JP2023535730A - Ｃｏｖｉｄ－１９の３成分ワクチン - Google Patents

Ｃｏｖｉｄ－１９の３成分ワクチン Download PDF

Info

Publication number
JP2023535730A
JP2023535730A JP2023504555A JP2023504555A JP2023535730A JP 2023535730 A JP2023535730 A JP 2023535730A JP 2023504555 A JP2023504555 A JP 2023504555A JP 2023504555 A JP2023504555 A JP 2023504555A JP 2023535730 A JP2023535730 A JP 2023535730A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
substituted
unsubstituted
rbd
cell
nhc
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2023504555A
Other languages
English (en)
Other versions
JPWO2022020810A5 (ja
Inventor
レビー，ロナルド
ハーベス，オレ・アウドゥン・ワーナー
サレッツ，アドリエンヌ
ブレイク，ティモシー・アール
ウェンダー，ポール
ウェイマス，ロバート・エム
チェルウィンスキ，デブラ
サギフ－バルフィ，イディット
ローマイア，ジュリアン・ヨハンネス
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Leland Stanford Junior University
Original Assignee
Leland Stanford Junior University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Leland Stanford Junior University filed Critical Leland Stanford Junior University
Publication of JP2023535730A publication Critical patent/JP2023535730A/ja
Publication of JPWO2022020810A5 publication Critical patent/JPWO2022020810A5/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/215—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/593—Polyesters, e.g. PLGA or polylactide-co-glycolide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/88—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation using microencapsulation, e.g. using amphiphile liposome vesicle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/17—Immunomodulatory nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本明細書では、とりわけ、ＣＯＶＩＤ－１９のワクチンのための複合体、組成物及び方法が提供される。本明細書で提供される細胞透過性複合体は、ｐＨ感受性崩壊ドメインを含むカチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合された核酸を含み得る。本明細書で提供される細胞透過性複合体は、とりわけ、ワクチンに有用であり、ワクチンは、その実施形態を含めて本明細書で提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む。

Description

本出願は、その全体があらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる、２０２０年７月２４日に出願した米国仮出願第６３／０５６，４６５号の優先権を主張するものである。
ＡＳＣＩＩテキストファイルとして提出された配列表、表又はコンピュータプログラム一覧付属物に対する参照
２０２１年７月２２年に８，１９２バイトでマシンフォーマットＩＢＭ－ＰＣ、ＭＳ Ｗｉｎｄｏｗｓオペレーティングシステムにより作成した０４１２４３－５６１００１ＷＯ＿ＳＬ＿ＳＴ２５．ｔｘｔファイルに書き込まれた配列表が参照により本明細書に組み込まれる。
現行では、ＳＡＲ－ＣｏＶ－２ウイルスによって引き起こされる疾患に対して利用可能な有効な処置又はワクチンは存在しない。
新規のコロナウイルスであるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされるＣＯＶＩＤ－１９を予防する安全且つ有効なワクチンを開発する必要がある。本明細書では、これら及び当該技術分野における他の問題に対する解決策を提供する。
（発明の要旨）
一態様では、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体が提供される。
一態様では、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体を含むワクチン組成物が提供される。
一態様では、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体の治療有効量、及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
一態様では、ウイルス性疾患の処置又は防止を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置又は防止する方法であって、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体の治療又は予防有効量を対象に投与することを含む方法が提供される。
一態様では、ウイルス性疾患の処置を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置する方法であって、実施形態を含む本明細書に記載される細胞透過性複合体の治療有効量及び薬学的担体を対象に投与し、それによって対象におけるウイルス性疾患を処置することを含む方法が提供される。
一態様では、ウイルス性疾患に罹患し得る宿主を免疫化するための方法であって、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体を、ウイルスタンパク質又はその機能的断片に対する抗体が生成されるような条件下で宿主に投与することを含む方法が提供される。
ＥＬＩＳＡアッセイの検出ステップの概略図の例を示す(図１Ａ)。抗ＩｇＧ又はＩｇＭ抗体を検出するためのＥＬＩＳＡアッセイのプロトコールの例を示す(図１Ｂ)。 ＥＬＩＳＡアッセイの検出ステップの概略図の例を示す(図１Ａ)。抗ＩｇＧ又はＩｇＭ抗体を検出するためのＥＬＩＳＡアッセイのプロトコールの例を示す(図１Ｂ)。 ＥＬＩＳＡデータＤ＋４のグラフである。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスにおけるＲＢＤ特異的抗体反応の早期検出を示す。ワクチンの投与後４日に採取したマウスからの試料を示す。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスについて（図２Ａ）、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｂ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂをワクチン接種したマウスについて(図２Ｃ)、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｄ）、全ての群のマウスからの結果は、比較のためにオーバーレイされる（図２Ｅ）。 ＥＬＩＳＡデータＤ＋４のグラフである。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスにおけるＲＢＤ特異的抗体反応の早期検出を示す。ワクチンの投与後４日に採取したマウスからの試料を示す。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスについて（図２Ａ）、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｂ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂをワクチン接種したマウスについて(図２Ｃ)、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｄ）、全ての群のマウスからの結果は、比較のためにオーバーレイされる（図２Ｅ）。 ＥＬＩＳＡデータＤ＋４のグラフである。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスにおけるＲＢＤ特異的抗体反応の早期検出を示す。ワクチンの投与後４日に採取したマウスからの試料を示す。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスについて（図２Ａ）、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｂ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂをワクチン接種したマウスについて(図２Ｃ)、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｄ）、全ての群のマウスからの結果は、比較のためにオーバーレイされる（図２Ｅ）。 ＥＬＩＳＡデータＤ＋４のグラフである。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスにおけるＲＢＤ特異的抗体反応の早期検出を示す。ワクチンの投与後４日に採取したマウスからの試料を示す。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスについて（図２Ａ）、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｂ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂをワクチン接種したマウスについて(図２Ｃ)、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｄ）、全ての群のマウスからの結果は、比較のためにオーバーレイされる（図２Ｅ）。 ＥＬＩＳＡデータＤ＋４のグラフである。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスにおけるＲＢＤ特異的抗体反応の早期検出を示す。ワクチンの投与後４日に採取したマウスからの試料を示す。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスについて（図２Ａ）、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｂ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂをワクチン接種したマウスについて(図２Ｃ)、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋アゴニストＣＤ４０ｍＡｂ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスについて（図２Ｄ）、全ての群のマウスからの結果は、比較のためにオーバーレイされる（図２Ｅ）。 ＥＬＩＳＡデータＤ＋８のグラフである。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスにおける優位なＲＢＤ特異的抗体応答を示す。ワクチンの投与後４日及び８日に採取したマウスからの試料。 特異性試験－ワクチン誘導抗体はＲＢＤ特異的であることを示す。ＲＢＤ特異的抗体の検出に使用されるマイクロプレートの代表的な画像（図４Ａ）。及び、ＲＲＢＤ特異的抗体の検出を示すグラフを示すグラフ（図４Ｂ）。グラフはさらに、Ａｎｔｉ Ｈｉｓ（Ｈｉｓ Ｔａｇ対照）及びＡｎｔｉ ＯＶＡ（無関係な対照）の検出結果を示す。 特異性試験－ワクチン誘導抗体はＲＢＤ特異的であることを示す。ＲＢＤ特異的抗体の検出に使用されるマイクロプレートの代表的な画像（図４Ａ）。及び、ＲＲＢＤ特異的抗体の検出を示すグラフを示すグラフ（図４Ｂ）。グラフはさらに、Ａｎｔｉ Ｈｉｓ（Ｈｉｓ Ｔａｇ対照）及びＡｎｔｉ ＯＶＡ（無関係な対照）の検出結果を示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答のアイソタイプ特徴付けを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、堅牢なアイソタイプスイッチングを誘導する。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図５Ａ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図５Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図５Ｃ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図５Ｄ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図５Ｅ）を示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答のアイソタイプ特徴付けを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、堅牢なアイソタイプスイッチングを誘導する。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図５Ａ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図５Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図５Ｃ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図５Ｄ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図５Ｅ）を示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答のアイソタイプ特徴付けを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、堅牢なアイソタイプスイッチングを誘導する。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図５Ａ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図５Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図５Ｃ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図５Ｄ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図５Ｅ）を示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答のアイソタイプ特徴付けを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、堅牢なアイソタイプスイッチングを誘導する。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図５Ａ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図５Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図５Ｃ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図５Ｄ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図５Ｅ）を示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答のアイソタイプ特徴付けを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、堅牢なアイソタイプスイッチングを誘導する。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図５Ａ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図５Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図５Ｃ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図５Ｄ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図５Ｅ）を示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンのアイソタイプ特徴付けは、長期にわたるアイソタイプスイッチングされたＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（ワクチン接種後６０日超）ことを示す。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図６Ａ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図６Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図６Ｃ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図６Ｄ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図６Ｅ）示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンのアイソタイプ特徴付けは、長期にわたるアイソタイプスイッチングされたＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（ワクチン接種後６０日超）ことを示す。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図６Ａ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図６Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図６Ｃ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図６Ｄ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図６Ｅ）示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンのアイソタイプ特徴付けは、長期にわたるアイソタイプスイッチングされたＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（ワクチン接種後６０日超）ことを示す。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出（について図６Ａ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図６Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図６Ｃ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図６Ｄ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図６Ｅ）示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンのアイソタイプ特徴付けは、長期にわたるアイソタイプスイッチングされたＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（ワクチン接種後６０日超）ことを示す。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図６Ａ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図６Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図６Ｃ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図６Ｄ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図６Ｅ）示す。 ＲＢＤ特異的抗体応答－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンのアイソタイプ特徴付けは、長期にわたるアイソタイプスイッチングされたＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（ワクチン接種後６０日超）ことを示す。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。結果は、ＩｇＧ抗体の検出について（図６Ａ）、ＩｇＧ３抗体の検出について（図６Ｂ）、ＩｇＧ２ａ抗体の検出について（図６Ｃ）、ＩｇＧ１抗体の検出について（図６Ｄ）、ＩｇＧ２ｂ抗体の検出について（図６Ｅ）示す。 気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）におけるＢＤ特異的抗体応答を示す。検査のために肺から試料を採取するために使用されるＢＡＬ手順を示す概略図（図７Ａ）。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ワクチン接種した動物の肺に検出されるＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図７Ｂ）。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。 気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）におけるＢＤ特異的抗体応答を示す。検査のために肺から試料を採取するために使用されるＢＡＬ手順を示す概略図（図７Ａ）。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ワクチン接種した動物の肺に検出されるＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図７Ｂ）。ワクチンの投与後４日、８日及び１４日に採取したマウスからの試料。 受容体結合阻害アッセイを示す概略図である。 細胞受容体結合阻害アッセイを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤがＡＣＥ－２受容体に結合するのを遮断するＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図９Ａ）。結果は、ワクチン接種後１２日目（図９Ｂ）、及びワクチン接種後２６日目（図９Ｃ）にＲＢＤが依然として遮断されていることを示す。 細胞受容体結合阻害アッセイを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤがＡＣＥ－２受容体に結合するのを遮断するＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図９Ａ）。結果は、ワクチン接種後１２日目（図９Ｂ）、及びワクチン接種後２６日目（図９Ｃ）にＲＢＤが依然として遮断されていることを示す。 細胞受容体結合阻害アッセイを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤがＡＣＥ－２受容体に結合するのを遮断するＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図９Ａ）。結果は、ワクチン接種後１２日目（図９Ｂ）、及びワクチン接種後２６日目（図９Ｃ）にＲＢＤが依然として遮断されていることを示す。 ＡＣＥ２－スパイクＲＢＤ相互作用を遮断する抗体についてのアッセイを示す（図１０Ａ）。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスの血清が、スパイクＲＢＤがＡＣＥ２受容体に結合するのを阻害することを示す（図１０Ｂ）。 。ＡＣＥ２－スパイクＲＢＤ相互作用を遮断する抗体についてのアッセイを示す（図１０Ａ）。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスの血清が、スパイクＲＢＤがＡＣＥ２受容体に結合するのを阻害することを示す（図１０Ｂ）。 偽ウイルス中和アッセイを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、偽ウイルスを発現するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＡＣＥ－２発現細胞への侵入を完全に遮断するＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図１１Ａ）。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスの血清が、偽ウイルスがＡＣＥ－２発現細胞に侵入するのを阻害することを示す（図１１Ｂ）。 偽ウイルス中和アッセイを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、偽ウイルスを発現するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質のＡＣＥ－２発現細胞への侵入を完全に遮断するＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図１１Ａ）。結果は、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧをワクチン接種したマウスの血清が、偽ウイルスがＡＣＥ－２発現細胞に侵入するのを阻害することを示す（図１１Ｂ）。 ヒト化マウスにおけるＣＡＲＴ－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧワクチンを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ヒト免疫細胞で再構築されたマウスのＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図１２Ａ）、結果は、ヒトＰＢＭＣを投与されたマウスのＲＢＤ特異的ＩｇＧの検出を示す（図１２Ｂ）。 ヒト化マウスにおけるＣＡＲＴ－ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧワクチンを示す。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ヒト免疫細胞で再構築されたマウスのＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（図１２Ａ）、結果は、ヒトＰＢＭＣを投与されたマウスのＲＢＤ特異的ＩｇＧの検出を示す（図１２Ｂ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ＴＬＲ９（ＣｐＧ）供給源及び投与経路とは無関係に、ＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（例えば、ワクチンは皮下投与経路と筋肉内投与経路の両方で免疫応答を誘導する）ことを示す。結果は、ｍＲＮＡワクチンがタンパク質ワクチンよりも優れていることを示す。結果はさらに、同じシリンジ内の成分の投与が、別々の注射による成分の投与よりも良いことを示す。ＲＢＤ特異的抗体の検出は、ワクチン接種後１４日目に完了した（図１３Ａ）。ＲＢＤ特異的抗体の検出は、ワクチン接種後２１日目に完了した（図１３Ｂ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋ＣｐＧワクチンは、ＴＬＲ９（ＣｐＧ）供給源及び投与経路とは無関係に、ＲＢＤ特異的抗体応答を誘導する（例えば、ワクチンは皮下投与経路と筋肉内投与経路の両方で免疫応答を誘導する）ことを示す。結果は、ｍＲＮＡワクチンがタンパク質ワクチンよりも優れていることを示す。結果はさらに、同じシリンジ内の成分の投与が、別々の注射による成分の投与よりも良いことを示す。ＲＢＤ特異的抗体の検出は、ワクチン接種後１４日目に完了した（図１３Ａ）。ＲＢＤ特異的抗体の検出は、ワクチン接種後２１日目に完了した（図１３Ｂ）。 全てのＣｐＧ群で、Ｄ＋１４で早くもアイソタイプスイッチングが観察されたことを示すグラフである。ＣｐＧ １８２６及びＣｐＧ ＳＤ１０１を含むＣｐＧクラスが試験された。 部分的な受容体遮断が、Ｄ＋１４で早くも観察されたことを示す。結果は、様々なＣｐＧクラスがＤ＋１４で早くもＡＣＥ－２へのＲＢＤスパイクタンパク質の結合の阻害を誘導することを確認している（図１５Ａ）。この結果は、タンパク質ワクチンよりも高いＲＢＤ特異的抗体レベルを誘導するｍＲＮＡワクチンと一致している。さらに、様々な投与方法（例えば、皮下、静脈内及び筋肉内）は、Ｄ＋１４で受容体遮断を誘導する（図１５Ｂ）。 部分的な受容体遮断が、Ｄ＋１４で早くも観察されたことを示す。結果は、様々なＣｐＧクラスがＤ＋１４で早くもＡＣＥ－２へのＲＢＤスパイクタンパク質の結合の阻害を誘導することを確認している（図１５Ａ）。この結果は、タンパク質ワクチンよりも高いＲＢＤ特異的抗体レベルを誘導するｍＲＮＡワクチンと一致している。さらに、様々な投与方法（例えば、皮下、静脈内及び筋肉内）は、Ｄ＋１４で受容体遮断を誘導する（図１５Ｂ）。 電荷変更放出性輸送体（ＣＡＲＴ）は、共製剤化されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤ ｍＲＮＡとアジュバントとを効果的に送達することを示す概略図である。プライムブースト免疫化は、マウスにおける堅牢な抗原特異的Ｂ細胞及びＴ細胞応答をもたらす。 ＣＡＲＴ送達プラットフォーム方法は、全身投与と局所投与の両方を介して、ｍＲＮＡを効果的に複合体化、送達及び放出することを示す。ＣＡＲＴ静電製剤、細胞内取り込み、エンドソームエスケープ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ ｍＲＮＡの翻訳（図１７Ａ）。開環重合によるＣＡＲＴ合成（ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン、ＴＵ＝１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル）－３－シクロヘキシルチオ尿素）（図１７Ｂ）。ＣＡＲＴの化学構造、分解生成物及び電荷変化機序（図１７Ｃ）。全身ＩＶ投与（左、５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）及び局所ＩＭ投与（各側腹部に２．５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）を介したインビボルシフェラーゼレポーター遺伝子発現（図１７Ｄ）。投与後４時間のインビボｍＲＮＡ発現の定量化（図１７Ｅ）。 ＣＡＲＴ送達プラットフォーム方法は、全身投与と局所投与の両方を介して、ｍＲＮＡを効果的に複合体化、送達及び放出することを示す。ＣＡＲＴ静電製剤、細胞内取り込み、エンドソームエスケープ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ ｍＲＮＡの翻訳（図１７Ａ）。開環重合によるＣＡＲＴ合成（ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン、ＴＵ＝１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル）－３－シクロヘキシルチオ尿素）（図１７Ｂ）。ＣＡＲＴの化学構造、分解生成物及び電荷変化機序（図１７Ｃ）。全身ＩＶ投与（左、５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）及び局所ＩＭ投与（各側腹部に２．５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）を介したインビボルシフェラーゼレポーター遺伝子発現（図１７Ｄ）。投与後４時間のインビボｍＲＮＡ発現の定量化（図１７Ｅ）。 ＣＡＲＴ送達プラットフォーム方法は、全身投与と局所投与の両方を介して、ｍＲＮＡを効果的に複合体化、送達及び放出することを示す。ＣＡＲＴ静電製剤、細胞内取り込み、エンドソームエスケープ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ ｍＲＮＡの翻訳（図１７Ａ）。開環重合によるＣＡＲＴ合成（ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン、ＴＵ＝１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル）－３－シクロヘキシルチオ尿素）（図１７Ｂ）。ＣＡＲＴの化学構造、分解生成物及び電荷変化機序（図１７Ｃ）。全身ＩＶ投与（左、５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）及び局所ＩＭ投与（各側腹部に２．５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）を介したインビボルシフェラーゼレポーター遺伝子発現（図１７Ｄ）。投与後４時間のインビボｍＲＮＡ発現の定量化（図１７Ｅ）。 ＣＡＲＴ送達プラットフォーム方法は、全身投与と局所投与の両方を介して、ｍＲＮＡを効果的に複合体化、送達及び放出することを示す。ＣＡＲＴ静電製剤、細胞内取り込み、エンドソームエスケープ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ ｍＲＮＡの翻訳（図１７Ａ）。開環重合によるＣＡＲＴ合成（ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン、ＴＵ＝１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル）－３－シクロヘキシルチオ尿素）（図１７Ｂ）。ＣＡＲＴの化学構造、分解生成物及び電荷変化機序（図１７Ｃ）。全身ＩＶ投与（左、５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）及び局所ＩＭ投与（各側腹部に２．５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）を介したインビボルシフェラーゼレポーター遺伝子発現（図１７Ｄ）。投与後４時間のインビボｍＲＮＡ発現の定量化（図１７Ｅ）。 ＣＡＲＴ送達プラットフォーム方法は、全身投与と局所投与の両方を介して、ｍＲＮＡを効果的に複合体化、送達及び放出することを示す。ＣＡＲＴ静電製剤、細胞内取り込み、エンドソームエスケープ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ ｍＲＮＡの翻訳（図１７Ａ）。開環重合によるＣＡＲＴ合成（ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン、ＴＵ＝１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル）－３－シクロヘキシルチオ尿素）（図１７Ｂ）。ＣＡＲＴの化学構造、分解生成物及び電荷変化機序（図１７Ｃ）。全身ＩＶ投与（左、５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）及び局所ＩＭ投与（各側腹部に２．５μｇのｆＬｕｃ ｍＲＮＡ）を介したインビボルシフェラーゼレポーター遺伝子発現（図１７Ｄ）。投与後４時間のインビボｍＲＮＡ発現の定量化（図１７Ｅ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴにＣｐＧを添加すると、より強力な抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答が誘発され、早期のアイソタイプスイッチングにつながることを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴと３μｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、３μｇのＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、プライミング後４日目と８日目にブーストした（図１８Ａ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（白丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（黒丸）、及びナイーブ（ダイヤモンド）マウスからのＲＢＤ特異的ＩｇＧの血清レベルを、ＥＬＩＳＡによるプライミング後６０日間の過程にわたってモニターした（図１８Ｂ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗マウスＩｇＧ１（丸マーカー）、ＩｇＧ２ａ（黒）、ＩｇＧ２ｂ（四角マーカー）及びＩｇＧ３（白）モノクローナル抗体を使用して、ＲＢＤに特異的なＩｇＧアイソタイプの分布をＥＬＩＳＡ法により解析した（図１８Ｃ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗ＲＢＤ ＩｇＧの絶対濃度を評価した。＊＝Ｐ＜０．０５ Ｓｔｕｄｅｎｔ独立Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側）。２つの個々の実験を代表するデータ（図１８Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴにＣｐＧを添加すると、より強力な抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答が誘発され、早期のアイソタイプスイッチングにつながることを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴと３μｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、３μｇのＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、プライミング後４日目と８日目にブーストした（図１８Ａ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（白丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（黒丸）、及びナイーブ（ダイヤモンド）マウスからのＲＢＤ特異的ＩｇＧの血清レベルを、ＥＬＩＳＡによるプライミング後６０日間の過程にわたってモニターした（図１８Ｂ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗マウスＩｇＧ１（丸マーカー）、ＩｇＧ２ａ（黒）、ＩｇＧ２ｂ（四角マーカー）及びＩｇＧ３（白）モノクローナル抗体を使用して、ＲＢＤに特異的なＩｇＧアイソタイプの分布をＥＬＩＳＡ法により解析した（図１８Ｃ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗ＲＢＤ ＩｇＧの絶対濃度を評価した。＊＝Ｐ＜０．０５ Ｓｔｕｄｅｎｔ独立Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側）。２つの個々の実験を代表するデータ（図１８Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴにＣｐＧを添加すると、より強力な抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答が誘発され、早期のアイソタイプスイッチングにつながることを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴと３μｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、３μｇのＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、プライミング後４日目と８日目にブーストした（図１８Ａ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（白丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（黒丸）、及びナイーブ（ダイヤモンド）マウスからのＲＢＤ特異的ＩｇＧの血清レベルを、ＥＬＩＳＡによるプライミング後６０日間の過程にわたってモニターした（図１８Ｂ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗マウスＩｇＧ１（丸マーカー）、ＩｇＧ２ａ（黒）、ＩｇＧ２ｂ（四角マーカー）及びＩｇＧ３（白）モノクローナル抗体を使用して、ＲＢＤに特異的なＩｇＧアイソタイプの分布をＥＬＩＳＡ法により解析した（図１８Ｃ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗ＲＢＤ ＩｇＧの絶対濃度を評価した。＊＝Ｐ＜０．０５ Ｓｔｕｄｅｎｔ独立Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側）。２つの個々の実験を代表するデータ（図１８Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴにＣｐＧを添加すると、より強力な抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答が誘発され、早期のアイソタイプスイッチングにつながることを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴと３μｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、３μｇのＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、プライミング後４日目と８日目にブーストした（図１８Ａ）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（白丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（黒丸）、及びナイーブ（ダイヤモンド）マウスからのＲＢＤ特異的ＩｇＧの血清レベルを、ＥＬＩＳＡによるプライミング後６０日間の過程にわたってモニターした（図１８Ｂ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗マウスＩｇＧ１（丸マーカー）、ＩｇＧ２ａ（黒）、ＩｇＧ２ｂ（四角マーカー）及びＩｇＧ３（白）モノクローナル抗体を使用して、ＲＢＤに特異的なＩｇＧアイソタイプの分布をＥＬＩＳＡ法により解析した（図１８Ｃ）、プライミング後１４日目及び６０日目に、抗ＲＢＤ ＩｇＧの絶対濃度を評価した。＊＝Ｐ＜０．０５ Ｓｔｕｄｅｎｔ独立Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側）。２つの個々の実験を代表するデータ（図１８Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期に高レベルのＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５）を、図１８Ａに記載されるように免疫化した。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）で免疫化したマウスの血清をＤ２８及びＤ６０で回収し、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイで試験した。同じセットの血清試料を、偽型ウイルス中和アッセイで試験した。ｚｓＧｒｅｅｎ及びホタルルシフェラーゼベクターを含むＲＢＤ発現偽ウイルス粒子を、滴定濃度の熱不活化マウス血清と同時インキュベートした（図１９Ａ）。偽ウイルス粒子－血清混合物を、ＡＣＥ－２過剰発現２９３Ｆ細胞を含むウェルに添加した。ホタルルシフェラーゼ発現は、実験開始後４８時間及び７２時間で測定した。Ｄ６０において、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ－ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）免疫化マウスからＢＡＬを回収した（図１９Ｂ）。ＲＢＤ特異的総ＩｇＧをＥＬＩＳＡ法によりアッセイした（図１９Ｃ）。免疫グロブリンを含有するＢＡＬを、市販のＡＣＥ－２阻害キットを使用して、ｈＡＣＥ－２へのＲＢＤの結合を阻害する能力について試験した（図１９Ｄ）。ナイーブマウス（灰色、ｎ＝３）又はＤ０及びＤ２１で、３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ（黒、ｎ＝３）でＩＶワクチン接種したマウスからの肺の単一細胞懸濁液をＤ２８で収集し、培地単独、ＲＢＤタンパク質、又は無関係なタンパク質（ＣＤ８１－Ｈｉｓ）［５μｇ／ｍＬ］と４８時間インキュベートし、Ｔ細胞活性化マーカーＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ４＋Ｔ細胞上の細胞内ＴＮＦαについて染色した。データはＳＤ±平均値として示す。１つの実験を表すデータ。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１、二元配置分散分析（テューキー多重比較検定）（図１９Ｅ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期に高レベルのＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５）を、図１８Ａに記載されるように免疫化した。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）で免疫化したマウスの血清をＤ２８及びＤ６０で回収し、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイで試験した。同じセットの血清試料を、偽型ウイルス中和アッセイで試験した。ｚｓＧｒｅｅｎ及びホタルルシフェラーゼベクターを含むＲＢＤ発現偽ウイルス粒子を、滴定濃度の熱不活化マウス血清と同時インキュベートした（図１９Ａ）。偽ウイルス粒子－血清混合物を、ＡＣＥ－２過剰発現２９３Ｆ細胞を含むウェルに添加した。ホタルルシフェラーゼ発現は、実験開始後４８時間及び７２時間で測定した。Ｄ６０において、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ－ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）免疫化マウスからＢＡＬを回収した（図１９Ｂ）。ＲＢＤ特異的総ＩｇＧをＥＬＩＳＡ法によりアッセイした（図１９Ｃ）。免疫グロブリンを含有するＢＡＬを、市販のＡＣＥ－２阻害キットを使用して、ｈＡＣＥ－２へのＲＢＤの結合を阻害する能力について試験した（図１９Ｄ）。ナイーブマウス（灰色、ｎ＝３）又はＤ０及びＤ２１で、３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ（黒、ｎ＝３）でＩＶワクチン接種したマウスからの肺の単一細胞懸濁液をＤ２８で収集し、培地単独、ＲＢＤタンパク質、又は無関係なタンパク質（ＣＤ８１－Ｈｉｓ）［５μｇ／ｍＬ］と４８時間インキュベートし、Ｔ細胞活性化マーカーＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ４＋Ｔ細胞上の細胞内ＴＮＦαについて染色した。データはＳＤ±平均値として示す。１つの実験を表すデータ。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１、二元配置分散分析（テューキー多重比較検定）（図１９Ｅ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期に高レベルのＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５）を、図１８Ａに記載されるように免疫化した。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）で免疫化したマウスの血清をＤ２８及びＤ６０で回収し、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイで試験した。同じセットの血清試料を、偽型ウイルス中和アッセイで試験した。ｚｓＧｒｅｅｎ及びホタルルシフェラーゼベクターを含むＲＢＤ発現偽ウイルス粒子を、滴定濃度の熱不活化マウス血清と同時インキュベートした（図１９Ａ）。偽ウイルス粒子－血清混合物を、ＡＣＥ－２過剰発現２９３Ｆ細胞を含むウェルに添加した。ホタルルシフェラーゼ発現は、実験開始後４８時間及び７２時間で測定した。Ｄ６０において、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ－ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）免疫化マウスからＢＡＬを回収した（図１９Ｂ）。ＲＢＤ特異的総ＩｇＧをＥＬＩＳＡ法によりアッセイした（図１９Ｃ）。免疫グロブリンを含有するＢＡＬを、市販のＡＣＥ－２阻害キットを使用して、ｈＡＣＥ－２へのＲＢＤの結合を阻害する能力について試験した（図１９Ｄ）。ナイーブマウス（灰色、ｎ＝３）又はＤ０及びＤ２１で、３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ（黒、ｎ＝３）でＩＶワクチン接種したマウスからの肺の単一細胞懸濁液をＤ２８で収集し、培地単独、ＲＢＤタンパク質、又は無関係なタンパク質（ＣＤ８１－Ｈｉｓ）［５μｇ／ｍＬ］と４８時間インキュベートし、Ｔ細胞活性化マーカーＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ４＋Ｔ細胞上の細胞内ＴＮＦαについて染色した。データはＳＤ±平均値として示す。１つの実験を表すデータ。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１、二元配置分散分析（テューキー多重比較検定）（図１９Ｅ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期に高レベルのＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５）を、図１８Ａに記載されるように免疫化した。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）で免疫化したマウスの血清をＤ２８及びＤ６０で回収し、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイで試験した。同じセットの血清試料を、偽型ウイルス中和アッセイで試験した。ｚｓＧｒｅｅｎ及びホタルルシフェラーゼベクターを含むＲＢＤ発現偽ウイルス粒子を、滴定濃度の熱不活化マウス血清と同時インキュベートした（図１９Ａ）。偽ウイルス粒子－血清混合物を、ＡＣＥ－２過剰発現２９３Ｆ細胞を含むウェルに添加した。ホタルルシフェラーゼ発現は、実験開始後４８時間及び７２時間で測定した。Ｄ６０において、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ－ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）免疫化マウスからＢＡＬを回収した（図１９Ｂ）。ＲＢＤ特異的総ＩｇＧをＥＬＩＳＡ法によりアッセイした（図１９Ｃ）。免疫グロブリンを含有するＢＡＬを、市販のＡＣＥ－２阻害キットを使用して、ｈＡＣＥ－２へのＲＢＤの結合を阻害する能力について試験した（図１９Ｄ）。ナイーブマウス（灰色、ｎ＝３）又はＤ０及びＤ２１で、３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ（黒、ｎ＝３）でＩＶワクチン接種したマウスからの肺の単一細胞懸濁液をＤ２８で収集し、培地単独、ＲＢＤタンパク質、又は無関係なタンパク質（ＣＤ８１－Ｈｉｓ）［５μｇ／ｍＬ］と４８時間インキュベートし、Ｔ細胞活性化マーカーＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ４＋Ｔ細胞上の細胞内ＴＮＦαについて染色した。データはＳＤ±平均値として示す。１つの実験を表すデータ。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１、二元配置分散分析（テューキー多重比較検定）（図１９Ｅ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期に高レベルのＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５）を、図１８Ａに記載されるように免疫化した。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）で免疫化したマウスの血清をＤ２８及びＤ６０で回収し、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイで試験した。同じセットの血清試料を、偽型ウイルス中和アッセイで試験した。ｚｓＧｒｅｅｎ及びホタルルシフェラーゼベクターを含むＲＢＤ発現偽ウイルス粒子を、滴定濃度の熱不活化マウス血清と同時インキュベートした（図１９Ａ）。偽ウイルス粒子－血清混合物を、ＡＣＥ－２過剰発現２９３Ｆ細胞を含むウェルに添加した。ホタルルシフェラーゼ発現は、実験開始後４８時間及び７２時間で測定した。Ｄ６０において、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ（丸）、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ（四角）及びＣｐＧ－ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）免疫化マウスからＢＡＬを回収した（図１９Ｂ）。ＲＢＤ特異的総ＩｇＧをＥＬＩＳＡ法によりアッセイした（図１９Ｃ）。免疫グロブリンを含有するＢＡＬを、市販のＡＣＥ－２阻害キットを使用して、ｈＡＣＥ－２へのＲＢＤの結合を阻害する能力について試験した（図１９Ｄ）。ナイーブマウス（灰色、ｎ＝３）又はＤ０及びＤ２１で、３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ（黒、ｎ＝３）でＩＶワクチン接種したマウスからの肺の単一細胞懸濁液をＤ２８で収集し、培地単独、ＲＢＤタンパク質、又は無関係なタンパク質（ＣＤ８１－Ｈｉｓ）［５μｇ／ｍＬ］と４８時間インキュベートし、Ｔ細胞活性化マーカーＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ４＋Ｔ細胞上の細胞内ＴＮＦαについて染色した。データはＳＤ±平均値として示す。１つの実験を表すデータ。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１、二元配置分散分析（テューキー多重比較検定）（図１９Ｅ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、ＩＶ及びＩＭワクチン接種後に中和抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘発することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群につきｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３μｇのＣｐＧとで免疫化し、プライミング後２１日目にブーストした（図２０Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価を２１日目及び２８日目に測定及び定量した。測定値は、Ａ４５０として（図２０Ｂ）、抗ＲＢＤのｎｇ／ｍＬ（図２０Ｃ）で示される。２８日目に、ＩＶ及びＩＭの両方で処置したマウスからＢＡＬが回収され、抗ＲＢＤ免疫グロブリンをＥＬＩＳＡによってアッセイした。データは平均±ＳＤとして示す。２つの独立した実験を表すデータ。統計的有意性は、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、対応のない）ｎｓ＝Ｐ＞０．０５によって評価された（図２０Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、ＩＶ及びＩＭワクチン接種後に中和抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘発することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群につきｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３μｇのＣｐＧとで免疫化し、プライミング後２１日目にブーストした（図２０Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価を２１日目及び２８日目に測定及び定量した。測定値は、Ａ４５０として（図２０Ｂ）、抗ＲＢＤのｎｇ／ｍＬ（図２０Ｃ）で示される。２８日目に、ＩＶ及びＩＭの両方で処置したマウスからＢＡＬが回収され、抗ＲＢＤ免疫グロブリンをＥＬＩＳＡによってアッセイした。データは平均±ＳＤとして示す。２つの独立した実験を表すデータ。統計的有意性は、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、対応のない）ｎｓ＝Ｐ＞０．０５によって評価された（図２０Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、ＩＶ及びＩＭワクチン接種後に中和抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘発することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群につきｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３μｇのＣｐＧとで免疫化し、プライミング後２１日目にブーストした（図２０Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価を２１日目及び２８日目に測定及び定量した。測定値は、Ａ４５０として（図２０Ｂ）、抗ＲＢＤのｎｇ／ｍＬ（図２０Ｃ）で示される。２８日目に、ＩＶ及びＩＭの両方で処置したマウスからＢＡＬが回収され、抗ＲＢＤ免疫グロブリンをＥＬＩＳＡによってアッセイした。データは平均±ＳＤとして示す。２つの独立した実験を表すデータ。統計的有意性は、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、対応のない）ｎｓ＝Ｐ＞０．０５によって評価された（図２０Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、ＩＶ及びＩＭワクチン接種後に中和抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘発することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群につきｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３μｇのＣｐＧとで免疫化し、プライミング後２１日目にブーストした（図２０Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価を２１日目及び２８日目に測定及び定量した。測定値は、Ａ４５０として（図２０Ｂ）、抗ＲＢＤのｎｇ／ｍＬ（図２０Ｃ）で示される。２８日目に、ＩＶ及びＩＭの両方で処置したマウスからＢＡＬが回収され、抗ＲＢＤ免疫グロブリンをＥＬＩＳＡによってアッセイした。データは平均±ＳＤとして示す。２つの独立した実験を表すデータ。統計的有意性は、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、対応のない）ｎｓ＝Ｐ＞０．０５によって評価された（図２０Ｄ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡとＣｐＧワクチン接種は、長期持続する記憶ＴＨ１ ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘導することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのｃｔｒｌ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ又は３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧでＤ１とで免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした。１０５日目に、プールされた脾細胞を回収し、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について濃縮し、直接エクスビボＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイのためのＲＢＤペプチド混合物で１６時間別々に刺激した（図２１Ａ）。ＥＬＩＳｐｏｔ分析のために、それぞれの群からの脾細胞を３連で測定した。さらに、個々のマウスの全脾細胞（１群あたりｎ＝５）を培地又はＲＢＤペプチドプールと１８時間インキュベートした（図２１Ｂ）。インキュベーション後、細胞を回収し、Ｔ細胞記憶マーカーＣＤ４４及びＩＦＮγ（図２１Ｃ）、またはＣＤ４４並びに細胞内サイトカインＩＦＮγ、ＴＮＦα、及びＩＬ－４（図２１Ｄ）について染色した。各ドットは、個々のマウスの測定値を表す。＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１一元配置分散分析（テューキー多重比較検定）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡとＣｐＧワクチン接種は、長期持続する記憶ＴＨ１ ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘導することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのｃｔｒｌ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ又は３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧでＤ１とで免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした。１０５日目に、プールされた脾細胞を回収し、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について濃縮し、直接エクスビボＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイのためのＲＢＤペプチド混合物で１６時間別々に刺激した（図２１Ａ）。ＥＬＩＳｐｏｔ分析のために、それぞれの群からの脾細胞を３連で測定した。さらに、個々のマウスの全脾細胞（１群あたりｎ＝５）を培地又はＲＢＤペプチドプールと１８時間インキュベートした（図２１Ｂ）。インキュベーション後、細胞を回収し、Ｔ細胞記憶マーカーＣＤ４４及びＩＦＮγ（図２１Ｃ）、またはＣＤ４４並びに細胞内サイトカインＩＦＮγ、ＴＮＦα、及びＩＬ－４（図２１Ｄ）について染色した。各ドットは、個々のマウスの測定値を表す。＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１一元配置分散分析（テューキー多重比較検定）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡとＣｐＧワクチン接種は、長期持続する記憶ＴＨ１ ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘導することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのｃｔｒｌ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ又は３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧでＤ１とで免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした。１０５日目に、プールされた脾細胞を回収し、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について濃縮し、直接エクスビボＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイのためのＲＢＤペプチド混合物で１６時間別々に刺激した（図２１Ａ）。ＥＬＩＳｐｏｔ分析のために、それぞれの群からの脾細胞を３連で測定した。さらに、個々のマウスの全脾細胞（１群あたりｎ＝５）を培地又はＲＢＤペプチドプールと１８時間インキュベートした（図２１Ｂ）。インキュベーション後、細胞を回収し、Ｔ細胞記憶マーカーＣＤ４４及びＩＦＮγ（図２１Ｃ）、またはＣＤ４４並びに細胞内サイトカインＩＦＮγ、ＴＮＦα、及びＩＬ－４（図２１Ｄ）について染色した。各ドットは、個々のマウスの測定値を表す。＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１一元配置分散分析（テューキー多重比較検定）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡとＣｐＧワクチン接種とは、長期持続する記憶ＴＨ１ ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘導することを示すＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝５）を静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）により３μｇのｃｔｒｌ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ又は３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧでＤ１とで免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした。１０５日目に、プールされた脾細胞を回収し、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞について濃縮し、直接エクスビボＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイのためのＲＢＤペプチド混合物で１６時間別々に刺激した（図２１Ａ）。ＥＬＩＳｐｏｔ分析のために、それぞれの群からの脾細胞を３連で測定した。さらに、個々のマウスの全脾細胞（１群あたりｎ＝５）を培地又はＲＢＤペプチドプールと１８時間インキュベートした（図２１Ｂ）。インキュベーション後、細胞を回収し、Ｔ細胞記憶マーカーＣＤ４４及びＩＦＮγ（図２１Ｃ）、またはＣＤ４４並びに細胞内サイトカインＩＦＮγ、ＴＮＦα、及びＩＬ－４（図２１Ｄ）について染色した。各ドットは、個々のマウスの測定値を表す。＊＊＝Ｐ＜０．０１、＊＊＊＝Ｐ＜０．００１一元配置分散分析（テューキー多重比較検定）。 免疫化マウスの中和抗体レベルは、ワクチン接種されたヒトで達成されたものに匹敵することを示す。免疫化マウスから血清（ＩＭ－三角形、ＩＶ－四角、ｎ＝５）を２８日目に回収した。Ｐｆｉｚｅｒ／ＢｉｏＮＴｅｃｈのｍＲＮＡワクチンを接種した献血者（ｎ＝１３）からの血清を、ブースト前７日以内（ブースト前、丸）又はブースト後１５±４日以内（ブースト後、ダイヤモンド）（図２２Ａ）のいずれかに回収され、市販の代理ウイルス中和試験（図２２Ｂ）を使用して、ＲＢＤ／ＡＣＥ－２結合を阻害する能力について試験した。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＊＊＝Ｐ＜０．０００１一元配置分散分析（テューキー多重比較検定）。 免疫化マウスの中和抗体レベルは、ワクチン接種されたヒトで達成されたものに匹敵することを示す。免疫化マウスから血清（ＩＭ－三角形、ＩＶ－四角、ｎ＝５）を２８日目に回収した。Ｐｆｉｚｅｒ／ＢｉｏＮＴｅｃｈのｍＲＮＡワクチンを接種した献血者（ｎ＝１３）からの血清を、ブースト前７日以内（ブースト前、丸）又はブースト後１５±４日以内（ブースト後、ダイヤモンド）（図２２Ａ）のいずれかに回収され、市販の代理ウイルス中和試験（図２２Ｂ）を使用して、ＲＢＤ／ＡＣＥ－２結合を阻害する能力について試験した。＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＊＊＝Ｐ＜０．０００１一元配置分散分析（テューキー多重比較検定）。 ＣＡＲＴオリゴマー及びＣＡＲＴ／ｍＲＮＡ ＮＰの特徴付けを示す。ＣＡＲＴ Ｏ６－ｓｔａｔ－Ｎ６：Ａ９の１Ｈ ＮＭＲスペクトル（ＣＤ３ＯＨ、５００ＭＨｚ）を示す。ＣＤ３ＯＤ：ＢｎＯＨ末端基７．３５ｐｐｍ、５Ｈ（Ｃ５Ｈ５）；ノネニルセグメント０．９ｐｐｍ、１８Ｈ（ＣＨ３）；オレイルセグメント０．８５ｐｐｍ、１８Ｈ（ＣＨ３）、アミノエステルセグメント３．５ｐｐｍ、１８Ｈ（ＣＨ２）の相対比を示す。平均分子量（Ｎ－Ｂｏｃ保護オリゴマーのゲル浸透クロマトグラフィー対ポリスチレン標準）：Ｍｎ＝４．３ｋＤａ、Ｄ＝１．１９。これらの比を比較すると、ＤＰ１：６：６：９の統計的トリブロックＣＡＲＴが示される（図２３Ａ）。ＣＡＲＴヌクレオチドナノ粒子製剤及び物理的特徴付け。ａナノ粒子サイズは、動的光散乱（ＤＬＳ）を使用して測定した。各値は、同じ単位で対応する標準偏差を有する独立に調製された製剤を用いた３回の試行の平均である。これらの試料の分析からのナノ粒子サイズの関数としての散乱光の強度のプロットは、粒子サイズの１つの単峰性分布を示す。ｂゼータ電位測定は、電気泳動光散乱（ＥＬＳ）を使用して行った。各値は、独立に調製された製剤を使用した３回の試行からの６回の測定値の平均であり（各試行について、２回の測定値が連続して取得された）、同じ単位で対応する標準偏差を有する。ｃカプセル化効率は、ＲＮＡ特異的Ｑｕｂｉｔ ＲＮＡ ＢＲ色素（Ｑ１０２１０；Ｉｎｖｔｒｇｅｎ）の蛍光によって測定した。ＲＢＤ－ｍＲＮＡ又はＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋ＣｐＧは、合計８４０ｎｇのヌクレオチドカーゴと、正味１０：１（カチオン：アニオン）比で十分なＣＡＲＴを使用して、複合体を形成した。これを、５μＬのＱｕｂｉｔ試薬を含む０．７５ｍＬのＲＮａｓｅフリー脱イオン水に加えた。溶液の蛍光は、励起波長６３０（スリット幅４ｎｍ）及び発光波長６８０ｎｍ（スリット幅４ｎｍ）を使用して、直ちに測定した。％カプセル化は、Ｑｕｂｉｔ色素単独（ヌクレオチドなし）の蛍光を差し引き、非複合ｍＲＮＡを有するＱｕｂｉｔの蛍光に正規化することによって決定された（図２３Ｂ）。 ＣＡＲＴオリゴマー及びＣＡＲＴ／ｍＲＮＡ ＮＰの特徴付けを示す。ＣＡＲＴ Ｏ６－ｓｔａｔ－Ｎ６：Ａ９の１Ｈ ＮＭＲスペクトル（ＣＤ３ＯＨ、５００ＭＨｚ）を示す。ＣＤ３ＯＤ：ＢｎＯＨ末端基７．３５ｐｐｍ、５Ｈ（Ｃ５Ｈ５）；ノネニルセグメント０．９ｐｐｍ、１８Ｈ（ＣＨ３）；オレイルセグメント０．８５ｐｐｍ、１８Ｈ（ＣＨ３）、アミノエステルセグメント３．５ｐｐｍ、１８Ｈ（ＣＨ２）の相対比を示す。平均分子量（Ｎ－Ｂｏｃ保護オリゴマーのゲル浸透クロマトグラフィー対ポリスチレン標準）：Ｍｎ＝４．３ｋＤａ、Ｄ＝１．１９。これらの比を比較すると、ＤＰ１：６：６：９の統計的トリブロックＣＡＲＴが示される（図２３Ａ）。ＣＡＲＴヌクレオチドナノ粒子製剤及び物理的特徴付け。ａナノ粒子サイズは、動的光散乱（ＤＬＳ）を使用して測定した。各値は、同じ単位で対応する標準偏差を有する独立に調製された製剤を用いた３回の試行の平均である。これらの試料の分析からのナノ粒子サイズの関数としての散乱光の強度のプロットは、粒子サイズの１つの単峰性分布を示す。ｂゼータ電位測定は、電気泳動光散乱（ＥＬＳ）を使用して行った。各値は、独立に調製された製剤を使用した３回の試行からの６回の測定値の平均であり（各試行について、２回の測定値が連続して取得された）、同じ単位で対応する標準偏差を有する。ｃカプセル化効率は、ＲＮＡ特異的Ｑｕｂｉｔ ＲＮＡ ＢＲ色素（Ｑ１０２１０；Ｉｎｖｔｒｇｅｎ）の蛍光によって測定した。ＲＢＤ－ｍＲＮＡ又はＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋ＣｐＧは、合計８４０ｎｇのヌクレオチドカーゴと、正味１０：１（カチオン：アニオン）比で十分なＣＡＲＴを使用して、複合体を形成した。これを、５μＬのＱｕｂｉｔ試薬を含む０．７５ｍＬのＲＮａｓｅフリー脱イオン水に加えた。溶液の蛍光は、励起波長６３０（スリット幅４ｎｍ）及び発光波長６８０ｎｍ（スリット幅４ｎｍ）を使用して、直ちに測定した。％カプセル化は、Ｑｕｂｉｔ色素単独（ヌクレオチドなし）の蛍光を差し引き、非複合ｍＲＮＡを有するＱｕｂｉｔの蛍光に正規化することによって決定された（図２３Ｂ）。 ２９３Ｆ細胞にＣＡＲＴ－ＲＢＤ ｍＲＮＡをトランスフェクトしたことを示す。１６時間後、上清をＲＢＤ－Ｈｉｓ発現についてウエスタンブロットで分析した。陰性対照は、トランスフェクトされていない細胞からの培地である。１００ｎｇの精製ＲＢＤタンパク質を陽性対照として使用した（図２４Ａ）。示されたｍＲＮＡを使用して、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ複合体のＩＶ注射後２４時間の循環免疫細胞サブセットに対するＣＤ６９アップレギュレーションを示す。非免疫刺激性ｍＲＮＡ ＥＧＦＰ ｍＲＮＡ（５ｍｏＵ）（Ｌ－７２０１ Ｔｒｉｌｉｎｋ）、免疫刺激性ｍＲＮＡ：ＣｌｅａｎＣａｐＴＭ ＦＬｕｃ ｍＲＮＡ（Ｌ－７６０２ Ｔｒｉｌｉｎｋ）（図２４Ｂ）。複数の独立した実験からのプールされたデータ。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ￡０．００１（＊＊＊）。 ２９３Ｆ細胞にＣＡＲＴ－ＲＢＤ ｍＲＮＡをトランスフェクトしたことを示す。１６時間後、上清をＲＢＤ－Ｈｉｓ発現についてウエスタンブロットで分析した。陰性対照は、トランスフェクトされていない細胞からの培地である。１００ｎｇの精製ＲＢＤタンパク質を陽性対照として使用した（図２４Ａ）。示されたｍＲＮＡを使用して、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ複合体のＩＶ注射後２４時間の循環免疫細胞サブセットに対するＣＤ６９アップレギュレーションを示す。非免疫刺激性ｍＲＮＡ ＥＧＦＰ ｍＲＮＡ（５ｍｏＵ）（Ｌ－７２０１ Ｔｒｉｌｉｎｋ）、免疫刺激性ｍＲＮＡ：ＣｌｅａｎＣａｐＴＭ ＦＬｕｃ ｍＲＮＡ（Ｌ－７６０２ Ｔｒｉｌｉｎｋ）（図２４Ｂ）。複数の独立した実験からのプールされたデータ。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ￡０．００１（＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、プライミング後４日に早くも抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘発することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、Ｄａｙ＋４とＤａｙ＋８とにブーストした。ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡ（丸）、ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡとＣｐＧ（四角）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）、及びナイーブ（三角形）マウスからのＲＢＤ特異的ＩｇＧの血清レベルを、プライミング後の４日にＥＬＩＳＡによって試験した（図２５Ａ）。同じ血清試料を、５ｕｇ／ｍｌのＧＦＰ－Ｈｉｓタンパク質でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートを使用して、無関係なＨｉｓタグ付きＧＦＰ（ＧＦＰ－Ｈｉｓ）タンパク質との交差反応性について試験し、抗Ｈｉｓ抗体陽性プレート対照（ダイヤモンド）と比較した（図２５Ｂ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、プライミング後４日に早くも抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘発することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、Ｄａｙ＋４とＤａｙ＋８とにブーストした。ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡ（丸）、ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡとＣｐＧ（四角）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（ダイヤモンド）、及びナイーブ（三角形）マウスからのＲＢＤ特異的ＩｇＧの血清レベルを、プライミング後の４日にＥＬＩＳＡによって試験した（図２５Ａ）。同じ血清試料を、５ｕｇ／ｍｌのＧＦＰ－Ｈｉｓタンパク質でコーティングしたＥＬＩＳＡプレートを使用して、無関係なＨｉｓタグ付きＧＦＰ（ＧＦＰ－Ｈｉｓ）タンパク質との交差反応性について試験し、抗Ｈｉｓ抗体陽性プレート対照（ダイヤモンド）と比較した（図２５Ｂ）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期免疫グロブリンアイソタイプスイッチを誘導し、高レベルのＡＣＥ－２－ＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、プライミング後Ｄ４及びＤ８にブーストした。ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡ（丸）、ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡとＣｐＧ（四角）、免疫化マウスからの血清を、Ｄａｙ＋１４日目（図２６Ａ）に採取し、及びＤａｙ＋６０日目（図２６Ｂ）に採取し、ＲＢＤに特異的なＩｇＧアイソタイプの分布を、抗マウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３モノクローナル抗体を使用してＥＬＩＳＡで分析した。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴは、早期免疫グロブリンアイソタイプスイッチを誘導し、高レベルのＡＣＥ－２－ＲＢＤ中和抗体を生成することを示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧ（ｎ＝５）、ＣｐＧ ＣＡＲＴ（ｎ＝５）、又はナイーブ未処置（ｎ＝５）のいずれかで静脈内免疫化し、プライミング後Ｄ４及びＤ８にブーストした。ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡ（丸）、ＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡとＣｐＧ（四角）、免疫化マウスからの血清を、Ｄａｙ＋１４日目（図２６Ａ）に採取し、及びＤａｙ＋６０日目（図２６Ｂ）に採取し、ＲＢＤに特異的なＩｇＧアイソタイプの分布を、抗マウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３モノクローナル抗体を使用してＥＬＩＳＡで分析した。 皮下及び筋肉内ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン投与は、堅牢なアイソタイプスイッチングされた抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘導することを示す。１群あたり５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧで、静脈内（ＩＶ）、筋肉内（ＩＭ）又は皮下（ＳＣ）によって免疫化し、プライミング後にＤ８にブーストした（図２７Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価をＤ１４及びＤ２８に測定した（図２７Ｂ）。ＲＢＤ特異的ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３をＤａｙ＋１４に測定した。２つの個々の実験を表すデータ（図２７Ｃ）。 皮下及び筋肉内ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン投与は、堅牢なアイソタイプスイッチングされた抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘導することを示す。１群あたり５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧで、静脈内（ＩＶ）、筋肉内（ＩＭ）又は皮下（ＳＣ）によって免疫化し、プライミング後にＤ８にブーストした（図２７Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価をＤ１４及びＤ２８に測定した（図２７Ｂ）。ＲＢＤ特異的ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３をＤａｙ＋１４に測定した。２つの個々の実験を表すデータ（図２７Ｃ）。 皮下及び筋肉内ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン投与は、堅牢なアイソタイプスイッチングされた抗ＲＢＤ免疫グロブリン応答を誘導することを示す。１群あたり５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧで、静脈内（ＩＶ）、筋肉内（ＩＭ）又は皮下（ＳＣ）によって免疫化し、プライミング後にＤ８にブーストした（図２７Ａ）。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価をＤ１４及びＤ２８に測定した（図２７Ｂ）。ＲＢＤ特異的ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３をＤａｙ＋１４に測定した。２つの個々の実験を表すデータ（図２７Ｃ）。 中和抗体の誘導は、ＣｐＧ供給源とは無関係であることを示す。１群あたり５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧで、ＣｐＧの３つの異なる供給源（ＩＭＯ／２０５５、ＳＤ１０１又はＯＤＮ２３９５）を使用して、静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）によって免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした（図２８Ａ）。Ｄ２１及びＤ２８に回収した免疫化マウス由来の血清を、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイを使用して、ＲＢＤ－ＡＣＥ－２結合を阻害する能力について試験した（図２８Ｂ）。Ｄ２１及びＤ２８に回収した免疫化マウス由来の血清を、ＥＬＩＳＡ法により完全なＳｐｉｋｅタンパク質に結合する能力について試験した（図２８Ｃ）。 中和抗体の誘導は、ＣｐＧ供給源とは無関係であることを示す。中和抗体の誘導は、ＣｐＧ供給源とは無関係であることを示す。１群あたり５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧで、ＣｐＧの３つの異なる供給源（ＩＭＯ／２０５５、ＳＤ１０１又はＯＤＮ２３９５）を使用して、静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）によって免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした（図２８Ａ）。Ｄ２１及びＤ２８に回収した免疫化マウス由来の血清を、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイを使用して、ＲＢＤ－ＡＣＥ－２結合を阻害する能力について試験した（図２８Ｂ）。Ｄ２１及びＤ２８に回収した免疫化マウス由来の血清を、ＥＬＩＳＡ法により完全なＳｐｉｋｅタンパク質に結合する能力について試験した（図２８Ｃ）。 中和抗体の誘導は、ＣｐＧ供給源とは無関係であることを示す。中和抗体の誘導は、ＣｐＧ供給源とは無関係であることを示す。１群あたり５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスを、３ｕｇのＲＢＤ－ＣＡＲＴ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧで、ＣｐＧの３つの異なる供給源（ＩＭＯ／２０５５、ＳＤ１０１又はＯＤＮ２３９５）を使用して、静脈内（ＩＶ）又は筋肉内（ＩＭ）によって免疫化し、プライミング後にＤ２１にブーストした（図２８Ａ）。Ｄ２１及びＤ２８に回収した免疫化マウス由来の血清を、市販のＲＢＤ－ＡＣＥ－２阻害アッセイを使用して、ＲＢＤ－ＡＣＥ－２結合を阻害する能力について試験した（図２８Ｂ）。Ｄ２１及びＤ２８に回収した免疫化マウス由来の血清を、ＥＬＩＳＡ法により完全なＳｐｉｋｅタンパク質に結合する能力について試験した（図２８Ｃ）。 マウスを、図２８Ａ～２８Ｃに記載されるように免疫化した。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価をＤ２８（図２９Ａ）及びＤ２１（図２９Ｂ）に測定した。Ｄ２１の血清中のＲＢＤ特異的抗体の絶対濃度の定量化を示す（図２９Ｃ）。 マウスを、図２８Ａ～２８Ｃに記載されるように免疫化した。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価をＤ２８（図２９Ａ）及びＤ２１（図２９Ｂ）に測定した。Ｄ２１の血清中のＲＢＤ特異的抗体の絶対濃度の定量化を示す（図２９Ｃ）。 マウスを、図２８Ａ～２８Ｃに記載されるように免疫化した。血清中のＲＢＤ特異的免疫グロブリン力価をＤ２８（図２９Ａ）及びＤ２１（図２９Ｂ）に測定した。Ｄ２１の血清中のＲＢＤ特異的抗体の絶対濃度の定量化を示す（図２９Ｃ）。 Ｄ１及びＤ２１に、３．ｉｇ ＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３．ｉｇ ＣｐＧ－ＣＡＲＴ又は３．ｉｇ ｃｔｒｌ ｍＲＮＡ＋３．ｉｇ ＣｐＧ－ＣＡＲＴをＩＶ又はＩＭでワクチン接種したマウスの脾細胞を、ワクチン接種後Ｄ１０５に回収し、ＲＢＤペプチドプール又は培地で１８時間インキュベートしたことを示すグラフである。刺激後、細胞内サイトカイン染色フローサイトメトリーによって、細胞をＩＦＮ、ＴＮＦ又はＩＬ－４産生について分析した。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣｐＧ－ＣＡＲＴ Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２ワクチンの安全性評価を示す。マウス（１群あたり６匹）に、ＰＢＳ、ＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ又は３ｕｇのＧＦＰ ｍＲＮＡとＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＣｐＧ、又はＣＡＲＴで製剤化した３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡと３ｕｇのＣｐＧを注射した。治療薬は、０日目（プライム）及び２１日目（ブースト）に、尾静脈（ＩＶ）又は筋肉（ＩＭ）に注射した。注射及び安全性測定のスケジュールを表す概略図（図３１Ａ）である。マウスの体重は、０日目（初回処置前）、１日目、２日目、４日目及び７日目に、ＩＭ（図３１Ｂ）及び、ＩＶ（図３１Ｃ）処置マウスについて測定した。白血球（ＷＢＣ）カウントは、１日目（図３１Ｄ）、２日目（図３１Ｅ）、及び４日目（図３１Ｆ）に評価した。データは対照群に対するパーセンテージを示した。サイトカインの測定のために１日目及び７日目に血清を回収した。２２日目及び２６日目に、１群あたり３匹のマウスを屠殺し、剖検評価及び全血球数を評価し、サイトカイン及び肝酵素の測定のために血清を採取した。ＩＰ１０を１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｇ）、及び７日目（プライム後１週間）（図３１Ｈ）に採取した血清で測定した。ＩＦαを１日目（Ｄ１プライム後）（図３１Ｉ）及び、７日目（プライム後１週間）（図３１Ｊ）に採取した血清で測定した。血清中のアラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）を２２日目（ブースト後のＤ１）（図３１Ｋ）及び２６日目（Ｄ５ブースト後）（図３１Ｌ）に血清で測定し、及び、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）を２２日目（ブースト後Ｄ１）（図３１Ｍ）及び、２６日目（ブースト後Ｄ５）（図３１Ｎ）の血清中にて測定した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。 ＣＡＲＴ保存安定性アッセイを示すグラフである。ＣＡＲＴは、Ｆｌｕｃ ｍＲＮＡを１０：１＋／－の比で製剤化した。これらの製剤は、ＲＴ、４℃又は－２０℃のいずれかで保存した。ＣＡＲＴ製剤を１１日間保存した後、試料を解凍し、尾静脈に注射した（マウスあたり５０ｕＬの総体積、５ｕｇのｍＲＮＡ）。同時に、ＣＡＲＴ／Ｆｌｕｃ ｍＲＮＡの新しい製剤を調製し、尾静脈に注射した。ルシフェラーゼ発現のレベルはＢＬＩ（単位：ｐ／ｓ）によって決定され、有効性を新たに製剤化したＣＡＲＴ／ｍＲＮＡと比較した。実験は１回行った。統計的有意性は一元配置分散分析によって評価された：Ｐ＞０．０５（ｎｓ）、Ｐ≦０．０５（＊）、Ｐ≦０．０１（＊＊）、Ｐ≦０．００１（＊＊＊）、Ｐ≦０．０００１（＊＊＊＊）。
本開示の様々な実施形態及び態様が本明細書に示され説明されるが、そのような実施形態及び態様が単なる例として提供されることは当業者に明らかである。当業者は、多数の変形形態、変更及び置換を、開示から逸脱することなく思い浮かべる。本明細書に記載される開示の実施形態に対する様々な代替物が、開示を実施する際に採用することができることを理解されたい。
文脈が別段の指示をしない限り、本明細書に記載される開示の様々な特徴を任意の組合せで使用することができることが具体的に意図される。さらに、本開示はまた、一部の実施形態において、本明細書に記載される任意の特徴又は特徴の組合せを除外又は省略することができることを企図する。説明するために、本明細書で、複合体が成分Ａ、Ｂ及びＣを有すると述べている場合、それは特にＡ、Ｂ若しくはＣのいずれか、又はそれらの組合せを、単独で又は任意の組合せで省略及び否認することができることを意図する。
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。したがって、例えば、「がん細胞」への言及は、複数のがん細胞を含む。他の例において、「核酸」又は「核酸」への言及は、複数の核酸分子、すなわち核酸を含む。
用語「約」は、特定の値を含む値の範囲を意味し、当業者は、特定の値と合理的に類似していると考える。実施形態において、約は、当該技術分野で一般的に許容される測定値を使用した標準偏差内を意味する。実施形態において、約は、特定の値の＋／－１０％に及ぶ範囲を意味する。実施形態において、約は、特定の値を意味する。
また本明細書で使用される場合、「及び／又は」は、関連する列挙された項目の１つ以上の任意の及び全ての可能な組合せ、並びに代替（「又は」）で解釈される場合の組合せの欠如を指し、包含する。
本明細書で使用される場合、用語「含む(ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ)」は、組成物及び方法が記載された要素を含むことを意味するが、他のものを排除するものではないことを意図する。本明細書で使用される場合、「本質的にからなる(ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ)」（及び文法的異形）という移行句は、記載された実施形態の記載された材料又はステップ、及び「基本的及び新規な特徴に実質的に影響を及ぼさないもの」を包含するものとして解釈されるべきである。したがって、用語「本質的にからなる」は、本明細書で使用される場合、「含む(ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ)」と同等であると解釈されるべきではない。「からなる(Ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ)」は、本明細書に開示される組成物を投与するための他の成分及び実質的な方法のステップの微量要素を超えて排除することを意味するものとする。これらの移行用語の各々によって定義される態様は、本開示の範囲内にある。
本明細書で使用される略語は、化学及び生物学的技術分野のそれらの従来の意味を有する。本明細書に記載される化学構造及び式は、化学で知られている化学原子価の標準的な規則に従って構築される。
置換基が左から右に書かれた従来の化学式によって特定される場合、それらは構造を右から左に書くことから生じる化学的に同一の置換基を等しく包含する、例えば、－ＣＨ２Ｏ－は、－ＯＣＨ２－と等価である。
本明細書で使用される場合、用語「オリゴマー」及び「ポリマー」は、複数の繰り返しサブユニットを有する化合物（例えば、重合モノマー）を指す。用語「コオリゴマー」又は「コポリマー」は、２つ以上の異なる残基（本明細書で互換的に使用されるモノマー単位又はモノマー）を含むオリゴマー又はポリマーを指す。オリゴマー中のモノマーの数は、一般に、ポリマー中のモノマーの数よりも少ない。したがって、一部の例において、オリゴマーは、１～約１０のモノマー、１～約２０のモノマー、１～約３０のモノマー、１～約４０のモノマー、１～約５０のモノマー、１～約１００のモノマー、１～約１５０のモノマー、１～約２００のモノマー、１～約２５０のモノマー、１～約３００のモノマー、１～約３５０個のモノマー、１～約４００個のモノマー、１～約４５０個のモノマー又は１～約５００個のモノマーの長さを有してもよい。一部の例において、オリゴマーは、約５００未満のモノマー、約４５０未満のモノマー、約４００未満のモノマー、約３５０未満のモノマー、約３００未満のモノマー、約２５０未満のモノマー、約２００未満のモノマー、約１５０未満のモノマー、約１００未満のモノマー、約５０個未満のモノマー、長さが約４０未満のモノマー、約３０未満のモノマー、約２０未満のモノマー、又は約１０個未満のモノマーの長さを有してもよい。ポリマーの文脈では、ポリマー中のモノマーの数は、一般に、オリゴマー中のモノマーの数よりも多い。したがって、一部の例において、ポリマーは、約５００～約１０００のモノマー、約５００～約２０００のモノマー、約５００～約３０００のモノマー、約５００～約４０００のモノマー、約５００～約５０００のモノマー、約５００～約６０００のモノマー、約５００～約７０００のモノマー、約５００～約８０００のモノマー、約５００～約９０００のモノマー、約５００～約１００００モノマー、又は１００００を超えるモノマー長を有してもよい。
用語「重合性モノマー」は、ポリマー化学の技術分野のその意味に従って使用され、ポリマーを形成するために他のモノマー分子（同一又は異なる他の重合性モノマーなどの）に化学的に共有結合し得る化合物を指す。
用語「ブロックコポリマー」は、その通常の意味に従って使用され、共有結合によって連結された重合モノマーの２つ以上の部分（例えば、ブロック）を指す。実施形態において、ブロックコポリマーは、ポリマーの繰り返しパターンである。実施形態において、ブロックコポリマーは、周期的（例えば、繰り返しパターン）配列中の２種以上のモノマーを含む。例えば、ジブロックコポリマーは、式：－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－であり、「Ｂ」は第１のサブユニットであり、「Ａ」は一緒に共有結合した第２のサブユニットである。したがって、トリブロックコポリマーは、３つの異なるブロックを有するコポリマーであり、そのうちの２つは同一であってもよく（例えば、－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－）又は３つ全てが異なり（例えば、－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－Ａ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｂ－Ｃ－Ｃ－Ｃ－Ｃ－Ｃ－）、「Ａ」は第１のサブユニットであり、「Ｂ」は第２のサブユニットであり、一緒に共有結合された第３のサブユニットである。
用語「アルキル」は、それ自体又は別の置換基の一部として、特に明記しない限り、直鎖（すなわち、非分枝）若しくは分枝鎖の炭素鎖（又は炭素）、又はそれらの組合せを意味し、完全に飽和していてもよく、一価又は多価不飽和であってもよく、一価、二価及び多価の基を含んでいてもよい。アルキルは、指定された数の炭素を含んでいてもよい（例えば、Ｃ１～Ｃ１０は１～１０個の炭素を意味する。）。アルキルは環化されていない鎖である。飽和炭化水素基の例としては、限定するものではないが、基、例えばメチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、メチル、例えば、ｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、ｎ－ヘプチル、ｎ－オクチルなどの相同体及び異性体などの基が挙げられる。不飽和アルキル基は、１つ以上の二重結合又は三重結合を有するものである。不飽和アルキル基の例としては、限定するものではないが、ビニル、２－プロペニル、クロチル、２－イソペンテニル、２－（ブタジエニル）、２，４－ペンタジエニル、３－（１，４－ペンタジエニル）、エチニル、１－及び３－プロピニル、３－ブチニル、並びに高級相同体及び異性体が挙げられる。アルコキシは、酸素リンカー（－Ｏ－）を介して分子の残りの部分に結合したアルキルである。アルキル部分は、アルケニル部分であってもよい。アルキル部分は、アルキニル部分であってもよい。アルキル部分は、完全飽和であってもよい。アルケニルは、１つ以上の二重結合に加えて、２つ以上の二重結合及び／又は１つ以上の三重結合を含んでもよい。アルキニルは、１つ以上の三重結合に加えて、２つ以上の三重結合及び／又は１つ以上の二重結合を含んでもよい。
用語「アルキレン」は、それ自体又は別の置換基の一部として、特に明記しない限り、アルキル、例示されるが限定されない、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－から生じた二価の基を意味する。典型的には、アルキル（又はアルキレン）基は１～２４個の炭素原子を有し、本明細書では１０個以下の炭素原子を有する基が好ましい。「低級アルキル」又は「低級アルキレン」は、より短い鎖状のアルキル基又はアルキレン基であり、一般に８個以下の炭素原子を有する。用語「アルケニレン」は、それ自体又は別の置換基の一部として、特に明記しない限り、アルケンから誘導される二価の基を意味する。
用語「ヘテロアルキル」は、それ自体又は別の用語と組み合わせて、特に明記しない限り、少なくとも１つの炭素原子及び少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｐ、Ｓｉ、及びＳ）を含む安定な直鎖若しくは分枝鎖、又はそれらの組合せを意味し、窒素原子及び硫黄原子は、任意選択的に酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は任意選択的に四級化されていてもよい。ヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ、又はＰ）は、ヘテロアルキル基の任意の内部位置又はアルキル基が分子の残りの部分に結合している位置に配置されてもよい。ヘテロアルキルは環化されていない鎖である。例として、－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ－ＣＨ３、－ＣＨ２－ＣＨ２－ＮＨ－ＣＨ３、－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ３、－ＣＨ２－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ２、－Ｓ（Ｏ）－ＣＨ３、－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｓ（Ｏ）２－ＣＨ３、－ＣＨ＝ＣＨ－Ｏ－ＣＨ３、－Ｓｉ（ＣＨ３）３、－ＣＨ２－ＣＨ＝Ｎ－ＯＣＨ３、－ＣＨ＝ＣＨ－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ３、及び－ＣＮが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、－ＣＨ２－ＮＨ－ＯＣＨ３及び－ＣＨ２－Ｏ－Ｓｉ（ＣＨ３）３のように、最大２個又は３個のヘテロ原子が連続していてもよい。ヘテロアルキル部分は、１つのヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含んでもよい。ヘテロアルキル部分は、２つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ、又はＰ）を含んでもよい。ヘテロアルキル部分は、３つの任意の異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ、又はＰ）を含んでもよい。ヘテロアルキル部分は、４つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ、又はＰ）を含んでもよい。ヘテロアルキル部分は、５つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ、又はＰ）を含んでもよい。ヘテロアルキル部分は、８つまでの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ、又はＰ）を含んでもよい。用語「ヘテロアルケニル」は、それ自体又は別の用語と組み合わせて、特に明記しない限り、少なくとも１つの二重結合を含むヘテロアルキルを意味する。ヘテロアルケニルは、任意選択的に、１つ以上の二重結合に加えて、２つ以上の二重結合及び／又は１つ以上の三重結合を含んでもよい。用語「ヘテロアルキニル」は、それ自体又は別の用語と組み合わせて、特に明記しない限り、少なくとも１つの三重結合を含むヘテロアルキルを意味する。ヘテロアルキニルは、任意選択的に、１つ以上の三重結合に加えて、２つ以上の三重結合及び／又は１つ以上の二重結合を含んでもよい。
同様に、用語「ヘテロアルキレン」は、それ自体又は別の置換基の一部として、特に明記しない限り、ヘテロアルキル、例示されるが限定されない、－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ２－及び－ＣＨ２－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＮＨ－ＣＨ２－から生じた二価の基を意味する。ヘテロアルキレン基について、ヘテロ原子はまた、鎖末端のいずれか又は両方を占めることができる（例えば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）。なおさらに、アルキレン及びヘテロアルキレン連結基について、連結基の式が書かれる方向によって、連結基の配向は暗示されない。例えば、式－Ｃ（Ｏ）２Ｒ’－は、－Ｃ（Ｏ）２Ｒ’－と－Ｒ’Ｃ（Ｏ）２－との両方を表す。上述のように、本明細書で使用される場合、ヘテロアルキル基として、ヘテロ原子を介して分子の残りの部分に結合されている基、例えば－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＯＲ’、－ＳＲ’及び／又はＳＯ２Ｒ’が挙げられる。「ヘテロアルキル」が記載され、続いて－ＮＲ’Ｒ’’などの特定のヘテロアルキル基が記載される場合、ヘテロアルキル及び－ＮＲ’Ｒ’’という用語は冗長でも相互に排他的でもないことが理解される。むしろ、明瞭さを加えるために特定のヘテロアルキル基が記載される。したがって、用語「ヘテロアルキル」は、本明細書において、－ＮＲ’Ｒ’’などの特定のヘテロアルキル基を除外するものと解釈されるべきではない。
用語「シクロアルキル」及び「ヘテロシクロアルキル」は、それ自体又は他の用語と組み合わせて、特に明記しない限り、それぞれ「アルキル」及び「ヘテロアルキル」の環状バージョンを意味する。シクロアルキル及びヘテロアルキルは芳香族ではない。さらに、ヘテロシクロアルキルについて、ヘテロ原子は、複素環が分子の残りの部分に結合されている位置を占めることができる。シクロアルキルの例として、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１－シクロヘキセニル、３－シクロヘキセニル、シクロヘプチルなどが挙げられる。ヘテロシクロアルキルの例としては、これらに限定されないが、１－（１，２，５，６－テトラヒドロピリジル）、１－ピペリジニル、２－ピペリジニル、３－ピペリジニル、４－モルホリニル、３－モルホリニル、テトラヒドロフラン－２－イル、テトラヒドロフラン－３－イル、テトラヒドロチエン－２－イル、テトラヒドロチエン－３－イル、１－ピペラジニル、２－ピペラジニルなどが挙げられる。「シクロアルキレン」及び「ヘテロシクロアルキレン」は、単独で又は別の置換基の一部として、それぞれシクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから生じた二価の基を意味する。
用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、それ自体又は別の置換基の一部として、特に明記しない限り、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」などの用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを含むことを意味する。例えば、「ハロ（Ｃ１～Ｃ４）アルキル」という用語は、限定するものではないが、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２－トリフルオロエチル、４－クロロブチル、３－ブロモプロピルなどを含む。
用語「アシル」は、特に明記しない限り、Ｒが置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである－Ｃ（Ｏ）Ｒを意味する。
用語「アリール」は、特に明記しない限り、多価不飽和、芳香族、炭化水素置換基を意味し、一緒に縮合されている（すなわち、縮合環アリール）又は共有結合されている単環若しくは多環（好ましくは１～３環）であってもよい。縮合環アリールは、一緒に縮合した複数の環を指し、縮合環の少なくとも１つはアリール環である。用語「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ又はＳなどの少なくとも１つのヘテロ原子を含むアリール基（又は環）を指し、窒素原子及び硫黄原子は任意選択的に酸化され、窒素原子は任意選択的に四級化される。したがって、用語「ヘテロアリール」は、縮合環ヘテロアリール基を含む（すなわち、一緒に縮合した複数の環を含み、縮合環の少なくとも１つは複素芳香環である。）。５，６－縮合環ヘテロアリーレンは、一緒に縮合した２つの環を指し、１つの環は５員を有し、他の環は６員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。同様に、６，６－縮合環ヘテロアリーレンは、一緒に縮合した２つの環を指し、１つの環は６員を有し、他の環は６員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。６，５－縮合環ヘテロアリーレンは、一緒に縮合した２つの環を指し、１つの環は６員を有し、他の環は５員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。ヘテロアリール基は、炭素原子又はヘテロ原子を通じて分子の残りの部分に結合することができる。アリール基及びヘテロアリール基の非限定的な例として、フェニル、ナフチル、ピロリル、ピラゾリル、ピリダジニル、トリアジニル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラジニル、プリニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、フリル、チエニル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾイル ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラン、イソベンゾフラニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾチオフェニル、イソキノリル、キノキサリニル、キノリル、１－ナフチル、２－ナフチル、４－ビフェニル、１－ピロリル、２－ピロリル、３－ピロリル、３－ピラゾリル、２－イミダゾリル、４－イミダゾリル、ピラジニル、２－オキサゾリル、４－オキサゾリル、２－フェニル－４－オキサゾリル、５－オキサゾリル、３－イソオキサゾリル、４－イソオキサゾリル、５－イソオキサゾリル、２－チアゾリル、４－チアゾリル、５－チアゾリル、２－フリル、３－フリル、２－チエニル、３－チエニル、２－ピリジル、３－ピリジル、４－ピリジル、２－ピリミジル、４－ピリミジル、５－ベンゾチアゾリル、プリニル、２－ベンゾイミダゾリル、５－インドリル、１－イソキノリル、５－イソキノリル、２－キノキサリニル、５－キノキサリニル、３－キノリル、及び６－キノリルが挙げられる。上記したアリール及びヘテロアリール環系の各々の置換基は、以下に記載される許容される置換基の群から選択される。「アリーレン」及び「ヘテロアリーレン」は、単独で又は別の置換基の一部として、それぞれアリール及びヘテロアリールから生じた二価の基を意味する。ヘテロアリール基置換基は、環ヘテロ原子窒素に－Ｏ－結合していてもよい。
簡潔にするために、用語「アリール」は、他の用語と組み合わせて使用される場合（例えば、アリールオキシ、アリールチオキシ、アリールアルキル）、上記で定義したアリール環及びヘテロアリール環の両方を含む。したがって、用語「アリールアルキル」は、アリール基が、炭素原子（例えば、メチレン基）が例えば酸素原子（例えば、フェノキシメチル、２－ピリジルオキシメチル、３－（１－ナフチルオキシ）プロピルなど）によって置き換えられたアルキル基を含むアルキル基に結合されている基（例えば、ベンジル、フェネチル、ピリジルメチルなど）を含むことを意味する。
記号「
Figure 2023535730000002
 」は、分子又は化学式の残りの部分への化学部分の結合点を示す。
用語「オキソ」は、本明細書で使用される場合、炭素原子に二重結合されている酸素を意味する。
用語「アルキルスルホニル」は、本明細書で使用される場合、式－Ｓ（Ｏ２）－Ｒ’［式中、Ｒ’は上記で定義されるようなアルキル基である。］を有する部分を意味する。Ｒ’は、特定の数の炭素を有していてもよい（例えば、「Ｃ１～Ｃ４アルキルスルホニル」）。
用語「アルキルアリーレン」は、アルキレン部分に共有結合したアリーレン部分（本明細書ではアルキレンリンカーともいう。）である。実施形態において、アルキルアリーレン基は、式：
Figure 2023535730000003
 を有する。
アルキルアリーレン部分は、アルキレン部分又はアリーレンリンカー（例えば、炭素２、３、４、又は６）上で、ハロゲン、オキソ、－Ｎ３、－ＣＦ３、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＣＨＯ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ２ＣＨ３、－ＳＯ３Ｈ、－ＯＳＯ３Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ５アルキル又は置換若しくは非置換の２～５員のヘテロアルキルで、（例えば、置換基で）置換されてもよい。実施形態において、アルキルアリーレンは非置換である。
上記の用語の各々（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、及び「ヘテロアリール」）は、示された基の置換及び非置換形態の両方を含む。基の種類ごとに好ましい置換基を以下に示す。
アルキル及びヘテロアルキル基（アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル、及びヘテロシクロアルケニルと呼ばれることが多い基を含む。）の置換基は、これらに限定されないが、－ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ－ＯＲ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＳＲ’、ハロゲン、－ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＣＯ２Ｒ’、－ＣＯＮＲ’Ｒ’’、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、－ＮＲ－Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、－ＮＲ－Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲＳＯ２Ｒ’、－ＮＲ’ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＯＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’ＮＲ’’’Ｒ’’’’、－ＣＮ、－ＮＯ２、－ＮＲ’ＳＯ２Ｒ’’、－ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ’’、－ＮＲ’Ｃ（Ｏ）－ＯＲ’’、－ＮＲ’ＯＲ’’から選択される様々な基の１つ以上であってもよく、０から（２ｍ’＋１）（ここでｍ’はこのような基の炭素原子の総数である。）の範囲の数である。Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、及びＲ’’’’は、それぞれ好ましくは独立に、水素、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール（例えば、１～３個のハロゲンで置換されたアリール）、置換若しくは非置換のヘテロアリール、置換若しくは非置換のアルキル、アルコキシ、若しくはチオアルコキシ基又はアリールアルキル基を指す。本明細書に記載される化合物が２つ以上のＲ基を含む場合、例えば、Ｒ基の各々は、それぞれＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’’基がこれらの基の２つ以上が存在する場合、それぞれＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’基であるように独立に選択される。Ｒ’とＲ’’が同じ窒素原子に結合している場合、それらは窒素原子と組み合わせて４、５、６又は７員環を形成することができる。例えば、－ＮＲ’Ｒ’’は、限定するものではないが、１－ピロリジニル及び４－モルホリニルを含む。置換基に関する上記の考察から、当業者は、用語「アルキル」が、水素基以外の基、例えばハロアルキル（例えば、－ＣＦ３及び－ＣＨ２ＣＦ３）及びアシル（例えば、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、－Ｃ（Ｏ）ＣＦ３、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣＨ３など）に結合された炭素原子を含む基を含むことを意味することを理解する。
アルキル基について記載した置換基と同様に、アリール基及びヘテロアリール基の置換基は様々であり、例えば、ゼロから芳香環系上の開原子価の総数までの範囲の数で、－ＯＲ’、－ＮＲ’Ｒ’’、－ＳＲ’、ハロゲン、－ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、－Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＣＯ２Ｒ’、－ＣＯＮＲ’Ｒ’’、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、－ＮＲ’－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、－ＮＲ－Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、－ＮＲ－Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、－Ｓ（Ｏ）Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、－Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲＳＯ２Ｒ’、－ＮＲ’ＮＲ’’Ｒ’’’、－ＯＮＲ’Ｒ’’、－ＮＲ’Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’ＮＲ’’’Ｒ’’’’、－ＣＮ、－ＮＯ２、－Ｒ’、－Ｎ３、－ＣＨ（Ｐｈ）２、フルオロ（Ｃ１～Ｃ４）アルコキシ、及びフルオロ（Ｃ１～Ｃ４）アルキル、－ＮＲ’ＳＯ２Ｒ’’、－ＮＲ’Ｃ（Ｏ）Ｒ’’、－ＮＲ’Ｃ（Ｏ）－ＯＲ’’、－ＮＲ’ＯＲ’’から選択され、
ここでＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、及びＲ’’’’は、好ましくは、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから独立に選択される。本明細書に記載される化合物が２つ以上のＲ基を含む場合、例えば、各Ｒ基は、それぞれＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’’基の１つ以上が存在する場合、それぞれＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’基であるように独立に選択される。
環の置換基（例えば、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン又はヘテロアリーレン）は、環の特定の原子上ではなく、環上の置換基（一般に浮遊置換基と呼ばれる。）として描写されてもよい。そのような場合、置換基は、（化学的原子価の規則に従う）環原子のいずれかに結合してもよく、縮合環又はスピロ環式環の場合、縮合環又はスピロ環式環の１つの員に関連するものとして描写される置換基（単一環上の浮遊置換基）は、縮合環又はスピロ環式環のいずれかの上の置換基（複数の環上の浮遊置換基）であってもよい。置換基が環に結合しているが、特定の原子（浮遊置換基）ではなく、置換基の添え字が１より大きい整数である場合、複数の置換基は、同じ原子、同じ環、異なる原子、異なる縮合環、異なるスピロ環上にあってもよく、各置換基は任意選択的に異なっていてもよい。分子の残りの部分への環の結合点が単一の原子（浮遊置換基）に限定されない場合、結合点は環の任意の原子であってもよく、縮合環又はスピロ環式環の場合、化学的原子価の規則に従いながら、任意の縮合環又はスピロ環式環の任意の原子である。環、縮合環、又はスピロ環式環が１つ以上の環ヘテロ原子を含み、環、縮合環、又はスピロ環式環が１つを超える浮遊置換基（分子の残りの部分への結合点を含むが、これらに限定されない。）と示される場合、浮遊置換基はヘテロ原子に結合してもよい。環ヘテロ原子が浮遊置換基を有する構造又は式において、１つ以上の水素（例えば、環原子に対する２つの結合及び水素に対する３番目の結合を有する環窒素。）に結合していることが示される場合、ヘテロ原子が浮遊置換基に結合している場合、置換基は、化学的原子価の規則に従いながら、水素を置き換えることが理解される。
２個以上の置換基は、任意選択的に結合して、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキル基を形成してもよい。このようないわゆる環形成置換基は、典型的には、必ずしもではないが、環状塩基構造に結合して見出される。実施形態において、環形成置換基は、塩基構造の隣接する員に結合されている。例えば、環状塩基構造の隣接する員に結合された２つの環形成置換基は、縮合環構造を作り出す。別の実施形態において、環形成置換基は、塩基構造の単一の員に結合されている。例えば、環状塩基構造の単一の員に結合された２つの環形成置換基は、スピロ環構造を作り出す。さらに別の実施形態において、環形成置換基は、塩基構造の隣接していない員に結合されている。
アリール環又はヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基の２つは、任意選択的に、式－Ｔ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＲＲ’）ｑ－Ｕ－［式中、Ｔ及びＵは独立に－ＮＲ－、－Ｏ－、－ＣＲＲ’－又は単結合であり、ｑは０～３の整数である。］の環を形成してもよい。代替的に、アリール環又はヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基の２つは、任意選択的に、式Ａ－（ＣＨ２）ｒ－Ｂ－［式中、Ａ及びＢは独立に－ＣＲＲ’－、－Ｏ－、－ＮＲ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’－又は単結合であり、ｒは１～４の整数である。］の置換基で置き換えられてもよい。そのように形成された新しい環の単結合の１つは、任意選択的に二重結合で置き換えられてもよい。代替的に、アリール環又はヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基の２つは、任意選択的に、式－（ＣＲＲ’）ｓ－Ｘ’－（Ｃ’’Ｒ’’Ｒ’’’）ｄ－［式中、ｓとｄとは独立に０から３の整数であり、Ｘ’は－Ｏ－、－ＮＲ’－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－又はＳ（Ｏ）２ＮＲ’－である。］の置換基で置き換えられてもよい。置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’及びＲ’’’は、好ましくは、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、及び置換若しくは非置換のヘテロアリールから独立に選択される。
本明細書で使用される場合、用語「ヘテロ原子」又は「環ヘテロ原子」は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）、及びケイ素（Ｓｉ）を含むことを意味する。
「置換基」は、本明細書で使用される場合、以下の部分から選択される基を意味する：
（Ａ）オキソ、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、－Ｎ３、非置換アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、非置換ヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、非置換シクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、非置換ヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、非置換アリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール又はフェニル）、又は非置換ヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）、及び
（Ｂ）アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、ヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、シクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、ヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、アリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール、又はフェニル）、ヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）、以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換され：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、－Ｎ３、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール又はフェニル）、又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）、及び
（ｉｉ）アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、ヘテロアルキル（例、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、シクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、ヘテロシクロアルキル（例、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、アリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール、又はフェニル）、ヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）、以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換され：
（ａ）オキソ、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、－Ｎ３、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール又はフェニル）、又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）、及び
（ｂ）アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、ヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、シクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、ヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、アリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール、又はフェニル）、ヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）、以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換され：
オキソ、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、－Ｎ３、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル、又は２～４員のヘテロアルキル）、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、又はＣ５～Ｃ６シクロアルキル）、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル、又は５～６員のヘテロシクロアルキル）、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール又はフェニル）、又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール、又は５～６員のヘテロアリール）。
「サイズ限定置換基（ｓｉｚｅ－ｌｉｍｉｔｅｄｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ）」又は「サイズ限定置換基（ｓｉｚｅ－ｌｉｍｉｔｅｄｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ ｇｒｏｕｐ）」は、本明細書で使用される場合、「置換基」について上述した全ての置換基から選択される基を意味し、各置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキルは置換若しくは非置換の２～２０員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ８シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３～８員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のアリールは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリールであり、各置換若しくは非置換のヘテロアリールは置換若しくは非置換の５～１０員のヘテロアリールである。
「低級置換基」又は「低級置換基」は、本明細書で使用される場合、「置換基」について上述した全ての置換基から選択される基を意味し、各置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ８アルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキルは置換若しくは非置換の２～８員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ７シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３～７員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のアリールは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリールであり、各置換若しくは非置換のヘテロアリールは置換若しくは非置換の５～９員のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、本明細書の化合物に記載される各置換基は、少なくとも１つの置換基で置換されている。より詳細には、一部の実施形態において、本明細書の化合物に記載される各置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレンは、少なくとも１つの置換基で置換されている。他の実施形態において、これらの基の少なくとも１つ又は全ては、少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換されている。他の実施形態において、これらの基の少なくとも１つ又は全ては、少なくとも１つの低級置換基で置換されている。
本明細書に記載される化合物の他の実施形態において、各置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキルは置換若しくは非置換の２～２０員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ８シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３～８員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のアリールは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリールであり、並びに／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリールは置換若しくは非置換の５～１０員のヘテロアリールであってもよい。本明細書に記載される化合物の実施形態において、各置換若しくは非置換のアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ２０アルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換の２～２０員のヘテロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ８シクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換若しくは非置換の３～８員のヘテロシクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のアリーレンは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリーレンであり、並びに／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリーレンは置換若しくは非置換の５～１０員のヘテロアリーレンである。
実施形態において、各置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ８アルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキルは置換若しくは非置換の２～８員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ７シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３～７員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のアリールは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリールであり、並びに／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリールは置換若しくは非置換の５～９員のヘテロアリールである。実施形態において、各置換若しくは非置換のアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ８アルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換の２～８員のヘテロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ７シクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換若しくは非置換の３～７員のヘテロシクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のアリーレンは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリーレンであり、並びに／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリーレンは置換若しくは非置換の５～９員のヘテロアリーレンである。実施形態において、化合物は、本明細書に記載される化学種である。
実施形態において、置換又は非置換の部分（例えば、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、及び／又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン）は、非置換である（例えば、それぞれ、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、非置換のアルキレン、非置換のヘテロアルキレン、非置換のシクロアルキレン、非置換のヘテロシクロアルキレン、非置換のアリーレン、及び／又は非置換のヘテロアリーレンである。）。実施形態において、置換又は非置換の部分（例えば、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、及び／又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン）は、置換されている（例えば、それぞれ、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレンである。）。
実施形態において、置換部分（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレン）は、少なくとも１つの置換基で置換され、置換部分が複数の置換基で置換されている場合、それぞれの置換基は、任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、置換部分が複数の置換基で置換されている場合、各置換基は異なる。
実施形態において、置換部分（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレン）は、少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換され、置換部分が複数のサイズ限定置換基で置換されている場合、それぞれのサイズ限定置換基は、任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、置換部分が複数のサイズ限定置換基で置換されている場合、各サイズ限定置換基は異なる。
実施形態において、置換部分（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレン）は、少なくとも１つの低級置換基で置換され、置換部分が複数の低級置換基で置換されている場合、それぞれの低級置換基は、任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、置換部分が複数の低級置換基で置換されている場合、各低級置換基は異なる。
実施形態において、置換部分（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレン）は、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換され、置換部分が置換基、サイズ限定置換基及び低級置換基から選択れる複数の基で置換されている場合、各置換基、サイズ限定置換基及び又は低級置換基は、任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、置換部分が置換基、サイズ限定置換基、及び低級置換基から選択される複数の基で置換されている場合、各置換基、サイズ限定置換基、及び／又は低級置換基は異なる。
本開示のある特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心又はキラル中心）又は二重結合、鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、互変異性体、幾何異性体、絶対立体化学の観点から、アミノ酸については（Ｒ）－若しくは（Ｓ）－又は（Ｄ）－若しくは（Ｌ）－として定義されてもよい立体異性形態を有し、個々の異性体は、本開示の範囲内に包含される。本開示の化合物は、当技術分野で、合成及び／又は単離するには不安定すぎることが知られているものを含まない。本開示は、ラセミ体及び光学的に純粋な形態の化合物を含むことを意味する。光学活性な（Ｒ）－及び（Ｓ）－、又は（Ｄ）－及び（Ｌ）－異性体は、キラルシントン又はキラル試薬を使用して調製する又は従来の技術を使用して分割することができる。本明細書に記載される化合物がオレフィン結合又は他の幾何学的不斉中心を含む場合、別段の定めがない限り、化合物はＥ及びＺ幾何異性体の両方を含むことが意図される。
本明細書で使用される場合、用語「異性体」は、同じ数及び種類の原子を有し、したがって同じ分子量を有するが、原子の構造配置又は配置に関して異なる化合物を指す。
用語「互変異性体」は、本明細書で使用される場合、平衡状態で存在し、ある異性体形態から別の異性体形態に容易に変換される２つ以上の構造異性体の１つを指す。
本開示のある特定の化合物が互変異性体形態で存在し得ることは当業者に明らかであり、化合物の全てのこのような互変異性形態は本開示の範囲内にある。
特に明記しない限り、本明細書に描写される構造は、構造の全ての立体化学的形態、すなわち、各非対称中心のＲ及びＳ構成を含むことも意味する。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学的異性体並びに鏡像異性体及びジアステレオマー混合物は、開示の範囲内にある。
特に明記しない限り、本明細書に描写される構造は、１つ以上の同位体富化原子の存在においてのみ異なる化合物を含むことも意味する。例えば、重水素又はトリチウムによる水素の置き換え、又は１３Ｃ－若しくは１４Ｃ－富化炭素による炭素の置き換えを除いて、本発明の構造を有する化合物は、本開示の範囲内にある。
本開示の化合物はまた、そのような化合物を構成する原子の１つ以上において、不自然な割合の原子同位体を含有してもよい。例えば、化合物は、例えばトリチウム（３Ｈ）、ヨウ素１２５（１２５Ｉ）、又は炭素１４（１４Ｃ）などの放射性同位元素で放射標識されていてもよい。本開示の化合物の全ての同位体変形形態は、放射性であるか否かにかかわらず、本開示の範囲に包含される。
代替物が、出願全体を通して、例えば、２つ以上の可能なアミノ酸を含む各アミノ酸位置をマーカッシュ群で記載されていることに留意されたい。マーカッシュ群の各メンバーは別々に考慮されるべきであり、それによって別の実施形態を含み、マーカッシュ群は単一の単位として読まれるべきではないことが特に企図される。
本明細書で使用される場合、用語「バイオコンジュゲート」及び「バイオコンジュゲートリンカー」は、バイオコンジュゲート反応性基又はバイオコンジュゲート反応性部分の原子又は分子間に生じる会合を指す。会合は、直接的又は間接的であってもよい。例えば、本明細書で提供される第１のバイオコンジュゲート反応性基間のコンジュゲート（例えば、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド、又は－マレイミド）及び第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、スルフヒドリル、硫黄含有アミノ酸、アミン、アミン側鎖含有アミノ酸、又はカルボキシレート）は、例えば、共有結合又はリンカー（例えば、第２のリンカーの第１のリンカー）によって直接的であってもよく、又は例えば、非共有結合（例えば、静電相互作用（例えば、イオン結合、水素結合、ハロゲン結合）、ファンデルワールス相互作用（例えば、双極子－双極子、双極子－誘起双極子、ロンドン分散）、環スタッキング（パイ効果）、疎水性相互作用など）によって間接的であってもよい。実施形態において、バイオコンジュゲート又はバイオコンジュゲートリンカーは、求核置換（例えば、アミン及びアルコールとハロゲン化アシルとの反応、活性エステルの反応）、求電子置換（例えば、エナミン反応）及び炭素－炭素及び炭素－ヘテロ原子多重結合への付加（例えば、マイケル反応、ディールス－アルダー付加）を含むが、これらに限定されないバイオコンジュゲート化学（すなわち、２つのバイオコンジュゲート反応性基の会合）を使用して形成される。これら及び他の有用な反応は、例えば、３月、ＡＤＶＡＮＣＥＤ ＯＲＧＡＮＩＣ ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ、第３版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８５；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ、ＢＩＯＣＯＮＪＵＧＡＴＥ ＴＥＣＨＮＩＱＵＥＳ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、１９９６；及びＦｅｅｎｅｙら、ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ ＯＦ ＰＲＯＴＥＩＮＳ；Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｅｒｉｅｓ、第１９８巻、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．、１９８２に検討されている。実施形態において、第１のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、マレイミド部分）は、第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、スルフヒドリル）に共有結合している。実施形態において、第１のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、ハロアセチル部分）は、第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、スルフヒドリル）に共有結合している。実施形態において、第１のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、ピリジル部分）は、第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、スルフヒドリル）に共有結合している。実施形態において、第１のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド部分）は、第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えばアミン）に共有結合している。実施形態において、第１のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、マレイミド部分）は、第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、スルフヒドリル）に共有結合している。実施形態において、第１のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、－スルホ－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド部分）は、第２のバイオコンジュゲート反応性基（例えば、アミン）に共有結合している。
本明細書のバイオコンジュゲート化学に使用される有用なバイオコンジュゲート反応性部分として、例えば：
（ａ）以下に限定されないが、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル、Ｎ－ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル、酸ハロゲン化物、アシルイミダゾール、チオエステル、ｐ－ニトロフェニルエステル、アルキル、アルケニル、アルキニル及び芳香族エステルを含むカルボキシル基及びその種々の誘導体；
（ｂ）エステル、エーテル、アルデヒドなどに変換され得るヒドロキシル基；
（ｃ）ハロゲン化物が後に求核性基、例えばアミン、カルボン酸アニオン、チオールアニオン、カルバニオン又はアルコキシドイオンで置換され、それによってハロゲン原子の部位に新しい基の共有結合をもたらすことができるハロアルキル基；
（ｄ）ディールス－アルダー反応に関与することができるジエノフィル基、例えば、マレイミド（ｍａｌｅｉｍｉｄｏ）基又はマレイミド（ｍａｌｅｉｍｉｄｅ）基；
（ｅ）カルボニル誘導体、例えばイミン、ヒドラゾン、セミカルバゾン若しくはオキシムの形成を介して、又はグリニャール付加若しくはアルキルリチウム付加などの機序を介して、その後の誘導体化が可能となるようなアルデヒド基又はケトン基；
（ｆ）例えばスルホンアミドを形成するアミンとのその後の反応のためのハロゲン化スルホニル基；
（ｇ）ジスルフィドに変換され、ハロゲン化アシルと反応する又は金などの金属に結合する又はマレイミドと反応することができるチオール基；
（ｈ）例えば、アシル化、アルキル化又は酸化することができるアミン又はスルフヒドリル基（例えば、システイン中に存在する。）；
（ｉ）例えば、環化付加、アシル化、マイケル付加などを受けることができるアルケン；
（ｊ）例えば、アミン及びヒドロキシル化合物と反応することができるエポキシド；
（ｋ）核酸の合成に有用なホスホロアミダイト及び他の標準的な官能基；
（ｌ）金属酸化ケイ素結合；
（ｍ）例えば、リン酸ジエステル結合を形成するための反応性リン基（例えば、ホスフィン）への金属結合；
（ｎ）銅触媒環化付加クリックケミストリーを使用してアルキンにカップリングされたアジド；及び
（ｏ）アビジン又はストレパビジンと反応して、アビジン－ビオチン複合体又はストレプトアビジン－ビオチン複合体を形成することができるビオチンコンジュゲートが挙げられる。
バイオコンジュゲート反応性基は、本明細書に記載されるコンジュゲートの化学的安定性に関与しない、又は干渉しないように選択することができる。代替的に、反応性官能基は、保護基の存在によって架橋反応に関与することから保護することができる。実施形態において、バイオコンジュゲートは、不飽和結合、例えばマレイミド、及びスルフヒドリル基との反応に由来する分子実体を含む。
「アナログ（ａｎａｌｏｇ）」、「アナログ（ａｎａｌｏｇｕｅ）」、又は「誘導体」は、化学及び生物学におけるその明白な通常の意味に従って使用され、例えば、ある原子を別の元素の原子で置き換える場合、又は特定の官能基の存在下で、又はある官能基を別の官能基で置き換える場合、又は参照化合物の１つ以上のキラル中心の絶対立体化学において、別の化合物（すなわち、いわゆる「参照」化合物）と構造的に類似しているが、組成が異なる化合物を指す。したがって、アナログは、機能及び外観において類似又は比較可能であるが、構造又は起源において参照化合物ではない化合物である。
用語「１つの（ａ）」又は「１つの（ａｎ）」は、本明細書で使用される場合、１つ以上を意味する。加えて、「ａ［ｎ］で置換された」という語句は、本明細書で使用される場合、特定の基が、指名された置換基のいずれか又は全ての１つ以上で置換されていてもよいことを意味する。例えば、アルキル基又はヘテロアリール基などの基が「非置換のＣ１～Ｃ２０アルキル、又は非置換の２～２０員のヘテロアルキルで置換されている」場合、基は１つ以上の非置換Ｃ１～Ｃ２０アルキル、及び／又は１つ以上の非置換２～２０員のヘテロアルキルを含んでいてもよい。
さらに、部分がＲ置換基で置換されている場合、その基は「Ｒ置換」と称されることがある。部分がＲ置換されている場合、部分は少なくとも１つのＲ置換基で置換され、各Ｒ置換基は任意選択的に異なる。特定のＲ基が化学属（式（Ｉ）など）の記載に存在する場合、その特定のＲ基の各出現を区別するために、ローマ字のアルファベット記号が使用されてもよい。例えば、複数のＲ１３置換基が存在する場合、各Ｒ１３置換基は、Ｒ１３Ａ、Ｒ１３Ｂ、Ｒ１３Ｃ、Ｒ１３Ｄなどと区別されてもよく、Ｒ１３Ａ、Ｒ１３Ｂ、Ｒ１３Ｃ、Ｒ１３Ｄなどの各々は、Ｒ１３の定義の範囲内に、任意選択的に異なって定義される。
さらに、部分がＲ置換基で置換されている場合、その基は「Ｒ置換」と称されることがある。部分がＲ置換されている場合、部分は少なくとも１つのＲ置換基で置換され、各Ｒ置換基は任意選択的に異なる。特定のＲ基が化学属（式（Ｉ）など）の記載に存在する場合、その特定のＲ基の各出現を区別するために、ローマ字のアルファベット記号が使用されてもよい。例えば、複数のＲ２０１置換基が存在する場合、各Ｒ２０１置換基は、Ｒ２０１Ａ、Ｒ２０１Ｂ、Ｒ２０１Ｃ、Ｒ２０１Ｄなどと区別されてもよく、Ｒ２０１Ａ、Ｒ２０１Ｂ、Ｒ２０１Ｃ、Ｒ２０１Ｄなどの各々は、Ｒ２０１の定義の範囲内に、任意選択的に異なって定義される。
用語「求核性部分」は、１つ以上の電子（例えば、２個）を求電子剤に供与することができる化学種又は官能基を指す。実施形態において、求核性部分は、化学反応において求電子剤に電子を供与して結合を形成することができる化学種又は官能基を指す。
用語「求電子部分」は、１つ以上の電子（例えば、２個）を受け取ることができる化学種又は官能基を指す。実施形態において、求電子性部分は、空軌道を有し、したがって化学反応において結合を形成するために電子を受け入れることができる化学種又は官能基を指す。
用語「オリゴグリコール部分」は、一般式：Ｒ４００－Ｏ－（ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ）ｎ３００－
Figure 2023535730000004
 ［式中、Ｒ４００はＨ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｎ３００は１以上の整数である。］を有する化学的実体を指す。一部の例では、Ｒ４００はＨ又はアルキルである。
本開示の化合物の説明は、当業者に公知の化学結合の原理によって限定される。したがって、基がいくつかの置換基の１つ以上によって置換され得る場合、そのような置換は、化学結合の原理に従い、本質的に不安定ではない、及び／又は水性、中性、並びにいくつかの既知の生理学的条件などの周囲条件下で不安定である可能性が高いと当業者に知られている化合物を与えるように選択される。例えば、ヘテロシクロアルキル又はヘテロアリールは、当業者に公知の化学結合の原理に従って、環ヘテロ原子を介して、分子の残りの部分に結合され、それによって本質的に不安定な化合物を回避する。
用語「薬学的に許容される塩」は、本明細書に記載される化合物上に見出される特定の置換基に応じて、比較的無毒性の酸又は塩基で調製される活性化合物の塩を含むことを意味する。本開示の化合物が比較的酸性の官能基を含む場合、塩基付加塩は、そのような化合物の中性形態を、ニート又は適切な不活性溶媒中で十分な量の所望の塩基と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩の例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ塩、若しくはマグネシウム塩、又は類似の塩が挙げられる。本開示の化合物が比較的塩基性の官能基を含む場合、酸付加塩は、そのような化合物の中性形態を、ニート又は適切な不活性溶媒中で十分な量の所望の酸と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の例として、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、硫酸、一水素硫酸、ヨウ化水素酸、又は亜リン酸などに由来するものが挙げられ、並びに比較的毒性のない有機酸に由来する塩、例えば酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、シュウ酸、メタンスルホン酸などが挙げられる。また、アルギニン酸塩などのアミノ酸の塩、及びグルクロン酸又はガラクツノール酸などの有機酸の塩なども含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９７７、６６、１～１９頁を参照のこと。）。本開示のある特定の化合物は、化合物を塩基性又は酸付加塩のいずれかに変換することを可能にする塩基性及び酸性官能基の両方を含有する。
したがって、本開示の化合物は、薬学的に許容される酸との塩などとして存在してもよい。本開示は、このような塩を含む。このような塩の非限定的な例として、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩（例えば、（＋）－酒石酸塩、（－）－酒石酸塩、又はラセミ混合物を含むそれらの混合物）、コハク酸塩、安息香酸塩、及びアミノ酸との塩、例えばグルタミン酸塩、並びに第四級アンモニウム塩（例えば、ヨウ化メチル、ヨウ化エチルなど）が挙げられる。これらの塩は、当業者に公知の方法により調製することができる。
化合物の中性形態は、好ましくは、塩を塩基又は酸と接触させ、従来の様式で親化合物を単離することによって再生される。化合物の親形態は、極性溶媒への溶解性などのある特定の物理的特性において様々な塩形態と異なっていてもよい。
塩形態に加えて、本開示は、プロドラッグ形態である化合物を提供する。本明細書に記載される化合物のプロドラッグは、本開示の化合物を提供する生理学的条件下で、容易に化学変化を受ける化合物である。本明細書に記載される化合物のプロドラッグは、投与後にインビボで変換され得る。さらに、プロドラッグは、例えば、適切な酵素又は化学試薬と接触した場合などのエクスビボ環境における化学的又は生化学的方法によって本開示の化合物に変換することができる。
本開示のある特定の化合物は、非溶媒和形態及び水和形態を含む溶媒和形態で存在することができる。一般に、溶媒和形態は非溶媒和形態と同等であり、本開示の範囲に包含される。本開示のある特定の化合物は、複数の結晶又は非晶質形態で存在することができる。一般に、全ての物理的形態は、本開示によって企図される使用について等価であり、本開示の範囲内にあることが意図される。
他に定義されない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎら、ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ ＯＦ ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ ＡＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＢＩＯＬＯＧＹ、第２版、Ｊ． Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ １９９４）；Ｓａｍｂｒｏｏｋら、ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＣＬＯＮＩＮＧ、Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ １９８９）を参照されたい。本明細書に記載されるものと類似又は同等の任意の方法、デバイス及び材料を、本開示の実施に使用することができる。以下の定義は、本明細書で頻繁に使用されるある特定の用語の理解を容易にするために提供され、本開示の範囲を限定することを意図するものではない。
「核酸」は、一本鎖、二本鎖若しくは多本鎖形態のいずれかのデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチド並びにそれらのポリマー、又はそれらの相補体を指す。「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」、「オリゴ」などの用語は、通常及び通例の意味で、ヌクレオチドの線状配列を指す。用語「ヌクレオチド」は、通常及び慣習的な意味で、ポリヌクレオチドの単一単位、すなわちモノマーを指す。ヌクレオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、又はそれらの修飾バージョンであり得る。本明細書で企図されるポリヌクレオチドの例として、一本鎖及び二本鎖ＤＮＡ、一本鎖及び二本鎖ＲＮＡ、並びに一本鎖及び二本鎖ＤＮＡとＲＮＡとの混合物を有するハイブリッド分子が挙げられる。核酸の例、例えば本明細書で企図されるポリヌクレオチドとして、任意のタイプのＲＮＡ、例えばメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、低干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、トランス活性化ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）、プラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）、ミニサークルＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ（ｇＮＤＡ）、及びそれらの任意の断片が挙げられる。ポリヌクレオチドの文脈における用語「二重鎖」は、通常及び慣習的な意味で、二本鎖性を指す。核酸は直鎖状又は分岐状である可能性がある。例えば、核酸はヌクレオチドの直鎖であり得、又は核酸は分岐することができ、例えば、核酸がヌクレオチドの１つ以上のアーム又は分岐を有するようにする。任意選択的に、分岐核酸は、デンドリマーなどの高次構造を形成するために繰り返し分岐される。
核酸は、例えばホスホチオエート骨格を有する核酸を含み、１つ以上の反応性部分を含むことができる。本明細書で使用される場合、反応性部分という用語は、共有結合、非共有結合又は他の相互作用を介して、別の分子と反応することができる任意の基、例えば核酸又はポリペプチドを含む。例として、核酸は、共有結合、非共有結合又は他の相互作用を介して、タンパク質又はポリペプチド上のアミオ酸と反応するアミノ酸反応性部分を含むことができる。
この用語はまた、既知のヌクレオチドアナログ又は修飾された骨格残基若しくは連結を含有する核酸を包含し、それらは合成的、天然に存在する、及び天然に存在せず、参照核酸と同様の結合特性を有し、参照ヌクレオチドと類似の方法で代謝される。このようなアナログの例として、限定するものではないが、例えば、ホスホロアミデート、ホスホロジアミデート、ホスホロチオエート（リン酸塩中の酸素を置き換える二重結合硫黄を有するホスホチオエートとしても知られる）、ホスホロジチオエート、ホスホノカルボン酸、ホスホノカルボン酸、ホスホノ酢酸、ホスホノギ酸、メチルホスホネート、ホスホン酸ホウ素、又はＯ－メチルホスホロアミダイト結合を含むホスホジエステル誘導体（Ｅｃｋｓｔｅｉｎ、ＯＬＩＧＯＮＵＣＬＥＯＴＩＤＥＳ ＡＮＤ ＡＮＡＬＯＧＵＥＳ：Ａ ＰＲＡＣＴＩＣＡＬ ＡＰＰＲＯＡＣＨ、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓを参照のこと。）並びに５－メチルシチジン又はシュードウリジンなどのヌクレオチド塩基への修飾並びにペプチド核酸骨格及び連結が挙げられる。他の類似体核酸として、正の骨格を有するもの、非イオン性骨格、修飾糖、及び非リボース骨格（例えばホスホロジアミデートモルホリノオリゴ又は当該技術分野において公知のロック核酸（ＬＮＡ））が挙げられ、米国特許第５，２３５，０３３号及び第５，０３４，５０６号、及び第６章及び第７章、ＡＳＣ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ ５８０、ＣＡＲＢＯＨＹＤＲＡＴＥ ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮＳ ＩＮ ＡＮＴＩＳＥＮＳＥ ＲＥＳＥＡＲＣＨ、Ｓａｎｇｈｕｉ＆Ｃｏｏｋ編を含む。１つ以上の炭素環糖を含む核酸も、核酸の１つの定義に含まれる。リボースリン酸骨格の修飾は、様々な理由、例えば、生理学的環境における、又はバイオチップ上のプローブとして、そのような分子の安定性及び半減期を増加させるために行われてもよい。天然に存在する核酸及びアナログの混合物を製造することができる。代替的に、異なる核酸アナログの混合物、及び天然に存在する核酸及びアナログの混合物が作製されてもよい。実施形態において、ＤＮＡにおけるヌクレオチド間連結は、ホスホジエステル、ホスホジエステル誘導体、又は両方の組合せである。
核酸は、非特異的配列を含むことができる。本明細書で使用される場合、「非特異的配列」という用語は、任意の他の核酸配列と相補的であるように設計されていない、又は部分的にのみ相補的である一連の残基を含む核酸配列を指す。例として、非特異的核酸配列は、細胞又は生物と接触したときに阻害核酸として機能しない核酸残基の配列である。「阻害性核酸」とは、標的核酸（例えばタンパク質に翻訳可能なｍＲＮＡ）に結合し、標的核酸（例えばＤＮＡからのｍＲＮＡ）の転写を減少させる、又は標的核酸（例えばｍＲＮＡ）の翻訳を減少させる、又は転写物スプライシング（一本鎖モルホリノオリゴ）を改変することができる核酸（例えばＤＮＡ、ＲＮＡ、ヌクレオチドアナログのポリマー）である。実施形態において、核酸はＲＮＡ（例えばｍＲＮＡ）である。実施形態において、核酸は１０～１００，０００塩基長である。実施形態において、核酸は５０及び１０，０００塩基長である。実施形態において、核酸は５０及び５，０００塩基長である。実施形態において、核酸は５０～１，０００塩基長である。
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、本明細書において、アミノ酸残基のポリマーを指すために互換的に使用され、ポリマーは、アミノ酸から構成されない部分にコンジュゲートされてもよい。この用語は、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工化学的模倣体であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマー及び天然に存在しないアミノ酸ポリマーに適用される。この用語は、大環状ペプチド、非ペプチド官能基で修飾されたペプチド、ペプチド模倣薬、ポリアミド、及びマクロラクタムに適用される。「融合タンパク質」とは、単一の部分として組換え的に発現される２つ以上の別個のタンパク質配列をコードするキメラタンパク質を指す。
用語「ペプチジル」及び「ペプチジル部分」は、一価ペプチドを意味する。
用語「アミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸及び合成アミノ酸、並びに天然に存在するアミノ酸と類似の様式で機能するアミノ酸アナログ及びアミノ酸模倣体を指す。天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによってコードされるもの、並びに後で修飾されるアミノ酸、例えばヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタミン酸、及びＯ－ホスホセリンである。アミノ酸アナログは、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的な化学構造、すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基に結合したα炭素、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを有する化合物を指す。このようなアナログは、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）又は修飾されたペプチド骨格を有するが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造を保持する。アミノ酸模倣体は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する化合物を指す。「天然に存在しないアミノ酸」及び「非天然アミノ酸」という用語は、天然には見られないアミノ酸アナログ、合成アミノ酸及びアミノ酸模倣体を指す。
アミノ酸は、本明細書において、それらの一般に知られている３文字の記号、又はＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ生化学命名委員会によって推奨される１文字の記号のいずれかによって参照され得る。ヌクレオチドは、同様に、それらの一般的に受け入れられている単一文字コードによって参照され得る。
「接触する」は、その明白な通常の意味に従って使用され、少なくとも２つの異なる種（例えば、生体分子又は細胞を含む化合物）が反応、相互作用又は物理的に触れるのに十分近位になることを可能にするプロセスを指す。しかしながら、得られた反応生成物は、添加された試薬間の反応から直接、又は反応混合物中に生成され得る１つ以上の添加された試薬からの中間体から製造することができることを理解されたい。実施形態において、接触は、例えば、核酸がエンドヌクレアーゼと相互作用することを可能にすることを含む。
「対照」試料又は値は、試験試料と比較するための参照、通常は既知の参照として機能する試料を指す。例えば、試験試料は、試験条件から、例えば、試験化合物の存在下で採取し、既知の条件からの試料と、例えば、試験化合物（陰性対照）の非存在下、又は既知の化合物（陽性対照）の存在下で、比較することができる。対照は、いくつかの試験又は結果から収集された平均値を表すこともできる。当業者は、対照が任意の数のパラメーターの評価のために設計することができることを認識する。例えば、薬理学的データ（例えば、半減期）又は治療的尺度（例えば、副作用の比較）に基づいて治療利益を比較するように対照を考案することができる。当業者は、所与の状況においてどの標準対照が最も適切であるかを理解し、標準対照値との比較に基づいてデータを分析することができる。標準対照は、データの有意性（例えば、統計的有意性）を決定するためにも役立つ。例えば、所与のパラメーターの値が標準対照で大きく異なる場合、試験試料の変動は有意とはみなされない。
「標識」又は「検出可能な部分」は、分光的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的、又は他の物理的手段によって検出可能な組成物である。例えば、有用な標識として、３２Ｐ、蛍光色素、高電子密度の試薬、酵素（例えば、ＥＬＩＳＡにおいて一般的に使用されるような）、ビオチン、ジゴキシゲニン、又はハプテン及びタンパク質、又は例えば、標的ペプチドと特異的に反応するペプチド若しくは抗体に放射性標識を組み込むことによって、検出可能にすることができるタンパク質又は他の実体が挙げられる。抗体を標識にコンジュゲートするための当該技術分野で公知の任意の適切な方法は、例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １９９６、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏに記載の方法を使用して、用いることができる。
「生体試料」又は「試料」は、対象又は患者から得られた、又は対象又は患者に由来する材料を指す。生体試料として、生検及び剖検試料などの組織の切片、並びに組織学的目的で採取された凍結切片が挙げられる。そのような試料として、血液及び血液画分又は産物などの体液（例えば、血清、血漿、血小板、赤血球など）、喀痰、組織、培養細胞（例えば、初代培養、外植片、及び形質転換細胞）、便、尿、滑液、関節組織、滑膜組織、滑膜細胞、線維芽細胞様滑膜細胞、マクロファージ様滑膜細胞、免疫細胞、造血細胞、線維芽細胞、マクロファージ、Ｔ細胞などが挙げられる。生体試料は、典型的には、チンパンジー又はヒトなどの霊長類などの哺乳動物；牛；犬；猫；げっ歯類、例えば、モルモット、ラット、マウス；ウサギ；又は鳥；爬虫類；又は魚などの真核生物から得られる。
「細胞」とは、本明細書で使用される場合、そのゲノムＤＮＡを保存又は複製するのに十分な代謝又は他の機能を実行する細胞を指す。細胞は、例えば、無傷の膜の存在、特定の色素による染色、子孫（ｐｒｏｇｅｎｙ）を産生する能力、又は配偶子の場合、生存可能な子孫（ｏｆｆｓｐｒｉｎｇ）を産生するために第２の配偶子と結合する能力を含む、当該技術分野で周知の方法によって同定することができる。細胞は、原核細胞及び真核細胞を含んでもよい。原核細胞として細菌が挙げられるが、これに限定されない。真核細胞として、酵母細胞並びに植物及び動物由来の細胞、例えば哺乳動物、昆虫（例えば、スポドプテラ属（ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ））及びヒト細胞を含むが、これらに限定されない。
「遺伝子」という用語は、タンパク質の産生に関与するＤＮＡのセグメントを意味し、コーディング領域の前後の領域（リーダーとトレーラー）、及び個々のコーディングセグメント（エクソン）間の介在シーケンス（イントロン）が含まれる。リーダー、トレーラー、及びイントロンには、遺伝子の転写及び翻訳中に必要な調節要素が含まれている。さらに、「タンパク質遺伝子産物」とは、特定の遺伝子から発現するタンパク質である。
遺伝子に関して「発現」又は「発現される」という言葉は、本明細書で使用される場合、その遺伝子の転写及び／又は翻訳産物を意味する遺伝子を指す。細胞内のＤＮＡ分子の発現レベルは、細胞内に存在する対応するｍＲＮＡの量、又は細胞によって産生されるそのＤＮＡによってコードされるタンパク質の量のいずれかに基づいて決定され得る（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、１８．１～１８．８８頁）。
トランスフェクトされた遺伝子の発現は、細胞内で一過性又は安定に起こり得る。「一過性発現」の間、トランスフェクトされた遺伝子は、細胞分裂中に娘細胞に移されない。その発現はトランスフェクトされた細胞に限定されるため、遺伝子の発現は時間と共に失われる。対照的に、トランスフェクトされた遺伝子の安定した発現は、遺伝子がトランスフェクトされた細胞に選択上の利点を与える別の遺伝子とコトランスフェクトされる場合に起こり得る。そのような選択上の利点は、細胞に提示されるある特定の毒素に対する耐性であり得る。
用語「プラスミド」は、遺伝子の発現に必要な遺伝子及び／又は調節エレメントをコードする核酸分子を指す。プラスミドからの遺伝子の発現は、シス又はトランスで起こり得る。遺伝子がシスで発現している場合、遺伝子と調節エレメントは同じプラスミドによってコードされる。トランスにおける発現は、遺伝子及び調節エレメントが別々のプラスミドによってコードされる例を指す。
「外因性」という用語は、所与の細胞又は生物の外部に由来する分子又は物質（例えば、核酸又はタンパク質）を指す。逆に、「内因性」という用語は、所与の細胞若しくは生物に天然である、又は内部に由来する分子又は物質を指す。
「ベクター」は、別の核酸を細胞内に輸送することができる核酸である。ベクターは、適切な環境に存在する場合、ベクターによって担持される１つ以上の遺伝子によってコードされるタンパク質（１つ以上）の発現を方向付けることができる。
「コドン最適化」という用語は、種々の宿主の形質転換のための核酸分子の遺伝子又はコード領域を指すように、ＤＮＡによってコードされるポリペプチドを改変することなく、宿主生物の典型的なコドン使用を反映するように、核酸分子の遺伝子又はコード領域におけるコドンを改変することを指す。そのような最適化は、少なくとも１つ、又は２つ以上、又は有意な数のコドンを、その生物の遺伝子においてより頻繁に使用される１つ以上のコドンで置き換えることを含む。多種多様な動物、植物、微生物種に利用可能な多数の遺伝子配列を考えると、コドン使用の相対頻度を計算することが可能である。コドン使用表は、例えば、ｗｗｗ．ｋａｚｕｓａ．ｏｒ．ｊｐ／ｃｏｄｏｎ／で入手可能な「コドン使用データベース」で容易に入手可能である。各生物におけるコドン使用又はコドン選好に関する知識を利用することにより、当業者は、任意の所与のポリペプチド配列に頻度を適用し、ポリペプチドをコードするが、所与の種に最適なコドンを使用するコドン最適化コード領域の核酸断片を作製することができる。コドン最適化コード領域は、当業者に公知の様々な方法によって設計することができる。
「細胞培養」は、生物の外部に存在する細胞のインビトロ集団である。細胞培養は、細胞バンク若しくは動物から単離された初代細胞、又はこれらの供給源の１つに由来し、長期間のインビトロ培養のために不死化された二次細胞から確立することができる。
用語「トランスフェクション」、「形質導入」、「トランスフェクトすること」又は「形質導入」は、互換的に使用することができ、核酸分子及び／又はタンパク質を細胞に導入するプロセスとして定義される。核酸は、非ウイルス性又はウイルスベースの方法を使用して細胞に導入することができる。核酸分子は、完全なタンパク質又はその機能的部分をコードする配列であり得る。典型的には、核酸ベクターは、タンパク質発現に必要な要素（例えば、プロモーター、転写開始部位など）を有する。トランスフェクションの非ウイルス方法として、核酸分子を細胞に導入するための送達系としてウイルスＤＮＡ又はウイルス粒子を使用しない任意の適切な方法が挙げられる。例示的な非ウイルストランスフェクション法として、リン酸カルシウムトランスフェクション、リポソームトランスフェクション、ヌクレオフェクション、ソノポレーション、熱ショックによるトランスフェクション、磁化及び電気穿孔が挙げられる。ウイルスベースの方法の場合、任意の有用なウイルスベクターを本明細書に記載される方法で使用することができる。ウイルスベクターの例として、レトロウイルス、アデノウイルス、レンチウイルス及びアデノ随伴ウイルスベクターが挙げられるが、これらに限定されない。一部の態様において、核酸分子は、当該技術分野において周知の標準手順に従って、レトロウイルスベクターを使用して細胞に導入される。「トランスフェクション」又は「形質導入」という用語は、外部環境から細胞にタンパク質を導入することも指す。典型的には、タンパク質の形質導入又はトランスフェクションは、目的のタンパク質への細胞膜を横断することができるペプチド又はタンパク質の付着に依存する。例えば、Ｆｏｒｄら、（２００１）Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ８：１～４頁及びＰｒｏｃｈｉａｎｔｚ（２００７）Ｎａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ４：１１９～２０を参照されたい。
本明細書で使用される場合、「特異的結合」又は「特異的に結合する」という用語は、生理学的条件下で比較的安定である複合体（例えば、ウイルスタンパク質及び前記ウイルスタンパク質に対する受容体）を形成する２つの分子を指す。
リガンドが別の種（例えば、タンパク質又は核酸）に結合するかどうか、及び／又はそのようなリガンド－種相互作用の親和性を決定するための方法は、当該技術分野において公知である。例えば、タンパク質へのリガンドの結合は、ウエスタンブロット、ドットブロット、表面プラズモン共鳴法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ ｓｙｓｔｅｍ； Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓｗｅｄｅｎ ａｎｄ Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）、等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）、又は酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）などの様々な技術、これらに限定されない、を使用して検出及び／又は定量化することができる。
リガンドの免疫特異的結合及び交差反応性を分析するために使用することができるイムノアッセイとして、これらに限定されないが、ウエスタンブロット、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、免疫拡散アッセイ、凝集アッセイ、補体固定アッセイ、免疫放射測定アッセイ、及び蛍光イムノアッセイなどの技術を使用した競合的及び非競合的アッセイシステムが挙げられる。このようなアッセイは日常的であり、当技術分野で周知である。
「抗体」という用語は、抗原に特異的に結合して認識する免疫グロブリン遺伝子又はその機能的断片によってコードされるポリペプチドを指す。認識される免疫グロブリン遺伝子として、カッパ、ラムダ、アルファ、ガンマ、デルタ、イプシロン、及びミュー定常領域遺伝子、並びに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が挙げられる。軽鎖はカッパ又はラムダのいずれかに分類される。重鎖はガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、又はイプシロンに分類され、次に、免疫グロブリンクラスであるＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥをそれぞれ定義する。
用語「抗原」及び「エピトープ」は、免疫系の構成要素、例えば、抗体、Ｔ細胞受容体、又はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞上の受容体などの他の免疫受容体によって特異的に認識される分子（例えば、ポリペプチド）の部分を交換可能に指す。本明細書で使用される場合、「抗原」という用語は、抗原エピトープ及びその抗原断片を包含する。
例示的な免疫グロブリン（抗体）構造単位は、四量体を有することができる。各四量体は、ポリペプチド鎖の２つの同一の対から構成され、各対は、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤａ）及び１つの「重」鎖（約５０～７０ｋＤａ）を有する。各鎖のＮ末端は、主に抗原認識を担う約１００～１１０個以上のアミノ酸の可変領域を規定する。用語「可変重鎖」、「ＶＨ」、又は「ＶＨ」は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ又はＦａｂを含む免疫グロブリン重鎖の可変領域を指し、一方、「可変軽鎖」、「ＶＬ」又は「ＶＬ」という用語は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ又はＦａｂを含む免疫グロブリン軽鎖の可変領域を指す。
抗体機能的断片の例として、限定するものではないが、完全な抗体分子、抗体断片、例えばＦｖ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、相補性決定領域（ＣＤＲ）、ＶＬ（軽鎖可変領域）、ＶＨ（重鎖可変領域）、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２’及びこれら又は標的抗原に結合することができる免疫グロブリンペプチドの任意の他の機能的部分の任意の組合せが挙げられる（例えば、ＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬ ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ（Ｐａｕｌ編、第４版、２００１）を参照のこと。）。当業者によって理解されるように、様々な抗体断片は、様々な方法、例えば、ペプシンなどの酵素による無傷抗体の消化、又はデノボ合成によって得ることができる。抗体断片は、多くの場合、化学的に、又は組換えＤＮＡ法のいずれかを使用してデノボで合成される。したがって、本明細書で使用される場合、抗体という用語には、抗体全体の修飾、若しくは組換えＤＮＡ法を使用してデノボで合成されたもの（例えば、一本鎖Ｆｖ）、又はファージディスプレイライブラリーを使用して同定されたもの（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２頁を参照されたい。）のいずかによって産生された抗体断片を含む。用語「抗体」はまた、二価又は二重特異性分子、ダイアボディ、トリアボディ、及びテトラボディを含む。二価及び二重特異性分子は、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙら（１９９２）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４８：１５４７頁、Ｐａｃｋ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（１９９２）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３１：１５７９頁、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒら（１９９３）、ＰＮＡＳ．ＵＳＡ ９０：６４４４頁、Ｇｒｕｂｅｒら（１９９４）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８頁、Ｚｈｕら（１９９７）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．６：７８１頁、Ｈｕら（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５６：３０５５頁、Ａｄａｍｓら（１９９３）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５３：４０２６頁、及びＭｃＣａｒｔｎｅｙら。（１９９５）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８：３０１頁に記載されている。
本明細書で使用される場合、用語「崩壊」、「自己崩壊」、「自己崩壊機序」、「崩壊部分」、「崩壊ドメイン」などは、本明細書において、化学基が分子内反応を受ける能力を指し、それによって化学基の化学転位及びそれが結合された化合物の残りからの転位された化学基の放出をもたらす。「ｐＨ感受性」崩壊ドメインは、慎重なｐＨ範囲内で崩壊反応を受け、慎重なｐＨ範囲（例えば、ｐＨ約１～５、ｐＨ約５～７又はｐＨ約７～１０）外で実質的に崩壊反応を受けない化学基を指す。実施形態において、慎重なｐＨ範囲は、ｐＨ１～３、ｐＨ２～４、ｐＨ３～５、ｐＨ４～６、ｐＨ５～７、ｐＨ６～８、ｐＨ７～９又はｐＨ８～１０である。実施形態において、ｐＨ感受性崩壊領域は、カチオン性アルファアミノエステル（オリゴ（α－アミノエステル））を含む。実施形態において、カチオン性アルファアミノエステルのカチオン成分は、正に荷電した窒素原子（例えばカチオン性アミン）である。実施形態において、カチオン性アルファアミノエステルのカチオン成分は、グアニジニウム基ではない。実施形態において、カチオン性アルファアミノエステルのカチオン成分は、ピペリジニウム基ではない。
「細胞透過性複合体」などの用語は、通常及び慣習的な意味で、細胞（真核細胞又は原核細胞などの生物学的細胞）に浸透することができる化学複合体（例えば、本明細書に開示される複合体又は組成物及びその実施形態）を指す。実施形態において、細胞透過性複合体は、カチオン性両親媒性ポリマーにイオン的に結合された核酸を含む。実施形態において、核酸は、カチオン性両親媒性ポリマーの非存在下では細胞に実質的に浸透することができない。したがって、実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、細胞内への核酸の輸送を促進する。本明細書で使用される場合、「カチオン性電荷変更放出性輸送体」、「ＣＡＲＴ」などの用語は、本明細書に開示される細胞透過性複合体を指す。ＣＡＲＴ化合物は、カチオン性両親媒性ポリマー成分内のｐＨ感受性崩壊ドメインの作用を通じて、細胞内の核酸成分を放出することができ、細胞内のｐＨに応答して反応し、それによって細胞内で核酸を放出する。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、細胞内で急速に分解する（例えば、ｐＨ７．４で６時間未満のＴ１／２）。少なくとも一部の実施形態において、ポリプレックス、複合体、静電複合体、ＣＡＲＴ／ｍＲＮＡ複合体、ＣＡＲＴ／オリゴヌクレオチド複合体及びナノ粒子は、細胞透過性複合体を指すために交換可能に使用することができる。
用語「両親媒性ポリマー」は、本明細書で使用される場合、親水性部分及び疎水性部分の両方を含むポリマーを指す。実施形態において、親水性部分と疎水性部分は、１対１の質量比で存在する。実施形態において、親水性部分と疎水性部分は、１対２の質量比で存在する。実施形態において、親水性部分と疎水性部分は、１対５の質量比で存在する。実施形態において、親水性部分と疎水性部分は、２対１の質量比で存在する。実施形態において、親水性部分と疎水性部分は、５対１の質量比で存在する。両親媒性ポリマーは、ジブロック又はトリブロックコポリマーであってもよい。実施形態において、両親媒性ポリマーは、２つの親水性部分（例えば、ブロック）及び１つの疎水性部分（例えば、ブロック）を含んでもよい。
「親油性ポリマードメイン」などの用語は、しばしば「脂質ブロック」と呼ばれ、親水性ではない（例えば水のみに不溶である。）カチオン性両親媒性ポリマーの領域を指す。実施形態において、親油性ポリマードメインは、水に対する溶解度が低い。例えば、水への低溶解度とは、水に約０．０００５ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ可溶である親油性ポリマードメインの溶解度を指す。
「開始剤」とは、重合反応を開始する目的を有するカチオン性両親媒性ポリマーを合成する反応に関与する化合物を指す。したがって、開始剤は、典型的には、合成されたポリマーの末端に組み込まれる。例えば、１つのタイプ（又は式）のモノマーまた２つ以上のタイプのモノマー（例えば２つの異なるタイプのモノマー）の複数の分子を開始剤と反応させて、カチオン性両親媒性ポリマーを提供することができる。開始剤は、得られたポリマーの少なくとも一方の端に存在することができ、ポリマーに存在する繰り返し（又は重合）単位を構成しない。
用語「疾患」又は「状態」は、本明細書で提供される化合物、医薬組成物、又は方法で処置することができる対象の状態又は健康状態を指す。この疾患は、自己免疫性、炎症性、がん、感染性、代謝性、発達性、心血管、肝臓、腸、内分泌、神経又は他の疾患であり得る。一部の例において、疾患はがん（例えば乳がん、卵巣がん、肉腫、骨肉腫、肺がん、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えばメルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵臓がん、黒色腫、神経芽細胞腫）である。
用語「感染」又は「感染症」は、細菌、ウイルス、真菌又は他の任意の病原性微生物因子などの生物によって引き起こされ得る疾患又は状態を指す。
用語「ウイルス」又は「ウイルス粒子」は、生物学分野におけるそれらの明白な通常の意味に従って使用され、ウイルスゲノム（例えばＤＮＡ、ＲＮＡ、一本鎖、二本鎖）、タンパク質の保護コート（例えばカプシド）及び関連タンパク質を含む粒子を指し、エンベロープウイルス（例えばヘルペスウイルス）の場合、脂質及び任意選択的に宿主細胞膜の成分を含むエンベロープ、及び／又はウイルスタンパク質を指す。
「ウイルス感染」又は「ウイルス性疾患」という用語は、ウイルスによって引き起こされる疾患又は状態を指す。ウイルス感染の非限定的な例として、肝ウイルス疾患（例えば、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型、Ｅ型肝炎）、ヘルペスウイルス感染（例、ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、帯状疱疹）、フラビウイルス感染、ジカウイルス感染、サイトメガロウイルス感染、呼吸器ウイルス感染（例えば、アデノウイルス感染、インフルエンザ、重症急性呼吸器症候群、コロナウイルス感染（例、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９、ＭＥＲＳ））、胃腸ウイルス感染（例えば、ノロウイルス感染、ロタウイルス感染、アストロウイルス感染）、発疹性ウイルス感染（例えば、麻疹、帯状疱疹、天然痘、風疹）、ウイルス性出血性疾患（例えば、エボラ出血熱、ラッサ熱、デング熱、黄熱病）、神経学的ウイルス感染（例えば、ウエストナイルウイルス感染、ポリオ、ウイルス性髄膜炎、ウイルス性脳炎、日本脳炎、狂犬病）、及びヒトパピローマウイルス感染が挙げられる。
用語「感染」又は「感染症」は、細菌、ウイルス、真菌又は他の任意の病原性微生物因子などの生物によって引き起こされ得る疾患又は状態を指す。実施形態において、感染症は、病原性ウイルスによって引き起こされる。病原性ウイルスは、細胞（ヒト細胞など）内で感染して複製し、病気を引き起こす可能性のあるウイルスである。実施形態において、感染症は、ウイルス関連疾患である。ウイルス関連疾患の非限定的な例として、肝ウイルス疾患（例えば、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型、Ｅ型肝炎）、ヘルペスウイルス感染（例、ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、帯状疱疹）、フラビウイルス感染、ジカウイルス感染、サイトメガロウイルス感染、呼吸器ウイルス感染（例えば、アデノウイルス感染、インフルエンザ、重症急性呼吸器症候群、コロナウイルス感染（例、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９、ＭＥＲＳ））、胃腸ウイルス感染（例えば、ノロウイルス感染、ロタウイルス感染、アストロウイルス感染）、発疹性ウイルス感染（例えば、麻疹、帯状疱疹、天然痘、風疹）、ウイルス性出血性疾患（例えば、エボラ出血熱、ラッサ熱、デング熱、黄熱病）、神経学的ウイルス感染（例えば、ウエストナイルウイルス感染、ポリオ、ウイルス性髄膜炎、ウイルス性脳炎、日本脳炎、狂犬病）、及びヒトパピローマウイルス感染が挙げられる。
本明細書で定義されるように、分子（例えばポリヌクレオチド又はタンパク質）の活性及び／又は機能性に関して「阻害」、「阻害する」、「阻害すること」などの用語は、阻害の非存在下で、タンパク質の活性又は機能に対して分子の活性又は機能に負の影響を与える（例えば、減少又は低減させる。）ことを意味する。したがって、阻害は、少なくとも一部分において、刺激を部分的又は完全に遮断、活性化の減少、防止若しくは遅延、又はシグナル伝達若しくは酵素活性若しくはタンパク質若しくはポリヌクレオチドの量の不活性化、脱感作若しくは下方制御することを含む。同様に「阻害剤」は、標的生体分子（すなわち、核酸、ペプチド、炭水化物、脂質、又は自然界から見出すことができる任意の他の分子）を、例えば、標的生体分子の結合、部分的又は完全な遮断、減少、防止、遅延、不活性化、脱感作、又は下方制御する活性によって阻害する化合物である。疾病防止処置の文脈では、阻害は疾患又は疾患の症状の低減を指す。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、ベータコロナウイルスのファミリーに属し、そのメンバーには、新しい千年紀に重篤な疾患の発生を引き起こした他の２つの人獣伝染病ウイルス：重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）及び中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）が含まれる。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、２００２年～２００３年に重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）の流行を引き起こしたＳＡＲＳ－ＣｏＶとほぼ８０％の遺伝的類似性を示している。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、２０１２年に始まり、現在も続いている中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）の流行の原因であるＭＥＲＳ－ＣｏＶとより遠い関係にある。例えば、Ｙｕｋｉら、２０２０、Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎ．２１５、１０８４２７頁； Ｃｈｅｎら２０２０、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｖｉｒｏｌ．９２、４１８～４２３頁を参照されたい。「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ」という用語は、ＳＡＲＳコロナウイルスを指す。「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ」という用語には、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＭＥＲＳ－ＣｏＶなどの任意のコロノウイルスが含まれる。
「ＣＯＶＩＤ－１９」とは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされる疾患を指す。ＣＯＶＩＤ－１９の潜伏期間は２～１４日で、症状として、例えば、発熱、倦怠感、咳、息切れ（例えば、呼吸困難など）が挙げられる。
「ＭＥＲＳ－ＣｏＶ」とは、中東呼吸器症候群関連コロナウイルスを指す。例えば、Ｃｈｕｎｇら、Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｉｄｄｌｅ Ｅａｓｔ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ、Ｓｏｕｔｈ Ｋｏｒｅａ、２０１８、Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、２５（５）：９５８～９６２頁（２０１９）を参照されたい。
「中東呼吸器症候群」又は「ＭＥＲＳ」は、ＭＥＲＳ－コロナウイルスによって引き起こされる疾患を指す。
「処置」、「処置すること」、及び「処置する」は、薬剤を使用して疾患、障害又は状態に作用して、疾患、障害若しくは状態及び／又はその症状の有害又はその他の望ましくない影響を低減又は改善することとして定義される。それを必要とする状態又は対象を「処置すること」又は「処置する」とは、（１）症状の低減などの臨床結果を含む、有益な又は望ましい結果を得るための措置を講じること；（２）疾患を阻害すること、例えば、疾患又はその臨床症状の発症を阻止又は軽減すること；（３）疾患を緩和すること、例えば、疾患又はその臨床症状の退行を引き起こすこと；又は（４）疾患を遅らせることを指す。例えば、有益又は所望の臨床結果として、がん細胞の減少及び／又は排除並びにがん細胞の転移の防止及び／又は減少が含まれるが、これらに限定されない。
用語「防止する」、「防止すること」又は「防止」は、疾患の文脈において、疾患の症状をまだ経験していない又は示していない対象において疾患の臨床症状を発症させないことを指す。一部の例において、そのような防止は、疾患の素因があるとみなされ得る対象に適用され得るが、一方、いくつかの他の例において、対象は必ずしも疾患の素因があるとみなされない可能性がある。
本明細書で使用される場合、「投与する」とは、当業者に公知の様々な方法及び送達系のいずれかを使用して、対象への組成物の物理的導入を指す。本明細書に記載される組成物の好ましい投与経路として、例えば注射又は注入による、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、脊髄又は他の非経口投与経路が挙げられる。語句「非経口投与」は、本明細書で使用される場合、経腸及び局所投与以外の投与様式を意味し、通常は注射による、限定するものではないが、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、リンパ内、病巣内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内注射及び注入、並びにインビボ電気穿孔が挙げられる。代替的に、本明細書に記載される組成物は、局所、表皮又は粘膜投与経路などの非経口経路、例えば、鼻腔内、経口、膣内、直腸内、舌下又は局所的に投与することもできる。投与はまた、例えば、１回、複数回、及び／又は１回以上の延長期間にわたって行うことができる。
疾患に関連する物質又は物質の活性又は機能の文脈における「関連する」又は「に関連する」という用語は、疾患が（全体的又は部分的に）引き起こされ得ること、又は疾患の症状が（全体的又は部分的に）物質又は物質の活性又は機能によって引き起こされ得ることを意味する。この用語が症状の文脈で使用される場合、例えば症状が疾患又は状態に関連している場合、症状は、症状を示す対象に存在する疾患又は状態を示すことができることを意味する。
「対象」、「個体」、「宿主」又は「それを必要とする対象」という用語は、疾患若しくは状態に罹患している、又は将来疾患若しくは状態を有する可能性がある生物を指す。用語「患者」は、既に疾患又は状態を有する生物、例えば、疾患又は状態と診断された患者、又は疾患若しくは状態に関連する１つ以上の症状を有する患者を指す。非限定的な例として、ヒト、他の哺乳動物、ウシ、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、ウシ、シカ、及び他の非哺乳動物が挙げられる。一部の実施形態において、患者はヒトである。
用語「ワクチン」は、特定の疾患又は病原体に対する能動的な獲得免疫及び／又は治療効果（例えば処置）を提供することができる組成物を指す。ワクチンは、典型的には、病原体又は疾患、すなわち標的病原体又は疾患に対する対象において、免疫応答を誘導することができる１種以上の薬剤を含有する。免疫原性薬剤は、身体の免疫系を刺激して、標的病原体又は疾患の存在の脅威又は兆候として薬剤を認識し、それによって免疫学的記憶を誘導して、免疫系がその後の曝露時に、病原体のいずれかをより容易に認識及び破壊することができるようにする。ワクチンは、予防的（例えば、任意の自然若しくは病原体による将来の感染、又は素因のある対象におけるがんの予想される発生の影響を防止又は改善する。）、又は治療的（例えば、がんと診断された対象のがんを処置する。）であり得る。ワクチンの投与はワクチン接種と呼ばれる。一部の例において、ワクチン組成物は、核酸、例えば抗原分子（例えばペプチド）をコードするｍＲＮＡを対象に提供することができる。対象においてワクチン組成物を介して送達される核酸は、抗原分子に発現することができ、対象が抗原分子に対する免疫を獲得することを可能にする。感染症に対するワクチン接種との関連において、ワクチン組成物は、ある特定の病原体に関連する抗原分子、例えば病原体内で発現されることが知られている１つ以上のペプチド（例えば病原性細菌又はウイルス）をコードするｍＲＮＡを提供することができる。ウイルスワクチンの文脈において、ワクチン組成物は、免疫が求められるウイルスに特徴的なある特定のウイルスペプチド、例えばウイルス表面上で実質的に排他的又は高度に発現されるペプチド（例えば、キャプシド）をコードするｍＲＮＡを提供することができる。対象は、ウイルスワクチン組成物によるワクチン接種後、ウイルスペプチドに対する免疫を有して、それを発現する細胞を特異性で死滅させることができる。
「アジュバント」という用語は、免疫学におけるその明白な通常の意味に従って使用され、ワクチンの成分として一般的に使用される物質を指す。アジュバントは、ワクチンの一部として、１つ以上の特異的抗原と共に対象に投与された場合、対象における抗原特異的免疫応答を増加させることができる。実施形態において、アジュバントは、抗原に対する免疫応答を加速する。実施形態において、アジュバントは、抗原に対する免疫応答を延長する。実施形態において、アジュバントは、抗原に対する免疫応答を増強する。
本明細書で使用される用語「免疫応答」は、限定するものではないが、「獲得免疫応答」としても知られる「適応免疫応答」を包含し、適応免疫は、免疫応答によって標的とされる特定の病原体又は特定のタイプの細胞に対する初期応答の後に免疫学的記憶を誘発し、その後の遭遇時にその標的に対する増強された応答をもたらす。免疫学的記憶の誘導は、ワクチン接種の基礎を提供することができる。
「免疫原性」又は「抗原性」という用語は、免疫応答、例えば、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答、Ｂ細胞応答（例えば、エピトープに特異的に結合する抗体の産生）、ＮＫ細胞応答、又はそれらの任意の組合せを誘導する化合物又は組成物を、免疫適格対象に投与した場合を指す。したがって、免疫原性又は抗原性組成物は、免疫適格対象において免疫応答を誘発することができる組成物である。例えば、免疫原性又は抗原性組成物は、免疫応答によって標的とされる病原体又は特定のタイプの細胞に関連する１つ以上の免疫原性エピトープを含むことができる。さらに、免疫原性組成物は、エピトープを発現するために使用することができる抗原ポリペプチドの１つ以上の免疫原性エピトープをコードする単離された核酸構築物（ＤＮＡ又はＲＮＡなど）を含むことができる（したがって、このポリペプチド又は標的病原体又は細胞の種類に関連する関連ポリペプチドに対する免疫応答を誘発するために使用される。）。
本明細書に提供される方法によれば、対象に、本明細書で交換可能に使用される、本明細書で提供される１種以上の薬剤、組成物、又は複合体、（例えば細胞透過性複合体又はワクチン組成物）の有効量を投与することができる。用語「有効量」及び「有効投与量」は、互換的に使用される。用語「有効量」は、所望の効果（例えば、細胞への核酸のトランスフェクション及びトランスフェクトされた核酸の意図された結果を示す。）を生じるのに必要な任意の量として定義される。薬剤を投与するための有効量及びスケジュールは、当業者によって経験的に決定することができる。投与のための投与量の範囲は、所望の効果、例えば核酸のトランスフェクション、遺伝子発現の調節、遺伝子編集、幹細胞の誘導、免疫応答の誘導などを生成するのに十分な大きさのものである。投与量は、望ましくない交差反応、アナフィラキシー反応などの実質的な有害な副作用を引き起こすほど大きくするべきではない。一般に、投与量は、年齢、状態、性別、疾患のタイプ、疾患若しくは障害の程度、投与経路、又は他の薬物がレジメンに含まれるかどうかによって変化し得、当業者によって決定することができる。投与量は、任意の禁忌の場合に、個々の医師によって調整することができる。投薬量は様々であり得、１日１回以上の用量投与で、１日又は数日間投与することができる。ガイダンスは、所与のクラスの医薬品に対する適切な投与量に関して、文献に記載されている。例えば、所与のパラメーターについて、有効量は、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、４０％、５０％、６０％、７５％、８０％、９０％、又は少なくとも１００％の増加又は減少を示すことができる。有効性は、「倍」の増加又は減少として表すこともできる。例えば、治療有効量は、対照に対して少なくとも１．２倍、１．５倍、２倍、５倍、又はそれ以上の効果を有することができる。正確な用量及び製剤は、処置の目的に依存することができ、公知の技術を使用して、当業者によって確認可能である（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ（１～３巻、１９９２）；Ｌｌｏｙｄ、Ｔｈｅ Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｇｅｎｎａｒｏ、Ｅｄｉｔｏｒ（２００３）及びＰｉｃｋａｒ、Ｄｏｓｅ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ（１９９９））。
細胞透過性複合体－セクション１
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の実施形態によれば、すべての置換基が、以下に列挙されるように定義される。
本明細書に開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、上記カチオン性配列に対する対アニオンとしては、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリフレート、塩化物、臭化物、硫酸、リン酸、コハク酸、又はクエン酸などの当該技術分野で公知の一般的な対イオンを挙げることができる。実施形態において、対アニオンは、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリフレート、塩化物、臭化物、硫酸、リン酸、コハク酸、又はクエン酸である。さらに、以下のセクション２～４に記載される細胞透過性複合体のいずれもがセクション１の下で提供される組成物及び方法に使用できることが注目される。例えば、このセクションに記載される核酸、カチオン性両親媒性ポリマー及びカチオン性両親媒性ポリマーのいずれもが、その実施形態を含めて本明細書に提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体の一部を形成し得る。
一態様では、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体が提供される。
実施形態において、リボ核酸は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合されている。
実施形態において、ウイルスタンパク質は、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）タンパク質、ヒトメタ肺炎ウイルス（ｈＭＰＶ）タンパク質、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ３）タンパク質、インフルエンザＨ１０Ｎ８ウイルスタンパク質、インフルエンザＨ７Ｎ９ウイルスタンパク質、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）タンパク質、ジカウイルスタンパク質、チクングニア熱ウイルスタンパク質又は重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルス（ＣｏＶ）タンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質は呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）タンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はヒトメタ肺炎ウイルス（ｈＭＰＶ）タンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はパラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ３）タンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はインフルエンザＨ１０Ｎ８ウイルスタンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はインフルエンザＨ７Ｎ９ウイルスタンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）タンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はジカウイルスタンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質はチクングニア熱ウイルスタンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質は重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルス（ＣｏＶ）タンパク質である。
実施形態において、ウイルスタンパク質は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１タンパク質又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タンパク質である。実施形態において、ウイルスタンパク質は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質又はその断片である。実施形態において、ウイルスタンパク質は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の可溶性受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）である。
実施形態において、リボ核酸は、配列番号３の配列を含む。実施形態において、リボ核酸は、配列番号３の配列を含む。
実施形態において、リボ核酸は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の一部又は断片を含む。実施形態において、リボ核酸は、配列番号４の配列の一部又は断片を含む。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが少なくとも１００、２００、３００、４００、５００、６００又は７００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、少なくとも１００、２００、３００、４００、５００、６００又は７００の配列番号４の連続ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約１００、２００、３００、４００、５００、６００又は７００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、約１００、２００、３００、４００、５００、６００又は７００の配列番号４の連続ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約１００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約１５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約２００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約２５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約３００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約３５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約４００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約４５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約５００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約５５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約６００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約６５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約７００～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約７５０～約９００ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、一部又は断片は、長さが約８００～約９００ヌクレオチドである。本明細書で提供される一部又は断片は、５０～約９００の配列番号４の連続ヌクレオチドを含み得る。
実施形態において、核酸アジュバントはＤＮＡアジュバントである。
実施形態において、核酸アジュバントはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである。
実施形態において、核酸アジュバントは、１つ以上の非メチル化ＣｐＧオリゴヌクレオチドを含む。
実施形態において、核酸アジュバントはＴＬＲ－９アゴニストである。
実施形態において、核酸アジュバントは、配列番号１（ｔｃｃａｔｇａｃｇｔｔｃｃｔｇａｃｇｔｔ）又は配列番号２（ｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｔ）の配列を有する。実施形態において、核酸アジュバントは、配列番号１の配列を有する。実施形態において、核酸アジュバントは、配列番号２の配列を有する。
実施形態において、核酸アジュバントは、ＯＤＮ１８２６と称され、配列番号１（５’－ｔｃｃａｔｇａｃｇｔｔｃｃｔｇａｃｇｔｔ－３’）の配列を有する。核酸アジュバントは完全ホスホロチオエート骨格を含み得る。実施形態において、核酸アジュバントはヌクレアーゼ抵抗性である。
実施形態において、核酸アジュバントは、ＯＤＮ ＳＤ－１０１と称され、配列番号２（５’－ｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｔ－３’）の配列を有する。核酸アジュバントは完全ホスホロチオエート骨格を含み得る。実施形態において、核酸アジュバントはヌクレアーゼ抵抗性である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性崩壊ドメイン及び親油性ポリマードメインを含む。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Ｒ１Ａ－［Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ］ｚ５ （Ｉ）
［式中、
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、
ｚ５は、１～１０の整数であり、
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
ｚ４は、１～１００の整数であり、
ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、式：
Figure 2023535730000005
 ［式中、ｎ２は、１～１００の整数であり、Ｒ２０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ＬＰ１は、式：
Figure 2023535730000006
 ［式中、ｎ２１は、１～１００の整数であり、Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、ｎ２１は６であり、Ｒ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。
実施形態において、非置換のＣ１８アルケニルはオレイルである。
実施形態において、ＬＰ２は、式：
Figure 2023535730000007
 ［式中、ｎ２２は、１～１００の整数であり、Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、ｎ２２は６であり、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。
実施形態において、非置換のＣ９アルケニルはノネニルである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000008
 ［式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｎは７である。］
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000009
 ［式中、ｎ２１は６であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は６であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｎは９である。］
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000010
 ［式中、
環Ａは、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ＣＡＲＴは、式：－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ
を有し、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、
ｚ５は、１～１０の整数であり、
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
ｚ４は、１～１００の整数であり、
ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のナフタレニルである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000011
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000012
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、
Figure 2023535730000013
 ［式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、本明細書で定義されるＣＡＲＴである。］
を有する。
実施形態において、ｚ５は、１～３の整数である。実施形態において、ｚ５は１又は３である。実施形態において、ｚ５は１である。実施形態において、ｚ５は３である。
実施形態において、Ｒ２Ａは水素である。
実施形態において、Ｌ２は結合である。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、式：
Figure 2023535730000014
 ［式中、ｎは２以上の整数である。］
を有する。
実施形態において、ｎは、２～５０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～５０の整数である。実施形態において、ｎは７である。実施形態において、ｎは９である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000015
 ［式中、
Ｒ１Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、独立に、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、独立に、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
Ｘ１は、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、
Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ４は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンであり、
Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルであり、
Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、
Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｎ１は、０～５０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ２は、２～１００の整数であり、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ５は、１～１０の整数である。］
を有する。
実施形態において、ＬＰ１は、式：
Figure 2023535730000016
 ［式中、ｎ２１は、１～１００の整数であり、Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ｎ２１は１０～４０である。
実施形態において、Ｒ２０１は、非置換のＣ１２アルキルである。
実施形態において、ＬＰ２は、式：
Figure 2023535730000017
 ［式中、ｎ２２は、１～１００の整数であり、Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ｎ２２は１０～３５である。
実施形態において、Ｒ２０２は、非置換のＣ１２アルケニルである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000018
 ［式中、ｎ２１は、１０～２０の整数であり、Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｚ２は、独立に、３～１０の整数である。］
を有する。
実施形態において、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000019
 ［式中、ｎ２２は、１０～３５の整数であり、Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｚ２は、独立に、５～２０の整数である。］
を有する。
実施形態において、ｎ２２は１４であり、Ｒ２０２はドデシルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、本明細書に記載される細胞透過性複合体は、カチオン性両親媒性ポリマーと異なる第２のカチオン性両親媒性ポリマーをさらに含む。
実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000020
 ［ｎ２３は、１～１００の整数であり、ｚ６は、５～１５の整数であり、Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ２０３は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ｎ２３は１３であり、ｚ６は１１であり、Ｒ２０３はドデシルである。
実施形態において、Ｘ１はＣＨ２である。
実施形態において、Ｌ４は、独立に、置換又は非置換のＣ２～Ｃ８アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は、独立に、非置換のＣ２～Ｃ８アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は、独立に、非置換のＣ２アルキレン、非置換のＣ３アルキレン又はＣ４アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は、独立に、非置換のＣ３アルキレン又はＣ４アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は、独立に、非置換のＣ２アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は、独立に、非置換のＣ３アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は、独立に、非置換のＣ４アルキレンである。
実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素又は置換されたヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素又は－Ｃ（ＮＨ）ＮＨ２である。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２のうちの少なくとも２つは水素であり、１つは－Ｃ（ＮＨ）ＮＨ２である。
実施形態において、Ｚは－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、Ｒ１３は水素である。
実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、独立に、水素、又は置換若しくは非置換のアルキルである。
実施形態において、ｎ１は２である。
実施形態において、Ｘ２は－Ｏ－である。
実施形態において、ｚ１又はｚ３は、独立に、１０～４０の整数である。
実施形態において、ｚ２は、独立に、３～２０の整数である。
細胞透過性複合体－セクション２
式（Ｉ－Ａ）、（ＩＩ－Ａ）、（ＩＩＩ－Ａ）、（ＩＶ）、（ＩＶ－Ａ）、（Ｖ－Ａ）、（Ｖａ－Ａ）、（Ｉａ－Ａ）、（ＶＩ－Ａ）、（Ｉｂ－Ａ）、（Ｉｃ－Ａ）、（Ｉｄ－Ａ）、（ＶＩＩ－Ａ）、（ＶＩＩＩ－Ａ）、（ＩＸ－Ａ）、（Ｘ－Ａ）及び（ＸＩ－Ａ）の実施形態に従って、全ての置換基は以下に列挙されるように定義される。このセクションで記載されている細胞透過性複合体のいずれも、本明細書で提供される組成物及び方法に使用することができる。例えば、このセクションで記載されている核酸、カチオン性両親媒性ポリマー及びカチオン性両親媒性ポリマーのいずれも、その実施形態を含めて本明細書で提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体の一部を形成し得る。
本明細書で提供される細胞透過性複合体は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合された核酸を含み得、当該カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性崩壊ドメインを含む。実施形態において、１つ以上の対イオン（例えばアニオン）もまた、カチオン性両親媒性ポリマー内の正の電荷に対する逆の電荷として存在し得る。実施形態において、核酸は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合されている。実施形態において、核酸は、カチオン性両親媒性ポリマーにイオン結合されている。実施形態において、細胞透過性複合体は、複数の任意選択的に異なる核酸（例えば、１～１０個の追加の核酸、１～５個の追加の核酸、１～５個の追加の核酸、２個の追加の核酸又は１個の追加の核酸）を含む。実施形態において、核酸はＲＮＡである。実施形態において、核酸はｍＲＮＡである。
実施形態において、細胞透過性複合体内に存在するカチオン性両親媒性ポリマー分子内のカチオンの数と核酸分子上のアニオンの数との間の比率は、約０．５：１、約１：１、約５：１、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１０２：１、約１０３：１、約１０４：１、約１０５：１、約１０６：１、約１０７：１、約１０８：１、約１０９：１、約１０１０：１若しくはそれ以上又は前記のものの間にある任意の範囲であり得る。他の実施形態において、細胞透過性複合体内に存在する核酸分子上のアニオンの数とカチオン性両親媒性ポリマー分子上のカチオンの数との間の比率は、約０．５：１、約１：１、約５：１、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１０：１、約１０２：１、約１０３：１、約１０４：１、約１０５：１、約１０６：１、約１０７：１、約１０８：１、約１０９：１、約１０１０：１若しくはそれ以上又は前記のものの間にある任意の範囲であり得る。一部の好ましい実施形態において、この比率は、核酸上の負の電荷が１であるのに対し、両親媒性ポリマー分子上のカチオン電荷はおよそ１０である。他の実施形態は、核酸上の負の電荷が１であるのに対し両親媒性ポリマー分子上のカチオン電荷５を有し得る又は核酸上の負の電荷が１であるのに対し両親媒性ポリマー分子上のカチオン電荷２０を有し得る。
実施形態において、細胞透過性複合体内に存在する核酸分子の数とカチオン性両親媒性ポリマー分子の数との間の比率は、約０．５：１、約１：１、約１０：１、約１０２：１、約１０３：１、約１０４：１、約１０５：１、約１０６：１、約１０７：１、約１０８：１、約１０９：１、約１０１０：１若しくはそれ以上又は前記のものの間にある任意の範囲であり得る。他の実施形態において、細胞透過性複合体内に存在するカチオン性両親媒性ポリマー分子の数と核酸分子の数との間の比率は、約０．５：１、約１：１、約１０：１、約１０２：１、約１０３：１、約１０４：１、約１０５：１、約１０６：１、約１０７：１、約１０８：１、約１０９：１、約１０１０：１若しくはそれ以上又は前記のものの間にある任意の範囲であり得る。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、カチオン電荷変更性リリース可能トランスポーター（ＣＡＲＴ）であり得る。実施形態において、ＣＡＲＴは、カチオン性から中性への又はカチオン性からアニオン性へのｐＨ感受性の電荷変化を受ける一連のカチオン性配列を有するオリゴマー鎖を含み得る。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性崩壊ドメイン及び親油性ポリマードメインを有する。実施形態において、親油性ポリマードメインは、細胞膜透過、細胞送達及び／又は細胞膜を通過する輸送を促進し得る。実施形態において、親油性ポリマードメインは、水に実質的に不溶性であり得る（例えば、約０．０００５ｍｇ／ｍＬ未満～約１０ｍｇ／ｍＬの水溶性）。実施形態において、親油性ポリマードメインは、ナノ粒子へのカチオン性両親媒性ポリマーの凝集を促進し得る。実施形態において、このようなナノ粒子は、約５０ｎｍ～約５００ｎｍの平均最長寸法を有し得る。実施形態において、親油性ポリマードメインは、エンドソームへの侵入及びその中での崩壊の後の、カチオン性両親媒性ポリマーの残り部分のエンドソーム融合を促進し得る。実施形態において、本開示の細胞透過性複合体は、核酸カーゴの分解を防ぐ。用語「核酸カーゴ」又はこれに類する用語は、通常の及び慣習的な意味で、本明細書に開示される細胞透過性複合体及びその実施形態による細胞内への輸送に望ましい種を指す。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式（Ｉ－Ａ）：Ｈ－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｈ（Ｉ－Ａ）を有し、式中、Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、結合又は親油性ポリマードメインであり、ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは親油性ポリマードメインであり、ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、ｚ１、ｚ３及びｚ４は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、そしてｚ２は２～１００の整数である。
実施形態において、Ｌ１は、置換又は非置換のＣ１～Ｃ３アルキレンである。実施形態において、Ｌ１は、置換又は非置換のメチレンである。実施形態において、Ｌ１は、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキレンである。実施形態において、Ｌ１は、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ３アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～３員のヘテロアルキレンである。
実施形態において、Ｌ１は、置換若しくは非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキレン（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリーレン（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニレン）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｌ１は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリーレン、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換のアルキレン、非置換のヘテロアルキレン、非置換のシクロアルキレン、非置換のヘテロシクロアルキレン、非置換のアリーレン又は非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキレン）である。実施形態において、Ｌ１は結合である。
実施形態において、Ｌ２は、置換又は非置換のＣ１～Ｃ３アルキレンである。実施形態において、Ｌ２は、置換又は非置換のメチレンである。実施形態において、Ｌ２は、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキレンである。実施形態において、Ｌ２は、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ３アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～３員のヘテロアルキレンである。
実施形態において、Ｌ２は、置換若しくは非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキレン（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリーレン（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニレン）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｌ２は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリーレン、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、非置換のアルキレン、非置換のヘテロアルキレン、非置換のシクロアルキレン、非置換のヘテロシクロアルキレン、非置換のアリーレン又は非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキレン）である。実施形態において、Ｌ２は結合である。
実施形態において、ｚ２は、２～９０（例えば、５～９０、１０～９０若しくは２０～９０）、２～８０（例えば、５～８０、１０～８０若しくは２０～８０）、２～７０（例えば、５～７０、１０～７０若しくは２０～７０）、２～５０（例えば、５～５０、１０～５０若しくは２０～５０）又は２～２５の整数である。実施形態において、ｚ１、ｚ３及びｚ４は、独立に、０～９０（例えば、５～９０、１０～９０若しくは２０～９０）、０～８０（例えば、５～８０、１０～８０若しくは２０～８０）、０～７０（例えば、５～７０、１０～７０若しくは２０～７０）、０～５０（例えば、５～５０、１０～５０若しくは２０～５０）又は２～２５の整数である。実施形態において、ｚ１、ｚ３及びｚ４は、独立に、２～９０（例えば、５～９０、１０～９０若しくは２０～９０）、２～８０（例えば、５～８０、１０～８０若しくは２０～８０）、２～７０（例えば、５～７０、１０～７０若しくは２０～７０）、２～５０（例えば、５～５０、１０～５０若しくは２０～５０）又は２～２５の整数である。
細胞透過性複合体の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは第１の求核性部分及び第１の求電子部分を含み、第１の求核性部分は、ｐＨ範囲内で第１の求電子部分と反応性であり、当該ｐＨ範囲外（例えば、ｐＨ約１～５、ｐＨ約５～７又はｐＨ約７～１０）で当該求電子部分と実質的に反応性ではない。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ１～３、ｐＨ２～４、ｐＨ３～５、ｐＨ４～６、ｐＨ５～７、ｐＨ６～８、ｐＨ７～９又はｐＨ８～１０である。求核性部分は、化学分野におけるその一般的な通常の意味に従って使用され、電子を供与し得る部分（例えば官能基）を指す。
実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ１～３である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ２～４である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ３～５である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ４～６である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ５～７である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ６～８である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ７～９である。実施形態において、第１の求核性部分が第１の求電子部分と最も反応性であるｐＨ範囲は、ｐＨ８～１０である。実施形態において、ｐＨは１である。実施形態において、ｐＨは２である。実施形態において、ｐＨは３である。実施形態において、ｐＨは４である。実施形態において、ｐＨは５である。実施形態において、ｐＨは６である。実施形態において、ｐＨは７である。実施形態において、ｐＨは８である。実施形態において、ｐＨは９である。実施形態において、ｐＨは１０である。実施形態において、ｐＨは約１である。実施形態において、ｐＨは約２である。実施形態において、ｐＨは約３である。実施形態において、ｐＨは約４である。実施形態において、ｐＨは約５である。実施形態において、ｐＨは約６である。実施形態において、ｐＨは約７である。実施形態において、ｐＨは約８である。実施形態において、ｐＨは約９である。実施形態において、ｐＨは約１０である。
実施形態において、第１の求核性部分は、低いｐＨ（例えばｐＨ約１～約５）で実質的にプロトン化している。実施形態において、第１の求核性部分は、ｐＨ５～７の範囲で実質的にプロトン化している。実施形態において、第１の求核性部分はカチオン性である。実施形態において、第１の求核性部分はカチオン性の窒素（例えばカチオン性のアミン）を含む。
実施形態において、第１の求核性部分は、ｐＨに対して不安定な保護基に結合していてよい。用語「ｐＨに対して不安定な保護基」又はそれに類する用語は、通常の及び慣習的な意味で、それが結合している別の官能基を保護し得る化学的部分を指し、当該保護基は、ある特定のｐＨ条件（例えば、ｐＨの低下など）の下で保護基として切断され得る又は別の方法で不活化され得る。一実施形態において、ｐＨに対して不安定な保護基は、酸性条件下（例えば、７未満のｐＨ）で除去される基である－ＣＯ２－ｔ－Ｂｕである。さらなる求核保護基としては、光、熱、求核剤及び塩基によって切断されるものが含まれる。
上記に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（ＩＩ－Ａ）の構造：
Figure 2023535730000021
 を有し、式中、ｎは２以上の整数であり、ｎ１は０～５０の整数であり、Ｚは求核性部分であり、Ｘ１は結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、Ｘ２は－Ｏ－又は－Ｓ－であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、ｎは、２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の範囲内の整数である。実施形態において、ｎ１は、０～２５、０～１０、０～５の範囲内の整数である。実施形態において、ｎ１は、０、１、２、３、４又は５である。実施形態において、ｎ１は１又は２である。
実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は水素である。
上記に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式の構造：
Figure 2023535730000022
 を有し得、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ１、Ｚ及びＸ２は、本明細書で定義されている通りであり、ｎ１及びｎ２は２以上の整数である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（ＩＩＩ－Ａ）の構造：
Figure 2023535730000023
 を有し、式中、ｎは２以上の整数であり、Ｚは求核性部分であり、Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－であり、そしてＲ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、ｎは、２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００又は２～５０の範囲の整数である。
実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は水素である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（ＩＶ）の構造：
Figure 2023535730000024
 を有し、式中、ｎは２以上の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００又は２～５０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～１５である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（ＩＶ－Ａ）の構造：
Figure 2023535730000025
 を有し、式中、ｎは２以上の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００又は２～５０の範囲の整数である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（Ｖ－Ａ）の構造：
Figure 2023535730000026
 を有し、式中、ｎは２以上の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００又は２～５０の範囲の整数である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（Ｖａ－Ａ）の構造：
Figure 2023535730000027
 を有し、式中、ｎは２以上の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは、２～１００又は２～５０の範囲の整数である。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の構造：
Figure 2023535730000028
 を有し、式中、Ｘ６は、－Ｏ－、－ＮＨ－、－ＣＯＮＨ－、－ＣＯＯ－、－ＯＣＯ－、－ＮＨＣＯ－であり、Ｒ２０は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、そしてＲ２１は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、オリゴグリコール部分である。
実施形態において、Ｒ２０は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０は水素である。
実施形態において、Ｒ２１は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２１は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２１は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２１は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ２１は水素である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の構造：
Figure 2023535730000029
 を有し、式中、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｎ３は、０～５０の整数である。
実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、水素である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、以下の式（ＶＩ－Ａ）の構造：
Figure 2023535730000030
 を有し、式中、ｎは２以上の整数であり、ｎ１は０～５０の整数であり、Ｘ１は、結合、－Ｏ－、－ＮＲ５－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、Ｘ２は結合、－Ｏ－、－Ｃ（Ｒ９）（Ｒ１０）－又は－Ｃ（Ｒ９）（Ｒ１０）－Ｃ（Ｒ１１）（Ｒ１２）－であり、Ｘ４は、結合、－ＮＲ１６－、－Ｏ－、－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－又は－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－Ｃ（Ｒ１８）（Ｒ１９）－であり、Ｘ５は求核性部分であり、そしてＲ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は水素である。
実施形態において、Ｚは求核性部分である。実施形態において、Ｚは、－Ｓ－、－ＯＲ１３－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、式中、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｚは－Ｓ－である。実施形態において、Ｚは－Ｓ＋Ｒ１３－である。実施形態において、Ｚは－ＮＲ１３－である。実施形態において、Ｚは－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－である。実施形態において、Ｚは－Ｓ＋Ｈ－である。実施形態において、Ｚは－ＮＨ－である。実施形態において、Ｚは－Ｎ＋Ｈ２－である。実施形態において、Ｚは－ＯＨ－である。
実施形態において、Ｒ１３は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１３は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１３は水素である。
実施形態において、Ｚは
Figure 2023535730000031
 であり、式中、Ｘ３は、－Ｃ（Ｒ１５）－又は－Ｎ－であり、Ｘ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１６）２－、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１７）２－、－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－又は－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－Ｃ（Ｒ１８）（Ｒ１９）－であり、Ｘ５は求核性部分であり、そしてＲ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｘ３は－ＣＨである。
実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｘ５は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）であり、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
本明細書に開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、親油性ポリマードメインは、式：
Figure 2023535730000032
 ［式中、ｎ２は、１～１００の整数であり、Ｒ２０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、Ｒ２０は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１２アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１１アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ２アルキルである。
実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１２アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１１アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ２アルケニルである。
実施形態において、Ｒ２０は、ステアリル部分（例えば、非置換のＣ１８アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０は、オレイル部分（例えば、非置換のＣ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０は、リノレイル部分（例えば、非置換のＣ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０は、ドデシル部分（例えば、非置換のＣ１２アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０は、ノネニル部分（例えば、非置換のＣ９アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０は、
Figure 2023535730000033
 である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、以下の式（Ｉａ－Ａ）：
Figure 2023535730000034
 ［式中、Ｘ６は、－Ｏ－、－ＮＨ－、－ＣＯ２－、－ＣＯＮＨ－、－Ｏ２Ｃ－又は－ＮＨＣＯ－であり得、Ｒ２０は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ２１は、水素、置換又は非置換のアルキルであり、ｎは、本明細書で定義されている通りである。］
の化合物である。実施形態において、Ｒ２０はオリゴグリコール部分である。
実施形態において、Ｒ２０は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２１は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２１は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２１は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２１は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、構造：
Figure 2023535730000035
 ［式中、ｎ４は、０～５０の整数である。］
を有する。実施形態において、ｎ４は０～１０である。実施形態において、ｎ４は１～１５である。
本明細書に開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、構造：
Figure 2023535730000036
 ［式中、Ｘ７は、－Ｏ－、－ＮＨ－、－ＣＯ２－、－ＣＯＮＨ－、－Ｏ２Ｃ－又は－ＮＨＣＯ－であり、Ｒ２２は、水素、又は置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ２３は、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。実施形態において、Ｒ２２はオリゴグリコール部分である。
実施形態において、Ｒ２２は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。る実施形態において、Ｒ２２は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２２は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２２は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、以下の式（Ｉｂ－Ａ）：
Figure 2023535730000037
 ［式中、Ｒ１００は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
の化合物であり得る。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｎ１００は、本明細書に定義されるように２以上の整数である。
実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は水素である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、以下の式（Ｉｃ－Ａ）：
Figure 2023535730000038
 ［式中、Ｒ２００は、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｎ２００は、２以上の整数である。］
の化合物であり得る。実施形態において、Ｒ２００はオリゴグリコール部分である。実施形態において、Ｒ２００はアミン末端オリゴグリコール部分である。
「オリゴグリコール部分」という用語は、
Figure 2023535730000039
 を指し、「アミン末端オリゴグリコール部分」は、
Figure 2023535730000040
 ［式中、ｎ２００は、２以上の整数である。］
を指す。
実施形態において、Ｒ２００は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２００は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２００は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２００は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ２００は水素である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、以下の式（Ｉｄ－Ａ）：
Figure 2023535730000041
 ［式中、Ｒは、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ３００及びＲ３０１は、独立に、水素、又は置換若しくは非置換のアルキルであり、ｎ３００は、本明細書に定義される通りである。］
の化合物であり得る。実施形態において、Ｒ３０２はオリゴグリコール部分である。実施形態において、Ｒはアミン末端オリゴグリコール部分である。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は水素である。
実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性崩壊ドメインを有することができる。一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性崩壊ドメイン及び親油性ポリマードメインを有する。一部の実施形態において、細胞透過性複合体は、以下の式（ＶＩＩ－Ａ）：
Ｒ１Ａ－［Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ］ｚ５
［式中、
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、結合又は親油性ポリマードメインであり、ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは親油性ポリマードメインであり、
ＩＭは、ｐＨ感受性崩壊ドメインであり、
ｚ５は、１～１０の整数であり、
ｚ１、ｚ３及びｚ４は、独立に、０～１００であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ２は、２～１００の整数である。］
のカチオン性両親媒性ポリマーを有する。
実施形態において、Ｒ１Ａは、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ１Ａは、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ１Ａは、水素、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキル、置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ６シクロアルキル、置換若しくは非置換の３～６員のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のフェニル、又は置換若しくは非置換の５～６員のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。
実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアリールである。一部の他の実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のフェニルである。さらなる一部の他の実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアリールである。さらなる一部の他の実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
一部の実施形態において、細胞透過性複合体は、以下の式（ＶＩＩＩ－Ａ）：
Figure 2023535730000042
 ［式中、
環Ａは、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ＣＡＲＴは、式：－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ
を有し得、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、結合又は親油性ポリマードメインであり、ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは親油性ポリマードメインであり、ＩＭは、ｐＨ感受性崩壊ドメインであり、ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１、ｚ３及びｚ４は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有するカチオン性両親媒性ポリマーを有することができる。
一部の実施形態において、上記式（ＶＩＩＩ－Ａ）において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。一部の他の実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。さらなる一部の他の実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。さらなる一部の他の実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、環Ａは、非置換のアリール（すなわちＣＡＲＴ部分以外が非置換である。）。実施形態において、環Ａは、非置換のフェニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外が非置換である。）。実施形態において、環Ａは、非置換のフェニル又はナフタレニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外が非置換である。）。実施形態において、環Ａは、置換されたアリールである（すなわちＣＡＲＴ部分以外も置換されている。）。実施形態において、環Ａは、置換されたフェニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外も置換されている。）。実施形態において、環Ａは、置換されたフェニル又はナフタレニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外も置換されている。）。
実施形態において、細胞透過性複合体は検出可能剤（例えば、フルオロフォア）を有する。
実施形態において、Ｒ１Ａはメトキシリンカーで置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１Ａはリンカー（例えば、－ＣＨ２－Ｏ－）で置換されたアリールである。Ｒ１Ａがメトキシリンカーで置換されたアリールである非限定的な例は、式：
Figure 2023535730000043
 を有する。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式（ＩＸ－Ａ）：
Figure 2023535730000044
 を有する。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式（Ｘ－Ａ）：
Figure 2023535730000045
 を有する。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式（ＸＩ－Ａ）：
Figure 2023535730000046
 を有することができ、式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、式（ＶＩＩＩ－Ａ）（例えば、－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ）で定義されるＣＡＲＴ部分である。実施形態において、それぞれのＣＡＲＴ部分は任意選択的に異なる。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000047
Figure 2023535730000048
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000049
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000050
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000051
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000052
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000053
 を有する。
実施形態において、環Ｒはリンカー（例えば、結合、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン）を通じて検出可能剤で置換されている。
一部の実施形態において、細胞透過性複合体は、Ｌ１が－ＣＨ２－Ｏ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである前述の式のいずれかを有するカチオン性両親媒性ポリマーを有する。実施形態において、Ｌ１は－ＣＨ２－Ｏ－である。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、Ｌ１が－ＣＨ２－Ｏ－、
Figure 2023535730000054
 である前述の式のいずれかを有することができる。実施形態において、Ｌ１は－ＣＨ２－Ｏ－である。実施形態において、Ｌ１は
Figure 2023535730000055
 である。実施形態において、Ｌ１は
Figure 2023535730000056
 である。実施形態において、Ｌ１は
Figure 2023535730000057
 である。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｚ１、ｚ３及びｚ４が独立に、０～１００の整数であり得、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない前述の式のいずれかを有することができる。一部の実施形態において、ｚ１、ｚ３及びｚ４は独立に、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２０、又は２～１０の整数であり得、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない。実施形態において、ｚ１、ｚ３及びｚ４は独立に、範囲２～１００又は２～５０の整数であり得、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない。
実施形態において、ｚ１は０である。実施形態において、ｚ１は１である。実施形態において、ｚ１は２である。実施形態において、ｚ１は３である。実施形態において、ｚ１は４である。実施形態において、ｚ１は５である。実施形態において、ｚ１は６である。実施形態において、ｚ１は７である。実施形態において、ｚ１は８である。実施形態において、ｚ１は９である。実施形態において、ｚ１は１０である。実施形態において、ｚ１は１１である。実施形態において、ｚ１は１２である。実施形態において、ｚ１は１３である。実施形態において、ｚ１は１４である。実施形態において、ｚ１は１５である。実施形態において、ｚ１は１６である。実施形態において、ｚ１は１７である。実施形態において、ｚ１は１８である。実施形態において、ｚ１は１９である。実施形態において、ｚ１は２０である。実施形態において、ｚ１は２１である。実施形態において、ｚ１は２２である。実施形態において、ｚ１は２３である。実施形態において、ｚ１は２４である。実施形態において、ｚ１は２５である。実施形態において、ｚ１は２６である。実施形態において、ｚ１は２７である。実施形態において、ｚ１は２８である。実施形態において、ｚ１は２９である。実施形態において、ｚ１は３０である。実施形態において、ｚ１は３１である。実施形態において、ｚ１は３２である。実施形態において、ｚ１は３３である。実施形態において、ｚ１は３４である。実施形態において、ｚ１は３５である。実施形態において、ｚ１は３６である。実施形態において、ｚ１は３７である。実施形態において、ｚ１は３８である。実施形態において、ｚ１は３９である。実施形態において、ｚ１は４０である。実施形態において、ｚ１は４１である。実施形態において、ｚ１は４２である。実施形態において、ｚ１は４３である。実施形態において、ｚ１は４４である。実施形態において、ｚ１は４５である。実施形態において、ｚ１は４６である。実施形態において、ｚ１は４７である。実施形態において、ｚ１は４８である。実施形態において、ｚ１は４９である。実施形態において、ｚ１は５０である。実施形態において、ｚ１は５１である。実施形態において、ｚ１は５２である。実施形態において、ｚ１は５３である。実施形態において、ｚ１は５４である。実施形態において、ｚ１は５５である。実施形態において、ｚ１は５６である。実施形態において、ｚ１は５７である。実施形態において、ｚ１は５８である。実施形態において、ｚ１は５９である。実施形態において、ｚ１は６０である。実施形態において、ｚ１は６１である。実施形態において、ｚ１は６２である。実施形態において、ｚ１は６３である。実施形態において、ｚ１は６４である。実施形態において、ｚ１は６５である。実施形態において、ｚ１は６６である。実施形態において、ｚ１は６７である。実施形態において、ｚ１は６８である。実施形態において、ｚ１は６９である。実施形態において、ｚ１は７０である。実施形態において、ｚ１は７１である。実施形態において、ｚ１は７２である。実施形態において、ｚ１は７３である。実施形態において、ｚ１は７４である。実施形態において、ｚ１は７５である。実施形態において、ｚ１は７６である。実施形態において、ｚ１は７７である。実施形態において、ｚ１は７８である。実施形態において、ｚ１は７９である。実施形態において、ｚ１は８０である。実施形態において、ｚ１は８１である。実施形態において、ｚ１は８２である。実施形態において、ｚ１は８３である。実施形態において、ｚ１は８４である。実施形態において、ｚ１は８５である。実施形態において、ｚ１は８６である。実施形態において、ｚ１は８７である。実施形態において、ｚ１は８８である。実施形態において、ｚ１は８９である。実施形態において、ｚ１は９０である。実施形態において、ｚ１は９１である。実施形態において、ｚ１は９２である。実施形態において、ｚ１は９３である。実施形態において、ｚ１は９４である。実施形態において、ｚ１は９５である。実施形態において、ｚ１は９６である。実施形態において、ｚ１は９７である。実施形態において、ｚ１は９８である。実施形態において、ｚ１は９９である。実施形態において、ｚ１は１００である。
実施形態において、ｚ３は０である。実施形態において、ｚ３は１である。実施形態において、ｚ３は２である。実施形態において、ｚ３は３である。実施形態において、ｚ３は４である。実施形態において、ｚ３は５である。実施形態において、ｚ３は６である。実施形態において、ｚ３は７である。実施形態において、ｚ３は８である。実施形態において、ｚ３は９である。実施形態において、ｚ３は１０である。実施形態において、ｚ３は１１である。実施形態において、ｚ３は１２である。実施形態において、ｚ３は１３である。実施形態において、ｚ３は１４である。実施形態において、ｚ３は１５である。実施形態において、ｚ３は１６である。実施形態において、ｚ３は１７である。実施形態において、ｚ３は１８である。実施形態において、ｚ３は１９である。実施形態において、ｚ３は２０である。実施形態において、ｚ３は２１である。実施形態において、ｚ３は２２である。実施形態において、ｚ３は２３である。実施形態において、ｚ３は２４である。実施形態において、ｚ３は２５である。実施形態において、ｚ３は２６である。実施形態において、ｚ３は２７である。実施形態において、ｚ３は２８である。実施形態において、ｚ３は２９である。実施形態において、ｚ３は３０である。実施形態において、ｚ３は３１である。実施形態において、ｚ３は３２である。実施形態において、ｚ３は３３である。実施形態において、ｚ３は３４である。実施形態において、ｚ３は３５である。実施形態において、ｚ３は３６である。実施形態において、ｚ３は３７である。実施形態において、ｚ３は３８である。実施形態において、ｚ３は３９である。実施形態において、ｚ３は４０である。実施形態において、ｚ３は４１である。実施形態において、ｚ３は４２である。実施形態において、ｚ３は４３である。実施形態において、ｚ３は４４である。実施形態において、ｚ３は４５である。実施形態において、ｚ３は４６である。実施形態において、ｚ３は４７である。実施形態において、ｚ３は４８である。実施形態において、ｚ３は４９である。実施形態において、ｚ３は５０である。実施形態において、ｚ３は５１である。実施形態において、ｚ３は５２である。実施形態において、ｚ３は５３である。実施形態において、ｚ３は５４である。実施形態において、ｚ３は５５である。実施形態において、ｚ３は５６である。実施形態において、ｚ３は５７である。実施形態において、ｚ３は５８である。実施形態において、ｚ３は５９である。実施形態において、ｚ３は６０である。実施形態において、ｚ３は６１である。実施形態において、ｚ３は６２である。実施形態において、ｚ３は６３である。実施形態において、ｚ３は６４である。実施形態において、ｚ３は６５である。実施形態において、ｚ３は６６である。実施形態において、ｚ３は６７である。実施形態において、ｚ３は６８である。実施形態において、ｚ３は６９である。実施形態において、ｚ３は７０である。実施形態において、ｚ３は７１である。実施形態において、ｚ３は７２である。実施形態において、ｚ３は７３である。実施形態において、ｚ３は７４である。実施形態において、ｚ３は７５である。実施形態において、ｚ３は７６である。実施形態において、ｚ３は７７である。実施形態において、ｚ３は７８である。実施形態において、ｚ３は７９である。実施形態において、ｚ３は８０である。実施形態において、ｚ３は８１である。実施形態において、ｚ３は８２である。実施形態において、ｚ３は８３である。実施形態において、ｚ３は８４である。実施形態において、ｚ３は８５である。実施形態において、ｚ３は８６である。実施形態において、ｚ３は８７である。実施形態において、ｚ３は８８である。実施形態において、ｚ３は８９である。実施形態において、ｚ３は９０である。実施形態において、ｚ３は９１である。実施形態において、ｚ３は９２である。実施形態において、ｚ３は９３である。実施形態において、ｚ３は９４である。実施形態において、ｚ３は９５である。実施形態において、ｚ３は９６である。実施形態において、ｚ３は９７である。実施形態において、ｚ３は９８である。実施形態において、ｚ３は９９である。実施形態において、ｚ３は１００である。
実施形態において、ｚ４は０である。実施形態において、ｚ４は１である。実施形態において、ｚ４は２である。実施形態において、ｚ４は３である。実施形態において、ｚ４は４である。実施形態において、ｚ４は５である。実施形態において、ｚ４は６である。実施形態において、ｚ４は７である。実施形態において、ｚ４は８である。実施形態において、ｚ４は９である。実施形態において、ｚ４は１０である。実施形態において、ｚ４は１１である。実施形態において、ｚ４は１２である。実施形態において、ｚ４は１３である。実施形態において、ｚ４は１４である。実施形態において、ｚ４は１５である。実施形態において、ｚ４は１６である。実施形態において、ｚ４は１７である。実施形態において、ｚ４は１８である。実施形態において、ｚ４は１９である。実施形態において、ｚ４は２０である。実施形態において、ｚ４は２１である。実施形態において、ｚ４は２２である。実施形態において、ｚ４は２３である。実施形態において、ｚ４は２４である。実施形態において、ｚ４は２５である。実施形態において、ｚ４は２６である。実施形態において、ｚ４は２７である。実施形態において、ｚ４は２８である。実施形態において、ｚ４は２９である。実施形態において、ｚ４は３０である。実施形態において、ｚ４は３１である。実施形態において、ｚ４は３２である。実施形態において、ｚ４は３３である。実施形態において、ｚ４は３４である。実施形態において、ｚ４は３５である。実施形態において、ｚ４は３６である。実施形態において、ｚ４は３７である。実施形態において、ｚ４は３８である。実施形態において、ｚ４は３９である。実施形態において、ｚ４は４０である。実施形態において、ｚ４は４１である。実施形態において、ｚ４は４２である。実施形態において、ｚ４は４３である。実施形態において、ｚ４は４４である。実施形態において、ｚ４は４５である。実施形態において、ｚ４は４６である。実施形態において、ｚ４は４７である。実施形態において、ｚ４は４８である。実施形態において、ｚ４は４９である。実施形態において、ｚ４は５０である。実施形態において、ｚ４は５１である。実施形態において、ｚ４は５２である。実施形態において、ｚ４は５３である。実施形態において、ｚ４は５４である。実施形態において、ｚ４は５５である。実施形態において、ｚ４は５６である。実施形態において、ｚ４は５７である。実施形態において、ｚ４は５８である。実施形態において、ｚ４は５９である。実施形態において、ｚ４は６０である。実施形態において、ｚ４は６１である。実施形態において、ｚ４は６２である。実施形態において、ｚ４は６３である。実施形態において、ｚ４は６４である。実施形態において、ｚ４は６５である。実施形態において、ｚ４は６６である。実施形態において、ｚ４は６７である。実施形態において、ｚ４は６８である。実施形態において、ｚ４は６９である。実施形態において、ｚ４は７０である。実施形態において、ｚ４は７１である。実施形態において、ｚ４は７２である。実施形態において、ｚ４は７３である。実施形態において、ｚ４は７４である。実施形態において、ｚ４は７５である。実施形態において、ｚ４は７６である。実施形態において、ｚ４は７７である。実施形態において、ｚ４は７８である。実施形態において、ｚ４は７９である。実施形態において、ｚ４は８０である。実施形態において、ｚ４は８１である。実施形態において、ｚ４は８２である。実施形態において、ｚ４は８３である。実施形態において、ｚ４は８４である。実施形態において、ｚ４は８５である。実施形態において、ｚ４は８６である。実施形態において、ｚ４は８７である。実施形態において、ｚ４は８８である。実施形態において、ｚ４は８９である。実施形態において、ｚ４は９０である。実施形態において、ｚ４は９１である。実施形態において、ｚ４は９２である。実施形態において、ｚ４は９３である。実施形態において、ｚ４は９４である。実施形態において、ｚ４は９５である。実施形態において、ｚ４は９６である。実施形態において、ｚ４は９７である。実施形態において、ｚ４は９８である。実施形態において、ｚ４は９９である。実施形態において、ｚ４は１００である。
実施形態において、ｎは２である。実施形態において、ｎは３である。実施形態において、ｎは４である。実施形態において、ｎは５である。実施形態において、ｎは６である。実施形態において、ｎは７である。実施形態において、ｎは８である。実施形態において、ｎは９である。実施形態において、ｎは１０である。実施形態において、ｎは１１である。実施形態において、ｎは１２である。実施形態において、ｎは１３である。実施形態において、ｎは１４である。実施形態において、ｎは１５である。実施形態において、ｎは１６である。実施形態において、ｎは１７である。実施形態において、ｎは１８である。実施形態において、ｎは１９である。実施形態において、ｎは２０である。実施形態において、ｎは２１である。実施形態において、ｎは２２である。実施形態において、ｎは２３である。実施形態において、ｎは２４である。実施形態において、ｎは２５である。実施形態において、ｎは２６である。実施形態において、ｎは２７である。実施形態において、ｎは２８である。実施形態において、ｎは２９である。実施形態において、ｎは３０である。実施形態において、ｎは３１である。実施形態において、ｎは３２である。実施形態において、ｎは３３である。実施形態において、ｎは３４である。実施形態において、ｎは３５である。実施形態において、ｎは３６である。実施形態において、ｎは３７である。実施形態において、ｎは３８である。実施形態において、ｎは３９である。実施形態において、ｎは４０である。実施形態において、ｎは４１である。実施形態において、ｎは４２である。実施形態において、ｎは４３である。実施形態において、ｎは４４である。実施形態において、ｎは４５である。実施形態において、ｎは４６である。実施形態において、ｎは４７である。実施形態において、ｎは４８である。実施形態において、ｎは４９である。実施形態において、ｎは５０である。実施形態において、ｎは５１である。実施形態において、ｎは５２である。実施形態において、ｎは５３である。実施形態において、ｎは５４である。実施形態において、ｎは５５である。実施形態において、ｎは５６である。実施形態において、ｎは５７である。実施形態において、ｎは５８である。実施形態において、ｎは５９である。実施形態において、ｎは６０である。実施形態において、ｎは６１である。実施形態において、ｎは６２である。実施形態において、ｎは６３である。実施形態において、ｎは６４である。実施形態において、ｎは６５である。実施形態において、ｎは６６である。実施形態において、ｎは６７である。実施形態において、ｎは６８である。実施形態において、ｎは６９である。実施形態において、ｎは７０である。実施形態において、ｎは７１である。実施形態において、ｎは７２である。実施形態において、ｎは７３である。実施形態において、ｎは７４である。実施形態において、ｎは７５である。実施形態において、ｎは７６である。実施形態において、ｎは７７である。実施形態において、ｎは７８である。実施形態において、ｎは７９である。実施形態において、ｎは８０である。実施形態において、ｎは８１である。実施形態において、ｎは８２である。実施形態において、ｎは８３である。実施形態において、ｎは８４である。実施形態において、ｎは８５である。実施形態において、ｎは８６である。実施形態において、ｎは８７である。実施形態において、ｎは８８である。実施形態において、ｎは８９である。実施形態において、ｎは９０である。実施形態において、ｎは９１である。実施形態において、ｎは９２である。実施形態において、ｎは９３である。実施形態において、ｎは９４である。実施形態において、ｎは９５である。実施形態において、ｎは９６である。実施形態において、ｎは９７である。実施形態において、ｎは９８である。実施形態において、ｎは９９である。実施形態において、ｎは１００である。
実施形態において、ｎ１は０である。実施形態において、ｎ１は１である。実施形態において、ｎ１は２である。実施形態において、ｎ１は３である。実施形態において、ｎ１は４である。実施形態において、ｎ１は５である。実施形態において、ｎ１は６である。実施形態において、ｎ１は７である。実施形態において、ｎ１は８である。実施形態において、ｎ１は９である。実施形態において、ｎ１は１０である。実施形態において、ｎ１は１１である。実施形態において、ｎ１は１２である。実施形態において、ｎ１は１３である。実施形態において、ｎ１は１４である。実施形態において、ｎ１は１５である。実施形態において、ｎ１は１６である。実施形態において、ｎ１は１７である。実施形態において、ｎ１は１８である。実施形態において、ｎ１は１９である。実施形態において、ｎ１は２０である。実施形態において、ｎ１は２１である。実施形態において、ｎ１は２２である。実施形態において、ｎ１は２３である。実施形態において、ｎ１は２４である。実施形態において、ｎ１は２５である。実施形態において、ｎ１は２６である。実施形態において、ｎ１は２７である。実施形態において、ｎ１は２８である。実施形態において、ｎ１は２９である。実施形態において、ｎ１は３０である。実施形態において、ｎ１は３１である。実施形態において、ｎ１は３２である。実施形態において、ｎ１は３３である。実施形態において、ｎ１は３４である。実施形態において、ｎ１は３５である。実施形態において、ｎ１は３６である。実施形態において、ｎ１は３７である。実施形態において、ｎ１は３８である。実施形態において、ｎ１は３９である。実施形態において、ｎ１は４０である。実施形態において、ｎ１は４１である。実施形態において、ｎ１は４２である。実施形態において、ｎ１は４３である。実施形態において、ｎ１は４４である。実施形態において、ｎ１は４５である。実施形態において、ｎ１は４６である。実施形態において、ｎ１は４７である。実施形態において、ｎ１は４８である。実施形態において、ｎ１は４９である。実施形態において、ｎ１は５０である。
実施形態において、ｎ２は１である。実施形態において、ｎ２は２である。実施形態において、ｎ２は３である。実施形態において、ｎ２は４である。実施形態において、ｎ２は５である。実施形態において、ｎ２は６である。実施形態において、ｎ２は７である。実施形態において、ｎ２は８である。実施形態において、ｎ２は９である。実施形態において、ｎ２は１０である。実施形態において、ｎ２は１１である。実施形態において、ｎ２は１２である。実施形態において、ｎ２は１３である。実施形態において、ｎ２は１４である。実施形態において、ｎ２は１５である。実施形態において、ｎ２は１６である。実施形態において、ｎ２は１７である。実施形態において、ｎ２は１８である。実施形態において、ｎ２は１９である。実施形態において、ｎ２は２０である。実施形態において、ｎ２は２１である。実施形態において、ｎ２は２２である。実施形態において、ｎ２は２３である。実施形態において、ｎ２は２４である。実施形態において、ｎ２は２５である。実施形態において、ｎ２は２６である。実施形態において、ｎ２は２７である。実施形態において、ｎ２は２８である。実施形態において、ｎ２は２９である。実施形態において、ｎ２は３０である。実施形態において、ｎ２は３１である。実施形態において、ｎ２は３２である。実施形態において、ｎ２は３３である。実施形態において、ｎ２は３４である。実施形態において、ｎ２は３５である。実施形態において、ｎ２は３６である。実施形態において、ｎ２は３７である。実施形態において、ｎ２は３８である。実施形態において、ｎ２は３９である。実施形態において、ｎ２は４０である。実施形態において、ｎ２は４１である。実施形態において、ｎ２は４２である。実施形態において、ｎ２は４３である。実施形態において、ｎ２は４４である。実施形態において、ｎ２は４５である。実施形態において、ｎ２は４６である。実施形態において、ｎ２は４７である。実施形態において、ｎ２は４８である。実施形態において、ｎ２は４９である。実施形態において、ｎ２は５０である。実施形態において、ｎ２は５１である。実施形態において、ｎ２は５２である。実施形態において、ｎ２は５３である。実施形態において、ｎ２は５４である。実施形態において、ｎ２は５５である。実施形態において、ｎ２は５６である。実施形態において、ｎ２は５７である。実施形態において、ｎ２は５８である。実施形態において、ｎ２は５９である。実施形態において、ｎ２は６０である。実施形態において、ｎ２は６１である。実施形態において、ｎ２は６２である。実施形態において、ｎ２は６３である。実施形態において、ｎ２は６４である。実施形態において、ｎ２は６５である。実施形態において、ｎ２は６６である。実施形態において、ｎ２は６７である。実施形態において、ｎ２は６８である。実施形態において、ｎ２は６９である。実施形態において、ｎ２は７０である。実施形態において、ｎ２は７１である。実施形態において、ｎ２は７２である。実施形態において、ｎ２は７３である。実施形態において、ｎ２は７４である。実施形態において、ｎ２は７５である。実施形態において、ｎ２は７６である。実施形態において、ｎ２は７７である。実施形態において、ｎ２は７８である。実施形態において、ｎ２は７９である。実施形態において、ｎ２は８０である。実施形態において、ｎ２は８１である。実施形態において、ｎ２は８２である。実施形態において、ｎ２は８３である。実施形態において、ｎ２は８４である。実施形態において、ｎ２は８５である。実施形態において、ｎ２は８６である。実施形態において、ｎ２は８７である。実施形態において、ｎ２は８８である。実施形態において、ｎ２は８９である。実施形態において、ｎ２は９０である。実施形態において、ｎ２は９１である。実施形態において、ｎ２は９２である。実施形態において、ｎ２は９３である。実施形態において、ｎ２は９４である。実施形態において、ｎ２は９５である。実施形態において、ｎ２は９６である。実施形態において、ｎ２は９７である。実施形態において、ｎ２は９８である。実施形態において、ｎ２は９９である。実施形態において、ｎ２は１００である。
実施形態において、ｚ２は２である。実施形態において、ｚ２は３である。実施形態において、ｚ２は４である。実施形態において、ｚ２は５である。実施形態において、ｚ２は６である。実施形態において、ｚ２は７である。実施形態において、ｚ２は８である。実施形態において、ｚ２は９である。実施形態において、ｚ２は１０である。実施形態において、ｚ２は１１である。実施形態において、ｚ２は１２である。実施形態において、ｚ２は１３である。実施形態において、ｚ２は１４である。実施形態において、ｚ２は１５である。実施形態において、ｚ２は１６である。実施形態において、ｚ２は１７である。実施形態において、ｚ２は１８である。実施形態において、ｚ２は１９である。実施形態において、ｚ２は２０である。実施形態において、ｚ２は２１である。実施形態において、ｚ２は２２である。実施形態において、ｚ２は２３である。実施形態において、ｚ２は２４である。実施形態において、ｚ２は２５である。実施形態において、ｚ２は２６である。実施形態において、ｚ２は２７である。実施形態において、ｚ２は２８である。実施形態において、ｚ２は２９である。実施形態において、ｚ２は３０である。実施形態において、ｚ２は３１である。実施形態において、ｚ２は３２である。実施形態において、ｚ２は３３である。実施形態において、ｚ２は３４である。実施形態において、ｚ２は３５である。実施形態において、ｚ２は３６である。実施形態において、ｚ２は３７である。実施形態において、ｚ２は３８である。実施形態において、ｚ２は３９である。実施形態において、ｚ２は４０である。実施形態において、ｚ２は４１である。実施形態において、ｚ２は４２である。実施形態において、ｚ２は４３である。実施形態において、ｚ２は４４である。実施形態において、ｚ２は４５である。実施形態において、ｚ２は４６である。実施形態において、ｚ２は４７である。実施形態において、ｚ２は４８である。実施形態において、ｚ２は４９である。実施形態において、ｚ２は５０である。実施形態において、ｚ２は５１である。実施形態において、ｚ２は５２である。実施形態において、ｚ２は５３である。実施形態において、ｚ２は５４である。実施形態において、ｚ２は５５である。実施形態において、ｚ２は５６である。実施形態において、ｚ２は５７である。実施形態において、ｚ２は５８である。実施形態において、ｚ２は５９である。実施形態において、ｚ２は６０である。実施形態において、ｚ２は６１である。実施形態において、ｚ２は６２である。実施形態において、ｚ２は６３である。実施形態において、ｚ２は６４である。実施形態において、ｚ２は６５である。実施形態において、ｚ２は６６である。実施形態において、ｚ２は６７である。実施形態において、ｚ２は６８である。実施形態において、ｚ２は６９である。実施形態において、ｚ２は７０である。実施形態において、ｚ２は７１である。実施形態において、ｚ２は７２である。実施形態において、ｚ２は７３である。実施形態において、ｚ２は７４である。実施形態において、ｚ２は７５である。実施形態において、ｚ２は７６である。実施形態において、ｚ２は７７である。実施形態において、ｚ２は７８である。実施形態において、ｚ２は７９である。実施形態において、ｚ２は８０である。実施形態において、ｚ２は８１である。実施形態において、ｚ２は８２である。実施形態において、ｚ２は８３である。実施形態において、ｚ２は８４である。実施形態において、ｚ２は８５である。実施形態において、ｚ２は８６である。実施形態において、ｚ２は８７である。実施形態において、ｚ２は８８である。実施形態において、ｚ２は８９である。実施形態において、ｚ２は９０である。実施形態において、ｚ２は９１である。実施形態において、ｚ２は９２である。実施形態において、ｚ２は９３である。実施形態において、ｚ２は９４である。実施形態において、ｚ２は９５である。実施形態において、ｚ２は９６である。実施形態において、ｚ２は９７である。実施形態において、ｚ２は９８である。実施形態において、ｚ２は９９である。実施形態において、ｚ２は１００である。
実施形態において、ｚ５は１である。実施形態において、ｚ５は２である。実施形態において、ｚ５は３である。実施形態において、ｚ５は４である。実施形態において、ｚ５は５である。実施形態において、ｚ５は６である。実施形態において、ｚ５は７である。実施形態において、ｚ５は８である。実施形態において、ｚ５は９である。実施形態において、ｚ５は１０である。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｚ２が２～１００の整数である前述の式のいずれかを有することができる。一部の実施形態において、ｚ２は、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２、又は２～１０の整数であり得る。実施形態において、ｚ２は範囲２～１００又は２～５０の整数であり得る。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｚ５が１～３の整数である前述の式のいずれかを有することができる。一部の他の実施形態において、ｚ５は１又は３である。さらに一部の他の実施形態において、ｚ５は１である。一部のさらに他の実施形態において、ｚ５は３である。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、Ｒ２が水素である前述の式のいずれかを有することができる。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、Ｌ２が結合である前述の式のいずれかを有することができる。
実施形態において、ＣＡＲＴは式：
Figure 2023535730000058
Figure 2023535730000059
Figure 2023535730000060
を有する。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000061
 を有することができ、式中、ｎは２又はそれよりも大きい整数である。一部の実施形態において、ｎは、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２、又は２～１０の整数である。実施形態において、ｎは範囲２～１００又は２～５０の整数である。
一部の実施形態において、前述の式（ＩＶ－Ａ）では、ｎは２～５０の範囲の整数である。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000062
 を有することができ、
式中、
ｎは２又はそれよりも大きい整数であり、
ｎ１は０～５０の整数であり、
Ｚは求核性部分であり；
Ｘ１は結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり；
Ｘ２は－Ｏ－又は－Ｓ－であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000063
 を有することができ、
式中、
ｎは２又はそれよりも大きい整数であり、
Ｚは求核性部分であり；
Ｘ１は結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり；
Ｘ２は－Ｏ－又は－Ｓ－であり；
Ｒ１．１、Ｒ１．２、Ｒ２．１、Ｒ２．２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000064
 を有することができ、
式中、ｎは２又はそれよりも大きい整数である。実施形態において、ｎは、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２、又は２～１０の整数である。実施形態において、ｎは範囲２～１００又は２～５０の整数である。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000065
 を有することができ、
式中、ｎは２又はそれよりも大きい整数である。実施形態において、ｎは、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２、又は２～１０の整数である。実施形態において、ｎは範囲２～１００又は２～５０の整数である。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000066
 を有することができ、
式中、ｎは２又はそれよりも大きい整数であり；ｎ１は０～５０の整数であり；Ｘ１は、結合、－Ｏ－、－ＮＲ５－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり；Ｘ２は、結合、－Ｏ－、－Ｃ（Ｒ９）（Ｒ１０）－又は－Ｃ（Ｒ９）（Ｒ１０）－Ｃ（Ｒ１１）（Ｒ１２）－であり；Ｘ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１６）２－、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１７）２－、－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－又は－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－Ｃ（Ｒ１８）（Ｒ１９）－であり；Ｘ５は求核性部分であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、指定された前述の式のいずれかを有するｐＨ感受性崩壊ドメインでは、Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－、又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、式中、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、指定された前述の式のいずれかを有するｐＨ感受性崩壊ドメインでは、Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－、又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、式中、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、指定された前述の式のいずれかを有するｐＨ感受性崩壊ドメインでは、Ｚは、
Figure 2023535730000067
 であり、
式中、
Ｘ３はＣ（Ｒ１５）又はＮであり；
Ｘ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１６）２－、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１７）２－、－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－又は－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－Ｃ（Ｒ１８）（Ｒ１９）－であり；
Ｘ５は求核性部分であり；
Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、指定された前述の式のいずれかを有するｐＨ感受性崩壊ドメインでは、Ｚは、
Figure 2023535730000068
 であり、
式中、
Ｘ３はＣ（Ｒ１５）又はＮであり；
Ｘ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１６）２－、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１７）２－、－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－又は－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－Ｃ（Ｒ１８）（Ｒ１９）－であり；
Ｘ５は求核性部分であり；
Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、指定された前述の式のいずれかを有するｐＨ感受性崩壊ドメインでは、Ｘ５は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、式中、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
一部の実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは以下の式のうちの１つを有することができる：本明細書で開示される細胞透過性複合体の実施形態及びその実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは以下の式（ＩＶ）の構造を有する：
Figure 2023535730000069
一部の実施形態において、親油性ポリマードメイン、又は互換的に親油性ポリマードメインとも呼ばれるものは以下のＲ基の変化：
Figure 2023535730000070
 のうちの１つを有することができる。
本明細書で開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、核酸は、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、トランス活性化ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）、プラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）、ミニサークルＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ（ｇＮＤＡ）などのＤＮＡ又はＲＮＡでもよい。細胞透過性複合体はタンパク質又はペプチドをさらに含んでもよい。
本明細書で開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、細胞透過性複合体は複数の親油性部分をさらに含む。
本明細書で開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、細胞透過性複合体は複数の崩壊ドメインをさらに含む。
本明細書で開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、上記カチオン性配列に対する対アニオンは、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリフレート、塩化物、臭化物、硫酸、リン酸、コハク酸、又はクエン酸などの当該技術分野で公知の一般的対イオンを含むことができる。実施形態において、対アニオンは、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリフレート、塩化物、臭化物、硫酸、リン酸、コハク酸、又はクエン酸である。
細胞透過性複合体－セクション３
式（Ｉ）及び（ＩＶ）の実施形態によれば、すべての置換基は、以下に列挙されるように定義される。このセクションに記載される細胞透過性複合体のいずれもが本明細書で提供される組成物及び方法に使用できる。例えば、このセクションに記載される核酸、カチオン性両親媒性ポリマー及びカチオン性両親媒性ポリマーのいずれもが、その実施形態を含めて本明細書で提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント及びカチオン性両親媒性ポリマーの一部を形成し得る。
以上に記載されるように、その実施形態を含めて本明細書で提供されるカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Ｒ１Ａ－［Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ］ｚ５ （Ｉ）
［式中、
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有し得る。
上記式の置換基は、本出願全体を通じて記載されるように定義される。したがって、本明細書における化合物の他の実施形態において、各々の置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロアルキルは、置換若しくは非置換の２～２０員のヘテロアルキルであり、各々の置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ８シクロアルキルであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３～８員のヘテロシクロアルキルであり、各々の置換若しくは非置換アリールは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリールであり、且つ／又は各々の置換若しくは非置換のヘテロアリールは、置換若しくは非置換の５～１０員のヘテロアリールである。本明細書における化合物の一部の実施形態において、各々の置換若しくは非置換のアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ２０アルキレンであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換の２～２０員のヘテロアルキレンであり、各々の置換若しくは非置換のシクロアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ８シクロアルキレンであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換若しくは非置換の３～８員のヘテロシクロアルキレンであり、各々の置換若しくは非置換アリーレンは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリーレンであり、且つ／又は各々の置換若しくは非置換のヘテロアリーレンは、置換若しくは非置換の５～１０員のヘテロアリーレンである。一部の実施形態において、化合物は、以下の実施例のセクション、図又は表に記載される化学種である。
一部の実施形態において、各々の置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ８アルキルであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロアルキルは、置換若しくは非置換の２～８員のヘテロアルキルであり、各々の置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ７シクロアルキルであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３～７員のヘテロシクロアルキルであり、各々の置換若しくは非置換アリールは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリールであり、且つ／又は各々の置換若しくは非置換のヘテロアリールは、置換若しくは非置換の５～９員のヘテロアリールである。一部の実施形態において、各々の置換若しくは非置換のアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ８アルキレンであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換の２～８員のヘテロアルキレンであり、各々の置換若しくは非置換のシクロアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ７シクロアルキレンであり、各々の置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換若しくは非置換の３～７員のヘテロシクロアルキレンであり、各々の置換若しくは非置換アリーレンは、置換若しくは非置換のＣ６～Ｃ１０アリーレンであり、且つ／又は各々の置換若しくは非置換のヘテロアリーレンは、置換若しくは非置換の５～９員のヘテロアリーレンである。一部の実施形態において、化合物は、以下の実施例のセクション、図又は表に記載される化学種である。
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｒ１Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、又は－ＯＣＨ２Ｉ若しくは－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ１Ａは、独立に、Ｒ１Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ１Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ１Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ１Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ１Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ１Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ１Ａ１は、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ１Ａ１は、独立に、Ｒ１Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ１Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ１Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ１Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ１Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ１Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ１Ａ２は、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ１Ａ２は、独立に、Ｒ１Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ１Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ１Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ１Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ１Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ１Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ１Ａ３は、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ１Ａ３は、独立に、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ２Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、又は－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ２Ａは、独立に、Ｒ２Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２Ａ１で置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ２Ａ１は、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ２Ａ１は、独立に、Ｒ２Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２Ａ２で置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ２Ａ２は、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ２Ａ２は、独立に、Ｒ２Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２Ａ３で置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｒ２Ａ３は、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、又は－ＯＣＨ２Ｆであり得る。実施形態において、Ｒ２Ａ３は、独立に、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
Ｌ１は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキレン、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキレン、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキレン、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキレン、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリーレン、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は、ＲＬ１で置換された（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキレン、ＲＬ１で置換された（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキレン、ＲＬ１で置換された（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキレン、ＲＬ１で置換された（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキレン、ＲＬ１で置換された（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリーレン、又はＲＬ１で置換された（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリーレンである。ＲＬ１は、独立に、水素、ハロゲン、＝Ｏ、＝Ｓ、－ＣＦ３、－ＣＮ、－ＣＣｌ３、－ＣＯＯＨ、－ＣＨ２ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＯＨ、－ＳＨ、－ＳＯ２Ｃｌ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＯ２、－ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員）ヘテロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールであり得る。
Ｌ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキレン、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキレン、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキレン、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキレン、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリーレン、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、ＲＬ２で置換された（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキレン、ＲＬ２で置換された（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキレン、ＲＬ２で置換された（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキレン、ＲＬ２で置換された（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキレン、（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリーレン、又はＲＬ２で置換された（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリーレンである。ＲＬ２は、独立に、水素、ハロゲン、＝Ｏ、＝Ｓ、－ＣＦ３、－ＣＮ、－ＣＣｌ３、－ＣＯＯＨ、－ＣＨ２ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＯＨ、－ＳＨ、－ＳＯ２Ｃｌ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＯ２、－ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ２０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールであり得る。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000071
 ［式中、
環Ａは、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ＣＡＲＴは、式：－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ
を有し、Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000072
 を有する。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000073
 を有する。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000074
 ［式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、本明細書で定義されるＣＡＲＴである。］
を有する。
実施形態において、ｚ５は、１～３の整数である。実施形態において、ｚ５は１又は３である。実施形態において、ｚ５は１である。実施形態において、ｚ５は３である。実施形態において、Ｒ２Ａは水素である。実施形態において、Ｌ２は結合である。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、式：
Figure 2023535730000075
 ［式中、ｎは２以上の整数である。］
を有する。実施形態において、ｎは、２～５０の範囲の整数である。実施形態において、ｎは７である。実施形態において、ｎは９である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、式：
Figure 2023535730000076
 ［式中、ｎ２は、１～１００の整数であり、Ｒ２０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ＬＰ１は、式：
Figure 2023535730000077
 ［式中、ｎ２１は、１～１００の整数であり、Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、Ｒ２０１は、独立に、Ｒ２０１Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ３０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２０１Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２０１Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２０１Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２０１Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２０１Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０１Ａは、独立に、Ｒ２０１Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ３０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２０１Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２０１Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２０１Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２０１Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２０１Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０１Ｂは、独立に、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ３０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
実施形態において、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、ｎ２１は６であり、Ｒ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、非置換のＣ１８アルケニルはオレイルである。
実施形態において、ｎ２１は、０～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～９０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～８０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～７０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～６０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～５０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～４０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～３０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～２０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、０～１０の整数である。実施形態において、ｎ２１は、５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、１５～１００の整数である。ｎ２１は、２５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、３５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、４５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、５５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、６５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、７５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、８５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は、９５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２１は０である。実施形態において、ｎ２１は１である。実施形態において、ｎ２１は２である。実施形態において、ｎ２１は３である。実施形態において、ｎ２１は４である。あ実施形態において、ｎ２１は５である。実施形態において、ｎ２１は６である。実施形態において、ｎ２１は７である。実施形態において、ｎ２１は８である。実施形態において、ｎ２１は９である。実施形態において、ｎ２１は１０である。実施形態において、ｎ２１は１１である。実施形態において、ｎ２１は１２である。実施形態において、ｎ２１は１３である。実施形態において、ｎ２１は１４である。実施形態において、ｎ２１は１５である。実施形態において、ｎ２１は１６である。実施形態において、ｎ２１は１７である。実施形態において、ｎ２１は１８である。実施形態において、ｎ２１は１９である。実施形態において、ｎ２１は２０である。実施形態において、ｎ２１は２１である。実施形態において、ｎ２１は２２である。実施形態において、ｎ２１は２３である。実施形態において、ｎ２１は２４である。実施形態において、ｎ２１は２５である。実施形態において、ｎ２１は２６である。実施形態において、ｎ２１は２７である。実施形態において、ｎ２１は２８である。実施形態において、ｎ２１は２９である。実施形態において、ｎ２１は３０である。実施形態において、ｎ２１は３１である。実施形態において、ｎ２１は３２である。実施形態において、ｎ２１は３３である。実施形態において、ｎ２１は３４である。実施形態において、ｎ２１は３５である。実施形態において、ｎ２１は３６である。実施形態において、ｎ２１は３７である。実施形態において、ｎ２１は３８である。実施形態において、ｎ２１は３９である。実施形態において、ｎ２１は４０である。実施形態において、ｎ２１は４１である。実施形態において、ｎ２１は４２である。実施形態において、ｎ２１は４３である。実施形態において、ｎ２１は４４である。実施形態において、ｎ２１は４５である。実施形態において、ｎ２１は４６である。実施形態において、ｎ２１は４７である。実施形態において、ｎ２１は４８である。実施形態において、ｎ２１は４９である。実施形態において、ｎ２１は５０である。実施形態において、ｎ２１は５１である。実施形態において、ｎ２１は５２である。実施形態において、ｎ２１は５３である。実施形態において、ｎ２１は５４である。実施形態において、ｎ２１は５５である。実施形態において、ｎ２１は５６である。実施形態において、ｎ２１は５７である。実施形態において、ｎ２１は５８である。実施形態において、ｎ２１は５９である。実施形態において、ｎ２１は６０である。実施形態において、ｎ２１は６１である。実施形態において、ｎ２１は６２である。実施形態において、ｎ２１は６３である。実施形態において、ｎ２１は６４である。実施形態において、ｎ２１は６５である。実施形態において、ｎ２１は６６である。実施形態において、ｎ２１は６７である。実施形態において、ｎ２１は６８である。実施形態において、ｎ２１は６９である。実施形態において、ｎ２１は７０である。実施形態において、ｎ２１は７１である。実施形態において、ｎ２１は７２である。実施形態において、ｎ２１は７３である。実施形態において、ｎ２１は７４である。実施形態において、ｎ２１は７５である。実施形態において、ｎ２１は７６である。実施形態において、ｎ２１は７７である。実施形態において、ｎ２１は７８である。実施形態において、ｎ２１は７９である。実施形態において、ｎ２１は８０である。実施形態において、ｎ２１は８１である。実施形態において、ｎ２１は８２である。実施形態において、ｎ２１は８３である。実施形態において、ｎ２１は８４である。実施形態において、ｎ２１は８５である。実施形態において、ｎ２１は８６である。実施形態において、ｎ２１は８７である。実施形態において、ｎ２１は８８である。実施形態において、ｎ２１は８９である。実施形態において、ｎ２１は９０である。実施形態において、ｎ２１は９１である。実施形態において、ｎ２１は９２である。実施形態において、ｎ２１は９３である。実施形態において、ｎ２１は９４である。実施形態において、ｎ２１は９５である。実施形態において、ｎ２１は９６である。実施形態において、ｎ２１は９７である。実施形態において、ｎ２１は９８である。実施形態において、ｎ２１は９９である。実施形態において、ｎ２１は１００である。
実施形態において、ＬＰ２は、式：
Figure 2023535730000078
 ［式中、ｎ２２は、１～１００の整数であり、Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。実施形態において、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、ｎ２２は６であり、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、非置換のＣ９アルケニルはノネニルである。
実施形態において、Ｒ２０２は、独立に、Ｒ２０２Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ３０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２０２Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２０２Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２０２Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２０２Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２０２Ａで置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０２Ａは、独立に、Ｒ２０２Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ３０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、Ｒ２０２Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、Ｒ２０２Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、Ｒ２０２Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、Ｒ２０２Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又はＲ２０２Ｂで置換された若しくは非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０２Ｂは、独立に、非置換の（例えば、Ｃ１～Ｃ３０若しくはＣ１～Ｃ６）アルキル、非置換の（例えば、２～２０員若しくは２～６員の）ヘテロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ３～Ｃ８若しくはＣ５～Ｃ７）シクロアルキル、非置換の（例えば、３～８員若しくは３～６員の）ヘテロシクロアルキル、非置換の（例えば、Ｃ５～Ｃ１０若しくはＣ５～Ｃ６）アリール、又は非置換の（例えば、５～１０員若しくは５～６員の）ヘテロアリールである。
実施形態において、ｎ２２は、０～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～９０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～８０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～７０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～６０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～５０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～４０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～３０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～２０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、０～１０の整数である。実施形態において、ｎ２２は、５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、１５～１００の整数である。ｎ２２は、２５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、３５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、４５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、５５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、６５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、７５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、８５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は、９５～１００の整数である。実施形態において、ｎ２２は０である。実施形態において、ｎ２２は１である。実施形態において、ｎ２２は２である。実施形態において、ｎ２２は３である。実施形態において、ｎ２２は４である。実施形態において、ｎ２２は５である。実施形態において、ｎ２２は６である。実施形態において、ｎ２２は７である。実施形態において、ｎ２２は８である。実施形態において、ｎ２２は９である。実施形態において、ｎ２２は１０である。実施形態において、ｎ２２は１１である。実施形態において、ｎ２２は１２である。実施形態において、ｎ２２は１３である。実施形態において、ｎ２２は１４である。実施形態において、ｎ２２は１５である。実施形態において、ｎ２２は１６である。実施形態において、ｎ２２は１７である。実施形態において、ｎ２２は１８である。実施形態において、ｎ２２は１９である。実施形態において、ｎ２２は２０である。実施形態において、ｎ２２は２１である。実施形態において、ｎ２２は２２である。実施形態において、ｎ２２は２３である。実施形態において、ｎ２２は２４である。実施形態において、ｎ２２は２５である。実施形態において、ｎ２２は２６である。実施形態において、ｎ２２は２７である。実施形態において、ｎ２２は２８である。実施形態において、ｎ２２は２９である。実施形態において、ｎ２２は３０である。実施形態において、ｎ２２は３１である。実施形態において、ｎ２２は３２である。実施形態において、ｎ２２は３３である。実施形態において、ｎ２２は３４である。実施形態において、ｎ２２は３５である。実施形態において、ｎ２２は３６である。実施形態において、ｎ２２は３７である。実施形態において、ｎ２２は３８である。実施形態において、ｎ２２は３９である。実施形態において、ｎ２２は４０である。実施形態において、ｎ２２は４１である。実施形態において、ｎ２２は４２である。実施形態において、ｎ２２は４３である。実施形態において、ｎ２２は４４である。実施形態において、ｎ２２は４５である。実施形態において、ｎ２２は４６である。実施形態において、ｎ２２は４７である。実施形態において、ｎ２２は４８である。実施形態において、ｎ２２は４９である。実施形態において、ｎ２２は５０である。実施形態において、ｎ２２は５１である。実施形態において、ｎ２２は５２である。実施形態において、ｎ２２は５３である。実施形態において、ｎ２２は５４である。実施形態において、ｎ２２は５５である。実施形態において、ｎ２２は５６である。実施形態において、ｎ２２は５７である。実施形態において、ｎ２２は５８である。実施形態において、ｎ２２は５９である。実施形態において、ｎ２２は６０である。実施形態において、ｎ２２は６１である。実施形態において、ｎ２２は６２である。実施形態において、ｎ２２は６３である。実施形態において、ｎ２２は６４である。実施形態において、ｎ２２は６５である。実施形態において、ｎ２２は６６である。実施形態において、ｎ２２は６７である。実施形態において、ｎ２２は６８である。実施形態において、ｎ２２は６９である。実施形態において、ｎ２２は７０である。実施形態において、ｎ２２は７１である。実施形態において、ｎ２２は７２である。実施形態において、ｎ２２は７３である。実施形態において、ｎ２２は７４である。実施形態において、ｎ２２は７５である。実施形態において、ｎ２２は７６である。実施形態において、ｎ２２は７７である。実施形態において、ｎ２２は７８である。実施形態において、ｎ２２は７９である。実施形態において、ｎ２２は８０である。実施形態において、ｎ２２は８１である。実施形態において、ｎ２２は８２である。実施形態において、ｎ２２は８３である。実施形態において、ｎ２２は８４である。実施形態において、ｎ２２は８５である。実施形態において、ｎ２２は８６である。実施形態において、ｎ２２は８７である。実施形態において、ｎ２２は８８である。実施形態において、ｎ２２は８９である。実施形態において、ｎ２２は９０である。実施形態において、ｎ２２は９１である。実施形態において、ｎ２２は９２である。実施形態において、ｎ２２は９３である。実施形態において、ｎ２２は９４である。実施形態において、ｎ２２は９５である。実施形態において、ｎ２２は９６である。実施形態において、ｎ２２は９７である。実施形態において、ｎ２２は９８である。実施形態において、ｎ２２は９９である。実施形態において、ｎ２２は１００である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000079
 ［式中、
ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｎは７である。］
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000080
 ［式中、
ｎ２１は６であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は６であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｎは９である。］
を有する。
実施形態において、核酸は、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ガイド（ｇＲＮＡ）、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、トランス活性化ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）、プラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）、ミニサークルＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ（ｇＮＤＡ）である。実施形態において、核酸は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする配列を含む。
一態様では、その実施形態を含めて本明細書で提供される複数の細胞透過性複合体を含むナノ粒子組成物が提供される。
一態様では、その実施形態を含めて本明細書で提供される複合体、及び薬学的に許容される単体を含む医薬組成物が提供される。
一態様では、核酸を細胞内にトランスフェクトする方法であって、細胞を、その実施形態を含めて本明細書で提供される複合体と接触させることを含む方法が提供される。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、細胞内で分解され、それによって分解生成物を形成する。実施形態において、分解生成物は、置換又は非置換のジケトピペラジンである。
実施形態において、核酸は、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）をコードするＣＡＲを含む。
本明細書で提供されるｍＲＮＡは、細胞に発現され得る。実施形態において、細胞は真核細胞である。実施形態において、細胞は、哺乳動物又はヒト細胞である。実施形態において、細胞は、生物の一部を形成する。実施形態において、生物はヒトである。実施形態において、細胞は、リンパ細胞又は骨髄細胞である。実施形態において、細胞はＴ細胞である。実施形態において、細胞は骨髄細胞である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Ｒ１Ａ－［Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ］ｚ５
［式中、
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、結合又は親油性ポリマードメインであり、ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは親油性ポリマードメインであり、ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000081
 ［式中、環Ａは、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ＣＡＲＴは、式：－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａを有し、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、結合又は親油性ポリマードメインであり、ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは親油性ポリマードメインであり、
ＩＭはｐＨ感受性崩壊ドメインであり、ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000082
 を有する。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000083
 を有する。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000084
 ［式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、本明細書で定義されるＣＡＲＴである。］
を有する。
実施形態において、Ｌ１は、－ＣＨ２－Ｏ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは、式：
Figure 2023535730000085
 ［式中、ｎは２以上の整数である。］
を有する。
細胞透過性複合体－セクション４
式（Ｉａ－Ｃ）、（Ｉｂ－Ｃ）、（Ｉｃ－Ｃ）、（Ｉｄ－Ｃ）、（ＶＩＩＩ－Ｃ）、（ＩＸ－Ｃ）、（Ｘ－Ｃ）、（ＸＩ－Ｃ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）、（ＸＶ－Ｃ）、（ＸＶＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩＩ－Ｃ）、（ＸＩＸ－Ｃ）、（ＸＸ－Ｃ）、（ＸＸｂ－Ｃ）、（ＸＸＩ－Ｃ）及び（ＸＸＩａ－Ｃ）の実施形態によれば、すべての置換基は、以下に列挙されるように定義される。このセクションに記載される細胞透過性複合体のいずれもが本明細書で提供される組成物及び方法に使用できる。例えば、このセクションに記載される核酸、カチオン性両親媒性ポリマー及びカチオン性両親媒性ポリマーのいずれもが、その実施形態を含めて本明細書で提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体の一部を形成し得る。
その実施形態を含めて本明細書に提供される細胞透過性複合体は、カチオン性両親媒性ポリマー（例えば、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）及び（ＸＶ－Ｃ）を有する。）に非共有結合された核酸を含む。その実施形態を含めて本明細書に提供される細胞透過性複合体は、各々のポリマー型が化学的に異なる複数の（１つより多い、例えば、２つの）カチオン性両親媒性ポリマー型（例えば、第１のカチオン性両親媒性ポリマーと第２の両親媒性ポリマーとの混合物）をさらに含んでもよい。
本明細書で提供される細胞透過性複合体は、ｐＨ感受性崩壊ドメイン（例えば、式（ＸＶＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩＩ－Ｃ）、（ＸＩＸ－Ｃ）、（ＸＸ－Ｃ）及び（ＸＸＩ－Ｃ）を有する。）を含むカチオン性両親媒性ポリマー（例えば、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）及び（ＸＶ－Ｃ）を有する。）に非共有結合された核酸を含んでもよい。実施形態において、１つ以上の対イオン（例えば、アニオン）が、カチオン性両親媒性ポリマーにおける正電荷に対する対電荷として存在してもよい。実施形態において、核酸は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合されている。実施形態において、核酸は、カチオン性両親媒性ポリマーにイオン結合されている。実施形態において、細胞透過性複合体は、複数の任意選択的に異なる核酸（例えば、１～１０個の追加の核酸、１～５個の追加の核酸、１～５個の追加の核酸、２個の追加の核酸又は１個の追加の核酸）を含む。実施形態において、核酸はＤＮＡである。実施形態において、核酸はＲＮＡである。実施形態において、核酸はｍＲＮＡである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000086
 ［式中、
環Ａは、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ＣＡＲＴは、式：－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａを有し、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
ＩＭは、式：
Figure 2023535730000087
 を有し、
ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
式（ＸＶＩ－Ｃ）及び（ＸＶＩＩ－Ｃ）において、Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり得る。Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－である。Ｒ１及びＲ２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。Ｌ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンである。Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－である。Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。ｎ１は、０～５０の整数である。ｚ２は２～１００の整数であり、ｚ５は１～１０の整数である。
実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000088
 ［式中、ＩＭは、式：
Figure 2023535730000089
 を有し、置換基及び変数は、本明細書に記載されるように定義される。］
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000090
 ［式中、ＩＭは、式：
Figure 2023535730000091
 を有し、置換基及び変数は、本明細書に記載されるように定義される。］
を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000092
 ［式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、本明細書で定義されるＣＡＲＴである。］
を有する。
実施形態において、ｚ５は、１～３の整数である。実施形態において、ｚ５は１又は３である。実施形態において、ｚ５は１である。実施形態において、ｚ５は３である。実施形態において、Ｒ２Ａは水素である。実施形態において、Ｌ２は結合である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000093
 ［式中、環Ａは、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ＣＡＲＴは、式：－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａを有し、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、結合又は親油性ポリマードメインであり、ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは親油性ポリマードメインであり、ＩＭは、式：
Figure 2023535730000094
 を有し、
ｚ５は、１～１０の整数であり、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、ｚ４は、１～１００の整数であり、ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する。
式（ＸＶＩ－Ｃ）及び（ＸＶＩＩ－Ｃ）において、Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり得る。Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－である。Ｒ１及びＲ２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。Ｌ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンである。Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－である。Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。ｎ１は、０～５０の整数である。ｚ２は２～１００の整数であり、ｚ５は１～１０の整数である。
実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000095
 を有し、
式中、ＩＭは式：
Figure 2023535730000096
 を有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000097
 を有し、
式中、ＩＭは式：
Figure 2023535730000098
 を有する。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000099
 を有し、
式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、本明細書で定義されるＣＡＲＴである。
実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。一部の他の実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニルである。さらなる一部の他の実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のアリールである。さらなる一部の他の実施形態において、環Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、環Ａは、非置換のアリール（すなわちＣＡＲＴ部分以外が非置換である。）。実施形態において、環Ａは、非置換のフェニル又はナフタレニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外が非置換である。）。実施形態において、環Ａは、置換されたアリールである（すなわちＣＡＲＴ部分以外も置換されている。）。実施形態において、環Ａは、置換されたフェニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外も置換されている。）。実施形態において、環Ａは、置換されたフェニル又はナフタレニルである（すなわちＣＡＲＴ部分以外も置換されている。）。
実施形態において、細胞透過性複合体は検出可能剤（例えば、フルオロフォア）を有する。
実施形態において、Ｒ１Ａはメトキシリンカーで置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１Ａはリンカー（例えば、－ＣＨ２－Ｏ－）で置換されたアリールである。Ｒ１Ａがメトキシリンカーで置換されたアリールである非限定的な例は式：
Figure 2023535730000100
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３、ｚ４、及びｚ５は本明細書に定義される通りである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式（ＩＸ－Ｃ）：
Figure 2023535730000101
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３、ｚ４、及びｚ５は本明細書に定義される通りである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式（Ｘ－Ｃ）：
Figure 2023535730000102
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３、ｚ４、及びｚ５は本明細書に定義される通りである。
一部の実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式（ＸＩ－Ｃ）：
Figure 2023535730000103
 を有し、式中、ＣＡＲＴ１、ＣＡＲＴ２及びＣＡＲＴ３は、独立に、式（ＶＩＩＩ－Ｃ）（例えば、－Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＩＭ）ｚ２－（ＬＰ２）ｚ３］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ）で定義されるＣＡＲＴ部分である。実施形態において、それぞれのＣＡＲＴ部分は任意選択的に異なる。
実施形態において、Ｌ１は、－ＣＨ２－Ｏ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000104
 を有する。
式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）において、Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインである。
Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－である。
Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－である。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｌ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンである。
Ｒ４０、Ｒ４１、及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。
Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－、又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－である。
Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
ｎ１は、０～５０の整数である。
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない。
ｚ４は１～１００の整数である。
ｚ２は２～１００の整数であり；ｚ５は０～１０の整数である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000105
 を有する。
式（ＸＩＶ－Ｃ）及び（ＸＶ－Ｃ）では、Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインである。
Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－である。
Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－である。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
Ｌ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンである。
Ｒ４０及びＲ４１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。
Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－、又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－である。
Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
ｎ１は、０～５０の整数である。
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない。ｚ４は１～１００の整数である。ｚ２は２～１００の整数であり；ｚ５は１～１０の整数である。
実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ２～Ｃ８アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ８アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ７アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ６アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ５アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ４アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ３アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ２アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ２～Ｃ８アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ８アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ７アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ６アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ５アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ４アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ３アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ２アルキレンである。実施形態において、Ｌ４は非置換のＣ２アルキレン、非置換Ｃ３アルキレン又は非置換のＣ４アルキレンである。
実施形態において、Ｌ４は、置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基、又は低級置換基で置換された）又は非置換のＣ２～Ｃ８アルキレン（例えば、Ｃ２～Ｃ８、Ｃ２～Ｃ６、Ｃ２～Ｃ４、又はＣ２）である。実施形態において、Ｌ４は、非置換Ｃ２～Ｃ８アルキレン（例えば、Ｃ２～Ｃ８、Ｃ２～Ｃ６、Ｃ２～Ｃ４、又はＣ２）である。実施形態において、Ｌ４は、非置換Ｃ２アルキレン、非置換Ｃ３アルキレン又は非置換のＣ４アルキレンである。
実施形態において、置換Ｌ４（例えば、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、及び／又は置換ヘテロアリーレン）は、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基、又は低級置換基で置換され、置換Ｌ４が、置換基、サイズ限定置換基、及び低級置換基から選択される複数の基で置換されている場合、それぞれの置換基、サイズ限定置換基及び／又は低級置換基は任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、Ｌ４が置換されている場合、Ｌ４は少なくとも１つの置換基で置換されている。実施形態において、Ｌ４が置換されている場合、Ｌ４は少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換されている。実施形態において、Ｌ４が置換されている場合、Ｌ４は少なくとも１つの低級置換基で置換されている。
実施形態において、Ｒ４０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４０は、独立に、水素、置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４又はＣ１～Ｃ２）、又は置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員、又は４～５員）である。
実施形態において、置換Ｒ４０（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール及び／又は置換ヘテロアリール）は、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基、又は低級置換基で置換され、置換Ｒ４０が、置換基、サイズ限定置換基、及び低級置換基から選択される複数の基で置換されている場合、それぞれの置換基、サイズ限定置換基及び／又は低級置換基は任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、Ｒ４０が置換されている場合、Ｒ４０は少なくとも１つの置換基で置換されている。実施形態において、Ｒ４０が置換されている場合、Ｒ４０は少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換されている。実施形態において、Ｒ４０が置換されている場合、Ｒ４０は少なくとも１つの低級置換基で置換されている。
実施形態において、Ｒ４１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４１は、独立に、水素、置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４又はＣ１～Ｃ２）又は置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員、又は４～５員）である。
実施形態において、置換Ｒ４１（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール及び／又は置換ヘテロアリール）は、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基、又は低級置換基で置換され、置換Ｒ４１が、置換基、サイズ限定置換基、及び低級置換基から選択される複数の基で置換されている場合、それぞれの置換基、サイズ限定置換基及び／又は低級置換基は任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、Ｒ４１が置換されている場合、Ｒ４１は少なくとも１つの置換基で置換されている。実施形態において、Ｒ４１が置換されている場合、Ｒ４１は少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換されている。実施形態において、Ｒ４１が置換されている場合、Ｒ４１は少なくとも１つの低級置換基で置換されている。
実施形態において、Ｒ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４２は、独立に、水素、置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４又はＣ１～Ｃ２）又は置換（例えば、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員、又は４～５員）である。
実施形態において、置換Ｒ４２（例えば、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール及び／又は置換ヘテロアリール）は、少なくとも１つの置換基、サイズ限定置換基、又は低級置換基で置換され、置換Ｒ４２が、置換基、サイズ限定置換基、及び低級置換基から選択される複数の基で置換されている場合、それぞれの置換基、サイズ限定置換基及び／又は低級置換基は任意選択的に異なっていてもよい。実施形態において、Ｒ４２が置換されている場合、Ｒ４２は少なくとも１つの置換基で置換されている。実施形態において、Ｒ４２が置換されている場合、Ｒ４２は少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換されている。実施形態において、Ｒ４２が置換されている場合、Ｒ４２は少なくとも１つの低級置換基で置換されている。
実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素又は置換ヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素又は－Ｃ（ＮＨ）ＮＨ２である。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２の少なくとも２つは水素であり、１つは－Ｃ（ＮＨ）ＮＨ２である。
実施形態において、Ｒ１Ａは、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ１Ａは、水素、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキル、置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ６シクロアルキル、置換若しくは非置換の３～６員のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のフェニル、又は置換若しくは非置換の５～６員のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、置換されたヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ１Ａは、非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。
実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアリールである。一部の他の実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のフェニルである。さらなる一部の他の実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のアリールである。さらなる一部の他の実施形態において、Ｒ１Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、Ｒ２Ａは、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２Ａは、水素、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキル、置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ６シクロアルキル、置換若しくは非置換の３～６員のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のフェニル、又は置換若しくは非置換の５～６員のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２Ａは、置換又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換又は非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換されたヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換又は非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換されたシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換されたヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換又は非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換されたアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、置換されたヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ２Ａは、非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。
実施形態において、Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３Ａは、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ３Ａは、水素、置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキル、置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のＣ３～Ｃ６シクロアルキル、置換若しくは非置換の３～６員のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のフェニル、又は置換若しくは非置換の５～６員のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のアリールである。一部の他の実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のフェニルである。さらなる一部の他の実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のアリールである。さらなる一部の他の実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のフェニル又はナフタレニルである。
実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルキル若しくはＣ１～Ｃ４アルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換されたヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員のヘテロアルキル、２～６員のヘテロアルキル若しくは２～４員のヘテロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換されたシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキ若しくはＣ５～Ｃ６シクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換されたヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員のヘテロシクロアルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル若しくは５～６員のヘテロシクロアルキル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換されたアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０アリール、Ｃ１０アリール若しくはフェニル）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換又は非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、置換されたヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。実施形態において、Ｒ３Ａは、非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員のヘテロアリール、５～９員のヘテロアリール若しくは５～６員のヘテロアリール）である。
本明細書で提供される式ＩＩ、ＩＩＩ、ＸＩＶ－Ｃ、及びＸＶ－Ｃ、並びにその実施形態では、Ｌ１は置換又は非置換のＣ１～Ｃ３アルキレンでもよい。実施形態において、Ｌ１は置換又は非置換のメチレンである。実施形態において、Ｌ１は置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキレンである。実施形態において、Ｌ１は置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ３アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～３員のヘテロアルキレンである。
実施形態において、Ｌ１は、置換若しくは非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキレン（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリーレン（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニレン）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｌ１は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリーレン、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換のアルキレン、非置換のヘテロアルキレン、非置換のシクロアルキレン、非置換のヘテロシクロアルキレン、非置換のアリーレン又は非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキレン）である。実施形態において、Ｌ１は結合である。
実施形態において、Ｌ１は、－ＣＨ２－Ｏ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ１は－ＣＨ２－Ｏ－である。
実施形態において、Ｌ１は、－ＣＨ２－Ｏ－、
Figure 2023535730000106
 である。実施形態において、Ｌ１は－ＣＨ２－Ｏ－である。実施形態において、Ｌ１は
Figure 2023535730000107
 である。実施形態において、Ｌ１は
Figure 2023535730000108
 である。実施形態において、Ｌ１は
Figure 2023535730000109
 である。
本明細書で提供される式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）及び（ＸＶ－Ｃ）並びにその実施形態では、Ｌ２は置換又は非置換のＣ１～Ｃ３アルキレンでもよい。実施形態において、Ｌ２は置換又は非置換のメチレンである。実施形態において、Ｌ２は置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキレンである。実施形態において、Ｌ２は置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ３アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～３員のヘテロアルキレンである。
実施形態において、Ｌ２は、置換若しくは非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキレン（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリーレン（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニレン）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｌ２は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリーレン、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、非置換のアルキレン、非置換のヘテロアルキレン、非置換のシクロアルキレン、非置換のヘテロシクロアルキレン、非置換のアリーレン又は非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキレン）である。実施形態において、Ｌ２は結合である。
本明細書で提供される式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）及び（ＸＶ－Ｃ）並びにその実施形態では、Ｌ４は置換又は非置換のＣ１～Ｃ３アルキレンでもよい。実施形態において、Ｌ４は置換又は非置換のメチレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ６アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～６員のヘテロアルキレンである。実施形態において、Ｌ４は置換若しくは非置換のＣ１～Ｃ３アルキレン、又は置換若しくは非置換の２～３員のヘテロアルキレンである。
本明細書で提供されるＬ４は、脂肪族リンカー、ペプチドリンカー又はペグ化リンカーでもよい。実施形態において、Ｌ４は、置換若しくは非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキレン（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリーレン（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニレン）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｌ４は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリーレン、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ４は、非置換のアルキレン、非置換のヘテロアルキレン、非置換のシクロアルキレン、非置換のヘテロシクロアルキレン、非置換のアリーレン又は非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ４は、非置換のアルキレン（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキレン）である。実施形態において、Ｌ４は結合である。
本明細書で提供される式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）及び（ＸＶ－Ｃ）並びにその実施形態では、ｚ２は、２～９０（例えば、５～９０、１０～９０又は２０～９０）、２～８０（例えば、５～８０、１０～８０又は２０～８０）、２～７０（例えば、５～７０、１０～７０又は２０～７０）、２～５０（例えば、５～５０、１０～５０又は２０～５０）又は２～２５の整数でもよい。実施形態において、ｚ１及びｚ３は、独立に、０～９０（例えば、５～９０、１０～９０又は２０～９０）、０～８０（例えば、５～８０、１０～８０又は２０～８０）、０～７０（例えば、５～７０、１０～７０又は２０～７０）、０～５０（例えば、５～５０、１０～５０又は２０～５０）又は２～２５の整数である。実施形態において、ｚ１及びｚ３は、独立に、２～９０（例えば、５～９０、１０～９０又は２０～９０）、２～８０（例えば、５～８０、１０～８０又は２０～８０）、２～７０（例えば、５～７０、１０～７０又は２０～７０）、２～５０（例えば、５～５０、１０～５０又は２０～５０）又は２～２５の整数である。実施形態において、ｚ４は、独立に、１～９０（例えば、５～９０、１０～９０又は２０～９０）、１～８０（例えば、５～８０、１０～８０又は２０～８０）、１～７０（例えば、５～７０、１０～７０又は２０～７０）、１～５０（例えば、５～５０、１０～５０又は２０～５０）又は２～２５の整数である。実施形態において、ｚ４は、独立に、２～９０（例えば、５～９０、１０～９０又は２０～９０）、２～８０（例えば、５～８０、１０～８０又は２０～８０）、２～７０（例えば、５～７０、１０～７０又は２０～７０）、２～５０（例えば、５～５０、１０～５０又は２０～５０）又は２～２５の整数である。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000110
 の構造を有する。
式（ＸＶＩ－Ｃ）又は（ＸＶＩＩ－Ｃ）において、Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－である。Ｘ２は－Ｏ－又は－Ｓ－であり；Ｒ１及びＲ２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；Ｌ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンである。Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルであり；Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－、又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり；Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；ｎ１は０～５０の整数であり；ｚ２は２～１００の整数であり；ｚ５は１～１０の整数である。
式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）、（ＸＶ－Ｃ）、（ＸＶＩ－Ｃ）及び（ＸＶＩＩ－Ｃ）では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４又はＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員、又は４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６又はＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員、又は５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０又はフェニル）又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員、又は５～６員）でもよい。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は水素である。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式：
Figure 2023535730000111
 を有し、式中、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；ｚ２は１～５０の整数である。
実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１．１、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ２４、Ｒ２５及びＲ２６は、独立に、水素である。
本明細書で提供される式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）、（ＸＶ－Ｃ）、（ＸＶＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩＩ－Ｃ）及び（ＸＩＸ－Ｃ）、並びにその実施形態では、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ４０、Ｒ４１、Ｒ４２、Ｒ２０１、Ｒ２０２及びＲ２０３は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４又はＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員、又は４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６又はＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員、又は５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０又はフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員、又は５～６員）でもよい。実施形態において、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ４０、Ｒ４１、Ｒ４２、Ｒ２０１、Ｒ２０２及びＲ２０３は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ４０、Ｒ４１、Ｒ４２、Ｒ２０１、Ｒ２０２及びＲ２０３は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ４０、Ｒ４１、Ｒ４２、Ｒ２０１、Ｒ２０２及びＲ２０３は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３Ａ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ４０、Ｒ４１、Ｒ４２、Ｒ２０１、Ｒ２０２及びＲ２０３は水素である。
本明細書で提供される式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩＶ－Ｃ）、（ＸＶ－Ｃ）、（ＸＶＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩ－Ｃ）、（ＸＶＩＩＩ－Ｃ）及び（ＸＩＸ－Ｃ）、並びにその実施形態では、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４又はＣ１～Ｃ２）、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員、又は４～５員）でもよい。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基又は低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、非置換アルキル又は非置換のヘテロアルキルである。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は水素である。
実施形態において、Ｚは求核性部分である。実施形態において、Ｚは、－Ｓ－、－ＯＲ１３－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－、又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、式中、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｚは－Ｓ－である。実施形態において、Ｚは－Ｓ＋Ｒ１３－である。実施形態において、Ｚは－ＮＲ１３－である。実施形態において、Ｚは－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－である。実施形態において、Ｚは－Ｓ＋Ｈ－である。実施形態において、Ｚは－ＮＨ－である。実施形態において、Ｚは－Ｎ＋Ｈ２－である。実施形態において、Ｚは－ＯＨ－である。実施形態において、Ｚは－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－でありＲ１３は水素である。
実施形態において、Ｒ１３は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１３は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１３は水素である。実施形態において、Ｒ１３は－ＮＨ３ ＋である。実施形態において、Ｒ１３は－ＮＨ２である。
実施形態において、Ｒ１３Ａは、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１３Ａは、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３Ａは、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１Ａ３は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１３Ａは水素である。実施形態において、Ｒ１３Ａは－ＮＨ３ ＋である。実施形態において、Ｒ１３Ａは－ＮＨ２である。
実施形態において、Ｚは、
Figure 2023535730000112
 であり、式中、Ｘ３は、－Ｃ（Ｒ１５）－又は－Ｎ－であり；Ｘ４は、結合、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１６）２－、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１７）２－、－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－又は－Ｃ（Ｒ１６）（Ｒ１７）－Ｃ（Ｒ１８）（Ｒ１９）－であり；Ｘ５は求核性部分であり、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｘ３は－ＣＨである。
実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｘ５は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、式中、Ｒ１３は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式（ＸＸ－Ｃ）：
Figure 2023535730000113
 を有し、式中、ｚ２は本明細書で定義される通りである。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式（ＸＸｂ－Ｃ）：
Figure 2023535730000114
 を有し、式中、ｚ２は本明細書で定義される通りである。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式（ＸＸＩ－Ｃ）：
Figure 2023535730000115
 を有し、式中、ｚ２及びＲ１３Ａは本明細書で定義される通りである。
実施形態において、ｐＨ感受性崩壊ドメインは式（ＸＸＩａ－Ｃ）：
Figure 2023535730000116
 を有し、式中、ｚ２及びＲ１３Ａは本明細書で定義される通りである。
実施形態において、親油性ポリマードメイン（ＬＰ１又はＬＰ２）は式：
Figure 2023535730000117
 を有し、式中、ｎ２は１～１００の整数であり；Ｒ２０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１２アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１１アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ２アルキルである。
実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９～Ｃ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１２アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１１アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ１０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０は非置換のＣ２アルケニルである。
実施形態において、Ｒ２０はステアリル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０はオレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０はリノレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０はドデシル部分（例えば、非置換Ｃ１２アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０はノネニル部分（例えば、非置換Ｃ９アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０は、
Figure 2023535730000118
 である。
実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、独立に、水素又は置換若しくは非置換のアルキルである。
実施形態において、ｎ１は２である。
実施形態において、Ｘ２は－Ｏ－である。
実施形態において、ｚ１又はｚ３は独立に１０～４０の整数である。
実施形態において、ｚ２は独立に３～２０の整数である。
実施形態において、ＬＰ１は式：
Figure 2023535730000119
 を有し、式中、ｎ２１は１～１００の整数である。
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、ｎ２１は１０～４０である。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１２アルキルである。
実施形態において、Ｒ２０１は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０１は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０１は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０１は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ８～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ８～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ９～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ９～Ｃ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１２アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１１アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ９アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ２アルキルである。
実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ８～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ８～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ９～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ９～Ｃ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１２アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１１アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ１０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０１は非置換のＣ２アルケニルである。
実施形態において、Ｒ２０１はステアリル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０１はオレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０１はリノレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０１はドデシル部分（例えば、非置換Ｃ１２アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０１はノネニル部分（例えば、非置換Ｃ９アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０１は、
Figure 2023535730000120
 である。
実施形態において、ｎ２１は５でありＲ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、ｎ２１は６でありＲ２０１は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、非置換Ｃ１８アルケニルはオレイルである。
実施形態において、ＬＰ２は式：
Figure 2023535730000121
 を有する。ｎ２２は１～１００の整数である。Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０２は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０２は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０２は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０２は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ８～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ８～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ９～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ９～Ｃ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１２アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１１アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ２アルキルである。
実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ８～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ８～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ９～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ９～Ｃ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１２アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１１アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ２アルケニルである。
実施形態において、Ｒ２０２はステアリル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０２はオレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０２はリノレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０２はドデシル部分（例えば、非置換Ｃ１２アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０２はノネニル部分（例えば、非置換Ｃ９アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０２は、
Figure 2023535730000122
 である。
実施形態において、ｎ２２は１０～３５である。実施形態において、Ｒ２０２は非置換のＣ１２アルケニルである。
実施形態において、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、ｎ２２は６であり、Ｒ２０２は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、非置換Ｃ９アルケニルはノネニルである。
実施形態において、親油性ポリマードメインは、以下の式（Ｉａ－Ｃ）：
Figure 2023535730000123
 の化合物であり、式中、Ｘ６は、－Ｏ－、－ＮＨ－、－ＣＯ２－、－ＣＯＮＨ－、－Ｏ２Ｃ－、又は－ＮＨＣＯ－でもよく、Ｒ２０は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ２１は、水素、置換若しくは非置換のアルキルであり、ｎは１～１００の整数である。実施形態において、Ｒ２０はオリゴグリコール部分である。
実施形態において、Ｒ２０は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２１は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２１は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２１は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２１は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、親油性ポリマーは構造：
Figure 2023535730000124
 を有し、式中、Ｘ７は、－Ｏ－、－ＮＨ－、－ＣＯ２－、－ＣＯＮＨ－、－Ｏ２Ｃ－、又は－ＮＨＣＯ－であり、Ｒ２２は、水素又は置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ２３は、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２２はオリゴグリコール部分である。
実施形態において、Ｒ２２は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２２は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２２は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２２は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、親油性ポリマードメイン（例えば、ＬＰ１、ＬＰ２）は式：
Figure 2023535730000125
 を有し、式中、Ｒ１００は、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、水素、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｎ１００は、２又は本明細書で定義される通りのそれよりも大きい整数である。
実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は水素である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは式（Ｉｃ－Ｃ）：
Figure 2023535730000126
 を有し、式中、Ｒ２００は、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、ｎ２００は２又はそれよりも大きい整数である。実施形態において、Ｒ２００はオリゴグリコール部分である。実施形態において、Ｒ２００はアミン末端オリゴグリコール部分である。用語「オリゴグリコール部分」とは、
Figure 2023535730000127
 のことであり、「アミン末端オリゴグリコール部分」とは、
Figure 2023535730000128
 のことであり、式中、ｎ２００は２又はそれよりも大きい整数である。
実施形態において、Ｒ２００は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２００は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２００は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２００は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。実施形態において、Ｒ２００は水素である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは式：
Figure 2023535730000129
 を有し、式中、Ｒは、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、Ｒ３００及びＲ３０１は、独立に、水素又は置換若しくは非置換のアルキルであり、ｎ３００は本明細書に定義されている通りである。実施形態において、Ｒ３０２はオリゴグリコール部分である。実施形態において、Ｒはアミン末端オリゴグリコール部分である。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は水素である。
実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３００、Ｒ３０１及びＲ３０２は、独立に、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、親油性ポリマードメインは下の式を有し、式中、Ｒは、ステアリル、オレイル、リノレイル、ドデシル、ノネイル及びコレステロール：
Figure 2023535730000130
 としてそこに定義される。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000131
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４は本明細書に定義される通りである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000132
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４は本明細書に定義される通りである。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000133
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４は本明細書に定義される通りである。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000134
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４は本明細書に定義される通りである。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000135
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４は本明細書に定義される通りである。実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000136
 を有し、式中、ＬＰ１、ＬＰ２、ＩＭ、Ｌ１、Ｌ２、Ｒ２Ａ、ｚ１、ｚ２、ｚ３及びｚ４は本明細書に定義される通りである。
実施形態において、ｚ１、ｚ３及びｚ４は独立に、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２、又は２～１０の整数であり得、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない。実施形態において、ｚ１、ｚ３及びｚ４は独立に、範囲２～１００又は２～５０の整数であり得、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０ではない。
実施形態において、ｚ１は０である。実施形態において、ｚ１は１である。実施形態において、ｚ１は２である。実施形態において、ｚ１は３である。実施形態において、ｚ１は４である。実施形態において、ｚ１は５である。実施形態において、ｚ１は６である。実施形態において、ｚ１は７である。実施形態において、ｚ１は８である。実施形態において、ｚ１は９である。実施形態において、ｚ１は１０である。実施形態において、ｚ１は１１である。実施形態において、ｚ１は１２である。実施形態において、ｚ１は１３である。実施形態において、ｚ１は１４である。実施形態において、ｚ１は１５である。実施形態において、ｚ１は１６である。実施形態において、ｚ１は１７である。実施形態において、ｚ１は１８である。実施形態において、ｚ１は１９である。実施形態において、ｚ１は２０である。実施形態において、ｚ１は２１である。実施形態において、ｚ１は２２である。実施形態において、ｚ１は２３である。実施形態において、ｚ１は２４である。実施形態において、ｚ１は２５である。実施形態において、ｚ１は２６である。実施形態において、ｚ１は２７である。実施形態において、ｚ１は２８である。実施形態において、ｚ１は２９である。実施形態において、ｚ１は３０である。実施形態において、ｚ１は３１である。実施形態において、ｚ１は３２である。実施形態において、ｚ１は３３である。実施形態において、ｚ１は３４である。実施形態において、ｚ１は３５である。実施形態において、ｚ１は３６である。実施形態において、ｚ１は３７である。実施形態において、ｚ１は３８である。実施形態において、ｚ１は３９である。実施形態において、ｚ１は４０である。実施形態において、ｚ１は４１である。実施形態において、ｚ１は４２である。実施形態において、ｚ１は４３である。実施形態において、ｚ１は４４である。実施形態において、ｚ１は４５である。実施形態において、ｚ１は４６である。実施形態において、ｚ１は４７である。実施形態において、ｚ１は４８である。実施形態において、ｚ１は４９である。実施形態において、ｚ１は５０である。実施形態において、ｚ１は５１である。実施形態において、ｚ１は５２である。実施形態において、ｚ１は５３である。実施形態において、ｚ１は５４である。実施形態において、ｚ１は５５である。実施形態において、ｚ１は５６である。実施形態において、ｚ１は５７である。実施形態において、ｚ１は５８である。実施形態において、ｚ１は５９である。実施形態において、ｚ１は６０である。実施形態において、ｚ１は６１である。実施形態において、ｚ１は６２である。実施形態において、ｚ１は６３である。実施形態において、ｚ１は６４である。実施形態において、ｚ１は６５である。実施形態において、ｚ１は６６である。実施形態において、ｚ１は６７である。実施形態において、ｚ１は６８である。実施形態において、ｚ１は６９である。実施形態において、ｚ１は７０である。実施形態において、ｚ１は７１である。実施形態において、ｚ１は７２である。実施形態において、ｚ１は７３である。実施形態において、ｚ１は７４である。実施形態において、ｚ１は７５である。実施形態において、ｚ１は７６である。実施形態において、ｚ１は７７である。実施形態において、ｚ１は７８である。実施形態において、ｚ１は７９である。実施形態において、ｚ１は８０である。実施形態において、ｚ１は８１である。実施形態において、ｚ１は８２である。実施形態において、ｚ１は８３である。実施形態において、ｚ１は８４である。実施形態において、ｚ１は８５である。実施形態において、ｚ１は８６である。実施形態において、ｚ１は８７である。実施形態において、ｚ１は８８である。実施形態において、ｚ１は８９である。実施形態において、ｚ１は９０である。実施形態において、ｚ１は９１である。実施形態において、ｚ１は９２である。実施形態において、ｚ１は９３である。実施形態において、ｚ１は９４である。実施形態において、ｚ１は９５である。実施形態において、ｚ１は９６である。実施形態において、ｚ１は９７である。実施形態において、ｚ１は９８である。実施形態において、ｚ１は９９である。実施形態において、ｚ１は１００である。
実施形態において、ｚ３は０である。実施形態において、ｚ３は１である。実施形態において、ｚ３は２である。実施形態において、ｚ３は３である。実施形態において、ｚ３は４である。実施形態において、ｚ３は５である。実施形態において、ｚ３は６である。実施形態において、ｚ３は７である。実施形態において、ｚ３は８である。実施形態において、ｚ３は９である。実施形態において、ｚ３は１０である。実施形態において、ｚ３は１１である。実施形態において、ｚ３は１２である。実施形態において、ｚ３は１３である。実施形態において、ｚ３は１４である。実施形態において、ｚ３は１５である。実施形態において、ｚ３は１６である。実施形態において、ｚ３は１７である。実施形態において、ｚ３は１８である。実施形態において、ｚ３は１９である。実施形態において、ｚ３は２０である。実施形態において、ｚ３は２１である。実施形態において、ｚ３は２２である。実施形態において、ｚ３は２３である。実施形態において、ｚ３は２４である。実施形態において、ｚ３は２５である。実施形態において、ｚ３は２６である。実施形態において、ｚ３は２７である。実施形態において、ｚ３は２８である。実施形態において、ｚ３は２９である。実施形態において、ｚ３は３０である。実施形態において、ｚ３は３１である。実施形態において、ｚ３は３２である。実施形態において、ｚ３は３３である。実施形態において、ｚ３は３４である。実施形態において、ｚ３は３５である。実施形態において、ｚ３は３６である。実施形態において、ｚ３は３７である。実施形態において、ｚ３は３８である。実施形態において、ｚ３は３９である。実施形態において、ｚ３は４０である。実施形態において、ｚ３は４１である。実施形態において、ｚ３は４２である。実施形態において、ｚ３は４３である。実施形態において、ｚ３は４４である。実施形態において、ｚ３は４５である。実施形態において、ｚ３は４６である。実施形態において、ｚ３は４７である。実施形態において、ｚ３は４８である。実施形態において、ｚ３は４９である。実施形態において、ｚ３は５０である。実施形態において、ｚ３は５１である。実施形態において、ｚ３は５２である。実施形態において、ｚ３は５３である。実施形態において、ｚ３は５４である。実施形態において、ｚ３は５５である。実施形態において、ｚ３は５６である。実施形態において、ｚ３は５７である。実施形態において、ｚ３は５８である。実施形態において、ｚ３は５９である。実施形態において、ｚ３は６０である。実施形態において、ｚ３は６１である。実施形態において、ｚ３は６２である。実施形態において、ｚ３は６３である。実施形態において、ｚ３は６４である。実施形態において、ｚ３は６５である。実施形態において、ｚ３は６６である。実施形態において、ｚ３は６７である。実施形態において、ｚ３は６８である。実施形態において、ｚ３は６９である。実施形態において、ｚ３は７０である。実施形態において、ｚ３は７１である。実施形態において、ｚ３は７２である。実施形態において、ｚ３は７３である。実施形態において、ｚ３は７４である。実施形態において、ｚ３は７５である。実施形態において、ｚ３は７６である。実施形態において、ｚ３は７７である。実施形態において、ｚ３は７８である。実施形態において、ｚ３は７９である。実施形態において、ｚ３は８０である。実施形態において、ｚ３は８１である。実施形態において、ｚ３は８２である。実施形態において、ｚ３は８３である。実施形態において、ｚ３は８４である。実施形態において、ｚ３は８５である。実施形態において、ｚ３は８６である。実施形態において、ｚ３は８７である。実施形態において、ｚ３は８８である。実施形態において、ｚ３は８９である。実施形態において、ｚ３は９０である。実施形態において、ｚ３は９１である。実施形態において、ｚ３は９２である。実施形態において、ｚ３は９３である。実施形態において、ｚ３は９４である。実施形態において、ｚ３は９５である。実施形態において、ｚ３は９６である。実施形態において、ｚ３は９７である。実施形態において、ｚ３は９８である。実施形態において、ｚ３は９９である。実施形態において、ｚ３は１００である。
実施形態において、ｚ４は１である。実施形態において、ｚ４は２である。実施形態において、ｚ４は３である。実施形態において、ｚ４は４である。実施形態において、ｚ４は５である。実施形態において、ｚ４は６である。実施形態において、ｚ４は７である。実施形態において、ｚ４は８である。実施形態において、ｚ４は９である。実施形態において、ｚ４は１０である。実施形態において、ｚ４は１１である。実施形態において、ｚ４は１２である。実施形態において、ｚ４は１３である。実施形態において、ｚ４は１４である。実施形態において、ｚ４は１５である。実施形態において、ｚ４は１６である。実施形態において、ｚ４は１７である。実施形態において、ｚ４は１８である。実施形態において、ｚ４は１９である。実施形態において、ｚ４は２０である。実施形態において、ｚ４は２１である。実施形態において、ｚ４は２２である。実施形態において、ｚ４は２３である。実施形態において、ｚ４は２４である。実施形態において、ｚ４は２５である。実施形態において、ｚ４は２６である。実施形態において、ｚ４は２７である。実施形態において、ｚ４は２８である。実施形態において、ｚ４は２９である。実施形態において、ｚ４は３０である。実施形態において、ｚ４は３１である。実施形態において、ｚ４は３２である。実施形態において、ｚ４は３３である。実施形態において、ｚ４は３４である。実施形態において、ｚ４は３５である。実施形態において、ｚ４は３６である。実施形態において、ｚ４は３７である。実施形態において、ｚ４は３８である。実施形態において、ｚ４は３９である。実施形態において、ｚ４は４０である。実施形態において、ｚ４は４１である。実施形態において、ｚ４は４２である。実施形態において、ｚ４は４３である。実施形態において、ｚ４は４４である。実施形態において、ｚ４は４５である。実施形態において、ｚ４は４６である。実施形態において、ｚ４は４７である。実施形態において、ｚ４は４８である。実施形態において、ｚ４は４９である。実施形態において、ｚ４は５０である。実施形態において、ｚ４は５１である。実施形態において、ｚ４は５２である。実施形態において、ｚ４は５３である。実施形態において、ｚ４は５４である。実施形態において、ｚ４は５５である。実施形態において、ｚ４は５６である。実施形態において、ｚ４は５７である。実施形態において、ｚ４は５８である。実施形態において、ｚ４は５９である。実施形態において、ｚ４は６０である。実施形態において、ｚ４は６１である。実施形態において、ｚ４は６２である。実施形態において、ｚ４は６３である。実施形態において、ｚ４は６４である。実施形態において、ｚ４は６５である。実施形態において、ｚ４は６６である。実施形態において、ｚ４は６７である。実施形態において、ｚ４は６８である。実施形態において、ｚ４は６９である。実施形態において、ｚ４は７０である。実施形態において、ｚ４は７１である。実施形態において、ｚ４は７２である。実施形態において、ｚ４は７３である。実施形態において、ｚ４は７４である。実施形態において、ｚ４は７５である。実施形態において、ｚ４は７６である。実施形態において、ｚ４は７７である。実施形態において、ｚ４は７８である。実施形態において、ｚ４は７９である。実施形態において、ｚ４は８０である。実施形態において、ｚ４は８１である。実施形態において、ｚ４は８２である。実施形態において、ｚ４は８３である。実施形態において、ｚ４は８４である。実施形態において、ｚ４は８５である。実施形態において、ｚ４は８６である。実施形態において、ｚ４は８７である。実施形態において、ｚ４は８８である。実施形態において、ｚ４は８９である。実施形態において、ｚ４は９０である。実施形態において、ｚ４は９１である。実施形態において、ｚ４は９２である。実施形態において、ｚ４は９３である。実施形態において、ｚ４は９４である。実施形態において、ｚ４は９５である。実施形態において、ｚ４は９６である。実施形態において、ｚ４は９７である。実施形態において、ｚ４は９８である。実施形態において、ｚ４は９９である。実施形態において、ｚ４は１００である。
実施形態において、ｎは２である。実施形態において、ｎは３である。実施形態において、ｎは４である。実施形態において、ｎは５である。実施形態において、ｎは６である。実施形態において、ｎは７である。実施形態において、ｎは８である。実施形態において、ｎは９である。実施形態において、ｎは１０である。実施形態において、ｎは１１である。実施形態において、ｎは１２である。実施形態において、ｎは１３である。実施形態において、ｎは１４である。実施形態において、ｎは１５である。実施形態において、ｎは１６である。実施形態において、ｎは１７である。実施形態において、ｎは１８である。実施形態において、ｎは１９である。実施形態において、ｎは２０である。実施形態において、ｎは２１である。実施形態において、ｎは２２である。実施形態において、ｎは２３である。実施形態において、ｎは２４である。実施形態において、ｎは２５である。実施形態において、ｎは２６である。実施形態において、ｎは２７である。実施形態において、ｎは２８である。実施形態において、ｎは２９である。実施形態において、ｎは３０である。実施形態において、ｎは３１である。実施形態において、ｎは３２である。実施形態において、ｎは３３である。実施形態において、ｎは３４である。実施形態において、ｎは３５である。実施形態において、ｎは３６である。実施形態において、ｎは３７である。実施形態において、ｎは３８である。実施形態において、ｎは３９である。実施形態において、ｎは４０である。実施形態において、ｎは４１である。実施形態において、ｎは４２である。実施形態において、ｎは４３である。実施形態において、ｎは４４である。実施形態において、ｎは４５である。実施形態において、ｎは４６である。実施形態において、ｎは４７である。実施形態において、ｎは４８である。実施形態において、ｎは４９である。実施形態において、ｎは５０である。実施形態において、ｎは５１である。実施形態において、ｎは５２である。実施形態において、ｎは５３である。実施形態において、ｎは５４である。実施形態において、ｎは５５である。実施形態において、ｎは５６である。実施形態において、ｎは５７である。実施形態において、ｎは５８である。実施形態において、ｎは５９である。実施形態において、ｎは６０である。実施形態において、ｎは６１である。実施形態において、ｎは６２である。実施形態において、ｎは６３である。実施形態において、ｎは６４である。実施形態において、ｎは６５である。実施形態において、ｎは６６である。実施形態において、ｎは６７である。実施形態において、ｎは６８である。実施形態において、ｎは６９である。実施形態において、ｎは７０である。実施形態において、ｎは７１である。実施形態において、ｎは７２である。実施形態において、ｎは７３である。実施形態において、ｎは７４である。実施形態において、ｎは７５である。実施形態において、ｎは７６である。実施形態において、ｎは７７である。実施形態において、ｎは７８である。実施形態において、ｎは７９である。実施形態において、ｎは８０である。実施形態において、ｎは８１である。実施形態において、ｎは８２である。実施形態において、ｎは８３である。実施形態において、ｎは８４である。実施形態において、ｎは８５である。実施形態において、ｎは８６である。実施形態において、ｎは８７である。実施形態において、ｎは８８である。実施形態において、ｎは８９である。実施形態において、ｎは９０である。実施形態において、ｎは９１である。実施形態において、ｎは９２である。実施形態において、ｎは９３である。実施形態において、ｎは９４である。実施形態において、ｎは９５である。実施形態において、ｎは９６である。実施形態において、ｎは９７である。実施形態において、ｎは９８である。実施形態において、ｎは９９である。実施形態において、ｎは１００である。
実施形態において、ｎ１は０である。実施形態において、ｎ１は１である。実施形態において、ｎ１は２である。実施形態において、ｎ１は３である。実施形態において、ｎ１は４である。実施形態において、ｎ１は５である。実施形態において、ｎ１は６である。実施形態において、ｎ１は７である。実施形態において、ｎ１は８である。実施形態において、ｎ１は９である。実施形態において、ｎ１は１０である。実施形態において、ｎ１は１１である。実施形態において、ｎ１は１２である。実施形態において、ｎ１は１３である。実施形態において、ｎ１は１４である。実施形態において、ｎ１は１５である。実施形態において、ｎ１は１６である。実施形態において、ｎ１は１７である。実施形態において、ｎ１は１８である。実施形態において、ｎ１は１９である。実施形態において、ｎ１は２０である。実施形態において、ｎ１は２１である。実施形態において、ｎ１は２２である。実施形態において、ｎ１は２３である。実施形態において、ｎ１は２４である。実施形態において、ｎ１は２５である。実施形態において、ｎ１は２６である。実施形態において、ｎ１は２７である。実施形態において、ｎ１は２８である。実施形態において、ｎ１は２９である。実施形態において、ｎ１は３０である。実施形態において、ｎ１は３１である。実施形態において、ｎ１は３２である。実施形態において、ｎ１は３３である。実施形態において、ｎ１は３４である。実施形態において、ｎ１は３５である。実施形態において、ｎ１は３６である。実施形態において、ｎ１は３７である。実施形態において、ｎ１は３８である。実施形態において、ｎ１は３９である。実施形態において、ｎ１は４０である。実施形態において、ｎ１は４１である。実施形態において、ｎ１は４２である。実施形態において、ｎ１は４３である。実施形態において、ｎ１は４４である。実施形態において、ｎ１は４５である。実施形態において、ｎ１は４６である。実施形態において、ｎ１は４７である。実施形態において、ｎ１は４８である。実施形態において、ｎ１は４９である。実施形態において、ｎ１は５０である。
実施形態において、ｎ２は１である。実施形態において、ｎ２は２である。実施形態において、ｎ２は３である。実施形態において、ｎ２は４である。実施形態において、ｎ２は５である。実施形態において、ｎ２は６である。実施形態において、ｎ２は７である。実施形態において、ｎ２は８である。実施形態において、ｎ２は９である。実施形態において、ｎ２は１０である。実施形態において、ｎ２は１１である。実施形態において、ｎ２は１２である。実施形態において、ｎ２は１３である。実施形態において、ｎ２は１４である。実施形態において、ｎ２は１５である。実施形態において、ｎ２は１６である。実施形態において、ｎ２は１７である。実施形態において、ｎ２は１８である。実施形態において、ｎ２は１９である。実施形態において、ｎ２は２０である。実施形態において、ｎ２は２１である。実施形態において、ｎ２は２２である。実施形態において、ｎ２は２３である。実施形態において、ｎ２は２４である。実施形態において、ｎ２は２５である。実施形態において、ｎ２は２６である。実施形態において、ｎ２は２７である。実施形態において、ｎ２は２８である。実施形態において、ｎ２は２９である。実施形態において、ｎ２は３０である。実施形態において、ｎ２は３１である。実施形態において、ｎ２は３２である。実施形態において、ｎ２は３３である。実施形態において、ｎ２は３４である。実施形態において、ｎ２は３５である。実施形態において、ｎ２は３６である。実施形態において、ｎ２は３７である。実施形態において、ｎ２は３８である。実施形態において、ｎ２は３９である。実施形態において、ｎ２は４０である。実施形態において、ｎ２は４１である。実施形態において、ｎ２は４２である。実施形態において、ｎ２は４３である。実施形態において、ｎ２は４４である。実施形態において、ｎ２は４５である。実施形態において、ｎ２は４６である。実施形態において、ｎ２は４７である。実施形態において、ｎ２は４８である。実施形態において、ｎ２は４９である。実施形態において、ｎ２は５０である。実施形態において、ｎ２は５１である。実施形態において、ｎ２は５２である。実施形態において、ｎ２は５３である。実施形態において、ｎ２は５４である。実施形態において、ｎ２は５５である。実施形態において、ｎ２は５６である。実施形態において、ｎ２は５７である。実施形態において、ｎ２は５８である。実施形態において、ｎ２は５９である。実施形態において、ｎ２は６０である。実施形態において、ｎ２は６１である。実施形態において、ｎ２は６２である。実施形態において、ｎ２は６３である。実施形態において、ｎ２は６４である。実施形態において、ｎ２は６５である。実施形態において、ｎ２は６６である。実施形態において、ｎ２は６７である。実施形態において、ｎ２は６８である。実施形態において、ｎ２は６９である。実施形態において、ｎ２は７０である。実施形態において、ｎ２は７１である。実施形態において、ｎ２は７２である。実施形態において、ｎ２は７３である。実施形態において、ｎ２は７４である。実施形態において、ｎ２は７５である。実施形態において、ｎ２は７６である。実施形態において、ｎ２は７７である。実施形態において、ｎ２は７８である。実施形態において、ｎ２は７９である。実施形態において、ｎ２は８０である。実施形態において、ｎ２は８１である。実施形態において、ｎ２は８２である。実施形態において、ｎ２は８３である。実施形態において、ｎ２は８４である。実施形態において、ｎ２は８５である。実施形態において、ｎ２は８６である。実施形態において、ｎ２は８７である。実施形態において、ｎ２は８８である。実施形態において、ｎ２は８９である。実施形態において、ｎ２は９０である。実施形態において、ｎ２は９１である。実施形態において、ｎ２は９２である。実施形態において、ｎ２は９３である。実施形態において、ｎ２は９４である。実施形態において、ｎ２は９５である。実施形態において、ｎ２は９６である。実施形態において、ｎ２は９７である。実施形態において、ｎ２は９８である。実施形態において、ｎ２は９９である。実施形態において、ｎ２は１００である。
実施形態において、ｚ２は２である。実施形態において、ｚ２は３である。実施形態において、ｚ２は４である。実施形態において、ｚ２は５である。実施形態において、ｚ２は６である。実施形態において、ｚ２は７である。実施形態において、ｚ２は８である。実施形態において、ｚ２は９である。実施形態において、ｚ２は１０である。実施形態において、ｚ２は１１である。実施形態において、ｚ２は１２である。実施形態において、ｚ２は１３である。実施形態において、ｚ２は１４である。実施形態において、ｚ２は１５である。実施形態において、ｚ２は１６である。実施形態において、ｚ２は１７である。実施形態において、ｚ２は１８である。実施形態において、ｚ２は１９である。実施形態において、ｚ２は２０である。実施形態において、ｚ２は２１である。実施形態において、ｚ２は２２である。実施形態において、ｚ２は２３である。実施形態において、ｚ２は２４である。実施形態において、ｚ２は２５である。実施形態において、ｚ２は２６である。実施形態において、ｚ２は２７である。実施形態において、ｚ２は２８である。実施形態において、ｚ２は２９である。実施形態において、ｚ２は３０である。実施形態において、ｚ２は３１である。実施形態において、ｚ２は３２である。実施形態において、ｚ２は３３である。実施形態において、ｚ２は３４である。実施形態において、ｚ２は３５である。実施形態において、ｚ２は３６である。実施形態において、ｚ２は３７である。実施形態において、ｚ２は３８である。実施形態において、ｚ２は３９である。実施形態において、ｚ２は４０である。実施形態において、ｚ２は４１である。実施形態において、ｚ２は４２である。実施形態において、ｚ２は４３である。実施形態において、ｚ２は４４である。実施形態において、ｚ２は４５である。実施形態において、ｚ２は４６である。実施形態において、ｚ２は４７である。実施形態において、ｚ２は４８である。実施形態において、ｚ２は４９である。実施形態において、ｚ２は５０である。実施形態において、ｚ２は５１である。実施形態において、ｚ２は５２である。実施形態において、ｚ２は５３である。実施形態において、ｚ２は５４である。実施形態において、ｚ２は５５である。実施形態において、ｚ２は５６である。実施形態において、ｚ２は５７である。実施形態において、ｚ２は５８である。実施形態において、ｚ２は５９である。実施形態において、ｚ２は６０である。実施形態において、ｚ２は６１である。実施形態において、ｚ２は６２である。実施形態において、ｚ２は６３である。実施形態において、ｚ２は６４である。実施形態において、ｚ２は６５である。実施形態において、ｚ２は６６である。実施形態において、ｚ２は６７である。実施形態において、ｚ２は６８である。実施形態において、ｚ２は６９である。実施形態において、ｚ２は７０である。実施形態において、ｚ２は７１である。実施形態において、ｚ２は７２である。実施形態において、ｚ２は７３である。実施形態において、ｚ２は７４である。実施形態において、ｚ２は７５である。実施形態において、ｚ２は７６である。実施形態において、ｚ２は７７である。実施形態において、ｚ２は７８である。実施形態において、ｚ２は７９である。実施形態において、ｚ２は８０である。実施形態において、ｚ２は８１である。実施形態において、ｚ２は８２である。実施形態において、ｚ２は８３である。実施形態において、ｚ２は８４である。実施形態において、ｚ２は８５である。実施形態において、ｚ２は８６である。実施形態において、ｚ２は８７である。実施形態において、ｚ２は８８である。実施形態において、ｚ２は８９である。実施形態において、ｚ２は９０である。実施形態において、ｚ２は９１である。実施形態において、ｚ２は９２である。実施形態において、ｚ２は９３である。実施形態において、ｚ２は９４である。実施形態において、ｚ２は９５である。実施形態において、ｚ２は９６である。実施形態において、ｚ２は９７である。実施形態において、ｚ２は９８である。実施形態において、ｚ２は９９である。実施形態において、ｚ２は１００である。
実施形態において、ｚ５は１である。実施形態において、ｚ５は２である。実施形態において、ｚ５は３である。実施形態において、ｚ５は４である。実施形態において、ｚ５は５である。実施形態において、ｚ５は６である。実施形態において、ｚ５は７である。実施形態において、ｚ５は８である。実施形態において、ｚ５は９である。実施形態において、ｚ５は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｚ２が２～１００の整数である前述の式のいずれかを有する。実施形態において、ｚ２は、範囲２～１００、２～９０、２～８０、２～７０、２～６０、２～５０、２～４０、２～３０、２～２又は２～１０の整数であり得る。実施形態において、ｚ２は２～１００又は２～５０の整数である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｚ５が１～３の整数である前述の式のいずれかを有する。他の実施形態において、ｚ５は１又は３である。さらに一部の他の実施形態において、ｚ５は１である。一部の他の実施形態において、ｚ５は３である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、Ｒ２が水素である前述の式のいずれかを有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、Ｌ２が結合である前述の式のいずれかを有する。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000137
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000138
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000139
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000140
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000141
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000142
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000143
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000144
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000145
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000146
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000147
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000148
 を有し、式中、ｎ２１は４であり、ｎ２２は４であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000149
 を有し、式中、ｎ２１は４であり、ｎ２２は４であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000150
 を有し、式中、ｎ２１は４であり、ｎ２２は４であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000151
 を有し、式中、ｎ２１は４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は４であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000152
 を有し、式中、ｎ２１は４であり、ｎ２２は４であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000153
 を有し、式中、ｎ２１は４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は４であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000154
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、ｎ２２は６であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000155
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は６であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000156
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、ｎ２２は６であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000157
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は６であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000158
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、ｎ２２は６であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000159
 を有し、式中、ｎ２１は５であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、ｎ２２は６であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000160
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000161
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000162
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000163
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000164
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000165
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000166
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000167
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000168
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000169
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000170
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000171
 を有し、式中、ｎ２１は１４であり、Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000172
 を有し、式中、ｎ２１は１０～２０の整数であり；
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；
ｚ２は、独立に、３～１０の整数である。
実施形態において、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000173
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２１は１０～２０の整数であり、Ｌ１は本明細書に記載される通りである。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000174
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２１は１４であり；Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はＣ１２Ｈ２５であり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000175
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２１は１２であり；Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０１はＣ１２Ｈ２５であり、ｚ２は６である。
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；
ｚ２は独立に、３～１０の整数である。
実施形態において、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000176
 を有し、式中、ｎ２２は１０～３５の整数であり；
Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；
ｚ２は、独立に、５～２０の整数である。
実施形態において、ｎ２２は１４であり、Ｒ２０２はドデシルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000177
 を有し、式中、ｎ２２は１０～３５の整数であり；Ｌ１は本明細書の通りに定義され；
Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；
ｚ２は独立に、５～２０の整数である。
実施形態において、ｎ２２は１４であり、Ｒ２０２はドデシルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000178
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２２は３１であり；Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０２はＣ１２Ｈ２５であり、ｚ２は１０である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000179
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２２は１５であり；Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０２はＣ１２Ｈ２５であり、ｚ２は５である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000180
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２２は１４であり；Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０２はＣ１２Ｈ２５であり、ｚ２は７である。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000181
 を有し、式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載される通りであり、ｎ２２は１６であり；Ｌ１は－Ｏ－であり、Ｒ２０２はＣ１２Ｈ２５であり、ｚ２は１５である。
実施形態において、細胞透過性複合体は第２のカチオン性両親媒性ポリマーをさらに含み、第２のカチオン性両親媒性ポリマーはカチオン性両親媒性ポリマーとは異なる。
実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000182
 を有し、
ｎ２３は１～１００の整数であり；
ｚ６は５～１５の整数であり；
Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；
Ｒ２０３は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000183
 を有し、
ｎ２３は１～１００の整数であり；
ｚ６は５～１５の整数であり；
Ｌ３Ａは、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり；
Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり；
Ｒ２０３は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
実施形態において、Ｒ２０３は、置換若しくは非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ８、Ｃ１～Ｃ６、Ｃ１～Ｃ４若しくはＣ１～Ｃ２）、置換若しくは非置換のヘテロアルキル（例えば、２～８員、２～６員、４～６員、２～３員若しくは４～５員）、置換若しくは非置換のシクロアルキル（例えば、Ｃ３～Ｃ８、Ｃ３～Ｃ６、Ｃ４～Ｃ６若しくはＣ５～Ｃ６）、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル（例えば、３～８員、３～６員、４～６員、４～５員若しくは５～６員）、置換若しくは非置換のアリール（例えば、Ｃ６～Ｃ１０若しくはフェニル）、又は置換若しくは非置換のヘテロアリール（例えば、５～１０員、５～９員若しくは５～６員）である。実施形態において、Ｒ２０３は、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のアリール、又は置換（例えば、置換基、サイズ限定置換基若しくは低級置換基で置換された）若しくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０３は、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール又は非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２０３は、水素又は非置換のアルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）である。
実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ８～Ｃ３０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ８～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ９～Ｃ２０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ９～Ｃ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１２アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１１アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１０アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ９アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ８アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ７アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ５アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ４アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ３アルキルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ２アルキルである。
実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ８～Ｃ３０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ８～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ９～Ｃ２０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ９～Ｃ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１２アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１１アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ１０アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ９アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ８アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ７アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ６アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ５アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ４アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ３アルケニルである。実施形態において、Ｒ２０３は非置換のＣ２アルケニルである。
実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000184
 を有し、式中、Ｒ３Ａは本明細書に記載される通りであり、Ｌ３Ａは－Ｏ－であり、ｚ６は１６であり、Ｒ２０３はＣ１２Ｈ２５であり、ｎ２３は１５である。
実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは式：
Figure 2023535730000185
 を有し、式中、Ｒ３Ａは本明細書に記載される通りであり、Ｌ３Ａは－Ｏ－であり、ｚ６は１１であり、Ｒ２０３はＣ１２Ｈ２５であり、ｎ２３は１３である。
実施形態において、Ｒ２０３はステアリル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０３はオレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０３はリノレイル部分（例えば、非置換Ｃ１８アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０３はドデシル部分（例えば、非置換Ｃ１２アルキル）である。実施形態において、Ｒ２０３はノネニル部分（例えば、非置換Ｃ９アルケニル）である。実施形態において、Ｒ２０３は、
Figure 2023535730000186
 である。
実施形態において、ｎ２３は１３であり、ｚ６は１１であり、Ｒ２０３はドデシルである。
実施形態において、ＣＡＲＴは式：
Figure 2023535730000187
Figure 2023535730000188
を有する。
核酸（例えば、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸）は、第１のカチオン性両親媒性ポリマー及び第２の両親媒性ポリマーに非共有結合され得、
第１のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000189
 ［式中、
Ｒ１Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、独立に、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、独立に、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、
Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ４は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンであり、
Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルであり、
Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、
Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｎ１は、０～５０の整数であり、
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
ｚ２は、２～１００の整数であり、
ｚ４は、１～１００の整数であり、
ｚ５は、１～１０の整数であり、第１のカチオン性両親媒性ポリマーと第２の両親媒性ポリマーは異なっている。］
を有する。
第１のカチオン性両親媒性ポリマーは、その実施形態を含めて本明細書で提供されるカチオン性両親媒性ポリマーのいずれかであってもよい。第２のカチオン性両親媒性ポリマーは、その実施形態を含めて本明細書で提供されるカチオン性両親媒性ポリマーのいずれかであってもよいし、本明細書で提供される複合体に有用な任意の他のカチオン性両親媒性ポリマーであってもよい。実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは、その全体があらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１８／０２２９３０号として出願されたＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ１７／４４２３８号に記載されるカチオン性両親媒性ポリマーのいずれかである。
実施形態において、第１のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000190
 ［式中、ｎ２１は、１０～２０の整数であり、
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｚ２は、独立に、３～１０の整数である。］
を有する。
実施形態において、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。
実施形態において、第１のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000191
 ［式中、ｎ２２は、１０～３５の整数であり、
Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｚ２は、独立に、５～２０の整数である。］
を有する。
実施形態において、ｎ２２は１４であり、Ｒ２０２はドデシルであり、ｚ２は７である。
実施形態において、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000192
 ［式中、ｎ２３は、１～１００の整数であり、
ｚ６は、５～１５の整数であり、
Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ３Ａは、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
Ｒ２０３は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する。
実施形態において、ｎ２３は１３であり、ｚ６は１１であり、Ｒ２０３はドデシルである。
実施形態において、第１のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000193
 ［式中、ｎ２１は１４であり、Ｒ２０１はドデシルであり、ｚ２は８である。］
を有し、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000194
 ［式中、ｎ２３は１３であり、Ｒ２０３はドデシルであり、ｚ６は１１である。］
を有する。
実施形態において、第１のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000195
 ［式中、ｎ２２は、１０～３５の整数であり、Ｒ２０２はドデシルであり、ｚ２は３～１５である。］
を有し、第２のカチオン性両親媒性ポリマーは、式：
Figure 2023535730000196
 ［式中、ｎ２３は１３であり、Ｒ２０３はドデシルであり、ｚ６は１１である。］
を有する。
一態様では、実施形態を含めて本明細書に記載される複数の細胞透過性複合体を含むナノ粒子組成物が提供される。
一態様では、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体、及び薬学的賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
実施形態において、核酸は、ＤＮＡ又はＲＮＡ、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）（例えば、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）、トランス活性化ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）、プラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）、ミニサークルＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ（ｇＮＤＡ）である。細胞透過性複合体は、タンパク質又はペプチドをさらに含んでもよい。
本明細書に開示される細胞透過性複合体及びその実施形態は、複数の親油性部分を含んでもよい。
本明細書に開示される細胞透過性複合体及びその実施形態は、複数の崩壊ドメインを含んでもよい。
本明細書に開示される細胞透過性複合体及びその実施形態に加えて、実施形態において、上記カチオン性配列に対する対アニオンとしては、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリフレート、塩化物、臭化物、硫酸、リン酸、コハク酸、又はクエン酸などの当該技術分野で公知の一般的な対イオンを挙げることができる。実施形態において、対アニオンは、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリフレート、塩化物、臭化物、硫酸、リン酸、コハク酸、又はクエン酸である。
別の態様では、核酸を細胞内にトランスフェクトする方法であって、細胞を、本明細書に開示される細胞透過性複合体、又はその実施形態と接触させることを含む方法が提供される。
実施形態において、方法は、カチオン性両親媒性ポリマーを細胞内で分解させ、それによって分解生成物を形成することをさらに含む。実施形態において、分解生成物は、置換又は非置換のジケトピペラジンである。
核酸を細胞内にトランスフェクトする方法の任意の実施形態に加えて、実施形態において、核酸はｍＲＮＡである。実施形態において、方法は、ｍＲＮＡを細胞に発現させることをさらに含む。実施形態において、細胞は、生物の一部を形成する。実施形態において、生物はヒトである。
とりわけ、インビトロとインビボの両方での、オリゴヌクレオチド及びポリアニオン性カーゴ、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の複合体形成、保護、標的細胞、組織及び器官中への送達及び放出を可能にする又は増強する新規の材料及び戦略が本明細書で提供される。
例えば、ｍＲＮＡ送達のために本明細書で開示される１つの戦略は、ｍＲＮＡなどのポリアニオンを静電気的に組み合わせて、ｍＲＮＡカーゴを保護し容易に細胞に進入しオリゴヌクレオチドカーゴを独自に放出する非共有結合的巨大分子粒子を作製することが発見された生分解性ポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）オリゴマー及びその変種を使用して達成される。次に、細胞中で放出されたｍＲＮＡは、細胞プロセスによりペプチド及びタンパク質に変換され、その配列及びしたがって活性がｍＲＮＡ配列により決定される。
したがって、例えば、核酸それ自体及び既知の遺伝子送達ベクターの使用よりも大幅に増加した改良された細胞トランスフェクション効率が提供される。ｍＲＮＡの送達のために使用される材料及び戦略を使用すれば、ｓｉＲＮＡ、ｐＤＮＡ、ｓｈＲＮＡ及びｇＤＮＡなどの他のオリゴヌクレオチドも送達できる。ｍＲＮＡの送達のために使用される材料及び戦略を利用すれば、ヘパリン、無機ポリリン酸塩及びイノシトールポリリン酸塩などの他のアニオン性生体分子をさらに送達できる（例えば、ＩＰ３、ＩＰ７、ＩＰ８）。この送達は、様々なヒト及び非ヒト細胞系を用いて、並びに筋肉内、静脈内、腹腔内、眼球内、鼻腔内、皮下、頬側及び局所を含むがこれらに限定されないインビボでの複数の投与様式を通じて達成することができる。本明細書で開示されるポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）は、例えば、生医学的治療、イメージング及び装置での応用のためのカスタマイズ可能な、生分解性、生体適合性材料として利用することができる。バレロラクトン、カプロラクトン、ラクチド及び環状カーボネートなどの生分解性、非毒性化合物材料と共重合すれば、カーゴ放出速度、疎水性、ターゲティングリガンドの取込み、体内分布及び毒性を含む物理的生物学的特性を調整することができる。
したがって、一部の実施形態において、本明細書で提供される薬剤は、環状アミノエステル及び環状メチルトリメチレンカーボネート（ＭＴＣ）モノマーに由来してもよいオリゴマー、ポリマー、コオリゴマー及びコポリマーを含む。環状アミノエステルは、モルホリン－２－オン及びその相同体の基本構造を有し、考えられる複数の置換パターンは以下を含む。
（１）様々な疎水性基（例えば、Ｒ＝アルキル、アルケニル、アリール、ステロイド、ヘテロ環を含むポリ環）、カチオン基（例えば、グリシン、リシン、オルニチン、アルギニンなどのアミノ酸でのアシル化を含む、アンモニウム、ホスホニウム、スルホニウム、グアニジウム）、アニオン基（例えば、カルボン酸、硫酸、リン酸）又は親水性（例えば、ＰＥＧ）カルバメートでのＮ－アシル化。Ｎ－Ｂｏｃ又はＮ－Ｃｂｚ基でのモルホリン窒素の保護、続いて有機触媒開環オリゴマー化又は重合は、脱保護カチオン性ポリマー又はオリゴマー骨格を与えることができる。
（２）カーゴ複合体形成及びそれに続く生分解によるカーゴ放出を可能にするように選択される前述の考えられる官能基でのエステルカルボニルの隣のアルファアルキル化又は官能化
（３）前述の官能基でのモルホリン窒素の近位のアルキル化
（４）上記改変の組合せ
さらに、コポリマー又はコオリゴマー（ブロック又は統計的な）は、２種以上のモルホリン－２－オンモノマーを混合することにより、又は本明細書に記載される１つ若しくは複数のモルホリン－２－オンモノマーと１つ若しくは複数の環状カーボネートモノマーの共重合（又はコオリゴマー化）により作製できる。これらのカーボネートモノマーは、類似する多様な側鎖官能基、とりわけ、親油基又はカチオン基を取り込んで、オリゴヌクレオチド安定性、送達及び放出特性を調節することができる。さらに、親油性官能基を取り込むために、ラクチド、グリコリド、バレロラクトン及び／又はカプロラクトンを含むがこれらに限定されない様々な他の市販の環状エステルモノマーを使用することができる。
ポリアミノエステル及びポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）の合成は、モルホリン－２－オン及び環状カーボネートモノマーの開環重合及び／又は共重合によって達成される。Ｎ－Ｂｏｃ保護モルホリノン（ＭＢｏｃ）は、有機触媒系を使用して、高変換率（＞８５％）、調整可能なＭｎ（１ｋＤａ～２０ｋＤａ）、及び低分子量分布（Ｍｗ／Ｍｎ－１．１－１．３）に重合する。Ｂｏｃ基の重合後の脱保護により、カチオン性（二プロトン性、第二級アミン）水溶性ポリマーが得られる（Ｄ２０で－－０．５Ｍ、＞３日間安定）。さらに、ＭＢｏｃとＭＴＣ－ドデシルカーボネートモノマーとの共重合とそれに続く脱保護は、狭い多分散性（＜１．４ＰＤＩ）及び調整可能なブロック長を有する高収率（＞６０％）で適度に荷電したカチオン性物質を生じさせる。ブロック長は、モノマーに対する開始剤の比によって制御される。
ポリアミノエステル及びポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）は、生体適合性及び生分解性である。カチオン性ポリアミノエステルは、新規なｐＨ及び緩衝液依存性崩壊機序を通じて、急速に分解し、一実施形態において、ビス－Ｎ－ヒドロキシエチ－２，５－ピペリジンジオンビス－ヒドロキシエチルグリシンを生成する。この予期せぬ分解は、処理濃度で無毒の生成物を生成し、単量体形態（さらなる加水分解の予想される生成物）は、メイラード反応におけるリン脂質修飾の天然バイオマーカーである。アミノエステル／カーボネートコポリマーのカーボネートセグメントは、加水分解及び脱炭酸によって分解し、その副生成物は以前に無毒であることが示されている。新しいポリ－及びオリゴ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）は、その独自の分解機序により、遺伝子送達剤として予想外の性能を示す。これらの新材料は、中程度の理論電荷比（例えば、約１０：１）で、ｍＲＮＡを非共有結合的に複合、保護、送達、及び放出し、並外れたトランスフェクション効率（場合によっては＞９９％）とインビトロ及びインビボでの遺伝子発現の堅牢な誘導をもたらす。この戦略は、異なる長さのｍＲＮＡ分子の送達に有効である（１０００ヌクレオチド及び２０００ヌクレオチド転写物を試験）。一実施形態において、遺伝子送達は、カチオン性ポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）をアニオン性カーゴと製剤化して、サイズが２００～４００ｎｍの自己組織化粒子を形成することによって達成される。これらの粒子は、細胞内遺伝子送達に必要な時間スケールで安定しており、細胞内でオリゴヌクレオチドカーゴを１回放出する。特定の理論に束縛されないが、これらの物質は、ビス－Ｎ－ヒドロキシエチル－２，５－ピペリジンジオン生成物ビス－ヒドロキシエチルグリシンに分解する。ｍＲＮＡ／両親媒性物質複合体による様々なヒト及び非ヒト細胞株（ＨｅＬａ、ＨａＣａＴ、Ｊ７７４、ＨＥＫ２９３など）の処理により、タンパク質発現（例えば、ＧＦＰ、ルシフェラーゼ）がインビトロ及びインビボで複数の投与様式（筋肉内及び静脈内で試験された。）を通じて誘導される。
タンパク質発現は、フローサイトメトリー及び蛍光顕微鏡（ＧＦＰ）、並びに生物発光（ホタルルシフェラーゼ）によって蛍光レポーター遺伝子をコードするｍＲＮＡを使用して測定されている。ポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）は、市販の標準であるＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００、及びｓｉＲＮＡ送達について前述した他の多くのリード化合物よりも効率的なトランスフェクション剤であることが示されている。
実施形態において、遺伝子送達は、得られた複合体の安定性及びサイズを調整し、細胞取り込みを増加させ、複合体からのｍＲＮＡ放出の速度を調整し、カーゴｍＲＮＡの発現を増強するために選択された第３の成分の存在下で、ｍＲＮＡカーゴを有する混合両親媒性オリゴマーの製剤化によって達成される。第３の成分として、Ｚｎ＋２、Ｍｇ＋２、Ｃａ＋２などの配位金属、炭水化物などの動的非共有結合架橋リンカー、Ｃｌ－、ＡｃＯ－、コハク酸塩、及びクエン酸塩などの対イオン、並びに脂質及びＰＥＧなどの溶解調節剤が挙げられるが、これらに限定されない。
この技術の適用には、次のものが含まれる。臨床適用：（１ａ）核酸トランスフェクションベクター：ＤＮＡとＲＮＡの利用は、長年にわたって遺伝病の処置に提案されてきたが、遺伝子治療の臨床使用に対する最大の障害は、依然として、オリゴヌクレオチドカーゴの効果的な送達である。（Ｉｂ）感染症を防止するためのＲＮＡワクチン接種：ｍＲＮＡベースのワクチンは、ＤＮＡワクチンよりも高い安全性の利点を示すが、臨床的には現在、細胞へのｍＲＮＡ送達によって制限されている。この適用は現在臨床的に研究されているが、最先端の技術では、電気穿孔によるインビトロトランスフェクションのために、患者から初代細胞を除去し、その後、形質転換細胞を患者に再導入する必要がある。この方法は、インビボでｍＲＮＡ発現を直接誘導する本発明者らの送達技術を使用して大幅に改善することができる。（１ｃ）幹細胞誘導：４つの既知の転写イオン因子の発現を誘導する本発明者らの技術を使用することにより、未分化幹細胞において多能性を誘導することができる。ポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）送達ビヒクルのモジュール性により、４つの必要なｍＲＮＡ転写物全てを同時に簡単に送達することができる。（１）培養細胞のインビトロトランスフェクション、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９を使用した遺伝子編集、遺伝子発現（ｍＲＮＡ翻訳）及び遺伝子ノックダウン（ＲＮＡｉ）の組合せを使用した経路の検証など、基礎研究適用が含まれるが、これらに限定されない。がん免疫療法、アレルギー耐性、タンパク質補充療法、遺伝子編集、診断、
本開示の複合体、組成物及び方法の利点として、例えば、以下を含み得る：
（１）Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００などの市販のトランスフェクション剤よりもインビトロでのｍＲＮＡトランスフェクション効率が高く、Ｊ７７４マクロファージなどのトランスフェクションが困難な細胞株においても、それによって忍容性を高めながら有効性を改善させる。
（２）インビボ（ＢＡＬＢ／ｃマウス）での堅牢な遺伝子発現により、この技術の臨床的適用性を実証し、それによってリポフェクタミンなどのカチオン性担体の毒性を回避し、遺伝子送達及び発現のエクスビボ方法の臨床的代替手段を提供する。
（３）差示的なインビボ遺伝子発現は、静脈内注射時に肝臓と脾臓の発現が優勢であり、局所発現は、筋肉内（例えば）送達で、投与部位で持続する、異なる投与経路を使用して達成することができる。経鼻送達は、粘膜及び／又は肺の取り込みへの経路を提供する。
（４）効率的な遺伝子発現を可能にする既知の代謝物（ビス－ヒドロキシエチルグリシン）への迅速な分解。
（５）低ｐＨ環境（皮膚や腸管など）では安定性を示すが、より高いｐＨ環境では分解するオリゴヌクレオチド含有粒子など、ｐＨ依存的にｍＲＮＡを放出する。
（６）金属フリー合成により材料に容易にアクセスし、目標の分子量を有し、分散度を高度に制御するオリゴマー、ポリマー、ブロック／統計的コポリマー又はコオリゴマーを作製する。
（７）材料は、形成された粒子の表面に、葉酸やビオチンなどのターゲティングリガンドを添加すること、又はモノクローナル抗体に付着させることによって、標的化に適している。
（８）カチオン性ポリアミノエステルドメインの単離可能な中性小分子への特異的な崩壊機序は、ヒドロキシエチルグリシンの環状二量体である生体適合性／生分解性生成物であるビス－Ｎ－ヒドロキシエチル－２，５－ピペリジンジオンの形成をもたらす。
複合体、組成物及び方法の特徴として、以下のものが挙げられる。実施形態において、ポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）ポリ（アミノエステル）及びそれに由来するカチオン性物質は、以下の特性及び機能の少なくとも１つを示すことができる：
（１）生体適合性／生分解性ヒドロキシエチルグリシン二量体をもたらすカチオン性ポリアミノエステルの特異的なｐＨ応答性崩壊機序；オリゴヌクレオチドカーゴの放出をもたらすこれらの材料のドメインは、カチオン性アンモニウムの不可逆的な中和をもたらして、アニオン性カーゴの放出を迅速に引き起こす予期せぬ分子内結合形成事象を介して生じるという点で、他の応答性生体材料の中でも固有である。
（２）ビス－Ｎ－ヒドロキシエチル－２，５－ピペリクラ－７－イネジオンなどの分子内分解の単離可能な生成物で、さらにヒドロキシエチルグリシンに分解される。
（３）アニオン性カーゴが送達のために静電的に粒子に包装され、細胞内在化に続いて急速に放出されるように、活動の時間的ウィンドウを提供する。
（４）巨大分子構造の制御で複数のラクトンモノマーの共重合が可能である。官能化モノマーは、ブロック又は統計的構造で重合することができ、これにより、環状カーボネート又はリン酸塩などの複数のモノマータイプの組合せがさらに可能になる。
（５）インビボでのこれらの物質の使用は、局所的又は全身的に投与された場合でも、急性毒性なしに起こり得、治療応答に必要な濃度で高い忍容性を示す。
（６）遺伝子送達ビヒクルとして使用すると、ポリ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）はメッセンジャーＲＮＡを含むオリゴヌクレオチドの効率的な送達及び放出を可能にする。ＭＴＣ－ドデシルカーボネートとＮ－Ｂｏｃモルホリン－２－オンモノマーとの両親媒性ブロックコオリゴマーは、ｍＲＮＡなどの大きなアニオン性カーゴと製剤化されて、安定した４００ｎｍ未満の粒子を形成することができる。これらの得られた粒子は、細胞によって効果的に取り込まれ、それらのｍＲＮＡカーゴを放出し、堅牢な遺伝子発現をもたらすことができる。この概念は、複数の細胞株でインビトロに実証されているだけでなく、マウス研究でもインビボで実証されている。これらの材料の有効性は、中性小分子ビス－Ｎ－ヒドロキシエチル－２，５－ピペリジンジオンビス－ヒドロキシエチルグリシンを形成するカチオン性アミノエステルブロックのｐＨ応答性転位によることが示されている。他のカチオン性遺伝子送達ビヒクルは、以前から報告されているが、これらのオリゴ（カーボネート－ｃｏ－アミノエステル）は、細胞の取り込みに適した時間スケールで、ｍＲＮＡ（又は他のオリゴヌクレオチド）カーゴを放出する独自の能力とその忍容性により、固有であり、トップパフォーマーの１つである。
（７）ｍＲＮＡ送達の経験的に決定された最適長は、ＭＴＣ－ドデシルカーボネート及びＮ－Ｂｏｃモルホリン－２－オンドメインの両方について、平均ＤＰ１２のジブロックが最適に機能するという点で、我々の先行技術から離れて教示している。この長さは、ＰＥＩなどの市販のカチオン性ポリアミンベクターよりもはるかに短く、また、本発明者らの以前に発見されたｓｉＲＮＡ送達ベクター（ＷＯ２０１３０３６５３２Ａ１号及びＰＮＡＳ ２０１２、１０９（３３）、１３１７１～１３１７６頁を参照されたい。）よりも長い。
一態様において、核酸を細胞（例えば、肺細胞）にトランスフェクトする方法が本明細書によって提供される。この方法は、細胞を本明細書に記載される細胞透過性複合体と接触させることを含み、その実施形態を含む。実施形態において、方法は、細胞内で遺伝子編集を引き起こす。実施形態において、遺伝子編集は、単離又は操作されたヌクレアーゼ系を使用して、ＤＮＡが生物のゲノム中に挿入される、欠失される又は置き換えられる遺伝子工学の一種であるゲノム編集（ｇｅｎｏｍｅ－ｅｄｉｔｉｏｎ）又はゲノム編集（ｇｅｎｏｍｅ ｅｄｉｔｉｎｇ）を包含することができる。ある特定の実施形態において、本明細書で開示される方法は、トランスフェクトされた細胞において遺伝子編集を引き起こすことができる遺伝的ツール又はシステムを送達するために使用することができる。遺伝子編集のための遺伝的ツール又はシステムのいくつかの非限定的な例として、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓシステム及びトランスポゾンシステムが含まれる。
一態様において、一部の実施形態によるトランスフェクション方法によってトランスフェクトされた核酸（すなわちカーゴ核酸）は、細胞のゲノム中の標的配列とハイブリダイズするＣＲＩＳＰＲ－ＣａｓシステムガイドＲＮＡをコードする第１のヌクレオチド配列及びＣａｓ９タンパク質をコードする第２のヌクレオチド配列とを有する１つ以上のベクターを有することができる。ある特定の実施形態において、第１及び第２のヌクレオチド配列は、同じ又は異なるベクター上に位置することができる。
一般に、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９を採用したシステムは、遺伝子編集のための高度な忠実度と比較的単純な構造を提供する。システムは、その特異性について、標的配列及びプロトスペーサー隣接モチーフ（ＰＡＭ）の２つの要因に依存する可能性がある。標的配列は、例えばｃｒＲＮＡアレイ中の各ＣＲＩＳＰＲ遺伝子座の一部として２０塩基長であり得る。ｃｒＲＮＡアレイは、複数の固有の標的配列を有することができる。Ｃａｓ９タンパク質は、宿主ＤＮＡ上の塩基対と結合する配列を利用することにより、宿主のゲノム上の正しい位置を選択することができる。宿主ゲノム上のＰＡＭ配列は、Ｃａｓ９によって認識することができる。エレメントが、例えば１つ以上のプラスミドに組み立てられ、細胞にトランスフェクトされると、ｃｒＲＮＡの助けを借りて、Ｃａｓ９タンパク質は宿主細胞のＤＮＡの正しい配列を見つけることができ、Ｃａｓ９バリアントに応じて、ＤＮＡに一本鎖又は二本鎖の切断を作製する。宿主ＤＮＡの適切な間隔の切断は、相同性指向修復を引き起こすことができる。ＤＮＡ修復鋳型を提供することで、ゲノム内の意図された位置に特定のＤＮＡ配列を挿入することができる。組み込まれると、新しい配列は、細胞の遺伝物質の一部になり、その娘細胞に渡すことができる。有効なｓｇＲＮＡ配列の設計を支援するために、多くのオンラインツールが当該技術分野で利用可能である。一部の実施形態によれば、本明細書のある特定の実施形態による方法及び組成物は、ＣＲＩＳＰＲ－ＣａｓシステムガイドＲＮＡをコードするヌクレオチド配列及びＣａｓ９タンパク質をコードするヌクレオチド配列を送達又はトランスフェクトして、トランスフェクトされた細胞に遺伝子編集を誘導することができる。
一部の実施形態において、ある特定の実施形態によるトランスフェクション方法によってトランスフェクトされたカーゴ核酸は、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）を有することができる。一部の実施形態において、このｃｒＲＮＡは、ＣＲＩＳＰＲ－ＣａｓシステムガイドＲＮＡをコードする第１のヌクレオチド配列の同じベクター中にあることができる。
一部の実施形態において、ある特定の実施形態によるトランスフェクション方法によってトランスフェクトされたカーゴ核酸は、トランス活性化ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を有することができる。一部の実施形態において、このｔｒａｃｒＲＮＡは、Ｃａｓ９タンパク質をコードする第２のヌクレオチド配列の同じベクター中にあることができる。
一部の実施形態において、一部の実施形態によるトランスフェクション方法に利用されるＣａｓ９タンパク質は、トランスフェクトされた細胞における発現のために最適化されたコドンであり得る。
別の態様において、一部の実施形態によるトランスフェクション方法によってトランスフェクトされた核酸（すなわちカーゴ核酸）は、トランスポサーゼをコードする第１のヌクレオチド配列及びトランスポサーゼ認識部位によって挟まれた目的の遺伝子の核酸配列を有する第２のヌクレオチド配列をを有する１つ以上のベクターを有することができる。一部の実施形態において、第１及び第２のヌクレオチド配列は、同じ又は異なるベクター上に位置することができる。
転位性要素（又はトランスポゾン）は、一般に、ゲノム内の位置を変えることができるＤＮＡ配列を指し、時には突然変異を作製又は逆転させ、細胞の遺伝的構成及びゲノムサイズを変更する。トランスポサーゼは一般に、トランスポゾンに結合し、例えばカットアンドペースト機序又は複製転位機序によってトランスポゾンのゲノムの別の部分への移動を触媒することができる酵素を指す。トランスポサーゼ及びトランスポサーゼ認識部位に挟まれた目的の遺伝子を細胞内に導入すると、目的の遺伝子の細胞ゲノムへの挿入を誘導することができる。一部の実施形態によれば、本明細書のある特定の実施形態による方法及び組成物は、トランスフェクトされた細胞において遺伝子編集を誘導するために、トランスポサーゼ及び目的の遺伝子をコードする核酸を送達又はトランスフェクトすることができる。
実施形態において、一部の実施形態によるトランスフェクション方法において使用されるトランスポサーゼは、ゲノム配列を認識して切り出すことができる。他の一部の実施形態において、トランスフェクション方法を介してトランスフェクトされる目的の遺伝子の核酸配列を、トランスフェクトされた細胞のゲノムに組み込むことができる。
実施形態において、一部の実施形態によるトランスフェクション方法を介して行われる遺伝子編集は、以下：ＤＮＡ欠失、遺伝子破壊、ＤＮＡ挿入、ＤＮＡ反転、点突然変異、ＤＮＡ置き換え、ノックイン、及びノックダウンの１つ以上を引き起こすことができる。
一態様において、核酸を細胞にトランスフェクトする方法が提供される。この方法は、細胞を、その実施形態を含めて本明細書に提供される細胞透過性複合体と接触させることを含む。実施形態において、細胞は肺細胞である。
ワクチン組成物及びウイルス性疾患の処置方法
ある態様において、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体を含むワクチン組成物が提供される。本明細書に提供される細胞透過性複合体は、ワクチンに特に有用であり、ワクチンは、その実施形態を含めて本明細書に提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む。
ある態様において、そのような処置又は防止を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置又は防止する方法が提供され、方法は、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体の治療的又は予防有効量を、対象に投与することを含む。
ある態様において、それを必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置する方法であって、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体の治療有効量及び薬学的担体を対象に投与し、それによって対象におけるウイルス性疾患を処置することを含む方法が提供される。
本明細書に提供される細胞透過性複合体は、ワクチンに特に有用であり、ワクチンは、その実施形態を含めて本明細書に提供される、ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む。したがって、ある態様において、ウイルス性疾患に罹患し得る宿主を免疫化するための方法であって、ウイルスタンパク質又はその機能的断片に対する抗体が産生されるような条件下で、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体を宿主に投与することを含む方法が提供される。ワクチンに使用されるアジュバントとカチオン性両親媒性ポリマーの組合せに基づいて、特定のクラスのＩｇＧアイソタイプが、ワクチンを投与されている対象に産生される。実施形態において、核酸アジュバントは、配列番号１（ｔｃｃａｔｇａｃｇｔｔｃｃｔｇａｃｇｔｔ）の配列を有し、産生される抗体は、マウスＩｇＧ２抗体（例えば、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ）である。実施形態において、核酸アジュバントは配列番号１の配列（ｔｃｃａｔｇａｃｇｔｔｃｃｔｇａｃｇｔｔ）を有し、産生される抗体は、ヒトＩｇＧ１抗体である。さらなる実施形態において、細胞透過性複合体は静脈内投与される。
実施形態において、核酸アジュバントは、配列番号２（ｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｔ）の配列を有し、産生される抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３抗体であり、ＩｇＧ１抗体の量は、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ抗体の量より少ない。さらなる実施形態において、細胞透過性複合体は静脈内投与される。
実施形態において、抗体はＩｇＧ２抗体である。
実施形態において、ウイルス性疾患はＳＡＲＳである。実施形態において、ウイルス性疾患はＣＯＶＩＤ－１９である。実施形態において、ウイルス性疾患はＭＥＲＳである。
医薬組成物
ある態様において、実施形態を含めて本明細書に記載される細胞透過性複合体の治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
実施形態において、本明細書に提供される組成物は、治療目的で使用される。一部の実施形態において、治療目的は、予防目的（疾患又は状態の発症を防止する目的）及び処置目的（既存の疾患又は状態を処置する目的）を包含する。組成物がカチオン性両親媒性ポリマーを有するがカーゴ核酸を有しない場合、治療効果を発揮することができるカーゴ核酸は、対象への投与前に、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合で結合することができる。
一部の実施形態において、組成物は、ワクチン又はその組成物、すなわちワクチン及び任意選択的に薬学的に許容される担体を含有する組成物であり得る。ワクチン又はワクチン組成物は、感染症（例えば、ＣＯＶＤ－１９）若しくは状態、又は疾患若しくは状態に関連する病原体を防止及び／又は処置するために使用することができる。一部の実施形態において、ワクチン又はワクチン組成物は、カチオン性両親媒性ポリマー及びカーゴ核酸を有する細胞透過性複合体を含有する。一部の実施形態において、細胞透過性複合体は、対象に投与された場合、免疫応答、すなわち免疫原性を誘導することができる。この免疫原性は、少なくとも部分的に、カーゴ核酸によってコードされる１つ以上の抗原ペプチドがトランスフェクトされた細胞において発現されるときに誘導され得る。
一態様において、本明細書に開示されるカチオン性両親媒性ポリマー又は細胞透過性複合体は、医薬組成物に製剤化することができる。カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性の崩壊ドメインを有することができる。一実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤及び／又は薬学的に許容される担体をさらに含有することができる。
一部の実施形態において、医薬組成物は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合した核酸を、有効成分として有する細胞透過性複合体及び核酸アジュバントを有することができ、投与経路に応じて薬学的に許容される賦形剤又は添加剤をさらに含有する。このような賦形剤又は添加剤として、水、薬学的に許容される有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリルナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルデンプンナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、薬学的に許容される界面活性剤などが挙げられる。使用される添加剤は、限定するものではないが、本開示の剤形に応じて、適宜、上記又はそれらの組合せから選択することができる。
一部の実施形態において、薬学的に許容される担体は、核酸アジュバントである。一部の例において、核酸アジュバントとして、限定するものではないが、トール様受容体（ＴＬＲ）のアゴニスト、ＳＴＩＮＧ経路のアゴニスト、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、又はＰＤ１－Ｌに対するアゴニスト抗体、フロイントアジュバント、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、ＰＤ１、ＣＴＬＡ４に対するブリオスタチン及びリガンド並びにそれらの任意の組合せを含むことができる。一部の実施形態において、核酸アジュバントは、細胞透過性複合体を対象に同時投与する場合に誘導される免疫原性を増大することができる。一部の実施形態において、核酸アジュバントは、対象に、複合体と同時投与した場合に、抗体クラススイッチングを誘導することができる。
本開示の医薬組成物の製剤は、選択された投与経路（例えば、溶液、エマルジョン）に応じて変化し得る。投与経路は、例えば、筋肉内、皮下、静脈内、リンパ内、皮下、筋肉内、眼内、局所皮膚、局所結膜、経口、膀胱内（膀胱）、肛門内及び膣内であり得る。
一部の実施形態において、組成物は、凍結保護剤を含むことができる。凍結保護剤の非限定的な例として、グリコール（例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、及びグリセロール）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ホルムアミド、スクロース、トレハロース、デキストロース、及びそれらの任意の組合せが含まれる。
一部の実施形態において、製剤は、制御放出製剤である。用語「制御放出製剤」は、徐放性及び時間放出製剤を含む。制御放出製剤は、当該技術分野において周知である。これらには、組成物の持続的、周期的、パルス的、又は遅延放出を可能にする賦形剤が含まれる。制御放出製剤として、限定するものではないが、マトリックスへの組成物の埋め込み、腸溶性コーティング、マイクロカプセル化、ゲル及びヒドロゲル、インプラント並びに組成物の制御放出を可能にする任意の他の製剤が挙げられる。
一態様において、細胞透過性複合体又はその組成物を有する部品のキットが提供される。別の態様において、核酸又はその組成物に結合していないカチオン性両親媒性ポリマーを有する部分のキットが提供される。キットは、カチオン性両親媒性ポリマー及びカーゴ核酸を使用して、細胞透過性複合体を作製するためのプロトコールを記述する文書又は説明書をさらに含むことができる。キットの文書又は使用説明書には、それを必要とする対象に組成物を投与するためのプロトコールも記載することができる。
本明細書に記載される治療用製剤は、有効成分、すなわち所望の程度の純度を有する免疫原性物質を、任意選択の生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤と混合することによって、保存のために調製することができる。許容される担体、賦形剤又は安定剤は、用いられる投与量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり得、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸などの緩衝剤を含み得；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；保存剤（例えばオクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリシンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、又はデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトールなどの糖類。ナトリウムなどの塩を形成する対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎタンパク質複合体）；並びに／又はＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）、若しくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤であってもよい。
本明細書の製剤はまた、２つ以上の活性化合物（例えば、細胞透過性複合体を有する免疫原性薬剤に加えて第２の活性剤）を含有してもよく、これらは互いに悪影響を及ぼさない相補的な活性のために選択され得る。そのような分子は、意図する目的に有効となり得る量で適宜組み合わせて存在することができる。
免疫応答を誘導する方法
別の態様において、対象において免疫応答を誘導する方法が本明細書に提供される。一部の実施形態において、方法は、細胞透過性複合体を使用して、疾患又は状態を処置及び／又は防止することができる。方法は一般に、治療有効量の細胞透過性複合体又は本明細書に記載される細胞透過性複合体を有する医薬組成物を、単独で（例えば、単独療法において）又は１つ以上の追加の成分、例えば薬学的に許容される賦形剤及び／又は追加の治療剤と組み合わせて（例えば、併用療法で）それを必要とする対象に投与することを含む。
一部の実施形態において、細胞透過性複合体又は細胞透過性複合体を有するその医薬組成物は、細胞透過性複合体又はその医薬組成物で、投与された対象の免疫応答を誘導し得るワクチンとして使用することができる。
一部の実施形態において、ワクチンは、ワクチンが対象における疾患又は状態の発生の可能性を防止又は低減することができるように、予防活性を有することができる。実施形態において、ワクチンが予防目的で使用される場合、対象は、疾患又は状態を有していない動物、例えば、疾患若しくは状態と診断されなかった、又は疾患若しくは状態に関連する顕著な症状を有しないヒトであり得る。いくつかの他の実施形態において、ワクチンは、ワクチンが疾患又は状態（例えば、ウイルス性疾患）を処置するために使用され得るような治療効果を有する。治療用ワクチンのいくつかの例として、ウイルス性疾患（ＣＯＶＩＤ－１９など）を発症している、又は発症するリスクがある患者に投与することができるウイルスワクチンが挙げられるが、これらに限定されない。ウイルスワクチンは、１つ以上の抗ウイルス活性、例えばウイルス粒子数の減少、ウイルス複製及び感染力の減少及び／又は阻害を示すことができる。一部の他の実施形態において、ウイルスワクチンは、予防目的のために、特に感染の素因があると考えられるが、現在ウイルス性疾患を有していない対象に使用される。予防ワクチンは、素因のある対象に投与し、対象におけるウイルス性疾患の発生の可能性を防止又は低減することができる。
一態様において、本明細書の開示は、それを必要とする対象において疾患に対する免疫応答を誘導する方法を提供する。この方法は、有効量の細胞透過性複合体を対象に投与することを含むことができる。
一部の実施形態において、細胞透過性複合体を、複合体を投与された対象に免疫応答を誘導することができるワクチンとして使用することができる。複合体は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合で結合した核酸を含むことができ、カチオン性両親媒性ポリマーは、ｐＨ感受性の崩壊ドメインを有することができる。
実施形態において、ワクチン又はその組成物に含まれる核酸は、ウイルスタンパク質又はその断片をコードする核酸配列であり得る。例えば、感染症が懸念される場合、ワクチンに含まれる核酸は、感染症の病原体（例えば病原性ウイルス）に発現することが知られている１つ以上のペプチドをコードすることができ、対象に投与された場合、免疫応答を誘導することができる。実施形態において、ウイルスタンパク質は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の可溶性受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）である。ウイルスタンパク質をコードする核酸が対象に投与され、対象のある特定の細胞に送達（すなわちトランスフェクト）されると、トランスフェクトされた核酸は、最終的に翻訳され、抗原ペプチドに発現することができる。発現されたペプチドは抗原性又は免疫原性であるため、発現されたペプチドに対する免疫応答を対象に誘導することができる。対象は、このワクチン接種を介して獲得免疫応答を有することができ、適応免疫は、免疫応答によって標的とされる免疫原性ペプチドに対する初期応答の後に、免疫学的記憶を誘発することができ、その後の遭遇時にその標的に対する応答の増強をもたらし、予防効果を示す。
一部の実施形態において、ワクチン接種は、単一のワクチン組成物中に核酸の２つの別個のタイプ（又は配列）を送達することによって、治療効果及び予防効果の二重活性を提供することができる。２つの別個の核酸は、２つの異なる免疫原性ペプチドをコードすることができる。したがって、一部の実施形態において、ワクチン組成物は、（１）既存の疾患又は状態に対して、より即時の処置効果を誘導することができる第１の免疫原性ペプチドをコードする第１の核酸、及び（２）異なる疾患又は状態の将来の発生のために、対象に適応免疫を誘導することを目的とした異なる第２の免疫原性ペプチドをコードする第２の核酸をトランスフェクトすることができる。一部の実施形態において、ワクチンは、２つ以上の異なる核酸を対象に送達することができ、各核酸はそれぞれ独立に治療効果又は予防効果を示す。
実施形態において、ワクチン組成物は、２つ以上の異なるタイプ（又は異なる式）のカチオン性両親媒性ポリマーを有することができる。代替的に、ワクチン組成物は、カチオン性両親媒性ポリマーの単一タイプ（又は単一の式）のみを有することができる。一部の実施形態において、単一のタイプのカチオン性両親媒性ポリマーは、１つのタイプの核酸（配列）に非共有結合することができる。代替的に、単一のタイプのカチオン性両親媒性ポリマーは、２つ以上のタイプの核酸（配列）に非共有結合することができる。したがって実施形態において、各々が異なる配列の核酸に結合している異なるタイプのカチオン性両親媒性ポリマーの混合物を、２つ以上の配列（又はタイプ）の核酸を送達するために対象に一緒に投与することができる。代替的に、複数のタイプ（又は配列）の核酸に結合された単一のタイプ（又は式）のカチオン性両親媒性ポリマーを、２つ以上の配列（又はタイプ）の核酸を送達するために、対象に投与することができる。さらに代替的に、核酸の単一の配列（又はタイプ）に結合されたカチオン性両親媒性ポリマーの単一タイプ（又は式）を対象に投与することができる。
一部の実施形態において、ワクチン又はその組成物に含有される核酸は、ｍＲＮＡであり得る。一部の実施形態において、核酸は、ワクチン接種を介して、対象内の１つ以上の細胞にトランスフェクトされる。一部の実施形態において、１つ又は２つ以上の核酸配列を、ワクチン組成物を介してトランスフェクトすることができる。したがって、一部の実施形態において、ワクチン組成物は、それぞれ、そのそれぞれが異なる抗原ペプチドをコードする２つの異なる核酸を含有する。したがって、ワクチン接種を必要とする対象にワクチンを投与すると、２種類以上の抗原エピトープを発現し、対象に免疫応答を誘導することができる。代替の実施形態において、１つのタイプの核酸をワクチン接種を介してトランスフェクトすることができ、１つのタイプのエピトープを発現し、対象に免疫応答を誘導することができる。
投与
態様において、細胞又は対象に所望の活性を与えるように、その実施形態を含めて本明細書に提供される組成物を細胞又は対象に送達する方法が提供される。一部の実施形態において、組成物は、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合しているカーゴ核酸を有する細胞透過性複合体を含有する。カーゴ核酸は、細胞にトランスフェクトされる、又は対象に投与された場合、核酸配列の性質に応じて、様々な意図された効果を提供することができる。意図された効果のいくつかの非限定的な例として、遺伝子発現に対する調節、細胞経路の調節、ゲノム編集及び免疫応答の誘導が挙げられる。一部の実施形態において、組成物は、対象に意図された効果の少なくとも一部を達成するのに十分な有効量で、対象に投与することができる。
「投与」、「投与すること」などは、組成物に関連して使用される場合、インビトロで細胞に投与、インビボで細胞に投与、医療専門家による対象への投与、若しくは対象による自己投与である、直接投与、及び／又は開示の組成物を処方する行為であってもよい、間接投与の両方を指す。細胞に関して本明細書で使用される場合、組成物を細胞に導入することを指す。典型的には、有効量が投与され、その量は当業者によって決定することができる。任意の投与方法が使用されてもよい。化合物（例えば、薬物及び抗体）は、例えば、化合物を細胞培養培地に添加する又はインビボでの注射によって、細胞に投与することができる。対象への投与は、例えば、血管内注射、直接腫瘍内送達などによって達成することができる。
投与は、経口投与、坐剤としての投与、局所接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病変内、くも膜下腔内、鼻腔内若しくは皮下投与、又は徐放性デバイス、例えばミニ浸透圧ポンプの対象への埋め込みを意味してもよい。投与は、非経口及び経粘膜（例えば、頬側、舌下、口蓋、歯肉、鼻、膣、直腸、又は経皮）を含む任意の経路による。非経口投与として、例えば、静脈内、筋肉内、細動脈内、皮内、皮下、腹腔内、脳室内、及び頭蓋内が挙げられる。他の送達様式として、限定するものではないが、リポソーム製剤の使用、静脈内注入、経皮パッチなどが挙げられる。「同時投与する」とは、本明細書に記載される組成物が、１つ以上の追加の療法、例えば化学療法、ホルモン療法、放射線療法、又は免疫療法などのがん療法の投与と同時に、直前に、又は直後に投与されることを意味する。本開示の化合物は、単独で投与することができる又は患者に同時投与することができる。同時投与は、化合物（２種以上の化合物）の個々又は組合せでの同時又は逐次投与を含むことを意味する。
対象に投与される投与量及び頻度（単回又は複数回投与）は、様々な要因、例えば、対象が別の疾患に罹患しているかどうか、その投与経路、レシピエントのサイズ、年齢、性別、健康状態、体重、肥満度指数、及び食事；処置中の疾患の症状の性質と程度、同時処置の種類、処置中の疾患による合併症、又はその他の健康関連の問題に応じて変化し得る。他の治療レジメン又は薬剤は、その実施形態を含めて本明細書に記載される方法及び組成物と併せて使用することができる。確立された投与量（例えば、頻度及び持続時間）の調整及び操作は、十分に当業者の能力の範囲内である。
本明細書に提供される教示を利用して、実質的な毒性を引き起こさず、しかも特定の患者によって実証される臨床症状を処置するのに有効である有効な予防的又は治療的処置レジメンを計画することができる。この計画には、化合物の効力、相対的バイオアベイラビリティ、患者の体重、有害な副作用の存在と重症度、好ましい投与様式、及び選択した薬剤の毒性プロファイルなどの要因を考慮することによって、活性化合物を慎重に選択することを伴うべきである。
一部の実施形態において、対象は、哺乳動物、例えばヒト、非ヒト霊長類、マウス（すなわち、マウス及びラット）、イヌ、ネコ、又はウマである。一実施形態において、対象はヒトである。
一部の実施形態において、組成物は、対象の体重の約１ｎｇ／ｋｇ、対象の体重の約１０ｎｇ／ｋｇ、対象の体重の約５０ｎｇ／ｋｇ、対象の体重の約１００ｎｇ／ｋｇ、対象の体重の約５００ｎｇ／ｋｇ、対象の体重の約１ｕｇ／ｋｇ、対象の体重の約１０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約５０ｕｇ／ｋｇ、対象の体重の約１００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約１５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約２００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約２５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約３００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約３５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約３７５μｇ／ｋｇ、対象の体重の約４００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約４５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約５００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約５５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約６００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約６５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約７００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約７５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約８００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約８５０μｇ／ｋｇ、対象の体重の約９００μｇ／ｋｇ、対象の体重の約１ｍｇ／ｋｇ、対象の体重の約１０ｍｇ／ｋｇ、対象の体重の約５０ｍｇ／ｋｇ、対象の体重の約１００ｍｇ／ｋｇ、対象の体重の約５００ｍｇ／ｋｇ、対象の体重の約１ｇ／ｋｇ以上、又は前述のいずれかの介入範囲の用量（又は量）で投与することができる。一部の実施形態において、組成物は、約０．５μｇ、約１．０μｇ、約１．５μｇ、約２．０μｇ、約２．５μｇ、約３．０μｇ、約３．５μｇ、約４．０μｇ、約４．５μｇ 約５．０μｇ、約５．５μｇ、約６．０μｇ、約６．５μｇ、約７．０μｇ、約７．５μｇ、約８．０μｇ、約８．５μｇ、約９．０μｇ、約９．５μｇ、約１．０ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２．０ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３．０ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４．０ｍｇ、約４．５ｍｇ 約５．０ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６．０ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７．０ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８．０ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９．０ｍｇ、約９．５ｍｇ、約１ｇ以上、又は前述の任意の介入範囲の用量（又は量）で投与することができる。一部の実施形態において、組成物は、対象体重の約７．５μｇ又は約０．３７５ｍｇ／ｋｇの用量（又は量）で投与することができる。投与は、所望の期間にわたって繰り返すことができ、例えば、約１日～約５日の期間にわたって、又は数日毎に１回、例えば、約５日、約１ヶ月にわたって、約２ヶ月にわたってなど繰り返すことができる。本明細書における重量は、細胞透過性複合体の重量又は組成物又はその医薬製剤の重量であり得る。一部の実施形態において、
一実施形態において、組成物は、所望の利益を引き出す又は他の方法で治療効果を提供するために、６時間、１２時間、毎日又は隔日、又は毎週又は毎月の間隔で、全身的又は局所的に（例えば腫瘍内注射、静脈内注射）投与することができる。
一実施形態において、組成物、特にがんワクチンに対する奏効率は、ベースライン基準又は対照基準と比較して低減する可能性がある。用語「奏効率」は、処置後にがんの退縮に応答する患者のパーセンテージを示すために、本明細書においてその慣習的な意味で使用される。奏功率には、例えば、部分的又は完全な退縮が含まれる。部分奏効は、がん細胞の約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９７％、約９８％、又は約９９％の退縮を含む。一部の実施形態において、対照基準は、健常対象、がん対象（例えば、処置を受けているがん対象又は別のがん対象）、又はそれらの任意の集団から取得される。
本明細書に記載される実施例及び実施形態は、例示のみを目的としており、それに照らして様々な修正又は変更が当業者に示唆され、本出願の精神及び範囲並びに添付の特許請求の範囲に含まれることが理解される。本明細書で引用される全ての刊行物、特許、及び特許出願は、全ての目的のために、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
実施形態において、カチオン性両親媒性ポリマーは、細胞内で分解され、それにより分解生成物を形成する。実施形態において、分解生成物は、置換又は非置換のジケトピペラジンである。
実施形態において、方法は、ｍＲＮＡが細胞内で発現されることを可能にすることをさらに含む。実施形態において、細胞は真核細胞である。実施形態において、細胞は、哺乳動物又はヒト細胞である。実施形態において、細胞は生物の一部を形成する。実施形態において、生物はヒトである。実施形態において、細胞は、リンパ球系細胞又は骨髄性細胞である。実施形態において、細胞はＴ細胞である。実施形態において、細胞は骨髄性細胞である。
提供される態様において、それを必要とする対象に免疫応答を誘導する方法が提供され、方法は、その実施形態を含めて本明細書に提供される複合体の有効量を投与することを含む。
Ｐ実施形態
Ｐ実施形態１．ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２．前記リボ核酸が、前記カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合されている、Ｐ実施形態１の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３．前記ウイルスタンパク質が、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）タンパク質、ヒトメタ肺炎ウイルス（ｈＭＰＶ）タンパク質、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ３）タンパク質、インフルエンザＨ１０Ｎ８ウイルスタンパク質、インフルエンザＨ７Ｎ９ウイルスタンパク質、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）タンパク質、ジカウイルスタンパク質、チクングニア熱ウイルスタンパク質又は重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルス（ＣｏＶ）タンパク質である、Ｐ実施形態１又は２の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態４．前記ウイルスタンパク質が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１タンパク質又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タンパク質である、Ｐ実施形態１～３のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態５．前記ウイルスタンパク質が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質又はその断片である、Ｐ実施形態１～３のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態６．前記ウイルスタンパク質が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の可溶性受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）である、Ｐ実施形態１～３のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態７．前記リボ核酸が、配列番号３の配列を含む、Ｐ実施形態１～６のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態８．前記核酸アジュバントがＤＮＡアジュバントである、Ｐ実施形態１～７のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態９．前記核酸アジュバントがトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、Ｐ実施形態１～７のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１０．前記核酸アジュバントが、１つ以上の非メチル化ＣｐＧオリゴヌクレオチドを含む、Ｐ実施形態１～７のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１１．前記核酸アジュバントがＴＬＲ－９アゴニストである、Ｐ実施形態１～７のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１２．前記核酸アジュバントが、配列番号１又は配列番号２の配列を有する、Ｐ実施形態１～７のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１３．前記カチオン性両親媒性ポリマーが、ｐＨ感受性崩壊ドメイン及び親油性ポリマードメインを含む、Ｐ実施形態１～１２のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１４．前記カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
Ｒ１Ａ－［Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ］ｚ５ （Ｉ）
［式中、
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
ＩＭは、前記ｐＨ感受性崩壊ドメインであり、
ｚ５は、１～１０の整数であり、
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
ｚ４は、１～１００の整数であり、
ｚ２は、２～１００の整数である。］
を有する、Ｐ実施形態１～１２のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１５．前記親油性ポリマードメインが、式：
Figure 2023535730000197
 ［式中、
ｎ２は、１～１００の整数であり
Ｒ２０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する、Ｐ実施形態１４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１６．ＬＰ１が、式：
Figure 2023535730000198
 ［式中、
ｎ２１は、１～１００の整数であり、
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する、Ｐ実施形態１４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１７．ｎ２１が５であり、Ｒ２０１が非置換のＣ１８アルケニルである、Ｐ実施形態１６の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１８．前記非置換のＣ１８アルケニルがオレイルである、Ｐ実施形態１７の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態１９．ＬＰ２が、式：
Figure 2023535730000199
 ［式中、
ｎ２２は、１～１００の整数であり、
Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する、Ｐ実施形態１４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２０．ｎ２２が５であり、Ｒ２０２が非置換のＣ９アルケニルである、Ｐ実施形態１９の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２１．前記非置換のＣ９アルケニルがノネニルである、Ｐ実施形態２０の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２２．前記カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
Figure 2023535730000200
 ［式中、
ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｎは７である。］
を有する、Ｐ実施形態１４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２３．前記カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
Figure 2023535730000201
 ［式中、
Ｒ１Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、独立に－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、独立に－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、
Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｌ４は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンであり、
Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルであり、
Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、
Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｎ１は、０～５０の整数であり、
ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
ｚ２は、２～１００の整数であり、
ｚ４は、１～１００の整数であり、
ｚ５は、１～１０の整数である。］
を有する、Ｐ実施形態１～１２のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２４．ＬＰ１が、式：
Figure 2023535730000202
 ［式中、
ｎ２１は、１～１００の整数であり、
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する、Ｐ実施形態２３の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２５．ｎ２１が１０～４０である、Ｐ実施形態２４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２６．Ｒ２０１が非置換のＣ１２アルキルである、Ｐ実施形態２４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２７．ＬＰ２が、式：
Figure 2023535730000203
 ［式中、
ｎ２２は、１～１００の整数であり、
Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する、Ｐ実施形態２４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２８．ｎ２２が１０～３５である、Ｐ実施形態２７の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態２９．Ｒ２０２が非置換のＣ１２アルケニルである、Ｐ実施形態２７の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３０．前記カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
Figure 2023535730000204
 ［式中、
ｎ２１は、１０～２０の整数であり、
Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｚ２は、独立に、３～１０の整数である。］
を有する、Ｐ実施形態２３～２９のいずれか１つの細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３１．ｎ２１が１４であり、Ｒ２０１がドデシルであり、ｚ２が８である、Ｐ実施形態３０の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３２．前記カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
Figure 2023535730000205
 ［式中、
ｎ２２は、１０～３５の整数であり、
Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
ｚ２は、独立に、５～２０の整数である。］
を有する、Ｐ実施形態３１の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３３．ｎ２２が１４であり、Ｒ２０２がドデシルであり、ｚ２が７である、Ｐ実施形態３２の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３４．前記カチオン性両親媒性ポリマーと異なる前記第２のカチオン性両親媒性ポリマーをさらに含む、Ｐ実施形態２３の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３５．前記第２のカチオン性両親媒性ポリマーが、式：
Figure 2023535730000206
 ［式中、
ｎ２３は、１～１００の整数であり、
ｚ６は、５～１５の整数であり、
Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
Ｒ２０３は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
を有する、Ｐ実施形態３４の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３６．ｎ２３が１３であり、ｚ６が１１であり、Ｒ２０３がドデシルである、Ｐ実施形態３５の細胞透過性複合体。
Ｐ実施形態３７．Ｐ実施形態１～３６のいずれか１つの細胞透過性複合体を含むワクチン組成物。
Ｐ実施形態３８．Ｐ実施形態１～３６のいずれか１つの細胞透過性複合体の治療有効量、及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
Ｐ実施形態３９．ウイルス性疾患の処置又は防止を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置又は防止する方法であって、Ｐ実施形態１～３６のいずれか１つの細胞透過性複合体の治療又は予防有効量を前記対象に投与することを含む方法。
Ｐ実施形態４０．ウイルス性疾患の処置を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置する方法であって、Ｐ実施形態１～３６のいずれか１つの細胞透過性複合体の治療有効量及び薬学的担体を対象に投与し、それによって前記対象におけるウイルス性疾患を処置することを含む方法。
Ｐ実施形態４１．ウイルス性疾患に罹患し得る宿主を免疫化するための方法であって、Ｐ実施形態１～３６のいずれか１つの細胞透過性複合体を、前記ウイルスタンパク質又はその機能的断片に対する抗体が生成されるような条件下で宿主に投与することを含む方法。
Ｐ実施形態４２．前記抗体がＩｇＧ２抗体である、Ｐ実施形態４１の方法。
Ｐ実施形態４３．ウイルス性疾患がＳＡＲＳである、Ｐ実施形態４０～４２のいずれか１つの方法。
Ｐ実施形態４４．ウイルス性疾患がＣＯＶＩＤ－１９である、Ｐ実施形態４０～４２のいずれか１つの方法。
Ｐ実施形態４５．ウイルス性疾患がＭＥＲＳである、Ｐ実施形態４０～４２のいずれか１つの方法。
実施例１：ｍＲＮＡワクチン
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の可溶性受容体結合ドメインをコードするｍＲＮＡを使用した。免疫応答は、細胞の侵入と感染力とに必要なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の重要な部分に焦点を当てている。以前のコロナ流行ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及び中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）において全スパイクワクチンで観察された抗体媒介性の「疾患増強」は、ウイルスタンパク質の断片及び特異的ドメイン（例えばＲＢＤ）を使用することによって防止される。ＴＬＲ９アゴニストは、アジュバントとして使用してもよい。ＴＬＲ９アゴニストは、ｍＲＮＡをコードするＲＢＤを受けたのと同じ細胞への効果的な共送達のために、共製剤化されてもよい。ＴＬＲ９アゴニストは、自然免疫応答を活性化し、それが次に適応免疫応答を助け、誘発する場合がある。さらに、抗体アイソタイプのスイッチングと成熟Ｂ細胞応答とを支援することが以前に示されている。ＴＬＲ９アゴニストは、Ｔ細胞応答をさらに増強し得る。本明細書に提供される組成物は、生きている動物の免疫細胞への核酸の非常に効率的な送達のために使用されてもよく、望ましい毒性及び免疫原性プロファイルを有する。
ＣＡＲＴ ＲＢＤ－ｍＲＮＡの最初の実験－アジュバントテスト、ＲＢＤ特異的抗体を検出するＥＬＩＳＡ、Ｔ細胞アッセイ、受容体結合阻害／競合及び偽ウイルス中和アッセイ：
Figure 2023535730000207
群１：３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ Ｉ．Ｖ．
・群２：３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋３ｕｇのＣｐＧ（共製剤化）Ｉ．Ｖ．
・群３：３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋３０ｕｇのアゴニストＣＤ４０ｍＡｂ（共製剤化）Ｉ．Ｖ．
・群４：３ｕｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ＋３０ｕｇのアゴニストＣＤ４０ｍＡｂ＋３ｕｇのＣｐＧ（共製剤化）Ｉ．Ｖ．
・群５：３ｕｇのＣｐＧ－ＣＡＲＴ＋３０ｕｇのアゴニストＣＤ４０ｍＡｂ（共製剤化）ＩＶ ＣＴＲ群
・群６：ナイーブマウスＣＴＲ．群
生きている動物の循環器と肺の両方で検出されるアイソタイプスイッチングされた中和抗体応答を誘導する３成分のｍＲＮＡワクチンを開発した。３つの成分は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）の可溶性バージョンをコードするｍＲＮＡ、ＣｐＧなどのＤＮＡベースのオリゴヌクレオチドの形態のＴＬＲ９アゴニスト、及び電荷変更放出性輸送体（ＣＡＲＴ）である。ＣＡＲＴは、ｍＲＮＡとＴＬＲ９アゴニストとを製剤化し、ＴＬＲ９アゴニストとＲＢＤ ｍＲＮＡとを生きた動物の細胞に効率的に送達するナノ粒子を作製する。
近交系マウス系統とヒト化マウスの両方で機能するワクチンを開発した。ＣＡＲＴ技術は、げっ歯類モデルにおける安全性について評価されている。ワクチンは、前臨床モデルで望ましい反応を示す。
実施例２：ＴＬＲ－９アゴニストを有する電荷変更放出性輸送体を用いたｍＲＮＡ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ワクチンは、中和抗体とＴ細胞メモリーとを誘導する
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のパンデミックにより、予防ワクチンの急速な開発が必要になった。２つのｍＲＮＡワクチンがＦＤＡによって緊急使用が承認されており、並外れた有効性が実証されている。これらのｍＲＮＡワクチンの成功は、ｍＲＮＡの開発速度及び治療の可能性を確立する。これらの認可されたワクチンは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の完全長バージョンをコードする。それらは、固有の免疫刺激特性を有する脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）送達ビヒクルと製剤化される。将来の世代のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ワクチンの柔軟性及び一般的なｍＲＮＡワクチンの開発を確保するために、異なるワクチン接種戦略及び代替ｍＲＮＡ送達ビヒクルが望ましい。
ここでは、電荷変更放出性輸送体（ＣＡＲＴ）と呼ばれる送達ビヒクルを使用した代替のｍＲＮＡワクチンアプローチの開発について報告する。これらの本質的に非免疫原性ビヒクルを使用して、本発明者らは、ＣｐＧモチーフを有するオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ－ＯＤＮ）などの共製剤アジュバントを含めることにより、ワクチンの免疫原性を調整することができる。我々のｍＲＮＡ－ＣＡＲＴワクチンを接種したマウスは、循環器及び肺気管支液の両方で治療上関連するレベルのＲＢＤ特異的中和抗体を発達させた（図１６）。さらに、本発明者らのワクチンは、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞メモリーを含む強力で長期的なＲＢＤ特異的ＴＨ１ Ｔ細胞応答を誘発した。
導入
コロナウイルスのパンデミックは、１０年以上にわたって懸念が高まっており、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及び中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）に対するワクチンを開発するためのいくつかの試みがなされてきた１。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの世界的な蔓延は、コロナウイルスワクチンからの以前の洞察を活用して、ＣＯＶＩＤ－１９パンデミックを緩和するための安全で効果的でスケーラブルなワクチンを開発する世界的な取り組みを刺激した。世界中で様々なワクチン候補及びアプローチが調査されているが２、ｍＲＮＡワクチン３～６の開発と実施の並外れたペースは、この最先端技術の可能性を示している。ＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２に対してＦＤＡから緊急使用許可を付与されたｍＲＮＡワクチンは、これらの進歩により、これまでのワクチンの概念から臨床試験への最も迅速な臨床解釈が可能になったため、基礎科学と応用科学の勝利を表している５、６。ｍＲＮＡは一過性に発現し、ゲノムに統合されず、体内の自然な分解メカニズムによって排除される。ｍＲＮＡワクチンは、柔軟で迅速な設計を提供し、次世代の製品が新しいウイルスバリアントの出現に対処することを可能にする。
現在承認されているインビトロの転写によって生成されるｍＲＮＡワクチン５、６は、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）に製剤化され、筋肉内投与される、通常２つの構造エピトープ突然変異を含む、完全なウイルススパイクタンパク質をコードするｍＲＮＡに組み込まれた化学修飾ヌクレオチドを使用する。それらの並外れた成功にもかかわらず、ＣＯＶＩＤ－１９に対する最も効果的で安全でスケーラブルなワクチンに貢献する基礎となる科学は進化し続けている。ｍＲＮＡ及び送達ビヒクルの特定の成分の修飾及び配列の最適化は、免疫学的応答に影響を与える可能性がある７。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びＭＥＲＳの以前の研究では、疾患の抗体依存性感染増強（ＡＤＥ）から潜在的な合併症を回避するために、コードされた抗原の適切な選択が重要である８ことが示されている９。ＬＮＰの成分であるイオン化可能な脂質はアジュバントとして作用するが、有害事象を誘発する可能性があるため、送達ビヒクルの化学的性質も重要であり１０、ＬＮＰ製剤にポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を使用すると、アレルギー反応を引き起こす可能性がある１１、１２。
これらの継続的な課題と、ＣＯＶＩＤ－１９パンデミックの世界規模が既存のＬＮＰ技術のサプライチェーンに負担をかけている程度は、現在及び将来のパンデミックに直面した世界的な対応の回復力を高め、最も効果的で耐久性のある免疫学的応答につながる可能性のある代替アプローチを試験し、新たなウイルスバリアント１３の出現に迅速に対応できるようにするために、代替アプローチを開発する必要性を浮き彫りにしている。
本研究では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）をコードするｍＲＮＡを利用した代替の３成分のｍＲＮＡワクチンを提示し、電荷変更放出性輸送体（ＣＡＲＴ）１４～１６と呼ばれる高効率で非毒性のＰＥＧフリーｍＲＮＡ送達プラットフォーム及び共製剤化されたアジュバント１６、１７としてのＴＬＲ９アゴニスト（ＣｐＧ）を製剤化した（図１７Ａ）。先行研究では、ＲＢＤが有望な抗原標的であることが示されており１８～２０、これはこの標的に対して誘発された抗体はしばしば強く中和されるためである。ＣＡＲＴは、有望な新しい遺伝子送達プラットフォームを提供し、前臨床マウス研究においてｍＲＮＡワクチンの効果的な送達者であることが証明されている１６、２１。ＣＡＲＴは、脂質モノマーの配列及びカチオン性モノマーの配列を含む単一成分両親媒性ジブロックオリゴマーである（図１７Ｂ、２３Ａ～２３Ｂ）。それらは、２段階の有機触媒オリゴマー化で大規模に容易に製造される。ＣＡＲＴは、ｍＲＮＡ（又はＣｐＧのような他の共製剤されたヌクレオチド）を静電的にカプセル化し、遺伝子カーゴを細胞に送達する。ＣＡＲＴの固有の特徴は、電荷変化転位を受けて中性ジケトピペラジン小分子（ＤＫＰ）を生成する能力である。この形質転換は、ｍＲＮＡの放出を促進し（図１７Ｃ）、持続性カチオンに関連するあらゆる毒性の問題を排除する２２。以前の観察では、静脈注射時に、ヒドロキシエチルグリシン繰り返しカチオンユニットを含むＣＡＲＴが、ｍＲＮＡを選択的に脾臓に送達することを示していたが１４～１６、これらの同じ産物の筋肉内（ＩＭ）注射は、筋肉内で局所的にｍＲＮＡ翻訳をもたらす（図１７Ｄ）。ｆＬｕｃ ｍＲＮＡを用いた生物発光研究は、インビボタンパク質発現がＩ．Ｍ．注射後の筋肉内よりもＩ．Ｖ．注射後の脾臓内で大きいことを示している。いずれの部位において、発現は４～６時間後にピークに達し（図１７Ｅ）、３～４日の期間にわたって減少する。さらに、不飽和脂質ブロックを含むＣＡＲＴは、抗原提示細胞のトランスフェクションが強化されたことを示し１５、ＣＯＶＩＤ－１９ワクチンにこのようなＣＡＲＴを選択する動機となる。ＣＡＲＴ送達ビヒクルは、それ自体では非特異的免疫刺激を誘導しない１６、２１。この特性により、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ－ＯＤＮなどのオリゴデオキシヌクレオチドアジュバントの共製剤化が可能になり、誘導された免疫応答を調整することができる。
ここで本発明者らは、ＣＡＲＴとＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤをコードするｍＲＮＡとＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ（ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ）の共製剤化が、マウスにおいて堅牢な中和抗体とＲＢＤ特異的Ｔ細胞応答を誘導することを示している。さらに、ワクチン接種動物の脾臓と肺でこれらの抗体とメモリーＴ細胞の有意なレベルを検出する。
結果
ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン接種は、免疫化後４日目に抗ＲＢＤ特異的抗体を誘発する。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）２３をコードするｍＲＮＡは、ウイルスの公開された配列に基づいて、インビトロ転写によって作成された。品質管理ステップとして翻訳されたｍＲＮＡ産物のタンパク質検出を可能にするために、Ｈｉｓタグが含まれていた。得られたｍＲＮＡは、最適なＣＡＰ－１構造を含んでいた；ウリジンは修飾Ｎ１－メチル－シュードウリジンに置き換えられ、シチジンは５－メチルシチジンに置き換えられて、ｍＲＮＡの安定性及び翻訳を最大にした。タンパク質発現は、トランスフェクトされた２９３Ｆ及びＨｅＬａ細胞におけるウエスタンブロットによって検証された（図２４Ａ）。ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ複合体の投与が、最適に改変されたｍＲＮＡで製剤化された場合、非特異的な免疫刺激効果をもたらさないことを実証するために２４、マウスにｍＲＮＡ－ＣＡＲＴを静脈内注射し（ＩＶ）、自然免疫細胞の活性化をモニターした。本発明者らが最も感度の高いとみなしている試験である。ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ複合体は、修飾されたｍＲＮＡで製剤化された場合、そのような非特異的刺激効果を伴わないことがわかった。しかし、未修飾ｍＲＮＡで製剤化された場合、自然免疫細胞サブセットの非特異的活性化が観察され、非特異的免疫刺激の特性がＣＡＲＴではなく、カーゴに依存することが実証された（図２４Ｂ）。その後、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ複合体を抗原提示細胞のエンドソームＴＬＲ９受容体を誘発するＣｐＧオリゴヌクレオチドと共製剤化することにより、本発明者らの候補ワクチンの免疫応答を指示することができた。これらのＣｐＧ実体は、安全で効果的なワクチンアジュバントであることが知られている１７。
アジュバントとしてＣｐＧを添加した場合と添加しない場合のＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴワクチン接種の効果を評価した。ＣＡＲＴのＩＶ注射は、脾臓のＢ細胞、マクロファージ、及び樹状細胞などの抗原提示細胞（ＡＰＣ）にカーゴを効果的に送達する１５、１６（図１７Ｄ）。ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴワクチン接種のこの投与経路は、がん治療ワクチン接種の先行研究で有効であることが証明されている１６。この知見に基づき、まずＩＶ投与によるワクチンの評価を行った。マウスを０日目にプライミングし、４日目と８日目に３ｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴを３ｇのＣｐＧのある場合とない場合で製剤化し、２回のブーストを受けた（図１８Ａ）。対照として、ｍＲＮＡを含まないＣｐＧ－ＣＡＲＴを単独で３ｇ投与した群と、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で処置した対照群が含まれた。ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴとＣｐＧを接種したマウスは、ワクチン接種後４日という早い時期に、検出可能なレベルの抗ＲＢＤ ＩｇＧ及びＩｇＭを発現した（図２５Ａ）。経時的に、本発明者らは、対照と比較して、両方のｍＲＮＡ処置群の血清中の抗ＲＢＤ抗体のレベルの増加を観察した（図１８Ｂ）。重要なことに、本発明者らのワクチンによって誘導された抗体は、ＲＢＤに特異的であり、無関係なＨｉｓタグ付きタンパク質（ＧＦＰ－Ｈｉｓ）に交差反応しなかった（図２５Ｂ）。注目すべきことに、ＣｐＧを含む製剤を接種したマウスにおけるＲＢＤ特異的抗体応答は、ＣｐＧなしで処置した群で観察されたものを一貫して上回っていた（図１８Ｂ、１８Ｄ）。
ＣｐＧの添加により、ＲＢＤ特異的抗体応答の早期のアイソタイプスイッチングがもたらされる。
１４日目までに、ＣｐＧ共製剤化ワクチンが、ＩｇＧ１からＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３へのアイソタイプのスイッチングを受けたＲＢＤ特異的Ｉｇ応答を誘導することを観察した。対照的に、共製剤化されたＣｐＧなしでワクチン製剤を投与されたマウスは、主にスイッチのないＩｇＧ１を産生した（図１８Ｃ、２６Ａ及び２６Ｂ）。６０日目までに、これらの違いはそれほど明白ではなかったが、ＣｐＧ含有ワクチンを接種したマウスの血清中に、全てのクラスのＲＢＤ特異的抗体のより高いレベルを検出した（図１８Ｃ、２６Ｂ）。
ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン接種によって誘導された抗体は、ＲＢＤ－ＡＣＥ２結合を阻害し、偽型ウイルスの侵入を中和する。
誘導された抗血清を、ＲＢＤ－ＡＣＥ２相互作用を阻害するそれらの能力について次に試験し（図１９Ａ）、ＡＣＥ２発現標的細胞への偽型ウイルスの侵入を遮断した（図１９Ｂ）。機能的ＲＢＤ－ＡＣＥ２受容体の遮断は、フローサイトメトリーによるＡＣＥ２発現標的細胞へのＲＢＤタンパク質の結合（データ示さず。）と、ＡＣＥ２タンパク質でコーティングされた固相への結合との両方に対してアッセイされた。２８日目に、アジュバントを含まないワクチンを接種した群と比較して、ＣｐＧを含むワクチンを接種した群間で中和抗体のレベルに顕著な違いが観察された。ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン接種マウス由来の抗血清は、それぞれ１：５００及び１：１８，０００のＩＣ５０で、高度の受容体遮断及び偽型ウイルス中和を示したが、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウス由来の抗血清は、バックグラウンドより上でかろうじて陽性であった（図１９Ａ、１９Ｂ）。しかし、ＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴを接種したマウスの抗血清は６０日目までに、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴを接種したマウスの抗血清よりも程度は低いものの、ＲＢＤ－ＡＣＥ２受容体の結合を遮断し、偽型のウイルス侵入を中和することができた（図１９Ａ、１９Ｂ）。受容体相互作用遮断アッセイと偽ウイルス中和アッセイとの結果は、よく相関していた。
ワクチン接種マウスの気管支肺胞洗浄におけるＲＢＤ特異的抗体。
ワクチン接種マウスの肺におけるＲＢＤ特異的免疫グロブリンの存在を評価するために、処置後Ｄ６０で気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を採取した。ＲＢＤ特異的Ｉｇは、ＥＬＩＳＡ法によりＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴ及びＲＢＤ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴワクチン接種マウスの両方からＢＡＬにおいて検出された（図１９Ｃ）。特に、ＢＡＬは２ｍＬの滅菌ＰＢＳで肺を洗い流すことによって収集されるため、Ｉｇ力価は、高度に希釈された試料を表す。重要なことに、希釈されているものの、両方のワクチン接種群のＢＡＬ由来のこれらの免疫グロブリンは、Ｄ６０でＲＢＤ－ＡＣＥ２結合を遮断した（図１９Ｄ）。
ワクチン接種マウスの肺におけるＲＢＤ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞。
マウスでは、Ｉｇクラスのスイッチングは、ＴＨ１ Ｔ細胞応答に関連する２５、２６。ワクチン誘発Ｔ細胞応答を評価するために、Ｄ２８でＩＶワクチン接種マウスの肺から単一細胞懸濁液を調製し、培地単独又は可溶性ＲＢＤ－Ｈｉｓタンパク質若しくは制御タンパク質（ｈＣＤ８１－Ｈｉｓ）の存在下で、細胞を４８時間培養した。次に、細胞を回収し、メモリー及び活性化特異的表面タンパク質並びに細胞内サイトカインに対する蛍光色素結合モノクローナル抗体を使用して、Ｔ細胞活性化のためのフローサイトメトリーによってアッセイした。驚くべきことに、ＲＢＤタンパク質の再刺激により、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスの肺細胞懸濁液において、規定のＲＢＤ特異的ＣＤ４＋／ＣＤ４４ｈｉｇｈ／ＣＤ１３４＋及びＣＤ４＋／ＣＤ４４ｈｉｇｈ／ＴＮＦα＋活性化Ｔ細胞サブセットを同定することができたが、細胞を培地単独又は制御タンパク質の存在下で培養した場合には検出できなかった（図１９Ｅ）。ＣＤ４＋Ｔ細胞によるＴＮＦα分泌は、ＴＨ１分極と関連している。
ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチンは、静脈内、筋肉内、及び皮下の投与経路によって堅牢な抗ＲＢＤ Ｉｇ応答を誘発する。
投与経路（ＲＯＡ）に関連して本発明者らのワクチンの有効性を試験するために、ＩＶ、ＩＭ、又はＳＣ投与された免疫化によって誘発されるＲＢＤ特異的Ｉｇ応答を比較した。マウスは、０日目にＣＡＲＴで製剤化された３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ及び３μｇのＣｐＧでプライミングされ、８日目にブーストを受けた（図２７Ａ）。全ての投与経路は、分析された時点Ｄ１４及びＤ２８において、検出可能な中和抗体価をもたらし、ＩＭ投与とＳＣ投与との間に有意差はなかった（図２７Ｂ）。ＩＶワクチン接種マウスでは力価が高くなる傾向があった。アイソタイプのスイッチングは、投与経路とは無関係に生じた（図２７Ｃ）。
ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチンは、臨床的に関連するプライム－ブーストレジメンにおいて堅牢なＲＢＤ特異的Ｉｇ応答を誘導し、ＣｐＧ源とは無関係である。
現在承認されているＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ワクチンによって選択された免疫化レジメンに導かれて２７、マウスはＤ０にワクチンでプライミングされ、Ｄ２１にブーストされた。マウスを３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ ＣＡＲＴでＩＶ又はＩＭのいずれかで免疫化された（図２０Ａ）。以前の観察を確認すると、両方の群で堅牢な応答が観察された。ＩＶ免疫化マウスは、Ｄ２１及びＤ２８の両方に、血清及びＢＡＬにおいて、より高い統計学的に有意ではない抗ＲＢＤ抗体価を示した（図２０Ｂ～２０Ｄ）。両群の抗血清は、Ｄ２１に、ＲＢＤ－ＡＣＥ２結合を効果的に阻害し（図２８Ｂ）、Ｄ２８に、実質的により効果的であったが、２つの群間で総ＲＢＤ特異的ＩｇＧに観察された差を反映している（図２０Ｃ）。さらに、完全なスパイクタンパク質に対する堅牢な抗体応答は、静脈内投与群でより高かったものの、両群で観察された（図２８Ｃ）。したがって、ワクチン誘発性抗ＲＢＤ応答は、主に完全なスパイクタンパク質に曝露されたＲＢＤエピトープに向けられる。重要なことに、ＣｐＧは堅牢なアイソタイプスイッチングされた抗ＲＢＤ免疫グロブリンに必要とされるが、その応答はＣｐＧの供給源とは無関係である。ＣｐＧの４つの異なる供給源、ＣｐＧのＣサブクラスの３つ（ＣｐＧ－Ｃ）及びＢサブクラスの１つ（ＣｐＧ－Ｂ）を試験した。異なるＣｐＧ－Ｃ間で有意差は認められず（図２８Ａ～２８Ｃ及び２９Ａ～２９Ｃ）、一方、ＢサブクラスＣｐＧは、ＣｐＧ－Ｃと比較して下回った（データ示さず。）。
ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチンは、ＴＨ１ ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞メモリーを長期間誘導した。
Ｄ１及びＤ２１のいずれかに、３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ－ＣＡＲＴ又は３μｇのＣｔｒｌ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ－ＣＡＲＴを、ＩＶ又はＩＭで投与されたマウスの脾細胞を、ワクチン接種後１０５日目に採取し、ＩＦＮγ酵素結合免疫吸着スポットアッセイ（ＥＬＩＳｐｏｔ）によってＴ細胞応答を特徴付けた。このアッセイでは、プールされた脾細胞をＣＤ４＋又はＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかに富ませ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤペプチドプール又は培地単独で一晩培養した。ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞における有意なＩＦＮγ応答は、ＩＶ及びＩＭワクチン接種の両方によって検出された。ＩＶワクチン接種マウスの投与経路は脾臓を標的としているため、脾臓Ｔ細胞がより強い応答を与えることが期待される。一方、ワクチン接種後１０５日目に応答Ｔ細胞を検出することは顕著である（図２１Ａ及び２１Ｂ）。
ワクチン誘導性Ｔ細胞の機能性と分極をさらに評価するために、ＲＢＤペプチドプール又は培地単独の存在下で、同実験の個々のマウスの脾細胞をインキュベートした。１８時間のインキュベーション後、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞を、メモリーマーカーＣＤ４４の発現及び細胞内サイトカインＩＦＮγ、ＴＮＦα、及びＩＬ－４について、フローサイトメトリーによって別々にアッセイした。ワクチン接種後のこの遅い時点でも、ＲＢＤ－ｍＲＮＡ及びＣｐＧ－ＣＡＲＴ ＩＶワクチン接種群では、ＲＢＤ特異的ＩＦＮγ産生ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞並びにＴＮＦα産生ＣＤ８＋Ｔ細胞の有意な集団を特定することができた。ＩＬ－４産生ＣＤ４＋Ｔ細胞の増加はなく、Ｔ細胞メモリーが主にＴＨ１であったことを示している（図２１Ｃ、２１Ｄ及び３０）。ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔの結果とは対照的に、ＩＭワクチン接種マウスでは、フローサイトメトリーによってこれらの低頻度の集団（それぞれ、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋富化条件の５×１０５個細胞あたり、平均２８個及び５５個のＩＦＮγスポット）を特定することはできなかった。
免疫化マウスの中和抗体レベルは、ワクチン接種されたヒトで達成されたものに匹敵する。
臨床試験の結果は、Ｐｆｉｚｅｒ／ＢｉｏＮＴｅｃｈのｍＲＮＡワクチン及びＭｏｄｅｒｎａのワクチンの両方が、２回目のブースターワクチン投与前に、症候性感染からの保護を与えることができることを示している２８、２９。これは、その初期のプレブースト時点におけるヒトの抗体レベルが疾患防御を与えるのに十分であることを示唆している。したがって、本発明者らのワクチン接種マウスにおいて達成された中和抗体のレベルを、ブースターの前後に免疫化されたヒトの中和抗体のレベルと比較した。ＢＡＬＢ／ｃマウスに３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ－ＣＡＲＴを、ＩＭ又はＩＶのいずれかでＤ１及びＤ２１にワクチン接種し、血清をＤ２８に採取した。次に、これらのマウスの血清を、プライミングワクチン接種の１５～２１日後に採取し、次いでブースターワクチン接種の１５±４日後に採取された、個別のＰｆｉｚｅｒ／ＢｉｏＮＴｅｃｈのｍＲＮＡ－ＬＮＰワクチン接種したヒトの１３個の血清と比較した。本発明者らのＩＭ及びＩＶワクチン接種マウスのブースト後の血清で達成されたＲＢＤ－ＡＣＥ２阻害のレベルは、ヒトのブースト前血清のレベルと同等又はそれより高かった。ＩＶワクチン接種を受けたマウスにおける阻害抗体レベルは、ブースト後のヒトにおける抗体レベルと同等であった（図２２Ａ及び２２Ｂ）。
ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン接種は、良好な安全性プロファイルを示す。
ワクチンの安全性プロファイルを評価するために、マウスをＤ０及びＤ２１に、ＰＢＳ、３μｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ、３μｇのＧＦＰ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ－ＣＡＲＴ、又は３μｇのＲＢＤ ｍＲＮＡ＋３μｇのＣｐＧ－ＣＡＲＴのいずれかで処置した（図３１Ａ）。処置後に体重に差は認められなかった（図３１Ｂ及び３１Ｃ）。ＣｐＧ含有製剤のＩＶ投与は、処置後２４時間で白血球（ＷＢＣ）数の一時的な減少を誘導し、Ｄ２までに回復した。これはＣｐＧによって駆動され、ＣｐＧを含まないｍＲＮＡ－ＣＡＲＴの注射は、ＷＢＣ数を変化させなかった（図３１Ｄ～３１Ｆ）。処置後１日及び１週間で測定されたＴＮＦα及びＩＬ－６の血清レベルは、ワクチン接種の影響を受けなかった。ＩＭ及びＩＶワクチン接種は、プライムの１日後に血清ＩＰ１０及びＩＦＮαレベルの一時的な増加をもたらした。血清サイトカインレベルは、プライム後７日の第２の分析時点で、正常範囲内であった。ここでも、過渡効果はＣｐＧによって媒介され、ＣｐＧを含まないｍＲＮＡ－ＣＡＲＴで処置したマウスは、未処置のマウスと比較して、処置後に変化していないサイトカインプロファイルを示した（図３１Ｇ～３１Ｊ）。ＷＢＣ数とサイトカインプロファイルの両方について、同様の動態がブースト処置後に観察された（データ示さず。）。処置は、アラニントランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸トランスフェラーゼ（ＡＳＴ）（図３１Ｋ－３１Ｎ）、及びアルカリホスファターゼ（ＡＰ）（データ示さず。）の血清肝酵素レベルによって評価されるように、肝毒性を誘導しなかった。さらに、ブースター処置後１日目と５日目に行った肉眼病理組織学では、主要臓器の肉眼的評価に病理所見を認めなかった。
検討
初めて、ｍＲＮＡベースの治療薬がＦＤＡによって承認され、両方のｍＲＮＡベースのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ワクチンの成功は注目に値し、相互に検証されている。しかし、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ワクチンの製造、展開及び入手可能性における課題は残っている。ｍＲＮＡベースの治療薬全般の継続的な成功と改良のための重要な態様の１つは、化学的及び生物学的特性を変化させながら、安全な送達ビヒクルの多様な選択肢へのアクセスを作成することである。ここでは、本発明者らは臨床的に使用されている脂質ナノ粒子への代替ｍＲＮＡ送達プラットフォームを使用して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の臨床的に関連するＲＢＤ抗原に対する効果的なｍＲＮＡワクチン接種戦略を示す。本発明者らは、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧをアジュバントとして含めることによって増強された、効果的なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２特異的免疫応答を観察した。さらに、得られた抗ＲＢＤ血清がＡＣＥ２発現細胞への偽ウイルス侵入を中和することができることを示した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスのＡＣＥ２受容体結合ドメインに着目し、免疫化された動物の血清と肺の両方においてアイソタイプスイッチングされたＲＢＤ特異的中和抗体を大量に作製することができた。さらに、承認されたＰｆｉｚｅｒ／ＢｉｏＮＴｅｃｈのｍＲＮＡ－ＬＮＰワクチンを接種したヒトの血清からの中和抗体の血清レベルを、ｍＲＮＡ－ＣＡＲＴをワクチン接種したマウスの血清レベルと比較した。完全に免疫化されたマウスの中和抗体のレベルは、Ｐｆｉｚｅｒ／ＢｉｏＮＴｅｃｈのｍＲＮＡワクチンを接種したヒトのブースト前の血液試料で測定された中和抗体のレベルと同等（ＩＭ）又はそれ以上（ＩＶ）だった。この承認されたｍＲＮＡワクチンは、プライム後１２日目に早くも防御を与えることが示されているため、これは、本発明者らのワクチンによって誘導される中和抗体レベルが防御を付与するのに十分であることを示している２８。もちろん、これらの結果をさらに検証するために、非ヒト霊長類などのより大型の動物におけるワクチン接種研究が必要とされる。最後に、ＲＢＤ ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチンは、ＴＨ１分極の長期にわたるＴ細胞記憶の誘導により、ＲＢＤ特異的ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞応答を誘導した。さらに、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂが優勢なＩｇＧアイソタイププロファイルは、ＴＨ１分極されたＴ細胞応答を確認する。
ＬＮＰと比較すると、ＣＡＲＴは固有の生体分布を持ち、単純にＣＡＲＴ構造の変化によって、リガンドを標的にする必要がなく、ｍＲＮＡを選択的に脾臓又は他の臓器に送達する。ＣＡＲＴは、任意の望ましいヌクレオチドの組合せで、複数のｍＲＮＡで容易に調製及び製剤化することができ２１、ｍＲＮＡと混合される単一の構造成分のみを必要とし、その製造に特別なマイクロフルイディクス装置を必要としない。これにより、代替薬物適用戦略が可能になる。予備実験は、ｍＲＮＡと製剤化されたＣＡＲＴが－２０℃で１１日間安定であることを示している（図３２）。しかしながら、製剤は特定の設備を必要としないため、ワクチンの混合シュート投与を使用することができる。本発明者らの最初の実験は、ＤＭＳＯ中の製剤化されていないＣＡＲＴが－２０℃で１２ヶ月を超えて安定であることを示している。したがって、ＣＡＲＴとｍＲＮＡは、２チャンバーシリンジの２つの別々のチャンバーに分割することができ、投与時点での混合とｍＲＮＡ－ＣＡＲＴ形成とを可能にし、事前に製剤化された複合体の熱安定性の問題を回避することができる。ＬＮＰとは対照的に、ＣＡＲＴは、非特異的な免疫刺激効果がないため、ワクチン設計と選択の柔軟性が高まり、ＬＮＰの固有の免疫特性に依存するというより、ｍＲＮＡと同時送達された場合、オリゴデオキシヌクレオチドアジュバントの量を変化させることができる。ＣＡＲＴをＩＭに注射すると、遺伝子発現は注射部位にのみ局在し、他の臓器には広がらない。ＬＮＰのＩＭ注射を使用したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ワクチン研究では、肝臓が最高レベルのレポーター遺伝子及び抗原発現を示した１９。さらに、ＣＡＲＴのＩＶ注射は、ｍＲＮＡ発現を脾臓にのみ付与し、ＩＭと比較してＩＶワクチン接種のより高い効力を説明することができた。ワクチンのＩＶ投与は、より強い抗体及びＴ細胞応答を誘導したが、両方の投与経路を介して有意な応答を誘導することができた。興味深いことに、結核に対するＢＣＧワクチンによるＩＶワクチン接種は、確立された皮内投与又はエアロゾル投与と比較して、血液、脾臓、ＢＡＬ、及び肺リンパ節における抗原応答性ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の増加により、非ヒト霊長類の保護転帰を大きく変化させることが最近示されている３０。さらに、ＩＶ投与されたｍＲＮＡ脂質ナノ粒子は、前臨床マウスモデル及び治療用がんワクチン接種の臨床第Ｉ相試験で効力を示している３１、３２。
我々は、スパイクタンパク質配列全体ではなく、ＲＢＤに対して特異的に本発明者らのワクチンを向けることを選択した。強力な体液性及び細胞性免疫応答は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２全長スパイクタンパク質とＲＢＤとの両方を使用した臨床試験で観察されている６。さらに、ＲＢＤ ｍＲＮＡ指向性ワクチンは、米国とドイツで試験された第１／２相臨床試験で安全であることが証明された２７、３３。さらに、ＲＢＤは、体液性及び細胞性免疫応答に不可欠な標的能力を提供する。Ｐｉｃｃｏｌｉらは、曝露された患者由来の血清の中和活性の９０％が、ＲＢＤを標的としていることを示した３４。ＲＢＤは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｓタンパク質に対するＴ細胞応答のエピトープでもある３５。ＲＢＤ（Ｎ５０１Ｙ）に突然変異を有する急速に広がる変異体が、英国で同定されており（Ｂ．１．１．７）、現在のｍＲＮＡベースのワクチンの適用範囲について懸念が生じている６。このＮ５０１Ｙ突然変異は、元々のＲＢＤ配列に対してワクチン接種されたマウスが、特異的な突然変異を含むＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２バリアントをクリアにすることができたため、ＲＢＤワクチン接種の有効性に影響を与えないようである３６。しかし、最近のデータは、他の臨床的に関連するＲＢＤ及び非ＲＢＤ変異がワクチン誘発性体液性免疫からの脱出を媒介する可能性があることを示しており１３、３７、柔軟で迅速な適応可能なワクチンプラットフォームの緊急の必要性を強調している。
ｍＲＮＡ＋ＣｐＧ－ＣＡＲＴワクチン接種の安全性データは良好であるように思われる。検出された白血球数及びサイトカインプロファイルの変化は、ＣｐＧによって媒介された。しかし、ＣｐＧは、他のワクチンの臨床試験でよく知られている安全性の記録を有する。ＣｐＧのようなＴＬＲ活性化分子を本発明者らのワクチンに製剤化する能力は、免疫系の能力が低く、重度のＣＯＶＩＤ１９の症状のリスクが高い集団において、防御免疫応答を誘導するのに役立つと考えている。ＣｐＧはｐＤＣとＢ細胞とを直接活性化し、自然免疫応答と適応免疫応答との両方の誘導に貢献する。ＣｐＧによって開始される一連の事象は、ナチュラルキラー細胞、Ｔ細胞、及び単球／マクロファージの成熟、分化、及び増殖を間接的に支持する３８～４１。ＣｐＧによって活性化されたＢ細胞は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）及びＭＨＣクラスＩＩ、ＣＤ４０、ＣＤ８０、及びＣＤ８６を含む共刺激分子の発現をアップレギュレートする４２～４４。その後、ＣｐＧ刺激Ｂ細胞は増殖し、形質細胞とメモリーＢ細胞に分化する４５。ＣｐＧのアジュバント効果は、本発明者らの研究によって裏付けられており、ＣｐＧの添加は、より迅速な免疫応答、血清及び気管支肺胞洗浄におけるより高い抗ＲＢＤ力価、より効果的なＡＣＥ２－ＲＢＤ阻害及び偽型ウイルスの中和、Ｔ細胞応答の増加、並びにより顕著なアイソタイプスイッチングをもたらした。
結論として、本発明者らの研究は、臨床的に関連するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ＲＢＤ抗原に対するこのｍＲＮＡ－ＣＡＲＴワクチンプラットフォームの効力と柔軟性を示している。異なる投与経路を介したＢ細胞とＴ細胞の両方の応答の堅牢な誘導は、感染症に対するｍＲＮＡベースの治療薬の一般的な開発において、臨床的に承認された脂質ナノ粒子の代替として、さらなる探索とその使用を保証する。
材料と方法
組換えタンパク質。
Ｗｕｈａｎ－Ｈｕ－１ゲノム配列（ＧｅｎＢａｎｋ ＭＮ９０８９４７３）の残基１－１２１３である、可溶性ＲＢＤ－Ｈｉｓ、残基３１９－５４１及びスパイク－ＨｉｓをコードするｐＣＡＧＧＳプラスミドは、Ｆｌｏｒｉａｎ Ｋｒａｍｍｅｒ教授（Ｉｃａｈｎ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｔ Ｍｏｕｎｔ Ｓｉｎａｉ）からの贈り物だった２３。可溶性ＡＣＥ２－ｈＩｇＡ ＦＣ融合タンパク質をコードするｐｃＤＮＡ３プラスミドは、ａｄｄｇｅｎｅ（ＩＤ １４５１５４）から購入した。プラスミドは、Ｏｎｅ Ｓｈｏｔ ＴＯＰ１０ Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）及びＺｙｍｏＰＵＲＥ ＩＩ Ｐｌａｓｍｉｄ Ｍａｘｉｐｒｅｐキット（Ｚｙｍｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）を使用して増殖させた。組換えタンパク質は、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅ ２９３トランスフェクションキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、精製ＤＮＡで２００×１０６個のこれらの細胞をトランスフェクションすることにより製造した。トランスフェクトされた細胞からの上清を、トランスフェクションの３日後に３００ｇで１０分間遠心分離し、２２μｍのフィルターで濾過することにより採取した。ＲＢＤ－Ｈｉｓ及びＳｐｉｋｅ－Ｈｉｓ含有上清は、ＨｉｓＰｕｒ Ｎｉ－ＮＴＡ樹脂（Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用してバッチ精製した。上清を６ｍＬの樹脂とともに室温（ＲＴ）で１時間インキュベートした。その後、遠心分離（７００ｇで２分間）により樹脂を回収し、洗浄し、最終的に製造者の推奨に従って溶出した。溶出画分をＳＤＳ－ＰＡＧＥ及びウエスタンブロットで分析して、ＲＢＤ－Ｈｉｓ又はＳｐｉｋｅ－Ｈｉｓ精製を確認し、陽性画分をプールした。
インビトロ転写。
ＲＢＤ－６ｈｉｓをｐＣＡＧＧＳ発現プラスミドから、Ｔ７プロモーター及びｍＲＮＡ合成に必要なポリＡ配列を含むＬＦ－ｐＬＭＣＴプラスミドにクローニングした。ＬＦ－ｐＬＭＣＴプラスミドは、Ｋｒｉｓ Ｔｈｉｅｌｅｍａｎｓ博士（Ｆｒｅｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｂｅｌｇｉｕｍ）からの贈り物だった。ＲＢＤ－６ｈｉｓコード配列は、フォワードプライマーとして、ＰＨＵＳＩＯＮポリメラーゼ（ＮＥＢ）及びＴＡＡＡＣＴＴＡＡＧＡＣＡＡＣＣＡＴＧＧＴＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＧＴＧＣ（配列番号５）、リバースプライマーとして、ＧＧＧＧＡＴＣＣｃＧＴＣＴＴＣＣＴＣＧＡＧＴＴＡＴＣＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡ（配列番号６）を使用したＰＣＲによって増幅された。次いで、ＰＣＲ産物をＮｃｏＩ及びＸｈｏＩによってｐＬＭＣＴに挿入した。ＲＢＤをコードするｍＲＮＡは、Ｈｉｓｃｒｉｂｅ Ｔ７（ＮＥＢ）と共転写ＣｌｅａｎＣａｐ ＡＧ（Ｔｒｉｌｉｎｋ）、Ｎ１－メチル－シュードウリジン（Ｔｒｉｌｉｎｋ）、及び５－メチル－シチジン（Ｔｒｉｌｉｎｋ）を使用して、製造者の推奨に従って合成した。インビトロ転写の鋳型は、ＰＨＵＳＩＯＮハイフィデリティＤＮＡポリメラーゼ（ＮＥＢ）とＴＧＴＧＧＡＡＴＴＧＴＧＡＧＣＧＧＡＴＡ（配列番号７）をフォワードプライマーとして及びＣＴＴＣＡＣＴＡＴＴＧＴＣＧＡＣＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡＡ（配列番号８）をリバースプライマーとして使用して、産生されたｐＬＭＣＴ－ＲＢＤ－６ＨｉｓからのＰＣＲアンプリコンであった。
ＣＡＲＴの調整及び特徴付け。
ＣＡＲＴ Ｏ６－ｓｔａｔ－Ｎ６：Ａ９は、オレイルとノネニル置換カーボネートモノマーの１：１の統計的混合物の最初のブロックと、続いてａ－アミノエステルモノマーのブロックからなり、既報のとおり調製された１４、１５。端的には、トルエン（１５０μＬ）中のノネニル（２９ｍｇ、１ｍｍｏｌ）とオレイルカーボネート（４０．５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の混合物に、５０μＬのトルエン中のＴＵ、ＤＢＵ及びＢｎＯＨ（５ｍｏｌ％のＴＵ／ＤＢＵ、０．２ｍｍｏｌのＢｎＯＨ）を添加した。反応物を１．５時間撹拌し、次いで、モルホリノンモノマー（３３．４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を固体として添加し、次いで、さらに２．５時間撹拌した。反応物をＡｃＯＨでクエンチし、次いでＤＣＭ／ＭｅＯＨ（３．５ｋＤａのＭｗ、カットオフ）で一晩透析した。透析後の濃縮により、８５ｍｇの透明な残渣が得られ、乾燥ＤＣＭ（８．５ｍＬ）中のＴＦＡ（０．８５ｍＬ）で一晩脱保護された。脱保護ポリマーの末端基分析は、６個のノネニル及び６個のオレイルカーボネート単位並びに９個のカチオン性アミノエステル単位のブロック長を示した。
ＣＡＲＴオリゴヌクレオチド製剤。
ＣＡＲＴワクチンを調製するために、ＣＡＲＴの完全なプロトン化とオリゴヌクレオチドの完全な脱プロトン化（ＣｐＧとｍＲＮＡヌクレオチドの質量比１：１）を想定して、ＣＡＲＴは、ＣｐＧとＲＢＤ ｍＲＮＡの混合物を１０：１のカチオン：アニオン比で製剤化した。製剤は、試薬を酸性ＰＢＳ（０．１ＭのＨＣｌの添加により５．５に調整されたｐＨ）に２０秒間、総体積５０～１００μＬで混合し、続いて卓上遠心分離機で短時間スピンさせることによって調製した。製剤は、インビトロ又はインビボ実験のために５分以内に使用された。
マウスのワクチン接種。
雌のＢＡＬＢ／ｃマウス（８～１２週齢）をＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入し、Ｓｔａｎｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍｅｄｉｃａｌ ＣｅｎｔｅｒのＬａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｆａｃｉｌｉｔｙに収容した。全ての実験は、Ｓｔａｎｆｏｒｄ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｖｅ Ｐａｎｅｌ ｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅによって承認され、Ｓｔａｎｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎｉｍａｌ Ｆａｃｉｌｉｔｙ及びＮＩＨガイドラインに従って実施された。ＲＢＤ－ｍＲＮＡ及びＣｐＧは、上記のように、ｐＨ５．５のＰＢＳ中のＣＡＲＴポリマーと製剤化した。マウスに、２．６μＬのＣＡＲＴ（５ｍＭ）と製剤化された３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡ又は２．６μＬのＣＡＲＴ（５ｍＭ）と製剤化された３μｇのＣｐＧ又は５．２μＬのＣＡＲＴ（５ｍＭ）と製剤化された３μｇのＲＢＤ－ｍＲＮＡと３μｇのＣｐＧを注射した。マウスをＩＶ、ＩＭ、又はＳＣ注射によってワクチン接種し、実験に記載されるようにブーストした。ＣＡＲＴは、指示された濃度のｍＲＮＡで、５０～１００μＬの総体積で製剤化される。ＩＶ投与の場合、１００μＬの製剤化されたＣＡＲＴを尾静脈注射により投与した。ＩＭ注射の場合、５０μＬの製剤化されたＣＡＲＴを大腿筋に注射した。ＳＣ注射は、マウスの尾部近くの背中に投与した。指示された時点で、マウスを採血し、血清を採取した。
ＨｅＬａ及び２９３Ｆトランスフェクション。
ＨｅＬａ細胞及び２９３Ｆ細胞を、Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ培地（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中の１２ウェルプレートに、１ウェルあたり１０６個の細胞でプレーティングした。２μｇのＲＢＤ－ｈｉｓ ｍＲＮＡ又はＧＦＰ ｍＲＮＡ（Ｔｒｉｌｉｎｋ）を６．６μＬのＰＢＳ ｐＨ５．５に、１．３７μＬの５ｍＭのＣＡＲＴと製剤化し、細胞に添加した。トランスフェクションの４時間後、Ｏｐｔｉ－ＭＥＭ培地を１０％のＦＣＳ及びペニシリン－ストレプトマイシン１０００Ｕ／ｍＬを含むＲＰＭＩ培地に交換した。トランスフェクションの１２時間後、ＲＢＤ及びＧＦＰ発現を、それぞれウエスタンブロット及び蛍光顕微鏡法によってモニターした。
ウエスタンブロット。
ＨｅＬａ又は２９３Ｆトランスフェクト細胞由来の培地の１５μＬを、４×試料充填緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）と混合し、４～１２％のＮｕＰＡＧＥゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に充填した。電気泳動は、ＭＥＳ緩衝液中で２００Ｖで３５分間行った。タンパク質をｉＢＬＯＴシステム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用してセルロース膜に転写した。膜をＰｏｎｃｅａｕ ｒｅｄで染色して、タンパク質転写を確認し、次いで、５％の脱脂粉乳を含む０．１％のＴｗｅｅｎ（登録商標）２０（ＴＢＳＴ）を含むＴＢＳ緩衝液で膜を１時間ブロッキングした。膜をＴＢＳＴ中で３回洗浄し、５％の脱脂粉乳及び１：１０００のマウス抗Ｈｉｓ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）を含むＴＢＳＴ中で一晩インキュベートした。ＴＢＳＴ中で３回洗浄した後、膜を５％の脱脂粉乳を含むＴＢＳＴ中の１：１００００抗マウスＩｇ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）で１時間インキュベートした。ＴＢＳＴ中で３回洗浄した後、ＥＣプライムウエスタンブロッティングシステム（Ｓｉｇｍａ）を使用してブロットを明らかにした。膜は、ＢｉｏＲａｄのＣｈｅｍｉｄｏｃ ＭＰイメージングシステムを使用してイメージングされた。
血清調製。
ヒト試料については、採血前に対象からインフォームドコンセントが得られた。血液をエッペンドルフ管に採取し、室温で６０分間凝固させた。１０００ｇで１０分間遠心分離を行った後、上清を回収した。血清を５６℃で３０分間熱失活させた。
ＥＬＩＳＡ。
Ｎｕｎｃ－Ｉｍｍｕｎｏ ＭｉｃｒｏＷｅｌｌ ９６ウェルＥＬＩＳＡプレート（ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＳｉｇｍ）を、ｐＨ９の炭酸緩衝液中に、２μｇ／ｍＬのＲＢＤ－Ｈｉｓ又はＳｐｉｋｅ－Ｈｉｓタンパク質を１ウェルあたり５０μＬで一晩コーティングした。ＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液（０．１％のＴｗｅｅｎ（登録商標）２０を含むＰＢＳ）で３回洗浄した後、０．１％のＴｗｅｅｎ（登録商標）２０（ＴＢＳＴ）を含むＴＢＳ緩衝液に希釈された１００μＬの５％の脱脂粉乳を使用して、室温で１時間、プレートをブロッキングした。血清、ＢＡＬ及び抗体希釈液を、１％の脱脂粉乳を含むＴＢＳＴで調製した。ブロッキング溶液を除去し、各段階希釈液の５０μＬを室温で１時間プレートに添加した。プレートを３回洗浄し、ＨＲＰコンジュゲートされた抗ヒトＩｇ（１：５０００、ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ）、抗マウスＩｇ（１：５０００、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗マウスＩｇＧ２ａ（１：５０００、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、抗マウスＩｇＧ２ｂ（１：５０００、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、抗マウスＩｇＧ１（１：５０００、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、抗マウスＩｇＧ３（１：５０００、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、抗マウスＩｇＡ（１：５０００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）又は抗マウスＩｇＭ（１：５０００、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）とインキュベートした。プレートを３回洗浄し、１００μＬのＴＭＢ ＥＬＩＳＡ基質（Ａｂｃａｍ）を各ウェルに添加した。ＥＬＩＳＡを１０分間発色させた後、ＴＭＢ基質用停止溶液（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の５０μＬを各ウェルに添加することによって反応を停止した。一部のアッセイでは、既知の抗体濃度のヒト抗ＲＢＤ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎｅ）を標準として使用した。４５０ｎｍでの光学密度（ＯＤ４５０）は、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｐａｒａｄｉｇｍマイクロプレートリーダー（分子デバイス）を使用して測定した。
ＲＢＤ－ＡＣＥ２相互作用遮断アッセイＥＬＩＳＡ。
ＲＢＤ－ＡＣＥ２相互作用遮断アッセイは、Ｇｅｎｅｓｃｒｉｐｔの市販キット、自社開発のＥＬＩＳＡ及びフローサイトメトリーの３つの方法を使用して評価された。
市販のキットに関して、製造者の使用説明書に従って、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２サロゲートウイルス中和テスト（ｓＶＮＴ）キット（Ｇｅｎｅｓｃｒｉｐｔ）を使用した。端的には、試料及び対照を希釈緩衝液で指示された比で希釈し、ＨＲＰ－ＲＢＤと１：１の比で、３７℃で３０分間プレインキュベートした。次いで、試料をｈＡＣＥ２でプレコートしたウェル中の捕捉プレートに添加した。３７℃で１５時間インキュベートした後、ウェルを洗浄緩衝液で４回洗浄した。ＴＭＢ溶液を添加し、暗所で室温で１５時間インキュベートした。１５時間後、停止溶液をウェルに添加し、速やかに分析した。４５０ｎｍでの光学密度（ＯＤ４５０）は、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｐａｒａｄｉｇｍマイクロプレートリーダー（分子デバイス）を使用して測定した。
自社開発のＥＬＩＳＡでは、Ｎｕｎｃ－Ｉｍｍｕｎｏマイクロウェル９６ウェルＥＬＩＳＡプレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を、炭酸緩衝液ｐＨ９中に、２μｇ／ｍＬのＲＢＤ－Ｈｉｓ又はＳｐｉｋｅ－Ｈｉｓタンパク質を１ウェルあたり５０μＬで一晩コーティングした。ＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液（０．１％のＴｗｅｅｎ（登録商標）２０を含むＰＢＳ）中で３回洗浄した後、０．１％のＴｗｅｅｎ（登録商標）２０（ＴＢＳＴ）を含むＴＢＳ緩衝液に希釈された１００μＬの５％の脱脂粉乳を使用して、室温で１時間、プレートをブロッキングした。血清、ＢＡＬ及び抗体希釈液を、１％の脱脂粉乳を含むＴＢＳＴ中で調製した。ブロッキング溶液を除去し、各段階希釈液の５０μＬを室温で１時間プレートに添加した。プレートを３回洗浄し、５０μＬの２回希釈したＡＣＥ２－ｈＩｇＡ上清を各ウェルに１時間加えた。３回の洗浄後、プレートをＨＲＰコンジュゲートされた抗ヒトＩｇＡ（１：１０００、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と１％の脱脂粉乳を有するＴＢＳＴ中で１時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、１００μＬのＴＭＢ ＥＬＩＳＡ基質（Ａｂｃａｍ）を各ウェルに添加した。ＥＬＩＳＡを１０分間発色させた後、ＴＭＢ基質用停止溶液（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の５０μＬを各ウェルに添加することによって反応を停止した。一部のアッセイでは、既知の抗体濃度のヒト抗ＲＢＤ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を標準として使用した。４５０ｎｍでの光学密度（ＯＤ４５０）は、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｐａｒａｄｉｇｍマイクロプレートリーダー（分子デバイス）を使用して測定した。
フローサイトメトリーアッセイでは、ＲＢＤ－Ｈｉｓ２μｇ／ｍＬを血清と１時間インキュベートした。次に、４×１０５個のＡＣＥ２発現ＨＥＫ２９３Ｔ細胞をＲＢＤ－Ｈｉｓ／血清ミックスに添加し、室温で３０分間インキュベートした。次いで、細胞を１％のＢＳＡを含むＰＢＳ中で２回洗浄した。次に、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８コンジュゲートされた抗Ｈｉｓ抗体（クローンＪ０９９Ｂ１、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）を使用してＲＢＤを検出した。細胞をフローサイトメトリー（ＢＤ）により分析した。
偽ウイルスアッセイ。
Ｓａｒｓ－Ｃｏｖ－２スパイクタンパク質及びルシフェラーゼを発現する偽型レンチウイルスは、前述のようにＨＥＫ２９３Ｔ細胞で産生された４６、４７。トランスフェクションの１日前に、６×１０６個のＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、１０％のＦＣＳ、２ｍＭのＬ－グルタミン、ストレプトマイシン及びペニシリンを含むＲＰＭＩの１０ｃｍ培養プレートに播種した。次に、ＴｒａｎｓＩＴ（Ｍｉｒｕｓ）を使用して、１０μｇのレンチウイルスパッケージングベクター（ｐＨＡＧＥ＿Ｌｕｃ２＿ＩＲＥＳ＿ＺｓＧｒｅｅｎ）、３．４μｇのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク及びレンチウイルスヘルパープラスミド（２．２μｇのＨＤＭ－Ｈｇｐｍ２、２．２μｇのＨＤＭ－Ｔａｔ１ｂ及び２．２μｇのｐＲＣ－ＣＭＶ＿Ｒｅｖ１ｂ）を細胞にトランスフェクトした。スパイクベクターには、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＷｕｈａｎ－Ｈｕ－１株（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＣ＿０４５５１２）からの完全長野生型スパイク配列が含まれてした。これらの５つのプラスミドは、Ｊｅｓｓｅ Ｂｌｏｏｍ博士（Ｆｒｅｄ Ｈｕｔｃｈ Ｓｅａｔｔｌｅ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）から親切に提供された。トランスフェクションの７２時間後、ウイルス含有上清を採取し、３００ｇで５分間遠心分離し、０．４５μｍのフィルターで濾過し、分注し、－８０℃で凍結した。
ウイルス中和アッセイでは、ＡＣＥ２発現ＨＥＫ２９３Ｔ４７細胞を、感染の１日前に１２，５００細胞／ウェルでポリＬ－リシンコーティングされた白壁の透明底９６ウェルプレートに播種した。マウス血清を２０００ｇで１５分間遠心分離し、５６℃で３０分間熱失活させ、Ｄ１０培地（１０％のＦＣＳを補充したＤＭＥＭ培地）で希釈した。ウイルスをＤ１０培地で希釈し、ポリブレン（５μｇ／ｍＬ）を補充した後、血清希釈液を添加した。ウイルス／血清混合物を３７℃で１時間プレインキュベートした後、細胞に加え、３７℃で約４８時間インキュベートした。ＢｒｉｔｅＬｉｔｅアッセイ読み出し溶液（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を添加することによって細胞を溶解し、発光値をＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｐａｒａｄｉｇｍマイクロプレートリーダー（分子デバイス）で測定した。陽性対照として、中和ヒト抗ＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２ ＩｇＧ１抗体を使用した（Ａｃｒｏ）。
気管支肺胞洗浄。
マウスを屠殺し、前述の手順に従って１ｍＬのＰＢＳで肺を２回膨らませた４８。洗浄画分をプールし、１２００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清を回収し、ＥＬＩＳＡ法により抗ＲＢＤ抗体をアッセイした。
肺におけるＴ細胞応答アッセイ。
マウスの肺は、ワクチン接種後の指示された日に採取された。肺単一細胞懸濁液を調製するために、肺を小片に切断し、コラゲナーゼＤ（２ｍｇ／ｍＬ、Ｓｉｇｍａ）及びＤＮａｓｅ（５０μｇ／ｍＬ、Ｓｉｇｍａ）を含むＲＰＭＩ中で３７℃で３０分間インキュベートした。次いで、消化ミックスを５倍に希釈し、肺調製物を７０μｍの細胞ストレーナーで処理した。脾臓又は肺単一細胞懸濁液中に存在する赤血球を、ＡＣＫ緩衝液（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して溶解した。単一細胞懸濁液は、Ｔ細胞応答アッセイのためのさらなる処理まで氷上に保持された。細胞を９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、Ｖ底）で１×１０６細胞／ウェルで培養し、抗マウスＣＤ２８抗体［０．５ｇ／ｍＬ］（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）の存在下で、５μｇ／ｍＬのＲＢＤ－Ｈｉｓ又はｈＣＤ８１－Ｈｉｓ又は培地単独（ＲＰＭＩ＋５％のＦＣＳ）で４８時間刺激した。陽性対照として、細胞を抗マウスＣＤ３［０．０５ｇ／ｍＬ］（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）で刺激した。細胞内染色のために、細胞を染色前にＧｏｌｇｉＳｔｏｐ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で５時間処理した。刺激後、細胞を洗浄し、ＰＢＳ中のＡｑｕａ生／死生存率色素（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）で染色し、さらに２回洗浄し、モノクローナル抗体とＦｃブロック：ＣＤ１６／３２、ＣＤ４ ＢＶ６０５ ＲＭ４－５、ＣＤ８ ＦＩＴＣ ５３－６．７、ＣＤ４４ ＡＰＣ ＩＭ７、ＣＤ６９ ＰＥ－Ｃｙ７ Ｈ１．２Ｆ３、ＣＤ１３４ ＢＶ７８６ ＯＸ－８６、ＣＤ１３７ ＰＥ １ＡＨ２及びＣＤ４５Ｒ／Ｂ２２０ Ｐｅｒ－ＣＰ ５．５ ＲＡ３－６Ｂ２（全てＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）のカクテルで染色した。細胞を固定し、製造者のプロトコール（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に従って透過処理し、ａＴＮＦα ＢＶ６５０ ＭＰ６－ＸＴ２２（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で染色した。細胞を洗浄し、２％のホルムアルデヒドで固定し、ＢＤ ＬＳＲ ＩＩで取得し、ＣｙｔｏｂａｎｋＶ７．３．０を使用して分析した。
脾臓におけるＴ細胞応答アッセイ。
ワクチン接種後Ｄ１０５にマウスの脾臓を採取し、次いで、７０ｍの細胞ストレーナー（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で処理することによって、単一細胞懸濁液を調製した。次に、細胞を管あたり６×１０５個の細胞のＦＡＣＳ管でインキュベートし、２ｇ／ｍＬのＲＢＤペプチドミックス［ＰｅｐＭｉｘ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｓ－ＲＢＤ）タンパク質ＩＤ：Ｐ０ＤＴＣ２ ＰＭ－ＷＣＰＶ－Ｓ－ＲＢＤ－１、ＪＰＴ］又は培地単独で１８時間刺激した。陽性対照として、細胞を抗マウスＣＤ３［０．０５ｇ／ｍＬ］（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）及び抗マウスＣＤ２８抗体［０．５ｇ／ｍＬ］（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）で刺激した。ＧｏｌｇｉＳｔｏｐ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）をアッセイの最後の１０時間にわたって添加した。刺激後、細胞を洗浄し、ＰＢＳ中のＡｑｕａ生／死生存率色素（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）で染色し、さらに２回洗浄し、モノクローナル抗体とＦｃブロック：ＣＤ１６／３２、ＣＤ４ Ａｘ７００ ＲＭ４－５、ＣＤ８ ＡＰＣ－Ｈ７ ５３－６．７及びＣＤ４４ ＡＰＣ ＩＭ７（全てＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とのカクテルで染色した。細胞を固定し、製造者のプロトコール（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に従って透過処理し、ＩＦＮγ ＰＥ－Ｃｙ７ ＸＭＧ１．２、ＴＮＦα ＢＶ６５０ ＭＰ６－ＸＴ２２及びＩＬ－４ ＢＶ７８６ １１Ｂ１１（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で細胞内サイトカインについて染色した。細胞を洗浄し、２％のホルムアルデヒドで固定し、Ｃｙｔｅｋ Ａｕｒｏｒａ（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｌｉｇｈｔｓ）で取得し、ＣｙｔｏｂａｎｋＶ７．３．０を使用して分析した。
ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔ。
アッセイは、製造者の使用説明書に従って実施した（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ、マウスＩＦＮγキットｃａｔ．ＥＬ４８５）。端的には、ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔ分析は、ＭＡＣＳソート（製造者の指示に従ってＭｉｌｔｅｎｙｉＣＤ４＋又はＣＤ８＋マイクロビーズ）によって、ＣＤ４＋が枯渇しＣＤ８＋Ｔ細胞に富化された、又はＣＤ８＋が枯渇しＣＤ４＋Ｔ細胞が富化された、ＰＢＭＣを使用して、エクスビボで（増殖のためのさらなるインビトロ培養なしで）実施された。試験は３連で、陽性対照［抗ＣＤ３モノクローナル抗体（０．０５ｇ／ｍＬ；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）］で実施された。ＩＦＮγ特異的抗体でプレコートされたＰＶＤＦ裏打ちマイクロプレート（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ、マウスＩＦＮγキットｃａｔ．ＥＬ４８５）をＰＢＳで洗浄し、５％のＦＣＳを含むＲＰＭＩ培地（Ｃｏｒｎｉｎｇ）で室温で２０分間ブロッキングした。ウェルあたり、５×１０５個のエフェクター細胞を２ｇ／ｍＬのＲＢＤペプチドミックス［ＰｅｐＭｉｘ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｓ－ＲＢＤ）タンパク質ＩＤ：Ｐ０ＤＴＣ２ ＰＭ－ＷＣＰＶ－Ｓ－ＲＢＤ－１、ＪＰＴ］で１６時間刺激した。刺激後、ウェルを洗浄し、ビオチン化抗ＩＦＮγ抗体（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ、マウスＩＦＮγキットｃａｔ．ＥＬ４８５）を４℃で一晩インキュベートした。翌日、ウェルを洗浄し、ストレプトアビジン－ＡＰ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ、マウスＩＦＮγキットｃａｔ．ＥＬ４８５）で室温で２時間インキュベートした。洗浄後、ウェルを５－ブロモ－４－クロロ－３’－インドリルホスフェート（ＢＣＩＰ）／ニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）基質（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ、マウスＩＦＮγキットｃａｔ ＥＬ４８５）でインキュベートした。プレートをスキャンし、ＩｍｍｕｎｏＳｐｏｔマイクロアナライザーを使用して分析した。
インビボ生物発光イメージング。
生物発光評価のために、マウスは注射及びイメージング手順中に、イソフルランガス（酸素中２％のイソフルラン、１Ｌ／分）で麻酔された。Ｄ－ルシフェリン（Ｂｉｏｓｙｎｔｈ ＡＧ）の腹腔内注射は、１５０ｍｇ／ｋｇの用量で行われ、Ｆｕｃ酵素の飽和基質濃度を提供した（ルシフェリンは血液脳関門を通過する。）。マウスを、冷却された電荷結合素子カメラを搭載したインビボ光学イメージングシステム（ＡＭＩ ＨＴ； Ｓｐｅｃｔｒａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ｉｍａｇｉｎｇ）使用して遮光チャンバーでイメージングした。画像記録中、マウスはノーズコーンを介して送達されたイソフルランを吸入し、カメラシステムの暗箱内で体温を３７℃に維持した。生物発光画像は、ルシフェリン投与後１０～２０分の間に取得された。マウスは通常、イメージングから２分以内に麻酔から回復した。
白血球数。
５Ｌの血液を採取し、４５Ｌの３％の酢酸とメチレンブルー（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ）と混合し、血球計数器を使用して核をカウントした。
サイトカイン分析。
ＩＰ１０、ＩＦＮａ、ＴＮＦａ及びＩＬ６は、製造者のプロトコールに従って、ＢｉｏｌｅｇｅｎｄからのＬＥＧＥＮＤｐｌｅｘビーズベースのイムノアッセイを使用して、血清試料で測定された。アッセイはＢＤ ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ装置で分析した。
全血球計算。
全血球計算（ＣＢＣ）分析は、スタンフォードの動物診断ラボによって実施された。Ｓｙｓｍｅｘ ＸＮ－１０００Ｖ分析装置システムで自動血液検査を実施した。血液塗抹標本は全てのＣＢＣ試料について作成され、臨床検査技師によってレビューされた。手動鑑別は、種及び自動分析によって示されるように実行された。
肝酵素分析。
肝酵素は、スタンフォードの動物診断ラボによって分析された。化学分析は、Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ ＥＸＬ２００／ＬＯＣＩ分析装置で実行された。臨床検査技師は、示されているように希釈及び反復検査を含む全ての検査を実施し、全てのデータをレビューした。
安全に関する記載。
全マウス実験で、予期せぬ又は異常に高い安全上の問題は発生しなかった。
Figure 2023535730000208
Figure 2023535730000209
Figure 2023535730000210
Figure 2023535730000211
Figure 2023535730000212
Figure 2023535730000213
非公式の配列表
配列番号１（ＯＤＮ １８２６）：ｔｃｃａｔｇａｃｇｔｔｃｃｔｇａｃｇｔｔ
配列番号２（ＯＤＮ ＳＤ－１０１）：ｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｃｇｔｔｃｇａａｔ
配列番号３（スパイクタンパク質のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤをコードするｍＲＮＡ）：
Figure 2023535730000214
配列番号４（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質をコードするｍＲＮＡ）：
Figure 2023535730000215
Figure 2023535730000216
Figure 2023535730000217
配列番号５（ＢＤ－６ｈｉｓコード配列のフォワードプライマー）
ＴＡＡＡＣＴＴＡＡＧＡＣＡＡＣＣＡＴＧＧＴＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＧＴＧＣ
配列番号６（ＢＤ－６ｈｉｓコード配列のリバースプライマー）
ＧＧＧＧＡＴＣＣｃＧＴＣＴＴＣＣＴＣＧＡＧＴＴＡＴＣＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡ
配列番号７（ｐＬＭＣＴ－ＲＢＤ－６Ｈｉｓ由来のアンプリコンについてのフォワードプライマー）
ＴＧＴＧＧＡＡＴＴＧＴＧＡＧＣＧＧＡＴＡ
配列番号８（ｐＬＭＣＴ－ＲＢＤ－６Ｈｉｓ由来のアンプリコンについてのリバースプライマー）
Figure 2023535730000218

Claims (45)

  1. ウイルスタンパク質をコードする配列を含むリボ核酸、核酸アジュバント、及びカチオン性両親媒性ポリマーを含む細胞透過性複合体。
  2. リボ核酸が、カチオン性両親媒性ポリマーに非共有結合されている、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  3. ウイルスタンパク質が、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）タンパク質、ヒトメタ肺炎ウイルス（ｈＭＰＶ）タンパク質、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ３）タンパク質、インフルエンザＨ１０Ｎ８ウイルスタンパク質、インフルエンザＨ７Ｎ９ウイルスタンパク質、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）タンパク質、ジカウイルスタンパク質、チクングニア熱ウイルスタンパク質又は重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルス（ＣｏＶ）タンパク質である、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  4. ウイルスタンパク質が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１タンパク質又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タンパク質である、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  5. ウイルスタンパク質が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質又はその断片である、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  6. ウイルスタンパク質が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質の可溶性受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）である、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  7. リボ核酸が、配列番号３の配列を含む、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  8. 核酸アジュバントがＤＮＡアジュバントである、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  9. 核酸アジュバントがトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  10. 核酸アジュバントが、１つ以上の非メチル化ＣｐＧオリゴヌクレオチドを含む、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  11. 核酸アジュバントがＴＬＲ－９アゴニストである、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  12. 核酸アジュバントが、配列番号１又は配列番号２の配列を有する、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  13. カチオン性両親媒性ポリマーが、ｐＨ感受性崩壊ドメイン及び親油性ポリマードメインを含む、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  14. カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
    Ｒ１Ａ－［Ｌ１－［（ＬＰ１）ｚ１－（ＬＰ２）ｚ３－（ＩＭ）ｚ２］ｚ４－Ｌ２－Ｒ２Ａ］ｚ５ （Ｉ）
    ［式中、
    Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    Ｒ２Ａは、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
    ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
    ＩＭは、前記ｐＨ感受性崩壊ドメインであり、
    ｚ５は、１～１０の整数であり、
    ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
    ｚ４は、１～１００の整数であり、
    ｚ２は、２～１００の整数である。］
    を有する、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  15. 親油性ポリマードメインが、式：
    Figure 2023535730000219
     ［式中、
    ｎ２は、１～１００の整数であり
    Ｒ２０は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
    を有する、請求項１４に記載の細胞透過性複合体。
  16. ＬＰ１が、式：
    Figure 2023535730000220
     ［式中、
    ｎ２１は、１～１００の整数であり、
    Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
    を有する、請求項１４に記載の細胞透過性複合体。
  17. ｎ２１が５であり、Ｒ２０１が非置換のＣ１８アルケニルである、請求項１６に記載の細胞透過性複合体。
  18. 非置換のＣ１８アルケニルがオレイルである、請求項１７に記載の細胞透過性複合体。
  19. ＬＰ２が、式：
    Figure 2023535730000221
     ［式中、
    ｎ２２は、１～１００の整数であり、
    Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
    を有する、請求項１４に記載の細胞透過性複合体。
  20. ｎ２２が５であり、Ｒ２０２が非置換のＣ９アルケニルである、請求項１９に記載の細胞透過性複合体。
  21. 非置換のＣ９アルケニルがノネニルである、請求項２０に記載の細胞透過性複合体。
  22. カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
    Figure 2023535730000222
     ［式中、
    ｎ２１は５であり、Ｒ２０１はオレイルであり、ｎ２２は５であり、Ｒ２０２はノネニルであり、ｎは７である。］
    を有する、請求項１４に記載の細胞透過性複合体。
  23. カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
    Figure 2023535730000223
     ［式中、
    Ｒ１Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    Ｒ２Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、独立に－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、独立に－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    Ｌ１及びＬ２は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレンであり、
    ＬＰ１及びＬＰ２は、独立に、親油性ポリマードメインであり、
    Ｘ１は、結合、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－、－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－、－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－又は－Ｏ－Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）－Ｃ（Ｒ７）（Ｒ８）－であり、
    Ｘ２は、－Ｏ－又は－Ｓ－であり、
    Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    Ｌ４は、独立に、結合、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、置換若しくは非置換のアルキレン、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキレンであり、
    Ｒ４０、Ｒ４１及びＲ４２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のヘテロアルキルであり、
    Ｚは、－Ｓ－、－Ｓ＋Ｒ１３－、－ＮＲ１３－又は－Ｎ＋（Ｒ１３）（Ｈ）－であり、
    Ｒ１３は、水素、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、－ＣＮ、－ＯＨ、＝Ｏ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、ＳＯ２ＮＨ２、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    ｎ１は、０～５０の整数であり、
    ｚ１及びｚ３は、独立に、０～１００の整数であり、ｚ１又はｚ３の少なくとも１つは０でなく、
    ｚ２は、２～１００の整数であり、
    ｚ４は、１～１００の整数であり、
    ｚ５は、１～１０の整数である。］
    を有する、請求項１に記載の細胞透過性複合体。
  24. ＬＰ１が、式：
    Figure 2023535730000224
     ［式中、
    ｎ２１は、１～１００の整数であり、
    Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
    を有する、請求項２３に記載の細胞透過性複合体。
  25. ｎ２１が１０～４０である、請求項２４に記載の細胞透過性複合体。
  26. Ｒ２０１が非置換のＣ１２アルキルである、請求項２４に記載の細胞透過性複合体。
  27. ＬＰ２が、式：
    Figure 2023535730000225
     ［式中、
    ｎ２２は、１～１００の整数であり、
    Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
    を有する、請求項２４に記載の細胞透過性複合体。
  28. ｎ２２が１０～３５である、請求項２７に記載の細胞透過性複合体。
  29. Ｒ２０２が非置換のＣ１２アルケニルである、請求項２７に記載の細胞透過性複合体。
  30. カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
    Figure 2023535730000226
     ［式中、
    ｎ２１は、１０～２０の整数であり、
    Ｒ２０１は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    ｚ２は、独立に、３～１０の整数である。］
    を有する、請求項２３に記載の細胞透過性複合体。
  31. ｎ２１が１４であり、Ｒ２０１がドデシルであり、ｚ２が８である、請求項３０に記載の細胞透過性複合体。
  32. カチオン性両親媒性ポリマーが、式：
    Figure 2023535730000227
     ［式中、
    ｎ２２は、１０～３５の整数であり、
    Ｒ２０２は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    ｚ２は、独立に、５～２０の整数である。］
    を有する、請求項３１に記載の細胞透過性複合体。
  33. ｎ２２が１４であり、Ｒ２０２がドデシルであり、ｚ２が７である、請求項３２に記載の細胞透過性複合体。
  34. 前記カチオン性両親媒性ポリマーと異なる第２のカチオン性両親媒性ポリマーをさらに含む、請求項２３に記載の細胞透過性複合体。
  35. 第２のカチオン性両親媒性ポリマーが、式：
    Figure 2023535730000228
     ［式中、
    ｎ２３は、１～１００の整数であり、
    ｚ６は、５～１５の整数であり、
    Ｒ３Ａは、独立に、水素、ハロゲン、－ＣＣｌ３、－ＣＢｒ３、－ＣＦ３、－ＣＩ３、ＣＨＣｌ２、－ＣＨＢｒ２、－ＣＨＦ２、－ＣＨＩ２、－ＣＨ２Ｃｌ、－ＣＨ２Ｂｒ、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨ２Ｉ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ２、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨ２、－ＮＯ２、－ＳＨ、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ４Ｈ、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＮＨＮＨ２、－ＯＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、－ＮＨＳＯ２Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、－ＮＨＯＨ、－ＯＣＣｌ３、－ＯＣＦ３、－ＯＣＢｒ３、－ＯＣＩ３、－ＯＣＨＣｌ２、－ＯＣＨＢｒ２、－ＯＣＨＩ２、－ＯＣＨＦ２、－ＯＣＨ２Ｃｌ、－ＯＣＨ２Ｂｒ、－ＯＣＨ２Ｉ、－ＯＣＨ２Ｆ、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールであり、
    Ｒ２０３は、独立に、水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。］
    を有する、請求項３４に記載の細胞透過性複合体。
  36. ｎ２３が１３であり、ｚ６が１１であり、Ｒ２０３がドデシルである、請求項３５に記載の細胞透過性複合体。
  37. 請求項１に記載の細胞透過性複合体を含むワクチン組成物。
  38. 請求項１に記載の細胞透過性複合体の治療有効量、及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
  39. ウイルス性疾患の処置又は防止を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置又は防止する方法であって、請求項１に記載の細胞透過性複合体の治療又は予防有効量を対象に投与することを含む方法。
  40. ウイルス性疾患の処置を必要とする対象におけるウイルス性疾患を処置する方法であって、請求項１に記載の細胞透過性複合体の治療有効量及び薬学的担体を対象に投与し、それによって対象におけるウイルス性疾患を処置することを含む方法。
  41. ウイルス性疾患に罹患し得る宿主を免疫化するための方法であって、請求項１に記載の細胞透過性複合体を、ウイルスタンパク質又はその機能的断片に対する抗体が生成されるような条件下で宿主に投与することを含む方法。
  42. 抗体がＩｇＧ２抗体である、請求項４１に記載の方法。
  43. ウイルス性疾患がＳＡＲＳである、請求項４０に記載の方法。
  44. ウイルス性疾患がＣＯＶＩＤ－１９である、請求項４０に記載の方法。
  45. ウイルス性疾患がＭＥＲＳである、請求項４０に記載の方法。
JP2023504555A 2020-07-24 2021-07-26 Ｃｏｖｉｄ－１９の３成分ワクチン Pending JP2023535730A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063056465P 2020-07-24 2020-07-24
US63/056,465 2020-07-24
PCT/US2021/043213 WO2022020810A1 (en) 2020-07-24 2021-07-26 A three component vaccine for covid-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2023535730A true JP2023535730A (ja) 2023-08-21
JPWO2022020810A5 JPWO2022020810A5 (ja) 2024-05-27

Family

ID=79728449

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2023504555A Pending JP2023535730A (ja) 2020-07-24 2021-07-26 Ｃｏｖｉｄ－１９の３成分ワクチン

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20240148858A1 (ja)
EP (1) EP4185331A1 (ja)
JP (1) JP2023535730A (ja)
CN (1) CN116724118A (ja)
AU (1) AU2021310952A1 (ja)
CA (1) CA3189834A1 (ja)
WO (1) WO2022020810A1 (ja)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023172885A1 (en) * 2022-03-09 2023-09-14 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Branched lipid charge-altering releasable transporters for nucleic acid delivery
WO2024015047A1 (en) * 2022-07-11 2024-01-18 The Uab Research Foundation Treatment methods for viral infections

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999052549A1 (en) * 1998-04-09 1999-10-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Adjuvant compositions
WO2018022930A1 (en) * 2016-07-27 2018-02-01 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Immolative cell-penetrating complexes for nucleic acid delivery
WO2020097614A2 (en) * 2018-11-09 2020-05-14 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Hybrid immolative cell-penetrating complexes for nucleic acid delivery
KR20210134651A (ko) * 2019-02-01 2021-11-10 더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티 폐로의 핵산 전달을 위한 희생 세포-침투 복합체

Also Published As

Publication number Publication date
EP4185331A1 (en) 2023-05-31
WO2022020810A1 (en) 2022-01-27
CA3189834A1 (en) 2022-01-27
CN116724118A (zh) 2023-09-08
AU2021310952A1 (en) 2023-02-23
US20240148858A1 (en) 2024-05-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7429280B2 (ja) 核酸送達用の崩壊性細胞透過性複合体
ES2907486T3 (es) Métodos y composiciones para reducir metástasis
US11931416B2 (en) Immolative cell-penetrating complexes for nucleic acid delivery to the lung
JP2023535730A (ja) Ｃｏｖｉｄ－１９の３成分ワクチン
WO2018079740A1 (ja) 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物
US20220088163A1 (en) Hybrid immolative cell-penetrating complexes for nucleic acid delivery
WO2022187631A1 (en) Micelle releasing thermosensitive hydrogels as a therapeutic delivery system
WO2023172885A1 (en) Branched lipid charge-altering releasable transporters for nucleic acid delivery
WO2023230201A1 (en) Small molecule conjugated charge-altering releasable transporters for nucleic acid delivery
CN118079011A (zh) 用于将核酸递送至肺部的分解性细胞穿透复合物
CN118076631A (en) Modeling antibody responses to antigens using antibodies

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20240517

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20240517