JP3668278B2 - Novel carotenoid and process for producing the same - Google Patents

Description

【０００７】
【化４】

【０００８】
また、本発明は、アグロバクテリウム属に属し、上記記載のカロテノイド生産能を有する微生物を培地に培養し、培地中に上記記載のカロテノイドを生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする上記記載のカロテノイドの製造法である。
以下に本発明を詳細に説明する。
【０００９】
最初に本発明の新規カロテノイドであるアスタキサンチングルコサイド及びアドニキサンチングルコサイドについて説明する。
アスタキサンチングルコサイド［式（Ｉ）の化合物］の理化学的性質は以下の通りである。
１．物質の色：赤色粉末
２．分子量：758
３．分子式：Ｃ₄₆Ｈ₆₂Ｏ₉

５．可視部吸収スペクトル（ベンゼン中）：λmax 487nm
６．¹Ｈ-ＮＭＲ（重クロロホルム中で測定，500MHz)
δppm(水素数、多重度、結合定数）: 1.21(3H,s), 1.23(3H,s), 1.32(3H,s),1.35(3H,s), 1.81(1H,t,13), 1.91(3H,s), 1.94(3H,s), 1.99-2.01(12H,s),2.04(1H,t,14), 2.15(1H,dd,6,14), 2.16(1H,dd,6,13), 3.41(1H,m), 3.45(1H,dd,8,9), 3.61(2H,m), 3.83(1H,m), 3.93(1H,m), 4.32(1H,ddd,2,6,13), 4.40(1H,dd,6,14), 4.57(1H,d,8), 6.20-6.70(14H,m)
７．¹³Ｃ-ＮＭＲ（重クロロホルム中で測定、125MHz)
δppm(多重度）: 12.58(q), 12.59(q), 12.83(q), 12.84(q), 14.0(q), 14.1(q), 26.2 (q), 26.6(q), 30.6(q), 30.8(q), 36.8(s), 37.4(s), 44.7(t),45.5(t), 62.7(t), 69.2(d), 70.3(d), 74.3(d), 75.7(d), 77.2(d), 77.6(d),104.9(d), 123.0(d), 123.3(d), 124.5(d), 124.7(d), 126.9(s), 127.9(s), 130.6(d), 130.8(d), 133.8(d), 134.0(d), 134.4(s), 134.6(s), 135.1(d), 135.5(d), 136.7(s), 136.8(s), 139.7(d), 140.0(d), 142.3(d), 142.7(d), 162.2(s), 162.4(s), 199.3(s), 200.4(s)
８．溶解性：含水メタノール、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、酢酸エチルに易溶。ヘキサンに難溶。
【００１０】
アドニキサンチングルコサイド［式（II）の化合物］の理化学的性質は以下の通りである。
１．物質の色：赤色粉末
２．分子量：744
３．分子式：Ｃ₄₆Ｈ₆₄Ｏ₈

５．可視部吸収スペクトル（ベンゼン中）：λmax 476nm
６．¹Ｈ-ＮＭＲ（重クロロホルム中で測定，500MHz)
δppm(水素数、多重度、結合定数）: 1.08(6H,s), 1.23(3H,s), 1.35(3H,s),1.48(1H,t,12), 1.74(3H,s), 1.77(1H,ddd,2,4,12), 1.91(3H,s), 1.98-2.00(12H,s), 2.04(1H,m), 2.05(1H,m), 2.15(1H,dd,6,14), 2.39(1H,ddd,2,6,17),3.41(1H,m), 3.45(1H,dd,8,9), 3.61(2H,m), 3.83(1H,m), 3.93(1H,m), 4.00(1H,m), 4.40(1H,dd,6,14), 4.57(1H,d,8), 6.10-6.70(14H,m)
７．溶解性：含水メタノール、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、酢酸エチルに易溶。ヘキサンに難溶。
【００１１】
次に、アスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドの製造法について説明する。
アスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドは、例えば、N-81106 株を培地に培養し、培地中にこれらのカロテノイドを生成蓄積せしめ、そして、これらを採取することにより製造することができる。このN-81106 株は、沖縄県慶良間列島海域の海水より分離した菌株で、以下のような菌学的性質を示す。
【００１２】
なお、この菌株の詳細な性質については Journal of Marine Biotechnology（泉田仁、足立恭子、西島美由紀、遠藤衛、幹渉, (1995)）により公表される予定であるが、本出願の出願時点では未公表である。
（１）形態
菌の形・大きさ：桿状、0.９μｍ×1.２μｍ
運動性：あり
鞭毛：周毛あり
細胞の多形成：なし
胞子の形成：なし
グラム染色：陰性
（２）各培地における生育状況
肉汁寒天平板培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円形コロニーを形成する。
【００１３】
肉汁寒天斜面培養：非拡散性で光沢を有する、橙色の円形コロニーを形成する。
肉汁液体培養：培地全体に均一に生育し、橙色を示す。
肉汁ゼラチン穿刺培養：ほとんど生育しない。
（３）生理学的性質
硝酸塩の還元：陽性
脱窒反応：陰性
インドールの生成：陰性
クエン酸の利用：陰性
色素の生成：脂溶性の赤橙色色素
ウレアーゼ活性：陰性
オキシダーゼ活性：陽性
カタラーゼ活性：陽性
β−グルコシダーゼ活性（エスクリン分解性）：陽性
β−ガラクトシダーゼ活性：陽性
生育の範囲：pH ５〜９、温度 10〜40℃
酸素に対する態度：好気性
海水耐性：陽性
Ｏ−Ｆテスト：酸化
糖類の同化能：
陽性：Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−フルクトース、乳糖、麦芽糖、ショ糖、グリコーゲン、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン
陰性：Ｌ−アラビノース、Ｄ−マンニトール、イノシトール、Ｌ−ラムノース、Ｄ−ソルビトール
有機酸の同化能：
陽性：乳酸塩
陰性：クエン酸塩、リンゴ酸塩、グルコン酸塩、カプリン酸塩、コハク酸塩、アジピン酸塩
他の有機物の資化能
陽性：イノシン、ウリジン、グルコース−１−リン酸、グルコース−６−リン酸
陰性：ゼラチン、Ｌ−アルギニン、ＤＮＡ、カゼイン
（４）化学的性質
Ｇ＋Ｃ含量 67.4％
ユビキノンの型 Ｑ-10
以上の菌学的性質をバージーズ・マニュアル・オブ・システマチック・バクテリオロジーにもとづき検索し、本菌株をアグロバクテリウム・アウランティアカスに属するものと同定した。また、本菌株は、Agrobacterium aurantiacus. nov N-81106として工業技術院生命工学技術研究所にFERM P-14023として寄託されている（原寄託日：平成５年12月16日) 。
【００１４】
アスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドの製造に用いる菌株は、上記の N-81106株だけでなく、アグロバクテリウム属に属し、アスタキサンチングルコサイドまたはアドニキサンチングルコサイド生産能を有する菌株であれば特に限定されない。また、アグロバクテリウム属バクテリアの人工的変異方法、例えば紫外線照射、Ｘ線照射、変異誘発剤処理などあるいは自然発生による変異株、また遺伝子操作、細胞融合による変異株でも、アスタキサンチングルコサイドまたはアドニキサンチングルコサイドを生産するものであればいずれも本発明に用いることができる。
【００１５】
本発明の製造法においては、上記微生物を一般に微生物の培養に用いられる培地で培養し、産生されるアスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドを常法により採取する。
まず培養法について述べる。
アグロバクテリウム属バクテリアの培養には通常の培養方法を用いることができる。培地としては資化可能な炭素源、窒素源、無機物および必要な生育、生産促進物質を程よく含有する培地であれば合成培地、天然培地いずれでも使用可能である。炭素源としてはグルコース、澱粉、デキストリン、マンノース、フラクトース、シュークロース、ラクトース、キシロース、アラビノース、マンニトール、糖蜜などを単独または組み合わせて用いられる。さらに、菌の資化能によっては炭化水素、アルコール類、有機酸類なども用いられる。窒素源としては塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーン・スチーブ・リカー、大豆粉、カザミノ酸などが単独または組み合わせて用いられる。そのほか、食塩、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅などの無機塩類や海水または天然海水中に存在する無機塩類を必要に応じて加える。また、β−カロテン生合成上の前駆体と考えられる代謝マップ（日本生化学会編、東京化学同人発行、1980年)123〜125ページ記載の前駆体やアスタキサンチン、アドニキサンチンなどのアスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドの生産を促進する微量成分を適当に添加することができる。
【００１６】
培養法としては、液体培養法、とくに深部攪拌培養法がもっとも適している。培養温度は16〜40℃、特に20〜30℃が適当であり、培養中の培地のpHはアンモニア水や炭酸アンモニウム溶液などを添加して、４〜10、特に６〜８に維持することが望ましい。液体培養で通常１〜７日培養をおこなうと、アスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドが菌体中に生成蓄積される。培養物中の生成量が最大に達したときに培養を停止する。
【００１７】
培養物からアスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドの単離精製は、微生物代謝産物をその培養物から単離精製するために常用される方法に従っておこなわれる。例えば培養物をろ過や遠心分離により培養ろ液と菌体に分け、菌体を有機溶剤（例えば、ヘキサン、ベンゼン、クロロホルム、アセトン、エーテル、酢酸エチル、エタノール、メタノールおよび以上の含水物など）で抽出する。また、培養ろ液中にアスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドが存在する場合には、酢酸エチルやジエチルエーテルなどの有機溶媒による抽出や、吸着型樹脂（Amberite XAD-2など) に吸着後、適当な有機溶媒にて抽出物を得ることが可能である。ついで抽出液を濃縮後、シリカゲル、化学結合型シリカゲル、ゲルろ過剤などを用いた液体クロマトグラフィーにより、単離精製する。アスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドの動向は薄層クロマトグラフィーによるアスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドに特徴的な赤橙色を目安として追跡することができる。
【００１８】
アスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイドは、アスタキサンチン等の公知のカロテノイドと同様に養殖魚介類の色調改善剤、色揚げ剤として利用することができる。
【００１９】
【実施例】
以下実施例により本発明を説明するが、本発明はこれに限定されるものではないことは言うまでもない。
〔実施例１〕
種菌としてアグロバクテリウム・アウランティアカス（FERM P-14023) を用いた。前培養及び本培養には、 DIFCO社製「MARINE BROTH」を説明書記載の方法により調製した培地（培地組成を表１に示す）適宜培養槽に分注し殺菌後用いた。前培養として、500ml 容量三角フラスコ中の250ml の培地、計20Ｌに、該菌株を一白耳植菌し、25℃で96時間振とう（100rpm) 培養した。
【００２０】
【表１】

【００２１】
培養液を遠心分離（10,000rpm)して菌体分画を得、アセトン2000mlを添加し攪拌した後、沈澱物をろ別し、抽出液を200ml に濃縮した。得られた濃縮液に酢酸エチルおよび蒸留水を各1000ml添加し、分液ロートにて酢酸エチル画分を得、濃縮・乾固した。乾固物をさらにシリカゲルカラムにクロロホルムとメタノールの混合液を溶媒に用いて供した。溶出したクロロホルム：メタノール（９：１）の画分について，TSK gel ODS-80Tsと蒸留水：メタノール（95：５）を用いた高速液体クロマトグラフィーによりアスタキサンチングルコサイド２mgおよびアドニキサンチングルコサイド0.６mgを得た。
【００２２】
【発明の効果】
本発明により新規高極性カロテノイドであるアスタキサンチングルコサイドおよびアドニキサンチングルコサイド、並びにその製造方法が提供される。[0001]
[Industrial application fields]
The present invention relates to astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside, which are novel carotenoids, and a method for producing the same. Astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside are useful for color improvement agents, food additives and the like of cultured fish and shellfish.
[0002]
[Prior art]
Carotenoids such as beta-carotene are widely distributed in various animals in addition to microorganisms and plants. Astaxanthin is known as a red carotenoid distributed in the body surface of shrimp, crabs, red sea bream, and salmon muscles, and is used as a color tone improving agent and a color frying agent for cultured seafood. In recent years, it has also been reported to have an antioxidant effect (Nobuto Shimizu, Miki Wataru, carotenoids of marine organisms, Miki Wataru, Hoshiseisha Koseikaku, 1993) and is expected to be applied to food additives.
[0003]
However, since astaxanthin is a fat-soluble substance, there are problems in terms of solubility such as solubility in water-soluble solvents and addition to water-soluble compounds. Therefore, development of novel highly polar carotenoids, particularly highly polar carotenoids having the same basic skeleton as astaxanthin is desired.
[0004]
[Problems to be solved by the invention]
In view of the above circumstances, an object of the present invention is to provide a novel highly polar carotenoid and a method for producing the same.
[0005]
[Means for Solving the Problems]
As a result of searching from the natural world, the present inventors have found novel compounds astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside and completed the present invention.
That is, the present invention is a novel carotenoid represented by the following formula (I) or (II).
[0006]
[Chemical 3]

[0007]
[Formula 4]

[0008]
Further, the present invention is a microorganism belonging to the genus Agrobacterium, cultivating a microorganism having the above-mentioned carotenoid-producing ability in a medium, producing and accumulating the above-mentioned carotenoid in the medium, and collecting it. It is a manufacturing method of the described carotenoid.
The present invention is described in detail below.
[0009]
First, astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside, which are novel carotenoids of the present invention, will be described.
The physicochemical properties of astaxanthin glucoside [compound of formula (I)] are as follows.
1. Material color: red powder2. Molecular weight: 758
3. Molecular formula: C ₄₆ H ₆₂ O ₉

5. Visible absorption spectrum (in benzene): λmax 487nm
6). ¹ H-NMR (measured in deuterated chloroform, 500 MHz)
δppm (hydrogen number, multiplicity, coupling constant): 1.21 (3H, s), 1.23 (3H, s), 1.32 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.81 (1H, t, 13), 1.91 (3H, s), 1.94 (3H, s), 1.99-2.01 (12H, s), 2.04 (1H, t, 14), 2.15 (1H, dd, 6,14), 2.16 (1H, dd, 6, 13), 3.41 (1H, m), 3.45 (1H, dd, 8,9), 3.61 (2H, m), 3.83 (1H, m), 3.93 (1H, m), 4.32 (1H, ddd, 2, 6,13), 4.40 (1H, dd, 6,14), 4.57 (1H, d, 8), 6.20-6.70 (14H, m)
7. ¹³ C-NMR (measured in deuterated chloroform, 125 MHz)
δppm (Multiplicity): 12.58 (q), 12.59 (q), 12.83 (q), 12.84 (q), 14.0 (q), 14.1 (q), 26.2 (q), 26.6 (q), 30.6 (q) , 30.8 (q), 36.8 (s), 37.4 (s), 44.7 (t), 45.5 (t), 62.7 (t), 69.2 (d), 70.3 (d), 74.3 (d), 75.7 (d) , 77.2 (d), 77.6 (d), 104.9 (d), 123.0 (d), 123.3 (d), 124.5 (d), 124.7 (d), 126.9 (s), 127.9 (s), 130.6 (d) , 130.8 (d), 133.8 (d), 134.0 (d), 134.4 (s), 134.6 (s), 135.1 (d), 135.5 (d), 136.7 (s), 136.8 (s), 139.7 (d) , 140.0 (d), 142.3 (d), 142.7 (d), 162.2 (s), 162.4 (s), 199.3 (s), 200.4 (s)
8). Solubility: Easily soluble in hydrous methanol, methanol, ethanol, chloroform, acetone, ethyl acetate. Insoluble in hexane.
[0010]
The physicochemical properties of adonixanthin glucoside [compound of formula (II)] are as follows.
1. Material color: red powder2. Molecular weight: 744
3. Molecular formula: C ₄₆ H ₆₄ O ₈

5. Visible absorption spectrum (in benzene): λmax 476nm
6). ¹ H-NMR (measured in deuterated chloroform, 500 MHz)
δppm (hydrogen number, multiplicity, coupling constant): 1.08 (6H, s), 1.23 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.48 (1H, t, 12), 1.74 (3H, s), 1.77 (1H, ddd, 2,4,12), 1.91 (3H, s), 1.98-2.00 (12H, s), 2.04 (1H, m), 2.05 (1H, m), 2.15 (1H, dd, 6, 14), 2.39 (1H, ddd, 2,6,17), 3.41 (1H, m), 3.45 (1H, dd, 8,9), 3.61 (2H, m), 3.83 (1H, m), 3.93 ( 1H, m), 4.00 (1H, m), 4.40 (1H, dd, 6,14), 4.57 (1H, d, 8), 6.10-6.70 (14H, m)
7. Solubility: Easily soluble in hydrous methanol, methanol, ethanol, chloroform, acetone, ethyl acetate. Insoluble in hexane.
[0011]
Next, a method for producing astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside will be described.
Astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside can be produced, for example, by culturing the N-81106 strain in a medium, producing and accumulating these carotenoids in the medium, and collecting them. This N-81106 strain is a strain isolated from seawater in the Kerama Islands area of Okinawa Prefecture and exhibits the following mycological properties.
[0012]
The detailed properties of this strain are scheduled to be published by Journal of Marine Biotechnology (Jin Izumida, Atsuko Adachi, Miyuki Nishijima, Mamoru Endo, Miki Wataru, (1995)), but it has not been published at the time of filing this application. It is public.
(1) Shape and size of morphological fungus: rod-shaped, 0.9 μm × 1.2 μm
Motility: Yes flagellar: Peripheral hair cell multiformation: None Spore formation: None Gram staining: Negative (2) Growth status in each medium Meat broth agar plate culture: Non-diffusible, glossy, orange round colonies Form.
[0013]
Meat broth agar slant culture: Non-diffusible and glossy orange round colonies are formed.
Meat broth liquid culture: Grows uniformly throughout the medium and shows an orange color.
Meat broth gelatin puncture culture: hardly grows.
(3) Physiological properties Reduction of nitrate: Positive denitrification reaction: Formation of negative indole: Use of negative citric acid: Formation of negative pigment: Fat-soluble red-orange pigment urease activity: Negative oxidase activity: Positive catalase activity: Positive β -Glucosidase activity (esculin degradability): Positive β-galactosidase activity: Positive growth range: pH 5-9, temperature 10-40 ° C
Attitude toward oxygen: aerobic seawater tolerance: positive OF test: assimilation ability of oxidized sugars:
Positive: D-glucose, D-mannose, D-galactose, D-fructose, lactose, maltose, sucrose, glycogen, N-acetyl-D-glucosamine Negative: L-arabinose, D-mannitol, inositol, L-rhamnose, Assimilation ability of D-sorbitol organic acid:
Positive: Lactate negative: Citrate, malate, gluconate, caprate, succinate, adipate and other organic substances assimilation ability Positive: inosine, uridine, glucose-1-phosphate, glucose -6-phosphate negative: gelatin, L-arginine, DNA, casein (4) Chemical properties G + C content 67.4%
Ubiquinone type Q-10
The above bacteriological properties were searched based on the Virgie's Manual of Systematic Bacteriology, and this strain was identified as belonging to Agrobacterium aurantiacus. In addition, this strain has been deposited as Agrobacterium aurantiacus. Nov N-81106 at FERM P-14023 at the Institute of Biotechnology, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (original deposit date: December 16, 1993).
[0014]
The strain used for the production of astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside is not only the above-mentioned N-81106 strain, but also belongs to the genus Agrobacterium and has the ability to produce astaxanthin glucoside or adonixanthin glucoside. There is no particular limitation. In addition, astaxanthin glucoside or adoni can also be used for artificial mutation methods of Agrobacterium, such as ultraviolet irradiation, X-ray irradiation, mutagen treatment, naturally occurring mutant strains, and mutant strains by gene manipulation and cell fusion. Any substance that produces xanthine glucoside can be used in the present invention.
[0015]
In the production method of the present invention, the microorganism is cultured in a medium generally used for culturing microorganisms, and the produced astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside are collected by a conventional method.
First, the culture method is described.
A normal culture method can be used for culturing Agrobacterium. As a medium, any medium can be used as long as it contains moderately assimilable carbon sources, nitrogen sources, inorganic substances, and necessary growth and production promoting substances. As the carbon source, glucose, starch, dextrin, mannose, fructose, sucrose, lactose, xylose, arabinose, mannitol, molasses and the like are used alone or in combination. Furthermore, hydrocarbons, alcohols, organic acids and the like are also used depending on the assimilation ability of the bacteria. As the nitrogen source, ammonium chloride, ammonium nitrate, sodium nitrate, urea, peptone, meat extract, yeast extract, dry yeast, corn stew liquor, soy flour, casamino acid and the like are used alone or in combination. In addition, inorganic salts such as salt, potassium chloride, magnesium sulfate, calcium carbonate, potassium dihydrogen phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, ferrous sulfate, calcium chloride, manganese sulfate, zinc sulfate, copper sulfate, seawater or natural seawater Inorganic salts present therein are added as needed. In addition, a metabolic map considered as a precursor in β-carotene biosynthesis (edited by the Japanese Biochemical Society, published by Tokyo Chemical Dojin, 1980), as described in pages 123 to 125, astaxanthin glucoside such as astaxanthin and adonixanthin, and The trace component which accelerates | stimulates the production of adonixanthin glucoside can be added appropriately.
[0016]
As the culture method, a liquid culture method, particularly a deep stirring culture method is most suitable. The culture temperature is suitably 16 to 40 ° C., particularly 20 to 30 ° C. The pH of the medium during the culture can be maintained at 4 to 10, particularly 6 to 8 by adding aqueous ammonia or ammonium carbonate solution. desirable. When culture is usually performed for 1 to 7 days in liquid culture, astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside are produced and accumulated in the cells. The culture is stopped when the production amount in the culture reaches the maximum.
[0017]
Isolation and purification of astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside from the culture is performed according to a method commonly used for isolating and purifying microbial metabolites from the culture. For example, the culture is separated into culture filtrate and cells by filtration or centrifugation, and the cells are separated with an organic solvent (for example, hexane, benzene, chloroform, acetone, ether, ethyl acetate, ethanol, methanol, and the above-mentioned water-containing products). Extract. In addition, when astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside are present in the culture filtrate, after extraction with an organic solvent such as ethyl acetate or diethyl ether or adsorption to an adsorption resin (such as Amberite XAD-2) It is possible to obtain the extract in a suitable organic solvent. Next, the extract is concentrated and then isolated and purified by liquid chromatography using silica gel, chemically bonded silica gel, gel filtration agent, or the like. The trend of astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside can be traced by using the reddish orange color characteristic of astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside by thin layer chromatography as a guide.
[0018]
Astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside can be used as a color tone improving agent and a color frying agent for cultured seafood as well as known carotenoids such as astaxanthin.
[0019]
【Example】
EXAMPLES The present invention will be described below with reference to examples, but it goes without saying that the present invention is not limited to these examples.
[Example 1]
Agrobacterium aurantiacus (FERM P-14023) was used as an inoculum. For pre-culture and main culture, a medium prepared by the method described in DIFCO "MARINE BROTH" (medium composition is shown in Table 1) was appropriately dispensed in a culture tank and used after sterilization. As a pre-culture, the strain was inoculated into 20 L in a 250 ml medium in a 500 ml Erlenmeyer flask and cultured with shaking (100 rpm) at 25 ° C. for 96 hours.
[0020]
[Table 1]

[0021]
The culture broth was centrifuged (10,000 rpm) to obtain a cell fraction, and after adding 2000 ml of acetone and stirring, the precipitate was filtered off and the extract was concentrated to 200 ml. To the obtained concentrated liquid, 1000 ml of ethyl acetate and distilled water were added, and an ethyl acetate fraction was obtained with a separatory funnel, and concentrated and dried. The dried product was further applied to a silica gel column using a mixture of chloroform and methanol as a solvent. The eluted chloroform: methanol (9: 1) fraction was subjected to high performance liquid chromatography using TSK gel ODS-80Ts and distilled water: methanol (95: 5) to give 2 mg of astaxanthin glucoside and 0. 6 mg was obtained.
[0022]
【The invention's effect】
The present invention provides astaxanthin glucoside and adonixanthin glucoside, which are novel highly polar carotenoids, and a method for producing the same.

Claims (2)

A novel carotenoid represented by the following formula (I) or (II).

A microorganism belonging to the genus Agrobacterium and having the ability to produce carotenoid according to claim 1 is cultured in a medium, the carotenoid according to claim 1 is produced and accumulated in the medium, and this is collected. A method for producing the carotenoid as described.