JP3553567B2

JP3553567B2 - Method for crystallizing N2-((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N6-trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline

Info

Publication number: JP3553567B2
Application number: JP2003297778A
Authority: JP
Inventors: 恭義上田; 肇真鍋
Original assignee: Kaneka Corp
Current assignee: Kaneka Corp
Priority date: 1993-01-08
Filing date: 2003-08-21
Publication date: 2004-08-11
Anticipated expiration: 2019-08-11
Also published as: JP2004043488A

Description

本発明は、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤であるリジノプリル（Ｎ²−（（Ｓ）−１−カルボキシ−３−フェニルプロピル）−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン）の製造中間体として有用な、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化方法に関するものである。 The present invention is an angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitors lisinopril - useful as intermediates for the production of (N ² ((S) -1- carboxy-3-phenylpropyl) -L- lysyl -L- proline), N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - relates a method of crystallizing a trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline.

Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンは、特開昭６１−３６２９７号に示される方法などによりえることができる。反応でえられたＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを単離・精製する方法としては、晶析による方法が非常に簡便であり、特開昭６１−３６２９７号にはメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／シクロヘキサン（６５０ｍｌ／２４０ｍｌ）を用いる晶析方法が記載されている。また、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Journal of Organic Chemistry）、５３巻、８３６〜８４３頁（１９８８年）にも、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／シクロヘキサンやメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／ヘキサン類（Ｃ₆Ｈ₁₄）（２２５ｍｌ／８５ｍｌシクロヘキサン）を用いる晶析方法が記載されている。しかしながら、これらの溶剤を晶析溶剤として用いる方法には、溶剤の危険性が高いことや、えられたＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶物性が悪いことなどの問題があり、必ずしも好ましい方法とは言い難い。結晶物性が悪いと固液分離に時間がかかったり、ケーキ洗浄時に母液を充分に置換できなかったりする。また、一旦えられた結晶が融解・油状化（シロップ化）しやすく、固液分離から乾燥の工程において、一部またはほとんどが融解・油状化して分離回収がうまく行なえなかったり、形成された油状物・融解物からの溶剤除去が非常に難しいため、乾燥に長時間を要したり、乾燥が途中で進まなくなったりする。 N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline can be obtained by a method described in JP-A-61-36297. Can be. As a method for isolating and purifying N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline obtained by the reaction, crystallization is performed. Is very simple, and JP-A-61-36297 describes a crystallization method using methyl tert-butyl ether / cyclohexane (650 ml / 240 ml). Also, Journal of Organic Chemistry, vol. 53, pp. 836-843 (1988), methyl tert-butyl ether / cyclohexane and methyl tert-butyl ether / hexanes (C ₆ H ₁₄ ) (225 ml / 85 ml cyclohexane) is described. However, the method using these solvents as crystallization solvents involves a high risk of the solvents and the obtained N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -triethyl. There are problems such as poor crystal properties of fluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, and it is not always a preferable method. If the crystal properties are poor, solid-liquid separation takes a long time, or the mother liquor cannot be sufficiently replaced during cake washing. In addition, the crystals once obtained are easily melted and turned into oil (syrup), and in the process from solid-liquid separation to drying, part or most of the crystals are melted and turned into oil, so that separation and recovery cannot be performed well or the formed oil Since it is very difficult to remove the solvent from the material / melt, it takes a long time to dry, or the drying does not progress on the way.

本発明者らが、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／シクロヘキサンあるいはメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／ヘキサン類（Ｃ₆Ｈ₁₄）以外の晶析溶剤を予備的に探索したところ、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンが晶出しないか、あるいは油状で回収されてしまい、また、ゲル状物はえられてもうまく結晶化しないために濾過による回収ができないなど、結晶化が極めて難しい技術課題であることが判った。 When the present inventors preliminarily searched for a crystallization solvent other than methyl tert-butyl ether / cyclohexane or methyl tert-butyl ether / hexanes (C ₆ H ₁₄ ), it was found that N ² -((S) -1-ethoxy) was used. (Carbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline does not crystallize or is recovered as an oil, and a gel does not crystallize well even if obtained. Therefore, crystallization was found to be an extremely difficult technical problem, such as the inability to recover by filtration.

本発明が解決しようとする課題は、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／シクロヘキサンあるいはメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／ヘキサン類（Ｃ₆Ｈ₁₄）にかわるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを良好な結晶物性で結晶化させうる溶剤を見出すことである。 An object of the present invention is to provide, methyl tert- butyl ether / cyclohexane or methyl tert- butyl ether / hexanes (C ₆ H ₁₄₎ to replace N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - is to find a solvent which can be crystallized trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline with good crystalline properties.

本発明者らは、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを結晶化する溶剤に関して鋭意検討した結果、良好な結晶物性で結晶化できる溶剤は極めて類似した分子構造を有することを見出した。 The present inventors have conducted intensive studies on a solvent that crystallizes N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline. It has been found that a solvent that can be crystallized with good crystal properties has a very similar molecular structure.

すなわち、本発明は、一般式ＣＲ¹Ｒ²Ｒ³Ｒ⁴（式中、Ｒ¹は塩素原子、臭素原子、メトキシ基、アセチル基、アセトキシ基、クロロメチル基またはフェニル基を表し、Ｒ²は水素原子、塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基またはメトキシ基を表し、Ｒ³は塩素原子、臭素原子、メチル基またはメトキシ基を表し、Ｒ⁴は塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基またはメトキシ基を表し、ただし、Ｒ¹がメトキシ基で、かつ、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴がメチル基である組み合わせは除く）で示される化合物の１種もしくは２種以上の混合物を結晶化溶剤として用いるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化方法に関する。 That is, the present invention represents the general formula ^{^{^{^{CR 1 R 2 R 3 R 4}}}} ( wherein, R ¹ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methoxy group, an acetyl group, an acetoxy group, chloromethyl group or phenyl group, R ² is Represents a hydrogen atom, a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group, an ethyl group or a methoxy group, R ³ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group or a methoxy group, and R ⁴ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group, an ethyl group; Or a mixture of two or more of the compounds represented by the formula (1) except that R ¹ is a methoxy group and R ² , R ³ and R ⁴ are methyl groups. The present invention relates to a method for crystallizing N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline used as a crystallization solvent.

また、本発明は、一般式ＣＲ¹Ｒ²Ｒ³Ｒ⁴（式中、Ｒ¹は塩素原子、臭素原子、メトキシ基、アセチル基、アセトキシ基、クロロメチル基またはフェニル基を表し、Ｒ²は水素原子、塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基またはメトキシ基を表し、Ｒ³は塩素原子、臭素原子、メチル基またはメトキシ基を表し、Ｒ⁴は塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基またはメトキシ基を表し、ただし、Ｒ¹がメトキシ基で、かつ、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴がメチル基である組み合わせは除く）で示される化合物の１種もしくは２種以上とメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとの混合物を結晶化溶剤として用いるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化方法に関する。 Further, the present invention represents the general formula ^{^{^{^{CR 1 R 2 R 3 R 4}}}} ( wherein, R ¹ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methoxy group, an acetyl group, an acetoxy group, chloromethyl group or phenyl group, R ² is Represents a hydrogen atom, a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group, an ethyl group or a methoxy group, R ³ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group or a methoxy group, and R ⁴ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group, an ethyl group; Or a methoxy group, provided that R ¹ is a methoxy group and R ² , R ³ and R ⁴ are methyl groups). ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - - crystallization of trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline N ² using a mixture of ether as the crystallization solvent Law on.

また、本発明は、前記結晶化溶剤にさらにＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの溶解度、晶析濃度、収率、結晶物性などの晶析条件を制御する補助的な溶剤を使用するＮ² −（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化方法に関する。 The present invention further N ² in the crystallization solvent - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - solubility of trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline, crystallization concentration, yield, N ² using an auxiliary solvent for controlling crystallizing condition such as crystalline properties - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - trifluoroacetyl -L- The present invention relates to a method for crystallizing lysyl-L-proline.

また、本発明は結晶化溶剤としてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを、Ｎ²−（（３）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの溶解度、晶析濃度、収率、結晶物性などの晶析条件を制御する補助的な溶剤としてメチルシクロヘキサンを用いるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化方法に関する。 The present invention also relates to the solubility of methyl tert-butyl ether as a crystallization solvent and the solubility of N ² -((3) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline. , crystallization析濃degree, yield, using methylcyclohexane as an auxiliary solvent for controlling crystallizing condition such as crystalline properties N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - tri The present invention relates to a method for crystallizing fluoroacetyl-L-lysyl-L-proline.

本発明の結晶化方法に用いる結晶化溶剤としての一般式ＣＲ¹Ｒ²Ｒ³Ｒ⁴（式中、Ｒ¹は塩素原子、臭素原子、メトキシ基、アセチル基、アセトキシ基、クロロメチル基またはフェニル基を表し、Ｒ²は水素原子、塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基またはメトキシ基を表し、Ｒ³は塩素原子、臭素原子、メチル基またはメトキシ基を表し、Ｒ⁴は塩素原子、臭素原子、メチル基、エチル基またはメトキシ基を表し、ただし、Ｒ¹がメトキシ基で、かつ、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴がメチル基である組み合わせは除く）で示される化合物の例としては、メチルｔｅｒｔ−ブチルケトン、ｔｅｒｔ−ブチルベンゼン、フェニルトリクロロメタン、四臭化炭素、酢酸イソプロピル、酢酸ｔｅｒｔ−ブチル、２，２−ジメトキシプロパン、オルト酢酸トリメチル、オルト炭酸テトラメチル、塩化イソブチル、塩化ｔｅｒｔ−ブチル、２，２−ジクロロプロパン、１，１，１−トリクロロエタン、四塩化炭素、１，１，２−トリクロロエタン、塩化ネオペンチル、２，２−ジクロロブタンおよびブロモトリクロロメタンなどをあげることができる。これらは２種以上の混合物であってもよい。また、これらの１種もしくは２種以上とメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（一般式ＣＲ¹Ｒ²Ｒ³Ｒ⁴において、Ｒ¹がメトキシ基であり、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴がメチル基である組み合わせに相当する）との混合物であってもよい。 General formula CR ¹ R ² R ³ R ⁴ (wherein R ¹ is a chlorine atom, a bromine atom, a methoxy group, an acetyl group, an acetoxy group, a chloromethyl group or a phenyl) as a crystallization solvent used in the crystallization method of the present invention. R ² represents a hydrogen atom, a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group, an ethyl group or a methoxy group, R ³ represents a chlorine atom, a bromine atom, a methyl group or a methoxy group, R ⁴ represents a chlorine atom, Represents a bromine atom, a methyl group, an ethyl group or a methoxy group, provided that R ¹ is a methoxy group and R ² , R ³ and R ⁴ are methyl groups). , Methyl tert-butyl ketone, tert-butylbenzene, phenyltrichloromethane, carbon tetrabromide, isopropyl acetate, tert-butyl acetate, 2,2-dimethoxypropane, ortho vinegar Trimethyl, tetramethyl orthocarbonate, isobutyl chloride, tert-butyl chloride, 2,2-dichloropropane, 1,1,1-trichloroethane, carbon tetrachloride, 1,1,2-trichloroethane, neopentyl chloride, 2,2-dichloro Butane and bromotrichloromethane. These may be a mixture of two or more. Further, one or more of these compounds may be combined with methyl tert-butyl ether (in the general formula CR ¹ R ² R ³ R ⁴ , R ¹ is a methoxy group, and R ² , R ³ and R ⁴ are methyl groups. ).

前記のごとき本発明に使用しうる結晶化溶剤は、Ｃ（ＣＨ₃）₄（ネオペンタン）あるいはＣＣｌ₄（四塩化炭素）あるいはＣＢｒ₄（四臭化炭素）あるいはＣ（ＯＣＨ₃）₄（オルト炭酸テトラメチル）（いずれも炭素原子を中心として４つの比較的大きさの似た置換基（メチル基、塩素原子、臭素原子、メトキシ基）からなる）なる基本骨格が、少なくとも１つの塩素原子、臭素原子、メトキシ基、アセチル基、アセトキシ基、クロロメチル基またはフェニル基を持つように置換された分子構造を持つものであって、全体として基本骨格と類似した分子サイズを示す化合物である。 The crystallization solvent which can be used in the present invention as described above is C (CH ₃ ) ₄ (neopentane) or CCl ₄ (carbon tetrachloride) or CBr ₄ (carbon tetrabromide) or C (OCH ₃ ) ₄ (orthocarbonate). A basic skeleton consisting of four relatively similar substituents (methyl group, chlorine atom, bromine atom, and methoxy group) centered on a carbon atom, each having at least one chlorine atom and bromine A compound having a molecular structure substituted with an atom, a methoxy group, an acetyl group, an acetoxy group, a chloromethyl group or a phenyl group, and having a molecular size similar to the basic skeleton as a whole.

このことから、本来、結晶化しにくいＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを結晶化させるためには、結晶化に使用する溶剤分子の形状、ならびに、適した置換基の存在が重要な要件であると推察される。すなわち、溶剤分子の形状と置換基が、ある好適な範囲内に維持されるばあいにおいて、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンと溶剤分子との間に結晶化を可能とする何らかの相互作用が生じるものと考えられる。 Therefore, originally, difficult to crystallize N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - to crystallize the trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline, It is presumed that the shape of the solvent molecule used for crystallization and the presence of a suitable substituent are important requirements. That is, N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl- can be used when the shape and the substituent of the solvent molecule are maintained within a certain suitable range. It is believed that some interaction occurs between L-lysyl-L-proline and the solvent molecule that allows crystallization.

このようにＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンは、前記のような種々の原子や置換基と相互作用しやすく、逆に、前記のような分子形状や原子や置換基を有しない溶剤は、結晶化溶剤として適切ではなく、たとえば、脂肪族炭化水素（たとえば、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン、ネオペンタン、シクロヘキサンやメチルシクロヘキサン）には、相互作用をもたないために溶解度が非常に低く、このような溶剤は単独では全く結晶化溶剤とはならない。 Thus N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline, interacts with various atoms or substituent groups such as the Solvents which are easy to act, and conversely, do not have the above-mentioned molecular shape, atoms or substituents, are not suitable as crystallization solvents, for example, aliphatic hydrocarbons (for example, n-hexane, n-heptane, neopentane , Cyclohexane and methylcyclohexane) have very low solubility because they have no interaction, and such a solvent alone does not become a crystallization solvent at all.

このことを確認するために、本発明者らは、まず、前記のごとき本発明において使用される結晶化溶剤を用いてＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを結晶化させ、結晶内部に存在するこれらの溶剤量を測定した。その結果、溶剤の種類により異なるが、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンに対しておよそ１〜１００モル％の溶剤量であった。そしてこの、結晶内部に存在する溶剤量は、溶剤分子の形状、嵩高さや存在する置換基の種類に影響され、溶剤分子の嵩高さや自由度が増すと結晶内溶剤量（モル％）が減少する傾向が認められた。 In order to confirm this, the present inventors first used the crystallization solvent used in the present invention as described above to prepare N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-. N ⁶ -Trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline was crystallized, and the amount of these solvents present inside the crystal was measured. As a result, although it depends on the type of the solvent, it is about 1 to 100 with respect to N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline. The solvent amount was mol%. The amount of the solvent present inside the crystal is affected by the shape and bulkiness of the solvent molecule and the type of the substituents, and when the bulkiness and the degree of freedom of the solvent molecule increase, the amount of the solvent in the crystal (mol%) decreases. A tendency was observed.

さらに、これらの溶剤分子とＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン分子との相互作用を確認するために、ＣＨ₃ＣＣｌ₃（１，１，１−トリクロロエタン）を用いて結晶化させることにより、えられたＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶を用い、乾燥経時サンプルのＦＴ−ＩＲ測定を実施した。その結果、結晶内に存在する溶剤分子がＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン分子中の、少なくともトリフルオロアセチル部分と相互作用していることが示された。 Furthermore, these solvents molecule and N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - To confirm the interaction between trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline molecule And N ³ -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoro by crystallization using CH ₃ CCl ₃ (1,1,1-trichloroethane). Using a crystal of acetyl-L-lysyl-L-proline, an FT-IR measurement of a dried aged sample was performed. As a result, the solvent molecules present in the crystal is N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - in trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline molecule at least tri It was shown to interact with the fluoroacetyl moiety.

このことから、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化を行なうには、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン分子中の、トリフルオロアセチルアミノブチル基のような自由度のある基、あるいは結晶化には好適に働きにくい基を、結晶化が可能な状態に維持することが必要であり、このためには分子の形状と置換基が好適な範囲内にある化合物を結晶化溶剤として使用することが重要な要件であると判断される。つまり、結晶内溶剤が結晶化の状態や結晶物性に大きく関係していることがわかった。前述の結晶化溶剤はこの要件にかなうものである。 From this fact, to crystallize N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, N ² -(( S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - in trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline molecule, degree of freedom a group such as trifluoroacetyl-aminobutyl group or crystallization, It is necessary to maintain a group that does not work favorably in a state that allows crystallization, and for this purpose, it is necessary to use a compound having a molecular shape and a substituent within a suitable range as a crystallization solvent. Is determined to be an important requirement. That is, it was found that the solvent in the crystal was significantly related to the state of crystallization and the crystal properties. The crystallization solvent mentioned above meets this requirement.

しかし、当然のことながら、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの溶解度や晶析濃度、収率、結晶物性などの晶析条件を左右する条件が適切でないばあいがあるが、先の条件を制御するために前記のごとき結晶化溶剤に補助的な溶剤を適量加えて使用することができる。このような補助的な溶剤としては、たとえばジエチルケトン、ジオキサン、酢酸エチル、ニトロメタン、塩化メチレン、ｔｅｒｔ−ブタノール、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、メチルシクロヘキサンなどがあげられる。 However, it goes without saying that the solubility, crystallization concentration, yield, and solubility of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline In some cases, conditions that affect crystallization conditions such as crystal properties are not appropriate. However, in order to control the above conditions, an appropriate amount of an auxiliary solvent may be added to the crystallization solvent as described above. Examples of such auxiliary solvents include diethyl ketone, dioxane, ethyl acetate, nitromethane, methylene chloride, tert-butanol, benzene, n-hexane, cyclohexane, methylcyclohexane and the like.

なかでも、塩化メチレンや酢酸エチルを用いて、ある程度溶解度を高めることで晶析濃度を高めたり、メチルシクロヘキサンを用いて収率向上や結晶物性を改善する方法が好ましく使用される。たとえば補助的な溶剤としてメチルシクロヘキサンを用いたばあい、シクロヘキサンを用いたばあいに比べると、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの結晶化溶剤に与える影響は変わらないが、相転移の特性や結晶内溶剤量に与える影響から、より乾燥工程の作業性にすぐれ、融解性の少ない結晶がえられる。 Among them, a method of increasing the crystallization concentration by increasing the solubility to some extent using methylene chloride or ethyl acetate, or improving the yield and improving the crystal properties by using methylcyclohexane is preferably used. For example, when methylcyclohexane is used as an auxiliary solvent, compared to the case where cyclohexane is used, N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl- The effect of L-lysyl-L-proline on the crystallization solvent remains the same, but from the effects on the phase transition characteristics and the amount of solvent in the crystal, the workability of the drying step is more excellent, and crystals with less melting properties can be obtained. .

これらの補助的な溶剤は、融点、沸点、蒸気圧特性、相転移など既知の物性や前記結晶内溶剤量、さらにＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンに対する溶解度に与える効果などをもとに、各々の補助的な溶剤の特性にしたがって好ましい割合で結晶化溶剤とともに用いると効果的である。 These auxiliary solvents include known physical properties such as a melting point, a boiling point, a vapor pressure characteristic, and a phase transition, the amount of the solvent in the crystal, and N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N Based on the effect on solubility in ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline and the like, it is effective to use the crystallization solvent in a preferable ratio according to the characteristics of each auxiliary solvent.

ところで、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルは、Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンのすぐれた結晶化溶剤として知られているが、その作用機構も本発明の結晶化溶剤に該当する分子構造をもっていることに起因することが明らかになった。したがって、同様に補助的な溶剤と組合せることによってＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンの晶析条件を制御できることがわかった。とくに、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを、補助的な溶剤としてのメチルシクロヘキサンと組合わせて用いると、特開昭６１−３６２９７号に記載されたようなシクロヘキサンとの組合せに比べ、前述のごときメチルシクロヘキサンの特性が発揮される。このばあい、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとメチルシクロヘキサンとの使用割合は、特開昭６１−３６２９７号に記載のシクロヘキサンとの組合せにおけるのと実質的に同程度の割合で使用できるが、実際には晶析終了時においてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／メチルシクロヘキサンの重量比が１／１〜１／０．１、好ましくは１／０．７〜１／０．２、さらに好ましくは１／０．４〜１／０．２５の範囲で使用するのがよい。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／メチルシクロヘキサンの割合が、１／１以下であると不純物が析出してえられる結晶の品質が悪かったり、油状物や結晶性状の悪いものが回収されたりしやすく、１／０．１をこえると回収率が悪かったり、結晶の触解抑制効果が低いことがあるため好ましくない。 Incidentally, methyl tert- butyl ether, N ² - known as excellent crystallization solvents trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ However, it has been clarified that the action mechanism also results from having a molecular structure corresponding to the crystallization solvent of the present invention. Therefore, the crystallization conditions of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline are likewise obtained by combining with auxiliary solvents. Was found to be controllable. In particular, when methyl tert-butyl ether is used in combination with methylcyclohexane as an auxiliary solvent, the characteristics of methylcyclohexane as described above are compared with the combination with cyclohexane described in JP-A-61-36297. Is exhibited. In this case, the use ratio of methyl tert-butyl ether and methylcyclohexane can be substantially the same as that in the combination of cyclohexane described in JP-A-61-36297. At the end of the precipitation, the weight ratio of methyl tert-butyl ether / methylcyclohexane is 1/1 to 1 / 0.1, preferably 1 / 0.7 to 1 / 0.2, and more preferably 1 / 0.4 to 1 / 0.1. It is better to use in the range of 0.25. When the ratio of methyl tert-butyl ether / methylcyclohexane is 1/1 or less, the quality of crystals obtained by precipitation of impurities is poor, and oily substances and those having poor crystal properties are easily recovered. If the ratio exceeds 0.1, the recovery rate is poor, and the effect of suppressing the disintegration of crystals is low, which is not preferable.

ここまでに記載した化合物を溶剤として用いる結晶化方法としては、冷却晶析、濃縮晶析、また、他の溶剤からなる溶液をこれらの化合物からなる溶液に置換していく晶析方法といった、通常の晶析方法を用いることができる。結晶化に際しては、種晶を添加してもよい。なお、えられるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン結晶の結晶物性、ハンドリング性、回収率などを改善するために、２種以上の混合溶剤として使用することもできるし、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、メチルシクロヘキサンなどの補助的な溶剤の適当量を、予め添加、または晶析途中で添加するなどして、含ませることもできる。共存不純物の影響で結晶化しにくいばあいには、まず結晶化溶剤だけで結晶化させ、補助的な溶剤は逐次添加することも好ましく行なわれる。 Crystallization methods using the compounds described so far as a solvent include cooling crystallization, concentration crystallization, and crystallization methods such as replacing a solution composed of other solvents with a solution composed of these compounds. Can be used. Upon crystallization, a seed crystal may be added. The obtained N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline crystals have improved crystal properties, handling properties, and recovery rates. In order to do so, it can be used as a mixed solvent of two or more types, or by adding an appropriate amount of an auxiliary solvent such as n-hexane, cyclohexane, or methylcyclohexane in advance, or by adding it during crystallization. , Can also be included. When crystallization is difficult due to the effect of coexisting impurities, it is preferable to first crystallize only with a crystallization solvent and to sequentially add an auxiliary solvent.

このようにしてえられるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン結晶は、通常の固液分離・ケーキ洗浄の後、乾燥することができる。固液分離の方法としては、加圧濾過、減圧濾過、遠心分離などの通常用いられる方法を使用できる。また、乾燥方法としては、融解・油状化を抑制するなどの観点から、約２０℃〜約５０℃の低温下での減圧乾燥（真空乾燥）を行なうことが好ましい。湿結晶の結晶物性やハンドリング性を改善するために、本発明の実施において使用しうる化合物を用いて湿結晶を洗浄・置換することもできる。 The thus obtained N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline crystals are subjected to ordinary solid-liquid separation and cake washing. After that, it can be dried. As a method of solid-liquid separation, a commonly used method such as filtration under pressure, filtration under reduced pressure, and centrifugation can be used. As a drying method, from the viewpoint of suppressing melting and oiling, it is preferable to perform reduced-pressure drying (vacuum drying) at a low temperature of about 20 ° C to about 50 ° C. In order to improve the crystal properties and handling properties of the wet crystal, the wet crystal can be washed and replaced with a compound that can be used in the practice of the present invention.

以下、実施例、参考例により本発明を説明するが、もとより本発明はこれらに限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described with reference to examples and reference examples, but the present invention is not limited to these examples.

実施例１
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを、最高濃度を１００ｗ／ｖ％とし、これに表１の化合物を溶剤として用いて加温、溶解し、透明な溶液をえた。この溶液を撹拌下に室温まで冷却して、結晶の析出の有無を調べた。 Example 1
N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline at a maximum concentration of 100 w / v%, Was heated and dissolved using as a solvent to obtain a transparent solution. The solution was cooled to room temperature with stirring, and the presence or absence of crystal precipitation was examined.

実施例２
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１２ｇを１，１，１−トリクロロエタン１００ｍｌに加温、溶解した。その後、室温まで冷却後、析出した結晶を濾取した。えられた結晶を１，１，１−トリクロロエタンで洗浄し、減圧下で乾燥したところ約９ｇであった。乾燥結晶の融点は７８℃であった。 Example 2
12 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline was heated and dissolved in 100 ml of 1,1,1-trichloroethane. Then, after cooling to room temperature, the precipitated crystals were collected by filtration. The obtained crystals were washed with 1,1,1-trichloroethane and dried under reduced pressure to give about 9 g. The melting point of the dried crystals was 78 ° C.

実施例３
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１５ｇ、四塩化炭素３１ｇ、酢酸イソプロピル２０ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。その後、氷冷して析出した結晶を濾取し、ｎ−ヘプタンで充分に洗浄した。えられた結晶は約１５ｇであった。 Example 3
A mixture of 15 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 31 g of carbon tetrachloride and 20 g of isopropyl acetate was heated and dissolved. Then, the insoluble matter was filtered. Thereafter, the crystals precipitated on ice were collected by filtration and washed sufficiently with n-heptane. The obtained crystals weighed about 15 g.

実施例４
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１５ｇ、四塩化炭素３１ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１７ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。その後、氷冷して析出した結晶を濾取し、シクロヘキサンで充分に洗浄した。えられた結晶は１２ｇであった。 Example 4
A mixture of 15 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 31 g of carbon tetrachloride and 17 g of methyl tert-butyl ether was heated. , Was dissolved, and the insoluble matter was filtered. After cooling with ice, the precipitated crystals were collected by filtration and washed sufficiently with cyclohexane. The obtained crystals weighed 12 g.

実施例５
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１５ｇ、四臭化炭素６４ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１７ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。その後、氷冷して析出した結晶を濾取し、シクロヘキサンで充分に洗浄した。えられた結晶は１０ｇであった。 Example 5
A mixture of 15 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 64 g of carbon tetrabromide and 17 g of methyl tert-butyl ether was added. The mixture was dissolved by heating, and the insoluble matter was filtered. After cooling with ice, the precipitated crystals were collected by filtration and washed sufficiently with cyclohexane. The obtained crystals weighed 10 g.

実施例６
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン２０ｇ、１，１，１−トリクロロエタン１４ｇ、ジエチルケトン８ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。この溶液を冷却したところ結晶が析出した。析出した結晶は１７ｇであった。 Example 6
A mixture of 20 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 14 g of 1,1,1-trichloroethane and 8 g of diethyl ketone was prepared. The mixture was heated and dissolved, and the insoluble matter was filtered. When this solution was cooled, crystals precipitated. The precipitated crystals weighed 17 g.

実施例７
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン３０ｇ、四臭化炭素１０ｇ、ジエチルケトン８ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。この溶液を冷却したところ結晶が析出した。析出した結晶は２３ｇであった。 Example 7
A mixture of 30 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 10 g of carbon tetrabromide and 8 g of diethyl ketone was heated, After dissolution, the insoluble matter was filtered. When this solution was cooled, crystals precipitated. The precipitated crystals weighed 23 g.

実施例８
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１５ｇ、１，１，１−トリクロロエタン２７ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１７ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。その後、氷冷して結晶を析出させた後、メチルシクロヘキサン１０ｇを添加した。えられた結晶を濾取し、１，１，１−トリクロロエタン８ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル５ｇ、メチルシクロヘキサン３ｇの混合液、ついでメチルシクロヘキサン１０ｇで洗浄した。えられた結晶は１２ｇであった。乾燥結晶の融点は７８℃であった。 Example 8
15 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 27 g of 1,1,1-trichloroethane and 17 g of methyl tert-butyl ether The mixture was heated and dissolved, and the insolubles were filtered. Thereafter, after cooling with ice to precipitate crystals, 10 g of methylcyclohexane was added. The obtained crystals were collected by filtration and washed with a mixed solution of 8 g of 1,1,1-trichloroethane, 5 g of methyl tert-butyl ether and 3 g of methylcyclohexane, and then 10 g of methylcyclohexane. The obtained crystals weighed 12 g. The melting point of the dried crystals was 78 ° C.

実施例９
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン３ｇ、メチルシクロヘキサン３ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１２ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。この溶液を冷却したところ、結晶が析出した。析出した結晶は約２ｇであった。 Example 9
A mixture of 3 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 3 g of methylcyclohexane, and 12 g of methyl tert-butyl ether was heated, After dissolution, the insoluble matter was filtered. When this solution was cooled, crystals precipitated. The precipitated crystals were about 2 g.

実施例１０
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン６ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル２０ｇの混合物を加温溶解して、不溶物を濾過した後、種晶を添加し、冷却して結晶を析出させた。一晩撹拌した後、メチルシクロヘキサン１３ｇを滴下し、さらに氷冷した。濾過した後、冷却したメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／メチルシクロヘキサン（重量比５：２）で洗浄した。析出した結晶は約６ｇであった。 Example 10
A mixture of 6 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline and 20 g of methyl tert-butyl ether was dissolved by heating and insoluble. After filtration of the substance, seed crystals were added and cooled to precipitate crystals. After stirring overnight, 13 g of methylcyclohexane was added dropwise, and the mixture was further cooled with ice. After filtration, the mixture was washed with cooled methyl tert-butyl ether / methylcyclohexane (weight ratio: 5: 2). The precipitated crystals weighed about 6 g.

参考例１
実施例１のＮｏ．３８、３９および４１でえた懸濁液から結晶を濾取した後、ｎ−ヘキサンで充分に洗浄した。このサンプル中の結晶内溶剤量（結晶化に使用した溶剤のＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンに対するモル％、以下同様）を測定し、表２の結果をえた。 Reference Example 1
No. 1 of the first embodiment. After the crystals were collected by filtration from the suspensions obtained in 38, 39 and 41, they were sufficiently washed with n-hexane. For trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline - the crystals in the solvent amount in the sample (the solvent used for crystallization N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ Mol%, the same applies hereinafter) and the results in Table 2 were obtained.

参考例２
実施例１のＮｏ．５２、５３、５４および５５でえた懸濁液から結晶を濾取した後、ｎ−ヘキサンで充分に洗浄した。このサンプル中の結晶内溶剤量を測定し、表３の結果をえた。 Reference Example 2
No. 1 of the first embodiment. The crystals were collected from the suspensions obtained in 52, 53, 54 and 55 by filtration, and then sufficiently washed with n-hexane. The amount of solvent in the crystal in this sample was measured, and the results in Table 3 were obtained.

参考例３
実施例３でえられたサンプル中の結晶内溶剤量を測定したところ、四塩化炭素４８モル％、酢酸イソプロピル６モル％であった。 Reference Example 3
When the amount of the solvent in the crystal in the sample obtained in Example 3 was measured, it was 48 mol% of carbon tetrachloride and 6 mol% of isopropyl acetate.

参考例４
実施例４でえられたサンプル中の結晶内溶剤量を測定したところ、四塩化炭素５０モル％、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル３１モル％であった。 Reference example 4
When the amount of the solvent in the crystal in the sample obtained in Example 4 was measured, it was 50 mol% of carbon tetrachloride and 31 mol% of methyl tert-butyl ether.

参考例５
実施例５でえられたサンプル中の結晶内溶剤量を測定したところ、四臭化炭素７０モル％、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル２３モル％であった。 Reference example 5
When the amount of the solvent in the crystal in the sample obtained in Example 5 was measured, it was 70 mol% of carbon tetrabromide and 23 mol% of methyl tert-butyl ether.

参考例６
実施例９でえられたサンプル中の結晶内溶剤量を測定したところ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル５５モル％、メチルシクロヘキサン２２モル％であった。湿結晶を室温下真空乾燥し、融点７８℃の乾燥結晶をえた。 Reference Example 6
When the amount of the solvent in the crystal in the sample obtained in Example 9 was measured, it was 55 mol% of methyl tert-butyl ether and 22 mol% of methylcyclohexane. The wet crystals were dried under vacuum at room temperature to obtain dry crystals having a melting point of 78 ° C.

参考例７
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン６ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル２０ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した後、種晶を添加し、冷却して結晶を析出させた。一晩撹拌した後、シクロヘキサン８ｇを滴下し、さらに氷冷した。濾過した後、冷却したメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／シクロヘキサン（重量比５：２）で洗浄した。析出した結晶は約６ｇであった。結晶内溶剤量を測定したところ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル７４モル％、シクロヘキサン１８モル％であった。湿結晶を室温下真空乾燥し、融点７７℃の乾燥結晶をえた。また、この湿結晶を２０℃の大気中で８時間放置したものには、部分的な融解が認められた。 Reference Example 7
A mixture of 6 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline and 20 g of methyl tert-butyl ether was heated and dissolved, After filtering the insoluble matter, seed crystals were added, and the crystals were precipitated by cooling. After stirring overnight, 8 g of cyclohexane was added dropwise, and the mixture was further cooled with ice. After filtration, the resultant was washed with cooled methyl tert-butyl ether / cyclohexane (weight ratio: 5: 2). The precipitated crystals were about 6 g. When the amount of the solvent in the crystal was measured, it was 74 mol% of methyl tert-butyl ether and 18 mol% of cyclohexane. The wet crystals were dried under vacuum at room temperature to obtain dried crystals having a melting point of 77 ° C. When the wet crystals were left in the air at 20 ° C. for 8 hours, partial melting was observed.

参考例８
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン６ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル２０ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した後、種晶を添加し、冷却して結晶を析出させた。一晩撹拌した後ｎ−ヘキサン８ｇを滴下し、さらに氷冷した。濾過した後、冷却したメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル／ｎ−ヘキサン（重量比５：２）溶液で洗浄したところ、ケーキの収縮性が大きく、洗浄時の操作性が悪かった。析出した結晶は透明感があり、その析出量は約６ｇであった。結晶内溶剤量を測定したところ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル５６モル％、ｎ−ヘキサンは検出されなかった。湿結晶は、融解しやすかったので直ちに室温下真空乾燥し、融点７４℃の乾燥結晶をえた。 Reference Example 8
A mixture of 6 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline and 20 g of methyl tert-butyl ether was heated and dissolved, After filtering the insoluble matter, seed crystals were added, and the crystals were precipitated by cooling. After stirring overnight, 8 g of n-hexane was added dropwise, and the mixture was further cooled with ice. After filtration, the cake was washed with a cooled solution of methyl tert-butyl ether / n-hexane (weight ratio: 5: 2). As a result, the shrinkage of the cake was large, and the operability during washing was poor. The precipitated crystals were transparent, and the amount of the precipitated crystals was about 6 g. When the amount of the solvent in the crystal was measured, methyl tert-butyl ether (56 mol%) and n-hexane were not detected. The wet crystal was easily melted and was immediately dried under vacuum at room temperature to obtain a dry crystal having a melting point of 74 ° C.

参考例９
実施例１０でえられたサンプル中の結晶内溶剤量を測定したところ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル５６モル％、メチルシクロヘキサン１６モル％であった。湿結晶を室温下真空乾燥し、融点７８℃の乾燥結晶をえた。また、この湿結晶を２０℃の大気中で２４時間放置したところ、全く融解性は認められなかった。 Reference Example 9
When the amount of the solvent in the crystal in the sample obtained in Example 10 was measured, it was 56 mol% of methyl tert-butyl ether and 16 mol% of methylcyclohexane. The wet crystals were dried under vacuum at room temperature to obtain dry crystals having a melting point of 78 ° C. When the wet crystals were left in the air at 20 ° C. for 24 hours, no melting property was observed.

参考例１０
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン３ｇ、メチルシクロヘキサン１７ｇ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１２ｇの混合物を加温、溶解して、不溶物を濾過した。この溶液を冷却したところ、油状物がえられた。 Reference Example 10
A mixture of 3 g of N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, 17 g of methylcyclohexane and 12 g of methyl tert-butyl ether was heated, After dissolution, the insoluble matter was filtered. Upon cooling the solution, an oil was obtained.

参考例１１
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１０ｇをエタノール３０ｍｌに溶解した。この溶液にシクロヘキサンを徐々に添加したところ、油状物がえられた。 Reference Example 11
N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline 10g was dissolved in ethanol 30 ml. When cyclohexane was gradually added to this solution, an oily substance was obtained.

参考例１２
Ｎ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリン１０ｇを塩化メチレン３０ｍｌに溶解した。この溶液にシクロヘキサンを徐々に添加したところ、油状物がえられた。 Reference Example 12
N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline 10g was dissolved in methylene chloride 30 ml. When cyclohexane was gradually added to this solution, an oily substance was obtained.

参考例１３
実施例２の乾燥経時のサンプルについて、ＦＴ−ＩＲを測定した。ＦＴ−ＩＲの測定結果を図１〜図３に示す。 Reference Example 13
The FT-IR of the dried and aged sample of Example 2 was measured. FT-IR measurement results are shown in FIGS.

装置：ＦＴＳ−１５Ｅ／Ｄ（商品名、バイオラドたディジラブ（Bio Rad Digilab）（アメリカ）製）
付属装置：拡散反射スペクトル測定装置
（商品名、スペクトラテック（Spectra tech）（アメリカ）製）
（条件）光源：特殊セラミックス
検出器：ＭＣＴ
分解能：４ｃｍ^-1
積算回数：５００回
試料分散媒：なし Apparatus: FTS-15E / D (trade name, Bio Rad Digilab (USA))
Attached device: Diffuse reflection spectrum measuring device
(Product name, Spectra tech (USA) made)
(Conditions) Light source: Special ceramics
Detector: MCT
Resolution: 4cm ^-1
Number of accumulation: 500 times
Sample dispersion medium: None

その結果、各サンプルの３３００ｃｍ^-1、３１００ｃｍ^-1付近のピークの吸収位置は表４の通りであった。 As a result, the absorption positions of the peaks near 3300 cm ^-1 and 3100 cm ^-1 of each sample were as shown in Table 4.

また、図１〜図３から明らかなように、１７２４．４ｃｍ^-1のピーク強度に変化が認められた。 1 to 3, a change was observed in the peak intensity at 1724.4 cm ^-1 .

これらのことから、結晶中で、溶剤が基質であるＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンと相互作用を有していると考えられ、この相互作用が結晶化と関連があるものと思われる。 For these reasons, in the crystal, N ² solvent is a substrate - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - interacts with trifluoroacetyl -L- lysyl -L- proline And this interaction appears to be related to crystallization.

本発明によれば、結晶化が極めて困難なＮ²−（（Ｓ）−１−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル）−Ｎ⁶−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシル−Ｌ−プロリンを安定的に良好な結晶として取得できる。 According to the present invention, N ² -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline, which is extremely difficult to crystallize, is stably improved. Crystal can be obtained.

参考例１３における１，１，１−トリクロロエタン含量が１ｗｔ％のサンプルの、ＦＴ−ＩＲの測定結果を表すチャートである。14 is a chart showing FT-IR measurement results of a sample having a 1,1,1-trichloroethane content of 1 wt% in Reference Example 13. 参考例１３における１，１，１−トリクロロエタン含量が５ｗｔ％のサンプルの、ＦＴ−ＩＲの測定結果を表すチャートである。13 is a chart showing FT-IR measurement results of a sample having a 1,1,1-trichloroethane content of 5 wt% in Reference Example 13. 参考例１３における１，１，１−トリクロロエタン含量が１５ｗｔ％のサンプルの、ＦＴ−ＩＲの測定結果を表すチャートである。13 is a chart showing FT-IR measurement results of a sample having a 1,1,1-trichloroethane content of 15 wt% in Reference Example 13.

Claims

Methyl tert- butyl ether as crystallization solvents, using methylcyclohexane as a supplementary solvent N ² - ((S) -1- ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶ - trifluoroacetyl -L- lysyl -L -A method for crystallization of proline.

The crystallization method according to claim 1, wherein the crystallization is performed by replacing a solution comprising another solvent with a solution containing methyl tert-butyl ether and methylcyclohexane.

N dissolved in methyl tert-butyl ether ^2Two -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶⁶ The crystallization method according to claim 1 or 2, wherein methylcyclohexane is added after precipitating-trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline.

N obtained ^2Two -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶⁶ The crystallization method according to claim 1, 2 or 3, wherein the crystals of -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline are dried under reduced pressure at a temperature of 20 to 50C.

Using a mixture containing 4 parts by weight of methyl tert-butyl ether and 1 part by weight of methylcyclohexane as crystallization solvent ^2Two -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶⁶ A method for crystallizing trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline.

N obtained ^2Two -((S) -1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl) -N ⁶⁶ The crystallization method according to claim 5, wherein the crystals of -trifluoroacetyl-L-lysyl-L-proline are dried under reduced pressure at a temperature of 20 to 50C.