3.93 (m, 3H), 4.89 ~ 4.94 (m, 1H) , 5.35 (d, J = 4 Hz), 6.89 (d, J = 8 Hz), 6.87 (dd, J = 2 and 8 Hz), 6.92 (d, J = 2 Hz), 7.69 to 7.72 (m, 2H) and 7.82 to 7.85 (m, 2H).
In order to determine the stereochemistry of this molecule, NOE difference experiments were performed. In this experiment, multiplets at 4.89-4.94 ppm were irradiated with very low specific frequency decoupling pulses and data was collected to measure only the presence of signal increase. This represents a positive NOE effect and represents a close spatial relationship between these protons. In this experiment, NOE was found for tablets at 5.35 ppm, another methine furan proton. This indicates that this molecule is a cis isomer. Another NOE is also seen for aromatic protons, indicating that this triplet represents a benzylic proton. NOE was also present for multiplets at 1.92 to 2.12 ppm containing other furan methylene protons.
Chromatography also yielded a mixture of 115 and 116 (0.342 g, 26%).
(g): Preparation of trans 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- (3-aminopropoxy) tetrahydrofuran (117)
Pure hydrazine hydrate (150 μL, 3.2 mmol) was added to a solution of 115 (253 mg, 0.62 mmol) in absolute ethanol (1.5 ml) with stirring. The solution was heated to reflux for 5 minutes and a white solid precipitated from the solution. The mixture was heated to reflux for 2 hours. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate: hexane = 1: 1) showed the absence of starting material and a spot in the first part. The reaction was quenched with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (5 × 10 ml). The organic phase was washed with water (2 × 10 ml), brine (2 × 10 ml) and dried (sodium sulfate). Removal of the solvent under reduced pressure left a colorless oil (150 mg, 86%).¹H NMR (CDCl_Three) 1.25 (brs, 2H), 1.68 to 1.78 (m, 3H), 1.81 to 1.98 (m, 1H), 2.14 to 2.2 (m, 1H), 2.3 to 2.36 (m, 1H), 2.80 (t, J = 6.5Hz, 2H), 3.47 to 3.55 (m, 1H), 3.78 to 3.87 (m, partially hidden, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 4.99 (t, J = 7Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 2 and 6Hz, 1H), 6.80 to 6.88 (m, 3H).
(h): Preparation of cis 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- (3-aminopropoxy) tetrahydrofuran (118)
Pure hydrazine hydrate (125 μl, 2.57 mmol) was added to a solution of 116 (210 mg, 0.51 mmol) in absolute ethanol (3.0 ml) with stirring. The solution was heated to reflux for 5 minutes and a white solid precipitated from the solution. The mixture was heated to reflux for 2 hours. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate: hexane = 1: 1) showed the absence of starting material and a spot in the first part. The reaction was quenched with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (5 × 10 ml). The organic phase was washed with water (2 × 10 ml), brine (1 × 10 ml) and dried (sodium sulfate). Removal of the solvent under reduced pressure left a hard oil (105 mg, 73%).¹H NMR (CDCl_Three) 1.45 (brs, 2H), 1.73 to 1.78 (m, 2H), 2.01 to 2.12 (m, 3H), 2.19 to 2.29 (m, 1H), 2.81 (t, J = 7Hz, 2H), 3.48 to 3.53 ( m, 1H), 3.85 to 3.93 (m, partially hidden, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 4.96 to 5.01 (m, 1H), 5.17 (dd, J = 3 and 6 Hz, 1 H), 6.83 (d, J = 8 Hz, 1 H), 6.89 (dd, J = 2 and 8 Hz, 1 H) and 6.96 (d, J = 2 Hz, 1 H).
(i): Preparation of trans 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-butyl-N-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (5)
To a solution of 117 (53 mg, 0.19 mmol) in dry dichloromethane (3 ml) was added triethylamine (32 μl, 0.22 mmol) and then triphosgene (19 mg, 0.06 mmol) under argon atmosphere with stirring. The solution was heated to reflux for 30 minutes and cooled to room temperature. To this solution was added solid n-butylhydroxylamine (34 mg, 0.38 mmol) in one portion and it was left at room temperature overnight. The reaction was quenched with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (3 × 10 ml). The combined organic phases were washed with aqueous sodium bicarbonate (saturated, 3 × 10 ml) and dried (sodium sulfate). Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate) showed complex mixtures of Rf 0.90, 0.50, 0.25 and 0.00. The sample was purified by column (flash) chromatography on silica gel 60 (230-400 mesh) and eluted with ethyl acetate to give a spot at Rf 0.50 as a milky oil (8 mg, 11%).¹H NMR (CDCl_Three) 0.92 (t, J = 7Hz, 3H), 1.27 to 1.39 (m, 2H), 1.51 to 1.61 (m, 2H), 1.71 to 1.86 (m, 3H), 1.88 to 2.15 (m, 1H), 2.17 to 2.29 (m, 1H), 2.32 to 2.42 (m, 1H), 3.28 to 3.58 (m, 4H), 3.81 to 3.94 (m, partially hidden, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.90 ( s, 3H), 5.49 to 5.05 (m, 1H), 5.31 to 5.38 (m, 1H), 6.28 to 6.34 (m, 1H) and 6.81 to 6.86 (m, 3H), IR (film) 3407, 3193, 2933 , 1640,1516,1263,1029cm^-1.
(j): Preparation of trans 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-methyl-N-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (6)
To a solution of 117 (32 mg, 0.11 mmol) in dry dichloromethane (3 ml) was added triphosgene (12 mg, 0.04 mmol), followed immediately by triethylamine (17 μl, 0.12 mmol) in an argon atmosphere with stirring. The solution was heated to reflux for 2 hours, cooled to room temperature and placed in an ice bath. To this reaction mixture was added neat triethylamine (32 μl, 0.23 mmol) followed by methylhydroxylamine hydrochloride (19 mg, 0.23 mmol). The reaction was left at room temperature overnight. The reaction was quenched with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (3 × 10 ml). The organic extract was washed with water (3 × 10 ml), brine (3 × 10 ml) and the solvent was removed under reduced pressure to give an amber oil. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate) showed only one new spot at Rf 0.30. The sample was purified by column (flash) chromatography on silica gel 60 (230-400 mesh) eluting with ethyl acetate to give the desired compound as an amber oil (12 mg, 30%).¹H NMR (CDCl_Three) 1.73 to 1.84 (m, 2H), 1.90 to 2.01 (m, 1H), 2.03 to 2.13 (m, 1H), 2.18 to 2.29 (m, 1H), 2.32 to 2.43 (m, 1H), 3.13 (s, 3H), 3.30 to 3.44 (m, 2H), 3.49 to 3.59 (m, 1H), 3.82 to 3.92 (m, partially hidden, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.91 (m, 3H) , 4.96 to 5.04 (m, 1H), 5.34 (dd, J = 2 and 5Hz, 1H), 6.34 (br t, 5Hz, 1H) and 6.82 to 6.68 (m, 3H), IR (film) 3407, 3229, 2935,1636,1516,1263 and 1029cm^-1.
(k): Preparation of cis 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-butyl-N-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (7)
To a solution of 118 (50 mg, 0.18 mmol) in dry dichloromethane (3 ml) was added triphosgene (18 mg, 0.06 mmol), followed immediately by triethylamine (80 μl, 0.57 mmol) in an argon atmosphere with stirring. The solution was heated to reflux for 2 hours, cooled to room temperature and placed in an ice bath. To this reaction mixture was added pure triethylamine (50 μl, 0.35 mmol) followed by solid n-butylhydroxylamine (32 mg, 0.36 mmol). The reaction was left at room temperature overnight. The reaction was quenched with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (3 × 10 ml). The organic extract was washed with water (3 × 10 ml), brine (3 × 10 ml) and the solvent was removed under reduced pressure to give an amber oil. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate) showed approximately two equivalent spots at Rf 0.85 and 0.45. The sample was purified by column (flash) chromatography on silica gel 60 (230-400 mesh), eluting with ethyl acetate to initially give a spot at Rf 0.85 as an amber oil (26 mg). Elution sequentially with the same solvent system gave the title compound as an amber oil (25 mg, 35%).¹H NMR (CDCl_Three 1.1 (t, J = 7Hz, 3H), 1.25 to 1.37 (m, 2H), 1.49 to 1.59 (m, 2H), 1.76 to 1.84 (m, 2H), 1.99 to 2.1 (m, 3H), 2.19 to 2.26 (m, 1H), 3.26 to 3.54 (m, 5H), 3.84 to 3.92 (m, partially hidden, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 4.96 to 5.02 (m , 1H), 5.17 (d, J = 4Hz, 1H), 6.24 (t, J = 4Hz, 1H), 6.52 (br s, 1H), 6.83 (d, J = 8Hz, 1H) and 6.89 to 95 (m , 2H), IR (film) 2913,1640,1570,1463,1262,1139 and 1031cm^-1.
(l): Preparation of cis 2- (3 ′, 4′-dimethoxyphenyl) -5- [3- (N-methyl-N-hydroxyureidyl) propoxy] tetrahydrofuran (8)
To a solution of 118 (56 mg, 0.2 mmol) in dry dichloromethane (3 ml) was added triphosgene (20 mg, 0.07 mmol), followed immediately by triethylamine (80 μl, 0.57 mmol) in an argon atmosphere with stirring. The solution was heated to reflux for 2 hours, cooled to room temperature and placed in an ice bath. To this reaction mixture was added pure triethylamine (80 μl, 0.57 mmol) followed by solid methylhydroxylamine hydrochloride (32 mg, 0.39 mmol). The reaction was left at room temperature overnight. The reaction was quenched with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (3 × 10 ml). The organic extract was washed with water (3 × 10 ml), brine (3 × 10 ml) and the solvent was removed under reduced pressure to give an amber oil. Analysis by TLC (silica gel; ethyl acetate) showed one spot at Rf 0.30 and some material in the first position. The sample was purified by column (flash) chromatography on silica gel 60 (230-400 mesh) eluting with ethyl acetate to give the title compound as an amber oil (30 mg, 42%).¹H NMR (CDCl_Three) 1.76 (m, 2H), 1.98-2.10 (m, 3H), 2.18-2.26 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 3.25-3.37 (m, 2H), 3.46-3.54 (m, 1H) , 3.85 to 3.90 (m, partially hidden, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 4.93 to 5.00 (m, 1H), 5.16 (d, J = 4Hz, 1H ), 6.27 (t, J = 5Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8Hz, 1H) and 6.88 to 6.93 (m, 2H), IR (pure) 2933, 1643, 1518, 1261 and 1029cm^-1.
Example 3
2- (2,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (13) and 2- (4-fluorophenyl) 5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (14 , 15)
(a): Preparation of 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-bromopropoxy) tetrahydrofuran (Compound 128)
Compound 105 (1.0 g, 3.94 mmol) was dissolved in 4 ml of dichloromethane. To this solution was added triethylamine (597 mg, 5.90 mmol). The reaction mixture was cooled in an ice bath and trifluoroacetic anhydride (1.24 g, 5.90 mmol) was added dropwise. The reaction mixture was stirred at 0 ° C. for 30 minutes and then 3-bromopropanol (1.84 g, 13.27 mmol) was added. The reaction mixture was warmed to room temperature and stirred at room temperature for 2 hours. Saturated NaHCO_ThreeQuenched with aqueous solution and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated NaCl solution, MgSO_FourDried over, filtered and evaporated under reduced pressure to give an oil that was purified by column chromatography (silica, 4: 1 hexane / ethyl acetate) (128: 430 mg and its cis isomer 250 mg; total yield) Rate 46%).¹H NMR (CDCl_Three): 128 (trans): 1.77 (m, 1H); 1.98 (m, 1H); 2.15 (m, 2H); 2.20 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 3.53 (t, 2H); 3.60 (m, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.87 (m, 1H); 3.89 (s, 6H); 5.01 (t, 1H); 5.35 (dd, 1H); 6.57 (s, 2H).
(b): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-bromopropoxy) tetrahydrofuran (compounds 129, 130)
These compounds were prepared from 123 using a procedure analogous to that described in Example 3 (a), replacing compound 105 with compound 123.¹H NMR (CDCl_Three): 129 (trans): 1.72 (m, 1H); 1.98 (m, 1H); 2.14 (m, 2H); 2.20 (m, 1H); 2.40 (m, 1H); 3.53 (t, 2H); 3.60 (m, 1H); 3.89 (s, 1H); 5.06 (t, 1H); 5.34 (m, 1H); 7.02 (t, 2H); 7.30 (m, 2H). 130 (cis): 1.98 (m, 1H); 2.07 (m, 2H); 2.14 (m, 2H); 2.26 (m, 1H); 3.52 (t, 2H); 3.58 (m, 1H); 3.93 (m, 1H); 5.00 (m, 1H) ); 5.20 (dd, 1H); 7.03 (t, 2H); 7.35 (m, 2H).
(c): Preparation of 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-O-benzylhydroxylaminopropoxy) tetrahydrofuran (Compound 131)
Compound 128 (260 mg, 0.69 mmol) was dissolved in 2 ml of 1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2- (1H) -pyrimidinone (DMPU). To this solution was added sodium carbonate (220.4 mg, 2.08 mmol) and benzylhydroxylamine hydrochloride (166 mg, 1.04 mmol). The reaction was stirred at 80 ° C. for 16 hours, quenched with water and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated sodium chloride solution,_Four, Filtered and evaporated to give an oil that was purified by column (flash) chromatography using ethyl acetate (114 mg, 40%) as solvent.¹H NMR (CDCl_Three): 1.72 (m, 1H); 1.82 (m, 2H); 1.92 (m, 1H); 2.18 (m, 1H); 2.36 (m, 1H); 3.06 (t, 2H); 3.52 (m, 1H) ; 3.81 (m, 1H); 3.83 (s, 3H); 3.87 (s, 6H); 4.71 (s, 2H); 4.98 (t, 1H); 530 (dd, 1H); 6.55 (s, 2H); 7.35 (m, 5H).
(d): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-O-benzylhydroxylaminopropoxy) tetrahydrofuran (compounds 132 and 133)
These compounds were prepared from 129 and 130 using a procedure similar to that described in Example 3 (c), replacing compound 128 with compounds 129 and 130.¹H NMR (CDCl_Three): 132 (trans): 1.70 (m, 1H); 1.83 (m, 2H); 1.94 (m, 1H); 2.17 (m, 1H); 2.38 (m, 1H); 3.07 (t, 2H); 3.52 (m, 1H); 3.82 (m, 2H); 4.71 (s, 2H); 5.02 (t, 1H); 5.30 (ss, 1H); 7.02 (t, 2H); 7.30 (m, 2H); 7.36 ( m, 5H) .133 (cis): 1.85 (m, 2H); 1.96 (m, 1H); 2.05 (m, 2H); 2.26 (m, 1H); 3.05 (t, 2H); 3.50 (m, 1H ); 3.88 (m, 2H); 4.70 (s, 2H); 4.99 (m, 1H); 5.17 (dd, 1H); 5.50 (bs, 1H); 7.00 (t, 2H); 7.35 (m, 7H) .
(e): Preparation of 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-O-benzylhydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (Compound 134)
Compound 131 (114 mg, 0.27 mmol) was dissolved in 3 ml of dichloromethane. To this solution was added trimethylsilyl isocyanate (47.6 mg, 0.41 mmol). The reaction was stirred at room temperature for 16 hours and then refluxed for 4 hours. The reaction was quenched with saturated ammonium chloride solution, extracted with ethyl acetate and evaporated to give an oil. The product was isolated by preparative TLC using ethyl acetate as a solvent.¹H NMR (CDCl_Three): 1.72 (m, 1H); 1.94 (m, 3H); 2.16 (m, 1H); 2.38 (m, 1H); 3.50 (m, 1H); 3.62 (m, 2H); 3.80 (m, 1H) ; 3.82 (s, 3H); 3.84 (s, 6H); 4.81 (s, 2H); 4.99 (t, 1H); 5.30 (m, 3H); 6.54 (s, 2H); 7.37 (s, 5H).
(f): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-O-benzylhydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (compounds 135 and 136)
These compounds were prepared from 132 and 133 using a procedure similar to that described in Example 3 (e), replacing compound 131 with compounds 132 and 133.¹H NMR (CDCl_Three): 135 (trans): 1.70 (m, 1H); 1.93 (m, 3H); 2.16 (m, 1H); 2.39 (m, 1H); 3.50 (m, 1H); 3.62 (m, 2H); 3.80 (m, 1H); 4.82 (s, 2H); 5.04 (t, 1H); 5.30 (dd, 1H); 5.35 (bs, 2H); 7.00 (t, 2H); 7.29 (m, 2H); 7.38 ( s, 5H) .136 (cis): 1.98 (m, 4H); 2.08 (m, 1H); 2.25 (m, 1H); 3.48 (m, 1H); 3.62 (m, 2H); 3.83 (m, 1H) ); 4.81 (s, 2H); 4.98 (m, 1H); 5.17 (dd, 1H); 5.42 (bs, 1H); 7.00 (t, 2H); 7.33 (m, 2H); 7.38 (s, 5H) .
(g): Preparation of 2- (3,4,5-trimethoxyphenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (Compound 13)
Compound 134 (90 mg, 0.19 mmol) was dissolved in 2 ml of ethyl acetate and then Pd / C (10%) (18 mg) was added. The reaction mixture was hydrogenated at balloon pressure for 16 hours. The reaction solution was filtered and the filtrate was concentrated. The product was isolated by preparative TLC using ethyl acetate as a solvent (68 mg).¹H NMR (CDCl_Three): 1.75 (m, 1H); 1.91 (m, 2H); 1.95 (m, 1H); 2.20 (m, 1H); 2.37 (m, 1H); 3.58 (m, 1H); 3.66 (m, 2H) ; 3.81 (s, 3H); 3.85 (m, 1H); 3.87 (s, 6H); 5.00 (t, 1H); 5.35 (dd, 1H); 5.41 (bs, 2H); 6.35 (s, 2H); 8.39 (s, 1H).
(h): Preparation of 2- (4-fluorophenyl) -5- (3-hydroxyureidylpropoxy) tetrahydrofuran (compounds 14 and 15)
Compounds 14 and 15 were prepared from 135 and 136 using a procedure similar to that described in Example 3 (g), replacing compound 134 with compounds 135 and 136.¹H NMR (CDCl_Three): 14 (trans): 1.72 (m, 1H); 1.93 (m, 3H); 2.20 (m, 1H); 2.38 (m, 1H); 3.58 (m, 1H); 3.67 (m, 2H); 3.85 (m, 1H); 5.05 (t, 1H); 5.33 (dd, 1H); 5.48 (bs, 2H); 7.00 (t, 2H); 7.28 (m, 2H); 8.48 (bs, 1H) .15 ( Cis): 1.92 (m, 2H); 2.01 (m, 1H); 2.10 (m, 2H); 2.26 (m, 1H); 3.53 (m, 1H); 3.64 (m, 2H); 3.87 (m, 1H) ); 4.98 (m, 1H); 5.20 (dd, 1H); 5.43 (bs, 2H); 7.01 (m, 2H); 7.31 (m, 2H); 8.43 (bs, 1H).
Example 4
Trans-2- {3- (N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (207)
A synthetic scheme for preparing compound 207 is shown in Scheme 8.

(a): Preparation of 2- (t-butyldimethylsilyloxy) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 202):
2-Hydroxy-5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (550 mg, 3.0 mmol), t-butyldimethylsilyl chloride (498 mg, 3.3 mmol) and imidazole (450 mg, 6.6 mmol) were dissolved in 2 ml of dry DMF. The solution was stirred overnight under a dry argon atmosphere, poured into 200 ml of water and extracted with a 2: 1 mixture of ethyl acetate and hexane (3 × 100 ml). The combined organic extracts were washed with water (4 × 200 ml) and brine (100 ml), dried over sodium sulfate and evaporated to 2- (t-butyldimethylsilyloxy) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran ( Compound 830, a mixture of cis and trans isomers (830 mg, 93%) was obtained as a colorless oil that did not require any purification.¹H-NMR (CDCl_Three) 7.40-7.50 (2H, m, minor isomer), 7.25-7.35 (2H, m, major isomer), 7.00-7.10 (2H, m, both major and minor isomers), 5.71 to 5.75 (1H, m, major isomer), 5.59 to 5.62 (1H, m, minor isomer), 5.12 to 5.20 (1H, m, major isomer), 4.90 to 4.98 (1H, m, minor isomer) Isomers), 2.40 to 2.55 (1H, m, both major and minor isomers), 2.05 to 2.17 (1H, m, both major and minor isomers), 1.87 to 2.00 (1H, m, both major and minor isomers), 1.67 to 1.70 (1H, m, both major and minor isomers), 0.92 (s, 9H, both major and minor isomers) ), 0.16 (s, 6H, both major and minor isomers).
(b): Preparation of trans-2- (3-tetrahydropyranyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 204):
2- (t-butyldimethylsilyloxy) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (202, 593 mg, 2.0 mmol) was mixed in 10 ml of dry methylene chloride (degassed by blowing argon before use) . The solution was cooled to -70 ° C. Trimethylsilyl bromide (290 μl, 2.2 mmol) was added dropwise with stirring at the same temperature in a dry argon atmosphere. Stirring was continued for an additional 1.5 hours to produce 2-bromo-5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (203), which was used for subsequent chemical treatment without further purification (see below). .
In a separate flask, 3-tetrahydropyranyloxy-but-1-yne (370 mg, 2.4 mmol) was dissolved in dry THF (5 ml). The solution was cooled to −60 ° C. and added by dropwise addition of n-butyllithium (1.0 ml, 2.4 mmol) with stirring at the same temperature in a dry argon atmosphere. Stirring was continued for another 0.5 hour. The resulting solution was removed with a syringe and added dropwise to a solution of 2-bromotetrahydrofuran (previously prepared) at −70 ° C. with stirring. Stirring was continued at -78 ° C for an additional 1.5 hours. The reaction flask was stored in the refrigerator (−78 ° C.) overnight (TLC showed no change). The reaction mixture was poured into a 2M solution of ammonium chloride (50 ml) and extracted with methylene chloride (3 × 50 ml). The solution was dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was purified by flash column chromatography (eluent, 10% ethyl acetate in hexane) to give two components. Proton NMR analysis identifies the less polar component as trans-2- (3-tetrahydropyranyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 204,280 mg, 45%) The more polar component (230 mg) was found to be a mixture of two or more compounds. This mixture was discarded.¹H-NMR (CDCl_Three) δ 7.27 to 7.30 (2H, m); 7.01 (2H, t, J = 8.7Hz), 5.09 (1H, t, J = 7.1Hz), 4.91 to 4.95 (2H, m), 4.57 to 4.64 (1H) , m), 3.78 to 3.90 (1H, m), 3.50 to 3.60 (1H, m), 2.30 to 2.50 (2H, m), 2.05 to 2.17 (1H, m), 1.70 to 1.90 (3H, m), 1.50 ~ 1.65 (4H, m), 1.48 (3H, d, J = 6.6Hz).
(c): Preparation of trans-2- (3-hydroxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 205):
Trans-2- (3-tetrahydropyranyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 204, 280 mg, 0.9 mmol) was dissolved in methanol (15 ml). 50 mg) of p-toluenesulfonic acid) was added to this solution and the resulting solution was stirred for 45 minutes. Saturated sodium bicarbonate solution (10 ml) was added. After 5 minutes of stirring, the solution was added to 10 ml of water, diluted with 15 ml of brine and extracted with methylene chloride (3 × 30 ml). The combined organic extracts were dried over sodium sulfate, the solvent was removed on a rotary evaporator, and trans-2- (3-hydroxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 205 ) 212 mg (100%) was obtained.¹H-NMR (CDCl_Three) δ 7.29 (2H, dd, J = 8.7, 5.2Hz), 7.01 (2H, t, J = 8.7Hz), 5.09 (1H, t, J = 7.4Hz), 4.92 (1H, t, J = 7.4) Hz), 4.59 (1H, q, J = 6.6Hz), 2.30 to 2.50 (2H, m), 2.05 to 2.15 (1H, m), 2.00 (1H, br s), 1.75 to 1.88 (1H, m), 1.47 (3H, d, J = 6.6Hz).
(d): Preparation of trans-2- {3- (N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 206): Trans-2- (3-hydroxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 205, 210 mg, 0.89 mmol), triphenylphosphine (288 mg, 1.1 mmol) and N, O-bis (Phenoxycarbonyl) hydroxylamine (283 mg, 1.1 mmol) was dissolved in dry THF (5 ml). The solution was cooled to 0 ° C. under an argon atmosphere and diisopropyl azodicarboxylate (216 ml, 1.1 μmol) was added dropwise. Stirring was continued for 1 hour at the same temperature. The solvent was evaporated and the residue was purified by flash column chromatography (eluent, 30% ethyl acetate in hexane) to give trans-2- {3- (N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but There was obtained 250 mg (57%) of 1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 206).¹H-NMR (CDCl_Three) δ7.15 ~ 7.45 (12H, m), 7.02 (2H, t, J = 8.6Hz), 5.32 (1H, q, J = 7.0Hz), 5.07 (1H, t, J = 6.8Hz), 4.96 ( 1H, t, J = 5.7Hz), 2.25 to 2.50 (2H, m), 2.05 to 2.20 (1H, m), 1.70 to 1.85 (1H, m), 1.66 (3H, d, J = 7.0Hz).
(e): Preparation of trans-2- {3- (N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 207):
Trans-2- {3- (N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (206, 200 mg, 0.41 mmol) in methylene chloride Dissolved in a high pressure tube as a medium solution. The solvent was evaporated using a stream of argon and the residue was cooled to -78 ° C. In this tube, ammonia (8 ml) was concentrated and 4 ml of t-butanol was added. The tube was sealed and allowed to warm slowly to room temperature and stirred at room temperature for 18 hours. The pressure was released very slowly and the tube was left open for 1 hour. The residue was transferred to a flask and rotavapped twice with added toluene. The residue was purified by flash column chromatography (eluent, 3% methanol in ethyl acetate) and further purified by preparative TLC (solvent, 5% methanol in methylene chloride) to give trans-2- {3- (N-hiroki 93 mg (78%) of ciureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 207) were obtained. IR (film) 3481,3269,2985,2877,2249,1662,1670,1510,1444,1224,1172,1037cm^-1;¹H-NMR (CDCl_Three) δ8.10 (1H, br s), 7.26 (2H, dd, J = 8.6,5.4Hz), 7.00 (2H, t, J = 8.6Hz), 5.80 (1H, br, s), 5.00〜5.20 ( 2H, m), 4.80 to 5.00 (1H, m), 2.20 to 2.50 (2H, m), 2.00 to 2.20 (1H, m), 1.70H, HHh
~ 1.90 (1H, m), 1.37 (3H, dd, J = 6.9,1.9Hz).
Example 5
S, S, S- and S, S, R of trans-2- {3- (N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compounds 216 and 217) -Preparation of isomers
Prepare S, S, R- and S, S, S-isomers of trans-2- {3- (N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran One way to do this is shown in Scheme 9 below.

(a): Preparation of methyl 3- (4-fluorobenzoyl) propionate (Compound 209)
To a solution of 3- (4-fluorobenzoyl) propionic acid (1.98 g, 10.0 mmol) in methanol (25 ml) was added 0.5 ml of concentrated sulfuric acid. The resulting solution was stirred for 2 hours under an argon atmosphere. The reaction mixture was neutralized with saturated sodium bicarbonate, the methanol was removed using a rotary evaporator, and the residue was dissolved in 50 ml of ethyl acetate. The resulting solution was washed with saturated sodium bicarbonate (3 × 50 ml) and brine (50 ml), dried over sodium sulfate, the solvent was removed under reduced pressure and methyl 3- (4-fluorobenzoyl) propionate (2 g, 94% ) IR (film) 3448,3111,3076,3003,3958,1734,1678,1601,1423,1300,1240,1155,1099cm^-1;¹H-NMR (CDCl_Three) δ7.97 (2H, dd, J = 9.0,5.5Hz), 7.10 (2H, T, J = 8.9Hz), 3.67 (3H, s), 3.25 (2H, t, J = 6.6Hz), 2.73 ( 2H, t, J = 6.6Hz); 13C-NMR (CDCl3) δ 196.50, 173.34, 167.54, 164.17, 132.98, 130.77, 115.91, 115.62, 51.91, 33.31, 28.00.
(b): Preparation of (S) -5- (4-fluorophenyl) -γ-butyrolactone (compound 210)
A solution of methyl 3- (4-fluorobenzoyl) propionate (Compound 209, 780 mg, 3.67 mmol) in dry THF (2 ml) was pre-cooled (0 ° C.) under stirring in an argon atmosphere (−)-DIP- Chloride (2.02 g, 6.25 mmol) was added dropwise to a solution in THF (2 ml). The resulting solution was stirred at the same temperature for 2 hours and left at 0-5 ° C. overnight. While maintaining the temperature at 0 ° C., water (2 ml) was added dropwise with stirring followed by methanol (5 ml) and 5M NaOH solution (5 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours, cooled and 15 ml of saturated sodium bicarbonate solution was added. The resulting mixture was washed with ether (3 × 50 ml) and acidified with 6N HCl. The acidic mixture was extracted with toluene (3 × 50 ml). The combined toluene extracts were washed with braion (50 ml), dried over sodium sulfate and the solvent removed under reduced pressure. The residue was resuspended in 50 ml of toluene and PPTS (10 mg) was added thereto. The resulting solution was refluxed for 2 hours with a Dean-Stark trap (15 ml of distillate was first discharged). The solution was cooled, washed with saturated bicarbonate solution (2 × 50 ml), dried over sodium sulfate, the solvent was removed under reduced pressure and 620 mg of (S) -5- (4-fluorophenyl) -γ-butyrolactone ( 94%). 1H-NMR (CDCl3) δ 7.33 (2H, dd, J = 8.8, 5.3Hz), 7.09 (2H, t, J = 8.7Hz), 5.50 (1H, dd, J = 8.4, 5.9Hz), 2.64 ~ 2.71 (3H, m), 2.17 to 2.22 (1H, m).
(c): Preparation of (5S) -2-hydroxy-5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 211) (S) -5- (4-fluorophenyl) -γ-butyrolactone (compound 210, 620 mg, 3.44) mmol) was azeotropically dried (in hexanes) and dissolved in dry methylene chloride (25 ml). The solution was cooled to −78 ° C. with stirring in an argon atmosphere and DIBALH (3.5 ml of a 1.5M solution in toluene, 5.16 mmol) was added dropwise. Stirring was continued at −78 ° C. for 2 hours, then a saturated solution of potassium sodium tartrate (25 ml) was added. The cooling bath was removed and stirring was continued for another 2 hours. The reaction mixture was diluted with methylene chloride (25 ml). The organic layer was separated, washed with water (2 × 50 ml) and brine (50 ml), dried over sodium sulfate, the solvent was removed under reduced pressure and 2-hydroxy-5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (620 mg, 100%).¹H-NMR (CDCl_Three) δ 7.30 to 7.41 (m, 2H), 7.04 (m, 2H), 5.63 to 5.78 (m, 1H), 5.00 to 5.22 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 2.20 to 2.32 (m, 1H), 1.95-2.10 (m, 1H), 1.79 (m, 1H).
(d): Preparation of (5S) -2- (t-butyldimethylsilyloxy) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 212)
(5S) -2-Hydroxy-5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 211,620 mg, 3.5 mmol), t-butyldimethylsilyl chloride (700 mg, 5.25 mmol) and imidazole (595 mg, 8.75 mmol) in 2 ml of dry DMF Dissolved. The resulting solution was stirred overnight in a dry argon atmosphere, poured into 200 ml of water and extracted with a 2: 1 mixture of ethyl acetate and hexane (3 × 100 ml). The combined organic layers were washed with water (4 × 200 ml) and brine (100 ml), dried over sodium sulfate and the solvent removed under reduced pressure to give (5S) -2- (t-butyldimethylsilyloxy) -5- 1 g (96%) of (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 212, mixture of cis and trans isomers) was obtained as a colorless oil that did not require further purification.¹H-NMR (CDCl_Three) 7.40-7.50 (2H, m, minor isomer), 7.25-7.35 (2H, m, major isomer), 7.00-7.10 (2H, m, both major and minor isomers), 5.71 to 5.75 (1H, m, major isomer), 5.59 to 5.62 (1H, m, minor isomer), 5.12 to 5.20 (1H, m, major isomer), 4.90 to 4.98 (1H, m, minor isomer) Isomers), 2.40 to 2.55 (1H, m, both major and minor isomers), 2.05 to 2.17 (1H, m, both major and minor isomers), 1.87 to 2.00 (1H, m, both major and minor isomers), 1.67 to 1.70 (1H, m, both major and minor isomers), 0.92 (s, 9H, both major and minor isomers) ), 0.16 (s, 6H, both major and minor isomers).
(e): Preparation of (2S, 5S) -trans-2- (3-t-butyldimethylsilyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 213)
(5S) -2- (t-Butyldimethylsilyloxy) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 212, 1 g, 3.4 mmol) was degassed by blowing in methylene chloride (Argon before use) .) Dissolved in 10 ml. The solution was cooled to −70 ° C. and added by dropwise addition of trimethylsilyl bromide (500 μl, 4.1 mmol) with stirring at the same temperature in an argon atmosphere. Stirring was continued for an additional 1.5 hours to give (5S) -2-bromo-5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran, which was used without isolation (see below). In a separate flask, 3-t-butyldimethylsiloxy-but-1-yne (840 mg, 4.5 mmol) was dissolved in dry THF (10 ml). The solution was cooled to −60 ° C. and added by dropwise addition of n-butyllithium (1.8 ml of a 2.5M solution in hexane, 4.5 mmol) with stirring at the same temperature in an argon atmosphere. Stirring was continued for another 0.5 hour. The resulting solution was added through a cannula by dropwise addition of a solution of 2-bromotetrahydrofuran (previously prepared) with stirring at -70 ° C. Stirring was continued at -78 ° C for an additional 1.5 hours. The reaction flask was left in the refrigerator (−78 ° C.) overnight (TLC did not show any change). The reaction mixture was poured into a 2M solution of ammonium chloride (100 ml) and extracted with methylene chloride (3 × 75 ml). The solution was dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was purified by flash column chromatography (eluent, 10% ethyl acetate in hexane) to give two components. Proton NMR analysis showed that the less polar component was (2S, 5S) -trans-2- (3-t-butyldimethylsilyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compounds 213,765 mg, 65%).¹H-NMR (CDCl_Three) δ 7.29 (2H, m), 7.01 (2H, t, J = 8.7Hz), 5.09 (1H, t, J = 7.1HZ), 4.91 to 4.97 (2H, m), 4.55 to 4.62 (1H, m ), 2.26 to 2.50 (2H, m), 2.05 to 2.17 (1H, m), 1.75 to 1.88 (1H, m), 1.38 (3H, d, J = 6.6Hz), 0.90 (9H, s), 0.12 ( 6H, s). The more polar component is (2R, 5S) -cis-2- (3-t-butyldimethylsilyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 214,190 mg, 16%).
(f): Preparation of (2S, 5S) -trans-2- (3-hydroxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 215)
Dissolve (2S, 5S) -trans-2- (3-t-butyldimethylsilyloxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 213, 765 mg, 2.2 mmol) in 20 ml of THF did. The solution was cooled to 0 ° C. and TBAF (6.6 ml of 1M solution in THF) was added thereto. The resulting solution was stirred at 0 ° C. for 2 hours and the solvent was removed under reduced pressure. The residue is solvented in ethyl acetate (100 ml), washed with water (3 × 100 ml, in each case 5 ml of brine added to the separating layer) and subsequently with brine (50 ml), washed with sodium sulphate and the solvent is removed under reduced pressure. As a result, 500 mg (97%) of (2S, 5S) -trans-2- (3-hydroxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 215) was obtained. 1H-NMR (CDCl3) δ 7.29 (2H, dd, J = 8.7, 5.2Hz), 7.01 (2H, t, J = 8.7Hz), 5.09 (1H, t, J = 7.4Hz), 4.92 (1H, t, J = 7.4Hz), 4.59 (1H, q, J = 6Hz), 2.30 ~ 2.50 (2H, m), 2.05 ~ 2.15 (1H, m), 1.75 ~ 1.88 (1H, m), 1.72 (1H, br s), 1.47 (3H, d, J = 6.6Hz).
(2S, 5S) -trans-2- (3-hydroxy-but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 215, 500 mg, 2.13 mmol), (R) -α-methoxy-phenyl Acetic acid (1.06 g, 6.4 mmol) and DMAP (86 mg, 0.7 mmol) were dissolved in dry methylene chloride (3 ml). DCC (1.5 g, 7.24 mmol) was added and the resulting solution was stirred at room temperature in an argon atmosphere for 3 hours (many white solids precipitated in a few minutes). The solid was removed by filtration and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash column chromatography (eluent, 8% ethyl acetate in hexane) to give two diastereomeric esters. Less polar is (2S, 5S) -trans-2- {3- (S) -hydroxy-but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 216, 250 mg, 30%,¹From H-NMR,> 95%).¹H-NMR (CDCl_ThreeHHH
) δ 7.25-7.50 (7H, m), 7.02 (2H, t, J = 8.5Hz), 5.52-5.60 (1H, m), 5.06 (1H, t, J = 6.8Hz), 4.88-4.94 (1H , m), 4.78 (1H, s), 3.43 (3H, s), 2.25 to 2.47 (2H, m), 2.00 to 2.13 (1H, m), 1.75 to 1.88 (1H, m), 1.37 (3H, d (2S, 5S) -trans-2- {3- (R) -hydroxy-but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound) 217, 230mg, 29%,¹72% from H-NMR).¹H-NMR (CDCl_Three) 7.22 ~ 7.50 (7H, m), 7.01 (2H, t, J = 8.7Hz), 5.50 ~ 5.60 (1H, m), 4.98 (1H, t, J = 7.2Hz), 4.79 ~ 4.85 (1H) , m), 4.79 (1H, s), 3.44 (3H, s), 2.20 to 2.40 (2H, m), 1.88 to 1.98 (1H, m), 1.72 to 1.80 (1H, m), 1.51 (3H, d , J = 6.7 Hz). By subjecting these two esters to basic hydrolysis (stirring in 10 ml of 1M ethanol solution of KOH for 30 minutes at 50 ° C., followed by normal treatment), the respective alcohols; (2S, 5S) -trans-2- {3- (S) -hydroxy-but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 218, 150 mg, 98%) and its diastereomers ( 2S, 5S) -trans-2- {3- (R) -hydroxy-but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 221, 50 mg, 100%) was obtained. Both of these alcohol¹The H-NMR spectrum was identical to that of 218.
(g): (2S, 5S) -trans-2- {3- (R)-(N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl} -5- (4-fluoro Preparation of phenyl) tetrahydrofuran (compound 219)
(2S, 5S) -trans-2- {3- (S) -hydroxy-but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 218, 150 mg, 0.64 mmol), triphenylphosphine (200 mg 0.77 mmol) and N, O-bis (phenoxycarbonyl) hydroxylamine (200 mg, 0.77 mmol) were dissolved in dry THF (3 ml). The solution was cooled to 0 ° C. and added thereto by dropwise addition of diisopropyl azodicarboxylate (142 μl, 0.77 mmol) with stirring in a dry argon atmosphere. Stirring was continued for 1 hour at the same temperature. The solvent was evaporated on a rotary evaporator and the residue was purified by flash column chromatography (eluent, 30% ethyl acetate in hexane) and purified (2S, 5S) -trans-2- {3- (R)-(N There was obtained 225 mg (72%) of -phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl) -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (219).¹H-NMR (CDCl_Three) 7.15 ~ 7.45 (12H, m), 7.02 (2H, t, J = 8.6Hz), 5.32 (1H, q J = 7.0Hz), 5.07 (1H, t, J = 6.8Hz), 4.96 (1H , t, J = 5.7Hz), 2.25 to 2.50 (2H, m), 2.05 to 2.20 (1H, m), 1.70 to 1.85 (1H, m), 1.66 (3H, d, J = 7.0Hz).
(h): (2S, 5S) -trans-2- {3- (S)-(N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl} -5- (4-fluoro Preparation of phenyl) tetrahydrofuran (compound 222)
Starting from (2S, 5S) -trans-2- {3- (R) -hydroxy-but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (compound 221, 150 mg, 0.64 mmol), 218 (2S, 5S) -trans-2- {3- (S)-(N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl} -5- (4 -Fluorophenyl) tetrahydrofuran (Compound 222) was obtained. 1H-NMR was identical to 219.
(i): (2S, 5S) -trans-2- {3- (R)-(N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (CMI-947) Preparation of (compound 220):
(2S, 5S) -trans-2- {3- (R)-(N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran ( Compound 219,225 mg) was dissolved as a solution in methylene chloride in a high pressure tube. The solvent was evaporated with a stream of argon and the residue was cooled to -78 ° C. In this tube, 10 ml of ammonia was concentrated and 2 ml of t-butanol was added. The tube was sealed and left to warm slowly to room temperature. It was allowed to stir at room temperature for 18 hours. The pressure was released very slowly and the tube was left open for 1 hour. The residue was transferred to a flask, toluene was added and concentrated twice under reduced pressure. The residue was purified by preparative TLC (eluent, 5% methanol in methylene chloride) to give (2S, 5S) -trans-2- {3- (R)-(N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl } -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (CMI-947,220) 120 mg (90%) was obtained. IR (film) 3209,2985,2874,1653,1510,1449,1336,1224,1157,1037cm^-1,¹H-NMR (CD3 OD) δ 7.34 (2H, dd, J = 8.7, 5.4Hz), 7.04 (2H, t, J = 8.8Hz), 5.00 to 5.10 (2H, m), 4.85 to 4.95 (1H, m), 2.25 to 2.50 (2H, m), 2.00 to 2.15 (1H, m), 1.78 to 1.85 (1H, m), 1.38 (3H, d, J = 7.0Hz).
(j): (2S, 5S) -trans-2- {3- (S)-(N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (CMI-948) Preparation of (Compound 223):
(2S, 5S) -trans-2- {3- (S)-(N-phenoxycarbonyloxy-N-phenoxycarbonyl-amino) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran ( (2S, 5S) -trans-2- {3- (S)-(N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5-, starting from compound 222,225 mg) and following a procedure similar to 219 110 mg (83%) of (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran (CMI-948,223) was obtained. IR (film) 3200,2985,2881,1643,1510,1442,1222,1035cm^-1; 1H-NMR (CD3 OD) δ 7.34 (2H, dd, J = 8.7,5.5Hz), 7.04 (2H, t, J = 8.9Hz), 5.00-5.10 (2H, m), 4.85-4.95 (1H , m), 2.25 to 2.50 (2H, m), 2.00 to 2.15 (1H, m), 1.70 to 1.85 (1H, m), 1.38 (3H, d, J = 7.0Hz).
Example 6
Trans-2- {3- (N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran R, R, S- and R, R, R-isomers (compound 234 and 236)
Prepare S, S, R- and S, S, .S-isomers of trans-2- {3- (N-hydroxyureidyl) -but-1-ynyl} -5- (4-fluorophenyl) tetrahydrofuran One way to do this is shown in Scheme 10 below.

(a) Preparation of 4- (4-fluorophenyl) -4-oxo-methylbutanoate (Compound 209)
To a solution of 3- (4-benzoyl) propionic acid (208) (5.0 g) in methanol (20 ml) was added a few drops of sulfuric acid with stirring. After stirring overnight (19 hours), the reaction was neutralized with saturated aqueous sodium bicarbonate and methanol was removed under reduced pressure. The residue was dissolved in ethyl acetate (50 ml), washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (3 × 15 ml), water (2 × 15 ml) and brine (2 × 15 ml) and dried (Na₂SO_Four), Filtered and concentrated to give a pale crystalline solid (5.3 g, 98%).¹H-NMR: 2.79 (t, 2H), 3.30 (T, 2H), 3.71 (S, 3H), 7.14 (T, 2H), 8.02 (m, 2H).
(b): Preparation of R-4- (4-fluorophenyl) -γ-butyrolactone (Compound 224)
Drying keto-ester 209 (10.07 g, 48.0 mmol) in a solution of cooled (0 ° C.) in (+)-DIP chloride (25 g, 77.9 mmol) in dry THF (20 ml) under stirring in an argon atmosphere. A solution in THF (20 ml) was added slowly. The reaction was placed in a refrigerator (4 ° C.) for 30 hours, then returned to the ice bath and water (10 ml), methanol (30 ml) and 10% aqueous NaOH (60 ml) were added with stirring. The ice bath was removed. When all of the ester was hydrolyzed, saturated aqueous sodium bicarbonate (80 ml) was added. The aqueous solution was extracted with ether (2 × 100 ml), then acidified to pH 2 and extracted with benzene (2 × 180 ml). Pyridinium-p-toluenesulfonate (60 ml) was added to the combined benzene layers and then heated to reflux using a Dean-Stark trap. When the reaction is complete, the benzene solution is washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (150 ml) and brine (2 × 50 ml) and dried (Na₂SO_Four), Filtered and concentrated to give a white crystalline solid (7.92 g, 91%) which was confirmed to be R structure based on previous literature.¹H-NMR: 2.10-2.25 (m, 1H), 2.68 (m, 3H), 5.50 (m, 1H), 7.08 (t, 2H), 7.30 (m, 2H).
(c): Preparation of cis and trans-5R-5- (4-fluorophenyl) -2-hydroxytetrahydrofuran (compound 225)
To a solution of lactone 224 (7.25 g, 40.3 mmol) in dry toluene (50 ml) cooled in a dry ice / acetone bath under stirring, diisobutylaluminum hydride (1.5 M solution in toluene) (1.5 eq, 40 ml) Was added. When the reaction was complete, methanol (10 ml) was added slowly, followed by saturated aqueous potassium potassium L-tartrate solution (60 ml) and the ice bath was removed. The solution was stored overnight (16 hours), the layers were separated, and the water column fraction was extracted with ethyl acetate (2 × 50 ml). The combined organic layers were washed with water (3 × 30 ml) and brine (3 × 30 ml) and dried (Na₂SO_Four), Filtered and concentrated. The product was a colorless oil (6.32 g, 86%) which was a mixture of two diastereomers (50/50).¹H-NMR: 1.7 (m, 1H), 1.9-2.3 (m, 2H), 2.42 (m, 1H), 3.60 (bs, 0.5H), 3.72 (bs, 0.5H), 4.98 (t, 0.5H) , 5.20 (t, 0.5H), 5.60 (bs, 0.5H), 5.72 (m, 0.5H), 7.00 (t, 2H), 7.25 (m, 1H), 7.40 (m, 1H).
(d): Preparation of cis and trans-5R-5- (4-fluorophenyl) -2-t-butyldimethylsiloxytetrahydrofuran (compound 226):
To a solution of lactol 225 (6.32 g, 34.7 mmol) in methylene chloride (140 ml) was added with stirring, imidazole (1.1 eq, 38.2 mmol, 2.60 g)) and TBD <S chloride (5.77 g). After stirring overnight, the reaction was filtered and concentrated. The crude product was filtered through a plug of silica to a colorless oil (9.61 g, 93%), a mixture of two diastereomers (2: 1).¹H-NMR: 0.14 (s, 6H), 0.92 (s, 9H), 1.7 (m, 1H), 1.9 to 2.2 (m, 2H), 2.4 to 2.5 (m, 1H), 4.9 (m, 0.33H) 5.16 (t, 0.66H), 5.59 (m, 0.33H), 5.71 (dd, 0.66H), 7.00 (m, 2H), 7.25 (m, 1.33H), 7.40 (m, 0.66H).
For a sample of this compound with a racemic mixture and a 5-position modification, the presence of each structure at this center was determined by chiral solvating agent [2,2,2-trifluoro-1- (9-anthryl) ethanol, 2.2 mg base , 40 mg CSA]. These conditions indicated that compound 226 had no detectable amount of 5S isomer.
As a control, a 2: 1 diastereomeric mixture of compound 226 (2.2 mg), which was a racemic mixture at position 5, was treated with CSA (40 mg). Multiplets from 4.86 to 4.92 ppm (0.33H) became two multiplets at 4.64 to 4.72 and 4.78 to 4.84 ppm. For the other diastereomers (same spectrum), double doublets at 5.66-5.70 ppm resulted in two sets of dds at 5.64-5.68 and 5.70-5.74 ppm. For compounds with reduced chirality, small multiplets (W / CSA) appear at 4.62 to 4.70, and double doublets appear at 5.68 to 5.70 ppm. There was no evidence of other isomers.
(e): Preparation of 2R, 5R-trans-5- (4-fluorophenyl) -2- (3-t-butyldimethylsiloxy-1-butynyl) tetrahydrofuran (compound 227):
To a solution of 226 (500 mg, 1.69 mmol) in dry degassed methylene chloride (10 ml) cooled to −78 ° C. was added TMS bromide (0.25 ml, 1.86 mmol). This was stirred for 4 hours. To another flask containing 3-t-butyldimethylsiloxy-1-butyne (0.31 g, 1.68 mmol) and THF (5 ml) was added n-butyllithium (1.6 M in hexane, 1.26 ml, 2.02 mmol). After 30 minutes, the solution was transferred to the solution via cannula. After 2 hours, the reaction was poured into 2M aqueous ammonium chloride (25ml), extracted into methylene chloride (3x25ml) and dried (Na₂SO_Four), Filtered and concentrated. Flash chromatography (5% ethyl acetate in hexanes) gave the trans product as a clear oil (280 mg, 48%).¹H NMR: 0.17 (d, 6H), 0.91 (s, 9H), 1.42 (d, 3H), 1.8 (m, 1H), 2.25 to 2.50 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 4.91 (m , 1H), 5.09 (m, 1H), 7.0 (t, 2H), 7.30 (m, 2H).
(f): Preparation of 2R, 5R-trans-5- (4-fluorophenyl) -2- (3-hydroxy-1-butynyl) tetrahydrofuran (Compound 228):
Tetrabutylammonium fluoride (0.86 g, 3.3 mmol) was added while stirring a solution of 227 (0.38 g, 1.1 mmol) in THF (5 ml) cooled in an ice bath. The ice bath was removed. After 30 minutes, the solvent was removed and the product was separated by flash chromatography (25% ethyl acetate in hexane). The product was a colorless oil (170 mg, 67%).¹H NMR: 1.48 (d, 3H), 1.8 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 2.3-2.5 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 4.91 (t, 1H), 5.1 (t , 1H), 7.0 (t, 2H), 7.29 (m, 2H).
228's hydroxy functional group was converted to R-alpha-methoxyphenylacetic acid (DDC, DMAP, CH₂Cl₂The resulting diastereomer (229 + 230) was separated (flash chromatography) and the R and S isomers at the carbitol carbon were isolated. The ester was removed by base hydrolysis (KOH, 78%) to give carbinols 231 and 232. A complete structure was confirmed based on the MosHeR model.
(g): Preparation of 2R, 5R-trans-5- (4-fluorophenyl) -2- (3R-3-N, O-bisphenoxycarbonyl hydroxylamino-1-butynyl) tetrahydrofuran (Compound 233):
Cooled (ice bath) 2R, 5R-trans-5- (4-fluorophenyl) -2- (3S-3-hydroxy-1-butynyl) tetrahydrofuran (231) (29 mg, 0.12 mmol), triphenylphosphine ( To a solution of 39 mg, 0.15 mmol) and N, O-bisphenoxycarbonyl hydroxylamine (37 mg, 0.14 mmol) in THF (3 ml) was added diisopropyl azodicarboxylate (0.029 ml, 0.15 mmol) slowly. The ice bath was removed and the solvent was removed when the reaction was complete (a few minutes). The product was obtained as a colorless oil (32 mg, 53%) by flash column chromatography (15% ethyl acetate in hexane).¹H NMR: 1.65 (d, 3H), 1.8 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 2.4 (m, 2H), 4.94 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 5.30 (m, 1H ), 7.0 (t, 2H), 7.15-7.40 (m, 2H).
(h): Preparation of 2R, 5R-trans-5- (fluorophenyl) -2- (3R-3-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran (compound 234):
Compound 233 (32 mg) was combined with condensed ammonia (about 3 ml) and t-butanol (about 2 ml) at −78 ° C. in a vessel with a screw cap equipped with a stir bar. The vessel was sealed and the cooling bath was removed. After stirring overnight at room temperature, the pressure was released and the solvent was removed. The product was triturated (25% ethyl acetate in hexanes) to give a white solid (14 mg, 74%). 1H NMR: 1.41 (d, 3H), 1.8 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 2.3 to 2.5 (m, 2H), 4.93 (t, 1H), 5.08 (t, 1H), 5.20 (m , 1H), 5.38 (bs, 1H), 7.0 (t, 2H), 7.29 (m, 2H).
Electric spray MS: M + 1 = 293
The synthesis of the RRS isomer from ester 230 (CMI-957) was performed in the same manner as the synthesis of the RRR isomer from ester 29 (CMI-954).
Example 7
2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran (compound 401, FIG. 4) and 2S, 5R-trans-2- (4 -Fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidylbutyl) tetrahydrofuran (Compound 402, Figure 4)
Preparation of 4S- (4-fluorophenoxymethyl) -γ-butyrolactone (Compound 301, FIG. 4) (S) -γ-butyrolactone (1.0 g, 8.61 mmol), 4-fluorophenol (1.16 g, 10.35 mmol) and tri To a solution of phenylphosphine (2.49 g, 9.49 mmol) in THF (10 ml), diisopropoxy azodicarboxylate (1.87 μl, 9.46 mmol) was added dropwise with stirring. After the addition, the reaction mixture was stirred at 80 ° C. for 16 hours. The solvent was removed and the product was separated by flash chromatography (silica, 2: 1 hexane / ethyl acetate) (1.38 g, 76.3%).¹H NMR (CDCl_Three): 2.27 (m, 1H); 2.42 (m, 1H); 2.60 (m, 1H); 4.04 (m, 1H); 4.15 (m, 1H); 4.85 (m, 1H); 6.84 (m, 2H) ; 6.98 (m, 2H).
Preparation of 2S- (4-fluorophenoxymethyl) -5-hydroxy-tetrahydrofuran (compound 302, FIG. 4)
To a solution of lactone 301 (1.38 g, 27.22 mmol) in dry toluene (24 ml) at −78 ° C. with stirring, DIBALKH in 1.5 M toluene solution (6.76 ml, 10.13 mmol) was added dropwise. The reaction mixture was stirred at -78 ° C for 2 hours. The reaction was quenched by the addition of additional methanol (1.7 ml) while maintaining the temperature below -60 ° C. The mixture was warmed to −20 ° C., followed by the addition of saturated aqueous sodium potassium tartrate (10 ml) while maintaining the reaction temperature at −10 to 0 ° C. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight and then the two phases were separated. The aqueous layer was extracted with ethyl acetate. The combined organic layers were washed with water, saturated NaCl solution, and then concentrated under reduced pressure to give an oil that was purified by flash column chromatography (silica, 1: 1 hexane / ethyl acetate) (1.41 g, 101%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.80 (m, 1H); 2.05 (m, 2H); 2.26 (m, 1H); 3.93 (m, 2H); 4.04 (m, 2H); 4.47 (m, 0.5H); 4.61 (m, 0.5 H); 5.57 (m, 0.5H); 5.66 (m, 0.5H); 6.88 (m, 2H); 6.98 (m, 2H).
Preparation of 2S- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (t-butyldimethylsiloxy) tetrahydrofuran (Compound 303, FIG. 4)
To a solution of lactol 302 (1.41 g, 6.65 mmol) in methylene chloride (25 ml) was added with stirring imidazole (498.1 mg, 7.32 mmol) and TBDMS chloride (1.10 g, 7.32 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature overnight, then the reaction was filtered and the filtrate was concentrated. The crude product was purified by flash column chromatography using 9: 1 hexane / ethyl acetate as solvent to give a colorless oil (1.22 g, 56.2%) as a mixture of two diastereomers (approx. 2: 1) Got.¹H NMR (CDCl_Three): 0.11 (s, 6H); 0.90 (s, 9H); 1.80-2.10 (m, 3H); 2.22 (m, 1H); 3.91 (m, 2H); 4.38 (m, 0.33H); 4.50 (m , 0.67H); 5.52 (m, 0.33H); 5.59 (m, 0.67H); 6.86 (m, 2H); 6.96 (m, 2H).
2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-t-butyldimethylsiloxy-1-butynyl) tetrahydrofuran (compound 304, FIG. 4) and 2S, 5R-cis-2- (4 -Fluorophenoxymethyl) -5- (4-t-butyldimethylsiloxy-1-butynyl) tetrahydrofuran (Compound 305, FIG. 4)
To a solution of 303 (720 mg, 2.21 mmol) in dry methylene chloride (10 ml) cooled to −78 ° C., TMS bromide (349.8 μl, 2.65 mmol) was added with stirring. The reaction mixture was stirred at −78 ° C. for 4 hours. To another flask containing 4-t-butyldimethylsiloxy-1-butyne (812.8 mg, 4.42 mmol) and THF (10 ml) was added n-butyllithium (2.5 M in hexane, 2.65 ml, 6.63 mmol). After 30 minutes, the solution was transferred to the solution via cannula. After 2 hours, the reaction was added with saturated aqueous ammonium chloride, extracted with methylene chloride, dried over mgSO4, filtered and concentrated. Flash column chromatography (silica, 95: 5 hexane / ethyl acetate) gave two products: trans compound 304 (210 mg) and cis compound 305 (160 mg), and a mixture of these two compounds (50 mg). The total yield is 48.5%.¹H NMR (CDCl_Three): 304: 0.10 (s, 6H); 0.91 (s, 9H); 1.87 (m, 1H); 2.01 (m, 1H); 2.22 (m, 2H); 2.43 (t, 2H); 3.72 (t, 2H); 3.92 (d, 2H); 4.47 (m, 1H); 4.73 (m, 1H); 6.86 (m, 2H); 6.95 (t, 2H). 305: 0.09 (s, 6H); 0.90 (s , 9H); 1.92-2.20 (m, 4H); 2.42 (m, 2H); 3.70 (t, 2H); 3.92 (m, 1H); 4.07 (m, 1H); 4.29 (m, 1H); 4.62 ( m, 1H); 6.86 (m, 2H); 6.96 (t, 2H).
In the preparation of compounds 304 and 305, oxygen protecting groups known to those skilled in the art other than 4-t-butyldimethylsilyl can be optionally used.
In order to determine the stereochemistry of this molecule, NOE difference experiments were performed on both 304 and 305. In 304 NOE difference experiments, multiplet at 4.73 ppm was irradiated with very low specific frequency decoupling pulses and data was collected only to determine the presence of signal increase. This represents a positive NOE effect, indicating an intimate spatial relationship between these protons. In this experiment, NOE was found for multiplets at 2.22 ppm, which is a furan ring proton. Here, the multiplet at 4.47 ppm was irradiated with a very low specific frequency decoupling pulse, and data was collected only to measure the presence of an increase in signal. NOE was found for multiplets at 2.22 ppm, the furan ring proton. Another NOE was found for the proton at 3.92 ppm, which is a proton on the methylene adjacent to the multiplet, indicating that the multiplet represents a proton adjacent to the methylene.
In a 305 NOE difference experiment, the triplet at 4.62 ppm was irradiated with a very low specific frequency decoupling pulse, and data was collected only to determine the presence of an increase in signal. This represents a positive NOE effect, indicating an intimate spatial relationship between these protons. In this experiment, NOE was found for multiplets at 4.29 ppm, another methine furan proton. Another NOE was found for the multiplet at 2.17 ppm, the furan proton. Here, a very low specific frequency decoupling pulse was irradiated to the multiplet at 4.29 ppm, and data was collected only to measure the presence of an increase in signal. NOE was found for triplets at 4.62 ppm, another methine furan proton. Another NOE was also found for protons at 3.92 and 4.07 ppm, which are protons on methylene close to the multiplet, indicating that the multiplet represents a proton close to methylene. Another NOE was found for multiplets at 2.11 ppm, which is a furan proton.
Preparation of 2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-t-hydroxy-1-butyl) tetrahydrofuran (Compound 306, Figure 4)
To a solution of 304 (210 mg, 0.54 mmol) in THF (1.4 ml) cooled in an ice bath, tetrabutylammonium fluoride (420.3 mg, 1.61 mmol) was added with stirring. The ice bath was removed and the reaction was stirred at room temperature for 1 hour. The solvent was removed and the product was separated by flash chromatography (silica, 1: 1 hexane / ethyl acetate) (124 mg, 83.2%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.88 (m, 1H); 2.02 (m, 1H); 2.25 (m, 2H); 2.50 (m, 2H); 3.72 (t, 2H); 3.93 (d, 2H); 4.48 (m, 1H) ; 4.76 (m, 1H); 6.84 (m, 2H); 6.96 (t, 2H).
Preparation of 2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N, O-bisphenoxycarbonylhydroxylamino-1-butynyl) tetrahydrofuran (Compound 307, FIG. 4)
Cooled (ice bath) compound 306 (124.0 mg, 0.45 mmol), triphenylphosphine (128.9 mg, 0.49 mmol) and N, O-bisphenoxycarbonyl hydroxylamine (147.3 mg, 0.54 mmol) in THF (5 ml). To the solution was added diisopropoxyl-azodicarboxylate (94.1 μl, 0.48 mmol). The ice bath was removed and the reaction was warmed to room temperature and stirred at room temperature for 30 minutes. The solvent was removed and the product was purified by flash column chromatography (silica, 4: 1 hexane / ethyl acetate) (195 mg, 82.0%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.85 (m, 1H); 2.03 (m, 1H); 2.22 (m, 2H); 2.75 (m, 2H); 3.92 (d, 2H); 4.05 (m, 2H); 4.47 (m, 1H) ; 4.76 (m, 1H); 6.84 (m, 2H); 6.95 (m, 2H); 7.26 (m, 5H); 7.41 (m, 5H).
Preparation of 2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran (Compound 401, FIG. 4)
NH at -78 ° C in a container with a head screw_ThreeWas charged (about 1 to 2 ml). Compound 307 (195.0 mg, 0.37 mmol) previously dissolved in 20 ml of methanol was added to the cold liquid nitrogen. The vessel was sealed and removed with a dry ice bath. The reaction mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was again cooled in a dry ice bath and the pressure was released. The container was opened and the solvent was removed. The product was isolated by flash column chromatography using ethyl acetate as solvent to give a solid (108 mg, 91.7%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.84 (m, 1H); 2.01 (m, 1H); 2.22 (m, 2H); 2.55 (t, 2H); 3.75 (t, 2H); 3.94 (m, 2H); 4.48 (m, 1H) ; 4.74 (t, 1H); 5.25 (bs, 2H); 6.86 (m, 2H); 6.98 (m, 2H).
Preparation of 2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran (Compound 402)
Compound 1 (75 mg, 0.23 mmol) was dissolved in 2 ml of ethyl acetate, then Pd / C (10%) (15 mg) was added and hydrogenated at balloon pressure for 16 hours. The reaction solution was filtered and the filtrate was concentrated. The product was isolated by flash column chromatography using ethyl acetate as solvent (70 mg, 92.2%).¹H NMR (CDCl_Three): 1.50-1.70 (m, 8H); 2.10 (m, 2H); 3.58 (m, 2H); 3.91 (m, 2H); 4.08 (m, 1H); 4.40 (m, 1H); 5.15 (bs, 2H); 6.87 (m, 2H); 6.97 (t, 2H); 7.40 (bs, 1H).
II. Pharmaceutical composition
Humans, horses, dogs, cows and other animals, particularly mammals, suffering from inflammatory diseases, particularly those mediated by PAF or 5-lipoxygenase products, are pharmaceutically acceptable to reduce the formation of oxygen radicals The patient can be treated by administering an effective amount of one or more of the compounds, pharmaceutically acceptable derivatives or salts thereof contained in a carrier or diluent to the patient. The active material can be administered in liquid, cream, gel or solid or aerosol form by any suitable route, eg, oral, parenteral, intravenous, intradermal, subcutaneous or topical.
As used herein, the term “pharmaceutically acceptable salt or complex” refers to a salt or complex that retains the desired biological activity of the compound and exhibits minimal undesirable toxicological effects. Non-limiting examples of such salts include (a) acid addition salts formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid and nitric acid, and acetic acid, succinic acid, tartaric acid Formed with organic acids such as succinic acid, apple acid, ascorbic acid, benzoic acid, tannic acid, pamoic acid, arginic acid, polyglutamic acid, naphthalene sulfonic acid, naphthalene disulfonic acid and polygalacturonic acid (B) metal cations such as zinc, calcium, bismuth, barium, magnesium, aluminum, copper, cobalt, nickel, cadmium, sodium and potassium, or ammonia, N, N-dibenzylethylenediamine, D-glucosamine With base formed with cations formed from tetraethylammonium or ethylenediamine Including combinations or (c) and (a) and (b), for example, a zinc tannate salt or the like, a; salt. The compounds are also pharmaceutically acceptable quaternary salts known to those skilled in the art, in particular the formula —NR_Three ⁺In which R is alkyl or benzyl, and Z is chloride, bromide, iodide, -O-alkyl, toluenesulfonate, methylsulfonate, sulfonate, phosphate or carboxylate (eg, benzoate, succinate, acetate, glycolate, maleate , Which represents a counter ion, including malate, citrate, tartrate, ascorbate, benzoate, cinnamoate, mandeloate, benzyloate and diphenylacetate).
The active compound is included in a pharmaceutically acceptable carrier or diluent in an amount sufficient to be dispensed to the patient in a therapeutically effective amount without causing severe toxic effects in the patient being treated. A preferred dosage of active compound for all of the above symptoms is about 10 ng / kg to 300 mg / kg, preferably 0.1 to 100 mg / kg per day, more generally 0.5 to about 25 mg per kg patient weight per day. is there. A preferred dosage for cardiovascular indications is 10 ng / kg to 20 mg / kg. A typical topical dosage is 0.01 to 3% by weight / weight in a suitable carrier. The effective dosage range of a pharmaceutically acceptable derivative can be calculated based on the weight of the parent compound to be administered. If the derivative itself is active, the effective dosage can be estimated as described above using the weight of the derivative, or can be estimated using other means known to those skilled in the art.
The compound is conveniently administered in any suitable unit dosage form, including but not limited to those containing 1 to 3000 mg, preferably 5 to 500 mg of active ingredient per unit dosage form. It is usually convenient for the oral dosage to be 25-250 mg.
Preferably, the active ingredient is administered to achieve a peak plasma concentration of the active compound of about 0.00001-30 mM, preferably about 0.1-30 μM. This can be accomplished, for example, by intravenous infusion of a solution or composition of the active ingredient contained in saline or an aqueous medium, if desired, or by administration of the active ingredient as a bolus.
The concentration of the active compound in the drug composition depends on the absorption, distribution, inactivation and secretion rate of the drug, as well as other factors known to those skilled in the art. It should be noted that the dosage varies depending on the severity of the symptoms to be alleviated. Further, for any particular substance, the specific dosage should be adjusted over time according to the professional judgment of the person who controls or supervises the administration of the composition and the individual's needs, and the concentrations disclosed herein It should be understood that the ranges are exemplary only and are not intended to limit the scope of the claimed compositions or the practice. The active ingredient can be administered at once or divided into many smaller doses to be administered at varying time intervals.
Oral compositions are usually included in an inert diluent or edible carrier. They can be enclosed in gelatin capsules or compressed into tablets. For the purpose of oral therapeutic administration, the active compound can be incorporated with excipients and used in the form of tablets, troches, or capsules. Pharmaceutically compatible binding agents, and / or adjuvant materials can be included as part of the composition.
Tablets, pills, capsules, troches and the like can contain any of the following similar ingredients or compounds: a binder such as microcrystalline cellulose, gum tragacanth or gelatin; an additive such as starch or lactose. Dispersants such as form, alginic acid, Primogel or corn starch; lubricants such as magnesium stearate or Sterotes; lubricants such as colloidal silicon dioxide; sweeteners such as sucrose or saccharin; or peppermint, methyl salicylate Or a flavor such as an orange flavor. When the dosage unit form is a capsule, it can contain, in addition to the aforementioned types of materials, a liquid carrier such as a fatty oil. In addition, the dosage unit form can include various other materials that improve the physical form of the dosage unit, such as sugar coatings, shellac or enteric agents.
The active compound or pharmaceutically acceptable salt or derivative thereof can be administered as a component of an elixir, suspension, syrup, wafer or chewing gum. A syrup may contain, in addition to the active components, sucrose as a sweetening agent and certain preservatives, dyes and colorings and flavors.
The active compound or pharmaceutically acceptable salt or derivative thereof has the desired action, such as other active materials that do not impair the desired action, or antibiotics, antifungals, other anti-inflammatory or antiviral compounds. It can also be used by mixing with supplementary materials.
Solutions or suspensions used for parenteral, intradermal, subcutaneous or topical application may contain the following components: water for injection, saline solution, fixed oil, polyethylene glycol, glycerin, propylene glycol Or sterile diluents such as other synthetic solvents; bactericides such as benzyl alcohol or methyl paraben; antioxidants such as ascorbic acid or sodium bisulfite; chelating agents such as ethylenediaminetetraacetic acid; acetates, citrates or phosphates Buffers such as and drugs for adjusting tonicity such as sodium chloride or dextrose. The parenteral preparation can be enclosed in ampoules, disposable syringes or multiple dose vials made of glass or plastic.
When administered intravenously, preferred carriers are saline or phosphate buffered saline (PBS).
In one embodiment, the active compounds are prepared with carriers that will protect the compound against rapid elimination from the body, such as a controlled release formulation, including implants and microencapsulated dosage systems. Biodegradable and biocompatible polymers can be used such as ethylene vinyl acetate, polyanhydrides, polyglycolic acid, collagen, polyorthoesters, and polylactic acid. It will be clear to those skilled in the art how to prepare such formulations. These materials can also be obtained commercially from Alza (California) and Scios Nova (Baltimore, Maryland).
Liposomal suspensions can also be pharmaceutically acceptable carriers. These can be prepared according to methods known to those skilled in the art, for example, as disclosed in US Pat. No. 4,522,811, which is hereby incorporated by reference in its entirety. For example, liposomal formulations may be prepared by dissolving a suitable lipid (eg stearoyl phosphatidylethanolamine, stearoyl phosphatidylcholine, aracadyl phosphatidylcholine and cholesterol) in an inorganic solvent and then evaporating the inorganic solvent to a thin film of dry lipid on the surface of the container Can be prepared by leaving The active compound or its monophosphate, diphosphate and / or triphosphate derivatives are then introduced into the container. The container is then swirled by hand to remove the lipid material from the sides of the container and disperse the lipid aggregates, thereby forming a liposome suspension.
III. Biological activity
A wide variety of biological assays have been used to assess the ability of compounds, including the ability of compounds to bind to PAF receptors, to act as PAF receptor antagonists and the effect of compounds on various PAF-mediated pathways. Any of these known assays can be used to assess the ability of the compounds disclosed herein to act as PAF receptor antagonists.
For example, PAF is known to induce hemoconcentration and increased permeability of the microcirculation leading to a decrease in plasma volume. PAF-mediated acute circulatory collapse is used as the basis of an assay to assess the ability of a compound to act as a PAF antagonist by analyzing the effect of the compound on PAF-induced decreased plasma volume in animal models such as mice be able to.
Endotoxemia causes the release of chemical mediators including eicosanoids, PAF and ulcer necrosis factor (TNF) that stimulate various physiological responses including fever, hypotension, leukocytosis, and disturbance of glucose and lipid metabolism. Endotoxemia can lead to severe shock and death. Endotoxin-induced mouse mortality is a useful animal model for evaluating the pharmacological effects of compounds on endotoxic shock.
Two other common assays used to evaluate the ability of compounds to act as PAF receptor antagonists are Shen et al., “The Chemical and Biological Properties of PAF Agonists, which are platelet aggregation in vitro and hypotension in rats. Antagonists, and Biosynthetic Inhibitors ", Platelet-Activating Factor and Related Lipid Mediators, F. Snyder, Plenum Press, New York State 153 (1987).
A wide variety of biological assays have also been used to evaluate the ability of compounds to inhibit the enzyme 5-lipoxygenase. For example, cytosolic 5-lipoxygenase from rat basophilic leukemia cells (RBL) has been widely used in studies on leukotriene biosynthesis. Compounds that inhibit 5-lipoxygenase reduce the level of leukotrienes.
Another biological assay used to evaluate the ability of compounds to inhibit the enzyme 5-lipoxygenase is LTB from ionophore-stimulated human whole blood._FourBased on a classic pharmacological model of inflammation induced by inhibiting.
Example 5
Ability of compounds to bind to PAF receptors
(a) Preparation of human platelet thin film
Human platelet thin films are prepared from platelet concentrates obtained from the American Red Cross Blood Service (Dedham, Mass.). After washing several times with a platelet wash solution (150 mM NaCl, 10 mM Tris, and 2 mM EDTA, pH 7.5), the platelet pellet is washed with 5 mM MgCl.₂Resuspend at pH 7.0 in 10 mM Tris, and 2 mM EDTA. The cells are then quickly frozen in liquid nitrogen and thawed slowly at room temperature. Repeat the freezing and thawing procedure at least three times. To further separate the thin film fragments, the dissolved thin film suspension was diluted with 10 mM MgCl₂Layer on top of discontinuous sucrose gradients of 0.25, 1.03 and 1.5M sucrose prepared in 10 mM Tris, and 2 mM EDTA (pH 7.0) and centrifuge at 63,500 × g for 2 hours. A 0.25 to 1.03 M thin film fraction (thin film A) and a 1.03 to 1.5 M thin film fraction (thin film B) were collected separately. The protein concentration of the thin film preparation is determined by the Lowry's method using bovine serum albumin (BSA) as a standard. The membrane is then separated into small fractions (4 ml each), stored at -80 ° C and thawed before use.
(b) [^ThreeH] PAF binding inhibition
[^ThreeThe ability of H] PAF to bind to specific receptors on human platelet thin films is₂In the presence of pH 7.0 under the optimum conditions of pH 7.0. 10 mM MgCl₂In 10 mM Tris, and 0.25% BAS (pH 7.0) [^ThreeThin film protein (100 μg) is added to a final 0.5 ml solution containing H] PAF 0.15 pmol (0.3 nM concentration) and a known amount of unlabeled PAF or PAF receptor antagonist. After 4 hours incubation at 0 ° C., bound and unbound [^ThreeH] PAF is separated through Whatman GF / C glass fiber under reduced pressure. Under this assay condition, the filter binding [^ThreeNo degradation of H] PAF should be detected. Non-specific binding is defined as total binding in the presence of excess unlabeled PAF (1 mM) that is not displaced by either high concentrations of unlabeled PAF, PAF analogs or PAF receptor antagonists. Specific binding is defined as the difference between total binding and non-specific binding.
In order to determine the relative potency of the test compound, the total binding in the absence of inhibitor is 0% suppressed, and the total binding in the presence of 1 mM unlabeled PAF is 100% in the presence of inhibitor. [^ThreeH] PAF binding is normalized as% inhibition. The percent inhibition by compound can be calculated by the following formula:
% Inhibition = [(total binding−total binding in the presence of compound) / non-specific binding] × 100%
I c₅₀Is specific [^ThreeCalculated as the concentration of inhibitor required to obtain 50% inhibition of H] PAF binding and calculated by the non-linear regression computer software program, GraphPadInplot, version 3.0 (GraphPad Software, San Diego, Calif.).
Example 6
Effects of compounds on PAF-induced blood concentration
(a) animals
Female Charles CD-1 mice weighed 16-20 g are obtained from the Charles River Laboratory (Wilmington, Mass.). Optionally provide tap water and rodent laboratory chow (5001, Plinamills, St. Louis, MO). Mice are kept in the breeding room for an average of 4 days before use.
(b) Hematocrit measurement
PAF (1-O-alkyl-2-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine, Sigma Chemical) is dissolved in 0.25% bovine serum albumin (BAS) in 0.9% NaCl solution. Except for dose-response studies, 10 μg (10 ml / kg) of PAF solution is injected into the tail vein. All test compounds are dissolved in 0.5 DMSO saline solution and injected intravenously in an amount of 3 mg / kg body weight 15 minutes prior to the PAF trial. Thirty to fifty μl of blood is collected by cutting the tail end into a microhematocrit tube (O.D.1.50 mm) with heparin added 15 minutes after PAF administration. All test compounds are given intravenously in mice in an amount of 3 mg / kg 15 min before PAF (10 μg / kg, iv) or AA (0.5 mg / ear).
Example 7
Effects of compounds on cytosolic 5-lipoxygenase in rat basophil leukemia cells.
(a) Enzyme preparation
Washed rat RBL cells (4 × 10 8) were suspended in 20 ml of pH 7.4 50 M potassium phosphate buffer containing 10% ethylene glycol / 1 mM EDTA (buffer A). The cell suspension was sonicated at 20 KHz for 30 seconds, and the sonicated material was centrifuged at 10,000 × g for 10 minutes, followed by further centrifugation at 105,000 × g for 1 hour. The supernatant solution (cytosol fraction) containing 5-lipoxygenase was stored at -70 ° C. Protein concentration was determined according to Bradford's procedure (Bradford Dye Reagent) using bovine serum albumin as a standard.
(b) Enzyme assay
In a normal assay for 5-lipoxygenase, the mixture is pH 7.4 potassium phosphate buffer 50 mM, 2 mM CaCl.₂2 mM ATP, 25 M lalachidonic acid (0.1 Ci) and enzyme (protein 50-100 mg) were included in a final volume of 200 liters. The reaction was carried out at 24 ° C. for 3 minutes. The mixture was extracted with 0.2 ml of ice-cold mixture of ethyl ether: methanol: 0.2M citric acid (= 30: 4: 1). The extract was subjected to thin layer chromatography at −10 ° C. in a solvent system of petroleum ether: ethyl ether: acetic acid (= 15: 85: 0.1). The silica gel areas corresponding to authentic arachidonic acid and its metabolites were scraped and placed in scintillation vials for counting. Enzyme activity was expressed as the amount of arachidonic acid oxidized in 3 minutes. In this assay, the representative compounds 9, 11, 14 and 15 described above showed activity.
Example 8
Inhibition of soluble 5-lipoxygenase in RBL-1 cell extracts
RBL-1 cells were grown in rotating flasks according to specifications from ATCC (2 × 10⁶/ ml). Cells were harvested and washed twice in calcium-free and magnesium-free PBS. Cells, 50 mM K₂HPO_Four pH7.4, 10% PEG-8000, 1 mM EDTA, 2 x 10 in 1 mM PMSF⁷Suspend at a concentration of / ml and then sonicate. The lysate is centrifuged at 100,000 × g for 1 hour at 4 ° C., the supernatant (cytosol) is removed and stored at −70 ° C.
The 5-L0 activity in the RBL-1 cytosol is determined as follows: 5 mM CaCl₂2mM ATP, 50mM K₂HPO_Four pH 7.4, varying concentrations of test compound (from 10 ml of compound dissolved in DMSO), and 50% [¹⁴C] 0.2 ml of a reaction solution consisting of RBL-1 cytosol at a concentration that converts the arachidonic acid base into an oxygenated product (determined experimentally for each site formulation) is incubated at room temperature for 10 minutes. From the ethanol reservoir [¹⁴C] The reaction is started by adding 5 ml of arachidonic acid (final concentration = 9.5 mM) and allowed to proceed for 3 minutes. The reaction is terminated by adding cold ethyl ether: methanol: 0.2 M citric acid (= 30: 4: 1) and centrifuged at 10,000 × g for 1 minute. 50 ml of the organic layer is taken out, placed in a glass capillary pipette, and dropped onto a silica gel 60A TLC plate (# LK6D manufactured by Whatman). Plates are developed in petroleum ether: ethyl ether: acetic acid (= 15; 85; 0.1) for 30 minutes at room temperature. Expose the plate to Kodak XAR-5 film for 24 hours. The film is developed and scanned using a densitometer to calculate the peak area of arachidonic acid and its product. % Inhibition was converted to oxygenated product in the sample containing the test compound relative to the control sample (not the test compound) [¹⁴C] Determined from the amount of arachidonic acid.
Table 5 provides data on the inhibition of soluble 5-lipoxygenase in RBL-1 cell extracts by racemic compound 202, and its enantiomers, compounds 216, 217, 234 and 236.
Example 9
Leukotriene B in ionophore-stimulated human whole blood_FourProduction control
Human blood is removed and placed in a blood collection tube supplemented with heparin, and 1 ml of it is placed in a 1.5 ml microfuge tube. 5 ml of test compound of different concentration dissolved in DMSO is added to the blood sample and incubated at 37 ° C. for 30 minutes. Calcium ionophore (5 ml) (A23187) in DMSO is added to a final concentration of 50 mM and the sample is incubated at 37 ° C. for 15 minutes. The sample is then centrifuged at 1100 × g (2500 rpm, H1000B rotor, Sorvall centrifuge) at 4 ° C. for 10 minutes. Transfer 100 ml of the supernatant to a 1.5 ml microtube, add 400 ml of cold ethanol and precipitate the protein on ice for 30 minutes. Samples are centrifuged at 110 xg for 10 minutes at 4 ° C and the supernatant is LTB using a commercial EIA kit (Cayman Chemical) according to the manufacturer's instructions._FourTest for.
Table 5 shows leukotriene B in racemic compound 202 and its enantiomers, compounds 216, 217, 234 and 236 in ionophore-stimulated human whole blood._FourData on production control is shown.
Example 9
Evaluation of pre-death (ex-vivo) mouse and rat whole blood 5-lipoxygenase
CD-1 female mice weighed 18-25 g and CD female rats weighed 150-230 g were obtained from Charles River Laboratory. The compound is dissolved in 0.5% DMSO in 0.9% NaCl for administration to mice (0.5 mg / ml) and alcohol vehicle (benzyl alcohol 2%, ethanol 1%, PEG300 for use in rats (5 mg / ml). 40%, propylene glycol 10%, DiH₂5% dextrose in O + 47% of 3.5% pluronic F-68). Animals were injected with compound (5 mg / ml) or the corresponding vehicle (0.5% DMSO in saline, 10 ml / kg for mice; alcohol vehicle, 1. ml / kg for rats) 15 min before sacrifice by decapitation. Whole blood (0.3 ml) supplemented with heparin was added into a 1.5 ml Eppendorf centrifuge tube containing 3 ml of 2 mM calcium ionophore A23187 (final concentration of A23187 is 20 mM). Samples were incubated for 30 minutes in a 37 ° C. water bath and then centrifuged for 2 minutes. Dilute plasma (x120) and use EIA to remove LTB_FourTested for
Table 5 provides data for premature mouse and rat whole blood 5-lipoxygenase values for the administration of racemic compound 202, and its enantiomers, compounds 216, 217, 234 and 236.
Example 10
Glucuronidation rate
Glucuronidation rate is a measure of the in vivo metabolic stability of the compounds disclosed herein.
In vitro glucuronidation reaction was performed using a reaction mixture containing human microsomal protein 2 mg / ml, 5 mM magnesium chloride, 100 mM Tris HCl (pH = 7.4), 0.1-1.0 mM base and 3 mM UDP-glucuronic acid. After incubation at 37 ° C. for 0 (control), 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, and 240 minutes, 40 μl of the reaction mixture was mixed with 80 μl of acetonitrile and centrifuged to remove the precipitated protein. An aliquot of the supernatant was analyzed by reverse phase HPLC to determine parent compound disappearance and metabolite formation.
Table 5 provides glucuronidation rate data for racemic compound 202 and its enantiomers, compounds 216, 217, 234 and 236, and FIG. 2 shows it.
FIG. 3 shows the glucuronidation rate of the indicated enantiomer.
Example 11
Effects of compounds on cytosolic 5-lipoxygenase in rat basophil leukemia cells
RBL-2H3 cells were grown in tissue culture flasks by Carter et al. (J Pharm Exp Ther 256 (3); 929-937, 1991). Cells were harvested and washed 5 times in calcium and magnesium free D-PBS. Cells were 2 × 10 in 10 mM BES, 10 mM PIPES pH 6.8, 1 mM EDTA.⁷Suspend at a concentration of / ml and then sonicate. The sonication product was centrifuged at 20,000 × g at 4 ° C. for 20 minutes. Next, the supernatant (cytosol) is removed and stored at -70 ° C.
The 5-L0 activity in the RBL-2H3 formulation is determined as follows: 0.7 mM CaCl₂, 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 10 mM BES, 10MM PIPES pH 7.4, test compounds dissolved in varying concentrations of DMSO (finally 7.5% DMSO in the assay), and 15% arachidonic acid base mixture oxygenated 0.1 ml of the reaction solution consisting of the RBL-2H3 preparation in an amount to be converted into a product (determined experimentally for each RBL-2H3 preparation) is incubated at room temperature for 20 minutes. 5 μl of arachidonic acid base mixture (0.028% NH per assay)_FourDuring OH [¹⁴C] arachidonic acid 0.944 nmol and arachidonic acid 6.06 nmol) are added and allowed to proceed at 37 ° C. for 5 minutes. The reaction was terminated by adding 0.12 ml of (i) triphenylphosphine 1.66 mg / ml in ethyl ether; (ii) methanol; and (iii) a mixture of 0.2 M citric acid (= 30: 4: 1) Centrifuge at 1000 xg for 1 minute. 50 μl of the organic layer is removed and placed in a glass capillary pipette and dropped onto a silica gel 60A TLC plate (# 6KDF manufactured by Whatman). The plate is developed in ethyl ether: acetic acid (= 100: 0.1) for 25 minutes at room temperature. Expose the plate to Kodak X-OMAT AR film for 40 hours. The film is developed and scanned using a densitometer to calculate the peak area of arachidonic acid and its product. % Inhibition was converted to oxygenated product in the sample containing the test compound relative to the control sample (not the test compound) [¹⁴C] Determined from the amount of arachidonic acid.
The results are shown in Table 4.
Example 12
Leukotriene B in ionophore-stimulated human whole blood_FourProduction control
Human blood is removed and placed in a blood collection tube supplemented with heparin, and 1 ml of this is placed in a 1.5 ml microtube. Different concentrations of test compound (5 ml) dissolved in DMSO are added to the blood sample and incubated at 37 ° C. for 15 minutes. Calcium ionophore (5 ml, A23187) in DMSO is added to a final concentration of 50 mM and the sample is incubated at 37 ° C. for 30 minutes. The sample is then centrifuged at 1100 × g (2500 rpm, H1000B rotor, Sorvall centrifuge) at 40 ° C. for 10 minutes. The supernatant (100 ml) is transferred to a 1.5 ml microtube, 400 ml of cold ethanol is added and the protein is allowed to settle on ice for 30 minutes. Samples are centrifuged at 110 xg for 10 minutes at 4 ° C and the supernatant is LTB using a commercially available EIA kit (Cayman Chemical) according to the manufacturer's specifications according to the instructions._FourTest for.
The results are shown in Table 5.

Example 4
Premature mouse whole blood 5-lipoxygenase evaluation
CD-1 female mice weighed 18-25 g and CD female rats weighed 150-230 g were obtained from Charles River Laboratory. The compound is dissolved in 0.5% DMSO in 0.9% NaCl for administration to mice (0.5 mg / ml) and alcohol vehicle (benzyl alcohol 2%, ethanol 1%, PEG300 for use in rats (5 mg / ml). 40%, propylene glycol 10%, DiH₂5% dextrose in O + 47% of 3.5% Pluronic F-68). Animals were injected with compound (5 mg / ml) or the corresponding vehicle (0.5% DMSO in saline, 10 ml / kg for mice; alcohol vehicle, 1 ml / kg for rats) 15 min before sacrifice by decapitation. Whole blood (0.3 ml) supplemented with heparin was added to a 1.5 ml Eppendorf centrifuge tube containing 3 ml of 2 mM calcium ionophore A23187 (final concentration of A23187 is 20 mM). Samples were incubated for 30 minutes in a 37 ° C. water bath and then centrifuged for 2 minutes. Dilute plasma (x120) and use EIA to remove LTB_FourTested for
The results are shown in Table 5.
Example 5
Glucuronidation research
Glucuronidation rate is a measure of the in vivo metabolic stability of the compounds disclosed herein.
In vitro glucuronidation reaction was performed using a reaction mixture containing human microsomal protein 2 mg / ml, 5 mM magnesium chloride, 100 mM Tris HCl (pH = 7.4), 0.1-1.0 mM base and 3 mM UDP-glucuronic acid. After incubation at 37 ° C. for 0 (control), 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, and 240 minutes, 40 μl of the reaction mixture was mixed with 80 μl of acetonitrile and centrifuged to remove the precipitated protein. An aliquot of the supernatant was analyzed by reverse phase HPLC to determine parent compound disappearance and metabolite formation.
The results are shown in Table 5.
Example 6
Eosinophil infiltration assay
Inflammatory cell accumulation in the lung is one of the pathogenic features of asthma. After allergen was inhaled by the patient, an increase in white blood cells, particularly eosinophils, was observed in the blood and lung lavage fluid. Eosinophils appear to be important effector cells that have the effect of releasing the cytotoxic properties of particulate proteins and inflammatory mediators in allergic inflammation. Prevention of allergen-induced eosinophil influx into the lung is considered a compelling goal for new anti-asthma drugs.
Leukotriene is a product of the arachidonic acid 5-lipoxygenase (5-LO) pathway. Lipoxygenase metabolites (LTB_Four5-oxo-15-hydroxy-eicosatetraenoic acid) has been identified as having potent activity on supplemented eosinophils. 5-LO inhibitors that can block acute bronchoconstriction and reduce the subsequent accumulation of eosinophils in lung cells resulting in the action of allergens, for the prevention and treatment of asthma Can be beneficial.
Eosinophil infiltration into the lung can be measured by counting the number of cells in allergen-induced guinea pigs or bronchoalveolar lavage fluid (BALF) from mice.
Guinea pig model: Female Hartley guinea pigs weighing 400-500 g, 20 μg OVA in 0.5 ml 0.9% NaCl and Al (OH)_Three 100 mg was sensitized to ovalbumin (OVA) by intraperitoneal injection on days 1 and 2. Animals were treated with 0.5% OVA (in 0.9% NaCl) aerosol on days 15 and 16. Compounds were prepared in 10% PEG200 or 0.5% carboxymethylcellulose and administered orally 3 times (1 hour before each treatment and between 2 treatments). To prevent histamine release-induced death, pyriramine (3 mg / kg, ip) was given 15 minutes before each treatment. 24 hours after the first treatment (or 4 hours after the last treatment), blood was drawn from the carotid artery of the animal under anesthesia. DPBS (w / o Ca²⁺, Mg²⁺BAL was performed by tracheal cannulation at 37 ° C. using 0.5 mM EDTA 2 × 10 ml. The total number of cells in the BAL fluid was measured with a Sysmex microcell counter (F-800) to count the cells that were different in the cytospin formulation. % Inhibition on total cell or eosinophil accumulation = [(vehicle-sham)-(treated product-fake)] / (vehicle-fake) × 100.
Mouse model: male C57 BL / 6 male mice weighing 21-23 g, 10 μg OVA and Al (OH) in 0.2 ml 0.9% NaCl_ThreeSensitization to OVA was performed by administering 1 mg on day 1. Hypersensitivity developed after inhalation of aerosolized 1% OVA or saline for 30 minutes daily on days 14-21. Compounds were prepared in 10% PEG200 or 0.5% carboxymethylcellulose and administered orally in an amount of 20 mg / kg twice daily from day 18 to day 22. Four hours after the last OVA aspiration, blood was drawn from the carotid artery of the animal under anesthesia. DPBS (w / o Ca containing 0.5 mM sodium EDTA)²⁺, Mg²⁺) BAL was performed by tracheal cannulation at 37 ° C. with 2 × 1 ml. The total cell number in the BAL fluid was measured by a Sysmex microcell counter (F-800). Differentiated cells in BAL fluid were counted with a Sysmex microcell counter (F-800). Different cells were counted on cytospin formulation and white Giemsa dye. % Inhibition on total cell or eosinophil accumulation = [(vehicle-fake)-(treated product-fake)] / (vehicle-fake) × 100. (Yeadon et al. Agents Actions, 38, 8-17, 1993; Brusselle GG et al., ALA'94, A754; Schwenk U. et al., J. Biol. Biochem. 267: 12482-12488, 1992. Year; and Clinic M. et al., Cur. Poin. Immunol. Vol. 6, 860-864, 1994)

Modifications and variations of the invention relating to compounds that reduce the formation of oxygen radicals during inflammatory or immune reactions will be apparent to those skilled in the art from the foregoing detailed description of the invention. Such modifications and variations are intended to fall within the scope of the appended claims.

Claims (7)

Compound represented by the following formula (I):

Wherein Ar is phenyl, trimethoxyphenyl, dimethoxyphenyl, fluorophenyl, or difluorophenyl;
m is zero;
n is 1-6;
W is -AN (OM) C (O) N (R 3) R 4;
A is lower alkynyl;
M is hydrogen or a pharmaceutically acceptable cation;
X, Y and Z are O (oxygen);
R1, R2, R3 and R4 are independently hydrogen or lower alkyl;
It is. The compound of claim 1, wherein Ar is 4-fluorophenyl. 3. A compound according to claim 1 or 2 that is at least 97% enantiomeric rich. 2. The compound of claim 1 which is 2S, 5R-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran. 2. The compound of claim 1 which is 2S, 5S-trans-2- (4-fluorophenoxymethyl) -5- (4-N-hydroxyureidyl-1-butynyl) tetrahydrofuran. A pharmaceutical composition for the treatment or prevention of inflammatory diseases, comprising the compound according to any one of claims 1 to 5 or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier. A method for producing a medicament for treating an inflammatory disease, comprising using the compound according to any one of claims 1 to 5 or a pharmaceutically acceptable salt.

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