JP3446042B2 - 化学物質の微生物学的同定方法 - Google Patents
化学物質の微生物学的同定方法Info
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Description
的同定方法に関するものである。 【0002】 【従来の技術】現在、化学物質のデーターベースChemic
al abstractには約1700万件の化学物質が登録され
ている。そのうち、1万種類以上の合成化学物質が環境
中に蓄積しているものと推定され、その数は年々増えて
いる。合成化学物質の中には、直接または環境中で形を
変えた後に生態や人体に悪影響を与える物質も含まれて
いる。そのため、それぞれの化学物質について、生態や
人体に与える影響を迅速に評価する必要がある。また、
環境汚染問題が国民の不安をあおるような社会問題とな
っている状況の下、種々の高度な測定システムで、環境
中に存在する化学物質を同定・定量しようとする試みが
なされている。しかしながら、どのような高度な技術を
用いても、現状では約10%の化学物質を同定できるに
すぎないと言われている。従って、環境中に存在する未
知の化学物質そのものを同定するよりも、環境中に存在
する化学物質の毒性を表現できる指標を確立する方が実
用的である。上述した必要性から、現在、多機関で簡易
毒性評価試験(バイオアッセイ)を利用した毒性の指標
化がなされようとしている。バイオアッセイでは生物個
体を用いず動植物細胞や微生物を用いて「化学物質によ
る生物的応答の変化」を測定し、「毒性」を評価する方
法である。ところが、現在利用されているバイオアッセ
イは主として単一細胞の生育阻害を測定しているだけで
ある。この方法では、化学物質による毒性の有無は評価
できるが、その毒性の性質やどのような化学物質に起因
する毒性であるかを判断するための情報が全く得られな
い。 【0003】 【発明が解決しようとする課題】本発明は、試料化学物
質を、微生物学的に同定する方法を提供することをその
課題とする。 【0004】 【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記課題
を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、本発明を完成する
に至った。即ち、本発明によれば、あらかじめ定めた複
数種の指標微生物を試料化学物質の存在下で該試料化学
物質の濃度を変化させて生育させる微生物生育工程と、
該微生物生育工程における試料化学物質濃度と指標微生
物濃度との関係を測定する測定工程と、該測定工程で得
られた該指標微生物濃度と該試料化学物質濃度との関係
を、データバンクにあらかじめ収納させている指標微生
物濃度と指標化学物質濃度との関係を示すデータと照合
する照合工程とからなることを特徴とする化学物質の微
生物学的同定方法が提供される。 【0005】 【発明の実施の形態】本発明の方法は、その試料化学物
質を微生物学的に同定するためのデータバンクを用い
る。このデータバンクには、あらかじめ測定した指標化
学物質濃度と指標微生物濃度との関係を示すデータを収
納させておく。このデータバンクに収納させる指標化学
物質濃度と指標微生物濃度との関係を示すデータ(以
下、単に微生物/化学物質濃度データとも言う)は、で
きるだけ多数であることが好ましく、その微生物/化学
的濃度データが新しく得られたときには、迅速にそのデ
ータをデータバンクに収納させるのが好ましい。本発明
の場合、あらかじめ定めた複数種の指標微生物とあらか
じめ定めた複数種の指標化学的物質とを用いて、微生物
/化学物質濃度データを作り、これをデータバンクに収
納させておくのがよい。 【0006】指標化学物質としては、微生物に対して阻
害性を示すものが用いられる。このようなものとして
は、以下に示す大腸菌に対する生育阻害性を示すものを
選んだ。下記にした化合物の後のカッコ内に、大腸菌に
対するその最低阻害濃度を示す。 【0007】No.1 Methylmercury chloride
(0.91μM) No.2 Nickel chloride(1111μM) No.3 2−Aminoanthracene(370μM) No.4 Tributyltin chloride(0.1μM) No.5 Malathion(222μM) No.6 Phenol(17mM) No.7 Lindane(6666μM) No.8 Pentachlorophenol(74μM) No.9 Trp-P-2(Acetate)(37μM) No.10 4-Nitroquinoline-N-oxide(567μM) No.11 Benzo(a)pyrene(111μM) No.12 Paraquat(333μM) No.13 Maneb(37μM) No.14 Cadmium chloride(333μM) No.15 Bis phenol-A(123μM) No.16 Di-2-ethylhexyl phthalate(92.6μ
M) No.17 2,5-Dichlorophenol(13.7μM) No.18 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid(24
7μM) No.19 Formaldehyde(555μM) No.20 p-Nonylphenol(666μM) No.21 Sodium Arsenite(111μM) No.22 Thiuram(12.3μM) No.23 2,4,5-Trichlorophenol(13.7μM) No.24 potassium dichlomate(33μM) No.25 Triphenyltin chloride(3.3μM) 【0008】指標化学物質に関しては、前記においては
25種を示したが、化学物質のより正確な微生物学的同
定を行うには、できるだけ多数の化学物質を選定するの
が好ましいことは明らかである。従って、指標化学物質
は上記のものに限定されるものでないことは当然であ
る。 【0009】指標微生物としては、その種類が異なった
ものを多数選ぶのが好ましいが、その指標微生物の具体
例を示すと以下の通りである。 (1)Acetobacter pasteurianus IFO 3188 この微生物は、塩化メチル水銀(methylmercury chlori
de)に対して感受性を示す微生物である。この微生物
は、1μM程度の塩化メチル水銀の存在下でほぼ完全に
その生育が阻止され、0.3μM程度の濃度でも明らか
な増殖阻害を生じる。他の化学物質に対する感受性は表
1に示す。 (2)Acetobacter pasteurianus IFO 3129 この微生物は、塩化ニッケルに感受性を示す微生物であ
る。この微生物は0.17μM程度の塩化ニッケルの存
在下では60%程度の生育を示すにとどまった。他の化
学物質に対する感受性は表2に示す。 (3)Glysomyces rutagersensis IFO 14488 この微生物は、2−アミノアントラセンに感受性を示す
微生物である。この微生物は、2−アミノアントラセン
4.6μM程度の濃度においても感受性を示す。他の化
学物質に対する感受性は表3に示す。 (4)Aureobacterium esteraromatium IFO 3752 この微生物は、塩化トリブチルスズに感受性を示す微生
物である。この微生物は、塩化トリブチルスズに対して
は0.003μM程度の低濃度まで感受性を示す。他の
化学物質に対する感受性は表4に示す。 (5)Comamonas Testosteroni IAM 1048 この微生物は、マラチオン(Malathion)に感受性を示
す微生物である。この微生物は、0.3μM程度のマラ
チオンの存在下で明らかな生育阻害を生じた。他の化学
物質に対する感受性は表5に示す。 (6)Pseudomonas synxantha IFO 3913 この微生物は、フェノールに感受性を示す微生物であ
る。この微生物は、フェノール濃度23μM程度で明ら
かな増殖阻害を示した。他の化学物質に対する感受性は
表6に示す。 (7)Staphylococcus aureus IFO 3060 この微生物は、リンダン(Lindane)に感受性を示す微
生物である。この微生物は、リンダン0.34μM程度
においても生育阻害を示した。他の化学物質に対する感
受性は表7に示す。以上に示した7種類の微生物は、化
学物質に対する感受性は異なり、それぞれ異なった化学
物質に対して強い感受性を示す。 【0010】指標微生物の生育(培養)は、L培地(酵
母エキス1%、ポリペプトン0.5%)を用いて行っ
た。生育は、96穴マイクロプレート上で25℃で行な
い、650nmの吸光度でその生育(微生物濃度)を観
察した。この場合、培地には、所定化学物質を所定濃度
で添加した。後期表1〜表7に、前記指標化学物質に対
する前記指標微生物の感受性(微生物/化学物質濃度デ
ータ)を示す。なお、以下に示す表1〜7において、生
育の欄に示した650nmの吸光度の数値は、その上欄
に示した化学物質の濃度(μM)の数値に対応するもの
である。例えば、表1の(1)Acetobacter pasteurian
us IFO3188における生育の欄の吸光度102及び0.1
16は、その上欄のMethylmercury chlorideの濃度(μ
M)0.000及び0.034に対応するものである。 【0011】 【表1】(1)Acetobacter pasteurianus IFO3188の化
学物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.102 0.116 0.108 0.085
0.024 0.021 0.0240.025 0.024 0.024 0.018 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.109 0.113 0.112 0.119
0.114 0.114 0.1140.117 0.100 0.012 0.013 2-Aminoanthracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.5
24 4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 333
3.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.101 0.109 0.116 0.110
0.107 0.106 0.0900.089 0.065 -0.048 -0.091 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.104 0.049 0.048 0.049
0.046 0.040 0.0180.016 0.011 0.015 0.024Malathion
濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914 2.741 8.
222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.111 0.111 0.127 0.120
0.126 0.120 0.1230.120 0.108 0.081 -0.003 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.107 0.112 0.124 0.108
0.107 0.099 0.0800.075 0.038 0.027 0.018 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000生育
(Absorbance at 650nm) 0.108 0.111 0.119 0.121 0.1
18 0.085 0.0700.094 0.100 0.094 -0.063 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.104 0.113 0.123 0.111
0.086 0.037 0.0180.018 0.018 0.017 0.014 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.098 0.120 0.121 0.110
0.111 0.102 0.0740.061 0.039 0.015 0.074 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0 生育(Absorbance at 650nm) 0.121 0.114 0.121 0.112
0.120 0.109 0.1040.098 0.082 0.018 0.014 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.093 0.090 0.121 0.120
0.120 0.115 0.1110.095 0.081 0.060 0.051 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.110 0.107 0.114 0.107
0.103 0.093 0.0750.059 0.024 0.017 0.015 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.111 0.116 0.127 0.123
0.125 0.120 0.1140.085 0.014 0.009 0.018 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.106 0.098 0.115 0.115
0.111 0.102 0.0900.055 0.020 0.017 0.016 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.090 0.095 0.121 0.125
0.119 0.112 0.0950.063 0.021 0.020 0.070 Di-2-ethylhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042
0.127 0.381 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.66
7 833.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.091 0.087 0.118 0.114
0.118 0.116 0.1100.094 0.066 0.047 0.0522,5-Dichl
orophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.572
13.716 41.148 123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.098 0.090 0.121 0.122
0.126 0.127 0.1060.070 0.021 0.017 0.017 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000
0.339 1.016 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.6
67 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.099 0.098 0.118 0.126
0.119 0.121 0.1150.107 0.081 0.018 0.021Formaldeh
yde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.285 6.856
20.56861.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.109 0.098 0.116 0.116
0.115 0.114 0.1120.086 0.048 0.019 0.015 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.108 0.086 0.126 0.126
0.112 0.020 0.0140.011 0.012 0.024 0.099 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.111 0.113 0.121 0.122
0.125 0.121 0.1230.112 0.047 0.026 0.009Thiuram
濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.370 4.1
11 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.112 0.107 0.113 0.106
0.105 0.080 0.0500.027 0.018 0.013 0.013 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.118 0.113 0.122 0.109
0.065 0.019 0.0180.018 0.016 0.020 0.027 Potassium dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005
0.015 0.045 0.1360.407 1.222 3.667 11.000 33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.115 0.107 0.114 0.113
0.111 0.110 0.1160.115 0.112 0.104 0.079 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.0140.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.107 0.112 0.110 0.106
0.105 0.106 0.1000.108 0.104 0.091 0.083 【0012】 【表2】(2)Acetobacter pasteurianus IFO3129の化
学物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.260 0.313 0.292 0.269
0.165 0.036 0.0470.047 0.041 0.034 0.032 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.556 0.345 0.265 0.264
0.261 0.265 0.5840.272 0.480 0.114 0.026 2-Aminoanthracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.5
24 4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 333
3.000生育(Absorbance at 650nm) 0.272 0.296 0.284
0.269 0.267 0.264 0.2370.198 0.166 0.031 -0.040 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.278 0.047 0.047 0.047
0.046 0.046 0.0390.025 0.013 0.016 0.030 Malathion 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914
2.741 8.222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.265 0.252 0.255 0.253
0.243 0.230 0.2310.223 0.214 0.168 0.083 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.323 0.300 0.323 0.305
0.289 0.283 0.2670.224 0.178 0.071 0.032 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.234 0.234 0.235 0.235
0.221 0.168 0.1370.164 0.158 0.132 -0.114 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.271 0.228 0.213 0.199
0.155 0.073 0.0290.021 0.023 0.021 0.021 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.648 0.580 0.288 0.285
0.274 0.140 0.0700.036 0.023 0.023 0.068 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0 生育(Absorbance at 650nm) 0.296 0.299 0.298 0.303
0.303 0.289 0.2810.240 0.154 0.021 0.024 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.077 0.079 0.078 0.079
0.076 0.074 0.0710.054 0.047 0.047 0.048 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.349 0.311 0.314 0.276
0.236 0.193 0.1560.123 0.049 0.032 0.024 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.341 0.323 0.371 0.332
0.671 0.601 0.5970.250 0.642 0.059 0.027 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.252 0.247 0.245 0.227
0.210 0.192 0.1600.120 0.021 0.017 0.024 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.246 0.257 0.242 0.250
0.242 0.225 0.2010.090 0.030 0.024 0.178 Di-2-ethylhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042
0.127 0.381 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.66
7 833.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.245 0.235 0.235 0.234
0.238 0.223 0.2130.188 0.159 0.119 0.055 2,5-Dichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.
524 4.572 13.716 41.148 123.444 370.333 1111.000 3333.000生育(Abso
rbance at 650nm) 0.252 0.264 0.260 0.262 0.235 0.2
38 0.2300.193 0.036 0.029 0.024 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000
0.339 1.016 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.6
67 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.248 0.262 0.257 0.265
0.254 0.246 0.2180.191 0.135 0.032 0.045 Formaldehyde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.
285 6.856 20.568 61.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.252 0.266 0.248 0.247
0.262 0.233 0.2270.174 0.035 0.034 0.033 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.280 0.271 0.275 0.269
0.249 0.185 0.0120.010 0.010 0.014 0.042 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.281 0.265 0.234 0.165
0.279 0.282 0.2650.259 0.166 0.036 0.013 Thiuram 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457
1.370 4.111 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.286 0.294 0.331 0.383
0.279 0.361 0.2700.150 0.041 0.035 0.025 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.285 0.270 0.265 0.201
0.110 0.027 0.0260.023 0.022 0.035 0.046Potassium
dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005 0.015 0.0
45 0.1360.407 1.222 3.667 11.000 33.000生育(Absor
bance at 650nm) 0.281 0.267 0.546 0.276 0.275 0.73
6 0.2710.264 0.259 0.473 0.218 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.0140.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.323 0.454 0.311 0.303
0.476 0.288 0.2870.290 0.275 0.273 0.240 【0013】 【表3】(3)Glysomyces rutagersensis IFO14488の
化学物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.066 0.065 0.069 0.068
0.047 0.042 0.0380.032 0.026 0.021 0.018 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.041 0.038 0.039 0.042
0.042 0.044 0.0420.040 0.025 0.025 0.024 2-Aminoanthracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.5
24 4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 333
3.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.076 0.070 0.076 0.069
0.061 0.058 0.0470.029 0.003 -0.015 -0.157 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000生
育(Absorbance at 650nm) 0.058 0.053 0.052 0.051
0.050 0.043 0.0370.029 0.025 0.026 0.036 Malathion 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914
2.741 8.222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.059 0.052 0.053 0.052
0.054 0.053 0.0540.051 0.048 0.045 0.006 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.044 0.059 0.059 0.061
0.059 0.054 0.0500.047 0.038 0.032 0.025 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.049 0.046 0.046 0.050
0.049 0.048 0.0490.066 0.073 0.090 -0.082 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.052 0.049 0.049 0.046
0.044 0.038 0.0290.027 0.028 0.028 0.030 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.053 0.053 0.053 0.050
0.049 0.047 0.0420.027 0.027 0.029 0.133 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0 生育(Absorbance at 650nm) 0.066 0.061 0.059 0.056
0.055 0.054 0.0480.047 0.043 0.036 0.030 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.055 0.053 0.058 0.058
0.054 0.049 0.0450.042 0.035 0.026 0.019 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.053 0.051 0.054 0.055
0.054 0.054 0.0510.049 0.052 0.046 0.041 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000生育(Absorba
nce at 650nm) 0.057 0.050 0.050 0.051 0.050 0.047
0.0440.042 0.032 0.025 0.030 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.045 0.043 0.042 0.037
0.033 0.033 0.0330.031 0.029 0.029 0.027 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.060 0.058 0.062 0.064
0.059 0.055 0.0520.042 0.030 0.026 0.058Di-2-ethy
lhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042 0.127 0.38
1 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.667 833.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.052 0.052 0.053 0.051
0.053 0.051 0.0500.039 0.036 0.022 0.020 2,5-Dichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.
524 4.572 13.716 41.148 123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.062 0.059 0.061 0.060
0.059 0.056 0.0540.044 0.030 0.024 0.0202,4-Dichl
orophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.01
6 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.667 2222.00
0 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.062 0.058 0.063 0.061
0.057 0.055 0.0520.050 0.033 0.022 0.026 Formaldehyde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.
285 6.856 20.56861.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.054 0.050 0.054 0.054
0.053 0.052 0.0510.050 0.048 0.036 0.021 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.056 0.054 0.052 0.052
0.048 0.045 0.0310.021 0.019 0.023 0.069 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.111 12.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.049 0.047 0.049 0.047
0.047 0.045 0.0440.040 0.040 0.041 0.035 Thiuram 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457
1.370 4.111 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.053 0.048 0.049 0.047
0.044 0.042 0.0340.028 0.023 0.022 0.025 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.056 0.053 0.053 0.050
0.039 0.033 0.0310.029 0.031 0.030 0.046 Potassium dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005
0.015 0.045 0.136 0.407 1.222 3.667 11.000 33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.041 0.036 0.041 0.043
0.043 0.043 0.0440.042 0.040 0.037 0.037 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.014 0.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.044 0.045 0.049 0.049
0.049 0.052 0.0500.044 0.034 0.026 0.020 【0014】 【表4】(4)Aureobacterium esteraromatium IFO 37
52の化学物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.091 0.107 0.110 0.093
0.043 0.023 0.0220.023 0.022 0.021 0.018 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.098 0.106 0.116 0.112
0.116 0.111 0.1120.114 0.110 0.084 0.016 2-Aminoanthracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.5
24 4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 333
3.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.095 0.093 0.113 0.104
0.099 0.099 0.0900.091 0.069 0.008 -0.108 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.105 0.037 0.044 0.044
0.042 0.038 0.0300.018 0.014 0.023 0.032Malathion
濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914 2.741 8.
222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.101 0.098 0.122 0.120
0.119 0.113 0.1050.100 0.088 0.068 -0.001 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.100 0.099 0.121 0.114
0.107 0.105 0.1010.098 0.085 0.045 0.023 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.103 0.110 0.131 0.132
0.126 0.099 0.0770.093 0.103 0.111 -0.059 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.095 0.098 0.116 0.115
0.093 0.054 0.0220.021 0.019 0.017 0.021 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000生
育(Absorbance at 650nm) 0.089 0.098 0.107 0.107
0.103 0.089 0.0560.039 0.030 0.023 0.056 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0 生育(Absorbance at 650nm) 0.106 0.111 0.121 0.118
0.118 0.118 0.1010.096 0.081 0.068 0.066 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.111 12.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.096 0.097 0.118 0.117
0.113 0.110 0.1070.099 0.087 0.077 0.126 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.097 0.089 0.120 0.117
0.112 0.104 0.0890.085 0.065 0.049 0.032 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.107 0.102 0.121 0.120
0.122 0.119 0.1160.105 0.074 0.024 0.036 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.090 0.094 0.119 0.119
0.112 0.105 0.0930.085 0.046 0.020 0.020 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.088 0.092 0.123 0.123
0.121 0.111 0.0950.080 0.019 0.018 0.052 Di-2-ethylhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042
0.127 0.381 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.66
7 833.000生育(Absorbance at 650nm) 0.087 0.069 0.
122 0.119 0.121 0.117 0.1090.096 0.075 0.052 0.048 2,5-Dichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.
524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000 33
33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.097 0.103 0.129 0.127
0.128 0.122 0.1130.086 0.020 0.017 0.019 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000
0.339 1.016 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.6
67 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.093 0.103 0.124 0.122
0.124 0.124 0.1160.100 0.075 0.018 0.027 Formaldehyde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.
285 6.856 20.56861.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.097 0.107 0.122 0.123
0.119 0.121 0.1200.112 0.084 0.044 0.015 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.102 0.090 0.076 0.111
0.108 0.095 0.0150.016 0.013 0.022 0.101 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.098 0.094 0.122 0.120
0.119 0.119 0.1110.107 0.100 0.088 0.065 Thiuram 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457
1.370 4.111 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.105 0.097 0.124 0.122
0.123 0.109 0.0820.040 0.020 0.017 0.016 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.098 0.095 0.115 0.110
0.081 0.021 0.0200.020 0.020 0.023 0.033 Potassium dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005
0.015 0.045 0.1360.407 1.222 3.667 11.000 33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.105 0.101 0.121 0.122
0.124 0.117 0.1180.120 0.116 0.109 0.088 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.0140.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.100 0.096 0.107 0.110
0.109 0.103 0.1000.085 0.056 0.029 0.019 【0015】 【表5】(5)Comamonas Testosteroni IAM1048の化学
物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.420 0.419 0.417 0.381
0.080 0.059 0.0560.056 0.057 0.048 0.039 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.316 0.302 0.314 0.313
0.303 0.302 0.2930.285 0.279 0.178 -0.005 2-Aminoanthracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.5
24 4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 333
3.000生育(Absorbance at 650nm) 0.417 0.412 0.435
0.420 0.425 0.413 0.3900.335 0.248 0.118 -0.084 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.401 0.406 0.401 0.394
0.373 0.268 0.1550.074 0.056 0.051 0.072 Malathion 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914
2.741 8.222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.341 0.341 0.346 0.319
0.314 0.300 0.2880.270 0.234 0.141 -0.101 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.321 0.302 0.312 0.315
0.319 0.321 0.3050.302 0.269 0.156 0.000 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.323 0.312 0.316 0.313
0.302 0.267 0.2400.258 0.405 0.750 1.157 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.393 0.404 0.401 0.400
0.379 0.337 0.2820.158 0.039 0.035 0.037 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.391 0.562 0.456 0.411
0.418 0.361 0.2670.089 0.046 0.035 0.089 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0生育(Absorbance at 650nm) 0.399 0.406 0.412 0.39
8 0.402 0.386 0.3660.355 0.345 0.284 0.140 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.416 0.425 0.445 0.443
0.432 0.430 0.4250.409 0.386 0.306 -0.108 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.327 0.314 0.326 0.313
0.304 0.294 0.2590.168 -0.085 -0.543 -1.517 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.316 0.304 0.314 0.311
0.304 0.303 0.2840.257 0.165 0.041 0.003 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.307 0.294 0.302 0.294
0.287 0.297 0.2860.262 0.201 0.068 -0.269 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.413 0.420 0.425 0.428
0.423 0.388 0.3530.223 0.054 0.049 0.157 Di-2-ethylhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042
0.127 0.381 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.66
7 833.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.432 0.414 0.440 0.437
0.438 0.426 0.4360.417 0.110 0.021 -0.143 2,5-Dichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.
524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000 33
33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.436 0.442 0.447 0.449
0.454 0.430 0.1340.083 0.054 0.049 0.040 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000
0.339 1.016 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.6
67 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.427 0.430 0.438 0.443
0.446 0.434 0.4210.390 0.099 0.044 0.052 Formaldehyde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.
285 6.856 20.56861.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.437 0.428 0.444 0.446
0.442 0.427 0.4330.429 0.430 0.382 0.077 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.403 0.387 0.412 0.408
0.388 0.364 0.2930.216 0.182 0.142 0.022 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.407 0.407 0.403 0.436
0.416 0.399 0.3830.365 0.333 0.242 0.129 Thiuram 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457
1.370 4.111 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.404 0.401 0.426 0.416
0.391 0.362 0.2530.191 0.083 0.037 0.047 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.411 0.398 0.397 0.390
0.313 0.063 0.0500.052 0.049 0.041 0.077 Potassium dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005
0.015 0.045 0.1360.407 1.222 3.667 11.000 33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.323 0.303 0.322 0.318
0.311 0.303 0.2960.296 0.289 0.273 0.226 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.0140.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.321 0.315 0.328 0.327
0.317 0.304 0.2820.280 0.237 0.197 0.118 【0016】 【表6】(6)Pseudomonas synxantha IFO 3913の化学
物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.719 0.716 0.728 0.733
0.736 0.476 0.0700.060 0.056 0.057 0.046 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.667 0.686 0.673 0.673
0.673 0.666 0.6620.666 0.659 0.542 0.051 2-Aminoanthracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.5
24 4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 333
3.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.784 0.785 0.804 0.794
0.805 0.803 0.7690.723 0.682 0.548 0.150 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.748 0.773 0.767 0.776
0.769 0.761 0.7610.729 0.351 0.077 0.057 Malathion 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914
2.741 8.222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.717 0.714 0.708 0.696
0.695 0.680 0.6880.706 0.778 0.751 0.180 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.624 0.649 0.646 0.615
0.594 0.541 0.4220.298 0.203 0.116 0.053 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.655 0.657 0.647 0.660
0.644 0.606 0.5930.597 0.571 0.451 -0.032 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.770 0.775 0.774 0.763
0.756 0.726 0.7110.692 0.708 0.731 0.158 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.701 0.712 0.726 0.723
0.723 0.714 0.7110.730 0.700 0.382 0.149 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0 生育(Absorbance at 650nm) 0.746 0.754 0.768 0.748
0.753 0.741 0.7180.725 0.747 0.845 0.630 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000生育
(Absorbance at 650nm) 0.782 0.802 0.814 0.819 0.8
03 0.806 0.7930.775 0.773 0.774 0.558 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.680 0.691 0.679 0.669
0.659 0.638 0.5550.440 0.308 0.221 0.154 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.695 0.720 0.712 0.697
0.676 0.668 0.6690.692 0.760 0.808 0.261 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.677 0.704 0.696 0.698
0.683 0.676 0.6480.592 0.529 0.471 0.381 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.787 0.805 0.812 0.817
0.821 0.807 0.8210.836 0.573 0.686 0.455Di-2-ethy
lhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042 0.127 0.38
1 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.667 833.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.784 0.757 0.792 0.794
0.783 0.772 0.7730.772 0.788 0.783 0.582 2,5-Dichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.
524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000 33
33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.788 0.805 0.810 0.818
0.822 0.824 0.8300.852 0.767 0.075 0.024 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000
0.339 1.016 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.6
67 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.761 0.773 0.785 0.797
0.801 0.795 0.8010.835 0.906 0.945 0.045 Formaldehyde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.
285 6.856 20.56861.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.765 0.752 0.776 0.784
0.785 0.779 0.7890.789 0.784 0.765 0.740 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.758 0.762 0.775 0.763
0.737 0.708 0.7260.621 0.484 0.420 0.289 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.776 0.773 0.786 0.778
0.762 0.735 0.7150.680 0.663 0.615 0.520 Thiuram 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457
1.370 4.111 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.769 0.773 0.774 0.771
0.773 0.756 0.7370.703 0.652 0.624 0.354 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.750 0.759 0.763 0.759
0.736 0.701 0.6570.562 0.044 0.033 0.081 Potassium dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005
0.015 0.045 0.1360.407 1.222 3.667 11.000 33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.644 0.664 0.668 0.659
0.651 0.631 0.6360.634 0.630 0.602 0.501 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.0140.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.624 0.631 0.621 0.636
0.635 0.622 0.6210.641 0.672 0.738 0.418 【0017】 【表7】(7)Staphylococcus aureus IFO 3060の化学
物質感受性 Methylmercury chloride 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.10
2 0.305 0.914 2.7418.222 24.667 74.000 222.000 66
6.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.184 0.198 0.200 0.189
0.007 0.006 0.0060.007 0.008 0.007 0.005 Nickel chloride 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524
4.572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.
000 生育(Absorbance at 650nm) 0.237 0.232 0.226 0.227
0.224 0.220 0.2160.216 0.208 0.111 0.0072-Aminoan
thracene 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.572
13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.174 0.181 0.176 0.173
0.170 0.168 0.1670.155 0.124 0.121 0.033 Tributyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.003 0.010
0.030 0.091 0.2720.815 2.444 7.333 22.000 66.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.154 0.177 0.185 0.183
0.160 0.109 0.0850.045 0.020 0.010 0.029 Malathion 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305 0.914
2.741 8.222 24.66774.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.235 0.226 0.223 0.219
0.216 0.211 0.2150.222 0.231 0.226 0.063 Phenol 濃度 (μM) 0.000 0.847 2.540 7.620 22.861 6
8.584 205.753 617.2591851.778 5555.333 16666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.256 0.192 0.199 0.198
0.197 0.193 0.1930.190 0.180 0.159 0.043 Lindane 濃度 (μM) 0.000 0.339 1.016 3.048 9.144 2
7.432 82.296 246.889740.667 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.177 0.095 0.085 0.080
0.075 0.071 0.0800.074 0.106 0.055 -0.230 Pentachlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.3
05 0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.146 0.148 0.142 0.129
0.107 0.090 0.0730.041 0.007 0.002 0.004 Trp-P-2(Acetate) 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.189 0.200 0.199 0.187
0.176 0.143 0.0840.041 0.017 0.012 0.085 4-Nitroquinoline-N-oxide 濃度 (μM) 0.000 0.001 0.
003 0.008 0.023 0.0700.210 0.630 1.889 5.667 17.00
0 生育(Absorbance at 650nm) 0.182 0.185 0.185 0.183
0.181 0.177 0.1850.188 0.191 0.170 0.104 Benzo(a)pyrene 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.162 0.164 0.156 0.158
0.138 0.114 0.0940.076 0.068 0.062 0.094 Paraquat 濃度 (μM) 0.000 0.051 0.152 0.457 1.372
4.115 12.346 37.037111.111 333.333 1000.000生育(A
bsorbance at 650nm) 0.249 0.241 0.218 0.217 0.217
0.211 0.1960.177 0.174 0.175 0.161 Maneb 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457 1.3
70 4.111 12.333 37.000111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.232 0.230 0.225 0.226
0.223 0.215 0.2160.212 0.187 0.134 0.013 Cadmium chloride 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.15
2 0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.237 0.233 0.221 0.215
0.203 0.164 0.1590.123 0.090 0.076 0.029 Bis-phenol-A 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.
572 13.716 41.148123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.159 0.158 0.156 0.156
0.158 0.163 0.1620.109 0.003 0.003 0.085 Di-2-ethylhexyl phthalate 濃度 (μM) 0.000 0.042
0.127 0.381 1.143 3.42810.284 30.852 92.556 277.66
7 833.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.158 0.157 0.159 0.152
0.153 0.150 0.1510.153 0.143 0.080 0.0692,5-Dichl
orophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508 1.524 4.572
13.71641.148 123.444 370.333 1111.000 3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.156 0.162 0.158 0.157
0.156 0.152 0.0860.053 0.029 0.001 0.002 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid 濃度 (μM) 0.000
0.339 1.016 3.048 9.14427.432 82.296 246.889 740.6
67 2222.000 6666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.158 0.159 0.155 0.159
0.159 0.153 0.1460.116 0.066 0.005 0.011 Formaldehyde 濃度 (μM) 0.000 0.085 0.254 0.762 2.
285 6.856 20.56861.704 185.111 555.333 1666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.160 0.159 0.163 0.164
0.162 0.161 0.1590.161 0.160 0.156 0.147 p-Nonylphenol 濃度 (μM) 0.000 0.034 0.102 0.305
0.914 2.741 8.22224.667 74.000 222.000 666.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.158 0.165 0.164 0.167
0.143 0.156 0.0700.068 0.052 0.055 0.160 Sodium Arsenite 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152
0.457 1.370 4.11112.333 37.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.148 0.148 0.148 0.147
0.149 0.143 0.1410.131 0.094 0.094 0.070 Thiuram 濃度 (μM) 0.000 0.017 0.051 0.152 0.457
1.370 4.111 12.33337.000 111.000 333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.145 0.150 0.150 0.153
0.151 0.146 0.1340.092 0.029 0.006 0.004 2,4,5-Trichlorophenol 濃度 (μM) 0.000 0.169 0.508
1.524 4.572 13.71641.148 123.444 370.333 1111.000
3333.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.152 0.155 0.161 0.154
0.109 0.034 0.0060.005 0.005 0.006 0.000 Potassium dichlomate 濃度 (μM) 0.000 0.002 0.005
0.015 0.045 0.1360.407 1.222 3.667 11.000 33.000 生育(Absorbance at 650nm) 0.241 0.227 0.225 0.224
0.220 0.216 0.2190.222 0.218 0.207 0.188 Triphenyltin chloride 濃度 (μM) 0.000 0.000 0.001
0.002 0.005 0.0140.041 0.122 0.367 1.100 3.300 生育(Absorbance at 650nm) 0.256 0.274 0.260 0.257
0.255 0.254 0.2480.232 0.129 0.097 0.024 【0018】指標微生物としては、生育阻害を受けやす
い種類の異なったものを多数選ぶのが好ましい。このよ
うな微生物としては、各化学物質に対する必須指標微生
物を選定するのがよい。この必須指標微生物を選定する
には、先ず、各化学物質について、その大腸菌の生育を
阻害する最低濃度を測定し、この最低阻害濃度より低い
濃度で生育阻害を受ける微生物を複数選択する(1次ス
クリーニング)。次に、この1次スクリーニングで選択
した微生物を、異なる濃度の指標化学物質の存在下で生
育させ、その化学物質による生育阻害の特性を観察す
る。この結果から、1次スクリーニングで選択した微生
物の中で最もその化学物質に感受性を示す微生物を、必
須指標微生物として選ぶ。もちろん、指標微生物として
は、この必須指標微生物の他に、大腸菌よりも生育阻害
を受けやすい各種の微生物を指標微生物とすることがで
きる。 【0019】前記表1〜7に示した結果から理解される
ように、Methylmercury chloride,Nickel chloride,2-A
minoanthracene,,Malathion,Pheno1,Lindane等の指標化
学物質は、Methylmercury chlorideを除いて、明らかに
指標微生物に対する阻害が顕著である。ただし、Methyl
mercury chlorideとTributyltin chlorideについては指
標微生物以外にも複数の微生物で顕著な生育阻害が認め
られた。Methylmercury chlorideについては、全ての指
標微生物に対してほぼ同程度の阻害特性を示すが、この
ような化学物質は他の24種類では認められないことか
ら、Methylmercury chlorideの特徴を示しているものと
理解できる。Tributyltin chlorideについては、3種類
の微生物に限って阻害を示すことから、これもその生育
スペクトルがTributyltin chlorideの特徴を表している
ものと理解することができる。以上のことから、上記の
化学物質に対する指標微生物の生育特性又は生産スペク
トル(微生物/化学物質濃度データ)は、化学物質の特
徴を反映していることは明らかである。 【0020】Pentachlorophenol,Trp-P-2(Acetate),4-N
itroquinoline-N-oxide,Benzo(a)pyrene,Paraquat,Mane
b,Cadmium chlorideについては、これらの化合物に感受
性を示す微生物が存在するために、生育スペクトルが、
特徴的なものとなっている。例えば、Pentachloropheno
lに対して、Acetobacter pasteurianusIF03129は感受性
を示した。本微生物は本来、Nickel chlorideに対して
感受性を示す微生物として選定したが、Pentachlorophe
nolにも感受性があると理解できる。しかしながら、他
の微生物のPentachlorophenolとNickel chlorideに対す
る感受性が異なることから、その生育スペクトルは明ら
かに両化学物質が異なるものであることを示している。
同様に、Trp-P-2(Acetate),4-Nitroquinoline-N-oxide,
Benzo(a)pyrene,Paraquat,Maneb,Cadmiumchlorideにつ
いても、感受性を示す指標微生物が存在するが、当該微
生物以外のスペクトルが異なることから、区別すること
ができる。 【0021】Bis-phenol-A,Di-2-ethyl hexylphthalat
e,2,5-Dichlorophenol,2,4-Dichlorophenoxy acid,Form
aldehyde,p-Nonylphenol,Sodium Arsenite,Thiuram,2,
4,5-Trichlorophenol,Potassium dichlomate,Triphenyl
tin chlorideについては、顕著に感受性を示す微生物は
存在しなかった。これらの化合物の内、2,5-DichIoroph
eno1,2,4-Dichlorophenoxy acetic acid,2,4,5-Trichlo
rophenolを除くと、これらの化合物に対する微生物の感
受性が異なることから、化学物質の生育スペクトルは特
徴的な結果となっている。2,5-Dichlorophenol,2,4-Dic
hlorophenoxy acetic acid,2,4,5-Trichlorophenolにつ
いては生育スペクトルが類似していた。しかしながらこ
れらの化合物は類似化合物であることから、その毒性も
類似していることが推測され、生育スペクトルが類似す
るのは当然であると考えることができる。逆に、本発明
法が化学物質の毒性を表現するために有効であることを
示している例であると考えることができる。 【0022】本発明の方法は、試料化学物質の存在下で
複数の指標微生物を生育する工程を含む。この場合の生
育条件は、前記した指標微生物の存在下で指標化学物質
を生育させたときと同じ条件である。また、本発明の方
法は、前記生育工程における微生物濃度と試料化合物質
濃度との関係を測定する測定工程を含む。本発明の方法
は、前記測定工程で得られた微生物/化学物質濃度デー
タを、前記データバンクに収納されている指標微生物/
指標化学物質濃度データと照合する照合工程を含む。こ
の照合工程において、試料化学物質と同一又は近似する
指標微生物/指標化学物質濃度データが検出されたとき
には、その試料化合物質は、微生物学的に、その検出さ
れたデータにおける指標化学物質と同一又は近似するも
のと同定される。本発明に使用し得る試料化学物質は、
高純度化学物質である必要はなく、化学物質を含む環境
水や、化学物質で汚染された汚染水等であることができ
る。前記した各工程は、いずれも自動的に行うことがで
きる。測定工程で得られたデータのデータバンクに収納
されたデータとの照合は、コンピュータを用いて自動的
に行うことができる。 【0023】 【発明の効果】本発明によれば、試料化学物質を微生物
学的に同定することができる。即ち、その化学物質の種
類や構造及びその化学物質の微生物に対する毒性を微生
物学的手法により知ることができる。このような方法
は、従来全く知られておらず、本発明により初めて得ら
れたもので、その産業的意義は多大である。
Claims (1)
- (57)【特許請求の範囲】 【請求項1】 あらかじめ定めた複数種の指標微生物を
試料化学物質の存在下で該試料化学物質の濃度を変化さ
せて生育させる微生物生育工程と、該微生物生育工程に
おける試料化学物質濃度と指標微生物濃度との関係を測
定する測定工程と、該測定工程で得られた該指標微生物
濃度と該試料化学物質濃度との関係を、データバンクに
あらかじめ収納させている指標微生物濃度と指標化学物
質濃度との関係を示すデータと照合する照合工程とから
なることを特徴とする化学物質の微生物学的同定方法。
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JP2000052470A JP3446042B2 (ja) | 2000-02-28 | 2000-02-28 | 化学物質の微生物学的同定方法 |
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