JP3755019B2

JP3755019B2 - Radiation damage protection agent containing ribofuranose derivative

Info

Publication number: JP3755019B2
Application number: JP07388394A
Authority: JP
Inventors: 興一安藤; 真理三沢; 三千代宮口; 孝司木内; 奈妥森重; 正三塩崎
Original assignee: National Institute of Radiological Sciences
Current assignee: National Institute of Radiological Sciences
Priority date: 1994-03-18
Filing date: 1994-03-18
Publication date: 2006-03-15
Anticipated expiration: 2021-03-15
Also published as: JPH07258283A

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、リボフラノース誘導体を有効成分とする放射線障害防護剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
日本人の死因の約１／４は癌であり、癌患者は今後とも増加すると予測されている。癌の治療方法の主なものは外科手術、放射線療法、化学療法であり、現在、これらを組み合わせた治療が行われている。
【０００３】
放射線療法は、外科手術と並んで癌治療の根本的治療法であるが、放射線被曝による患者への様々な障害の出現が、放射線療法の有用性への評価、期待を減弱せしめている。放射線照射により惹起される様々な障害を防護できる予防・治療剤を開発できれは、放射線療法において患部に照射できる放射線を飛躍的に増量することが可能となり、放射線による癌の治療効果を更に高めることに寄与することができる。
【０００４】
放射線の障害を防護する薬剤として、従来、含硫アミン化合物等が検討されてきたが臨床に適用されるまでに到っていない。最近、放射線障害防護剤としてアミフォスチン（ＳｅｍｉｎａｒｓｉｎＯｎｃｏｌｏｇｙ，８，６５（１９８１））の臨床治験がなされているが、副作用の点で問題が存在する。
【０００５】
米国特許公報第４４２０４８９号は５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボース等の環内に硫黄原子を有する糖化合物の放射線障害防護作用を開示しているが、臨床に供与できるだけの強い効果に到っていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、新たな放射線障害防護活性を有する化合物を見出すべく鋭意研究を行った結果、新規なリボフラノース誘導体が優れた放射線障害防護作用を有することを見出し、本発明を完成するに到った。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
かくして本発明によれば、一般式（１）
【化２】

（式中、Ｒ¹は分岐していてもよい炭素数１〜６個の低級アルキル基を示し、Ｒ²とＲ³はそれぞれ独立して水素原子、または分岐していてもよい低級アルキル基、或いは一緒になってアルキリデン基を示す。）で表されるリボフラノース誘導体を有効成分とする放射線障害防護剤が提供される。
【０００８】
上記式（１）において、Ｒ¹は炭素数１〜６個の分岐していてもよい低級アルキル基であり、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、２−メチルペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、４−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基などが挙げられ、好適にはエチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基などである。
【０００９】
Ｒ²，Ｒ³はそれぞれ独立して水素原子、または分岐していてもよい低級アルキル基、或いは一緒になってアルキリデン基を示す。分岐していてもよい低級アルキル基としては、通常炭素数が１〜６個であり、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、２−メチルペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、４−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３，３−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基などが挙げられ、好適にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基などである。また、アルキリデン基としては一般的には炭素数が１〜８個のアルキリデン基であり、具体的にはメチリデン基、エチリデン基、プロピリデン基、イソプロピリデン基、ブチリデン基、イソブチリデン基、ペンチリデン基、イソペンチリデン基、ヘキシリデン基、シクロヘキシリデン基、ベンジリデン基などが挙げられ、好適にはイソプロピリデン基、ベンジリデン基、シクロヘキシリデン基などであり、更に好適にはイソプロピリデン基である。
【００１０】
本発明の一般式（１）で表され、放射線防護剤として使用される新規なリボフラノース誘導体の具体例としては、例えばメチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−メチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−エチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−イソペンチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−ジメチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−ジエチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−イソプロピル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−エチル−３−Ｏ−ｎ−プロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−メチル−３−Ｏ−ｔ−ブチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−イソブチル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−ｓ−ブチル−３−Ｏ−メチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−メチル−３−Ｏ−イソペンチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−（２−メチルペンチル）−３−Ｏ−イソペンチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−メチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−イソプロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−ｎ−ブチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−（１ ' ，１ ' −ジメチルブチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−（１ ' ，３ ' −ジメチルブチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−ｎ−プロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−ｎ−ヘキシル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−（２ ' ，３ ' −ジメチルブチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−（４ ' −メチルペンチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドなどが例示され、好適には、メチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−ジメチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２，３−Ｏ−ジエチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−イソプロピル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル２−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、メチル３−Ｏ−ｎ−プロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドなどであり、１位のα，β立体異性体は、各々単独あるいは混合物のいずれであっても本発明に包含される。
【００１１】
あるいは、例えばエチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−ブチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｔ−ブチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｓ−ブチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−アセチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−プロピオニル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−ベンゾイル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、エチル２−Ｏ−メチル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル２−Ｏ−（４−メチルペンチル）−３−Ｏ−イソブチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル２−Ｏ−エチル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｔ−ブチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−アセチル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、エチル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−アセチル−２，３−Ｏ−ヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、エチル２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｔ−ブチル２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−アセチル−２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−プロピオニル−２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、ｎ−プロピル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−ブチリル−２，３−Ｏ−メチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、２，３−ジメチルブチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル２，３−Ｏ−メチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル２，３−Ｏ−エチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−プロピオニル−２，３−Ｏ−イソペンチリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−バレリル−２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−ベンゾイル−２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、エチル２−Ｏ−メチル−３−Ｏ−メチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル２−Ｏ−エチル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル２−Ｏ−イソプロピル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−ブチル２−Ｏ−エチル−３−Ｏ−ｎ−プロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソブチル２−Ｏ−メチル−３−Ｏ−ｔ−ブチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−ペンチル２−Ｏ−イソブチル−３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ネオペンチル２−Ｏ−ｓ−ブチル−３−Ｏ−メチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、２，３−ジメチルブチル２−Ｏ−メチル−３−Ｏ−イソペンチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル２−Ｏ−（２−メチルペンチル）−３−Ｏ−イソペンチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル２−Ｏ−メチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、プロピル２−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−ブチル２−Ｏ−イソプロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｓ−ブチル２−Ｏ−ｎ−ブチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、２−メチルペンチル２−Ｏ−（１，１−ジメチルブチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−ヘキシル２−Ｏ−（１，３−ジメチルブチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、エチル３−Ｏ−エチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、４−メチルペンチル３−Ｏ−ｎ−プロピル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、２−メチルペンチル３−Ｏ−ｎ−ヘキシル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１，１−ジメチルブチル３−Ｏ−（２，３−ジメチルブチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、２，３−ジメチルブチル３−Ｏ−（４−メチルペンチル）−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドなどが例示され、好適には、エチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｔ−ブチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−アセチル−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、エチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｔ−ブチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、１−Ｏ−アセチル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−プロピオニル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、エチル２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｎ−プロピル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、イソプロピル２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド、ｔ−ブチル２，３−Ｏ−ベンジリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−アセチル−２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノース、１−Ｏ−プロピオニル−２，３−Ｏ−シクロヘキシリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノースなどであり、１位のα，β立体異性体は、各々単独あるいは混合物のいずれであっても本発明に包含される。
【００１２】
本発明の化合物は、市場から入手可能なＤ−リボースや、アデノシン、グアノシン、シチジン、ウリジンなどのリボヌクレオシドから、常法にしたがって容易に合成できる。たとえば、Ｄ−リボースの１位のヒドロキシル基を酸性レジンなどのような酸性触媒存在下でアルコールと反応させてアルコキシル基とし、ついでＤ−リボースの２および３位のヒドロキシル基を酸性レジンなどのような酸性触媒存在下でアルデヒドやケトンと反応させてアセタールとして、Ｄ−リボースの１，２，３位のヒドロキシル基を保護したのち、Ｄ−リボースの５位のヒドロキシル基をトシルクロライドなどで活性化してチオ酢酸カリウムなどを反応させると本発明の化合物のうち２および３位がＯ−アルキリデン基である化合物が得られる。また、２および３位のＯ−アルキリデン基を除去した後に、Ｄ−リボースの２，３位をトシルクロライドやナトリウムハイドライドなどで活性化させてアルコールや塩化物等と反応させれば、本発明の化合物のうち２および３位の酸素原子にそれぞれ分岐してもよい炭素数１〜６の低級アルキル基が結合した本発明の化合物が得られる。
【００１３】
１位のヒドロキシル基をアルコキシル基に変換するため用いられるアルコールは、常法にて用いられるものであり、具体例としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、ｓ−ブタノール、ｔ−ブタノール、イソブタノール、ｎ−ペンタノール、イソペンタノール、ネオペンタノール、ｎ−ヘキサノール、４−メチルペンタノール、３−メチルペンタノール、２−メチルペンタノール、３，３−ジメチルブタノール、２，２−ジメチルブタノール、１，１−ジメチルブタノール、１，２−ジメチルブタノール、１，３−ジメチルブタノール、２，３−ジメチルブタノールなどの炭素数１〜６の低級アルコールが挙げられる。２，３位のヒドロキシル基をアセタールに変換するため用いられるアルデヒドやケトンは、常法にて用いられるものであり、具体例としては、ホルムアルデヒド、アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド、ブチルアルデヒド、イソブチルアルデヒド、ペンチルアルデヒド、ヘキシルアルデヒド、ヘプチルアルデヒド、ベンジルアルデヒドなどのアルデヒド類やアセトン、エチルメチルケトン、ジエチルケトン、ジプロピルケトン、エチルプロピルケトン、ジ−ｔ−ブチルケトン、シクロペンチルケトン、シクロヘキシルケトンなどのケトン類が例示される。
これらのなかでも反応性の観点からエタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｓ−ブタノール、ｔ−ブタノールなどが好ましい。
【００１４】
化合物の合成に際しての反応条件は常法に従って設定すればよく、特に限定されないが、通常−５℃〜１５０℃、５分〜２４時間程度の条件下で反応させる。また、用いられる溶媒についても常法に従って選択することができるが、通常、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、無水ピリジン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドなどの溶媒の中から、反応を阻害せず出発物質が溶解可能なものを選択し、単独もしくは組み合わせて使用すればよい。反応終了後、化合物は常法に従って反応混和物から採取される。例えば、熱時に反応液中の不溶物を濾別し濾液中に析出した結晶を濾取し再結晶したり、クロマトグラフイー等によって更に精製することができる。
【００１５】
これらの化合物を放射線障害防護剤として用いるに際しては、上記医薬的に許容しうる担体もしくは希釈剤などを含有した医薬品組成物として使用することができ、その剤型は適宜選択できる。例えば、液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、腸溶剤およびカプセル剤などの経口剤や、注射剤、坐剤などの非経口剤が挙げられる。
【００１６】
製剤方法は常法に従えばよく、例えば、本発明の化合物と医薬的に許容し得る担体もしくは希釈剤、更には、安定剤その他所望の添加剤を配合し、所望の剤型とすることができる。このような担体もしくは希釈剤の例としては、例えば、澱粉類、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、デキストリン、マンニット、ソルビット、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、トラガカントゴム、ゼラチン、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、微結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、寒天、アルギン酸ナトリウム、カオリンなどの固体希釈剤や、例えば、水、生理食塩水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコ−ル、グリセリン、ハルトマン液、リンゲル液などの液体希釈剤をあげることができる。この際、普通用いられる安定剤等を含有してもよい。
【００１７】
本発明の放射線障害防護剤が経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年齢、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で、本発明の化合物を１日０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲で使用することができる。また、静注、皮下注、筋肉注射など、非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年齢、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で本発明の化合物を１日０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲で使用することができる。
【００１８】
【発明の効果】
かくして本発明によれば、放射線障害防護活性を有するリボフラノース誘導体が得られ、試薬、医薬品およびその中間体として有用である。
【００１９】
【実施例】
本発明のリボフラノース誘導体および放射線障害防護剤について具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限られるものではない。
（合成例１）エチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドの合成。
Ｄ−リボース（５０ｇ）をエタノール（３５０ｍｌ）およびアセトン（３５０ｍｌ）の混合溶液に溶解し、アンバーリスト１５（１０ｇ；米国ローム＆ハース社製）を加えて８０℃で３時間加熱還流した。反応後、室温まで冷却して、アンバーリストを濾別し、濾液をクロロホルムで抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮して得られた粗シロップ（６９ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム）に付し中間体４９ｇを得た。このうち３０ｇに無水ピリジン（６０ｍｌ）を加え溶解し、室温撹拌下、トシルクロライド（２７．６ｇ）を加え、室温で２時間撹拌後、更に７０℃として５時間加熱撹拌した。反応液を室温まで放冷し、水を加えてクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を集めて希硫酸で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭（５ｇ）で処理後濃縮し、粗シロップ（６９ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ベンゼン／クロロホルム＝１／１）に付しトシル体２７ｇを得た。この濃縮物にジメチルホルムアミド（１５０ｍｌ）を加え溶解し、チオ酢酸カリ（８．４ｇ）を加えて７０℃で５時間加熱還流した。その後、反応液を減圧下濃縮し、水を加えてクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を集め、無水硫酸マグネシウムで乾燥し濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフイー（展開液；クロロホルム）で精製してエチル２，３−Ｏ−イソプロピデン−５−デオキシ−５−アセチルチオ−Ｄ−リボフラノシド（１９ｇ）を得た。次いでこの化合物をメタノール（１００ｍｌ）に溶解し、０．５Ｎナトリウムメトキシド／メタノール（３ｍｌ）溶液を加え、室温で一晩静置した。反応液を濃縮して得られた残査をカラムクロマトグラフイー（展開液；ベンゼン→クロロホルム）で精製することにより、エチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物１とする）を（９．４ｇ）得た。
この化合物は ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルから同定された。機器データを以下に示す。ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃ ，δ値）
１．１０〜１．２８（３Ｈ，ｔ）、１．３０（３Ｈ，ｓ）、１．４５（３Ｈ，ｓ）、２．４０〜３．００（２Ｈ，ｍ）、３．３０〜３．８２（２Ｈ，ｍ）、４．００〜４．２１（１Ｈ，ｂｒｓ）、４．５０〜４．７０（２Ｈ，ｍ）、５．０３（１Ｈ，ｓ）
【００２０】
（合成例２）イソプロピル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドの合成
合成例１でＤ−リボースを溶解させる混合溶液のエタノールをイソプロパノールに代えて同様の実験を行い、イソプロピル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物２という）を得た。この化合物は¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルから同定された。機器データを以下に示す。ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃ ，δ値）
１．１０〜１．２５（６Ｈ，ｄ）、１．３４（６Ｈ，ｓ）、２．４０〜３．００（２Ｈ，ｍ）、３．７３〜４．２５（２Ｈ，ｍ）、４．５４〜４．７６（２Ｈ，ｍ）、５．２０（１Ｈ，ｓ）
【００２１】
（合成例３）エチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドの合成
合成例１で得た化合物１（７．８ｇ）のメタノール（７８ｍｌ）溶液にアンバーリスト１５（２．４ｇ）を加えて窒素置換下、３０℃で４時間撹拌した。その後反応液を濾過し、濾液を濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフイー（クロロホルム：メタノール＝１００：０→９７：３）で精製することにより、エチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物３という）を（５．１ｇ）得た。この化合物は、¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルから同定された。機器データを以下に記す。
ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃ ，δ値）
１．０８〜１．３２（３Ｈ，ｔ）、２．６３〜２．９０（２Ｈ，ｍ）、３．４０〜４．３８（５Ｈ，ｍ）、４．８０〜５．００（１Ｈ，ｄ）
【００２２】
（合成例４）イソプロピル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドの合成
化合物２（１．０ｇ）から合成例３と同様にアンバーリスト１５で２，３位を脱保護し、シリカゲルカラムクロマトグラフイーで精製して、イソプロピル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物４という）を（７０ｍｇ）得た。この化合物は、¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルから同定された。機器データを以下に記す。
ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃ ，δ値）
１．２０〜１．２３（６Ｈ，ｄ）、２．９０〜３．２５（２Ｈ，ｍ）、３．９２〜４．３８（４Ｈ，ｍ）、５．０５（０．５Ｈ、ｄ，Ｊ_1、2＜１．０Ｈｚ，β−Ｈ−１）、５．１６（０．５Ｈ、ｄ，Ｊ_1、2＝３．０Ｈｚ，α−Ｈ−１）
【００２３】
（合成例５）メチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドの合成
Ｄ−リボース９５ｇをメタノールとアセトンの等比混合溶媒１３３０ｍｌに溶解させ、アンバーリスト１５（４７．５ｇ）を加えて７０℃で１．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却してアンバーリストを濾別し、濾液を溶媒を除去した。得られた残査にクロロホルム４００ｍｌを加えて水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し溶媒を除去した。次いで無水ピリジン１２０ｍｌに溶解させ、塩化パラトルエンスルホニル５９．６ｇを添加後、室温で２時間攪拌し、更に９５℃で２時間攪拌した。反応液を室温まで放冷した後、水を加えてクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を集めて希硫酸、希塩酸で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し溶媒を除去後、約７４ｇの無色粘性の液体を得た。
【００２４】
この液体３０ｇをジメチルホルムアミド２５０ｍｌに溶解させ、チオ酢酸カリ９．８ｇを加えて６０〜７０℃で５時間攪拌した。その後、反応液を減圧下濃縮し、水を加えてクロロホルムで抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を除去した。これをメタノール１１０ｍｌに溶解し、０．５Ｎナトリウムメトキシド／メタノール３．４ｍｌを加えて室温で一晩放置した。その後、反応液を濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフイー（ベンゼン→クロロホルム）で精製することにより、１位のα、β混合物であるメチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物５という）１７．１ｇを得た。更に化合物５をシリカゲルクロマトグラフィー（ベンゼン→クロロホルム）で精製し、１位のα体であるメチル２，３−Ｏ−イソプロピリデン−５−デオキシ−５−チオ−α−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物６という）を単離した。
【００２５】
（合成例６）メチル５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボフラノシドの合成。
化合物５（２ｇ）をメタノール２０ｍｌに溶解させ、アンバーリスト１５（０．６ｇ）を加えて窒素置換下、３０℃で４時間攪拌した。アンバーリストを濾別後、濾液を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフイー（クロロホルム：メタノール＝１００：０→９７：３）で精製することにより、メチル５−デオキシ−５−チオ−β−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物７という）０．５ｇを得た。
【００２６】
（合成例７）メチル５−デオキシ−５−チオ−α−Ｄ−リボフラノシドの合成。
化合物６（２ｇ）を合成例２と同様にしてアンバーリスト１５を用いて脱保護し、シリカゲルカラムクロマトグラフイーで精製することで、メチル５−デオキシ−５−チオ−α−Ｄ−リボフラノシド（以下、化合物８とする）を０．６ｇ得た。化合物８は化合物７との１位の立体異性体である。
【００２７】
（試験例１）ｉｎｖｉｖｏ放射線障害防護試験
動物は３ケ月齡のＣ３Ｈ／Ｈｅ雄性マウスを１群１０匹で使用した。化合物１および５は０．０５％のＴｗｅｅｎ８０に懸濁させ、化合物３、７および８は生理食塩水に溶解した。比較剤は５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボース（以下、比較剤１とする）を使用し、生理食塩水に溶解した。対照群には生理食塩水を投与した。薬剤濃度はマウス１０ｇ当たり投与液量が０．１ｍｌになるように調整し、それぞれ５００ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与した。薬剤投与１５分後に東芝製¹³⁷ Ｃｓ−γ線照射装置を用いて１０Ｇｙをマウスに全身照射し、以後、３０日間生死を判定した。この結果、化合物１および５は１５日目まで生存率は６０％以上で生存率が０％となるのは化合物１が１８日目、化合物５が１７日目であった。化合物３は３０日目でも生存率６０％以上であり、化合物７および８は３０日目でも生存率１００％であった。これに対して比較剤１の生存率は１０日目にすでに５０％であり、１３日目には生存率は０％となった。また、対照群では９日目にすでに生存率は５０％となり、１２日目には０％となった。
この結果から、化合物１、３、５、７および８は強い放射線障害防護作用を有していることが判った。また、その効果は１位の立体異性体の差なく発揮されている事も判った。
【００２８】
（試験例２）ｉｎｖｉｔｒｏ放射線障害防護試験
ヒト唾液腺腫瘍細胞２．５×１０⁵個を５ｍｌ照射用ボトルに播種し、２日間、３７℃下で培養した。化合物３、７および５−デオキシ−５−チオ−Ｄ−リボース（以下、比較剤１という）を所定量添加した牛胎児血清１０％入りＭＥＭ培地５ｍｌと交換後、３７℃で３０分間培養し、島津製シールド型信愛号２５０Ｘ線装置を用いて２００ＫＶ×１５Ａで７Ｇｙ照射した。照射後、無血清ＭＥＭ培地で洗浄し、０．１％トリプシンで細胞を剥離後、コールカウンターで細胞数を計測し、所定数を６ｃｍφのデイッシュに播種した。播種細胞数は１０日間培養後にコロニーが１００個前後できるように調整した。コロニーの染色はＳｏｌｕｔｉｏｎＶ（ＭｇＳＯ₄ ，７Ｈ₂Ｏ）で洗浄後、１０％ホルマリンで１０分以上固定した。次いで１％メチレンブルーで１分間染色後、水洗し、１００倍の顕微鏡下でコロニー数を計測した。生存率（Ｓ．Ｆ．）を下式から求めた。結果を図１に示した。
Ｓ．Ｆ．＝（照射コロニー数／播種細胞数）／（無照射コロニー数／播種細胞数）
【００２９】
【図１】
【００３０】
図１より、化合物３および７は比較剤１に比べて非常に強いｉｎｖｉｔｒｏ放射線障害防護効果を持つ事が判った。
【００３１】
（試験例３）毒性試験
実験動物は３ケ月齢の雄性Ｃ３Ｈ／Ｈｅマウスを１群１０匹で使用した。試験例１と同様に調整した化合物１、３、５、７および化合物８を腹腔内に１０００ｍｇ／ｋｇ投与して３０日間観察したが、異常な症状は認められず、死亡した個体も認められなかった。このことから、本発明の化合物１、３、５、７および８は極めて毒性の低い化合物であることが判った。
【００３２】
【図面の簡単な説明】
【図１】薬剤濃度と生存率の関係を示した図面である。[0001]
[Industrial application fields]
The present inventionRadiation damage protective agent containing ribofuranose derivative as active ingredientAbout.
[0002]
[Prior art]
About one quarter of Japanese deaths are cancer, and it is predicted that the number of cancer patients will continue to increase. The main treatment methods for cancer are surgery, radiation therapy, and chemotherapy, and currently a combination of these treatments is performed.
[0003]
Radiation therapy is a fundamental treatment for cancer treatment as well as surgery, but the appearance of various obstacles to patients due to radiation exposure has diminished the evaluation and expectation of the usefulness of radiation therapy. If a prophylactic / therapeutic agent capable of protecting various disorders caused by radiation irradiation can be developed, it will be possible to dramatically increase the amount of radiation that can be irradiated to the affected area in radiation therapy, and further enhance the therapeutic effect of cancer by radiation. Can contribute.
[0004]
Conventionally, sulfur-containing amine compounds and the like have been studied as drugs that protect against radiation damage, but have not yet been applied clinically. Recently, amifostine (Seminars in Oncology,865 (1981)), but there are problems in terms of side effects.
[0005]
U.S. Pat. No. 4,420,489 discloses a radiation damage protective action of a sugar compound having a sulfur atom in the ring such as 5-deoxy-5-thio-D-ribose. Not.
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
As a result of intensive studies to find a compound having a new radiation damage protection activity, the present inventors have found that a novel ribofuranose derivative has an excellent radiation damage protection action and have completed the present invention. It was.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
Thus, according to the present invention, the general formula (1)
[Chemical formula 2]

(Wherein R¹Represents a lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms which may be branched, and R²And R^ThreeEach independently represents a hydrogen atom, a lower alkyl group which may be branched, or an alkylidene group together. Ribofuranose derivatives represented byRadiation protection agent comprising.
[0008]
In the above formula (1), R¹Is carbon number1~ 6 lower alkyl groups which may be branched, specificallyMethyl group, Ethyl group, n-propyl group, isopropyl group, n-butyl group, isobutyl group, s-butyl group, t-butyl group, n-pentyl group, isopentyl group, 2-methylpentyl group, neopentyl group, n-hexyl Group, 4-methylpentyl group, 3-methylpentyl group, 2-methylpentyl group, 3,3-dimethylbutyl group, 2,2-dimethylbutyl group, 1,1-dimethylbutyl group, 1,2-dimethylbutyl Group, 1,3-dimethylbutyl group, 2,3-dimethylbutyl group and the like, preferably ethyl group, n-propyl group, isopropyl group, n-butyl group, isobutyl group and the like.
[0009]
R², R^ThreeEach independently represents a hydrogen atom, a lower alkyl group which may be branched, or an alkylidene group together. The lower alkyl group which may be branched usually has 1 to 6 carbon atoms, specifically, methyl group, ethyl group, n-propyl group, isopropyl group, n-butyl group, isobutyl group, s -Butyl group, t-butyl group, n-pentyl group, isopentyl group, 2-methylpentyl group, neopentyl group, n-hexyl group, 4-methylpentyl group, 3-methylpentyl group, 2-methylpentyl group, 3 , 3-dimethylbutyl group, 2,2-dimethylbutyl group, 1,1-dimethylbutyl group, 1,2-dimethylbutyl group, 1,3-dimethylbutyl group, 2,3-dimethylbutyl group, etc. Preferably a methyl group, an ethyl group, an n-propyl group, an isopropyl group, an n-butyl group, an isobutyl group, and the like. Further, the alkylidene group is generally an alkylidene group having 1 to 8 carbon atoms, and specifically includes a methylidene group, an ethylidene group, a propylidene group, an isopropylidene group, a butylidene group, an isobutylidene group, a pentylidene group, an isopropylene group, Examples thereof include a pentylidene group, a hexylidene group, a cyclohexylidene group, and a benzylidene group, preferably an isopropylidene group, a benzylidene group, a cyclohexylidene group, and more preferably an isopropylidene group.
[0010]
Represented by the general formula (1) of the present invention.Used as a radiation protection agentSpecific examples of novel ribofuranose derivatives includeFor example methyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-methylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-ethylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-isopentylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-dimethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-diethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-isopropyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-ethyl-3-On-propyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-methyl-3-Ot-butyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-isobutyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-s-butyl-3-O-methyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-methyl-3-O-isopentyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O- (2-methylpentyl) -3-O-isopentyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-methyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-isopropyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-n-butyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O- (1 ' , 1 ' -Dimethylbutyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O- (1 ' , 3 ' -Dimethylbutyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O-n-propyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O-n-hexyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O- (2 ' , 3 ' -Dimethylbutyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O- (4 ' -Methylpentyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside and the like, preferably methyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-dimethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2,3-O-diethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-isopropyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 2-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, methyl 3-O-n-propyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside and the α, β stereoisomers at the 1-position are included in the present invention, either alone or in a mixture. .
[0011]
Or, for example, ethyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-propyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-butyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, t-butyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, s-butyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-acetyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-propionyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-benzoyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, ethyl 2-O-methyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 2-O- (4-methylpentyl) -3-O-isobutyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-propyl 2-O-ethyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-propyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, t-butyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-acetyl-2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, ethyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-acetyl-2,3-O-hexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, ethyl 2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, t-butyl 2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-acetyl- 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-propionyl-2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribo Furanose, n-propyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-butyryl-2,3-O-methylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 2 , 3-Dimethylbutyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 2,3-O-methylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 2,3-O-ethylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-propionyl-2,3-O-isopentylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1 -O-valeryl-2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-benzoyl-2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio- D-ribofuranose, ethyl 2-O-methyl-3-O-methyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 2-O-ethyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n -Propyl 2-O-isopropyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-butyl 2-O-ethyl-3-On-propyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isobutyl 2-O-methyl-3-Ot-butyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-pentyl 2-O-isobutyl-3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, neopentyl 2-O-s-butyl-3-O-methyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 2,3-dimethylbutyl 2-O-methyl-3-O-isopentyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 2-O- (2-methylpentyl) -3-O-isopentyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 2-O-methyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, propyl 2-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-butyl 2-O-isopropyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, s-butyl 2-O-n-butyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 2-methylpentyl 2-O- (1,1-dimethylbutyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-hexyl 2-O- (1,3-dimethylbutyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, ethyl 3-O-ethyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 4-methylpentyl 3-O-n-propyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 2-methylpentyl 3-O-n-hexyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1,1-dimethylbutyl 3-O- (2,3-dimethylbutyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside 2,3-dimethylbutyl Examples include 3-O- (4-methylpentyl) -5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, preferably ethyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-propyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, t-butyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-acetyl-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, ethyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-propyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, t-butyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, 1-O-acetyl-2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1 -O-propionyl-2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, ethyl 2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, n-propyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside, isopropyl 2,3-O-cyclohexylidene-5-thio-D-ribofuranoside, t-butyl 2,3-O-benzylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-acetyl-2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, 1-O-propionyl-2,3-O-cyclohexylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranose, and the α-, β-stereoisomers at the 1-position are each singly or in a mixture. Even if included.
[0012]
The compound of the present invention can be easily synthesized from commercially available D-ribose and ribonucleosides such as adenosine, guanosine, cytidine, uridine and the like according to a conventional method. For example, the hydroxyl group at the 1-position of D-ribose is reacted with an alcohol in the presence of an acidic catalyst such as an acidic resin to form an alkoxyl group, and the hydroxyl groups at the 2- and 3-positions of D-ribose are then treated with an acidic resin or the like. After reacting with an aldehyde or ketone in the presence of an acidic catalyst to protect the 1,2- and 3-position hydroxyl groups of D-ribose as an acetal, the 5-position hydroxyl group of D-ribose is activated with tosyl chloride, etc. When potassium thioacetate or the like is reacted, a compound in which the 2- and 3-positions of the compound of the present invention are O-alkylidene groups is obtained. In addition, if the O-alkylidene group at the 2nd and 3rd positions is removed and then the 2nd and 3rd positions of D-ribose are activated with tosyl chloride, sodium hydride or the like to react with alcohol, chloride, etc. Among the compounds, the compound of the present invention is obtained in which a lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, which may be branched, is bonded to oxygen atoms at the 2 and 3 positions.
[0013]
The alcohol used for converting the hydroxyl group at the 1-position to an alkoxyl group is one used in a conventional manner, and specific examples include methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, s-butanol, t-butanol, isobutanol, n-pentanol, isopentanol, neopentanol, n-hexanol, 4-methylpentanol, 3-methylpentanol, 2-methylpentanol, 3,3-dimethylbutanol, 2 , 2-dimethylbutanol, 1,1-dimethylbutanol, 1,2-dimethylbutanol, 1,3-dimethylbutanol, 2,3-dimethylbutanol and the like, and lower alcohols having 1 to 6 carbon atoms. Aldehydes and ketones used for converting the hydroxyl groups at the 2- and 3-positions to acetals are those used in a conventional manner. Specific examples include formaldehyde, acetaldehyde, propionaldehyde, butyraldehyde, isobutyraldehyde, pentylaldehyde. And aldehydes such as hexyl aldehyde, heptyl aldehyde and benzyl aldehyde, and ketones such as acetone, ethyl methyl ketone, diethyl ketone, dipropyl ketone, ethyl propyl ketone, di-t-butyl ketone, cyclopentyl ketone and cyclohexyl ketone. .
Among these, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, s-butanol, t-butanol and the like are preferable from the viewpoint of reactivity.
[0014]
The reaction conditions for the synthesis of the compound may be set according to conventional methods and are not particularly limited, but the reaction is usually carried out under conditions of about -5 ° C to 150 ° C for 5 minutes to 24 hours. In addition, the solvent used can be selected according to a conventional method, but usually a solvent capable of dissolving the starting material without inhibiting the reaction from among solvents such as tetrahydrofuran, methylene chloride, anhydrous pyridine, dioxane, dimethylformamide and the like. May be selected and used alone or in combination. After completion of the reaction, the compound is collected from the reaction mixture according to a conventional method. For example, insolubles in the reaction solution can be filtered off during heating, and crystals precipitated in the filtrate can be collected by filtration and recrystallized, or further purified by chromatography or the like.
[0015]
When these compounds are used as radiation protection agents, they can be used as pharmaceutical compositions containing the pharmaceutically acceptable carrier or diluent, and the dosage form can be appropriately selected. For example, oral preparations such as liquids, powders, granules, tablets, intestinal solvents and capsules, and parenteral preparations such as injections and suppositories can be mentioned.
[0016]
The formulation method may be in accordance with conventional methods. For example, the compound of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier or diluent, and further, a stabilizer and other desired additives may be blended to obtain a desired dosage form. it can. Examples of such carriers or diluents include, for example, starches, lactose, sucrose, glucose, dextrin, mannitol, sorbit, calcium phosphate, calcium sulfate, tragacanth gum, gelatin, gum arabic, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, polyvinyl Solid diluents such as pyrrolidone, microcrystalline cellulose, magnesium stearate, talc, polyethylene glycol, agar, sodium alginate, kaolin, such as water, saline, ethanol, propylene glycol, polyethylene glycol, glycerin, Hartmann's solution And liquid diluents such as Ringer's solution. Under the present circumstances, you may contain the stabilizer etc. which are used normally.
[0017]
In order for the radiation damage protective agent of the present invention to exhibit the desired effect as an oral preparation, although it varies depending on the age, weight, and degree of disease of the patient, the compound of the present invention is usually administered 0.1 to 0.1 a day for adults. It can be used in the range of 100 mg / kg. In addition, in order to exert the desired effect as a parenteral agent such as intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, etc., the compound of the present invention is usually administered for one day in an adult, although it varies depending on the age, weight and degree of disease of the patient. It can be used in the range of 0.01 to 10 mg / kg.
[0018]
【The invention's effect】
Thus, according to the present invention, a ribofuranose derivative having a radiation damage-protecting activity can be obtained, and is useful as a reagent, a pharmaceutical product and an intermediate thereof.
[0019]
【Example】
The ribofuranose derivative and the radiation damage protective agent of the present invention will be specifically described, but the present invention is not limited to these examples.
Synthesis Example 1 Synthesis of ethyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside.
D-ribose (50 g) was dissolved in a mixed solution of ethanol (350 ml) and acetone (350 ml), Amberlyst 15 (10 g; manufactured by Rohm & Haas, USA) was added, and the mixture was heated to reflux at 80 ° C. for 3 hours. After the reaction, the reaction mixture was cooled to room temperature, the Amberlyst was filtered off, the filtrate was extracted with chloroform, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure, and a crude syrup (69 g) obtained was subjected to silica gel column chromatography (developing solvent: (Chloroform) to obtain 49 g of intermediate. 30 g of this was dissolved by adding anhydrous pyridine (60 ml), tosyl chloride (27.6 g) was added with stirring at room temperature, stirred for 2 hours at room temperature, and further heated and stirred at 70 ° C. for 5 hours. The reaction solution was allowed to cool to room temperature, water was added, and the mixture was extracted with chloroform. The chloroform layer was collected, washed with dilute sulfuric acid, dried over anhydrous magnesium sulfate, treated with activated carbon (5 g) and concentrated, and the crude syrup (69 g) was subjected to silica gel column chromatography (developing solvent: benzene / chloroform = 1/1). To 27 g of tosyl body was obtained. Dimethylformamide (150 ml) was added to the concentrate for dissolution, potassium thioacetate (8.4 g) was added, and the mixture was heated to reflux at 70 ° C. for 5 hours. Thereafter, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, water was added, and the mixture was extracted with chloroform. The chloroform layer was collected, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated, and the resulting residue was purified by silica gel column chromatography (developing solution; chloroform) to obtain ethyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5. -Acetylthio-D-ribofuranoside (19 g) was obtained. Next, this compound was dissolved in methanol (100 ml), a 0.5N sodium methoxide / methanol (3 ml) solution was added, and the mixture was allowed to stand overnight at room temperature. The residue obtained by concentrating the reaction solution is purified by column chromatography (developing solution; benzene → chloroform) to give ethyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-. Ribofuranoside (hereinafter referred to as Compound 1) (9.4 g) was obtained.
This compound¹Identified from 1 H-NMR spectrum. The device data is shown below. NMR spectrum (CDCl_Three , Δ value)
1.10 to 1.28 (3H, t), 1.30 (3H, s), 1.45 (3H, s), 2.40 to 3.00 (2H, m), 3.30 to 3. 82 (2H, m), 4.00 to 4.21 (1H, brs), 4.50 to 4.70 (2H, m), 5.03 (1H, s)
[0020]
Synthesis Example 2 Synthesis of Isopropyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside
A similar experiment was conducted by replacing ethanol in the mixed solution in which D-ribose was dissolved in Synthesis Example 1 with isopropanol, and isopropyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside (hereinafter referred to as compound). 2). This compound¹Identified from 1 H-NMR spectrum. The device data is shown below. NMR spectrum (CDCl_Three , Δ value)
1.10 to 1.25 (6H, d), 1.34 (6H, s), 2.40 to 3.00 (2H, m), 3.73 to 4.25 (2H, m), 4. 54 to 4.76 (2H, m), 5.20 (1H, s)
[0021]
Synthesis Example 3 Synthesis of ethyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside
Amberlyst 15 (2.4 g) was added to a solution of compound 1 (7.8 g) obtained in Synthesis Example 1 in methanol (78 ml), and the mixture was stirred at 30 ° C. for 4 hours under nitrogen substitution. Thereafter, the reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (chloroform: methanol = 100: 0 → 97: 3) to obtain ethyl 5-deoxy-5-thio. (5.1 g) of -D-ribofuranoside (hereinafter referred to as Compound 3) was obtained. This compound¹Identified from 1 H-NMR spectrum. The device data is described below.
NMR spectrum (CDCl_Three , Δ value)
1.08 to 1.32 (3H, t), 2.63 to 2.90 (2H, m), 3.40 to 4.38 (5H, m), 4.80 to 5.00 (1H, d) )
[0022]
Synthesis Example 4 Synthesis of isopropyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside
The compounds 2 (1.0 g) were deprotected with Amberlyst 15 in the same manner as in Synthesis Example 3, and purified by silica gel column chromatography to obtain isopropyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside ( (Hereinafter referred to as Compound 4) (70 mg) was obtained. This compound¹Identified from 1 H-NMR spectrum. The device data is described below.
NMR spectrum (CDCl_Three , Δ value)
1.20 to 1.23 (6H, d), 2.90 to 3.25 (2H, m), 3.92 to 4.38 (4H, m), 5.05 (0.5H, d, J_{1, 2}<1.0 Hz, β-H-1), 5.16 (0.5 H, d, J_{1, 2}= 3.0Hz, α-H-1)
[0023]
Synthesis Example 5 Synthesis of methyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside
95 g of D-ribose was dissolved in 1330 ml of a mixed solvent of methanol and acetone in an equal ratio, Amberlyst 15 (47.5 g) was added, and the mixture was heated to reflux at 70 ° C. for 1.5 hours. After completion of the reaction, the reaction solution was cooled to room temperature, Amberlyst was filtered off, and the solvent was removed from the filtrate. To the obtained residue, 400 ml of chloroform was added and washed with water, and then dried over anhydrous magnesium sulfate to remove the solvent. Next, the resultant was dissolved in 120 ml of anhydrous pyridine, 59.6 g of paratoluenesulfonyl chloride was added, and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours and further stirred at 95 ° C. for 2 hours. The reaction solution was allowed to cool to room temperature, water was added, and the mixture was extracted with chloroform. The chloroform layer was collected, washed with dilute sulfuric acid and dilute hydrochloric acid, dried over anhydrous magnesium sulfate and the solvent was removed to obtain about 74 g of a colorless viscous liquid.
[0024]
30 g of this liquid was dissolved in 250 ml of dimethylformamide, 9.8 g of potassium thioacetate was added, and the mixture was stirred at 60 to 70 ° C. for 5 hours. Thereafter, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, water was added, the mixture was extracted with chloroform, dried over anhydrous magnesium sulfate, and then the solvent was removed. This was dissolved in 110 ml of methanol, added with 3.4 ml of 0.5N sodium methoxide / methanol and left at room temperature overnight. Thereafter, the reaction solution was concentrated, and the resulting residue was purified by silica gel column chromatography (benzene → chloroform), whereby methyl 2,3-O-isopropylidene-5, which is a mixture of α and β at the 1-position. 17.1 g of deoxy-5-thio-D-ribofuranoside (hereinafter referred to as compound 5) was obtained. Further, compound 5 was purified by silica gel chromatography (benzene → chloroform), and methyl 2,3-O-isopropylidene-5-deoxy-5-thio-α-D-ribofuranoside (hereinafter referred to as compound) which is α-position at the 1-position. 6) was isolated.
[0025]
Synthesis Example 6 Synthesis of methyl 5-deoxy-5-thio-D-ribofuranoside.
Compound 5 (2 g) was dissolved in 20 ml of methanol, Amberlyst 15 (0.6 g) was added, and the mixture was stirred at 30 ° C. for 4 hours under nitrogen substitution. After the amberlist was filtered off, the filtrate was concentrated and purified by silica gel column chromatography (chloroform: methanol = 100: 0 → 97: 3) to obtain methyl 5-deoxy-5-thio-β-D-ribofuranoside. 0.5 g (hereinafter referred to as Compound 7) was obtained.
[0026]
Synthesis Example 7 Synthesis of methyl 5-deoxy-5-thio-α-D-ribofuranoside.
Compound 6 (2 g) was deprotected using Amberlyst 15 in the same manner as in Synthesis Example 2, and purified by silica gel column chromatography to obtain methyl 5-deoxy-5-thio-α-D-ribofuranoside (hereinafter referred to as “Compound 6”). 0.6 g). Compound 8 is the 1-position stereoisomer with compound 7.
[0027]
(Test Example 1) In vivo radiation damage protection test
The animals used were 3 months old C3H / He male mice per group. Compounds 1 and 5 were suspended in 0.05% Tween 80, and compounds 3, 7 and 8 were dissolved in saline. As a comparison agent, 5-deoxy-5-thio-D-ribose (hereinafter referred to as comparison agent 1) was used and dissolved in physiological saline. Saline was administered to the control group. The drug concentration was adjusted so that the dose of the solution was 0.1 ml per 10 g of the mouse, and 500 mg / kg was administered intraperitoneally. Made by Toshiba 15 minutes after drug administration¹³⁷ A mouse was irradiated with 10 Gy using a Cs-γ-ray irradiator, and then the survival was determined for 30 days. As a result, compounds 1 and 5 had a survival rate of 60% or more until the 15th day, and the survival rate was 0% on the 18th day for compound 1 and on the 17th day for compound 5. Compound 3 had a survival rate of 60% or more even on day 30, and compounds 7 and 8 had a survival rate of 100% on day 30. In contrast, the survival rate of Comparative Agent 1 was already 50% on the 10th day, and the survival rate was 0% on the 13th day. In the control group, the survival rate was already 50% on the 9th day and 0% on the 12th day.
From this result, it was found that Compounds 1, 3, 5, 7, and 8 have a strong radiation damage protective action. It was also found that the effect was exhibited without any difference between the stereoisomers at the 1-position.
[0028]
(Test Example 2) In vitro radiation damage protection test
Human salivary gland tumor cells 2.5 × 10^FiveThe seeds were seeded in 5 ml irradiation bottles and cultured at 37 ° C. for 2 days. After exchanging with 5 ml of MEM medium containing 10% fetal bovine serum to which a predetermined amount of Compound 3, 7 and 5-deoxy-5-thio-D-ribose (hereinafter referred to as Comparative Agent 1) was added, the mixture was cultured at 37 ° C. for 30 minutes, 7 Gy was irradiated at 200 KV × 15 A using a Shimadzu shield type Shinai No. 250 X-ray apparatus. After irradiation, the cells were washed with a serum-free MEM medium, and the cells were detached with 0.1% trypsin. Then, the number of cells was counted with a call counter, and a predetermined number was seeded on a 6 cmφ dish. The number of seeded cells was adjusted so that about 100 colonies could be formed after 10 days of culture. Colony staining was performed using Solution V (MgSO_Four , 7H₂After washing with O), it was fixed with 10% formalin for 10 minutes or more. Subsequently, it was stained with 1% methylene blue for 1 minute, washed with water, and the number of colonies was counted under a 100 × microscope. Survival rate (SF) was calculated from the following equation. The results are shown in FIG.
S. F. = (Number of irradiated colonies / number of seeded cells) / (Number of unirradiated colonies / number of seeded cells)
[0029]
[Figure 1]
[0030]
From FIG. 1, it was found that compounds 3 and 7 have a very strong in vitro radiation damage protective effect as compared with Comparative Agent 1.
[0031]
(Test Example 3) Toxicity test
As experimental animals, 3 months old male C3H / He mice were used in groups of 10 mice. Compound 1, 3, 5, 7 and Compound 8 prepared in the same manner as in Test Example 1 were intraperitoneally administered at 1000 mg / kg and observed for 30 days. No abnormal symptoms were observed, and no individual died. It was. From this, it was found that the compounds 1, 3, 5, 7 and 8 of the present invention are extremely low toxicity compounds.
[0032]
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a graph showing the relationship between drug concentration and survival rate.

Claims

General formula (1)

(In the formula, R ¹ represents an optionally branched lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, and R ² and R ³ each independently represents a hydrogen atom or an optionally branched lower alkyl group, or together. And represents an alkylidene group.) A radiation damage protective agent comprising a ribofuranose derivative represented by