JP3126180B2 - Tissue culture method of Saffron Mesbe - Google Patents
Tissue culture method of Saffron MesbeInfo
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Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は食用、薬用のサフランの
中の有効成分の１つである色素を効果的に培養する方法
である。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a method for effectively cultivating a pigment which is one of the active ingredients in edible and medicinal saffron.
【０００２】[0002]
【従来の方法】サフランはアヤメ科の多年生草本クロッ
カス・サティバス Ｌ．(Crocus Sativus L.) であり、
柱頭部を乾燥したものを生薬として用いる。スペイン、
フランス、イタリア、わが国では広島、香川、大分、岩
手の各県で生産されている。成分としては、カロチノイ
ド色素約２％を含み、その成分はクロシン（クロセチン
の配糖体）で、また苦味配糖体ピクロクロシン(Picrocr
ocin) 約２％、精油０．４〜１．３％を含む。精油の主
成分はサフラナール（生薬特有の芳香成分）である。2. Description of the Prior Art Saffron is a perennial herb of the family Iridaceae, Crocus sativa L. (Crocus Sativus L.)
The dried stigma is used as a crude drug. Spain,
In France, Italy and Japan, it is produced in Hiroshima, Kagawa, Oita and Iwate prefectures. It contains about 2% of carotenoid pigment, crocin (glycoside of crocetin), and bitter glycoside picrocrocin (Picrocr).
ocin) containing about 2% and 0.4-1.3% of essential oils. The main component of the essential oil is safranal (fragrance component peculiar to crude drugs).
【０００３】このサフランは香辛料、食品用着色料とし
て、或いは薬用として利用されているが、そのメシベの
乾燥物を利用するので天然物では、取れる量が少なく、
その単価も非常に高い。また天然品では、気候の変化を
受け、一定の品質のものが得られにくい。そこで組織培
養が各種試みられている。[0003] This saffron is used as a spice, a food coloring, or as a medicinal product. However, since it uses a dried mesibet, it cannot be obtained in a natural product.
The unit price is also very high. In addition, natural products are difficult to obtain products of a certain quality due to changes in the climate. Therefore, various attempts have been made for tissue culture.
【０００４】例えば、特開昭６２−２７５６１７号公報
には、クロッカス・サティバス Ｌ．すなわちサフラン
の雌ずい又はそれに相当する器官をサイトカイニン又は
サイトカイニン及びオーキシンを含有する人工培養基に
て生長、肥大成熟させる方法が開示されている。サイト
カイニンは古くより植物培養細胞の細胞分裂を誘起する
物質として知られており、又オーキシンと併用すること
で、カルスの誘導や細胞増殖が促進されることも知られ
ている。For example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 62-275617 discloses Crocus Satibas L. That is, a method is disclosed in which a saffron pistil or an organ corresponding thereto is grown and hypertrophically matured using cytokinin or an artificial culture medium containing cytokinin and auxin. Cytokinin has been known for a long time as a substance that induces cell division of cultured plant cells, and it is also known that callus induction and cell growth are promoted when used in combination with auxin.
【０００５】特開昭６３−１０９７８８号公報には、ク
ロッカス・サティバス Ｌ．の雌性器官を摘出してサイ
トカイニンを含有する人工培養基で培養し、サフラナー
ル、ピクロクロシン及びそれら類縁体、クロシン、クロ
セチン及びそれらの類縁体よりなる群より選ばれた１以
上の物質を生産するものである。しかし、サフランの雌
ずいに、これらの物質が含まれていることは古くより知
られていることである。[0005] JP-A-63-109788 discloses Crocus Sativas L.A. And culturing it in an artificial culture medium containing cytokinin to produce one or more substances selected from the group consisting of safranal, picrocrocin and their analogs, crocin, crocetin and their analogs . However, it has long been known that saffron pistils contain these substances.
【０００６】特開昭６３−１６０５８０号公報には、ク
ロッカス属植物のカルスを植物ホルモン添加のＭＳ培地
で培養する方法が開示されている。植物組織の培養にオ
ーキシンやサイトカイニン等の植物ホルモンを使用する
ことは古くよりよく知られており、ムラシゲ・スクーグ
培地も通常用いられている培地である。JP-A-63-160580 discloses a method of cultivating callus of a genus Crocus in an MS medium supplemented with plant hormones. The use of plant hormones such as auxin and cytokinin for culturing plant tissues has been well known for a long time, and Murashige-Skoog medium is also a commonly used medium.
【０００７】特開昭６３−２５８５７４号公報には、サ
フランの柱頭、花柱、子房、胚珠、花弁の部分を摘出
し、これを切り分けた組織をサイトカイニンとオーキシ
ンを添加したＬＳ培地又はＢ５培地に移植し、継代培養
することが開示されている。植物の部分を摘出、切り分
けて培養することは古くより行なわれ、サイトカイニン
やオーキシンの植物ホルモンも通常使用され、リンスマ
イヤー・スクーグの培地、ガンボルグ培地なども通常使
用される培地である。[0007] JP-A-63-258574 discloses that the stigma, style, ovary, ovule, and petals of saffron are excised and cut and placed in a LS medium or a B5 medium supplemented with cytokinin and auxin. It is disclosed to implant and subculture. Extraction, cutting and cultivation of plant parts have been performed for a long time, and plant hormones such as cytokinin and auxin are usually used, and Linsmeier Skoog's medium and Gamborg's medium are also commonly used media.
【０００８】これらの何れの方法を試験しても、それほ
どサフランの有効成分の増殖の速度が増すことはない
し、有効成分が飛躍的に増産されるわけではない。Tests of any of these methods do not significantly increase the rate of growth of the active ingredient of saffron and do not significantly increase the production of the active ingredient.
【０００９】[0009]
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、サフ
ランの有効成分の一つであるクロシン、クロセチンの色
素をより効率的に得る方法を提供することである。SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to provide a method for more efficiently obtaining pigments of crosine and crocetin, which are one of the active ingredients of saffron.
【００１０】[0010]
【課題を解決するための手段】本発明者は、前記課題を
解決するために鋭意研究を行った結果、メバロン酸ラク
トンを培地中に添加することにより解決し得ることを見
い出し本発明を完成した。すなわち本発明は、メバロン
酸ラクトンを含有する培地を用いて培養することを特徴
とするサフランメシベの組織培養方法である。Means for Solving the Problems The inventors of the present invention have conducted intensive studies to solve the above-mentioned problems, and as a result, have found that the problem can be solved by adding lactone mevalonate to a medium, and have completed the present invention. . That is, the present invention is a tissue culture method of saffron mesbe, which is characterized by culturing using a medium containing lactone mevalonate.
【００１１】メバロン酸は、火落酸とも称され、その誘
導体ラクトンは次式によって表わされる。[0011] Mevalonic acid is also called burnt acid, and its derivative lactone is represented by the following formula.
【化１】 メバロン酸ラクトンの配合量は、培地の種類や植物ホル
モン等の添加物等の種類によっても変化するが、培地に
対して０．１〜３０ppm 、好ましくは１〜２０ppm を添
加すると良好な結果が得られることが判明した。Embedded image The amount of mevalonate lactone varies depending on the type of medium and the type of additives such as plant hormones, but good results can be obtained by adding 0.1 to 30 ppm, preferably 1 to 20 ppm, to the medium. Turned out to be.
【００１２】これに用いる培地としては、特に限定され
ずムラシゲ・スクーグ(Murashige and Skoog) の培地、
ホワイト(White) の培地、ガンボルグ(Gamborg) らの培
地、ニッチュ(nitsch)の培地、ヘラー(Heller)の培地、
シェンク及びヒルデブラント(Schenk and Hildebrandt)
の培地、ニッチュ及びニッチュ(Nitsch and Nitsch)の
培地、ノップ(Knopp) の培地、リンスマイヤー及びスク
ーグ(Linsmaier and Skoog) の培地などの培地がある。The medium used for this purpose is not particularly limited, but is Murashige and Skoog's medium,
White medium, Gamborg et al. Medium, Nitsch medium, Heller medium,
Schenk and Hildebrandt
, Nitsch and Nitsch medium, Knop's medium, Linsmaier and Skoog's medium.
【００１３】これらの培地に、必要により、植物生長調
節物質として知られるサイトカイニン、オーキシンを添
加してもよい。サイトカイニンとしては、ベンジルアデ
ニン、ゼアチン、カイネチン等が例示でき、これらをそ
の種類によって異なるが、添加するときは０．０１〜２
０ppm添加する。オーキシンとしては、ナフタレン酢
酸、インドール酢酸、２，４‐ジクロロフェノキシ酢酸
等が例示でき、これらをその種類によって異なるが添加
するときは０．０１〜２０ppm 添加する。If necessary, cytokinins and auxins known as plant growth regulators may be added to these media. Examples of cytokinins include benzyladenine, zeatin, kinetin, and the like, which vary depending on the type.
Add 0 ppm. Examples of the auxin include naphthalene acetic acid, indole acetic acid, 2,4-dichlorophenoxy acetic acid, and the like. The auxin varies depending on the type, but when added, 0.01 to 20 ppm is added.
【００１４】また必要により、他の培地用薬剤も添加す
ることができる。また、温度は２０〜２５℃で暗所で培
養する。[0014] If necessary, other culture medium agents can be added. In addition, the cells are cultured in a dark place at a temperature of 20 to 25 ° C.
【００１５】[0015]
【実施例】以下に実施例によって、本発明を更に具体的
に説明するが、本発明は、この実施例に限定されるもの
ではない。 （実施例１〜３）（比較例１） 花芽が１０cm位に伸びたサフランの球根の外皮を剥き変
色した部分を除去した後、流水で３時間洗浄した。１０
％塩化ベンザルコニウムに３〜４秒、７０％エタノール
に１〜２秒、５％次亜塩素酸ナトリウムに２０〜４０分
浸漬した。そののちは無菌的に行った。花芽を球根の部
分を残して切り取り、滅菌水で３回洗浄した。次に花芽
から蕾を取り出して切開し、メシベを花柱を長くつけた
状態で取り出し培地に接種した。培地はMurashige and
Skoogの培地にサッカロース４％、寒天末０．９％、ｐ
Ｈ５．８に調整した。これにナフタレン酢酸１０ppm ベ
ンジルアデニン１ppm を加えた。これに表１のように本
発明の特徴とする添加物を加えた。これを２ヶ月目に植
え継ぎ４ヶ月培養した。EXAMPLES The present invention will be described more specifically with reference to the following examples, but the present invention is not limited to these examples. (Examples 1 to 3) (Comparative Example 1) After removing the discolored portion by removing the outer skin of a saffron bulb with flower buds extending to about 10 cm, it was washed with running water for 3 hours. 10
% Of benzalkonium chloride for 3 to 4 seconds, 70% of ethanol for 1 to 2 seconds, and 5% of sodium hypochlorite for 20 to 40 minutes. After that, it was performed aseptically. The flower buds were cut off leaving the bulbs, and washed three times with sterile water. Next, the buds were taken out from the flower buds, incised, and the mesibes were taken out in a state where the style was long and inoculated on the medium. The medium is Murashige and
Skoog medium 4% saccharose, 0.9% agar powder, p
Adjusted to H5.8. To this was added 10 ppm of naphthalene acetic acid and 1 ppm of benzyl adenine. As shown in Table 1, additives characteristic of the present invention were added thereto. This was subcultured in the second month and cultured for 4 months.
【００１６】[0016]
【表１】 [Table 1]
【００１７】培養したものを全量、４％ＮａＯＨの５０
％エタノール水溶液で充分攪拌混合し、ろ液を４２５nm
の波長で吸光度を測定し、比較例１を１００として、指
数で結果を表２に示した。The total amount of the cultivated cells was adjusted to 50% with 4% NaOH.
% Ethanol aqueous solution, and the filtrate is 425 nm.
The absorbance was measured at a wavelength of, and Comparative Example 1 was set to 100, and the results were shown in Table 2 by indices.
【００１８】[0018]
【表２】 [Table 2]
【００１９】（実施例４〜６）（比較例２） 前記の実施例１〜３の培地のナフタレン酢酸を５ ppmに
変更し、ベンジルアデニンを０．５ ppmに変更して、表
３に示す添加物を加えて、実施例１〜３と同様に培養し
た。(Examples 4 to 6) (Comparative Example 2) In the culture media of Examples 1 to 3, naphthalene acetic acid was changed to 5 ppm, and benzyl adenine was changed to 0.5 ppm. The culture was carried out in the same manner as in Examples 1 to 3, with the addition of additives.
【００２０】[0020]
【表３】 [Table 3]
【００２１】実施例１〜３と同様に、吸光度を測定し、
比較例２を１００として、その指数で結果を表４に示し
た。The absorbance was measured in the same manner as in Examples 1 to 3,
The results are shown in Table 4 by the index, with Comparative Example 2 being 100.
【表４】 [Table 4]
【００２２】[0022]
【発明の効果】サフランメシベの培養培地に、メバロン
酸ラクトンを添加することによって、実施例によって明
らかなように、得られる色素の量が３０〜５０％増加す
ることが確認された。According to the present invention, it was confirmed that the addition of lactone mevalonate to the culture medium of saffron radix increased the amount of pigment obtained by 30 to 50%, as is apparent from the examples.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 7/44 Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｐ 19/44 Ｃ１２Ｒ 1:91） (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 5/04 C12P 7/44 C12P 19/44 A23L 1/275 ＣＡ（ＳＴＮ)──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI (C12P 7/44 C12R 1:91) (C12P 19/44 C12R 1:91) (58) Investigated field (Int.Cl. 7 , DB name) C12N 5/04 C12P 7/44 C12P 19/44 A23L 1/275 CA (STN)
Claims (1)
いて培養することを特徴とするサフランメシベの組織培
養方法。1. A method for tissue culture of saffron mesbe, which comprises culturing using a medium containing lactone mevalonate.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03271877A JP3126180B2 (en) | 1991-09-25 | 1991-09-25 | Tissue culture method of Saffron Mesbe |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03271877A JP3126180B2 (en) | 1991-09-25 | 1991-09-25 | Tissue culture method of Saffron Mesbe |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0576353A JPH0576353A (en) | 1993-03-30 |
| JP3126180B2 true JP3126180B2 (en) | 2001-01-22 |
Family
ID=17506150
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03271877A Expired - Fee Related JP3126180B2 (en) | 1991-09-25 | 1991-09-25 | Tissue culture method of Saffron Mesbe |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3126180B2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6268935B1 (en) | 1994-04-15 | 2001-07-31 | Minolta Co., Ltd. | Image processor |
-
1991
- 1991-09-25 JP JP03271877A patent/JP3126180B2/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ＣＡ １０５：１２０４６５（Ａｂｓｔｒａｃｔ ｏｆ ＳａｅｎｇｙａｋＨａｋｈｏｅｃｈｉ１７（１）ｐ．７−１１（１９８６）） |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6268935B1 (en) | 1994-04-15 | 2001-07-31 | Minolta Co., Ltd. | Image processor |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0576353A (en) | 1993-03-30 |
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