JP3746270B2

JP3746270B2 - Anticholesterolemia cooking oil

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Publication number: JP3746270B2
Application number: JP2002560474A
Authority: JP
Inventors: マービン、エル．ビーレンバウム; クリストファー、ジェイ．ベリー
Original assignee: MLB Enterprises LLC; Redeem Inc
Current assignee: MLB Enterprises LLC; Redeem Inc
Priority date: 2001-01-29
Filing date: 2001-01-29
Publication date: 2006-02-15
Anticipated expiration: 2021-01-29
Also published as: CA2430878A1; KR100548602B1; EP1370148A1; EP1370148A4; CN1479578A; JP2004519228A; KR20030085123A; WO2002060272A1

Description

【０００１】
この出願は１９９８年１０月１４日付で出願されたＵＳ仮特許出願第６０／１０４，２２７号に基づいており、その開示は参考のためその全体でここに組み込まれる。
【０００２】
【発明の分野】
本発明は、ヒト患者で血中脂質レベルを改善する上で有用な食用油、並びにその油を製造および使用するための方法に関する。
【０００３】
【発明の背景】
米国で７５０，０００人以上が冠状動脈系心臓疾患および卒中で毎年死んでいる。約１２５万人が毎年心臓発作を起し、そのうち半分は徴候なしで起こる。冠状動脈系心臓疾患は米国の男女で最も多い死因である。１世紀にわたる医薬開発にもかかわらず、世紀の変わり目のときより１０倍も多いアメリカ人が心臓発作で死亡している。
【０００４】
米国心臓学会によると、コレステロールレベルが心臓血管系疾患で主要な予兆である。血流中に脂質の中でみられる軟質ロウ状物質のコレステロールは、細胞膜、一部のホルモンおよび他の所要組織を形成するために用いられることから、健康体の重要な要素である。しかしながら、血中で高レベルのコレステロール（高コレステロール血症）は冠状動脈系心臓疾患の主要リスクファクターであり、心臓発作に至る。
【０００５】
コレステロールは血中で不溶性であり、リポタンパク質と称される脂質およびタンパク質の特別なキャリアにより、細胞から細胞へと輸送されねばならない。数種のリポタンパク質があり、そのうち最も重要なものは低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）である。
【０００６】
低密度リポタンパク質は血中で主要なコレステロールキャリアである。過剰のＬＤＬコレステロールが血中で循環すると、心臓および脳へ栄養補給する動脈の壁内でゆっくり蓄積していく。他の物質と一緒になって、それは動脈を閉塞させうる厚くて硬い沈着物、プラークを形成することがある。この状態はアテローム性動脈硬化症として知られている。このプラーク付近における血餅（または血栓）の形成は心筋の一部への血流を妨げて、心臓発作を引き起こすことがある。血餅が脳の一部への血流を妨げると、結果は卒中である。高レベルのＬＤＬコレステロールは心臓疾患のリスク増加をもたらす。そのため、ＬＤＬコレステロールはしばしば“悪いコレステロール”と称されている。
【０００７】
高密度リポタンパク質（“ＨＤＬ”）は血中コレステロールの約１／３〜１／４を運搬する。ＨＤＬはコレステロールを動脈から運び出して、肝臓へ戻し、それは最終的に体から排出される、と考えられている。ＨＤＬは過剰のコレステロールをアテローム硬化プラークから除去して、それらの成長を遅らせる、と一部の専門家は考えている。高レベルのＨＤＬは心臓発作から防御するらしいため、ＨＤＬは“良いコレステロール”として知られている。その逆も真実である：低ＨＤＬレベルはより大きなリスクを示す。
【０００８】
コレステロールは２種の供給源から生じる。それは体内で、主に肝臓で（１日約１０００ｍｇ）生産され、肉、家禽、魚、魚介および乳製品のような動物由来の食品でもみられる。植物由来の食品（果物、野菜、穀物、堅果および種子）はコレステロールを含有していない。
【０００９】
飽和脂肪酸は血中コレステロールを上昇させる主要な元凶であり、それが心臓疾患のリスクを増加させている。しかし、食物コレステロールも関与している。平均のアメリカ人男性は１日約３６０ｍｇ；平均のアメリカ人女性は２２０〜２６０ｍｇのコレステロールを消費している。
【００１０】
１億の成人が２００ミリグラム／デシリットル(mg/dl)以上の血中コレステロールレベルを有し、ほぼ４千万のアメリカ人が２４０mg/dl以上のレベルを有している。治療を要するＬＤＬレベルを有したアメリカ人は５３００万いるが、そのうち１／３以下が必要な治療をうけているにすぎない、とみられている。更に、治療されたほとんどの患者は、治療目標を達成していない。年間の治療費は１千億ドル以上とみられ、冠状動脈系心臓疾患はなおアメリカ人のＮｏ．１死因のままである。
【００１１】
そのため、心臓発作または卒中を有するリスクは、血中における低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）およびトリグリセリドの量により明確に予測される。
【００１２】
コレステロールおよびトリグリセリドレベルは、コレステロールおよび飽和脂肪の食物摂取の減少のように、医学的介入および／または食物制限で減少させうる。しかしながら、一部の食物制限は新たな問題を生じた。例えば、近年バターからマーガリンへの変更が勧められている。バターはコレステロールおよび飽和脂肪が高い。他方、スティックマーガリンは水素添加油分をベースにした半固形粘稠度を有している。しかしながら、水素添加プロセスはトランス脂肪を形成する。トランス脂肪はアテローム形成性であり、バターに安定性を付与する天然飽和脂肪より２〜３倍高い心臓血管リスクを生じることが、臨床研究で証明された。マーガリン、特にスティックマーガリンが２０〜３０％のトランス脂肪を含有しうるという点で、バターよりマーガリンが優れているという健康上の利点には現在疑いがある。米国心臓学会は現在ソフトマーガリンを勧めている。このようなマーガリン、いわゆる無トランスマーガリン、即ち、完全に水素添加されたヤシ油またはヤシ油フラクションから処方されているマーガリンが最近売り出された。このマーガリンは、トランス脂肪はないが、マーガリンで２番目に危険な成分、飽和脂肪のレベルが高い。
【００１３】
ヒトでコレステロールレベルを減少させる他の化合物が報告された。例えば、植物ステロール類、特にβ‐シトステロールは抗コレステロール血症効果を有することが報告され、小腸でコレステロール吸収を阻害すると考えられている。植物ステロール類は胆汁塩ミセル中のコレステロールと置き換わると考えられている。摂取された食物コレステロールのうち約半分が吸収され、他方５％未満のβ‐シトステロールが吸収される。植物ステロール類が胆汁塩ミセルのコレステロールと置き換わると、コレステロールは便中に排泄される。
【００１４】
植物ステロール類は、遊離アルコールおよびエステルとして、飽和および不飽和型で天然に存在する。不飽和型の方が多い。天然シトステロール類は水素添加によりシトスタノール類へ変換されることが知られており、スタノール類はコレステロール吸収を阻止する上でステロール類よりも単位重量当たりで有効であり、スタノール類は吸収されないことが報告されている。更に、吸収されるβ‐シトステロールの量は、投与される用量が変わっても、比較的一定のようである。ステロール類およびスタノール類の双方は、それらの非吸収性のせいで、コレステロール吸収の比較マーカーとして用いられている。しかしながら、シトスタノールが全く吸収されず、あるシトステロールが吸収されることは、明白であるらしい。
【００１５】
更に、食物へのシトスタノールの添加は、コレステロール吸収のみならず、シトステロールおよびビタミン吸収も減少させる。一部の人々はこれを利点として特徴付けたが、シトスタノール類が微量栄養素の通常吸収を阻止するという事実は問題となりうるのである。
【００１６】
Lancet 1995;345:1529-1532では、良性前立腺過形成（ＢＰＨ）の治療でβ‐シトステロール（２０ｍｇ/日）の使用を報告した。この症状は前立腺内で繊維性筋性および上皮構造のゆっくりした腫脹であり、最終的には閉塞性尿症状に至り、これは５０歳を超えるほとんどの男性である程度みられる。そのため、抗コレステロール血症剤としてシトスタノール類のみの使用はＢＰＨのリスクを増すことがある。
【００１７】
動脈硬化症および高コレステロールレベルを含めた疾患の治療および予防に関して研究された他の化合物にはトコトリエノール類があり、これは小麦麦芽、コメヌカ、オート麦およびヤシでみられる天然型のビタミンＥである。
【００１８】
インビトロで、コレステロールに対するトコトリエノール類の濃度依存性影響から、３‐ヒドロキシ‐３‐メチルグルタリル補酵素Ａレダクターゼ（ＨＭＧＣｏＡレダクターゼ）活性の転写後ダウンレギュレーションを行うことが証明しうる。これは、ＵＳ単独で年間８０億ドルの売上にのぼる抗コレステロール血症剤、スタチン類の標的となる酵素である。スタチン類は直接作用して、ＨＭＧＣｏＡレダクターゼを阻止する。しかしながら、スタチン類は肝機能不全も時々起す。
【００１９】
残念ながら、スタチン類またはトコトリエノール類を投与された多くの患者は、食物コレステロールが食品から吸収される速度の補償的増加で、コレステロール合成速度の減少に応答している。単一療法としてスタチン類を投与された患者の８０％は治療目的を達成できなかった、と近年の研究では報告している。スタチン類に関して、コレステロール吸収の補償的増加を抑える上で多くの場合に必要なレベルまで用量を増加させると、前記のように肝臓合併症の発生率を１１倍増加させてしまう。肝臓合併症のリスクのせいで、スタチン類は医者の指示のもとで投与されねばならない。同様に、トコトリエノール類はインビトロで見込みを示したが、臨床試験の結果は不明確であった。Qureshi,Am.J Clin.Nutr.53:Suppl.4:1021S-1026S,(1991 Apr.)は簡単な研究において“応答者”の脂質パラメーターで有意の改善を報告したが、同物質（ヤシ由来のトコトリエノールに富むフラクション、即ちヤシ由来ＴＲＦ）を補給された美食患者におけるその後３回の研究では結果を確認できなかった。Antila,et al,Helsinki Antioxidant Symposium,1991 Wahlquist,M.,et al,Nutrition Research 12:Suppl.1:S181-S201(1992)；Tomeo,A.,et al,Lipids 30:1179-1183(1995)参照。その答えとして、QureshiはQureshi A.,et al,Lipids 30(12):1171-1177(1995)で、ｄ‐トコフェロールがトコトリエノール類の抗コレステロール血症効果を阻害することを示唆した。本発明による油類での臨床試験の結果はこの結論を支持せず、むしろ他の非ケン化性成分との相乗作用が血中脂質調整を行う上で必要であることを示している。
【００２０】
パルプおよび紙廃棄物から抽出される水素添加植物ステロール類を含有している、Finland,Benecolで近年売り出されたマーガリンは、食事で標準マーガリンの代わりにBenecolマーガリンを用いた患者でコレステロールレベルを１０〜１５％減少させることがわかった。この減少は心臓血管リスクで２０〜３０％減少に相当する。しかしながら、植物ステロール抽出物が新食品添加物として米国および他の諸国で規制認可を要する、という欠点をBenecolはかかえている。
【００２１】
毒性型の酸素が多くの慢性衰弱性疾患に関与している。これらには、特に心臓血管、新生物、関節炎、年齢関連黄斑変性および早老がある。これら毒性型の酸素の組織レベルが上昇すると、ビタミンＥ群の酸化防止剤のような防御酸化防止剤の組織レベルは低下する。これらのリスクファクターはGeyにより心臓血管系疾患の場合で確認され、血中ビタミンＥ値が減少すると、虚血性心疾患の頻度が上昇することを彼は示した。過酸化物の血中レベルを調べるために、多くの研究者はチオバルビツール酸の付加物（ＴＢＡＲＳ、チオバルビツール酸反応物質としても知られ、マロンアルデヒド修飾物質とも称されている）または過酸化物を測定した。Holvoet、Collenおよびvan de Werfは最近、急性冠状動脈症候群のマーカーとして、マロンアルデヒド修飾ＬＤＬの関連性を証明した。血中でのマロンアルデヒド（ＴＢＡＲＳ）タイプの混入が内皮損傷およびプラーク不安定を示し、トロポニンＩのような他の常用指標よりも急性冠状動脈症候群を更に正確に示すことを、これらの科学者は指摘した。Redeemで毎日補給されている、少くとも１回卒中を起した患者の介在研究では、ＴＢＡＲＳ物質の血清レベルが研究前の値より有意に減少した。Tomeo,A.C.,et al,Antioxidant effects of tocotrienols in patients with hyperlipidemia and carotid stenosis(高脂血症および頚動脈狭窄症の患者におけるトコトリエノール類の酸化防止効果),Lipids 30:1179-1183,1995；Watkins,T.R.et al,Hypocholesterolemic and antioxidant effects of rice bran oil non-saponifiables in hypercholesterolemic subjects(高コレステロール血症者におけるコメヌカ油非ケン化性物質の血中コレステロール低下および酸化防止効果),Environ.Nutr.Interactions,3:(2)1-8,1999参照。更に、彼らの血清ビタミンＥレベルは研究前値のほぼ２倍であった。Jordan Heart Research Foundationのこの同グループの研究者は、実験ラットモデルで同様の関連性を先に証明していた。Watkins,T.R.,et al,γ-tocotrienol as a hypocholesterolemic and antioxidant agent in rats fed atherogenic diets(アテローム形成食を与えたラットで血中コレステロール低下および酸化防止剤としてのγ‐トコトリエノール),Lipids,28:1113-1118,1993参照。
【００２２】
したがって、無トランスで、飽和脂肪が少なく、マーガリンの製造で使用に適した食用油について、必要性が存在している。好ましくは、その食用油は化学的に処理（例えば、水素添加）されねばならない添加物を必要としない。
【００２３】
公知の油製品に代わる安全で有効な代替品であって、店頭（ＯＴＣ）で販売されるかまたは主要食品に配合されうる食用油製品についても、必要性が存在している。
【００２４】
更に、長期にわたる悪い食習慣を変える上で患者が有する困難性を認識して、心臓血管系薬剤と異なり、直接的な医者の指示なしに摂取しても十分に安全な、心臓血管系疾患に対する新たな介入戦略について必要性が存在している。
【００２５】
【好ましい態様の要旨】
本発明の一面によると、ヒト患者によるコレステロールの合成および吸収を減少させて、ヒト患者からコレステロールの排出を促進する食用油が提供される。
好ましくは、その食用油は実質的にトランス脂肪酸を含んでいない。
【００２６】
好ましい態様において、本発明の油は植物油または植物油の混合物である。非常に好ましくは、本発明の油は精製コメヌカ油またはコメヌカおよびヤシ油の混合物である。
【００２７】
本発明の更に別の面によると、前記いずれかの油を含有した食品が提供される。
【００２８】
本発明の追加面によると、有効量の前記いずれかの油を患者に投与するステップからなる、ヒト患者で総コレステロールおよびＬＤＬを減少させて、ＨＤＬを上昇させる方法が提供される。
【００２９】
本発明の更に別の面によると、抗コレステロール血症食用油の製造方法が提供される。その方法は、食用油を用意し、前選択用量および前選択投与形態で消費されたときに、その油が１日ベースで約２５〜７５０ｍｇのトコフェロール類、トコトリエノール類またはそれらの組合せ、約５〜約５００ｍｇのステリルエステル類および約５〜約５００ｍｇのシクロアルテノール類を供するように、その食用油のトコフェロール類、トコトリエノール類、遊離ステロール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類の含有率を調整するステップからなる。
【００３０】
好ましい態様では、粗製植物油（“Oil Ａ”）、特に粗製コメヌカ油を脱ロウおよび脱ガム化し、真空下高温で保つ。次いで、石鹸ストックへのステロール類およびシクロアルテノール類のエステルの損失を最少に抑える条件下で、遊離脂肪酸を（ケン化された）石鹸へ変換するように、アルカリ性水和ケイ酸ナトリウムおよび少量の水酸化カリウムを用いてマイルドなｐＨで遊離脂肪酸をOil Ａから除去する。次いで、トコトリエノールに富む蒸留物、好ましくはコメヌカまたはヤシ油デオドライザー蒸留物を、好ましくはイソプロパノール中で、実質的にケン化し、非ケン化性フラクションを好ましくはヘキサンおよび水で抽出し、抽出物（“Oil Ｂ”）を得る。最後に、適切な部分のOil ＡおよびOil Ｂを、望ましい濃度のトコフェロール類、トコトリエノール類、遊離ステロール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類を有する製品を製造するために混合する。
【００３１】
本発明の他の目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明から当業者に明らかとなるであろう。しかしながら、詳細な説明および具体例は、本発明の好ましい態様を示しているが、説明のためであって、限定のためではないことが、理解されるべきである。本発明の範囲内で多くの変更および修正がその精神から逸脱せずに行え、本発明はこのようなすべての修正を含んでいる。
【００３２】
【好ましい態様の詳細な説明】
人体のコレステロールレベルは、３つの協同メカニズム、即ち合成、吸収および排出により調節されている。ほとんどの公知抗コレステロール血症化合物および組成物はこれらメカニズムのうち１つのみを標的にしているため、機能するには標的メカニズムに比較的大きな影響を有しなければならない。
【００３３】
本発明による食用油はコレステロールの合成および吸収を減少させ、その一方でコレステロールの排出を増加させる。３つすべてのメカニズムが同時に働いて、ＬＤＬ、ＨＤＬおよびトリグリセリドレベルで適度にバランスのとれた改善を果たす。
【００３４】
ヒト患者でのコレステロールの合成、吸収および排出の減少および増加は、本発明による食用油の投与前および後にヒト患者で測定したその量の比較により調べられる。
【００３５】
本発明による食用油は、薬剤またはニュートラシューティカル(栄養剤：nutraceutical)ではなく、“機能性食品”として特徴付けられる。機能性食品は、European Unionにより、“それらが科学的に健康増進効果を証拠書類で証明しており、健康という名目で販売されうるように処理または改変された日常食品”として規定されている。日本では、“機能性食品”は天然成分のみから誘導され、食物の一部として消費されて、サプルメント形態ではない（即ち、錠剤またはカプセルではない）日常食品として規定されている。
【００３６】
好ましくは、本発明による食用油はヒト患者でコレステロール合成を減少させる少くとも１種の化合物、例えば少くとも１種のトコトリエノールを含有している。このような化合物の具体例としては、α‐トコトリエノール、β‐トコトリエノール、γ‐トコトリエノールおよびδ‐トコトリエノールがある。
【００３７】
食用油は、好ましくは、ヒト患者でコレステロール吸収を減少させる少くとも１種の化合物、例えば少くとも１種の遊離ステロールまたはステリルエステルも含有している。本発明で有用な具体的化合物としては、カンペステロール、β‐シトステロールおよび他のステロール類およびスタノール類のフェルラ酸および脂肪酸エステルがある。
【００３８】
本発明の油に好ましく含まれるものは、ヒト患者でコレステロール排出を促進させる少くとも１種の化合物である。このような化合物としては、３‐（４‐ヒドロキシ‐３‐メトキシフェニル）‐２‐プロパン酸、４‐ヒドロキシ‐３‐メトキシ‐シンナル酸(cinnarnic acid)または３‐メトキシ‐４‐ヒドロキシケイ皮酸と様々に称されるフェルラ酸（Ｃ_１０Ｈ_１０Ｏ_４）のシクロアルテノールエステル類がある。このような化合物の具体例としては、２４‐メチレン‐シクロアルテノールおよびシクロアルテノールのフェルラ酸エステルがある。
【００３９】
本発明による食用油は、過酸化物と称されているが、分析では、公知の心臓血管リスクファクターである、ＴＢＡＲＳ（チオバルビツール酸反応物質）およびマロンアルデヒド様化合物（即ち、ＴＢＡ）とも称されている、過酸化された脂質‐および他の物質、例えばタンパク質、炭水化物および核酸‐の蓄積および血中レベルを好ましくは減少させる。
【００４０】
非常に好ましくは、本発明の食用油はヒト患者でＴＢＡＲＳおよび類似の過酸化付加物の形成および蓄積を制限する化合物を少くとも１種供する。
【００４１】
本発明によると、食用油は、トコトリエノールまたはトコフェロール群のいずれに由来してもよいが、トコトリエノールまたはトコフェロールとして測定しうる酸化防止活性を組織、例えば血液に、付与するビタミンＥ様活性も発揮する。
【００４２】
非常に好ましくは、油中の少くとも１種の化合物は（ここで詳細に記載されている）トコトリエノールまたはトコフェロール群に由来しているため、心臓血管系疾患のリスクがあるヒト患者の血中で血清トコフェロールまたはトコトリエノールレベルを上昇させる。
【００４３】
本発明に従い用いられるトコフェロール類、トコトリエノール類、ステロール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類は、好ましくは天然源に由来するが、所望であれば合成で製造してもよい。特に、１種以上の成分は合成でも、または植物油ベース以外の供給源に由来してもよい。
【００４４】
非常に好ましくは、本発明の油はトランス脂肪酸を実質的に含まない。ここで用いられている“実質的に含まない”とは、約２％（重量／重量）未満を意味する。最良では、本発明の油はトランス脂肪酸を全く含まない。
【００４５】
(ｉ)トコトリエノール類および／またはトコフェロール類対(ii)遊離ステロール類および／またはステロールエステル類対(iii)シクロアルテノール類の最良比は約１：０．５：０．０５〜１：５：０．５であり、非常に好ましくは約１：１：０．０５であることが、臨床試験でわかった。そのため、好ましい態様において、本発明の油中における上記成分の比率はこの好ましい範囲内に入り、最良には約１：１：０．０５である。そして、本発明による油は、上記組成の成分(ｉ)、(ii)、および(iii)の混合物を約２０〜６０％含んでいても良い。さらに、本発明による油は、すべてのパーセンテージが重量／重量で、ｉ)約１０〜３０％のトコフェロール類、トコトリエノール類またはそれらの組合せ、ii)約２〜２０％の遊離ステロール類、iii)約２〜２０％のステロールエステル類、iv)約０．１〜１．０％のシクロアルテノール類、およびｖ)約７〜１９％の飽和脂肪を含んでいることが好ましい。
【００４６】
ヒト患者に投与されるトコフェロール類およびトコトリエノール類の量は好ましくは約５０〜５００ｍｇ／日、または換言すると約１０〜２００ｍｇ／投与単位である。ステロール類およびステリルエステル類の量も同様に、好ましくは約５０〜５００ｍｇ／日である。シクロアルテノール類の量は、好ましくは約２．５〜２５ｍｇ／日である。好ましい態様において、ヒト患者に約４００ｍｇのトコフェロール類およびトコトリエノール類、４００ｍｇのステロール類およびステリルエステル類および２０ｍｇのシクロアルテノール類が投与される。これは約１：１：０．０５の好ましい成分比に相当する。諸成分の割合が前記範囲内にあり、患者が１日に前記範囲内で各成分の総量を消費するかぎり、本発明の油中における様々な成分の割合は広い範囲内で変わりうる。
【００４７】
好ましい態様において、本発明による食用油は植物油、特に精製コメヌカ油または精製コメヌカ油およびヤシ油の混合物である。
【００４８】
非常に好ましくは、本発明の食用油は精製コメヌカ油である。粗製コメヌカ油はあらゆる市販植物油の中で最大の割合で非ケン化性物質を含有している。総非ケン化性物質はしばしば４％（重量による）を超え、これはマーガリン製造で現在用いられている油の約４倍である。
【００４９】
粗製コメヌカ油は、好ましくは本発明による使用上精製される。含油ヌカがコメから分離されるときに、遊離脂肪酸の非常に速い増加を起こす特に活性なリパーゼ酵素が活性化される。コメが粉砕後すぐに熱または化学物質で安定化されたときでも、５〜１０％の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）レベルが普通である；工業用コメヌカ油は３０％もの高いＦＦＡレベルを有することがある。更に、ＦＦＡレベルには季節変動がある。ロウレベルも高く、ヌカが溶媒で抽出された温度と通常関連している。そのためコメヌカ油は精製が最も難しい油の１つである。工業的に、コメヌカ油は化学的精製により処理される。
【００５０】
トコトリエノール類の別な有用源、ヤシ油も、つぶされたときにヤシの実がリパーゼ酵素を放出することから、高いＦＦＡレベルを有している。ヤシ油のＦＦＡレベルは２〜５％である。ヤシ油のほとんどの商業生産では物理的精製プロセスを用いている。しかしながら、このような精製法では低トコフェロール／トコトリエノール濃度、典型的には３０００〜５０００ｐｐｍの低グレード蒸留物を生じる。化学精製機から得られたデオドライザー蒸留物は、それより高い濃度、典型的には１〜３％のトコフェロール／トコトリエノールのものである。しかしながら、化学精製プロセスに際して、ステロール類およびシクロアルテノール類のフェルラ酸および脂肪酸エステルはイオン化され、石鹸ストックへ失われる。遊離ステロール類およびトリテルペンアルコール類（シクロアルテノール類）は極性および無極性双方の溶媒に様々な程度で可溶性であるが、無極性溶媒は脂肪酸およびフェルラ酸類のエステルに対して選択的である。これらの分子はコレステロールと構造的に類似している。エステル型のとき、それらは消化管でミセルからのコレステロールとより容易に入れ替わるが、それ自体は吸収されないか、または吸収されても速やかに排出される。
【００５１】
そのため、トコトリエノールに富むフラクションは化学的精製コメデオドライザー蒸留物から回収しうるが、それはこれらの有用なエステル類を実質的に欠いている。
【００５２】
デオドライザー蒸留物からのトコフェロールおよびトコトリエノールに富むフラクションの公知の生産プロセスには、イオン交換、ケン化および硬石鹸からの抽出、メチルエステル化、遊離脂肪酸のエステル化および分子蒸留、およびディーステロライゼイション（脱ステロール化：desterolization）のようなプロセスがある。これらプロセスの各々において、トコトリエノールに富む濃縮物の分離方法は、意図的または付随的にフェルレート類およびシクロアルテノール類の天然ステリルエステルを除去する。
【００５３】
粗製コメヌカ油が時間を経ると、遊離ステロール類は遊離脂肪酸とエステル化することが観察された。遊離ステロール類および遊離シクロアルテノール類がエステル化されて、トコフェロール類がされないようなマイルドな条件下で、油を真空下高温でエージングさせることにより、このプロセスは加速されうることがわかった。Rogers,et al,J.Am.Oil Chem.Assoc.,70:No.3,1993は、異なる製造業者から入手した５種の市販コメヌカ油を分析した。（オリザノール類として定量された）シクロアルテノール類および植物ステロール類のフェルラ酸エステル分は１１５〜７８７ｐｐｍで、平均４００ｐｐｍである。同油で、トコトリエノール分は７２〜１１５７ｐｐｍで、平均５００ｐｐｍである。オリザノール類の９５％およびトコトリエノール類の６０％以上は従来の精製プロセスで失われる。そのため有効量の抗コレステロール血症活性成分を得るためには、患者は１日１ｋｇ以上の油を消費することが求められる。
【００５４】
こうして本発明は、最適割合のトコトリエノール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類が製品に留まり、存在するステロール類が、実質的に、脂質への溶解性増加が食物コレステロールの吸収を減少させる上で化合物の効力の根底にあるステリルエステル類の形態であるという点で、新規方法の必要性を満たしている。
【００５５】
一般的に、本発明の方法は、脱ロウおよび脱ガム化された粗製コメヌカ油（“Oil Ａ”）と、遊離脂肪酸でエステル化された遊離ステロール類およびトリテルペンアルコール類から始める。次いで、石鹸ストックへのステロール類およびシクロアルテノール類のエステルの損失を最少に抑える条件下で（ケン化された）石鹸へ遊離脂肪酸が変換されるように、蒸留により、または、アルカリ性水和ケイ酸ナトリウムおよび少量の水酸化カリウムを用いたマイルドなｐＨで、ステロール類およびシクロアルテノール類のエステル化状態を保てる条件下で、残留遊離脂肪酸を除去する。次いで、好ましくはコメヌカまたはヤシ油の、トコトリエノールに富むデオドライザー蒸留物をイソプロパノール中で実質的にケン化し、非ケン化性フラクションをヘキサンおよび水で抽出し、抽出物（“Oil Ｂ”）を得る。最後に、適量のOil ＡおよびOil Ｂを、所要濃度のトコフェロール類、トコトリエノール類、遊離ステロール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類を有する製品を形成するために混合する。
【００５６】
規制認可を要する合成成分を含有したBenecolのような製品とは対照的に、精製コメヌカ油のような、本発明による植物油の好ましい態様は、Benecolとは異なり、トランス脂肪酸形成のリスクを伴う水素添加および化学処理を要しない適切なステリルおよびスタニルエステル類をそれらが天然で含有していることから、規制問題を生じない。
【００５７】
本発明による植物油は、限定されないが、バター、マーガリン、アイスクリームおよびマヨネーズ‐チョコレート製品；大豆乳および米乳のような液体；および、ワインおよびミネラル水のような水ベースドリンクを含めた様々な食品中へ配合することができる。本発明の油は、軟質ゲルを形成する上で、ゼラチン外皮中への封入にも適している。本発明の油が製造されている形態が具体的にどのようなものであっても、ヒト患者への様々な成分の１日量は前記範囲内にすべきである。所定形態中における本発明油の濃度に応じて、１食当たりの食品または封入油などの総量も変わる。軟質ゲルのような高濃度形態は、ドリンクのような希釈形態よりも少ない総量で投与される。
【００５８】
本発明は下記非制限例で更に説明される。例１は本発明油の一態様の製造方法を開示している。例２、３、４および５は、本発明の油、または本発明油の成分を個別にまたは本発明の場合とは実質的に異なる割合で含有した他の調製物を患者に投与する、ヒト研究の結果について比較している。例２はヤシ由来トコトリエノール類と本発明油との投与を比較している。例３は別な方法により処理されたコメトコトリエノール類と本発明油とを比較している。例４は従来処理コメ油と本発明油とを比較している。例５は、高レベルのステロール類およびステリルエステル類を配合した２種の市販マーガリンに対して、本発明油の性能を比較している。
【００５９】
各場合において、活性成分の割合が本発明によるときのみ、血中脂質値の望ましい変化が達成されることが証明されている。本発明油は著しく優れており、ＬＤＬレベルを減少させ、ＨＤＬを上昇およびトリグリセリド値を減少させる上で格別優れていることが示されている。
【００６０】
例１
コメ油（“Oil Ａ”）１００ｇを分析し、脱ロウおよび脱ガム化し、その油の酸値をＡＯＡＣ法により調べる。その油は５％のステロール類、スタノール類およびシクロアルテノール類を：
カンペステロール１５％
シトステロール１０
カンペスタノール１．４
スチグマステロール１．５
シトスタノール１．５
シクロアルテノール３０
２４‐メチレンシクロアルテノール４０
として含有し、更に１１２０ｐｐｍのトコフェロール類およびトコトリエノール類、γ‐トコトリエノールとして５８％を含有している。Oil Ａを適度な真空下１２５℃で一夜保ち、こうしてエステル化に際して生成する水を除去し、反応を正常に進行させて、ステロール類およびシクロアルテノール類の脂肪酸エステルが形成される天然エージングプロセスを加速させる。次いでOil Ａを５０℃に冷却する。
【００６１】
スラリー中で水酸化カリウムおよびアルカリ性水和ケイ酸ナトリウム（Britesorb^ＲＮＣ、ＰＱ Corporation,Valley Forge,ＰＡ市販）を１部の水酸化カリウム対４部のBritesorb^Ｒ対６部の水の比率で混合することにより、マイルドな苛性剤を調製する。既に測定された酸値の５％化学量論過剰に相当する量のスラリーを上記の冷却Oil Ａへ加え、混合物を６０℃で１時間攪拌した後、温度を８０℃に上昇させ、混合物を濾過する。
【００６２】
精製された油を洗浄および乾燥させて、フェルラ酸のステロールエステル類およびシクロアルテノールエステル類に富むが、遊離脂肪酸および遊離ステロール類を実質的に含まない天然油を得る。
【００６３】
次いで、コメヌカ油の化学精製によるデオドライザー蒸留物を得て、分析する。その蒸留物は次の成分を含有していることがわかった：
以下を含有する２．０％のトコフェロール類およびトコトリエノール類：
α‐トコフェロール０．５％
γ‐トコフェロール０．４％
α‐トコトリエノール０．１％
γ‐トコトリエノール１．０％
８．０％ステロール類、全体
２．０％ステリルエステル類
以下を含有する全体で７５．２％のグリセリド類：
遊離脂肪酸４３．５％
モノグリセリド類６．７％
ジグリセリド類８．６％
トリグリセリド類１６．４％
【００６４】
脂肪酸の分布は次のとおりである：
Ｃ１２：００．１％（重量による）
Ｃ１４：０１．０
Ｃ１６：０２７．５
Ｃ１６：１０．３
Ｃ１８：０２．０
Ｃ１８：１３９．０
Ｃ１８：２２７．０
Ｃ１８：３０．８
Ｃ２０：００．８
Ｃ２０：１０．６
Ｃ２２：００．２
Ｃ２４：００．４
【００６５】
次いで、５０ｇの蒸留物を５倍容量のイソプロパノールと混合し、ＡＯＡＣ法を用いて上記分析からケン化を計算する。次いで、すべてのグリセリド成分をケン化するために要する計算上の化学量論重量の１５０％で８０％水酸化カリウムの量を求め、反応混合物へゆっくり加える。反応混合物を６０℃で３０分間水浴中に保ち、冷却させ、次いで１０倍容量のヘキサンおよび２０倍容量の水で一夜かけて中和および抽出する。ヘキサン相を分離し、洗浄および乾燥させ、得られた半固形相（“Oil Ｂ”）を上記で得られた中性油と合わせる。得られた精製油はトコフェロール類およびトコトリエノール類と、シクロアルテノール類およびステロール類のエステルに富むが、遊離脂肪酸、モノ‐、ジ‐およびトリグリセリド類および遊離ステロール類を欠いている。
【００６６】
場合により、得られた上記の半固形相は、４℃で遊離ステロール類をメタノールから沈澱させることにより脱ステロール化して、混合前に蒸留により濃縮することができる。
【００６７】
トコフェロール類およびトコトリエノール類の収率は、反応混合物のケン化度に応じて、４５〜７５％である。トコトリエノール類およびトコフェロール類対シクロアルテノール類およびフェルラ酸およびステロールエステル類の比率も、ケン化度により調整しうる。
【００６８】
混合されるOil ＡおよびOil Ｂの比率は、約０．５〜２５％（重量／重量、油の総重量ベース）のトコフェロール類およびトコトリエノール類の濃度で割合再調整された油を製造するために、変えることができる。高濃度のとき、油はニュートラシューティカル（栄養剤）または治療剤として、軟質ゲル中への封入に適する。低濃度のとき、油はマーガリンまたはマヨネーズのような食品中へ直接配合しうる。各場合において、望ましい濃度は、その製品を消費する患者へ５０〜５００ｍｇ/日（または換言すると、約２０〜２００ｍｇ/食）のトコトリエノール類／トコフェロール類を供するために十分なものである。
【００６９】
例２
ステロール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類を欠くように処理された、ヤシ油由来のトコトリエノールに富むフラクション（ＴＲＦ）を、１年間にわたり１日３回１６０〜２４０ｍｇの量で試験群に投与した。Tomeo,A.,et al,Lipids 30:1179-1183,1995。更に２年間にわたりトコトリエノール類の用量を１日３回２４０ｍｇまで増加させた。Kooyenga,D.,et al,Asia Pacific J.Clin.Nutr.6:72-75,1996。総コレステロール、ＬＤＬまたはＨＤＬコレステロール、またはトリグリセリドレベルの変化は２年間にわたり観察されなかった。次いで、２００ｍｇのトコトリエノール類を含有した本発明による油を１年間わたり１日３回２．４ｇ／日で試験群に投与した。血中脂質は改善した：ＬＤＬコレステロールの２０％減少、ＨＤＬコレステロールの２０％増加、およびトリグリセリド類の２３％減少が観察された。表１参照。

【００７０】
例３
例２の研究のメンバー１０人は、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類の油を欠くように処理された、Eastman Chemical Company製のコメ油からのトコトリエノールに富む濃縮物NuTriene^Ｒに切り換えた。例２で観察されたＬＤＬコレステロールの低下は維持されたが、ＨＤＬコレステロールレベルの増加の２５％およびトリグリセリドの減少の５０％が失われた。表２参照。

【００７１】
例４
ステロール類、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類に富む（合計１．５ｍｇ／日）が、トコトリエノール類に乏しい（２．５ｍｇ／日）物理的精製コメ油から製造されたマーガリンを患者に投与した。血中脂質値に変化はみられなかった。Weststrate,J.A.et al,European J.Clin.Nutr.52:334-343,1998。表３参照。

【００７２】
例５
例４の患者を、スタノールエステル類(Benecol)またはステリルエステル類のいずれかを含有したマーガリン製品に切り換えた。双方のグループが、上記エステル類約３ｇ／日を含有するマーガリンを摂取した。８〜１３％のＬＤＬコレステロール濃度の減少が観察されたが、ＨＤＬコレステロールまたはトリグリセリド類で有意の変化はみられなかった。この研究では、シトスタノールエステル類の他の研究の結果を確認しているが、血漿酸化防止剤の有意な枯渇を報告している。Miettinen,T.A.et al,New Engl.J.Med.333:1308-1312,1995；Weststrate,J.A.et al,Eur.J.Clin.Nutr.52:334-343,1998。表４参照。

【００７３】
結論
前記のデータは、本発明による、トコトリエノール類／トコフェロール類、ステリルエステル類、遊離ステロール類およびシクロアルテノール類の量のコントロールが、最良の治療手法で血中脂質値を調整する、ということを証明している。例２の結果は、トコトリエノール類単独の投与が血中脂質値に影響を与えないことを示している。本発明による食用油の投与が、総コレステロール、ＬＤＬコレステロールおよびトリグリセリド類を低下させ、一方でＨＤＬコレステロールを増加させることを、例２は更に証明している。例３は、ステリルエステル類およびシクロアルテノール類を欠くコメ由来トコトリエノール濃縮物が、ＨＤＬレベルを増加させるかまたはトリグリセリド類を減少させる上で無効であることを証明している。例４は、トコトリエノールに乏しい物理的に精製したコメ油が無効であることを示し、例５は、トコトリエノール類なしでのステロール類およびステリルエステル類の投与は、ＨＤＬまたはトリグリセリド値に変化をもたらさないことを示している。
【００７４】
本発明による油を投与された患者により達成される血清総コレステロールおよびＬＤＬコレステロールの減少は、薬物療法で達成される最良の結果に匹敵する。２０％のＨＤＬコレステロールレベルの増加および２３％のトリグリセリド類の減少は特に有意である。Watkins,T.et al,Environmental Nutr.Interactions,3:8-18,1999。総コレステロール（ＴＣ）／ＨＤＬコレステロール比は、総コレステロールまたはＬＤＬコレステロールレベル単独と比較して、冠状動脈系心臓疾患のリスクの優れた尺度であることがわかった。Framingham研究では、冠状動脈系心臓疾患の８年見込み比は、最高比のヒトと比較して、最低のＴＣ／ＨＤＬ比のヒトで１０倍増加した。Kinosian,B.et al,L.J.Invest.Med.43,443-450,1995。平均で、本発明による油を投与された患者のＴＣ／ＨＤＬ比は５．９７から４．２９へ２８％減少した。公衆衛生を改善するために本発明の油で生じうる影響は自明である。本発明の油を用いた臨床試験で報告された、ＴＣ／ＨＤＬ比で２８％減少した５０歳男性は、７５歳すぎまで生きる可能性が２倍である。
【００７５】
前記の例は説明目的のみであり、請求の範囲により特定される本出願人の発明の範囲を決して制限するものではない。[0001]
This application is based on US Provisional Patent Application No. 60 / 104,227, filed Oct. 14, 1998, the disclosure of which is hereby incorporated by reference in its entirety.
[0002]
FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to edible oils useful in improving blood lipid levels in human patients and methods for making and using the oils.
[0003]
BACKGROUND OF THE INVENTION
More than 750,000 people in the United States die each year from coronary heart disease and stroke. About 1.25 million people have a heart attack each year, half of which occur without signs. Coronary heart disease is the most common cause of death in men and women in the United States. Despite a century of drug development, 10 times more Americans have died from heart attacks than at the turn of the century.
[0004]
According to the American Heart Association, cholesterol levels are a major predictor of cardiovascular disease. Cholesterol, a soft waxy substance found in lipids in the bloodstream, is an important component of a healthy body because it is used to form cell membranes, some hormones, and other required tissues. However, high levels of cholesterol in the blood (hypercholesterolemia) is a major risk factor for coronary heart disease leading to a heart attack.
[0005]
Cholesterol is insoluble in blood and must be transported from cell to cell by a special carrier of lipids and proteins called lipoproteins. There are several types of lipoproteins, the most important of which are low density lipoprotein (LDL) and high density lipoprotein (HDL).
[0006]
Low density lipoprotein is the major cholesterol carrier in the blood. As excess LDL cholesterol circulates in the blood, it slowly accumulates in the walls of arteries that feed the heart and brain. Together with other substances, it can form a thick, hard deposit, a plaque that can occlude the artery. This condition is known as atherosclerosis. The formation of a blood clot (or thrombus) near this plaque can interfere with blood flow to a portion of the heart muscle and cause a heart attack. The result is stroke if the clot obstructs blood flow to a part of the brain. High levels of LDL cholesterol result in an increased risk of heart disease. Therefore, LDL cholesterol is often referred to as “bad cholesterol”.
[0007]
High density lipoprotein ("HDL") carries about 1/3 to 1/4 of the blood cholesterol. HDL is thought to carry cholesterol out of the artery and back to the liver, which is ultimately excreted from the body. Some experts believe that HDL removes excess cholesterol from atherosclerotic plaques and slows their growth. HDL is known as “good cholesterol” because high levels of HDL appear to protect against heart attacks. The converse is also true: low HDL levels indicate greater risk.
[0008]
Cholesterol comes from two sources. It is produced in the body, primarily in the liver (about 1000 mg per day) and is also found in animal-derived foods such as meat, poultry, fish, seafood and dairy products. Plant-derived foods (fruit, vegetables, grains, nuts and seeds) do not contain cholesterol.
[0009]
Saturated fatty acids are a major source of elevated blood cholesterol, which increases the risk of heart disease. However, dietary cholesterol is also involved. The average American man consumes about 360 mg per day; the average American woman consumes 220-260 mg of cholesterol.
[0010]
100 million adults have blood cholesterol levels above 200 milligrams / deciliter (mg / dl) and nearly 40 million Americans have levels above 240 mg / dl. There are 53 million Americans with LDL levels that need treatment, but only one third or less of them are considered to receive the treatment they need. Furthermore, most patients who have been treated have not met their therapeutic goals. Annual treatment costs are expected to be over $ 100 billion, and coronary heart disease is still an American no. 1 remains the cause of death.
[0011]
Therefore, the risk of having a heart attack or stroke is clearly predicted by the amount of low density lipoprotein (LDL), high density lipoprotein (HDL) and triglycerides in the blood.
[0012]
Cholesterol and triglyceride levels can be reduced with medical intervention and / or food restriction, such as reduced food intake of cholesterol and saturated fat. However, some food restrictions have created new problems. For example, the change from butter to margarine has recently been recommended. Butter is high in cholesterol and saturated fat. On the other hand, stick margarine has a semi-solid consistency based on hydrogenated oil. However, the hydrogenation process forms trans fats. Clinical studies have demonstrated that trans fats are atherogenic and produce cardiovascular risks that are 2-3 times higher than natural saturated fats that confer stability to butter. There are currently doubts about the health benefits of margarine over butter in that margarine, especially stick margarine, can contain 20-30% trans fat. The American Heart Association currently recommends soft margarine. Such margarines, so-called trans-margarines, ie margarines formulated from fully hydrogenated coconut oil or coconut oil fractions have recently been marketed. This margarine is free of trans fat but has the highest level of saturated fat, the second most dangerous ingredient in margarine.
[0013]
Other compounds that reduce cholesterol levels in humans have been reported. For example, plant sterols, particularly β-sitosterol, have been reported to have anticholesterolemic effects and are thought to inhibit cholesterol absorption in the small intestine. Plant sterols are thought to replace cholesterol in bile salt micelles. About half of the ingested dietary cholesterol is absorbed, while less than 5% of β-sitosterol is absorbed. When plant sterols replace bile salt micelle cholesterol, cholesterol is excreted in the stool.
[0014]
Plant sterols occur naturally in saturated and unsaturated forms as free alcohols and esters. There are more unsaturated types. Natural sitosterols are known to be converted to sitostanols by hydrogenation, stanols are more effective per unit weight than sterols in preventing cholesterol absorption, and stanols are not absorbed It has been reported. Furthermore, the amount of β-sitosterol absorbed appears to be relatively constant with changes in the dose administered. Both sterols and stanols have been used as comparative markers of cholesterol absorption because of their non-absorbability. However, it appears that no sitostanol is absorbed and some sitosterol is absorbed.
[0015]
Furthermore, the addition of sitostanol to food reduces not only cholesterol absorption but also sitosterol and vitamin absorption. Some people have characterized this as an advantage, but the fact that sitostanols block the normal absorption of micronutrients can be problematic.
[0016]
Lancet 1995; 345: 1529-1532 reported the use of β-sitosterol (20 mg / day) in the treatment of benign prostatic hyperplasia (BPH). This symptom is a slow swelling of the fibrotic muscular and epithelial structures within the prostate, eventually leading to obstructive urinary symptoms, which are seen to some extent in most men over 50 years of age. Therefore, the use of only sitostanols as anticholesterolemia agents may increase the risk of BPH.
[0017]
Other compounds studied for the treatment and prevention of diseases including arteriosclerosis and high cholesterol levels include tocotrienols, which are natural vitamin E found in wheat germ, rice bran, oats and palms. .
[0018]
The concentration-dependent effects of tocotrienols on cholesterol in vitro may prove to perform post-transcriptional down-regulation of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMGCoA reductase) activity. This is an enzyme that is the target of statins, an anticholesterolemia that sells $ 8 billion a year in the US alone. Statins act directly to block HMGCoA reductase. However, statins sometimes cause liver dysfunction.
[0019]
Unfortunately, many patients who receive statins or tocotrienols respond to a decrease in the rate of cholesterol synthesis with a compensatory increase in the rate at which dietary cholesterol is absorbed from food. A recent study reports that 80% of patients who received statins as monotherapy failed to achieve their therapeutic goals. For statins, increasing the dose to a level often necessary to reduce the compensatory increase in cholesterol absorption increases the incidence of liver complications as described above by 11 times. Because of the risk of liver complications, statins must be administered under the direction of a doctor. Similarly, tocotrienols showed promise in vitro, but the results of clinical trials were unclear. Qureshi, Am.J Clin.Nutr.53: Suppl.4: 1021S-1026S, (1991 Apr.) reported a significant improvement in the lipid parameters of “responders” in a simple study. The following three studies in gastronomy patients supplemented with a tocotrienol-rich fraction (ie, palm-derived TRF) failed to confirm the results. Antila, et al, Helsinki Antioxidant Symposium, 1991 Wahlquist, M., et al, Nutrition Research 12: Suppl. 1: S181-S201 (1992); Tomeo, A., et al, Lipids 30: 1179-1183 (1995) reference. In response, Qureshi suggested in Qureshi A., et al, Lipids 30 (12): 1171-1177 (1995) that d-tocopherol inhibits the anticholesterolemia effect of tocotrienols. The results of clinical trials with oils according to the present invention do not support this conclusion, but rather indicate that synergy with other non-saponifiable components is necessary for blood lipid regulation.
[0020]
Margarine, recently marketed in Finland, Benecol, containing hydrogenated plant sterols extracted from pulp and paper waste, has a cholesterol level of 10 to 10 in patients using Benecol margarine instead of standard margarine in their diet. It was found to decrease by 15%. This reduction corresponds to a 20-30% reduction in cardiovascular risk. However, Benecol suffers from the disadvantage that plant sterol extracts require regulatory approval in the United States and other countries as a new food additive.
[0021]
Toxic forms of oxygen are involved in many chronic debilitating diseases. These include in particular cardiovascular, neoplastic, arthritis, age-related macular degeneration and premature aging. As the tissue level of these toxic forms of oxygen increases, the tissue level of protective antioxidants such as vitamin E group antioxidants decreases. These risk factors were confirmed by Gey in the case of cardiovascular disease, and he showed that decreasing blood vitamin E levels increased the frequency of ischemic heart disease. To investigate blood levels of peroxide, many researchers have added adducts of thiobarbituric acid (TBARS, also known as thiobarbituric acid reactant, also called malonaldehyde modifier) or The oxide was measured. Holvoet, Collen and van de Werf recently demonstrated the relevance of malonaldehyde-modified LDL as a marker for acute coronary syndrome. These scientists say that contamination with malonaldehyde (TBARS) type in the blood indicates endothelial damage and plaque instability, more accurately indicating acute coronary syndrome than other routine indicators such as troponin I. It pointed out. In an intervening study of patients with at least one stroke supplemented daily with Redeem, serum levels of TBARS substances were significantly reduced from pre-study values. Tomeo, AC, et al, Antioxidant effects of tocotrienols in patients with hyperlipidemia and carotid stenosis, Lipids 30: 1179-1183, 1995; Watkins, TR et al, Hypocholesterolemic and antioxidant effects of rice bran oil non-saponifiables in hypercholesterolemic subjects, Environ.Nutr.Interactions, 3: (2) See 1-8, 1999. Furthermore, their serum vitamin E levels were almost twice the pre-study values. The researchers in this group at the Jordan Heart Research Foundation have previously demonstrated similar relevance in experimental rat models. Watkins, TR, et al, γ-tocotrienol as a hypocholesterolemic and antioxidant agent in rats fed atherogenic diets, Lipids, 28: 1113, a cholesterol-lowering and antioxidant agent in blood fed rats. -1118,1993.
[0022]
Accordingly, a need exists for an edible oil that is trans-free, low in saturated fat, and suitable for use in the production of margarine. Preferably, the edible oil does not require additives that must be chemically treated (eg, hydrogenated).
[0023]
There is also a need for edible oil products that are safe and effective alternatives to known oil products that can be sold over-the-counter (OTC) or blended into the main food.
[0024]
Furthermore, recognizing the difficulties that patients have in changing bad eating habits over time, unlike cardiovascular drugs, it is safe enough for cardiovascular diseases that are safe enough to take without direct physician instruction There is a need for new intervention strategies.
[0025]
[Summary of preferred embodiment]
According to one aspect of the present invention, there is provided an edible oil that reduces cholesterol synthesis and absorption by human patients and promotes cholesterol excretion from human patients.
Preferably, the edible oil is substantially free of trans fatty acids.
[0026]
In a preferred embodiment, the oil of the present invention is a vegetable oil or a mixture of vegetable oils. Most preferably, the oil of the present invention is refined rice bran oil or a mixture of rice bran oil and palm oil.
[0027]
According to still another aspect of the present invention, a food containing any of the above oils is provided.
[0028]
According to an additional aspect of the present invention, there is provided a method for reducing total cholesterol and LDL and increasing HDL in a human patient comprising the step of administering to the patient an effective amount of any of the above oils.
[0029]
According to yet another aspect of the present invention, a method for producing an anticholesterolemia edible oil is provided. The method comprises providing an edible oil and when consumed in a preselected dose and preselected dosage form, the oil is about 25 to 750 mg of tocopherols, tocotrienols or combinations thereof on a daily basis, about 5 to Adjust the content of tocopherols, tocotrienols, free sterols, steryl esters and cycloartenols in the edible oil to provide about 500 mg of steryl esters and about 5 to about 500 mg of cycloartenols. It consists of steps.
[0030]
In a preferred embodiment, crude vegetable oil ("Oil A"), particularly crude rice bran oil, is dewaxed and degummed and kept at an elevated temperature under vacuum. An alkaline hydrated sodium silicate and a small amount are then used to convert free fatty acids to (saponified) soap under conditions that minimize loss of sterols and cycloartenol esters to the soap stock. Free fatty acids are removed from Oil A at a mild pH using potassium hydroxide. The tocotrienol-rich distillate, preferably rice bran or coconut oil deodorizer distillate, is then substantially saponified, preferably in isopropanol, and the non-saponifiable fraction is preferably extracted with hexane and water, and the extract (" Oil B "). Finally, the appropriate portions of Oil A and Oil B are mixed to produce a product with the desired concentration of tocopherols, tocotrienols, free sterols, steryl esters and cycloartenols.
[0031]
Other objects, features and advantages of the present invention will become apparent to those skilled in the art from the following detailed description. However, it should be understood that the detailed description and specific examples, while indicating the preferred embodiment of the invention, are intended for purposes of illustration and not limitation. Many changes and modifications within the scope of the present invention may be made without departing from the spirit thereof, and the invention includes all such modifications.
[0032]
[Detailed Description of Preferred Embodiments]
Human cholesterol levels are regulated by three cooperative mechanisms: synthesis, absorption and excretion. Since most known anticholesterolemia compounds and compositions target only one of these mechanisms, to function they must have a relatively large impact on the target mechanism.
[0033]
Edible oils according to the present invention reduce cholesterol synthesis and absorption while increasing cholesterol excretion. All three mechanisms work simultaneously to provide a reasonably balanced improvement in LDL, HDL and triglyceride levels.
[0034]
The decrease and increase in cholesterol synthesis, absorption and excretion in human patients is investigated by comparing their amounts measured in human patients before and after administration of the edible oil according to the present invention.
[0035]
The edible oil according to the invention is characterized as a “functional food” rather than a drug or nutraceutical. Functional foods are defined by the European Union as “daily foods that have been scientifically proven to promote health and have been treated or modified so that they can be sold under the name of health”. In Japan, “functional foods” are defined as everyday foods that are derived from natural ingredients only, consumed as part of the food, and not in supplement form (ie, not tablets or capsules).
[0036]
Preferably, the edible oil according to the invention contains at least one compound that reduces cholesterol synthesis in human patients, for example at least one tocotrienol. Specific examples of such compounds include α-tocotrienol, β-tocotrienol, γ-tocotrienol and δ-tocotrienol.
[0037]
The edible oil preferably also contains at least one compound that reduces cholesterol absorption in human patients, such as at least one free sterol or steryl ester. Specific compounds useful in the present invention include ferulic acid and fatty acid esters of campesterol, β-sitosterol and other sterols and stanols.
[0038]
Preferably included in the oil of the present invention is at least one compound that promotes cholesterol excretion in human patients. Such compounds include 3- (4-hydroxy-3-methoxyphenyl) -2-propanoic acid, 4-hydroxy-3-methoxy-cinnarnic acid or 3-methoxy-4-hydroxycinnamic acid. And ferulic acid (C₁₀H₁₀O₄) Cycloartenol esters. Specific examples of such compounds include 24-methylene-cycloartenol and ferulic acid esters of cycloartenol.
[0039]
The edible oil according to the invention is referred to as peroxide, but in the analysis it is also known as TBARS (thiobarbituric acid reactant) and malonaldehyde-like compound (ie TBA), which are known cardiovascular risk factors. The accumulation and blood levels of peroxidized lipids and other substances, such as proteins, carbohydrates and nucleic acids, which are being carried out, are preferably reduced.
[0040]
Most preferably, the edible oil of the present invention provides at least one compound that limits the formation and accumulation of TBARS and similar peroxide adducts in human patients.
[0041]
According to the present invention, the edible oil may be derived from either the tocotrienol or tocopherol group, but also exhibits vitamin E-like activity that imparts an antioxidant activity that can be measured as tocotrienol or tocopherol to tissues such as blood.
[0042]
Most preferably, at least one compound in the oil is derived from the tocotrienol or tocopherol group (described in detail herein) and therefore in the blood of a human patient at risk for cardiovascular disease. Increase serum tocopherol or tocotrienol levels.
[0043]
The tocopherols, tocotrienols, sterols, steryl esters and cycloartenols used according to the invention are preferably derived from natural sources, but may be produced synthetically if desired. In particular, the one or more components may be synthetic or derived from sources other than vegetable oil based.
[0044]
Most preferably, the oil of the present invention is substantially free of trans fatty acids. As used herein, “substantially free” means less than about 2% (weight / weight). At best, the oil of the present invention does not contain any trans fatty acids.
[0045]
The best ratio of (i) tocotrienols and / or tocopherols to (ii) free sterols and / or sterol esters to (iii) cycloartenols is about 1: 0.5: 0.05 to 1: 5: Clinical trials have shown that it is 0.5 and very preferably about 1: 1: 0.05. Therefore, in a preferred embodiment, the ratio of the above components in the oil of the present invention falls within this preferred range, and is best about 1: 1: 0.05. The oil according to the present invention may contain about 20-60% of a mixture of components (i), (ii) and (iii) of the above composition. In addition, the oils according to the present invention are all in weight / weight, i) about 10-30% tocopherols, tocotrienols or combinations thereof, ii) about 2-20% free sterols, iii) about Preferably, it contains 2-20% sterol esters, iv) about 0.1-1.0% cycloartenols, and v) about 7-19% saturated fat.
[0046]
The amount of tocopherols and tocotrienols administered to a human patient is preferably about 50-500 mg / day, or in other words about 10-200 mg / dosage unit. The amount of sterols and steryl esters is likewise preferably about 50-500 mg / day. The amount of cycloartenols is preferably about 2.5-25 mg / day. In a preferred embodiment, a human patient is administered about 400 mg of tocopherols and tocotrienols, 400 mg of sterols and steryl esters and 20 mg of cycloartenols. This corresponds to a preferred component ratio of about 1: 1: 0.05. As long as the proportions of the various components are within the above ranges and the patient consumes the total amount of each component within the above ranges per day, the proportions of the various components in the oil of the present invention can vary within wide limits.
[0047]
In a preferred embodiment, the edible oil according to the invention is a vegetable oil, in particular refined rice bran oil or a mixture of refined rice bran oil and coconut oil.
[0048]
Most preferably, the edible oil of the present invention is refined rice bran oil. Crude rice bran oil contains the highest proportion of non-saponifiables among all commercially available vegetable oils. Total non-saponifiables often exceed 4% (by weight), which is about 4 times the oil currently used in margarine production.
[0049]
Crude rice bran oil is preferably purified for use according to the present invention. When oleaginous nuka is separated from rice, a particularly active lipase enzyme is activated that causes a very fast increase in free fatty acids. Even when rice is stabilized with heat or chemicals immediately after grinding, 5-10% free fatty acid (FFA) levels are common; industrial rice bran oil may have FFA levels as high as 30% . Furthermore, there are seasonal variations in the FFA level. The low level is also high and is usually related to the temperature at which the nuka was extracted with the solvent. For this reason, rice bran oil is one of the most difficult oils to refine. Industrially, rice bran oil is processed by chemical refining.
[0050]
Another useful source of tocotrienols, coconut oil, also has high FFA levels because palm fruit releases lipase enzymes when crushed. The FFA level of coconut oil is 2-5%. Most commercial production of coconut oil uses physical refining processes. However, such purification methods result in low grade distillates with low tocopherol / tocotrienol concentrations, typically 3000-5000 ppm. The deodorizer distillate obtained from the chemical refiner is of higher concentration, typically 1-3% tocopherol / tocotrienol. However, during the chemical purification process, ferulic acid and fatty acid esters of sterols and cycloartenols are ionized and lost to the soap stock. Free sterols and triterpene alcohols (cycloartenols) are soluble to varying degrees in both polar and nonpolar solvents, but nonpolar solvents are selective for fatty acids and esters of ferulic acids. These molecules are structurally similar to cholesterol. When in the ester form, they are more easily replaced with cholesterol from micelles in the gastrointestinal tract, but are not absorbed per se or are rapidly excreted when absorbed.
[0051]
As such, a fraction rich in tocotrienol can be recovered from the chemically purified comedy dryer distillate, which is substantially devoid of these useful esters.
[0052]
Known production processes for tocopherol and tocotrienol rich fractions from deodorizer distillates include ion exchange, saponification and extraction from soaps, methyl esterification, esterification and molecular distillation of free fatty acids, and desterolization ( There are processes such as desterolization. In each of these processes, the tocotrienol-rich concentrate separation method intentionally or incidentally removes the natural steryl esters of ferrates and cycloartenols.
[0053]
Over time, the crude rice bran oil was observed to esterify free sterols with free fatty acids. It has been found that this process can be accelerated by aging the oil at high temperature under vacuum under mild conditions such that the free sterols and free cycloartenols are esterified and not tocopherols. Rogers, et al, J. Am. Oil Chem. Assoc., 70: No. 3, 1993 analyzed five commercial rice bran oils obtained from different manufacturers. The ferulic acid ester content of cycloartenols and plant sterols (quantified as oryzanols) is 115 to 787 ppm with an average of 400 ppm. In the same oil, the tocotrienol content is 72 to 1157 ppm, and the average is 500 ppm. 95% of the oryzanols and more than 60% of the tocotrienols are lost in conventional purification processes. Therefore, in order to obtain an effective amount of an anticholesterolemia active ingredient, the patient is required to consume 1 kg or more of oil per day.
[0054]
Thus, the present invention allows the optimal proportions of tocotrienols, steryl esters and cycloartenols to remain in the product, and that the sterols present are such that increased lipid solubility substantially reduces the absorption of dietary cholesterol. The need for new methods is met in that it is in the form of steryl esters that underlie the potency of the compounds.
[0055]
In general, the process of the present invention begins with dewaxed and degummed crude rice bran oil ("Oil A") and free sterols and triterpene alcohols esterified with free fatty acids. The free fatty acids are then converted by distillation or alkaline hydrated silica so that the free fatty acids are converted to (saponified) soap under conditions that minimize loss of sterols and cycloartenol esters to the soap stock. Residual free fatty acids are removed under conditions that maintain the esterification state of sterols and cycloartenols at mild pH using sodium acid and a small amount of potassium hydroxide. The tocotrienol-rich deodorizer distillate, preferably rice bran or coconut oil, is then substantially saponified in isopropanol and the non-saponifiable fraction is extracted with hexane and water to give an extract ("Oil B"). Finally, the appropriate amounts of Oil A and Oil B are mixed to form a product with the required concentrations of tocopherols, tocotrienols, free sterols, steryl esters and cycloartenols.
[0056]
In contrast to products such as Benecol containing synthetic components that require regulatory approval, preferred embodiments of vegetable oils according to the present invention, such as refined rice bran oil, are different from Benecol and are hydrogenated with the risk of trans fatty acid formation. And because they naturally contain the appropriate steryl and stannyl esters that do not require chemical treatment, they do not create regulatory issues.
[0057]
Vegetable oils according to the present invention include various foods including but not limited to butter, margarine, ice cream and mayonnaise-chocolate products; liquids such as soy milk and rice milk; and water-based drinks such as wine and mineral water Can be blended in. The oil of the present invention is suitable for encapsulating in gelatin shells in forming a soft gel. Whatever the form in which the oil of the present invention is specifically manufactured, the daily doses of the various components to human patients should be within the above ranges. Depending on the concentration of the oil of the present invention in the predetermined form, the total amount of food or encapsulated oil per serving also changes. High concentration forms such as soft gels are administered in less total amounts than diluted forms such as drinks.
[0058]
The invention is further illustrated by the following non-limiting examples. Example 1 discloses a process for producing one embodiment of the oil of the present invention. Examples 2, 3, 4, and 5 are humans that administer to a patient an oil of the invention, or other preparation containing components of the oil individually or in substantially different proportions than in the present invention. Comparison of research results. Example 2 compares the administration of palm derived tocotrienols with the oil of the present invention. Example 3 compares cometocotrienols treated by another method with the oil of the present invention. Example 4 compares the conventionally treated rice oil and the inventive oil. Example 5 compares the performance of the oil of the invention against two commercial margarines formulated with high levels of sterols and steryl esters.
[0059]
In each case, it has been demonstrated that the desired changes in blood lipid levels are achieved only when the proportion of active ingredient is according to the invention. The oils of the present invention are remarkably superior and have been shown to be exceptionally superior in reducing LDL levels, raising HDL and reducing triglyceride levels.
[0060]
Example 1
100 g of rice oil (“Oil A”) is analyzed, dewaxed and degummed, and the acid value of the oil is determined by the AOAC method. The oil contains 5% sterols, stanols and cycloartenols:
Campesterol 15%
Sitosterol 10
Campestanol 1.4
Stigmasterol 1.5
Sitostanol 1.5
Cycloartenol 30
24-Methylenecycloartenol 40
In addition, 1120 ppm of tocopherols and tocotrienols, and 58% as γ-tocotrienol. A natural aging process in which Oil A is kept at 125 ° C. under moderate vacuum overnight, thus removing the water produced during esterification and allowing the reaction to proceed normally to form fatty acid esters of sterols and cycloartenols. Accelerate. Oil A is then cooled to 50 ° C.
[0061]
Potassium hydroxide and alkaline hydrated sodium silicate (Britesorb in the slurry)^RNC, PQ Corporation, Valley Forge, PA), 1 part potassium hydroxide to 4 parts Britesorb^RA mild caustic is prepared by mixing at a ratio of 6 parts water. An amount of slurry corresponding to a 5% stoichiometric excess of the already measured acid value is added to the above cooled Oil A and the mixture is stirred at 60 ° C. for 1 hour, then the temperature is raised to 80 ° C. and the mixture is filtered To do.
[0062]
The refined oil is washed and dried to obtain a natural oil rich in ferulic acid sterol esters and cycloartenol esters but substantially free of free fatty acids and free sterols.
[0063]
A deodorizer distillate by chemical purification of rice bran oil is then obtained and analyzed. The distillate was found to contain the following components:
2.0% tocopherols and tocotrienols containing:
α-Tocopherol 0.5%
γ-Tocopherol 0.4%
α-Tocotrienol 0.1%
γ-Tocotrienol 1.0%
8.0% sterols, overall
2.0% steryl esters
75.2% total glycerides containing:
Free fatty acid 43.5%
Monoglycerides 6.7%
Diglycerides 8.6%
Triglycerides 16.4%
[0064]
The distribution of fatty acids is as follows:
C12: 0 0.1% (by weight)
C14: 0 1.0
C16: 0 27.5
C16: 1 0.3
C18: 0 2.0
C18: 1 39.0
C18: 2 27.0
C18: 3 0.8
C20: 0 0.8
C20: 1 0.6
C22: 0 0.2
C24: 0 0.4
[0065]
Then 50 g of distillate is mixed with 5 volumes of isopropanol and saponification is calculated from the above analysis using the AOAC method. The amount of 80% potassium hydroxide is then determined at 150% of the calculated stoichiometric weight required to saponify all glyceride components and slowly added to the reaction mixture. The reaction mixture is kept in a water bath for 30 minutes at 60 ° C., allowed to cool and then neutralized and extracted overnight with 10 volumes of hexane and 20 volumes of water. The hexane phase is separated, washed and dried, and the resulting semi-solid phase (“Oil B”) is combined with the neutral oil obtained above. The resulting refined oil is rich in tocopherols and tocotrienols, and esters of cycloartenols and sterols, but lacks free fatty acids, mono-, di- and triglycerides and free sterols.
[0066]
Optionally, the resulting semi-solid phase can be desterolized by precipitating free sterols from methanol at 4 ° C. and concentrated by distillation prior to mixing.
[0067]
The yield of tocopherols and tocotrienols is 45-75%, depending on the degree of saponification of the reaction mixture. The ratio of tocotrienols and tocopherols to cycloartenols and ferulic acid and sterol esters can also be adjusted by the degree of saponification.
[0068]
The ratio of Oil A and Oil B to be mixed is about 0.5 to 25% (weight / weight, based on the total weight of oil) to produce a re-adjusted oil at a concentration of tocopherols and tocotrienols. Can be changed. At high concentrations, the oil is suitable for encapsulation in a soft gel as a nutraceutical or therapeutic agent. At low concentrations, the oil can be incorporated directly into foods such as margarine or mayonnaise. In each case, the desired concentration is sufficient to provide 50-500 mg / day (or in other words about 20-200 mg / meal) of tocotrienols / tocopherols to the patient consuming the product.
[0069]
Example 2
Tocotrienol-rich fraction (TRF) derived from coconut oil, treated to lack sterols, steryl esters and cycloartenols, was administered to the test group in an amount of 160-240 mg three times a day for one year. . Tomeo, A., et al, Lipids 30: 1179-1183, 1995. Over the next two years, the dose of tocotrienols was increased to 240 mg three times a day. Kooyenga, D., et al, Asia Pacific J. Clin. Nutr. 6: 72-75, 1996. No changes in total cholesterol, LDL or HDL cholesterol, or triglyceride levels were observed over 2 years. The oil according to the invention containing 200 mg of tocotrienols was then administered to the test group at 2.4 g / day three times a day for one year. Blood lipids improved: a 20% decrease in LDL cholesterol, a 20% increase in HDL cholesterol, and a 23% decrease in triglycerides were observed. See Table 1.

[0070]
Example 3
Ten members of the study of Example 2 were treated with Nutriene, a rich tocotrienol concentrate from rice oil from Eastman Chemical Company that had been treated to lack oils of steryl esters and cycloartenols.^RSwitched to. The LDL cholesterol reduction observed in Example 2 was maintained, but a 25% increase in HDL cholesterol levels and a 50% decrease in triglycerides were lost. See Table 2.

[0071]
Example 4
Patients were administered margarine made from physically refined rice oil rich in sterols, steryl esters and cycloartenols (total 1.5 mg / day) but poor in tocotrienols (2.5 mg / day). There was no change in blood lipid levels. Weststrate, J.A. et al, European J. Clin. Nutr. 52: 334-343, 1998. See Table 3.

[0072]
Example 5
The patient of Example 4 was switched to a margarine product containing either stanol esters (Benecol) or steryl esters. Both groups took margarine containing about 3 g / day of the esters. A decrease in LDL cholesterol concentration of 8-13% was observed, but no significant change was seen with HDL cholesterol or triglycerides. This study confirms the results of other studies of sitostanol esters but reports significant depletion of plasma antioxidants. Miettinen, T.A. et al, New Engl. J. Med. 333: 1308-1312, 1995; Weststrate, J.A. et al, Eur. J. Clin. Nutr. 52: 334-343, 1998. See Table 4.

[0073]
Conclusion
The above data demonstrates that control of the amount of tocotrienols / tocopherols, steryl esters, free sterols and cycloartenols according to the present invention regulates blood lipid levels in the best therapeutic approach. is doing. The results of Example 2 indicate that administration of tocotrienols alone does not affect blood lipid levels. Example 2 further demonstrates that administration of an edible oil according to the present invention reduces total cholesterol, LDL cholesterol and triglycerides while increasing HDL cholesterol. Example 3 demonstrates that rice-derived tocotrienol concentrates lacking steryl esters and cycloartenols are ineffective at increasing HDL levels or decreasing triglycerides. Example 4 shows that physically refined rice oil poor in tocotrienols is ineffective, and Example 5 shows that administration of sterols and steryl esters without tocotrienols does not change HDL or triglyceride levels It is shown that.
[0074]
The reduction in serum total cholesterol and LDL cholesterol achieved by patients receiving oil according to the present invention is comparable to the best results achieved with drug therapy. A 20% increase in HDL cholesterol levels and a 23% decrease in triglycerides are particularly significant. Watkins, T. et al, Environmental Nutr. Interactions, 3: 8-18, 1999. The total cholesterol (TC) / HDL cholesterol ratio has been found to be an excellent measure of the risk of coronary heart disease compared to total cholesterol or LDL cholesterol levels alone. In the Framingham study, the 8-year probable ratio of coronary heart disease increased 10-fold in humans with the lowest TC / HDL ratio compared to the highest human. Kinosian, B. et al, L. J. Invest. Med. 43, 443-450, 1995. On average, the TC / HDL ratio of patients receiving the oil according to the invention was reduced by 28% from 5.97 to 4.29. The effects that can occur with the oils of the present invention to improve public health are self-evident. A 50-year-old man with a 28% reduction in the TC / HDL ratio reported in a clinical trial using the oil of the present invention is twice as likely to live up to over 75 years.
[0075]
The above examples are for illustrative purposes only and do not in any way limit the scope of Applicants' invention as specified by the claims.

Claims

All percentages are weight / weight, i) 10-30% tocopherols, tocotrienols or combinations thereof, ii) 2-20% free sterols, iii) 2-20% sterol esters, iv) An edible oil comprising 0.1-1.0% cycloartenols and v) 7-19% saturated fat.

The edible oil according to claim 1, comprising 70 to 80% total fat.

2. Edible oil according to claim 1, comprising less than 2% trans fatty acid.

The edible oil according to claim 1, comprising 20 to 60% non-saponifiable components.

The edible oil according to claim 1, which is a vegetable oil or a mixture of vegetable oils.

The edible oil according to claim 1 which is refined rice bran oil.

The edible oil according to claim 1, which is a mixture of rice bran oil and coconut oil.

A food comprising the oil according to claim 1.

An edible oil comprising 20-60% non-saponifiable components,
The non-saponifiable component comprises (i) at least one tocotrienol or tocopherol, (ii) at least one free sterol or sterol ester, and (iii) at least one cycloartenol;
Here, the ratio of (i) :( ii) is in the range of 1: 0.5 to 1: 5.0, and the ratio of (ii) :( iii) is 1: 0.01 to 1: 0.1. An edible oil in which the ratio of (i) :( iii) is in the range of 1: 0.05 to 1: 0.5.

The oil according to claim 9, wherein the ratio of (i) :( ii) :( iii) is 1: 1: 0.05.

A method for producing an anticholesterolemia edible oil, comprising:
a) Prepare cooking oil;
b) all percentages by weight / weight, (i) 10-30% tocopherols, tocotrienols or combinations thereof, (ii) 2-20% free sterols, (iii) 2-20% sterols Esters, (iv) inclusion of tocopherols, tocotrienols, free sterols, sterol esters and cycloartenols in the edible oil so that the oil contains 0.1-1.0% cycloartenols A method comprising adjusting the rate.

In step a), the edible oil contains at least one saturated fat, and in step b) the edible oil contains 7-19% saturated fat. 12. The method of claim 11, wherein the minutes are adjusted.

12. The method of claim 11, wherein after step a), the edible oil is substantially free of trans fatty acids.

A method of producing an edible oil that reduces total serum cholesterol and serum LDL cholesterol and increases serum HDL cholesterol in a human patient comprising:
An edible oil comprising (a) (i) at least one tocotrienol and tocopherol, (ii) at least one free sterol and sterol ester, and (iii) at least one cycloartenol is provided. ,
(B) The ratio of (i) :( ii) is in the range of 1: 0.5 to 1: 5.0, and the ratio of (ii) :( iii) is 1: 0.01 to 1: 0.1. And adjusting the ingredients of the edible oil so that the ratio of (i) :( iii) is in the range of 1: 0.05 to 1: 0.5. .

15. The method of claim 14, wherein the edible oil also reduces blood triglyceride levels in a human patient.

A method for producing a food product that reduces total serum cholesterol and serum LDL cholesterol and increases serum HDL cholesterol in a human patient comprising:
Preparing an edible oil obtained by the method of claim 14;
Including the edible oil in food.

15. The method of claim 14, wherein the oil reduces total serum cholesterol in the human patient by 5-25%.

15. The method of claim 14, wherein the oil reduces serum LDL cholesterol in the human patient by 5-25%.

15. The method of claim 14, wherein the oil increases serum HDL cholesterol in the human patient by 10-30%.

15. The method of claim 14, wherein the oil increases the HDL to total cholesterol ratio in the human patient by 10-30%.

15. The method of claim 14, wherein the oil reduces serum levels of peroxide, measured as TBARS, by 10-60% in the human patient.

15. The method of claim 14, wherein the oil is one that increases tocopherol or tocotrienol serum levels in the human patient by 20-110%.

A method for producing an edible oil that reduces total blood cholesterol in a human patient comprising:
providing an edible oil comprising (a) (i) at least one tocotrienol and tocopherol, (ii) at least one free sterol and sterol ester, and (iii) at least one cycloartenol,
b) The ratio of (i) :( ii) is in the range of 1: 0.5 to 1: 5.0, and the ratio of (ii) :( iii) is 1: 0.01 to 1: 0. And adjusting the ingredients of the edible oil so that the ratio of (i) :( iii) is in the range of 1: 0.05 to 1: 0.5. ,Method.

24. The method of claim 23, wherein the oil comprises at least one compound that reduces cholesterol synthesis in the human patient.

24. The method of claim 23, wherein the oil comprises at least one compound that increases cholesterol excretion from the human patient.

The ratio of the mixed components (i) to (iii) effectively reduces the absorption, synthesis and blood levels of cholesterol by a human patient and increases the excretion of cholesterol from the human patient; 24. The method of claim 23.

A method of producing an oil that reduces total blood cholesterol in a human patient comprising:
a) Prepare oil,
b) said oil is weight / weight in all percentages, (i) 10-30% tocopherols, tocotrienols or combinations thereof, (ii) 2-20% free sterols, (iii) 2- (Iv) of tocopherols, tocotrienols, free sterols, sterol esters, and cycloartenols to comprise 20% sterol esters, (iv) 0.1-1.0% cycloartenols. A method comprising adjusting the amount.

28. The method of claim 27, wherein the oil is refined rice bran oil.

28. The method of claim 27, wherein the oil is a mixture of rice bran oil and coconut oil.

The oil comprises at least one saturated fat;
28. The method of claim 27, further comprising preparing the oil composition such that the amount of saturated fat in the oil is 7-19%.

28. The method of claim 27, wherein the edible oil is substantially free of trans fatty acids.