JP2602526B2 - Biosensor for continuous measurement of enzyme activity - Google Patents
Biosensor for continuous measurement of enzyme activityInfo
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、酵素活性連続計測用バイオセンサ、特にイ
オン選択性電極、酵素電極等の感応電極を内蔵した酵素
活性連続計測用バイオセンサに関する。Description: TECHNICAL FIELD The present invention relates to a biosensor for continuous measurement of enzyme activity, and particularly to a biosensor for continuous measurement of enzyme activity incorporating a sensitive electrode such as an ion-selective electrode or an enzyme electrode.
現在、多くの領域で酵素が利用されているが、その場
合には酵素の活性を知ることが重要である。At present, enzymes are used in many areas, and in that case, it is important to know the activity of the enzymes.
また、医療分野では、人間等の体液中に存在する酵素
について、その活性を計測し、該酵素の増減を調べるこ
とにより病態を診断する方法が広く用いられている。従
って、この場合も、酵素の活性を精確に、しかも迅速に
知ることが重要である。In the medical field, a method of diagnosing a disease state by measuring the activity of an enzyme present in a body fluid of a human or the like and examining the increase or decrease of the enzyme is widely used. Therefore, also in this case, it is important to know the activity of the enzyme accurately and quickly.
上記のような酵素の活性を知る方法としては、例え
ば、酵素電極等を用いて酵素の活性を計測する方法が知
られている。As a method of knowing the activity of the enzyme as described above, for example, a method of measuring the activity of the enzyme using an enzyme electrode or the like is known.
しかしながら、上記の酵素電極等を用いる方式では、
試料液を調製するための前処理に長時間を要し、また、
計測のための操作が煩雑である等の問題があった。However, in the method using the enzyme electrode or the like,
Pretreatment for preparing the sample solution takes a long time,
There is a problem that the operation for measurement is complicated.
従って、本発明の目的は、酵素の活性を、迅速且つ簡
便に計測でき、しかも連続して計測できる酵素活性連続
計測用バイオセンサを提供することにある。Therefore, an object of the present invention is to provide a biosensor for continuous measurement of enzyme activity, which can measure enzyme activity quickly and easily and can measure continuously.
本発明は、基質導入部及び該基質導入部に多孔質膜を
介して連接され且つ感応電極が挿入されている試料導入
部を備え、上記基質導入部にはバッファに溶解されてい
る基質を連続導入する基質導入手段が接続され、且つ上
記試料導入部には被検酵素含有試料をキャリアと共に導
入する試料導入手段が接続されていることを特徴とする
酵素活性連続計測用バイオセンサを提供するものであ
る。The present invention includes a substrate introduction part and a sample introduction part connected to the substrate introduction part via a porous membrane and having a sensitive electrode inserted therein, wherein the substrate introduction part is provided with a substrate dissolved in a buffer continuously. A biosensor for continuous measurement of enzyme activity, characterized in that a substrate introduction means for introduction is connected, and a sample introduction means for introducing a sample containing a test enzyme together with a carrier is connected to the sample introduction section. It is.
上記構成からなる酵素活性連続計測用バイオセンサに
よれば、上記多孔質膜を通して、一定量の基質が試料導
入部に供給・拡散された状態を定常的に形成することが
できるため、該試料導入部に被検酵素を含有する試料を
導入することにより、上記試料導入部において該被検酵
素が関与する上記基質の反応を起こさせることができ、
しかもその際の反応の進行状況を反応系の変化から上記
感応電極で検出できるので、該検出結果から上記試料中
の被検酵素の活性を計測することが可能となる。従っ
て、キャリアの上流位置に試料を注入するだけで、該試
料に含有されている被検酵素の活性を、迅速且つ簡便
に、しかも連続して計測することが可能となる。そし
て、適切な種類の基質及び感応電極等を選択使用するこ
とにより、任意の酵素についてその活性を計測すること
が可能となる。According to the biosensor for continuous measurement of enzyme activity having the above configuration, a state in which a certain amount of substrate is supplied and diffused to the sample introduction portion can be constantly formed through the porous membrane. By introducing a sample containing a test enzyme into the part, the reaction of the substrate involving the test enzyme can be caused in the sample introduction part,
In addition, since the progress of the reaction at that time can be detected from the change in the reaction system by the sensitive electrode, the activity of the test enzyme in the sample can be measured from the detection result. Therefore, simply by injecting the sample into the upstream position of the carrier, the activity of the test enzyme contained in the sample can be measured quickly, simply, and continuously. By selecting and using appropriate types of substrates, sensitive electrodes, and the like, the activity of any enzyme can be measured.
以下、本発明の好ましい実施例を図面に基づいて説明
する。Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings.
第１図は本発明の一実施例である酵素活性連続計測用
バイオセンサを示す概略説明図、第２図は上記酵素活性
連続計測用バイオセンサの要部を拡大して示す概略断面
図である。FIG. 1 is a schematic explanatory view showing a biosensor for continuous measurement of enzyme activity according to one embodiment of the present invention, and FIG. 2 is a schematic cross-sectional view showing an enlarged main part of the biosensor for continuous measurement of enzyme activity. .
本実施例の酵素活性連続計測用バイオセンサは、第２
図に示すように、その本体の外殻が筒状容器１で構成さ
れており、該筒状容器１の下端部には基質導入部２が形
成され、該基質導入部２の上部には感応電極３が挿入さ
れている試料導入部４が連接され、しかも上記基質導入
部２と試料導入部４との間には多孔質膜５が介在され、
該多孔質膜５により上記両導入部２及び４が仕切られて
いる。そして、上記筒状容器１と上記感応電極３との間
は該感応電極３に周回されているＯ−リング６でシール
されている。そして、本実施例では、上記感応電極３
が、イオン選択性電極の一つである酸素電極である。The biosensor for continuous measurement of enzyme activity of
As shown in the figure, the outer shell of the main body is constituted by a cylindrical container 1, a substrate introduction part 2 is formed at a lower end of the cylindrical container 1, and a sensitive part is provided on an upper part of the substrate introduction part 2. The sample introduction part 4 in which the electrode 3 is inserted is connected, and a porous membrane 5 is interposed between the substrate introduction part 2 and the sample introduction part 4,
The introduction sections 2 and 4 are separated by the porous membrane 5. The space between the cylindrical container 1 and the sensitive electrode 3 is sealed by an O-ring 6 circling around the sensitive electrode 3. In this embodiment, the sensitive electrode 3
Is an oxygen electrode which is one of the ion selective electrodes.
また、上記基質導入部２には、導入口2a及び排出口2b
が互いに対向する位置に設けられており、該導入口2aに
はバッファに溶解されている基質を連続導入する基質導
入手段が接続されている。そして、上記試料導入部４に
も、導入口4a及び排出口4bが互いに対向する位置に設け
られており、該導入口2aには被検酵素含有試料をキャリ
アと共に導入する試料導入手段が接続されている。In addition, the substrate inlet 2 has an inlet 2a and an outlet 2b.
Are provided at positions facing each other, and a substrate introduction means for continuously introducing the substrate dissolved in the buffer is connected to the introduction port 2a. The sample inlet 4 is also provided with an inlet 4a and an outlet 4b at positions facing each other, and the inlet 2a is connected to a sample introducing means for introducing a sample containing a test enzyme together with a carrier. ing.
本実施例では、第１図に示すように上記基質導入手段
が、恒温水槽７に浸漬されているバッファ（緩衝液）貯
留部８と、該バッファ貯留部８から上記基質導入部２へ
バッファを供給するための管９と、該管９に連結されて
いるポンプ10とから構成されている。また、上記試料導
入手段、恒温水槽7aに浸漬されているキャリア貯留部8a
と、該キャリア貯留部8aから上記試料導入部４へキャリ
アを供給するための管9aと、該管9aに連結されているポ
ンプ10aとから構成されている。更に、上記管9aには、
試料を測定系に供給するための試料注入部11が設けられ
ている。尚、実施例では、排出口4bに接続されている管
にポンプ10bが設けられている。In this embodiment, as shown in FIG. 1, the substrate introduction means includes a buffer (buffer solution) storage section 8 immersed in a constant temperature water tank 7 and a buffer from the buffer storage section 8 to the substrate introduction section 2. It comprises a pipe 9 for feeding and a pump 10 connected to the pipe 9. Further, the sample introduction means, the carrier storage section 8a immersed in the constant temperature water tank 7a
And a pipe 9a for supplying a carrier from the carrier storage section 8a to the sample introduction section 4, and a pump 10a connected to the pipe 9a. Furthermore, in the above-mentioned tube 9a,
A sample injection unit 11 for supplying a sample to the measurement system is provided. In the embodiment, a pump 10b is provided in a pipe connected to the outlet 4b.
また、上記バッファ貯留部８及びキャリア貯留部8aに
は、それぞれ貯留されているバッファ及びキャリアを酸
素で飽和するために、図示するように空気が吹き込まれ
ている。Further, air is blown into the buffer storage section 8 and the carrier storage section 8a as shown in the drawing to saturate the stored buffer and carrier with oxygen.
次に、本実施例の作用を説明する。 Next, the operation of the present embodiment will be described.
先ず、バッファ貯留部８に貯留されているバッファ
（基質が所定濃度で溶解されている）をポンプ10で、常
時、一定の流速で上記基質導入部２に導入しておくと同
時に、キャリア貯留部8aに貯留されているキャリア用の
バッファをもポンプ10aで、常時、一定の流速で上記試
料導入部４に導入しておくことにより常時状態を形成す
る。尚、上記の基質溶解用及びキャリア用の何れのバッ
ファも、被検酵素の種類と使用する基質との組合せに応
じた適切なものが用いられる。First, the buffer (the substrate is dissolved at a predetermined concentration) stored in the buffer storage unit 8 is always introduced into the substrate introduction unit 2 at a constant flow rate by the pump 10 at the same time as the carrier storage unit. The buffer for the carrier stored in 8a is always introduced into the sample introduction unit 4 at a constant flow rate by the pump 10a by the pump 10a, so that a constant state is formed. As the buffer for dissolving the substrate and the buffer for the carrier, an appropriate buffer is used according to the combination of the type of the test enzyme and the substrate to be used.
その後、キャリアの上流に位置する管9aに設けられて
いる試料注入部11から被検酵素を含有する試料（被検酵
素含有試料）をキャリア中に注入し、該試料をキャリア
と共に上記試料導入部４に導入する。Thereafter, a sample containing a test enzyme (sample containing a test enzyme) is injected into the carrier from a sample injection section 11 provided in a tube 9a located upstream of the carrier, and the sample is introduced together with the carrier into the sample introduction section. Introduce to 4.
上記定常状態においては、上記多孔質膜５を通して、
一定量の基質が試料導入部４に透過・拡散された状態が
定常的に形成されている。換言すれば、上記試料導入部
４を流れるバッファ（キャリア）には常に一定の濃度の
基質が溶存している状態が形成されている。In the above-mentioned steady state, through the above-mentioned porous membrane 5,
A state where a certain amount of the substrate is transmitted and diffused into the sample introduction unit 4 is constantly formed. In other words, a state in which a constant concentration of the substrate is always dissolved in the buffer (carrier) flowing through the sample introduction unit 4 is formed.
従って、上記の如く、上記注入部11から試料を注入
し、該試料を上記試料導入部４に導入することにより、
該試料導入部４において試料に含有されている被検酵素
が関与する上記基質と溶存酸素との反応を起こさせるこ
とができ、しかもその際の反応の進行状況を上記酸素電
極でバッファ中に溶存している酸素量、即ち酸素減少量
を容易に検出でき、その検出結果から上記試料中の被検
酵素の活性を計測することが可能となる。Therefore, as described above, by injecting a sample from the injection unit 11 and introducing the sample into the sample introduction unit 4,
In the sample introducing section 4, a reaction between the substrate involved in the test enzyme contained in the sample and dissolved oxygen can be caused, and the progress of the reaction at that time can be dissolved in the buffer by the oxygen electrode. The amount of oxygen, that is, the amount of decrease in oxygen can be easily detected, and the activity of the test enzyme in the sample can be measured from the detection result.
上述した如く、本実施例の酵素活性連続計測用バイオ
センサを用いることにより、キャリアの上流位置に試料
を注入するだけで、該試料に含有されている被検酵素の
活性を、迅速且つ簡便に、しかも連続して計測すること
が可能となる。As described above, by using the biosensor for continuous measurement of enzyme activity of the present example, the activity of the test enzyme contained in the sample can be quickly and simply determined by injecting the sample upstream of the carrier. In addition, continuous measurement can be performed.
本発明の酵素活性連続計測用バイオセンサについて更
に詳述すると、基質導入部２と試料導入部４との間の多
孔質膜としては、該試料導入部４に基質を透過し且つ拡
散する機能を備えたものであれば、その材料、厚さ及び
孔径等には特に制限はなく、種々変更使用することがで
きることはいうまでもないが、例えば、メンブランフィ
ルター、透析膜等を利用でき、材料としてはポリカーボ
ネイト、ポリエステル等の親水性ポリマーのほうがフッ
素樹脂等の疎水性ポリマーより好ましい。但し、これに
限るものではない。The biosensor for continuous measurement of enzyme activity of the present invention will be described in more detail. The porous membrane between the substrate introduction part 2 and the sample introduction part 4 has a function of transmitting and diffusing a substrate to the sample introduction part 4. As long as it is provided, its material, thickness, pore diameter, etc. are not particularly limited, and it goes without saying that various changes can be used.For example, a membrane filter, a dialysis membrane, or the like can be used. Is more preferably a hydrophilic polymer such as polycarbonate or polyester than a hydrophobic polymer such as fluororesin. However, it is not limited to this.
また、基質が溶解されているバッファは、常に一定の
濃度の基質が含まれいることが重要であるが、試料導入
部４に透過・拡散して消費される基質の量に比べバッフ
ァに溶解されている基質の濃度が十分に高い場合には、
該バッファを一回の使用の後に廃棄するのではなく、循
環させて繰り返して使用することも可能である。また、
上記キャリア用のバッファとしては、通常、上記基質を
溶解するために使用するバッファと同一であるが、異な
っていてもよい。It is important that the buffer in which the substrate is dissolved contains a constant concentration of the substrate at all times. However, the buffer is dissolved in the buffer compared to the amount of the substrate that is transmitted and diffused into the sample introduction unit 4 and consumed. If the substrate concentration is high enough,
Instead of discarding the buffer after one use, it is possible to circulate and use the buffer repeatedly. Also,
The buffer for the carrier is usually the same as the buffer used for dissolving the substrate, but may be different.
更に、酵素活性連続計測用バイオセンサに適用される
基質導入手段及び試料導入手段は、それぞれ第１図に示
した前記構成に限るものでなく、実質的に同様の機能を
有するのであれば種々変更可能であることはいうまでも
ない。Further, the substrate introducing means and the sample introducing means applied to the biosensor for continuous measurement of enzyme activity are not limited to the above-mentioned constitutions shown in FIG. 1, but may be variously modified as long as they have substantially the same functions. It goes without saying that it is possible.
以上、本発明を実施例に基づいて詳細に説明してきた
が、本発明の酵素活性連続計測用バイオセンサは前記実
施例に示したものに限るものでないことはいうまでもな
い。As described above, the present invention has been described in detail based on the examples. However, it goes without saying that the biosensor for continuous measurement of enzyme activity of the present invention is not limited to those shown in the above examples.
例えば、感応電極としては、酸素電極に限らず他のイ
オン選択性電極であっても、又は酵素電極等であっても
よい。For example, the sensitive electrode is not limited to the oxygen electrode, but may be another ion-selective electrode, an enzyme electrode, or the like.
感応電極として酵素電極を用いる酵素活性連続計測用
バイオセンサの好ましい実施例を、第３図に基づいて説
明する。A preferred embodiment of a biosensor for continuous measurement of enzyme activity using an enzyme electrode as a sensitive electrode will be described with reference to FIG.
上記第３図に要部を拡大して示す実施例の酵素活性連
続計測用バイオセンサは、後に説明する実施例２に適用
して有効なものであり、感応電極（酵素電極）３は、前
記実施例と同様の酸素電極の先端に固定化酵素12を配
し、該固定化酵素12を、Ｏ−リング６で押さえ付けられ
ている分子透過性の膜13で覆い且つ固定してなるもので
ある。The biosensor for continuous measurement of enzyme activity according to the embodiment shown in FIG. 3 in which main parts are enlarged is effective when applied to the embodiment 2 described later, and the sensitive electrode (enzyme electrode) 3 An immobilized enzyme 12 is arranged at the tip of an oxygen electrode similar to that of the embodiment, and the immobilized enzyme 12 is covered and fixed by a molecule-permeable membrane 13 pressed by an O-ring 6. is there.
上記固定化酵素12を構成する酵素の種類及びその固定
化法等には特に制限はない。また、上記の分子透過性の
膜13にも特に制限はなく、例えば、メンブランフィルタ
ー、透析膜又は限外濾過膜等の測定対象分子が透過する
性質を有している膜を挙げることができる。There are no particular restrictions on the type of enzyme that constitutes the immobilized enzyme 12, its immobilization method, and the like. The above-mentioned molecule-permeable membrane 13 is not particularly limited, and examples thereof include a membrane having a property of transmitting a molecule to be measured, such as a membrane filter, a dialysis membrane, or an ultrafiltration membrane.
次に、本発明の酵素活性連続計測用バイオセンサにつ
いて、該センサーを用いて酵素の活性の計測を行う実施
例を挙げて具体的に説明する。Next, the biosensor for continuous measurement of enzyme activity of the present invention will be specifically described with reference to an example in which the enzyme activity is measured using the sensor.
（実験例１） 酵素活性連続計測用バイオセンサとしては、要部を第
２図に示したものを用い、下記の条件の下でグルコース
オキシダーゼ（酵素）の活性の計測を行った。(Experimental example 1) As a biosensor for continuous measurement of enzyme activity, a biosensor whose main part is shown in Fig. 2 was used to measure the activity of glucose oxidase (enzyme) under the following conditions.
尚、上記センサの試料導入部４においては、次の
（１）式に示すようにグルコースの酸化反応が起こり、
その際にバッファ中の溶存酸素が消費され、減少する変
化が起こっている。この溶存酸素の減少量が酸素電極に
より測定されるものである。In addition, in the sample introduction part 4 of the sensor, an oxidation reaction of glucose occurs as shown in the following equation (1).
At that time, the dissolved oxygen in the buffer is consumed and a decreasing change occurs. The amount of reduction of the dissolved oxygen is measured by the oxygen electrode.
グルコース＋酸素→グルコノラクトン＋過酸化水素
（１） 計測条件 キャリア用バッファ リン酸緩衝液（0.05M） pH7.8 温度 35℃ 流速 入口:0.73ml/min. 出口:0.87ml/min. 基質溶解用バッファ リン酸緩衝液（0.05M） pH7.8 温度 35℃ 流速 0.27ml/min. 基質（グルコース）濃度 1.0M 多孔質膜 ポリカーボネート・ポリエステル製膜 孔径:2.0μｍ 上記条件の下で、試料注入部11からグルコースオキシ
ダーゼの含有量の異なる試料を注入し、その際の試料に
含有されているグルコースオキシダーゼの単位量を横軸
に、レコーダ（図示せず）に記録された電流減少値（ピ
ーク高）を縦軸に採って両者の関係を表したのが第４図
に示したグラフである。尚、一回の計測に要した時間は
約10分であった。Glucose + oxygen → gluconolactone + hydrogen peroxide (1) Measurement conditions Carrier buffer Phosphate buffer (0.05M) pH7.8 Temperature 35 ° C Flow rate Inlet: 0.73ml / min. Outlet: 0.87ml / min. Buffer phosphate buffer (0.05M) pH7.8 Temperature 35 ° C Flow rate 0.27ml / min. Substrate (glucose) concentration 1.0M Porous membrane Polycarbonate / polyester membrane Pore size: 2.0μm Under the above conditions, sample injection part Samples having different glucose oxidase contents were injected from step 11 and the current decrease value (peak height) recorded on a recorder (not shown) was plotted on the horizontal axis with the unit amount of glucose oxidase contained in the sample at that time. Is plotted on the vertical axis, and the relationship between the two is represented in the graph shown in FIG. The time required for one measurement was about 10 minutes.
第４図から明らかなように、上記電流減少値とグルコ
ースオキシダーゼの含有量との間には明確な相関性が認
められ、それ故に上記酵素活性連続計測用バイオセンサ
を用いることにより、グルコースオキシダーゼの活性を
迅速且つ簡便に計測することができることが分かった。As is apparent from FIG. 4, a clear correlation was observed between the current decrease value and the content of glucose oxidase. Therefore, by using the biosensor for continuous measurement of enzyme activity, glucose oxidase It was found that the activity could be measured quickly and easily.
（実験例２） 酵素活性連続計測用バイオセンサとしては、要部を第
３図に示したものを用い、下記の条件を下でLDH（Lacta
te dehydrogenaze:酵素）の活性の計測を行った。(Experimental Example 2) As a biosensor for continuous measurement of enzyme activity, a biosensor whose main part is shown in Fig. 3 was used, and LDH (Lacta) was used under the following conditions.
The activity of te dehydrogenaze (enzyme) was measured.
尚、上記センサの試料導入部４においては、次の
（２）式に示すように乳酸の脱水素反応によりピルビン
酸が生成する反応が起こり、このピルビン酸を酵素電極
で測定することにより、上記LDHの活性を計測するもの
である。ここで使用される酵素電極としては、ピルビン
酸酸化酵素（pyruvate oxidase）が固定された固定化酵
素12が酸素電極の先端に配されているものであり、該酵
素電極の内部に位置するバッファ中では、次の（３）式
に示す反応が起こり、溶存酸素が消費され、減少する変
化が起こっている。この溶存酸素の減少量が前記実験例
１の場合と同様に酸素電極により測定されるものであ
る。In the sample introduction section 4 of the sensor, a reaction in which pyruvic acid is generated by the dehydrogenation of lactic acid occurs as shown in the following equation (2). It measures the activity of LDH. As the enzyme electrode used here, an immobilized enzyme 12 on which pyruvate oxidase (pyruvate oxidase) is immobilized is disposed at the tip of the oxygen electrode. Then, the reaction shown in the following equation (3) occurs, and dissolved oxygen is consumed, and a decrease occurs. The amount of reduction of the dissolved oxygen is measured by the oxygen electrode as in the case of the first experimental example.
乳酸＋NAD→ピルビン酸＋NADH （２） ここで、NADはnicotinamide−adenine dinucleotide
であり、NADHはその還元型である。Lactic acid + NAD → pyruvate + NADH (2) where NAD is nicotinamide-adenine dinucleotide
And NADH is its reduced form.
ピルビン酸＋酵素→アセチルリン酸＋酢酸＋CO2＋H2O2
（３） 計測条件 キャリア用バッファ リン酸緩衝液（0.05M） pH7.0 温度 35℃ 流速 入口:0.73ml/min. 出口:0.87ml/min. 基質溶解用バッファ リン酸緩衝液（0.05M） pH7.0 温度 35℃ 流速 0.27ml/min. 基質（乳酸）濃度 1.0M 多孔質膜 ポリカーボネート・ポリエステル製膜 孔径:2.0μｍ 固定化酵素の量： 40unit 分子透過性の膜：メンブランフィルター（孔径２μｍ） 上記条件の下で、前記実施例の場合と同様に、試料注
入部11からLDHの含有量の異なる試料を注入し、その際
の試料に含有されているLDHの単位量を横軸に、レコー
ダ（図示せず）に記録された電流減少値（ピーク高）を
縦軸に採って両者の関係を表したのが第５図に示したグ
ラフである。Pyruvate + enzyme → acetyl phosphate + acetic acid + CO 2 + H 2 O 2
(3) Measurement conditions Carrier buffer Phosphate buffer (0.05M) pH7.0 Temperature 35 ° C Flow rate Inlet: 0.73ml / min. Outlet: 0.87ml / min. Substrate lysis buffer Phosphate buffer (0.05M) pH7 .0 Temperature 35 ° C Flow rate 0.27ml / min. Substrate (lactic acid) concentration 1.0M Porous membrane Polycarbonate / polyester membrane Pore size: 2.0μm Amount of immobilized enzyme: 40unit Molecular permeable membrane: membrane filter (pore size 2μm) Under the same conditions as in the previous embodiment, samples having different LDH contents were injected from the sample injection section 11, and the unit amount of LDH contained in the sample at that time was plotted on the horizontal axis, and the recorder ( FIG. 5 is a graph showing the relationship between the current decrease values (peak heights) recorded in (not shown) on the vertical axis.
第５図から明らかなように、上記電流減少値とLDHの
含有量との間にも明確な相関性が認められ、それ故に上
記酵素活性連続計測用バイオセンサを用いることによ
り、グルコースオキシダーゼの活性を迅速且つ簡便に計
測することができることが分かった。As is evident from FIG. 5, a clear correlation was observed between the current decrease value and the LDH content. Therefore, by using the biosensor for continuous measurement of enzyme activity, the activity of glucose oxidase was confirmed. It has been found that can be measured quickly and easily.
本発明の酵素活性連続計測用バイオセンサは、酵素の
活性を、迅速且つ簡便に計測でき、しかも連続して計測
できる。INDUSTRIAL APPLICABILITY The biosensor for continuous measurement of enzyme activity of the present invention can quickly and simply measure the activity of an enzyme, and can continuously measure the activity.
第１図は本発明の一実施例である酵素活性連続計測用バ
イオセンサを示す概略説明図、第２図は上記酵素活性連
続計測用バイオセンサの要部を拡大して示す概略断面
図、第３図は他の実施例の要部を拡大して示す概略断面
図、第４図及び第５図はそれぞれ酵素活性連続計測用バ
イオセンサを用いて行った実験結果をしめすグラフであ
る。 １……筒状容器、２……基質導入部 ３……感応電極、４……試料導入部 ５……多孔質膜FIG. 1 is a schematic explanatory view showing a biosensor for continuous measurement of enzyme activity according to an embodiment of the present invention. FIG. 2 is a schematic cross-sectional view showing an enlarged main part of the biosensor for continuous measurement of enzyme activity. FIG. 3 is a schematic cross-sectional view showing an enlarged main part of another embodiment, and FIGS. 4 and 5 are graphs showing the results of experiments performed using a biosensor for continuous measurement of enzyme activity. DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Cylindrical container, 2 ... Substrate introduction part 3 ... Sensitive electrode 4, ... Sample introduction part 5 ... Porous membrane
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭57−86752（ＪＰ，Ａ) 特開 昭58−183089（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−71944（ＪＰ，Ａ) 特開 昭56−92455（ＪＰ，Ａ) ──────────────────────────────────────────────────続 き Continuation of the front page (56) References JP-A-57-86752 (JP, A) JP-A-58-183089 (JP, A) JP-A-60-71944 (JP, A) 92455 (JP, A)
Claims (2)
介して連接され且つ感応電極が挿入されている試料導入
部を備え、上記基質導入部にはバッファに溶解されてい
る基質を連続導入する基質導入手段が接続され、且つ上
記試料導入部には被検酵素含有試料をキャリアと共に導
入する試料導入手段が接続されていることを特徴とする
酵素活性連続計測用バイオセンサ。1. A substrate introduction part and a sample introduction part connected to the substrate introduction part via a porous membrane and having a sensitive electrode inserted therein, wherein the substrate introduction part contains a substrate dissolved in a buffer. A biosensor for continuous measurement of enzyme activity, wherein a substrate introduction means for continuous introduction is connected, and a sample introduction means for introducing a sample containing a test enzyme together with a carrier is connected to the sample introduction section.
素電極である請求項（１）記載の酵素活性連続計測用バ
イオセンサ。2. The biosensor for continuous measurement of enzyme activity according to claim 1, wherein the sensitive electrode is an ion-selective electrode or an enzyme electrode.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63072767A JP2602526B2 (en) | 1988-03-26 | 1988-03-26 | Biosensor for continuous measurement of enzyme activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| JP63072767A JP2602526B2 (en) | 1988-03-26 | 1988-03-26 | Biosensor for continuous measurement of enzyme activity |
Publications (2)
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|---|---|
| JPH01245146A JPH01245146A (en) | 1989-09-29 |
| JP2602526B2 true JP2602526B2 (en) | 1997-04-23 |
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Family Applications (1)
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Families Citing this family (1)
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|---|---|---|---|---|
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-
1988
- 1988-03-26 JP JP63072767A patent/JP2602526B2/en not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH01245146A (en) | 1989-09-29 |
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