JP2022544528A - 標的物質を含む液体を精製するための装置 - Google Patents

Abstract

標的物質を含む液体を精製するための装置であって、第２のおよび任意の後続ユニットの供給流が下流のユニットからの生成物ストリームを含むように直列に配置された少なくとも２つのユニットを含み、各ユニットが、切換式バイパスアセンブリを含む特定の構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む、装置。該ユニットおよび流路アセンブリもまた、特許請求される。該ユニットは、それらが含むデバイスを除いて本質的に同じであり得、単純性、費用および操作の容易性、オペレーターエラーのリスク低減、保守の容易化、ならびにスペアパーツの在庫の低減に関して利点につながる。【選択図】図１

Description

本発明は、標的物質を含む液体、特に生体分子、例えば組換えポリペプチドを含む液体を処理するための、ユニット、流路アセンブリおよび装置に関する。

多くの生体分子、特に組換えポリペプチド、およびプラスミド（ｐＤＮＡ）などの核酸は、特に治療用途のために大きな注目を集めている。このような生体分子は、一般に、所望の生体分子を発現するように遺伝子操作された組換え宿主細胞を培養することによって生成される。その後、生体分子は、典型的には、いくつかのユニット操作を含む方法によって、培地から回収される。

標的物質を含む溶液を処理するための装置が、当技術分野で公知である。しかしながら、そのような化合物の商業製造における使用のための装置は、通常、非常にかさばり、広い床面積とインフラストラクチャを必要とする。さらに、装置のいくつかの共通性がユニット操作のいくつかで達成できる場合もあるが、ウイルスの不活化および／または限外濾過などの特定のユニット操作のための装置の設計は、例えばクロマトグラフィー精製の設計とは顕著に異なっている。これは、２セット以上の装置を収容するためにより多くのスペースが必要であるか、または複数のステージについての装置の相互運用性と制御が非常に複雑であることを意味する。さらに、オペレーターは、使用する様々なタイプの装置についてトレーニングが必要とされる。したがって、簡素化された、広く適用可能な装置が望ましいであろう。共通の流路を使用して複数の処理ステップが行われることを可能にする装置を同定することもまた、望ましいであろう。

本発明の第１の態様によれば、標的物質および不純物を含む液体原料を、精製された標的物質を含む生成物ストリーム、および任意選択で不純物の少なくとも一部を含む１つまたは複数の廃棄物ストリームに変換するための装置であって、装置が、第２のおよび任意の後続ユニットの供給流が下流のユニットからの生成物ストリームを含むように直列に配置された少なくとも２つの処理ユニットを含み、各処理ユニットは以下の構成要素（ｉ）～（ｖｉ）：
（ｉ）液体原料の注入口（１）；
（ｉｉ）所望の比率で少なくとも２つの液体を提供するための２つ以上の可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含む複数注入口フローコントローラ（４）；
（ｉｉｉ）ミキシング手段（８）；
（ｉｖ）標的物質から不純物の少なくとも一部を分離させる処理操作を実行するためのデバイス（１２）；
（ｖ）ユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）；
（ｖｉ）ユニットを通過する液体をミキシング手段（８）に流入させるか、またはミキシング手段（８）をバイパスさせるための、切換式バイパスアセンブリ（３１）
を含む、装置が提供される。

本発明は、製造規模で実行することができる装置を提供し、特に、単純性、費用および操作の容易性、オペレーターエラーのリスク低減、保守の容易化、ならびにスペアパーツの在庫の低減に関して、以前の装置に対して多くの利点を提供する。

本明細書において、「処理ユニット」という句はしばしば「ユニット」と省略され、この２つは交換可能に使用される。
添付の図面において：

本発明の装置にあり得る、ある処理ユニットの概略図である。 本発明のユニット中にあり得る流路アセンブリを概略的に示す図である。

図１は、以下の実施例セクションにおいてより詳細に説明される。
図２は、処理ユニットの１つまたは２つ以上（好ましくは少なくとも半分、より好ましくは全て）において使用され得る流路アセンブリを概略的に示す。流路アセンブリは、管、例えばガンマ線照射によって滅菌し得る材料（例えば、プラスチック材料）で作られた管によって連結された同定された構成要素を含み、好ましくは各使用の後に処理されるか、または洗って再利用され得る。流路アセンブリは、６つの異なる液体（例えば、緩衝液、酸性溶液、アルカリ性溶液、有機溶媒など）のための６つの注入口（２ａ）～（２ｆ）および別の液体、例えば水のための第７の注入口（２ｇ）を含む。６つの液体はそれぞれのバルブ（３ａ、３ｂ）、（３ｃ、３ｄ）および（３ｅ、３ｆ）を通過して、複数注入口フローコントローラ（４）に流れ込む所望の割合で６つの液体で構成される３つの液体ストリームを生じる。この実施形態では、流路アセンブリは、（注入口（２ｇ）から）複数注入口フローコントローラ（４）にさらなる液体を導入するための（例えば水）、バルブ（３ｇ）を取り付けられた第４の管をさらに含む。バルブ（３）を取り付けた注入口（１）は、標的物質（例えば、モノクローナル抗体）および不純物を含む液体原料を流路アセンブリに導入するために使用され得る逆止バルブ（３ｈ）を有する。複数注入口フローコントローラ（４）の下流で、液体ストリームが、液体のフローを与えるための手段（６）（例えば、流路の外に位置するモーターに取り付けられたインペラーブレードまたはポンプ揚程）、圧力センサ（７）のためのブロックを通過し、その後切換式バイパスアセンブリ（３１）に流入する。切換式バイパスアセンブリ（３１）は３つの連結部分を有し、１つは気泡トラップを取り付けられたミキシング手段（８）に通じ、１つはミキシング手段（８）の外に通じ、１つはデバイスフィードの注入口（１２ａ）に通じる。処理操作を達成するためのデバイス（１２）（デバイス（１２）は図２に示さず）を通って流れた後、精製された液体原料は排出口（１２ｂ）を通過し、圧力センサ、ｐＨおよびＵＶセンサ（３２）の組合せを通過する。最後に、精製された液体原料は、一連のバルブ（１７）、（１９）および（２０）を含む排出口ラインを通過し、それにより出口フィード排出口（ｅｘｉｔ ｆｅｅｄ ｏｕｔｌｅｔ）（１８）、廃棄物ストリーム排出口（２１）および生成物ストリーム排出口（２２）の間のフローの制御が可能になる。

ユニットに関して上で定義されるような構成要素（ｉ）～（ｉｉｉ）、（ｖ）および（ｖｉ）を含む流路アセンブリは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含むユニットならびに流路アセンブリおよび構成要素（ｉｖ）を含むユニットのように、本発明のさらなる特徴を形成する。

典型的には、各ユニットは１つの処理操作を実行する。
処理ユニットの数は特に制限されず、液体原料を所望の目的に適した形態、例えば、製剤については薬剤に変換するために必要な精製ステップの大部分に依存している。いくつかの実施形態では、装置は２つのユニットを含む（例えば、２つの処理操作を実行するために）。他の実施形態では、装置は、２つより多いユニット、例えば（少なくとも）３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、またはそれ以上のユニットを含み、好ましくは、各ユニットは上記の特徴（ｉ）～（ｖｉ）を有する。

本装置は、並列に動作する２つ以上のユニットをさらに含むことができるが、全てのユニットが直列に配置されることが好ましい（例えば、任意選択で望ましい場合、各ユニットの間にブレークバッグを伴って直列に連結される）。多くの非常に好ましい実施形態では、各ユニットで実行される方法操作は、他の全てのユニットで使用される方法操作とは異なる。したがって、装置は、例えば、クロマトグラフィーを実行するための複数のユニットを含んでもよいが、そのような各々のクロマトグラフィーユニット（またはそれが使用される方法）は、好ましくは、クロマトグラフィーを実行するための他のユニットとは異なる。

特定の実施形態では、各ユニットは、他のユニットの少なくとも半分、より好ましくは全ての流路アセンブリと実質的に同じ流路アセンブリを含む。
好ましくは、各ユニットは、本装置の操作の間にその混合バイオプロセシング液体を（インサイチュで）調製する。このようにして、別の方法操作を意図した、外部で準備された間違ったバイオプロセシング液体をオペレーターが使用するリスクが回避される。

特定の実施形態では、各ユニットは他のユニットと実質的に同じ流路アセンブリを含む。
１つの実施形態では、各ユニットからの生成物ストリームは、次のユニット（次のユニットがある場合）に直接供給される。他の実施形態では、１つまたは複数のユニットの生成物ストリームが貯蔵容器（例えば、「ブレークバッグ（ｂｒｅａｋ ｂａｇ）」）に供給され、その後、次のユニット（もしあれば）の原料として使用されることが便利であることが多い。このようにして、生成物ストリームが次のユニットに入る前にそれを試験し、本方法を一時停止するなどが可能となる。

第１のユニットの原料もまた、貯蔵容器から供給されてもよいし、または望ましい場合には、それは、細胞培養装置、例えば、バイオリアクターから直接供給されてもよい。適切な貯蔵容器の例には、タンクおよびバッグが含まれる。

液体原料の注入口（１）は、好ましくは、バルブ（３）および任意選択で逆止バルブ（３ｈ）が取り付けられたチューブを、典型的には含む。逆止バルブ（３ｈ）は複数注入口フローコントローラ（４）を流れる液体で液体原料が汚染されることを避けるために有用である。第２のおよび任意の後続処理ユニットのための液体原料は、典型的には、先行処理ユニットからの生成物を含む。

複数注入口フローコントローラ（４）は、好ましくは、複数注入口フローコントローラ（４）を通る少なくとも２つの液体（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、または８つの液体）のフローを制御する可変フロー注入口バルブ（４ａ）、より好ましくは断続的フロー注入口バルブを含む。複数注入口フローコントローラ（４）は、少なくとも２つの可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含み、多くの場合、３つ、４つ、５つ、６つ、または７つなど、最大８つの可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含む。可変フロー注入口バルブ（４ａ）は、各々同じ寸法を有してもよく、または１つまたは複数の可変フロー注入口バルブ（４ａ）が異なる寸法を有していてもよい。特定の好ましい実施形態では、各可変フロー注入口バルブ（４ａ）から複数注入口フローコントローラ（４）の排出口までの測定された容積は、各可変フロー注入口バルブについて同じであり、各可変フロー注入口バルブ（４ａ）から複数注入口フローコントローラ（４）の排出口までの測定された容積および経路長の両方が、各可変フロー注入口バルブについて同じであることが非常に好ましい。

本発明で使用される複数注入口フローコントローラ（４）もまた、少なくとも１つの排出口を含み、２つ以上の排出口が存在し得るが、単一の排出口が使用されることが好ましい。

可変フローバルブ（４ａ）は、液体が流れることを維持する第１の比較的低い流量と、少なくとも第２のより高い流量との間のフローを調整することができる。好ましい実施形態では、可変フロー注入口バルブ（４ａ）は断続的可変フロー注入口バルブであり、これは第１の位置でのフローを防ぐが、少なくとも第２の位置でのフローを許容する。最も好ましくは、全てのバルブは断続的フローバルブである。バルブは、当技術分野で公知のアクチュエータ、例えば空気圧アクチュエータ、または好ましくはソレノイドアクチュエータを含んでもよい。

好ましくは、複数注入口フローコントローラ（４）の可変フロー注入口バルブ（４ａ）は、最も好ましくは、プログラム可能なコントロールユニットによってコントロールされ、複数注入口フローコントローラを流れる入力液体の必要とされる相対量を達成するためにバルブの開閉を制御する。これは、好ましくは、所望の組成物を生成するために、所定の期間またはサイクル速度で、複数注入口フローコントローラ（４）の可変フロー注入口バルブ（４ａ）を通して循環し、バルブの開閉を、必要とされるサイクル時間の割合に従って制御することによって達成される。サイクル速度は一定または可変のいずれかであり得る。最も好ましくは、断続的フロー注入口バルブが使用され、操作中、任意の所与の時間に１つのバルブ（４ａ）のみが開くようにコントロールされる。多くの実施形態では、複数注入口フローコントローラ（４）のサイクル速度は一定に維持され、入力液体の所望の相対量は一定に維持される。

多くの実施形態では、複数のサイクルが使用される。使用されるサイクル数は、本方法の期間、処理される液体の量、装置の流量および最大操作圧力などの多くの要因に依存する。特定の実施形態では、少なくとも１０サイクル、例えば、少なくとも５０、１００、５００、７５０、１０００、１５００、２０００、３０００、５０００、７５００、１００００またはそれ以上のサイクルを使用することができる。

ある範囲のサイクル周波数が使用できることは認識されよう。多くの場合、周波数は１００Ｈｚ未満、典型的には５０Ｈｚ未満、通常は１０Ｈｚ未満、好ましくは５Ｈｚ未満である。特定の好ましい実施形態では、周波数は２Ｈｚ以下、最も好ましくは１Ｈｚ以下、例えば０．０５～０．５Ｈｚである。

少なくとも２つの液体の混合（例えば、バイオプロセシング液体を調製するためまたは液体を液体原料と混合するため）は、複数注入口フローコントローラ（４）排出口を通った液体のフローを、任意選択でユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）の作用と組み合わせて、単純に組み合わせることによって達成され得る一方で、ユニットはミキシング手段（８）、好ましくは、好ましくは静的ミキサー、最も好ましくは時間遅延、スプリットフロー静的ミキサーを含む、ミキシングチャンバーを含む。

少なくとも２つの液体の一方は、任意選択で液体原料である。
多くの実施形態では、ミキシング手段（８）は、ユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）の下流かつ処理操作を実行するためのデバイス（１２）の上流に位置する。いくつかの好ましい実施形態では、ミキシング手段（８）は気泡トラップを含む。

ミキシング手段（８）は、好ましくは液体原料を１つまたは複数の液体と組み合わせてデバイスフィードを生成するのに適している。ミキシング手段（８）はまた、好ましくは少なくとも２つの他の液体を組み合わせてバイオプロセシング液体を調製するのに適している。

各ユニットによって行われ得る処理操作には、クロマトグラフィー、ウイルス不活化、濾過（例えばウイルス除去）、リフォールディング、限外濾過、ダイアフィルトレーション、精密濾過、濃縮することならびに／または緩衝液交換、インライン前処理およびリフォールディングを行うことが含まれる。

いくつかの実施形態では、装置は、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するための少なくとも２つのユニット、および多くの場合においては標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するための少なくとも３つのユニットさえも含む。標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するための第１のユニットは、好ましくは、アフィニティークロマトグラフィーカラム、例えばプロテインＡアフィニティーカラムを含む。標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するための第２のユニットは、好ましくは、陰イオン交換クロマトグラフィーカラムを含む。標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するための第３のユニットは、存在する場合、好ましくは、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムを含む。

したがって、ある好ましい実施形態では、装置は、直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット
を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される。

別の好ましい実施形態では、装置は、直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット
を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される。

別の好ましい実施形態では、装置は、直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｄ．陰イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット
を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される。

別の好ましい実施形態では、装置は、直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｄ．陰イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｅ．任意の不活化ウイルスの除去のためのユニット
を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される。

別の好ましい実施形態では、装置は、直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｄ．陰イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
ｅ．任意の不活化ウイルスの除去のためのユニット；
ｆ．先行ユニットからの生成物ストリームを濃縮するため、および／または緩衝液交換を実行するためのユニット
を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される。

好ましくは、ユニットは本明細書に列挙された順序で直列に配置されており、例えば、ユニットａ．～ｇ．を含む装置においては、ユニットが、好ましくはａ．、ｂ．、ｃ．、ｄ．、ｅ．、次にｆ．の順序で直列に配置されている。

好ましくは、ユニットの少なくとも１つ（好ましくは、ユニットの少なくとも半分、より好ましくは、全てのユニット）は、構成要素（ｉｖ）の上流に位置する圧力センサをさらに含む。

好ましくは、ユニットの少なくとも１つ（好ましくは、ユニットの少なくとも半分、より好ましくは、全てのユニット）は、構成要素（ｉｖ）の下流に位置する圧力センサをさらに含む。

好ましくは、ユニットの少なくとも１つ（好ましくは、ユニットの少なくとも半分、より好ましくは、全てのユニット）は、構成要素（ｉｖ）の下流に位置するＵＶセンサをさらに含む。

好ましくは、ユニットの少なくとも１つ（好ましくは、ユニットの少なくとも半分、より好ましくは、全てのユニット）は、構成要素（ｉｖ）の下流に位置するｐＨセンサをさらに含む。

好ましくは、ユニットの少なくとも１つ（好ましくは、ユニットの少なくとも半分、より好ましくは、全てのユニット）は、構成要素（ｉｖ）の下流に位置する導電率センサをさらに含む。

好ましい実施形態では、構成要素（ｉｖ）以外の各ユニットの構成要素部品の少なくとも７５％は、装置の他のユニットの少なくとも８０％において使用される構成要素部品と同一である。好ましくは、構成要素（ｉｖ）以外の各ユニットの構成要素部品の少なくとも８５％は、装置の他のユニットの少なくとも８０％において使用される構成要素部品と同一である。特に好ましくは、構成要素（ｉｖ）以外の各ユニットの構成要素部品の少なくとも９５％は、装置の他のユニットの少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％において使用される構成要素部品と同一である。特に好ましい実施形態では、構成要素（ｉｖ）を除く各ユニットの全ての構成要素部品は、装置の他の全てのユニットにおいて使用される全ての構成要素部品と同一である。誤解を避けるために、装置を通って流れる液体は、装置の構成要素部品ではない。これらの実施形態は、各ユニットの構成要素部品間の高程度の共通性が、スペア部品の在庫がより少なく必要とされることを意味するので、有利である。さらになお、ユニットがよく似ているため、装置の日常の保守が簡素化されており、各ユニットが装置の他のユニットとよく似ているため、装置を操作することがより容易である（高価な標的物質が破壊されるリスクが低い）。複数の製造業者からの非常に異なる処理ユニットを使用する従来技術とは対照的に、技術者は、多数の非常に異なる処理ユニットを補修する方法を学ぶ必要性を回避する。各ユニットの構成要素（ｉｖ）は、典型的には、他のユニットの構成要素（ｉｖ）とは異なるため（各ユニットが個別の処理操作を実行できるようにするため）、「構成要素（ｉｖ）以外」という言葉となる。

好ましい実施形態では、装置の全てのユニットは、デバイス（１２）を除いて実質的に同一である。この実施形態では、デバイス（１２）は、２つ以上のユニットにおいて同一であってもよいが、より典型的には、デバイス（１２）は、例えば、図１に示されるように、各ユニットが個別の処理操作を実行できるようユニットごとに異なる。

デバイスフィードの注入口はまた、例えば複数注入口フローコントローラ（４）からまたはミキシング手段（８）から、バイオプロセシング液体を受け入れるために使用され得る。バイオプロセシング液体は、例えばクロマトグラフィーにおけるコンディショナーまたは溶離液として、ウイルスを不活化するための手段として、フィルターを通して標的物質を洗浄するための手段としてなど、液体原料から不純物を除去するのに有用である。

装置は、任意選択で、以下の処理操作：クロマトグラフィー、ウイルス不活化、濾過（例えば、限外濾過、精密濾過、デッドエンド濾過および／またはダイアフィルトレーション）、ウイルス除去、リフォールディング、濃縮することならびに／または緩衝液交換、凝結およびインライン前処理を行うことの１つまたは複数を実行するための処理ユニットをさらに含む。

デバイス（１２）を使用して実行され得るクロマトグラフィーバイオ処理操作には、アフィニティークロマトグラフィー（例えばプロテインＡアフィニティークロマトグラフィー）、イオン交換（陰イオンおよび陽イオン交換のいずれかまたは両方）クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ：ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、逆相クロマトグラフィー、拡張ベッドクロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、膜クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ：ｓｉｚｅ ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）が含まれる。多くの実施形態では、ユニットの少なくとも１つは、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィーの処理操作を実行する。クロマトグラフィー操作を実行するためのデバイスは、膜、繊維モノリスまたは樹脂などの適切なクロマトグラフィー装置を含む。クロマトグラフィーを実行するユニットの数および配列は、標的物質の性質に従って選択される。

好ましくは、装置は、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するための構成要素（ｉ）～（ｉｖ）を含む、少なくとも２つ、より好ましくは３つのユニットを含む。この場合、各ユニットにおいて実行されるクロマトグラフィー精製は、好ましくは、全ての他のユニットで使用されるものと異なる条件および／または異なる材料（例えば、異なる樹脂、膜またはモノリス）をクロマトグラフィーカラムに詰めたクロマトグラフィーカラムを使用する。特に好ましい実施形態では、ユニットの少なくとも１つはアフィニティークロマトグラフィーを実行し、ユニットの少なくとも１つは陽イオン交換クロマトグラフィーを実行し、ユニットの少なくとも１つは陰イオン交換クロマトグラフィーを実行する。

ウイルス不活化の処理操作を実行するためのデバイス（１２）は、典型的には、存在する任意のウイルスを不活化する条件下で標的物質を含む液体を貯蔵し得る貯蔵容器を含む。特定の実施形態では、ウイルス不活化デバイス（１２）の排出口および注入口は、再循環ループを生じるように流体的に連結され得る。そのような一実施形態では、装置は、「デバイス」注入口と「デバイス」排出口との間で流体的に連結された容器またはバッグを提供され得、装置排出口の１つは、複数注入口フローコントローラ（４）注入口の１つに流体的に連結される。液体原料の注入口（１）に流体的に連結されたデバイス（１２）の「注入口」と「排出口」の間の容器またはバッグは、フロー（６）を与える手段、典型的には、ポンプによって充填されるか、または他の複数注入口フローコントローラ（４）注入口の少なくとも１つを通った少なくとも１つの他の液体で前処理される。特定の実施形態では、容器またはバッグはミキシング容器またはバッグである。バイオプロセシング液体は、標的物質を含む溶液が、複数注入口フローコントローラ（４）上の少なくとも１つの他の注入口に流体的に連結された少なくとも１つのさらなる液体によって前処理されるので、複数注入口フローコントローラ（４）の注入口を通って容器またはバッグに再循環して、複数注入口フローコントローラ（４）の注入口に戻る。

ウイルス不活化は、当技術分野で公知の条件を使用したいくつかの技術によって実行され得る。例えば、約４．０未満のｐＨ、例えば約３．０～約４．０の間のｐＨ、好ましくは約３．２～約３．９の間のｐＨ、特に約３．４～約３．８の間のｐＨ、より特に約３．４５～約３．７の間のｐＨで液体原料を含む流体をインキュベートすることができるクロマトグラフィーカラム、クロマトグラフィー膜、または保持槽を使用すること。好ましくは、液体原料は、前述のｐＨで少なくとも２５分の期間、例えば約３０分～１．５時間の間の期間、好ましくは約３０分～１．２５時間の間の期間、より好ましくは約０．７５時間～１．２５時間の間の期間、特に約１時間の期間、保持される。各場合において、選択される条件は、標的物質が破損していない、または破壊されていないことである。

不活化ウイルスは、例えば米国特許第６，３６５，３９５号に記載されるように、ノーマルフローフィルター（ＮＦＦ：ｎｏｒｍａｌ ｆｌｏｗ ｆｉｌｔｅｒ）または接線流濾過（ＴＦＦ：ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ ｆｌｏｗ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）フィルターを使用した、濾過によって除去され得る。ＴＦＦモードまたはＮＦＦモードのいずれかで、不活化ウイルスを除去するための濾過は、一般に２０～１００ナノメートル（ｎｍ）の平均細孔径を有する膜を使用して、不活化ウイルスを保持する条件下で行われる。このような膜は、膜を通った標的物質の通過を可能にしながら、膜表面に不活化ウイルスを保持する。

不活化ウイルスを除去するためのユニットは、ウイルス不活化ステップを生き延びたウイルスも除去することができる。
（活性を維持する任意のウイルスとともに）不活化ウイルスを除去するのに使用され得る代表的な適した限外濾過膜には、再生セルロース、ポリエーテルスルホン、ポリアリールスルホン、ポリスルホン、ポリイミド、ポリアミド、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ：ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｉｄｅｎｅｄｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）などから形成された膜が含まれ、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、Ｍａｓｓから入手可能な、ＶＩＲＥＳＯＬＶＥ．ＲＴＭ．膜およびＲＥＴＲＯＰＯＲＥ（商標）膜として公知である。これらは、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、Ｍａｓｓから入手可能な、ＶＩＲＥＳＯＬＶＥ（商標）ＮＦＰウイルスフィルターなどのカートリッジ（ＮＦＦ）形態で、またはＰＥＬＬＩＣＯＮ（商標）カセットなどのカセット（ＴＦＦ用）としてのいずれかで供給され得る。

デバイス（１２）を使用して実行され得る濾過操作には、ウイルス濾過、深層濾過および絶対濾過、限外濾過、ダイアフィルトレーションならびに精密濾過が含まれる。多くの実施形態では、濾過デバイス（１２）は、デバイス注入口とデバイス排出口との間にフィルターモジュールを含む。フィルターモジュールは、複数注入口フローコントローラ注入口（４）に取り付けられた少なくとも２つの液体フィードを使用してフラッシュおよび追跡することができ、標的物質を含む液体原料は、原料注入口（１）に流体的に連結することができる。濾過デバイス（１２）を通った液体原料の処理は、複数注入口フローコントローラ排出口（４）および原料注入口（１）に流体的に連結されて下流に位置し、濾過デバイス（１２）の上流に位置する、フローを与えるための手段（６）を通って達成される。フィルターはしばしばモジュラー形式であり、生体分子を精製する分野で公知の配置を使用し得る。

ウイルス濾過、深層濾過および絶対濾過方法操作は当技術分野で公知であり、市販の濾過デバイスを使用して実行され得る。多くの実施形態では、処理操作として濾過を実行するために、１つまたは複数の濾過デバイスがデバイス（１２）注入口と排出口との間に位置する。別の実施形態では、さらなるフィルターデバイスが装置排出口の下流に位置し、これによって、特定の実施形態では、装置がクロマトグラフィー、ウイルス不活化、接線流濾過、ウイルス濾過または深層濾過などのほとんどの精製ステップを実行し、続いて装置外部の二次濾過操作を実行することができる。

本発明の装置を使用して行われ得る接線流濾過（「ＴＦＦ」）ユニット操作には、従来の再循環ＴＦＦおよびシングルパスＴＦＦが含まれる。特定の実施形態では、装置の排出口および注入口は流体的に連結されて再循環ループ、一例として再循環接線流濾過を生じ得る。１つの実施形態では、当技術分野で公知のように、装置は、デバイス注入口とデバイス排出口との間に平坦シート、中空繊維またはスパイラル巻膜のいずれかを含むＴＦＦモジュールを提供されており、ＴＦＦモジュールからの残余分は、装置排出口の１つから、少なくとも１つの注入口および１つの排出口を含む容器またはバッグ上の流体的に連結された注入口へ導かれる。容器またはバッグの排出口は、液体原料注入口に流体的に連結される。容器またはバッグは、容器またはバッグ上の第２の注入口に流体的に連結されることによって原料または液体を容器またはバッグに供給する補助手段を使用して、一定のレベルで維持される。別の実施形態では、装置は、デバイス注入口とデバイス排出口との間に平坦シート、中空繊維またはスパイラル巻膜のいずれかを含むＴＦＦモジュールを提供されており、ＴＦＦモジュールからの残余分は装置排出口の１つから複数注入口フローコントローラバルブの注入口の１つに戻るよう流体的に連結されている。特定の実施形態では、装置排出口からその注入口への再循環ループは、ブレーク容器（ｂｒｅａｋ ｖｅｓｓｅｌ）またはバッグを含む。標的物質または液体を含む溶液は、フローを与えるための手段、典型的にはポンプによって、液体原料注入口を通って再循環ループに引き入れられる。残余分はＴＦＦモジュールを通って、好ましくは複数注入口フローコントローラ注入口の１つを通って、再循環する。複数注入口フローコントローラを使用して、残余分を少なくとも１つの他の液体と混合し得る。ＴＦＦを再循環する操作は当技術分野で公知であり、クロス流量および膜貫通圧力を設定することによってコントロールされる。

特定の実施形態では、シングルパスＴＦＦは、例えばＷＯ２０１７／１１８８３５に記載されるようなシングルパスＴＦＦの場合のように、デバイス注入口とデバイス排出口との間に平坦シート、中空繊維またはスパイラル巻膜のいずれかを含むＴＦＦモジュールとともに構成され得る。

いくつかの実施形態では、シングルパスおよび再循環ＴＦＦのハイブリッドが使用され得、ここでＴＦＦモジュールの下流の可変フローバルブを使用して生じる残余分が供給容器に戻る。

本発明の装置は、任意選択で、気泡トラップ、圧力センサ、温度センサ、ｐＨセンサ、流量センサ、導電率センサ、空気センサ、およびｕｖ／可視多波長センサなどのｕｖセンサの１つまたは複数をさらに含む。

液体のフローを与えるための手段（６）は当技術分野で周知であり、液体に対するガス圧力、特に窒素またはヘリウムなどの不活性ガスの適用が挙げられる。好ましくは、ユニットを通った液体のフローを与えるための手段は、１つまたは複数のポンプを含む。使用され得るポンプには、蠕動ポンプ、ダイアフラムポンプ、ローブポンプおよび遠心ポンプが含まれる。使い捨ておよび再利用可能なポンプ設計が使用され得る。多くの好ましい実施形態では、ユニット操作を行う各手段について、単一のポンプが使用され、原料とフローコントローラ（４）からの排出口との間の連結の間の流体連結の下流に位置する。最も好ましくは、ポンプはデバイス（１２）の上流に位置する。選択されるポンプのタイプおよびサイズは、一般に、装置のパラメータを調整および設計するのに適切な流容量および圧力プロファイルに依存する。特定の非常に好ましい実施形態では、ポンプは四元ダイアフラムポンプである。

流路アセンブリに存在する手段（６）は、典型的には、１つまたは複数のインペラー、例えばダイアフラムインペラー（ｄｉａｐｈｒａｇｍ ｉｍｐｅｌｌｅｒ）を含む。これらは、インペラーを駆動するための手段、例えば流路アセンブリの外に位置するモーターに連結され、駆動され得る。

切換式バイパスアセンブリ（３１）は、所望される場合、液体原料をミキシング手段（８）に入らせない選択肢を提供するのに有用である。これによって、デバイスがまた、ミキシング手段（８）において液体原料をバイオプロセシング液体と組み合わせることによって標的物質にダメージを与えるかまたは分解させる可能性がある、壊れやすい標的物質の精製に使用され得るという利点が提供される。

切換式バイパスアセンブリ（３１）はまた、２つ以上の液体を混合して、その後処理操作のためのデバイス（１２）に供給され得るバイオプロセシング液体を調製するのに、有用である。

切換式バイパスアセンブリ（３１）は、デバイス（１２）がクロマトグラフィーカラムを含む場合に、特に有用である。切換式バイパスアセンブリ（３１）を使用して、ミキシング手段（８）を通過することなく、標的物質および不純物を含む液体原料をクロマトグラフィーカラム（１２）に充填し得、その後ミキシング手段（８）を使用して、カラム（１２）に負荷された標的物質のための溶離液として作用するバイオプロセシング液体（その組成は、複数注入口フローコントローラ（４）を使用して、要求に応じて変更し得る）を調製し得る。さらに、ミキシング手段（８）をバイパスすることは、そうでなければデバイス（１２）がホールドアップ容量および生成物の安定性が問題となり得る限外濾過および／またはダイアフィルトレーションの方法ステップを実行する場合、有用であり得る場合がある。

切換式バイパスアセンブリ（３１）は、好ましくは、液体原料およびバイオプロセシング液体のフローをミキシング手段（８）、またはミキシング手段（８）を通過することなくデバイス（１２）のいずれかに導く、管および２つまたは３つのバルブを含む。

本発明の１つの特定の実施形態では、各ユニットは以下の構成要素（ｉ）～（ｖｉ）：
（ｉ）液体原料の注入口（１）；
（ｉｉ）所望の比率で少なくとも２つの液体を提供するための２つ以上の可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含む複数注入口フローコントローラ（４）；
（ｉｉｉ）ミキシング手段（８）；
（ｉｖ）処理操作を実行するためのデバイス（１２）に液体を供給するための排出口およびデバイス（１２）から液体を受け入れるための注入口；
（ｖ）流路アセンブリを通った液体のフローを与えるための手段（６）；
（ｖｉ）液体をミキシング手段（８）に流入させるか、またはミキシング手段（８）をバイパスさせるための、切換式バイパスアセンブリ（３１）
を含む、流路アセンブリを含む。

この流路アセンブリは、本発明の特徴を形成する。
流路アセンブリに関して：好ましくは、構成要素（ｖ）は構成要素（ｉｉｉ）の上流かつ構成要素（ｉｉ）の下流にあり；好ましくは、構成要素（ｉｉｉ）は構成要素（ｉｉ）の下流にあり；好ましくは、流路アセンブリはプラスチック材料で構築されており；好ましくは、流路アセンブリは、ガンマ線照射によるアセンブリの滅菌を許容する材料、例えばシリコーン、特に編組シリコーン、ポリエチレンまたはポリプロピレンで構築されており；別の実施形態では、流路アセンブリはステンレス鋼で構築されている。好ましくは、流路アセンブリは無菌である。

好ましくは、流路アセンブリは、導電率計、ｐＨセンサおよび／または圧力センサを受け入れるための１つまたは複数のブロックをさらに含む。好ましくは、１つまたは複数のブロックの少なくとも１つは手段（６）の下流かつミキシング手段（８）の上流に位置する。さらに、１つまたは複数のブロックの少なくとも１つが、デバイス（１２）の下流に位置することが好ましい。特に好ましい実施形態では、１つまたは複数のブロックの少なくとも１つはデバイス（１２）の下流に位置し、導電率計、ｐＨ計および圧力センサを受け入れるよう適合させる。

前述の流路アセンブリ、および好ましくは標的物質から不純物の少なくとも一部を分離する処理操作を実行するためのデバイス（１２）を含むユニットが、本発明のさらなる態様を形成する。

本発明の装置は、好ましくは、さらなる圧力（すなわち、フローを与えるための手段（６）によって提供される圧力に加えて）を、デバイス（１２）を通って流れる液体に加えるための手段をさらに含み、前記手段はデバイス（１２）の下流に位置する。さらなる圧力を加えるための手段は当技術分野で公知であり、ピンチバルブが含まれ、ダイアフラムバルブおよび可変位置ダイアフラムバルブが特に好ましい。

好ましい実施形態では：
（Ａ）各ユニットは流路アセンブリを含み；
（Ｂ）ユニットの少なくとも半分（好ましくはユニットの全て）で使用される流路アセンブリは、実質的に同じ構成を有する。

流路アセンブリを作るのに使用される交換可能な管は、好ましくは、プラスチック材料、例えばシリコーン、特に編組シリコーンから構成される。
好ましくは、各ユニットを通る流路アセンブリは、他のユニットの全てを通る流路アセンブリと実質的に同一である。

特定の実施形態では、ユニットの１つまたは複数（好ましくはユニットの全て）は、交換が必要になる前に有意な回数の再利用が可能になるような材料、例えばステンレス鋼から構築された、複数回使用の流路アセンブリを含む。

特定の実施形態では、ユニットの１つまたは複数（好ましくはユニットの全て）は、好ましくは、材料、例えば、限定された寿命を有し、使い捨て消耗品として利用されるように設計されたプラスチック材料、例えばシリコーン、特に編組シリコーン、ポリエチレンまたはポリプロピレンから構築された、単回使用の流路アセンブリを含む。

多くの実施形態では、各処理操作は、プログラム可能なコントロールユニット、好ましくはコンピュータのコントロール下で実行される。いくつかの実施形態では、単一のコントロールユニットは２つ以上の処理操作を制御する。他の実施形態では、各処理操作は別々のコントロールユニットのコントロール下にある。これらの、他の実施例では、好ましくは、コントロールユニットは共通のプログラミング言語を使用し、それによってコントロールユニット間の伝達が単純化される。

好ましい実施形態では、バイオプロセシング液体は、少なくとも３つの液体を組み合わせることによって提供され、少なくとも３つの液体の少なくとも２つ（好ましくは全て）のそれぞれは少なくとも２つのさらなる液体（例えば、バルブ（３ａ）および（３ｂ）または（３ｃ）および（３ｄ）を使用して）を組み合わせることによって提供される。この組合せは、好ましくは、ミキシング手段（８）によって実行される。少なくとも３つの液体は、それぞれ液体（２ａ）および（２ｂ）、（２ｃ）および（２ｄ）ならびに（２ｅ）および（２ｆ）を組み合わせることによって調製され得る。

ユニットにおいて使用されるバイオプロセシング液体の組成は、本方法全体を通して同じのままであってもよく、または組成は本方法中に変化してもよい。例えば、バイオプロセシング液体の組成は、特にユニットがクロマトグラフィーカラムを含み、バイオプロセシング液体が溶離液として機能する場合に、本方法中に徐々にまたは段階的に変化してもよい。

バイオプロセシング液体を調製するのに使用され得る液体（例えば、少なくとも２つの液体）には、適切な処理操作を行うための、当技術分野で公知のものが含まれる。このような液体の例には、酸性、中性および塩基性溶液、例えば２．５～１４の範囲のｐＨを有するものおよび様々な濃度の種々の塩の溶液もまた、含まれる。例には、以下の１つまたは複数を含む水溶液が含まれる：水酸化、リン酸、硫酸、塩酸または酢酸ナトリウム、カリウムまたはアンモニウム；塩、例えば、ナトリウム、カルシウム、カリウム、およびアンモニウム塩、例えばリン酸塩、塩酸塩、酢酸塩、クエン酸塩および硫酸塩を含む、約３Ｍまでの塩濃度を有する水溶液；例が当技術分野で周知である、緩衝液；還元剤（例えばＤＴＴ（ＤＬ－ジチオスレイトール）およびＴＣＥＰ（ｔｒｉｓ（２－カルボキシエチル）ホスフィン）；アミノ酸（例えば、ヒスチジン、アルギニンおよびグリシン）；界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ（商標）２０およびＴｒｉｔｏｎ（商標）－Ｘ１００）；水混和性有機溶媒、例えばポリオール、例えばグリセリンおよびポリエチレングリコール；ならびに上記の２つ以上を含む混合物。

本発明のユニット、装置および流路アセンブリを使用して処理され得る標的物質には、生体分子、例えば、ｐＤＮＡ；細胞治療、ウイルスワクチンなどのワクチン、遺伝子治療生成物、糖、封入体、特にポリペプチドを含む封入体；特に組換えポリペプチドが含まれる。

ｐＤＮＡは、スーパーコイル、線形、およびオープンサーキュラー（つまり、ニック入りまたは弛緩した）アイソフォームなどの複数の形態の１つまたは複数であってもよい。スーパーコイル状ｐＤＮＡアイソフォームは共有結合で閉じた環状形態を有し、ｐＤＮＡは宿主酵素系の作用によって宿主細胞内で負のスーパーコイル状となる。オープンサーキュラーアイソフォームでは、ｐＤＮＡ二重鎖の１つの鎖が、１つまたは複数の場所で切断されている。

ｐＤＮＡの生成方法は当技術分野で周知である。ｐＤＮＡは、天然物または人工のものであってもよく、例えば、外来ＤＮＡインサートを持つクローニングベクターであってもよい。多くの実施形態では、ｐＤＮＡは、１キロベース～５０キロベースのサイズ範囲にある。例えば、発現された干渉ＲＮＡをコードするｐＤＮＡは、典型的には、３キロベース～４キロベースのサイズ範囲にある。

ポリペプチド、特に組換えポリペプチドには、サイトカイン、成長因子、抗体、抗体フラグメント、免疫グロブリン様ポリペプチド、酵素、ワクチン、ペプチドホルモン、ケモカイン、受容体、受容体フラグメント、キナーゼ、ホスファターゼ、イソメラーゼ、ヒドロラーゼ、転写因子および融合ポリペプチドを含む治療タンパク質ならびにペプチドが含まれる。

抗体には、生物学的活性を有するモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントが含まれ、前記のものの任意の多価および／または多重特異性形態が含まれる。

天然に存在する抗体は、典型的には、４つのポリペプチド鎖、ジスルフィド結合によって相互連結された２つの同一の重（Ｈ）鎖および２つの同一の軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、可変領域（Ｖ_Ｈ）および定常領域（Ｃ_Ｈ）を含み、Ｃ_Ｈ領域は、その本来の形態で３つのドメイン、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３を含む。各軽鎖は、可変領域（Ｖ_Ｌ）および１つのドメインＣ_Ｌを含む定常領域を含む。

Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域が散在する相補性決定領域（ＣＤＲ：ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分化することができる。各Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲで構成され、アミノ末端からカルボキシ末端までに、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置される。

発現され得る抗体フラグメントは、インタクトな抗体の一部を含み、前記部分は、所望の生物学的活性を有する。抗体フラグメントは、一般に少なくとも１つの抗原結合部位を含む。抗体フラグメントの例には：（ｉ）Ｖ_Ｌ、Ｃ_Ｌ、Ｖ_ＨおよびＣ_Ｈ１ドメインを有するＦａｂフラグメント；（ｉｉ）２つのＦａｂ誘導体間のジスルフィド架橋によって二価フラグメントを形成することができる、Ｃ_Ｈ１ドメインのＣ末端に１つまたは複数のシステイン残基を有するＦａｂ’フラグメントなどのＦａｂ誘導体；（ｉｉｉ）Ｖ_ＨおよびＣ_Ｈ１ドメインを有するＦｄフラグメント；（ｉｖ）Ｃ_Ｈ１ドメインのＣ末端に１つまたは複数のシステイン残基を有するＦｄ誘導体などのＦｄ誘導体；（ｖ）抗体の単一アームのＶ_ＬおよびＶ_Ｈドメインを有するＦｖフラグメント；（ｖｉ）Ｖ_ＬおよびＶ_Ｈドメインが共有結合している単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体などの単鎖抗体分子；（ｖｉｉ）定常領域ドメインを有するかまたは有さない別の可変ドメイン（Ｖ_ＨまたはＶ_Ｌドメインポリペプチド）に連結した定常領域ドメインを有さないＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインポリペプチド、（例えば、Ｖ_Ｈ－Ｖ_Ｈ、Ｖ_Ｈ－Ｖ_Ｌ、またはＶ_Ｌ－Ｖ_Ｌ）；（ｖｉｉｉ）単離されたＣＤＲ領域などの、Ｖ_Ｈドメイン、またはＶ_Ｌドメイン、およびＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインのいずれかの抗原結合フラグメントからなるフラグメントなどのドメイン抗体フラグメント；（ｉｘ）同じポリペプチド鎖内の２つの抗原結合部位、例えば軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）に連結された重鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）を含む、いわゆる「ダイアボディ」；ならびに（ｘ）相補的な軽鎖ポリペプチドと一緒になって１対の抗原結合領域を形成する１対のタンデムＦｄセグメントを含む、いわゆる線状抗体が含まれる。

封入体には、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などの細菌細胞の細胞質中で形成される不溶性の凝集体が含まれ、最も一般的にはポリペプチド、特に組換えポリペプチドを含む。
標的物質、例えば組換えポリペプチドを処理するため、特に組換えポリペプチドを精製または単離するための方法が、本発明のさらなる態様を形成する。

本発明による装置の一実施形態は、図１を参照して記載される。バイオ処理操作を実行するための第１のデバイスは、標的生体分子および不純物を含む液体原料の注入口（１）ならびに、６つの異なる緩衝液の注入口（２ａ）～（２ｆ）、ならびに水の注入のための注入口（２ｇ）を含む。各注入口には、ストレートスルーダイアフラムバルブ（３）および（３ａ）～（３ｇ）などのバルブが取り付けられており、フローをオンまたはオフに切り替えることができる。示されている実施形態では、注入口（２ａ）および（２ｂ）、（２ｃ）および（２ｄ）ならびに（２ｅ）および（２ｆ）を通過する緩衝液フィードは、バルブの下流で組み合わされ、（３ａ）～（３ｆ）は、それぞれ３つの緩衝液フィードラインを形成し、これらは、注入口（２ｇ）を通る注射フィードおよび流入のための水とともに、複数注入口フローコントローラ（４）の異なる注入口に流体的に連結されている。複数注入口フローコントローラ（４）は、高速作動ソレノイドアクチュエータを有する単一の排出口を持つ４つのバルブマニホールドを含む。この構成により、またバルブ（３ａ）および（３ｂ）、（３ｃ）および（３ｄ）、ならびに（３ｅ）および（３ｆ）を適切に開閉することにより、注入口（２ａ）および（２ｂ）、（２ｃ）および（２ｄ）または（２ｅ）および（２ｆ）を通って入る緩衝液間の選択が可能となり、装置の操作の柔軟性が向上する。複数注入口フローコントローラ（４）からの排出口は、ポンプ（６）の上流の位置（５）で標的生体分子および不純物を含む液体原料の注入口（１）と流体的に連結されており、気泡トラップを備えた静的ミキサー（８）を通って、第１のクロマトグラフィーカラム（１２）の注入口へ、組み合わされたフィードのフローを与える。ポンプ（６）からの出力をクロマトグラフィーカラム（１２）に供給するラインには、圧力センサ（７）、空気センサ（９）、超音波流量計などの流量計（１０）、ならびに温度および導電率組合せ式センサ（１１）が取り付けられている。いくつかの実施形態では、ポンプ（６）は、流量計（１０）からのフィードバック信号（２９）に応答して、プログラム可能なコントロールユニットを介してコントロールされる。いくつかの実施形態では、任意選択で、複数注入口フローコントローラ（４）は、導電率および温度センサ（１１）からのフィードバック信号（２８）に応答して、プログラム可能なコントロールユニットを介してコントロールされる。プログラム可能なコントロールユニットはまた、いずれか所望により、液体原料がミキシング手段（８）に入るかまたはミキシング手段（８）をバイパスする準備をする、切換式バイパスアセンブリ（３１）をコントロールし得る。さらに、プログラム可能なコントロールユニットはまた、バイオプロセシング液体がミキシング手段（８）において調製されるように、デバイス（１２）への発送（ｏｎｗａｒｄ ｄｅｓｐａｔｃｈ）のための切換式バイパスアセンブリ（３１）を制御し得る。クロマトグラフィーカラム（１２）からの排出口ラインには、圧力センサ（１３）、温度および導電率組合せ式センサ（１４）、ｕｖ／可視多波長検出器などのｕｖ検出器（１５）、ｐＨ計（１６）、および可変位置バルブ（３０）が提供されており、これらを使用して、圧力を制御し、望ましい場合、背圧をかけることができる。好ましくは、ポンプ（６）および可変位置バルブ（３０）の操作、ならびにそれによる装置内の圧力の制御は、圧力センサ（７）および（１３）からのフィードバック信号（２６）および（２７）に応答して、プログラム可能なコントロールユニットを介してコントロールされる。排出口ラインは、一連のバルブ（１７）、（１９）、および（２０）を通過し、これにより、フローを、出口フィード排出口（１８）、廃棄物ストリーム排出口（２１）、または生成物ストリーム排出口（２２）の間でコントロールできるようになり、例えば、収集またはサンプリングが可能となる。装置には、操作中に必要な場合は、フローを迂回させてカラム（１２）をバイパスできるようにするバルブ（２３ａ）および（２３ｂ）ならびに、カラムを通るフローを停止できるようにするさらなるバルブ（２４）および（２５）がさらに取り付けられている。次に、出口フィード排出口（１８）は、図１に示されるように構成された、１つのユニットからさらなる処理操作を実行するための第２の装置で標的物質および任意の残った不純物を含む生成物ストリームを提供するフィードラインとして使用することができるが、好ましくは、クロマトグラフィーカラム（１２）は、異なるタイプのクロマトグラフィーカラムまたは非クロマトグラフィーデバイス（１２）などのさらなる処理操作を実行するための異なるデバイス（１２）に置き換えられ、ここで、さらなる処理操作を実行するための第２のデバイスでは、注入口（１）を通って供給される原料は、生成物ストリーム排出口（１８）から前のユニットからの生成物ストリームを含む。

１つの操作方法では、バルブ（３ａ）～（３ｇ）が閉じられる一方で、バルブ（３）が開かれ、標的物質を含む液体が、ポンプ（６）によってカラム（１２）に供給され、カラムに標的物質がロードされる。例えば、標的物質がモノクローナル抗体である場合、プロテインＡアフィニティー樹脂を含むカラムが好ましく、モノクローナル抗体はプロテインＡ樹脂に選択的に結合する。切換式バイパスアセンブリ（３１）は、標的物質および不純物を含む液体原料がミキシング手段（８）を通過することなくカラム（１２）にロードされるのを可能にする。所望のロードが完了すると、バルブ（３）が閉じられ、１つまたは複数のバルブ（３ａ）～（３ｇ）が開かれ、１つまたは複数のバイオプロセシング液体が注入口（２ａ）～（２ｇ）を通ってユニットに入り、カラム（１２）を通ってポンプで送られるようになる。いくつかの実施形態では、最初にバルブ（３ａ）のみが開かれ、洗浄緩衝液であってもよい緩衝液が注入口（２ａ）から供給される注入口バルブを開くように、複数注入口バルブ（４）が操作され、ロードされたカラムが注入口（２ａ）からの緩衝液で洗浄される。所望の洗浄段階が完了すると、バルブ（３ａ）は開いたままであるか、または閉じられて、バルブ（３ｂ）～（３ｇ）のうちの１つまたは複数が開かれてもよい。注入口（２ｂ）～（２ｇ）からの液体、またはその混合物を、カラム（１２）にポンプで送るために、複数注入口バルブ（４）の注入口バルブ（４ａ）を開く。複数注入口バルブ（４）のバルブ（４ａ）（バルブ（４ａ）は図１に示さないが、図２参照のこと）、および／またはバルブ（３ａ）～（３ｇ）の開閉をコントロールすることにより、カラムに供給されるバイオプロセシング液体の組成を望むように変更およびコントロールできる。例えば、バルブ（３ｂ）、（３ｃ）および（３ｅ）が開いている場合、複数注入口フローコントローラ（４）で開いている注入口バルブ（４ａ）を変更して、他を閉じることにより、バイオプロセシング液体の組成を段階的に変化させることが可能になる。別の例では、複数注入口フローコントローラ（４）の２つ以上の注入口バルブ（４ａ）を、所与の頻度で、選ばれた期間、開閉して、バイオプロセシング液体の所与の混合物がカラム（１２）に供給されるようになる。さらに、切換式バイパスアセンブリ（３１）は、注入口（２ａ）～（２ｇ）からの液体が、ミキシング手段（８）において任意の組合せまたは比で混合されて、その後標的物質および不純物が予めロードされたカラム（１２）に供給され得るバイオプロセシング液体／溶離液勾配を生じることを可能にする。複数注入口バルブ（４）の注入口バルブ（４ａ）が開いているか閉じている時間および／または頻度を調整することにより、カラムに供給される液体の組成を変更することができる。時間および／または頻度が段階的に変更される場合、組成もまた、段階的に変更される。時間および／または頻度が一定期間にわたって徐々に変化する場合、得られたバイオプロセシング液体の組成もまた徐々に変化し、カラム（１２）への勾配の適用を可能とする。いずれの所望の方法によっても、カラム（１２）に供給されるバイオプロセシング液体の組成は、標的物質を不純物に対して異なる速度でカラムから溶出させる組成に変化させることができ、標的物質を含む生成物ストリームの部分を収集し得、不純物を含む両側の廃棄物ストリームが廃棄され得る。溶出前に、カラム（１２）から出る液体は、生成物ストリーム排出口（２２）を介して収集されるか、または廃棄物（２１）に送られ、バルブ（１７）、（１９）、および（２０）は、それに応じて設定される。カラム（１２）からの標的物質の溶出のために、バルブ（１９）および（２０）が閉じられ、バルブ（１７）が開かれ、標的物質が排出口（１８）を通って第２の処理ユニットへ通過する。

第２の処理ユニットの操作は、実質的に、第１のユニットに関して上に記載されたようであってよい。第１のユニットの生成物ストリーム排出口（１８）と同等な生成物ストリーム排出口（１８）を通って第２の処理ユニットを出る標的物質は、回収されてそのまま使用されてもよいし、または、例えば構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含むさらなるユニットにおいて１つまたは複数のさらなる処理操作に供されてもよいことは、認識されよう。そのようなさらなる処理操作は、従来の装置を使用してもよいし、または図１に示される構成によるさらなる装置を使用してもよいし、または本発明による他のものであってもよい。

特許請求の範囲の主題全体は、その参照により、本明細書に組み込まれる。
本発明は、以下の実施例によって限定されることなく示される。

クロマトグラフィー方法操作において、タンパク質は、クロマトグラフィー樹脂に結合し、異なる塩濃度の緩衝液で洗浄され、その後高塩濃度の緩衝液を使用することによって除去（溶出）される。例として、組換えラクトフェリンを結合させて、０～１Ｍの塩化ナトリウム濃度を持つｐＨ７．５リン酸ナトリウム緩衝液を使用して２．３Ｌ ＰＯＲＯＳ－ＸＳ陽イオン交換樹脂カラムから溶出させ得る。これは、バルブ（２３ｂ）が単純な流体連結に置き換わっていることを除いて図１に記載される特徴を含む完全に使い捨ての流路アセンブリを有する単一の独立型ユニットで実行され得る。ストック溶液は、以下の順序で注入口に取り付けられる：２Ｍ塩化ナトリウムが注入口（２ａ）に取り付けられる；０．１Ｍ二塩基性リン酸ナトリウムが注入口（２ｃ）に取り付けられる；０．０１Ｍ一塩基性リン酸ナトリウムが注入口（２ｅ）に取り付けられる；水が注入口（２ｇ）に取り付けられる；タンパク質フィードが注入口（１）に取り付けられる。緩衝液は、複数注入口フローコントローラ（４）ならびに下流のポンプ（６）および静的ミキサー（８）の作用によって所望の緩衝液組成を生成するようにストック溶液のそれぞれを比例的に選択することによって生じる。正しい緩衝液組成の確立の間、ミキシング手段（８）およびカラム（１２）は、切換式バイパスアセンブリ（３１）およびバルブ（２３ａ）を使用してバイパスされ、バルブ（２４）および（２５）は閉じられ、不要な緩衝液は廃棄物（２１）に導かれる。緩衝液が均一であると、上流の導電率センサ（１１）から安定に読み取られることによって示されると、バルブ（２４）および（２５）を開き、バルブ（２３ａ）のバイパスラインを閉じることにより、緩衝液がクロマトグラフィーカラム（１２）に供給される。方法条件は、カラム（１２）の下流の導電率、ＵＶおよびｐＨセンサ、（１４）、（１５）、および（１６）を使用して、監視される。タンパク質のカラムへの結合の前のカラムの前処理、および使用後の水リンスの間、液体は廃棄物（２１）に送られる。前処理されると、クロマトグラフィー樹脂は、静的ミキサー（８）を通って押されるポンプ（６）の作用によって、液体原料注入口（１）から引き込まれたタンパク質とともに、カラム（１２）にロードされる。第１の低塩濃度緩衝洗浄液は、生成物ストリーム排出口（１８）を通って収集され、第２の中塩濃度（ｍｅｄｉｕｍ ｓａｌｔ）緩衝洗浄液は出口フィード（２２）を通って収集される一方で、カラムからのフロースルーは、出口フィードを通って収集される。最後に、標的タンパク質は、高塩濃度溶出緩衝液を使用してカラムから取り出され、生成物ストリーム排出口（１８）を通って収集される。

Claims (40)

1. 標的物質および不純物を含む液体原料を、精製された標的物質を含む生成物ストリーム、および不純物の少なくとも一部を含む１つまたは複数の廃棄物ストリームに変換するための装置であって、装置が、第２のおよび任意の後続ユニットの供給流が下流のユニットからの生成物ストリームを含むように直列に配置された少なくとも２つの処理ユニットを含み、各処理ユニットは以下の構成要素（ｉ）～（ｖｉ）：
   （ｉ）液体原料の注入口（１）；
   （ｉｉ）所望の比率で少なくとも２つの液体を提供するための２つ以上の可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含む複数注入口フローコントローラ（４）；
   （ｉｉｉ）ミキシング手段（８）；
   （ｉｖ）標的物質から不純物の少なくとも一部を分離させる処理操作を実行するためのデバイス（１２）；
   （ｖ）ユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）；および
   （ｖｉ）ユニットを通過する液体をミキシング手段（８）に流入させるか、またはミキシング手段（８）をバイパスさせるための、切換式バイパスアセンブリ（３１）
   を含む、装置。
2. ユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）が複数注入口フローコントローラ（４）の下流かつミキシング手段（８）の上流に位置する、請求項１に記載の装置。
3. 各ユニットが、そのユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）を１つだけ含む、請求項１または２に記載の装置。
4. 切換式バイパスアセンブリ（３１）が、液体原料および／または少なくとも２つの他の液体のフローをミキサー手段（８）、またはミキサー手段（８）を通過することなくデバイス（１２）のいずれかに導く、管および２つまたは３つのバルブを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の装置。
5. 各ユニットが：
   （ａ）注入口（１）を通ってユニットに流入する液体原料；
   （ｂ）複数注入口フローコントローラ（４）を通って流れる少なくとも２つの液体；
   （ｃ）ミキサー手段（８）において混合されるか、またはミキサー手段（８）をバイパスし、いずれの場合でも、標的物質から不純物の少なくとも一部を分離させて生成物ストリームおよび任意選択で廃棄物ストリームを生じる処理操作が実行されるデバイス（１２）に入る、液体原料および少なくとも２つの液体；および
   （ｄ）生成物ストリーム、および存在する場合廃棄物ストリームが、ユニットから出る経路
   を備えた流路アセンブリを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の装置。
6. クロマトグラフィーを実行するための構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む少なくとも１つのユニットを含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の装置。
7. ウイルス不活化を実行するための構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む少なくとも１つのユニットを含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の装置。
8. 液体原料から任意のウイルスを除去するための構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む少なくとも１つのユニットを含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の装置。
9. クロマトグラフィーを実行するための構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む少なくとも２つのユニットを含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の装置。
10. クロマトグラフィーユニットの処理操作を実行するための少なくとも２つのユニットのそれぞれにおいて実行されるクロマトグラフィー精製が、前記ユニットの他方において使用されるものと異なる条件および／または異なる樹脂をクロマトグラフィーカラムに詰めたクロマトグラフィーカラムを使用する、請求項９に記載の装置。
11. アフィニティークロマトグラフィー、陽イオン交換クロマトグラフィー、陰イオン交換クロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、拡張ベッドクロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、膜クロマトグラフィーまたはサイズ排除クロマトグラフィーを実行するための構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む少なくとも１つのユニットを含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の装置。
12. 各ユニットが、混合されたバイオプロセシング液体を調製するための手段を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の装置。
13. 各ユニットが、そのユニットを通った液体のフローを与えるための単一のポンプ（６）を含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載の装置。
14. 標的材料が安定であるｐＨで標的材料を緩衝するために生成物ストリームのダイアフィルトレーションを実行するための構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含む少なくとも１つのユニットを含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の装置。
15. 直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
    ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；および
    ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット
    を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の装置。
16. 直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
    ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；および
    ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット
    を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の装置。
17. 直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
    ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
    ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；および
    ｄ．陰イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット
    を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される、請求項１から１６のいずれか一項に記載の装置。
18. 直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
    ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
    ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｄ．陰イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；および
    ｅ．任意の不活化ウイルスの除去のためのユニット
    を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖｉ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の装置。
19. 直列に、好ましくは列挙された順序で配置された以下のユニット：
    ａ．好ましくはアフィニティークロマトグラフィーによって、標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｂ．液体原料中に存在し得る任意のウイルスの不活化のためのユニット；
    ｃ．陽イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｄ．陰イオン交換クロマトグラフィーによって標的物質のクロマトグラフィー精製を実行するためのユニット；
    ｅ．任意の不活化ウイルスの除去のためのユニット；および
    ｆ．先行ユニットからの生成物ストリームを濃縮するため、および／または緩衝液交換を実行するためのユニット
    を含み、各ユニットは、構成要素（ｉ）～（ｖ）を含み、最終ユニットを除いて各ユニットの生成物フィードは、次のユニットの原料として使用される、請求項１から１８のいずれか一項に記載の装置。
20. （Ａ）各ユニットが流路アセンブリを含み；かつ
    （Ｂ）ユニットの少なくとも半分（好ましくはユニットの全て）で使用される流路アセンブリが実質的に同じ構成を有する、
    請求項１から１９のいずれか一項に記載の装置。
21. 流路アセンブリがプラスチック材料から構築されている、請求項２０に記載の装置。
22. デバイス（１２）以外の各ユニットの構成要素部品の少なくとも７５％が、装置の他のユニットの少なくとも８０％において使用される構成要素部品と同一である、請求項１から２１のいずれか一項に記載の装置。
23. デバイス（１２）を除く各ユニットの全ての構成要素部品が、装置の他の全てのユニットにおいて使用される全ての構成要素部品と同一である、請求項１から２２のいずれか一項に記載の装置。
24. 各ユニットを通る流路アセンブリが、他のユニットの全てを通る流路アセンブリと実質的に同一である、請求項１から２３のいずれか一項に記載の装置。
25. 以下の構成要素（ｉ）～（ｖｉ）：
    （ｉ）液体原料の注入口（１）；
    （ｉｉ）所望の比率で少なくとも２つの液体を提供するための２つ以上の可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含む複数注入口フローコントローラ（４）；
    （ｉｉｉ）ミキシング手段（８）；
    （ｉｖ）処理操作を実行するためのデバイス（１２）に液体を供給するための排出口およびデバイス（１２）から液体を受け入れるための注入口；
    （ｖ）流路アセンブリを通った液体のフローを与えるための手段（６）；および
    （ｖｉ）液体をミキシング手段（８）に流入させるか、またはミキシング手段（８）をバイパスさせるための、切換式バイパスアセンブリ（３１）
    を含む、流路アセンブリ。
26. 構成要素（ｖ）が構成要素（ｉｉｉ）の上流かつ構成要素（ｉｉ）の下流にある、請求項２５に記載の流路アセンブリ。
27. 構成要素（ｉｉｉ）が構成要素（ｉｉ）の下流にある、請求項２５または２６に記載の流路アセンブリ。
28. 導電率計、ｐＨ計および／または圧力センサを受け入れるための１つまたは複数のブロックをさらに含む、請求項２５から２７のいずれか一項に記載の流路アセンブリ。
29. １つまたは複数のブロックの少なくとも１つが、手段（６）の下流かつミキシング手段（８）の上流に位置する、請求項２８に記載の流路アセンブリ。
30. １つまたは複数のブロックの少なくとも１つが、デバイス（１２）の下流に位置する、請求項２８または２９に記載の流路アセンブリ。
31. １つまたは複数のブロックの少なくとも１つが、デバイス（１２）の下流に位置し、導電率計、ｐＨ計および圧力センサを受け入れるよう適合された、請求項２８から３０のいずれか一項に記載の流路アセンブリ。
32. プラスチック材料で構築された、請求項２５から３１のいずれか一項に記載の流路アセンブリ。
33. ガンマ線照射による滅菌を許容する材料で構築された、請求項２５から３２のいずれか一項に記載の流路アセンブリ。
34. ステンレス鋼で構築された、請求項２５から３１のいずれか一項に記載の流路アセンブリ。
35. 無菌である、請求項２５から３４のいずれか一項に記載の流路アセンブリ。
36. 請求項２５から３５のいずれか一項に記載の流路アセンブリを含む、請求項１から２４のいずれか一項に記載の装置。
37. 標的物質および不純物を含む液体原料を、精製された標的物質を含む生成物ストリーム、および不純物の少なくとも一部を含む１つまたは複数の廃棄物ストリームに変換するためのユニットであって、ユニットは以下の構成要素（ｉ）～（ｖｉ）：
    （ｉ）液体原料の注入口（１）；
    （ｉｉ）所望の比率で少なくとも２つの液体を提供するための２つ以上の可変フロー注入口バルブ（４ａ）を含む複数注入口フローコントローラ（４）；
    （ｉｉｉ）ミキシング手段（８）；
    （ｉｖ）標的物質から不純物の少なくとも一部を分離させる処理操作を実行するためのデバイス（１２）；
    （ｖ）ユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）；および
    （ｖｉ）ユニットを通過する液体をミキシング手段（８）に流入させるか、またはミキシング手段（８）をバイパスさせるための、切換式バイパスアセンブリ（３１）
    を含む、ユニット。
38. 構成要素（ｖ）が構成要素（ｉｉｉ）の上流かつ構成要素（ｉｉ）の下流にある、請求項３７に記載のユニット。
39. 構成要素（ｉｉｉ）が構成要素（ｉｉ）の下流にある、請求項３７または３８に記載のユニット。
40. ユニットを通った液体のフローを与えるための手段（６）を１つだけ含む、請求項３７から３９のいずれか一項に記載のユニット。
    

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