【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は抗ウイルス活性を有する新規なホスホナートヌクレオチドエステル誘導体又はその薬剤として許容され得る塩に関し、詳細には抗ウイルス剤として経口投与が可能なホスホナートヌクレオチドエステル誘導体又はその薬剤として許容され得る塩に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
感染性のウイルス疾患は医学上重要な問題として認識されており、このような疾患を治療する目的で、抗ウイルス活性を有し、同時に正常細胞系に対しては増殖阻害活性を持たない薬剤の開発が検討されている。例えばホスホナートヌクレオチド類は、選択的抗ウイルス剤として現在盛んに研究が進められている。具体的には、９−（２−ホスホニルメトキシ）エチルアデニン（ＰＭＥＡ）、９−（２−ホスホニルメトキシ）エチル−２，６−ジアミノプリン（ＰＭＤＡＰ）等が単純ヘルペス１型及び２型（ＨＳＶ−１及びＨＳＶ−２）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）に対して有効であることが報告されている（横田他、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，３５，３９４（１９９１）；Ｖｏｔｒｕｂａ ｅｔ ａｌ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３２，５２４（１９８７））。
【０００３】
ところで、これらのヌクレオチド及びイオン性オルガノリン酸エステルに関する問題は、それらが経口吸収性を持たないことである（Ｄｅ Ｃｌｅｒｃｑ ｅｔａｌ、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，３３，１８５（１９８９））。従ってこれらの化合物により効果を発揮するのに必要な血中濃度を得るためには、静注、筋注等の非経口的投与が必要であった。
しかしこれらの非経口投与による治療は入院患者以外には困難であり、長期治療が必要なＡＩＤＳやＢ型肝炎ウイルス疾患等の治療には好ましい方法ではなかった。そこで、抗ウイルス活性を有すると同時に経口投与が可能な薬剤の開発が望まれていたが、未だに実用化されていないのが現状であった。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本願発明者らは上記問題を解決するべく鋭意検討を重ねてきた結果、特定のホスホナートヌクレオチドエステル類により所期の目的が達成できることを見出し、本発明を完成するに至った。
即ち本発明の要旨は、下記一般式（Ｉ）
【０００５】
【化６】
【０００６】
を表し、Ｒ１ 及びＲ２ はそれぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、メルカプト基、Ｃ６ 〜Ｃ１０のアリールチオ基又はアミノ基を表し、Ｒ３ はＣ１ 〜Ｃ４ のアルキル基又はフッ素原子、Ｃ１ 〜Ｃ４ のアルコキシ基、フェノキシ基、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基及びＣ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基から選ばれる１以上の置換基を有するエチル基を表し、Ｒ４ はフッ素原子、Ｃ１ 〜Ｃ４ のアルコキシ基、フェノキシ基、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基及びＣ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基から選ばれる１以上の置換基を有するエチル基を表し、Ｘ、Ｙ及びＺはそれぞれ独立してメチン基又は窒素原子を表す。）で表されるホスホナートヌクレオチドエステル誘導体又はその塩に存する。
【０００７】
以下、本発明につき詳細に説明する。
本発明のホスホナートヌクレオチドエステル誘導体は、上記一般式（Ｉ）で表される。上記一般式（Ｉ）においてＲ１ 及びＲ２ のハロゲン原子としてはフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられ、Ｃ６ 〜Ｃ１０のアリールチオ基としてはフェニルチオ基、トリルチオ基、ナフチルチオ基等が挙げられる。また、Ｒ３ のＣ１ 〜Ｃ４ のアルキル基としてはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられ、Ｒ３ のエチル基の置換基であるＣ１ 〜Ｃ４ のアルコキシ基としてはメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ブトキシ基等が、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基としてはベンジルオキシ基、フェネチルオキシ基、フェニルプロポキシ基等のフェニル−Ｃ１ 〜Ｃ４ アルコキシ基が、Ｃ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基としてはアセトキシ基、プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基、ｉ−ブチリルオキシ基、バレリルオキシ基等が挙げられる。Ｒ４ のエチル基の置換基であるＣ１ 〜Ｃ４ のアルコキシ基、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基及びＣ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基としてはＲ３ のエチル基の置換基と同様のものが挙げられる。
上記一般式（Ｉ）において、好ましい環Ａとしては
【０００８】
【化７】
（Ｒ１ 及びＲ２ は請求項１で定義したとおり。）が挙げられる。
特に好ましい環Ａは、
【０００９】
【化８】
（Ｒ１ は水素原子、塩素原子、ヒドロキシル基、メルカプト基、トリルチオ基又はアミノ基を表し、Ｒ２ は水素原子、塩素原子、ヨウ素原子、ヒドロキシル基又はアミノ基を表す。）、
【００１０】
【化９】
（Ｒ１ はアミノ基を表し、Ｒ２ は水素原子を表す。）、又は
【００１１】
【化１０】
（Ｒ１ 及びＲ２ はアミノ基を表す。）である。
【００１２】
また、Ｒ３ としてはＣ１ 〜Ｃ３ のアルキル基、２，２，２−トリフルオロエチル基又はＣ１ 〜Ｃ３ のアルコキシ基、フェノキシ基、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基及びＣ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基から選ばれる置換基を１つ有するエチル基が好ましく、特に、Ｃ１ 〜Ｃ３ のアルキル基又は２，２，２−トリフルオロエチル基が好ましい。
【００１３】
Ｒ４ としては２，２，２−トリフルオロエチル基又はＣ１ 〜Ｃ３ のアルコキシ基、フェノキシ基、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基及びＣ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基から選ばれる置換基を１つ有するエチル基が好ましく、特に２，２，２−トリフルオロエチル基が好ましい。
なお、Ｒ３ 又はＲ４ が置換エチル基を表す場合、エチル基の２位が置換されていることが好ましく、さらにＲ３ 及びＲ４ のうち少なくとも一方が２，２，２−トリフルオロエチル基であることが好ましい。Ｘ及びＺとしては窒素原子が好ましい。
【００１４】
上記一般式（Ｉ）で表される本発明のホスホナートヌクレオチドエステル誘導体は、塩を形成することができる。かかる塩の具体例としては、酸性基が存在する場合には、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等の金属塩、アンモニウム塩、メチルアンモニウム塩、ジメチルアンモニウム塩、トリメチルアンモニウム塩、ジシクロヘキシルアンモニウム塩等のアンモニウム塩等を形成することができ、塩基性基が存在する場合には、塩酸塩、臭酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の鉱酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、マンデル酸塩、ケイ皮酸塩、乳酸塩等の有機酸塩等を形成することができる。
また本発明の化合物は、置換基の種類によりケト−エノール互変異性等の互変異性体を形成するが、これらの互変異性体も本発明化合物に包含される。
【００１５】
本発明化合物の具体例を下記表−１〜７に示す（表中、Ｐ．Ｓ．は
【００１６】
【化１１】
の置換位置をＸ，Ｙ又はＺとして表す。また、Ｘ，Ｙ又はＺのＣは−ＣＨ＝を表す。）。
【００１７】
【表１】
【００１８】
【表２】
【００１９】
【表３】
【００２０】
【表４】
【００２１】
【表５】
【００２２】
【表６】
【００２３】
【表７】
【００２４】
【表８】
【００２５】
【表９】
【００２６】
【表１０】
【００２７】
【表１１】
【００２８】
【表１２】
【００２９】
【表１３】
【００３０】
【表１４】
【００３１】
【表１５】
【００３２】
【表１６】
【００３３】
【表１７】
【００３４】
【表１８】
【００３５】
【表１９】
【００３６】
【表２０】
【００３７】
【表２１】
【００３８】
【表２２】
【００３９】
【表２３】
【００４０】
【表２４】
【００４１】
【表２５】
【００４２】
【表２６】
【００４３】
【表２７】
【００４４】
【表２８】
【００４５】
【表２９】
【００４６】
【表３０】
【００４７】
【表３１】
【００４８】
【表３２】
【００４９】
【表３３】
【００５０】
【表３４】
【００５１】
【表３５】
【００５２】
【表３６】
【００５３】
【表３７】
【００５４】
【表３８】
【００５５】
【表３９】
【００５６】
【表４０】
【００５７】
【表４１】
【００５８】
【表４２】
【００５９】
【表４３】
【００６０】
【表４４】
【００６１】
【表４５】
【００６２】
【表４６】
【００６３】
【表４７】
【００６４】
【表４８】
【００６５】
【表４９】
【００６６】
【表５０】
【００６７】
【表５１】
【００６８】
【表５２】
【００６９】
【表５３】
【００７０】
【表５４】
【００７１】
【表５５】
【００７２】
【表５６】
【００７３】
【表５７】
【００７４】
【表５８】
【００７５】
【表５９】
【００７６】
【表６０】
【００７７】
【表６１】
【００７８】
【表６２】
【００７９】
【表６３】
【００８０】
【表６４】
【００８１】
【表６５】
【００８２】
【表６６】
【００８３】
【表６７】
【００８４】
【表６８】
【００８５】
【表６９】
【００８６】
本発明の化合物は、例えば下記反応ルート（１）または（２）に従って合成することができる。
反応ルート（１）
【００８７】
【化１２】
【００８８】
（上記式中、Ｒ１ 〜Ｒ４ 及び環Ａは上記一般式（Ｉ）中で定義したとうりであり、Ｒ５ はフッ素原子、Ｃ１ 〜Ｃ４ のアルコキシ基、フェノキシ基、Ｃ７ 〜Ｃ１０のフェニルアルコキシ基、Ｃ２ 〜Ｃ５ のアシルオキシ基、Ｃ１ 〜Ｃ４ のアシルアミノ基及びヒドロキシル基から選ばれる１以上の置換基を有するエチル基を表す。Ｗはハロゲン原子、パラトルエンスルホニルオキシ基、メタンスルホニルオキシ基、トリフルオロメタンスルホニルオキシ基等の脱離基を表す。）
まず（ＩＩ）式で表される化合物及び（ＩＩＩ）式で表される化合物を１０〜２５０℃、好ましくは１３０〜１８０℃の温度で、０．１〜２０時間、好ましくは３〜１５時間反応させる。
【００８９】
上記反応により得られる（ＩＶ）式の化合物は、必要に応じて通常の分離、精製手段、例えば蒸留、吸着、分配クロマトグラフィー等により分離、精製することができる。（ＩＶ）式の化合物は上記のようにして分離、精製してもよいが、そのまま精製することなく以下の反応に供してもよい。
引き続き、（ＩＶ）式の化合物及び（Ｖ）式で表される化合物を、塩基、例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、トリエチルアミン、ジアザビシクロウンデセン等の存在下、溶媒、例えばアセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、メチルピロリドン等の溶媒中、１０〜２００℃、好ましくは５０〜１５０℃の温度で、０．１〜１００時間、好ましくは５〜２０時間反応させ、化合物（Ｉ）を得る。
反応ルート（２）
【００９０】
【化１３】
【００９１】
（上記式中、Ｒ１ 〜Ｒ４ 及び環Ａは上記一般式（Ｉ）中で定義したとうりであり、Ｍｅはメチル基を、Ｅｔはエチル基をそれぞれ表す。）
まず（ＶＩ）式で表される化合物とトリメチルシリルジエチルアミンとを、溶媒、例えばジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等の塩素系溶媒中、室温付近で１時間程度反応させる。このとき、トリメチルシリルジエチルアミンは（ＶＩ）式の化合物１モルに対し、２モル以上使用する。
【００９２】
次いで反応液を濃縮乾固した後、ジクロロメタン等の塩素系溶媒に溶かし、オキザリルクロリドを（ＶＩ）式の化合物１モルに対して２モル以上添加し、触媒量のジメチルホルムアミドの存在下、氷冷下で約１時間、室温付近で約１時間反応させる。
かくして得られる（ＶＩＩ）式で表される化合物を、通常は精製することなく、溶媒留去後、溶媒、例えばジクロロメタン等の塩素系溶媒、ピリジン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、メチルピロリドン等の溶媒中、１０〜１００℃、好ましくは２０〜３０℃の温度で、０．１〜１００時間、好ましくは５〜２４時間Ｒ３ ＯＨ，Ｒ４ ＯＨと反応させ、化合物（Ｉ）を得る。
【００９３】
上記反応ルート（１）または（２）で得られる（Ｉ）式の化合物は、必要に応じて通常のヌクレオチドの分離、精製手段、例えば再結晶、吸着、イオン交換、分配クロマトグラフィー法等を適宜選択して分離、精製することができる。かくして得られる（Ｉ）式の化合物は、必要に応じて公知の方法により種々の塩基誘導体に誘導できる。
なお、上記反応ルート中における（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＶＩ）式の化合物は、試薬として販売されているものを購入して使用することもできるが、適宜公知の方法に従って合成して用いることもできる。
【００９４】
本発明の化合物は、下記の試験例に示す通り、経口投与が可能な抗ウイルス剤として、また他のイオン性ホスホナートヌクレオチド類似体に見られるように、抗腫瘍活性を有することが期待される。対象とするウイルスは特に制限されないが、具体的にはヒト免疫不全ウイルス、インフルエンザウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス等のＲＮＡウイルスや単純ヘルペスウイルスＩ、単純ヘルペスウイルスＩＩ、サイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス等のＤＮＡウイルスが挙げられ、より好ましくはＢ型肝炎ウイルスが挙げられる。
【００９５】
本発明の化合物は、ヒトに対して経口的に投与することができる。投与量は患者の年齢、健康状態、体重等に応じて適宜決定されるが、通常は１日当たり１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重であり、１回あるいはそれ以上投与される。
本発明の化合物は、通常使用される製剤用担体、賦形剤等の薬学的に許容される担体を含む組成物として使用することが好ましい。かかる担体としては、固体、液体のいずれでも構わない。固体担体としては、例えば乳糖、白陶土（カオリン）、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等が挙げられ、液状の担体としては、例えばグリセリン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、生理食塩水、水等が挙げられる。
剤型は種々の形態をとることができる。固体担体を用いる場合は、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル化剤、トローチ剤等が挙げられる。また液状の担体を用いる場合は、シロップ、軟ゼラチンカプセル、ゲル、ペースト等が挙げられる。
【００９６】
【実施例】
以下、本発明につき実施例を挙げて具体的に説明するが、その要旨を越えない限り以下に限定されるものではない。
実施例１
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３０９）の製造
２−クロロエチルクロロメチルエーテル１．９６ｇ（１５．２ｍｍｏｌ）及びトリス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスファイト５ｇ（１５．２ｍｍｏｌ）を１６０℃で１４時間反応させ、定量的に２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチルクロリドを５．１５ｇ得た。
【００９７】
アデニン２．０７ｇ（１５．３ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド３０ｍｌに懸濁し、水素化ナトリウム（鉱油中６０％）０．６１ｇと１００℃で１時間反応させた。次に２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチルクロリド５．１５ｇを上記反応液に加え、１００℃で５時間反応させた。反応後室温まで冷却し、濃縮乾固した。残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノール−クロロホルムで溶出させ、表題の化合物２．７７ｇ（４２％）を得た。
【００９８】
【００９９】
実施例２
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２，６−ジアミノプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．４５９）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１００】
【０１０１】
実施例３
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２−アミノ−６−クロロプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．５０９）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１０２】
【０１０３】
実施例４
７−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２−アミノ−６−クロロプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．５１０）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１０４】
【０１０５】
実施例５
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−８−アザ−２，６−ジアミノプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．６６３）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに８−アザ−２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１０６】
【０１０７】
実施例６
８−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−８−アザ−２，６−ジアミノプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．６６４）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに８−アザ−２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１０８】
【０１０９】
実施例７
７−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕テオフィリン（表−３中、化合物Ｎｏ．８０５）の製造
実施例１において、アデニンの代わりにテオフィリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１１０】
【０１１１】
実施例８
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２，６−ジクロロプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．５５９）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに２，６−ジクロロプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１１２】
【０１１３】
実施例９
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−３−デアザ−８−アザ−２，６−ジアミノプリン（表−４中、化合物Ｎｏ．８３８）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに３−デアザ−８−アザ−２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１１４】
【０１１５】
実施例１０
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−７−デアザ−８−アザ−２，６−ジアミノプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．７３４）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに７−デアザ−８−アザ−２，６−ジアミノプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１１６】
【０１１７】
実施例１１
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−６−クロロプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．１０８４）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに６−クロロプリンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１１８】
【０１１９】
実施例１２
９−〔２−〔メチル（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３０３）の製造
実施例１で得られた化合物１ｇ（２．３ｍｍｏｌ）をメタノール１０ｍｌに溶かし、シリカゲル５ｇを加えて５０℃で７時間反応させた後、濃縮乾固した。残渣を５％−メタノール−クロロホルムで溶出させ、表題の化合物０．７５ｇ（８８％）を得た。
【０１２０】
【０１２１】
実施例１３
９−〔２−〔メチル（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２，６−ジアミノプリン（表−１中、化合物Ｎｏ．４５３）の製造
実施例９において、実施例１で得られた化合物の代わりに実施例２で得られた化合物を用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１２２】
【０１２３】
実施例１４
９−〔〔２−ビス（２−メトキシエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３１３）の製造
９−〔（２−ホスホニルメトキシ）エチル〕アデニン１ｇ（３．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍｌに懸濁し、トリメチルシリルジエチルアミン３ｍｌと室温で１時間反応させ、濃縮乾固した。残渣をジクロロメタン１０ｍｌに溶解させ、ジメチルホルムアミド０．０５ｍｌ及びオキザリルクロリド０．９ｍｌを添加し、氷冷下で１時間、室温で１時間反応させた。溶媒留去後、残渣をピリジン２０ｍｌに溶解させ、２−メトキシエタノール０．７６ｇと室温で１２時間反応させた。濃縮乾固後、残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノール−クロロホルムで溶出させ、表題の化合物０．３ｇ（２２％）を得た。
【０１２４】
【０１２５】
実施例１５
９−〔〔２−ビス（２−フェノキシエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３２３）の製造
実施例１１において、２−メトキシエタノールの代わりに２−フェノキシエタノールを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１２６】
【０１２７】
実施例１６
９−〔〔２−ビス（２−ベンジルオキシエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３３１）の製造
実施例１１において、２−メトキシエタノールの代わりに２−ベンジルオキシエタノールを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１２８】
【０１２９】
実施例１７
９−〔〔２−ビス（２−アセトキシエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３４３）の製造
実施例１１において、２−メトキシエタノールの代わりに２−アセトキシエタノールを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１３０】
【０１３１】
実施例１８
９−〔〔２−ビス（２−バレリルオキシエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３４９）の製造
実施例１１において、２−メトキシエタノールの代わりに２−バレリルオキシエタノールを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１３２】
【０１３３】
実施例１９
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２−ヨードアデニン（表−１中、化合物Ｎｏ．３５９）の製造
実施例１１において、２−メトキシエタノールの代わりに２，２，２−トリフルオロエタノールを、又９−〔（２−ホスホニルメトキシ）エチル〕アデニンの代わりに９−〔（２−ホスホニルメトキシ）エチル〕−２−ヨードアデニンを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１３４】
【０１３５】
実施例２０
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕グアニン（表−１中、化合物Ｎｏ．２５９）の製造
実施例１において、アデニンの代わりに公知の方法により合成できる６−Ｏベンジルグアニンを用いた他は同様にして、９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−６−Ｏベンジルグアニンを得た。
【０１３６】
この化合物２．２１ｇ（４．０７ｍｍｏｌ）をエタノール２０ｍｌに溶かし、シクロヘキセン２０ｍｌ及び２０％水酸化パラジウムカーボン１．５ｇを加え、還流下２時間反応させた。水酸化パラジウムカーボンを濾去した後、溶液を濃縮乾固した。残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノールクロロホルムで溶出させ、表題の化合物１．０１ｇ（５５％）を得た。
【０１３７】
【０１３８】
実施例２１
７−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕グアニン（表−１中、化合物Ｎｏ．２６０）の製造
グアノシン１ｇ（３．５３ｍｍｏｌ）をジメチルアセトアミド１０ｍｌに懸濁し、２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチルヨージド１．７ｇを加え、１００℃で２時間反応させた。反応液を濃縮乾固し、残渣を３０％メタノール水に溶解させてオクタデシルシリルシリカゲルカラムに吸着させ、３０％メタノール−水で溶出させ、表題の化合物０．１ｇ（６．３％）を得た。
【０１３９】
【０１４０】
実施例２２
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニン−１−Ｎオキシド（表−２中、化合物Ｎｏ．７８０）の製造
実施例１の化合物８．１２ｇ（１８．６ｍｍｏｌ）をクロロホルム１５０ｍｌに溶かし、ｍ−クロロ過安息香酸１５ｇを加え、５０℃で２時間反応させた。析出する沈殿を濾去後シリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノール−クロロホルムで溶出させ、表題の化合物３．４２ｇ（４２％）を得た。
【０１４１】
【０１４２】
実施例２３
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−６−チオグアニン（表−１中、化合物Ｎｏ．６０９）の製造
実施例３の化合物８００ｍｇ（１．７ｍｍｏｌ）をエタノール１５ｍｌに溶かし、チオウレア１５７ｍｇを加え、還流下４時間反応させた。反応後室温まで冷却し、濃縮乾固した。残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノール−クロロホルムで溶出させ、表題の化合物２５２ｍｇ（３２％）を得た。
【０１４３】
【０１４４】
実施例２４
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２−アミノ−６−ｐ−トルイルチオプリン（表−６中、化合物Ｎｏ．１０３０）の製造
実施例３の化合物９．４ｇ（２０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ９０ｍｌに溶かし、ｐ−チオクレゾール５．２３ｇ、及びトリエチルアミン２．８ｍｌを室温で加え、次いで１００℃で４時間反応させた。反応後室温まで冷却し、反応液を濃縮乾固した。残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、クロロホルムで溶出させ、表題の化合物９．８ｇ（８８％）を得た。
【０１４５】
【０１４６】
実施例２５
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−２−ヒドロキシ−６−ｐ−トルイルチオプリン（表−７中、化合物Ｎｏ．１０５５）の製造
実施例２１の化合物６．９ｇ（１２．３ｍｍｏｌ）を５０％酢酸水溶液１２０ｍｌに溶かし、亜硝酸ナトリウム１２ｇを加え、５０℃で１時間反応させた。反応後室温まで冷却し、反応液を濃縮乾固した。残渣をクロロホルム−炭酸水素ナトリウム水溶液で分配し、クロロホルム層を硫酸マグネシウムで乾燥後濾過した。濾液を濃縮乾固しエーテルで結晶化し、表題の化合物２．３１ｇ（３４％）を得た。
【０１４７】
【０１４８】
実施例２６
９−〔２−〔ビス（２，２，２−トリフルオロエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕−１−メチルグアニン（表−５中、化合物Ｎｏ．１００５）の製造
実施例２０の化合物５００ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ７ｍｌに溶かし、炭酸カリウム１５０ｍｇ、モレキュラシーブス（０．４ｎｍ）１００ｍｇ及びヨウ化メチル２０３ｍｇ加え、室温で２時間反応させた。反応液を濾過後濃縮乾固した。残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノール−クロロホルム層で溶出させ、表題の化合物３０ｍｇ（５．８％）を得た。
【０１４９】
【０１５０】
参考例１
９−〔〔２−ビス（２−アセトアミドエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニンの製造
【０１５１】
【化１４】
【０１５２】
実施例１１において、２−メトキシエタノールの代わりに２−アセトアミドエタノールを用いた他は同様にして、表題化合物を得た。
【０１５３】
参考例２
９−〔〔２−ビス（２−ヒドロキシエチル）ホスホニルメトキシ〕エチル〕アデニンの製造
【０１５４】
【化１５】
【０１５５】
実施例１３で得られた化合物１ｇ（１．９ｍｍｏｌ）をエタノール２５ｍｌに溶かし、１０％パラジウムカーボン０．１ｇを加え、水素雰囲気下６０℃で７時間反応させた。パラジウムカーボンを濾去した後、溶液を濃縮乾固した。残渣をクロロホルムに溶解させてシリカゲルカラムに吸着させ、５％−メタノール−クロロホルムで溶出させ、表題の化合物０．３８ｇ（５５％）を得た。
【０１５６】
【０１５７】
試験例１
ＨＢＶ増殖抑制効果
ＨＢ６１１細胞（ＨＢＶを生産する組換えヒト肝癌細胞）２×１０４ 個を、１０％牛胎児血清、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）及びＧ−４１８（０．２ｍｇ／ｍｌ）を含むダルベッコＭＥ培地中、３７℃で培養した。培養２日目及び５日目に培地を交換した後、培養８日、１１日及び１４日後に検体を最終濃度で１０μＭ含む培地で置換し、培養１７日後に細胞のＤＮＡを回収した。細胞内のＨＢＶ−ＤＮＡ量をサザンブロットで測定し、細胞内でのＨＢＶ−ＤＮＡ合成阻害率を求めた。またＨＢ６１１細胞の５０％が死滅するのに要する化合物濃度を求めた。結果を下記表−８に示す。
【０１５８】
【表７０】
【０１５９】
試験例２
経口投与ラット血清のＨＢＶ増殖抑制効果
一群３匹よりなるラットに、検体を１ｇ／ｋｇあるいは０．５ｇ／ｋｇの１回経口用量を与え、投与１時間後に採血し、血清を調製した。また一群３匹よりなるマウスに、検体を０．３ｇ／ｋｇの１回経口用量を与え、投与３０分後に採血し、血清を調製した。
【０１６０】
ＨＢ６１１細胞２×１０４ 個を、１０％牛胎児血清、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）及びＧ−４１８（０．２ｍｇ／ｍｌ）を含むダルベッコＭＥ培地中、３７℃で培養した。培養２日目及び５日目に培地を交換した後、培養８日、１１日及び１４日後に上記血清（検体を経口投与後のラット血清）を５％含む培地で置換し、培養１７日後に細胞のＤＮＡを回収した。細胞内のＨＢＶ−ＤＮＡ量をサザンブロットで測定し、細胞内でのＨＢＶ−ＤＮＡ合成阻害率を求めた。参考のため、ＰＭＥＡについても同様の試験を行った。結果を下記表−９に示す。
【０１６１】
【表７１】
【０１６２】
【発明の効果】
本発明のホスホナートヌクレオチドエステル誘導体は、優れた抗ウイルス活性及び抗腫瘍活性を有し、更に経口投与できる。[0001]
[Industrial applications]
The present invention relates to a novel phosphonate nucleotide ester derivative having an antiviral activity or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and more specifically, a phosphonate nucleotide ester derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof which can be orally administered as an antiviral agent. About.
[0002]
2. Description of the Related Art
Infectious viral diseases are recognized as a medically important problem, and in order to treat such diseases, drugs with antiviral activity and at the same time, without growth inhibitory activity on normal cell lines are being developed. Development is under consideration. For example, phosphonate nucleotides are currently being actively studied as selective antiviral agents. Specifically, 9- (2-phosphonylmethoxy) ethyladenine (PMEA), 9- (2-phosphonylmethoxy) ethyl-2,6-diaminopurine (PMDAP) and the like include herpes simplex type 1 and type 2 ( HSV-1 and HSV-2), human immunodeficiency virus (HIV), and human hepatitis B virus (HBV) (Yokota et al., Antimicrob. Agents Chemother., 35, 394). (1991); Votruba et al, Mol. Pharmacol., 32, 524 (1987)).
[0003]
By the way, a problem with these nucleotides and ionic organophosphates is that they do not have oral absorbability (De Clercq et al., Antimicrob. Agents Chemother., 33, 185 (1989)). Therefore, parenteral administration, such as intravenous injection or intramuscular injection, was necessary in order to obtain the blood concentration necessary for exerting the effects of these compounds.
However, treatment by parenteral administration is difficult except for in-patients, and is not a preferable method for treatment of AIDS or hepatitis B virus disease requiring long-term treatment. Therefore, the development of a drug that has antiviral activity and can be administered orally at the same time has been desired, but it has not yet been put to practical use.
[0004]
[Means for Solving the Problems]
As a result of intensive studies to solve the above problems, the inventors of the present invention have found that the intended purpose can be achieved by using specific phosphonate nucleotide esters, and have completed the present invention.
That is, the gist of the present invention is represented by the following general formula (I)
[0005]
Embedded image
And R 1 And R 2 Is independently a hydrogen atom, a halogen atom, a hydroxyl group, a mercapto group, 6 ~ C 10 Represents an arylthio group or an amino group of 3 Is C 1 ~ C 4 An alkyl group or a fluorine atom, C 1 ~ C 4 An alkoxy group, a phenoxy group, C 7 ~ C 10 Phenylalkoxy group and C 2 ~ C 5 Represents an ethyl group having at least one substituent selected from acyloxy groups of 4 Is a fluorine atom, C 1 ~ C 4 An alkoxy group, a phenoxy group, C 7 ~ C 10 Phenylalkoxy group and C 2 ~ C 5 Represents an ethyl group having one or more substituents selected from acyloxy groups, and X, Y and Z each independently represent a methine group or a nitrogen atom. ) Or a salt thereof.
[0007]
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
The phosphonate nucleotide ester derivative of the present invention is represented by the above general formula (I). In the above general formula (I), R 1 And R 2 Examples of the halogen atom include a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, and an iodine atom. 6 ~ C 10 Examples of the arylthio group include a phenylthio group, a tolylthio group and a naphthylthio group. Also, R 3 C 1 ~ C 4 Examples of the alkyl group include a methyl group, an ethyl group, an n-propyl group, an i-propyl group, an n-butyl group, an i-butyl group, a sec-butyl group and a tert-butyl group. 3 C which is a substituent of the ethyl group of 1 ~ C 4 Examples of the alkoxy group include a methoxy group, an ethoxy group, a propoxy group, an i-propoxy group, and a butoxy group. 7 ~ C 10 Phenylalkoxy groups such as benzyloxy group, phenethyloxy group and phenylpropoxy group; 1 ~ C 4 When the alkoxy group is C 2 ~ C 5 Examples of the acyloxy group include acetoxy group, propionyloxy group, butyryloxy group, i-butyryloxy group, and valeryloxy group. R 4 C which is a substituent of the ethyl group of 1 ~ C 4 An alkoxy group of C 7 ~ C 10 Phenylalkoxy group and C 2 ~ C 5 The acyloxy group of R 3 And the same substituents as those for the ethyl group.
In the general formula (I), preferred ring A is
[0008]
Embedded image
(R 1 And R 2 Is as defined in claim 1. ).
Particularly preferred ring A is
[0009]
Embedded image
(R 1 Represents a hydrogen atom, a chlorine atom, a hydroxyl group, a mercapto group, a tolylthio group or an amino group; 2 Represents a hydrogen atom, a chlorine atom, an iodine atom, a hydroxyl group or an amino group. ),
[0010]
Embedded image
(R 1 Represents an amino group; 2 Represents a hydrogen atom. ) Or
[0011]
Embedded image
(R 1 And R 2 Represents an amino group. ).
[0012]
Also, R 3 As C 1 ~ C 3 Alkyl group, 2,2,2-trifluoroethyl group or C 1 ~ C 3 An alkoxy group, a phenoxy group, C 7 ~ C 10 Phenylalkoxy group and C 2 ~ C 5 Preferred is an ethyl group having one substituent selected from acyloxy groups of 1 ~ C 3 Or an 2,2,2-trifluoroethyl group is preferred.
[0013]
R 4 Is a 2,2,2-trifluoroethyl group or C 1 ~ C 3 An alkoxy group, a phenoxy group, C 7 ~ C 10 Phenylalkoxy group and C 2 ~ C 5 An ethyl group having one substituent selected from acyloxy groups is preferable, and a 2,2,2-trifluoroethyl group is particularly preferable.
Note that R 3 Or R 4 Represents a substituted ethyl group, it is preferable that the 2-position of the ethyl group is substituted, 3 And R 4 Preferably, at least one of them is a 2,2,2-trifluoroethyl group. X and Z are preferably nitrogen atoms.
[0014]
The phosphonate nucleotide ester derivative of the present invention represented by the above general formula (I) can form a salt. Specific examples of such a salt include, when an acidic group is present, a metal salt such as a lithium salt, a sodium salt, a potassium salt, a magnesium salt, and a calcium salt, an ammonium salt, a methyl ammonium salt, a dimethyl ammonium salt, and a trimethyl ammonium salt. Can form an ammonium salt such as dicyclohexylammonium salt, and when a basic group is present, a mineral acid salt such as hydrochloride, bromate, sulfate, nitrate, phosphate, or methanesulfonic acid Salt, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, acetate, propionate, tartrate, fumarate, maleate, malate, oxalate, succinate, citrate, benzoate And organic acid salts such as mandelate, cinnamate and lactate.
The compounds of the present invention form tautomers such as keto-enol tautomers depending on the type of the substituent, and these tautomers are also included in the compounds of the present invention.
[0015]
Specific examples of the compound of the present invention are shown in Tables 1 to 7 below (in the table, PS is
[0016]
Embedded image
Is represented as X, Y or Z. Further, C in X, Y or Z represents -CH =. ).
[0017]
[Table 1]
[0018]
[Table 2]
[0019]
[Table 3]
[0020]
[Table 4]
[0021]
[Table 5]
[0022]
[Table 6]
[0023]
[Table 7]
[0024]
[Table 8]
[0025]
[Table 9]
[0026]
[Table 10]
[0027]
[Table 11]
[0028]
[Table 12]
[0029]
[Table 13]
[0030]
[Table 14]
[0031]
[Table 15]
[0032]
[Table 16]
[0033]
[Table 17]
[0034]
[Table 18]
[0035]
[Table 19]
[0036]
[Table 20]
[0037]
[Table 21]
[0038]
[Table 22]
[0039]
[Table 23]
[0040]
[Table 24]
[0041]
[Table 25]
[0042]
[Table 26]
[0043]
[Table 27]
[0044]
[Table 28]
[0045]
[Table 29]
[0046]
[Table 30]
[0047]
[Table 31]
[0048]
[Table 32]
[0049]
[Table 33]
[0050]
[Table 34]
[0051]
[Table 35]
[0052]
[Table 36]
[0053]
[Table 37]
[0054]
[Table 38]
[0055]
[Table 39]
[0056]
[Table 40]
[0057]
[Table 41]
[0058]
[Table 42]
[0059]
[Table 43]
[0060]
[Table 44]
[0061]
[Table 45]
[0062]
[Table 46]
[0063]
[Table 47]
[0064]
[Table 48]
[0065]
[Table 49]
[0066]
[Table 50]
[0067]
[Table 51]
[0068]
[Table 52]
[0069]
[Table 53]
[0070]
[Table 54]
[0071]
[Table 55]
[0072]
[Table 56]
[0073]
[Table 57]
[0074]
[Table 58]
[0075]
[Table 59]
[0076]
[Table 60]
[0077]
[Table 61]
[0078]
[Table 62]
[0079]
[Table 63]
[0080]
[Table 64]
[0081]
[Table 65]
[0082]
[Table 66]
[0083]
[Table 67]
[0084]
[Table 68]
[0085]
[Table 69]
[0086]
The compound of the present invention can be synthesized, for example, according to the following reaction route (1) or (2).
Reaction route (1)
[0087]
Embedded image
[0088]
(In the above formula, R 1 ~ R 4 And ring A are as defined in formula (I) above, 5 Is a fluorine atom, C 1 ~ C 4 An alkoxy group, a phenoxy group, C 7 ~ C 10 A phenylalkoxy group, C 2 ~ C 5 An acyloxy group of C 1 ~ C 4 Represents an ethyl group having at least one substituent selected from an acylamino group and a hydroxyl group. W represents a leaving group such as a halogen atom, a paratoluenesulfonyloxy group, a methanesulfonyloxy group, and a trifluoromethanesulfonyloxy group. )
First, the compound represented by the formula (II) and the compound represented by the formula (III) are reacted at a temperature of 10 to 250 ° C, preferably 130 to 180 ° C for 0.1 to 20 hours, preferably 3 to 15 hours. Let it.
[0089]
The compound of the formula (IV) obtained by the above reaction can be separated and purified by ordinary separation and purification means, for example, distillation, adsorption, partition chromatography and the like, if necessary. The compound of formula (IV) may be separated and purified as described above, or may be subjected to the following reaction without purification.
Subsequently, the compound represented by the formula (IV) and the compound represented by the formula (V) are converted into a base such as sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydride, potassium hydride, triethylamine, diazabicycloundecene and the like. Under a solvent such as acetonitrile, tetrahydrofuran, dimethylsulfoxide, dimethylformamide, methylpyrrolidone, etc. at a temperature of 10 to 200 ° C, preferably 50 to 150 ° C, for 0.1 to 100 hours, preferably 5 to 20 hours. The reaction is performed to obtain compound (I).
Reaction route (2)
[0090]
Embedded image
[0091]
(In the above formula, R 1 ~ R 4 And ring A are as defined in formula (I) above, wherein Me represents a methyl group and Et represents an ethyl group. )
First, the compound represented by the formula (VI) is reacted with trimethylsilyldiethylamine in a solvent, for example, a chlorinated solvent such as dichloromethane, dichloroethane and chloroform at about room temperature for about 1 hour. At this time, trimethylsilyldiethylamine is used in an amount of 2 mol or more per 1 mol of the compound of the formula (VI).
[0092]
Next, the reaction solution is concentrated to dryness, dissolved in a chlorinated solvent such as dichloromethane, and oxalyl chloride is added in an amount of 2 mol or more per 1 mol of the compound of the formula (VI). The reaction is carried out for about 1 hour under cooling and about 1 hour near room temperature.
The thus-obtained compound represented by the formula (VII) is usually subjected to solvent distillation without purification, and then a solvent such as a chlorine-based solvent such as dichloromethane, pyridine, acetonitrile, tetrahydrofuran, dimethylsulfoxide, dimethylformamide, methylpyrrolidone And the like at a temperature of 10 to 100 ° C., preferably 20 to 30 ° C. for 0.1 to 100 hours, preferably 5 to 24 hours. 3 OH, R 4 Reaction with OH gives compound (I).
[0093]
The compound of the formula (I) obtained by the above-mentioned reaction route (1) or (2) may be appropriately subjected to ordinary nucleotide separation and purification means such as recrystallization, adsorption, ion exchange, partition chromatography and the like, if necessary. It can be selected and separated and purified. The compound of the formula (I) thus obtained can be derived into various base derivatives by a known method, if necessary.
The compound of the formula (II), (III) or (VI) in the above reaction route may be purchased and used as a reagent, and may be appropriately synthesized and used according to a known method. You can also.
[0094]
The compound of the present invention is expected to have antitumor activity as an orally administrable antiviral agent and as shown in other ionic phosphonate nucleotide analogs, as shown in the test examples below. . Although the target virus is not particularly limited, specifically, human immunodeficiency virus, influenza virus, RNA virus such as hepatitis C virus, herpes simplex virus I, herpes simplex virus II, cytomegalovirus, varicella-zoster virus, Examples include DNA viruses such as hepatitis B virus, and more preferably hepatitis B virus.
[0095]
The compounds of the present invention can be administered orally to humans. The dose is appropriately determined depending on the age, health condition, body weight, etc. of the patient, but is usually 1 to 1000 mg / kg body weight, preferably 5 to 50 mg / kg body weight per day, and is administered once or more times. You.
The compound of the present invention is preferably used as a composition containing a pharmaceutically acceptable carrier such as a commonly used pharmaceutical carrier, excipient and the like. Such a carrier may be either a solid or a liquid. Examples of solid carriers include lactose, china clay (kaolin), sucrose, crystalline cellulose, corn starch, talc, agar, pectin, stearic acid, magnesium stearate, lecithin, sodium chloride, and the like. Examples include glycerin, peanut oil, polyvinylpyrrolidone, olive oil, ethanol, benzyl alcohol, propylene glycol, physiological saline, water and the like.
The dosage form can take various forms. When a solid carrier is used, tablets, powders, granules, capsules, troches and the like can be mentioned. When a liquid carrier is used, syrups, soft gelatin capsules, gels, pastes and the like can be used.
[0096]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described specifically with reference to Examples, but the present invention is not limited thereto unless it exceeds the gist thereof.
Example 1
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 309 in Table 1)
1.96 g (15.2 mmol) of 2-chloroethyl chloromethyl ether and 5 g (15.2 mmol) of tris (2,2,2-trifluoroethyl) phosphite were reacted at 160 ° C. for 14 hours to quantitatively react 2- 5.15 g of [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl chloride was obtained.
[0097]
2.07 g (15.3 mmol) of adenine was suspended in 30 ml of dimethylformamide and reacted with 0.61 g of sodium hydride (60% in mineral oil) at 100 ° C. for 1 hour. Next, 5.15 g of 2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl chloride was added to the above reaction solution, and the mixture was reacted at 100 ° C. for 5 hours. After the reaction, the mixture was cooled to room temperature and concentrated to dryness. The residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with 5% -methanol-chloroform to obtain 2.77 g (42%) of the title compound.
[0098]
[0099]
Example 2
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2,6-diaminopurine (Compound No. 459 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0100]
[0101]
Example 3
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2-amino-6-chloropurine (Compound No. 509 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0102]
[0103]
Example 4
Production of 7- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2-amino-6-chloropurine (Compound No. 510 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0104]
[0105]
Example 5
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -8-aza-2,6-diaminopurine (Compound No. 663 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 8-aza-2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0106]
[0107]
Example 6
Production of 8- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -8-aza-2,6-diaminopurine (Compound No. 664 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 8-aza-2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0108]
[0109]
Example 7
Production of 7- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] theophylline (Compound No. 805 in Table 3)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that theophylline was used instead of adenine.
[0110]
[0111]
Example 8
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2,6-dichloropurine (Compound No. 559 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 2,6-dichloropurine was used instead of adenine.
[0112]
[0113]
Example 9
9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -3-deaza-8-aza-2,6-diaminopurine (in Table 4, compound No. 838) Manufacturing of
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 3-deaza-8-aza-2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0114]
[0115]
Example 10
9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -7-deaza-8-aza-2,6-diaminopurine (Compound No. 734 in Table 1) Manufacturing of
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 7-deaza-8-aza-2,6-diaminopurine was used instead of adenine.
[0116]
[0117]
Example 11
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -6-chloropurine (Compound No. 1084 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1, except that 6-chloropurine was used instead of adenine.
[0118]
[0119]
Example 12
Production of 9- [2- [methyl (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 303 in Table 1)
1 g (2.3 mmol) of the compound obtained in Example 1 was dissolved in 10 ml of methanol, 5 g of silica gel was added, the mixture was reacted at 50 ° C. for 7 hours, and then concentrated to dryness. The residue was eluted with 5% -methanol-chloroform to give 0.75 g (88%) of the title compound.
[0120]
[0121]
Example 13
Production of 9- [2- [methyl (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2,6-diaminopurine (Compound No. 453 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 9, except that the compound obtained in Example 2 was used instead of the compound obtained in Example 1.
[0122]
[0123]
Example 14
Production of 9-[[2-bis (2-methoxyethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 313 in Table 1)
1 g (3.5 mmol) of 9-[(2-phosphonylmethoxy) ethyl] adenine was suspended in 10 ml of dichloromethane, reacted with 3 ml of trimethylsilyldiethylamine at room temperature for 1 hour, and concentrated to dryness. The residue was dissolved in 10 ml of dichloromethane, 0.05 ml of dimethylformamide and 0.9 ml of oxalyl chloride were added, and the mixture was reacted under ice cooling for 1 hour and at room temperature for 1 hour. After evaporating the solvent, the residue was dissolved in 20 ml of pyridine and reacted with 0.76 g of 2-methoxyethanol at room temperature for 12 hours. After concentration to dryness, the residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with 5% -methanol-chloroform to obtain 0.3 g (22%) of the title compound.
[0124]
[0125]
Example 15
Production of 9-[[2-bis (2-phenoxyethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 323 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 11, except that 2-phenoxyethanol was used instead of 2-methoxyethanol.
[0126]
[0127]
Example 16
Production of 9-[[2-bis (2-benzyloxyethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 331 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 11, except that 2-benzyloxyethanol was used instead of 2-methoxyethanol.
[0128]
[0129]
Example 17
Production of 9-[[2-bis (2-acetoxyethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 343 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 11, except that 2-acetoxyethanol was used instead of 2-methoxyethanol.
[0130]
[0131]
Example 18
Production of 9-[[2-bis (2-valeryloxyethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine (Compound No. 349 in Table 1)
The title compound was obtained in the same manner as in Example 11, except that 2-valeryloxyethanol was used instead of 2-methoxyethanol.
[0132]
[0133]
Example 19
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2-iodoadenine (Compound No. 359 in Table 1)
In Example 11, 2,2,2-trifluoroethanol was used instead of 2-methoxyethanol, and 9-[(2-phosphonylmethoxy) was used instead of 9-[(2-phosphonylmethoxy) ethyl] adenine. The title compound was obtained in the same manner except that [ethyl] -2-iodoadenine was used.
[0134]
[0135]
Example 20
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] guanine (Compound No. 259 in Table 1)
In Example 1, 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] was used in the same manner as in Example 1 except that 6-Obenzylguanine which could be synthesized by a known method was used instead of adenine. [Ethyl] -6-O-benzylguanine was obtained.
[0136]
2.21 g (4.07 mmol) of this compound was dissolved in 20 ml of ethanol, 20 ml of cyclohexene and 1.5 g of 20% palladium hydroxide carbon were added, and the mixture was reacted under reflux for 2 hours. After filtering off the palladium hydroxide carbon, the solution was concentrated to dryness. The residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with 5% methanol-chloroform to obtain 1.01 g (55%) of the title compound.
[0137]
[0138]
Example 21
Production of 7- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] guanine (Compound No. 260 in Table 1)
1 g (3.53 mmol) of guanosine was suspended in 10 ml of dimethylacetamide, 1.7 g of 2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl iodide was added, and the mixture was reacted at 100 ° C. for 2 hours. The reaction solution was concentrated to dryness, and the residue was dissolved in 30% aqueous methanol, adsorbed on an octadecylsilyl silica gel column, and eluted with 30% methanol-water to obtain 0.1 g (6.3%) of the title compound. .
[0139]
[0140]
Example 22
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine-1-N oxide (Compound No. 780 in Table 2)
8.12 g (18.6 mmol) of the compound of Example 1 was dissolved in 150 ml of chloroform, 15 g of m-chloroperbenzoic acid was added, and the mixture was reacted at 50 ° C. for 2 hours. The precipitated precipitate was filtered off, adsorbed on a silica gel column and eluted with 5% methanol-chloroform to give 3.42 g (42%) of the title compound.
[0141]
[0142]
Example 23
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -6-thioguanine (Compound No. 609 in Table 1)
800 mg (1.7 mmol) of the compound of Example 3 was dissolved in 15 ml of ethanol, 157 mg of thiourea was added, and the mixture was reacted under reflux for 4 hours. After the reaction, the mixture was cooled to room temperature and concentrated to dryness. The residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with 5% -methanol-chloroform to obtain 252 mg (32%) of the title compound.
[0143]
[0144]
Example 24
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2-amino-6-p-toluylthiopurine (Compound No. 1030 in Table 6)
9.4 g (20 mmol) of the compound of Example 3 was dissolved in 90 ml of DMF, 5.23 g of p-thiocresol and 2.8 ml of triethylamine were added at room temperature, and then reacted at 100 ° C. for 4 hours. After the reaction, the reaction solution was cooled to room temperature, and the reaction solution was concentrated to dryness. The residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with chloroform to obtain 9.8 g (88%) of the title compound.
[0145]
[0146]
Example 25
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -2-hydroxy-6-p-toluylthiopurine (Compound No. 1055 in Table-7)
6.9 g (12.3 mmol) of the compound of Example 21 was dissolved in 120 ml of a 50% aqueous acetic acid solution, 12 g of sodium nitrite was added, and the mixture was reacted at 50 ° C. for 1 hour. After the reaction, the reaction solution was cooled to room temperature, and the reaction solution was concentrated to dryness. The residue was partitioned with chloroform-aqueous sodium hydrogen carbonate solution, and the chloroform layer was dried over magnesium sulfate and then filtered. The filtrate was concentrated to dryness and crystallized from ether to give 2.31 g (34%) of the title compound.
[0147]
[0148]
Example 26
Production of 9- [2- [bis (2,2,2-trifluoroethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] -1-methylguanine (Compound No. 1005 in Table-5)
500 mg (1.1 mmol) of the compound of Example 20 was dissolved in 7 ml of DMF, 150 mg of potassium carbonate, 100 mg of molecular sieves (0.4 nm) and 203 mg of methyl iodide were added, and reacted at room temperature for 2 hours. The reaction solution was filtered and concentrated to dryness. The residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with a 5% -methanol-chloroform layer to obtain 30 mg (5.8%) of the title compound.
[0149]
[0150]
Reference Example 1
Production of 9-[[2-bis (2-acetamidoethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine
[0151]
Embedded image
[0152]
The title compound was obtained in the same manner as in Example 11, except that 2-acetamidoethanol was used instead of 2-methoxyethanol.
[0153]
Reference Example 2
Production of 9-[[2-bis (2-hydroxyethyl) phosphonylmethoxy] ethyl] adenine
[0154]
Embedded image
[0155]
1 g (1.9 mmol) of the compound obtained in Example 13 was dissolved in 25 ml of ethanol, 0.1 g of 10% palladium carbon was added, and the mixture was reacted at 60 ° C. for 7 hours under a hydrogen atmosphere. After filtering off the palladium carbon, the solution was concentrated to dryness. The residue was dissolved in chloroform, adsorbed on a silica gel column, and eluted with 5% -methanol-chloroform to obtain 0.38 g (55%) of the title compound.
[0156]
[0157]
Test example 1
HBV proliferation inhibitory effect
HB611 cells (recombinant human hepatoma cells producing HBV) 2 × 10 4 Individuals were cultured at 37 ° C. in Dulbecco's ME medium containing 10% fetal calf serum, streptomycin (100 μg / ml), penicillin (100 IU / ml) and G-418 (0.2 mg / ml). After the medium was changed on the second and fifth days of the culture, the medium was replaced with a medium containing a final concentration of 10 μM after the cultivation on days 8, 11 and 14, and the DNA of the cells was recovered after 17 days of the culture. The amount of HBV-DNA in the cells was measured by Southern blot, and the inhibition rate of HBV-DNA synthesis in the cells was determined. The compound concentration required for killing 50% of the HB611 cells was determined. The results are shown in Table 8 below.
[0158]
[Table 70]
[0159]
Test example 2
HBV growth inhibitory effect of orally administered rat serum
A single oral dose of 1 g / kg or 0.5 g / kg was given to a test group consisting of three rats, and blood was collected one hour after administration to prepare serum. In addition, a single oral dose of 0.3 g / kg of the sample was given to a mouse consisting of three mice per group, and blood was collected 30 minutes after administration to prepare a serum.
[0160]
HB611 cells 2 × 10 4 Individuals were cultured at 37 ° C. in Dulbecco's ME medium containing 10% fetal calf serum, streptomycin (100 μg / ml), penicillin (100 IU / ml) and G-418 (0.2 mg / ml). After the medium was changed on the second and fifth days of the culture, the medium was replaced with a medium containing 5% of the above serum (rat serum after oral administration of the specimen) on the eighth, eleventh, and fourteenth days of the culture. Cell DNA was recovered. The amount of HBV-DNA in the cells was measured by Southern blot, and the inhibition rate of HBV-DNA synthesis in the cells was determined. For reference, a similar test was performed for PMEA. The results are shown in Table 9 below.
[0161]
[Table 71]
[0162]
【The invention's effect】
The phosphonate nucleotide ester derivative of the present invention has excellent antiviral activity and antitumor activity, and can be orally administered.